JP2003026585A - リパーゼ阻害剤 - Google Patents
リパーゼ阻害剤Info
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Abstract
れたリパーゼ阻害作用を有する物質を見出し、それを有
効成分とした新規なリパーゼ阻害剤を提供する 【解決手段】 リパーゼ阻害剤の有効成分として、アル
ファルファ抽出物、苦丁茶抽出物、金銀花抽出物、ペパ
ーミント抽出物、チョウジ抽出物、セイヨウキズタ抽出
物、オリーブ抽出物およびラフマ茶抽出物からなる群よ
り選択される1種または2種以上の抽出物を含有せしめ
る。
Description
害剤に関する。更に詳述すると、リパーゼ阻害作用を通
じて、飲食物、化粧品、日用雑貨など生活環境に存在す
る油脂類が原因となって生じる悪臭の発生抑制、化粧品
および日用雑貨など肌に直接接触するものに存在する油
脂類が原因となって生じる肌荒れの抑制、飲食物に存在
する油脂類が原因となって生じる肥満の抑制などに有用
なリパーゼ阻害剤に関する。
に存在する微生物などが産生するリパーゼにより加水分
解されて、グリセロールと脂肪酸を生成する。生じた脂
肪酸は酸化され、アルデヒド類等を生成し、悪臭や変敗
の原因となるため飲食品の品質を保持していく上で大き
な問題となっている。
生物が産生するリパーゼまたは表皮角化細胞のリパーゼ
の作用により皮脂類から脂肪酸が生成され、生じた脂肪
酸が好中球を活性化し、活性化された好中球が活性酸素
を放出し、これがニキビや皮膚炎の原因となる。
飲食された飲食品中の油脂類を分解することにより、消
化吸収を促進している。したがって、リパーゼの作用を
阻害することにより肥満症、過脂肪血症、アテローム性
動脈硬化症および動脈硬化症を治療・予防することが可
能となると考えられる。
して悪影響を及ぼすリパーゼの活性を阻害するリパーゼ
阻害剤としては、例えば、レモングラス、オールスパイ
ス、シナモン、クローブ、阿仙薬、グァバ、メドウスィ
ート、コラ・デ・カバロ、ビワ、ドッカツ、リョウキョ
ウ、ビンロウシ、ヨウバイヒ、サンペンズ、ケツメイシ
などの植物からの抽出物を利用したリパーゼ阻害剤が提
案されているが(特開2001−120237、特開2
000−103741、特開平11−228338、特
開平10−265364、特開平5−255100)、
有効性および安全性の点で満足できるものは未だ開発さ
れていないのが現状である。
全性の確認されている天然物の中から、優れたリパーゼ
阻害作用を有する物質を見出し、それを有効成分とした
新規なリパーゼ阻害剤を提供することを目的とする。
に、本発明により提供されるリパーゼ阻害剤は、アルフ
ァルファ抽出物、苦丁茶抽出物、金銀花抽出物、ペパー
ミント抽出物、チョウジ抽出物、セイヨウキズタ抽出
物、オリーブ抽出物およびラフマ茶抽出物からなる群よ
り選択される1種または2種以上の抽出物を有効成分と
して含有することを特徴とする。
アルファルファ抽出物が、アルファルファの茎部および
/または葉部を極性溶媒により抽出して得られる抽出物
であり、前記苦丁茶抽出物が、苦丁茶の葉部を極性溶媒
により抽出して得られる抽出物であり、前記金銀花抽出
物が、金銀花の花部、葉部または茎部を極性溶媒により
抽出して得られる抽出物であり、前記ペパーミント抽出
物が、ペパーミントの地上部を極性溶媒により抽出して
得られる抽出物であり、前記チョウジ抽出物が、チョウ
ジの蕾部を極性溶媒により抽出して得られる抽出物であ
り、前記セイヨウキズタ抽出物が、セイヨウキズタの茎
部および/または葉部を極性溶媒により抽出して得られ
る抽出物であり、前記オリーブ抽出物が、オリーブの葉
部を極性溶媒により抽出して得られる抽出物であり、前
記ラフマ茶抽出物が、ラフマ茶の葉部を極性溶媒により
抽出して得られる抽出物であることが好ましい。
ァ抽出物」、「苦丁茶抽出物」、「金銀花抽出物」、
「ペパーミント抽出物」、「チョウジ抽出物」、「セイ
ヨウキズタ抽出物」、「オリーブ抽出物」、「ラフマ茶
抽出物」には、アルファルファ、苦丁茶、金銀花、ペパ
ーミント、チョウジ、セイヨウキズタ、オリーブまたは
ラフマ茶の各植物(以下、単に「各植物」という場合が
ある。)を抽出原料として得られる抽出液、該抽出液の
希釈液もしくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾
燥物、またはこれらの粗精製物もしくは精製物のいずれ
もが含まれる。
(学名:Medicago sativa)は、別名ムラサキウマゴヤ
シ(ヨーロッパではルーサン(Lucerne))とも呼ば
れ、マメ科に属する多年生植物である。芽生えたばかり
のものはアルファルファもやしと呼ばれ、食用されてい
る。アルファルファは世界各地で飼料として用いられて
いる他、中国では内臓を強め、膀胱結石を取り除く民間
薬として利用されている。アルファルファは、世界各地
で栽培されており、これらの地域から容易に入手可能で
ある。抽出原料としては、アルファルファの茎部、葉部
などを使用することができる。
ex latifolia)は、別名タラヨウとも呼ばれ、モチノキ
科に属する常緑高木植物である。苦丁茶はお茶として飲
用されている他、頭痛、眼充血、耳鳴りなどの民間薬と
して利用されている。苦丁茶は、日本および中国の暖帯
に自生しており、これらの地域から容易に入手可能であ
る。抽出原料としては、苦丁茶の葉部、枝部、幹部、樹
皮部などを使用することができるが、葉部を使用するこ
とが好ましい。
nicera japonica または Loniceralanceolata)は、別
名スイカズラとも呼ばれ、スイカズラ科に属するつる性
の常緑低木植物である。金銀花は、お茶として飲用され
ている他、感冒、各種炎症などの民間薬として利用され
ている。金銀花は、日本および中国の暖帯に自生してお
り、これらの地域から容易に入手可能である。抽出原料
としては、金銀花の花部、葉部、茎部などを使用するこ
とができるが、花部を使用することが好ましい。
名:Mentha piperita)は、別名セイヨウハッカとも呼
ばれ、シソ科に属する多年生草本植物である。ペパーミ
ントは生のまま食用に用いたり、お茶として飲用された
りしている他、そのエキスが飲料、カクテル、ガムなど
に利用されている。ペパーミントは、ヨーロッパ、アメ
リカなどの世界各地で栽培されており、これらの地域か
ら容易に入手可能である。抽出原料としては、ペパーミ
ントの地上部などを使用することができる。
Syzygium aromaticum)は、別名クローブとも呼ばれ、
フトモモ科に属する常緑高木植物である。チョウジは、
スパイスとして多量に利用されている他、歯科用抗菌
剤、健胃剤などの薬用にも利用されている。チョウジ
は、アジアからアフリカにわたる熱帯で栽培されてお
り、インドネシアや東アフリカなどの地域から容易に入
手可能である。抽出原料としては、チョウジの蕾部など
を使用することができる。
(学名:Hedera helix)は、別名アイビーとも呼ばれ、
ウコギ科に属する常緑のつる性植物である。セイヨウキ
ズタは、中国では関節炎などの民間薬として利用されて
いる。セイヨウキズタは、ヨーロッパ、アフリカ、アジ
アなどに自生しており、これらの地域から容易に入手可
能である。抽出原料としては、セイヨウキズタの茎部、
葉部などを使用することができる。
Olea europaea)は、モクセイ科に属する常緑高木植物
である。果実から採取されたオリーブ油は、食用、薬
用、化粧品用として利用されている。オリーブは、地中
海沿岸や、中国などをはじめとしたアジアで栽培されて
おり、これらの地域から容易に入手可能である。抽出原
料としては、オリーブの葉部、枝部、樹皮部などを使用
することができるが、葉部を使用することが好ましい。
Apocynum venetum)は、キョウチクトウ科に属する多年
生草本植物である。ラフマ茶は、お茶として飲用されて
いる他、感冒の予防、高血圧症、不眠症などの民間薬と
して利用されている。ラフマ茶は、ヨーロッパや、中国
をはじめとしたアジアに自生しており、これらの地域か
ら容易に入手可能である。抽出原料としては、ラフマ茶
の葉部、全草などを使用することができる。
燥した後、そのまま又は粉砕機により粉砕して使用する
ことができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用
される乾燥機を用いて行ってもよい。抽出原料とする各
植物は、ヘキサン、ベンゼン等の非極性溶媒によって脱
脂等の前処理を施してから使用してもよい。脱脂等の前
処理を行なうことにより、各植物の極性溶媒による抽出
処理を効率よく行なうことができる。
媒を使用するのが好ましい。アルファルファ、苦丁茶、
金銀花、ペパーミント、チョウジ、セイヨウキズタ、オ
リーブまたはラフマ茶に含まれるリパーゼ阻害作用を示
す成分は、極性溶媒を抽出溶媒とする抽出処理によって
容易に抽出することができる。
水性有機溶媒などを例示することができ、これらを単独
で又は2種類以上を組み合わせて室温〜溶媒の沸点程度
の温度で使用することができる。
水には、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉
水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したもの
が含まれる。水に施す処理としては、例えば、加熱、殺
菌、滅菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等
が含まれる。従って、本発明において抽出溶媒として使
用し得る水には、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リ
ン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プ
ロピレンアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素
数1〜5の低級アルコール;アセトン、メチルエチルケ
トン等の低級脂肪族ケトン;1,3−ブチレングリコー
ル、プロピレングリコール、イソプロピレングリコー
ル、グリセリン等の炭素数2〜5の多価アルコール等を
例示することができる。
して使用する場合、その混合比は適宜調整することがで
きる。例えば、水と親水性有機溶媒との混合液を使用す
る場合には、親水性有機溶媒が低級アルコールであれば
水10重量部に対して1〜90重量部、親水性有機溶媒
が低級脂肪族ケトンであれば水10重量部に対して1〜
40重量部、親水性有機溶媒が多価アルコールであれば
水10重量部に対して10〜90重量部混合することが
好ましい。
を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定されず、常法に
従って行なうことができる。抽出処理の際には、特殊な
抽出方法を採用する必要はなく、室温ないし還流加熱下
において任意の装置を使用することができる。
原料を投入し、ときどき攪拌しながら可溶性成分を溶出
させる。この際、抽出条件は抽出原料等に応じて適宜調
整し得る。例えば、抽出溶媒として水を用いる場合に
は、抽出溶媒量は抽出原料の通常1〜1000倍量程度
(重量比)、抽出時間は通常30分〜2時間程度、抽出
温度は通常40〜90℃程度とする。また、抽出溶媒と
して水とエタノールとの混合液を用いる場合には、抽出
溶媒量は抽出原料の通常1〜100倍量程度(重量
比)、抽出時間は通常30分〜2時間程度、抽出温度は
通常40〜80℃程度とする。
後、ろ過して抽出残渣を除くことによって、抽出液を得
ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液
若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精
製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、
濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。
を目的として精製する場合、その精製方法は特に限定さ
れず、精製方法としては、例えば、活性炭処理、樹脂吸
着処理、イオン交換樹脂、液−液向流分配等の方法が挙
げられる。
しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱
色、脱臭等を目的とする精製を行なうことも可能である
が、化粧料や食品に添加する場合には大量に使用するも
のではないから、未精製のままでも実用上支障はない。
害剤として使用することができるが、常法に従って製剤
化して使用することもできる。製剤化する場合、保存や
取扱いを容易にするために、デキストリン、シクロデキ
ストリン等の薬学的に許容され得るキャリアーその他任
意の助剤を添加することができる。製剤化により粉末
状、顆粒状、錠剤状等、任意の剤形とすることができ
る。製剤化の際には、必要に応じてリパーゼ阻害作用を
有する他の物質を添加してもよい。
のいずれか1種を有効成分として含有させてもよいし、
2種以上を有効成分として含有させてもよい。2種以上
を有効成分として含有させる場合、その含有比は特に限
定されるものではなく、各抽出物の生理活性の強さなど
に応じて適宜調整することができる。
を効率よく阻害することができる。したがって、本発明
のリパーゼ阻害剤によれば、リパーゼ阻害作用を通じ
て、飲食品や化粧品などに含有される油脂類の分解を防
止し、飲食品や化粧品の悪臭や変敗を抑制することがで
きる他、リパーゼ阻害作用を通じたニキビ、皮膚炎など
の予防・治療、リパーゼ阻害作用を通じた肥満症、過脂
肪血症、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症などの予
防・治療が可能となる。
風味や使用感に対する悪影響が少ないので、広範な添加
対象物に対して使用することができる。本発明のリパー
ゼ阻害剤の添加対象物は特に限定されず、その具体例と
しては、飲食品、化粧品、口腔用剤などが挙げられる。
添加対象となる飲食品の具体例としては、清涼飲料、炭
酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料(これ
ら飲料の濃縮液および調製用粉末を含む);アイスクリ
ーム、アイスシャーベット、かき氷等の氷菓;そば、う
どん、はるさめ、ぎょうざの皮、シュウマイの皮、中華
麺、即席麺等の麺類;飴、キャンディー、ガム、チョコ
レート、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、
クリーム、焼き菓子等の菓子類;かまぼこ、ハム、ソー
セージ等の水産・畜産加工食品;加工乳、発酵乳等の乳
製品;サラダ油、天ぷら油、マーガリン、マヨネーズ、
ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の
油脂および油脂加工食品;ソース、たれ等の調味料;錠
剤状、顆粒状等の種々の形態の健康・栄養補助食品類;
その他スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物等が挙げ
られ、添加対象となる化粧料としては、軟膏、クリー
ム、乳液、ローション、パック等の皮膚化粧料が挙げら
れる。
量は、飲食品や化粧品の種類や抽出物の生理活性等によ
って適宜調整することができるが、好適な配合率は、未
精製の標準的な抽出物の乾燥物に換算して、飲食品の場
合には通常約0.01〜10重量%であり、化粧品の場
合には通常約0.001〜5重量%である。
するが、本発明は下記の実施例に限定されるものではな
い。
00g)に50重量%エタノール(1000ml)を加
え、還流冷却器を用いて、80℃にて2時間抽出を行っ
た後、濾紙にて濾過し、抽出液を得た。得られた抽出液
を減圧下に濃縮、乾燥を行い、アルファルファ抽出物2
0.8g(粉末)を得た(収率20.8%)。
水(1000ml)を加え、還流冷却器を用いて、90
℃にて2時間抽出を行った後、濾紙にて濾過し、抽出液
を得た。得られた抽出液を減圧下に濃縮、乾燥を行い、
苦丁茶抽出物30.1g(粉末)を得た(収率30.1
%)。
a)の花部(100g)に50重量%エタノール(10
00ml)を加え、還流冷却器を用いて、80℃にて2
時間抽出を行った後、濾紙にて濾過し、抽出液を得た。
得られた抽出液を減圧下に濃縮、乾燥を行い、金銀花抽
出物35.2g(粉末)を得た(収率35.2%)。
ita)の地上部(100g)に70重量%アセトン(1
000ml)を加え、還流冷却器を用いて、80℃にて
2時間抽出を行った後、濾紙にて濾過し、抽出液を得
た。得られた抽出液を減圧下に濃縮、乾燥を行い、ペパ
ーミント抽出物15.3g(粉末)を得た(収率15.
3%)。
cum)の蕾部(100g)にエタノール(1000m
l)を加え、還流冷却器を用いて、80℃にて2時間抽
出を行った後、濾紙にて濾過し、抽出液を得た。得られ
た抽出液を減圧下に濃縮、乾燥を行い、チョウジ抽出物
12.1g(粉末)を得た(収率12.1%)。
ix)の茎葉部(100g)に50重量%エタノール(1
000ml)を加え、還流冷却器を用いて、80℃にて
2時間抽出を行った後、濾紙にて濾過し、抽出液を得
た。得られた抽出液を減圧下に濃縮、乾燥を行い、セイ
ヨウキズタ抽出物25.7g(粉末)を得た(収率2
5.7%)。
に70重量%アセトン(1000ml)を加え、還流冷
却器を用いて、80℃にて2時間抽出を行った後、濾紙
にて濾過し、抽出液を得た。得られた抽出液を減圧下に
濃縮、乾燥を行い、オリーブ抽出物33.2g(粉末)
を得た(収率33.2%)。
に水(1000ml)を加え、還流冷却器を用いて、8
0℃にて2時間抽出を行った後、濾紙にて濾過し、抽出
液を得た。得られた抽出液を減圧下に濃縮、乾燥を行
い、ラフマ茶抽出物29.8g(粉末)を得た(収率2
9.8%)。
ァ抽出物(実施例1)、製造例2の苦丁茶抽出物(実施
例2)、製造例3の金銀花抽出物(実施例3)、製造例
4のペパーミント抽出物(実施例4)、製造例5のチョ
ウジ抽出物(実施例5)、製造例6のセイヨウキズタ抽
出物(実施例6)、製造例7のオリーブ抽出物(実施例
7)、製造例8のラフマ茶抽出物(実施例8)を50重
量%エタノールで溶解および希釈することによって、そ
れぞれ試料濃度62.5μg/ml〜10.0mg/m
lの試料溶液を調整した。得られた各試料溶液50μ
l、リパーゼ(Candida cylindracea起源、Biocatalyst
s社;15.4U/mL)50μl、0.1Mトリス塩酸緩衝液
(pH8.5)に溶解した5,5’-dithiobis(2-nitro-benzoi
c acid)(DTNB,0.1mg/mL)340μlおよびエタノー
ルに溶解したphenylmethylsulfonyl fluoride(PMSF,
3.5mg/mL)10μlをよく混合し、30℃で5分間静置
した。この酵素反応液に、エタノールに溶解した2,3-di
mercapto-1-propanol tributylate(BALB,0.3mg/mL)
およびsodium dodecylsulfate(SDS,0.26mg/mL)をそ
れぞれ25μlずつ加えた後、30℃で30分間反応さ
せた。アセトン500μlを加えて酵素反応を停止させ
た後、BALBが加水分解された量に比例する波長41
4nmの吸光度を測定した。また、コントロールとし
て、試料溶液の代わりに50重量%エタノールを加えた
場合について、同様の操作と吸光度測定を行った。測定
結果から、下記の計算式によりリパーゼ活性阻害率を算
出した。
0)/(A3−A2)]×100
した場合の吸光度(酵素反応開始前)、「A1」は試料
溶液を添加した場合の吸光度(酵素反応開始後)、「A
2」はコントロールの吸光度(酵素反応開始前)、「A
3」はコントロールの吸光度(酵素反応開始後)を表
す。
μg/mlに段階的に変化させて上記リパーゼ活性阻害
率の測定を行い、阻害率が50%になる試料溶液の試料
濃度(IC50)(μg/mL)を求めたところ、実施
例1〜8におけるIC50は、それぞれ190、17
0、280、170、210、340、230、150
(μg/mL)であった。
丁茶抽出物、金銀花抽出物、ペパーミント抽出物、チョ
ウジ抽出物、セイヨウキズタ抽出物、オリーブ抽出物お
よびラフマ茶抽出物がリパーゼ阻害作用を有することが
確認された。また、各抽出物のリパーゼ阻害作用の強さ
は、抽出物の濃度によって調節できることが確認され
た。
供される。本発明のリパーゼ阻害剤によれば、リパーゼ
阻害作用を通じて、飲食品や化粧品などに含有される油
脂類の分解を防止し、飲食品や化粧品の悪臭や変敗を抑
制することができる他、リパーゼ阻害作用を通じたニキ
ビ、皮膚炎などの予防・治療、リパーゼ阻害作用を通じ
た肥満症、過脂肪血症、アテローム性動脈硬化症、動脈
硬化症などの予防・治療が可能となる。また、本発明の
リパーゼ阻害剤は、添加対象物となる飲食品や化粧料な
どの風味や使用感に対する悪影響が少ないので、広範な
添加対象物に対して使用することができる。さらに、有
効成分の抽出原料となる各植物体は自然界に大量に存在
しており、安定供給が可能であるので、本発明のリパー
ゼ阻害剤は安価に製造することができる。
Claims (2)
- 【請求項1】 アルファルファ抽出物、苦丁茶抽出物、
金銀花抽出物、ペパーミント抽出物、チョウジ抽出物、
セイヨウキズタ抽出物、オリーブ抽出物およびラフマ茶
抽出物からなる群より選択される1種または2種以上の
抽出物を有効成分として含有することを特徴とするリパ
ーゼ阻害剤。 - 【請求項2】 前記アルファルファ抽出物が、アルファ
ルファの茎部および/または葉部を極性溶媒により抽出
して得られる抽出物であり、前記苦丁茶抽出物が、苦丁
茶の葉部を極性溶媒により抽出して得られる抽出物であ
り、前記金銀花抽出物が、金銀花の花部、葉部または茎
部を極性溶媒により抽出して得られる抽出物であり、前
記ペパーミント抽出物が、ペパーミントの地上部を極性
溶媒により抽出して得られる抽出物であり、前記チョウ
ジ抽出物が、チョウジの蕾部を極性溶媒により抽出して
得られる抽出物であり、前記セイヨウキズタ抽出物が、
セイヨウキズタの茎部および/または葉部を極性溶媒に
より抽出して得られる抽出物であり、前記オリーブ抽出
物が、オリーブの葉部を極性溶媒により抽出して得られ
る抽出物であり、前記ラフマ茶抽出物が、ラフマ茶の葉
部を極性溶媒により抽出して得られる抽出物であること
を特徴とする請求項1記載のリパーゼ阻害剤。
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