JP2002535981A5 - - Google Patents
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Description
【特許請求の範囲】
【請求項1】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞を増加/維持する方法において、
(a)未分化の造血幹細胞または前駆細胞を得る工程、および
(b)上記未分化の造血幹細胞または前駆細胞を、生理学的に許容できる3次元の繊維ネットワークを形成している不織繊維マトリックスを含むシート状担体の上に3次元の間質細胞培養が予め樹立されている固定相栓流バイオリアクターの中に播いて、未分化の造血幹細胞または前駆細胞を増加/維持する工程を含む方法。
【請求項2】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞が、臍帯血、動員された末梢血、および骨髄からなるグループより選択された組織から単離された細胞である、請求項1に記載の方法。
【請求項3】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、共通のHLA抗原をもつ、請求項1に記載の方法。
【請求項4】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、単一個体に由来する、請求項1に記載の方法。
【請求項5】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、異なった個体に由来する、請求項1に記載の方法。
【請求項6】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、同一種に由来する、請求項1に記載の方法。
【請求項7】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、異種に由来する、請求項1に記載の方法。
【請求項8】 間質細胞培養の間質細胞が、担体1立方センチメートルあたり少なくとも5×106細胞という密度にまで増殖している、請求項1に記載の方法。
【請求項9】 間質細胞培養の間質細胞が、担体1立方センチメートルあたり少なくとも107細胞という密度にまで増殖している、請求項1に記載の方法。
【請求項10】 固定相栓流バイオリアクターの中に未分化の造血幹細胞または前駆細胞を播く工程が行われてから少なくとも10時間該バイオリアクターの中の流れが停止される、請求項1に記載の方法。
【請求項11】 繊維の孔が、全容量に対する割合にして40%から95%を構成し、孔の大きさが10ミクロンから100ミクロンである、請求項1に記載の方法。
【請求項12】 マトリックスが、直径または幅が0.5ミクロンから50ミクロンである、へん平繊維、非丸形繊維、中空繊維、およびそれらの混合繊維からなるグループより選択された繊維からできている、請求項1に記載の方法。
【請求項13】 マトリックスが、幅2ミクロンから20ミクロン、繊維の厚さに対する幅の割合が少なくとも2:1であるリボン状繊維から構成されている、請求項1に記載の方法。
【請求項14】 マトリックスが、全容量に対する割合が60%から95%の孔容量をもつ、請求項1に記載の方法。
【請求項15】 マトリックスの高さが50〜1000μmである、請求項1に記載の方法。
【請求項16】 マトリックスの材料が、ポリエステル、ポリアルキレン、ポリフルオロクロロエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリスルホン、酢酸セルロース、ガラスファイバー、および不活性金属繊維からなるグループより選択される、請求項1に記載の方法。
【請求項17】 マトリックスが、四角形、リング形、円盤形、および十字形からなるグループより選択される、請求項1に記載の方法。
【請求項18】 マトリックスが円盤の形をしている、請求項1に記載の方法。
【請求項19】 マトリックスがポリ−D−リジンで被覆されている、請求項1に記載の方法。
【請求項20】 さらに、未分化の造血幹細胞または前駆細胞を単離する工程を含む、請求項1に記載の方法。
【請求項21】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞を増加/維持する方法において、
(a)未分化の造血幹細胞または前駆細胞を得る工程、および
(b)上記未分化の造血幹細胞または前駆細胞を、生理学的に許容できる3次元の繊維ネットワークを形成している不織繊維マトリックスを含むシート状担体の上に3次元の間質細胞培養が予め樹立されている固定相栓流バイオリアクターから得られた間質細胞馴化培地を含む培地の中で培養して、未分化の造血幹細胞または前駆細胞を増加/維持する工程を含む方法。
【請求項22】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞が、臍帯血、動員された末梢血、および骨髄からなるグループより選択された組織から単離された細胞である、請求項21に記載の方法。
【請求項23】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、共通のHLA抗原をもつ、請求項21に記載の方法。
【請求項24】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、単一個体に由来する、請求項21に記載の方法。
【請求項25】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、異なった個体に由来する、請求項21に記載の方法。
【請求項26】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、同種に由来する、請求項21に記載の方法。
【請求項27】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、異種に由来する、請求項21に記載の方法。
【請求項28】 間質細胞培養の間質細胞が、担体1立方センチメートルあたり少なくとも5×106細胞という密度にまで増殖している、請求項21に記載の方法。
【請求項29】 間質細胞培養の間質細胞が、担体1立方センチメートルあたり少なくとも107細胞という密度にまで増殖している、請求項21に記載の方法。
【請求項30】 繊維の孔が、全容量に対する割合にして40%から95%を構成し、孔の大きさが10ミクロンから100ミクロンである、請求項21に記載の方法。
【請求項31】 マトリックスが、直径または幅が0.5ミクロンから50ミクロンである、へん平繊維、非丸形繊維、中空繊維、およびそれらの混合繊維からなるグループより選択された繊維からできている、請求項21に記載の方法。
【請求項32】 マトリックスが、幅2ミクロンから20ミクロン、繊維の厚さに対する幅の割合が少なくとも2:1であるリボン状繊維から構成されている、請求項21に記載の方法。
【請求項33】 マトリックスが、全容量に対する割合が60%から95%の孔容量をもつ、請求項21に記載の方法。
【請求項34】 マトリックスの高さが50〜1000μmである、請求項21に記載の方法。
【請求項35】 マトリックスの材料が、ポリエステル、ポリアルキレン、ポリフルオロクロロエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリスルホン、酢酸セルロース、ガラスファイバー、および不活性金属繊維からなるグループより選択される、請求項21に記載の方法。
【請求項36】 マトリックスが、四角形、リング形、円盤形、および十字形からなるグループより選択される、請求項21に記載の方法。
【請求項37】 マトリックスが円盤の形をしている、請求項21に記載の方法。
【請求項38】 マトリックスがポリ−D−リジンで被覆されている、請求項21に記載の方法。
【請求項39】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞を増加/維持する上で有用な間質細胞馴化培地を調製する方法において、
(a)固定相栓流バイオリアクターの中で、生理学的に許容できる3次元の繊維ネットワークを形成している不織繊維マトリックスを含むシート状担体の上に間質細胞培養を樹立して、未分化の造血幹細胞または前駆細胞を増加/維持する工程、および
(b)所望の間質細胞密度に達したら、該固定相栓流バイオリアクターから培地を回収して、未分化の造血幹細胞または前駆細胞を増加/維持する上で有用な間質細胞馴化培地を得る工程を含む方法。
【請求項40】 間質細胞培養の間質細胞が、担体1立方センチメートルあたり少なくとも5×106細胞という密度にまで増殖している、請求項39に記載の方法。
【請求項41】 間質細胞培養の間質細胞が、担体1立方センチメートルあたり少なくとも107細胞という密度にまで増殖している、請求項39に記載の方法。
【請求項42】 繊維の孔が、全容量に対する割合にして40%から95%を構成し、孔の大きさが10ミクロンから100ミクロンである、請求項39に記載の方法。
【請求項43】 マトリックスが、直径または幅が0.5ミクロンから50ミクロンである、へん平繊維、非丸形繊維、中空繊維、およびそれらの混合繊維からなるグループより選択された繊維からできている、請求項39に記載の方法。
【請求項44】 マトリックスが、幅2ミクロンから20ミクロン、繊維の厚さに対する幅の割合が少なくとも2:1であるリボン状繊維から構成されている、請求項39に記載の方法。
【請求項45】 マトリックスが、全容量に対する割合が60%から95%の孔容量をもつ、請求項39に記載の方法。
【請求項46】 マトリックスの高さが50〜1000μmである、請求項39に記載の方法。
【請求項47】 マトリックスの材料が、ポリエステル、ポリアルキレン、ポリフルオロクロロエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリスルホン、酢酸セルロース、ガラスファイバー、および不活性金属繊維からなるグループより選択される、請求項39に記載の方法。
【請求項48】 マトリックスが、四角形、リング形、円盤形、および十字形からなるグループより選択される、請求項39に記載の方法。
【請求項49】 マトリックスが円盤の形をしている、請求項39に記載の方法。
【請求項50】 マトリックスがポリ−D−リジンで被覆されている、請求項39に記載の方法。
【請求項1】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞を増加/維持する方法において、
(a)未分化の造血幹細胞または前駆細胞を得る工程、および
(b)上記未分化の造血幹細胞または前駆細胞を、生理学的に許容できる3次元の繊維ネットワークを形成している不織繊維マトリックスを含むシート状担体の上に3次元の間質細胞培養が予め樹立されている固定相栓流バイオリアクターの中に播いて、未分化の造血幹細胞または前駆細胞を増加/維持する工程を含む方法。
【請求項2】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞が、臍帯血、動員された末梢血、および骨髄からなるグループより選択された組織から単離された細胞である、請求項1に記載の方法。
【請求項3】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、共通のHLA抗原をもつ、請求項1に記載の方法。
【請求項4】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、単一個体に由来する、請求項1に記載の方法。
【請求項5】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、異なった個体に由来する、請求項1に記載の方法。
【請求項6】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、同一種に由来する、請求項1に記載の方法。
【請求項7】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、異種に由来する、請求項1に記載の方法。
【請求項8】 間質細胞培養の間質細胞が、担体1立方センチメートルあたり少なくとも5×106細胞という密度にまで増殖している、請求項1に記載の方法。
【請求項9】 間質細胞培養の間質細胞が、担体1立方センチメートルあたり少なくとも107細胞という密度にまで増殖している、請求項1に記載の方法。
【請求項10】 固定相栓流バイオリアクターの中に未分化の造血幹細胞または前駆細胞を播く工程が行われてから少なくとも10時間該バイオリアクターの中の流れが停止される、請求項1に記載の方法。
【請求項11】 繊維の孔が、全容量に対する割合にして40%から95%を構成し、孔の大きさが10ミクロンから100ミクロンである、請求項1に記載の方法。
【請求項12】 マトリックスが、直径または幅が0.5ミクロンから50ミクロンである、へん平繊維、非丸形繊維、中空繊維、およびそれらの混合繊維からなるグループより選択された繊維からできている、請求項1に記載の方法。
【請求項13】 マトリックスが、幅2ミクロンから20ミクロン、繊維の厚さに対する幅の割合が少なくとも2:1であるリボン状繊維から構成されている、請求項1に記載の方法。
【請求項14】 マトリックスが、全容量に対する割合が60%から95%の孔容量をもつ、請求項1に記載の方法。
【請求項15】 マトリックスの高さが50〜1000μmである、請求項1に記載の方法。
【請求項16】 マトリックスの材料が、ポリエステル、ポリアルキレン、ポリフルオロクロロエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリスルホン、酢酸セルロース、ガラスファイバー、および不活性金属繊維からなるグループより選択される、請求項1に記載の方法。
【請求項17】 マトリックスが、四角形、リング形、円盤形、および十字形からなるグループより選択される、請求項1に記載の方法。
【請求項18】 マトリックスが円盤の形をしている、請求項1に記載の方法。
【請求項19】 マトリックスがポリ−D−リジンで被覆されている、請求項1に記載の方法。
【請求項20】 さらに、未分化の造血幹細胞または前駆細胞を単離する工程を含む、請求項1に記載の方法。
【請求項21】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞を増加/維持する方法において、
(a)未分化の造血幹細胞または前駆細胞を得る工程、および
(b)上記未分化の造血幹細胞または前駆細胞を、生理学的に許容できる3次元の繊維ネットワークを形成している不織繊維マトリックスを含むシート状担体の上に3次元の間質細胞培養が予め樹立されている固定相栓流バイオリアクターから得られた間質細胞馴化培地を含む培地の中で培養して、未分化の造血幹細胞または前駆細胞を増加/維持する工程を含む方法。
【請求項22】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞が、臍帯血、動員された末梢血、および骨髄からなるグループより選択された組織から単離された細胞である、請求項21に記載の方法。
【請求項23】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、共通のHLA抗原をもつ、請求項21に記載の方法。
【請求項24】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、単一個体に由来する、請求項21に記載の方法。
【請求項25】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、異なった個体に由来する、請求項21に記載の方法。
【請求項26】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、同種に由来する、請求項21に記載の方法。
【請求項27】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞、および間質細胞培養の間質細胞が、異種に由来する、請求項21に記載の方法。
【請求項28】 間質細胞培養の間質細胞が、担体1立方センチメートルあたり少なくとも5×106細胞という密度にまで増殖している、請求項21に記載の方法。
【請求項29】 間質細胞培養の間質細胞が、担体1立方センチメートルあたり少なくとも107細胞という密度にまで増殖している、請求項21に記載の方法。
【請求項30】 繊維の孔が、全容量に対する割合にして40%から95%を構成し、孔の大きさが10ミクロンから100ミクロンである、請求項21に記載の方法。
【請求項31】 マトリックスが、直径または幅が0.5ミクロンから50ミクロンである、へん平繊維、非丸形繊維、中空繊維、およびそれらの混合繊維からなるグループより選択された繊維からできている、請求項21に記載の方法。
【請求項32】 マトリックスが、幅2ミクロンから20ミクロン、繊維の厚さに対する幅の割合が少なくとも2:1であるリボン状繊維から構成されている、請求項21に記載の方法。
【請求項33】 マトリックスが、全容量に対する割合が60%から95%の孔容量をもつ、請求項21に記載の方法。
【請求項34】 マトリックスの高さが50〜1000μmである、請求項21に記載の方法。
【請求項35】 マトリックスの材料が、ポリエステル、ポリアルキレン、ポリフルオロクロロエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリスルホン、酢酸セルロース、ガラスファイバー、および不活性金属繊維からなるグループより選択される、請求項21に記載の方法。
【請求項36】 マトリックスが、四角形、リング形、円盤形、および十字形からなるグループより選択される、請求項21に記載の方法。
【請求項37】 マトリックスが円盤の形をしている、請求項21に記載の方法。
【請求項38】 マトリックスがポリ−D−リジンで被覆されている、請求項21に記載の方法。
【請求項39】 未分化の造血幹細胞または前駆細胞を増加/維持する上で有用な間質細胞馴化培地を調製する方法において、
(a)固定相栓流バイオリアクターの中で、生理学的に許容できる3次元の繊維ネットワークを形成している不織繊維マトリックスを含むシート状担体の上に間質細胞培養を樹立して、未分化の造血幹細胞または前駆細胞を増加/維持する工程、および
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【請求項41】 間質細胞培養の間質細胞が、担体1立方センチメートルあたり少なくとも107細胞という密度にまで増殖している、請求項39に記載の方法。
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【請求項44】 マトリックスが、幅2ミクロンから20ミクロン、繊維の厚さに対する幅の割合が少なくとも2:1であるリボン状繊維から構成されている、請求項39に記載の方法。
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