JP2003531129A

JP2003531129A - 炎症性腸疾患を治療するための抗体α４β７インテグリンおよびその使用

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Publication number: JP2003531129A
Application number: JP2001576078A
Authority: JP
Inventors: ブレットマン，リー，アール．; フォックス，ジュディス，エイ．; アリソン，デービッド，エドワード
Original assignee: Genentech Inc; Millennium Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Genentech Inc; Millennium Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2000-04-14
Filing date: 2001-04-13
Publication date: 2003-10-21
Also published as: PT2298348T; LUC00014I1; US20140186345A1; AU2001251629A1; EP1278543A2; WO2001078779A3; FR14C0080I2; JP2012184241A; LUC00014I2; US20200002423A1; FR14C0080I1; EP1278543B1; JP2015083603A; US20120034243A1; EP2298348B1; HK1054320A1; US20050095238A1; US20010046496A1; ES2398096T3; DK2298348T3

Abstract

(57)【要約】 α４β７インテグリンに対して結合特異性を有するヒトまたはヒト化免疫グロブリンまたはその抗原結合性断片の有効量を、粘膜組織の白血球浸潤に関連する疾患を有するヒトに投与することを含む、粘膜組織の白血球浸潤に関連する疾患を有するヒトの治療方法が開示される。好ましくは、体重１ｋｇ当たり約８ｍｇ以下の免疫グロブリンまたは断片が約１ヶ月間に投与される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】関連出願本出願は、２０００年４月１４日に出願された米国特許出願第０９／５５０，
０８２号の継続出願である２０００年１２月２７日に出願された米国特許出願第
０９／７４８，９６０号の継続出願である。上記各出願の全教示は参照により本
明細書に取り込まれる。

【０００２】発明の背景インテグリンレセプターは、リンパ球の再循環と炎症部位への漸増の両方を調
節するのに重要である（Ｃａｒｌｏｓ，Ｔ．Ｍ．およびＨａｒｌａｎ，Ｊ．Ｍ．
，Ｂｌｏｏｄ，８４：２０６８−２１０１（１９９４））。ヒトα４β７インテ
グリンは、数個のリガンドをもち、そのうちの１つは、腸間膜リンパ節の高内皮
性小静脈、およびパイヤー斑（Ｓｔｒｅｅｔｅｒ，Ｐ．Ｒ．ら、Ｎａｔｕｒｅ
３３１：４１−４６（１９８８））上に発現する粘膜血管アドレシン(addressin
) ＭＡｄＣＡＭ−１（Ｂｅｒｌｉｎ，Ｃ．ら、Ｃｅｌｌ７４：１８５−１９５
（１９９３）；Ｅｒｌｅ，Ｄ．Ｊ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５３：５１７−
５２８（１９９４））である。このため、α４β７インテグリンは、腸粘膜リン
パ様組織へのリンパ球移動を媒介するホーミングレセプターとして作用する（Ｓ
ｃｈｗｅｉｇｈｏｆｆｅｒ，Ｔ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：７１７−７
２９（１９９３））。また、α４β７インテグリンは、フィブロネクチンおよび
血管の細胞接着分子−１（ＶＣＡＭ−１）と相互作用する。

【０００３】炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、例えば潰瘍性大腸炎およびクローン病などは、胃腸
管の炎症を伴う消耗性および進行性の疾患でありうる。米国だけで推定２００万
人の人々が罹患し、症状には、腹痛、痙攣、下痢および直腸からの出血が含まれ
る。ＩＢＤ処置には、抗炎症薬（コルチコステロイドおよびスルファサラジンな
ど）、免疫抑制薬（６−メルカプトプリン、シクロスポリンおよびアザチオプリ
ンなど）および手術（結腸切除など）が含まれている。Ｐｏｄｏｌｓｋｙ，Ｎｅ
ｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３２５：９２８−９３７（１９９１）およびＰｏ
ｄｏｌｓｋｙ，ＮｅｗＥｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３２５：１００８−１０１６
（１９９１）。しかしながら、かかる治療剤は、ＩＢＤの寛解を維持するには効
果的ではない。

【０００４】マウスモノクローナル抗体Ａｃｔ−１（ｍＡｂＡｃｔ−１）などのヒトα４
β７インテグリンに対する抗体は、粘膜リンパ節内の高内皮性小静脈上に存在す
る粘膜アドレシン細胞接着分子−１（ＭＡｄＣＡＭ−１）へのα４β７インテグ
リンの結合を妨害する。Ａｃｔ−１は、最初にＬａｚａｒｏｖｉｔｓ，Ａ．Ｉ．
ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３３：１８５７−１８６２（１９８４）により、ヒ
ト破傷風トキソイド特異的Ｔリンパ球で免疫したマウスから単離され、マウスＩ
ｇＧ１／κ抗体であると報告された。Ｓｃｈｗｅｉｇｈｏｆｆｅｒ，Ｔ．ら、Ｊ
．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：７１７−７２９（１９９３）による該抗体の最近の
解析では、この抗体が、α４β７インテグリンを選択的に発現するヒト記憶ＣＤ
４＋Ｔリンパ球のサブセットに結合しうることが示された。しかしながら、ヒト
における治療に適用するためにマウス抗体を使用することに伴う深刻な問題は、
ヒトにおいて高度に免疫原性で、ヒト抗マウス抗体応答（ＨＡＭＡ）が急激に誘
導されることであり、これは、患者におけるマウス抗体の有効性を低減し、継続
投与を妨げ得る。ＨＡＭＡ応答は、マウス抗体の速やかなクリアランスをもたら
し、いかなる治療効果をも大きく制限する。

【０００５】したがって、炎症性腸疾患およびその他の粘膜組織の炎症性疾患に対する治療
アプローチの改善が必要とされている。

【０００６】発明の概要本発明は、抗体（例えば、ヒト化抗体、ヒト抗体）を投与する方法に関する。
一局面において、本発明は、α４β７インテグリンに対する結合特異性を有する
免疫グロブリンの有効量をヒトに投与する工程を含む、粘膜組織の白血球浸潤に
関連する疾患を有するヒトの治療方法である。好ましい態様では、体重１ｋｇあ
たり約８ｍｇ以下の免疫グロブリンを約１ヶ月間投与する。特定の態様では、免
疫グロブリンは、マウスＡｃｔ−１ｍＡｂのＣＤＲのアミノ酸配列を有する１
つまたはそれ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み得る。ＬＤＰ−０２は、投
与に好ましい抗体である。免疫グロブリンは、複数回の投薬で投与することがで
き、投薬の間隔は、少なくとも１日以上である。特定の態様では、投薬の間隔は
、少なくとも約７、１４もしくは２１日または約１ヶ月である。一態様では、一
投薬あたりの免疫グロブリンの投与量は、投薬後少なくとも約１０日間で、循環
リンパ球上のα４β７結合部位の約５０％以上の飽和、および／または循環リン
パ球の表面上でのα４β７インテグリン発現の約５０％以上の阻害を達成するの
に十分な量でありうる。別の態様では、一投薬あたりの免疫グロブリンの投与量
は、投薬後約１０日間で、少なくとも約１μｇ／ｍＬの該免疫グロブリンの血清
濃度を達成および維持するのに十分な量でありうる。

【０００７】免疫グロブリンは、単独で、または粘膜組織の白血球浸潤に関連する疾患を治
療するための１つ以上の他の薬剤とともに投与することができる。例えば、免疫
グロブリンは、ステロイド類、免疫抑制剤、非ステロイド系抗炎症剤または免疫
調節剤とともに投与することができる。好ましい態様では、免疫グロブリンは、
クローン病または潰瘍性大腸炎などの炎症性腸疾患を有するヒトを治療するため
に投与される。

【０００８】発明の詳細な説明本発明は、被験体に抗体（免疫グロブリン）を投与する方法に関する。一局面
では、投与される抗体は、α４β７インテグリンに対する結合特異性を有するヒ
トまたはヒト化抗体（例えば、哺乳動物α４β７（例えば、ヒト（ホモサピエン
ス）α４β７）である。好ましくは、ヒトまたはヒト化免疫グロブリンは、少な
くとも約１０⁷Ｍ^-1、好ましくは少なくとも約１０⁸Ｍ^-1、およびより好ましく
は少なくとも約１０⁹Ｍ^-1の親和性でα４β７インテグリンに結合しうる。一態
様では、ヒト化免疫グロブリンは、α４β７インテグリンに結合する非ヒト起源
の抗原結合領域と、ヒト定常領域由来の定常領域とを含む。別の態様では、α４
β７インテグリンに結合するヒト化免疫グロブリンは、非ヒト起源の相補性決定
領域と、ヒト起源の可変フレームワーク領域と、所望により、ヒト起源の定常領
域とを含有する。例えば、ヒト化免疫グロブリンは、α４β７インテグリンに結
合する非ヒト起源の抗体由来の相補性決定領域とヒト起源の軽鎖由来のフレーム
ワーク領域とを含有する軽鎖、およびα４β７インテグリンに結合する非ヒト起
源の抗体由来の相補性決定領域とヒト起源の重鎖由来のフレームワーク領域とを
含有する重鎖を含有しうる。

【０００９】天然の免疫グロブリンは、２つの同一の軽鎖（約２４ｋＤ）および２つの同一
の重鎖（約５５または７０ｋＤ）が四量体を形成した共通のコア構造を有する。
各鎖のアミノ末端部分は、可変（Ｖ）領域として知られており、各鎖の残りのよ
り保存された定常（Ｃ）領域とは区別されうる。軽鎖の可変領域内には、Ｊ領域
として知られるＣ末端部分がある。重鎖の可変領域内には、Ｊ領域に加えてＤ領
域がある。免疫グロブリンにおけるアミノ酸配列のバリエーションのほとんどは
、超可変領域または相補性決定領域（ＣＤＲ）として知られる、抗原結合に直接
関与するＶ領域内の３個の別個の部分に限定される。アミノ末端から順に、これ
らの領域を、それぞれＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３と称する。ＣＤＲは、
より保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）により定位置に保持される。アミノ
末端から順に、これらの領域を、それぞれＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、およびＦＲ
４と称する。ＣＤＲ領域およびＦＲ領域の位置および番号付けシステムは、Ｋａ
ｂａｔら（Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．ら、ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉ
ｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，第５版，Ｕ．Ｓ
．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｅａｌｔｈａｎｄＨｕｍａｎＳｅｒｖ
ｉｃｅｓ，Ｕ．Ｓ．ＧｏｖｅｒｎｍｅｎｔＰｒｉｎｔｉｎｇＯｆｆｉｃｅ（
１９９１））により規定されている。

【００１０】ヒト免疫グロブリンは、重鎖のアイソタイプに応じてクラスおよびサブクラス
に分けることができる。該クラスには、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤおよび
ＩｇＥが含まれ、ここで、重鎖は、それぞれ、ガンマ（γ）、ミュー（μ）、ア
ルファ（α）、デルタ（δ）またはイプシロン（ε）型である。サブクラスには
、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２が含まれ
、ここで重鎖は、それぞれγ１、γ２、γ３、γ４、α１およびα２型である。
選択されたクラスまたはサブクラスのヒト免疫グロブリン分子は、カッパ（κ）
軽鎖またはラムダ（λ）軽鎖のいずれかを有する。例えば、Ｃｅｌｌｕｌａｒ
ａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｗｏｎｓｉｅｗｉｃｚ，
Ｍ．Ｊ．編，第４５章，４１−５０頁，Ｗ．Ｂ．ＳａｕｎｄｅｒｓＣｏ，Ｐｈ
ｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ（１９９１）；Ｎｉｓｏｎｏｆｆ，Ａ．，Ｉｎｔｒ
ｏｄｕｃｔｉｏｎｔｏＭｏｌｅｃｕｌａｒＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，第２版
，第４章，４５−６５頁，ＳｉｎａｕｅｒＡｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｉｎｃ．，
Ｓｕｎｄｅｒｌａｎｄ，ＭＡ（１９８４）を参照のこと。

【００１１】本明細書で使用される「免疫グロブリン」という用語は、全抗体およびその生
物学的機能性断片を含む。かかる生物学的機能性断片は、対応する完全長抗体の
少なくとも１つの抗原結合機能（例えば、Ａｃｔ−１抗体のα４β７に対する特
異性）を保持し、好ましくは、そのリガンド（例えば、ＭＡｄＣＡＭ−１、フィ
ブロネクチン）の１つまたはそれ以上とα４β７との相互作用を阻害する能力を
保持する。特に好ましい態様では、生物学的機能性断片は、粘膜アドレシン（Ｍ
ＡｄＣＡＭ−１）へのα４β７の結合を阻害しうる。本明細書に記載のようにし
て投与しうる生物学的機能性抗体断片の例には、単鎖抗体、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａ
ｂ’およびＦ（ａｂ’）₂断片などの、α４β７インテグリンに結合しうる断片
が含まれる。かかる断片は、酵素的切断により、または組換え技術により作製す
ることができる。例えば、パパインまたはペプシンでの切断により、それぞれＦ
ａｂ断片またはＦ（ａｂ’）₂断片が生じうる。必要な基質特異性を有する他の
プロテアーゼもまた、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）₂または他の抗原結合性断片を作製
するのに使用することができる。また、抗体は、天然の停止部位の上流に１つま
たはそれ以上の停止コドンが導入された抗体遺伝子を用いて、種々の切形型で作
製することができる。例えば、Ｆ（ａｂ’）₂重鎖部分をコードするキメラ遺伝
子を設計し、重鎖のＣＨ₁ドメインおよびヒンジ領域をコードするＤＮＡ配列を
含めることができる。

【００１２】本明細書で使用される「ヒト化免疫グロブリン」という用語は、異なる起源の
免疫グロブリンの部分（ここで、少なくとも１つの部分がヒト起源である）を含
有してなる免疫グロブリン（抗体）をいう。例えば、ヒト化抗体は、慣用技術（
例えば、合成）により化学的に互いに連結されているか、または組換えＤＮＡ技
術を用いて連続したポリペプチドとして調製された（例えば、キメラ抗体のタン
パク質部分をコードするＤＮＡを発現させて、連続したポリペプチド鎖を生成さ
せうる）、必要な特異性を有するマウスなどの非ヒト起源の免疫グロブリン由来
の部分と、ヒト起源の免疫グロブリン（例えば、キメラ免疫グロブリン）配列に
由来する部分とを含有しうる。ヒト化免疫グロブリンの別の例は、非ヒト起源の
抗体由来のＣＤＲと、ヒト起源の軽鎖および／または重鎖由来のフレームワーク
領域（例えば、フレームワーク変化を持つ、または持たないＣＤＲグラフト抗体
）とを含有する１つまたはそれ以上の免疫グロブリン鎖を含んでなる免疫グロブ
リンである。キメラまたはＣＤＲグラフト単鎖抗体もまた、ヒト化免疫グロブリ
ンという用語に包含される。例えば、Ｃａｂｉｌｌｙら、米国特許第４，８１６
，５６７号明細書；Ｃａｂｉｌｌｙら、欧州特許第０，１２５，０２３Ｂ１号
明細書；Ｂｏｓｓら、米国特許第４，８１６，３９７号明細書；Ｂｏｓｓら、欧
州特許第０，１２０，６９４Ｂ１号明細書；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．Ｓ．ら
、国際公開公報８６／０１５３３パンフレット；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．Ｓ．
ら、欧州特許第０，１９４，２７６Ｂ１号明細書；Ｗｉｎｔｅｒ，米国特許第
５，２２５，５３９号明細書；Ｗｉｎｔｅｒ，欧州特許第０，２３９，４００
Ｂ１号明細書；Ｑｕｅｅｎら、欧州特許第０４５１２１６Ｂ１号明細書；
Ｐａｄｌａｎ，Ｅ．Ａ．ら、欧州特許出願第０，５１９，５９６Ａ１号明細書
を参照のこと。また、単鎖抗体については、Ｌａｄｎｅｒら、米国特許第４，９
４６，７７８号明細書；Ｈｕｓｔｏｎ，米国特許第５，４７６，７８６号明細書
；およびＢｉｒｄ，Ｒ．Ｅ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４２：４２３−４２６（１
９８８））を参照のこと。特定の態様では、ヒト化免疫グロブリンは、非ヒト起
源（例えば、マウス起源）の可変領域およびヒト定常領域の少なくとも一部（例
えば、Ｃγ１）を有する免疫グロブリン鎖（例えば、重鎖）、ならびに少なくと
も１つのＣＤＲが非ヒト起源（例えば、マウス起源）であり、フレームワーク領
域（ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４）および、任意に定常領域（例えば、Ｃκ
、Ｃλ）がヒト起源である免疫グロブリン鎖（例えば、軽鎖）を含みうる。

【００１３】ヒト化免疫グロブリンの抗原結合領域（非ヒト部分）は、α４β７インテグリ
ンに対する結合特異性を有する非ヒト起源の免疫グロブリン（ドナー免疫グロブ
リンと称する）由来でありうる。例えば、好適な抗原結合領域は、マウスＡｃｔ
−１モノクローナル抗体（Ｌａｚａｒｏｖｉｔｓ，Ａ．Ｉ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ．，１３３（４）：１８５７−１８６２（１９８４））由来でありうる。他
の供給源には、齧歯類（例えば、マウス、ラット）、ウサギ、ブタ、ヤギまたは
非ヒト霊長類（例えば、サル）などの非ヒト供給源から得られるα４β７インテ
グリン特異的抗体が含まれる。Ａｃｔ−１抗体またはＬＤＰ−０２と同じまたは
類似のエピトープに結合する抗体などの他のポリクローナル抗体またはモノクロ
ーナル抗体を作製しうる（例えば、Ｋｏｈｌｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４
９５−４９７（１９７５）；Ｈａｒｌｏｗら、１９８８，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ
：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ，（ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａ
ｒｂｏｒ，ＮＹ）；およびＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌ
ｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，第２巻（増補２７，‘９４夏），Ａｕｓｕｂｅ
ｌら編（ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ：ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹ），第
１１章（１９９１））。

【００１４】例えば、抗体は、適当な哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ヒツジ
）中の適切な免疫原に対して生じうる。免疫する抗原の調製法、ならびにポリク
ローナルおよびモノクローナル抗体製造は、任意の適当な技術を用いて行うこと
ができる。種々の方法が記載されている（例えば、Ｋｏｈｌｅｒら、Ｎａｔｕｒ
ｅ２５６：４９５−４９７（１９７５）およびＥｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．
６：５１１−５１９（１９７６）；Ｍｉｌｓｔｅｉｎら，Ｎａｔｕｒｅ２６６
：５５０−５５２（１９７７）；Ｋｏｐｒｏｗｓｋｉら，米国特許第４，１７２
，１２４号明細書；Ｈａｒｌｏｗ，ＥおよびＤ．Ｌａｎｅ，１９８８，Ａｎｔｉ
ｂｏｄｉｅｓ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ，（ＣｏｌｄＳｐ
ｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙ：ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇ
Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ）；ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓＩｎＭｏｌ
ｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２（補遺２７，１９９４年、夏），Ａ
ｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．ら編（ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ：Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ，ＮＹ），第１１章，（１９９１）を参照）。例えば、適当な免疫化剤
は、α４β７を有する細胞、α４β７を含有する膜画分、α４β７を含む適当な
免疫原の免疫原断片、適当な担体を結合したβ７ペプチドなどを含む。抗体産生
細胞（例えば、リンパ球）は、例えば、免疫された動物のリンパ節や脾臓から単
離され得る。次いで、この細胞は適当な不死化細胞〔例えば、ミエローマ細胞株
（例えば、ＳＰ２／０，Ｐ３×６３Ａｇ８．６５３）〕に融合させることができ
、それによってハイブリドーマを形成させる。融合細胞は選択的な培養技術を用
いて単離され得る。所望の特異性を有する抗体を産生する細胞は、適当なアッセ
イ（例えば、ＥＬＩＳＡ）を用いて選択され得る。必要な特異性の抗体（ヒト抗
体、非ヒト抗体）を作製しまたは単離する他の適当な方法は、例えば、ライブラ
リー（例えば、ファージディスプレイライブラリー）から組み換え抗体を選択す
る方法を含む。ヒト抗体のレパートリーを産生することができるトランスジェニ
ック動物（例えば、ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）（Ａｂｇｅｎｉｘ，Ｆｒｅ
ｍｏｎｔ，ＣＡ）は、適当な方法を用いて作製することができる（例えば、国際
公開第９８／２４８９３号パンフレット（Ａｂｇｅｎｉｘ）、１９９８年６月１
１日公開；Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｅ，Ｒ．およびＪａｋｏｂｏｖｉｔｓ，Ａ．
，米国特許第５，９３９，５９８号明細書；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら，Ｐｒｏｃ
．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：２５５１−２５５５（１９９３
）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２５５−２５８（１９９
３）を参照）。ヒト抗体のレパートリーを産生することができるトランスジェニ
ック動物のさらなる製造方法が記載されている（例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇら、米
国特許第５，５４５，８０６号明細書；Ｓｕｒａｎｉら，米国特許第５，５４５
，８０７号明細書；Ｌｏｎｂｅｒｇら、国際公開第９７／１３８５２号パンフレ
ット）。

【００１５】一つの態様において、ヒト化免疫グロブリンの抗原結合領域は、非ヒト起源の
ＣＤＲを含む。この態様において、α４β７インテグリンに対して結合特異性を
有するヒト化免疫グロブリンは、非ヒト起源の少なくとも一つのＣＤＲを含む。
例えば、ヒト化免疫グロブリンが非ヒト起源の１つ以上の免疫グロブリン由来の
重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３、および／または軽鎖ＣＤＲ１
、ＣＤＲ２および／またはＣＤＲ３を実質的に含むように、ＣＤＲは、非ヒト起
源の免疫グロブリンの軽鎖および重鎖の可変領域に由来し得、得られたヒト化免
疫グロブリンは、α４β７インテグリンに対して結合特異性を有する。好ましく
は、選択された鎖の３つのＣＤＲ全てがドナーの対応する鎖のＣＤＲと実質的に
同じであり、より好ましくは、軽鎖および重鎖の６つのＣＤＲ全てが対応するド
ナーの鎖のＣＤＲと実質的に同じである。好ましい態様において、非ヒト起源の
１つ以上のＣＤＲは、マウスＡｃｔ−１ＡｂのＣＤＲのアミノ酸配列（配列番
号：９−１４）を有する。

【００１６】ヒト起源のヒト化免疫グロブリンまたは免疫グロブリン鎖の一部（ヒト部分）
は、任意の適当なヒト免疫グロブリンまたは免疫グロブリン鎖に由来し得る。例
えば、ヒト定常領域またはその一部は、存在する場合、対立遺伝子変異体を含む
、ヒト抗体のκもしくはλ軽鎖、および／またはγ（例えば、γ１、γ２、γ３
、γ４）、μ、α（例えば、α１、α２）、δもしくはε重鎖から得ることがで
きる。特定の定常領域（例えば、ＩｇＧ１）、その変異体またはその一部は、エ
フェクター機能を調整するために選択され得る。例えば、変異した定常領域（変
異体）を、融合タンパク質に組み込んで、Ｆｃレセプターへの結合および／また
は補体を固定する能力を最小限にすることができる（例えば、Ｗｉｎｔｅｒら、
ＧＢ２，２０９，７５７Ｂ；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら，国際公開第８９／０７１４２
号パンフレット；Ｍｏｒｇａｎら、国際公開第９４／２９３５１号パンフレット
、１９９４年１２月２２日）。ＬＤＰ−０２は、ヒトＦｃγレセプターへの結合
を低減するように改変された重鎖定常領域（ヒトγ１重鎖定常領域）を含有する
。ＬＤＰ−０２Ｆｃ改変は、２３５位と２３７位にある（即ち、Ｌｅｕ²³⁵→Ａ
ｌａ²³⁵およびＧｌｙ²³⁷→Ａｌａ²³⁷）。

【００１７】存在する場合、ヒト起源の（例えば、軽鎖可変領域の）フレームワーク領域は
、抗原結合領域ドナーの類似領域（例えば、軽鎖可変領域）との配列類似性を有
するヒト抗体可変領域に由来することが好ましい。ヒト化免疫グロブリンのヒト
起源部分に対するフレームワーク領域の他の供給源には、ヒト可変コンセンサス
配列が含まれる（例えば、Ｋｅｔｔｌｅｂｏｒｏｕｇｈ，Ｃ．Ａ．ら，Ｐｒｏｔ
ｅｉｎＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ４：７７３−７８３（１９９１）；Ｃａｒｔ
ｅｒら，国際公開第９４／０４６７９号パンフレット、１９９４年３月３日公開
））。例えば、非ヒト部分を得るのに使用される抗体または可変領域の配列は、
Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．ら，ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆ
ＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，第５版，米国保健社会福祉
省、米国政府印刷局（１９９１）に記載のヒト配列と比較することができる。特
に好ましい態様において、ヒト化免疫グロブリン鎖のフレームワーク領域は、非
ヒトドナー抗体（例えば、マウスＡｃｔ−１抗体）の可変領域と、少なくとも約
６５％の全配列同一性、好ましくは少なくとも約７０％の全配列同一性を有する
ヒト可変領域由来である。ヒト部分は、非ヒトドナーの等価部分（例えば、ＦＲ
）と比べた場合に、使用される特定の部分（例えば、ＦＲ）内で少なくとも約６
５％の配列同一性、好ましくは少なくとも約７０％の配列同一性を有するヒト抗
体にも由来し得る。アミノ酸配列同一性は、デフォルトパラメーターを使用する
レーザージーンシステム（Ｌａｓｅｒｇｅｎｅｓｙｓｔｅｍ）（ＤＮＡＳＴＡ
Ｒ社、Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）などの、適当な配列アライメントアルゴリズムを
用いて測定することができる。

【００１８】一つの態様において、ヒト化免疫グロブリンは、ヒト起源の抗体の１つ以上の
鎖由来のフレームワーク領域（ＦＲ）を少なくとも１つ含む。したがって、ＦＲ
は、ヒト起源の１つ以上の抗体由来のＦＲ１および／またはＦＲ２および／また
はＦＲ３および／またはＦＲ４を含みうる。好ましくは、選択されたヒト化鎖の
ヒト部分は、ヒト起源の可変領域由来（例えば、ヒト免疫グロブリン鎖由来、ヒ
トコンセンサス配列由来）のＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３およびＦＲ４を含む。

【００１９】ヒト化抗体を調製するのに使用するため、非ヒトおよびヒト起源の免疫グロブ
リン部分は、免疫グロブリンまたはそれらが由来する免疫グロブリン部分に、ま
たはその変異体に同一の配列を有することができる。かかる変異体は、１つ以上
の残基の付加、欠失、または置換により異なる変異体を含む。上記に示されるよ
うに、非ヒト起源のＣＤＲは、非ヒトドナーにおいて実質的に同じであり、非ヒ
トドナーのＣＤＲと同一であることが好ましい。ヒト起源のフレームワーク領域
の残基をドナーの対応する位置の残基と置換するなどの、フレームワーク領域の
改変を行うことができる。１つ以上のアミノ酸の欠失、挿入および置換を含む１
つ以上の変異をフレームワーク領域において行うことができる。選択されたヒト
化抗体または鎖について、適当なフレームワーク変異体を設計することができる
。好ましくは、ヒト化免疫グロブリンは、非ヒトドナーのものと類似のまたはよ
り良好な親和性でα４β７インテグリンを結合することができる。変異体は、非
ヒトドナーまたはアクセプターのヒト鎖の突然変異誘発を含む、種々の適当な方
法により作製することができる。

【００２０】ヒトα４β７インテグリンに対して結合特異性を有する免疫グロブリン（例え
ば、ヒトおよび／またはヒト化免疫グロブリン）は、α４鎖（例えば、ｍＡｂ
ＨＰ１／２（Ｐｕｌｉｄｏ，ら，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ２６６：１０２４１
−１０２４５（１９９１），マウスＭＡｂ２１．６およびヒト化ＭＡｂ２１．６
（Ｂｅｎｄｉｇら，米国特許第５，８４０，２９９号明細書））および／または
α４β７ヘテロダイマーのβ７鎖の決定因子（エピトープ）に結合することがで
きる免疫グロブリン（抗原結合性断片を含む）を含む。例えば、特定の態様にお
いて、ヒトまたはヒト免疫グロブリンは、特異的にまたは選択的にα４β７複合
体の決定因子を結合することができるが、α４鎖またはβ７鎖上の決定因子（エ
ピトープ）を結合することはできない。一つの態様において、ヒトまたはヒト化
免疫グロブリンは、α４β７ヘテロダイマー上の組み合わせエピトープ（combin
atorial epitope)に対して結合特異性を有し得る。このような免疫グロブリンは
α４β７を結合することができるが、例えば、α４β１を結合することはできな
い。α４β７複合体に対する結合特異性を有する抗体は、マウスＡｃｔ−１抗体
およびＬＤＰ−０２と呼ばれるヒト化Ａｃｔ−１を含む（ＬｅｕｋｏＳｉｔｅ社
，１９９８年２月１９日公開の国際公開第９８／０６２４８号パンフレットおよ
び１９９６年８月１５日に出願された米国出願第０８／７００，７３７号を参照
、両方の教示は、すべて参照により本明細書に組み込まれる）。好ましい態様に
おいて、ヒト化免疫グロブリンは、結合作用（例えば、α４β７インテグリンに
対する特異性を有する、同一または類似のエピトープ特異性を有する）、および
／または阻害作用（例えば、インビトロおよび／またはインビボにおけるα４β
７インテグリンのＭＡｄＣＡＭ−１への結合を阻害する能力、あるいはα４β７
インテグリンを有する細胞のそのリガンドへの結合を阻害する能力（例えば、Ｍ
ＡｄＣＡＭ−１を有する細胞）などの、インビトロおよび／またはインビボでの
α４β７依存性接着を阻害する能力）などの、マウスＡｃｔ−１抗体に特徴的な
少なくとも１つの作用を有する。したがって、好ましいヒト化免疫グロブリンは
、α４β７に対する結合について、マウスＡｃｔ−１抗体の結合特異性、マウス
Ａｃｔ−１抗体のエピトープ特異性（例えば、マウスＡｃｔ−１、キメラＡｃｔ
−１抗体、またはヒト化Ａｃｔ−１（例えば、ＬＤＰ−０２）と（例えば、α４
β７インテグリンを有する細胞上で）競合することができる）、および／または
阻害作用を有し得る。前記方法に従って投与するのに特に好ましいヒト化Ａｂは
、ＬＤＰ−０２である。

【００２１】 α４β７インテグリンに対する結合特性を有するヒトまたはヒト化免疫グロブ
リンの結合作用は、標準的な免疫学的な方法、例えば、ヒト化免疫グロブリンと
α４β７インテグリン〔例えば、ヒトリンパ球（例えば、ＣＤ４⁺α４^hiβ^loサ
ブセットのリンパ球）、α４β７インテグリンを発現するα４および／またはβ
７をコードする核酸を含むヒトリンパ球系または組み換え宿主細胞などの、α４
β７インテグリンを有する細胞上のα４β７インテグリンを含む膜画分〕との複
合体形成をモニターするアッセイを用いる方法によって検出され得る。結合およ
び／または接着アッセイあるいは他の適当な方法を、必要な特異性をもつ（例え
ば、ライブラリー由来の）免疫グロブリン（例えば、ヒトおよび／またはヒト化
免疫グロブリン）の同定および／または単離手法（例えば、α４β７インテグリ
ンを有する細胞とそのリガンド（例えば、ＭＡｄＣＡＭを発現する第二の細胞、
固定化ＭＡｄＣＡＭ融合タンパク質（例えば、ＭＡｄＣＡＭ−Ｉｇキメラ）との
間の接着をモニターするアッセイ）または他の適当な方法に用いることもできる
。

【００２２】ヒト化免疫グロブリンを調製するのに用いられる非ヒトおよびヒト起源の免疫
グロブリン部分は、軽鎖、重鎖ならびに軽鎖および重鎖部分を含む。これらの免
疫グロブリン部分は、（例えば、部分のデノボ合成より）免疫グロブリンから得
るまたは由来しうる、または所望の特性（例えば、α４β７インテグリンを結合
すること、配列類似性）を有する免疫グロブリンもしくはその鎖をコードする核
酸を作製し、発現させることができる。所望のヒト化鎖をコードする遺伝子（例
えば、ｃＤＮＡ）を作製するため、ヒトまたは非ヒト起源の所望の部分（例えば
、抗原結合領域、ＣＤＲ、ＦＲ、定常領域）を含むヒト化免疫グロブリンを合成
および／または組み換え核酸を用いて作製することができる。鎖部分を調製する
ため、１つ以上の停止コドンを所望の位置に導入することができる。例えば、新
たに設計されたヒト化可変領域をコードする核酸（例えば、ＤＮＡ）配列を、Ｐ
ＣＲ突然変異誘発方法を用いて、既存のＤＮＡ配列を改変するために構築するこ
とができる（例えば、Ｋａｍｍａｎ，Ｍ．ら、Ｎｕｃｌ．ＡｃｉｄｓＲｅｓ．
１７：５４０４（１９８９）を参照）。新規なＣＤＲをコードするＰＣＲプラ
イマーを、同じ、または非常に類似したヒト可変領域に基づく、予めヒト化され
た可変領域のＤＮＡテンプレートにハイブリダイズさせることができる（Ｓａｔ
ｏ，Ｋ．ら，ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ５３：８５１−８５６（１９９
３））。類似のＤＮＡ配列がテンプレートとしての使用に利用できない場合、可
変領域配列をコードする配列を含む核酸を、合成オリゴヌクレオチドから構築す
ることができる（例えば、Ｋｏｌｂｉｎｇｅｒ，Ｆ．，ＰｒｏｔｅｉｎＥｎｇ
ｉｎｅｅｒｉｎｇ８：９７１−９８０（１９９３）を参照）。シグナルペプチ
ドをコードする配列も核酸（例えば、合成の際、ベクターに挿入する際）組み込
むことができる。天然のシグナルペプチド配列が入手できない場合、他の抗体由
来のシグナルペプチド配列を使用することができる（例えば、Ｋｅｔｔｌｅｂｏ
ｒｏｕｇｈ，Ｃ．Ａ．，ＰｒｏｔｅｉｎＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ４：７７３
−７８３（１９９１）を参照）。これらの方法、本明細書に記載の方法または他
の適当な方法を用いて、容易に変異体を作製することができる。一つの態様にお
いて、（例えば、ＬＤＰ−０２の）クローン化された可変領域に突然変異を起こ
させることができ、そして所望の特異性を有する変異体をコードする配列を選択
することができる（例えば、ファージライブラリーから；例えば、Ｋｒｅｂｂｅ
ｒら，米国特許第５，５１４，５４８号明細書；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、国際
公開第９３／０６２１３号パンフレット、１９９３年４月１日公開）を参照）。

【００２３】ヒトおよび／またはヒト化免疫グロブリンを、本発明の方法に従い、治療目的
および／または診断目的で（例えば、ヒトに）投与することができる。例えば、
粘膜組織の白血球浸潤に関連する疾患（例えば、クローン病または潰瘍性大腸炎
などの炎症性腸疾患）を治療するために、α４β７インテグリンに対して結合特
異性を有するヒトおよび／またはヒト化免疫グロブリンの有効量をヒトに投与す
ることができる。処置には、治療的または予防的な処置が含まれる（例えば、維
持療法）。この方法によれば、疾患を予防又は遅延させる（例えば、発症を遅ら
せる、緩解または鎮静を延長する）ことができたり、あるいは疾患の重篤度を全
体的または部分的に低減させることができる。

【００２４】一つの態様において、約１ヵ月間に体重１ｋｇあたり約８ｍｇ以下の免疫グロ
ブリンを投与する。さらなる態様では、約１ヵ月間に体重１ｋｇあたり約７ｍｇ
以下または約６ｍｇ以下または約５ｍｇ以下または約４ｍｇ以下または約３ｍｇ
以下または約２ｍｇ以下または約１ｍｇ以下の免疫グロブリンを投与する。本明
細書に用いられるように、「月」とは、暦の月をいい、２８日、２９日、３０日
および３１日の期間を含む。ヒトまたはヒト化免疫グロブリンの抗原結合性断片
を投与すべき場合、約１ヵ月間に投与される量は、断片のサイズにしたがって調
整することができる。例えば、抗原結合性断片が完全抗体の重量の約半分のサイ
ズである場合（例えば、ｋＤａで測定）、約１ヵ月間に投与される量は体重１ｋ
ｇあたり約４ｍｇ以下であり得る。投与される免疫グロブリンまたは抗原結合性
断片の量は、ｍｇ／ｋｇ体重としてまたは任意の他の適当な単位を用いて表現さ
れ得る。例えば、免疫グロブリンまたは抗原結合性断片の投与量は、体重１ｋｇ
あたり抗原結合部位のモルとして表現され得る。抗原結合部位のモル数は、免疫
グロブリンまたは断片のサイズ、量および結合価に依存し、容易に測定すること
ができる。例えば、ＩｇＧおよびそのＦ（ａｂ’）₂断片は２価であり、１ナノ
モルのＩｇＧまたはＦ（ａｂ’）₂断片を含む１用量は、２ナノモルの抗原結合
部位を含む。抗体または抗原結合性断片のサイズは、任意の適当な方法（例えば
、ゲル濾過）を用いて測定することができる。

【００２５】ヒトもしくはヒト化抗体または抗原結合性断片は、単回量または初回量後の１
以上の二次投与量で投与され得る。反復投与が望ましい場合、所望の治療および
／または診断効果を達成するために、投与間の間隔および免疫グロブリンまたは
抗原結合性断片の量を調節することができる。例えば、投与すべき各用量は体重
１ｋｇあたり約８ｍｇまでの免疫グロブリンまたは断片を独立して含有すること
ができる。１回の投与量が体重１ｋｇあたり約８ｍｇの免疫グロブリンまたは断
片を含む場合、次の用量が投与される前の最小限の間隔は約１ヵ月間である。好
ましくは、各用量は、体重１ｋｇあたり約０．１〜約８ｍｇまたは約０．１〜約
５ｍｇの免疫グロブリンまたは断片を独立して含む。さらに好ましくは、各用量
は、体重１ｋｇあたり約０．１〜約２．５ｍｇの免疫グロブリンまたは断片を含
む。最も好ましくは、各用量は、体重１ｋｇあたり約０．１５ｍｇ、約０．５ｍ
ｇ、約１．０ｍｇ、約１．５ｍｇまたは約２．０ｍｇの免疫グロブリンまたは断
片を独立して含む。

【００２６】２つの投与の間隔（例えば、初回量と最初の二次投与量、１回目の二次投与量
と２回目の二次投与量）はいずれも、個々に数秒または数分から約１２０日以上
まで変化し得る。例えば、初回量を投与することができ、１回目の二次投与量を
約１日後に投与することができる。その後、２回目および３回目の二次投与量を
約１ヵ月の間隔で投与することができる。一般に、投与間の最小限の間隔は、少
なくとも約１日間または少なくとも約７日間である。特定の態様において、投与
間の最小限の間隔は、少なくとも約１４日間、または少なくとも約２１日間、ま
たは少なくとも約１ヵ月間（例えば、２８日、２９日、３０日、３１日）である
。さらなる態様において、投与間の間隔は、少なくとも約４０日、約５０日、約
６０日、約７０日、約８０日、約９０日、約１００日、約１１０日または約１２
０日であってもよい。

【００２７】各投与で投与されるヒトもしくはヒト化免疫グロブリンまたはその抗原結合性
断片の量は、所望の薬動力学的または薬力学的な効果を生じるのに十分な量であ
り得る。種々のヒトおよび／またはヒト化免疫グロブリンまたはその抗原結合性
断片の薬動力学的または薬力学的パラメーターは、適当な方法を用いて測定する
ことができる。例えば、抗体および抗原結合性断片の薬力学的パラメーター（例
えば、抗原飽和、抗原発現の抗体誘導阻害）を、適当な免疫アッセイを用いて測
定することができる。例えば、本明細書に記載されるように、ＬＤＰ−０２の投
与後のα４β７シグナル（即ち、α４β７への標識した抗体の結合）をフローサ
イトメトリーで測定した。そのアッセイの結果は、ＬＤＰ−０２の投与が、循環
しているリンパ球表面上でα４β７の飽和および／またはα４β７の発現の阻害
を生じ得ることを示した。

【００２８】したがって、各投与量は、用量投与後、少なくとも約１０日間で、ａ）循環し
ているリンパ球（例えば、ＣＤ８⁺細胞）上のα４β７インテグリン結合部位の
約５０％以上の飽和および／またはｂ）循環しているリンパ球の細胞表面上での
α４β７インテグリン発現の約５０％以上の阻害を達成するのに十分な量の免疫
グロブリンまたは断片を含むことができる。別の態様において、各用量は、用量
投与後、少なくとも約１０日間で、ａ）循環しているリンパ球上のα４β７イン
テグリン結合部位の約６０％以上、約７０％以上、約８０％以上または約８５％
以上の飽和および／またはｂ）循環しているリンパ球の細胞表面上でのα４β７
インテグリン発現の約６０％以上、約７０％以上、約８０％以上または約８５％
以上の阻害を達成および維持するのに十分な量の免疫グロブリンまたは断片を含
むことができる。

【００２９】他の詳細な態様において、各用量は、循環リンパ球（例えば、ＣＤ８＋細胞）
上のα４β７インテグリン結合部位の所望の飽和度を達成するおよび／または用
量の投与後少なくとも約１４日、少なくとも約２０日、少なくとも約２５日また
は少なくとも約一ヶ月の期間、所望の程度で循環リンパ球の細胞表面上のα４β
７インテグリンの発現を阻害するのに十分な量の免疫グロブリンまたは断片を含
有しうる。さらなる態様において、各用量は、循環リンパ球（例えば、ＣＤ８＋
細胞）上のα４β７インテグリン結合部位の所望の飽和度を達成するおよび／ま
たは少なくとも約４０日、約５０日、約６０日、約７０日、約８０日、約９０日
、約１００日、約１１０日または約１２０日の期間、所望の程度で循環リンパ球
の細胞表面上のα４β７インテグリンの発現を阻害するのに十分な量の免疫グロ
ブリンまたは断片を含有しうる。

【００３０】所望の血清濃度を達成するあるいは標的抗原の発現を飽和するおよび／または
阻害するのに必要な抗体の用量を決定する適切なアッセイが、容易に設計されう
る。例えば、フローサイトメトリーに基づくアッセイが、α４β７に結合する免
疫グロブリン（例えば、ヒトまたはヒト化）の投与後の被験体から単離された細
胞の表面上のα４β７発現を測定するのに使用されうる。１つの態様において、
ヒトα４β７に結合するマウス抗体が使用されうる。好ましくは、マウス抗体は
、ヒトまたはヒト化免疫グロブリンにより結合されるエピトープとは異なるα４
β７のエピトープに結合し得、α４β７に対するマウス抗体の結合はヒト化免疫
グロブリンの先の結合により阻害（例えば、遮断）されない。これらの特性を有
するマウス抗体または他の抗体は、本明細書に記載の方法または他の適切な方法
を用いて調製および選択されうる。ヒトから単離された循環リンパ球（例えば、
ＣＤ８＋細胞）上のα４β７発現のレベルは、各抗体（すなわち、投与される免
疫グロブリン、マウス抗体）を用いてフローサイトメトリーまたは他の適切な方
法により測定または決定されうる。次いで、投与されるヒトまたはヒト化抗体が
ヒトに投与され得、投与後所定の時間に末梢血液が抜き取られ得、リンパ球が解
析のために単離（例えば、密度勾配遠心分離法による）されうる。末梢血液リン
パ球（例えば、ＣＤ８＋細胞）は各抗体を用いて染色され得、各抗体により検出
されたα４β７の量は、フローサイトメトリーまたは他の適切な方法により測定
または検出されうる。ヒトまたはヒト化免疫グロブリンを用いて測定または決定
されたα４β７インテグリンの量における減少は、ａ）投与された免疫グロブリ
ンによる持続性のインテグリン占有（例えば、抗原飽和）および／またはｂ）リ
ンパ球の表面上のα４β７発現の阻害（例えば、α４β７のダウンモジュレーシ
ョン、α４β７の減少(shedding)）を示す。マウス抗体を用いて測定または決定
されたα４β７インテグリンの量に変化のないヒトまたはヒト化免疫グロブリン
を用いて測定または決定されたα４β７インテグリンの量における減少は、投与
されたヒトまたはヒト化免疫グロブリンによるα４β７の持続性の占有（例えば
、飽和）を示す。マウス抗体を用いて測定または決定されたα４β７インテグリ
ンの量における減少を有するヒトまたはヒト化免疫グロブリンを用いて測定また
は決定されたα４β７インテグリンの量における減少は、循環リンパ球の表面上
のα４β７発現の阻害を示す。

【００３１】前記抗体の投与後の時間に関する該抗体の血清濃度などの薬物動態学のパラメ
ーターが、ＥＬＩＳＡまたは細胞ベースアッセイなどのイムノアッセイを用いて
測定されうる。例えば、本明細書に記載されるように、抗体（ＬＤＰ−０２）の
単回投与後の所定の時点でのヒト化抗α４β７免疫グロブリン（ＬＤＰ−０２）
の血清濃度を、細胞ベースアッセイを用いて測定した。アッセイの結果、ＬＤＰ
−０２の血清濃度はヒト化抗体の投与後約１０日間以上高いまま（例えば、１μ
ｇ／ｍＬ以上）でありうることが明らかになった。血清中にＬＤＰ−０２が延長
して存在することは、α４β７機能の持続性阻害、例えば、α４β７が媒介する
ＭＡｄＣＡＭへの白血球の接着の持続性阻害を生じる結果として優れた効能を示
しうる。

【００３２】したがって、投与される各用量は、用量の投与後少なくとも約１０日間少なく
とも約１μｇ／ｍＬの血清濃度を達成および維持するのに十分な量の免疫グロブ
リンまたは断片を含有しうる。詳細な態様において、各用量は、用量の投与後少
なくとも約１４日、少なくとも約２０日、少なくとも約２５日または少なくとも
約一ヶ月間、少なくとも約１μｇ／ｍＬの血清濃度を達成および維持するのに十
分な量の免疫グロブリンまたは断片を含有しうる。さらなる態様において、各用
量は、少なくとも約４０、約５０、約６０、約７０、約８０、約９０、約１００
、約１１０または約１２０日間、少なくとも約１μｇ／ｍＬの血清濃度を達成お
よび維持するのに十分な量の免疫グロブリンまたは断片を含有しうる。

【００３３】本明細書に記載されるように、ヒトまたはヒト化免疫グロブリンの抗原結合性
断片は、インタクトであるかまたは天然の免疫グロブリンより実質的に小さいも
のであり得、それゆえにタンパク質１単位（μｇ）当たりより多くの抗原（α４
β７）に結合しうる。したがって、優れた効能を示しうるヒトまたはヒト化免疫
グロブリンの抗原結合性断片の血清濃度は、１μｇ／ｍＬ未満でありうる。した
がって、ヒトまたはヒト化免疫グロブリンの抗原結合性断片の投与が所望である
場合、用量は、インタクトな免疫グロブリンについて１μｇ／ｍＬに比例する血
清濃度に達するのに十分な量の抗原結合性断片を含有しうる。例えば、抗原結合
性断片が重量によりインタクトな抗体の約半分の大きさである場合（例えば、ｋ
Ｄａで測定する）、用量は、少なくとも約１０日間約０．５μｇ／ｍＬの血清濃
度を達成および維持するのに十分な量を含有しうる。免疫グロブリンまたは抗原
結合性断片の所望の血清濃度を、μｇ／ｍＬとして、または他の適切な単位を使
用して表しうる。例えば、投与される免疫グロブリンまたは抗原結合性断片の量
は、血清容積当たりの抗原結合部位のモル（例えば、Ｍ）として表されうる。

【００３４】ヒトおよびヒト化免疫グロブリンは、本発明によりインビボ診断適用のため、
または治療（予防を含む）適用におけるα４β７インテグリン機能を調節するた
めに投与されうる。例えば、ヒトおよびヒト化免疫グロブリンは、被験体におけ
るα４β７インテグリンのレベルを検出および／または測定するために使用され
うる。例えば、α４β７インテグリンに対する結合特異性を有するヒト化免疫グ
ロブリンをヒトに投与することができ、形成される抗体−α４β７インテグリン
複合体が適切な方法を用いて検出されうる。例えば、ヒト化抗体は、例えば、放
射性核種（¹²⁵Ｉ、¹¹¹Ｉｎ、テクネチウム９９ｍ）、エピトープ標識（ｔａｇ
）、アフィニティー標識（例えば、ビオチン、アビジン）、スピン標識、酵素、
蛍光基または化学発光基で標識され得、適切な検出方法が使用されうる。本方法
の適用において、ヒト化免疫グロブリンは、α４β７インテグリンの反応性およ
び／または発現に関して正常組織対炎症組織（例えば、ヒト由来）を解析する（
例えば、放射線学的に）ため、またはＩＢＤもしくは他の状態とα４β７の増加
した発現（例えば、罹患組織における）との関連を検出するために使用されうる
。本明細書に記載される免疫グロブリンは、正常組織対炎症組織におけるα４β
７インテグリンの存在の評価のために本発明の方法により投与され得、それによ
って疾患の存在、疾患の発達および／または炎症性疾患における抗α４β７イン
テグリン療法の効能が評価されうる。

【００３５】ヒトおよびヒト化免疫グロブリン（抗原結合性断片を含む）は、α４β７イン
テグリンの結合機能および／または白血球（例えば、リンパ球、単球）浸潤機能
を調節する（例えば、阻害する（低減または阻止する））ために個体に投与され
うる。例えば、リガンド（すなわち１つ以上のリガンド）へのα４β７インテグ
リンの結合を阻害するヒトおよびヒト化免疫グロブリンは、組織、特に分子ＭＡ
ｄＣＡＭを発現する組織の白血球（例えば、リンパ球、単球）の浸潤（組織にお
ける白血球の漸増および／または蓄積を含む）に関連する疾患の治療方法により
投与されうる。ヒト免疫グロブリンもしくはその抗原結合性断片またはヒト化免
疫グロブリンもしくはその抗原結合性断片（すなわち、１つ以上の免疫グロブリ
ンもしくは断片）の有効量が、かかる疾患を治療するために個体（例えば、ヒト
または他の霊長類などの哺乳動物）に投与される。例えば、胃腸管（腸関連内皮
を含む）、他の粘膜組織、または分子ＭＡｄＣＡＭ−１を発現する組織（例えば
、小腸および大腸の粘膜固有層の細静脈などの腸関連組織；および乳腺（例えば
、乳汁分泌乳腺））の白血球浸潤に関連する疾患を含む炎症性疾患は、本発明の
方法により治療されうる。同様に、ＭＡｄＣＡＭ−１を発現する細胞（例えば、
内皮細胞）への白血球の結合を生じる組織の白血球浸潤に関連する疾患を有する
個体が、本発明により治療されうる。

【００３６】特に好ましい態様において、治療されうる疾患としては、したがって、潰瘍性
大腸炎、クローン病、回腸炎、セリアック病、非熱帯性スプルー、セロネガティ
ブ関節症に関連する腸症、微視的またはコラーゲン蓄積大腸炎、好酸球性胃腸炎
、直腸結腸切除術後生じる回腸嚢炎、および回腸肛門吻合などの炎症性腸疾患（
ＩＢＤ）が挙げられる。

【００３７】膵炎およびインスリン依存性糖尿病は、本方法を用いて治療されうる他の疾患
である。ＮＯＤ（非肥満糖尿病）マウス、ならびにＢＡＬＢ／ｃマウスおよびＳ
ＪＬマウス由来の外分泌膵臓においていくつかの管によりＭＡｄＣＡＭ−１が発
現されることが報告されている。報告によれば、ＭＡｄＣＡＭ−１の発現はＮＯ
Ｄマウスの膵臓の炎症した島において内皮上で誘導され、ＭＡｄＣＡＭ−１は、
インスリン炎の初期段階にＮＯＤ島内皮により発現された優勢アドレシン(addre
ssin) であった(Hanninen, A. ら、J. Clin. Invest., 92: 2509-2515(1993))。
さらに、島内でα４β７を発現するリンパ球の蓄積が観察され、ＭＡｄＣＡＭ−
１は、炎症した島由来の管へのリンパ腫細胞のα４β７を介する結合に影響を与
えた(Hanninen, A. ら、J. Clin. Invest., 92: 2509-2515(1993))。

【００３８】本発明の方法により治療されうる粘膜組織に関連する炎症性疾患の例としては
、乳腺炎（乳腺）、胆嚢炎、胆管炎、胆管周囲炎（胆管および肝臓の周囲組織）
、慢性気管支炎、慢性静脈洞炎、喘息、および対宿主性移植片病（例えば、胃腸
管内）が挙げられる。クローン病で見られるように、炎症はしばしば粘膜表面を
超えて拡大し、それゆえに過敏性肺炎、膠原病、類肉腫症、および他の特発性の
状態などの間質性線維症を生じる肺の慢性炎症性疾患が、治療を受けうる。

【００３９】治療は、治癒的であり得、寛解もしくは静止状態を誘導し得、または進行中の
疾患の再発もしくは回帰を阻止しうる。本方法により、治療は、例えば、一時的
または慢性でありうる（例えば、進行中の疾患の長期にわたる治療、静止状態の
疾患を維持する、静止状態を誘導および静止状態を維持する）。

【００４０】特に好ましい態様において、α４β７インテグリンに結合特異性を有するヒト
またはヒト化免疫グロブリンは、潰瘍性大腸炎またはクローン病などの炎症性腸
疾患を有するヒトに投与される。免疫グロブリンは、進行中の疾患を治療するた
めおよび／または静止状態を維持する（すなわち、再発または回帰を阻害する）
ために投与されうる。詳細な態様において、１つ以上の他の薬剤（例えば、ステ
ロイド類（プレドニゾン、プレドニゾロン、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）
）、シクロスポリンＡ、ＦＫ５０６、ＴＮＦαに結合特異性を有する抗体（イン
フリキシマブ(infliximab)、ＣＤＰ５７１）、アザチオプリン(azathioprene)、
６−メルカプトプリン、５−アミノサリチル酸（５−ＡＳＡ）または５−ＡＳＡ
を含む化合物（例えば、スルファサラジン(sulfsalazine)、オルサラジン(olsal
azine)、バルサラジド(balsalazide) 、抗生物質（例えば、メトロニダゾル）、
インターロイキン（ＩＬ−１０、ＩＬ−１１）、ニコチン、ヘパリン、サリドマ
イド、リドカイン(lidocane)）または手術（例えば、腸切除）での治療により誘
導されている炎症性腸疾患の静止状態を維持するために、ヒトまたはヒト化免疫
グロブリンが投与されうる。

【００４１】ヒト免疫グロブリンもしくはその抗原結合性断片またはヒト化免疫グロブリン
もしくはその抗原結合性断片は、有効量で投与される。治療に関して有効量は、
所望の治療（予防を含む）効果を達成するのに十分な量（例えば、α４β７イン
テグリンが媒介するそのリガンドへの結合および／またはシグナル伝達を低減ま
たは阻止し、それにより白血球の接着および浸潤および／または関連する細胞応
答を阻害するするのに十分な量；寛解を誘導するまたは疾患の再発もしくは回帰
を阻止するのに十分な量）である。ヒト免疫グロブリンもしくはその抗原結合性
断片またはヒト化免疫グロブリンもしくはその抗原結合性断片は、本明細書に記
載される単回用量でまたは初期用量、続く１回以上の引き続く用量で投与されう
る。特定の用量ならびに投与間で投与される免疫グロブリンまたは抗原結合性断
片の量は、一般的健康、年齢、性別、体重および薬物に対する耐性ならびに疾患
の型および重篤性などの個体の特徴に依存しうる。当業者は、これらのおよび他
の因子に依存して適当な用量を決定しうるであろう。

【００４２】本方法により、ヒトまたはヒト化免疫グロブリンが、個体（例えば、ヒト）に
単独でまたは他の薬剤（すなわち、１つ以上のさらなる薬剤）と共に投与されう
る。ヒトまたはヒト化免疫グロブリンは、さらなる薬剤の投与前、投与と同時ま
たは投与後に投与されうる。１つの態様において、α４β７インテグリンのその
リガンドへの結合を阻害する１をこえるヒトまたはヒト化免疫グロブリンが投与
される。別の態様において、内皮リガンドへの白血球の結合を阻害する抗ＭＡｄ
ＣＡＭ−１抗体、抗ＶＣＡＭ−１抗体、または抗ＩＣＡＭ−１抗体などの抗体（
例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体）が、α４β７インテグリンに結合するヒトまた
はヒト化免疫グロブリンに加えて投与される。さらに他の態様において、さらな
る薬理学的活性成分（例えば、５−アミノサリチル酸（５−ＡＳＡ）または５−
ＡＳＡを含む化合物（例えば、スルファサラジン、オルサラジン、バルサラジド
）、他の非ステロイド抗炎症性化合物、またはステロイド抗炎症性化合物（例え
ば、プレドニゾン、プレドニゾロン、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ））、免
疫抑制剤（アザチオプリン、６−メルカプトプリン、シクロスポリンＡ、ＦＫ５
０６）、免疫調節剤（例えば、ＴＮＦαに対する結合特異性を有する抗体（イン
フリキシマブ、ＣＤＰ５７１）、サリドマイド、インターロイキン（例えば、組
換えヒトＩＬ−１０、組換えヒトＩＬ−１１）、抗生物質（例えば、メトロニダ
ゾル）、ニコチン、ヘパリン、リドカイン）が、本発明のヒト化免疫グロブリン
と共に投与されうる。

【００４３】種々の投与経路が可能であり、必ずしも限定されないが、治療される疾患また
は状態に依存して、非経口（例えば、静脈内、動脈内、筋内、鞘内、皮下注射）
、経口（例えば、食事）、局所、吸入（例えば、気管支内、鼻腔内または経口吸
入、点鼻薬）、または直腸が挙げられる。非経口投与、特に静脈内注射および皮
下注射が好ましい。

【００４４】ヒト免疫グロブリンまたはその抗原結合性断片および／またはヒト化免疫グロ
ブリンまたはその抗原結合性断片が、粘膜組織の白血球浸潤に関連する疾患（例
えば、炎症性腸疾患（例えば、潰瘍性大腸炎、クローン病）の治療のための医薬
組成物または生理学的組成物の要素として個体に投与されうる。かかる組成物は
、本明細書に記載されるα４β７インテグリンに結合特異性を有する免疫グロブ
リンまたは抗原結合性断片、および薬学的または生理学的に許容されうるキャリ
アを含有しうる。同時療法(co-therapy)のための医薬組成物または生理学的組成
物は、α４β７インテグリンに結合特異性を有する免疫グロブリンまたは抗原結
合性断片および１つ以上のさらなる治療剤を含有しうる。α４β７インテグリン
機能に対する結合特異性を有する免疫グロブリンまたは抗原結合性断片と、さら
なる治療剤とは、投与前に共に混合しうるかまたは別々に投与しうる異なる組成
物の成分でありうる。処方は、選択された投与経路により変化するであろう（例
えば、溶液、乳液、カプセル）。適切なキャリアは、免疫グロブリンまたはその
抗原結合性断片および／またはさらなる治療剤と相互作用しない不活性成分を含
みうる。レミントン(Remington) の製薬科学、Mack Publishing Company, Easto
n, PA に記載されているような標準の薬学処方技術が、使用されうる。非経口投
与のための適切なキャリアとしては、例えば、滅菌水、生理食塩水、静菌食塩水
（約０．９％ベンジルアルコールを含む食塩水）、リン酸緩衝化食塩水、ハンク
ス溶液、リンガー乳酸などが挙げられる。組成をカプセルに入れる（例えば、硬
質ゼラチンまたはシクロデキストランのコーティング内など）方法は、当該分野
で公知である(Baker, ら、「生物学的活性薬剤の制御された放出」、Jhon Wiley
およびSons, 1986) 。吸入に関しては、薬剤は、可溶化され、投与のための適切
なディスペンサー（例えば、アトマイザ、ネブライザ、加圧エーロゾルディスペ
ンサー）内に充填されうる。

【００４５】本発明を以下実施例により説明するが、いかなる限定も意図しない。

【００４６】実施例導入ＬＤＰ−０２は、α４β７インテグリンに結合するヒト化ＩｇＧ１モノクロー
ナル抗体であり、ほとんどのＴおよびＢリンパ球の表面上に存在する細胞表面糖
タンパク質である。α４β７は、ホーミング受容体ＭＡｄＣＡＭ−１との接着相
互作用を介して、胃腸粘膜および腸関連リンパ組織へのリンパ球輸送を媒介する
。α４β７−ＭＡｄＣＡＭ−１相互作用を遮断することにより、ＬＤＰ−０２は
、血管系から胃腸粘膜への白血球の漸増を阻害し得、したがって、潰瘍性大腸炎
およびクローン病などの炎症性腸疾患（ＩＢＤ）を罹患する患者における炎症性
活性に有利な効果を有する。

【００４７】この段落は、完結した２つのＬＤＰ−０２臨床試験からの情報を示す。これら
の試験は、健康な被験体において行なわれた１つの完結した相Ｉの研究（研究Ｌ
２９７−００７）および潰瘍性大腸炎（ＵＣ）を罹患した患者における１つの完
結した相Ｉｂ／ＩＩａ試験（研究Ｌ２９７−００６）を含む。表Ｉは、各研究を
説明する。

【００４８】

【表１】

【００４９】実施例１：研究L297-007 「健康な男性ボランティアにおける皮下および静脈内経路により投与されたLD
P-02の耐容性、薬動力学および薬物動態学を調査するプラセボ−対照、二重盲検
、上昇用量研究」と題された研究L297-007は完了しており、最終的な結果をこの
セクションで示す。

【００５０】研究設計研究L297-007は、健康な男性ボランティアにおける無作為化、二重盲検、プラ
セボ−対照、上昇単一用量研究であった。全ての封入（inclusion ）／排除（ex
clusion ）判定基準に適合する18〜50歳の健康な男性ボランティアを、研究グル
ープにより経時的に研究に登録し、各研究グループ内で、LDP-02またはプラセボ
（すなわち、等張性クエン酸ナトリウム緩衝液）を無作為に割り当てて与えた。
被験体の危険性を最小にするために、安全性および耐容性を次の用量レベルに増
大させる前に各用量レベルで再検討した。治療グループおよび研究のために計画
された被験体の数を表２に示す。

【００５１】

【表２】

【００５２】研究１日目に、LDP-02またはプラセボを、大腿へのSC（グループ１ SC 用量の
み）または30分間一定速度でのIV注入のいずれかで投与した（グループ１〜４）
。安全性評価には、有害事象の記録、身体検査、生命徴候、臨床検査（すなわち
、血液学、血液化学、および尿検査）、血漿サイトカインレベル、および12リー
ド心電図（ECG ）が含まれた。さらに、これはLDP-02の最初の臨床試験であった
ので、連続心臓モニタリングを投薬前から投薬の４時間後まで行った。血液サン
プルを得て、LDP-02に対する抗- 抗体応答、サイトカインレベル、血清LDP-02濃
度（薬物動態学）、およびα4 β7 レセプターおよびリンパ球サブセットの飽和
および結合部位占有（薬動力学）を評価した。研究評価を、治療の36日後までの
特定の時間に行った。36日目の薬物動態学的および薬力学的（免疫学的）分析の
結果の後、プロトコルを修正し、LDP-02を与えた被験体に対してさらに採血でき
るようにした。これらの採血を用いて、定量できなくなるまで（すなわち、定量
の限界未満[BLQ] ）LDP-02血清レベルを追跡し、α4 β7 飽和および記憶細胞集
団がベースライン（投薬前）レベルに戻ったことを確認した。この修正は、終末
相動力学の特徴が36日までに十分に確立されていない高用量グループで特に重要
であった。

【００５３】研究結果薬物動態学血清LDP-02のアッセイを、確証された細胞ベースアッセイを用いて行った。標
準およびサンプルを、α4 β7 抗原を発現する標的細胞株（HUT-78）とともにイ
ンキュベートした。洗浄の後、蛍光標識ポリクローナル抗ヒトIgG1を添加した。
蛍光強度をフローサイトメトリーにより測定し、LDP-02標準の蛍光強度と比較し
た。次いで、LDP-02の効果的な血清濃度を、サンプルと既知の濃度のLDP-02で作
成した検量線との比較により規定した。

【００５４】 LDP-02血清濃度を決定するための血液サンプルを、投薬前、投薬の１、1.5 、
３、８、12および24時間後、ならびに３、５、７、８、15、22、および36日後に
収集した。LDP-02が36日目に依然として検出可能であることが知られていた場合
、レベルがアッセイの定量の限界未満に低下するまでLDP-02を与えた被験体から
採血した。LDP-02を与えた14名の被験体の内の13名が、投薬の最大226 日後まで
の追跡調査採血に関して回復した。

【００５５】個々の患者による時間経過におけるLDP-02濃度およびLDP-02用量グループによ
る平均薬物動態学的パラメータは、研究L297-007の付録に示す。時間経過におけ
る平均LDP-02血清濃度を、全ての治療グループの最終採血に対して図６にプロッ
トする。

【００５６】

【表３】

【００５７】４つの用量グループについて平均単一用量IV薬物動態学的パラメータの値を得
た（C _max、t_1/2zおよびAUG ）。追跡調査サンプル（すなわち、36日を超えて
採取したもの）は、病巣が安全であった場合、濃度−時間プロフィールのいくつ
かのさらなる特徴付けを可能にした。約10日の２つのより低い用量グループ（0.
15および0.5mg/kg）とより高い用量グループ（1.5 および2.5mg/kg）との間のt₁ _/2z 値における差異は、より高い用量グループの「真の」終末期が特徴付けられ
なかったことにおいて説明され得た。より低い用量のLDP-02（0.15および0.5mg/
kg）の非区画（non-compartmental ）薬物動態学は、充分に特徴付けられ、用量
が2.5mg/kgに上昇したときに非線状薬物動態学が明らかになった。

【００５８】 LDP-02の薬力学的効果の評価蛍光活性化細胞分取（FACS）解析を用いて、LDP-02投与の前および後の末梢血
リンパ球上のα4 β7 部位の存在を測定した。抗体によって認識されるα4 β7
を検出するために、ビオチン標識ACT-1 、LDP-02のマウスホモログを患者血液サ
ンプルに加え、PE- ストレプトアビジンを用いて検出した。標準化した平均等価
可溶性蛍光（MESF）は、検出可能α4 β7 部位の数に比例する。

【００５９】時間経過における血清α4 β7 結合（MESF値および投与後の各時間点でのベー
スラインのパーセンテージ）は、個々の被験体および研究L297-007の付録の治療
グループによって示される。

【００６０】 FACS分析により測定されるように、各治療に関する時間経過における（すなわ
ち、36日目まで）リンパ球上のα4 β7 インテグリンの平均飽和を図７に示す。
図７から理解されるように、全てのLDP-02用量の投与後、少なくとも２週間、リ
ンパ球上に遊離α4 β7 結合部位は検出されなかった。約７日目〜22日目に、0.
15mg/kg のIV用量グループおよび0.15mg/kg のSC用量グループのα4 β7 シグナ
ルは、ベースラインに戻り始めた。22日目〜36日目に、0.5mg/kgのIV用量グルー
プのα4 β7 シグナルはベースラインに戻り始めた。より高い用量のLDP-02研究
（1.5 および2.5mg/kg）でのα4 β7 シグナルの喪失は、単一IV投薬後36日より
も長く持続した。2.5mg/kg用量グループに関して、α4 β7 結合飽和は70日目ま
で続いた（研究L297-007の付録のデータを参照）。

【００６１】リンパ球上の遊離α4 β7 結合部位がベースライン（投薬前）レベルに戻って
いることを確認するために、約200 研究日までの追跡調査採血を行った。遊離α
4 β7 部位の最初の再現は、LDP-02血液濃度が検出不可能になったときに起こる
ようであった。

【００６２】結論健康な男性被験体への0.15、0.50、1.50および2.5mg/kgのIV用量ならびに0.15
mg/kg のSC用量でのLDP-02の投与は良好に耐容性を示した。

【００６３】全てのLDP-02用量の投与の後、リンパ球上の遊離α4 β7 結合部位は投薬後約
２週間検出されなかった。α4 β7 結合部位の飽和は、0.15mg/kg のIVグループ
について投与後約２週間および0.15mg/kg のSCおよび0.5mg/kgのIVグループにつ
いて投薬後約３週間継続した。効果の持続期間は、1.5mg/kgのIV用量で１ヶ月以
上持続し、2.5mg/kgのLDP-02のIVで約70日目まで継続した。36日後に得られた追
跡調査サンプルは、遊離α4 β7 結合部位の発現がベースライン（投薬前のレベ
ル）に戻ったことを示した。LDP-02に対する抗イディオタイプ抗体は惹起されず
、体液性免疫応答を開始しないことを示した。用量を2.5mg/kgまで増大させると
、より低用量のLDP-02（0.15および0.15mg/kg ）の非区画薬物動態学は明らかに
なった。

【００６４】研究L297-007の付録治療グループによる被験体による時間経過におけるLDP-02血清濃度。個々の被験体からのデータを表４〜９に示す。

【００６５】

【表４】

【００６６】

【表５】

【００６７】

【表６】

【００６８】

【表７】

【００６９】

【表８】

【００７０】

【表９】

【００７１】研究L297-007：個々の患者からの治療グループデータによる平均薬物動態学的パ
ラメータを表１０〜１４に示す。

【００７２】

【表１０】

【００７３】

【表１１】

【００７４】

【表１２】

【００７５】

【表１３】

【００７６】

【表１４】

【００７７】 L297-007：治療グループによる被験体による時間経過における血清α4 β7 結合
。個々の患者からのデータを表１５〜２０に示す。各被験体について、血液サン
プリングの時間、サンプルのMESFおよびベースライン（投薬前）MESFの％を示す
。

【００７８】

【表１５】

【００７９】

【表１６】

【００８０】

【表１７】

【００８１】

【表１８】

【００８２】

【表１９】

【００８３】

【表２０】

【００８４】実施例２．研究L297-006 「中程度に重篤な潰瘍性大腸炎を有する患者におけるLDP-02の安全性、耐容性
、薬動力学、薬物動態学、および有効性を測定するための単一用量フェーズIb/I
Ia、プラセボ対照、無作為化、二重盲検研究」と題された研究は完了しており、
ある最終的な結果をこのセクションで示す。

【００８５】研究原理健康なボランティアにおけるフェーズＩ試験（実施例１．研究L297-007）から
の結果は、0.15mg/kg のSCおよびIV、0.5mg/kgのIV、1.5mg/kgのIV、および2.5m
g/kgのIVの用量のLDP-02が安全であり、充分に耐容性であることを示した。さら
に、0.15mg/kg のIVまたはSC、および0.5mg/kgのIVの用量は、約100 〜130 時間
のｔ_1/2を有することを示し、フローサイトメトリーデータは、未結合のα4 β
7 が投薬後約２週間で0.15mg/kg の用量グループに再び現れ始めることを示した
。これらのデータに基づいて、0.15mg/kg のSC、0.15mgのIV、0.5mg/kgのIV、お
よび2.0mg/kgのIVのLDP-02用量を、潰瘍性大腸炎を有する患者における初期の研
究において使用するために選択した。LDP-02の各用量が、次の用量レベルへの増
大の前に、安全であり、良好に耐容性であることを決定するためにこの研究を設
計した。

【００８６】研究設計前記研究は、中程度に重篤な潰瘍性大腸炎を有すると診断された患者における
無作為化、二重盲検、プラセボ−対照、上昇単一用量研究であった。肛門縁から
25cm程度の最小の疾患を有すると潰瘍性大腸炎の診断を考証された患者が、潜在
的に研究に適格であった。Truelove-Witts判定基準（Br Med J; 2: 1042-1048 (
1955) ）により規定されるような重篤な潰瘍性大腸炎を有する患者は除外した。
全ての封入／排除判定基準に適合した潰瘍性大腸炎患者を、４つの研究グループ
に経時的に登録し、各研究グループ内で、LDP-2 またはプラセボ（すなわち、0.
9 ％塩化ナトリウム緩衝液）を無作為に割り当てて与えた。治療グループおよび
登録された被験体の数を表２１に示す。

【００８７】

【表２１】

【００８８】研究投薬（LDP-02またはプラセボ）を、大腿へのSCまたは30分間のIV注入のい
ずれかにより１日目に投与した。安全性評価には、有害事象の記録、身体検査、
生命徴候、臨床検査（すなわち、血液学、血液化学、および尿検査）、血漿サイ
トカインレベル、およびECG が含まれた。血液を種々の時間点で採取し、LDP-02
血清濃度を測定し、末梢血リンパ球上のα4 β7 結合レセプターを飽和し、ブロ
ックするLDP-02の有効性を評価した。大腸の炎症を減少させるLDP-02の有効性を
、臨床疾患観察、内視鏡外観、組織病理学、および免疫組織化学により測定した
。

【００８９】研究結果患者整理および個体グループ統計学中程度の重篤度の潰瘍性大腸炎を有する29名の患者を研究に参加させ、28名が
試験を完了した。１名の患者は、スクリーニング時にClostridium difficile 毒
素陽性であることが見出されたが、検査結果の報告が遅れたため、前記患者を試
験に参加させ、2.0mg/kgのIVのLDP-02を与えた。研究室結果が得られてから、患
者を抗体で処置し、他の患者と交替させた。研究を中止した患者は他にはいなか
った。患者を時間経過にともなって研究に補充したので、ベースライン潰瘍性大
腸炎病歴に関して治療グループを平均化する試みは行なわなかった。このように
して、潰瘍性大腸炎疾患の重篤度および持続期間ならびに潰瘍性大腸炎の以前の
薬物治療は、患者間および治療グループ間で異なっていた。これらのデータを表
２２に示す。

【００９０】

【表２２】

【００９１】疾患測定これは、本来、用量範囲安全性および薬物動態学研究であったが、治療の効果
を評価するために種々のパラメータを測定した。有効性評価には、改変Baron （
内視鏡検査）スコアリングシステム、Mayo臨床疾患活性指数スコア、Powell-Tuc
k 疾患活性指数スコア、便通の頻度、および炎症性腸疾患質問票が含まれた。こ
れらのパラメータに関するベースラインから30日目までの変化を表２３に示す。
30日目の評価がない患者については、得られた最後のベースライン後観察を30日
に進ませて行った。

【００９２】

【表２３】

【００９３】表２３に示される結果から理解されるように、種々の治療グループ間で応答に
変動があった。0.5mg/kgのIVを与えた患者は、最高の応答を有しているようであ
った；中央内視鏡重篤度スコアは、２グレード減少し、Mayo臨床スコアは、便通
頻度の減少とともに10ポイント減少した。0.5mg/kgのIVを与えた５名の患者の内
の３名は、改変Baron Ｓ字結腸鏡検査スコアにおいて２ポイントの改善を有して
おり、内視鏡的応答と考えられた；2.0mg/kgのIVおよび0.15mg/kg のSCのグルー
プの両方において１名のみの患者（１グループ当たり治療した総数５名と比べて
）が内視鏡的応答を有していた。プラセボグループもまた、Ｓ字結腸鏡検査スコ
アおよびMayo臨床スコアにおける改善を経験したが、両方とも0.5mg/kgのIVグル
ープと比べると規模は小さかった。８名の患者の内の２名は内視鏡的応答を経験
した。

【００９４】 30日目の改変Baron Ｓ字結腸鏡検査スコアおよびMayo臨床スコアにおいてゼロ
として規定した、完全に寛解した患者の数を表２４に報告する。

【００９５】

【表２４】

【００９６】プラセボグループの患者は誰も完全な寛解を経験せず、一方、LDP-02を与えた
グループの２名の患者は完全な寛解を有していた。２名の患者は両方とも、同じ
グループであった；両方の患者には0.5mg/kgのLDP-02を単一投与した。前記患者
の一方は、メサラミン治療を同時に与え、他方には低用量コルチコステロイド（
１日当たり経口で20mgプレドニゾン）を同時に与えた。

【００９７】薬物動態学血清におけるLDP-02のアッセイを、以前に記載されるようにCytometry Associ
ates, Inc.により行った（研究L297-007）。注入の完了する前および直後（１日
目）、および２、３、５、10、14、21、30および60日目に血液サンプルを収集し
、LDP-02の薬物動態学的プロフィールを評価した。

【００９８】個々の患者による時間経過におけるLDP-02濃度およびLDP-02用量による平均薬
物動態学的パラメータを研究L296-006の付録に示す。

【００９９】図８から理解されるように、0.15mg/kg のIVおよびSCグループのLDP-02の血清
レベルは、投薬の約20日後に＜1.0 μg/mLに低下する。2.0mg/kg用量グループに
関して、LDP-02レベルは、約60日目まで上昇したままであった。表２５は、治療
グループによる重要な薬物動態学的パラメータを示す。

【０１００】

【表２５】

【０１０１】これらの用量は、LDP-02の最大濃度に関する用量およびIV投与の後に測定され
た曲線下の領域と直線性があるようである。クリアランスおよび終末排除半減期
（terminal elimination half life）は、投与されるIV用量には依存しないよう
である。分布の容積は、IVのLDP-02の用量の増大と共にわずかに減少するようで
ある。

【０１０２】 LDP-02の薬力学的効果の評価血液リンパ球上のα4 β7 部位の存在を測定するためのFACS分析を以前に記載
した（研究L296-007）。時間経過における血清α4 β7 結合（すなわち、MESF値
および各投与後時間点でのベースラインのパーセンテージ）は、個々の患者およ
び研究L297-006の付録における治療グループにより示される。

【０１０３】全ての治療の時間経過におけるベースラインMESFの平均パーセントを図９に示
す。図９から理解されるように、ベースラインMESFのパーセントは、用量に依存
する効果の持続期間とともにLDP-02のSCおよびIV投与の後に約10％に迅速に低下
する。約10日目に始まって、α4 β7 シグナルは、0.15mg/kg のIVおよびSC用量
グループについてはベースラインに戻り始めた。しかし、α4 β7 シグナルは、
0.5mg/kgのIVおよび2.0mg/kgの用量グループについては30日から60日までの間に
ベースラインに戻り始めた。

【０１０４】結論中程度の重篤度の潰瘍性大腸炎を有する患者への0.15mg/kg のIVおよびSC、0.
5mg/kgのIV、および2.0mg/kgのIVの用量でのLDP-02の投与は、良好に耐容性を示
した。

【０１０５】潰瘍性大腸炎を有する患者からの薬物動態学的および薬力学的なデータは、健
康なボランティアで見出されたものと一致した。これらはLDP-02の最大濃度に関
する用量およびIV投与の後に測定された曲線下の領域と直線性があるようである
。クリアランスおよび終末排除半減期は、投与されるIV用量には依存しないよう
である。分布の容積は、IV LDP-02 の用量の増大と共にわずかに減少するようで
ある。ベースラインMESFのパーセントは、用量に依存する効果の持続時間ととも
にLDP-02のSCおよびIV投与の後に、約10％に迅速に低下した。0.15mg/kg のIVお
よびSC用量グループに関して、ベースラインMESFのパーセントは、投薬の約10日
後にベースラインに戻り始めたが、0.5mg/kgのIVおよび2.0mg/kgの用量グループ
は、それぞれ約30日および約60日に生じ始めた。

【０１０６】研究L297-006の付録治療グループによる被験体による時間経過におけるLDP-02血清濃度。個々の被
験体からのデータを表２６〜３０に示す。表２６〜３０に示されるデータはμg/
mLである。

【０１０７】

【表２６】

【０１０８】

【表２７】

【０１０９】

【表２８】

【０１１０】

【表２９】

【０１１１】

【表３０】

【０１１２】治療グループによる薬物動態学的パラメータ。個々の被験体から得られたデー
タを表３１〜３４に示す。

【０１１３】

【表３１】

【０１１４】

【表３２】

【０１１５】

【表３３】

【０１１６】

【表３４】

【０１１７】治療グループによる被験体による時間経過における血清α4 β結合。個々の被
験体から得られたデータを表３５〜４０に示す。各被験体に関して、血液サンプ
リングの時間、サンプルのMESFおよびベースライン（投薬前）の％を示す。

【０１１８】

【表３５】

【０１１９】

【表３６】

【０１２０】

【表３７】

【０１２１】

【表３８】

【０１２２】

【表３９】

【０１２３】

【表４０】

【０１２４】本発明をその好ましい態様に関して詳細に示し、記載してきたが、形態および
詳細における種々の変化が特許請求の範囲により含まれる本発明の範囲から逸脱
することなくなされうることを当業者は理解する。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、マウスＡｃｔ−１軽鎖シグナルペプチド配列に連結されたマウス（Ｍ
ｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ）Ａｃｔ−１軽鎖可変領域のヌクレオチド配列（配列番
号：１）および推定アミノ酸配列（配列番号：２）を示す図である。

【図２】図２は、マウスＡｃｔ−１抗体重鎖可変領域のヌクレオチド配列（配列番号：
３）およびアミノ酸配列（配列番号：４）を示す図である。可変領域のヌクレオ
チド配列は、推定マウスＡｃｔ−１重鎖シグナルペプチド配列をコードするヌク
レオチド配列に連結され、複合配列を生じている。（重鎖領域を増幅したプライ
マーの同一性は、縮重配列から推定し、シグナルペプチドのアミノ酸配列は、プ
ライマー、下流配列および他のシグナルペプチドの配列に由来していた。図示し
たシグナルペプチドは、Ａｃｔ−１ハイブリドーマのものと同一でない場合があ
る。）

【図３】図３は、重鎖シグナルペプチドを有するヒト化Ａｃｔ−１抗体（ＬＤＰ−０２
）の重鎖の一部のヌクレオチド配列（配列番号：５）およびアミノ酸配列（配列
番号：６）を示す図である。

【図４】図４は、軽鎖シグナルペプチドを有するヒト化Ａｃｔ−１抗体（ＬＤＰ−０２
）の軽鎖の一部のヌクレオチド配列（配列番号：７）およびアミノ酸配列（配列
番号：８）を示す図である。

【図５】図５は、マウス抗体Ａｃｔ−１およびＬＤＰ−０２の軽鎖相補性決定領域（Ｃ
ＤＲ１、配列番号：９；ＣＤＲ２、配列番号：１０；ＣＤＲ３，配列番号：１１
）および重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ１，配列番号：１２；ＣＤＲ２，配列番号
：１３；ＣＤＲ３，配列番号：１４）のアミノ酸配列を示す図である。

【図６】図６は、ＬＤＰ−０２の単回投与後の健常人における経時的な平均血清ＬＤＰ
−０２レベル（μｇ／ｍＬ）を示すグラフである。平均血清ＬＤＰ−０２レベル
は、０．１５ｍｇ／ｋｇの静脈内（ＩＶ）（−黒菱形−）注射または皮下（ＳＣ
）（−黒四角−）注射による投与後、および０．５ｍｇ／ｋｇの静脈内注射（−
上向き黒三角−）による投与後３６日目までに、無視できるほどになった。しか
しながら、血清ＬＤＰ−０２は、１．５ｍｇ／ｋｇ（−ｘ−）または２．５ｍｇ
／ｋｇ（−＊−）の静脈内注射による投与後３６日目を過ぎてもなお測定可能で
あった。

【図７】図７は、ＬＤＰ−０２の投与後のα４β７シグナル（Ａｃｔ−１ｍＡｂで検
出）の持続的な損失を示すグラフである。約９０％のα４β７シグナルが、ＬＤ
Ｐ−０２の投与後に急激に失われ（ＭＥＳＦ約１０％）、すべてのＬＤＰ−０２
投薬量の投与後も持続した。７日目から２２日目の間に、α４β７シグナルは、
０．１５ｍｇ／ｋｇＩＶ投薬群（−黒四角−）および０．１５ｍｇ／ｋｇＳ
Ｃ投薬群（−黒菱形−）で、ベースラインに戻り始めた。２２日目から３６日目
の間では、α４β７シグナルは、０．５ｍｇ／ｋｇＩＶ（−上向き黒三角−）
投薬群でベースラインに戻り始めた。試験した高ＬＤＰ−０２投薬量（１．５ｍ
ｇ／ｋｇ（−ｘ−）および２．５ｍｇ／ｋｇ（−＊−））では、α４β７シグナ
ルの損失は、単回ＩＶ投薬後３６日間以上持続した。２．５ｍｇ／ｋｇ投薬群（
−＊−）では、α４β７シグナルの損失は、約７０日目まで持続した（データは
、本明細書の研究Ｌ２９７−００７の付録に提供した）。ＭＥＳＦ：平均可溶性
蛍光当量(mean equivalent soluble fluorescence)。

【図８】図８は、ＬＤＰ−０２の単回投与後の潰瘍性大腸炎を有する患者における経時
的な平均血清ＬＤＰ−０２レベル（μｇ／ｍＬ）を示すグラフである。平均血清
ＬＤＰ−０２レベルは、ＬＤＰ−０２の投与後、急激に上昇した。血清ＬＤＰ−
０２濃度は、ＬＤＰ−０２を０．１５ｍｇ／ｋｇで静脈内（−上向き三角−）注
射または皮下（−黒丸−）注射により投与された患者において、投薬後１０日ま
でに１．０μｇ／ｍＬ未満まで低下した。しかしながら、血清ＬＤＰ−０２濃度
は、０．５ｍｇ／ｋｇの静脈内注射（−黒四角−）による投与後、約２０日間、
１．０μｇ／ｍＬ超を維持した。ＬＤＰ−０２の血清濃度は、２．０ｍｇ／ｋｇ
の静脈内投与（−下向き黒三角−）後、約６０日間、１μｇ／ｍＬ超を維持した
。

【図９】図９は、ＬＤＰ−０２の投与後のα４β７シグナル（Ａｃｔ−１ｍＡｂで検
出）の持続的な損失を示すグラフである。約９０％のα４β７シグナルが、ＬＤ
Ｐ−０２の投与後に急激に失われ（ＭＥＳＦ約１０％）、シグナルの損失の持続
時間は投薬量に依存した。約１０日目から、α４β７シグナルは、ＩＶ（−黒四
角−）注射またはＳＣ（−黒菱形−）注射による０．１５ｍｇ／ｋｇＬＤＰ−
０２投与群でベースラインに戻り始めた。しかしながら、α４β７シグナルは、
０．５ｍｇ／ｋｇ（−上向き白三角−）静脈内投与群では３０日目から６０日目
の間に、２．０ｍｇ／ｋｇ（−ｘ−）静脈内投与群では第６０日以降に、ベース
ラインに戻り始めた（データは、本明細書の研究Ｌ２９７−００６の付録に提供
した）。ＭＥＳＦ：平均可溶性蛍光当量。

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１４年３月２８日（２００２．３．２８）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 1/00 Ａ６１Ｐ 1/00 1/04 1/04 1/16 1/16 1/18 1/18 3/10 3/10 9/00 9/00 11/00 11/00 11/06 11/06 15/14 15/14 37/02 37/02 43/00 １０５ 43/00 １０５１１１１１１ // Ｃ０７Ｋ 16/28 ＺＮＡＣ０７Ｋ 16/28 ＺＮＡ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＢＺ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＯ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者ブレットマン，リー，アール．アメリカ合衆国マサチューセッツ 01776 サッドベリー，グレイストーンレーン 183 (72)発明者フォックス，ジュディス，エイ．アメリカ合衆国カリフォルニア 94115 サンフランシスコ，ゴールデンゲートアベニュー 1531 (72)発明者アリソン，デービッド，エドワードアメリカ合衆国カリフォルニア 94010 バーリンガム，アパートメント９，オークグローブアベニュー 1285 Ｆターム(参考） 4C085 AA33 AA34 AA35 DD62 EE01 EE03 GG02 GG03 GG04 GG05 GG08 4C086 AA01 AA02 CB07 DA10 DA17 DA20 MA01 MA02 MA04 MA13 MA17 MA22 MA23 MA31 MA35 MA37 MA41 MA43 MA52 MA55 MA59 MA60 MA66 NA14 ZA59 ZA66 ZA68 ZA75 ZA81 ZB07 ZB21 ZC35 ZC41 4H045 AA30 BA10 CA40 DA75 EA20 EA28

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】非ヒト起源の抗原結合性領域およびヒト起源の抗体の少なく
とも一部を含有する、α4 β7 インテグリンに対する結合特異性を有するヒト化
免疫グロブリンまたはその抗原結合性断片の有効量を、粘膜組織の白血球浸潤に
関連する疾患を有するヒトに投与することを含み、ここで該免疫グロブリンまた
は断片は、初回投与の後、１回以上引き続き投与され、２つの投薬の最小の間隔
はいずれも少なくとも約１日間であり、体重１kg当たり約８mg以下の免疫グロブ
リンまたは断片が約１ヶ月間に投与される、粘膜組織の白血球浸潤に関連する疾
患を有するヒトの治療方法。
【請求項２】前記免疫グロブリンまたは断片がα4 β7 インテグリンのα
4 鎖に結合する、請求項１記載の方法。
【請求項３】前記免疫グロブリンまたは断片がα4 β7 インテグリンのβ
7 鎖に結合する、請求項１記載の方法。
【請求項４】前記免疫グロブリンまたは断片がα4 β7 複合体に対する結
合特異性を有する、請求項１記載の方法。
【請求項５】前記ヒト起源の免疫グロブリンの一部がヒト定常領域に由来
する、請求項１記載の方法。
【請求項６】前記抗原結合性領域が齧歯類起源である、請求項５記載の方
法。
【請求項７】前記抗原結合性領域が齧歯類起源の相補性決定領域を含有し
、前記ヒト起源の抗体の一部がヒトフレームワーク領域に由来する、請求項１記
載の方法。
【請求項８】前記抗原結合性領域が、以下のアミノ酸配列：軽鎖：CDR1 配列番号：９ CDR2 配列番号：１０ CDR3 配列番号：１１重鎖：CDR1 配列番号：１２ CDR2 配列番号：１３ CDR3 配列番号：１４の軽鎖可変領域の３つの相補性決定領域（CDR1、CDR2およびCDR3）の内の少なく
とも１つおよび重鎖可変領域の３つの相補性決定領域（CDR1、CDR2およびCDR3）
の内の少なくとも１つを含有する、請求項１記載の方法。
【請求項９】前記抗原結合性領域が、以下のアミノ酸配列：軽鎖：CDR1 配列番号：９ CDR2 配列番号：１０ CDR3 配列番号：１１重鎖：CDR1 配列番号：１２ CDR2 配列番号：１３ CDR3 配列番号：１４の軽鎖可変領域の３つの相補性決定領域（CDR1、CDR2およびCDR3）および重鎖可
変領域の３つの相補性決定領域（CDR1、CDR2およびCDR3）を含有する、請求項８
記載の方法。
【請求項１０】前記ヒト化免疫グロブリンまたはその抗原結合性断片が重
鎖および軽鎖を含有する、請求項１記載の方法であって、該軽鎖は、α4 β7 に結合する非ヒト起源の抗体に由来する相補性決定領域およ
びヒト起源の軽鎖に由来するフレームワーク領域を含有し、ここで各々の該相補
性決定領域（CDR1、CDR2およびCDR3）は以下のアミノ酸配列：軽鎖：CDR1 配列番号：９ CDR2 配列番号：１０ CDR3 配列番号：１１を含有する；かつ該重鎖は、α4 β7 に結合する非ヒト起源の抗体に由来する相補性決定領域およ
びヒト起源の重鎖に由来するフレームワーク領域を含有し、ここで各々の該相補
性決定領域（CDR1、CDR2およびCDR3）は以下のアミノ酸配列：重鎖：CDR1 配列番号：１２ CDR2 配列番号：１３ CDR3 配列番号：１４を含有する、方法。
【請求項１１】前記ヒト化免疫グロブリンまたはその抗原結合性断片が配
列番号：６の重鎖可変領域を含有する、請求項１０記載の方法。
【請求項１２】前記ヒト化免疫グロブリンまたはその抗原結合性断片が配
列番号：８の軽鎖可変領域を含有する、請求項１０記載の方法。
【請求項１３】前記投薬の各々が独立して体重１kg当たり約0.1 〜約８mg
の免疫グロブリンまたは断片を含有する、請求項１記載の方法。
【請求項１４】前記投薬の各々が独立して体重１kg当たり約0.1 〜約５mg
の免疫グロブリンまたは断片を含有する、請求項１記載の方法。
【請求項１５】前記投薬の各々が独立して体重１kg当たり約0.1 〜約2.5m
g の免疫グロブリンまたは断片を含有する、請求項１記載の方法。
【請求項１６】前記投薬の各々が独立して体重１kg当たり約0.15、約0.5
、約1.0 、約1.5 または約2.0mg の免疫グロブリンまたは断片を含有する、請求
項１記載の方法。
【請求項１７】投薬の間隔が少なくとも約７日間である、請求項１記載の
方法。
【請求項１８】投薬の間隔が少なくとも約14日間である、請求項１記載の
方法。
【請求項１９】投薬の間隔が少なくとも約21日間である、請求項１記載の
方法。
【請求項２０】投薬の間隔が少なくとも約28日間である、請求項１記載の
方法。
【請求項２１】投薬の間隔が少なくとも約30日間である、請求項１記載の
方法。
【請求項２２】前記投薬の各々が、独立してa ）循環リンパ球上のα4 β
7 インテグリン結合部位の約50％以上の飽和および／またはb ）循環リンパ球の
細胞表面上のα4 β7 インテグリン発現の約50％以上の阻害を達成するのに充分
な量の免疫グロブリンまたは断片を含有し、ここで該飽和および／または阻害は
該投薬の投与の後少なくとも約10日間維持される、請求項１記載の方法。
【請求項２３】前記投薬の各々が、独立してa ）循環リンパ球上のα4 β
7 インテグリン結合部位の約60％以上の飽和および／またはb ）循環リンパ球の
細胞表面上のα4 β7 インテグリン発現の約60％以上の阻害を達成するのに充分
な量の免疫グロブリンまたは断片を含有する、請求項２２記載の方法。
【請求項２４】前記投薬の各々が、独立してa ）循環リンパ球上のα4 β
7 インテグリン結合部位の約70％以上の飽和および／またはb ）循環リンパ球の
細胞表面上のα4 β7 インテグリン発現の約70％以上の阻害を達成するのに充分
な量の免疫グロブリンまたは断片を含有する、請求項２２記載の方法。
【請求項２５】前記投薬の各々が、独立してa ）循環リンパ球上のα4 β
7 インテグリン結合部位の約80％以上の飽和および／またはb ）循環リンパ球の
細胞表面上のα4 β7 インテグリン発現の約80％以上の阻害を達成するのに充分
な量の免疫グロブリンまたは断片を含有する、請求項２２記載の方法。
【請求項２６】前記投薬の各々が、独立して該飽和および／または阻害が
該投薬の投与の後少なくとも約14日間達成および維持されるのに充分な量の免疫
グロブリンまたは断片を含有する、請求項２２記載の方法。
【請求項２７】前記投薬の各々が、独立して該飽和および／または阻害が
該投薬の投与の後少なくとも約20日間達成および維持されるのに充分な量の免疫
グロブリンまたは断片を含有する、請求項２２記載の方法。
【請求項２８】前記投薬の各々が、独立して該飽和および／または阻害が
該投薬の投与の後少なくとも約25日間達成および維持されるのに充分な量の免疫
グロブリンまたは断片を含有する、請求項２２記載の方法。
【請求項２９】前記投薬の各々が、独立して該飽和および／または阻害が
該投薬の投与の後少なくとも約30日間達成および維持されるのに充分な量の免疫
グロブリンまたは断片を含有する、請求項２２記載の方法。
【請求項３０】前記投薬の各々が、独立して該飽和および／または阻害が
該投薬の投与の後少なくとも約60日間達成および維持されるのに充分な量の免疫
グロブリンまたは断片を含有する、請求項２２記載の方法。
【請求項３１】前記投薬の各々が、独立して体重１kg当たり約0.1 〜約８
mgの免疫グロブリンまたは断片を含有する、請求項２２記載の方法。
【請求項３２】前記投薬の各々が、独立して体重１kg当たり約0.1 〜約５
mgの免疫グロブリンまたは断片を含有する、請求項２２記載の方法。
【請求項３３】前記投薬の各々が、独立して体重１kg当たり約0.1 〜約2.
5mg の免疫グロブリンまたは断片を含有する、請求項２２記載の方法。
【請求項３４】前記投薬の各々が、独立して、体重１kg当たり約0.15、約
0.5 、約1.0 、約1.5 または約2.0mg の免疫グロブリンまたは断片を含有する、
請求項２２記載の方法。
【請求項３５】投薬の間隔が少なくとも約７日間である、請求項２２記載
の方法。
【請求項３６】投薬の間隔が少なくとも約14日間である、請求項２２記載
の方法。
【請求項３７】投薬の間隔が少なくとも約21日間である、請求項２２記載
の方法。
【請求項３８】投薬の間隔が少なくとも約28日間である、請求項２２記載
の方法。
【請求項３９】投薬の間隔が少なくとも約30日間である、請求項２２記載
の方法。
【請求項４０】ヒト化免疫グロブリンが投与され、前記投薬の各々が、該
投薬の投与の後少なくとも約10日間、少なくとも約１μg/mLの免疫グロブリンの
血清濃度を達成し、維持するのに充分な量の免疫グロブリンを含有する、請求項
１記載の方法。
【請求項４１】前記投薬の各々が、独立して該投薬の投与の後少なくとも
約14日間、前記血清濃度を達成し、維持するのに充分な量の免疫グロブリンを含
有する、請求項４０記載の方法。
【請求項４２】前記投薬の各々が、独立して該投薬の投与の後少なくとも
約20日間、前記血清濃度を達成し、維持するのに充分な量の免疫グロブリンを含
有する、請求項４０記載の方法。
【請求項４３】前記投薬の各々が、独立して該投薬の投与の後少なくとも
約25日間、前記血清濃度を達成し、維持するのに充分な量の免疫グロブリンを含
有する、請求項４０記載の方法。
【請求項４４】前記投薬の各々が、独立して該投薬の投与の後少なくとも
約30日間、前記血清濃度を達成し、維持するのに充分な量の免疫グロブリンを含
有する、請求項４０記載の方法。
【請求項４５】前記投薬の各々が、独立して該投薬の投与の後少なくとも
約60日間、前記血清濃度を達成し、維持するのに充分な量の免疫グロブリンを含
有する、請求項４０記載の方法。
【請求項４６】前記投薬の各々が、独立して体重１kg当たり約0.1 〜約８
mgの免疫グロブリンを含有する、請求項４０記載の方法。
【請求項４７】前記投薬の各々が、独立して体重１kg当たり約0.1 〜約５
mgの免疫グロブリンを含有する、請求項４０記載の方法。
【請求項４８】前記投薬の各々が、独立して体重１kg当たり約0.1 〜約2.
5mg の免疫グロブリンを含有する、請求項４０記載の方法。
【請求項４９】前記投薬の各々が、独立して体重１kg当たり約0.15、約0.
5 、約1.0 、約1.5 または約2.0mg の免疫グロブリンまたは断片を含有する、請
求項４０記載の方法。
【請求項５０】投薬の間隔が少なくとも約７日間である、請求項４０記載
の方法。
【請求項５１】投薬の間隔が少なくとも約14日間である、請求項４０記載
の方法。
【請求項５２】投薬の間隔が少なくとも約21日間である、請求項４０記載
の方法。
【請求項５３】投薬の間隔が少なくとも約28日間である、請求項４０記載
の方法。
【請求項５４】投薬の間隔が少なくとも約30日間である、請求項４０記載
の方法。
【請求項５５】１以上のさらなる治療剤の有効量を投与することをさらに
含む、請求項１記載の方法。
【請求項５６】前記治療剤が、ステロイド、免疫抑制剤、非ステロイド性
抗炎症剤および免疫調節剤からなる群より選ばれる、請求項５５記載の方法。
【請求項５７】前記治療剤が、アザチオプリン、６- メルカプトプリン、
スルファサラジン、５- アミノサリチル酸、プレドニゾンおよびプレドニゾロン
からなる群より選ばれる、請求項５５記載の方法。
【請求項５８】粘膜組織の白血球浸潤に関連する前記疾患が、炎症性腸疾
患、膵炎、インスリン依存性糖尿病、乳腺炎、胆嚢炎、胆管炎、胆管周囲炎、慢
性気管支炎、慢性静脈洞炎、喘息および対宿主性移植片病からなる群より選ばれ
る、請求項１記載の方法。
【請求項５９】前記粘膜組織の白血球湿潤に関連する疾患が炎症性腸疾患
である、請求項１記載の方法。
【請求項６０】前記炎症性腸疾患が潰瘍性大腸炎である、請求項５９記載
の方法。
【請求項６１】前記炎症性腸疾患がクローン病である、請求項５９記載の
方法。
【請求項６２】非ヒト起源の抗原結合性領域およびヒト起源の抗体の少な
くとも一部を含有する、α4 β7 インテグリンに対する結合特異性を有するヒト
化免疫グロブリンまたはその抗原結合性断片の有効量を、炎症性腸疾患を有する
ヒトに投与することを含み、ここで該免疫グロブリンまたは断片は、初回投与の
後、１回以上引き続き投与され、２つの投薬の最小の間隔はいずれも少なくとも
約１日間であり、体重１kg当たり約８mg以下の免疫グロブリンまたは断片が約１
ヶ月間に投与される、炎症性腸疾患を有するヒトの治療方法。
【請求項６３】前記ヒト化免疫グロブリンまたはその抗原結合性断片が重
鎖および軽鎖を含有する、請求項６２記載の方法であって、該軽鎖は、α4 β7 に結合する非ヒト起源の抗体に由来する相補性決定領域およ
びヒト起源の軽鎖に由来するフレームワーク領域を含有し、ここで各々の該相補
性決定領域（CDR1、CDR2およびCDR3）は以下のアミノ酸配列：軽鎖：CDR1 配列番号：９ CDR2 配列番号：１０ CDR3 配列番号：１１を含有する；かつ該重鎖は、α4 β7 に結合する非ヒト起源の抗体に由来する相補性決定領域およ
びヒト起源の重鎖に由来するフレームワーク領域を含有し、ここで各々の該相補
性決定領域（CDR1、CDR2およびCDR3）は以下のアミノ酸配列：重鎖：CDR1 配列番号：１２ CDR2 配列番号：１３ CDR3 配列番号：１４を含有する、方法。
【請求項６４】炎症性腸疾患が潰瘍性大腸炎である、請求項６３記載の方
法。
【請求項６５】炎症性腸疾患がクローン病である、請求項６３記載の方法
。
【請求項６６】非ヒト起源の抗原結合性領域およびヒト起源の免疫グロブ
リンの少なくとも一部を含有する、α4 β7 インテグリンに対する結合特異性を
有するヒト化免疫グロブリンまたはその抗原結合性断片の有効量をヒトに投与す
ることを含み、ここで該免疫グロブリンまたは断片は投薬で投与され、投薬の最
小の間隔は少なくとも約７日間であり、体重１kg当たり約８mg以下の免疫グロブ
リンまたは断片が約30日間に投与される、ヒトにおける静止状態の炎症性腸疾患
の再発および／または回帰を阻害する方法。
【請求項６７】静止状態が内科的療法または外科的療法によって誘導され
ている、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】前記炎症性腸疾患が潰瘍性大腸炎である、請求項６６記載
の方法。
【請求項６９】前記炎症性腸疾患がクローン病である、請求項６６記載の
方法。