JPH0672845B2 - 分析方法 - Google Patents
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- JPH0672845B2 JPH0672845B2 JP61205604A JP20560486A JPH0672845B2 JP H0672845 B2 JPH0672845 B2 JP H0672845B2 JP 61205604 A JP61205604 A JP 61205604A JP 20560486 A JP20560486 A JP 20560486A JP H0672845 B2 JPH0672845 B2 JP H0672845B2
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- analysis
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
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- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/27—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands using photo-electric detection ; circuits for computing concentration
- G01N21/272—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands using photo-electric detection ; circuits for computing concentration for following a reaction, e.g. for determining photometrically a reaction rate (photometric cinetic analysis)
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- G—PHYSICS
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- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
- G01N33/521—Single-layer analytical elements
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- G01N2021/1738—Optionally different kinds of measurements; Method being valid for different kinds of measurement
- G01N2021/174—Optionally different kinds of measurements; Method being valid for different kinds of measurement either absorption-reflection or emission-fluorescence
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- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
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Description
【発明の詳細な説明】 ［利用分野］ 本発明は比色分析等光学的変化を利用して流体中の特定
成分を定量分析する方法に関する。特に、そのような分
析における所要時間の短縮に関する。
成分を定量分析する方法に関する。特に、そのような分
析における所要時間の短縮に関する。
［従来技術の欠点］ 液体中に存在する特定の物質を検出するために、検出対
象となる物質と適当な試薬との反応により生ずる発色、
変色等の光学的変化を利用する方法は、極めて一般的な
方法であり、比色分析と呼ばれている。湿式法では、被
検物質と反応して発色等の光学的変化を生ずる試薬は、
試料液に添加される。これに対し最近発達した乾式法で
は、試薬を含有する分析要素に液体試料を点滴し、被検
物質と試薬の反応により生ずる発色等を測定する。この
ような乾式分析要素として例えば、特公昭53−21677号
や特開昭55−164356号に開示されたものがある。
象となる物質と適当な試薬との反応により生ずる発色、
変色等の光学的変化を利用する方法は、極めて一般的な
方法であり、比色分析と呼ばれている。湿式法では、被
検物質と反応して発色等の光学的変化を生ずる試薬は、
試料液に添加される。これに対し最近発達した乾式法で
は、試薬を含有する分析要素に液体試料を点滴し、被検
物質と試薬の反応により生ずる発色等を測定する。この
ような乾式分析要素として例えば、特公昭53−21677号
や特開昭55−164356号に開示されたものがある。
試料液に試薬を添加するか、乾式分析要素に試料液を点
着すると、試薬と被検成分が反応し、色素の形成等が生
ずる。例えば、特開昭55−164356号に記載された乾式分
析要素に血液または血漿を点着すると、分析要素中の試
薬と検体中のグルコースが反応し、色素、例えば赤色の
色素が形成される。乾式分析要素の光学濃度は生成した
色素の量に対応するから、一定時間後に反射光学濃度を
測定し、予め求めておいた検量線からグルコース濃度、
いわゆる血糖値に換算する。湿式法では、液の透過濃度
が測定される。
着すると、試薬と被検成分が反応し、色素の形成等が生
ずる。例えば、特開昭55−164356号に記載された乾式分
析要素に血液または血漿を点着すると、分析要素中の試
薬と検体中のグルコースが反応し、色素、例えば赤色の
色素が形成される。乾式分析要素の光学濃度は生成した
色素の量に対応するから、一定時間後に反射光学濃度を
測定し、予め求めておいた検量線からグルコース濃度、
いわゆる血糖値に換算する。湿式法では、液の透過濃度
が測定される。
従来は、反応速度を速度として酵素などの活性を測定す
る反応速度法による分析の場合を除くと、試料液の点着
または試薬の添加から一定時間後に光学濃度測定を行う
のみであった。被検成分の濃度（例えば血糖値）が、比
較的低い場合にはすでに反応が終了しているので、この
時間まで待つ必要はなく、時間の不経済である。分析操
作に要する時間が短縮された乾式分析法では、なおさら
である。しかし被検成分の濃度が高い場合には、反応時
間が短いと検量線の勾配が小さく、分析値の変動係数が
大となり、十分な分析精度が得られないことが多い。
る反応速度法による分析の場合を除くと、試料液の点着
または試薬の添加から一定時間後に光学濃度測定を行う
のみであった。被検成分の濃度（例えば血糖値）が、比
較的低い場合にはすでに反応が終了しているので、この
時間まで待つ必要はなく、時間の不経済である。分析操
作に要する時間が短縮された乾式分析法では、なおさら
である。しかし被検成分の濃度が高い場合には、反応時
間が短いと検量線の勾配が小さく、分析値の変動係数が
大となり、十分な分析精度が得られないことが多い。
［解決すべき技術課題］ 本発明は、液体中の特定物質の濃度を比色分析等で測定
する方法において、分析精度を損なうことなく、分析に
要する時間を必要最小限度に短縮することを目的とす
る。
する方法において、分析精度を損なうことなく、分析に
要する時間を必要最小限度に短縮することを目的とす
る。
［問題解決の手段］ 本発明においては、 （１）光学濃度を反応開始後適当な時間間隔で複数回測
定することにより、光学濃度の変化を追跡し、 （２）各測定時点における光学濃度の値から更に反応を
継続するかどうかを判断し、 （３）分析精度の上で更に反応を継続する必要がないと
判断した場合は、その反応時間に対応する検量線を選択
し、 （４）反応を継続する必要があると判断した場合は更に
反応を継続し、 （５）精度の上から必要最小限度の反応時間で分析を終
了する ことを特徴とする。
定することにより、光学濃度の変化を追跡し、 （２）各測定時点における光学濃度の値から更に反応を
継続するかどうかを判断し、 （３）分析精度の上で更に反応を継続する必要がないと
判断した場合は、その反応時間に対応する検量線を選択
し、 （４）反応を継続する必要があると判断した場合は更に
反応を継続し、 （５）精度の上から必要最小限度の反応時間で分析を終
了する ことを特徴とする。
本発明は種々の発色反応に基づく比色分析、特に一体化
乾式分析要素を用いた比色分析に適用できる。例えば以
下に列挙するような発色反応に基づく比色分析に適用で
きる。
乾式分析要素を用いた比色分析に適用できる。例えば以
下に列挙するような発色反応に基づく比色分析に適用で
きる。
（１）被検物質（アナライトともいわれる）との反応に
より直接または間接に生成した過酸化水素を検出する種
々の発色反応。例えば、 ペルオキシダーゼその他の過酸化物触媒活性物質の存在
下においてフェナゾン類（１−フェニル−2,3−ジメチ
ル−４−アミノピラゾリン−５−オン、１−（2,4,6−
トリクロロフェニル−2,3−ジメチル４−４−アミノピ
ラゾリン−５−オン等）とフェノール類（フェノール、
α−ナフトール、1,7−ジヒドロキシナフタレン等）と
のカップリング反応、 ペルオキシダーゼ等の存在下においてベンジジン型色原
体、例えばベンジジン、Ｏ−トルイジン、Ｏ−ジアニシ
ジン、テトラメチルベンジジンの、変色反応（例えば、
USP2,981,606号の記載参照）、 イミダゾール核を有するロイコ色素、例えば2,4,5−ト
リアリールイミダゾール、2,4−ジアリール−５−アル
キルイミダゾール等からの色素生成反応。
より直接または間接に生成した過酸化水素を検出する種
々の発色反応。例えば、 ペルオキシダーゼその他の過酸化物触媒活性物質の存在
下においてフェナゾン類（１−フェニル−2,3−ジメチ
ル−４−アミノピラゾリン−５−オン、１−（2,4,6−
トリクロロフェニル−2,3−ジメチル４−４−アミノピ
ラゾリン−５−オン等）とフェノール類（フェノール、
α−ナフトール、1,7−ジヒドロキシナフタレン等）と
のカップリング反応、 ペルオキシダーゼ等の存在下においてベンジジン型色原
体、例えばベンジジン、Ｏ−トルイジン、Ｏ−ジアニシ
ジン、テトラメチルベンジジンの、変色反応（例えば、
USP2,981,606号の記載参照）、 イミダゾール核を有するロイコ色素、例えば2,4,5−ト
リアリールイミダゾール、2,4−ジアリール−５−アル
キルイミダゾール等からの色素生成反応。
（２）NADとNADH,またはNADPとNADPHの間の酸化還元反
応に共役する電子伝達剤を介してのテトラゾリウム塩か
らのホルマザン色素形成反応。例えば、特開昭59−8809
7号に記載されたテトラゾリウム塩からの色素形成反
応。
応に共役する電子伝達剤を介してのテトラゾリウム塩か
らのホルマザン色素形成反応。例えば、特開昭59−8809
7号に記載されたテトラゾリウム塩からの色素形成反
応。
（３）芳香族ジアゾニウム塩とビリルビンの結合による
アゾビリルビンの生成反応。例えばUSP2,854,317号、同
3,880,588号、特開昭59−145965号の記載参照。
アゾビリルビンの生成反応。例えばUSP2,854,317号、同
3,880,588号、特開昭59−145965号の記載参照。
（４）バリルマンデル酸とジアゾニウム塩、例えばｐ−
ニトロベンゼンジアゾニウムとによるアゾ色素の形成反
応。
ニトロベンゼンジアゾニウムとによるアゾ色素の形成反
応。
（５）クレアチニンとピクリン酸塩からの色素形成反応
（いわゆるヤッフェ法）。
（いわゆるヤッフェ法）。
（６）酵素活性下での自己顕色性基質からの色素解離。
例えば USP4,233,403号に記載のあるｐ−ニトロフェノール置換
オリゴ糖から、パラニトロフェノールを生成する加水分
解反応、 γ−グルタミルパラニトロアニリド、リン酸パラニトロ
フェノール等から、パラニトロフェノールを生成する加
水分解反応。
例えば USP4,233,403号に記載のあるｐ−ニトロフェノール置換
オリゴ糖から、パラニトロフェノールを生成する加水分
解反応、 γ−グルタミルパラニトロアニリド、リン酸パラニトロ
フェノール等から、パラニトロフェノールを生成する加
水分解反応。
（７）酸性環境でナフチルアミン類、例えばＮ−（１−
ナフチル）−Ｎ′−ジエチルエチレンジアミンとｏ−フ
タルアルデヒドと尿素との反応、例えば特開昭55−6903
8号、特開昭58−117457号に記載のある反応。
ナフチル）−Ｎ′−ジエチルエチレンジアミンとｏ−フ
タルアルデヒドと尿素との反応、例えば特開昭55−6903
8号、特開昭58−117457号に記載のある反応。
（８）金属イオン、例えばカルシウムイオンと、キレー
ト剤、例えば3,3′−ビス［｛ジ（カルボキシメチル）
アミノ｝メチル］−ｏ−クレゾールフタレインとの間の
キレート色素形成反応。
ト剤、例えば3,3′−ビス［｛ジ（カルボキシメチル）
アミノ｝メチル］−ｏ−クレゾールフタレインとの間の
キレート色素形成反応。
（９）酸塩基指示薬のpHによる変色。例えば、フェノー
ルスルフォフタレイン、ブロムクレゾールグリーン、ブ
ロムクレゾールパープル等の変色。
ルスルフォフタレイン、ブロムクレゾールグリーン、ブ
ロムクレゾールパープル等の変色。
（10）酸塩基指示薬の蛋白質による変色。例えば、アン
モニア、尿素等の分析に利用されるブロムクレゾールグ
リーン、ブロムクレゾールパープル、テトラブロモフェ
ノールブルー等のアルブミンによる変色。
モニア、尿素等の分析に利用されるブロムクレゾールグ
リーン、ブロムクレゾールパープル、テトラブロモフェ
ノールブルー等のアルブミンによる変色。
（11）総蛋白の定量に利用される、アルカリ環境におけ
るビウレット試薬の呈色。
るビウレット試薬の呈色。
色素の形成または変色（吸収波長変化）のみならず、色
素の退色や有色物質の減少を測定する場合にも、本発明
が適用できる。例えば、NADHまたはNADPHの減少を測定
するグルコースの分析やフェリシアン化物の減少を測定
するグルコースの分析である。
素の退色や有色物質の減少を測定する場合にも、本発明
が適用できる。例えば、NADHまたはNADPHの減少を測定
するグルコースの分析やフェリシアン化物の減少を測定
するグルコースの分析である。
短波長電磁波、例えば紫外線、放射線の励起により生ず
る蛍光を測定する場合にも、本発明が適用できる。また
化学発光、生物発光などの発光を測定する場合にも、本
発明が適用できる。例えば、過酸化水素の作用によるル
ミノール発光等。
る蛍光を測定する場合にも、本発明が適用できる。また
化学発光、生物発光などの発光を測定する場合にも、本
発明が適用できる。例えば、過酸化水素の作用によるル
ミノール発光等。
［発明の効果］ 本発明は、液体中の特定物質の濃度を比色分析等で測定
する方法において、分析精度を損なうことなく、分析に
要する時間を必要最小限度に短縮することができる。
する方法において、分析精度を損なうことなく、分析に
要する時間を必要最小限度に短縮することができる。
試料液の点着または試薬の添加から一定時間後に光学濃
度測定を行う従来の終点法分析に比し、本発明では、被
検成分の濃度（例えば血糖値）が比較的低い場合には反
応が比較的短時間に終了しているのでそれ以上待つこと
なく分析を終了し、分析時間の経済を図ることができ
る。乾式分析法のように分析操作に要する時間が短縮さ
れた分析法では特にその長所を活用することができる。
度測定を行う従来の終点法分析に比し、本発明では、被
検成分の濃度（例えば血糖値）が比較的低い場合には反
応が比較的短時間に終了しているのでそれ以上待つこと
なく分析を終了し、分析時間の経済を図ることができ
る。乾式分析法のように分析操作に要する時間が短縮さ
れた分析法では特にその長所を活用することができる。
一方、被検成分の濃度が高い場合には、反応時間が短い
と検量線の勾配が小さく、分析値の変動係数が大とな
り、十分な分析精度が得られないことがあるので、この
ような場合には必要な反応時間を取ることにより、分析
精度を高く保つことができる。乾式分析要素を用いた分
析法では、上の傾向が多く見られるので、これは重要で
ある。
と検量線の勾配が小さく、分析値の変動係数が大とな
り、十分な分析精度が得られないことがあるので、この
ような場合には必要な反応時間を取ることにより、分析
精度を高く保つことができる。乾式分析要素を用いた分
析法では、上の傾向が多く見られるので、これは重要で
ある。
本発明では、分析時間の異なる短縮だけでなく、試料液
中の被検成分濃度に応じて、分析精度の上で必要な最小
限の反応時間を選ぶので、分析精度を損なうことなく所
要時間の合理的な短縮が達成できる。
中の被検成分濃度に応じて、分析精度の上で必要な最小
限の反応時間を選ぶので、分析精度を損なうことなく所
要時間の合理的な短縮が達成できる。
［実施例］ ＜化学分析スライドの作製＞ 下記のようにして、グルコース乾式化学分析スライドを
作製した。
作製した。
ゼラチン下塗りがされている厚さ180ミクロンのポリエ
チレンテレフタレート平滑フィルムの上に下記組成の試
薬層を塗布液、乾燥厚さが15ミクロンになるように塗布
し乾燥した。
チレンテレフタレート平滑フィルムの上に下記組成の試
薬層を塗布液、乾燥厚さが15ミクロンになるように塗布
し乾燥した。
ゼラチン 20g ペルオキシダーゼ 2500IU グルコースオキシダーゼ 1000IU 1,7−ジヒドロキシナフタレン 0.5g ４−アミノアンチピリン 0.5g ポリオキシエチレンノニルフェノール 0.2g 水 200ml その上に下記組成の光遮蔽層塗布液を乾燥厚さが７ミク
ロンになるように、塗布、乾燥した。
ロンになるように、塗布、乾燥した。
ゼラチン 10g 二酸化チタン 100g 水 500ml 光遮蔽層の上に下記組成の接着層を乾燥膜厚が２μｍに
なるように塗布、乾燥した。
なるように塗布、乾燥した。
ゼラチン 4g ポリオキシエチレンノニルフェノール 0.1g 水 200ml 接着層を30g/m2の割合の水で湿らせた後、綿ブロード織
物を軽く圧着し、乾燥させた。
物を軽く圧着し、乾燥させた。
上記のように作製されたグルコース分析フィルムを、15
×15mmに切り、24×28mmのプラスチック製マウントに収
納した。
×15mmに切り、24×28mmのプラスチック製マウントに収
納した。
＜比色分析操作＞ 上記のように作製されたグルコース分析スライドを、第
１図に示す分析装置のスライド挿入位置２に装填し、試
料液10μをマイクロピペットで点着した後、直ちにス
ライド送りレバー４を測光位置３まで押して、インキュ
ベータ７内にスライドを送り込む。
１図に示す分析装置のスライド挿入位置２に装填し、試
料液10μをマイクロピペットで点着した後、直ちにス
ライド送りレバー４を測光位置３まで押して、インキュ
ベータ７内にスライドを送り込む。
分析装置内に設けられたタイマーにより、スライドの送
り込みから２分後に、インキュベータの下方に設けられ
た測光窓を通して、スライド内の化学分析フィルムの支
持体側からの反射光学濃度を光学濃度測定ヘッド（プロ
ーブ）12の光源と測光部14、参照光の測光部15によって
測定した。光源には透過極大波長500nmのフィルターを
光路に挿入した。
り込みから２分後に、インキュベータの下方に設けられ
た測光窓を通して、スライド内の化学分析フィルムの支
持体側からの反射光学濃度を光学濃度測定ヘッド（プロ
ーブ）12の光源と測光部14、参照光の測光部15によって
測定した。光源には透過極大波長500nmのフィルターを
光路に挿入した。
本発明における代表的な工程を示すフローチャートを、
本実施例の場合について第２図に示す。
本実施例の場合について第２図に示す。
点着から２分後に測定した光学濃度の値が0.400より小
のときには、反応を打ち切ってスライドをインキュベー
タからトレイ23に排出させる一方、反応時間２分での用
意された検量線を用いて、グルコース濃度を算出する。
検量線は演算装置内の記憶装置に記憶されているもの
が、演算制御装置からの指令信号により選択されて演算
装置の演算部にインプットされ、演算に用いられる。
のときには、反応を打ち切ってスライドをインキュベー
タからトレイ23に排出させる一方、反応時間２分での用
意された検量線を用いて、グルコース濃度を算出する。
検量線は演算装置内の記憶装置に記憶されているもの
が、演算制御装置からの指令信号により選択されて演算
装置の演算部にインプットされ、演算に用いられる。
２分後の光学濃度が0.400以上であるときには、３分後
までインキュベータ内でスライド上の反応を継続させ
て、光学濃度を測定する。
までインキュベータ内でスライド上の反応を継続させ
て、光学濃度を測定する。
３分後の光学濃度が0.600より小のときには、反応を打
ち切ってスライドをインキュベータから排出させる一
方、反応時間３分での用意された検量線を用いて、グル
コース濃度を算出する。３分後の光学濃度が0.600以上
であるときには、さらに４分後までインキュベータ内で
スライド上の反応を継続させて、４分後に光学濃度に測
定する。
ち切ってスライドをインキュベータから排出させる一
方、反応時間３分での用意された検量線を用いて、グル
コース濃度を算出する。３分後の光学濃度が0.600以上
であるときには、さらに４分後までインキュベータ内で
スライド上の反応を継続させて、４分後に光学濃度に測
定する。
４分後の光学濃度が0.700より小のときには、反応を打
ち切ってスライドをインキュベータから排出させる一
方、反応時間４分での用意された検量線を用いて、グル
コース濃度を算出する。４分後の光学濃度が0.700以上
であるときには、さらに５分後までインキュベータ内で
スライド上の反応を継続させて、５分後に光学濃度を測
定する。
ち切ってスライドをインキュベータから排出させる一
方、反応時間４分での用意された検量線を用いて、グル
コース濃度を算出する。４分後の光学濃度が0.700以上
であるときには、さらに５分後までインキュベータ内で
スライド上の反応を継続させて、５分後に光学濃度を測
定する。
５分後の光学濃度が0.850より小のときには、反応を打
ち切ってスライドをインキュベータから排出される一
方、反応時間５分での用意された検量線を用いて、グル
コース濃度を算出する。５分後の光学濃度が0.850以上
であるときには、さらに６分後までインキュベータ内で
スライド上の反応を継続させて、６分後に光学濃度を測
定する。測定終了後のスライドは排出される。
ち切ってスライドをインキュベータから排出される一
方、反応時間５分での用意された検量線を用いて、グル
コース濃度を算出する。５分後の光学濃度が0.850以上
であるときには、さらに６分後までインキュベータ内で
スライド上の反応を継続させて、６分後に光学濃度を測
定する。測定終了後のスライドは排出される。
本実施例における以上の論理処理フローチャートを第３
図に示した。
図に示した。
＜検量線の作製＞ 各反応時間に対する検量線は、分析に先立ち以下のよう
にして作成した。
にして作成した。
前記のグルコース分析スライドに、0,50,100,150,200,2
50,300,350,400,450,500,550,600mg/dlのグルコースを
それぞれ含む管理血清（市販管理血清およびそれに所要
量のグルコースを加えたもの）を、マイクロピペットを
用いて点着し、1,2,3,4,5,6分後の反射光学濃度を測定
した。各グルコース濃度における反応時間に反射光学濃
度の関係は、第４図に示すごとくであった。このグラフ
をもとに、反応時間2,3,4,5,6分における検量線（グル
コース含量対光学濃度）を求めた。各反応時間に対する
検量線は第５図に示すごとくであった。
50,300,350,400,450,500,550,600mg/dlのグルコースを
それぞれ含む管理血清（市販管理血清およびそれに所要
量のグルコースを加えたもの）を、マイクロピペットを
用いて点着し、1,2,3,4,5,6分後の反射光学濃度を測定
した。各グルコース濃度における反応時間に反射光学濃
度の関係は、第４図に示すごとくであった。このグラフ
をもとに、反応時間2,3,4,5,6分における検量線（グル
コース含量対光学濃度）を求めた。各反応時間に対する
検量線は第５図に示すごとくであった。
第１図は実施例に用いた分析装置の断面図と電気回路の
模式図である。 第２図は工程フローチャートの代表例、第３図は実施例
の論理処理フローチャートである。 第４図は実施例における反応時間と反射光学濃度の関係
を示すグラフ、第５図は実施例における検量線を示すグ
ラフである。 第１図、第２図で各記号の示す意義は下記の通りであ
る。 １……スライド挿入レバーの、スライド排出位置を示す ２……スライド挿入レバーの、液点着位置を示す ３……スライド挿入レバーの、測光位置を示す４スライ
ド挿入レバー ５……スライド挿入レバー（平面図） ６……スライド送り部 ７……上部保温部材 ８……化学分析スライド、16……ランプ ９……黒板、17……増幅器 10……白板、18……増幅器 11……下部保温部材、19……切り換え器 12……測光ヘッド、20……A/D変換器 13……レンズ、21……コンピュータ 14……受光素子、22……ベース 15……受光素子（参照光） 23……スライド排出トレー
模式図である。 第２図は工程フローチャートの代表例、第３図は実施例
の論理処理フローチャートである。 第４図は実施例における反応時間と反射光学濃度の関係
を示すグラフ、第５図は実施例における検量線を示すグ
ラフである。 第１図、第２図で各記号の示す意義は下記の通りであ
る。 １……スライド挿入レバーの、スライド排出位置を示す ２……スライド挿入レバーの、液点着位置を示す ３……スライド挿入レバーの、測光位置を示す４スライ
ド挿入レバー ５……スライド挿入レバー（平面図） ６……スライド送り部 ７……上部保温部材 ８……化学分析スライド、16……ランプ ９……黒板、17……増幅器 10……白板、18……増幅器 11……下部保温部材、19……切り換え器 12……測光ヘッド、20……A/D変換器 13……レンズ、21……コンピュータ 14……受光素子、22……ベース 15……受光素子（参照光） 23……スライド排出トレー
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭56−150333（ＪＰ，Ａ)
Claims (1)
- 【請求項１】液体中の特定物質の濃度または活性を、化
学反応を介して生ずる光学的変化を検出して測定する分
析方法において、光学濃度または発光強度を反応開始後
適当な時間間隔で複数回測定することにより、光学濃度
の変化を追跡し、各測定時点における光学濃度の値から
更に反応を継続するかどうか判断し、分析精度の上から
反応を継続する必要がないと判断した場合はその反応時
間に対応する検量線を選択し、反応を継続する必要があ
ると判断した場合は更に反応を継続して、分析精度の上
から最小限度の反応時間で分析を終了することを特徴と
する分析方法。
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|---|---|---|---|
| JP61205604A JPH0672845B2 (ja) | 1986-09-01 | 1986-09-01 | 分析方法 |
| DE19873729189 DE3729189A1 (de) | 1986-09-01 | 1987-09-01 | Analytisches verfahren |
| US07/351,315 US5047351A (en) | 1986-09-01 | 1989-05-10 | Optical end-point type analytical method |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61205604A JPH0672845B2 (ja) | 1986-09-01 | 1986-09-01 | 分析方法 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6361147A JPS6361147A (ja) | 1988-03-17 |
| JPH0672845B2 true JPH0672845B2 (ja) | 1994-09-14 |
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61205604A Expired - Fee Related JPH0672845B2 (ja) | 1986-09-01 | 1986-09-01 | 分析方法 |
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|---|---|
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| JP (1) | JPH0672845B2 (ja) |
| DE (1) | DE3729189A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006119044A (ja) * | 2004-10-22 | 2006-05-11 | Sysmex Corp | 生体試料分析装置および方法 |
Families Citing this family (38)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4935346A (en) | 1986-08-13 | 1990-06-19 | Lifescan, Inc. | Minimum procedure system for the determination of analytes |
| JPH03123673U (ja) * | 1990-03-30 | 1991-12-16 | ||
| ATE123572T1 (de) * | 1990-12-12 | 1995-06-15 | Avl Medical Instr Ag | Indikatorsubstanz einer fluoreszenzoptischen messanordnung zur messung des ph-wertes einer probe sowie optischer sensor mit einer derartigen indikatorsubstanz. |
| DK20991D0 (ja) * | 1991-02-07 | 1991-02-07 | Novo Nordisk As | |
| US5514562A (en) * | 1991-02-07 | 1996-05-07 | Novo Nordisk A/S | Method and an apparatus for currently measuring the presence of traces of an undesirable substance in air |
| US5246858A (en) * | 1991-02-27 | 1993-09-21 | Boehringer Mannheim Corporation | Apparatus and method for analyzing a body fluid |
| EP0572571B1 (en) * | 1991-02-27 | 2003-12-03 | Roche Diagnostics Corporation | Apparatus and method for analyzing body fluids |
| DE4203202A1 (de) * | 1992-02-05 | 1993-08-12 | Boehringer Mannheim Gmbh | Geraet zur analyse einer medizinischen probe |
| US5371687A (en) * | 1992-11-20 | 1994-12-06 | Boehringer Mannheim Corporation | Glucose test data acquisition and management system |
| DE4321456C2 (de) * | 1993-06-29 | 1995-12-14 | Forschungszentrum Juelich Gmbh | Verfahren zur quantitativen Bestimmung von brennbaren Anteilen einer Probe und Vorrichtung zur Durchführung des Verfahrens |
| US5728352A (en) * | 1994-11-14 | 1998-03-17 | Advanced Care Products | Disposable electronic diagnostic instrument |
| EP0860695B1 (en) * | 1995-10-30 | 2006-01-04 | Arkray, Inc. | Method for measuring an analyte and corresponding device |
| US20030180183A1 (en) * | 1995-10-30 | 2003-09-25 | Takao Fukuoka | Method for measuring substance and testing piece |
| DE19835243A1 (de) * | 1998-08-04 | 2000-02-24 | Lmb Technologie Gmbh | Vorrichtung und Verfahren zum Bestimmen eines Hämoglobinwerts von Blut |
| AU7855000A (en) * | 1999-10-07 | 2001-05-10 | Umm Electronics, Inc. | Timing independent method for determining a proper time for measurement of a reaction between a sample fluid and reagent |
| US6458326B1 (en) | 1999-11-24 | 2002-10-01 | Home Diagnostics, Inc. | Protective test strip platform |
| US6525330B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-02-25 | Home Diagnostics, Inc. | Method of strip insertion detection |
| US6541266B2 (en) | 2001-02-28 | 2003-04-01 | Home Diagnostics, Inc. | Method for determining concentration of an analyte in a test strip |
| US7118916B2 (en) * | 2002-10-21 | 2006-10-10 | Lifescan, Inc. | Method of reducing analysis time of endpoint-type reaction profiles |
| US7239394B2 (en) | 2003-06-04 | 2007-07-03 | Inverness Medical Switzerland Gmbh | Early determination of assay results |
| GB0515750D0 (en) | 2005-07-30 | 2005-09-07 | Dyson Technology Ltd | Drying apparatus |
| GB0515744D0 (en) | 2005-07-30 | 2005-09-07 | Dyson Technology Ltd | Dryer |
| GB0515749D0 (en) | 2005-07-30 | 2005-09-07 | Dyson Technology Ltd | Drying apparatus |
| GB2428569B (en) * | 2005-07-30 | 2009-04-29 | Dyson Technology Ltd | Dryer |
| GB0515754D0 (en) | 2005-07-30 | 2005-09-07 | Dyson Technology Ltd | Drying apparatus |
| GB2434094A (en) | 2006-01-12 | 2007-07-18 | Dyson Technology Ltd | Drying apparatus with sound-absorbing material |
| GB2450351B (en) | 2007-06-20 | 2012-01-18 | Cozart Bioscience Ltd | Monitoring an Immunoassay |
| BRPI0814202B1 (pt) * | 2007-07-26 | 2019-10-29 | Home Diagnostics Inc | métodos e sistemas de determinação da concentração de produto de análise em amostra fluida |
| US8101062B2 (en) | 2007-07-26 | 2012-01-24 | Nipro Diagnostics, Inc. | System and methods for determination of analyte concentration using time resolved amperometry |
| CA2804843C (en) * | 2012-02-06 | 2021-02-02 | Ortho-Clinical Diagnostics, Inc. | Multiple time windows for extending the range of an assay |
| US9588113B2 (en) | 2012-02-22 | 2017-03-07 | Church & Dwight Co., Inc. | Methods for electronic analyte assaying |
| US9063091B2 (en) * | 2012-04-06 | 2015-06-23 | Ixensor Inc. | Test strips and method for reading test strips |
| EP2657681A1 (en) * | 2012-04-26 | 2013-10-30 | Roche Diagnostics GmbH | Improvement of the sensitivity and the dynamic range of photometric assays by generating multiple calibration curves |
| US9778200B2 (en) | 2012-12-18 | 2017-10-03 | Ixensor Co., Ltd. | Method and apparatus for analyte measurement |
| CN104062293B (zh) * | 2014-07-03 | 2016-04-20 | 青岛啤酒股份有限公司 | 一种检测大麦或麦芽中致酵母提前凝聚性因子的方法 |
| EP4176074A1 (en) | 2020-07-03 | 2023-05-10 | Glycospot ApS | System and method for determining enzyme activity in grain material |
| WO2022250593A1 (en) * | 2021-05-24 | 2022-12-01 | Delaval Holding Ab | Determination of haptoglobin quantity in milk |
| EP4346386A1 (en) * | 2021-05-24 | 2024-04-10 | DeLaval Holding AB | Determination of haptoglobin quantity in milk |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3245306A (en) * | 1961-10-05 | 1966-04-12 | Aluminum Co Of America | Photometer and method |
| US3881992A (en) * | 1973-07-02 | 1975-05-06 | Wilson Ralston | Optical rate measurement method |
| US4052161A (en) * | 1974-08-22 | 1977-10-04 | The Perkin-Elmer Corporation | Kinetic analyzer |
| JPS5247345B2 (ja) * | 1974-12-26 | 1977-12-01 | ||
| JPS51114985A (en) * | 1975-04-01 | 1976-10-09 | Kyoto Daiichi Kagaku:Kk | Mothod to analyse urine, etc. |
| US3989383A (en) * | 1975-04-07 | 1976-11-02 | Bio-Technology Instruments Corporation | Reaction detection system |
| SE418017B (sv) * | 1978-06-14 | 1981-04-27 | Bifok Ab | Sett att kontinuerligt bestemma olika langsamt reagerande substanser kvantitativt med anvendning av en enda metcell |
| JPS56155835A (en) * | 1980-05-02 | 1981-12-02 | Olympus Optical Co Ltd | Component analyzing method |
| DE3439181C2 (de) * | 1984-10-23 | 1994-01-20 | Lange Gmbh Dr Bruno | Verfahren zur photometrischen Bestimmung der Konzentration einer Substanz |
-
1986
- 1986-09-01 JP JP61205604A patent/JPH0672845B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1987
- 1987-09-01 DE DE19873729189 patent/DE3729189A1/de not_active Ceased
-
1989
- 1989-05-10 US US07/351,315 patent/US5047351A/en not_active Expired - Lifetime
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006119044A (ja) * | 2004-10-22 | 2006-05-11 | Sysmex Corp | 生体試料分析装置および方法 |
| US9568488B2 (en) | 2004-10-22 | 2017-02-14 | Sysmex Corporation | Biological sample analyzing apparatus |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6361147A (ja) | 1988-03-17 |
| DE3729189A1 (de) | 1988-03-03 |
| US5047351A (en) | 1991-09-10 |
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| EP0806671B1 (en) | Automated urinalysis system for detecting blood in urine |
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