JP2006119044A - 生体試料分析装置および方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 本発明では、まず被測定物質を含むと思われる生体試料と検査試薬とを混合して測定用試料を調製する。測定用試料から被測定物質に関する第1情報を収集し、第1情報が所定の条件を満たす場合、第1情報に基づいて被測定物質の分析を行う。一方、第1情報が所定の条件を満たさない場合、測定用試料から被測定物質に関する第2情報を収集し、第2情報に基づいて被測定物質の分析を行う。
【選択図】 図7
Description
生体試料分析装置1は、まず血液や尿などの検体に、担体粒子懸濁液および反応緩衝液を混合して測定用試料を調製する。担体粒子懸濁液とは、担体粒子を水や緩衝液など適当な液体に懸濁させたものである。検体中に被測定物質が存在する場合、担体粒子懸濁液を検体に添加すると、抗原抗体反応により担体粒子の凝集が生じる。反応緩衝液は、担体粒子懸濁液と共に検体に添加し、抗原抗体反応を生じさせる環境を整えるためのものである。本例の生体試料分析装置1は、調製した測定用試料にレーザー光を照射し、試料液から発せられた光学的情報を検出し、検出した光学的情報に基づき担体粒子の凝集率を算出する。なお、前記光学的情報は所定の反応時間において検出される。(ここで、反応時間とは、抗原抗体反応を生じさせてから凝集を検出するまでの時間のことをいう。)本例の生体試料分析装置1は、まず反応時間T1において検出した光学的情報に基づき担体粒子の凝集率を算出する。そして、反応時間T1における凝集率の値と所定の閾値とを比較し、反応時間T2(T1<T2)における測定を行うか否かを判断する。反応時間T1における凝集率の値が所定の閾値以上の場合、反応時間T2における測定を行わず、反応時間T1における凝集率と検量線に基づいて検体に含まれる被測定物質を定量する。一方、反応時間T1における凝集率の値が所定の閾値未満の場合、反応時間T1における測定結果の信頼性が低いため、より信頼性の高い測定結果を得られる反応時間T2における測定を行う。この場合は、反応時間T2において光学的情報を検出し、検出した光学的情報に基づいて反応時間T2における凝集率を算出する。そして、反応時間T2における凝集率と検量線に基づいて検体に含まれる被測定物質を定量する。なお、検量線は、凝集率と被測定物質との関係を示すものであり、既知濃度の被測定物質を含む溶液である標準液を測定して作成する。検量線を作成する際は、含まれる被測定物質の濃度が段階的に異なる複数の標準液を用いる。また、本例では光学的情報として前方散乱光を用いる。
図1は生体試料分析装置1の外観を示したものである。装置1の最前面には、各種設定入力を行ったり、また測定結果を表示出力するための液晶タッチパネル2、測定用試料調製部カバー3およびスタートスイッチ4が配置されている。図2は生体試料分析装置1の内部構成を示したものである。装置1右側のスペースには装置の動作や分析処理をつかさどる制御部5が配置されている。装置1左下のスペースには、試料液から信号を検出するための測定部6が配置されている。また、残りのスペースには、試料液を調製するための測定用試料調製部7が配置されている。
図3は測定用試料調製部7を示す説明図である。測定用試料調製部7は検体セット部8、標準液セット部9、試薬セット部10、反応部11、分注装置12および送液装置13を含む。前記図1の測定用試料調製部カバー3を開けることにより、検体セット部8には、検体の入った検体容器をセットするようになっている。標準液セット部9には、標準液の入った容器をそれぞれセットするようになっている。試薬セット部10には、反応緩衝液の入った容器14や担体粒子懸濁液の入った容器15をそれぞれセットするようになっている。反応部11には、微量試験管がセットされており、そこで検体または標準液に反応緩衝液や担体粒子懸濁液が混合されて測定用試料が調製される。なお、図には示していないが、反応部11は微量試験管の中の溶液を一定の温度に保つための温度調節機構と微量試験管の中の溶液を攪拌するための攪拌機構を備えている。分注装置12はその先端から所定量の液体を吸引・吐出するようになっており、また、図示していない駆動装置によって上下左右前後に移動可能となっている。送液装置13は測定用試料を吸引するための吸引管16と、吸引管16から吸引した測定用試料を図4で示している測定部6へ送液する送液管17と、測定用試料を吸引して測定部6へ送液するためのポンプ18からなる。また、送液装置13は図示していない駆動装置によって上下左右前後に移動可能となっており、吸引管16が反応部11にセットされた微量試験管に挿入され、そして所定の量の測定用試料が吸引される。吸引された測定用試料は送液管17を通って測定部6へ送液される。
図4は測定部6を示す説明図である。測定部6は、シースフローセル19、レーザー光源20、コンデンサレンズ21、集光レンズ22、ピンホール23、フォトダイオード24を設けている。シースフローセル19は、前記図3の測定用試料調製部7で調製された測定用試料を流すためのものである。また、図5に示すようにシースフローセル19は、測定用試料液を細孔部28に向かって上方へ噴射する試料ノズル25と、シース液供給口26と廃液口27を備える。集光レンズ22は、レーザー光を受けた試料中の粒子一個一個から得られる前方散乱光を集光する。フォトダイオード24は前方散乱光を受光し、光電変換し、電気信号として出力する。出力された各信号は制御部5へ送られる。
図6は制御部5の構成、および制御部5と装置各部との関係を示すブロック図である。制御部5は中央演算装置(CPU)やROM・RAM等の記憶装置を有するマイクロコンピューター、測定部6から送られてきた信号を処理する回路などを有する。制御部5は記憶部29、分析部30および動作制御部31としての機能を果たす。記憶部29は、試料中の粒子から得た信号の分析を行う分析プログラムや、装置各部の動作を制御する制御プログラムを記憶している。また、測定部6で検出された信号のデータや、分析プログラムによる処理結果を記憶する。分析部30は、分析プログラムに基づき測定部6で検出された信号を分析して、測定用試料液中に含まれる各粒子に関するデータを生成する。分析部30で生成されたデータは液晶タッチパネル2に出力される。動作制御部31は、記憶部29に記憶されている制御プログラムに基づき装置各部の動作を制御する。
モード設定処理について図8および図9を用いて説明する。図8は、モード設定処理を行う際に液晶タッチパネル2に表示される画面を示したものである。各画面には各種キーが表示されており、液晶タッチパネル2においてキーが表示されている位置を操作者が指等で触れると、そのキーが選択される。図9は、モード設定処理の流れを示すフローチャートである。フローチャートの各ステップは以下の通りである。
ステップS102:図8(I)の画面にて、測定モードおよび反応時間の設定入力を受け付ける。(I)の画面の左側上部には、操作者が測定モードを選択するためのキーが配置されている。ここで、「検量線モード」キーが選択されると検量線が作成され、「検体モード」キーが選択されると検体が測定される。また、「検量線モード」キーと「検体モード」キーの両方のキーが選択されると、検量線が作成された後に検体が測定される。さらに、画面の左側下部には、操作者により反応時間T1およびT2が入力される欄が配置されている。また、画面の右側には各欄へ数値を入力する際に用いられるテンキーが配置されている。(I)の画面にて設定入力の受付が完了すると、続いてステップS103へ進む。
ステップS103:(I)の画面には、「確定」キーが表示されており、S103では操作者による「確定」キーの選択を受け付ける。ここで「確定」キーが選択されると、続いてステップS104へ進む。
ステップS104:ステップS102にて「検量線モード」が選択されている場合には、続いてステップS105へ進む。一方、ステップS102にて「検量線モード」が選択されていない場合には、続いてステップS108へ進む。
ステップS105:液晶タッチパネル2に図8の(II)に示した画面を表示する。続いてステップS106へ進む。
ステップS106:(II)の画面にて、検量線の作成に用いる各標準液の濃度や番号など検量線モードに関する設定入力を受け付ける。(II)の画面の左側には、操作者が各標準液の濃度や番号などを入力するための欄が配置されている。また、画面の右側には各欄へ数値を入力する際に用いられるテンキーが配置されている。(II)の画面にて設定入力の受付が完了すると、続いてステップS107へ進む。
ステップS107:(II)の画面には、「確定」キーが表示されており、S107では操作者による「確定」キーの選択を受け付ける。ここで「確定」キーが選択されると、続いてステップS108へ進む。
ステップS108:ステップS102にて「検体モード」が選択されている場合には、続いてステップS109へ進む。一方、ステップS102にて「検体モード」が選択されていない場合にはモード設定処理が完了する。
ステップS109:液晶タッチパネル2に図8の(III)に示した画面を表示する。続いてステップS110へ進む。
ステップS110:(III)の画面にて、検体番号や検体名の入力など検体モードに関する設定入力を受け付ける。(III)の画面の左側には、操作者が各検体の番号や名前などを入力するための欄が配置されている。また、画面の右側には各欄へ数値や文字を入力する際に用いられるテンキーが配置されている。(III)の画面にて設定入力の受付が完了すると、続いてステップS111へ進む。
ステップS111:(III)の画面には、「確定」キーが表示されており、S111では操作者による「確定」キーの選択を受け付ける。ここで「確定」キーが選択されると、モード設定処理が完了する。
ステップS2では、ステップS1のモード設定処理で入力された測定条件に基づいて、検量線モードが選択されているか否かを判別する。ステップS1において「検量線モード」が選択されている場合は、続いてステップS3(標準液測定処理)へ進む。一方、ステップS1において「検量線モード」が選択されていない場合は、続いてステップS5(α(T1)設定処理)へ進む。
ステップS3では、既知濃度の被測定物質を含む標準液の測定が行われる。図10は、標準液測定処理の流れを示すフローチャートである。標準液測定処理では、ステップS301(測定用試料調製処理)、ステップS302(測定処理)およびステップS303(分析処理)が順次実行される。上記ステップS301、S302およびS303について以下に説明する。
ステップS301における測定用試料調製部7の動作を、図3を用いて説明する。まず分注装置12が、標準液セット部9にセットされている容器から標準液を吸引し、反応部11にセットされている微量試験管に10μLを分注する。次に分注装置12が試薬セット部10にセットされている容器14から反応緩衝液を吸引し、反応部11にセットされている微量試験管に80μlを分注する。さらに分注装置12が試薬セット部10にセットされている容器15から担体粒子懸濁液を吸引し、反応部11にセットされている微量試験管に10μLを分注する。この担体粒子懸濁液の添加により抗原抗体反応が開始される。反応部11は微量試験管の測定用試料を温度45℃に保ちながら撹拌する。そして、送液装置13は、反応部11の微量試験管中の測定用試料14.5μLを吸引し、測定部6のシースフローセル19に送る。
測定処理における測定部6の動作を、図4と図5を用いて説明する。測定処理では、担体粒子懸濁液が添加され抗原抗体反応が開始した後、送液装置13により反応部11の微量試験管から測定用試料14.5μLが吸引され、測定部6のシースフローセル19に送られる。シースフローセル19に送られた測定用試料は、試料ノズル25からシースフローセル内に吐出される。それと同時にシース液供給口26からシース液がシースフローセル内に吐出される。これによって試料液はシースフローセル内でシース液に包まれ、さらに細孔部28によって細く絞られて流れる。試料液の流れを、粒子径と同程度まで絞り込むことにより、試料液に含まれた粒子を一列に整列させて細孔部に流すことができる。
ステップS302により前方散乱光が検出されると、次に分析部30により分析プログラムに基づいた分析が実行される。ステップS303における分析プログラムの動作について、図11のフローチャートを用いて説明する。フローチャートの各ステップは以下の通りである。
ステップS303−2:前記前方散乱光信号のデータに基づき、試料液中の各粒子に対応する前方散乱光強度(Fsc)を算出する。続いてステップS303−3へ進む。
ステップS303−3:担体粒子について、ヒストグラムを作成する。図16は、担体粒子のFscをもとに作成したヒストグラムの一例であり、縦軸に粒子の個数(度数)を、横軸にFscをとったものである。続いてステップS303−4へ進む。
ステップS303−4:ステップS303−3で作成したヒストグラムに基づいて、凝集率を算出する。ここでは、まず、ステップS303−3で作成したヒストグラムに基づいて、単独粒子と凝集粒子を区別する。図16からわかるように、検出された粒子は単独粒子、二個凝集粒子、三個凝集粒子といった担体粒子の大きさの対応する位置に分布する。図中v、w、x、yで示すように、単独粒子よりも大きさの小さい個所、単独粒子と二個凝集粒子の間の個所、二個凝集粒子と三個凝集粒子の間の個所、三個凝集粒子よりも大きさの大きい個所には、実質的に粒子が分布しない。このようなヒストグラムにおいて、単独粒子の大きさに対応する前方散乱光強度および二個凝集粒子の大きさに対応する前方散乱光強度の間に閾値を設定し、前記閾値より小さな範囲に分布する粒子を単独粒子、前記閾値より大きな範囲に分布する粒子を凝集粒子として区別することで単独粒子数(M)および凝集粒子数(P)を計算する。さらに、MとPの合計である総粒子数(T)を求め、P/Tを凝集率として算出する。続いてステップS303−5へ進む。
ステップS303−5:ステップS303−3で作成されたヒストグラム、およびステップS303−4より算出された凝集率のデータを記憶する。
ステップS4では、ステップS3より得られた各標準液の凝集率のデータに基づいて検量線が作成される。ステップS4で作成される検量線には、反応時間T1で測定して得られるデータに基づいて作成された検量線T1、および反応時間T2で測定して得られるデータに基づいて作成された検量線T2がある。検量線T1は、ステップS3においてT1用の標準液を測定して得られた凝集率およびステップS1で入力された標準液の被測定物質の濃度に基づいて作成される。検量線T2は、ステップS3においてT2用の標準液を測定して得られた凝集率およびステップS2で入力された標準液の被測定物質の濃度に基づいて作成される。検量線作成処理における分析プログラムの動作について、図12のフローチャートを用いて説明する。フローチャートの各ステップは以下の通りである。
ステップS402:前記の濃度および凝集率に基づき、検量線T1を作成する。続いてステップS403へ進む。
ステップS403:ステップS402で作成された検量線T1を記憶する。続いてステップS404へ進む。
ステップS404:T2用の標準液の被測定物質の濃度、および分析のステップS3で算出されたT2用の標準液の凝集率のデータを記憶部29から読み出す。続いてステップS405へ進む。
ステップS405:前記の濃度および凝集率に基づき、検量線T2を作成する。続いてステップS406へ進む。
ステップS406:ステップS405で作成された検量線T2を記憶する。
ステップS5では、反応時間T1における凝集率の値の閾値:α(T1)が設定される。一般に、検量線を用いて濃度を算出する場合、信頼できる値を算出できる濃度範囲は検量線が直線状になっている範囲である。ゆえに、本例では、検量線T1の直線性が保証できる範囲の下限値と検量線T2の直線性が保証できる範囲の上限値に基づき、さらに再現性および正確性などを考慮して求めた値が閾値のデータとして予め装置の記憶部29に記憶させてある。そこで、本ステップにおいて、記憶部29から閾値のデータを自動的に読み出し、その値をα(T1)として設定する。このようにして、α(T1)が設定されると、続いてステップS6(検体モード選択の判別)へ進む。
ステップS6では、ステップS1のモード設定処理で入力された測定条件に基づいて、検体モードが選択されているか否かを判別する。ステップS1において「検体モード」が選択されている場合は、続いてステップS7(検体測定処理)へ進む。一方、ステップS1において「検体モード」が選択されていない場合は、続いてステップS9(出力処理)へ進む。
検体測定処理では、被測定物質を含むと思われる検体を測定し、測定して得られた凝集率とステップS4で作成された検量線に基づいて検体に含まれる被測定物質の濃度が算出される。図13は、検体測定処理の流れを示すフローチャートである。検体測定処理では、ステップS1のモード設定処理にて入力された条件で、ステップS701(測定用試料調製)、ステップS702(T1測定)、ステップS703(T1分析)、ステップS704(T2測定を行うか否かの判定)、ステップS705(T2測定)、ステップS706(T2分析)およびステップS707(定量)が順次実行される。
測定用試料調製における測定用試料調製部7の動作を、図3を用いて説明する。まず分注装置12が、検体セット部8にセットされている検体容器から検体を吸引し、反応部11にセットされている微量試験管に10μLを分注する。次に分注装置12が試薬セット部10にセットされている容器14から反応緩衝液を吸引し、反応部11にセットされている微量試験管に80μlを分注する。さらに分注装置12が試薬セット部10にセットされている容器15から担体粒子懸濁液を吸引し、反応部11にセットされている微量試験管に10μLを分注する。この担体粒子懸濁液の添加により抗原抗体反応が開始される。反応部11は微量試験管の測定用試料を温度45℃に保ちながら撹拌する。そして、送液装置13は、反応部11の微量試験管中の測定用試料14.5μLを吸引し、測定部6のシースフローセル19に送る。なお、ステップ702(T1測定)用に微量試験管から測定用試料が吸引された場合、その後も反応部11は微量試験管の測定用試料を温度45℃に保ちながら撹拌し続ける。
ステップS702では、S1にて入力された反応時間T1において前方散乱光信号を検出する。仮に、S1にて入力された反応時間T1が20秒であった場合、測定用試料調製部7や測定部6の動作は、抗原抗体反応が開始されてから20秒後に前方散乱光が検出されるように制御プログラムにより制御される。ステップS702における測定部6の動作は、ステップS302(測定処理)と同様であり、前方散乱光信号が検出され、検出された信号は記憶部29で記憶される。
ステップS702により前方散乱光信号が検出されると、次に分析部30により分析プログラムに基づいたT1分析が実行される。ステップS703における分析プログラムの動作は、ステップS303(分析処理)と同様であり、検出された前方散乱光信号に基づいて凝集率Aが算出される。そして、作成されたヒストグラムおよび算出された凝集率Aのデータは記憶部29で記憶される。
ステップS703で算出された凝集率Aと、ステップS5で設定された閾値:α(T1)とを比較する。算出された凝集率Aの値がα(T1)以上の場合、反応時間T1における凝集率Aを用いて被測定物質の濃度を求めることができるため、反応時間T2での測定は不要となる。ゆえに、この場合は、測定用試料調製部7の反応部11の微量試験管における保温および攪拌を終了し、続いてステップS707へ進む。一方、凝集率Aの値がα(T1)未満の場合、反応時間T1における凝集率Aを用いて被測定物質の濃度を求めることができないため、反応時間T2での測定が必要となる。ゆえに、この場合は続いてステップS705へ進む。また、この場合、反応部11における保温および攪拌は、後述の通り反応時間T2まで続けられる。
ステップS704において、凝集率Aの値がα(T1)未満の場合、続いてステップS705が実行される。ステップS705では、S1にて入力された反応時間T2において前方散乱光信号を検出する。仮に、S1にて入力された反応時間T2が15分であった場合、測定用試料調製部7や測定部6の動作は、抗原抗体反応が開始されてから15分後に前方散乱光が検出されるように制御プログラムにより制御される。T2測定における測定部6の動作は、ステップS302(測定処理)と同様であり、前方散乱光信号が検出され、検出された信号は記憶部29で記憶される。
ステップS705により前方散乱光信号が検出されると、次に分析部30により分析プログラムに基づいたT2分析が実行される。ステップS706における分析プログラムの動作は、ステップS303(分析処理)と同様であり、検出された前方散乱光信号に基づいて凝集率Bが算出され、作成されたヒストグラムおよび算出された凝集率Bのデータが記憶部29で記憶される。
ステップS607では、ステップS4にて予め作成した検量線と、ステップS703もしくはS706で得られた凝集率に基づいて、検体に含まれる被測定物質の濃度が算出される。T2測定およびT2分析が行われていない場合は、反応時間T1における凝集率Aおよび検量線T1に基づいて検体に含まれる被測定物質の濃度が算出される。一方、T2測定およびT2分析が行われている場合は、反応時間T2における凝集率Bおよび検量線T2に基づいて検体に含まれる被測定物質の濃度が算出される。そして、ステップS707で算出された濃度のデータが記憶部29で記憶される。
複数の検体を測定する場合、ステップS8において「全検体の測定が終了した」と判定されるまでステップS7が繰り返される。そして、全ての検体の測定が終了すると、続いてステップS9へ進む。
ステップS3で記憶された標準液の凝集率のデータ、ステップS4で記憶された検量線のデータ、ステップS7で記憶された検体の凝集率や濃度などのデータを液晶タッチパネル2に出力し、表示する。
上記に説明してきた生体試料分析装置1を用いて検量線を作成する場合の例を示す。なお、本例の測定における反応時間は、T1=20秒、T2=15分と設定した。
次に、上記に説明してきた生体試料分析装置1を用いて、さまざまな反応時間T2における検量線T2を作成した。
ここでは、上記に説明してきた生体試料分析装置1を用いて、反応時間T1=20秒、T2=95秒と設定した場合の測定結果を示す。また、本例では、凝集率の閾値α(T1)を7%と設定した。これより、反応時間T1の測定で算出された凝集率Aが7%以上であれば、反応時間T1における凝集率Aおよび検量線T1に基づいて、検体に含まれるCRPの濃度が算出される。一方、反応時間T1の測定で算出された凝集率Aが7%未満であれば、反応時間T2における凝集率Bに基づいて、検体に含まれるCRPの濃度が算出される。
ここでは、上記に説明してきた生体試料分析装置1を用いて、全血を測定した場合の測定結果を示す。なお、全血には血球成分が含まれている。このため、全血を検体として用いた場合、血清や血漿を用いて測定する場合と同じ量を用いると、血球成分量(血球容積分)を反映して測定値が低値になる。従って、全血を用いて測定する場合には、血球容積分を補正する必要がある。そこで、本例では、特表2004-503779に記載の方法を用いて補正した。具体的には、シスメックス株式会社製 全自動血球分析装置 XE-2100を用いて全血検体を測定し、予め血球数を求めた。そして、以下の式を用いて補正を行った。
C=C0/{1−(B/A)}
(式中、Cは補正して得られた被測定物質の濃度、C0は全血を測定して得られた被測定物質の濃度、Bは全血に含まれる血球数、Aは定数を示す。)なお、定数Aは、血球数とヘマトクリット値との相関関係から実験的に求めることができる。ヘマトクリット値とは、一定量の全血中に存在する赤血球の容積の割合を示したものであり、全血中の血球のほとんどが赤血球で占められていることから、ヘマトクリット値を一定量の全血中に存在する血球の容積の割合として用いることができる。定数Aは、ヘマトクリット値が100%になった(すなわち全血試料の全てが血球成分になった)と仮定したときの血球数の計数値に相当する。B/Aを算出することによって、採取した全血試料中の血球成分の割合を求めることができる。
生体試料分析装置41は、まず血液や尿などの検体に、担体粒子懸濁液および反応緩衝液を混合して測定用試料を調製する。そして、調製した測定用試料に光を照射し、試料液を通過した透過光を検出し、検出した透過光に基づいて吸光度を求める。図19は、反応時間における吸光度の変化の一例を模式的に示した図である。生体試料分析装置41は、まず反応時間T1aおよびT1a’において吸光度を検出し、検出した各吸光度(a、a’)に基づいて反応時間帯T1における吸光度変化量A(A=a’−a)を算出する。そして、反応時間帯T1における吸光度変化量Aの値と所定の閾値とを比較し、反応時間帯T2における測定を行うか否かを判断する。反応時間帯T1における吸光度変化量Aの値が所定の閾値以上の場合、反応時間帯T2における測定を行わず、反応時間帯T1における吸光度変化量Aに基づいて検体に含まれる被測定物質を定量する。一方、反応時間帯T1における吸光度変化量Aの値が所定の閾値未満の場合、反応時間帯T1における測定結果の信頼性が低いため、より信頼性の高い測定結果を得られる反応時間帯T2における測定を行う。この場合は、反応時間T2bおよびT2b’において吸光度を検出し、検出した各吸光度(b、b’)に基づいて反応時間帯T2における吸光度変化量B(B=b’−b)を算出する。そして、算出された吸光度変化量Bに基づいて検体に含まれる被測定物質を定量する。
生体試料分析装置41の外観は図1で示している生体試料分析装置1と同様に液晶タッチパネル、測定用試料調製部カバーおよびスタートスイッチが配置されている。また、生体試料分析装置41の内部構成は図2で示している生体試料分析装置1と同様に制御部、測定部、測定用試料調製部が配置されている。
図20は生体試料分析装置41の測定用試料調製部を示す説明図である。測定用試料調製部は、検体セット部42、標準液セット部43、試薬セット部44、反応部45、分注装置46を含む。前記の測定用試料調製部カバーを開けることにより、検体セット部42には、検体の入った検体容器をセットするようになっている。標準液セット部43には、標準液の入った容器をそれぞれセットするようになっている。試薬セット部44には、反応緩衝液の入った容器47や担体粒子懸濁液の入った容器48をそれぞれセットするようになっている。反応部45には、反応セルがセットされており、そこで検体または標準液に反応緩衝液や担体粒子懸濁液が混合されて測定用試料が調製される。なお、図には示していないが、反応部45は反応セルの中の溶液を一定の温度に保つための温度調節機構と反応セルの中の溶液を攪拌するための攪拌機構を備えている。分注装置46はその先端から所定量の液体を吸引・吐出するようになっており、また、図示していない駆動装置によって上下左右前後に移動可能となっている。
図21は測定部を示す説明図である。測定部は、反応セル49、光源50、フィルタ51、フォトダイオード52を設けている。光源50からの光は、フィルタ51によって800nmに分光される。そして、分光された光は、反応セル49中の試料を通過し、透過光となってフォトダイオード52に達する。フォトダイオード52は透過光を受光、光電変換し、電気信号として出力する。出力された各信号は制御部へ送られる。
生体試料分析装置41の制御部の構成は、図6で示している生体試料分析装置1と同様に、中央演算装置(CPU)やROM・RAM等の記憶装置を有するマイクロコンピューター、測定部から送られてきた信号を処理する回路などを有する。制御部は記憶部、分析部および動作制御部としての機能を果たす。記憶部は、試料中の粒子から得た信号の分析を行う分析プログラムや、装置各部の動作を制御する制御プログラムを記憶している。また、測定部で検出された信号のデータや、分析プログラムによる処理結果を記憶する。分析部は、分析プログラムに基づき測定部で検出された信号を分析して、データを生成する。分析部で生成されたデータは液晶タッチパネルに出力される。動作制御部は、記憶部に記憶されている制御プログラムに基づき装置各部の動作を制御する。
生体試料分析装置41におけるモード設定処理について図23および図24を用いて説明する。図23は、モード設定処理を行う際に液晶タッチパネルに表示される画面を示したものである。各画面には各種キーが表示されており、液晶タッチパネル2においてキーが表示されている位置を操作者が指等で触れると、そのキーが選択される。図24は、モード設定処理の流れを示すフローチャートである。フローチャートの各ステップは以下の通りである。
ステップSS102:図23(I)の画面にて、測定モードおよび反応時間の設定入力を受け付ける。(I)の画面の左側上部には、操作者が測定モードを選択するためのキーが配置されている。ここで、「検量線モード」キーが選択されると検量線が作成され、「検体モード」キーが選択されると検体が測定される。また、「検量線モード」キーと「検体モード」キーの両方のキーが選択されると、検量線が作成された後に検体が測定される。さらに、画面の左側下部には、操作者により反応時間T1およびT2が入力される欄が配置されている。生体試料分析装置41は、反応時間T1aから反応時間T1a’までの反応時間帯T1における吸光度変化量、もしくは反応時間T2bから反応時間T2b’までの反応時間帯T2における吸光度変化量を求める。そのため、反応時間を設定する欄はT1a、T1a’、T2bおよびT2b’の4ヶ所が設けられている。また、画面の右側には各欄へ数値を入力する際に用いられるテンキーが配置されている。(I)の画面にて設定入力の受付が完了すると、続いてステップSS103へ進む。
ステップSS103:(I)の画面には、「確定」キーが表示されており、SS103では操作者による「確定」キーの選択を受け付ける。ここで「確定」キーが選択されると、続いてステップSS104へ進む。
ステップSS104:ステップSS102にて「検量線モード」が選択されている場合には、続いてステップSS105へ進む。一方、「検量線モード」が選択されていない場合には、続いてステップSS108へ進む。
ステップSS105:液晶タッチパネルに図23の(II)に示した画面を表示する。続いてステップSS106へ進む。
ステップSS106:(II)の画面にて、検量線の作成に用いる各標準液の濃度や番号など検量線モードに関する設定入力を受け付ける。(II)の画面の左側には、操作者が各標準液の濃度や番号などを入力するための欄が配置されている。また、画面の右側には各欄へ数値を入力する際に用いられるテンキーが配置されている。(II)の画面にて設定入力の受付が完了すると、続いてステップSS107へ進む。
ステップSS107:(II)の画面には、「確定」キーが表示されており、SS107では操作者による「確定」キーの選択を受け付ける。ここで「確定」キーが選択されると、(II)の画面にて「確定」キーが押されている、続いてステップSS108へ進む。
ステップSS108:ステップSS102にて「検体モード」が選択されている場合には、続いてステップSS109へ進む。一方、ステップSS102にて「検体モード」が選択されていない場合にはモード設定処理が完了する。
ステップSS109:液晶タッチパネルに図23の(III)に示した画面を表示する。続いてステップSS110へ進む。
ステップSS110:(III)の画面にて、検体番号や検体名の入力など検体モードに関する設定入力を受け付ける。(III)の画面の左側には、操作者が各検体の番号や名前などを入力するための欄が配置されている。また、画面の右側には各欄へ数値や文字を入力する際に用いられるテンキーが配置されている。(III)の画面にて設定入力の受付が完了すると、続いてステップSS111へ進む。
ステップSS111:(III)の画面には、「確定」キーが表示されており、SS111では操作者による「確定」キーの選択を受け付ける。ここで「確定」キーが選択されると、モード設定処理が完了する。
ステップSS2では、ステップSS1のモード設定処理で入力された測定条件に基づいて、検量線モードが選択されているか否かを判別する。ステップSS1において「検量線モード」が選択されている場合は、続いてステップSS3(標準液測定処理)へ進む。一方、ステップSS1において「検量線モード」が選択されていない場合は、続いてステップSS5(γ(T1)設定処理)へ進む。
ステップSS3では、既知濃度の被測定物質を含む標準液の測定が行われる。図25は、標準液測定処理の流れを示すフローチャートである。標準液測定処理では、ステップSS301(測定用試料調製処理)、ステップSS302(測定処理)およびステップSS303(分析処理)が順次実行される。上記ステップSS301、SS302およびSS303について以下に説明する。
ステップSS301における測定用試料調製部の動作を、図20を用いて説明する。まず分注装置46が、標準液セット部43にセットされている容器から標準液を吸引し、反応部45にセットされている反応セルに15μLを分注する。次に分注装置46が試薬セット部44にセットされている容器47から反応緩衝液を吸引し、反応部45にセットされている反応セルに140μlを分注する。さらに分注装置46が試薬セット部44にセットされている容器48から担体粒子懸濁液を吸引し、反応部45にセットされている反応セルに50μLを分注する。この担体粒子懸濁液の添加により抗原抗体反応が開始される。反応部45は反応セルの測定用試料を温度37℃に保ちながら撹拌する。
ステップSS302における測定部の動作を、図21を用いて説明する。ステップSS302では、担体粒子懸濁液が添加され抗原抗体反応が開始した後、所定の反応時間において吸光度を求める。光源50からの光は、フィルタ51によって800nmに分光され、反応セル49に照射される。そして、照射された光は反応セル49中の試料を通過し、透過光となってフォトダイオード52に達する。フォトダイオード52は透過光を受光し、光電変換し、電気信号として出力する。出力された各信号は制御部へ送られる。出力された各信号は制御部へ送られ、データとして記憶部に記憶される。このようにして、ステップSS302では、測定用試料から所定の反応時間における透過光が検出される。ここで、所定の反応時間とは、ステップSS1で設定された反応時間T1a、T1a’、T2bおよびT2b’のことである。
ステップSS302により透過光が検出されると、次に分析部により分析プログラムに基づいた分析が実行される。ステップSS303における分析プログラムの動作について、図26のフローチャートを用いて説明する。フローチャートの各ステップは以下の通りである。
ステップSS303−2:透過光光信号のデータに基づき、吸光度を求める。続いてステップSS303−3へ進む。
ステップSS303−3:ステップSS303−2にて算出された吸光度に基づいて、反応時間帯における吸光度変化量を算出する。ここでは、反応時間T1aおける吸光度aおよび反応時間T1a’における吸光度a’に基づいて反応時間帯T1における吸光度変化量Aを算出し、反応時間T2bおける吸光度bおよび反応時間T2b’における吸光度b’に基づいて反応時間帯T2における吸光度変化量Aを算出する。続いてステップSS303−4へ進む。
ステップSS303−4:ステップSS303−2より算出された吸光度のデータおよびステップSS303−3より算出された吸光度変化量のデータを記憶する。
ステップSS4では、ステップSS3より得られた各標準液の吸光度変化量のデータに基づいて検量線が作成される。ステップSS4で作成される検量線には、反応時間帯T1における吸光度変化量のデータに基づいて作成された検量線T1、および反応時間帯T2における吸光度変化量のデータに基づいて作成された検量線T2がある。検量線T1は、ステップSS3においてT1用の標準液を測定して得られた反応時間帯T1における吸光度変化量およびステップSS1で入力された標準液の被測定物質の濃度に基づいて作成される。検量線T2は、ステップSS3においてT2用の標準液を測定して得られた反応時間帯T2における吸光度変化量およびステップSS1で入力された標準液の被測定物質の濃度に基づいて作成される。検量線作成処理における分析プログラムの動作について、図27のフローチャートを用いて説明する。フローチャートの各ステップは以下の通りである。
ステップSS402:前記の濃度および吸光度変化量に基づき、検量線T1を作成する。続いてステップSS403へ進む。
ステップSS403:ステップSS402で作成された検量線T1を記憶する。続いてステップSS404へ進む。
ステップSS404:T2用の標準液の被測定物質の濃度、および分析のステップSS3で算出された反応時間T2における吸光度変化量のデータを記憶部から読み出す。続いてステップSS405へ進む。
ステップSS405:前記の濃度および吸光度変化量に基づき、検量線T2を作成する。続いてステップSS406へ進む。
ステップSS406:ステップSS405で作成された検量線T2を記憶する。
ステップSS5では、反応時間帯T1における吸光度変化量の値の閾値:γ(T1)が設定される。前記で示した通り、一般に、検量線を用いて濃度を算出する場合、信頼できる値を算出できる濃度範囲は検量線が直線状になっている範囲である。ゆえに、本例では、検量線T1の直線性が保証できる範囲の下限値と検量線T2の直線性が保証できる範囲の上限値に基づき、さらに再現性および正確性などを考慮して求めた値が閾値のデータとして予め装置の記憶部に記憶させてある。そこで、本ステップにおいて、記憶部から閾値のデータを自動的に読み出し、その値をγ(T1)として設定する。このようにして、γ(T1)が設定されると、続いてステップSS6(検体モード選択の判別)へ進む。
ステップSS6では、ステップSS1のモード設定処理で入力された測定条件に基づいて、検体モードが選択されているか否かを判別する。ステップSS1において「検体モード」が選択されている場合は、続いてステップSS7(検体測定処理)へ進む。一方、ステップSS1において「検体モード」が選択されていない場合は、続いてステップSS9(出力処理)へ進む。
ステップSS7では、被測定物質を含むと思われる検体を測定し、測定して得られた吸光度変化量とステップSS4で作成された検量線に基づいて検体に含まれる被測定物質の濃度が算出される。図28は、検体測定処理の流れを示すフローチャートである。検体測定処理では、ステップSS1のモード設定処理にて入力された条件で、ステップSS702(測定用試料調製)、ステップSS702(T1測定)、ステップSS703(T1分析)、ステップSS704(T2測定を行うか否かの判定)、ステップSS705(T2測定)、ステップSS706(T2分析)およびステップSS707(定量)が順次実行される。
測定用試料調製における測定用試料調製部の動作を、図20を用いて説明する。まず分注装置46が、検体セット部42にセットされている検体容器から検体を吸引し、反応部45にセットされている反応セルに15μLを分注する。次に分注装置46が試薬セット部44にセットされている容器47から反応緩衝液を吸引し、反応部45にセットされている反応セルに10μlを分注する。さらに分注装置46が試薬セット部44にセットされている容器48から担体粒子懸濁液を吸引し、反応部45にセットされている反応セルに50μLを分注する。この担体粒子懸濁液の添加により抗原抗体反応が開始される。反応部45は反応セルの測定用試料を温度37℃に保ちながら撹拌する。
ステップSS702では、ステップSS1にて入力された反応時間T1aおよびT1a’において透過光信号を検出する。仮に、ステップSS1にて入力された反応時間T1aが10秒および反応時間T1a’が60秒であった場合、測定用試料調製部や測定部の動作は、抗原抗体反応が開始されてから10秒後に反応時間T1aにおける透過光が検出されるように、さらに、抗原抗体反応が開始されてから60秒後に反応時間T1a’における透過光が検出されるように制御プログラムにより制御される。ステップSS702における測定部の動作は、ステップSS302(測定処理)と同様であり、透過光信号が検出され、検出された信号は記憶部で記憶される。
ステップSS702により透過光信号が検出されると、次に分析部により分析プログラムに基づいたT1分析が実行される。ステップSS703における分析プログラムの動作は、ステップSS303(分析処理)と同様であり、検出された反応時間T1aにおける吸光度aおよび反応時間T1a’における吸光度a’が算出される。そして、各吸光度に基づいて反応時間帯T1における吸光度変化量Aが算出される。算出された吸光度および吸光度変化量Aのデータは記憶部で記憶される。
ステップSS703で算出された吸光度変化量Aと、ステップSS5で設定された閾値γ(T1)とを比較する。算出された吸光度変化量Aの値がγ(T1)以上の場合、反応時間帯T1における吸光度変化量Aを用いて被測定物質の濃度を求めることができるため、反応時間T2bおよび反応時間T2b’での測定は不要となる。ゆえに、この場合は、測定用試料調製部の反応部45の反応セルにおける保温および攪拌を終了し、続いてステップSS707へ進む。一方、吸光度変化量Aの値がγ(T1)未満の場合、反応時間帯T1における吸光度変化量Aを用いて被測定物質の濃度を求めることができないため、反応時間T2bおよび反応時間T2b’での測定が必要となる。ゆえに、この場合は続いてステップSS705へ進む。また、この場合、反応部45における保温および攪拌は、後述の通り反応時間T2b’まで続けられる。
ステップSS704において、吸光度変化量Aの値がγ(T1)未満の場合、続いてステップSS705が実行される。ステップSS705では、ステップSS1にて入力された反応時間T2bおよび反応時間T2b’において透過光信号を検出する。仮に、ステップSS1にて入力された反応時間T2bが60秒および反応時間 T2b’が180秒であった場合、測定用試料調製部や測定部の動作は、抗原抗体反応が開始されてから60秒後に反応時間T2bにおける透過光が検出されるように、さらに、抗原抗体反応が開始されてから180秒後に反応時間T2b’における透過光が検出されるように制御プログラムにより制御される。T2測定における測定部の動作は、ステップSS302(測定処理)と同様であり、透過光信号が検出され、検出された信号は記憶部で記憶される。
ステップSS705により透過光信号が検出されると、次に分析部により分析プログラムに基づいたT2分析が実行される。SS706における分析プログラムの動作は、ステップSS303(分析処理)と同様であり、検出された反応時間T2bにおける吸光度bおよび反応時間 T2b’における吸光度b’が算出される。そして、各吸光度に基づいて反応時間帯T2における吸光度変化量Bが算出される。算出された吸光度および吸光度変化量Bのデータは記憶部で記憶される。
ステップSS707では、ステップSS4にて予め作成した検量線と、ステップSS703もしくはステップSS706で得られた吸光度変化量に基づいて、検体に含まれる被測定物質の濃度が算出される。T2測定およびT2分析が行われていない場合には、反応時間帯T1における吸光度変化量Aおよび検量線T1に基づいて検体に含まれる被測定物質の濃度が算出される。一方、T2測定およびT2分析が行われている場合には、反応時間帯T2における吸光度変化量Bおよび検量線T2に基づいて検体に含まれる被測定物質の濃度が算出される。そして、ステップSS707で算出された濃度のデータが記憶部で記憶される。
複数の検体を測定する場合、ステップSS8において「全検体の測定が終了した」と判定されるまでステップSS8が繰り返される。そして、全ての検体の測定が終了すると、続いてステップSS9へ進む。
ステップSS3で記憶された標準液の吸光度変化量のデータ、ステップSS4で記憶された検量線のデータ、ステップSS7で記憶された検体の吸光度変化量や濃度などのデータを液晶タッチパネルに出力し、表示する。
ここでは、上記に説明してきた生体試料分析装置41を用いて、反応時間T1a=10秒、T1a’=60秒、T2b=60秒およびT2b’=180秒と設定した場合の測定結果を示す。また、本例では、吸光度変化量の閾値γ(T1)を0.01と設定した。これより、反応時間帯T1の測定で算出された吸光度変化量Aが0.01以上であれば、反応時間T1における吸光度変化量Aおよび検量線T1に基づいて、検体に含まれるCRPの濃度が算出される。一方、反応時間帯T1の測定で算出された吸光度変化量Aが0.01未満であれば、反応時間帯T2における吸光度変化量Bに基づいて、検体に含まれるCRPの濃度が算出される。
ここでは、上記に説明してきた生体試料分析装置41を用いて、全血を測定した場合の測定結果を示す。
C=C0/{1−(H/100)}
(式中、Cは補正して得られた被測定物質の濃度、C0は全血を測定して得られた被測定物質の濃度、Hはヘマトクリット値(%)を示す。)
2 液晶タッチパネル
3 測定用試料調製部カバー
4 スタートスイッチ
5 制御部
6 測定部
7 測定用試料調製部
8 検体セット部
9 標準液セット部
10試薬セット部
11反応部
12分注装置
13送液装置
19シースフローセル
Claims (22)
- (a)被測定物質を含むと思われる生体試料と検査試薬とを混合して測定用試料を調製する試料調製機構、
(b)測定用試料から被測定物質に関する情報を収集する測定手段、
(c)測定手段により被測定物質に関する第1情報を収集する第1制御手段、
(d)第1情報が所定の条件を満たす場合、第1情報に基づいて被測定物質の分析を行う第1分析手段、
(e)第1情報が所定の条件を満たさない場合、測定手段により被測定物質に関する第2情報を収集する第2制御手段、および
(f)第2情報に基づいて被測定物質の分析を行う第2分析手段、
を備えた生体試料分析装置。 - 前記第1制御手段は、試料調製機構が測定用試料を調製してから第1の時間後に測定手段により前記第1情報を収集し、前記第2制御手段は、試料調製機構が測定用試料を調製してから第2の時間後に測定手段により前記第2情報を収集する請求項1記載の生体試料分析装置。
- 前記第1分析手段は第1の検量線を用いて第1情報に基づいて被測定物質の濃度を定量し、前記第2分析手段は第2の検量線を用いて第2情報に基づいて被測定物質の濃度を定量する請求項2記載の生体試料分析装置。
- 被測定物質の濃度と被測定物質に関する情報との関係を示す検量線を作成する検量線作成手段を備え、検量線作成手段は、被測定物質の濃度と前記第1情報との関係を示す第1の検量線と、被測定物質の濃度と前記第2情報との関係を示す第2の検量線を作成する請求項3記載の生体試料分析装置。
- 前記第1制御手段は、試料調製機構が測定用試料を調製してから第1の時間経過時および第2の時間経過時における測定値の変化量を前記第1情報として収集し、前記第2制御手段は、試料調製機構が測定用試料を調製してから第3の時間経過時および第4の時間経過時における測定値の変化量を前記第2情報として収集する請求項1記載の生体試料分析装置。
- 前記第1分析手段は第1の検量線を用いて第1情報に基づいて被測定物質の濃度を定量し、前記第2分析手段は第2の検量線を用いて第2情報に基づいて被測定物質の濃度を定量する請求項5記載の生体試料分析装置。
- 被測定物質の濃度と被測定物質に関する情報との関係を示す検量線を作成する検量線作成手段を備え、検量線作成手段は、被測定物質の濃度と前記第1情報との関係を示す第1の検量線と、被測定物質の濃度と前記第2情報との関係を示す第2の検量線を作成する請求項6記載の生体試料分析装置。
- 前記検査試薬が、前記被測定物質に対する抗体または抗原を含有する請求項1〜請求項7のいずれか1項に記載の生体試料分析装置。
- 前記検査試薬が、前記被測定物質に対する抗体または抗原が感作された担体粒子を含む請求項1〜請求項8の何れか1項に記載の生体試料分析装置。
- (a)被測定物質を含むと思われる生体試料と、この被測定物質に対する抗体または抗原が感作された担体粒子を含む検査試薬とを混合して測定用試料を調製する試料調製機構、
(b)測定用試料から担体粒子の凝集度合いに関する情報を収集する測定手段、
(c)試料調製機構が測定用試料を調製してから第1の時間後に測定手段により担体粒子の凝集度合いに関する第1情報を収集する第1制御手段、
(d)第1情報が所定の条件を満たす場合、第1情報に基づいて被測定物質の分析を行う第1分析手段、
(e)第1情報が所定の条件を満たさない場合、試料調製機構が測定用試料を調製してから第2の時間後に測定手段により担体粒子の凝集度合いに関する第2情報を収集する第2制御手段、および
(f)第2情報に基づいて被測定物質の分析を行う第2分析手段、
を備えた生体試料分析装置。 - (a)被測定物質を含むと思われる生体試料と検査試薬とを混合して測定用試料を調製する試料調製機構、
(b)測定用試料を透過する透過光を検出する検出手段、
(c)試料調製機構が測定用試料を調製してから第1の時間経過時および第2の時間経過時における透過光の検出値に基づいて得られる吸光度変化量を第1情報として収集する第1制御手段、
(d)第1情報が所定の条件を満たす場合、第1情報に基づいて被測定物質の分析を行う第1分析手段、
(e)第1情報が所定の条件を満たさない場合、試料調製機構が測定用試料を調製してから第3の時間経過時および第4の時間経過時における透過光の検出値に基づいて得られる吸光度変化量を第2情報として収集する第2制御手段、および
(f)第2情報に基づいて被測定物質の分析を行う第2分析手段、
を備えた生体試料分析装置。 - 被測定物質を含むと思われる生体試料と検査試薬とを混合して測定用試料を調製する第1工程、
測定用試料から被測定物質に関する第1情報を収集する第2工程、
第1情報が所定の条件を満たす場合、第1情報に基づいて被測定物質の分析を行う第3工程、
第1情報が所定の条件を満たさない場合、測定用試料から被測定物質に関する第2情報を収集する第4工程、および
第2情報に基づいて被測定物質の分析を行う第5工程、
を含む生体試料分析方法。 - 前記第2工程は、測定用試料を調製してから、第1の時間後に測定用試料から前記第1情報を収集し、前記第4工程は、測定用試料を調製してから、第2の時間後に測定用試料から前記第2情報を収集する請求項12記載の生体試料分析方法。
- 前記第3工程は第1の検量線を用いて第1情報に基づいて被測定物質の濃度を定量し、前記第5工程は第2の検量線を用いて第2情報に基づいて被測定物質の濃度を定量する請求項13記載の生体試料分析方法。
- 被測定物質の濃度と被測定物質に関する情報との関係を示す検量線を作成する第6工程を含み、第6工程は、被測定物質の濃度と前記第1情報との関係を示す第1の検量線と、被測定物質の濃度と前記第2情報との関係を示す第2の検量線を作成する請求項14記載の生体試料分析方法。
- 前記第2工程は、測定用試料を調製してから第1の時間経過時および第2の時間経過時における測定値の変化量を前記第1情報として収集し、前記第4工程は、測定用試料を調製してから第3の時間経過時および第4の時間経過時における測定値の変化量を前記第2情報として収集する請求項12記載の生体試料分析方法。
- 前記第3工程は第1の検量線を用いて第1情報に基づいて被測定物質の濃度を定量し、前記第5工程は第2の検量線を用いて第2情報に基づいて被測定物質の濃度を定量する請求項16記載の生体試料分析方法。
- 被測定物質の濃度と被測定物質に関する情報との関係を示す検量線を作成する第6工程を含み、第6工程は、被測定物質の濃度と前記第1情報との関係を示す第1の検量線と、被測定物質の濃度と前記第2情報との関係を示す第2の検量線を作成する請求項17記載の生体試料分析方法。
- 前記検査試薬が、前記被測定物質に対する抗体または抗原を含有する請求項12〜請求項18のいずれか1項に記載の生体試料分析方法。
- 前記検査試薬が、前記被測定物質に対する抗体または抗原が感作された担体粒子を含む請求項12〜請求項19の何れか1項に記載の生体試料分析方法。
- 被測定物質を含むと思われる生体試料と、この被測定物質に対する抗体または抗原が感作された担体粒子を含む検査試薬とを混合して測定用試料を調製する第1工程、
第1工程において測定用試料を調製してから、第1の時間後に測定用試料から担体粒子の凝集度合いに関する第1情報を収集する第2工程、
第1情報が所定の条件を満たす場合、第1情報に基づいて被測定物質の分析を行う第3工程、
第1情報が所定の条件を満たさない場合、第1工程において測定用試料を調製してから、第2の時間後に測定用試料から担体粒子の凝集度合いに関する第2情報を収集する第4工程、および
第2情報に基づいて被測定物質の分析を行う第5工程、
を含む生体試料分析方法。 - 被測定物質を含むと思われる生体試料と検査試薬とを混合して測定用試料を調製する第1工程、
第1工程において測定用試料を調製してから、第1の時間経過時および第2の時間経過時において測定用試料を透過する透過光を検出し、前記透過光の検出値に基づいて得られる吸光度変化量を第1情報として収集する第2工程、
第1情報が所定の条件を満たす場合、第1情報に基づいて被測定物質の分析を行う第3工程、
第1情報が所定の条件を満たさない場合、第1工程において測定用試料を調製してから、第3の時間経過時および第4の時間経過時において測定用試料を透過する透過光を検出し、前記透過光の検出値に基づいて得られる吸光度変化量を第2情報として収集する第4工程、および
第2情報に基づいて被測定物質の分析を行う第5工程、
を含む生体試料分析方法。
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Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008070366A (ja) * | 2006-09-11 | 2008-03-27 | F Hoffmann La Roche Ag | クロマトグラフ迅速試験の測定範囲の拡張 |
JP2010522336A (ja) * | 2007-03-22 | 2010-07-01 | クオシェント ダイアグノスティックス リミテッド | 全血分析 |
JP2014122851A (ja) * | 2012-12-21 | 2014-07-03 | Sysmex Corp | 免疫測定方法および免疫測定装置 |
CN105116156A (zh) * | 2015-07-22 | 2015-12-02 | 江苏英诺华医疗技术有限公司 | 一种优化的适合医学检验的生化检测方法 |
WO2019049395A1 (ja) * | 2017-09-08 | 2019-03-14 | アルフレッサファーマ株式会社 | 分析装置および分析方法 |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006277424A (ja) * | 2005-03-30 | 2006-10-12 | Sysmex Corp | 分析システム、データ処理装置、測定装置、及びアプリケーションプログラム |
EP1909207B1 (de) * | 2006-09-11 | 2015-03-04 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Messbereichserweiterung chromatografischer Schnellteste |
EP2074223A4 (en) * | 2006-09-15 | 2010-03-10 | Foldrx Pharmaceuticals Inc | TEST PROCEDURE FOR THE DETECTION OF PROTEINS IN THE NATIVE CONDITION AND FOR THE IDENTIFICATION OF THE STABILITY OF PROTEINS IN THE NATIVE CONDITION MODULATING COMPOUNDS |
KR101285643B1 (ko) * | 2006-09-25 | 2013-07-12 | 토루 오바타 | 겔화 측정 장치 및 시료 셀 |
JP4969292B2 (ja) * | 2007-03-30 | 2012-07-04 | シスメックス株式会社 | 試料分析装置 |
JP5193940B2 (ja) * | 2009-05-11 | 2013-05-08 | 株式会社日立ハイテクノロジーズ | 自動分析装置 |
WO2011034678A1 (en) * | 2009-09-21 | 2011-03-24 | Arizona Board Of Regents, A Body Corporate Of The State Of Arizona | Use of superhydrophobic surfaces for liquid agglutination assays |
JP6257418B2 (ja) * | 2014-04-01 | 2018-01-10 | 株式会社日立ハイテクノロジーズ | 自動分析装置 |
JP7357425B2 (ja) | 2020-03-19 | 2023-10-06 | シスメックス株式会社 | 細胞分類方法、分類装置及びプログラム。 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS56150333A (en) * | 1980-04-23 | 1981-11-20 | Olympus Optical Co Ltd | Sample analysis method |
JPH0599930A (ja) * | 1991-01-31 | 1993-04-23 | Shimadzu Corp | 自動化学分析装置 |
JPH06249856A (ja) * | 1993-02-26 | 1994-09-09 | Shimadzu Corp | 生化学自動分析装置における測定方法 |
JPH0672845B2 (ja) * | 1986-09-01 | 1994-09-14 | 富士写真フイルム株式会社 | 分析方法 |
JPH08247950A (ja) * | 1995-03-15 | 1996-09-27 | Olympus Optical Co Ltd | 濃度分析方法 |
WO2003056312A1 (fr) * | 2001-12-27 | 2003-07-10 | Arkray, Inc. | Procede de mesure de la concentration |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS56155835A (en) | 1980-05-02 | 1981-12-02 | Olympus Optical Co Ltd | Component analyzing method |
JPH0635980B2 (ja) | 1985-06-05 | 1994-05-11 | 東亜医用電子株式会社 | 体液成分の測定方法 |
JP2666568B2 (ja) | 1990-12-29 | 1997-10-22 | 株式会社島津製作所 | 生化学自動分析装置 |
JP4404994B2 (ja) | 1999-07-22 | 2010-01-27 | シスメックス株式会社 | 免疫分析方法 |
EP1365240B1 (en) * | 2002-05-22 | 2006-09-13 | Sysmex Corporation | Immunoassay methods, immunoassay apparatuses, and reagents for immunoassays |
-
2004
- 2004-10-22 JP JP2004308701A patent/JP4805564B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2005
- 2005-10-21 US US11/255,576 patent/US9568488B2/en active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS56150333A (en) * | 1980-04-23 | 1981-11-20 | Olympus Optical Co Ltd | Sample analysis method |
JPH0672845B2 (ja) * | 1986-09-01 | 1994-09-14 | 富士写真フイルム株式会社 | 分析方法 |
JPH0599930A (ja) * | 1991-01-31 | 1993-04-23 | Shimadzu Corp | 自動化学分析装置 |
JPH06249856A (ja) * | 1993-02-26 | 1994-09-09 | Shimadzu Corp | 生化学自動分析装置における測定方法 |
JPH08247950A (ja) * | 1995-03-15 | 1996-09-27 | Olympus Optical Co Ltd | 濃度分析方法 |
WO2003056312A1 (fr) * | 2001-12-27 | 2003-07-10 | Arkray, Inc. | Procede de mesure de la concentration |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008070366A (ja) * | 2006-09-11 | 2008-03-27 | F Hoffmann La Roche Ag | クロマトグラフ迅速試験の測定範囲の拡張 |
JP2010522336A (ja) * | 2007-03-22 | 2010-07-01 | クオシェント ダイアグノスティックス リミテッド | 全血分析 |
JP2014122851A (ja) * | 2012-12-21 | 2014-07-03 | Sysmex Corp | 免疫測定方法および免疫測定装置 |
CN105116156A (zh) * | 2015-07-22 | 2015-12-02 | 江苏英诺华医疗技术有限公司 | 一种优化的适合医学检验的生化检测方法 |
WO2019049395A1 (ja) * | 2017-09-08 | 2019-03-14 | アルフレッサファーマ株式会社 | 分析装置および分析方法 |
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