PT1461342E - Derivados de estreptograminas, sua preparação e as composições que os contêm - Google Patents

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DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE ESTREPTOGRAMINAS, SUA PREPARAÇÃO E AS COMPOSIÇÕES QUE OS CONTÊM" A presente invenção refere-se a derivados do grupo A das estreptograminas de fórmula geral:

O

(i) que apresentam uma actividade antibacteriana particularmente interessante.

De entre as estreptograminas conhecidas, a pristinamicina (RP 7293), antibacteriano de origem natural produzido por Streptomyces pristinaespiralis, foi isolada pela primeira vez em 1955. A pristinamicina, comercializada sob o nome de Pyostacine®, é constituída, principalmente, por pristinamicina IIA associada a pristinamicina IA.

Um outro antibacteriano da classe das estreptograminas: a virginiamicina, foi isolada a partir de Streptomyces virginiae, ATCC 13161 [Antibiotics and Chemotherapy, 5, 632 (1955)]. 1 A virginiamicina (Staphylomicine®) é constituída principalmente pelo factor Mi (VM1) associado ao factor S (VS). A patente US-A-5242938 refere-se a Virginiamicinas Ml que são preparadas por substituições na posição 14-OH ou/e 16-OH. F. Le Goffic et al.r Eur J. Med. Chem. Chimica Therapeutica, 16(1), 69-72 (1981) descreveram a preparação de derivados di-hidroxilados da pristinamicina IIA.

Foram descritos, no pedido de patente GB 2206879, derivados modificados do grupo A das estreptograminas de estrutura:

O

OH (0)n no entanto, esses derivados apresentam uma fraca actividade.

Constatou-se agora que os derivados de estreptogramina do grupo A de fórmula geral (I), na qual:

Ri representa um átomo de halogéneo ou um radical hidroxilo, alquiloxilo, azido, tiocianato, ou Ri representa um radical -NR'R'', para o qual R' é um átomo de hidrogénio ou um radical metilo, e R'' é um átomo de hidrogénio, um radical alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo, benzilo, ou -OR''', sendo R''' um átomo de hidrogénio, um radical 2 alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo ou benzilo, ou R' ' representa -NR°R°0, podendo R° e R00 representar um radical metilo ou formar, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, um heterociclo de 4 ou 5 membros, saturado ou insaturado podendo, além disso, conter um outro heteroátomo seleccionado de azoto, oxigénio ou enxofre, e R'i representa um átomo de hidrogénio ou,

Ri e R'i formam, em conjunto, um radical oxo, R2 representa um átomo de halogéneo ou um radical alquilo, alcenilo ou alcinilo, fenilo ou heteroarilo, ou um radical alquiltio, feniltio ou heteroariltio, I R3 é um átomo de hidrogénio ou um radical metilo ou etilo, e a ligação — representa uma ligação simples (estereo--química 27R) ou uma ligação dupla, os radicais alquilo contendo 1 a 6 carbonos em cadeia linear ou ramificada e os radicais alcenilo e/ou alcinilo contendo 2 a 6 carbonos em cadeia linear ou ramificada, apresentam uma actividade antibacteriana particularmente interessante, nomeadamente, em germes bacterianos resistentes, sozinhos ou associados a um derivado de estreptogramina do grupo B.

De acordo com a invenção, quando Ri e/ou R2 é um átomo de halogéneo, pode representar o flúor, o cloro, o bromo ou o iodo; quando R2 é um radical heteroarilo ou heteroariltio, esse último 3 é mono ou bicíclico e compreende 1 a 4 heteroátomos seleccionados de azoto, oxigénio ou enxofre. A titulo de exemplo, quando R2 é um radical heteroarilo ou heteroariltio, o radical heteroarilo pode ser seleccionado de entre piridilo, tienilo, furilo, pirrolilo, imadozolilo, pirazinilo, quinolilo, isoquinolilo, indolilo, oxazolilo, tiazolilo, pirazolilo, indazolilo, tiadiazolilo ou oxadiazolilo.

De acordo com a invenção, os derivados de estreptogramina de fórmula geral (I) podem ser preparados por metalação de um derivado de estreptogramina de fórmula geral:

O

(II) na qual R'i, R3 e a ligação III são definidos como anteriormente, e Ri representa um átomo de flúor ou um radical hidroxilo, alquiloxilo, ou representa um radical -NR'R'para o qual R' é H ou um radical metilo, e R'' é H, um radical alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo, benzilo, ou -0R''', sendo R' '' H, alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo ou benzilo, ou R'' representa -NR°R°0, podendo R° e R00 ser metilo ou formar, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, um heterociclo de 4 ou 5 membros, saturado ou insaturado podendo, além disso, conter um outro heteroátomo seleccionado de azoto, oxigénio ou enxofre, ou Ri e R'i formam, em conjunto, um radical 4 0X0, por acção, sucessivamente, de um amideto para dar um polianião que responde, de acordo com a natureza dos substituintes e desde que se proceda a partir de um derivado de estreptograminas de fórmula geral (II), para o qual a ligação m é uma ligação dupla ou uma ligação simples, com as estruturas de fórmulas gerais:

5

e para as quais R3 é definido como anteriormente, e Ri representa um átomo de flúor ou um radical alquiloxilo, ou representa um radical -NR'R'', para o qual R' é um radical metilo, e R'' é um radical alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo, benzilo, ou -0R''', sendo R'' ' H, alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo ou benzilo, ou R'' representa -NR°R00, podendo R° e R00 ser metilo ou formar, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, um heterociclo de 4 ou 5 membros, saturado ou insaturado podendo, além disso, conter um outro heteroátomo seleccionado de azoto, o oxigénio o enxofre, depois, por acção de um agente electrófilo, podendo ser representado pela fórmula geral: r2-x (III) na qual R2 é um átomo de halogéneo, um radical alquilo, um 6 radical alcenilo ou alcinilo, com a excepção de representar um radical vinilo ou etinilo, e X representa um átomo de halogéneo ou um radical sulfoniloxilo, ou por acção de um dissulfureto quando R2 é alquiltio, feniltio ou heteroariltio, seguido, se necessário, da transformação de um derivado de estreptogramina de fórmula geral (I), para o qual R2 é um átomo de cloro, bromo ou iodo, num derivado de estreptogramina de fórmula geral (I), para o qual R2 é radical vinilo, etinilo, fenilo ou heteroarilo e/ou, se necessário, transformação do derivado de estreptogramina de fórmula geral (I), para o qual Ri e R'i formam, em conjunto, um radical oxo, num derivado correspondente para o qual Ri é um átomo de cloro, de bromo ou de iodo ou um radical azido ou tiocianato e R'i é um átomo de hidrogénio e/ou seguido da transformação de um derivado de estreptogramina de fórmula geral (I) , para o qual a ligação — é uma ligação dupla num derivado de estreptogramina de fórmula geral (I), para o qual a ligação — é uma ligação simples. A reacção de metalação realiza-se, em geral, a uma temperatura compreendida entre -100 e -20 °C, na presença de 4 a 7 equivalentes de um amideto, de um modo preferido, um amideto de litio, por exemplo, seleccionado de entre o diisopropilamideto de litio ou o 2,2,6,6-tetrametilpiperidina amideto de litio, num solvente anidro, nomeadamente, um éter como, por exemplo, o tetra-hidrofurano anidro, eventualmente na presença de um co-solvente como a 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetra--hidro-2(1H)-pirimidinona ou a hexametilfosforotriamida, na presença ou não de aditivos como, por exemplo, a tetrametilenodiamina, o diazabiciclo[2,2,2]octano ou o cloreto de litio anidro. É vantajoso proceder em meio inerte, por exemplo, sob árgon. 7 A reacção do agente electrófilo [nomeadamente representado pela fórmula geral (III)] realiza-se a uma temperatura compreendida entre -80 e 20 °C. De um modo vantajoso, o reagente electrófilo é seleccionado de entre os halogenetos ou os sulfonatos de alquilo, de alilo, de propargilo, de benzilo ou de heteroarilmetilo, ou ainda seleccionado de entre o bromo ou o iodo ou o cloreto de iodo, também pode ser seleccionado de entre os dadores de halogéneo (por exemplo, N-bromo ou N-clorossuccinimida, 1,1,2,2-tetra--fluoro-1,2-dicloro ou dibromoetano, o 1,2-dibromo-l,1,2,2--tetracloroetano, o 1,2-diiodoetano ou o 1,2-dibromoetano, o l-cloro-2-iodoetano, a hexacloroacetona) . De um modo vantajoso, procede-se num solvente orgânico como um éter, por exemplo, tetra-hidrofurano. A operação subsequente de transformação de um derivado de estreptogramina de fórmula geral (I), para o qual R2 é cloro, bromo ou iodo, num derivado de estreptogramina de fórmula geral (I) , para o qual R2 é vinilo, etinilo, fenilo ou heteroarilo, realiza-se, de um modo preferido, a partir de um derivado para o qual o halogéneo é bromo ou iodo, por acção de um derivado de estanho (por exemplo, viniltributilestanho, viniltrimetilestanho), ou de um derivado do boro (por exemplo, ácido borónico, ou derivado do 9-bora-biciclo[3,3,1]nonano), ou de um derivado do zinco (por exemplo, de estrutura R2ZnCl) na presença de um catalisador como um derivado do paládio (por exemplo, o tetraquis-trifenilfosfina paládio), na presença ou não de uma fosfina (como por exemplo, a tetraquis- -trifenilfosfina), de uma base (como por exemplo uma base azotada: trietilamina, dietilamina, piperidina, ou um carbonato: carbonato de sódio ou de potássio) e, eventualmente, na presença de um co-catalisador como um sal de cobre (Cul), num solvente orgânico inerte, ou uma mistura de solventes, como um hidrocarboneto aromático (por exemplo, o tolueno), um nitrilo (acetonitrilo), uma amida (como por exemplo, a dimetilformamida) ou um éter (tetra-hidrofurano) a uma temperatura compreendida entre 20 °C e a temperatura de refluxo da mistura reaccional. A operação subsequente de transformação de um derivado de estreptogramina de fórmula geral (I), para o qual Ri e R'i formam, em conjunto, um radical oxo, num derivado correspondente para o qual Ri é um átomo de cloro, de bromo ou de iodo ou um radical azido ou tiocianato e R'i é um átomo de hidrogénio, realiza-se de acordo com o pedido descrito no pedido de patente internacional WO 01/02427 aqui incorporado por referência.

Quando Ri e R'i são definidos como anteriormente, à excepção de representar, em conjunto, um radical oxo, a operação subsequente de transformação de um derivado de estreptogramina de fórmula geral (I) , para o qual a ligação — é uma ligação dupla, num derivado de estreptogramina de fórmula geral (I), para o qual a ligação — é uma ligação simples (estereoquimica 27R), realiza-se, em geral, por redução com um hidreto alcalino (por exemplo, boro-hidreto de sódio, boro-hidreto de lítio), num solvente, tal como um éter (por exemplo, tetra-hidrofurano), a uma temperatura compreendida entre 0 e 60 °C. A separação dos 2 epimeros em C27 realiza-se de acordo com os métodos correntes que não alteram o resto da molécula, nomeadamente, por cristalização ou cromatografia.

Os derivados de estreptogramina do grupo A de fórmula geral (II), para os quais Ri é um átomo de flúor ou um radical -NR'R'', para o qual R' é um átomo de hidrogénio ou um radical metilo, e R'' é um átomo de hidrogénio, um radical alquilo, 9 cicloalquilo, alilo, propinilo, benzilo, ou -0R''' , sendo R' ' ' um átomo de hidrogénio, um radical alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo ou benzilo, ou R' ' representa -NR°R00, podendo R° e R00 representar um radical metilo ou formar, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, um heterociclo de 4 ou 5 membros, saturado ou insaturado podendo, além disso, conter um outro heteroátomo seleccionado de azoto, oxigénio ou enxofre, podem ser preparados de acordo, ou por analogia, com os métodos descritos nos pedidos internacionais WO 99/05165 e WO 01/02427. 0 derivado di-hidroxilado de estreptogramina de fórmula geral (II) pode ser obtido de acordo com os métodos descritos por F. Le Goffic et al., Eur J. Med. Chem. Chimica Therapeutica, 16(1), 69-72 (1981) ou no pedido de patente FR 2795733. A separação da forma de epimero 16R e da forma de epímero 16S realiza-se de acordo com os métodos correntes; por exemplo, a separação das formas de epímeros pode realizar-se por cromatografia, cromatografia flash, cromatografia líquida de elevada performance (HPLC), em fase quiral ou não, ou cromatografia de partição centrífuga (CPC), a partir da mistura dos epímeros 16R e 16S, ou por cristalização.

Os derivados de estreptogramina de fórmula geral (II), para os quais Ri é um radical alquiloxilo, podem ser preparados por acção de um derivado de fórmula geral: alq-X (V) para o qual alq representa o radical alquilo correspondente e X representa um átomo de halogéneo, ou um radical metilsulfoniloxilo, p-toluenossulfoniloxilo ou 10 trifluorometilsulfoniloxilo, na presença de um agente de transferência de fase, num derivado di-hidroxilado de estreptogramina de fórmula geral:

O

na qual R3 e a ligação — são definidos como anteriormente, e em que, eventualmente, a função hidroxilo na posição 14 e/ou a função amida na posição 8 foram previamente protegidas, seguido, se necessário, da eliminação do/dos radical(ais) protector(es).

De um modo preferido, quando X é um átomo de halogéneo, faz-se reagir um derivado de fórmula geral (V) , para o qual X é um átomo de bromo ou de iodo.

De um modo vantajoso, o agente de transferência de fase é seleccionado de entre os derivados de amónio quaternários (por exemplo, os sais de tetra-alcoilamónio ou de trialcoilbenzilamónio como 0 cloreto, o brometo ou o sulfato).

Em geral, a reacção realiza-se em meio básico, por exemplo, na presença de hidróxido de sódio ou de potássio ou na presença de carbonato de potássio ou de carbonato de césio, a uma temperatura compreendida entre 10 e 60 °C, em meio hidro--orgânico, por exemplo, num hidrocarboneto (por exemplo, tolueno), um solvente halogenado (por exemplo, diclorometano) ou 11 um éster (nomeadamente, acetato de etilo). De um modo preferido, procede-se a cerca de 20 °C. Também de um modo preferido, procede-se na presença de um excesso do derivado de fórmula geral (V). A protecção e a desprotecção do radical hidroxilo na posição 14 ou da amida na posição 8 realiza-se de acordo com os métodos correntes que não alteram o resto da molécula, nomeadamente, por aplicação dos métodos descritos por T.W. Greene e P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis (2a ed.), A. Wiley-Interscience Publication (1991), ou por

Mc Omie, Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum

Press (1973). Por exemplo, a protecção do radical hidroxilo realiza-se com um radical alilo que é introduzido e eliminado de acordo com os métodos conhecidos. A protecção da amida pode realizar-se, nomeadamente, com o radical t-butoxicarbonilo.

Quando a reacção conduz a uma mistura dos isómeros 14- e 16-O-alcoilados, esses últimos podem ser separados de acordo com os métodos correntes que não alteram o resto da molécula, nomeadamente, por cromatografia [Cromatografia Liquida de

Elevada Performance (HPLC) em fase normal ou reversa, em fase quiral ou não, ou por cromatografia flash] ou por cristalização.

Os derivados de pristinamicina de fórmula geral (IV) correspondem, respectivamente, à pristinamicina IIA (PIIA), à pristinamicina IIB (PIIB), à pristinamicina IIC (PIIC), à pristinamicina IID (PHD) , à pristinamicina IIF (PIIF) e à pristinamicina IIG (PIIG) as quais são componentes conhecidos da pristinamicina natural. Os componentes PIIF e PIIG foram descritos na patente europeia EP 614910. A pristinamicina IIC (PIIC) e a pristinamicina IID (PIID) podem ser obtidas como 12 descrito por J.C. Barrière et al., Expert. Opin. Invest. Drugs, 3(2) , 115-31 (1994) .

Os derivados de pristinamicina de fórmula geral (IV) estão representados a seguir:

O

(IV) na qual R3 é um átomo de hidrogénio ou um radical metilo ou etilo, e a ligação — representa uma ligação simples (estereoquimica 27R) ou uma ligação dupla. A preparação e a separação dos componentes das estreptograminas naturais do grupo A [estreptograminas de fórmula geral (IV)] é realizada por fermentação e isolamento dos constituintes a partir do mosto de fermentação de acordo, ou por analogia, com o método descrito por J. Preud'homme et al., Buli. Soc. Chim. Fr., vol. 2, 585 (1968) ou na patente europeia EP 614910. Em alternativa, a preparação dos componentes naturais do grupo A pode ser realizada por fermentação especifica, como descrito no pedido de patente FR 2689518. 13

Os derivados de estreptogramina de fórmula geral (I) podem ser purificados, se necessário, por métodos fisicos, tais como a cristalização, a cromatografia ou a CPC.

Os derivados de estreptogramina de fórmula geral (I) , para os quais Ri representa um radical -NR'R'', podem ser transformados na forma de sais de adição de ácidos pelos métodos conhecidos. Entender-se-á que esses sais, quando existem, também estão no âmbito da presente invenção.

Como exemplos de sais de adição de ácidos farmaceuticamente aceitáveis, podem ser citados os sais formados com os ácidos minerais (cloridratos, bromidratos, sulfatos, nitratos, fosfatos) ou com os ácidos orgânicos (succinatos, fumaratos, tartaratos, acetatos, propionatos, maleatos, citratos, metanossulfonatos, etanossulfonatos, fenilsulfonatos, p-toluenossulfonatos, isetionatos, naftilsulfonatos ou canforsulfonatos, ou com derivados de substituição desses compostos) .

Entender-se-á que as associações formadas pelos derivados de acordo com a invenção e das estreptograminas do grupo B também estão no âmbito da presente invenção.

Os derivados de estreptogramina de acordo com a presente invenção apresentam propriedades antibacterianas e propriedades sinérgicas da actividade antibacteriana dos derivados de estreptogramina do grupo B. São particularmente interessantes do pela sua actividade potente, sozinhos ou associados.

Quando estão associados com um componente ou um derivado do grupo B das estreptograminas, esses últimos podem ser 14 seleccionados conforme se pretende obter uma forma administrável por via oral ou parentérica, de entre os componentes naturais: pristinamicina IA, pristinamicina IB, pristinamicina IC, pristinamicina ID, pristinamicina IE, pristinamicina IF, pristinamicina IG, virginiamicina Sl, S3 ou S4, vernamicina B ou C, etamicina ou de entre os derivados de hemi-síntese, tais como descritos nas patentes ou pedidos de patente US 4618599, US 4798827, US 5326782, US 5786449, WO 01/10895, WO 01/07467, EP 772630, EP 770132 ou EP 1056071.

Os derivados de estreptogramina, de acordo com a presente invenção, apresentam as propriedades antibacterianas e propriedades sinérgicas da actividade antibacteriana dos derivados de estreptogramina do grupo B, nomeadamente, em Staphylococcus Epidermidis N52 ou nas estirpes resistentes como Staphylococcus aureus Stephan. São particularmente interessantes pela sua actividade potente, sozinhos ou associados.

In vitro, em Staphylococcus Epidermidis N52, os derivados de estreptogramina de acordo com a invenção revelaram-se activos a concentrações compreendidas entre 1 e 64 pg/mL, sozinhos, ou entre 0,25 e 32 pg/mL associados a um derivado do grupo B, como a pristinamicina IB. In vitro, em Staphylococcus aureus Stephan, revelaram-se activos a concentrações compreendidas entre 0,5 e 64 pg/mL.

Por fim, os produtos de acordo com a invenção não revelaram toxicidade.

Os seguintes exemplos, apresentados a titulo não limitativo, ilustram a presente invenção. 15

Nos exemplos a seguir, a nomenclatura 16-desoxo pristinamicina IIA (ou IIB) significa a substituição da função cetona, na posição 16, por 2 átomos de hidrogénio. No decorrer da cromatografia, todas as fracções são analisadas por cromatografia em camada fina (CCM) , em placas de sílica Merck 60F254. As fracções correspondentes a uma mesma mancha em CCM são reagrupadas e concentradas à secura, sob pressão reduzida (30 °C; 2,7 kPa) . Os resíduos assim obtidos são analisados pelas técnicas espectroscópicas correntes (RMN; IR; MS) o que permite identificar o produto desejado.

Exemplo 1

(16R)-20-Bromo-16-desoxo-16-fluoropristinamicina IIB

Adiciona-se, numa hora, a -72 °C, sob atmosfera de árgon, a 5,32 g de (16R)-16-desoxo-16-fluoropristinamicina IIB em solução em 100 cm3 de tetra-hidrofurano anidro, uma solução de diisopropilamideto de lítio, arrefecida a -50 °C. Esta última foi previamente preparada por adição, a -50 °C, de 31 cm3 de n-butil-lítio (1,6 M em hexano) a uma solução de 100 cm3 de tetra-hidrofurano e de 7 cm3 de diisopropilamina seguido de um aumento, após a adição, até 20 °C. É adicionada, rapidamente, à solução castanha e espessa resultante, mantida a -72 °C, 7,5 cm3 de tetrametiletilenodiamina. Após agitação da mistura reaccional, dez minutos a -72 °C, adiciona-se, sempre a -72 °C, em quinze minutos, 9,8 g de 1,2-dibromo-l,1,2,2-tetracloroetano em solução em 20 cm3 de tetra-hidrofurano. A mistura é agitada 1 hora a -72 °C antes da adição, gota a gota, de 10 cm3 de ácido acético e de 100 cm3 de água. A solução obtida, quando de novo a 20 °C, é concentrada sob pressão reduzida. O resíduo é retomado 16 em 100 cm3 de água e 100 cm3 de acetato de etilo. A fase orgânica é separada e a fase aquosa extraída com 100 cm de acetato de etilo. As fases orgânicas reunidas são lavadas com 50 cm3 de água, adicionados de ácido clorídrico a 1 N de modo a ajustar o pH da fase aquosa a 2. A fase orgânica resultante é separada, lavada sucessivamente com 50 cm3 de água, com uma solução aquosa de bicarbonato de sódio a 5% e com 50 cm3 de salmoura e seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa) , para dar 10,3 g de um merengue laranja. Esse resíduo é purificado por duas cromatografias flash sucessivas em sílica [eluente: Acetato de etilo/Ciclo-hexano (70/30 em volume) e diclorometano/metanol (97/3 em volume)]. Após concentração sob pressão reduzida (2,7 kPa) das fracções contendo o desejado, obtém-se 0,53 g de (16.R)-20-bromo-16--desoxo-16-fluoropristinamicina IIB, sob a forma de um pó amarelo claro que funde a cerca de 172 °C.

Espectro de RMN de 3H (400 MHz, CDCI3, δ em ppm) : 0,96 (d, J = ( 5,5 Hz : 3H) ; 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H) ; 1,12 (d , J = 6,5 Hz: 3H) ; de 1 ,55 £ i 2,15 (mt: 5H) 1; 1 ,81 (s : 3H) ; 2, 16 (mt: 1H) ; 2,27 (mt: 1H) ; 2,77 (mt: 1H) ; 2, 91 (ddd, J = 26- -17 e 5 ) Hz: 1H) ; 3,18 (t desdobrado, J = 1 7 e 7 Hz: 1H); 3( ,48 (mt : 1H); 3, 65 (mt: 1H) ; 4,06 (mt: 1H); 4 , 58 (mt: 1H) , ; 4,81 (dd, J = 10 e 1,5 Hz: 1H) ; de 4, ,80 a 4,90 (mt : 1H) ; 4, 87 (dd , J = 9 e 4 Hz: 1H) ; 5,12 (dmt, Jhf = 48 Hz : 1H) ; 5,4 3 (d largo, J = = 9 Hz: 1H) ; 5,71 (ddd, J = 16-8,5 e 4 Hz: 1H) ; 5,83 (dd, J = 16 e 1,5 Hz : 1H) ; 5, 94 (mt: 1H); 6, 24 (d, J = 1 6 Hz: 1H); 6,53 (dd, J = 16 e 5 Hz: 1H). 17

Exemplo 2

(16R)-16-Desoxo-16-fluoro-20-metil-pristinamicina IIB

Adiciona-se, rapidamente, 0,87 cm3 de boro-hidreto de litio (2 M em tetra-hidrofurano) a uma solução, arrefecida a 0 °C, de 0,76 g de (16.R)-l6-desoxo-16-fluoro-20-metilpristinamicina IIA em 20 cm3 de tetra-hidrofurano. Após a adição, a mistura reaccional é agitada a 0 °C durante 3,5 horas antes de se adicionar 10 cm3 de ácido clorídrico a 1 N e de 10 cm3 de água. O pH da mistura obtida é ajustado a 6,7 por adição de uma solução aquosa de bicarbonato de sódio. A mistura é extraída 2 vezes com 35 cm3 de diclorometano. As fases orgânicas são reunidas e lavadas com 30 cm3 de salmoura, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa), para dar 0,63 g de um merengue branco que se purifica por HPLC semi-preparativa [fase Kromasil C8 10 pm; eluente: Água/Acetonitrilo (60/40 em volume)]. As fracções contendo o produto desejado são extraídas duas 2 vezes com 30 cm3 de diclorometano. As fases orgânicas são reunidas e secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa), para dar 0,145 g de um sólido branco. Este é agitado 1 hora numa mistura de pentano/éter diisopropílico, filtrado e seco uma noite sob pressão reduzida (2,7 kPa) para dar 0,12 g de (16P)-16-Desoxo-16-fluoro-20-metil-pristinamicina IIB, sob a forma de um pó branco que funde a cerca de 137 °C.

Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDC13, δ em ppm) : 0,96 (d, J = 6,5 Hz : 3H); 1,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,11 (d, J = 6,5 Hz: 3H) ; 1, 65 (d, J = 3,5 Hz: 1H); de 1,65 a 2,05 (mt: 5H) ; 1,81 (s: 3H); 2,13 (mt: 1H) ; 2,22 (mt: 1H); 2,53 (s: 3H) ; 2,76 (mt: 1H); 2,86 (ddd, J = 24-17 e 5 Hz: 1H); 3,12 18 (t desdobrado, J = 17 e 7 Hz: 1H) ; 3,48 (ddd, J = 16-9 e 3 Hz: 1H) ; 3,73 (mt: 1H); 4,08 (mt: 1H) ; 4,55 (ddd largo, J = 16-9 e 3 Hz: 1H); 4,81 (dd, J = 10 e 2 Hz: 1H); de 4,80 a 4,90 (mt: 1H) ; 4,85 (dd, J = 9 e 3,5 Hz: 1H) ; 5,12 (dmt, JHF = 48 Hz: 1H) ; 5,42 (d largo, J = 9 Hz: 1H) ; 5,70 (ddd, J = 16-9 e 4 Hz: 1H) ; 5,82 (dd, J = 16 e 2 Hz: 1H) ; 5,94 (mt: 1H) ; 6,23 (d largo, J = 16 Hz: 1H); 6,52 (dd, J = 16 e 5 Hz: 1H). A (161?)-16-desoxo-16-fluoro-20-metilpristinamicina IIA pode ser obtida do seguinte modo.

Adiciona-se, numa hora, a -72 °C, sob atmosfera de árgon, a 10,6 g de (167?)-16-desoxo-16-fluoropristinamicina IIfl em 300 cm3 de tetra-hidrofurano anidro e 20 cm3 de 1,3-dimetil--3,4,5,6-tetra-hidro-2(1H)-pirimidinona, uma solução de diisopropilamideto de lítio, arrefecido a -50 °C. (Esta última foi previamente preparada por adição, a -30 °C, de 50 cm3 de n-butil-lítio (1,6 M em hexano) a uma solução de 100 cm3 de tetra-hidrofurano e de 11,2 cm3 de diisopropilamina seguido de uma subida, após a adição, até 20 °C) . É adicionada, rapidamente, à solução castanha e espessa resultante, mantida a -72 °C, 12,1 cm3 de tetrametiletilenodiamina. Após agitação da mistura reaccional, dez minutos a -72 °C, adiciona-se, sempre a -72 °C, em cinco minutos, 12,4 g de iodeto de metilo. A mistura é agitada 1 hora a -72 °C antes da adição, gota a gota, de 12,6 cm3 de ácido acético e de 60 cm3 de água. A solução obtida, quando de novo a 20 °C, é concentrada sob pressão reduzida. O óleo espesso castanho obtido é retomado em 200 cm3 de água e 500 cm3 de acetato de etilo. Adiciona-se ácido clorídrico concentrado (10 cm3) de modo a ajustar o pH da fase aquosa a 3. A fase orgânica é separada e a fase aquosa extraída com 200 cm3 de acetato de etilo. As fases orgânicas reunidas são lavadas com 19 200 cm3 de água adicionados de bicarbonato de sódio de modo a obter um pH final de 7-8. A fase orgânica resultante é separada, lavada com 100 cm3 de salmoura e seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa), para dar 15,1 g de um óleo castanho que se purifica por duas cromatografias flash sucessivas [eluente: Acetato de etilo/Ciclo-hexano (50/50 em volume) e diclorometano/metanol/acetonitrilo (94/3/3 em volume)]. Após concentração sob pressão reduzida (2,7 kPa), obtém-se 1 g de (16P)-16-desoxo-16-fluoro-20-metilpristinamicina IIA, sob a forma de um pó branco que funde a cerca de 178 °C.

Espectro de RMN de 3H (400 MHz, cdci3, δ em ppm) : 0,99 (d, J = 6,5 Hz: 6H); 1,13 (d, J = 6,5 Hz : 3H) ; 1,52 (d, J = 4 Hz: 1H) ; 1,75 (s: 3H); de 1, 95 a 2,20 (mt: 2H); 2,27 (mt: 1H) ; 2,41 (s: 3H) ; de 2,60 a 2, 90 (mt: 3H); 2,97 (mt: 1H); 3,18 (t desdobrado, J = 14,5 e 3,5 Hz: 1H) ; 3,85 (d muito largo, J = 18 Hz: 1H); 4,08 (mt: 1H) ; 4,29 (mt: 2H) ; de 4,40 a 4,70 (mt: 1H); 4,62 (mt: 1H); 4,94 (mt: 2H); 5,66 (dt, J = 16 e 4 Hz: 1H) ; 5,91 (d largo, J = 16 Hz: 1H) ; 5,99 (d largo, J = 16 Hz: 1H); 6,14 (t, J = 3 Hz: 1H); 6,59 (dd, J = 16 e 7 Hz: 1H); 7,07 (mf: 1H) .

Exemplo 3

(16R)-16-Desoxo-16-dimetilamino-20-metil-pristinamicina IIB

Adiciona-se, gota a gota, a -75 °C, sob atmosfera de árgon, a uma solução de 1 g de (16H)-16-desoxo-16--dimetilaminopristinamicina IIA em 40 cm3 de tetra-hidrofurano anidro, uma solução de diisopropilamideto de lítio. Esta última 20 foi previamente preparada por adição, a -15 °C, de 5,6 cm3 de n-butil-litio (1,6 M em hexano) a uma solução de 10 cm3 de tetra-hidrofurano e de 1,26 cm3 de diisopropilamina. A solução castanho escuro resultante é agitada cinco minutos a -70 °C antes da adição, gota a gota, de 0,56 cm3 de iodeto de metilo. Após a adição, a mistura é agitada 5 minutos a -70 °C e adicionada de 50 cm3 de água e de 7 cm3 de uma solução aquosa de ácido fosfórico a 10%. A mistura obtida, quando de novo a 20 °C, é extraída 3 vezes com 75 cm3 de acetato de etilo. As fases orgânicas reunidas são lavadas com 75 cm3 de salmoura e secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa), para dar 0,94 g de um sólido amarelo que se purifica por HPLC preparativa [Kromasil C8®, 10 pm; eluente: água/acetonitrilo (72,5/27,5 em volume) adicionado de 0,1% de ácido trifluoroacético]. Após concentração, sob pressão reduzida (2,7 kPa), das fracções contendo o desejado, obtém-se um merengue branco que é agitado em 20 cm3 de éter diisopropílico e filtrado. 0 sólido obtido é seco sob pressão reduzida (2,7 kPa) para dar 0,15 g de {16R)-16-desoxo-16-dimetilamino-20--metilpristinamicina IIa^ sob a forma de um pó branco que funde a cerca de 145 °C.

Espectro de RMN de 3Η (400 MHz, CDCI3, δ em ppm) : 0,98 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 0,99 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,13 (d, J = 6,5 Hz: 3H) ; 1,69 (s: 3H) ; 1,76 (mt: 1H) ; de 1,95 a 2,10 (mt: 2H) ; de 2,35 a 2,50 (mt: 1H); 2,35 (s: 9H); 2,49 (t, J = 12 Hz: 1H) ; de 2,60 a 2,75 (mt: 2H); de 2,80 a 2,90 (mt: 1H); 2,89 (d largo, J = 12 Hz: 1H); 3,68 (d muito largo, J = 18 Hz: 1H); 4,07 (mt: 1H); 4,33 (mt: 1H); 4,40 (mt: 1H); 4,52 (mf: 1H); 4,82 (d largo, J = 9 Hz: 1H) ; 4,95 (dd, J = 10 e 1,5 Hz: 1H) ; 5,63 (ddd, J = 16-5 e 3,5 Hz: 1H) ; 5,88 (d largo, J = 16 Hz: 1H) ; 6,05 (d largo, J = 16 Hz: 1H) ; 6,12 (t, J = 3 Hz: 1H) ; 6,51 (dd, 21 J = 16 e 8 Hz: 1H); 7,48 (mf: 1H).

Exemplo 4

(16R) -20-Bromo-16-desoxo-16-fluoropristinamicina IIA

Procedendo como no exemplo 1 mas a partir de 10,6 g de (16B)-16-desoxo-16-fluoropristinamicina IIA em 100 cm3 de tetra--hidrofurano anidro, adicionados, em 45 minutos, de uma solução de diisopropilamideto de litio (previamente preparada a partir de 50 cm3 de n-butil-litio, 300 cm3 de tetra-hidrofurano e de 11,2 cm3 de diisopropilamina) , de 12,1 cm3 de tetrametiletilenodiamina e de 39 g de 1,1-dibromo-l,1,2,2--tetracloroetano em 100 cm3 de tetra-hidrofurano, adicionados em 15 minutos. Após tratamento aquoso, obtém-se 43 g de um óleo castanho que se agita durante 48 horas na presença de éter diisopropilico. A suspensão resultante é filtrada e seca para dar 15 g de um resíduo laranja que se purifica por duas cromatografias flash sucessivas [eluente: diclorometano/metanol/acetonitrilo (94/3/3 em volume) e acetato de etilo/ciclo-hexano (70/30 em volume)]. Após concentração, sob pressão reduzida (2,7 kPa), das fracções contendo o produto desejado, obtém-se um sólido que é agitado em 30 cm3 de éter etílico, filtrado e seco, sob pressão reduzida (2,7 kPa), para dar 1,9 g de (16R)-20-bromo-16-desoxo-16-fluoropristinamicina IIA, sob a forma de um pó amarelo claro que funde a cerca de 105 °C.

Espectro de RMN de 3H (400 MHz, CDCI3, δ em ppm) : 0,97 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 0,99 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,12 (d, J = 6,5 Hz: 3H) ; 1,53 (d, J = 3 Hz: 1H) ; 1,75 (s: 3H) ; de 1,90 a 2,15 22 (mt: 2H) ; 2,: 30 (dddd, J = 30-16-5 e 3 Hz: 1H) ; de 2, 60 a 2,80 (mt: 2H) ; 2 ,83 (mt: 1H) ; 3,02 (ddd, J = 14-10 e 1,1 3 Hz: 1H) ; 3,22 (t desdobrado, J = = 14 e 3 Hz: : 1H) ; 3, 90 (d largo, J = 20 Hz: 1H) ; 4, 05 (mt: 1H); 4,26 (mt: 1H) ; de 4, 25 a 4,40 (mf: 1H) ; 4 l, 53 (d mf, JHF = 48 Hz: 1H) ; 4,64 (mt: 1H) ; de 4 , 90 a 5, 00 (mt: 1H) ; 4, ,93 (dd, J = 10 e 1,5 i Hz: 1H) ; 5, 69 (dt, J = 16 e 4 Hz: 1H) ; 5,90 (d largo, J = 1 6 Hz: 1H) ; 6,01 (d largo, J = 16 Hz: 1H) ; 6,19 (t, J = 3 Hz : 1H); 6,60 (dd, J = 1 .6 e 7, .5 Hz : 1H) ; 7,18 (mf : 1H) .

Exemplo 5

(16R)-16-Desoxo-16-fluoro-20-vinilpristinamicina IIB

Adiciona-se rapidamente, a 20 °C e sob árgon, a uma solução de 0,7 g de (16R)-16-desoxo-16-fluoro-20-iodopristinamicina IIB numa mistura de 21 cm3 de tolueno e de 2,1 cm3 de N,N-dimetilformamida, 0,62 cm3 de viniltributilestanho e 25 mg de tetraquis-trifenilfosfina paládio. A solução castanha obtida é aquecida 20 horas a 80 °C. A mistura reaccional é filtrada sobre Clareei® e o filtrado obtido é diluido por adição de 50 cm3 de acetato de etilo. A solução obtida é lavada 2 vezes com 30 cm3 de água e com 30 cm3 de salmoura. A fase orgânica é seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada, sob pressão reduzida (2,7 kPa), para dar um residuo sólido que é purificado por cromatografia flash em silica [eluente: diclorometano/metanol (97/3 em volume)]. Após concentração, sob pressão reduzida (2,7 kPa), das fraeções contendo o produto desejado, obtém-se um sólido que é agitado em 30 cm3 de éter etílico e filtrado e seco, sob pressão reduzida (2,7 kPa), para dar 0,22 g de (16P)-16-desoxo-16-fluoro-20-vinilpristinamicina 23 IIB, sob a forma de um pó bege que funde a cerca de 160 °C.

Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDC13, δ em ppm) : 0,96 (d, J = 6 i, 5 Hz : 3H) ; 1,00 (d, J = 6,5 Hz : 3H); 1,11 (d, J = 6, 5 Hz: 3H) ; 1,66 (d, J = 3,5 Hz: 1H) ; de 1, 70 a 2,05 (mt: 5H) ; 1,82 (s: 3H) ; 2,15 (mt: 1H) ; 2,25 (mt: 1H) ; 2,76 (mt: 1H); 2,92 (ddd, J = 24-17 e 5 Hz: 1H); 3 ,18 (t desdobrado, J = 17 e 7 Hz : ih; ); 3, 48 (mt: 1H) ; 3,73 (mt: 1H) ; 4,09 (mt: 1H) ; 4,56 (mt: 1H) ; 4,80 (dd, J = 10 e 1 .,5 Hz : 1H); de 4, 80 a 4,90 (mt: 1H) ; 4,85 (dd, J = 9 e 3, ,5 Hz: 1H); 5 ',15 (dmt, JHf = 48 Hz: 1H) ; de 5, ,40 a 5,50 (mt: : 1H) ; 5,42 (dd, J = 11 e 1 Hz: 1H) ; 5,70 (ddd, J = 16-9,5 e 4 Hz: : 1H); 5,83 (dd, J = 16 e 1, 5 Hz : 1H) ; 5,85 (dd, J = 18 e 1 Hz : 1H); 5,93 (d largo, J = 9, 5 Hz: 1H) ; 6,24 (d largo, J = 16 Hz: 1H); 6,52 (dd, J = 1 6 e 4 Hz: 1H) ; 7,13 (dd, i J = 18 e 11 Hz: 1H) . A (16.R)-16-desoxo-16-fluoro-20-iodopristinamicina IIB pode ser obtida do seguinte modo.

Adiciona-se, numa hora, a -70 °C, sob atmosfera de árgon, a 2,66 g de (16f?)-16-desoxo-16-fluoropristinamicina IIB em solução em 50 cm3 de tetra-hidrofurano anidro, uma solução de diisopropilamideto de litio, arrefecido a -70 °C. (Esta última foi previamente preparada por adição, a -40 °C, de 12,4 cm3 de n-butil-litio (1,6 M em hexano) a uma solução de 50 cm3 de tetra--hidrof urano e de 2,8 cm3 de diisopropilamina seguido de um período de 5 minutos a 20 °C) . À solução laranja resultante, mantida a -72 °C, são adicionados, em 5 minutos, 3 cm3 de tetrametiletilenodiamina. Após agitação da mistura reaccional, 5 minutos a -70 °C, adiciona-se, sempre a -70 °C, em dez minutos, 1,27 g de iodo em solução em 10 cm3 de tetra- -hidrofurano. A mistura é agitada 15 minutos a -72 °C antes da 24 adição, gota a gota, depois da mistura reaccional voltar a 0 °C, de 5 cm3 de ácido acético e de 10 cm3 de água. A mistura obtida é retomada em 800 cm3 de água e 300 cm3 de acetato de etilo. A fase orgânica é separada e a fase aquosa extraída com 300 cm3 de acetato de etilo. As fases orgânicas reunidas são lavadas com 300 cm3 de água adicionados de ácido clorídrico a 1 N de modo a ajustar o pH da fase aquosa a 2, após lavagem. A fase orgânica resultante é separada, lavada sucessivamente com 50 cm3 de água, com uma solução aquosa de bicarbonato de sódio a 5% e com 50 cm3 de salmoura e seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa), para dar um sólido castanho que é combinado com duas outras amostras obtidas em condições análogas. Essa mistura (8,3 g) é purificada por cromatografia flash em sílica [eluente: diclorometano/metanol (97/3 em volume)]. Após concentração sob pressão reduzida (2,7 kPa), obtém-se 0,75 g de (16R)-16-desoxo--16-fluoro-20-iodopristinamicina IIB, sob a forma de um pó amorfo amarelo utilizado tal e qual.

Espectro de RMN de 3H (400 MHz, CDC13, δ em ppm) : 0,94 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00 (d, J - 6, 5 Hz : 3H); 1,11 (d , J - 6, 5 Hz: 3H); de 1,55 a 2,05 (mt: 5H) ; 1 ,80 (s: 3H); 2, 15 (mt: 1H) ; 2,25 (mt: 1H) ; 2 ,75 (mt: 1H) ; 2, 93 (ddd, J = 26· -17 e 5 Hz: 1H) ; 3,21 (t desdobrado, J = 17 e 7 ,5 Hz: 1H); 3,· 48 (mt: 1H) ; 3,63 (mt: 1H) ; 4 ,07 (mt: 1H) ; 4, 56 (mt : 1H); 4,' 79 (dd , J = = 10 e 1,5 Hz: 1H); de 4,8 C ) a 4,90 (mt : 1H) ; 4,89 (dd , J 9 e 4 Hz: 1H) ; 5,11 (d mt, Jhf = 48 Hz; : 1H) f 5,42 ! (d largo , J = 9 Hz: : 1H); 5,70 (ddd , J = 16-9 e 4 Hz: 1H) ; : ( 5,82 (dd, J = 16 e 2 Hz: 1H); 5,92 (dd, J = = 9 e 2 ,5 Hz: 1H) ; 6, 24 (d largo, J = = 16 Hz: 1H) ; 6,52 (dd, J = 16 e 5 Hz: 1H). 25

Exemplo 6

20-Metilpristinamicina IIA

Adiciona-se, gota a gota, a -30 °C, sob atmosfera de árgon, 5,9 cm3 de n-butil-litio (1,6 M em hexano) a uma mistura de 1,2 g de cloreto de litio (previamente seco sob pressão reduzida a 150 °C), de 35 cm3 de tetra-hidrofurano anidro e de 1,33 cm3 de diisopropilamina. Após adição, a mistura é levada a 0 °C antes de ser novamente arrefecida a -70 °C. São então adicionados, à mistura resultante, em trinta minutos, 50 cm3 de uma solução de tetra-hidrofurano anidro contendo 1 g de pristinamicina IIA anidra. A pristinamicina IIA anidra foi previamente obtida a partir de uma solução de tolueno/diclorometano (400 cm3/800 cm3) contendo 40 g de pristinamicina IIA que se concentra à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa), com auxilio de um rotavapor durante 4 horas, a 40 °C no máximo.

Após agitação da mistura reaccional, 5 minutos a -70 °C, adiciona-se rapidamente 1,18 cm3 de iodeto de metilo. A mistura é agitada 1 hora a -70 °C e arrefecida a -30 °C. Adiciona-se então 2 cm3 de ácido acético; deixa-se a temperatura da mistura reaccional subir novamente a 0 °C e adiciona-se 50 cm3 de água. A fase orgânica é separada e a fase aquosa extraída 2 vezes com 50 cm3 de acetato de etilo. As fases orgânicas reunidas são lavadas com 50 cm3 de salmoura e secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa), para dar 1 g de um óleo castanho que se purifica por cristalização em 15 cm3 de metilisobutilcetona. O sólido obtido é filtrado, lavado com éter dietílico e seco à pressão atmosférica para dar 0,4 g de 20-metilpristinamicina IIA, sob a forma de cristais brancos que fundem a cerca de 148 °C. 26

Exemplo 7 (161?) -16-desoxo-16-hidroxi-20-metilpristinamicina IIB

Adiciona-se, em 45 minutos, a -71 °C, sob atmosfera de árgon, a 15,6 cm3 de diisopropilamideto de litio comercial (2 M numa mistura de THF/heptano/etilbenzeno), uma solução de 3 g de (1SR)-16-desoxo-16-hidroxipristinamicina IIB anidra e de 200 cm3 de tetra-hidrofurano anidro. Após a adição, a mistura reaccional azul-verde é agitada dez minutos a -71 °C antes da adição, a -75 °C, em 25 minutos, de uma solução de 0,42 cm3 de iodeto de metilo em 20 cm3 de tetra-hidrofurano anidro. Após a adição, a mistura é agitada 1 hora a -70 °C e vertida sobre uma mistura de 400 cm3 de água e de 42 cm3 de uma solução aquosa de ácido fosfórico a 10%. A mistura obtida é extraída 3 vezes com 150 cm3 de acetato de etilo. As fases orgânicas reunidas são lavadas com 200 cm3 de salmoura, secas sobre sulfato de sódio,

filtradas e concentradas à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa), para dar um resíduo que se purifica por HPLC preparativa [Kromasil C8, 10 pm; eluente: água/acetonitrilo (70/30 em volume)]. As fracções contendo o produto desejado são concentradas sob pressão reduzida (2,7 kPa) para dar uma fase aquosa que está saturada em sal e extraída com acetato de etilo. A fase orgânica é seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa), a 40 °C, para dar 0,27 g de (16R)-16-desoxo-16- hidroxi-20- -metilpristinamicina IIB, sob a forma de um sólido branco que funde a partir de 131 °C. A (16P)-16-desoxo-16- -hidroxipristinamicina IIB anidra foi previamente obtida a partir de uma solução em tolueno (300 cm3) contendo 20 g de (16í?)-16-desoxo-16-hidroxipristinamicina IIB que se concentra à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa), com auxílio de um 27 rotavapor, a 40 °C no máximo. O resíduo é seco sob pressão reduzida (2,7 kPa) para dar 19,5 g de (1SR)-16-desoxo-16--hidroxipristinamicina IIB anidra. A (16f?)-16-desoxo-16-hidroxipristinamicina IIB pode ser obtida do seguinte modo:

Uma suspensão de 11,35 g de boro-hidreto de sódio em 550 cm3 de diclorometano é aquecida ao refluxo durante 20 minutos. Adiciona-se então, gota a gota em cerca de 30 minutos, 68,6 cm3 de ácido acético e uma solução (previamente seca sobre sulfato de sódio) de 52,75 g de pristinamicina IIB em 230 cm3 de diclorometano em cerca de 45 minutos. A mistura reaccional é agitada 4,5 horas ao refluxo e 16 horas a 20 °C. Adiciona-se então, à mistura reaccional, 500 cm3 de diclorometano e 1500 cm3 de água. A fase orgânica é decantada e a fase aquosa é extraída com 500 cm3 de cloreto de metileno. As fases orgânicas são reunidas e o pH é ajustado a 8 por uma adição lenta de 1000 cm3 de uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. A fase orgânica resultante é lavada, sucessivamente, com 1000 cm3 de água e 1000 cm3 de uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e tratada com noir 3S, seca sobre sulfato de sódio, filtrada sobre Célite® e concentrada à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa), para dar 50 g de um sólido amarelo claro. Adiciona-se, a 20 °C, a uma solução do sólido anterior em 900 cm3 de cloreto de metileno, 378 cm3 de uma solução aquosa de hidróxido de amónio a 0,5 M. Após 16 horas de agitação a 20 °C, a fase orgânica é decantada, lavada com 1000 cm3 de água e com 1000 cm3 de uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada à secura, sob pressão reduzida (2,7 kPa) , para dar 46 g de um sólido amarelo claro que é purificado por cromatografia flash [eluente: 28 gradiente de cloreto de metileno/metanol (98/2 e 97/3 em volume)]. Após concentração das fracções, obtém-se 8,57 g de (16R)-16-desoxo-16-hidroxipristinamicina IIB, sob a forma de um merengue branco sujo que funde a cerca de 140 °C (dec.).

Espectro de RMN de 1H (400 MHz, CDC13, δ em ppm) : 0,96 (d, J = 6,5 Hz : 3H); 1 O O J = = 6,5 Hz: 3H) ; 1,10 (d, J = 6, 5 Hz: 3H) ; de 1, 70 a 2,05 (mt: 6H) ; 1,81 (s: 3H) ; de 2 , 05 a 2 ,20 (mt: 2H) ; 2,76 (mt: 1H) ; 2,84 (dd , J = = 16 e 5, 5 Hz: 1H) ; 3 ,00 (dd, J = 16 e 7 Hz : 1H) ; j í, 04 (d, J = 4 : Hz: 1H); 3 ,45 (ddd, J = 16-9 e 4 Hz: 1H); 3, 90 (mt: 1H) ; 4,04 (mt: 1H) ; 4 ,27 (mt: 1H) ; 4,48 (ddd , J = 16-9 e 4 Hz: 1H) ; 4,80 (dd, J = 10 e 2 Hz: 1H) ; 4,84 (dd, . J = 9 e 3,5 Hz: 1H) ; 4,88 (mt : 1H) r 5,4^ 1 (d largo, J = 9 Hz: 1H); 5,67 (ddd, J = Ιέ i-9 e 4 Hz: 1H) ; 5 ,80 (dd, J = 16 e 1,5 Hz: 1H); 5 ,95 (dd, J = 9 e 4 Hz : 1H) r 6,lí ) (d largo, J = : 16 Hz: 1H); 6, ,53 (dd, J = 16 e 5 Hz: : 1H); 8,16 (s: 1H) .

Exemplo 8

(16R)-16-desoxo-16-metoxi-20-metilpristinamicina IIB

Procedendo de acordo com os métodos descritos nos exemplos anteriores, a partir de (16R)-16-desoxo-16--metoxipristinamicina IIB, prepara-se a (16R)-16-desoxo-16--metoxi-20-metilpristinamicina IIB sob a forma de um sólido amarelo claro, que funde a partir de 145 °C.

Espectro de RMN de 2H (300 MHz, CDC13, δ em ppm) : 0,97 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,03 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,11 (d, J = 6,5 Hz: 3H) ; de 1,70 a 2,20 (mt: 7H); 1,83 (s: 3H) ; 2,55 (s: 3H) ; 29 2,71 (dd, J = 16 e 8,5 : Hz : 1H); 2, 76 (mt: 1H) ; 3,11 (dd, J = 16 e 4 Hz: 1H) ; 3,42 (s: 3H); 3, 55 (ddd, J = 16-8, 5 e 3,5 Hz: 1H) ; de 3,70 a 3,90 (mt : 2H); 3 ;, 97 (mt: 1H) ; 4,45 (ddd, J = 16- -8 e 4 Hz : 1H) ; de 4 ,65 a 4,85 (mt : 3H); 5,44 (d largo, J = 9 Hz : 1H) ; 5,72 (ddd, J = 16-8,5 e 4 Hz: 1H) ; 5,82 (dd, J = 16 e 1,5 Hz : 1H); r 5,94 (mt: 1H); 6 ,22 (d largo, J = 16 Hz: 1H) ; 6, 53 (dd , J = 16 e 5 Hz : 1H) 1 . A (167?)-16-desoxo-16-metoxi-20-metilpristinamicina IIB pode ser preparada como descrito no pedido de patente FR 0016803. A presente invenção refere-se também a composições farmacêuticas contendo, pelo menos, um derivado de estreptogramina de acordo com a invenção, na forma pura, associado a, pelo menos, um derivado de estreptogramina do grupo B, se necessário, sob a forma de sal e/ou sob a forma de uma associação com um ou vários diluentes ou adjuvantes compatíveis e farmaceuticamente aceitáveis.

As composições de acordo com a invenção podem ser utilizadas por via oral, parentérica, tópica, rectal ou em aerossóis.

Como composições sólidas para administração oral podem ser utilizados comprimidos, pílulas, cápsulas, pós ou granulados. Nessas composições, o produto activo de acordo com a invenção, em geral sob a forma de associação, é misturado com um ou vários diluentes ou adjuvantes inertes, tais como sacarose, lactose ou amido. Essas composições podem compreender outras substâncias além dos diluentes, por exemplo, um lubrificante, tal como o estearato de magnésio ou um revestimento para uma libertação controlada. 30

Como composições líquidas para administração oral, pode utilizar-se soluções farmaceuticamente aceitáveis, suspensões, emulsões, xaropes e elixires contendo diluentes inertes, tais como a água ou o óleo de parafina. Essas composições também podem compreender outras substâncias além dos diluentes, por exemplo, produtos molhantes, edulcorantes ou aromatizantes.

As composições para administração parentérica podem ser soluções esterilizadas ou emulsões. Como solvente ou veículo, pode utilizar-se o propilenoglicol, um polietilenoglicol, óleos vegetais, em particular, o azeite, ésteres orgânicos injectáveis, por exemplo, o oleato de etilo. Essas composições também podem conter adjuvantes, em particular, agentes molhantes, isotónicos, emulsionantes, dispersantes e estabilizantes. A esterilização pode realizar-se de várias maneiras, por exemplo, com a ajuda de um filtro bacteriológico, por irradiação ou por aquecimento. Também podem ser preparadas sob a forma de composições sólidas esterilizadas que podem ser dissolvidas, no momento da utilização, em água esterilizada ou qualquer outro meio esterilizado injectável.

As composições para administração tópica podem ser, por exemplo, cremes, pomadas, loções ou aerossóis.

As composições para administração rectal são supositórios ou cápsulas rectais que contêm, além do princípio activo, excipientes, tais como a manteiga de cacau, glicéridos semi-sintéticos ou polietilenoglicóis. 31

Para a

As composições também podem ser aerossóis, utilização sob a forma de aerossóis líquidos, as composições podem ser soluções esterilizadas estáveis ou composições sólidas dissolvidas, no momento da utilização, em água esterilizada apirógena, em soro ou qualquer outro veículo farmaceuticamente aceitável. Para a utilização sob a forma de aerossóis secos para serem directamente inalados, o princípio activo é finamente dividido e associado a um diluente ou veículo sólido hidrossolúvel com uma granulometria de 30 a 80 pm, por exemplo, o dextrano, o manitol ou a lactose.

Em terapêutica humana, os novos derivados de estreptogramina de acordo com a invenção são particularmente úteis no tratamento das infecções de origem bacteriana. As doses dependem do efeito desejado e da duração do tratamento. O médico determinará a posologia que julgar ser a mais apropriada em função do tratamento, em função da idade, do peso, do grau da infecção e dos outros factores referentes ao indivíduo a tratar. Em geral, as doses estão compreendidas entre 0,5 e 3 g de produto activo, em 2 ou 3 administrações por dia, por via oral ou parentérica para um adulto. 0 seguinte exemplo ilustra uma composição de acordo com a invenção. 32

EXEMPLO

Prepara-se, de acordo com a técnica corrente, doseados a 250 mg de produto activo, tendo composição: (16R)-20-bromo-16-desoxo-16-fluoropristinamicina pristinamicina IB 75 mg excipiente: amido, silica hidratada, dextrina estearato de magnésio: qsp 500 mg

Lisboa, 30 de Maio de 2007 comprimidos a seguinte IIA 175 mg gelatina, 33

Claims (7)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Derivado do grupo A das estreptograminas de fórmula geral: O

   O) na qual: Ri representa um átomo de halogéneo ou um radical hidroxilo, alquiloxilo, azido, tiocianato, ou Ri representa um radical -NR'R'', para o qual R' é um átomo de hidrogénio ou um radical metilo, e R'' é um átomo de hidrogénio, um radical alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo, benzilo, ou -0R''', sendo R''' um átomo de hidrogénio, um radical alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo ou benzilo, ou R'' representa -NR°R°0, podendo R° e R00 representar um radical metilo ou formar, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, um heterociclo de 4 ou 5 membros, saturado ou insaturado podendo, além disso, conter um outro heteroátomo seleccionado de azoto, oxigénio ou enxofre, e R'i representa um átomo de hidrogénio ou, Ri e R'i formam, em conjunto, um radical oxo, 1 R2 representa um átomo de halogéneo ou um radical alquilo, alcenilo ou alcinilo, fenilo ou heteroarilo, ou um radical alquiltio, feniltio ou heteroariltio, R3 é um átomo de hidrogénio ou um radical metilo ou etilo, e a ligação — representa uma ligação simples (estereoquimica 27R) ou uma ligação dupla, os radicais alquilo contendo 1 a 6 carbonos em cadeia linear ou ramificada e os radicais alcenilo e/ou alcinilo contendo 2 a 6 carbonos em cadeia linear ou ramificada, bem como os seus sais, quando existem.
2. 2. Processo de preparação de um derivado do grupo A das estreptograminas de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se realizar a metalação de um derivado de estreptogramina de fórmula geral: O

   (ii) na qual R'i, R3 e a ligação ™ são definidos como anteriormente e Ri representa um átomo de flúor ou um radical hidroxilo, alquiloxilo, ou representa um radical 2 -NR'R'', para o qual R' é H ou um radical metilo, e R'' é H, um radical alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo, benzilo, ou -0R''', sendo R''' H, alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo ou benzilo, ou R'' representa -NR°R00, podendo R° e R00 ser metilo ou formar, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, um heterociclo de 4 ou 5 membros, saturado ou insaturado, podendo por outro lado conter um outro heteroátomo seleccionado de azoto, oxigénio ou enxofre, ou Ri e R'2 formam, em conjunto, um radical oxo, por acção, sucessivamente, de um amideto e por acção de um agente electrófilo podendo ser representado pela fórmula geral: R2-x (III) na qual R2 é um átomo de halogéneo, um radical alquilo, alcenilo ou alcinilo, com a excepção de representar um radical vinilo ou etinilo, e X representa um átomo de halogéneo ou um radical sulfoniloxilo, ou por acção de um dissulfureto quando R2 é alquiltio, feniltio ou heteroariltio, seguido, se necessário, da transformação de um derivado de estreptogramina de acordo com a reivindicação 1, para o qual R2 é um átomo de cloro, bromo ou iodo, num derivado de estreptogramina de acordo com a reivindicação 1, para o qual R2 é radical vinilo, etinilo, fenilo ou heteroarilo e/ou, se necessário, da transformação do derivado de estreptogramina de acordo com a reivindicação 1, para o qual R2 e R' i formam, em conjunto, um radical oxo, num derivado correspondente para o qual Ri é um átomo de cloro, de bromo ou de iodo ou um radical azido ou tiocianato e R'i é um átomo de hidrogénio e/ou seguido da transformação de um derivado de estreptogramina de acordo 3 com a reivindicação 1, para o qual a ligação — é uma ligação dupla num derivado de estreptogramina de acordo com a reivindicação 1, para o qual a ligação m é uma ligação simples.
3. 3. Processo de preparação de acordo com a reivindicação 2, de um derivado do grupo A das estreptograminas de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o agente electrófilo poder ser um dador de halogéneo seleccionado de entre a N-bromo ou N-clorossuccinimida, o 1,1,2,2-tetra-fluoro-l, 2--dicloro ou dibromoetano, o 1,2-dibromo-l,1,2,2--tetracloroetano, o 1,2-diiodoetano ou o 1,2-dibromoetano, o l-cloro-2-iodoetano ou a hexacloroacetona.
4. 4. Polianião derivado do grupo A das estreptograminas que corresponde, de acordo com a natureza dos substituintes e de acordo com a ligação ™ ser uma ligação dupla ou uma ligação simples, às estruturas de fórmulas gerais: 4

   ο 0-

   5 e para as quais R3 é definido como na reivindicação 1, e Ri representa um átomo de flúor ou um radical alquiloxilo, ou representa um radical -NR'R'para o qual R' é um radical metilo, e R'' é um radical alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo, benzilo ou -0R'' ', sendo R' '' H, alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo ou benzilo, ou R'' representa -NR°R°0, podendo R° e R00 ser metilo ou formar, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados, um heterociclo de 4 ou 5 membros, saturado ou insaturado, podendo, além disso, conter um outro heteroátomo seleccionado de azoto, oxigénio ou enxofre.
5. 5. Composição farmacêutica compreendendo um derivado de estreptogramina do grupo A de acordo com a reivindicação 1, na forma pura ou sob a forma de associação com, pelo menos, um derivado de estreptogramina do grupo B e/ou sob a forma de associação com um ou vários diluentes ou adjuvantes compatíveis e farmaceuticamente aceitáveis.
6. 6. Derivado do grupo das estreptograminas A de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R2 ser um radical heteroarilo ou heteroariltio, sendo esse último mono ou bicíclico e compreendendo 1 a 4 heteroátomos seleccionados de azoto, oxigénio ou enxofre, bem como os seus sais, quando existem.
7. 7. Derivado do grupo das estreptograminas A de acordo com a reivindicação 6, caracterizado por o radical heteroarilo poder ser seleccionado de entre piridilo, tienilo, furilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazinilo, quinolilo, isoquinolilo, indolilo, oxazolilo, tiazolilo, pirazolilo, indazolilo, tiadiazolilo ou oxadiazolilo, bem como os seus 6 sais, quando existem. Derivado do grupo das estreptograminas A de acordo com a reivindicação 1, seleccionado de entre - (16R)-20-Bromo-16-desoxo-16-fluoropristinamicina IIB - (16R)-16-Desoxo-16-fluoro-20-metil-pristinamicina IIB (16R)-16-Desoxo-16-dimetilamino-20-metil--pristinamicina IIB - (16R)-20-Bromo-16-desoxo-16-fluoropristinamicina IIA - (16R)-16-Desoxo-16-fluoro-20-vinil-pristinamicina IIB - 20-Metilpristinamicina II - (16R)-16-desoxo-16-hidroxi-20-metilpristinamicina IIb e - (16R)-16-desoxo-16-metoxi-20-metilpristinamicina IIb bem como os seus sais, quando existem. Lisboa, 30 de Maio de 2007