JP2005519050A

JP2005519050A - ストレプトグラミン誘導体、その製造及びそれを含有する組成物

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Publication number: JP2005519050A
Application number: JP2003556421A
Authority: JP
Inventors: エリク・バク; ジャン−クロード・バリエール; ジェラール・ピュショ
Original assignee: アベンティス・ファーマ・ソシエテ・アノニム
Priority date: 2001-12-26
Filing date: 2002-12-23
Publication date: 2005-06-30
Anticipated expiration: 2022-12-23
Also published as: CA2470447A1; CA2470447C; EP1461342A1; SI1461342T1; DE60218740D1; PT1461342E; WO2003055891A1; AU2002365025A1; DE60218740T2; EP1461342B1; FR2833954B1; CY1106642T1; FR2833954A1; JP4443928B2; DK1461342T3; ATE356133T1; ES2283654T3; MXPA04005536A

Abstract

本発明は、一般式（Ｉ）
【化１】

（式中、Ｒ１は、ハロゲン原子又はＯＨ、アルキルオキシ、アジド、チオシアナト基であるか、又はＲ１は、基−ＮＲ'Ｒ''基を表し、その際、Ｒ'は、水素原子又はメチル基であり、そしてＲ''は、水素原子又はアルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニル、ベンジル基、又は−ＯＲ'''であり、Ｒ'''は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニルもしくはベンジル基であり、又は、Ｒ''は、−ＮＲ^oＲ^ooを表し、Ｒ^o及びＲ^ooは、メチル基を表すことができ、又はそれらが結合している窒素原子と共に、さらに窒素、酸素及び硫黄から選ばれる別のヘテロ原子を含みうる飽和又は不飽和の４又は５員複素環を形成し；そしてＲ'１は、水素原子を表すか、又はＲ１及びＲ'１は、一緒になってオキソ基を形成し；Ｒ２は、ハロゲン原子又はアルキル、アルケニルもしくはアルキニル、フェニルもしくはヘテロアリール基、又はアルキルチオ、フェニルチオもしくはヘテロアリールチオ基を表し；Ｒ３は、水素原子又はメチルもしくはエチル基であり；そして結合---は、単結合（２７Ｒ立体化学）又は二重結合を表し、アルキル基は、直鎖又は分枝鎖中に１〜６個の炭素を含み、そしてアルキニル基は、直鎖又は分枝鎖中に２〜６個の炭素を含む）のグループＡのストレプトグラミン誘導体に関する。前記誘導体は、特に有用な抗菌剤である。

Description

本発明は、特に有益な抗菌活性を有する一般式

のグループＡのストレプトグラミン誘導体に関する。

知られているストレプトグラミンの中では、Streptomyces pristinaespiralisによって産生される天然由来の抗菌剤であるプリスチナマイシン（ＲＰ７２９３）は、１９５５年にはじめて単離された。商品名Pyostacine^(R)の下で販売されるプリスチナマイシンは、主にプリスチナマイシンIIＡとプリスチナマイシンＩＡとを組み合わせてなる。

ストレプトグラミン種の別の抗菌剤：バージニアマイシンは、Streptomyces virginiae、ＡＴＣＣ１３１６１[Antibiotics and Chemotherapy, 5, 632 (1955)]から単離された。バージニアマイシンは、(Staphylomycine^(R))は、主にＭ１（ＶＭ１）因子とＳ（ＶＳ）因子とを組み合わせてなる。

F. Le Goffic 等, Eur J. Med. Chem. Chimica Therapeutica, 16(1), 69-72 (1981) は、プリスチナマイシンIIＡのジヒドロキシ誘導体の製造を記載している。

特許出願第ＧＢ２２０６８７９号は、構造：

の修飾されたグループＡのストレプトグラミン誘導体を開示しているが、これらの誘導体は、弱い活性しか示さない。

ここで、一般式(Ｉ)（式中、
・Ｒ１は、ハロゲン原子又はヒドロキシル、アルキルオキシ、アジドもしくはチオシアナト基を表すか、又はＲ１は、基−ＮＲ'Ｒ''を表し、その際、Ｒ'は、水素原子又はメチル基であり、そしてＲ''は、水素原子又はアルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニルもしくはベンジル基、又は−ＯＲ'''であり、Ｒ'''は、水素原子又はアルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニルもしくはベンジル基であり、又は別の場合、Ｒ''は、−ＮＲ^o−Ｒ^ooを表し、Ｒ^o及びＲ^ooは、メチル基を表すことができ、又はそれらが結合している窒素原子と共に、さらに窒素、酸素及び硫黄から選ばれる別のヘテロ原子を含みうる飽和又は不飽和の４又は５員複素環を形成し、そして
・Ｒ'１は、水素原子を表すか、又は
・Ｒ１及びＲ'１は、一緒になってオキソ基を形成し、
・Ｒ２は、ハロゲン原子又はアルキル、アルケニルもしくはアルキニル、フェニルもしくはヘテロアリール基、又はアルキルチオ、フェニルチオもしくはヘテロアリールチオ基を表し、
・Ｒ３は、水素原子又はメチルもしくはエチル基であり、そして
・結合---は、単結合（２７Ｒ立体化学）又は二重結合を表し、
アルキル基は、直鎖又は分枝鎖中に１〜６個の炭素を含み、そして、アルケニル及び／又はアルキニル基は、直鎖又は分枝鎖中に２〜６個の炭素を含む）のグループＡのストレプトグラミン誘導体は、単独で又はグループＢのストレプトグラミン誘導体と組み合わせて、とりわけ耐性のある細菌系微生物において特に有益な抗菌活性を有することが見出された。

本発明によれば、Ｒ１及び／又はＲ２が、ハロゲン原子である場合、それは、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素を表すことができ；Ｒ２が、ヘテロアリール又はヘテロアリールチオ基である場合、この基は単環式又は二環式であり、そして窒素、酸素及び硫黄から選ばれる１〜４個のヘテロ原子を含む。
例えば、Ｒ２がヘテロアリール又はヘテロアリールチオ基である場合、ヘテロアリール基は、ピリジル、チエニル、フリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラジニル、キノリル、イソキノリル、インドリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、インダゾリル、チアジアゾリル又はオキサジアゾリルから選ぶことができる。

本発明によれば、一般式(Ｉ)のストレプトグラミン誘導体は、一般式

（式中、Ｒ'１、Ｒ３及び結合---は、上記定義された通りであり、そしてＲ１は、フッ素原子又はヒドロキシルもしくはアルキルオキシ基を表すか、又は基−ＮＲ'Ｒ''を表し、その際、Ｒ'は、Ｈ又はメチル基であり、そしてＲ''は、Ｈ又はアルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニルもしくはベンジル基、又は−ＯＲ'''であり、Ｒ'''は、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニルもしくはベンジルであり、又は別の場合、Ｒ''は、−ＮＲ^oＲ^ooを表し、Ｒ^o及びＲ^ooは、メチルであることができ、又はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、さらに窒素、酸素及び硫黄から選ばれる別のヘテロ原子を含みうる飽和又は不飽和の４又は５員複素環を形成し、又は別の場合、Ｒ１及びＲ'１は、一緒になってオキソ基を形成する）のストレプトグラミン誘導体を金属化し、置換基の性質に応じて、そして出発物質が、一般式(II)のストレプトグラミン誘導体であり、結合---が二重結合又は単結合であるかどうかに応じて、アミドを連続的に作用させ、一般式

（式中、そしてＲ３は、上記定義された通りであり、そしてＲ１は、フッ素原子もしくはアルキルオキシ基を表すか、又は基−ＮＲ'Ｒ''を表し、ここで、Ｒ'はメチル基であり、そしてＲ''は、アルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニルもしくはベンジル基、又は−ＯＲ'''であり、Ｒ'''は、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニルもしくはベンジルであるか、又は別の場合、Ｒ''は、−ＮＲ^oＲ^ooを表し, Ｒ^o及びＲ^ooは、メチルであることができ、又はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、さらに窒素、酸素及び硫黄から選ばれる別のヘテロ原子を含みうる飽和又は不飽和の４又は５員複素環を形成する）の対応するポリアニオンを得、次いで、一般式：

Ｒ２−Ｘ (III)
（式中、Ｒ２は、ハロゲン原子、アルキル基又はアルケニルもしくはアルキニル基であるが、ビニル又はエチニル基を表すことを除き、そしてＸは、ハロゲン原子又はスルホニルオキシ基を表す）によって表すことができる求電子試薬を作用させ、又は別法として、Ｒ２がアルキルチオ、フェニルチオ又はヘテロアリールチオである場合、ジスルフィドを作用させ、続いて、必要に応じて、一般式(Ｉ)（式中、Ｒ２は、塩素、臭素又はヨウ素原子である）のストレプトグラミン誘導体を一般式(Ｉ)（式中、Ｒ２は、ビニル、エチニル、フェニル及び／又はヘテロアリール基である）のストレプトグラミン誘導体に転化し、及び／又は、必要に応じて、一般式(Ｉ)（式中、Ｒ１及びＲ１'は、一緒になってオキソ基を形成する）のストレプトグラミン誘導体を対応する誘導体（式中、Ｒ１は、塩素、臭素もしくはヨウ素原子又はアジドもしくはチオシアナト基であり、そしてＲ'１は、水素原子である）に転化し、及び／又は、続いて一般式(Ｉ)（式中、結合---は、二重結合であ
る）のストレプトグラミン誘導体を、一般式(Ｉ)（式中、結合---は、単結合である）のストレプトグラミン誘導体に転化することによって製造することができる。

金属化反応は、一般に、−１００〜−２０℃の温度で、４〜７当量のアミド、好ましくは例えばリチウムジイソプロピルアミド及びリチウム２,２,６,６−テトラメチルピペリジンアミドから選ばれるリチウムアミドの存在下、無水溶媒、特にエーテル、例えば無水テトラヒドロフラン中、場合により共存溶媒、例えば１,３−ジメチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２(１Ｈ)−ピリミジノン又はヘキサメチルホスホロトリアミドの存在下で、添加剤、例えばテトラメチルエチレンジアミン、ジアザビシクロ[２.２.２]オクタン又は無水塩化リチウムの存在下で又は不存在下で実施する不活性媒体、例えばアルゴン下で方法を実施することは都合が良い。

求電子試薬［特に一般式(III)によって表される］の反応は、−８０〜２０℃の温度で実施する。求電子試薬は、有利には、アルキル、アリル、プロパルギル、ベンジル又はヘテロアリールメチルハライド又はスルホネートから選ばれるか、又は代わりに、臭素、ヨウ素又は塩化ヨウ素から選ばれ；また、ハロゲン供与体（例えば、Ｎ−ブロモスクシンイミド又はＮ−クロロスクシンイミド、１,１,２,２−テトラフルオロ−１,２−ジクロロ−又は−ジブロモエタン、１,２−ジブロモ−１,１,２,２−テトラクロロエタン、１,２−ジヨードエタン又は１,２−ジブロモエタン、１−クロロ−２−ヨードエタン又はヘキサクロロアセトン）から選ぶことができる。方法は、エーテル、例えばテトラヒドロフランのような有機溶媒中で実施するのが好都合である。

一般式(Ｉ)（式中、Ｒ２は、塩素、臭素又はヨウ素である）のストレプトグラミン誘導体の一般式(Ｉ)（式中、Ｒ２は、ビニル、エチニル、フェニル又はヘテロアリールである）のストレプトグラミン誘導体への転化後の操作は、ハロゲンが臭素又はヨウ素である誘導体を用いて出発し、触媒、例えばパラジウム誘導体（例えば、テトラキス（トリフェニルホスフィンパラジウム）の存在下で、ホスフィン（例えば、テトラキス（トリフェニルホスフィン））、塩基（例えば窒素性塩基：トリエチルアミン、ジエチルアミン又はピペリジン又は炭酸塩：炭酸ナトリウム又は炭酸カリウム）の存在下又は不存在下で、場合により助触媒、例えば銅塩（ＣｕＩ）の存在下で、そして不活性有機溶媒、又は溶媒混合物、例えば芳香族炭化水素（例えばトルエン）、ニトリル（アセトニトリル）、アミド（例えばジメチルホルムアミド）又はエーテル（テトラヒドロフラン）中、２０℃から反応混合物の還流点の間の温度で、スズ誘導体（例えば、ビニルトリブチルスズ又はビニルトリメチルスズ）、又はホウ素誘導体（例えば、ボロン酸又は９−ボラビシクロ[３.３.１]ノナン誘導体）、又は亜鉛誘導体（例えば、構造Ｒ２ＺｎＣｌ）の作用によって実施するのが好ましい。

一般式(Ｉ)（式中、Ｒ１及びＲ'１は、一緒になってオキソ基を形成する）のストレプトグラミン誘導体を、対応する誘導体（式中、Ｒ１は、塩素、臭素又はヨウ素原子又はアジド又はチオシアナト基であり、そしてＲ'１は、水素原子である）に転化するための次なる操作は、国際特許出願ＷＯ０１／０２４２７に記載された明細書に従って実施し、それは参照により本明細書に組み込まれている。

Ｒ１及びＲ'１が、一緒になってオキソ基を表すことを除く上記定義された通りである場合、結合---が二重結合である一般式(Ｉ)のストレプトグラミン誘導体を、結合---が単結合（２７Ｒ立体化学）である一般式(Ｉ)のストレプトグラミン誘導体へ転化するための次なる操作は、一般に、エーテル（例えばテトラヒドロフラン）のような溶媒中、０〜６０℃の温度で、ハロゲン化アルカリ金属（例えば水素化ホウ素ナトリウム又は水素化ホウ素リチウム）を用いた還元によって実施する。Ｃ２７における２つのエピマーの分離は、他の分子に悪影響を与えない通常の方法に従って、特に結晶化又はクロマトグラフィによって実施する。

Ｒ１がフッ素原子又は基−ＮＲ'Ｒ''であり、Ｒ'は、水素原子又はメチル基であり、そしてＲ''は、水素原子又はアルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニル又はベンジル基又は−ＯＲ'''であり、Ｒ'''は、水素原子又はアルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニル又はベンジル基であるか、又は別の場合、Ｒ''は、−ＮＲ^oＲ^ooを表し、Ｒ^o及びＲ^ooは、メチル基を表すことができ、又はそれらが結合している窒素原子と共に、さらに窒素、酸素及び硫黄から選ばれる別のヘテロ原子を含みうる飽和又は不飽和の４又は５員複素環を形成する、一般式(II)のグループＡのストレプトグラミン誘導体は、国際特許出願ＷＯ９９／０５１６５及びＷＯ０１／０２４２７に記載された方法に従って又は類似の方法で製造することができる。

一般式(II)のジヒドロキシストレプトグラミン誘導体は、F. Le Goffic 等, Eur J. Med. Chem. Chimica Therapeutica, 16(1), 69-72 (1981) 又は特許出願ＦＲ２７９５７３３に記載された方法に従って得ることができる。

１６Ｒエピマー形態及び１６Ｓエピマー形態の分離は、通常の方法に従って実施され、例えばエピマー形態の分離は、キラル又はアキラル相上のクロマトグラフィ、フラッシュクロマトグラフィ、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）、又は１６Ｒ及び１６Ｓのエピマーの混合物を用いて出発して遠心分離分配クロマトグラフィ（ＣＰＣ）又は結晶化によって実施することができる

Ｒ１がアルキルオキシ基である一般式(II)のストレプトグラミン誘導体は、相間移動試薬の存在下で、一般式：

（式中、Ｒ３及び結合---は、上記定義された通りであり、そして１４位のヒドロキシル官能基及び／又は８位のアミド官能基は、場合により予め保護されており、後で、必要に応じて、保護基が除去される）のジヒドロキシストレプトグラミン誘導体上で、一般式：
ａｌｋ−Ｘ (Ｖ)
（ここで、ａｌｋは、対応するアルキル基を表し、そしてＸは、ハロゲン原子又はメチルスルホニルオキシ、ｐ−トルエンスルホニルオキシ又はトリフルオロメチルスルホニルオキシ基を表す）の誘導体の作用によって製造することができる。

好ましくは、Ｘがハロゲン原子である場合、Ｘは、臭素又はヨウ素原子である一般式(Ｖ)の誘導体を反応させる。

相間移動試薬は、第四級アンモニウム誘導体（例えば、テトラアルキルアンモニウム又はトリアルキルベンジルアンモニウム塩、例えば塩化物、臭化物又は硫酸塩）から選ぶのが好都合である。

反応は、一般に、水性有機媒質中、例えば炭化水素（例えばトルエン）、ハロゲン化溶媒（例えばジクロロメタン）又はエステル（特に酢酸エチル）中、１０〜６０℃の温度で、塩基性媒質、例えばナトリウム又は水酸化カリウムの存在下で、又は炭酸カリウム又は炭酸セシウムの存在下で実施する。方法は、約２０℃で実施するのが好ましい。また、方法は、過剰の一般式(Ｖ)の誘導体の存在下で実施するのが好ましい。

１４位の水酸基又は８位のアミドの保護及び脱保護は、他の分子に影響を及ぼさない通常の方法に従って、特にT.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis (第２版), A. Wiley-Interscience Publication (1991) 又は McOmie, Protec
tive Groups in Organic Chemistry, Plenum Press (1973) に記載された方法を適用することによって実施する。例えば、水酸基の保護はアリル基を用いて実施し、これは知られている方法に従って導入し、そして除去する。アミドの保護は、特にｔ−ブトキシカルボニル基を用いて実施することができる。

反応により１４−及び１６−Ｏ−アルキル異性体の混合物が生じる場合、これらの異性体は、他の分子に悪影響を与えない通常の方法に従って、特にクロマトグラフィ［順相又は逆相上の、キラル又はアキラル相上の高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）、又はフラッシュクロマトグラフィ］によって又は結晶化によって分離することができる。

一般式(IV)のプリスチナマイシン誘導体は、それぞれプリスチナマイシンIIA (PIIA)、プリスチナマイシンIIB (PIIB)、プリスチナマイシンIIC (PIIC)、プリスチナマイシンIID (PIID)、プリスチナマイシンIIF (PIIF)及びプリスチナマイシンIIG (PIIG)に対応し、それらは、天然のプリスチナマイシンの知られている成分である。成分PIIF及びPIIGは、欧州特許ＥＰ６１４９１０に記載されている。プリスチナマイシンIIC (PIIC)及びプリスチナマイシンIID (PIID)は、J.C. Barriere 等, Expert. Opin. Invest. Drugs, 3(2), 115-31 (1994)に記載されたようにして得ることができる。

天然のグループＡのストレプトグラミン成分［一般式(IV)のストレプトグラミン］の製造及び分離は、J. Preud'homme 等, Bull. Soc. Chim. Fr., 第２巻, 585 (1968)によって、又は欧州特許ＥＰ６１４９１０に記載された方法に従って、又は同様にして発酵及び発酵からの成分の単離によって実施する。別法として、天然のグループＡ成分の製造は、特許出願ＦＲ２６８９５１８に記載された通り特定の発酵によって実施することができる。

一般式(Ｉ)のストレプトグラミン誘導体は、必要に応じて、物理的な方法、例えば結晶化、クロマトグラフィまたはＣＰＣによって精製することができる。
Ｒ１が基−ＮＲ'Ｒ''を表す一般式(Ｉ)のストレプトグラミン誘導体は、知られている方法によって酸との付加塩の形態に転化することができる。これらの塩は、存在する場合、本発明の内容に帰属することが理解される。

医薬上許容しうる酸との付加塩の例として、無機酸と形成する塩（塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩及びリン酸塩）又は有機酸と形成する塩（コハク酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、フェニルスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、ナフチルスルホン酸塩、又は樟脳スルホン酸塩、又はこれらの化合物の置換誘導体と）を記載することができる。

また、本発明による誘導体及びグループＢのストレプトグラミンによって形成された組合せは、本発明の内容に帰属することが理解される。

本発明によるストレプトグラミン誘導体は、グループＢのストレプトグラミン誘導体の抗菌活性における抗菌性及び相乗作用を有する。それらの強力な活性のために、単独又は組み合わせることが特に都合が良い。

それらをグループＢのストレプトグラミン成分又は誘導体と組み合わせる場合、この成分又は誘導体は、それが経口又は非経口投与形態を得ることが望ましいかどうかに応じて、天然成分：プリスチナマイシンIA、プリスチナマイシンIB、プリスチナマイシンIC、プリスチナマイシンID、プリスチナマイシンIE、プリスチナマイシンIF、プリスチナマイシンIG、バージニアマイシンS1、S3又はS4、ベルナマイシンＢ又はＣ、及びエタマイシン、又は特許又は特許出願ＵＳ４６１８５９９、ＵＳ４７９８８２７、ＵＳ５３２６７８２、ＵＳ５７８６４４９、ＷＯ０１／１０８９５、ＷＯ０１／０７４６７、ＥＰ７７２６３０、ＥＰ７７０１３２又はＥＰ１０５６０７１に記載された半合成の誘導体から選ぶことができる。

本発明によるストレプトグラミン誘導体は、グループＢのストレプトグラミン誘導体の抗菌活性において、特にStaphylococcus epidermidis N52において又はStaphylococcus aureus Stephanのような耐性菌株において抗菌性及び相乗作用を有する。それらは強力な活性のために単独で又は組み合わせることが特に都合が良い。

本発明によるストレプトグラミン誘導体は、Staphylococcus epidermidis N52においてin vitroで単独で１〜６４μg／ml、又はプリスチナマイシンＩＢのようなグループＢの誘導体と組み合わせて０.２５〜３２μg／mlの濃度で活性であることがわかった。それは、Staphylococcus aureus Stephanにおいてin vitroで、０.５〜６４μg／mlの濃度で活性であることがわかった。
最終的に、本発明による生成物は、毒性を示さなかった。

以下の実施例により、本発明を説明するが、これらに限定されるわけではない。
以下の実施例において名称１６−デオキソプリスチナマイシンIIA（又はIIB）は、１６位におけるケトン官能基が２個の水素原子で置き換えられていることを意味する。クロマトグラフィを行う際、全ての画分をMerck 60F254シリカプレート上で薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）によって分析した。ＴＬＣ上の同じスポットに相当する画分を合わせてから、減圧（３０℃；２.７ｋＰａ）下で濃縮して乾燥状態にした。このようにして得た残留物を通常の分光技術（ＮＭＲ；ＩＲ；ＭＳ）によって分析し、予想生成物を確認した。

〔実施例１〕
(１６Ｒ)−２０−ブロモ−１６−デオキソ−１６−フルオロプリスチナマイシンIIB
−５０℃に冷やしたリチウムジイソプロピルアミドの溶液を、アルゴン雰囲気下、−７２℃で無水テトラヒドロフラン１００cm³中に溶解した(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−フルオロプリスチナマイシンIIB５.３２ｇに１時間かけて加えた。ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中１.６Ｍ）３１cm³を−５０℃でテトラヒドロフラン１００cm³及びジイソプロピルアミン７cm³の溶液に加え、添加した後、２０℃まで加温させて予めリチウムジイソプロピルアミド溶液を製造した。得られた濃厚な褐色溶液にテトラメチルエチレンジアミン７.５cm³を素早く加え、−７２℃に維持した。反応混合物を−７２℃で１０分間撹拌した後、テトラヒドロフラン２０cm³中に溶解した１,２−ジブロモ−１,１,２,２−テトラクロロエタン９.８ｇを、さらに−７２℃で１５分かけて加えた。混合物を、−７２℃で１時間を撹拌し、続いて酢酸１０cm³、次いで水１００cm³を滴加した。得られた溶液を２０℃に加温させ、減圧下で濃縮した。残留物を、水１００cm³及び酢酸エチル１００cm³中に取った。有機相を分離し、水性相を酢酸エチル１００cm³で抽出した。合わせた有機相を水性相のｐＨを２に調節するために１Ｎ塩酸を含む水５０cm³で洗浄した。生成した有機相を分離し、水５０cm³、５％炭酸水素ナトリウム水溶液、及びブライン５０cm³で逐次洗浄してから硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、そして減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮して乾燥状態にし、橙色フォーム１０.３ｇを得た。この残留物を、シリカ上の２回の連続したフラッシュクロマトグラフィ［溶出液：酢酸エチル／シクロヘキサン（体積７０／３０）、次いでジクロロメタン／メタノール（体積９７／３）]により精製した。予想生成物を含む画分を減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮した後、(１６Ｒ)−２０−ブロモ−１６−デオキソ−１６−フルオロプリスチナマイシンIIB ０.５３ｇを約１７２℃で融解する淡黄色粉末の形態で得た。
1H NMR スペクトル (400 MHz, CDCl₃, ppmにおけるδ): 0.96 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.00 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.12 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.55〜2.15 (mt: 5H); 1.81 (s: 3H); 2.16 (mt: 1H); 2.27 (mt: 1H); 2.77 (mt: 1H); 2.91 (ddd, J = 26 - 17 及び 5 Hz: 1H); 3.18 (二重項 t, J = 17 及び 7 Hz: 1H); 3.48 (mt: 1H); 3.65 (mt: 1H); 4.06 (mt: 1H); 4.58 (mt: 1H); 4.81 (dd, J = 10 及び 1.5 Hz: 1H); 4.80〜4.90 (mt: 1H); 4.87 (dd, J = 9 及び 4 Hz: 1H); 5.12 (dmt, JHF = 48 Hz: 1H); 5.43 (ブロード d, J = 9 Hz: 1H); 5.71 (ddd, J = 16 - 8.5 及び 4 Hz: 1H); 5.83 (dd, J = 16 及び 1.5 Hz: 1H); 5.94 (mt: 1H); 6.24 (d, J = 16 Hz: 1H); 6.53 (dd, J = 16 及び 5 Hz: 1H).

〔実施例２〕
(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−フルオロ−２０−メチルプリスチナマイシンIIB
水素化ホウ素リチウム（テトラヒドロフラン中２Ｍ）０.８７cm³を、テトラヒドロフラン２０cm³中の（１６Ｒ）−１６−デオキソ−１６−フルオロ−２０−メチルプリスチナマイシンIIA ０.７６ｇの０℃に冷やした溶液に素早く加えた。添加後、反応混合物を０℃で３.５時間撹拌し、続いて１Ｎ塩酸１０cm³及び水１０cm³を添加した。得られた混合物のｐＨを水性炭酸水素ナトリウム溶液の添加により６.７に調節した。混合物を、ジクロロメタン３５cm³で２回抽出した。有機相を合わせてから、ブライン３０cm³で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮して乾燥状態にして白色フォーム０.６３ｇを得、これを半分取ＨＰＬＣ［Kromasil C8 １０μm相；溶出液：水／アセトニトリル（体積６０／４０）］によって精製した。予想生成物を含む画分を、ジクロロメタン３０cm³で２回抽出した。有機相を合わせてから硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、そして減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮して乾燥状態にし、白色固形物０.１４５ｇを得た。この固形物を、ペンタン／ジイソプロピルエーテル混合物中で１時間撹拌し、濾過し、次いで減圧（２.７ｋＰａ）下で一夜乾燥させて約１３７℃で融解する白色粉末形態で(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−フルオロ−２０−メチルプリスチナマイシンIIB ０.１２ｇを得た。
1H NMR スペクトル (400 MHz, CDCl₃, ppmにおけるδ): 0.96 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.00 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.11 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.65 (d, J = 3.5 Hz: 1H); 1.65〜2.05 (mt: 5H); 1.81 (s: 3H); 2.13 (mt: 1H); 2.22 (mt: 1H); 2.53 (s: 3H); 2.76 (mt: 1H); 2.86 (ddd, J = 24 - 17 及び 5 Hz: 1H); 3.12 (二重項 t, J = 17 及び 7 Hz: 1H); 3.48 (ddd, J = 16 − 9 及び 3 Hz: 1H); 3.73 (mt: 1H); 4.08 (mt: 1H); 4.55 (ブロード ddd, J = 16 - 9 及び 3Hz: 1H); 4.81 (dd, J = 10 及び 2 Hz: 1H); 4.80〜4.90 (mt: 1H); 4.85 (dd, J = 9 及び 3.5 Hz: 1H); 5.12 (dmt, JHF = 48 Hz: 1H); 5.42 (ブロード d, J = 9 Hz: 1H); 5.70 (ddd, J = 16 - 9 及び 4 Hz: 1H); 5.82 (dd, J = 16 及び 2 Hz: 1H); 5.94 (mt: 1H); 6.23 (ブロード d, J = 16 Hz: 1H); 6.52 (dd, J = 16 及び 5 Hz: 1H).

(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−フルオロ−２０−メチルプリスチナマイシンIIAは、以下の方法で得ることができる。
−５０℃に冷やしたリチウムジイソプロピルアミドの溶液を、アルゴン雰囲気下、−７２℃で無水テトラヒドロフラン３００cm³及び１,３−ジメチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２(１Ｈ)−ピリミジノン２０cm³中の（１６Ｒ）−１６−デオキソ−１６−フルオロプリスチナマイシンIIA １０.６ｇに１時間かけて加えた。（リチウムジイソプロピルアミド溶液は、−３０℃でｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中１.６Ｍ）５０ｃｍ³をテトラヒドロフラン１００cm³及びジイソプロピルアミン１１.２cm³の溶液に加え、続いて、添加後、２０℃に加温させることによって予め製造した）。生成した濃厚な褐色溶液に、テトラメチルエチレンジアミン１２.１cm³を素早く加え、−７２℃で維持した。−７２℃で１０分間反応混合物を撹拌した後、さらに−７２℃でヨウ化メチル１２.４ｇを５分かけて加えた。混合物を−７２℃で１時間撹拌し、続いて酢酸１２.６cm³、次いで水６０cm³を滴加した。得られた溶液を２０℃に加温させて、減圧下で濃縮した。得られた濃厚な褐色油を、水２００cm³及び酢酸エチル５００cm³中に取った。水性相のｐＨを３に調節するために濃塩酸（１０cm³）を加えた。有機相を分離し、水性相を酢酸エチル２００cm³で抽出した。合わせた有機相を、最終ｐＨ７〜８を得るために炭酸水素ナトリウムを含む水２００cm³で洗浄した。生成した有機相を分離し、ブライン１００cm³で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧（２.７ｋＰａ）の下で濾過、そして濃縮して乾燥状態にし、褐色の油１５.１ｇを得、これを２回の連続したフラッシュクロマトグラフィ［溶出液：酢酸エチル／シクロヘキサン（容量５０／５０）次いでジクロロメタン／メタノール／アセトニトリル（容量９４／３／３）］によって精製した。減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮した後、約１７８℃で融解する白色粉末の形態で(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−フルオロ−２０−メチルプリスチナマイシンIIA １ｇを得た。
1H NMR スペクトル (400 MHz, CDCl₃, ppmにおけるδ): 0.99 (d, J = 6.5 Hz: 6H); 1.13 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.52 (d, J = 4 Hz: 1H); 1.75 (s: 3H); 1.95〜2.20 (mt: 2H); 2.27 (mt: 1H); 2.41 (s: 3H); 2.60〜2.90 (mt: 3H); 2.97 (mt: 1H); 3.18 (二重項 t, J = 14.5 及び 3.5 Hz: 1H); 3.85 (非常にブロード d, J = 18 Hz: 1H); 4.08 (mt: 1H); 4.29 (mt: 2H); 4.40〜4.70 (mt: 1H); 4.62 (mt: 1H); 4.94 (mt: 2H); 5.66 (dt, J = 16 及び 4 Hz: 1H); 5.91 (ブロード d, J = 16 Hz: 1H); 5.99 (ブロード d, J = 16 Hz: 1H); 6.14 (t, J = 3 Hz: 1H); 6.59 (dd, J = 16 及び 7 Hz: 1H); 7.07 (多重項: 1H).

〔実施例３〕
(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−ジメチルアミノ−２０−メチルプリスチナマイシンIIB
リチウムジイソプロピルアミドの溶液を、アルゴン雰囲気下、−７５℃で無水テトラヒドロフラン４０cm³中の(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−ジメチルアミノプリスチナマイシンIIA １ｇの溶液に滴加した。リチウムジイソプロピルアミド溶液は、−１５℃でｎ−ブチルリチウム５.６cm³（ヘキサン中１.６Ｍ）をテトラヒドロフラン１０cm³及びジイソプロピルアミン１.２６cm³の溶液に加えることによって予め製造した。生成した黒ずんだ褐色溶液を、−７０℃で５分間撹拌し、続いてヨウ化メチル０.５６cm³を滴加した。添
加した後、混合物を−７０℃で５分間撹拌し、続いて水５０cm³及び１０％リン酸水溶液７cm³を添加した。得られた混合物を２０℃に加温させて酢酸エチル７５cm³で３回抽出した。合わせた有機相をブライン７５cm³で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、そして減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮して乾燥状態にし、黄色固形物０.９４ｇを得、これを分取ＨＰＬＣ［Kromasil Ｃ８^(R)、１０μｍ；溶出液：水／アセトニトリル（容量７２.５／２７.５）上記は、０.１％トリフルオロ酢酸を含む]によって精製した。予想生成物を含む画分を減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮した後、白色フォームを得、これをジイソプロピルエーテル２０cm³中で撹拌してから濾過した。得られた固形物を、減圧（２.７ｋＰａ）下で乾燥させて、約１４５℃で融解する白色粉末の形態で(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−ジメチルアミノ−２０−メチルプリスチナマイシンIIA ０.１５ｇを得た。
1H NMR スペクトル (400 MHz, CDCl₃, ppmにおけるδ): 0.98 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 0.99 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.13 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.69 (s: 3H); 1.76 (mt: 1H); 1.95〜2.10 (mt: 2H); 2.35〜2.50 (mt: 1H); 2.35 (s: 9H); 2.49 (t, J = 12 Hz: 1H); 2.60〜2.75 (mt: 2H); 2.80〜2.90 (mt: 1H); 2.89 (ブロード d, J = 12 Hz: 1H); 3.68 (非常にブロード d, J = 18 Hz: 1H); 4.07 (mt: 1H); 4.33 (mt: 1H); 4.40 (mt: 1H); 4.52 (多重項: 1H); 4.82 (ブロード d, J = 9 Hz: 1H); 4.95 (dd, J = 10 及び 1.5 Hz: 1H); 5.63 (ddd, J = 16 - 5 及び 3.5 Hz: 1H); 5.88 (ブロード d, J = 16 Hz: 1H); 6.05 (ブロード d, J = 16 Hz: 1H); 6.12 (t, J = 3 Hz: 1H); 6.51 (dd, J = 16 及び 8 Hz: 1H); 7.48 (多重項: 1H).

〔実施例４〕
(１６Ｒ)−２０−ブロモ−１６−デオキソ−１６−フルオロプリスチナマイシンIIA
実施例１のように操作したが、しかし、無水テトラヒドロフラン１００cm³中の１０.６ｇ（１６Ｒ）−１６−デオキソ−１６−フルオロプリスチナマイシンIIAを用いて出発し、これにリチウムジイソプロピルアミド溶液（ｎ−ブチルリチウム５０cm³、テトラヒドロフラン３００cm³及びジイソプロピルアミン１１.２cm³から予め製造した）を４５分かけて加え、テトラメチルエチレンジアミン１２.１cm³、及びテトラヒドロフラン１００のcm³中の１,１−ジブロモ−１,１,２,２−テトラクロルエタン３９ｇを１５分かけて加えた。水性処理した後、褐色の油４３ｇを得、そしてジイソプロピルエーテルの存在下で４８時間撹拌した。生成した懸濁液を濾過してから乾燥させて橙色残留物１５ｇを得、これを、２回の連続したフラッシュクロマトグラフィ［溶出液：ジクロロメタン／メタノール／アセトニトリル（容量９４／３／３）、次いで酢酸エチル／シクロヘキサン（容量７０／３０）］によって精製した。予想生成物を含む画分を減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮した後、固形物を得、これをエチルエーテル３０cm³中に撹拌し、濾過してから減圧（２.７ｋｐａ）下で乾燥させて、約１０５℃で融解する淡黄色粉末の形態で(１６Ｒ)−２０−ブロモ−１６−デオキソ−１６−フルオロプリスチナマイシンIIA １.９ｇを得た。
1H NMR スペクトル (400 MHz, CDCl₃, ppmにおけるδ): 0.97 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 0.99 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.12 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.53 (d, J = 3 Hz: 1H); 1.75 (s: 3H); 1.90〜2.15 (mt: 2H); 2.30 (dddd, J = 30 - 16 - 5 及び 3 Hz: 1H); 2.60〜2.80 (mt: 2H); 2.83 (mt: 1H); 3.02 (ddd, J = 14 - 10 及び 7.5 Hz: 1H); 3.22 (二重項 t, J = 14 及び 3 Hz: 1H); 3.90 (ブロード d, J = 20 Hz: 1H); 4.05 (mt: 1H); 4.26 (mt: 1H); 4.25〜4.40 (多重項: 1H); 4.53 (d 多重項, JHF = 48 Hz: 1H); 4.64 (mt: 1H); 4.90〜5.00 (mt: 1H); 4.93 (dd, J = 10 及び 1.5 Hz: 1H); 5.69 (dt, J = 16 及び 4 Hz: 1H); 5.90 (ブロード d, J = 16 Hz: 1H); 6.01 (ブロード d, J = 16 Hz: 1H); 6.19 (t, J = 3 Hz: 1H); 6.60 (dd, J = 16 及び 7.5 Hz: 1H); 7.18 (多重項: 1H).

〔実施例５〕
(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−フルオロ−２０−ビニルプリスチナマイシンIIB
ビニルトリブチルスズ０.６２cm³、次いでテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム２５ｍｇを、アルゴン下、２０℃で、トルエン２１cm³及びＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド２.１cm³の混合物中の（１６Ｒ）−１６−デオキソ−１６−フルオロ−２０−ヨードプリスチナマイシンIIB ０.７ｇの溶液に急速に加えた。得られた褐色溶液を８０℃で２０時間加熱した。Clarcel^(R)を通して反応混合物を濾過し、そして得られた濾液に、酢酸エチル５０cm³を加えて希釈した。得られた溶液を、水３０cm³で２回、次いでブライン３０cm³で洗浄した。有機相を、硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、次いで減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮して固形残留物を得、これをシリカ上のフラッシュクロマトグラフィ[溶出液：ジクロロメタン／メタノール（容量９７／３）]によって精製した。予想生成物を含む画分を減圧（２.７ｋｐａ）下で濃縮した後、固形物を得、これをエチルエーテル３０cm³中に撹拌し、次いで濾過し、減圧（２.７ｋＰａ）下で乾燥させて、約１６０℃で融解する淡褐色粉末の形態で（１６Ｒ）−１６−デオキソ−１６−フルオロ−２０−ビニルプリスチナマイシンIIB ０.２２ｇを得た。
1H NMR スペクトル (400 MHz, CDCl₃, ppmにおけるδ): 0.96 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.00 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.11 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.66 (d, J = 3.5 Hz: 1H); 1.70〜2.05 (mt: 5H); 1.82 (s: 3H); 2.15 (mt: 1H); 2.25 (mt: 1H); 2.76 (mt: 1H); 2.92 (ddd, J = 24 - 17 及び 5 Hz: 1H); 3.18 (二重項 t, J = 17 及び 7 Hz: 1H); 3.48 (mt: 1H); 3.73 (mt: 1H); 4.09 (mt: 1H); 4.56 (mt: 1H); 4.80 (dd, J = 10 及び 1.5 Hz: 1H); 4.80〜4.90 (mt: 1H); 4.85 (dd, J = 9 及び 3.5 Hz: 1H); 5.15 (dmt, JHF = 48 Hz: 1H); 5.40〜5.50 (mt: 1H); 5.42 (dd, J = 11 及び 1 Hz: 1H); 5.70 (ddd, J = 16 - 9.5 及び 4 Hz: 1H); 5.83 (dd, J = 16 及び 1.5 Hz: 1H); 5.85 (dd, J = 18 及び 1 Hz: 1H); 5.93 (ブロード d, J = 9.5 Hz: 1H); 6.24 (ブロード d, J = 16 Hz: 1H); 6.52 (dd, J = 16 及び 4 Hz: 1H); 7.13 (dd, J = 18 及び 11 Hz: 1H).

(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−フルオロ−２０−ヨードプリスチナマイシンIIBは、以下の方法で得ることができる。
−７０℃に冷やしたリチウムジイソプロピルアミドの溶液を、アルゴン雰囲気下、−７
０℃で無水テトラヒドロフラン５０cm³中に溶解された(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−フルオロプリスチナマイシンIIB ２.６６ｇに１時間かけて加えた（リチウムジイソプロピルアミド溶液は、−４０℃で、ｎ−ブチルリチウム(ヘキサン中１.６Ｍ)１２.４cm³をテトラヒドロフラン５０cm³及びジイソプロピルアミン２.８cm³の溶液に加え、続いて５分かけて２０℃に加温させることによって予め製造した）。テトラメチルエチレンジアミン３cm³を、生成した橙色溶液に５分かけて加え、−７２℃で維持した。反応混合物を−７０℃で５分間撹拌した後、テトラヒドロフラン１０cm³中に溶解したヨウ素１.２７ｇをさらに−７０℃で１０分かけて加えた。混合物を、−７２℃で１５分間撹拌し、続いて酢酸５cm³、次いで水１０cm³を滴加し、一旦反応混合物を０℃に戻した。得られた混合物を水８００cm³及び酢酸エチル３００cm³中に取った。有機相を分離し、水性相を酢酸エチル３００cm³で抽出した。合わせた有機相を、洗浄後に水性相のｐＨを２に調節するため、１Ｎ塩酸を含む水３００cm³で洗浄した。生成した有機相を分離し、水５０cm³、５％炭酸水素ナトリウム水溶液、及びブライン５０cm³で逐次洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、そして減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮して乾燥状態にして褐色の固形物を得、これを同様の条件下で得た２つの異なるバッチと合わせた。この混合物（８.３ｇ）を、シリカ上のフラッシュクロマトグラフィ［溶出液：ジクロロメタン／メタノール（容量９７／３）］により精製した。減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮した後、無定形黄色粉末の形態で(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−フルオロ−２０−ヨードプリスチナマイシンIIB ０.７５ｇを得、これをさらに精製することなく使用した。
1H NMR スペクトル (400 MHz, CDCl₃, ppmにおけるδ): 0.94 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.00 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.11 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.55〜2.05 (mt: 5H); 1.80 (s: 3H); 2.15 (mt: 1H); 2.25 (mt: 1H); 2.75 (mt: 1H); 2.93 (ddd, J = 26 - 17 及び 5 Hz: 1H); 3.21 (二重項 t, J = 17 及び 7.5 Hz: 1H); 3.48 (mt: 1H); 3.63 (mt: 1H); 4.07 (mt: 1H); 4.56 (mt: 1H); 4.79 (dd, J = 10 及び 1.5 Hz: 1H); 4.80〜4.90 (mt: 1H); 4.89 (dd, J = 9 及び 4 Hz: 1H); 5.11 (d mt, JHF = 48 Hz: 1H); 5.42 (ブロード d, J = 9 Hz: 1H); 5.70 (ddd, J = 16 - 9 及び 4 Hz: 1H); 5.82 (dd, J = 16 及び 2 Hz: 1H); 5.92 (dd, J = 9 及び 2.5 Hz: 1H); 6.24 (ブロード d, J = 16 Hz: 1H); 6.52 (dd, J = 16 及び 5 Hz: 1H).

〔実施例６〕
２０−メチルプリスチナマイシンIIA
ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中１.６Ｍ）５.９cm³を、アルゴン雰囲気下、−３０℃で塩化リチウム１.２ｇ（減圧下、１５０℃で予め乾燥させた）、無水テトラヒドロフラン３５cm³及びジイソプロピルアミン１.３３cm³の混合物に滴加した。添加後、混合物を０℃に加温させてから再び−７０℃に冷やした。次いで、無水プリスチナマイシンIIA１ｇを含む無水テトラヒドロフランの溶液５０cm³を、生成した混合物に３０分かけて加えた。無水プリスチナマイシンIIAは、プリスチナマイシンIIA ４０ｇを含むトルエン／ジクロロメタン溶液（４００cm³／８００cm³）を（２.７ｋＰａ）ロータリーエバポレーターを用いて最高４０℃で、４時間かけて減圧下で濃縮して乾燥状態にすることにより予め得た。

反応混合物を−７０℃で５分間撹拌した後、ヨウ化メチル１.１８cm³を、急速に加えた。混合物を−７０℃で１時間撹拌してから−３０℃に加熱した。次いで、酢酸２cm³を加え、反応混合物の温度を、０℃まで上昇させ、次いで水５０cm³を加えた。有機相を分離し、水性相を酢酸エチル５０cm³で２回抽出した。合わせた有機相をブライン５０cm³で洗浄してから硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、そして減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮して乾燥状態にして褐色の油１ｇを得、これをメチルイソブチルケトン１５cm³からの結晶化によって精製した。得られた固形物を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、次いで大気圧で乾燥させて、約１４８℃で融解する白色結晶の形態で２０−メチルプリスチナマイシンIIA ０.４ｇを得た。

〔実施例７〕
(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−ヒドロキシ−２０−メチルプリスチナマイシンIIB
無水(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−ヒドロキシプリスチナマイシンIIB ３ｇ及び無水テトラヒドロフラン２００cm³を、アルゴン雰囲気下、−７１℃で４５分かけて市販リチウムジイソプロピルアミド（ＴＨＦ／ヘプタン／エチルベンゼン混合物中２Ｍ）１５.６cm³に滴下した。添加した後、緑青色反応混合物を、−７１℃で１０分間撹拌し、続いて、無水テトラヒドロフラン２０cm³中のヨウ化メチル０.４２cm³の溶液を−７５℃で２５分かけて加えた。添加した後、混合物を−７０℃で１時間撹拌してから、水４００cm³及び１０％リン酸水溶液４２cm³の混合物中に注いだ。得られた混合物を、酢酸エチル１５０cm³で３回抽出した。合わせた有機相をブライン２００cm³で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、次いで減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮して乾燥状態にして残留物を得、これを分取ＨＰＬＣ［Kromasil Ｃ８、１０μm；溶出液：水／アセトニトリル（容量７０／３０）］によって精製した。予想生成物を含む画分を減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮して水性相を得、これを塩で飽和させてから酢酸エチルで抽出した。有機相を、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、そして減圧（２.７ｋＰａ）下、４０℃で濃縮して乾燥状態にして１３１℃から融解が始まる白色固形物の形態で(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−ヒドロキシ−２０−メチルプリスチナマイシンIIB ０.２７ｇを得た。無水(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−ヒドロキシプリスチナマイシンIIBは、(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−ヒドロキシプリスチナマイシンIIB ２０ｇを含むトルエン溶液（３００cm³）から予め得、これを、ロータリーエバポレーターを用いて最高４０℃で減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮して乾燥状態にした。残留物を減圧（２.７ｋＰａ）下で乾燥させて無水(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−ヒドロキシプリスチナマイシンIIB １９.５ｇを得た。

(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−ヒドロキシプリスチナマイシンIIBは、以下の方法で得ることができる：
ジクロロメタン５５０cm³中の水素化ホウ素ナトリウム１１.３５ｇの懸濁液を２０分間還流させた。次いで、酢酸６８.６cm³を約３０分かけて滴加し、続いてジクロロメタン２３０cm³中のプリスチナマイシンIIB ５２.７５ｇの溶液（硫酸ナトリウムで予め乾燥させた）を約４５分かけて滴加した。反応混合物を還流で４.５時間、次いで２０℃で１６時間撹拌した。次いで、ジクロロメタン５００cm³及び水１５００cm³を反応混合物に加えた。相を沈降させた後、有機相を分離し、水性相を塩化メチレン５００cm³で抽出した。有機相を合わせて、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１０００cm³をゆっくりと添加することによってｐＨを８に調節した。生成した有機相を水１０００cm³及び飽和塩化ナトリウム水溶液１０００cm³で逐次洗浄し、次いでブラック３Ｓで処理し、硫酸ナトリウムで乾燥、Celite^(R)を通して濾過し、そして減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮して乾燥状態にして淡黄色固形物５０ｇを得た。０.５Ｍ水酸化アンモニウム水溶液３７８cm³を、２０℃で塩化メチレン９００cm³中の上記固形物の溶液に加えた。２０℃で１６時間撹拌した後、相を沈降させた後、有機相を分離し、水１０００cm³、次いで飽和塩化ナトリウム水溶液１０００cm³で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、そして減圧（２.７ｋＰａ）下で濃縮して乾燥状態にして淡黄色固形物４６ｇを得、これをフラッシュクロマトグラフィ［溶出液：塩化メチレン／メタノール勾配（容量９８／２、次いで９７／３）］によって精製した。画分を濃縮した後、約１４０℃（分解）で融解するオフホワイトのフォーム形態で(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−ヒドロキシプリスチナマイシンIIB ８.５７ｇを得た。
1H NMR スペクトル (400 MHz, CDCl₃, ppmにおけるδ): 0.96 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.00 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.10 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.70〜2.05 (mt: 6H); 1.81 (s: 3H); 2.05〜2.20 (mt: 2H); 2.76 (mt: 1H); 2.84 (dd, J = 16 及び 5.5 Hz: 1H); 3.00 (dd, J = 16 及び 7 Hz: 1H); 3.04 (d, J = 4 Hz: 1H); 3.45 (ddd, J = 16 - 9 及び 4 Hz: 1H); 3.90 (mt: 1H); 4.04 (mt: 1H); 4.27 (mt: 1H); 4.48 (ddd, J = 16 - 9 及び 4 Hz: 1H); 4.80 (dd, J = 10 及び 2 Hz: 1H); 4.84 (dd, J = 9 及び 3.5 Hz: 1H); 4.88 (mt: 1H); 5.44 (ブロード d, J = 9 Hz: 1H); 5.67 (ddd, J = 16 - 9 及び 4 Hz: 1H); 5.80 (dd, J = 16 及び 1.5 Hz: 1H); 5.95 (dd, J = 9 及び 4 Hz: 1H); 6.19 (ブロード d, J = 16 Hz: 1H); 6.53 (dd, J = 16 及び 5 Hz: 1H); 8.16 (s: 1H).

〔実施例８〕
(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−メトキシ−２０−メチルプリスチナマイシンIIB
(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−メトキシプリスチナマイシンIIBを出発物質とし、前記実施例に記載された方法に従って操作して、１４５℃から融解が始まる淡黄色固形物の形態で(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−メトキシ−２０−メチルプリスチナマイシンIIBを製造した。
1H NMR スペクトル (300 MHz, CDCl₃, ppmにおけるδ): 0.97 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.03 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.11 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.70〜2.20 (mt: 7H); 1.83 (s: 3H); 2.55 (s: 3H); 2.71 (dd, J = 16 及び 8.5 Hz: 1H); 2.76 (mt: 1H); 3.11 (dd, J = 16 及び 4 Hz: 1H); 3.42 (s: 3H); 3.55 (ddd, J = 16 - 8.5 及び 3.5 Hz: 1H); 3.70〜3.90 (mt: 2H); 3.97 (mt: 1H); 4.45 (ddd, J = 16 - 8 及び 4 Hz: 1H); 4.65〜4.85 (mt: 3H); 5.44 (ブロード d, J = 9 Hz: 1H); 5.72 (ddd, J = 16 - 8.5 及び 4 Hz: 1H); 5.82 (dd, J = 16 及び 1.5 Hz: 1H); 5.94 (mt: 1H); 6.22 (ブロード d, J = 16 Hz: 1H); 6.53 (dd, J = 16 及び 5 Hz: 1H)

(１６Ｒ)−１６−デオキソ−１６−メトキシ−２０−メチルプリスチナマイシンIIBは、特許出願ＦＲ００１６８０３に記載された通り製造することができる。
また、本発明は、本発明による少なくとも一つのストレプトグラミン誘導体を、純粋な形態で、少なくとも一つのグループＢのストレプトグラミン誘導体と組み合わせて、必要
に応じて塩形態で、及び／又は一つまたはそれ以上の適合しうる及び医薬上許容しうる希釈剤又は補助剤と組み合わせた形態で含んでなる医薬組成物に関する。

本発明による組成物は、経口的に、非経口的に、局所的に、直腸に、又はエアゾル剤として使用することができる。

使用することができる経口投与のための固体組成物としては、錠剤、丸剤、ゲルカプセル剤、散剤又は顆粒剤が包含される。これらの組成物では、一般に組み合せ形態の本発明の活性生成物を、一つまたはそれ以上の不活性希釈剤又は補助剤、例えばスクロース、ラクトース又はデンプンと混合する。これらの組成物は、希釈剤以外の物質、例えば滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、又は持続放出のためのコーティングを含むことができる。

使用することができる経口投与のための液体組成物としては、医薬上許容しうる液剤、懸濁剤、乳濁液、シロップ剤及びエリキシル剤が包含される、上記には、不活性希釈剤、例えば水又は流動パラフィンが含まれる。また、これらの組成物は、希釈剤以外の物質、例えば湿潤、甘味又は香味生成物を含むことができる。

非経口投与のための組成物は、滅菌液又は乳濁液であることができる。使用できる溶媒又はビヒクルとしては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、特にオリーブ油及び注射可能な有機エステル、例えばオレイン酸エチルが包含される。また、これらの組成物は、補助剤、特に湿潤剤、等張剤、乳化剤、分散剤及び安定剤を含むことができる。

滅菌は、いくつかのやり方、例えば細菌学的濾過器を使用して、照射によって、又は加熱によって実施することができる。また、それは、滅菌水又は他のいずれの注射可能な滅菌媒体中に使用する時に溶解することができる滅菌固形組成物の形態で製造することができる。

局所投与のための組成物は、例えばクリーム剤、軟膏剤、ローション剤またはエアゾル剤であることができる。
直腸投与のための組成物は、坐剤又は直腸投与カプセルであり、それらは、活性成分の他に、賦形剤、例えばカカオ脂、半合成グリセリド又はポリエチレングリコールを含む。

また、組成物は、エアゾル剤であることができる。液体エアゾル剤の形態で使用する場合、組成物は、使用時に非発熱性滅菌水（apyrogenic sterile water）中、生理食塩水中、又は他のいずれの医薬上許容しうるビヒクル中に溶解する安定な滅菌溶液又は固形組成物であることができる。直接吸入するための乾燥エアゾル剤の形態で使用する場合、活性成分を微粉砕し、そして３０〜８０μmの粒径を有する固体の水溶性希釈剤又はビヒクル、例えばデキストラン、マンニトール又はラクトースと組み合わせる。

ヒトの治療では、本発明による新規なストレプトグラミン誘導体は、特に細菌由来の感染の治療に有用である。用量は、所望の効果及び治療期間に左右される。医師は、治療に応じて、年齢、体重、感染の程度及び治療する人のその他の個人的な因子によりもっとも適当であると考えられる用量を決定する。一般に、用量は、成人について経口的又は非経口的に１日当たり２又は３回の投与で、活性生成物０.５〜３ｇの間である。
以下の実施例は、本発明による組成物を説明する。

〔実施例〕
活性生成物２５０mg用量を含み下記の組成物を有する錠剤を通常の技術により製造した：
−(１６Ｒ)−２０−ブロモ−１６−デオキソ−１６−フルオロプリスチナマイシンIIＡ……１７５mg
−プリスチナマイシンＩＢ……７５mg
−賦形剤：デンプン、水和シリカ、デキストリン、ゼラチン、ステアリン酸マグネシウム：適量……５００mg

Claims

一般式

（式中、
・Ｒ１は、ハロゲン原子又はヒドロキシル、アルキルオキシ、アジドもしくはチオシアナト基を表すか、又はＲ１は、基−ＮＲ'Ｒ''を表し、その際、Ｒ'は、水素原子又はメチル基であり、そしてＲ''は、水素原子又はアルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニルもしくはベンジル基、又は−ＯＲ'''であり、Ｒ'''は、水素原子又はアルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニルもしくはベンジル基であり、又は別の場合、Ｒ''は、−ＮＲ^oＲ^ooを表し、Ｒ^o及びＲ^ooは、メチル基を表すことができ、又はそれらが結合している窒素原子と共に、窒素、酸素及び硫黄から選ばれる別のヘテロ原子を含みうる飽和又は不飽和の４又は５員複素環を形成し、そして
・Ｒ'１は、水素原子を表すか、又は
・Ｒ１及びＲ'１は、一緒になってオキソ基を形成し、
・Ｒ２は、ハロゲン原子又はアルキル、アルケニルもしくはアルキニル、フェニルもしくはヘテロアリール基、又はアルキルチオ、フェニルチオもしくはヘテロアリールチオ基を表し、
・Ｒ３は、水素原子又はメチルもしくはエチル基であり、そして
・結合---は、単結合（２７Ｒ立体化学）又は二重結合を表し、
アルキル基は、直鎖又は分枝鎖中に１〜６個の炭素を含み、そしてアルケニル及び／又はアルキニル基は、直鎖又は分枝鎖中に２〜６個の炭素を含む）
のグループＡのストレプトグラミン誘導体、及び、また、存在する場合、その塩。
金属化を、一般式

（式中、Ｒ'１、Ｒ３及び結合---は、上記定義された通りであり、そしてＲ１は、フッ素原子又はヒドロキシルもしくはアルキルオキシ基を表すか、又は基−ＮＲ'Ｒ''を表し、その際、Ｒ'は、Ｈ又はメチル基であり、そしてＲ''は、Ｈ又はアルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニルもしくはベンジル基、又は−ＯＲ'''であり、Ｒ'''は、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニルもしくはベンジルであり、又は別の場合、Ｒ''は、−ＮＲ^oＲ^ooを表し、Ｒ^o及びＲ^ooは、メチルであることができ、又はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、窒素、酸素及び硫黄から選ばれる別のヘテロ原子を含みうる飽和又は不飽和の４又は５員複素環を形成し、又は別の場合、Ｒ１及びＲ'１は、一緒になってオキソ基を形成する）のストレプトグラミン誘導体で実施し、アミドを連続的に作用させ、次いで、一般式：
Ｒ２−Ｘ (III)
（式中、Ｒ２は、ハロゲン原子、アルキル、アルケニル又はアルキニル基であるが、ビニル又はエチニル基を表すことはなく、そしてＸは、ハロゲン原子又はスルホニルオキシ基を表す）によって表すことができる求電子試薬を作用させ、又は別法として、Ｒ２がアルキルチオ、フェニルチオ又はヘテロアリールチオである場合、ジスルフィドを作用させ、続いて、必要に応じて、請求項１に記載のストレプトグラミン誘導体（式中、Ｒ２は、塩素、臭素又はヨウ素原子である）を請求項１に記載のストレプトグラミン誘導体（式中、Ｒ２は、ビニル、エチニル、フェニル又はヘテロアリール基である）に転化し、及び／又は、必要に応じて、請求項１に記載のストレプトグラミン誘導体（式中、Ｒ１及びＲ'１は、一緒になってオキソ基を形成する）を対応する誘導体（式中、Ｒ１は、塩素、臭素もしくはヨウ素原子又はアジドもしくはチオシアナト基であり、そしてＲ'１は、水素原子である）に転化し、及び／又は、続いて請求項１に記載のストレプトグラミン誘導体（式中、結合---は、二重結合である）を請求項１に記載のストレプトグラミン誘導体（式中、結合---は、単結合である）に転化することによって実施する、請求項１に記載のグループＡのストレプトグラミン誘導体の製造方法。
求電子試薬が、Ｎ−ブロモスクシンイミド又はＮ−クロロスクシンイミド、１,１,２,２−テトラフルオロ−１,２−ジクロロ−もしくはジブロモエタン、１,２−ジブロモ−１,１,２,２−テトラクロロエタン、１,２−ジヨードエタンもしくは１,２−ジブロモエタン、１−クロロ−２−ヨードエタン及びヘキサクロロアセトンから選ばれたハロゲン供与体であることができるか、又はトシルシアニドのようなシアノ供与体であることができる、請求項１に記載のグループＡのストレプトグラミン誘導体の請求項２に記載の製造方法。
置換基の性質に応じて、そして結合---が二重結合又は単結合であるかどうかに応じて、一般式

（ここで、Ｒ３は、請求項１で定義された通りであり、そしてＲ１は、フッ素原子もしくはアルキルオキシ基を表すか、又は基−ＮＲ'Ｒ''を表し、その際、Ｒ'はメチル基であり、そしてＲ''は、アルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニルもしくはベンジル基、又は−ＯＲ'''であり、Ｒ'''は、Ｈ、アルキル、シクロアルキル、アリル、プロピニルもしくはベンジルであるか、又は別の場合、Ｒ''は、−ＮＲ^oＲ^ooを表し、Ｒ^o及びＲ^ooは、メチルであることができ、又はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、さらに窒素、酸素及び硫黄から選ばれる別のヘテロ原子を含みうる飽和又は不飽和の４又は５員複素環を形成する）の構造に対応する、グループＡのストレプトグラミンから誘導されたポリアニオン。
請求項１に記載のグループＡのストレプトグラミン誘導体を、純粋な形態で、又は少なくとも一つのグループＢのストレプトグラミン誘導体と組み合わせた形態で、及び／又は一つまたはそれ以上の適合しうる、また医薬上許容しうる希釈剤又は補助剤と組み合わせた形態で、含有する医薬組成物。