JP2004131482A - ガノデルマルシダム胞子を用いた抗老化/更年期症状緩和 - Google Patents
ガノデルマルシダム胞子を用いた抗老化/更年期症状緩和 Download PDFInfo
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Abstract
【解決手段】ガノデルマルシダムの胞子(GLSs)が発芽活性化されたものを有効量ヒトへ経口投与することによる。
【効果】ヒトの老化を防止/遅延、及び/又は更年期症状が軽減される。特に男性患者に有効である。GLSsは、抗酸化剤として効果があり、特に還元型グルタチオン(GSH)量及びスーパーオキシドジスムターゼ(SOD)活性を上昇させることにより、フリーラジカルによる損傷を低減させる。GLSsはまた、血中のテストステロンレベルを上昇させ、うつ、特に高齢男性患者における老人性のうつを改善することができる。
【選択図】なし
Description
細胞には、全てではないが大部分のフリーラジカルによる損傷を阻止する抗酸化防御システムがある。フリーラジカルによる損傷が続くと、最終的に細胞は死んでしまう。フリーラジカルにより生物内の十分な数の細胞が死ぬ又は損傷を受けると、生物は老化する。
男性更年期は、女性更年期ほどひどくはなく、もっと緩やかなものであり、中には経験しない人もいる。男性更年期は、ホルモン変化、生理学的変化及び化学的変化を伴い、40〜55歳の間の男性に一般的におこる。これには、倦怠感、うつ、怒りっぽさが増す、気分のムラ、性欲減退、勃起障害、及び認識力の変化という特徴がある。原因については十分には研究されていないが、ホルモンの欠乏や過度のアルコール摂取、喫煙、高血圧症、薬物、貧しい食生活、運動不足、血行不良、精神的な問題といった要因が、この状態の原因となることが知られている。
うつは、男性更年期のもうひとつの一般的な共通点である。The Epidemilogic Catchment Area Study in the 1991 NIH Consens Statementによると、うつ症状は、65歳以上の共同体居住者の約15%に起こる。患者は、重苦しい気分、食欲不振、不眠、アネルギー、ならびに人生の通常の追求である興味や楽しみの喪失に見舞われることがある。高齢者の場合には、うつだと診断されず治療が行われないことがしばしばある。その一因は、うつは高齢者に関係する社会的、経済的問題とともに身体的な病気の一般的な結果であると、医療介護提供者及び/又は患者自身がしばしば結論づけるからである。今のところ、男性の更年期に関連した症状、特に高齢者を総合的に緩和する最良の薬剤はない。
ガノデルマの胞子は、ガノデルマの全ての生理活性物質を含有していることから、ガノデルマの本質(essence)を表わすと考えられるが、ガノデルマの研究のほとんどは、実験材料としてガノデルマの子実体又は菌糸体を用いて行われており、ガノデルマ胞子はほとんど研究されていない。
本発明は、ヒトの老化進行を防止/遅延する方法、及び/又は更年期に関連する症状を軽減/緩和する方法を提供するものである。本方法では、発芽活性化ガノデルマルシダム胞子(GLSs)を経口摂取することが必要である。
男性の更年期に関連する症状としては、疲労、食欲不振、動悸、健忘、いら立ち、うつ、インポテンス、及びこれらの併発がある。男性更年期は特に高齢男性に顕著である。
男性の更年期症状を軽減あるいは緩和するために、患者に、1日あたり約0.5〜10g、より好ましくは1〜5gのGLSsを投与する。GLSsは、患者のテストステロン及びスーパーオキシドジスムターゼ(SOD)活性の血中レベルを上昇させる。また、GLSsは、患者のマロンジアルデヒド(MDA)の血中レベルを低下させる。さらに、GLSsは患者、特に高齢者のうつを改善する。
ガノデルマルシダムの成熟胞子を加工処理を行うために選択した。胞子の加工処理には、発芽活性化胞子により産生された大量の生理活性物質を有効に保持するために、3つの特徴的な段階がある。第1段階は、胞子をある期間溶液に浸すことによって発芽を誘発し、次いで発芽誘発された胞子を換気の良い培養器内で培養する工程を含む。第2段階は、胞子壁破壊された(すなわち、胞子上膜の細胞壁の破壊による)胞子の調製工程を含み、これは酵素処理及び/又は機械力によって行うことができる。そして、最終段階は、胞子壁破壊胞子からの生理活性物質の抽出工程を含み、これは、凍結乾燥又は真空乾燥の後、溶媒又は薄膜濃縮による抽出により行うことができる。
I.発芽誘発のための浸漬:ガノデルマルシダムの成熟した完全な胞子を、発芽誘発のための浸漬工程を行うために注意深く選んだ。胞子は赤色ガノデルマルシダムの胞子が速やかに発芽することができる、純水、蒸留水、生理食塩水、あるいは他の栄養液中に保存した。栄養液の例としては、ココナッツジュース、1〜5%麦芽抽出液、ガノデルマルシダムの胞子襄果あるいは細毛体の0.5〜25%抽出物、ビオチン含有0.1〜5%培養液、リン酸カリウム(一塩基性)及び硫酸マグネシウム含有0.1〜3%培養液が挙げられる。溶液の選択は、要求される浸漬時間、処理する胞子量、及び材料の入手可能性などのその他の要因に依存する。上記発芽用溶液の1種以上を赤色ガノデルマルシダムの胞子の0.1〜5倍重量となるように添加して用いることができた。浸漬時間は、水温に応じて決定され、通常は20〜43℃で30分〜8時間浸漬した。好ましい浸漬時間は水温25〜35℃で2〜4時間であった。
GLSsの好ましい経口投与量は、1回につき約2〜4カプセルを1日に1〜3回である。
「フリーラジカル」という用語は、細胞代謝の過程中で絶えず生成され、生体に損傷を与え得る高活性物質の一群を意味する。フリーラジカルは、不対電子を有する原子である。ミトコンドリアは、化学的エネルギーを生み出す細胞領域であり、フリーラジカルを生成し、フリーラジカルによる損傷の主要部である。フリーラジカルは、酸化反応を誘発し、タンパク質を架橋し損傷させ、酵素活性を低下させ、核酸の代謝異常の一因となり、生体膜の多価不飽和脂質の過酸化を引き起こす。フリーラジカルによる攻撃の結果、生体のさまざまな臓器だけでなく、細胞の構造や機能が損傷を受け、結果的に老化及び複数の病変が生じる。
「SRS」という用語は、管理評価尺度(Supervision Rating Scale)のことをいう。SRSでは、患者/被験者が介護者から受ける管理レベルを判定する。SRSは、5段階にランク付けされたカテゴリー(自立、夜間管理、パートタイム管理、フルタイム間接管理、フルタイム直接管理)にさらに分類可能な13ポイントの順序尺度について管理レベルを評価する。SRSは、被験者、及び被験者が受けた管理レベルを直に観察した情報提供者との面接に基づいて、臨床医が評価するように設定された。
グルタチオン(GSH)は、身体の低分子量捕捉剤である。GSHはO2・−またはH2O2を除去することができる。組織中のGSH量は、身体の抗酸化能力を評価するのに重要な要因である。
1.1 材料
体重18〜22gのオス、メス半数づつのNIHマウス60匹を、Guangdong Provincial Animal Center for Medical Experiments(Certificate of Conformity Number : 26-2001A008 (for animal inspection) and 26-2001B008 (for animal facility))から入手した。
発芽活性化ガノデルマルシダム胞子(GLSs)(0.2g/mL)を、Guangzhou Green Food Project Company of the College of Life Sciences、Zhongshan University及びGreen Power Health Products International Co. Ltd., Sweden and Hong Kongから入手した。
試験器具:725UV-Vis分光計、TL-16高速卓上冷却遠心分離機、CS-502超恒温水槽、SL122電子秤、ボルテックスが含まれた。
試験試薬:GSH検査キット(Jenchun Biotech Research Institute, Nangjing, Chinaより入手)、総タンパク検査キット(Chungshen Biotech Hi-tech Co., Beijing, Chinaより入手)が含まれた。
マウスを12匹ずつ5群に無作為に分けた。4つの投薬群には、1g/kg/日、2g/kg/日、4g/kg/日、又は8g/kg/日のGLSsを、15日間毎日、強制摂食により投与した。コントロール群には、15日間毎日、生理食塩水を強制摂食により投与した。
投与期間の終了日に、動物を屠殺し、肝臓を摘出した。それぞれ約0.2gの肝臓組織を正確に量り、10%ホモジネートを調製し、遠心分離を行った。上澄液から30μLを分取し、GSH検査キット及び総タンパク検査キットを用いたGSH量及びタンパク量の検査に供した。GSH量は、mg/mg−タンパクで示した。
表1に示されるように、コントロール群と比較すると、全ての投薬群で、肝臓組織のGSH量の統計的に有意な増加(ペアt検定で、p<0.01)が見られた。
この試験結果は、GLSsによりNIHマウスのGSH量が著しく増加することを示している。このことから、GLSsは体内のGSH量を増加させることができることが明らかとなったので、本実験の条件下では、GLSsが抗老化及び抗酸化活性を有することが示唆された。
1.材料及び方法
1.1 材料
体重18〜22gのオス、メス半数づつのNIHマウス60匹を、Guangdong Provincial Animal Center for Medical Experiments(Certificate of Conformity Number: 36-2001A009 (for animal inspection) and 36-2001B008 (for facility))より入手した。
粉末状の発芽活性化ガノデルマルシダム胞子(GLSs)を、Guangzhou Green Food Project Company of the College of Life Sciences、 Zhongshan University及びGreen Power Health Products International Co., Ltd., Sweden and Hong Kongより入手した。GLSsを適当な水溶液に溶解し、終濃度0.2g/mLとした。
試験器具:725UV-Vis分光計、TL-16高速卓上冷却遠心分離機、CS-502超恒温水槽、SL122電子秤、ボルテックスが含まれた。
試験試薬:SOD検査キット(Jenchun Biotech Research Institute, Nangjing, Chinaより入手)が含まれた。SODの酵素活性はnmol/mLで算出した。
60匹のマウスを無作為に各群12匹ずつ5群(投薬群4、コントロール群1)に分けた。4つの投薬群には、1g/kg/日、2g/kg/日、4g/kg/日、又は8g/kg/日のGLSsを15日間毎日、強制摂食により投与した。コントロール群には、15日間毎日、生理食塩水を強制摂食により投与した。
試験期間の終了日に、動物を屠殺し、肝臓を摘出した。各動物から約0.2gの肝臓組織を採取し、2mL生理食塩水に加え、ホモゲナイズして10%ホモジネートを調製した。ホモジネートを遠心分離した。各ホモジネートの上澄液から30μL分取し、SOD検査キットを使用したSOD検査に供した。
表2に示されるように、コントロール群と比較すると、全ての投薬群で、マウスの総肝臓SOD(T−SOD)酵素活性に統計的に有意な増加(ペアt検定で、p<0.01−0.05)が見られた。
結果は、15日間のGLSs投与により、NIHマウスの肝臓SOD酵素活性が顕著に増加することを示した。コントロール群と比較すると、総SOD(T−SOD)酵素活性、細胞質ゾルSOD(Cu.Zn−SOD)酵素活性、ミトコンドリアSOD(Mn−SOD)酵素活性はいずれも、全ての用量レベルで統計的に有意な増加を示した。これにより、本実験の条件下で、GLSsが抗酸化活性を有することが示唆された。
体内の酵素反応又は非酵素反応により生成する酸素フリーラジカルは、生体膜の多価不飽和脂肪酸(PUFA)を攻撃する。この攻撃は、結果として、脂質の過酸化や、アルデヒド(例えばマロンジアルデヒド、MDA)、ケトン、ヒドロキシル、カルボニル、過酸化水素、過酸化物などの官能基を含む脂質過酸化物の生成、ならびに新しいフリーラジカルの生成などを引き起こし得る。したがって、MDAレベルは、脂質過酸化反応の程度を反映し、細胞損傷の重症度と間接的に関係がある。
MDA測定はしばしば、細胞の機能を評価するためにSOD検出と併用される。SOD活性は、酸素フリーラジカルを除去する細胞能力を示し、MDAレベルは、酸素フリーラジカルの攻撃による細胞損傷の重症度を反映する。
1.1 材料
体重18〜22gのオス、メス半数づつのNIHマウス60匹を、Guangdong Provincial Animal Center for Medical Experiments(Certificate of Conformity Numer: 26-2001A008 (for animal inspection) and 26-2001B008 (for animal facility))より入手した。
発芽活性化ガノデルマルシダム胞子粉末を、Guangzhou Green Food Project Company of the College of Life Sciences、Zhongshan University及びGreen Power Health Products International Co. Ltd., Sweden and Hong Kongより入手した。GLSsを、適当な水溶液に溶解し、終濃度0.2g/mLとした。
試験器具:725UV-Vis分光計、TL-16高速卓上冷却遠心分離機、CS-502超恒温水槽、SL122電子秤、ボルテックスが含まれた。
試験試薬:MDA検査キット(Jenchun Biotech Research Institute, Nangjing, Chinaより入手)が含まれた。
60匹のマウスを、無作為に各群12匹ずつ5群に分けた(投薬群4、コントロール群1)。4つの投薬群には、1g/kg/日、2g/kg/日、4g/kg/日、又は8g/kg/日のGLSsをそれぞれ15日間毎日、強制摂食により投与した。コントロール群には、15日間毎日、生理食塩水を強制摂食により投与した。
試験期間の終了日に、動物を屠殺し、肝臓を摘出した。約0.2gの肝臓組織を約2mLのホモジナイズ用溶液でホモジナイズして10%ホモジネートを得た。ホモジネートを遠心分離した。各ホモジネートの上澄液から10μLを分取し、MDA検査キットを用いたMDA検査に供した。
表5に示されるように、コントロール群と比較すると、全ての投薬群で、肝臓組織におけるMDAの統計的に有意な減少がみられた(ペアt検定で、p<0.01)。
本実験の結果により、GLSsは、NIHマウスのMDA量を効果的に減少させることが示された。これにより、本実験の条件下では、GLSsが体内でのMDA合成を阻害あるいは低減させる抗酸化活性を有することが示唆された。
男性、特に高齢男性の更年期症状は、健康上の心配事である。ますます多くの証拠により、男性ホルモンの生成及び機能の低下の他に、全身の代謝(微小循環代謝、血液粘性、酸素フリーラジカルの代謝など)の全体的なレベルが、高齢男性の身体的及び精神的状態に影響を及ぼし得ることが示されている。全身の代謝の改善により、痴呆発現の遅延、認知機能の改善、うつの軽減、テストステロンレベルの上昇、ならびに神経伝達物質及び脳受容体機能の調節を助けることができると仮定されている。
1.1 試験材料
カプセル化した発芽活性化ガノデルマルシダム胞子(GLSs)を、Gunagzhou Green Food Project Company of the College of Life Sciences、Zhongshan University及びGreen Power Health Products International Co. Ltd., Sweden and Hong Kongより入手した。各カプセルには、約300mgのGLSsが含まれていた。
以下の基準を満足する男性患者に、この試験を許可してもらった。
(1)年齢55〜76歳
(2)6ヶ月〜2年間、更年期症状がある(疲労、不眠、血管収縮、精神的及び心理学的症状、性的不全など)
(3)血中テストステロンレベルが正常値(140ng/dL)よりも低い
(4)重症の脳心臓血管疾患、接触感染症、及び腫瘍診断がいずれもない
(5)中年及び高齢男性用SRS自己評価のスコアが16より高い
(6)Zungうつ数量化スコアが50以上
試験は、中国広東省の広州第一人民病院泌尿器外科で行われた。
1.4 試験手順
投与開始前に、患者から、基準となる病歴、Zungスコア(Zung自己評価式抑うつ尺度)、SRSスコアを得た。朝、空腹時に、各患者から動脈血を採取し、血中のテストステロン、赤血球SOD及びMDAレベルを測定した。
投薬群には、何れの精神的/心理学的疾患に対しても同時に治療を行わず、3週間にわたり、GLSsを1日に3回、2カプセルずつ(GLSs約600mg)投与した。コントロール群にはプラセボを投与した。全ての患者について、週に1度、症状、SRSスコア、及びZungスコアを評価した。各患者の動脈血サンプルを3週間の投与終了時に採取し、血中のテストステロン、赤血球SOD及びMDAレベルを測定した。
平均年齢66歳の有資格の男性、総数138人が、試験に登録された。更年期症状の平均継続期間は、12.3ヶ月であった。138人中 人が独身だった。80人を投薬群に、58人をコントロール群に振り分けた。
表6に示されるように、3週間の投与後、投薬群の患者には全ての更年期症状について統計的に有意な改善(p<0.05)がみられたが、コントロール群ではほとんどの改善に有意差はなかった。さらに、改善に関する患者の主体的な自己評価ベースでは、投薬群患者では74.3%という全体的な有効率が報告されたのに対し、コントロール群患者では28.6%の改善であった。
現代医学では、近年、老人病に対する理解が非常に深まってきているが、1960年代までは、男性の老化進行中のホルモン変化及びそれに付随しておこる疾患は認識されていなかった。いわゆる「男性更年期」は、現在では医療分野に浸透している。男性更年期に関連した症状には、女性更年期と同様のものもある。しかしながら、男性更年期に対するホルモン変化(性ホルモン生成の減少、ライディッヒ細胞活性の低下、性的不全など)と神経機能(視床下部及び下垂体の応答の低下など)との相関関係は、いまだ立証されていない。
一方、コントロール群の患者には、プラセボ効果による改善が見られたが、これは、プラセボが心理学的治療効果を与えたためであると思われる。しかしながら、コントロール群の全体的な改善率28.6%は、GLSs投与患者の全体的な改善率74.3%より、統計的に有意に低かった。
ガノデルマ、特にその胞子の使用は、近年、栽培方法が開発されて以来、多くの研究対象となっている。しかし、ほとんどの研究はそのままの胞子(壁非破壊)を用いて行われた。これに対し、今回の臨床試験で使用したGLSsカプセルは、米国特許公報6316002B1記載の発芽活性化技術を使用して調製された。この技術により、胞子の全活性遺伝物質を治療効果を生み出すために利用できるようになるため、これらの胞子壁破壊胞子はより強力な抗酸化活性及び内分泌系調節活性を発揮する。
GLSsはフリーラジカル捕捉剤であるため、老年男性の更年期症状のよりよい治療選択肢である。さらに、GLSsは、ホルモン補給療法による副作用を生じることなく、テストステロン生成を促進し、うつを軽減し、老化進行を遅らせる。
本明細書で説明、議論した実施例は、本発明を実施及び使用するために、発明者が知る最良の方法を当業者に提供することのみを意図している。本明細書は、本発明の範囲を限定するものと見なされるべきではない。本発明の上述の実施例は、上記記載に照らして当業者が認識できるような修正、変更、要素の追加あるいは除外を本発明の範囲を逸脱することなく行うことがができる。したがって、本発明は、特許請求の範囲及びその均等物の範囲内で、具体的に記載されている以外にも実施できることが理解されるべきである。
Claims (17)
- 発芽活性化されたガノデルマルシダム(Ganoderma lucidum)の胞子(GLSs)の有効量をヒトに経口投与することを含む、ヒトの老化を防止/遅延する、及び/又は更年期症状を軽減/緩和する方法。
- 前記老化がフリーラジカル損傷により引き起こされるものであることを特徴とする、請求項1記載の方法。
- 前記GLSsが抗酸化剤であることを特徴とする、請求項1記載の方法。
- 前記GLSsを前記ヒトに1日あたり0.5〜10g投与することを特徴とする、請求項3記載の方法。
- 前記GLSsを前記ヒトに1日あたり1〜5g投与することを特徴とする、請求項4記載の方法。
- 前記GLSsが前記ヒトの還元型グルタチオン(GSH)及びスーパーオキシドジスムターゼ(SOD)活性を上昇させることを特徴とする、請求項3記載の方法。
- 前記更年期障害の症状が、疲労、食欲不振、動悸、健忘、いら立ち、うつ、及びインポテンスからなる群から選ばれる少なくともひとつであることを特徴とする、請求項1記載の方法。
- 前記ヒトが男性であることを特徴とする、請求項1記載の方法。
- 前記患者が高齢男性であることを特徴とする、請求項8記載の方法。
- 前記GLSsを前記ヒトに1日あたり0.5〜10g投与することを特徴とする、請求項7記載の方法。
- 前記GLSsを前記ヒトに1日あたり1〜5g投与することを特徴とする、請求項10記載の方法。
- 前記GLSsが前記ヒトの血中テストステロンを増加させることを特徴とする、請求項8記載の方法。
- 前記GLSsが前記ヒトの血中スーパーオキシドジスムターゼ(SOD)を増加させることを特徴とする、請求項8記載の方法。
- 前記GLSsが前記ヒトの血中マロンジアルデヒド(MDA)を減少させることを特徴とする、請求項8記載の方法。
- 前記GLSsが前記ヒトのうつを改善することを特徴とする、請求項8記載の方法。
- 請求項1記載の発芽活性化ガノデルマルシダム胞子(GLSs)を含む、ヒトの老化進行の防止/遅延用薬剤。
- 請求項1記載の発芽活性化ガノデルマルシダム胞子(GLSs)を含む、ヒトの更年期症状の軽減/緩和用薬剤。
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