JP2003113241A - ポリオキシアルキレン誘導体およびその製造方法 - Google Patents

ポリオキシアルキレン誘導体およびその製造方法

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Abstract

(57)【要約】 【課題】 高純度であり、保存安定性に優れた生体関連
物質の修飾に用いられるポリオキシアルキレン誘導体お
よび安全で高純度のポリオキシアルキレン誘導体を得る
製造方法を提供する。 【解決手段】 式（１）で示されるポリオキシアルキレ
ン誘導体およびその製造方法。 【化１】 （式中、Ｚは２〜８個の水酸基をもつ化合物の残基であ
り、ＡＯは炭素数２〜１８のオキシアルキレン基、ｎは
０〜２０００、ｍは０〜２０００、１≦ｎ＋ｍ、２≦ａ
＋ｂ≦８、１≦ｂであり、Ｒは炭素数１〜３０の炭化水
素基、Ｘは炭素数３〜１０の２価の炭化水素基を示
す。）

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ポリオキシアルキ
レン誘導体およびその製造方法に関する。さらに詳しく
は、ポリペプチド、生理活性タンパク質、酵素などへの
修飾やリポソーム、ポリマーミセルなどの薬物送達シス
テム（以下ＤＤＳという）における修飾など、生体関連
物質の修飾に用いられるポリオキシアルキレン誘導体お
よびその製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】近年、ＤＤＳの重要な担体として末端変
性ポリオキシアルキレン化合物が注目されている。特に
ポリペプチド、生理活性タンパク質、酵素などへのポリ
オキシアルキレン化合物による修飾やリポソーム、ポリ
マーミセルなどのポリオキシアルキレン化合物による修
飾は抗原性(免疫反応性)の低減、薬剤の安定性増加、体
内滞留時間の延長などの効果を得ることができる。末端
変性ポリオキシアルキレン化合物としては、ペプチドや
タンパク質の側鎖官能基、例えばリジン残基のアミノ
基、アスパラギン酸、グルタミン酸残基のカルボキシル
基、システイン残基のチオール基、またはリン脂質、ポ
リマーミセル原料のアミノ基やカルボキシル基などと反
応するカルボキシル基、アルデヒド基、アミノ基、チオ
ール基、マレイミド基などの官能基が導入されている。
これらの中で、システイン残基の側鎖チオール基やリジ
ン残基に導入されたチオール基などに対して、マレイミ
ド基を有する末端変性ポリオキシアルキレン化合物によ
る修飾はチオエーテル結合を形成することから他の修飾
法による結合よりもより強固な結合となりうる。しか
し、従来、マレイミド基を有するポリオキシアルキレン
化合物による修飾にはポリエチレングリコールまたはメ
トキシポリエチレングリコールに６−マレイミドカプロ
ン酸Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドなどを反応させたも
のが使用されていた。これらはポリオキシアルキレン鎖
とマレイミド基の間にエステル結合を介しているため、
生体内で加水分解し易いといった問題点があった。
【０００３】また、国際公開９２／１６２２１パンフレ
ット、国際公開９８／３８８７パンフレット、特開２０
００−１９１７００号公報、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃ
ａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ，９７（１５），８５４８−
５３（２０００）およびＢｉｏｃｈｅｍ．Ｊ． ，３５
１（１），８７−９３（２０００）に記載されているα
−マレイミドエチルオキシ−ω−メトキシ（ポリオキシ
アルキレン）は、同様に保存安定性が低いといった問題
点があった。また、医薬用途で使用される末端変性ポリ
オキシアルキレン化合物については、医薬製剤として展
開していくには目的の化合物より高分子量の不純物など
が少なく、活性基の導入率が高いものでなければなら
ず、これらの純度や活性基の導入率に関してより高いも
のが要求されている。
【０００４】従来、末端にマレイミド基を有するポリオ
キシアルキレン誘導体は、ポリオキシアルキレン鎖とマ
レイミド基の間に炭素数２のアルキル基をもつポリオキ
シアルキレン誘導体の製造方法がＳｙｎｔｈｅｔｉｃ
ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，２２（１６），２４２
５−２９（１９９２）に記載されているが、中間体の精
製方法について低引火点物質であるジエチルエーテルを
多量に使用しており、工業生産を行うには適当な方法で
はなかった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、高純度であ
り、保存安定性に優れた生体関連物質の修飾に用いられ
るポリオキシアルキレン誘導体および安全で高純度のポ
リオキシアルキレン誘導体を得る製造方法を提供するこ
とを目的とする。
【０００６】
【問題を解決するための手段】本発明は、（１）式
（１）で示されるポリオキシアルキレン誘導体、
【０００７】
【化９】
【０００８】（式中、Ｚは２〜８個の水酸基をもつ化合
物の残基であり、ＡＯは炭素数２〜１８のオキシアルキ
レン基、ｎは０〜２０００、ｍは０〜２０００、１≦ｎ
＋ｍ、２≦ａ＋ｂ≦８、１≦ｂであり、Ｒは炭素数１〜
３０の炭化水素基、Ｘは炭素数３〜１０の２価の炭化水
素基を示す。） （２） ＧＰＣ純度が９０％以上およびマレイミド基導
入率が９０％以上である前記のポリオキシアルキレン誘
導体、（３） ｐＨ７、２３℃での加水分解安定性試験
において、マレイミド基導入率の半減期（５０％減衰時
間）が４８時間以上である前記のポリオキシアルキレン
誘導体、（４） 式（１）において、Ｚが３〜８個の水
酸基をもつ化合物の残基であり、３≦ａ＋ｂ≦８、１≦
ｂである前記のポリオキシアルキレン誘導体、（５）生
体関連物質の修飾に用いることを特徴とする前記のポリ
オキシアルキレン誘導体、（６）式（１）において、Ｘ
が炭素数３の２価の炭化水素基である前記のポリオキシ
アルキレン誘導体、（７） 式（３）で示される末端ア
ミノ基含有ポリオキシアルキレン誘導体
【０００９】
【化１０】
【００１０】（式中、Ｚは２〜８個の水酸基をもつ化合
物の残基であり、ＡＯは炭素数２〜１８のオキシアルキ
レン基、ｎは０〜２０００、ｍは０〜２０００、１≦ｎ
＋ｍ、２≦ａ＋ｂ≦８、１≦ｂであり、Ｒは炭素数１〜
３０の炭化水素基、Ｘは炭素数３〜１０の２価の炭化水
素基を示す。）と無水マレイン酸を反応させて式（４）
で示されるポリオキシアルキレン末端マレアミド酸
【００１１】
【化１１】
【００１２】（記号は前記と同じである。）を得た後、
式（４）で示される化合物を式（４）で示される化合物
に対し５０〜５００容量／重量％の有機溶媒で溶解し、
ついで式（４）で示される化合物に対し３００〜５００
０容量／重量％の酢酸エチルとｎ−ヘキサンの混合物を
用いて晶析を行った後にマレイミド化反応を行う、式
（１）で示されるポリオキシアルキレン誘導体の製造方
法、
【００１３】
【化１２】
【００１４】（記号は前記と同じである。） （８） 式（２）で示される末端水酸基含有ポリオキシ
アルキレン誘導体
【００１５】
【化１３】
【００１６】（上記式において、Ｚは２〜８個の水酸基
をもつ化合物の残基であり、ＡＯは炭素数２〜１８のオ
キシアルキレン基、ｎは０〜２０００、ｍは０〜２００
０、１≦ｎ＋ｍ、２≦ａ＋ｂ≦８、１≦ｂであり、Ｒは
炭素数１〜３０の炭化水素基を示す。）をシアノ化し、
水素化により末端をアミノ化した式（３）で示される末
端アミノ基ポリオキシアルキレン誘導体
【００１７】
【化１４】
【００１８】（Ｘは炭素数３〜１０の２価の炭化水素基
を示し、他の記号は前記と同じである。）と無水マレイ
ン酸を反応させて式（４）で示されるポリオキシアルキ
レン末端マレアミド酸
【００１９】
【化１５】
【００２０】（記号は前記と同じである。）を得た後、
式（４）で示される化合物を式（４）で示される化合物
に対し５０〜５００容量／重量％の有機溶媒で溶解し、
ついで式（４）で示される化合物に対し３００〜５００
０容量／重量％の酢酸エチルとｎ−ヘキサンの混合物を
用いて晶析を行った後にマレイミド化反応を行う、生体
関連物質の修飾に用いられる式（１）で示されるポリオ
キシアルキレン誘導体の製造方法、
【００２１】
【化１６】
【００２２】（記号は前記と同じである。） （９） 無水マレイン酸の含有量が０．５重量％以下で
ある式（４）で示されるポリオキシアルキレン末端マレ
アミド酸を用いる前記のポリオキシアルキレン誘導体の
製造方法である。
【００２３】
【発明の実施の形態】以下に、本発明を詳しく説明す
る。本発明のポリオキシアルキレン誘導体は、特に生体
関連物質の修飾に有用な化合物である。生体関連物質と
は、生体内において生命活動を維持していくために必要
な物質およびそれに関連した物質のことである。例えば
生理活性物質、構造タンパク質やリン脂質が挙げられ、
アミノ酸を人工的に重合させたポリリジンやポリグルタ
ミン酸などのポリアミノ酸も含まれる。生理活性物質と
してはグルタチオンなどのチオール基を有するペプチ
ド、ヘモグロビン、インシュリンなどの生理活性タンパ
ク質、リパーゼ、プロテアーゼなどの酵素、化学的手法
や遺伝子組み替えにより得られるペプチド、タンパク
質、酵素などである。構造タンパク質としては生体組織
を形成するコラーゲンやケラチンなどが挙げられる。
【００２４】式（１）で示されるポリオキシアルキレン
誘導体について以下に詳細に述べる。Ｚは２〜８個の水
酸基をもつ化合物の残基であり、好ましくは３〜８個の
水酸基をもつ化合物の残基である。２〜８個の水酸基を
もつ化合物としてはエチレングリコール、プロピレング
リコール、ブチレングリコール、グリセリン、ジグリセ
リン、トリグリセリン、テトラグリセリン、ペンタグリ
セリン、ヘキサグリセリン、ペンタエリスリトールなど
が挙げられ、好ましくはエチレングリコール、グリセリ
ン、ジグリセリン、ヘキサグリセリン、ペンタエリスリ
トールであり、より好ましくはグリセリン、ジグリセリ
ン、ヘキサグリセリン、ペンタエリスリトールである。
ＡＯで示される炭素数２〜１８のオキシアルキレン基と
しては、オキシエチレン基、オキシプロピレン基、オキ
シブチレン基、オキシテトラメチレン基、オキシスチレ
ン基、オキシドデシレン基、オキシテトラデシレン基、
オキシヘキサデシレン基、オキシオクタデシレン基など
が挙げられ、好ましくは炭素数２〜４のオキシアルキレ
ン基であり、より好ましくはオキシエチレン基である。
【００２５】ｎおよびｍは炭素数２〜１８のオキシアル
キレン基の付加モル数を示しており、ｎおよびｍはそれ
ぞれ０〜２０００、１≦ｎ＋ｍの範囲である。ｎおよび
ｍは好ましくはそれぞれ２０〜２，０００、より好まし
くはそれぞれ４０〜１，０００の範囲である。また、２
０≦ｎ＋ｍ≦１，２００の範囲が好ましく、より好まし
くは４０≦ｎ＋ｍ≦４００の範囲である。ａおよびｂは
ポリオキシアルキレン鎖の本数を示しており、２≦ａ＋
ｂ≦８、１≦ｂの範囲である。好ましくは３≦ａ＋ｂ≦
８、１≦ｂの範囲である。生体関連物質は修飾すること
により免疫系への取り込みを抑制することができるが、
２本以上のポリオキシアルキレン鎖を有するポリオキシ
アルキレン誘導体により生理活性物質を修飾すること
で、活性を低下させずに修飾効果を得ることができる。
また、２つ以上のマレイミド基を有するポリオキシアル
キレン誘導体により生理活性物質を修飾すると、さらに
分子量を増加させることができ、より免疫系への取り込
みを抑制することができる。また、ｎ、ｍ、ａおよびｂ
はポリオキシアルキレン誘導体の全体分子量を表す指標
であり、これらの関係式は１≦（ｎ×ａ＋ｍ×ｂ）≦１
６，０００の範囲であり、２０≦（ｎ×ａ＋ｍ×ｂ）≦
５，０００の範囲が好ましく、より好ましくは４０≦
（ｎ×ａ＋ｍ×ｂ）≦１，２００の範囲である。これら
の範囲から式（１）で示されるポリオキシアルキレン誘
導体の全体分子量としては２５０〜７０万であり、好ま
しくは１０００〜２０万であり、より好ましくは２００
０〜５万である。
【００２６】Ｒで示される炭素数１〜３０の炭化水素基
としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロ
ピル基、ブチル基、イソブチル基、第三ブチル基、ペン
チル基、イソペンチル基、ヘキシル基、ヘプチル基、２
−エチルヘキシル基、オクチル基、ノニル基、デシル
基、ウンデシル基、ドデシル基、イソトリデシル基、テ
トラデシル基、ヘキサデシル基、イソヘキサデシル基、
オクタデシル基、イソオクタデシル基、オクタデセニル
基、オクチルドデシル基、ドコシル基、デシルテトラデ
シル基等の脂肪族炭化水素基、ベンジル基、クレジル
基、ブチルフェニル基、ジブチルフェニル基、オクチル
フェニル基、ドデシルフェニル基、ジオクチルフェニル
基、ジノニルフェニル基、ナフチル基、スチレン化フェ
ニル基、４−メトキシベンジル基、トリフェニルメチル
基等の芳香族炭化水素基等が挙げられ、好ましくはメチ
ル基、エチル基、第三ブチル基、オクタデシル基、ベン
ジル基、４−メトキシベンジル基、トリフェニルメチル
基である。より好ましくはメチル基、第三ブチル基、ベ
ンジル基である。Ｘで示される炭素数３〜１０の２価の
炭化水素基としては、例えばトリメチレン基、イソプロ
ピレン基、テトラメチレン基、イソブチレン基、ジメチ
ルメチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチレン基、
ヘプタメチレン基、オクタメチレン基、ノナメチレン
基、デカメチレン基などの直鎖および分岐炭化水素基、
フェニルメチレン基などの芳香族炭化水素基が挙げら
れ、好ましくはトリメチレン基、テトラメチレン基、ペ
ンタメチレン基、ヘキサメチレン基、ヘプタメチレン
基、オクタメチレン基、ノナメチレン基、デカメチレン
基であり、より好ましくはトリメチレン基、またはヘキ
サメチレン基、ヘプタメチレン基、オクタメチレン基、
ノナメチレン基、デカメチレン基である。水酸基を有す
る化合物に対して、シアノ基を導入する方法としてアク
リロニトリルを付加させるシアノエチル化が純度および
収率の面で優れている。シアノエチル化された化合物か
ら得られるものは炭素数３の２価の炭化水素基を有する
化合物である。このことから、式（１）において、Ｘが
炭素数３の２価の炭化水素基であるものがより好まし
い。一方、Ｘにおいて炭素数が６〜１０である２価の炭
化水素基であるものについては、加水分解安定性がさら
に優れたものになるため、生体関連物質を修飾して製剤
を開発する際、同質性の優れた製剤を提供することが可
能になることから、好ましい。
【００２７】また、得られるポリオキシアルキレン誘導
体の純度に関して、医薬製剤の原料として用いる場合に
は製剤の均質性や生体関連物質との反応性が要求される
ことからより高い純度が求められる。ポリオキシアルキ
レン誘導体においては、まず、製剤の均質性に関する問
題からＧＰＣ純度が要求される。これは目的分子量の２
倍量体、３倍量体などの含有量に関する純度である。本
発明で得られる生体関連物質の修飾に用いられるポリオ
キシアルキレン誘導体は、ＧＰＣ純度が好ましくは９０
％以上であり、より好ましくは９５％以上である。
【００２８】ＧＰＣ純度は以下に記載の試験法において
測定を行うことができる。 ＧＰＣ純度の測定法：ＧＰＣ（ゲルパーミエーションク
ロマトグラフィ）にて測定を行う。カラムはＳＨＯＤＥ
Ｘ ＫＦ８０４Ｌ（８ｍｍＩ．Ｄ×３０ｃｍ、昭和電工
（株）製）を３本接続したものを使用し、溶離液はテト
ラヒドロフラン、流速１．０ｍＬ／分、カラム温度４０
℃、検出器に示差屈折計を用い、試料は０．１重量％濃
度のテトラヒドロフラン溶液とし、注入量は１００μＬ
とする。得られたクロマトグラムにおいて、ピークが分
離している場合はピーク間の極小値から垂直分割し、ピ
ークが重なっている場合はピーク間の変曲点から垂直分
割して、得られた各ピークの面積値からメインピークの
面積百分率を算出する。
【００２９】また、生体関連物質との十分な反応性を得
るためには末端活性基であるマレイミド基の置換率が高
いことが望まれる。末端活性基の置換率が不十分である
と修飾された生体関連物質の生成率が低下し、血中滞留
性が低下するなど製剤の性能低下につながる。本発明で
得られる生体関連物質の修飾に用いられるポリオキシア
ルキレン誘導体は、ポリオキシアルキレン鎖末端官能基
であるマレイミド基導入率が好ましくは９０％以上であ
り、より好ましくは９２％以上である。マレイミド基導
入率は以下に記載の試験法において測定を行うことがで
きる。 マレイミド基導入率の測定法：４００ＭＨｚ1Ｈ−ＮＭ
Ｒにて測定を行う（測定装置：ＥＣＰ４００、日本電子
（株）製）。試料１５〜２０ｍｇを重クロロホルム０．
５５ｍＬに溶解し、1Ｈ−ＮＭＲを測定する。得られた
ＮＭＲチャートにおいて、マレイミド基由来のピーク
（δ６．６９、ｓ）、中間原料（ポリオキシアルキレン
末端マレアミド酸）由来ピーク（δ６．３５、ｄｄ）お
よび反応中間体由来ピーク（δ７．２２および６．６
２、ｄ）の積分値を求め、各積分値の総和に対するマレ
イミド基由来のピーク面積の百分率を計算し、ポリオキ
シアルキレン鎖末端官能基のマレイミド基導入率を算出
する。また、通常、生体関連物質との反応は緩衝液中で
行われる。そのため、ポリオキシアルキレン誘導体につ
いては、緩衝液中での加水分解安定性の優れたものが要
求されている。加水分解安定性が低い場合には、緩衝液
中での反応において加水分解を起こし、生体関連物質の
修飾率が低下し、その修飾効果が十分得られない、ま
た、十分な修飾効果を得るためには大過剰量のポリオキ
シアルキレン誘導体が必要になってくる、といった問題
がある。本発明で得られる生体関連物質の修飾に用いら
れるポリオキシアルキレン誘導体は、ｐＨ７、２３℃で
の加水分解安定性試験において、マレイミド基導入率の
半減期（５０％減衰時間）が４８時間以上であり、好ま
しくは５４時間以上であり、より好ましくは６０時間以
上である。また、２５％減衰時間が２４時間以上、７０
％減衰時間が６７時間以上であることが好ましく、より
好ましくは２５％減衰時間が２７時間以上、７０％減衰
時間が７５時間以上である。
【００３０】加水分解安定性試験は以下に記載の試験法
において測定を行うことができる。 加水分解安定性試験：試料０．０２ｇを５０ｍＬスクリ
ュー管に採取し、２０ｍＬのｐＨ７に調整した５０ｍＭ
リン酸緩衝液で溶解する。溶解後、２３℃で２４、４
８、７２時間後にそれぞれ４ｍＬずつとり、１％リン酸
水溶液を数滴加えた後、凍結乾燥を行う。これをクロロ
ホルムに溶解し不溶物を濾別し、エバポレーターで濃縮
して得られたものについて1Ｈ−ＮＭＲを測定してマレ
イミド基導入率を算出する。得られた各時間におけるマ
レイミド基導入率の初期マレイミド基導入率に対する下
記の変化率を算出する。 変化率＝[（各時間におけるマレイミド基導入率）／
（初期のマレイミド基導入率）]×１００ 変化率が７５％になった時間を２５％減衰時間、５０％
になった時間を５０％減衰時間（半減期）、３０％にな
った時間を７０％減衰時間とする。２５％減衰時間、５
０％減衰時間（半減期）および７０％減衰時間は、２
４、４８、７２時間後の変化率を測定し、横軸を時間、
縦軸を変化率としたグラフを作成し、切片を１００とし
て最小二乗法により得られた直線式を用いて、それぞれ
７５％、５０％および３０％になる時間を算出すること
により求められる。
【００３１】本発明で得られる生体関連物質の修飾に用
いられるポリオキシアルキレン誘導体は以下に示す製造
工程によって得られる。式（３）で示される末端アミノ
基含有ポリオキシアルキレン誘導体から製造を行うこと
ができる。好ましくは、純度の点で式（２）で示される
末端水酸基含有ポリオキシアルキレン誘導体から製造す
ることが良好である。
【００３２】
【化１７】
【００３３】工程［Ａ］は式（２）で示される末端水酸
基含有ポリオキシアルキレン誘導体に対しアルカリ触媒
存在下においてアクリロニトリル、ニトリル基を有する
炭素数３〜１０である２価の炭化水素のハロゲン化物な
どを付加してシアノ化を行い、その後、水素添加を行う
工程であり、ポリオキシアルキレン鎖と末端アミノ基と
の間に炭素数３〜１０の２価の炭化水素基をもつ式
（３）で示される末端アミノ基含有ポリオキシアルキレ
ン誘導体が得られる。ここで、ニトリル基を有する炭素
数３〜１０である２価の炭化水素のハロゲン化物とし
て、臭化物、塩化物、ヨウ化物が好ましく、より好まし
くは塩化物、臭化物である。式（２）で示される化合物
をシアノ化する際には水や式（２）で示される化合物を
溶解する有機溶媒を用いることが好ましく、式（２）で
示される化合物を溶解する有機溶媒としてはクロロホル
ム、トルエン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド
などが好ましく、さらに好ましくはトルエン、アセトニ
トリルである。溶媒使用量は式（２）で示される化合物
に対し５０〜５００容量／重量％であり、好ましくは７
０〜３００容量／重量％である。アルカリ触媒は水酸化
カリウム、水酸化ナトリウムなどの強アルカリ金属の水
酸化物、ナトリウムメチラートなどの強アルカリアルコ
ラートを用いる。触媒の使用量は式（２）で示される化
合物に対し０．５〜２５重量％であり、好ましくは３〜
１０重量％である。アクリロニトリルなどのシアノ化剤
の量は式（２）で示される化合物の水酸基１当量に対し
１〜１００当量が好ましく、より好ましくは１０〜６０
当量である。反応温度は−２０℃〜１５０℃が好まし
く、より好ましくは０℃〜１００℃である。反応時間は
１〜１０時間が好ましく、より好ましくは２〜６時間で
ある。反応後、水洗や吸着処理により触媒を除去し、溶
剤を除去してポリオキシアルキレンシアノ化物が得られ
る。
【００３４】得られたポリオキシアルキレンシアノ化物
は水素化に通常用いられる触媒を用いて水素化を行い、
式（３）で示される末端アミノ基含有ポリオキシアルキ
レン誘導体とする。この工程において、ポリオキシアル
キレンシアノ化物はこれを溶解する有機溶媒に溶解する
のが好ましく、トルエンまたはエタノールが好ましく、
より好ましくはトルエンである。溶媒使用量はポリオキ
シアルキレンシアノ化物に対し５０〜５００容量／重量
％であり、好ましくは７０〜３００容量／重量％であ
る。触媒としては、ニッケルまたはコバルトが好まし
く、より好ましくはニッケルである。触媒量はポリオキ
シアルキレンシアノ化物に対し０．５〜２５重量％が好
ましく、より好ましくは１〜１０重量％である。ニッケ
ル触媒を用いる場合は水素化反応時の副反応を防ぐため
にアンモニアガスを添加することが好ましい。アンモニ
アガスの添加量はポリオキシアルキレンシアノ化物に対
し５〜３０重量％であり、より好ましくは１０〜２０重
量％である。水素圧は１〜１０ＭＰａが好ましく、より
好ましくは３〜６ＭＰａである。反応温度は８０〜２０
０℃が好ましく、より好ましくは１００〜１５０℃であ
る。反応時間は０．５〜１０時間が好ましく、より好ま
しくは１〜５時間である。反応後、ろ過により触媒を除
去し、溶剤を除去して式（３）で示される末端アミノ基
含有ポリオキシアルキレン誘導体が得られる。この工程
において、得られたポリオキシアルキレンシアノ化物お
よび式（３）で示される化合物は晶析、吸着処理などに
よる精製工程を行ってもよい。
【００３５】工程［Ｂ］は工程［Ａ］で得られた式
（３）で示される化合物と無水マレイン酸を反応させる
ことにより、式（４）で示されるポリオキシアルキレン
末端マレアミド酸を得る工程である。式（３）で示され
る末端アミノ基含有ポリオキシアルキレン誘導体のアミ
ン純度は９０％以上が好ましく、より好ましくは９５％
以上である。アミン純度が低い場合、工程［Ｃ］におけ
る閉環反応が起こらないため、式（１）で示されるポリ
オキシアルキレン誘導体の末端官能基のマレイミド基導
入率が低くなってしまう。アミン純度は以下に記載の試
験法において測定を行うことができる。アミン純度の測
定法：液体クロマトグラフィにて測定を行う。カラムは
東ソー ＴＳＫｇｅｌ ＳＰ−５ＰＷ（７．５ｍｍＩ．
Ｄ×７．５ｃｍ、東ソ−（株）製）を使用し、溶離液は
２ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）、流速０．５ｍＬ／
分、カラム温度４０℃、検出器に示差屈折計を用い、試
料は０．５重量％濃度の２ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．
５）溶液とし、注入量は２０μＬとする。得られたクロ
マトグラムにおいて、ピークが分離している場合はピー
ク間の極小値から垂直分割し、ピークが重なっている場
合はピーク間の変曲点から垂直分割して、得られた各ピ
ークの面積値からメインピークの面積百分率を算出す
る。式（３）で示される化合物はこれを溶解する有機溶
媒に溶解するのが好ましく、クロロホルムまたはトルエ
ンが好ましい。溶媒使用量は式（３）で示される化合物
に対し５０〜５００容量／重量％であり、好ましくは７
０〜３００容量／重量％である。無水マレイン酸量は
（３）で示される化合物のアミノ基１当量に対し１．０
〜２０当量が好ましく、より好ましくは５〜１５当量で
ある。反応温度は２０〜８０℃が好ましく、より好まし
くは４０〜６０℃である。反応時間は０．５〜１０時間
が好ましく、より好ましくは１〜５時間である。得られ
た式（４）で示されるポリオキシアルキレン末端マレア
ミド酸はこれを溶解する有機溶剤に溶解し、酢酸エチル
とｎ−ヘキサンの混合物を用いて晶析を行う。式（４）
で示される化合物を溶解する有機溶剤としてはクロロホ
ルム、トルエン、アセトニトリルまたはジメチルホルム
アミドが好ましく、より好ましくはクロロホルムまたは
トルエンである。有機溶剤量は式（４)で示される化合
物に対して５０〜５００容量／重量％の範囲であり、好
ましくは７０〜３００容量／重量％の範囲である。
【００３６】酢酸エチルとｎ−ヘキサンの混合物の溶剤
量はポリオキシアルキレン末端マレアミド酸に対し３０
０〜５０００容量／重量％であり、好ましくは５００〜
２０００容量／重量％である。酢酸エチルとｎ−ヘキサ
ンの混合比は容量比で１：９〜９：１であり、好ましく
は４：６〜６：４である。晶析工程において、式（４）
で示される化合物を溶解する有機溶剤で溶解する際の温
度は０〜８０℃が好ましく、より好ましくは２０〜４０
℃である。この溶液に対して酢酸エチルとｎ−ヘキサン
の混合物を加え、結晶を析出させる際の温度は２０〜３
５℃が好ましい。酢酸エチルとｎ−ヘキサンは別々に加
えてもよい。晶析は２回以上繰り返し行っても良い。ま
た、得られた式（４）で示されるポリオキシアルキレン
末端マレアミド酸に含まれる無水マレイン酸の含有量は
０．５重量％以下であり、好ましくは０．１重量％以下
である。式（４）で示される化合物に含まれる無水マレ
イン酸の含有量が多いと目的の化合物より高分子量の不
純物が生成し、ＧＰＣ純度が低下する問題が生じる。
【００３７】無水マレイン酸の含有量は以下に記載の方
法で測定することができる。 ポリオキシアルキレン末端マレアミド酸に含まれる無水
マレイン酸の含有量の測定法：試料１５〜２０ｍｇを重
クロロホルム０．５５ｍＬに溶解し、４００ＭＨｚ1Ｈ
−ＮＭＲ（測定装置：ＥＣＰ４００、日本電子（株）
製）にて測定を行う。得られたＮＭＲチャートにおい
て、基準となるピーク（例えばメトキシ基を基準とした
場合、δ３．３８、ｓ、３Ｈ）に対して無水マレイン酸
由来のピーク（δ７．０５、ｓ、２Ｈ）の積分値を求
め、以下の式から無水マレイン酸の含有量を算出する。 無水マレイン酸含有量［重量％］＝（（積分値／２）×
９８／ポリオキシアルキレン末端マレアミド酸の分子
量）×１００
【００３８】工程［Ｃ］は工程［Ｂ］で得られた式
（４）で示されるポリオキシアルキレン末端マレアミド
酸を閉環し、式（１）で示されるポリオキシアルキレン
誘導体を得る工程である。閉環反応は、式（４）で示さ
れるポリオキシアルキレン末端マレアミド酸に対し５〜
１０００重量％、好ましくは１００〜５００重量％の無
水酢酸を加えて溶解し、１〜５０重量％、好ましくは５
〜４０重量％の酢酸ナトリウムやトリエチルアミンなど
の触媒を加え、６０〜１３０℃に加温することにより行
われる。必要ならば、有機溶剤を用いてもよい。用いる
有機溶媒としてはクロロホルム、アセトニトリル、トル
エンが好ましく、式（４）の化合物に対し、５０〜５０
０容量／重量％の範囲であり、好ましくは７０〜３００
容量／重量％の範囲である。反応後、触媒をろ過により
除き、減圧下、６０〜１３０℃で濾液を濃縮する。濃縮
物を有機溶剤に溶解した後、ｎ−ヘキサンと酢酸エチル
の混合物を加えて結晶を析出させ、ろ過後、乾燥し、式
（１）で示されるポリオキシアルキレン誘導体を得るこ
とができる。有機溶剤としてはクロロホルムまたはトル
エンが好ましく、有機溶剤量は式（１）の化合物に対し
て５０〜５００容量／重量％の範囲であり、好ましくは
７０〜３００容量／重量％の範囲である。酢酸エチルと
ｎ−ヘキサンの混合物の溶剤量は式（１）の化合物に対
して３００〜５０００容量／重量％であり、好ましくは
５００〜２０００容量／重量％である。酢酸エチルとｎ
−ヘキサンの混合比は容量比で１：９〜９：１であり、
好ましくは４：６〜６：４である。酢酸エチルとｎ−ヘ
キサンは別々に加えてもよく、精製は繰り返し行っても
良い。
【００３９】本発明のポリオキシアルキレン誘導体を用
いて生体関連物質を修飾する方法は、例えば、生体関連
物質をリン酸緩衝液に溶解し、１０℃以下に冷却した
後、ポリオキシアルキレン末端マレイミド誘導体を加
え、１〜１０時間攪拌する。脱塩後、凍結乾燥してポリ
オキシアルキレン誘導体で修飾した生体関連物質が得ら
れる。
【００４０】
【発明の効果】本発明のポリオキシアルキレン誘導体
は、高純度であり、マレイミド基部分が保存安定性に優
れているため、生体関連物質の修飾を行っても安定性に
優れている。また、本発明の製造方法で製造することに
より、安全に高純度のものが容易に得られる。本発明の
ポリオキシアルキレン誘導体を用いて修飾した生体関連
物質は、安定性に優れており、有用である。
【００４１】
【実施例】以下、実施例を用いて本発明を詳細に説明す
る。 実施例１ シアノ化反応：メトキシポリオキシエチレン（分子量５
０００、式（２）においてｎ＋ｍ＝１１２、ａ＝１、ｂ
＝１である化合物、ＭＥＨ−５０Ｈ 日本油脂(株)製）
６４０ｇを攪拌機、滴下装置、温度計および窒素バブリ
ングラインのついた３Ｌ四つ口フラスコに仕込み、イオ
ン交換水６４０ｇを加えて溶解し、１０℃以下まで冷却
した。これに５０％水酸化カリウム４０ｇを加え、さら
に５℃以下に冷却した後、５℃以下に保ったまま、アク
リロニトリル３４０ｇを２時間かけて滴下し、さらに２
時間攪拌した。反応終了後、８５％リン酸２４ｇを加え
て中和した。この反応液８４２ｇにイオン交換水２８０
０ｇに塩化ナトリウム５００ｇを溶かした水溶液を加
え、クロロホルム１０００ｍＬで抽出した。クロロホル
ム層を分層後、水層にクロロホルム５００ｍＬを加えて
抽出した。このクロロホルム液を濾過した後、９０℃、
０.３ｋＰａの減圧下で脱溶剤を行い、固化して粗メト
キシポリオキシエチレンシアノエチル化物６４０ｇを得
た。粗メトキシポリオキシエチレンシアノエチル化物６
００ｇを攪拌機および窒素シールラインのついた１０Ｌ
ビーカーに仕込み、クロロホルム５００ｍＬに溶解した
後、酢酸エチル４Ｌとヘキサン４Ｌの混合液を注ぎ、３
０分攪拌して結晶を析出させた。濾過して結晶を得た
後、さらにクロロホルム４００ｍＬに溶解して、さらに
酢酸エチル４Ｌとヘキサン４Ｌの混合液を注ぎ、３０分
攪拌して結晶を析出させた。濾過して得られた結晶を乾
燥してメトキシポリオキシエチレンシアノエチル化物５
４０ｇを得た。 アミノ化反応：メトキシポリオキシエチレンシアノエチ
ル化物２００ｇ、トルエン４００ｇ、ニッケル触媒４ｇ
を攪拌機、温度計、窒素導入管、水素導入管およびアン
モニア導入管のついた１Ｌオートクレーブに仕込み、反
応容器内を窒素置換した。６０℃まで昇温して溶解した
後、アンモニアガスを３０ｇ吹き込み、さらに水素ガス
を４ＭＰａまで吹き込んだ。反応容器を１３０℃まで昇
温して３時間攪拌しながら反応した。反応容器を８０℃
まで冷却してから触媒を濾別し、９０℃、０.３ｋＰａ
の減圧下、１時間で脱溶剤を行い、固化してメトキシポ
リオキシエチレンプロピルアミン１７０ｇを得た。得ら
れたメトキシポリオキシエチレンプロピルアミンのアミ
ン純度は９５．２％であった。 マレイミド化反応：メトキシポリオキシエチレンプロピ
ルアミン１６４ｇ、トルエン３２５ｍＬを攪拌機、温度
計、冷却管および窒素バブリングラインのついた１Ｌ四
つ口フラスコに仕込み、５０℃に加温して溶解した。こ
れに無水マレイン酸３２ｇを加え、４時間攪拌して反応
した。反応液を４０℃まで冷却後、酢酸エチル８００ｍ
Ｌとヘキサン８００ｍＬの混合液を注ぎ、３０分攪拌し
て結晶を析出させた。濾過して得た結晶を再度トルエン
３２５ｍＬに溶解し、酢酸エチル８００ｍＬとヘキサン
８００ｍＬの混合液を注ぎ、３０分攪拌して結晶を析出
させ、濾過して結晶を得た。この結晶を乾燥してメトキ
シポリオキシエチレンプロピルマレアミド酸１６７ｇを
得た。得られたメトキシポリオキシエチレンプロピルマ
レアミド酸に含まれる無水マレイン酸の含有量は０．０
０１１重量％であった。得られたメトキシポリオキシエ
チレンプロピルマレアミド酸１６７ｇ、無水酢酸５００
ｍＬ、酢酸ナトリウム６４ｇを攪拌機、温度計、冷却管
および窒素バブリングラインのついた１Ｌ四つ口フラス
コに仕込み、９０℃まで加温した。９０℃で３時間攪拌
して反応を行った後、５０℃まで冷却し酢酸ナトリウム
を濾過し、９０℃、０.３ｋＰａの減圧下で濾液を濃縮
した。クロロホルム３３０ｍＬに溶解して不溶物を濾過
した後、酢酸エチル１Ｌとヘキサン１Ｌの混合液を注
ぎ、３０分攪拌して結晶を析出させた。濾過して結晶を
得た後、さらにクロロホルム３３０ｍＬに溶解して、さ
らに酢酸エチル１Ｌとヘキサン１Ｌの混合液を注ぎ、３
０分攪拌して結晶を析出させた。濾過して得られた結晶
を乾燥してメトキシポリオキシエチレンプロピルマレイ
ミド１６０ｇを得た。得られた結晶は薄桃色であった。
【００４２】実施例２ シアノ化反応：ポリオキシエチレン（分子量１０００
０、式（２）においてｍ＝１１３、ａ＝０、ｂ＝２であ
る化合物、ＰＥＧ１１０００ 日本油脂(株)製）１６０
０ｇを攪拌機、滴下装置、温度計および窒素バブリング
ラインのついた５Ｌ四つ口フラスコに仕込み、イオン交
換水１６００ｇを加えて溶解し、１０℃以下まで冷却し
た。これに５０％水酸化カリウム１００ｇを加え、さら
に５℃以下に冷却した後、５℃以下まで冷却した。５℃
以下に保ったまま、アクリロニトリル８５０ｇを２時間
かけて滴下し、さらに２時間攪拌した。反応終了後、８
５％リン酸６０ｇを加えて中和した。クロロホルム２５
００ｍＬおよび１２５０ｍＬ、イオン交換水７０００
ｇ、塩化ナトリウム１２５０ｇを使用し、以下は実施例
１と同様に操作を行い、粗ポリオキシエチレンジシアノ
エチル化物１６００ｇを得た。粗ポリオキシエチレンジ
シアノエチル化物１６００ｇを攪拌機および窒素シール
ラインのついた３０Ｌビーカーに仕込み、クロロホルム
１．４Ｌに溶解した後、酢酸エチル１１.１Ｌとヘキサ
ン１１.１Ｌの混合液を注ぎ、３０分攪拌して結晶を析
出させた。濾過して結晶を得た後、さらにクロロホルム
１．４Ｌに溶解して、さらに酢酸エチル１１.１Ｌとヘ
キサン１１.１Ｌの混合液を注ぎ、３０分攪拌して結晶
を析出させた。濾過して得られた結晶を乾燥してポリオ
キシエチレンジシアノエチル化物１４００ｇを得た。 アミノ化反応：ポリオキシエチレンジシアノエチル化物
２００ｇ、トルエン４００ｇ、ニッケル触媒９ｇを攪拌
機、温度計、窒素導入管、水素導入管およびアンモニア
導入管のついた１Ｌオートクレーブに仕込んだ。その後
は実施例１と同様に操作を行い、ポリオキシエチレンジ
プロピルアミン１７０ｇを得た。得られたポリオキシエ
チレンジプロピルアミンのアミン純度は９３．７％であ
った。 マレイミド化反応：ポリオキシエチレンジプロピルアミ
ン１６４ｇ、トルエン３２５ｍＬを攪拌機、温度計、冷
却管および窒素バブリングラインのついた１Ｌ四つ口フ
ラスコに仕込み、５０℃に加温して溶解した。これに無
水マレイン酸３２ｇを加え、４時間攪拌して反応した。
反応液を４０℃まで冷却後、酢酸エチル８００ｍＬとヘ
キサン８００ｍＬの混合液を注ぎ、３０分攪拌して結晶
を析出させた。濾過して得た結晶を再度トルエン３２５
ｍＬに溶解し、酢酸エチル８００ｍＬとヘキサン８００
ｍＬの混合液を注ぎ、３０分攪拌して結晶を析出させ、
濾過して結晶を得た。この結晶を乾燥してポリオキシエ
チレンジプロピルマレアミド酸１６５ｇを得た。得られ
たポリオキシエチレンジプロピルマレアミド酸に含まれ
る無水マレイン酸の含有量は０．００１８重量％であっ
た。得られたポリオキシエチレンジプロピルマレアミド
酸１６５ｇ、無水酢酸５００ｍＬ、酢酸ナトリウム６３
ｇを攪拌機、温度計、冷却管および窒素バブリングライ
ンのついた１Ｌ四つ口フラスコに仕込み、９０℃まで加
温した。９０℃で３時間攪拌して反応を行った後、５０
℃まで冷却し酢酸ナトリウムを濾過し、９０℃、０.３
ｋＰａの減圧下で濾液を濃縮した。クロロホルム３６０
ｍＬに溶解して不溶物を濾過した後、酢酸エチル１Ｌと
ヘキサン１Ｌの混合液を注ぎ、３０分攪拌して結晶を析
出させた。濾過して結晶を得た後、さらにクロロホルム
３６０ｍＬに溶解して、さらに酢酸エチル１Ｌとヘキサ
ン１Ｌの混合液を注ぎ、３０分攪拌して結晶を析出させ
た。濾過して得られた結晶を乾燥してポリオキシエチレ
ンジプロピルマレイミド１６０ｇを得た。得られた結晶
は薄桃色であった。
【００４３】実施例３ シアノ化反応：テトラ（ポリオキシエチレン）ジグリセ
ロールエーテル（分子量１００００、式（２）において
ｍ＝５６、ａ＝０、ｂ＝４である化合物、ＤＧＥ−１０
０００日本油脂(株)製）１６００ｇを攪拌機、滴下装
置、温度計および窒素バブリングラインのついた５Ｌ四
つ口フラスコに仕込み、イオン交換水１６００ｇを加え
て溶解し、１０℃以下まで冷却した。これに５０％水酸
化カリウム１００ｇを加え、さらに５℃以下に冷却し
た。５℃以下に保ったまま、アクリロニトリル８５０ｇ
を２時間かけて滴下し、さらに２時間攪拌した。反応終
了後、８５％リン酸６０ｇを加えて中和した。クロロホ
ルム２５００ｍＬおよび１２５０ｍＬ、イオン交換水７
０００ｇ、塩化ナトリウム１２５０ｇを使用し、以下は
実施例１と同様に操作を行い、粗テトラ（ポリオキシエ
チレン）ジグリセロールテトラシアノエチル化物１６０
０ｇを得た。粗テトラ（ポリオキシエチレン）ジグリセ
ロールテトラシアノエチル化物１６００ｇを攪拌機およ
び窒素シールラインのついた３０Ｌビーカーに仕込み、
クロロホルム１．４Ｌに溶解した後、酢酸エチル１１.
１Ｌとヘキサン１１.１Ｌの混合液を注ぎ、３０分攪拌
して結晶を析出させた。濾過して結晶を得た後、さらに
クロロホルム１．４Ｌに溶解して、さらに酢酸エチル１
１.１Ｌとヘキサン１１.１Ｌの混合液を注ぎ、３０分攪
拌して結晶を析出させた。濾過して得られた結晶を乾燥
してテトラ（ポリオキシエチレン）ジグリセロールテト
ラシアノエチル化物１４００ｇを得た。 アミノ化反応：テトラ（ポリオキシエチレン）ジグリセ
ロールテトラシアノエチル化物２００ｇ、トルエン４０
０ｇ、ニッケル触媒９ｇを攪拌機、温度計、窒素導入
管、水素導入管およびアンモニア導入管のついた１Ｌオ
ートクレーブに仕込み、後は実施例１と同様に操作を行
い、テトラ（ポリオキシエチレン）ジグリセロールテト
ラプロピルアミン１７０ｇを得た。得られたテトラ（ポ
リオキシエチレン）ジグリセロールテトラプロピルアミ
ンのアミン純度は９３．１％であった。 マレイミド化反応：テトラ（ポリオキシエチレン）ジグ
リセロールテトラプロピルアミン１６４ｇ、トルエン３
２５ｍＬを攪拌機、温度計、冷却管および窒素バブリン
グラインのついた１Ｌ四つ口フラスコに仕込み、５０℃
に加温して溶解した。これに無水マレイン酸６４ｇを加
え、４時間攪拌して反応した。反応液を４０℃まで冷却
後、酢酸エチル８００ｍＬとヘキサン８００ｍＬの混合
液を注ぎ、３０分攪拌して結晶を析出させた。濾過して
得た結晶を再度トルエン３２５ｍＬに溶解し、酢酸エチ
ル８００ｍＬとヘキサン８００ｍＬの混合液を注ぎ、３
０分攪拌して結晶を析出させ、濾過して結晶を得た。こ
の結晶を乾燥してテトラ（ポリオキシエチレン）ジグリ
セロールテトラプロピルマレアミド酸１６７ｇを得た。
得られたテトラ（ポリオキシエチレン）ジグリセロール
テトラプロピルマレアミド酸に含まれる無水マレイン酸
の含有量は０．０２５重量％であった。得られたテトラ
（ポリオキシエチレン）ジグリセロールテトラプロピル
マレアミド酸１６７ｇ、無水酢酸５００ｍＬ、酢酸ナト
リウム６３ｇを攪拌機、温度計、冷却管および窒素バブ
リングラインのついた１Ｌ四つ口フラスコに仕込み、９
０℃まで加温した。９０℃で３時間攪拌して反応を行っ
た後、５０℃まで冷却し酢酸ナトリウムを濾過し、９０
℃、０.３ｋＰａの減圧下で濾液を濃縮した。クロロホ
ルム３６０ｍＬに溶解して不溶物を濾過した後、酢酸エ
チル１Ｌとヘキサン１Ｌの混合液を注ぎ、３０分攪拌し
て結晶を析出させた。濾過して結晶を得た後、さらにク
ロロホルム３６０ｍＬに溶解して、さらに酢酸エチル１
Ｌとヘキサン１Ｌの混合液を注ぎ、３０分攪拌して結晶
を析出させた。濾過して得られた結晶を乾燥してテトラ
（ポリオキシエチレン）ジグリセロールテトラプロピル
マレイミド１６２ｇを得た。得られた結晶は薄桃色であ
った。
【００４４】比較例１ メトキシポリオキシエチレンプロピルアミン（分子量５
０００）を原料として、先行文献（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ
ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，２２（１６），２４
２５−２９（１９９２））記載の方法により、メトキシ
ポリオキシエチレンエチルマレイミドの合成を行った。
シアノ化、アミノ化においては、実施例１と同一原料、
同一方法で行い、メトキシポリオキシエチレンプロピル
アミンを得た。得られたメトキシポリオキシエチレンプ
ロピルアミンのアミン純度は９６．８％であった。得ら
れたメトキシポリオキシエチレンプロピルアミン２．５
ｇ、無水マレイン酸４６０ｍｇおよびジオキサン１０ｍ
Ｌを５０ｍＬフラスコに仕込み、８０℃で３０分攪拌し
て反応した。反応液を冷却後、エーテル５００ｍＬを注
ぎ、一晩放置して結晶を析出させた。析出した結晶を濾
過し、結晶をエーテルで洗浄した後、真空下で乾燥して
メトキシポリオキシエチレンプロピルマレアミド酸を得
た。得られたメトキシポリオキシエチレンプロピルマレ
アミド酸に含まれる無水マレイン酸の含有量は０．０８
６重量％であった。得られたメトキシポリオキシエチレ
ンプロピルマレアミド酸に対し、無水酢酸２０ｍＬ、酢
酸ナトリウム１．０ｇを５０ｍＬフラスコに仕込み、１
００℃で４５分攪拌して反応を行った。冷却後、エバポ
レーションで溶剤を除き、５０ｍＬのジクロロメタンに
溶解し、活性炭で吸着処理を行った。これを濾過し、エ
ーテル５００ｍＬを注ぎ、一晩放置して結晶を析出させ
た。析出した結晶を濾過し、結晶をエーテルで洗浄した
後、真空下で乾燥してメトキシポリオキシエチレンプロ
ピルマレイミド２．２ｇを得た。得られた結晶は薄桃色
であった。
【００４５】比較例２ シアノ化、アミノ化においては、実施例１と同一原料、
同一方法で行い、メトキシポリオキシエチレンプロピル
アミンを得た。得られたメトキシポリオキシエチレンプ
ロピルアミンのアミン純度は９８．８％であった。得ら
れたメトキシポリオキシエチレンプロピルアミン１６４
ｇ、トルエン３２５ｍＬを攪拌機、温度計、冷却管およ
び窒素バブリングラインのついた１Ｌ四つ口フラスコに
仕込み、５０℃に加温して溶解した。これに無水マレイ
ン酸３２ｇを加え、４時間攪拌して反応した。反応終了
後、サンプリングを行ったところ、無水マレイン酸の含
有量は１５重量％であった。無水酢酸５００ｍＬ、酢酸
ナトリウム６４ｇを仕込み、９０℃まで加温した。以
下、実施例１と同様の操作を行い、メトキシポリオキシ
エチレンプロピルマレイミド１６４ｇを得た。得られた
結晶は濃茶色であった。 比較例３ 比較例３としてメトキシポリエチレングリコールマレイ
ミド（分子量５０００、Ｆｌｕｋａ社製、Ｐｒｏｄｕｃ
ｔ Ｎｕｍｂｅｒ ６３１８７［Ｍｅｔｈｏｘｙｐｏｌ
ｙｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ ５，０００ ｍｌ
ｅｉｍｉｄｅ］）を用いた。
【００４６】実施例１〜３および比較例１〜３で得られ
たポリオキシアルキレン誘導体について、ＧＰＣ純度お
よびマレイミド基導入率について比較した。結果を表１
に示す。
【００４７】
【表１】
【００４８】本発明の製造方法で得られたポリオキシア
ルキレン誘導体は、ＧＰＣ純度、マレイミド基導入率と
も高純度であるのに対して、本発明の範囲外である比較
例はＧＰＣ純度、マレイミド基導入率ともに本発明の要
求を満足するものは得られなかった。
【００４９】実施例１および比較例３で得られたポリオ
キシアルキレン誘導体について、加水分解安定性につい
て比較した。結果を表２に示す。試験方法は次の通りで
ある。 加水分解安定性試験 試料０．１ｇを５０ｍＬスクリュー管に採取し、１００
ｍＬのｐＨ７に調整した５０ｍＭリン酸緩衝液で溶解す
る。溶解後、２３℃で２４時間、４８時間、７２時間後
にそれぞれ４ｍＬとり、１％リン酸水溶液を数滴加えた
後、凍結乾燥を行った。これをクロロホルムに溶解し不
溶物を濾別し、エバポレーターで濃縮して得られたもの
について1Ｈ−ＮＭＲを測定してマレイミド基導入率を
算出した。初期マレイミド基導入率に対する変化率を表
２に示す。
【００５０】
【表２】
【００５１】これらの測定結果から得られた５０％減衰
時間（半減期）は実施例１が６７時間、比較例３が４６
時間であり、２５％減衰時間については、それぞれ３３
時間、２３時間、７０％減衰時間については、それぞれ
９４時間、６４時間であった。また、実施例１および比
較例３のポリオキシアルキレン誘導体により修飾したリ
ゾチームの安定性について比較した。結果を表３に示
す。試験方法は次の通りである。 リゾチームのチオール化 ニワトリ卵白リゾチームをｐＨ７．４のリン酸緩衝液に
溶解して０．５ｍＭとし、４℃に冷却しながらリゾチー
ムに対し２．５倍モル量の２−イミノチオラン塩酸塩
（Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．）を加え
て一晩攪拌し、リジン残基の側鎖アミノ基をチオール化
した。これに２倍モル過剰の実施例１および比較例３で
得られたポリオキシアルキレン末端マレイミド誘導体を
加え、冷却しながら３時間反応させた。無機塩を除去
後、凍結乾燥してポリオキシアルキレン誘導体により修
飾したリゾチームを得た。
【００５２】修飾リゾチームの安定性試験 修飾リゾチーム０．１ｇをｐＨ７．０の１０ｍＭリン酸
緩衝液（４−ヒドロキシ安息香酸メチル０．１％）２０
ｍＬに溶解し、４０℃で所定時間保持して修飾リゾチー
ムの活性を測定した。修飾リゾチームの活性測定法は以
下の通りである。マイクロコッカス・リソデイクチクス
（ＭＬｙｓｏｄｅｉｋｔｉｃｓ）の乾燥菌体を適量と
り、７５ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ６．２）を加えて
振り混ぜ、７５ｍＭリン酸ナトリウムを対照として波長
６４０ｎｍの吸光度が１．００になるように調整し、基
質溶液とした。また、リゾチーム量が５〜１５μｇ／ｇ
になるように精製水で調整し、試料溶液とした。３７℃
に保った基質溶液３．０ｍＬに対し試料溶液を０．１ｍ
Ｌ加え、攪拌した後、７５ｍＭリン酸ナトリウムを対照
として波長６４０ｎｍの吸光度を測定した。
【００５３】
【表３】
【００５４】上記の結果から、ポリオキシアルキレン鎖
とマレイミド基の間に炭素数２のアルキル基をもつ比較
例３のポリオキシアルキレン誘導体は、実施例と比較し
て化合物単体での安定性、酵素修飾を行った後の酵素の
活性も著しく劣ることがわかる。

Claims (9)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】式（１）で示されるポリオキシアルキレン
    誘導体。 【化１】 （式中、Ｚは２〜８個の水酸基をもつ化合物の残基であ
    り、ＡＯは炭素数２〜１８のオキシアルキレン基、ｎは
    ０〜２０００、ｍは０〜２０００、１≦ｎ＋ｍ、２≦ａ
    ＋ｂ≦８、１≦ｂであり、Ｒは炭素数１〜３０の炭化水
    素基、Ｘは炭素数３〜１０の２価の炭化水素基を示
    す。）
  2. 【請求項２】ＧＰＣ純度が９０％以上およびマレイミド
    基導入率が９０％以上である請求項１記載のポリオキシ
    アルキレン誘導体。
  3. 【請求項３】ｐＨ７、２３℃での加水分解安定性試験に
    おいて、マレイミド基導入率の半減期（５０％減衰時
    間）が４８時間以上である請求項１または請求項２記載
    のポリオキシアルキレン誘導体。
  4. 【請求項４】式（１）において、Ｚが３〜８個の水酸基
    をもつ化合物の残基であり、３≦ａ＋ｂ≦８、１≦ｂで
    ある請求項１、請求項２または請求項３記載のポリオキ
    シアルキレン誘導体。
  5. 【請求項５】生体関連物質の修飾に用いることを特徴と
    する請求項１、請求項２、請求項３または請求項４記載
    のポリオキシアルキレン誘導体。
  6. 【請求項６】式（１）において、Ｘが炭素数３の２価の
    炭化水素基である請求項１、請求項２、請求項３、請求
    項４または請求項５記載のポリオキシアルキレン誘導
    体。
  7. 【請求項７】式（３）で示される末端アミノ基含有ポリ
    オキシアルキレン誘導体 【化２】 （式中、Ｚは２〜８個の水酸基をもつ化合物の残基であ
    り、ＡＯは炭素数２〜１８のオキシアルキレン基、ｎは
    ０〜２０００、ｍは０〜２０００、１≦ｎ＋ｍ、２≦ａ
    ＋ｂ≦８、１≦ｂであり、Ｒは炭素数１〜３０の炭化水
    素基、Ｘは炭素数３〜１０の２価の炭化水素基を示
    す。）と無水マレイン酸を反応させて式（４）で示され
    るポリオキシアルキレン末端マレアミド酸 【化３】 （記号は前記と同じである。）を得た後、式（４）で示
    される化合物を式（４）で示される化合物に対し５０〜
    ５００容量／重量％の有機溶媒で溶解し、ついで式
    （４）で示される化合物に対し３００〜５０００容量／
    重量％の酢酸エチルとｎ−ヘキサンの混合物を用いて晶
    析を行った後にマレイミド化反応を行う、式（１）で示
    されるポリオキシアルキレン誘導体の製造方法。 【化４】 （記号は前記と同じである。）
  8. 【請求項８】式（２）で示される末端水酸基含有ポリオ
    キシアルキレン誘導体 【化５】 （式中、Ｚは２〜８個の水酸基をもつ化合物の残基であ
    り、ＡＯは炭素数２〜１８のオキシアルキレン基、ｎは
    ０〜２０００、ｍは０〜２０００、１≦ｎ＋ｍ、２≦ａ
    ＋ｂ≦８、１≦ｂであり、Ｒは炭素数１〜３０の炭化水
    素基を示す。）をシアノ化し、水素化により末端をアミ
    ノ化した式（３）で示される末端アミノ基ポリオキシア
    ルキレン誘導体 【化６】 （Ｘは炭素数３〜１０の２価の炭化水素基を示し、他の
    記号は前記と同じである。）と無水マレイン酸を反応さ
    せて式（４）で示されるポリオキシアルキレン末端マレ
    アミド酸 【化７】 （記号は前記と同じである。）を得た後、式（４）で示
    される化合物を式（４）で示される化合物に対し５０〜
    ５００容量／重量％の有機溶媒で溶解し、ついで式
    （４）で示される化合物に対し３００〜５０００容量／
    重量％の酢酸エチルとｎ−ヘキサンの混合物を用いて晶
    析を行った後にマレイミド化反応を行う、式（１）で示
    されるポリオキシアルキレン誘導体の製造方法。 【化８】 （記号は前記と同じである。）
  9. 【請求項９】無水マレイン酸の含有量が０．５重量％以
    下である式（４）で示されるポリオキシアルキレン末端
    マレアミド酸を用いる請求項７または請求項８記載のポ
    リオキシアルキレン誘導体の製造方法。
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Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004046222A1 (ja) * 2002-11-20 2004-06-03 Nof Corporation 修飾された生体関連物質、その製造方法および中間体
WO2006088245A1 (ja) * 2005-02-18 2006-08-24 The University Of Tokushima ポリオキシアルキレン鎖含有脂質誘導体及び該誘導体を含有する脂質膜構造体
JP2008231343A (ja) * 2007-03-23 2008-10-02 Kumamoto Univ ワクチン剤
JP2009503150A (ja) * 2005-07-19 2009-01-29 ネクター セラピューティックス エイエル，コーポレイション 重合体マレイミド類を調製する方法
WO2010114074A1 (ja) * 2009-03-31 2010-10-07 日油株式会社 多分岐鎖ポリオキシアルキレン化合物、およびその製造方法
JP2010533764A (ja) * 2007-07-18 2010-10-28 アイディー バイオケム インコーポレイテッド 高純度のメトキシポリエチレングリコールエチルマレイミドの製造方法
US8003117B2 (en) 2002-11-20 2011-08-23 Nof Corporation Polyalkylene glycol derivative and modified bio-related substance
WO2011125786A1 (ja) * 2010-03-31 2011-10-13 日油株式会社 多官能性ポリオキシアルキレン化合物、その製造方法及び中間体
JP2014132077A (ja) * 2009-03-31 2014-07-17 Nof Corp 高分子量ポリエチレングリコール化合物の精製方法
US8828373B2 (en) 2002-11-20 2014-09-09 Nof Corporation Polyalkylene glycol derivative and modified bio-related substance
WO2019176875A1 (ja) * 2018-03-13 2019-09-19 日油株式会社 主鎖および側鎖に単分散ポリエチレングリコールを有するヘテロ二官能性化合物
CN110475800A (zh) * 2017-03-30 2019-11-19 日油株式会社 具有一个羧基的聚乙二醇的纯化方法

Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7543018B2 (en) * 1996-04-11 2009-06-02 Aol Llc, A Delaware Limited Liability Company Caching signatures
JP4490290B2 (ja) * 2002-12-31 2010-06-23 ネクター セラピューティクス アラバマ，コーポレイション 加水分解安定性マレイミド末端ポリマー
US7432331B2 (en) * 2002-12-31 2008-10-07 Nektar Therapeutics Al, Corporation Hydrolytically stable maleimide-terminated polymers
US7329721B2 (en) * 2002-12-31 2008-02-12 Nektar Therapeutics Al, Corporation Maleamic acid polymer derivatives and their bioconjugates
US7482376B2 (en) 2003-07-03 2009-01-27 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Conjugated complement cascade inhibitors
SI1656410T1 (sl) 2003-07-22 2010-07-30 Nektar Therapeutics Postopek za pripravo funkcionaliziranih polimerov iz polimer alkoholov
AU2004297228A1 (en) 2003-12-03 2005-06-23 Nektar Therapeutics Al, Corporation Method of preparing maleimide functionalized polymers
US8012488B2 (en) * 2005-02-18 2011-09-06 Nof Corporation Polyoxyalkylene derivative
EP2412744B1 (en) 2005-07-18 2014-01-22 Nektar Therapeutics Method for preparing branched functionalised polymers using branched polyol cores
US7462627B2 (en) * 2006-02-09 2008-12-09 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Multi-arm polymeric conjugates of 7-ethyl-10-hydroxycamptothecin for treatment of breast, colorectal, pancreatic, ovarian and lung cancers
US7671067B2 (en) * 2006-02-09 2010-03-02 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Treatment of non-hodgkin's lymphomas with multi-arm polymeric conjugates of 7-ethyl-10-hydroxycamtothecin
EP2319542B1 (en) 2006-02-21 2018-03-21 Nektar Therapeutics Segmented degradable polymers and conjugates made therefrom
WO2007100829A2 (en) * 2006-02-28 2007-09-07 Dow Global Technologies Inc. Method for making polyethylene glycol carbonates
MX2008016314A (es) * 2006-06-30 2009-02-25 Toray Industries Composicion de resina termoplastica y articulo moldeado de la misma.
KR20090108082A (ko) * 2007-02-09 2009-10-14 엔존 파마슈티컬즈, 인코포레이티드 7-에틸-10-하이드록시캄토테신 다분지형 고분자 접합체를 이용한 내성 또는 불응성 암의 치료방법
US20100215092A1 (en) * 2007-10-05 2010-08-26 Telefonaktiebolaget Lm Ericsson (Publ) Method and Apparatus for Multiple Description Coding
CA2701612A1 (en) * 2007-10-05 2009-04-09 Takeda Pharmaceutical Company Limited Neuromedin u derivative
KR101001734B1 (ko) 2008-06-05 2010-12-15 아이디비켐(주) 고순도의 메톡시폴리에틸렌글리콜에틸말레이마이드의분석방법
WO2010025337A1 (en) * 2008-08-29 2010-03-04 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Method of treating ras associated cancer
BRPI0919842A8 (pt) * 2008-10-21 2015-09-22 Enzon Pharmaceuticals Inc tratamento de neuroblastioma com conjugados poliméricos de múltiplos braços de 7-etil-10-hidroxicamptotecina
CN102844054B (zh) 2009-12-15 2016-04-20 因赛普特有限责任公司 植入物和能生物降解的基准标记物
CA2788275A1 (en) 2010-03-03 2011-09-09 Boehringer Ingelheim International Gmbh Biparatopic abeta binding polypeptides
JP2013528374A (ja) 2010-05-10 2013-07-11 パーシード セラピューティクス リミテッド ライアビリティ カンパニー Ｖｌａ４のポリペプチド阻害剤
JP5825507B2 (ja) * 2010-06-25 2015-12-02 日油株式会社 分岐型ヘテロポリエチレングリコール
US10040761B2 (en) 2010-06-25 2018-08-07 Nof Corporation Branched hetero polyethylene glycol and intermediate
GEP201706773B (en) 2012-02-27 2017-11-27 Boehringer Ingelheim Int Cx3cr1-binding polypeptides
CN109843972B (zh) * 2016-10-07 2021-08-13 国立大学法人东京工业大学 分支型异单分散聚乙二醇及其制造方法和其缀合物

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0273545A1 (en) 1987-01-02 1988-07-06 Texaco Development Corporation Novel reaction product and ORI-inhibited motor fuel composition
EP0318162A3 (en) * 1987-11-25 1990-11-07 Texaco Development Corporation Novel bismaleimide derivatives
DK0575545T3 (da) * 1991-03-15 2003-09-15 Amgen Inc Pegylering af polypeptider
JP3562000B2 (ja) * 1994-12-14 2004-09-08 日本油脂株式会社 ポリオキシアルキレンモノアミンの製造方法
US5585484A (en) * 1995-04-19 1996-12-17 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University, A Division Of Yeshiva University Hemoglobin crosslinkers
JP3092531B2 (ja) 1996-11-05 2000-09-25 日本油脂株式会社 コハク酸イミジル基置換ポリオキシアルキレン誘導体の製造方法
WO1999003887A1 (en) 1997-07-14 1999-01-28 Bolder Biotechnology, Inc. Derivatives of growth hormone and related proteins
JP2000191700A (ja) 1998-12-28 2000-07-11 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd 持続型消化管運動ペプチド
AU2001238595A1 (en) * 2000-02-22 2001-09-03 Shearwater Corporation N-maleimidyl polymer derivatives

Cited By (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8003117B2 (en) 2002-11-20 2011-08-23 Nof Corporation Polyalkylene glycol derivative and modified bio-related substance
WO2004046222A1 (ja) * 2002-11-20 2004-06-03 Nof Corporation 修飾された生体関連物質、その製造方法および中間体
US8828373B2 (en) 2002-11-20 2014-09-09 Nof Corporation Polyalkylene glycol derivative and modified bio-related substance
US8034981B2 (en) 2002-11-20 2011-10-11 Nof Corporation Modified bio-related substance, process for producing the same, and intermediate
US7524875B2 (en) 2002-11-20 2009-04-28 Nof Corporation Modified bio-related substance, process for producing the same, and intermediate
US7851491B2 (en) 2002-11-20 2010-12-14 Nof Corporation Modified bio-related substance, process for producing the same, and intermediate
WO2006088245A1 (ja) * 2005-02-18 2006-08-24 The University Of Tokushima ポリオキシアルキレン鎖含有脂質誘導体及び該誘導体を含有する脂質膜構造体
JPWO2006088245A1 (ja) * 2005-02-18 2008-07-10 国立大学法人徳島大学 ポリオキシアルキレン鎖含有脂質誘導体及び該誘導体を含有する脂質膜構造体
JP2009503150A (ja) * 2005-07-19 2009-01-29 ネクター セラピューティックス エイエル，コーポレイション 重合体マレイミド類を調製する方法
JP2008231343A (ja) * 2007-03-23 2008-10-02 Kumamoto Univ ワクチン剤
JP2010533764A (ja) * 2007-07-18 2010-10-28 アイディー バイオケム インコーポレイテッド 高純度のメトキシポリエチレングリコールエチルマレイミドの製造方法
WO2010114074A1 (ja) * 2009-03-31 2010-10-07 日油株式会社 多分岐鎖ポリオキシアルキレン化合物、およびその製造方法
JP2010254986A (ja) * 2009-03-31 2010-11-11 Nof Corp 多分岐鎖ポリオキシアルキレン化合物、その製造方法および中間体
US8716435B2 (en) 2009-03-31 2014-05-06 Nof Corporation Multibranched polyoxyalkylene compound and producing method thereof
JP2014132077A (ja) * 2009-03-31 2014-07-17 Nof Corp 高分子量ポリエチレングリコール化合物の精製方法
JP2011225860A (ja) * 2010-03-31 2011-11-10 Nof Corp 多官能性ポリオキシアルキレン化合物、その製造方法及び中間体
US8816099B2 (en) 2010-03-31 2014-08-26 Nof Corporation Polyfunctional polyoxyalkylene compound, and producing method and intermediate thereof
WO2011125786A1 (ja) * 2010-03-31 2011-10-13 日油株式会社 多官能性ポリオキシアルキレン化合物、その製造方法及び中間体
CN110475800A (zh) * 2017-03-30 2019-11-19 日油株式会社 具有一个羧基的聚乙二醇的纯化方法
CN110475800B (zh) * 2017-03-30 2021-08-31 日油株式会社 具有一个羧基的聚乙二醇的纯化方法
WO2019176875A1 (ja) * 2018-03-13 2019-09-19 日油株式会社 主鎖および側鎖に単分散ポリエチレングリコールを有するヘテロ二官能性化合物

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