JPH06249856A - 生化学自動分析装置における測定方法 - Google Patents
生化学自動分析装置における測定方法Info
- Publication number
- JPH06249856A JPH06249856A JP6285093A JP6285093A JPH06249856A JP H06249856 A JPH06249856 A JP H06249856A JP 6285093 A JP6285093 A JP 6285093A JP 6285093 A JP6285093 A JP 6285093A JP H06249856 A JPH06249856 A JP H06249856A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- absorbance
- concentration
- reaction time
- sample
- rate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N35/00—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor
- G01N35/00584—Control arrangements for automatic analysers
- G01N35/00594—Quality control, including calibration or testing of components of the analyser
- G01N35/00603—Reinspection of samples
Landscapes
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Quality & Reliability (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 再検査を減らして検査を迅速化し、試料や試
薬の無駄を省き、自動分析装置の実処理能力の低下を防
止する。 【構成】 吸光度変化（率）から試料の被検成分の濃度
を再現性よく求めることのできる吸光度範囲の限界吸光
度を定めておき、濃度の異なる複数種の標準試料を用い
て反応過程にある被検液の吸光度変化率を複数の時刻で
測定し、各標準試料の吸光度で限界吸光度を満足するも
のについて予め定めた複数の反応時間の時刻ごとに吸光
度変化（率）を濃度に変換する濃度変換係数を求め、未
知試料の被検液の吸光度変化（率）を反応過程の複数の
時刻で測定し、予め定めた複数の反応時刻について反応
時間の長いものから短いものへとそれぞれの反応時刻に
おける吸光度を限界吸光度とを比較し、限界吸光度を満
足する反応時刻とそのときの吸光度変化（率）を採用
し、その採用した反応時刻における濃度変換係数及び試
薬ブランク値を用いて被検成分濃度を求める。
薬の無駄を省き、自動分析装置の実処理能力の低下を防
止する。 【構成】 吸光度変化（率）から試料の被検成分の濃度
を再現性よく求めることのできる吸光度範囲の限界吸光
度を定めておき、濃度の異なる複数種の標準試料を用い
て反応過程にある被検液の吸光度変化率を複数の時刻で
測定し、各標準試料の吸光度で限界吸光度を満足するも
のについて予め定めた複数の反応時間の時刻ごとに吸光
度変化（率）を濃度に変換する濃度変換係数を求め、未
知試料の被検液の吸光度変化（率）を反応過程の複数の
時刻で測定し、予め定めた複数の反応時刻について反応
時間の長いものから短いものへとそれぞれの反応時刻に
おける吸光度を限界吸光度とを比較し、限界吸光度を満
足する反応時刻とそのときの吸光度変化（率）を採用
し、その採用した反応時刻における濃度変換係数及び試
薬ブランク値を用いて被検成分濃度を求める。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は血清、血漿、尿などの生
体液試料を分析する生化学自動分析装置において、吸光
度測定値から試料の被検成分濃度を求める方法に関する
ものである。
体液試料を分析する生化学自動分析装置において、吸光
度測定値から試料の被検成分濃度を求める方法に関する
ものである。
【０００２】
【従来の技術】一般に試料中の被検成分が高濃度になる
と、反応の進行とともに吸光度の反応タイムコースは直
線的な吸光度変化を示さず、検量線は非直線的な関係と
なる。そこで、被検成分が高濃度な試料では、次のよう
な方法で対処している。 （１）試料が高濃度であることを予測して、広い濃度範
囲をカバーできるような分析条件、例えば試料量（Ｓ）
／試薬量（Ｒ）比を小さくしておく。
と、反応の進行とともに吸光度の反応タイムコースは直
線的な吸光度変化を示さず、検量線は非直線的な関係と
なる。そこで、被検成分が高濃度な試料では、次のよう
な方法で対処している。 （１）試料が高濃度であることを予測して、広い濃度範
囲をカバーできるような分析条件、例えば試料量（Ｓ）
／試薬量（Ｒ）比を小さくしておく。
【０００３】（２）一度測定した後、その試料が高濃度
であることが分かれば試料を希釈して再検査する。 （３）再検査の際、初回よりも少ない試料量で再検査す
る。 （４）レート法（カイネティック・アッセイ）の場合、
反応タイムコースが直線的な吸光度変化を示す吸光度範
囲（限界吸光度ＡＬ）を定めておき、ＡＬを満足する吸
光度測定値から単位時間当りの吸光度変化率（Ａｂｓ／
分）を求め、定量している。
であることが分かれば試料を希釈して再検査する。 （３）再検査の際、初回よりも少ない試料量で再検査す
る。 （４）レート法（カイネティック・アッセイ）の場合、
反応タイムコースが直線的な吸光度変化を示す吸光度範
囲（限界吸光度ＡＬ）を定めておき、ＡＬを満足する吸
光度測定値から単位時間当りの吸光度変化率（Ａｂｓ／
分）を求め、定量している。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】上記の（１）の方法で
は測定可能な濃度範囲は基本的にＳ／Ｒ比で決まるた
め、高濃度な試料まで測定できるようにすることを優先
させることによって低濃度域での再現性不良を招いてい
た。
は測定可能な濃度範囲は基本的にＳ／Ｒ比で決まるた
め、高濃度な試料まで測定できるようにすることを優先
させることによって低濃度域での再現性不良を招いてい
た。
【０００５】（２）と（３）の方法は、再検査を行なう
ため迅速性に欠ける。試料及び分析試薬を余分に必要と
する。さらに、生化学自動分析装置の実処理能力の低下
を招いていた。（４）の方法は、反応タイムコースが直
線的な吸光度変化を示す酵素活性測定にしか適用するこ
とができず、臨床的に重要な項目であるグルコース、ク
レアチニン、尿素窒素などの測定には適用することがで
きない。
ため迅速性に欠ける。試料及び分析試薬を余分に必要と
する。さらに、生化学自動分析装置の実処理能力の低下
を招いていた。（４）の方法は、反応タイムコースが直
線的な吸光度変化を示す酵素活性測定にしか適用するこ
とができず、臨床的に重要な項目であるグルコース、ク
レアチニン、尿素窒素などの測定には適用することがで
きない。
【０００６】本発明は再検査を減らして検査を迅速化
し、試料や試薬の無駄を省き、自動分析装置の処理能力
を上げることを目的とするものである。本発明はまた測
定濃度範囲を広げることも目的とするものである。
し、試料や試薬の無駄を省き、自動分析装置の処理能力
を上げることを目的とするものである。本発明はまた測
定濃度範囲を広げることも目的とするものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】エンドポイント法による
被検液の吸光度、又はレート法における被検液の吸光度
変化率から被検成分濃度を求めるための濃度変換係数
は、従来は１種類しか用意されていないのに対し、本発
明では予め設定された複数の測定時刻ごとに濃度変換係
数を用意しておく。そして未知試料の測定では、反応過
程にある被検液を複数の時刻で測定し、得られた吸光度
測定値を限界吸光度と比較し、限界吸光度を満たす吸光
度測定値のうちで最も反応時間の長い測定時刻での吸光
度又は吸光度変化率を採用し、その測定時刻に対応する
濃度変換係数及び試薬ブランク値を適用して被検成分濃
度を求める。
被検液の吸光度、又はレート法における被検液の吸光度
変化率から被検成分濃度を求めるための濃度変換係数
は、従来は１種類しか用意されていないのに対し、本発
明では予め設定された複数の測定時刻ごとに濃度変換係
数を用意しておく。そして未知試料の測定では、反応過
程にある被検液を複数の時刻で測定し、得られた吸光度
測定値を限界吸光度と比較し、限界吸光度を満たす吸光
度測定値のうちで最も反応時間の長い測定時刻での吸光
度又は吸光度変化率を採用し、その測定時刻に対応する
濃度変換係数及び試薬ブランク値を適用して被検成分濃
度を求める。
【０００８】本発明をエンドポイント法に適用するとき
は、次のステップ（Ａ）から（Ｄ）を含んでいる。
（Ａ）吸光度から試料の被検成分の濃度を再現性よく求
めることのできる吸光度範囲の限界吸光度を定めておく
こと、（Ｂ）濃度の異なる複数種の標準試料を用いて反
応過程にある被検液の吸光度を複数の時刻で測定し、各
標準試料の吸光度で前記限界吸光度を満足するものにつ
いて予め定めた複数の反応時間の時刻ごとに吸光度を濃
度に変換する第１の濃度変換係数を求めること、（Ｃ）
未知試料の被検液の吸光度を反応過程の複数の時刻で測
定し、予め定めた前記複数の反応時刻について反応時間
の長いものから短いものへとそれぞれの反応時刻におけ
る吸光度を前記限界吸光度とを比較して前記限界吸光度
を満足する反応時刻とそのときの吸光度を採用するこ
と、及び（Ｄ）その採用した反応時刻における第１の濃
度変換係数及び試薬ブランク値を用いて被検成分濃度を
求めること。
は、次のステップ（Ａ）から（Ｄ）を含んでいる。
（Ａ）吸光度から試料の被検成分の濃度を再現性よく求
めることのできる吸光度範囲の限界吸光度を定めておく
こと、（Ｂ）濃度の異なる複数種の標準試料を用いて反
応過程にある被検液の吸光度を複数の時刻で測定し、各
標準試料の吸光度で前記限界吸光度を満足するものにつ
いて予め定めた複数の反応時間の時刻ごとに吸光度を濃
度に変換する第１の濃度変換係数を求めること、（Ｃ）
未知試料の被検液の吸光度を反応過程の複数の時刻で測
定し、予め定めた前記複数の反応時刻について反応時間
の長いものから短いものへとそれぞれの反応時刻におけ
る吸光度を前記限界吸光度とを比較して前記限界吸光度
を満足する反応時刻とそのときの吸光度を採用するこ
と、及び（Ｄ）その採用した反応時刻における第１の濃
度変換係数及び試薬ブランク値を用いて被検成分濃度を
求めること。
【０００９】本発明をレート法に適用するときは、次の
ステップ（ａ）から（ｄ）を含んでいる。（ａ）吸光度
変化率から試料の被検成分の濃度を再現性よく求めるこ
とのできる吸光度範囲の限界吸光度を定めておくこと、
（ｂ）濃度の異なる複数種の標準試料を用いて反応過程
にある被検液の吸光度変化率を複数の時刻で測定し、各
標準試料の吸光度で前記限界吸光度を満足するものにつ
いて予め定めた複数の反応時間の時刻ごとに吸光度変化
率を濃度に変換する第２の濃度変換係数を求めること、
（ｃ）未知試料の被検液の吸光度変化率を反応過程の複
数の時刻で測定し、予め定めた前記複数の反応時刻につ
いて反応時間の長いものから短いものへとそれぞれの反
応時刻における吸光度を前記限界吸光度とを比較して前
記限界吸光度を満足する反応時刻とそのときの吸光度変
化率を採用すること、及び（ｄ）その採用した反応時刻
における第２の濃度変換係数及び試薬ブランク値を用い
て被検成分濃度を求めること。
ステップ（ａ）から（ｄ）を含んでいる。（ａ）吸光度
変化率から試料の被検成分の濃度を再現性よく求めるこ
とのできる吸光度範囲の限界吸光度を定めておくこと、
（ｂ）濃度の異なる複数種の標準試料を用いて反応過程
にある被検液の吸光度変化率を複数の時刻で測定し、各
標準試料の吸光度で前記限界吸光度を満足するものにつ
いて予め定めた複数の反応時間の時刻ごとに吸光度変化
率を濃度に変換する第２の濃度変換係数を求めること、
（ｃ）未知試料の被検液の吸光度変化率を反応過程の複
数の時刻で測定し、予め定めた前記複数の反応時刻につ
いて反応時間の長いものから短いものへとそれぞれの反
応時刻における吸光度を前記限界吸光度とを比較して前
記限界吸光度を満足する反応時刻とそのときの吸光度変
化率を採用すること、及び（ｄ）その採用した反応時刻
における第２の濃度変換係数及び試薬ブランク値を用い
て被検成分濃度を求めること。
【００１０】
【作用】図１を参照し、試料と試薬を反応させることに
よって吸光度が上昇する反応の場合について、レート法
を例にして説明する。濃度の異なる複数種の標準試料を
用い、あらかじめ設定した複数の測定時刻（測定区間
Ｉ，II，III）ごとの濃度変換係数Ｋ1，Ｋ2，Ｋ3と試薬
ブランク値変化ΔＡｂ1，ΔＡｂ2，ΔＡｂ3を求めてお
く（ステップＳ１）。測定区間Ｉは反応開始直後の時刻
ｔ1からｔｍまでの区間、測定区間IIは反応開始直後の
時刻ｔ1からｔｎまでの区間、測定区間IIIは反応開始直
後の時刻ｔ1から最終測定時刻ｔｅまでの区間（ｔｍ＜
ｔｎ＜ｔｅ）である。
よって吸光度が上昇する反応の場合について、レート法
を例にして説明する。濃度の異なる複数種の標準試料を
用い、あらかじめ設定した複数の測定時刻（測定区間
Ｉ，II，III）ごとの濃度変換係数Ｋ1，Ｋ2，Ｋ3と試薬
ブランク値変化ΔＡｂ1，ΔＡｂ2，ΔＡｂ3を求めてお
く（ステップＳ１）。測定区間Ｉは反応開始直後の時刻
ｔ1からｔｍまでの区間、測定区間IIは反応開始直後の
時刻ｔ1からｔｎまでの区間、測定区間IIIは反応開始直
後の時刻ｔ1から最終測定時刻ｔｅまでの区間（ｔｍ＜
ｔｎ＜ｔｅ）である。
【００１１】未知試料の測定において、ｔ1〜ｔｅ間の
異なる複数の時刻で吸光度を測定して測定データとして
取り込み記憶させる（ステップＳ２）。記憶されたデー
タについて、最終の吸光度Ａｅを限界吸光度ＡＬと比較
し、Ａｅ＜ＡＬであれば、反応時間ｔ1からｔｅまでの
最も長い反応時間の区間IIIでの吸光度変化率（ΔＡ／
Δｔ）3を最小二乗法により計算する（ステップＳ
４）。その吸光度変化率と区間ｔ1〜ｔｅにおける試薬
ブランク値変化ΔＡｂ3とから濃度変換係数Ｋ3を用いて
濃度が算出され、出力される（ステップＳ５）。
異なる複数の時刻で吸光度を測定して測定データとして
取り込み記憶させる（ステップＳ２）。記憶されたデー
タについて、最終の吸光度Ａｅを限界吸光度ＡＬと比較
し、Ａｅ＜ＡＬであれば、反応時間ｔ1からｔｅまでの
最も長い反応時間の区間IIIでの吸光度変化率（ΔＡ／
Δｔ）3を最小二乗法により計算する（ステップＳ
４）。その吸光度変化率と区間ｔ1〜ｔｅにおける試薬
ブランク値変化ΔＡｂ3とから濃度変換係数Ｋ3を用いて
濃度が算出され、出力される（ステップＳ５）。
【００１２】最終吸光度ＡｅがＡＬ以上であるときは、
それより反応時間の短い予め定められた反応時刻ｔｎに
おける吸光度Ａｎが限界吸光度ＡＬと比較され（ステッ
プＳ３，Ｓ６）、Ａｎ＜ＡＬであればそのｔ1〜ｔｎの
区間IIにおける吸光度変化率（ΔＡ／Δｔ）2が算出さ
れる（ステップＳ７）。得られた吸光度変化率（ΔＡ／
Δｔ）2と、ｔ1〜ｔｎの区間IIにおける濃度変換係数Ｋ
2及び試薬ブランク値変化ΔＡｂ2を用いて濃度が算出さ
れ、出力される（ステップＳ５）。
それより反応時間の短い予め定められた反応時刻ｔｎに
おける吸光度Ａｎが限界吸光度ＡＬと比較され（ステッ
プＳ３，Ｓ６）、Ａｎ＜ＡＬであればそのｔ1〜ｔｎの
区間IIにおける吸光度変化率（ΔＡ／Δｔ）2が算出さ
れる（ステップＳ７）。得られた吸光度変化率（ΔＡ／
Δｔ）2と、ｔ1〜ｔｎの区間IIにおける濃度変換係数Ｋ
2及び試薬ブランク値変化ΔＡｂ2を用いて濃度が算出さ
れ、出力される（ステップＳ５）。
【００１３】さらに、ＡｎがＡＬ以上であれば、それよ
りも反応時間の短い予め定められた反応時刻ｔｍにおけ
る吸光度Ａｍが限界吸光度ＡＬと比較され（ステップＳ
６，Ｓ８）、Ａｍ＜ＡＬであればそのｔ1〜ｔｍの区間
Ｉにおける吸光度変化率（ΔＡ／Δｔ）1が算出される
（ステップＳ９）。得られた吸光度変化率（ΔＡ／Δ
ｔ）1と、ｔ1〜ｔｍの区間Ｉにおける濃度変換係数Ｋ1
及び試薬ブランク値変化ΔＡｂ1を用いて濃度が算出さ
れ、出力される（ステップＳ５）。
りも反応時間の短い予め定められた反応時刻ｔｍにおけ
る吸光度Ａｍが限界吸光度ＡＬと比較され（ステップＳ
６，Ｓ８）、Ａｍ＜ＡＬであればそのｔ1〜ｔｍの区間
Ｉにおける吸光度変化率（ΔＡ／Δｔ）1が算出される
（ステップＳ９）。得られた吸光度変化率（ΔＡ／Δ
ｔ）1と、ｔ1〜ｔｍの区間Ｉにおける濃度変換係数Ｋ1
及び試薬ブランク値変化ΔＡｂ1を用いて濃度が算出さ
れ、出力される（ステップＳ５）。
【００１４】図１では試料と試薬を反応させることによ
って吸光度が上昇する反応の場合について説明している
が、反応が進むにつれて吸光度が下降する場合もある。
吸光度下降反応では、図１のステップＳ３，Ｓ６，Ｓ８
における不等号は逆方向となる。また、ステップＳ３，
Ｓ６，Ｓ８では共通の限界吸光度ＡＬを用いているが、
それぞれの測定時刻ｔｍ，ｔｎ，ｔｅで異なる限界吸光
度を設定しておいてもよい。
って吸光度が上昇する反応の場合について説明している
が、反応が進むにつれて吸光度が下降する場合もある。
吸光度下降反応では、図１のステップＳ３，Ｓ６，Ｓ８
における不等号は逆方向となる。また、ステップＳ３，
Ｓ６，Ｓ８では共通の限界吸光度ＡＬを用いているが、
それぞれの測定時刻ｔｍ，ｔｎ，ｔｅで異なる限界吸光
度を設定しておいてもよい。
【００１５】また、吸光度変化率はｔ1から始まる測定
区間での勾配として計算しているが、特定の時間ｔｉ〜
ｔｊについて勾配を求め、それぞれの区間ごとに濃度変
換係数と試薬ブランク値変化を求めておいてもよい。図
１はレート法の説明であるが、これをエンドポイント法
に適用するときは、吸光度変化率（ΔＡ／Δｔ）に代え
て特定の時刻での吸光度Ａｅ，Ａｎ又はＡｍを用い、試
薬ブランク値変化ΔＡｂを試薬ブランク値Ａｂに置き換
えればよい。
区間での勾配として計算しているが、特定の時間ｔｉ〜
ｔｊについて勾配を求め、それぞれの区間ごとに濃度変
換係数と試薬ブランク値変化を求めておいてもよい。図
１はレート法の説明であるが、これをエンドポイント法
に適用するときは、吸光度変化率（ΔＡ／Δｔ）に代え
て特定の時刻での吸光度Ａｅ，Ａｎ又はＡｍを用い、試
薬ブランク値変化ΔＡｂを試薬ブランク値Ａｂに置き換
えればよい。
【００１６】２種類の分析試薬を使用して第２試薬添加
前に試料ブランク値を測定する場合は、次の式により試
料ブランク値（Ａｓｂ）を算出して限界吸光度ＡＬを修
正するようにしてもよい。 Ａｓｂ＝(Ａｓ1−Ａｂ1)(Ｖｓ＋Ｖｒ1)／(Ｖｓ＋Ｖｒ1
＋Ｖｒ2) ＡＬ’＝ＡＬ＋Ａｓｂ ここで、Ａｓ1とＡｂ1はそれぞれ第２試薬添加前の（試
料＋第１試薬）液及び試薬ブランク液の吸光度、Ｖｓ，
Ｖｒ1，Ｖｒ2はそれぞれ試料、第１試薬、第２試薬の液
量である。
前に試料ブランク値を測定する場合は、次の式により試
料ブランク値（Ａｓｂ）を算出して限界吸光度ＡＬを修
正するようにしてもよい。 Ａｓｂ＝(Ａｓ1−Ａｂ1)(Ｖｓ＋Ｖｒ1)／(Ｖｓ＋Ｖｒ1
＋Ｖｒ2) ＡＬ’＝ＡＬ＋Ａｓｂ ここで、Ａｓ1とＡｂ1はそれぞれ第２試薬添加前の（試
料＋第１試薬）液及び試薬ブランク液の吸光度、Ｖｓ，
Ｖｒ1，Ｖｒ2はそれぞれ試料、第１試薬、第２試薬の液
量である。
【００１７】
【実施例】一例としてクレアチニンを測定した例を説明
する。クレアチニンの反応は次の式で表わされる。
する。クレアチニンの反応は次の式で表わされる。
【００１８】第１試薬としてアルカリ液を試料に添加
し、人体の体温と同じ３７℃に設定する。それに第２試
薬としてピクリン酸を添加すると、試料中のクレアチニ
ンは試薬中のピクリン酸と反応して５００ｎｍ付近で吸
収を示すアルカリ性ピクレートを生成する。試料量を３
μｌ、第１試薬及び第２試薬の量をそれぞれ２００μｌ
とし、５１０ｎｍでアルカリ性ピクレートの吸光度を測
定すると、図２に示される反応タイムコースが得られ
た。複数の曲線は上方向に描かれているものほど高濃度
試料であることを示している。図２において縦軸のスケ
ールは吸光度２０００ｍＡｂｓとなっており、最も高濃
度試料は測光ポイント３０付近からスケールアウトして
いる。実際には、２０００ｍＡｂｓ以上まで反応は進行
している。
し、人体の体温と同じ３７℃に設定する。それに第２試
薬としてピクリン酸を添加すると、試料中のクレアチニ
ンは試薬中のピクリン酸と反応して５００ｎｍ付近で吸
収を示すアルカリ性ピクレートを生成する。試料量を３
μｌ、第１試薬及び第２試薬の量をそれぞれ２００μｌ
とし、５１０ｎｍでアルカリ性ピクレートの吸光度を測
定すると、図２に示される反応タイムコースが得られ
た。複数の曲線は上方向に描かれているものほど高濃度
試料であることを示している。図２において縦軸のスケ
ールは吸光度２０００ｍＡｂｓとなっており、最も高濃
度試料は測光ポイント３０付近からスケールアウトして
いる。実際には、２０００ｍＡｂｓ以上まで反応は進行
している。
【００１９】限界吸光度ＡＬを３.０Ａｂｓで一定と
し、その限界吸光度よりも小さい範囲で吸光度変化率を
求めると、ｔ1を測定開始後１２秒、ｔｍを４８秒、ｔ
ｎを１３２秒、ｔｅを２５２秒として３つの反応区間
Ｉ，II，IIIについて図３に示されるようなクレアチニ
ン濃度に対する結果が得られる。例えば、反応区間III
の場合、２００ｍｇ／ｄｌ以下しか直線性を示さない。
この３つの区間についてそれぞれ吸光度変化率をクレア
チニン濃度に換算する濃度換算係数Ｋ1，Ｋ2，Ｋ3が算
出される。
し、その限界吸光度よりも小さい範囲で吸光度変化率を
求めると、ｔ1を測定開始後１２秒、ｔｍを４８秒、ｔ
ｎを１３２秒、ｔｅを２５２秒として３つの反応区間
Ｉ，II，IIIについて図３に示されるようなクレアチニ
ン濃度に対する結果が得られる。例えば、反応区間III
の場合、２００ｍｇ／ｄｌ以下しか直線性を示さない。
この３つの区間についてそれぞれ吸光度変化率をクレア
チニン濃度に換算する濃度換算係数Ｋ1，Ｋ2，Ｋ3が算
出される。
【００２０】図２の測定結果に対し、従来のように１つ
のレート測定区間（１２〜２５２秒間）内の限界吸光度
ＡＬを満足する測定値から単位時間当りの吸光度変化率
を求めると、図４に示されるように、限界吸光度ＡＬを
１.０、１.５、２.０Ａｂｓのいずれに設定した場合で
も１５０ｍｇ／ｄｌ以上の濃度域では原点から伸長した
直線の上方に乖離する関係となっている。
のレート測定区間（１２〜２５２秒間）内の限界吸光度
ＡＬを満足する測定値から単位時間当りの吸光度変化率
を求めると、図４に示されるように、限界吸光度ＡＬを
１.０、１.５、２.０Ａｂｓのいずれに設定した場合で
も１５０ｍｇ／ｄｌ以上の濃度域では原点から伸長した
直線の上方に乖離する関係となっている。
【００２１】一方、本発明で限界吸光度ＡＬとして１.
５Ａｂｓ（共通）を設定し、吸光度変化率を測定する
と、３つの測定区間Ｉ，II，IIIに対して図５に示され
るようにそれぞれ直線上に配列された測定値が得られ
る。各測定区間Ｉ，II，IIIの濃度変換係数Ｋ1，Ｋ2，
Ｋ3が図３のデータが予め求められるので、これらの区
間の各直線上に濃度変換係数Ｋ1，Ｋ2，Ｋ3をかける
と、図６に示されるように全て一直線上に配列される。
この直線関係は５００ｍｇ／ｄｌまで保持される。
５Ａｂｓ（共通）を設定し、吸光度変化率を測定する
と、３つの測定区間Ｉ，II，IIIに対して図５に示され
るようにそれぞれ直線上に配列された測定値が得られ
る。各測定区間Ｉ，II，IIIの濃度変換係数Ｋ1，Ｋ2，
Ｋ3が図３のデータが予め求められるので、これらの区
間の各直線上に濃度変換係数Ｋ1，Ｋ2，Ｋ3をかける
と、図６に示されるように全て一直線上に配列される。
この直線関係は５００ｍｇ／ｄｌまで保持される。
【００２２】図２から図６のデータは標準試料について
測定したものであるが、未知試料について図１のフロー
チャートに従って吸光度変化率を測定すれば、図５又は
図６の関係からクレアチニン濃度が求められる。なお図
２から図６はレート法に適用したものであるが、エンド
ポイント法でも同様に直線関係が得られる。
測定したものであるが、未知試料について図１のフロー
チャートに従って吸光度変化率を測定すれば、図５又は
図６の関係からクレアチニン濃度が求められる。なお図
２から図６はレート法に適用したものであるが、エンド
ポイント法でも同様に直線関係が得られる。
【００２３】
【発明の効果】本発明では予め設定された複数の測定時
刻ごとに濃度変換係数を用意しておき、未知試料の測定
では、反応過程にある被検液を複数の時刻で測定し、得
られた吸光度測定値を限界吸光度と比較し、限界吸光度
を満たす吸光度測定値のうちで最も反応時間の長い測定
時刻での吸光度又は吸光度変化率を採用し、それにその
測定時刻での濃度変換係数を適用して被検成分濃度を求
めるようにしたので、再検査が減り、検査が迅速化され
るとともに、試料や試薬の無駄を省き、自動分析装置の
実処理能力の低下を防止することができる。本発明はま
た測定濃度範囲を広げることもできる。本発明では、目
的及び測定濃度範囲に対して厳密に考える必要がなくな
り、試料量を増加させることができ、分析精度を向上さ
せることが可能になる。
刻ごとに濃度変換係数を用意しておき、未知試料の測定
では、反応過程にある被検液を複数の時刻で測定し、得
られた吸光度測定値を限界吸光度と比較し、限界吸光度
を満たす吸光度測定値のうちで最も反応時間の長い測定
時刻での吸光度又は吸光度変化率を採用し、それにその
測定時刻での濃度変換係数を適用して被検成分濃度を求
めるようにしたので、再検査が減り、検査が迅速化され
るとともに、試料や試薬の無駄を省き、自動分析装置の
実処理能力の低下を防止することができる。本発明はま
た測定濃度範囲を広げることもできる。本発明では、目
的及び測定濃度範囲に対して厳密に考える必要がなくな
り、試料量を増加させることができ、分析精度を向上さ
せることが可能になる。
【図１】本発明をレート法に適用した場合を示すフロー
チャート図である。
チャート図である。
【図２】クレアチニンの反応タイムコースを示す図であ
る。
る。
【図３】図２のデータから予め設定された３つの測定区
間におけるクレアチニン濃度と吸光度変化率との関係を
示す図である。
間におけるクレアチニン濃度と吸光度変化率との関係を
示す図である。
【図４】図２の測定データを従来の方法により処理した
結果を示す図である。
結果を示す図である。
【図５】図２のデータから本発明により採用された吸光
度を処理した図である。
度を処理した図である。
【図６】図５の吸光度に濃度変換係数をかけた結果を示
す図である。
す図である。
Claims (2)
- 【請求項１】 生化学自動分析装置を用い、試料と試薬
を反応させた被検液の吸光度から試料の被検成分の濃度
を求めるエンドポイント法による測定方法において、 吸光度から試料の被検成分の濃度を再現性よく求めるこ
とのできる吸光度範囲の限界吸光度を定めておくこと、 濃度の異なる複数種の標準試料を用いて反応過程にある
被検液の吸光度を複数の時刻で測定し、各標準試料の吸
光度で前記限界吸光度を満足するものについて予め定め
た複数の反応時間の時刻ごとに吸光度を濃度に変換する
第１の濃度変換係数を求めること、 未知試料の被検液の吸光度を反応過程の複数の時刻で測
定し、予め定めた前記複数の反応時刻について反応時間
の長いものから短いものへとそれぞれの反応時刻におけ
る吸光度を前記限界吸光度とを比較して前記限界吸光度
を満足する反応時刻とそのときの吸光度を採用するこ
と、及びその採用した反応時刻における第１の濃度変換
係数及び試薬ブランク値を用いて被検成分濃度を求める
こと、を含む測定方法。 - 【請求項２】 生化学自動分析装置を用い、試料と試薬
を反応させた被検液の吸光度変化率から試料の被検成分
の濃度を求めるレート法による測定方法において、 吸光度変化率から試料の被検成分の濃度を再現性よく求
めることのできる吸光度範囲の限界吸光度を定めておく
こと、 濃度の異なる複数種の標準試料を用いて反応過程にある
被検液の吸光度変化率を複数の時刻で測定し、各標準試
料の吸光度で前記限界吸光度を満足するものについて予
め定めた複数の反応時間の時刻ごとに吸光度変化率を濃
度に変換する第２の濃度変換係数を求めること、 未知試料の被検液の吸光度変化率を反応過程の複数の時
刻で測定し、予め定めた前記複数の反応時刻について反
応時間の長いものから短いものへとそれぞれの反応時刻
における吸光度を前記限界吸光度とを比較して前記限界
吸光度を満足する反応時刻とそのときの吸光度変化率を
採用すること、及びその採用した反応時刻における第２
の濃度変換係数及び試薬ブランク値を用いて被検成分濃
度を求めること、を含む測定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6285093A JPH06249856A (ja) | 1993-02-26 | 1993-02-26 | 生化学自動分析装置における測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6285093A JPH06249856A (ja) | 1993-02-26 | 1993-02-26 | 生化学自動分析装置における測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06249856A true JPH06249856A (ja) | 1994-09-09 |
Family
ID=13212203
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6285093A Pending JPH06249856A (ja) | 1993-02-26 | 1993-02-26 | 生化学自動分析装置における測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06249856A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003056312A1 (fr) * | 2001-12-27 | 2003-07-10 | Arkray, Inc. | Procede de mesure de la concentration |
| JP2006119044A (ja) * | 2004-10-22 | 2006-05-11 | Sysmex Corp | 生体試料分析装置および方法 |
| JP2010261822A (ja) * | 2009-05-08 | 2010-11-18 | Hitachi High-Technologies Corp | 自動分析装置、及び分析方法 |
| WO2010131413A1 (ja) * | 2009-05-11 | 2010-11-18 | 株式会社 日立ハイテクノロジーズ | 自動分析装置 |
| CN106290940A (zh) * | 2016-08-31 | 2017-01-04 | 江苏英诺华医疗技术有限公司 | 应用于生化分析仪的速率法检测数据智能处理方法 |
-
1993
- 1993-02-26 JP JP6285093A patent/JPH06249856A/ja active Pending
Cited By (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003056312A1 (fr) * | 2001-12-27 | 2003-07-10 | Arkray, Inc. | Procede de mesure de la concentration |
| US7054759B2 (en) | 2001-12-27 | 2006-05-30 | Arkray, Inc | Concentration measuring method |
| CN100410650C (zh) * | 2001-12-27 | 2008-08-13 | 爱科来株式会社 | 浓度测定方法 |
| JP2006119044A (ja) * | 2004-10-22 | 2006-05-11 | Sysmex Corp | 生体試料分析装置および方法 |
| US9568488B2 (en) | 2004-10-22 | 2017-02-14 | Sysmex Corporation | Biological sample analyzing apparatus |
| JP2010261822A (ja) * | 2009-05-08 | 2010-11-18 | Hitachi High-Technologies Corp | 自動分析装置、及び分析方法 |
| US9310388B2 (en) * | 2009-05-08 | 2016-04-12 | Hitachi High-Technologies Corporation | Automatic analyzer and analysis method |
| US20120109534A1 (en) * | 2009-05-08 | 2012-05-03 | Hitachi High-Technologies Corporation | Automatic analyzer and analysis method |
| CN102422144A (zh) * | 2009-05-11 | 2012-04-18 | 株式会社日立高新技术 | 自动分析装置 |
| US20120065898A1 (en) * | 2009-05-11 | 2012-03-15 | Hitachi High-Technologies Corporation | Automatic analyzer |
| JP2010261876A (ja) * | 2009-05-11 | 2010-11-18 | Hitachi High-Technologies Corp | 自動分析装置 |
| US9488667B2 (en) | 2009-05-11 | 2016-11-08 | Hitachi High-Technologies Corporation | Automatic analyzer |
| WO2010131413A1 (ja) * | 2009-05-11 | 2010-11-18 | 株式会社 日立ハイテクノロジーズ | 自動分析装置 |
| EP2431731A4 (en) * | 2009-05-11 | 2017-12-06 | Hitachi High-Technologies Corporation | Automatic analysis device |
| CN106290940A (zh) * | 2016-08-31 | 2017-01-04 | 江苏英诺华医疗技术有限公司 | 应用于生化分析仪的速率法检测数据智能处理方法 |
| CN106290940B (zh) * | 2016-08-31 | 2018-06-29 | 江苏英诺华医疗技术有限公司 | 应用于生化分析仪的速率法检测数据智能处理方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tiffany et al. | Enzymatic kinetic rate and end-point analyses of substrate, by use of a GeMSAEC fast analyzer | |
| US6159750A (en) | Fluorescence polarization immunoassay diagnostic method | |
| US5083283A (en) | Method of determining calibration curve and apparatus using calibaration curve | |
| EP2135075B1 (en) | Whole blood assay | |
| JPH0224337B2 (ja) | ||
| JPH0134337B2 (ja) | ||
| Kristiansen | Description of a generally applicable model for the evaluation of uncertainty of measurement in clinical chemistry | |
| US6596153B1 (en) | Method for analyzing a gas sample | |
| US20060199221A1 (en) | Correction for temperature dependence assays | |
| US5258308A (en) | Method, kit and apparatus for verifying calibration and linearity of vertical photometers | |
| JPH06249856A (ja) | 生化学自動分析装置における測定方法 | |
| Fingerhut et al. | Evaluation of the genetic screening processor (GSP™) for newborn screening | |
| US7312083B2 (en) | Control value assignment method | |
| JPS62842A (ja) | 検量線を使用する成分分析方法 | |
| JP3279756B2 (ja) | 定量計算装置 | |
| EP0180905A2 (en) | Method for determining endotoxin concentrations | |
| JPS6252434A (ja) | 吸光光度分析法 | |
| Patke et al. | A comparative analytical quality evaluation study between two methods for blood urea nitrogen estimation | |
| Hasson et al. | Determination of Glucose with a Research Model Aminco" Rotochem" by the Hexokinase Reaction | |
| JP2595267B2 (ja) | 測光的評価を用いる物質の測定法 | |
| Segulja | The Importance of Expertly Evaluated Tests Underlined by COVID-19 Pandemic: A Mini Review | |
| Suchanek et al. | Measurement uncertainty of test kit results–the ELISA example | |
| JP3204697B2 (ja) | 自動分析方法 | |
| Mondesert et al. | A French multicenter analytical evaluation of the automated Lumipulse G sNfL blood assay (Fujirebio®) and its comparison to four other immunoassays for serum neurofilament light chain assessment in clinical settings | |
| JPH057488A (ja) | レート式自動分析装置 |