JP2005298511A - 金銀花、桑白皮及び黄金抽出物を含有し、炎症緩和効果を有する抗紫外線用化粧料組成物。 - Google Patents
金銀花、桑白皮及び黄金抽出物を含有し、炎症緩和効果を有する抗紫外線用化粧料組成物。Info
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Abstract
金銀花抽出物、桑白皮抽出物及び黄金抽出物を含有する抗紫外線用化粧料組成物を提供すること。
【解決手段】
金銀花抽出物、桑白皮抽出物及び黄金抽出物を合計して0.00001〜30重量%含有する抗紫外線用化粧料組成物。
Description
金銀花抽出物の作製
金銀花抽出物を作製するために、金銀花を超純粋精製水で洗浄し、250メッシュを用いて濾過し異質物を除去した後、50℃で24時間乾燥した。乾燥した原材料50kgを、50%ブチレングリコール300kgを用いて40〜50℃で3日間熟成させ、250メッシュで高速遠心分離した。その後、これを濾過し、活性炭で脱色、脱臭してブチレングリコールを加えて金銀花抽出物を作製した。
桑白皮抽出物の作製
桑白皮抽出物を作製するために、桑白皮を超純粋精製水で洗浄し、250メッシュを用いて濾過し異質物を除去した後、50℃で24時間乾燥した。乾燥した原材料50kgを、50%ブチレングリコール250kgを用いて40〜50℃で5日間熟成させ、250メッシュで高速遠心分離した。その後、これを濾過し、活性炭で脱色、脱臭してブチレングリコールを加えて桑白皮抽出物を作製した。
黄金抽出物の作製
黄金抽出物を作製するために、黄金を超純粋精製水で洗浄し、250メッシュを用いて濾過し異質物を除去した後、50℃で24時間乾燥した。乾燥した原材料50kgを、50%ブチレングリコール400kgを用いて40〜50℃で3日間熟成させ、250メッシュで高速遠心分離した。その後、それを濾過し、活性炭で脱色、脱臭してブチレングリコールを加えて黄金抽出物を作製した。
神経細胞株U373MGにおけるサブスタンスRによるIL-6の生合成抑制効果の評価
ヒトの神経細胞株であるU373MGを、ウシ胎仔血清(FBS)10%が含まれたMEM(Minimum Essential Media, GIBCO BRL, Life Technologies社製)培地で96-ウェルプレートの各ウェルに2×104個ずつ細胞を播種し、24時間培養した。その後、培地を除去し、200μlのリン酸緩衝生理食塩水(PBS)で1回洗浄した。またFBSが含まれていない200μlのMEM培地に、上記作製例1〜4の抽出混合物を下記の表2に示す濃度で加えて処理し、ヒポキサンチン(160ul/ml)-キサンチン酸化酵素 (10mU/ml)を用いて化学的にサブスタンスRを形成させ、5時間培養した。その培養液の25μlを分取し、IL-6ELISA(Pharmingen社製、Opt EIA Human IL-6set)でサブスタンスRによるIL-6の遊離抑制効果を測定した。その結果を下記の表2に示した。対照群としては、上記抽出物で処理していないものを用いた。なお、抑制率は、対照群のIL-6の量に対するそれぞれの試料におけるIL-6の減少量の比として求めた。
繊維芽細胞におけるブラジキニン刺激によるIL-6、IL-8の生合成抑制効能評価
ヒトの表皮組織から分離し、培養した皮膚繊維芽細胞を、FBSが10%ずつ含まれたDMEM(Dulbecco’s Modified Eagle’s Media, GIBCO BRL, Life Technologies社製)培地で96-ウェルプレートの各ウェルに2×104個ずつまき、24時間培養した。またFBSの含まれていないDMEMで24時間培養し、ウシ胎仔血清1%が含まれたDMEMに、上記作製例1〜4の抽出混合物を下記の表3に示す濃度で加えて処理し、5時間培養した。その後、培養液を分取し、各培養液25μlあたりのIL-6、IL-8の生合成阻害能力を評価した。その結果を下記の表3に示す。なお、対照群は、上記実験例1と同様に抽出物で処理していないものを用いた。
角化細胞による有害ラジカルの抑制効果の評価
ヒトの表皮組織から分離した角化細胞を、24-ウェルプレートの各ウェルに5×104個ずつ播種し、24時間培養した。その後、FBSが含まれていない培地に切り替え、アスピリン処理を行いシクロオキシゲナーゼ(以下、COXという)の活性を抑制した。アスピリン処理の2時間後に、角化細胞が播種された各ウェルをPBSで2回洗浄し、各ウェルにPBS100μlを加えた。また、この角化細胞に、ヒポキサンチン(160ul/ml)-キサンチン酸化酵素 (10mU/ml)を用いて化学的サブスタンスRを形成させ、その後PBSを取り出し、各ウェルに角化細胞培養液(keratinocyte growth media, Clonetics. Bio Whittacker社、MD, USA)250μlを加えた。次いで、上記作製例1〜4の抽出混合物を、下記の表4に示す濃度で加えて処理し、16時間培養した。また、培養液25μlを取り出し、250μlのPBSで希釈した後、紫外線波長540nmでMTT法(3-(4,5-dimethyl thiazol-2-yl)-2,5 diphenyl tetrazolium bromode)によって化学的に誘導されたサブスタンスRの残量を測定した。その結果を下記の表4に示す。
角化細胞における紫外線刺激によるプロスタグランディン抑制効果の評価
ヒトの表皮組織から分離した角化細胞を、24-ウェルプレートの各ウェルに5×104個ずつまき、24時間培養した。その後、FBSが含まれていない培地に切り替え、アスピリン処理を行いシクロオキシゲナーゼの活性を抑制した。アスピリン処理の2時間後に、角化細胞がまかれた各ウェルをPBSで2回洗浄し、各ウェルにPBS100μlを加えた。また、この角化細胞に、紫外線B(UVB)ランプ(モデル:F15T8、UVB15W、Sankyo Dennki, Japan)を用いて紫外線(30mJ/cm2)を照射した後、PBSを取り出し、各ウェルに角化細胞培養液250μlを加えた。次いで、上記作製例1〜4の抽出混合物を、下記の表5に示した濃度で加えて処理し、16時間培養した。また、その上層液を適当量分取し、16時間で生成したPBS-2を定量することによって、金銀花、桑白皮及び黄金抽出物のプロスタグランディンの抑制効果を評価した。PGE-2の量は、酵素免疫分析法を用いて定量化した。その結果を下記の表5に示す。
臨床実験
上記実験から金銀花、桑白皮及び黄金抽出物剤型における紫外線による皮膚紅斑緩和効能を評価した。実験実施の一ヶ月前から非ステロイド系抗炎症剤及びその他のステロイド剤を服用していない人を対象として、金銀花、桑白皮、黄金抽出物の紫外線による皮膚紅斑抑制効果をKaidbeyとKurbanの方法によって評価した(Kaidbey & Kurban, 1976, J.Invest. Dermatol., Vol 66 pp 153-156)。健康な12人の男子を対象とし、被験者の上腕に穴が6箇所開いた直径1.5cmの不透明のテープを付着した後、各被検者の最小紅斑量(Minimal Erythma Dose, MED)の2倍程度の紫外線(UVB)をSEランプ(波長290〜320nm、Toshiba)で照射し、紅斑を作った。
上記金銀花、桑白皮及び黄金抽出物を含有する紫外線遮断用化粧料を作製した。
Claims (7)
- 金銀花抽出物、桑白皮抽出物及び黄金抽出物を合計して0.00001〜30重量%含有する抗紫外線用化粧料組成物。
- 前記組成物は、紫外線による皮膚刺激又は炎症予防用であることを特徴とする請求項1に記載の化粧料組成物。
- 前記皮膚刺激又は炎症は、IL−6又はIL−8によるものである請求項2に記載の化粧料組成物。
- 前記IL−6又はIL−8は、サブスタンスR又はブラジキニンに起因するものである請求項3に記載の化粧料組成物。
- 前記皮膚刺激又は炎症は、紫外線によって誘導されるシクロオキシゲナーゼ−2の活性に起因するものである請求項2に記載の化粧料組成物。
- 前記組成物は、紫外線遮断剤成分を更に含むものである請求項1に記載の化粧品組成物。
- 前記組成物は、前記紫外線遮断剤成分に起因して誘導される皮膚刺激又は炎症予防用であることを特徴とする請求項6に記載の化粧料組成物。
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