DE3439181C2 - Verfahren zur photometrischen Bestimmung der Konzentration einer Substanz - Google Patents

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren der im Oberbegriff des Anspruchs 1 angegebenen Art.

Photometer - bevorzugt als Filterphotometer ausgeführt - dienen zur Durchführung klinisch-chemischer Analysen, wobei nach Zusammenmischen der zu untersuchenden Probe mit Reagenz, die Messung normalerweise erst nach Ablauf einer vorgegebenen Zeitdauer ursprünglich werden konnte, wenn nämlich die für die für die Änderung der zu messenden Extinktion verantwortliche Reaktion möglichst vollständig abgeschlossen und somit die Endkonzentration erreicht ist. Diese Zeitdauer beträgt beispielsweise bei der Blutzuckerbestimmung (Glukose-Test) nach einer der üblicherweise zur Anwendung kommenden GOD-Methoden zwischen 10 und 30 Minuten. Das sich einstellende Endergebnis ist von der herrschenden Reaktionstemperatur abhängig, so daß brauchbare Ergebnisse nur erzielbar sind, wenn eine Thermostatisierung vorgesehen ist. Wegen der langen Reaktionsdauer besteht die Gefahr, daß sich die Temperatur sogar während der Messung verändert, so daß hiermit eine weitere schwer abschätzbare Beeinträchtigung der Meßgenauigkeit gegeben ist.

Bekannt ist auch eine Schnellmethode, bei der davon ausgegangen wird, daß bei bestimmten Tests die Glukosekonzentration proportional zur Extinktionszunahme innerhalb vorbestimmter Zeitabschnitte ist. Bei diesem Verfahren besteht der Nachteil, daß der Proportionalitätsfaktor vom gewählten Zeitabschnitt abhängig ist, so daß die Genauigkeit der Ergebnisse dieses Verfahrens vom präzisen Einhalten des von vorgegebenen Mischzeitpunkts abhängig sind wenn einmal davon ausgegangen wird, daß die Zeitpunkte der Extinktionsmessung selbst automatisiert sind. Auch hierbei muß während der Messung eine vorgegebene Temperatur eingehalten werden, da das Ergebnis temperaturabhängig ist, wenn auch nicht zu befürchten ist, daß sich die Temperatur der Probe während der relativ kurzen Meßdauer ändert. Ein derartiges Verfahren ist beispielsweise in der DE-AS 25 58 536 beschrieben.

Beide bekannten Verfahren weisen damit den Nachteil auf, daß die Bestimmung bei konstanter Temperatur erfolgen muß. Die die größere Meßgenauigkeit ermöglichende Messung der Endkonzentration erfordert zudem einen relativ großen Meßzeitraum.

Zwar kann bei der kinetischen Schnellmethode der Einfluß der Temperatur auf die Meßwerte durch Mitführen eines Standards weitgehend ausgeschaltet werden. Doch sind hierzu weitere Arbeitsschritte erforderlich, die den Arbeitsgang unnötig komplizieren und Ursache für Fehlmessungen sein können. Ferner wird hierdurch für den Standardansatz zusätzliches Reagenz benötigt, wodurch dem Anwender unnötige Kosten entstehen.

Aus der DE-OS 31 17 272 ist ein Photometer bekannt, bei dem aus mehreren in zeitlichem Abstand erhaltenen Extinktionswerten nach einem im voraus festgelegten Beurteilungsnormal das Analysenergebnis ermittelt wird. Es handelt sich dabei um eine Reaktion, welche einen linearen Teil des Verlaufs aufweist, der innerhalb einer Verzögerungsphase und einer Endpunktphase gelegen ist. Bei einer derartigen kinetischen Untersuchung ist es unbedingt notwendig, daß die auszuwertenden Messungen innerhalb des linearen Teils des Reaktionsverlaufs gelegen ist.

Da das Erreichen dieses linearen Teils vom Zeitpunkt des Zumischens der Analysensubstanz und von der Temperatur abhängig ist, wird zum sicheren Auswerten der im linearen Teil gelegenen Meßwerte vorgeschlagen, eine Vielzahl von Messungen vorzunehmen, wobei dann entweder aufgrund statistischer Berechnungen oder nach einem zeitlichen Auswahlkriterium Zurückführung der Meßwerte auf den linearen Reaktionsteil erfolgt. Diese Verarbeitung bedingt aber einen hohen Speicheraufwand, da eine Vielzahl von Meßwerten zwischengespeichert werden müssen.

Demgegenüber liegt der im Anspruch 1 angegebenen Erfindung die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren anzugeben, bei dem bei mindestens gleichbleibender Meßgenauigkeit sogar auf eine Thermostatisierung verzichtet werden kann.

Durch das verwendete lineare Zeitgesetz des Reaktionsverlaufs läßt sich der Endwert aus drei Meßpunkten errechnen, wobei diese Meßpunkte temperatur- und auch im wesentlichen zeitunabhängig gewählt werden können. Das beruht darauf, daß derartige Reaktionen einen stets gleichartigen logarithmischen Verlauf haben, wobei durch drei bekannte Meßwerte der Reaktionsverlauf und damit der Endwert definiert ist.

Wegen der kurzen Meßzeitdauer besteht auch nicht die Gefahr, daß eine Temperaturänderung der Probe während der Messung das Ergebnis beeinträchtigt.

Besonders vorteilhaft bei der erfindungsgemäßen Lösung ist, daß sich die damit verbundenen Maßnahmen in günstiger Weise in ein Mikroprozessor-gesteuertes Kleingerät einbeziehen lassen, welches in miniaturisierter Form aufgebaut sein kann, da großvolumige Bauelemente zur Thermostatisierung der Meßküvette entfallen. Damit kann auch bei einem kleinvolumigen transportablen Gerät eine Meßgenauigkeit erzielt werden, wie sie sonst nur mit stationären Laborgeräten erreichbar war.

Bei einer vorteilhaften Weiterbildung ist eine Bedienerführung vorgesehen, welche dem Benutzer auf einem Display oder dergleichen die zur Bedienung notwendigen Anweisungen gibt, so daß diese zeitgerecht vorgenommen werden können.

Bei dem erfindungsgemäßen Verfahren wird die Messung nach einem Zeitraum, nach dem eine genügende Annäherung an eine Endkonzentration erzielt ist, ersetzt durch eine Anzahl von Messungen im Bereich eines Reaktionsverlaufs mit monoton ansteigender Extinktion nach der Reagenzbeimischung.

Nach dem erfindungsgemäßen Verfahren, bei dem die Endkonzentration aufgrund von drei in vorgegebenem Zeitabstand durchgeführten Extinktionsmessungen errechnet wird, kommt es - im Gegensatz zu den bekannten kinetischen Verfahren - nicht auf eine exakte Einhaltung der Meßzeitpunkte in bezug auf den Reaktionsbeginn - also die Beimischung des Startreagenz - an. Es muß lediglich eine gute Durchmischung von Probe und Reagenz gewährleistet sein, wofür die Einhaltung eines Zeitbereichs ausreichend ist. Dieser Zeitbereich wird bevorzugt dadurch kontrolliert, daß während eines Zeitraums, in dem mittels einer entsprechenden Anzeige zum Einsetzen der Küvette in den Bereich des Lichtstrahls des Photometers aufgefordert wird, ein Kontrollorgan abgefragt wird, welches feststellt, ob die Meßküvette ihren vorgesehenen Platz erreicht hat. Erfolgt innerhalb dieses vorgegebenen Zeitraums kein Einsetzen der Küvette in ihre Meßposition, so wird der Meßvorgang abgebrochen.

Bei einer günstigen Weiterbildung des erfindungsgemäßen Verfahrens wird hierbei der Zeitbereich der Zumischung des Startreagenz auch noch in der Weise kontrolliert, daß hierfür ein Startzeitpunkt vorgegeben wird, der mit einem akustischen Signal gekennzeichnet ist, das auf einen auf dem Display dargestellten Abwärtszähl-Vorgang folgt, so daß damit der zum Zumischen des Startreagenz und zum Durchmischen zur Verfügung stehende Zeitraum durch einfache für die Bedienungsperson leicht verständliche Anweisungen erkennbar ist und die Auswertung der Meßpunkte unter Verhinderung von Fehlbedienungen unter den geforderten Voraussetzungen stattfindet.

Eine Bestimmung des Proben-Leerwerts (Konzentration E₀ ist in die zeitliche Folge der Bedienerführung ebenfalls eingefügt, so daß die genannte Extinktions-Bestimmung erst dann stattfinden kann, wenn die Leerwert-Bestimmung durchgeführt wurde. Bei der praktischen Ausführung wird das dadurch erreicht, daß nach einem Startsignal für den betreffenden Test mit der Analyse begonnen wird, wenn die Erkennung für die Anwesenheit einer Küvette im Photometer angesprochen hat und anschließend auch die Entnahme der Küvette angezeigt hat.

Das erfindungsgemäße Verfahren beruht auf Verwendung eines Analysetests, welcher nach einer sogenannten "Kinetik erster Ordnung" abläuft, "Kinetik erster Ordnung", d. h. die Reaktionsgeschwindigkeit (-dc/dt) der Konzentration c des zu bestimmenden Stoffes proportional ist:

Für die Differentialgleichung 1 läßt sich eine Lösung finden, die bei Anwendung auf photometrische Analysen zweckmäßig wie folgt wiedergegeben wird:

- ln (E_e - E_t) = a · k · t + B (Gl. 2)

Hierbei ist E_e die Extinktion der Endkonzentration und E_t die Extinktion zum Zeitpunkt t.

Bei Auswertung von mindestens drei zu festgelegten Zeitpunken gemessenen Extinktionswerten E_t läßt sich Gleichung 2 auflösen, wobei der voraussichtliche Endwert der Extinktion E_e - und damit die ermittelte Endkonzentration - unabhängig von der Meßdauer wird.

Bei der genannten Auflösung von Gleichung 2 nach E_e fällt das temperaturabhängige Glied k heraus, so daß die Berechnung von E_e unabhängig von der Temperatur ist, so daß eine Thermostatisierung nicht erforderlich ist.

Die praktische Realisierung mit einem derartigen Meßverfahren arbeitenden klinischen Gerätes hängt davon ab, daß die korrekte Bedienfolge innerhalb vorgegebener Zeitgrenzen kontrolliert wird und somit die durch die kurze Meßzeitdauer erforderliche höhere Präzisierung des Zeitpunktes der Reagenzzugabe eingehalten wird.

Die genannte Ermittlung der Endkonzentration der sich einstellenden Extinktion kann in der genannten Weise vorgenommen werden, wobei die Art der praktischen Berechnung nicht Gegenstand der Erfindung ist und entweder durch Approximationsverfahren oder aber durch das Aufsuchen von tabellarisch innerhalb ROMs abgespeicherten Funktionswerten ausgeführt werden kann.

Die Berechnung der Glukose-Konzentration erfolgt in der Weise, daß der berechnete Endwert der Extinktion (Endkonzentration E_e) mit einem Faktor multipliziert wird. Hierbei hat sich gezeigt, daß bei bestimmten Tests der für Serum ermittelte Faktor nicht für hämolisiertes Blut zu verwenden ist, sondern daß für dieses Material verschiedene vom Hämoglobin-Gehalt abhängige Berechnungsfaktoren erforderlich sind.

Bei einer anderen bevorzugten Weiterbildung der Erfindung wird die Untersuchung von Blut, Serum oder Plasma dadurch automatisiert nebeneinander vorgenommen, daß vor Beginn der Messung die Extinktion der Analysenflüssigkeit ermittelt wird, wobei je nach dem gefundenen Wert auf Serum oder hämolisiertes Blut geschlossen wird. Anschließend wird der Hämoglobingehalt bestimmt und es erfolgt die Auswertung nach dem entsprechenden Verfahren. Damit läßt sich in günstiger Weise eine zusätzliche Automatisierung des Meßvorgangs erzielen, so daß die an die Bedienungsperson zu stellenden Anforderungen weiter verringert sind.

Vorteilhafte Weiterbildungen der Erfindung sind in den Unteransprüchen gekennzeichnet bzw. werden nachstehend zusammen mit der Beschreibung einer bevorzugten Ausführung der Erfindung näher dargestellt. Es zeigt

Fig. 1 ein Blockschaltbild, aus dem die zeitliche Steuerung eines Ausführungsbeispiels der Erfindung einschließlich der Steuerung der funktionalen Auswertung der Meßergebnisse hervorgeht, und

Fig. 2 ein graphisches Diagramm mit dem zeitlichen Verlauf der Extinktion in Abhängigkeit von der Zeit am Beispiel der Glukosebestimmung.

Das Schaltbild gemäß Fig. 1 ist entsprechend dem zeitlichen Ablauf der Steuerung des erfindungsgemäßen Photometers am Beispiel der Glukosebestimmung aufgebaut. Die horizontal angeordneten Blöcke geben die Steuervorgänge in chronologischer Folge von links nach rechts wieder, wobei jeweils ein in den Block hineinführendes Eingangssignal die betreffende Funktion auslöst und nach Ausführung am Ausang ein logisches Signal abgibt, welches weitere externe Vorgänge initiiert und den nachfolgenden Block aktiviert. Dabei wird vorausgesetzt, daß die Aktivierung eines nachfolgenden Funktionsblocks den vorangehenden ausschaltet, so daß in der Kette jeweils nur eine Funktionsstufe aktiv ist. (Die dabei an sich erforderlichen "Rücksetz"- Leitungen sind aus Gründen der Übersichtlichkeit weggelassen worden.)

Die praktische Ausführung des Gerätes läßt sich - entsprechend dem dargestellten Schema - in vorteilhafter Weise sowohl durch diskrete Logikschaltungen als auch in programmierter Logik realisieren.

Nach dem Einschalten des Gerätes, welches für Batterie- und Netzbereich geeignet ist, erfolgt eine Eigenkontrolle (Self-Check), die nach positivem Ergebnis zum Aufleuchten der Betriebsanzeige führt. Der Selbsttestbaustein ist mit 0 bezeichnet, während die Betriebsanzeige mit dem Bezugszeichen 01 versehen ist. In diesem Zustand verharrt das Gerät, bis durch die Auswahl einer Tastenbetätigung über das Tastenfeld 02 signalisiert wird, welcher Test auszuführen ist. Durch Betätigen der dem Glukosetest zugeordneten Taste wird das über ein ODER-Gatter 03 von dem Block 0 einem UND-Gatter 04 zugeführte Signal mit dem Ausgangssignal des Tastenfeldes 02 für den Glukosetest-Betrieb verknüpft, woraufhin der Block 1 aktiviert wird, welcher die zur Durchführung dieses Tests notwendigen Schaltvorgänge auslöst. Falls eine andere Taste betätigt worden sein sollte, kann mit entsprechenden Verknüpfungen in weitere Betriebsfolgen eingetreten werden, welche der in Fig. 4 dargestellten entspricht bzw. um einzelne Betriebsvorgänge verkürzt sein kann, so daß ein vereinfachter Ablauf erfolgt. Bei den verkürzten Meßvorgängen handelt es sich bevorzugt um den Erythrocyten-Test oder um den Hämoglobintest, bei dem weder eine Leerwertmessung notwendig ist noch eine kinetische Messung. Hierbei wird auf das Einsetzen der die Analysenflüssigkeit enthaltenden Substanz nach Ausführung des Mischungsvorganges eine Endkonzentrationsmessung vorgenommen und der betreffende Wert angezeigt. Nach dem Ende des Meßvorgangs wird wieder zurück in das ODER-Gatter 03 verzweigt, wie es für den Glukosetest ebenfalls durch die zweite in das ODER-Gatter 03 führende Leitung angedeutet ist. Die Ausführung dieser Tests wird anhand des nachfolgend beschriebenen Glukose-Testablaufs verständlich, wenn die genannten Vereinfachungen berücksichtigt werden.

Nachdem vom Ausgangsignal des UND-Gatters 04 der Glukosebetrieb (Block 1) eingeleitet wurde, erscheint an diesem Block ein Ausgangsignal. Das Ausgangsignal gelangt zu einem Blinkgeber 11, welcher die Leerwert-Anzeige 12 intermittierend aufleuchten läßt.

Wird in die Küvettenaufnahme 13 eine Meßküvette eingesteckt, die die Analysenflüssigkeit (Blut oder Serum bzw. Plasma) enthält, so wird über einen Mikroschalter (bzw. eine entsprechende Lichtschranke) 14 ein diesen Betriebszustand angebendes logisches Signal an eine Auswertungsschaltung 15 übermittelt. Mit dem Ausgangsignal des Blocks 1 zusammen wird das Ausgangssignal einer Auswerteschaltung 15 für die Küvettensteuerung Block 2 einem UND- Gatter 10 zugeführt, dessen daraufhin erscheinendes Ausgangssignal die bei eingesetzter Leerwert-Küvette ablaufenden Betriebsvorgänge einleitet. Dabei wird einerseits über ein ODER-Gatter 21 die Photometer-Meßschaltung 22 aktiviert, wobei über eine Adressierschaltung 23 ein veränderbarer Speicherbereich RAM 24 adressiert wird, so daß der von der Photometer-Meßeinrichtung 22 erhaltene Extinktionswert in einem zugeordneten Speicherplatz des RAMs 24 abgelegt wird.

Dieser im RAM-Speicher abgelegte Leerwert kennzeichnet die Art der Probe, so daß bei der nachfolgenden Auswertung nach Zugabe des Startreagenz die Auswertung entsprechend vorgenommen werden kann. Dabei werden nach entsprechender Klassierung in mehreren innerhalb vorgegebener Grenzwerte gelegene Extinktionsbereiche einer Serum- und Blut verschiedener Hämoglobinkonzentrationen zugeordnet, woraufhin die Auswertung dem entsprechenden Ausgangswert angepaßt werden und somit mit einer entsprechend erhöhten Bereichsgenauigkeit vorgenommen werden kann.

Nach ausgeführtem Leerwert-Test blinkt die Glukose-Anzeige 18, ausgelöst über ein ODER-Gatter 25, einen Blinkgeber 26 und ein weiteres ODER-Gatter 27. Inzwischen können die Vorbereitungen für den nachfolgenden Glukose-Test getroffen werden. Die Leerwert-Küvette wird nach abgeschlossenen Vorbereitungen entnommen, was zu einem entsprechenden Ausgangssignal der Schaltung 15 führt, wobei die Invertierung des die Anwesenheit der Küvette anzeigenden Signals entsprechend der gegenteiligen Aussage zugeordnet ist. Das dem invertierenden Eingang eines UND-Gatters 29 zugeleitete Ausgangssignal der Schaltung 15 und das Ausgangssignal des Blocks 2 führen nach entsprechender Verknüpfung zu einem Ausgangsignal des UND-Gatters 29, woraufhin der Block 3 aktiviert wird, der der Funktion "Leerwert-Küvette entnommen" zugeordnet ist. Dessen Ausgangssignal bewirkt über das ODER-Gatter 25, daß die Glukose-Anzeige 18 mit dem Blinken fortfährt, wodurch dem Bediener signalisiert wird, daß der Glukosetest eingeleitet ist und eine entsprechende Bedienung erforderlich ist.

Wird jetzt die der Glukose-Messung zugeordnete Taste betätigt, so gelangt ein entsprechendes Ausgangssignal (verknüpft mit dem Ausgangsignal des Blocks 3 über ein UND-Gatter 30) zum Block 4. Gleichzeitig wird über das ODER-Gatter 27 die Glukose-Anzeige auf Dauerlicht geschaltet. Durch den Block 4 wird ein Zähler 41 aktiviert, welcher auf einem Display 42, ausgelöst durch den Block 2, während der Ausführung des Leerwert-Tests die Anzeige "0" hervorruft.

Diese Anzeige wird durch eine Zahlenanzeige ersetzt, welche beginnend von einem Ausgangswert bis zur Anzeige 0 rückwärts zählt und ein "Countdown-Signal" bildet. Während dieser Zeit ist die Bedienungsperson aufgefordert, die Reagenz zu der Analysensubstanz hinzuzufügen, wobei dieses Hinzufügen möglichst exakt während des Zeitpunkts "0" erfolgen soll, der zusätzlich durch ein von einem Signalgeber 45 abgegebenes akustisches Signal gekennzeichnet ist. Nach dem Durchlaufen des Nullpunktes zählt dieser Zähler fortgesetzt weiter, bis eine Anzeige von "25" erreicht ist, welche bei Weiterschaltung im Sekundentakt derzeit von 25 s entspricht. Während dieser Zeit wird von dem Aufwärtszähler 41 ein Ausgangssignal abgegeben, welches einem nachfolgenden ODER-Gatter 43 zugeführt wird, welches eine positive Verknüpfung mit dem Ausgangssignal der Schaltung 15 erzeugt, so daß beim Einfügen der Küvette innerhalb der Zeit von 25 s der nachfolgende Block angesteuert wird. Ist das nicht der Fall, d. h. erfolgt von dem Zähler 41 ein Ausgangsignal, das derzeit 25 zugeordnet ist bei nicht eingesetzter Küvette, so wird durch eine entsprechende Signalverknüpfung (invertierter Eingang eines weiteren ODER-Gatters 44) der Meßvorgang abgebrochen und über das ODER-Gatter 03 ein Rücksprung in den Anfangszustand nach Einschalten des Gerätes erzeugt.

(Bei einer bevorzugten anderen Ausführung kann der Rücksprung bei abgebrochener oder erfolgter Glukose-Messung auch in eine nach dem Block 1 vorzusehende ODER-Verknüpfung erfolgen, wobei dann der zuvor ausgeführte Test vorgewählt bleibt und entsprechend durch die weiteren Tasten durch eine geeignete Verknüpfung noch ein Wechsel des Betriebs möglich ist.)

Bei korrekt eingefügter Meßküvette wird durch die Meßwertsteuerung (Block 6) in vorgegebenen Zeitabständen über das ODER-Gatter 21 die Photometer-Meßschaltung 22 aktiviert, wobei die Meßwertschaltung jeweils für jede der drei Messungen ein Ausgangssignal weiterschaltet, welches dem Adressierer 23 zugeleitet wird, der seinerseits im RAM- Speicher 24 jeweils einen Speicherplatz adressiert, in dem der ermittelte Extinktionsmeßwert abgelegt wird.

Nach Beendigung der Messung (Aufnahme von drei Meßwerten) wird durch die Meßwert-Steuerung eine Auswertungsschaltung 61 aktiviert, welche aufgrund der in dem RAM-Speicher 24 enthaltenen Meßwerte die Ergebnisermittlung durchführt. Diese Ergebnisermittlung ergibt den vorausberechneten Extinktions- Endwert wieder, wobei aufgrund der im Anfangsbereich ermittelten drei Meßpunkte bei einem hier vorausgesetzten Verlauf mit einer Kinetik erster Ordnung über die integrierte Form der Differentialgleichung das Endergebnis ermittelt und als Zahlenwert der Glukose-Konzentration im Display 42 dargestellt wird. Der Block 7 wird beim Vorliegen des Ergebnisses aktiviert und gestattet über ein UND-Gatter 71 das Übertragen der Ergebnisanzeige in das Display. Wird jetzt die Meßwert-Küvette entnomen, führt ein entsprechendes Ausgangssignal der Küvetten-Auswertungsschaltung 15 über dem invertierenden Eingang eines UND-Gatters 72 zurück zum ODER-Gatter 03 und bewirkt den Übergang in den Zustand der Meßbereitschaft für einen nachfolgenden Meßvorgang.

In Fig. 2 ist die Extinktion in Abhängigkeit von der Zeit dargestellt. Es ist ersichtlich, daß über drei zu Meßzeitpunkten T₁ bis T₃ ausgenommene Extinktionswerte E₁ bis E₃ und entsprechender mathematischer Berechnung bzw. tabellarische Funktionsermittlung auf den Endwert E_e geschlossen werden kann, wenn die Reaktion in der vorausgesetzten Weise abläuft. Der entsprechende funktionale Zusammenhang ist für verschiedene Anfangs-Extinktionsbereiche abgespeichert, so daß die notwendige Genauigkeit bei der Auswertung erzielbar ist.

Der Ausgangspunkt T_A für den Anstieg der Extinktionskurve ist zeitlich unscharf, da er von der Reagenzien-Zugabe und dem Vorgang des Zumischens bestimmt wird. Diese Unschärfe ist durch den Bereich zwischen T_A und T_A angedeutet, wobei es sich überraschenderweise herausgestellt hat, daß das Meßergebnis auch dann noch mit der genügenden Genauigkeit erzielt wird, wenn die Zugabe in Verbindung mit der beschriebenen Signalwiedergabe zur Bedienerführung erfolgt, so daß der Zeitpunkt T_A eingehalten werden kann.

Die Erfindung beschränkt sich in ihrer Ausführung nicht auf die Benutzung diskreter logischer Baugruppen, sondern läßt sich vorteilhaft auch mit programmierter Logik - insbesondere unter Verwendung eines Mikroprozessors - realisieren.

Claims (8)

1. Verfahren zur photometrischen Bestimmung der Konzentration einer Substanz im Rahmen einer klinisch-chemischen Analyse, insbesondere zur kinetischen Bestimmung der Glucosekonzentration in Serum, Plasma oder hämolisiertem Blut, über die Ermittlung der sich bei einer Testreaktion einstellende Endkonzentration aufgrund eines vorbekannten funktionalen Typs des Reaktionsverlaufs mit monotoner Extinktionsänderung, bei dem die aktuelle Reaktionsgeschwindigkeit jeweils der Konzentration des zu bestimmenden Stoffes proportional ist, und in vorgegebenem zeitlichen Abstand ausgeführten Extinktionsmessungen, gekennzeichnet durch die Bestimmung der Endkonzentration durch Auswertung der Lösung der zugehörigen Differentialgleichung -ln (E_e - E_t) = a · k · t + Bbei der
E_t die aufgenommenen Extinktionswerte in Abhängigkeit von der Zeit t,
E_e die zu ermittelnde Endkonzentration,
k eine zu eliminierende temperaturabhängige Konstante
sowie a und B weitere Konstanten bilden,
unter Benutzung von zu drei verschiedenen Meßzeitpunkten aufgenommenen und festgehaltenen Extinktionswerten.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Auswertung in Abhängigkeit von einer photometrisch vorgenommenen Unterscheidung zwischen Serum und hämolysiertem Blut bzw. einer Bewertung der Hämoglobinkonzentration erfolgt.

3. Verfahren nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Auswertung mittels einer Anzahl von tabellarisch abgespeicherten Werten erfolgt.

4. Verfahren nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die erste Messung innnerhalb eines vorgegebenen Zeitabstands nach Zumischen des Reagenz ausgeführt wird.

5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß der Beginn des Zeitabstands festgelegt wird durch das Erfassen des Einführens einer die Probe samt Reagenz enthaltenden Küvette in das Photometer.

6. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß der Beginn des Zeitabstands festgelegt wird durch die Zuordnung zu einem abgegebenen akustischen und/oder optischen Signal.

7. Verfahren nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß der späteste Beginn des Zeitabstands festgelegt ist durch einen auf ein akustisches Signal folgenden Zeitraum.

8. Verfahren nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß das akustische und/oder optische Signal erscheint bei Nullanzeige eines Rückwärtszählers, der mit einem vorgegebenen Zahlenwert gestartet wird und in äquidistanten Zeitschritten zählt.