FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE, SI, SK, TR), En ce qui concerne les codes á deux lelíres el aulres abréviabrevet OAPI (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, lions, se référer aux "Noles explicatives relalives aux codes el L, MR, NE, SN, TD, TG). abréviations" figuranl au début de ch qué numero ordinaire de la Gazette du PCT. Publiée : — avec rapport de recherche internationale — avan I 'expiration du délai prévu pour la modification des revendications, sera republiée si des modifications sont recues
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DERIVADOS DE ESTREPTOGRAM1NAS. SU PREPARACION Y LAS COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN
La presente invención se refiere a derivados del grupo A de las estreptograminas de fórmula general:
que presentan una actividad antibacteriana particularmente interesante. Entre las estreptograminas conocidas, la pristinamicina (RP
7923), un antibacteriano de origen natural producido por Streptomyces prístinaespiralis se aisló por primera vez en 1955. La pristinamicina comercializada con el nombre Pyostacine® está constituida principalmente por pristinamicina MA asociada a pristinamicina IA. Otro antibacteriano de la clase de las estreptograminas: la virginiamicina, se aisló a partir de Streptomyces virginiae, ATCC 13161 [Antibiotics and Chemoterapy, 5, 632 (1955)]. La virginiamicina
(Staphylomicine®) está constituida principalmente por factor Mi (VM1 ) asociado a factor S (VS).
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F. Le Goffic y col., Eur. J. Med. Chem. Chlmica Therapeutica, 16(1 ), 69-72 (1981) han descrito la preparación de derivados dihidroxilados de pristinamicina II A. En la solicitud de patente GB 2 206 879 se han descrito derivados modificados del grupo A de las estreptograminas de estructura:
Sin embargo, estos derivados sólo presentan una escasa actividad. Se ha encontrado ahora que los derivados de estreptogramina del grupo A de fórmula general (I) en la que: ¦ Ri representa un átomo de halógeno o un radical hidroxi, alquiloxi, azido, tiocianato, o Ri representa un radical -NR'R" para el que R' es un átomo de hidrógeno o un radical metilo, y R" es un átomo de hidrógeno, un radical alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo, bencilo o -OR"\ siendo R'" un átomo de hidrógeno, un radical alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo o bencilo, o bien R" representa -NR°R°°, pudiendo representar R° y R°° un radical metilo, o formar junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos un heterociclo de 4 o 5 eslabones saturado o insaturado que puede contener además otro heteroátomo escogido entre nitrógeno, oxígeno o azufre, y 3
¦ 'i representa un átomo de hidrógeno, o bien ¦ Ri y R'i forman juntos un radical oxo, ¦ R2 representa un átomo de halógeno o un radical alquilo, alquenilo o alquinilo, fenilo o heteroarilo, o un radical alquiltio, feniltio o heteroariltio, ¦ R3 es un átomo de hidrógeno o un radical metilo o etilo, y ¦ el enlace ™ representa un enlace simple (estereoquímica 27R) o un enlace doble, conteniendo los radicales alquilo de 1 a 6 carbonos en cadena recta o ramificada y conteniendo los radicales alquenilo y/o alquinilo de 2 a 6 carbonos en cadena recta o ramificada, presentan una actividad antibacteriana particularmente interesante, especialmente sobre gérmenes bacterianos resistentes, solos o asociados a un derivado de estreptogramina del grupo B. Según la invención, cuando Ri y/o R2 son un átomo de halógeno, pueden representar flúor, cloro, bromo o yodo; cuando R2 es un radical heteroarilo o heteroariltio, este último es mono o bicíclico y comprende de 1 a 4 heteroátomos escogidos entre nitrógeno, oxígeno o azufre. A título de ejemplo, cuando R2 es un radical heteroarilo o heteroariltio, el radical heteroarilo puede escogerse entre piridilo, tienilo, furilo, pirrolilo, ¡midazolilo, pirazinilo, quinolilo, isoquinolilo, indolilo, oxazolilo, tiazolilo, pirazolilo, indazolilo, tiadiazolilo u oxadiazolilo.
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Según la invención, los derivados de estreptogramina de fórmula general (I) pueden prepararse por metalación de un derivado de estreptogramina de fórmula general:
en la que R'i, R3 y el enlace ™ se definen como anteriormente y R1 representa un átomo de flúor o un radical hidroxi, alquiloxi, o representa un radical -NR'R" para el que R' es H o un radical metilo, y R" es H, un radical alquiilo, cicloalquilo, alilo, propinilo, bencilo o -OR"\ siendo R'" H, alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo o bencilo, o bien R" representa -NR0R°°, pudiendo ser R° y R°° metilo, o formar junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos un heterociclo de 4 o 5 eslabones saturado o insaturado que puede contener además otro heteroátomo escogido entre nitrógeno, oxígeno o azufre, o bien R1 y RS forman juntos un radical oxo, por acción sucesivamente de un amiduro para dar un polianión que responde, según la naturaleza de los sustituyentes y según que se trabaje a partir de un derivado de estreptograminas de fórmula general (II) para el que el enlace ™ es un enlace doble un enlace simple, a las estructuras de fórmulas generales:
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y para las que R3 se define como anteriormente y R1 representa un átomo de flúor o un radical alquiloxi, o representa un radical -NR'R" para el que R' es un radical metilo y R" es un radical alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo, bencilo o -OR'", siendo R'" H, alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo o bencilo, o bien R" representa -NR0R°°, pudiendo ser R° y R°° metilo, o formar junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos un heterociclo de 4 o 5 eslabones saturado o insaturado que puede contener además otro heteroátomo escogido entre nitrógeno, oxígeno o azufre, y después por acción de un agente electrófilo que puede estar representado por la fórmula general: R2-X (III) en la que R2 es un átomo de halógeno, un radical alquilo, un radical alquenilo o alquinilo, con la excepción de representar un radical vinilo o etinilo, y X representa un átomo de halógeno o un radical sulfoniloxi, o bien por acción de un disulfuro cuando R2 es alquiltio, feniltio o heteroariltio, seguido en su caso por la transformación de un derivado de estreptogramina de fórmula general (I) para la que R2 es un átomo de cloro, bromo o yodo, en un derivado de estreptogramina de fórmula general (I) para la que R2 es un radical vinilo, etinilo, fenilo o heteroarilo y/o en su caso, transforma el derivado de estreptogramina de fórmula general (I) para la que R1 y R'i forman juntos un radical oxo en un derivado correspondiente para el que R1 es un átomo de cloro, bromo o yodo o un radical azido o tiocianato y R'i es un átomo de hidrógeno y/o seguida de la transformación de un derivado de estreptogramina de fórmula general (I) para el que el enlace ™ es un doble 8
enlace en un derivado de estreptogramina de fórmula general (I) para el que el enlace ™ es un enlace simple. La reacción de metalación se efectúa generalmente a una temperatura comprendida entre -100 y -20°C, en presencia de 4 a 7 equivalentes de un amiduro, preferiblemente un amiduro de litio, escogido por ejemplo entre diisopropilamiduro de litio o 2,2,6,6-tetrametilpiperidinaamiduro de litio, en un disolvente anhidro, especialmente un éter como por ejemplo tetrahidrofurano anhidro, eventualmente en presencia de un co-disolvente como 1 ,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidinona o hexametilfósfo-rotriamida, en presencia o no de aditivos como por ejemplo tetrametiletilendiamina, diazabiciclo[2,2,2]octano o cloruro de litio anhidro. Es ventajoso funcionar en medio inerte, por ejemplo bajo argón. La reacción del agente electrófilo [especialmente representado por la fórmula general (III)] se efectúa a una temperatura comprendida entre -80 y 20°C. El reactivo electrófilo se escoge ventajosamente entre haluros o sulfonatos de alquilo, alilo, propargilo, bencilo o heteroarilmetilo, o se escoge incluso entre bromo o yodo o cloruro de yodo, puede escogerse igualmente entre donantes de halógeno (por ejemplo, N-bromo o N-clorosuccinimida, l .l ^^-tetrafluoro-l ^-dicloro o dibromoetano, 1 ,2-dibromo-1 , 1,2,2-tetracloroetano, 1 ,2-diyodoetano o 1 ,2-dibromoetano, 1-cloro-2-yodoetano o hexacloroacetona). Se funciona ventajosamente en un disolvente orgánico como un éter, por ejemplo tetrahidrofurano.
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La operación subsiguiente de transformación de un derivado de estreptogramina de fórmula general (I) para el que R2 es cloro, bromo o yodo, en un derivado de estreptogramina de fórmula general (I) para el que R2 es vinilo, etinilo, fenilo o héteroarilo se efectúa preferiblemente a partir de un derivado para el que el halógeno es bromo o yodo, por acción de un derivado de estaño (por ejemplo, viniltributilestaño o viniltrimetilestaño), o un derivado de boro (por ejemplo, ácido borónico o derivado de 9-borabiciclo[3,3,1]nonano), o un derivado de zinc (por ejemplo, de estructura R2?nCI) en presencia de un catalizador como un derivado de paladio (por ejemplo, tetraquis-trifenilfosfina paladio) en presencia o no de una fosfina (como, por ejemplo, tetraquis-trifenilfosfina), de una base (como, por ejemplo, una base nitrogenada: trietilamina, dietilamina, piperidina o un carbonato: carbonato sódico o potásico) y eventualmente en presencia de un co-catalizador como una sal de cobre (Cul), en un disolvente orgánico inerte, o una mezcla de disolventes como un hidrocarburo aromático (por ejemplo, tolueno), un nitrito (acetonitrilo), una amida (como, por ejemplo, dimetilformamida) o un éter (tetrahidrofurano) a una temperatura comprendida entre 20°C y la temperatura de reflujo de la mezcla de reacción. La operación subsiguiente de transformación de un derivado de estreptogramina de fórmula general (I) para el que Ri y R'i forman juntos un radical oxo en un derivado correspondiente para el que R-i es un átomo de cloro, bromo o yodo o un radical azido o tiocianato y R'i es un átomo de 10
hidrógeno, se efectúa según la solicitud descrita en la solicitud de patente internacional WO 01/02427 incorporada aquí a título de referencia. Cuando Ri y R'i se definen como anteriormente con la excepción de representar juntos un radical oxo, la operación subsiguiente de transformación de un derivado de estreptogramina de fórmula general (I) para el que el enlace — es un doble enlace en un derivado de estreptogramina de fórmula general (I) para el que el enlace — es un enlace simple (estereoquímica 27R), se efectúa generalmente por reducción mediante un hidruro alcalino (por ejemplo, borohidruro sódico o borohidruro de litio), en un disolvente tal como un éter (por ejemplo, tetrahidrofurano), a una temperatura comprendida entre 0 y 60°C. La separación de los 2 epímeros en C27 se efectúa según los métodos habituales que no alteran el resto de la molécula, especialmente por cristalización o cromatografía. Los derivados de estreptogramina del grupo A de fórmula general (II) para los que R1 es un átomo de flúor o un radical -NR'R" para el que R' es un átomo de hidrógeno o un radical metilo, y R" es un átomo de hidrógeno, un radical alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo, bencilo o -OR"\ siendo R"' un átomo de hidrógeno, un radical alquilo, cicloalquilo, alilo, propinilo o bencilo, o bien R" representa -NR°R00, pudiendo representar R° y R00 un radical metilo, o formar junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos un heterociclo de 4 o 5 eslabones saturado o insaturado que puede contener además otro heteroátomo escogido entre nitrógeno, oxigeno o 11
azufre, pueden prepararse según, o por analogía con, los métodos descritos en las solicitudes internacionales WO 99/05165 y WO 01/02427. El derivado dihidroxilado de estreptogramina de fórmula general (II) puede obtenerse según los métodos descritos por F. Le Goffic y col., Eur J. Med. Chem. Chimica Therapeutica, 16(1), 69-72 (1981) o en la solicitud de patente FR 2 795 733. La separación de la forma epímera 16R y de la forma epímera 16S se efectúa según los métodos habituales; por ejemplo, la separación cié las formas epímeras puede efectuarse por cromatografía, cromatografía rápida, cromatografía líquida de alta eficacia (CLAE), sobre base quiral o no, o cromatografía por reparto de centrífuga (CRC), a partir de la mezcla de epimeros 16R y 16S o por cristalización. Los derivados de estreptogramina de fórmula general (II) para los que Ri es un radical alquiloxi pueden prepararse por acción de un derivado de fórmula general:
Alq-X (V)
para la que alq representa el radical alquilo correspondiente y X representa un átomo de halógeno, o un radical metilsulfoniloxi, p-toluenosulfoniloxi o trifluorometilsulfoniloxi, en presencia de un agente de transferencia de fase, sobre un derivado dihidroxilado de estreptogramina de fórmula general: 12
en la que R3 y el enlace ™ se definen como anteriormente, y en donde eventualmente la función hidroxi en posición 14 y/o la función amida en posición 8 se han protegido previamente, seguido en su caso por la eliminación del/de los radical(es) protector(es). Preferiblemente, cuando X es un átomo de halógeno, se hace actuar un derivado de fórmula general (V) para el que X es un átomo de bromo o de yodo. El agente de transferencia de fase se escoge ventajosamente entre derivados de amonio cuaternario (por ejemplo, sales de tetraalquilamonio o de trialquilbencilamonio como cloruro, bromuro o sulfato). La reacción se efectúa generalmente en medio básico, por ejemplo en presencia de hidróxido sódico o potásico, o en presencia de carbonato potásico o carbonato de cesio, a una temperatura comprendida entre 10 y 60°C, en medio hidro-orgánico, por ejemplo en un hidrocarburo (tolueno por ejemplo), un disolvente halogenado (por ejemplo, diclorometano) o un éster (especialmente acetato de etilo). Se trabaja preferiblemente a 13
aproximadamente 20°C. De preferencia igualmente se trabaja en presencia de un exceso del derivado de fórmula general (V). La protección y la desprotección del radical hidroxi en posición 14 o de la amida en posición 8 se efectúan según los métodos habituales que no afecten al resto de la molécula, especialmente por aplicación de los métodos descritos por T.W. Greene y P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis (2a ed.), A. Wiley - Interscience Publication (1991), o por Me Omie, Protective Groups in Organic Chemibtry, Plenum Press (1973). Por ejemplo, la protección del radical hidroxi se efectúa por un radical alilo que se coloca y elimina según los métodos conocidos. La protección de la amida puede efectuarse especialmente por el radical t-butoxicarbonilo. Cuando la reacción conduce a una mezcla de los isómeros 14- y 16-O-alquilados, estos últimos pueden separarse según los métodos habituales que no alteren el resto de la molécula, especialmente por cromatografía [Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (CLAE) en fase normal o inversa, en fase quiral o no o por cromatografía rápida] o por cristalización. Los derivados de pristinamicina de fórmula general (IV) corresponden respectivamente a la pristinamicina HA (PIIA), a la pristinamicina IIB (PIIB), a la pristinamicina IIC (PIIC), a la pristinamicina IID (PHD), a la pristinamicina IIF (PUF) y a la pristinamicina IIG (PIIG), que son componentes conocidos de la pristinamicina natural. Los componentes PUF y PIIG se han descrito en la patente europea EP 614910. La pristinamicina IIC (PIIC) y la 14
pristinamicina IID (PIID) pueden obtenerse como se describe por J.C. Barriere y col., Expert. Opin. Invest. Drugs, 3(2), 115-31 (1994). La preparación y la separación de los componentes de las estreptograminas naturales del grupo A [estreptograminas de fórmula general (IV)], se efectúa por fermentación y aislamiento de los constituyentes a partir del mosto de fermentación segón, o por analogía con, el método descrito por J. Preud'homme y col., Bull. Soc. Chim. Fr., vol. 2, 585 (1968) o en la patente europea EP 614910. Alternativamente, la preparación de los componentes naturales del grupo A puede efectuarse por fermentación específica, como se describe en la solicitud de patente FR 2 689 518. Los derivados de estreptogramina de fórmula general (I) pueden purificarse en su caso por métodos físicos tales como cristalización, cromatografía o CRC. Los derivados de estreptogramina de fórmula general (I) para los que Ri representa un radical -NR'R" pueden transformarse al estado de sales de adición con ácidos por métodos conocidos. Se entiende que estas sales, cuando existen, entran también en el marco de la presente invención. Como ejemplos de sales de adición con ácidos aceptables farmacéuticamente, pueden citarse las sales formadas con ácidos minerales (clorhidratos, bromhidratos, sulfates, nitratos, fosfatos) o con ácidos orgánicos (succinatos, fumaratos, tartratos, acetatos, propionatos, maleatos, citratos, metanosulfonatos, etanosulfonatos, fenilsulfonatos, p-toluenosulfonatos, 15
iset'ionatos, naftilsulfonatos o canforsulfonatos, o con derivados de sustitución de estos compuestos). Se entiende que las asociaciones formadas por medio de derivados según la invención y estreptograminas del grupo B entran igualmente en el marco de la presente invención. Los derivados de estreptogramina según la presente invención presentan propiedades antibacterianas y propiedades que crean sinergia de la actividad antibacteriana de los derivados de estreptogramina del grupo B. Son particularmente interesantes por el hecho de su actividad poderosa solos o asociados. Cuando están asociados con un componente o un derivado del grupo B de las estreptograminas, estos últimos pueden escogerse según que se desee obtener una forma administrable por vía oral o parenteral, entre los componentes naturales: pristinamicina IA, pristinamicina IB, pristinamicina IC, pristinamicina ID, pristinamicina IE, pristinamicina IF, pristinamicina IG, virginiamicina S1 , S3 o S4, vemamicina B o C, etamicina o entre derivados de hemisíntesis tales como los descritos en las patentes o solicitudes de patente US 4618599, US 4798827, US 5326782, US 5786449, WO 01/10895, WO 01/07467, EP 772630, EP 770132 o EP 1056071. Los derivados de estreptogramina según la presente invención presentan propiedades antibacterianas y propiedades que crean sinergia de la actividad antibacteriana de los derivados de estreptogramina del grupo B, especialmente sobre Staphylococcus Epidermidis N52 o sobre cepas 16
resistentes como Staphylococcus aureus Stephan. Son particularmente interesantes por el hecho de su actividad poderosa solos o asociados. In vitro sobre Staphylococcus Epidermidis N52, los derivados de estreptogramina según la invención se han mostrado activos en concentraciones comprendidas entre 1 y 64 pg/ml solos o entre 0,25 y 32 g/ml asociados a un derivado del grupo B como pristinamicina IB. In vitro sobre Staphylococcus aureus Stephan se han mostrado activos con concentraciones comprendidas entre 0,5 y 64 pg/ml. Finalmente, los productos según la invención no han revelado toxicidad. Los ejemplos siguientes, dados a título no limitativo, ilustran la presente invención. En los ejemplos que siguen, la nomenclatura 16-desoxo pristinamicina NA (o IIB) significa la sustitución de la función cetona en posición 16 por 2 átomos de hidrógeno. A medida de la cromatografía, todas las fracciones se analizan por cromatografía de capa fina (CCF), en placas de sílice Merck 60F254. Las fracciones correspondientes a una misma mancha en CCF se reagrupan y concentran después a sequedad, bajo presión reducida (30°C; 2,7 kPa). Los residuos obtenidos así son analizados por las técnicas espectroscópicas habituales (RMN; IR; MS) lo que permite identificar el producto esperado. Ejemplo 1 (16R)-20-Bromo-16-desoxo-16-fluoro pristinamicina llB 17
A 5,32 g de (16R)-16-desoxo-16-fluoro pristinamicina IIB en solución en 100 cm3 de tetrahidrofurano anhidro se añade, en una hora a -72°C, bajo atmósfera de argón, una solución de diisopropilamiduro de litio, enfriada a -50°C. Esta última se ha preparado previamente por adición, a -50°C, de 31 cm3 dé n-butil litio (1 ,6 M en hexano) a una solución de 100 cm3 de tetrahidrofurano y 7 cm3 de diisopropilamina seguido por una subida a 20°C tras la adición. A la solución parda y espesa resultante mantenida a -72°C se añaden rápidamente 7,5 cm3 de tetrametiietiiendiamina. Después de agitar la mezcla de reacción diez minutos a -72°C, se añaden siempre a -72°C, en quince minutos, 9,8 g de 1,2-dibromr>1 ,1,2,2-tetracloroetano en solución en 20 cm3 de tetrahidrofurano. La mezcla se agita 1 hora a -72°C antes de añadir, gota a gota, 10 cm3 de ácido acético y después 100 cm3 de agua. La solución obtenida vuelta a 20°C se concentra bajo presión reducida. El residuo se absorbe con 100 cm3 de agua y 100 cm3 de acetato de etilo. Se separa la fase orgánica y se extrae la fase acuosa con 100 cm3 de acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 50 cm3 de agua adicionados con ácido clorhídrico 1 N de manera que se ajuste el pH de la fase acuosa en 2. La fase orgánica resultante se separa, se lava sucesivamente con 50 cm3 de agua, con una solución acuosa de bicarbonato sódico al 5% y con 50 cm3 de salmuera, se seca después sobre sulfato sódico, se filtra y se concentra a sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar 10,3 g de un merengue naranja. Este residuo se purifica por dos cromatografías rápidas sucesivas sobre sílice [eluyente: acetato de etilo/ciclohexano (70/30 en volumen) y 18
después diclorometano/metanol (97/3 en volumen)]. Después de concentrar bajo presión reducida (2,7 kPa) fracciones que contienen el producto esperado, se obtienen 0,53 g de (16R)-20-bromo-16-desoxo-16-fluoro pristinamicina llB, en forma de un polvo amarillo pálido que funde a alrededor de 172°C. Espectro de RMN. 1H (400 MHz, CDCI3> d en ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1 ,00 (d, d = 6,5 Hz: 3H); 1 ,12 (d, J = 6,5 Hz: 3H); de 1 ,55 a 2,15 (mt: 5H); 1 ,81 (s: 3H); 2,16 (mt: 1 H); 2,27 (mt: 1 H); 2,77 (mt: 1 H); 2,91 (ddd, J = 26 - 17 y 5 Hz: 1 H); 3, 18 (t desdoblado, J = 17 y 7 Hz: 1 H); 3,48 (mt: 1H); 3,65 (mt: 1 H); 4,06 (mt: 1 H); 4,58 (mt: 1 H); 4,81 (dd, J = 10 y 1 ,5 Hz: 1 H); de 4,80 a 4,90 (mt: 1 H); 4,87 (dd, J = 9 y 4 Hz: 1 H); 5,12 (dmt, JHF = 48 Hz: 1 H); 5,43 (d ancho, J = 9 Hz: 1 H); 5,71 (ddd, J = 16 - 8,5 y 4 Hz: 1 H); 5,83 (dd, J = 16 y 1 ,5 Hz: 1 H); 5,94 (mt: 1 H); 6,24 (d, J = 16 Hz: 1 H); 6,53 (dd, J = 16 y 5 Hz: 1 H). Ejemplo 2 (16R)-16-Desoxo-16-fluoro-20-metil pristinamicina IIB A una solución enfriada a 0°C de 0,76 g de (16/?)-16-desoxo-16-fluoro-20-metil pristinamicina llA en 20 cm3 de tetrahidrofurano se añaden rápidamente 0,87 cm3 de borohidruro de litio (2 M en tetrahidrofurano). Tras la adición, se agita la mezcla de reacción a 0°C durante 3,5 horas antes de añadir 10 cm3 de ácido clorhídrico 1 N y 10 cm3 de agua. Se ajusta en 6,7 el pH de la mezcla obtenida por adición de una solución acuosa de bicarbonato sódico. Se extrae la mezcla con 2 veces 35 cm3 de diclorometano. Se reúnen las fases orgánicas y se lavan después con 30 cm3 de salmuera, se secan 19
sobre sulfato sódico, se filtran y se concentran a sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar 0,63 g de un merengue blanco que se purifica por HPLC semipreparativa [fase Kromasil C8 10 pm; eluyente; agua/acetonitrilo (60/40 en volumen)]. Las fracciones que contienen el producto esperado se extraen con 2 veces 30 cm3 de diclorometano. Se reúnen las fases orgánicas y se secan después sobre sulfato sódico, se filtran y se concentran a sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar 0,145 g de un sólido blanco. Éste se agita 1 hora en una mezclé? de pentano/éter diisopropílico, se filtra y se seca después una noche bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar 0,12 g de (16R)-16-desoxo-16-fluoro-20-metil pristinamicina HB en forma de un polvo blanco que funde a alrededor de 137°C. Espectro de RMN. 1H (400 MHz, CDCI3, d en ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1 ,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1 ,11 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1 ,65 (d, J = 3,5 Hz: 1 H); de 1 ,65 a 2,05 (mt: 5H); 1 ,81 (s: 3H); 2,13 (mt: 1 H); 2,22 (mt: 1 H); 2,53 (s: 3H); 2,76 (mt: 1 H); 2,86 (ddd, J = 24 - 17 y 5 Hz: 1 H); 3,12 (t desdoblado, J = 17 y 7 Hz: 1 H); 3,48 (ddd, J = 16 - 9 y 3 Hz: 1 H); 3,73 (mt: 1 H); 4,08 (mt: 1 H); 4,55 (ddd ancho, J = 16 - 9 y 3 Hz: 1 H); 4,81 (dd, J = 10 y 2 Hz: 1 H); de 4,80 a 4,90 (mt: 1 H); 4,85 (dd, J = 9 y 3,5 Hz: 1 H); 5, 12 (dmt, JHF = 48 Hz: 1 H); 5,42 (d ancho, J = 9 Hz: 1 H); 5,70 (ddd, J = 16 - 9 y 4 Hz: 1 H); 5,82 (dd, J = 16 y 2 Hz: 1 H); 5,94 (mt: 1 H); 6,23 (d ancho, J = 16 Hz: 1 H); 6,52 (dd, J = 16 y 5 Hz: 1 H). La (16F?)-16-desoxo-16-fluoro-20-metil pristinamicina llA puede obtenerse de la siguiente manera.
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A 10,6 g de (16R)-16-desoxo-16-fluoro pristinamicina llA en 300 cm3 de tetrahidrofurano anhidro y 20 cm3 de 1 ,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidinona, se añade, en una hora a -72°C, bajo atmósfera de argón, una solución de diisopropilamiduro de litio, enfriada a -50°C. (Esta última se ha preparado previamente por adición, a -30°C, de 50 cm3 de n-butil litio (1 ,6 M en hexano) a una solución de 100 cm3 de tetrahidrofurano y 11 ,2 cm3 de diisopropilamina seguido por una subida a 20°C tras la adición). A la solución parda y espesa resultante mantenida a -72°C se añaden rápidamente 12,1 cm3 de tetrametiletilendiamina. Después de agitar la mezcla de reacción diez minutos a -72°C, se añaden siempre a -72°C, en cinco minutos, 12,4 g de yoduro de metilo. La mezcla se agita 1 hora a -72°C antes de añadir, gota a gota, 12,6 cm3 de ácido acético y después 60 cm3 de agua. La solución obtenida vuelta a 20°C se concentra bajo presión reducida. El aceite espeso pardo obtenido se absorbe con 200 cm3 de agua y 500 cm3 de acetato de etilo. Se añade ácido clorhídrico concentrado (10 cm3) de manera que se ajuste el pH de la fase acuosa en 3. Se separa la fase orgánica y se extrae la fase acuosa con 200 cm3 de acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 200 cm3 de agua adicionados con bicarbonato sódico de manera que se obtenga un pH final de 7-8. La fase orgánica resultante se separa, se lava con 100 cm3 de salmuera y se seca después sobre sulfato sódico, se filtra y se concentra a sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar 15,1 g de un aceite pardo que se purifica con dos cromatografías rápidas sucesivas [eluyente: acetato de etilo/ciclohexano (50/50 en volumen) y después 21
diclorometano/metanol/acetonitrilo (94/3/3 en volumen)]. Después de concentrar bajo presión reducida (2,7 kPa), se obtiene 1 g de (16f?)-16-desoxo-16-fluoro-20-metil pristinamicina HA, en forma de un polvo blanco que funde a alrededor de 178°C. Espectro de RMN. (400 MHz, CDCI3> d en ppm): 0,99 (d, J = 6,5 Hz: 6H); 1 ,13 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1 ,52 (d, J = 4 Hz: 1 H); 1 ,75 (s: 3H); de 1 ,95 a 2,20 (mt: 2H); 2,27 (mt: 1 H); 2,41 (s: 3H); de 2,60 a 2,90 (mt: 3H); 2,97 (mt: 1 H); 3, 18 (t desdoblado, J = 14,5 y 3,5 Hz: 1H); 3,85 (d muy ancho, J = 18 Hz: 1 H); 4,08 (mt: 1 H); 4,29 (mt: 2H); de 4,40 a 4,70 (mt: 1 H); 4,62 (mt: 1 H); 4,94 (mt: 2H); 5,66 (dt, J = 16 y 4 Hz: 1 H); 5,91 (d ancho, J = 16 Hz: 1 H); 5,99 (d ancho, J = 16 Hz: 1 H); 6,14 (t, J = 3 Hz: 1 H); 6,59 (dd, J = 16 y 7 Hz: 1 H); 7,07 (mf: 1 H). Ejemplo 3 (16R)-16-Desoxo-16-dimetilamino-20-metil pristinamicina llB A una solución de 1 g de (16/?)-16-desoxo-16-dimetilamino pristinamicina HA en 40 cm3 de tetrahidrofurano anhidro se añade gota a gota, a -75°C, bajo atmósfera de argón, una solución de diisopropilamiduro de litio. Ésta última se ha preparado previamente por adición, a -15°C, de 5,6 cm3 de n-butil litio (1 ,6 M en hexano) a una solución de 10 cm3 de tetrahidrofurano y 1 ,26 cm3 de diisopropilamina. La solución parda oscura resultante se agita cinco minutos a -70°C antes de añadir, gota a gota, 0,56 cm3 de yoduro de metilo. Después de la adición, se agita la mezcla 5 minutos a -70°C y se añaden después 50 cm3 de agua y 7 cm3 de una solución acuosa de ácido 22
fosfórico al 10%. La mezcla obtenida vuelta a 20°C se extrae con 3 veces 75 cm3 de acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 75 cm3 de salmuera y se secan después sobre sulfato sódico, se filtran y se concentran a sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar 0,94 g de un sólido amarillo que se purifica por HPLC preparativa [Kromasil C8®, 10 pm; eluyente: agua/acetonitrilo (72,5/27,5 en volumen) adicionado con 0, 1 % de ácido trifluoroacético]. Después de concentrar bajo presión reducida (2,7 kPa) las fracciones que contienen el producto esperado, se obtiene un merengue blanco que se agita en 20 cm3 de éter diisopropílico y se filtra después. El sólido obtenido se seca bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar 0, 15 g de (16ft)-16-desoxo-16-dimetilamino-20-metil pristinamicina llA en forma de un polvo blanco que funde a alrededor de 145°C. Espectro de RMN. 1H (400 MHz, CDCI3, d en ppm): 0,98 (d, J = 6,5 Hz: 3H);
0,99 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1 ,13 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1 ,69 (s: 3H); 1 ,76 (mt: 1 H); de 1 ,95 a 2, 10 (mt: 2H); de 2,35 a 2,50 (mt: 1 H); 2,35 (s: 9H); 2,49 (t, J = 12
Hz: 1 H); de 2,60 a 2,75 (mt: 2H); de 2,80 a 2,90 (mt: 1 H); 2,89 (d ancho, J =
12 Hz: 1 H); 3,68 (d muy ancho, J = 18 Hz: 1 H); 4,07 (mt: 1 H); 4,33 (mt: 1 H);
4,40 (mt: 1 H); 4,52 (mf: 1 H); 4,82 (d ancho, J = 9 Hz: 1 H); 4,95 (dd, J = 10 y
1 ,5 Hz: 1 H); 5,63 (ddd, J = 16 - 5 y 3,5 Hz: 1 H); 5,88 (d ancho, J = 16 Hz: 1 H); 6,05 (d ancho, J = 16 Hz: 1 H); 6,12 (t, J = 3 Hz: 1 H); 6,51 (dd, J = 16 y 8
Hz: 1 H); 7,48 (mf: 1 H). Ejemplo 4 (16 )-20-Bromo-16-desoxo-16-fluoro pristinamicina HA 23
Trabajando como en el ejemplo 1 , pero a partir de 10,6 g de (16R)-16-desoxo-16-fluoro pristinamicina HA en 100 cm3 de tetrahidrofurano anhidro, adicionados en 45 minutos con una solución de diisopropilamiduro de litio (preparado previamente a partir de 50 cm3 de n-butil litio, 300 cm3 de tetrahidrofurano y 11 ,2 cm3 de diisopropilamina), 12,1 cm3 de tetrametiletilendiamina y 39 g de 1 ,1-dibromo-1 ,1 ,2,2-tetracloroetano en 100 cm3 de tetrahidrofurano adicionados en 15 minutos. Después de tratamiento acuoso, se obtienen 43 g de un aceite pardo que se agita durante 48 horas en presencia de éter diisopropílico. La suspensión resultante se filtra y seca después para dar 15 g de un residuo naranja que se purifica con dos cromatografías rápidas sucesivas [eluyente: diclorometano/metanol/ace-tonitrilo (94/3/3 en volumen) y después acetato de etilo/ciclohexano (70/30 en volumen)]. Después de concentrar bajo presión reducida (2,7 kPa) fracciones que contienen el producto esperado, se obtiene un sólido que se agita en 30 cm3 de éter etílico, se filtra y se seca después bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar 1 ,9 g de (16ft)-20-bromo-16-desoxo-16-fluoro pristinamicina I , en forma de un polvo amarillo pálido que funde a alrededor de 105°C. Espectro de RMN. 1H (400 MHz, CDCI3, d en ppm): 0,97 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 0,99 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1 ,12 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1 ,53 (d, J = 3 Hz: 1 H); 1 ,75 (s: 3H); de 1 ,90 a 2,15 (mt: 2H); 2,30 (dddd, J = 30 - 16 -5 y 3 Hz : 1 H); de 2,60 a 2,80 (mt: 2H); 2,83 (mt: 1 H); 3,02 (ddd, J = 14 - 10 y 7,5 Hz: 1 H); 3,22 (t desdoblado, J = 14 y 3 Hz: 1 H); 3,90(d ancho, J = 20 Hz: 1 H); 4,05 (mt: 1 H); 4,26 (mt: H); de 4,25 a 4,40 (mf: 1 H); 4,53 (d mf:, JHF = 48 Hz: 1 H); 4,64 (mt: 24
1 H); de 4,90 a 5,00 (mt: 1 H); 4,93 (dd, J = 10 y 1 ,5 Hz: 1 H); 5,69 (dt, J = 16 y 4 Hz: 1 H); 5,90 (d ancho, J = 16 Hz: 1 H); 6,01 (d ancho, J = 16 Hz: 1 H); 6,19 (t, J = 3 Hz: 1 H); 6,60 (dd, J = 16 y 7,5 Hz: 1 H); 7,18 (mf: 1 H). Ejemplo 5 (16 )-'16-Desoxo-16-fluoro-20-vinil pristinamicina llB A una solución de 0,7 g de (16R)-16-desoxo-16-fluoro-20-yodo pristinamicina llB en una mezcla de 21 cm3 de tolueno y 2,1 cm3 de N,N-dimetilformamida, se añaden rápidamente, a 20°C y bajo argón, 0,62 cm3 de viniltributilestaño y después 25 mg de tetraquis-trifenilfosfinapaladio. La solución marrón obtenida se calienta 20 horas a 80°C. La mezcla de reacción se filtra sobre Clarcel® y el filtrado obtenido se diluye por adición de 50 cm3 de acetato de etilo. La solución obtenida se lava con 2 veces 30 cm3 de agua y después con 30 cm3 de salmuera. La fase orgánica se seca sobre sulfato magnésico, se filtra y se concentra después bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar un residuo sólido que se purifica por cromatografía rápida sobre sílice [eluyente: díclorometano/metanol (97/3 en volumen)]. Después de concentrar bajo presión reducida (2,7 kPa) fracciones que contienen el producto esperado, se obtiene un sólido que se agita en 30 cm3 de éter etílico y se filtra y seca después bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar 0,22 g de (16f?)-16-desoxo-16-fluoro-20-vinil pristinamicina IIB, en forma de un polvo beige que funde a alrededor de 160°C. Espectro de R N. 1H (400 Hz, CDCI3, d en ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1 ,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1 ,11 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1 ,66 (d, J = 3,5 Hz: 1 H); de 25
1 ,70 a 2,05 (mt: 5H); 1,82 (s: 3H); 2,15 (mt: 1H); 2,25 (mt: 1H); 2,76 (mt: 1 H); 2,92 (ddd, J = 24 - 17 y 5 Hz: 1H); 3,18 (t desdoblado, J = 17 y 7 Hz: 1 H); 3,48 (mt: 1 H); 3,73 (mt: 1H); 4,09 (mt: 1H); 4,56 (mt: 1 H); 4,80 (dd, J = 10 y 1 ,5 Hz: 1 H); de 4,80 a 4,90 (mt: 1H); 4,85 (dd, J = 9 y 3,5 Hz: 1H); 5,15 (dmt, JHF = 48 Hz: 1H); dé 5,40 a 5,50 (mt: 1H); 5,42 (dd„ J = 11 y 1 Hz: 1H); 5,70 (ddd, J = 16 - 9,5 y 4 Hz: 1H); 5,83 (dd, J = 16 y 1 ,5 Hz: 1H); 5,85 (dd, J = 18 y 1 Hz: 1 H); 5,93 (d ancho, J = 9,5 Hz: 1H); 6,24 (d ancho, J = 16 Hz: 1H); 6,52 (dd, J = 16 y 4 Hz: 1 H); 7,13 (dd, J = 18 y 11 Hz: 1H). La (16R)-16-desoxo-16-fluoro-20-yodo pristinamicina IIB puede obtenerse de la siguiente manera. A 2,66 g de (16 )-16-desoxo-16-fluoro pristinamicina IIB en solución en 50 cm3 de tetrahidrofurano anhidro, se añade, en una hora a -70°C, bajo atmósfera de argón, una solución de diisopropilamiduro de litio, enfriada a -70°C. (Esta última se ha preparado previamente por adición, a -40°C, de 12,4 cm3 de n-butil litio (1 ,6 en hexano) a una solución de 50 cm3 de tetrahidrofurano y 2,8 cm3 de diisopropilamina seguido por un paso a 20°C durante 5 minutos). A la solución naranja resultante mantenida a -72°C se añaden en 5 minutos 3 cm3 de tetrametiletilendiamina. Después de agitar la mezcla de reacción 5 minutos a -70°C, se añaden siempre a -70°C, en diez minutos, 1 ,27 g de yodo en solución en 10 cm3 de tetrahidrofurano. La mezcla se agita 15 minutos a -72°C antes de añadir, gota a gota, 5 cm3 de ácido acético y después 10 cm3 de agua una vez vuelta a 0°C la mezcla de reacción. La mezcla obtenida se absorbe con 800 cm3 de agua y 300 cm3 de 26
acetato de etilo. Se separa la fase orgánica y se extrae la fase acuosa con 300 cm3 de acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 300 cm3 de agua adicionados con ácido clorhídrico 1 N de manera que se ajuste en 2 el pH de la fase acuosa después del lavado. La fase orgánica resultante se separa, se lavá sucesivamente con 50 cm3 de agua, con una solución acuosa de bicarbonato sódico del 5% y con 50 cm3 de salmuera, y se seca después sobre sulfato sódico, se filtra y se concentra a sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar un sólido marrón que se combina con otros dos lotes obtenidos en condiciones análogas. Esta mezcla (8,3 g) se purifica por cromatografía rápida sobre sílice [eluyente: diclorometano/metanol (97/3 en volumen)]. Después de concentrar bajo presión reducida (2,7 kPa), se obtienen 0,75 g de (16R)-16-desoxo-16-fluoro-20-yodo pristinamicina HB, en forma de un polvo amorfo amarillo utilizado tal cual. Espectro de RMN.1H (400 MHz, CDCI3, d en ppm): 0,94 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,00(d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,11 (d, J = 6,5 Hz: 3H); de 1,55 a 2,05 (mt: 5H); 1,80
(s: 3H); 2,15 (mt: 1H); 2,25 (mt: 1H); 2,75 (mt: 1H); 2,93 (ddd, J = 26 - 17 y 5
Hz: 1H); 3,21 (t desdoblado, J = 17 y 7,5 Hz: 1H); 3,48 (mt: 1H); 3,63 (mt: 1H);
4,07 (mt: 1H); 4,56 (mt: 1H); 4,79 (dd, J = 10 y 1,5 Hz: 1H); de 4,80 a 4,90
(mt: 1H); 4,89 (dd, J = 9 y 4 Hz: 1H); 5,11 (d mt, JHF = 48 Hz: 1H); 5,42 (d ancho, J = 9 Hz: 1H); 5,70 (ddd, J = 16 - 9 y 4 Hz: 1H); 5,82 (dd, J = 16 y 2
Hz: 1H); 5,92 (dd, J = 9 y 2,5 Hz: 1H); 6,24 (d ancho, J = 16 Hz: 1H); 6,52 (dd,
J= 16y5 Hz: 1H).
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Ejemplo 6 20-Met¡l pristinamicina IIA A una mecía de 1 ,2 g de cloruro de litio (secado previamente bajo presión reducida a 150°C), 35 cm3 de tetrahidrofurano anhidro y 1 ,33 cm3 de diisopropilamina', se añaden gota a gota, a -30°C bajo atmósfera de argón, 5,9 cm3 de n-butil litio (1 ,6 M en hexano). Tras la adición, se lleva la mezcla a 0°C antes de enfriarse de nuevo a -70°C. Se añaden entonces a la mezcla resultante, en treinta minutos, 50 cm3 de una solución de tetrahidrofurano anhidro que contiene 1 g de pristinamicina HA anhidra. La pristinamicina HA anhidra se ha obtenido previamente a partir de una solución de tolueno/diclorometano (400 cm3/800 cm3 ) que contiene 40 g de pristinamicina HA que se concentra a sequedad, bajo presión reducida (2,7 kPa), con ayuda de un evaporador rotativo durante 4 horas, a 40°C como máximo. Después de agitar la mezcla de reacción 5 minutos a -70°C, se añaden rápidamente 1 ,18 cm3 de yoduro de metilo. La mezcla se agita 1 hora a -70°C y se calienta después a -30°C. Se añaden entonces 2 cm3 de ácido acético; se deja subir la temperatura de la mezcla de reacción a 0°C y se añaden después 50 cm3 de agua. Se separa la fase orgánica y se extrae la fase acuosa con 2 veces 50 cm3 de acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 50 cm3 de salmuera y se secan después sobre sulfato sódico, se filtran y se concentran a sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar 1 g de un aceite pardo que se purifica por cristalización en 15 cm de 28
metilisobutilcetona. El sólido obtenido se filtra, se lava con éter dietílico y se seca después a presión atmosférica para dar 0,4 g de 20-metil pristinamicina IIA, en forma de cristales blancos que funden a aproximadamente 148°C. Ejemplo 7 (16f?)-16-Desoxo-16-hidroxi-20-metil pristinamicina l IB A 15,6 cm3 de diisopropilamiduro de litio comercial (2 M en una mezcla de THF/heptano/etilbenceno) se añade, en 45 minutos, a -71 °C bajo atmósgera de argón, una solución de 3 g de (16R)-16-desoxo-16-hidroxi pristinamicina llB anhidra y 200 cm3 de tetrahidrofurano anhidro. Después de la adición, la mezcla de reacción azul verdosa se agita diez minutos a -71 °C antes de añadir, a -75°C, en 25 minutos, una solución de 0,42 cm3 de yoduro de metilo en 20 cm3 de tetrahidrofurano anhidro. Tras la adición, se agita la mezcla 1 hora a -70°C y se vierte después sobre una mezcla de 400 cm3 de agua y 42 cm3 de una solución acuosa al 0% de ácido fosfórico. La mezcla obtenida se extrae con 3 veces 150 cm3 de acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 200 cm3 de salmuera, se secan sobre sulfato sódico, se filtran y se concentran después a sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar un residuo que se purifica por HPLC preparativa [Kromasil C8, 10 pm; eluyente: agua/acetonitrilo (70/30 en volumen)]. Las fracciones que contienen el producto esperado se concentran bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar una fase acuosa que está saturada en sal y se extrae después con acetato de etilo. La fase orgánica se seca sobre sulfato sódico, se filtra y se concentra a sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa), a 40°C, para dar 29
0,27 g de (16f?)-16-desoxo-16-hidroxi-20-metil pristinamicina llB, en forma de un sólido blanco que funde a partir de 131 °C. La (16/?)-16-desoxo-16-hidroxi pristinamicina IIB anhidra se obtuvo previamente a partir de una solución toluénica (300 cm3) que contenía 20 g de (16R)-16-desoxo-16-hidroxi pristinamicina IIB que se concentra a sequedad, bajo presión reducida (2,7 kPa), con ayuda de un evaporador rotativo a 40°C como máximo. El residuo se seca bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar 19,5 g de (16R)-16-desoxo-16-hidroxi pristinamicina IIB anhidra. La (16R)-16-desoxo-16-hidroxi pristinamicina IIB puede obtenerse de la manera siguiente: Una suspensión de 11 ,35 g de borohidruro sódico en 550 cm3 de diclorometano se calienta a reflujo durante 20 minutos. Se añaden entonces 68,6 cm3 de ácido acético gota a gota en aproximadamente 30 minutos y después una solución (secada previamente sobre sulfato sódico) de 52,75 g de pristinamicina IIB en 230 cm3 de diclorometano en aproximadamente 45 minutos. La mezcla de reacción se agita 4,5 horas a reflujo y después 16 horas a 20°C. Se añaden entonces a la mezcla de reacción 500 cm3 de diclorometano y 1500 cm3 de agua. Se decanta la fase orgánica y se extrae la fase acuosa con 500 cm3 de cloruro de metileno. Se reúnen las fases orgánicas y se ajusta el pH en 8 por adición lenta de 1000 cm3 de una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico. La fase orgánica resultante se lava sucesivamente con 1000 cm3 de agua y 1000 cm3 de una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se trata después con negro 3S, se seca 30
sobre sulfato sódico, se filtra sobre Célite® y se concentra a sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar 50 g de un sólido amarillo claro. A una solución del sólido precedente en 900 cm3 de cloruro de metileno se añaden a 20°C 378 cm3 de una solución acuosa de hidróxido amónico 0,5 M. Después de 16 horas de agitación a 20°C, la fase orgánica se decanta, se lava con 1000 cm3 de agua y después con 1000 cm3 de una solución acuosa saturada de cloruro sódico, se seca sobre sulfato sódico, se filtra y se concentra a sequedad bajo presión reducida (2,7 kPa) para dar 46 g de un sólido amarillo pálido que se purifica por cromatografía rápida [eluyente: gradiente de cloruro de metileno/metanol (98/2 y después 97/3 en volumen)]. Tras concentrar las fracciones, se obtienen 8,57 g de (16 ?)-16-desoxo-16-hidroxi pristinamicina lie en forma de un merengue blanco roto que funde a aproximadamente 140°C (desc). Espectro de RMN. 1H (400 MHz, CDCI3, d en ppm): 0,96 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1 ,00 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,10 (d, J = 6,5 Hz: 3H); de 1 ,70 a 2,05 (mt: 6H); 1 ,81
(s: 3H); de 2,05 a 2,20 (mt: 2H); 2,76 (mt: 1H); 2,84 (dd, J = 16 y 5,5 Hz: 1 H);
3,00 (dd, J = 16 y 7 Hz: 1 H); 3,04 (d, J = 4Hz: 1H); 3,45 (ddd, J = 16 - 9 y 4
Hz: 1 H); 3,90 (mt: 1H); 4,04 (mt: 1H); 4,27 (mt: H); 4,48 (ddd, J = 16 - 9 y 4
Hz: 1 H); 4,80 (dd, J = 10 y 2 Hz: 1H); 4,84 (dd, J = 9 y 3,5 Hz: 1H); 4,88 (mt: 1 H); 5,44 (d ancho, J = 9 Hz: 1H); 5,67 (ddd, J = 16 - 9 y 4 Hz: 1 H); 5,80 (dd,
J = 16 y 1 ,5 Hz: 1 H); 5,95 (dd, J = 9 y 4 Hz: 1H); 6,19 (d ancho, J = 16 Hz:
1 H); 6,53 (dd, J = 16 y 5 Hz: 1H); 8,16 (s: 1H).
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Ejemplo 8 (16R)-16-Desoxo-16-metoxi-20-metil pristinamicina llB Trabajando según los métodos descritos en los ejemplos precedentes, a partir de (16R)-16-desoxo-16-metoxi pristinamicina llB, se prepara (16f?)-16-desoxo-16-metoxi-20-metil pristinamicina IIB en forma de un sólido amarillo pálido, que funde a partir de 145°C. Espectro de RMN. 1H (300 MHz, CDCI3, d en ppm): 0,97 (d, J = 6,5 Hz: 3H);
1 ,03 (d, J = 6,5 Hz: 3H); 1,11 (d, J = 6,5 Hz: 3H); de 1,70 a 2,20 (mt: 7H); 1 ,83
(s: 3H); 2,55 (s: 3H); 2,71 (dd, J = 16 y 8,5 Hz: 1H); 2,76 (mt: 1H); 3,11 (dd, J = 16 y 4 Hz: 1 H); 3,42 (s: 3H); 3,55 (ddd, J = 16 - 8,5 y 3,5 Hz: 1 H); de 3,70 a
3,90 (mt: 2H); 3,97 (mt: 1H); 4,45 (ddd, J = 16 - 8 y 4 Hz: 1H); de 4,65 a 4,85
(mt: 3H); 5,44 (d ancho, J = 9 Hz: 1H); 5,72 (ddd, J = 16 - 8,5 y 4 Hz: 1H);
5,82 (dd, J = 16 y 1,5 Hz: 1H); 5,94 (mt: 1H); 6,22 (d ancho, J = 16 Hz: 1H);
6,53 (dd, J = 16 y 5 Hz: 1H). La (16f?)-16-desoxo-16-metoxi-20-metil pristinamicina IIB puede prepararse como se describe en la solicitud de patente FR 0016803. La presente invención se refiere igualmente a composiciones farmacéuticas que contienen al menos un derivado de estreptogramina según la invención, en estado puro, asociado a al menos un derivado de estreptogramina del grupo B, en su caso en forma de sal, y/o en forma de asociación con uno o varios diluyentes o coadyuvantes compatibles y aceptables farmacéuticamente.
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Las composiciones según la invención pueden utilizarse por vía oral, parenteral, tópica, rectal o en aerosoles. Como composiciones sólidas para administración oral, pueden utilizarse comprimidos, pildoras, cápsulas, polvos o granulados. En estas composiciones, el producto activo según la invención, generalmente en forma de asociación, se mezcla con uno o varios diluyentes o coadyuvantes inertes, tales cómo sacarosa, lactosa o almidón. Estas composiciones pueden comprender sustancias distintas de los diluyentes, por ejemplo, un lubricante tal como estearato magnésico o una envoltura destinada a una liberación controlada. Como composiciones líquidas para administración oral, se pueden utilizar soluciones aceptables farmacéuticamente, suspensiones, emulsiones, jarabes y elixires que contengan diluyentes inertes tales como agua o aceite de parafína. Estas composiciones pueden comprender igualmente sustancias distintas de los diluyentes, por ejemplo, productos mojantes, edulcorantes o aromatizantes. Las composiciones para administración parenteral pueden ser soluciones estériles o emulsiones. Como disolvente o vehículo se puede emplear propilenglicol, un polietilenglicol, aceites vegetales, en particular aceite de oliva, o ésteres orgánicos inyectables, por ejemplo oleato de etilo. Estas composiciones pueden contener igualmente coadyuvantes, en particular agentes mojantes, isotonizantes, emulsionantes, dispersantes y estabilizantes.
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La esterilización puede hacerse de varias maneras, por ejemplo con ayuda de un filtro bacteriológico, por irradiación o por calentamiento. También pueden prepararse en forma de composiciones sólidas estériles que pueden disolverse en el momento del empleo en agua estéril o cualquier otro medio estéril inyectable. Las composiciones para administración tópica pueden ser por ejemplo cremas, pomadas, lociones o aerosoles. Las composiciones para administración rectal son supositorios o cápsulas rectales, que contienen además del principio activo excipientes tales como manteca de cacao, glicéridos semisintéticos o polietilenglicoles. Las composiciones pueden ser igualmente aerosoles. Para utilización en forma de aerosoles líquidos, las composiciones pueden ser soluciones estériles estables o composiciones sólidas disueltas en el momento del empleo en agua estéril apirógena, suero o cualquier otro vehículo aceptable farmacéuticamente. Para la utilización en forma de aerosoles secos destinados a ser inhalados directamente, el principio activo está finamente dividido y asociado a un diluyente o vehículo sólido hidrosoluble de una granulometría de 30 a 80 pm, por ejemplo, dextrano, manitol o lactosa. En terapéutica humana, los nuevos derivados de estreptogramina según la invención son particularmente útiles en el tratamiento de infecciones de origen bacteriano. Las dosis dependen del efecto buscado y de la duración del tratamiento. El médico determinará la 34
posología que estime más apropiada en función del tratamiento, en función de la edad, el peso, el grado de infección y otros factores propios del sujeto a tratar. Generalmente, las dosis están comprendidas entre 0,5 y 3 g de producto activo en 2 o 3 administraciones por día, por vía oral o parenteral para un adulto. El siguiente ejemplo ilustra una composición según la invención. Ejemplo Se preparan según la técnica habitual comprimidos dosificados con 250 mg de producto activo, que tienen la siguiente composición: (16f?)-20-bromo-16-desoxo-16-fluoro pristinamicina llA 175 mg pristinamicina IB 75 mg excipiente: almidón, sílice hidratada, dextrina, gelatina, estearato magnésico: qsp 500 mg