JP2003252743A - チロシナーゼ活性阻害剤、メラニン産生抑制剤及びこれらを含有する皮膚外用剤 - Google Patents
チロシナーゼ活性阻害剤、メラニン産生抑制剤及びこれらを含有する皮膚外用剤Info
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Abstract
制作用に優れており、製剤中で変質することなく、高い
美白効果及び/又は美肌効果を有する皮膚外用剤を提供
すること。 【解決手段】 ワイン酵母抽出物を有効成分とするチロ
シナーゼ活性阻害剤及び/又はメラニン産生抑制剤及び
これらを含有する皮膚外用剤。
Description
を有効成分とするチロシナーゼ活性阻害剤及び/又はメ
ラニン産生抑制剤に関するものである。又、これを含有
して、チロシナーゼ活性阻害作用及び/又はメラニン産
生抑制作用による皮膚のくすみ、シミ、ソバカス並びに
老人性色素斑又は肝斑等の色素沈着の予防、改善や肌の
透明感を改善する美白効果や美肌効果に優れる皮膚外用
剤に関する。
ック、洗浄料、分散液、軟膏、液剤、エアゾール、貼付
剤、パップ剤、リニメント剤等の皮膚外用剤には、これ
らに所定の薬効を付与することを目的として種々の薬効
成分が加えられている。例えば、日焼け等により生じる
皮膚の黒化、色素沈着により生ずるシミ、ソバカス等を
予防又は改善する為に、アスコルビン酸、胎盤抽出物、
グルタチオン、ハイドロキノン等の美白剤が加えられて
いる。
の美白剤では、美白効果が十分でなかったり、あるい
は、製剤中で変質する等して所期の薬効が得られない場
合があり、その改善が望まれていた。
を行った結果、ワイン醸造時に得られる酵母からの抽出
物が、チロシナーゼ活性阻害作用及びメラニン産生抑制
作用を有し、美白成分として優れたものであることを見
出した。そして、この抽出物は、美白及び/又は美肌成
分として皮膚外用剤に配合できることを見出し、本発明
を完成した。
効成分とするチロシナーゼ活性阻害剤及び/又はメラニ
ン産生抑制剤を提供するものである。又、これを含有し
て、チロシナーゼ活性阻害作用及び/又はメラニン産生
抑制作用による皮膚のくすみ、シミ、ソバカス並びに老
人性色素斑又は肝斑等の色素沈着の予防、改善や肌の透
明感を改善する美白効果や美肌効果に優れる、安定なチ
ロシナーゼ活性阻害用皮膚外用剤、メラニン産生抑制用
皮膚外用剤を提供するものである。
は、Sacchromyces属に属するSacchr
omyces cerevisiae等の酵母を用いる
ことが出来る。本発明のワイン酵母抽出物の製造法は、
特に限定されるものではなく、一例を示せば、ワイン醸
造終了時の酵母を採取し、スラリー状にして加水洗浄し
た後、集菌、菌体破砕し、例えば抽出溶媒として水や熱
水等を用いて抽出を行い、遠心分離、精密濾過、減圧濃
縮等の精製操作を行なうことにより得ることができる。
必要ならば、本発明の効果に影響のない範囲で、更にイ
オン交換樹脂等を用い、吸着、脱色等の精製をして、溶
液状、ペースト状、ゲル状、粉末状として用いることも
できる。このようにして得られたワイン酵母の抽出物中
には、酵母自体の成分であるタンパク、アミノ酸、核
酸、ビタミン等が含まれるのはもちろんであるが、ワイ
ンの醸造過程で生じる成分、例えば糖類、エステル類、
ラクトン類、高級アルコール等も更に含まれる。
ことができる抽出溶媒としては、例えば水、低級1価ア
ルコール(メチルアルコール、エチルアルコール、プロ
ピルアルコール、ブチルアルコール等)、液状多価アル
コール(プロピレングリコール、ブチレングリコール、
グリセリン等)、エーテル(ジエチルエーテル、テトラ
ヒドロフラン等)、ケトン(アセトン等)等が挙げら
れ、それらの一種又は二種以上を混合して用いることが
できる。
活性阻害剤及び/又はメラニン産生抑制剤としてのワイ
ン酵母抽出物の含有量は、乾燥固形分として好ましくは
0.00001〜5質量%(以下単に「%」で示す)で
あり、より好ましくは0.0001〜2%である。この
範囲内であれば、該抽出物を安定に配合することがで
き、チロシナーゼ活性阻害作用及びメラニン産生抑制作
用に優れ、それらによる高い美白及び/又は美肌効果を
発揮することができる。又、抽出液として使用する場合
は、溶質である乾燥固形分の含有量が上記範囲内であれ
ば、その抽出液の濃度は何ら限定されるものではない。
シナーゼ活性阻害作用及び/又はメラニン産生抑制作用
による美白、美肌成分として常法に従い、種々の形態の
皮膚外用剤に配合することができる。
限定されず、例えば、乳液、クリーム、化粧水、パッ
ク、洗浄料、メーキャップ化粧料、分散液、軟膏、液
剤、エアゾール、貼付剤、パップ剤、リニメント剤等
の、いずれの形態の化粧料であっても、外用医薬品等で
あっても良い。
他に、化粧料や医薬部外品、外用医薬品等に通常使用さ
れる各種の成分、即ち、水、アルコール、油剤、界面活
性剤、増粘剤、粉体、キレート剤、pH調整剤、各種薬
効剤、動植物・微生物由来の抽出物、香料等を、本発明
の効果を損なわない範囲で適宜加えることができるが、
本発明のワイン酵母抽出物と、美白剤、抗酸化剤、細胞
賦活剤、抗炎症剤、紫外線防止剤等の薬効成分を併用し
て皮膚外用剤としたものは、ワイン酵母抽出物の作用効
果にこれら薬効剤の効果が加わり、本発明の効果を更に
高めることができる。
明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらに何等制約
されるものではない。
cerevisiae)を取り出して洗浄し、抽出溶
媒としての水に懸濁して自己消化させた後、得られた液
の濾過を行い凍結乾燥した。凍結乾燥したものを1%と
なるように水に溶解してワイン酵母抽出物を得た。
チルアルコール100mLを加え、室温にて3日間抽出
を行った後濾過してヨクイニン抽出物を得た。この時、
ヨクイニン抽出物の乾燥固形分は1.0%であった。
料としてそのチロシナーゼ活性阻害率を測定し、既にチ
ロシナーゼ活性阻害作用があることが知られている参考
例2で得たヨクイニン抽出物と比較した。すなわち、表
1に示した濃度の各試料水溶液に、酵素溶液[シグマ社
製、28,000単位のチロシナーゼ10mgを0.1
mol/Lリン酸緩衝液(pH6.8)20mLに溶解
したもの]0.1mLを加え、さらに0.1mol/L
リン酸緩衝液(pH6.8)を加え4.0mLとし、こ
れを25℃にて10分間インキュベートした。
おいた基質溶液[L−DOPA(東京化成社製)19
8.0mgを0.1mol/Lリン酸緩衝液(pH6.
8)100mLに溶解したもの]1.0mLを加え、1
0分間反応せしめた。反応後、475nmにおける吸光
度(ODS)を測定した。同様に、加熱失活させた前記
酵素を用いて反応させた時の吸光度(ODHE)、酵素
を添加し試料無添加の時の吸光度(ODB)及び試料と
不活性化した酵素を添加した時の吸光度(ODS HE)
を測定し、下記式(1)よりチロシナーゼ活性の阻害率
を算出した。この結果を表1に示す。
光度
のワイン酵母抽出物は高いチロシナーゼ活性阻害作用を
示した。
制及び細胞生存率試験 マウス由来のB16メラノーマ培養細胞を使用した。2
枚の6穴シャーレに10%FBS含有MEM培地を適量
とり、B16メラノーマ細胞を播種し、37℃、二酸化
炭素濃度5vol%中にて静置した。翌日、参考例1で
得たワイン酵母抽出物を、最終濃度が0(対照)、0.
02、0.05、2vol%となるように検体調製液を
添加し混和した。培養5日目に培地を交換し、再度検体
調製液を添加した。翌日、培地を除き、1枚のシャーレ
について、細胞をリン酸緩衝液(pH7)にて洗浄した
後回収し、B16メラノーマ培養細胞の白色化度を以下
の基準にて評価した。又、比較として参考例2で得たヨ
クイニン抽出物についても同様の試験を行った。
ルマリン固定後、1%クリスタルバイオレット溶液を添
加し染色した。各検体濃度に対する細胞生存率をモノセ
レーター(オリンパス社製)で測定した。以上の結果を
表2に示す。
抽出物は優れたメラニン産生抑制作用を発揮し、かつB
16メラノーマ培養細胞に対し毒性が低いことが認めら
れた。従って、本発明のワイン酵母抽出物を含有する皮
膚外用剤を肌に適用することにより、日焼けによる肌の
黒色化、シミ、ソバカス等を効果的に抑制し、優れた美
白及び/又は美肌効果を得ることできる。
・美肌効果を調べた。この結果を併せて表3に示す。
70℃に保つ。 B.成分(11)を70℃に加熱する。 C.AにBを加え乳化する。 D.冷却後、Cに成分(7)、(8)及び(10)を混
合してクリームを得た。
〜54才の女性15名をパネルとし、毎日、朝と夜の2
回、洗顔後に被験クリームの適量を顔面に塗布した。試
験は12週間行った。塗布による美白、美肌効果を以下
の基準によって評価し、評価結果は、各基準に該当する
パネルの人数で示した。
出物を配合した本発明品1のクリームは、肌の「くす
み」に優れた改善効果を示し、美しい肌とすることが明
らかとなった。
熱混合し、70℃に保つ。 B.Aを室温まで冷却し、成分(11)及び(12)を
添加混合することにより洗顔料を得た。
温まで冷却する。 B.Aに70℃にて加温混合した成分(6)〜(12)
を添加混合する。 C.Bに成分(5)及び(13)〜(15)を添加混合
しジェル化粧料を得た。
3)、(15)及び(18)を添加混合し、冷却する。 C.Bに成分(14)を加えた後、(16)及び(1
7)を添加混合して乳液を得た。
合し、化粧水を得た。
リー状に分散させる。 B.Aに加熱溶解した成分(11)〜(13)及び(1
6)を添加混合し、冷後成分(14)及び(15)を加
えて日焼け止め乳液を得た。
℃に加熱混合する。 B.Aに50℃にて加温混合した成分(10)、(1
1)及び(16)を添加混合し、冷後成分(14)及び
(15)を加えて、サンカット(登録商標)クリーム
(油中水型日焼け止め料)を得た。
室温まで冷却する。 C.BにA及び成分(15)、(16)を添加混合し
て、美容液を得た。
混合する。 B.Aに70℃にて加温混合した成分(12)〜(1
4)、(16)及び(19)を添加混合する。 C.冷後、Bに成分(15)及び(18)を加えてクリ
ームを得た。
ずれも経時安定性に優れ、皮膚に適用したときに優れた
美白及び美肌効果を発揮するものであった。
は、優れたチロシナーゼ活性阻害作用及びメラニン産生
抑制作用を有しており、チロシナーゼ活性阻害剤及び/
又はメラニン産生抑制剤として有用である。また、これ
を含有する皮膚外用剤は、色素沈着に対し高い抑制効果
を発揮し、肌のくすみ、日焼けなどによる皮膚の黒化、
シミ、ソバカスの防止及び改善等に有効なものである。
従って、チロシナーゼ活性阻害剤及び/又はメラニン産
生抑制剤としての本発明のワイン酵母抽出物及びこれを
含有する皮膚外用剤は、美白及び/又は美肌を目的とす
る化粧品や医薬品等に有利に利用することができるもの
である。
Claims (4)
- 【請求項1】 ワイン酵母抽出物を有効成分とすること
を特徴とするチロシナーゼ活性阻害剤。 - 【請求項2】 ワイン酵母抽出物を有効成分とすること
を特徴とするメラニン産生抑制剤。 - 【請求項3】 ワイン酵母抽出物をチロシナーゼ活性阻
害剤として含有することを特徴とするチロシナーゼ活性
阻害用皮膚外用剤。 - 【請求項4】 ワイン酵母抽出物をメラニン産生抑制剤
として含有することを特徴とするメラニン産生抑制用皮
膚外用剤。
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