JP2002528468A - Ｌ−カルニチンの合成に有用な補酵素 - Google Patents
Ｌ−カルニチンの合成に有用な補酵素Info
- Publication number
- JP2002528468A JP2002528468A JP2000578471A JP2000578471A JP2002528468A JP 2002528468 A JP2002528468 A JP 2002528468A JP 2000578471 A JP2000578471 A JP 2000578471A JP 2000578471 A JP2000578471 A JP 2000578471A JP 2002528468 A JP2002528468 A JP 2002528468A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- carnitine
- coenzyme
- crotonobetaine
- crotonobetainyl
- brought
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
- C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/007—Carnitine; Butyrobetaine; Crotonobetaine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/001—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by metabolizing one of the enantiomers
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
Abstract
(57)【要約】
本明細書に記載の発明は、Ｌ−カルニチンの合成に有用な酵素、特に補酵素Ａ、さらに具体的にはγ−ブチロベタイニル補酵素Ａおよびクロトノベタイニル補酵素Ａ、これらの製造方法、およびクロトノベタインおよびＤ（−）−カルニチンからＬ（−）−カルニチンの製造でのこれらの使用に関する。
Description
【０００１】 本明細書に記載の発明は、Ｌ−カルニチンの合成に有用な酵素、特に補酵素Ａ
、さらに具体的にはγ−ブチロベタイニル補酵素Ａおよびクロトノベタイニル補
酵素Ａ、これらの製造方法、およびクロトノベタインおよびＤ（−）−カルニチ
ンからＬ（−）−カルニチンの製造でのこれらの使用に関する。
、さらに具体的にはγ−ブチロベタイニル補酵素Ａおよびクロトノベタイニル補
酵素Ａ、これらの製造方法、およびクロトノベタインおよびＤ（−）−カルニチ
ンからＬ（−）−カルニチンの製造でのこれらの使用に関する。
【０００２】 現在までのところ、Ｌ−カルニチンの合成に有用な単離された酵素については
知られていない。特にγ−ブチロベタイニル補酵素Ａもクロトノベタイニル補酵
素Ａも既知物質ではない。Ｌ（−）−カルニチン製造方法において使用されるこ
れらの化合物の能力を確認する際には、Ｌ（−）−カルニチン製造方法について
の既知技術および知識を考慮しなければならない。Ｌ（−）−カルニチンを取得
することについて、化学的方法および生化学的または生物技術的方法が知られて
いる。大部分の化学合成法では、Ｄ、Ｌ−カルニチンが結果的に得られ、このラ
セミ混合物と光学的に活性の単離用酸、例えば、酒石酸、カンホル酸およびカン
ホルスルホン酸の光学異性体との反応により、次いで分別晶出を経てＬ−カルニ
チン鏡像異性体が得られる（例えば、特許ＤＤ２３２１７、ＤＤ９３３４７およ
び特許出願ＤＥ２９９７６７２）。これらすべての合成法についての欠点は、Ｄ
（＋）−カルニチンが不用な産物として得られることであり、合成された産物の
最大５０％だけがＬ（−）−カルニチンである。Ｄ、Ｌ−カルニチンの医療上の
使用は代替的でなく、すなわちＤ（＋）−カルニチンは代替物でない。Ｄ（＋）
−カルニチンは、脂肪酸の酸化について効果がないだけでなく、Ｌ（−）−カル
ニチンの種々の輸送系および特異的酵素を阻害する物質として競合的でもある（
Life Science 28 [191] 2931-938)。この理由によって、最初の主段階からの立
体特異的合成についての方法が開発されている（例えば、Tetrahedron, [1992],
Vol. 48, 319-324)。
知られていない。特にγ−ブチロベタイニル補酵素Ａもクロトノベタイニル補酵
素Ａも既知物質ではない。Ｌ（−）−カルニチン製造方法において使用されるこ
れらの化合物の能力を確認する際には、Ｌ（−）−カルニチン製造方法について
の既知技術および知識を考慮しなければならない。Ｌ（−）−カルニチンを取得
することについて、化学的方法および生化学的または生物技術的方法が知られて
いる。大部分の化学合成法では、Ｄ、Ｌ−カルニチンが結果的に得られ、このラ
セミ混合物と光学的に活性の単離用酸、例えば、酒石酸、カンホル酸およびカン
ホルスルホン酸の光学異性体との反応により、次いで分別晶出を経てＬ−カルニ
チン鏡像異性体が得られる（例えば、特許ＤＤ２３２１７、ＤＤ９３３４７およ
び特許出願ＤＥ２９９７６７２）。これらすべての合成法についての欠点は、Ｄ
（＋）−カルニチンが不用な産物として得られることであり、合成された産物の
最大５０％だけがＬ（−）−カルニチンである。Ｄ、Ｌ−カルニチンの医療上の
使用は代替的でなく、すなわちＤ（＋）−カルニチンは代替物でない。Ｄ（＋）
−カルニチンは、脂肪酸の酸化について効果がないだけでなく、Ｌ（−）−カル
ニチンの種々の輸送系および特異的酵素を阻害する物質として競合的でもある（
Life Science 28 [191] 2931-938)。この理由によって、最初の主段階からの立
体特異的合成についての方法が開発されている（例えば、Tetrahedron, [1992],
Vol. 48, 319-324)。
【０００３】 Ｌ（−）−カルニチンの化学合成の代わりとして、微生物的または酵素的な方
法がある。この方法において、Ｌ（−）−カルニチン・デヒドロゲナーゼ（ＥＣ
１.１.１.１０８）の逆反応を行うことができ、３−ジヒドロカルニチンからＬ
（−）−カルニチンがつくられる（特許ＵＳ４,２２１,８６９）。ＮＡＤＨ依存
性酵素として、還元等価物の製造が保証されねばならない。さらに、ジヒドロカ
ルニチンは非常に不安定である。種々の Entero bacteriaceae 株が、Ｌ（−）
−カルニチンをγ−ブチロベタインにクロトノベタインを介して嫌気性条件で転
換することができる（特許ＤＤ２２１９０５、ＪＰ６１６７４９４、ＪＰ６１２
３４７９４、ＪＰ６１２３４７８８）。Ｌ（−）−カルニチンのクロトノベタイ
ンへの代謝は可逆的であり、立体特異的酵素、Ｌ（−）−カルニチン・デヒドラ
ターゼが触媒となる（特許ＤＤ２８１７３５、ＤＤ２８１９１９）。この方法に
おいて、クロトノベタインは、Ｌ（−）−カルニチンの合成についての主な最終
化合物として使用できる。多数の Proteus 株もＬ（−）−カルニチンをクロト
ノベタインから好気性条件で形成する（特許ＵＳ５３００４３００）。不用産物
Ｄ（＋）−カルニチンからＬ（−）−カルニチンの酵素的合成について、ラセマ
ーゼが開示されている（特許ＤＤ３００１８１）。第３の可能性として、Ｌ（−
）−カルニチンをγ−ブチロベタインからγ−ブチロベタイン・ヒドロキシラー
ゼによる取得がある（ＥＣ／１．１４．１１．１）（特許出願ＤＥ３１２３９７
５）。特許ＥＰ１５８１９４、ＥＰ１９５９４４、ＪＰ６１１９９７９３に記載
の方法において、Ｌ（−）−カルニチンのクロトノベタインまたはγ−ブチロベ
タインからの製造は、クロトノベタインまたはγ−ブチロベタインの存在下でＣ
の補充的源、例えば、グリシンベタイン上で選択微生物を培養する。
法がある。この方法において、Ｌ（−）−カルニチン・デヒドロゲナーゼ（ＥＣ
１.１.１.１０８）の逆反応を行うことができ、３−ジヒドロカルニチンからＬ
（−）−カルニチンがつくられる（特許ＵＳ４,２２１,８６９）。ＮＡＤＨ依存
性酵素として、還元等価物の製造が保証されねばならない。さらに、ジヒドロカ
ルニチンは非常に不安定である。種々の Entero bacteriaceae 株が、Ｌ（−）
−カルニチンをγ−ブチロベタインにクロトノベタインを介して嫌気性条件で転
換することができる（特許ＤＤ２２１９０５、ＪＰ６１６７４９４、ＪＰ６１２
３４７９４、ＪＰ６１２３４７８８）。Ｌ（−）−カルニチンのクロトノベタイ
ンへの代謝は可逆的であり、立体特異的酵素、Ｌ（−）−カルニチン・デヒドラ
ターゼが触媒となる（特許ＤＤ２８１７３５、ＤＤ２８１９１９）。この方法に
おいて、クロトノベタインは、Ｌ（−）−カルニチンの合成についての主な最終
化合物として使用できる。多数の Proteus 株もＬ（−）−カルニチンをクロト
ノベタインから好気性条件で形成する（特許ＵＳ５３００４３００）。不用産物
Ｄ（＋）−カルニチンからＬ（−）−カルニチンの酵素的合成について、ラセマ
ーゼが開示されている（特許ＤＤ３００１８１）。第３の可能性として、Ｌ（−
）−カルニチンをγ−ブチロベタインからγ−ブチロベタイン・ヒドロキシラー
ゼによる取得がある（ＥＣ／１．１４．１１．１）（特許出願ＤＥ３１２３９７
５）。特許ＥＰ１５８１９４、ＥＰ１９５９４４、ＪＰ６１１９９７９３に記載
の方法において、Ｌ（−）−カルニチンのクロトノベタインまたはγ−ブチロベ
タインからの製造は、クロトノベタインまたはγ−ブチロベタインの存在下でＣ
の補充的源、例えば、グリシンベタイン上で選択微生物を培養する。
【０００４】 Ｌ（−）−カルニチン・デヒドラターゼ（ＥＣ４．２．１．８９）は、大腸菌
から単離され、まだ同定されていない低分子量の因子Ｆの存在下でのみ、クロト
ノベタインのＬ（−）−カルニチンへの可逆的転換について触媒となる（特許Ｄ
Ｄ２８１７３５）。Enterobacteriaceae科から単離されたＬ（−）−カルニチン
・デヒドラターゼの固定化で、副産物形成のないＬ（−）−カルニチンの合成が
開発されている（ＤＤ２８１９１０）。上記の低分子量の因子Ｆは、Ｄ（＋）か
らＬ（−）−カルニチンへのラセミ化にも同様に欠くことができない。クロトノ
ベタインからγ−ブチロベタインへの還元もこの因子の存在下でのみ生じる。
から単離され、まだ同定されていない低分子量の因子Ｆの存在下でのみ、クロト
ノベタインのＬ（−）−カルニチンへの可逆的転換について触媒となる（特許Ｄ
Ｄ２８１７３５）。Enterobacteriaceae科から単離されたＬ（−）−カルニチン
・デヒドラターゼの固定化で、副産物形成のないＬ（−）−カルニチンの合成が
開発されている（ＤＤ２８１９１０）。上記の低分子量の因子Ｆは、Ｄ（＋）か
らＬ（−）−カルニチンへのラセミ化にも同様に欠くことができない。クロトノ
ベタインからγ−ブチロベタインへの還元もこの因子の存在下でのみ生じる。
【０００５】 Ｌ（−）−カルニチン（３−ヒドロキシ−４−トリメチルアミノブチレート）
は、ユビキノン性の自然生起化合物であり、ミトコンドリア膜を通る長鎖脂肪酸
の輸送にアセチル基の担体として基本的に重要である。高等生物の代謝でのこの
主要な役割の結果として、種々の心臓疾患患者の治療と予防および透析での患者
の処置において使用される（参照、Pathology, 17, [1985], 116-169)。Ｌ（−
）−カルニチンの補充は、新生児および長期の大人の非経口栄養に不可欠である
（Guertler and Loester, Carnitin [1996], 21-30)。Ｌ（−）−カルニチンは
重要性が増している食事補充物質である。
は、ユビキノン性の自然生起化合物であり、ミトコンドリア膜を通る長鎖脂肪酸
の輸送にアセチル基の担体として基本的に重要である。高等生物の代謝でのこの
主要な役割の結果として、種々の心臓疾患患者の治療と予防および透析での患者
の処置において使用される（参照、Pathology, 17, [1985], 116-169)。Ｌ（−
）−カルニチンの補充は、新生児および長期の大人の非経口栄養に不可欠である
（Guertler and Loester, Carnitin [1996], 21-30)。Ｌ（−）−カルニチンは
重要性が増している食事補充物質である。
【０００６】 Ｌ（−）−カルニチンの合成に用いられる微生物的方法の欠点は、その微生物
の数が非常に限られ、その培養基からほとんど単離されないので、新たな滋養培
地を培養に際し継続的に補充しなければならないことである。その結果、蒸発し
たＬ（−）−カルニチン含有培養液の再生に多大の努力が払われねばならない。
微生物系でのクロトノベタインからＬ（−）−カルニチンの合成において、合成
反応に競合する反応として、クロトノベタイン・レダクターゼによってクロトノ
ベタインからγ−ブチロベタインへの転換が起こり得る。
の数が非常に限られ、その培養基からほとんど単離されないので、新たな滋養培
地を培養に際し継続的に補充しなければならないことである。その結果、蒸発し
たＬ（−）−カルニチン含有培養液の再生に多大の努力が払われねばならない。
微生物系でのクロトノベタインからＬ（−）−カルニチンの合成において、合成
反応に競合する反応として、クロトノベタイン・レダクターゼによってクロトノ
ベタインからγ−ブチロベタインへの転換が起こり得る。
【０００７】 二次的とは言えない重要な問題に、医薬用途の物質の製造に微生物を使用する
ことがある。多くの場合、使用される微生物は、病原菌株に由来するか、高度に
工学処理されて外因性遺伝子を含有する。これは、規制する当局が非常に注意し
ている点である。
ことがある。多くの場合、使用される微生物は、病原菌株に由来するか、高度に
工学処理されて外因性遺伝子を含有する。これは、規制する当局が非常に注意し
ている点である。
【０００８】 クロトノベタインからＬ（−）−カルニチンの合成に用いられる酵素的合成の
欠点は、大腸菌から得られタンパク質のない溶液が、固定化Ｌ（−）−カルニチ
ン・デヒドラターゼにより、クロトノベタインだけでなく、未同定因子Ｆ（酵素
の活性化に必須）も含有しなければならないことである。タンパク質を含まない
溶液の構成成分によりつくられた因子Ｆをかく乱する影響を、除外することがで
きない。Ｌ（−）−カルニチンの酵素的合成は限られた程度でしか適当でなく、
特に、使用される因子Ｆの量が正確に定量できない。同じ因子Ｆが大腸菌でのＤ
（＋）からＬ（−）−カルニチンへのラセミ化に基本的に重要である。因子Ｆは
、既知の補酵素または酵素補助因子で代替できない（Jung et al., Biochim. Bi
ophys. Acta 1003 [1989] 270-276)。
欠点は、大腸菌から得られタンパク質のない溶液が、固定化Ｌ（−）−カルニチ
ン・デヒドラターゼにより、クロトノベタインだけでなく、未同定因子Ｆ（酵素
の活性化に必須）も含有しなければならないことである。タンパク質を含まない
溶液の構成成分によりつくられた因子Ｆをかく乱する影響を、除外することがで
きない。Ｌ（−）−カルニチンの酵素的合成は限られた程度でしか適当でなく、
特に、使用される因子Ｆの量が正確に定量できない。同じ因子Ｆが大腸菌でのＤ
（＋）からＬ（−）−カルニチンへのラセミ化に基本的に重要である。因子Ｆは
、既知の補酵素または酵素補助因子で代替できない（Jung et al., Biochim. Bi
ophys. Acta 1003 [1989] 270-276)。
【０００９】 上述の欠点の原因は、因子Ｆの構造およびＬ（−）−カルニチン・デヒドラタ
ーゼのアポ酵素を活性化する際のその役割について知識が乏しいことである。同
様にして、Ｌ（−）−カルニチン・デヒドラターゼのアポ酵素を活性化し得る他
の化合物は、知られていない。
ーゼのアポ酵素を活性化する際のその役割について知識が乏しいことである。同
様にして、Ｌ（−）−カルニチン・デヒドラターゼのアポ酵素を活性化し得る他
の化合物は、知られていない。
【００１０】 本明細書に記載の発明の目的は、Ｌ（−）−カルニチンのクロトノベタインか
らの立体特異的合成を酵素的に可能すること、および不用産物Ｄ（＋）をＬ（−
）−カルニチンへラセミ化することである。これらの酵素的な触媒反応は、Ｌ（
−）−カルニチンの純粋化学的合成またはＬ−カルニチンの微生物的方法の使用
に替わりうる。
らの立体特異的合成を酵素的に可能すること、および不用産物Ｄ（＋）をＬ（−
）−カルニチンへラセミ化することである。これらの酵素的な触媒反応は、Ｌ（
−）−カルニチンの純粋化学的合成またはＬ−カルニチンの微生物的方法の使用
に替わりうる。
【００１１】 本明細書に記載の発明の目的は、Ｌ（−）−カルニチンのクロトノベタインか
らの酵素的合成を実現することであり、上記のγ−ブチロベタイニル補酵素Ａお
よびＬ−カルニチン・デヒドラターゼにより副産物の生成なしに行われる。その
他にも可能なのは、生理的に効力のない不用産物Ｄ（＋）−カルニチンのＬ（−
）−カルニチンへの転換であり、γ−ブチロベタイニル補酵素ＡとともにＬ（−
）−カルニチンのラセミ化系を用いて行われる。
らの酵素的合成を実現することであり、上記のγ−ブチロベタイニル補酵素Ａお
よびＬ−カルニチン・デヒドラターゼにより副産物の生成なしに行われる。その
他にも可能なのは、生理的に効力のない不用産物Ｄ（＋）−カルニチンのＬ（−
）−カルニチンへの転換であり、γ−ブチロベタイニル補酵素ＡとともにＬ（−
）−カルニチンのラセミ化系を用いて行われる。
【００１２】 本明細書に記載の発明の他の目的は、Ｌ（−）−カルニチンのクロトノベタイ
ンからの酵素的合成を実現することであり、クロトノベタイニル補酵素Ａおよび
Ｌ−カルニチン・デヒドラターゼにより副産物の生成なしに行われる。その他に
も可能なのは、生理的に効力のない不用産物Ｄ（＋）−カルニチンのＬ（−）−
カルニチンへの転換であり、クロトノベタイニル補酵素ＡとともにＬ（−）−カ
ルニチンのラセミ化系を用いて行われる。
ンからの酵素的合成を実現することであり、クロトノベタイニル補酵素Ａおよび
Ｌ−カルニチン・デヒドラターゼにより副産物の生成なしに行われる。その他に
も可能なのは、生理的に効力のない不用産物Ｄ（＋）−カルニチンのＬ（−）−
カルニチンへの転換であり、クロトノベタイニル補酵素ＡとともにＬ（−）−カ
ルニチンのラセミ化系を用いて行われる。
【００１３】 本発明の対象は、補酵素Ａ化合物であり、本明細書ではγ−ブチロベタイニル
補酵素Ａまたはクロトノベタイニル補酵素Ａである。これらは夫々、補助因子と
してのＬ（−）−カルニチン・デヒドラターゼを活性化でき、そのことによりク
ロトノベタインからＬ（−）−カルニチンへの可逆的形成が起きる。補助因子は
、Ｄ（＋）からＬ（−）−カルニチンへのラセミ化およびクロトノベタインから
γ−ブチロベタインへの転換にも非常に必要である。本明細書に記載の発明の対
称は、γ−ブチロベタイニル補酵素Ａの合成法および利用、および補酵素自体で
ある。
補酵素Ａまたはクロトノベタイニル補酵素Ａである。これらは夫々、補助因子と
してのＬ（−）−カルニチン・デヒドラターゼを活性化でき、そのことによりク
ロトノベタインからＬ（−）−カルニチンへの可逆的形成が起きる。補助因子は
、Ｄ（＋）からＬ（−）−カルニチンへのラセミ化およびクロトノベタインから
γ−ブチロベタインへの転換にも非常に必要である。本明細書に記載の発明の対
称は、γ−ブチロベタイニル補酵素Ａの合成法および利用、および補酵素自体で
ある。
【００１４】 Ｌ（−）−カルニチン・デヒドラターゼの、γ−ブチロベタイニル補酵素Ａま
たはクロトノベタイニル補酵素Ａとの組み合せは、クロトノベタインからＬ（−
）−カルニチンの合成について新しい可能性を提供する。Ｌ（−）−カルニチン
・デヒドラターゼとγ−ブチロベタイニル補酵素Ａまたはクロトノベタイニル補
酵素Ａとを同時に固定化すると、Ｌ（−）−カルニチンについて今日知られてい
る工業的方法の代替法が開発される。同様に、ラセミ化系が、Ｄ（＋）−カルニ
チンからＬ（−）−カルニチンの合成法として、γ−ブチロベタイニル補酵素Ａ
またはクロトノベタイニル補酵素Ａとともに使用される。
たはクロトノベタイニル補酵素Ａとの組み合せは、クロトノベタインからＬ（−
）−カルニチンの合成について新しい可能性を提供する。Ｌ（−）−カルニチン
・デヒドラターゼとγ−ブチロベタイニル補酵素Ａまたはクロトノベタイニル補
酵素Ａとを同時に固定化すると、Ｌ（−）−カルニチンについて今日知られてい
る工業的方法の代替法が開発される。同様に、ラセミ化系が、Ｄ（＋）−カルニ
チンからＬ（−）−カルニチンの合成法として、γ−ブチロベタイニル補酵素Ａ
またはクロトノベタイニル補酵素Ａとともに使用される。
【００１５】 本明細書に記載の発明により、クロトノベタインからＬ（−）−カルニチンの
合成がＬ（−）−カルニチン・デヒドラターゼ（ＥＣ４．２．１．８９）によっ
て可能である。Ｌ（−）−カルニチン・デヒドラターゼのアポ酵素の活性化には
、γ−ブチロベタイニル補酵素Ａまたはクロトノベタイニル補酵素Ａの触媒量の
みが必要である。
合成がＬ（−）−カルニチン・デヒドラターゼ（ＥＣ４．２．１．８９）によっ
て可能である。Ｌ（−）−カルニチン・デヒドラターゼのアポ酵素の活性化には
、γ−ブチロベタイニル補酵素Ａまたはクロトノベタイニル補酵素Ａの触媒量の
みが必要である。
【００１６】 γ−ブチロベタイニル補酵素Ａの合成のための条件は、γ−ブチロベタインの
活性化である。乾燥γ−ブチロベタイン塩酸塩を好ましくは最終産物として使用
する。γ−ブチロベタイン塩酸塩を三塩化リンと１５−７０℃（好ましくは２５
℃）で酸素気中で反応さす。形成した塩化γ−ブチロベタインを追加産物および
最終物質から窒素を送り込んで単離する。
活性化である。乾燥γ−ブチロベタイン塩酸塩を好ましくは最終産物として使用
する。γ−ブチロベタイン塩酸塩を三塩化リンと１５−７０℃（好ましくは２５
℃）で酸素気中で反応さす。形成した塩化γ−ブチロベタインを追加産物および
最終物質から窒素を送り込んで単離する。
【００１７】 このように得た塩化γ−ブチロベタインは、γ−ブチロベタイニル補酵素Ａの
合成に適している。補酵素Ａを最初に１Ｍの炭酸水素ナトリウムの氷混合物にｐ
Ｈ７．５−９．５（好ましくはｐＨ８．５）で懸濁する。これに塩化γ−ブチロ
ベタインの対応量（好ましくは過剰）を、ｐＨ値を調整しながら、加える。１５
−３０分後に反応が完了する。γ−ブチロベタイニル補酵素Ａの形成をＨＰＬＣ
（Spherisorb, C18 column）で確認し、最後に精製工程（DOWEX 50 のイオン交
換クロマトグラフィ−）を行う。純度の検査を再度ＨＰＬＣ（Spherisorb, C18
column）で行う。物理化学的性質の測定は、水洗した産物について行った（次表
を参照）。
合成に適している。補酵素Ａを最初に１Ｍの炭酸水素ナトリウムの氷混合物にｐ
Ｈ７．５−９．５（好ましくはｐＨ８．５）で懸濁する。これに塩化γ−ブチロ
ベタインの対応量（好ましくは過剰）を、ｐＨ値を調整しながら、加える。１５
−３０分後に反応が完了する。γ−ブチロベタイニル補酵素Ａの形成をＨＰＬＣ
（Spherisorb, C18 column）で確認し、最後に精製工程（DOWEX 50 のイオン交
換クロマトグラフィ−）を行う。純度の検査を再度ＨＰＬＣ（Spherisorb, C18
column）で行う。物理化学的性質の測定は、水洗した産物について行った（次表
を参照）。
【００１８】
【表１】
【００１９】 本発明のＬ（−）−カルニチン・デヒドラターゼ活性化試験のために、γ−ブ
チロベタイニル補酵素Ａ（好ましくは１０ｎｍｏｌ）をリン酸カリウム緩衝液（
１０ｍＭ、ｐＨ７．５）に入れ、部分的濃縮Ｌ（−）−カルニチン・デヒドラタ
ーゼ（なんらかの活性を示す因子Ｆなし）およびクロトノベタイン溶液を加え、
３７℃で代謝およびインキュベートする。
チロベタイニル補酵素Ａ（好ましくは１０ｎｍｏｌ）をリン酸カリウム緩衝液（
１０ｍＭ、ｐＨ７．５）に入れ、部分的濃縮Ｌ（−）−カルニチン・デヒドラタ
ーゼ（なんらかの活性を示す因子Ｆなし）およびクロトノベタイン溶液を加え、
３７℃で代謝およびインキュベートする。
【００２０】 形成したＬ（−）−カルニチンについて、カルニチン・アセチルトランスフェ
ラーゼで光学試験を行った（BERGMEYER (1970)による）。同様の方法をラセミ化
反応試験に適用し、Ｄ（＋）−カルニチン溶液（１Ｍ）をクロトノベタインの代
わりに加えた。形成したＬ（−）−カルニチンを、Ｌ（−）−カルニチンの既知
溶液の上述試験により正確に測定できる。
ラーゼで光学試験を行った（BERGMEYER (1970)による）。同様の方法をラセミ化
反応試験に適用し、Ｄ（＋）−カルニチン溶液（１Ｍ）をクロトノベタインの代
わりに加えた。形成したＬ（−）−カルニチンを、Ｌ（−）−カルニチンの既知
溶液の上述試験により正確に測定できる。
【００２１】 本明細書記載の発明による酵素系の活性化（クロトノベタインをγ−ブチロベ
タインへの転換）試験のために、精製γ−ブチロベタイニル補酵素Ａ（好ましく
は１−１０ｎｍｏｌ）を温かいリン酸カリウム緩衝液（好ましくは３７℃）に入
れ、窒素を送り込み（５０ｍＭ、ｐＨ７．８）、クロトノベタイン酵素還元系（
なんらかの活性を示す因子Ｆなし）をジチオニット（好ましくは５０ｍＭ）およ
びベンジルビオロゲン（好ましくは１ｍＭ）とともに加える。代謝されるべきク
ロトノベタイン溶液を加えた後、形成したγ−ブチロベタインを、酸化ベンジル
ビオロゲンに基づく光学試験を用いて、試験できる。
タインへの転換）試験のために、精製γ−ブチロベタイニル補酵素Ａ（好ましく
は１−１０ｎｍｏｌ）を温かいリン酸カリウム緩衝液（好ましくは３７℃）に入
れ、窒素を送り込み（５０ｍＭ、ｐＨ７．８）、クロトノベタイン酵素還元系（
なんらかの活性を示す因子Ｆなし）をジチオニット（好ましくは５０ｍＭ）およ
びベンジルビオロゲン（好ましくは１ｍＭ）とともに加える。代謝されるべきク
ロトノベタイン溶液を加えた後、形成したγ−ブチロベタインを、酸化ベンジル
ビオロゲンに基づく光学試験を用いて、試験できる。
【００２２】 同様に、クロトノベタイニル補酵素Ａの合成条件で、γ−ブチロベタインが活
性化される。乾燥γ−ブチロベタイン塩酸塩が最終産物として好ましくは用いら
れる。γ−ブチロベタイン塩酸塩を三塩化リンと１５−７０℃（好ましくは２５
℃）で酸素気中で反応さす。形成した塩化クロトノベタインを、追加産物および
最終産物から窒素を送り込んで単離する。
性化される。乾燥γ−ブチロベタイン塩酸塩が最終産物として好ましくは用いら
れる。γ−ブチロベタイン塩酸塩を三塩化リンと１５−７０℃（好ましくは２５
℃）で酸素気中で反応さす。形成した塩化クロトノベタインを、追加産物および
最終産物から窒素を送り込んで単離する。
【００２３】 このように得た塩化クロトノベタインは、クロトノベタイニル補酵素Ａの合成
に適している。補酵素Ａを最初に１Ｍの炭酸水素ナトリウムの氷混合物中にｐＨ
７．５−９．５（好ましくはｐＨ８．５）で懸濁せしめる。これに対応する量（
好ましくは過剰）の塩化クロトノベタインを、ｐＨ値を調整しながら加える。１
５−３０分後に反応が完結する。クロトノベタイニル補酵素Ａの形成をＨＰＬＣ
（Spherisorb, C18 column）で確認し、最後にさらに精製工程（DOWEX 50 のイ
オン交換クロマトグラフィ−）を行う。純度の検査を再度ＨＰＬＣ（Spherisorb
, C18 column）で行う。物理化学的性質の測定は、水洗した産物について行った
（次表を参照）。
に適している。補酵素Ａを最初に１Ｍの炭酸水素ナトリウムの氷混合物中にｐＨ
７．５−９．５（好ましくはｐＨ８．５）で懸濁せしめる。これに対応する量（
好ましくは過剰）の塩化クロトノベタインを、ｐＨ値を調整しながら加える。１
５−３０分後に反応が完結する。クロトノベタイニル補酵素Ａの形成をＨＰＬＣ
（Spherisorb, C18 column）で確認し、最後にさらに精製工程（DOWEX 50 のイ
オン交換クロマトグラフィ−）を行う。純度の検査を再度ＨＰＬＣ（Spherisorb
, C18 column）で行う。物理化学的性質の測定は、水洗した産物について行った
（次表を参照）。
【００２４】
【表２】
【００２５】 本発明のＬ（−）−カルニチン・デヒドラターゼ活性化試験のために、精製ク
ロトノベタイニル補酵素Ａ（好ましくは１−１０ｎｍｏｌ）をリン酸カリウム緩
衝液（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）に入れ、部分的濃縮Ｌ（−）−カルニチン・デヒ
ドラターゼ（なんらかの活性を示す因子Ｆなし）およびクロトノベタイン溶液を
加え、３７℃で代謝（１Ｍ）およびインキュベートする。
ロトノベタイニル補酵素Ａ（好ましくは１−１０ｎｍｏｌ）をリン酸カリウム緩
衝液（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）に入れ、部分的濃縮Ｌ（−）−カルニチン・デヒ
ドラターゼ（なんらかの活性を示す因子Ｆなし）およびクロトノベタイン溶液を
加え、３７℃で代謝（１Ｍ）およびインキュベートする。
【００２６】 形成したＬ（−）−カルニチンについて、カルニチン・アセチルトランスフェ
ラーゼで光学試験を行った（BERGMEYER (1970)による）。同様の方法をラセミ化
反応試験に適用し、Ｄ（＋）−カルニチン溶液（１Ｍ）をクロトノベタインの代
わりに加えた。形成したＬ（−）−カルニチンを、Ｌ（−）−カルニチンの既知
溶液での系についての上述試験により正確に測定できる。
ラーゼで光学試験を行った（BERGMEYER (1970)による）。同様の方法をラセミ化
反応試験に適用し、Ｄ（＋）−カルニチン溶液（１Ｍ）をクロトノベタインの代
わりに加えた。形成したＬ（−）−カルニチンを、Ｌ（−）−カルニチンの既知
溶液での系についての上述試験により正確に測定できる。
【００２７】 本明細書記載の発明による酵素系の活性化（クロトノベタインをγ−ブチロベ
タインへの転換）試験のために、精製クロトノベタイニル補酵素Ａ（好ましくは
１−１０ｎｍｏｌ）を温かいリン酸カリウム（好ましくは３７℃）に入れ、窒素
を送り込み（５０ｍＭ、ｐＨ７．８）、クロトノベタイン酵素還元系（なんらか
の活性を示す因子Ｆなし）をジチオニット（好ましくは５０ｍＭ）およびベンジ
ルビオロゲン（好ましくは１ｍＭ）とともに加える。代謝されるべきクロトノベ
タイン溶液（３．７５）を加えた後、形成したγ−ブチロベタインを、酸化ベン
ジルビオロゲンに基づく光学試験を用いて、試験できる。
タインへの転換）試験のために、精製クロトノベタイニル補酵素Ａ（好ましくは
１−１０ｎｍｏｌ）を温かいリン酸カリウム（好ましくは３７℃）に入れ、窒素
を送り込み（５０ｍＭ、ｐＨ７．８）、クロトノベタイン酵素還元系（なんらか
の活性を示す因子Ｆなし）をジチオニット（好ましくは５０ｍＭ）およびベンジ
ルビオロゲン（好ましくは１ｍＭ）とともに加える。代謝されるべきクロトノベ
タイン溶液（３．７５）を加えた後、形成したγ−ブチロベタインを、酸化ベン
ジルビオロゲンに基づく光学試験を用いて、試験できる。
【００２８】 実施例１ Ｌ（−）−カルニチンのクロトノベタインからの形成を、濃縮Ｌ（−）−カル
ニチン・デヒドラターゼおよびγ−ブチロベタイニル補酵素Ａ（ＢＢ−ＣｏＡ）
によって、リン酸カリウム緩衝液（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）で３７℃の１０分間
のインキュベートで行った。
ニチン・デヒドラターゼおよびγ−ブチロベタイニル補酵素Ａ（ＢＢ−ＣｏＡ）
によって、リン酸カリウム緩衝液（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）で３７℃の１０分間
のインキュベートで行った。
【００２９】
【表３】
【００３０】 実施例２ Ｌ（−）−カルニチンのＤ（＋）−カルニチンからの形成を、カルニチンのラ
セミ化系およびγ−ブチロベタイニル補酵素Ａ（ＢＢ−ＣｏＡ）によって、リン
酸カリウム緩衝液（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）で３７℃の１０分間のインキュベー
トで行った。
セミ化系およびγ−ブチロベタイニル補酵素Ａ（ＢＢ−ＣｏＡ）によって、リン
酸カリウム緩衝液（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）で３７℃の１０分間のインキュベー
トで行った。
【００３１】
【表４】
【００３２】 実施例３ Ｌ（−）−カルニチンのクロトノベタインからの形成を、濃縮Ｌ（−）−カル
ニチン・デヒドラターゼおよびクロトノベタイニル補酵素Ａ（ＣＢ−ＣｏＡ）に
よって、リン酸カリウム緩衝液（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）で３７℃の１０分間の
インキュベートで行った。
ニチン・デヒドラターゼおよびクロトノベタイニル補酵素Ａ（ＣＢ−ＣｏＡ）に
よって、リン酸カリウム緩衝液（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）で３７℃の１０分間の
インキュベートで行った。
【００３３】
【表５】
【００３４】 実施例４ Ｌ（−）−カルニチンのＤ（＋）−カルニチンからの形成を、カルニチンのラ
セミ化系およびクロトノベタイニル補酵素Ａ（ＣＢ−ＣｏＡ）によって、リン酸
カリウム緩衝液（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）で３７℃の１０分間のインキュベート
で行った。
セミ化系およびクロトノベタイニル補酵素Ａ（ＣＢ−ＣｏＡ）によって、リン酸
カリウム緩衝液（１０ｍＭ、ｐＨ７．５）で３７℃の１０分間のインキュベート
で行った。
【００３５】
【表６】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０７Ｂ 61/00 ３００ Ｃ０７Ｂ 61/00 ３００ Ｃ１２Ｐ 13/00 Ｃ１２Ｐ 13/00 Ｃ０７Ｍ 7:00 Ｃ０７Ｍ 7:00 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ， ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 ハンス−ペーター・クレーバー ドイツ連邦共和国デー−04416グロースド イベン、プラターネンベーク42番 Ｆターム(参考） 4B064 AE01 CA21 DA01 4H006 AA01 AB40 AC41 AC81 AC83 BA50 BA51 BA52 BA53 BN10 BS70 BU50 4H039 CA60 CF10 CJ20 4H055 AA01 AB10 AB20 AB40 AD72 DA09
Claims (12)
- 【請求項１】 下記の性質を特徴とするクロトノベタイニル補酵素Ａ： ａ）分子量：８９３.６ ｂ）最大吸収：２０８.０および２６０ｎｍ ｃ）モル吸収係数（ε260）：２０.２１＊ｍｍｏｌ-1＊ｃｍ-1 ｄ）クロトノベタイニル補酵素ＡについてのＬ（−）−カルニチン・デヒドラタ
ーゼのＫｍ値：８＊１６-6 ｅ）温度安定性：−２０℃で数週間、０℃で１時間 ｆ）ｐＨ安定性：ｐＨ２から１０で１週間良好、ｐＨ５で数週間安定 ｇ）溶解性：水によく溶け、有機溶媒にほとんど溶けない ｈ）他の性質：吸湿性。 - 【請求項２】 クロトノベタイン塩酸塩と補酵素Ａからの請求項１のクロト
ノベタイニル補酵素Ａの製造方法であって、塩化クロトノベタイニルをクロトノ
ベタイン塩酸塩からつくり、次いで補酵素Ａで転換することを特徴とする方法。 - 【請求項３】 Ｌ（−）−カルニチン・デヒドラターゼの活性化のための請
求項１のクロトノベタイニル補酵素Ａの使用であって、この２種の化合物を互い
に接触せしめることを特徴とする使用。 - 【請求項４】 Ｌ（−）−カルニチンの調製のための請求項１のクロトノベ
タイニル補酵素Ａの使用であって、この２種の化合物を互いに接触せしめ、次い
でクロトノベタインを加えることを特徴とする使用。 - 【請求項５】 Ｌ（−）−カルニチンの調製のための請求項１のクロトノベ
タイニル補酵素Ａの使用であって、クロトノベタイニル補酵素Ａとラセミ・カル
ニチンを互いに接触せし、次いでＤ（＋）−カルニチンを加えることを特徴とす
る使用。 - 【請求項６】 γ−ブチロベタインの調製のための請求項１のクロトノベタ
イニル補酵素Ａの使用であって、クロトノベタイニル補酵素Ａとクロトノベタイ
ン酵素還元系を互いに接触せし、次いでクロトノベタインを加えることを特徴と
する使用。 - 【請求項７】 下記の性質を特徴とするγ−ブチロベタイニル補酵素Ａ： ａ）分子量：８９５.２ ｂ）最大吸収：２０６.０および２５８ｎｍ ｃ）モル吸収係数（ε260）：１６.１１＊ｍｍｏｌ-1＊ｃｍ-1 ｄ）γ−ブチロベタイニル補酵素ＡについてのＬ（−）−カルニチン・ヒドラタ
ーゼのＫｍ値：５.９＊１０-6 ｅ）温度安定性：−２０℃で数週間、０℃で１時間 ｆ）ｐＨ安定性：ｐＨ３から１０で１時間良好、ｐＨ５で数週間安定 ｇ）溶解性：水によく溶け、有機溶媒にほとんど溶けない ｈ）他の性質：吸湿性。 - 【請求項８】 γ−ブチロベタイン塩酸塩と補酵素Ａからの請求項７のクロ
トノベタイニル補酵素Ａの製造方法であって、塩化クロトノベタイニルをクロト
ノベタイン塩酸塩からつくり、次いで補酵素Ａで転換することを特徴とする方法
。 - 【請求項９】 Ｌ（−）−カルニチン・デヒドラターゼの活性化のための請
求項７のγ−ブチロベタイニル補酵素Ａの使用であって、この２種の化合物を互
いに接触せしめることを特徴とする使用。 - 【請求項１０】 Ｌ（−）−カルニチンの調製のための請求項７のγ−ブチ
ロベタイニル補酵素Ａの使用であって、この２種の化合物を互いに接触せしめ、
次いでクロトノベタインを加えることを特徴とする使用。 - 【請求項１１】 Ｌ（−）−カルニチンの調製のための請求項７のγ−ブチ
ロベタイニル補酵素Ａの使用であって、γ−ブチロベタイニル補酵素Ａとラセミ
・カルニチンを互いに接触せしめ、次いでＤ（＋）−カルニチンを加えることを
特徴とする使用。 - 【請求項１２】 γ−ブチロベタインの調製のための請求項７のγ−ブチロ
ベタイニル補酵素Ａの使用であって、γ−ブチロベタイニル補酵素Ａとクロトノ
ベタイン酵素還元系を互いに接触せし、次いでクロトノベタインを加えることを
特徴とする使用。
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19850426.8 | 1998-10-27 | ||
| DE1998150426 DE19850426A1 (de) | 1998-10-27 | 1998-10-27 | gamma-Butyrobetainyl-Coenzym A und Verfahren zu seiner Herstellung |
| DE1998150433 DE19850433A1 (de) | 1998-10-27 | 1998-10-27 | Crotonobetainyl-Coenzym A, Verfahren zu seiner Herstellung |
| DE19850433.0 | 1998-10-27 | ||
| PCT/IT1999/000339 WO2000024919A1 (en) | 1998-10-27 | 1999-10-22 | Coenzymes useful for the synthesis of l-carnitine |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002528468A true JP2002528468A (ja) | 2002-09-03 |
| JP2002528468A5 JP2002528468A5 (ja) | 2006-12-28 |
Family
ID=26049898
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000578471A Pending JP2002528468A (ja) | 1998-10-27 | 1999-10-22 | Ｌ−カルニチンの合成に有用な補酵素 |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6379936B1 (ja) |
| EP (2) | EP1452604A3 (ja) |
| JP (1) | JP2002528468A (ja) |
| AT (1) | ATE290096T1 (ja) |
| AU (1) | AU1075400A (ja) |
| DE (1) | DE69924026T2 (ja) |
| DK (1) | DK1151130T3 (ja) |
| ES (1) | ES2237954T3 (ja) |
| PT (1) | PT1151130E (ja) |
| SI (1) | SI1151130T1 (ja) |
| WO (1) | WO2000024919A1 (ja) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2001248129A1 (en) * | 2000-04-17 | 2001-10-30 | Befa Handelsgesellschaft M.B.H. | Method for determining the concentration of carnitine in fluids |
| US7407778B2 (en) * | 2002-02-07 | 2008-08-05 | Pettegrew Jay W | Compounds, compositions and methods for treating neuropsychiatric disorders |
| US7700074B2 (en) * | 2002-02-07 | 2010-04-20 | Pettegrew Jay W | Method and system for diagnosis of neuropsychiatric disorders including chronic alcoholism |
| CN1795198B (zh) * | 2003-05-29 | 2011-08-17 | 杰伊·W·佩特格尤 | 对神经精神疾病进行医学成像所用的甘油磷酸胆碱及其衍生物 |
| US20060257842A1 (en) * | 2003-05-29 | 2006-11-16 | Pettegrew Jay W | Cryopreservation media and molecules |
| US20050232911A1 (en) * | 2004-04-19 | 2005-10-20 | Schreiber Brian D | Prevention and treatment of metabolic abnormalities associated with excess intramyocellular lipid |
| KR100713104B1 (ko) * | 2005-07-07 | 2007-05-02 | 씨제이 주식회사 | 뉴로스포라 크라사 유래의ｓ-아데노실메티오닌-6-ｎ-라이신-메틸트란스퍼라제, 그를코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를포함하는 벡터 및 숙주세포 및 상기 숙주세포를 이용하여트리메틸라이신을 생산하는 방법 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1142201B (it) | 1980-06-24 | 1986-10-08 | Sigma Tau Ind Farmaceuti | Procedimento per la produzione enzimatica di l-carnitina |
| DD221905B1 (de) | 1983-11-03 | 1987-03-18 | Univ Leipzig | Verfahren zur herstellung von l(-)-carnitin und seinen derivaten |
| EP0320460B1 (en) | 1987-10-26 | 1994-04-27 | Sigma-Tau Industrie Farmaceutiche Riunite S.p.A. | Process for isolating the enzyme carnitinehydrolyase from strains belonging to the family enterobacteriaceae and use of the immobilized enzyme for producing L(-)-carnitine |
| IT1240833B (it) | 1990-05-14 | 1993-12-17 | Sigma Tau Ind Farmaceuti | Procedimento biocatalitico per la produzione di l-(-)- carnitina da crotonilbetaina e ceppi di proteeae per l'uso in tale procedimento |
| HU220798B1 (hu) * | 1993-10-08 | 2002-05-28 | Lonza Ag. | A butiro-betain/krotono-betain-L-karnitin-anyagcsere génjeit kódoló DNS-molekulák és alkalmazásuk L-karnitin mikrobiológiai előállítására |
| FR2715167B1 (fr) * | 1994-01-20 | 1996-04-12 | Inst Nat Sciences Appliq Lyon | Procédé de production de la L-carnitine par voie microbiologique. |
| DE4402127A1 (de) * | 1994-01-21 | 1995-07-27 | Univ Leipzig | Carnitinracemase und Verfahren zu ihrer Herstellung |
-
1999
- 1999-10-22 DE DE69924026T patent/DE69924026T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1999-10-22 DK DK99954351T patent/DK1151130T3/da active
- 1999-10-22 ES ES99954351T patent/ES2237954T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-10-22 JP JP2000578471A patent/JP2002528468A/ja active Pending
- 1999-10-22 SI SI9930765T patent/SI1151130T1/xx unknown
- 1999-10-22 PT PT99954351T patent/PT1151130E/pt unknown
- 1999-10-22 AU AU10754/00A patent/AU1075400A/en not_active Abandoned
- 1999-10-22 AT AT99954351T patent/ATE290096T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-10-22 EP EP04007026A patent/EP1452604A3/en not_active Withdrawn
- 1999-10-22 WO PCT/IT1999/000339 patent/WO2000024919A1/en active IP Right Grant
- 1999-10-22 EP EP99954351A patent/EP1151130B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-11-26 US US09/992,005 patent/US6379936B1/en not_active Expired - Fee Related
-
2002
- 2002-03-26 US US10/105,318 patent/US6562608B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU1075400A (en) | 2000-05-15 |
| US6562608B2 (en) | 2003-05-13 |
| PT1151130E (pt) | 2005-06-30 |
| EP1452604A2 (en) | 2004-09-01 |
| DK1151130T3 (da) | 2005-06-20 |
| US6379936B1 (en) | 2002-04-30 |
| SI1151130T1 (en) | 2005-06-30 |
| US20020146787A1 (en) | 2002-10-10 |
| ATE290096T1 (de) | 2005-03-15 |
| EP1151130B1 (en) | 2005-03-02 |
| DE69924026T2 (de) | 2006-02-09 |
| EP1452604A3 (en) | 2005-03-30 |
| ES2237954T3 (es) | 2005-08-01 |
| DE69924026D1 (de) | 2005-04-07 |
| WO2000024919A1 (en) | 2000-05-04 |
| EP1151130A1 (en) | 2001-11-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR870002073B1 (ko) | L-카르니틴의 제조방법 | |
| EP2064331B1 (en) | Process for preparation of optically active N-protected 3-aminopyrrolidine or N-protected 3-aminopiperidine by optical resolution of racemic amine mixtures employing an omega-transaminase | |
| EP1818411A1 (en) | Process for the preparation of optically active chiral amines | |
| JP2676568B2 (ja) | Ｒ（−）−マンデル酸およびその誘導体の製造法 | |
| GB2078742A (en) | Enzymatic production of l-carnitine | |
| JP2002528468A (ja) | Ｌ−カルニチンの合成に有用な補酵素 | |
| JP2696424B2 (ja) | Ｒ（‐）―マンデル酸の製造法 | |
| EP0457735B1 (en) | Biocatalytic process for the production of L-(-)-carnitine from crotonobetaine and strains of Proteeae for use in said process | |
| US6337197B2 (en) | Coenzymes useful for the synthesis of L-carnitine | |
| US4906568A (en) | Process for isolation of carnitinehydrolyase and an effector from enterobacteriaceae and use thereof to prepare carnitine | |
| JP2698936B2 (ja) | Ｒ（‐）―マンデル酸誘導体の製造法 | |
| KR920007403B1 (ko) | L(-)-테트라히드로폴산의 제조방법 | |
| JPH0751071B2 (ja) | Ｌ―カルニチンの微生物学的方法による断続的製造方法 | |
| JP3081649B2 (ja) | Ｓ−（＋）−マンデルアミドおよびその誘導体の製造法 | |
| JP2696127B2 (ja) | 光学活性な２―ヒドロキシカルボン酸の製造法 | |
| DE19850426A1 (de) | gamma-Butyrobetainyl-Coenzym A und Verfahren zu seiner Herstellung | |
| JP3715662B2 (ja) | 光学活性β−ヒドロキシカルボン酸及びその対掌体エステルの製造方法 | |
| DE10032076A1 (de) | Verfahren zur enzymatischen Synthese von L-Carnitin | |
| DE19850433A1 (de) | Crotonobetainyl-Coenzym A, Verfahren zu seiner Herstellung | |
| JPH047678B2 (ja) | ||
| JPH04341195A (ja) | 光学活性マンデル酸の製法 | |
| JPH0521557B2 (ja) | ||
| EP1132480A1 (en) | Method for producing halo-L-tryptophan | |
| DD281735A7 (de) | Verfahren zur enzymatischen synthese von l(-)-carnitin | |
| JPH0889267A (ja) | Ｓ−（＋）−マンデルアミドおよびその誘導体の製造法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20061017 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20061017 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090915 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20100223 |