JP2002521044A - 傷ついた組織に対するターゲッティング医薬品剤 - Google Patents
傷ついた組織に対するターゲッティング医薬品剤Info
- Publication number
- JP2002521044A JP2002521044A JP2000562049A JP2000562049A JP2002521044A JP 2002521044 A JP2002521044 A JP 2002521044A JP 2000562049 A JP2000562049 A JP 2000562049A JP 2000562049 A JP2000562049 A JP 2000562049A JP 2002521044 A JP2002521044 A JP 2002521044A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- growth factor
- tissue
- binding domain
- angiogenesis
- collagen binding
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 230000008685 targeting Effects 0.000 title description 15
- 239000003814 drug Substances 0.000 title description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 120
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 100
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 100
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 100
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 83
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 80
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 79
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 claims abstract description 62
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims abstract description 62
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims abstract description 39
- 239000000587 angiogenesis modulating agent Substances 0.000 claims abstract description 30
- 230000004087 circulation Effects 0.000 claims abstract description 19
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 99
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 62
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 claims description 53
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 43
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 43
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims description 37
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 32
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 31
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 29
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 claims description 27
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 26
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 26
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 23
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 claims description 22
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 claims description 22
- 229960001134 von willebrand factor Drugs 0.000 claims description 22
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 claims description 19
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 18
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 claims description 17
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 claims description 17
- 102100031372 Thymidine phosphorylase Human genes 0.000 claims description 16
- 108700023160 Thymidine phosphorylases Proteins 0.000 claims description 16
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 16
- 230000002792 vascular Effects 0.000 claims description 16
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 15
- 102000003745 Hepatocyte Growth Factor Human genes 0.000 claims description 14
- 108090000100 Hepatocyte Growth Factor Proteins 0.000 claims description 14
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 14
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 claims description 14
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 claims description 14
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 14
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 14
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 13
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 11
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 10
- 108090000386 Fibroblast Growth Factor 1 Proteins 0.000 claims description 9
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 claims description 9
- 102100031706 Fibroblast growth factor 1 Human genes 0.000 claims description 8
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 claims description 8
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 8
- 102000009840 Angiopoietins Human genes 0.000 claims description 7
- 108010009906 Angiopoietins Proteins 0.000 claims description 7
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 claims description 7
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 claims description 7
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 7
- 239000002532 enzyme inhibitor Substances 0.000 claims description 7
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 claims description 7
- XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N interleukin-8 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N 0.000 claims description 7
- 229940096397 interleukin-8 Drugs 0.000 claims description 7
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 claims description 7
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 claims description 6
- 229940125532 enzyme inhibitor Drugs 0.000 claims description 6
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 claims description 6
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims description 5
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 claims description 5
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 5
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 claims description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 3
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 2
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 claims 17
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 claims 11
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 claims 6
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 claims 6
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 claims 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 64
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 30
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 24
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 20
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 20
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 17
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 15
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 12
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 11
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 11
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 description 11
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 10
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 10
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 10
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 10
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 10
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 10
- 101000808011 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor A Proteins 0.000 description 9
- 102000058223 human VEGFA Human genes 0.000 description 9
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 9
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 9
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 description 8
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 8
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 8
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 8
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 8
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 8
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 7
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 7
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 6
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 6
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 6
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 6
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 230000000250 revascularization Effects 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 5
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 5
- 230000018883 protein targeting Effects 0.000 description 5
- IQFYYKKMVGJFEH-OFKYTIFKSA-N 1-[(2r,4s,5r)-4-hydroxy-5-(tritiooxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO[3H])O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C)=C1 IQFYYKKMVGJFEH-OFKYTIFKSA-N 0.000 description 4
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 4
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 4
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 4
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 4
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 4
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 4
- 102000009524 Vascular Endothelial Growth Factor A Human genes 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 4
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 4
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 4
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 4
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 4
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 4
- 238000012552 review Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 4
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 4
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 4
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 4
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 3
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 3
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 3
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 3
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 description 3
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 3
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 3
- 238000001246 colloidal dispersion Methods 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 238000013461 design Methods 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 3
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 3
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 3
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 3
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 3
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 101100166239 Caenorhabditis elegans cbd-1 gene Proteins 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 2
- 108010067225 Cell Adhesion Molecules Proteins 0.000 description 2
- 102000016289 Cell Adhesion Molecules Human genes 0.000 description 2
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 2
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 2
- 102000005889 Cysteine-Rich Protein 61 Human genes 0.000 description 2
- 108010019961 Cysteine-Rich Protein 61 Proteins 0.000 description 2
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 2
- 102100024785 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 2
- 241000713813 Gibbon ape leukemia virus Species 0.000 description 2
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 2
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 2
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 2
- 241000829100 Macaca mulatta polyomavirus 1 Species 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102000013967 Monokines Human genes 0.000 description 2
- 108010050619 Monokines Proteins 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 2
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000714474 Rous sarcoma virus Species 0.000 description 2
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 2
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 2
- 241000723873 Tobacco mosaic virus Species 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 229940047120 colony stimulating factors Drugs 0.000 description 2
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- VLCYCQAOQCDTCN-UHFFFAOYSA-N eflornithine Chemical compound NCCCC(N)(C(F)F)C(O)=O VLCYCQAOQCDTCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 2
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 2
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 210000003000 inclusion body Anatomy 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 2
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 2
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 description 2
- 210000000865 mononuclear phagocyte system Anatomy 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 2
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 2
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 102220240796 rs553605556 Human genes 0.000 description 2
- FGDZQCVHDSGLHJ-UHFFFAOYSA-M rubidium chloride Chemical compound [Cl-].[Rb+] FGDZQCVHDSGLHJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 108060008226 thioredoxin Proteins 0.000 description 2
- 230000008467 tissue growth Effects 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 2
- DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N (2R)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2R,3S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-amino-1-hydroxyethylidene)amino]-3-carboxy-1-hydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1,5-dihydroxy-5-iminopentylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]hexanoic acid Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=N[C@@H](CS)C(=N[C@@H](C)C(=N[C@@H](CO)C(=NCC(=N[C@@H](CCC(=N)O)C(=NC(CS)C(=N[C@H]([C@H](C)O)C(=N[C@H](CS)C(=N[C@H](CO)C(=NCC(=N[C@H](CS)C(=NCC(=N[C@H](CCCCN)C(=O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)N=C([C@H](CS)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](C)N=C(CN=C([C@H](CO)N=C([C@H](CS)N=C(CN=C(C(CS)N=C(C(CC(=O)O)N=C(CN)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N 0.000 description 1
- JSPNNZKWADNWHI-PNANGNLXSA-N (2r)-2-hydroxy-n-[(2s,3r,4e,8e)-3-hydroxy-9-methyl-1-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoctadeca-4,8-dien-2-yl]heptadecanamide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)C(=O)N[C@H]([C@H](O)\C=C\CC\C=C(/C)CCCCCCCCC)CO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O JSPNNZKWADNWHI-PNANGNLXSA-N 0.000 description 1
- GMVPRGQOIOIIMI-UHFFFAOYSA-N (8R,11R,12R,13E,15S)-11,15-Dihydroxy-9-oxo-13-prostenoic acid Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CCCCCCC(O)=O GMVPRGQOIOIIMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 description 1
- NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 0.000 description 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100029457 Adenine phosphoribosyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 108010024223 Adenine phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102000008076 Angiogenic Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010074415 Angiogenic Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000009088 Angiopoietin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010048154 Angiopoietin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102400000068 Angiostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010079709 Angiostatins Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000750676 Bacillus phage Gamma Species 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100263579 Bos taurus VEGFA gene Proteins 0.000 description 1
- 101000782219 Bos taurus von Willebrand factor Proteins 0.000 description 1
- 241000701822 Bovine papillomavirus Species 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 102100032566 Carbonic anhydrase-related protein 10 Human genes 0.000 description 1
- 208000010867 Carotid Artery injury Diseases 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 102000001187 Collagen Type III Human genes 0.000 description 1
- 108010069502 Collagen Type III Proteins 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 206010069729 Collateral circulation Diseases 0.000 description 1
- 101150074155 DHFR gene Proteins 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102400001047 Endostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010079505 Endostatins Proteins 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000672609 Escherichia coli BL21 Species 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 101150021185 FGF gene Proteins 0.000 description 1
- 101100321669 Fagopyrum esculentum FA02 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000003971 Fibroblast Growth Factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- 206010018372 Glomerulonephritis membranous Diseases 0.000 description 1
- 102100031132 Glucose-6-phosphate isomerase Human genes 0.000 description 1
- 108010070600 Glucose-6-phosphate isomerase Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N Glycerol trioctadecanoate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100036738 Guanine nucleotide-binding protein subunit alpha-11 Human genes 0.000 description 1
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 1
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 description 1
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 108010093488 His-His-His-His-His-His Proteins 0.000 description 1
- 101000867836 Homo sapiens Carbonic anhydrase-related protein 10 Proteins 0.000 description 1
- 101100283445 Homo sapiens GNA11 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 101100321817 Human parvovirus B19 (strain HV) 7.5K gene Proteins 0.000 description 1
- 108010091358 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100029098 Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 108020005350 Initiator Codon Proteins 0.000 description 1
- 102100026236 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- QEVRUYFHWJJUHZ-DCAQKATOSA-N Met-Ala-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C QEVRUYFHWJJUHZ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 102000003792 Metallothionein Human genes 0.000 description 1
- 108090000157 Metallothionein Proteins 0.000 description 1
- 101100261636 Methanothermobacter marburgensis (strain ATCC BAA-927 / DSM 2133 / JCM 14651 / NBRC 100331 / OCM 82 / Marburg) trpB2 gene Proteins 0.000 description 1
- 229910021586 Nickel(II) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 102100021079 Ornithine decarboxylase Human genes 0.000 description 1
- 229940122060 Ornithine decarboxylase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108700005126 Ornithine decarboxylases Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 208000005764 Peripheral Arterial Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000030831 Peripheral arterial occlusive disease Diseases 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- 101100124346 Photorhabdus laumondii subsp. laumondii (strain DSM 15139 / CIP 105565 / TT01) hisCD gene Proteins 0.000 description 1
- QKDIHFHGHBYTKB-IHRRRGAJSA-N Pro-Ser-Phe Chemical compound N([C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C(=O)[C@@H]1CCCN1 QKDIHFHGHBYTKB-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- 101000808006 Rattus norvegicus Vascular endothelial growth factor A Proteins 0.000 description 1
- 108700005075 Regulator Genes Proteins 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 1
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 108060008245 Thrombospondin Proteins 0.000 description 1
- 102000002938 Thrombospondin Human genes 0.000 description 1
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 1
- 102000006747 Transforming Growth Factor alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 101800004564 Transforming growth factor alpha Proteins 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- HYNAKPYFEYJMAS-XIRDDKMYSA-N Trp-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HYNAKPYFEYJMAS-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 206010046865 Vaccinia virus infection Diseases 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010073925 Vascular Endothelial Growth Factor B Proteins 0.000 description 1
- 102000009520 Vascular Endothelial Growth Factor C Human genes 0.000 description 1
- 108010073923 Vascular Endothelial Growth Factor C Proteins 0.000 description 1
- 102000009519 Vascular Endothelial Growth Factor D Human genes 0.000 description 1
- 108010073919 Vascular Endothelial Growth Factor D Proteins 0.000 description 1
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100038217 Vascular endothelial growth factor B Human genes 0.000 description 1
- 108010003533 Viral Envelope Proteins Proteins 0.000 description 1
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 1
- SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N [4-(4-hydrazinylphenyl)phenyl]hydrazine Chemical compound C1=CC(NN)=CC=C1C1=CC=C(NN)C=C1 SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000711 alprostadil Drugs 0.000 description 1
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 210000000709 aorta Anatomy 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000823 artificial membrane Substances 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- FZCSTZYAHCUGEM-UHFFFAOYSA-N aspergillomarasmine B Natural products OC(=O)CNC(C(O)=O)CNC(C(O)=O)CC(O)=O FZCSTZYAHCUGEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005667 attractant Substances 0.000 description 1
- 230000003305 autocrine Effects 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000036770 blood supply Effects 0.000 description 1
- 230000004352 blood vessel remodeling Effects 0.000 description 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 1
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000003822 cell turnover Effects 0.000 description 1
- 229930183167 cerebroside Natural products 0.000 description 1
- RIZIAUKTHDLMQX-UHFFFAOYSA-N cerebroside D Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC)COC1OC(CO)C(O)C(O)C1O RIZIAUKTHDLMQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005482 chemotactic factor Substances 0.000 description 1
- 230000035605 chemotaxis Effects 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013599 cloning vector Substances 0.000 description 1
- 238000000975 co-precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000005860 defense response to virus Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 1
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 230000010595 endothelial cell migration Effects 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 210000004996 female reproductive system Anatomy 0.000 description 1
- 210000001105 femoral artery Anatomy 0.000 description 1
- 229940126864 fibroblast growth factor Drugs 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 239000003269 fluorescent indicator Substances 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000004077 genetic alteration Effects 0.000 description 1
- 231100000118 genetic alteration Toxicity 0.000 description 1
- 230000009395 genetic defect Effects 0.000 description 1
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000003966 growth inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960000789 guanidine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-O guanidinium Chemical compound NC(N)=[NH2+] ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 1
- 101150113423 hisD gene Proteins 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 1
- 229940052349 human coagulation factor ix Drugs 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000003090 iliac artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000008611 intercellular interaction Effects 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 230000008316 intracellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000003473 lipid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 230000000938 luteal effect Effects 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000010297 mechanical methods and process Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 210000004779 membrane envelope Anatomy 0.000 description 1
- 201000008350 membranous glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 231100000855 membranous nephropathy Toxicity 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N micophenolic acid Natural products OC1=C(CC=C(C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 230000001617 migratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 1
- 229960000951 mycophenolic acid Drugs 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N mycophenolic acid Chemical compound OC1=C(C\C=C(/C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N 0.000 description 1
- 230000010016 myocardial function Effects 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- QMMRZOWCJAIUJA-UHFFFAOYSA-L nickel dichloride Chemical compound Cl[Ni]Cl QMMRZOWCJAIUJA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 description 1
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 description 1
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 1
- 230000008481 normal tissue growth Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 239000002818 ornithine decarboxylase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 230000036284 oxygen consumption Effects 0.000 description 1
- 230000003076 paracrine Effects 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001095 phosphatidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- GMVPRGQOIOIIMI-DWKJAMRDSA-N prostaglandin E1 Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1CCCCCCC(O)=O GMVPRGQOIOIIMI-DWKJAMRDSA-N 0.000 description 1
- 238000000164 protein isolation Methods 0.000 description 1
- 230000030788 protein refolding Effects 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- BALXUFOVQVENIU-KXNXZCPBSA-N pseudoephedrine hydrochloride Chemical compound [H+].[Cl-].CN[C@@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 BALXUFOVQVENIU-KXNXZCPBSA-N 0.000 description 1
- ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N rapamycin Natural products COCC(O)C(=C/C(C)C(=O)CC(OC(=O)C1CCCCN1C(=O)C(=O)C2(O)OC(CC(OC)C(=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C)C)CCC2C)C(C)CC3CCC(O)C(C3)OC)C ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000021014 regulation of cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 210000002254 renal artery Anatomy 0.000 description 1
- 238000004153 renaturation Methods 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 208000037803 restenosis Diseases 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007320 rich medium Substances 0.000 description 1
- IOVGROKTTNBUGK-SJCJKPOMSA-N ritodrine Chemical compound N([C@@H](C)[C@H](O)C=1C=CC(O)=CC=1)CCC1=CC=C(O)C=C1 IOVGROKTTNBUGK-SJCJKPOMSA-N 0.000 description 1
- 229940102127 rubidium chloride Drugs 0.000 description 1
- 108010038196 saccharide-binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 239000013606 secretion vector Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 229960002930 sirolimus Drugs 0.000 description 1
- QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N sirolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N 0.000 description 1
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000010473 stable expression Effects 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000003151 transfection method Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 101150081616 trpB gene Proteins 0.000 description 1
- 101150111232 trpB-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 239000002691 unilamellar liposome Substances 0.000 description 1
- 208000007089 vaccinia Diseases 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 231100000216 vascular lesion Toxicity 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 1
- 230000004862 vasculogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000007998 vessel formation Effects 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037314 wound repair Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0271—Chimeric vertebrates, e.g. comprising exogenous cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1858—Platelet-derived growth factor [PDGF]
- A61K38/1866—Vascular endothelial growth factor [VEGF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/20—Fusion polypeptide containing a tag with affinity for a non-protein ligand
- C07K2319/21—Fusion polypeptide containing a tag with affinity for a non-protein ligand containing a His-tag
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/70—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/70—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction
- C07K2319/74—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction containing a fusion for binding to a cell surface receptor
- C07K2319/75—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction containing a fusion for binding to a cell surface receptor containing a fusion for activation of a cell surface receptor, e.g. thrombopoeitin, NPY and other peptide hormones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2799/00—Uses of viruses
- C12N2799/02—Uses of viruses as vector
- C12N2799/021—Uses of viruses as vector for the expression of a heterologous nucleic acid
- C12N2799/023—Uses of viruses as vector for the expression of a heterologous nucleic acid where the vector is derived from a poxvirus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
Abstract
Description
へ医薬品剤を向かわせるために、コラーゲン結合部位を使用することを特徴とす
る。
である。現在の治療手段には、血管形成術、ステントまたは冠状動脈バイパスに
よるリスク因子の緩和、心筋酸素消費量の低減および冠状血管動脈系血流の局部
的回復がある。これらの治療選択肢は多くの場合に十分には提供されておらず、
外科的処置の候補者にさえなれない患者が大勢いる。いくつかの試みが、移植や
、既存の血管を広げるための調整によって、虚血心筋に冠状血管動脈の血流量供
給を向上するために行われた。
用できる処理である。「血管形成」という単語は、新しい血管の成長を伴う組織
血管系形成の過程である。血管形成は、新しい血管系の形成と編成を最終結果と
する内皮性細胞および平滑筋細胞の増殖および移動を伴った細胞間マトリックス
の分解に関連した複雑な過程である(Folkman, J., and Klagsbrun, M., Scienc
e 235:442-7, 1987)。血管形成は、普通以下の3種類の機構のひとつを経て生
じる:(1)血管新生(血管内皮細胞が新しい血管の発生を開始している血管より
先に移動して出て行く)、(2)血管形成(血管が前駆細胞から新たに発生する)
、(3)血管拡大(既存の小さい血管の径が大きくなることにより、大きい血管と
なる)(Blood, C.H., and Zetter, B.R., Biochem. Biophys. Acta. 1032:89-1
18, 1990)。血管形成は、通常の新生児成長過程において、および黄体成長周期
間の女性生殖器系において重要な過程である(see Moses, M.A., et al., Scien
ce 248: 1408-10, 1990)。通常の状態の下で、新しい血管形成や既存の血管の再
構築に関連した過程は、自己制御式の過程であり、特定のタイプの細胞の拡がり
は制御されており、かつ協調されている。血管形成は、創傷治癒に関連しており
、また組織炎症、関節炎、喘息、腫瘍成長、糖尿病性網膜症およびその他の状態
を含んでいる数多くの臨床疾患の発病学にも関連している。血管形成と関連する
臨床症状は、血管形成不全(Folkman and Klagsbrun, 1987, 前出)と称する。
語だった。成長に見せるように作用する分子(分裂促進物質)だけでなく、成長
を阻害する分子(時々、成長抑制因子と称する)を言う時にも使用される。成長
因子は、また、細胞移動(例えば分裂促進のサイトカイン)を刺激したり、走化
性因子として作用したり、腫瘍細胞の細胞移動または侵襲を抑制したり、細胞の
分化機能を調整したり、アポトーシスに関連したり、細胞の生き残りを促進した
りすることも知られている。このような因子は拡散因子として分泌されることも
あれば、細胞膜内に埋め込まれた状態で存在しているものもある。それらは、し
たがって、オートクリン、パラクリン、ジャクスタクリン(juxtacrine)または
レトロクリン(retrocrine)といった方法で働くことができる。サイトカインは
、成長因子の一種である。
子として働き、また通常のまたは病理学の条件下いずれにおいても個々の細胞及
び組織の機能上の活性を調整する働きをする多様なグループの可溶性タンパク質
およびペプチドのための一般名として使用されている。これらのタンパク質は、
また細胞間の相互作用を直接媒介したり細胞外の生育環境において起こっている
過程を調節する。サイトカインには、以下のものが含まれる;インターロイキン
(最初は、白血球だけが作ると思われた)、リンフォカイン(最初は、リンパ球
だけが作ると思われた)、モノカイン(最初は、単球だけが作ると思われた)、
インターフェロン(最初は、抗ウイルス性反応に関連していると思われた)、コ
ロニー刺激因子(最初は、半固形培地での細胞生長を維持すると思われた)、ケ
モカイン(化学走性に関連していると思われた)、その他のタンパク質である。
生体内では、大部分のサイトカインの発現は厳密に調整されており、これらの因
子は通常、誘導信号に応答して活性化した細胞だけによってつくられる。
く、通常ホルモンと考えられる媒体からサイトカインを区別している大きな特長
は、サイトカインはホルモンとは異なり、特定の腺組織に分化した特殊化した細
胞によってつくられるのではないということ、つまりこれらの媒体の源となるあ
る特定の器官があるわけではないということである。サイトカインが、分泌され
たタンパク質であるということは、発現部位が必ずしも生物学的作用を行う部位
であるとは予測できないことを意味する。いくつかのサイトカインは古典的な酵
素と同一であるということが、それらの一次構造の決定によって判明した(たと
えば、成人型T細胞白血病-由来因子(ADF)、nm23、血小板由来内皮細胞成長因
子(PD-ECGF、またはneuroleukin))。酵素活性を持つという例外の発見が増え
つつあるが、サイトカインはふつう酵素活性を持っていない。サイトカインの生
物学的活性は、いろいろあるが、因子依存性の細胞系を用いて測定されることが
できる。また、サイトカインそのものは、たとえば、抗体を用いた他の検定で測
定されることができる。メッセージ増幅タイピング(Message amplification p
henotyping)は、分子生物学の現代の技法を用いて、サイトカイン特定のメッセ
ンジャーRNAの存在を検出する。
、組織が血管形成を促進する血管形成因子を生じることができることを示唆した
。線維芽細胞成長因子(bFGF)および血管内皮細胞増殖因子(vascular endothe
lial growth factor, VEGF)など、サイトカインおよび他の分子の中にあるいく
つかの血管形成因子が、虚血心筋の血管形成を促進することが生体内で証明され
た(Lopez and Simons, Drug Delivery 3: 143 1996)。これらの因子および化
合物は、細胞特異性や、それらが新しい血管の成長を誘発する機構において異な
っている。それらが血管内皮細胞の移動および増殖を誘発、もしくはコラゲナー
ゼの生産を刺激している可能性がある(例えば、see Klagsbrun, M., and D’Am
ore, P.A., Ann. Rev. Physiol. 53:217-39, 1991)。血管形成の活性を直接測
定できる多くの生物学的測定法がある(Wilting, J., et al., Anat. Embrol. (
Berl) 183:259-71, 1991)。
モダイメリックな、大量にグリコシル化されたタンパク質である(レビューとし
ては、以下のものがある。Ferrara, N., et al.,J.Cell Bio. 47:211, 1991; Fe
rrara, N., et al., Endocrin. Rev. 13:18-32, 1991)。しかしながら、グリコ
シル化は、生物学的活性のためには必要でない。サブユニットは、ジスルフィド
結合により連結される。ヒトの血管内皮細胞増殖因子は、メッセンジャーRNAが
、異なるスプライシングを受けた結果によって、アミノ酸の数で121、165
、189および206のいくつかの分子変異体で存在する。VEGF-B、VEGF-Cおよ
びVEGF-Dを含むVEGFの他のいくつかの変異体が確認されている。アミノ酸189
個の変異体VEGF(VEGF-189)は、血管透過性因子(VPF)と同一のものである。V
EGF-189およびVEGF-206が、大部分は細胞表面または基底膜のヘパリンを含んだ
プロテオグリカンに結合されている一方で、VEGF-121およびVEGF-165は可溶性の
分泌された形態の因子である。ラットおよびウシのVEGFは、ヒトのものよりもア
ミノ酸がひとつ短い。また、ウシとヒトのアミノ酸配列は95%の相同を示す。
8個のシステイン残基の位置は、VEGFおよびPDGFにおいてすべて保存されている
。分子量170〜235 kDaのVEGFに対する高親和性グリコプロテインリセプタ−は、
血管内皮細胞に発現している。VEGFは、かなり血管透過性に影響しており、いく
つかのバイオアッセイにおいて強力な血管形成タンパク質であり、血管内皮細胞
に対して非常に特異性のある細胞分裂促進剤であることが示された。試験管内で
は、2種類の短い形態のVEGFは、太い血管(macrovascular)の内皮細胞の増殖
を刺激するが、他の細胞型の増殖を高める効果は現さない。
することが示された(Harada et al., J. Clin. Invest. 94:623-30, 1994)。bF
GFおよびVEGFは、ヘパリンアルギン酸塩ミクロスフィアおよび埋め込み型浸透ポ
ンプによって、心筋環流の血管周囲への送出しの間、側枝血流量を増加させるこ
とが示された(Lopez and Simmons, 1996, 前出)。
を有する。血管形成成長因子の全身の投与によって、膜性腎症および骨髄サプレ
ッションのような腎性のおよび血液生成末端器官損傷を含む多くの副作用が、血
液動態の効果(Lopez and Simmons, 1996, 前出)と同様に記載された。加えて、
これらの薬剤の全身投与は、休眠中の腫瘍細胞を刺激する懸念を可能性のあるも
のにした。組換え型成長因子タンパク質の全身投与にかかる費用は、また大変高
価なものと考えられる。 本願発明は、上記した事情に鑑みてなされたものであり、その目的は、局所的
に治療目的の血管形成を誘発するための新しい化合物および方法を提供すること
にある。
び方法を提供する。そしてこれらは、心筋に新しい側副の血管(collateral blo
od vessels)を発現させることと、血流量の局所的な回復を達成するための試み
を目的とするものである。本願発明はまた、発作、組織炎症、潰瘍性状況、関節
炎、喘息、腫瘍成長、糖尿病性網膜症および他の状況を含む多数の臨床の疾患に
役立つ新しい化合物と方法を提供する。
合ポリペプチド(この融合ポリペプチドは、コラーゲンに結合することができる
)が、提供される。血管形成調整剤と連結したコラーゲン結合部位を含む融合ポ
リペプチド(この融合ポリペプチドは、コラーゲンに結合することができる)を
コードしている核酸配列もまた提供される。
たコラーゲン結合部位を含む融合ポリペプチドを被検者に投与することによって
、被検者の血流循環を局所的に変更するための方法が提供される。被検者の循環
を局所的に変更するための方法は、血管形成調整剤と連結したコラーゲン結合部
位を含む融合ポリペプチドをコードしている核酸配列の治療として効果的な量を
被検者に投与することによっても、また、提供される。
む融合ポリペプチドと接触させた血管内皮細胞を含んでいる単離された組織を用
いた組織移植が提供される。血管形成調整剤と連結したコラーゲン結合部位を含
む融合ポリペプチドの効果的な量を、単離された組織と接触することによって、
組織移植を準備する方法もまた、提供される。血管形成調整剤と連結したコラー
ゲン結合部位を含む融合ポリペプチドをコードしている核酸配列の効果的な量を
単離された組織と接触させることによって、その核酸配列が前記組織において発
現されることにより、移植片を活性化する方法が更に提供される。
整剤と連結したコラーゲン結合部位を含む融合ポリペプチドを含んでいる製薬組
成物が提供される。薬学的に許容可能なキャリアの中に、血管形成調整剤と連結
したコラーゲン結合部位を含む融合ポリペプチドをコードしている核酸を含んで
いる製薬組成物もまた、提供される。
い限り、単数形で示されている場合であっても(“ひとつの”、“そして”およ
び“その”:英語原文中では、「”a,” ”and,” and “the”」)、複数形を
含むものとする。したがって、例えば、「一つのターゲット細胞」(a target c
ell)には、複数のそのような細胞が含まれるし、「発現ベクター」(the expre
ssion vector)には、ひとつ又はそれ以上のトランスフォーメーションベクター
及び当該技術分野に精通する者にとっての同等物が含まれる。
が属している技術に精通する者によく理解されているのと同じ意味を有する。本
願明細書において記載されているものと同等の或いは類似したいかなる方法、細
胞および遺伝子は本願発明に使用可能であるけれども、以下には、好ましい方法
、装置および材料について説明する。
するように使用できる公開文書中に記載されている細胞株、ベクターおよび方法
論の全部を本願明細書に引用したものとする。このような公開文書は、本願発明
の出願日よりも前の開示だけのために単に提供される。このことは、本願明細書
において、発明者が従来の発明によって、かかる開示に先だつ権利がないという
告白として解釈されるものではない。
プチドを提供する。本願発明との関連において、「ポリペプチド」という単語は
、モノマーであるアミノ酸残基が、互いにアミド結合で一緒に結合されたポリマ
ーのことを意味する。アミノ酸がαアミノ酸である場合には、L型光学異性体ま
たはD型光学異性体のいずれも使用できるが、L型光学異性体が好ましい。「ポリ
ペプチド」または「タンパク質」という単語は、本願明細書において、いかなる
アミノ酸配列も含み、かつグリコプロテインのような修飾された配列をも含む。
「ポリペプチド」という単語は、特に自然に生じているタンパク質と共に、組換
えまたは化学合成によって形成されたタンパク質をも含んでいる。「フラグメン
ト」という単語は、ポリペプチドの一部分のことである。「フラグメント」とい
う単語は、少なくとも一つの役立つエピトープを呈するポリペプチドの一部分の
ことを意味する。「ポリペプチドの機能的断片」という語句は、そのポリペプチ
ドの活性を保持するポリペプチドのすべての断片を意味する。例えば、血管形成
調整剤の機能的断片には、血管新生活性を保持するフラグメントを含む。例えば
、生物学的に機能的な断片とは、大きさにおいて広い範囲を持つものであり、抗
体分子に結合可能なエピトープ程度の小さなポリペプチドフラグメントから、細
胞に対してその細胞型を変化させるように誘起またはプログラミングできる程度
に大きなポリペプチドまでを意味している。「エピトープ」とは、抗原に対して
接触することにより発現される免疫グロブリンに結合可能なポリペプチドの領域
のことである。
実質的に同じアミノ酸配列を有することができる。「実質的に同じであるもの」
とは、アミノ酸配列が全く同一ではないが、その大部分が同じであって、元のア
ミノ酸配列が有する機能上の活性を保持しているアミノ酸配列のことを意味する
。機能上の活性の例としては、あるフラグメントが、そのフラグメントの元であ
る完全な長さのポリペプチドを認識する抗体に対して結合するであろうという例
が挙げられる。一般的に二つのアミノ酸配列が少なくとも85%同一であるか、
またはその配列中に保存的バリエーションがある場合には、両アミノ酸配列は、
「実質的に同じである」か、「実質的に同質である」(substantially homologo
us)と言える。例えばBLASTプログラム(Altschul et al.,1990)のようなコン
ピュータプログラムは、配列の同一性を比較するために用いられるし、ALOMとい
うコンピュータプログラム(Klein et al.,1985)は、アミノ酸配列が、潜在的に
外周部分(potential peripheral)に位置するものであるか、膜貫通部位(memb
rane-spanning)であるかを分析する際に使用できる。
物学的に同等な他のアミノ酸残基に置き換えられていることを意味する。保存的
バリエーションには、イソロイシン、バリン、ロイシンおよびメチオニンのよう
な疎水性残基が互いに置換されること、極性残基が他の極性残基に互いに置換さ
れること、アルギニンとリジンとが互いに置換されること、グルタミン酸とアス
パラギン酸とが互いに置換されること、グルタミンとアスパラギンとが互いに置
換されること等の例がある。「保存的バリエーション」には、また、アミノ酸置
換後のポリペプチドに対して発現された抗体が、アミノ酸置換前の元のポリペプ
チドに対しても反応性を持つという意味も含んでいる。
タンパク質」とは、2またはそれ以上の異なるタンパク質に由来するアミノ酸配
列の部位を含むポリペプチド、または同じタンパク質に由来する2またはそれ以
上の領域であって通常は隣接しない部分を含むポリペプチドである。「コラーゲ
ン結合ドメイン」とは、コラーゲンに結合できる全てのポリペプチド又はそれら
の部分である。いくつかのコラーゲン結合ドメインは、従来技術において公知で
ある(Cruz, M.A., et al., Interaction of the von Willebrand factor (vWF)
with collagen: Localization of the primary collagen-binding site by ana
lysis of recombinant vWF A domain polypeptides, J. Biol. Chem., 270:1082
2-10827, 1995; Hoylaerts, M.F., et al., von Willebrand factor binds to n
ative collagen VI primarily via its Al domain, Biochem. J., 324:185-191,
1997; Lankhof, H., et al., A3 domain is essential for interaction of vo
n Willebrand factor with collagen type III, Thrombos Haemostas, 75;950-9
58, 1996)。一つの実施形態では、コラーゲン結合ドメインは、フォンビルブラ
ント因子(von Willebrand factor)のコラーゲン結合ドメインであり、それは
露出された血管のコラーゲンの認識に関与している(Takagi, J., et al., Bioc
hemistry 32:8530-4, 1992; Tuan, T.L., et al., Conn. Tiss. Res. 34:1-9, 1
996; Gordon, E.M., et al., Hum. Gene Ther. 8:1385-1394,上記の全ての文献
は、参照によって、本願明細書において組み込まれたものとする。)。フォンビ
ルブラント因子は、遺伝的な血友病の研究の止血因子として最初に同定され(Wa
gner, Ann. Rev. Cell. Biol. 6:217, 1990)、その後、血管病変に対する血小板
の凝集を行わせることによって、生体防御反応(vital surveillance function
)を誘導するものであることが示された(Ginsburg and Bowie, Blood 79:2507-
2519, 1992)。デカペプチドWREPSFMALS(配列番号1)は、フォンビルブラント
因子をコラーゲンに結合するためのキーであることが同定された(Takagi, J.,
et al., 前出, 1992; Tuan, T.L. et al., 前出, 1996)。本願発明において使
用されるが、コラーゲン結合ドメインを同定する試験方法は、従来技術において
公知である(Takagi, J., et al., 前出, 1992; Tuan, T.L. et al., 前出, 199
6)。
る(Hall et al., Hum. Gene. Ther., 8:2183-2192, 1997)。キメラタンパク質
が、コラーゲン結合能力を持っているか否かを判定するために、組換え型エンベ
ロープ作成物(SU-ECB-CEE+)が、PCRにより準備され、大腸菌によって発現され
た。約1μgのタンパク質が、コラーゲンコートされたマイクロタイタープレー
トにアプライされ、結合のために20分間放置された後、所定の条件で洗浄され
、修飾されたELISA法によってコラーゲン結合タンパク質の検出がなされた。5
種類の判定実験によって、免疫反応性のキメラタンパク質(SU-ECB-CEE+)が、P
BS、1M NaCl、1Mおよび2Mの尿素による洗浄後にも、コラーゲンに結合された
ままであったことが判明した。なお、そのキメラタンパク質をコラーゲンマトリ
ックス(レーン5-8)から遊離させるには、3M以上の濃度の尿素が必要であった
。コラーゲンコートされたマイクロタイタープレート及び、処置または未処置・
傷ついたまたは傷ついていない大動脈の、またはIVCセグメント(IVC segments
)の凍結切片は、1:1000に希釈された一次抗体によって、室温で4時間、
インキュベートされた。ラット免疫グロブリンGに対するビオチン化ヤギ抗体が
、アプライされた後に、ストレプトアビジンとホースラディッシュ・ペルオキシ
ダーゼとの結合物が続いてアプライされた。ジアミノベンジディン(diaminoben
zidine, DAB)が発色物質(chromogen)として使用され、マイクロタイタープレ
ートの発色促進のために塩化ニッケルが添加された。組織のスライドは、ヘマト
キシリンによって、逆染色(counterstained)された。
かなる物質をも含む。例えば、血管形成調整剤には、サイトカイン、成長因子、
酵素、酵素のインヒビター(enzymatic inhibitor)、または抗体が含まれる。
「サイトカイン」とは、ナノモルあるいはピコモルの濃度で液性の調節因子とし
て働くポリペプチドのことであり、通常のまたは病理的な条件下において、個々
の細胞および組織の機能上の活性を調整することができる。サイトカインは、直
接に細胞間の相互作用を調整することができ、および/または細胞外の環境にお
いて起こっている事象を制御することができる。サイトカインには、インターロ
イキン、リンフォカイン、モノカイン、インターフェロン、コロニー刺激因子お
よびケモカインに加えて、種々のタンパク質が含まれる。
、例えば、サイトカインや成長因子がある。更に具体的には、アンジオポエチン
1(angiopoeitin-1)、上皮細胞成長因子(EGF)、肝細胞成長因子(HGF)、腫
瘍壊死因子(TNFα)、血小板由来内皮細胞成長因子(PD-ECGF)、血小板由来成
長因子(PDGF)、インスリン様増殖因子(IGF)、インターロイキン8、成長ホ
ルモン、アンジオポエチン、血管内皮細胞増殖因子(VEGF)、酸性または塩基性
線維芽細胞成長因子(FGFs)、トランスフォーミング成長因子(TGFα)、CYR61
(Babic et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95:6355, 1998; Kireeva et al
., Mol. Cell. Biol. 16:1326, 1996)および血小板由来成長因子(PDGF)を含む
が、これらによって限定されるものではない。これらの各々の分子は、生体内に
おいて、血管形成を誘発することが示されている。血管形成活性を示す他の類似
した分子としては、ヘパリン結合性増殖因子(HBGFs)がある。ポリペプチド性
の血管形成因子に加えて、他の血管形成調整剤が知られている。例えば、プロス
タグランジンE1およびE2(これらは、脂質由来の血管形成因子である)は、血管
形成活性と共に、公知の炎症細胞誘引物質である(J. Natl. Cancer Inst. 69 4
75-482, 1982)。加えて、ニコチンアミドは、トリ角膜またはトリ細胞接着分子
(CAM)アッセイにおける実験を行うと、血管形成活性を示す(Science 236, 84
3-845, 1987)。加えて、ネガティブな血管形成調整分子(negative angiogenic
regulatory molecules)としては、アンジオスタチン(O’Reilly et al., Cel
l 79:315, 1994);エンド−スタチン(O’Reilly et al., Cell. 88:277, 1997)
;およびトロンボスポンジン(Good et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87:
6624, 1990)が含まれる。
コラーゲン結合ドメインを含んでいる融合ポリペプチドをコードする単離された
核酸配列を提供する。「ポリヌクレオチド」または「核酸配列」とは、少なくと
も10塩基の長さを持つ核酸が連結されたものを示す。「単離された核酸配列」
という語句は、それらが由来する組織において自然に発生する遺伝子としては連
続している(5‘側から3’側に)けれども、必ずしもいつも連続しているとい
うわけではないポリヌクレオチドのことを意味する。従ってこの語句は、例えば
、ベクター;プラスミドやウイルス中における独自の繰り返し;原核生物または
真核生物のゲノムDNA中に組み込まれている組換えDNAや、他の配列から独立して
いる別の分子(例えばcDNA)として存在する組換えDNAを含む。本願発明のヌク
レオチドは、リボヌクレオチド、デオキシリボヌクレオチド、またはいずれのヌ
クレオチドの修飾体をも含む。また、ヌクレオチドは、一本鎖または二本鎖のDN
Aを含む。
合ドメインをコードする核酸配列は、操作可能な状態で発現を調節する配列に結
合することができる。「操作可能な状態で結合される」とは、連結されているコ
ンポーネントが、互いが発現するように意図された方法によって共同する、とい
うことを意味する。あるコーディング配列が発現調節配列に操作可能な状態で結
合されていると、そのコーディング配列は、その発現調節配列の調節の下で発現
がなされるということになる。本明細書中において、「発現調節配列」とは、そ
の配列が操作可能な状態で結合されている別の核酸配列の発現を調節する核酸配
列のことを意味する。発現調節配列が別の核酸配列に操作可能な状態で結合され
ていると、その発現調節配列は、その別の核酸配列の転写を、また好ましくは翻
訳をも、制御及び調節する。したがって、発現調節配列には、適当なプロモータ
、エンハンサ、転写ターミネータ、タンパク質をコードする遺伝子における開始
コドン(すなわちATG)、イントロンのためのスプライシングシグナル、mRNAの
適切な翻訳を許可するための遺伝子の正しい解読枠の維持およびストップコドン
が含まれる。「調節配列」とは、最小の意味では、その存在が発現に影響を与え
るコンポーネントを含み、また、その存在が有利である(例えばリーダー配列や
、融合パートナー配列(fusion partner sequences))ような付加的なコンポー
ネントを含むことができる。発現調節配列には、プロモータが含まれる。
本明細書中においては、プロモータ要素には、細胞タイプ特異的または組織特異
的または外部からの信号や調節剤によってプロモータ依存的に遺伝子の発現を制
御するに十分なプロモータ要素もまた含んでおり、そのような要素は遺伝子の5
’または3’の領域に設置されるだろう。構成的な(constitutive)または誘導
的な(inducible)プロモータは、いずれも本願発明に含まれる(例えば, Bitte
r et al., Methods in Enzymology 153:516-544, 1987)。例えば、バクテリア
のシステムにおいてクローニングを行う場合には、誘導的なプロモータとして、
バクテリオファージγのpL、plac、ptrp、ptac(ptrp-lac のハイブリッドプロ
モータ)などのプロモータが使用されるだろう。哺乳動物細胞のシステムにおい
てクローニングを行う場合には、哺乳動物細胞由来のプロモータ(例えば、メタ
ロチオネインプロモータ)や、哺乳動物ウイルス由来のプロモータ(例えば、レ
トロウイルスの末端反復配列(LTR);アデノウイルス後期プロモータ;ワクシ
ニアウイルス7.5Kプロモータ)が使用されるだろう。組換えDNAや合成手法によ
って作成されたプロモータは、本願発明の核酸配列の転写を行うために提供され
るだろう。
、組換え発現ベクターに挿入されるだろう。「組換え発現ベクター」という単語
は、プラスミド、ウイルス、および当該技術分野において、本願発明の融合ペプ
チドをコードする核酸配列を挿入または移入することによって、その中に導入す
ることが可能な他のもの(vehicle)を含んでいる。発現ベクターは典型的には
、複製開始点、プロモータおよび、その発現ベクターが導入された細胞の表現型
の選択を許容する特別な遺伝子を含んでいる。本願発明ために適切なベクターと
しては、バクテリアの発現のためにはT7に基づく発現ベクター(Rosenberg, et
al., Gene 56:125, 1987)、哺乳動物細胞の発現のためにはpMSXND発現ベクター
(Lee and Nathans, J. Biol. Chem. 263:3521, 1988)、昆虫細胞の発現のため
にはバキュロウイルス由来のベクター、その他にカリフラワーモザイクウイルス
(CaMV);タバコモザイクウイルス(TMV)等が含まれるが、これらによって制
限されるものではない。
的または誘導的なプロモータ、転写エンハンサ要素、転写ターミネータ等が、発
現ベクターにおいて、使用されるであろう(例えば、 Bitter, et al., Methods
in Enzymology 153:516-544, 1987)。これらの要素は、当業者にとって公知の
ものである。
が使用されるだろう(総説として、Current Protocols in Molecular Biology,
Vol. 2, Ed. Ausubel, et al., Greene Publish. Assoc. & Wiley Interscience
, Ch. 13, 1988; Grant, et al., “Expression and Secretion Vectors for Ye
ast,” in Methods in Enzymologv, Eds. Wu & Grossman, Acad. Press, N.Y.,
Vol. 153, pp.516-544, 1987; Glover, DNA Cloning, Vol. II, IRL Press, Was
h., D.C., Ch. 3, 1986; and “Bitter, Heterologous Gene Expression in Yea
st,” Methods in Enzvmologv, Eds. Berger & Kimmel, Acad. Press, N.Y., Vo
l. 152, pp. 673-684, 1987; and The Molecular Biology of the Yeast Saccha
romyces, Eds. Strathern et al., Cold Spring Harbor Press, Vols. I and II
, 1982.等がある)。ADHまたはLEU2のような構成的なイーストプロモータや、GAL
のような誘導的なプロモータが使用されるだろう(“Cloning in Yeast,” Ch.
3, R. Rothstein In: DNA Cloning Vol.11, A Practical Approach, Ed. DM Glo
ver, IRL Press, Wash., D.C., 1986)。あるいは、外来性DNA配列のイーストク
ロモソームへの組み込みを促進するベクターが、使用されるだろう。
いう単語は、新しいDNA(すなわち、その細胞にとっては外部性DNA)を導入する
ことによって、その細胞が永久的な遺伝子変化を起こすことを意味している。細
胞が哺乳動物細胞である場合には、永久的な遺伝子変化は、その細胞のゲノム中
にDNAが導入されることによって、通常には達成される。「形質転換細胞」(tra
nsformed cell)という単語は、その細胞(あるいは、その細胞の祖先の細胞)
が、組換えDNA技術によって、コラーゲン結合ドメインに結合された血管形成調
整剤(またはそのフラグメント)からなる融合タンパク質をコードしているDNA
分子が導入された細胞であることを意味している。組換えDNAで宿主細胞を形質
転換することは、当該技術に精通する者にとって、よく知られているように、一
般的な技法によって行われるだろう。宿主が原核細胞(例えば大腸菌)であると
きには、DNAの取り込み能力を有するコンピテント細胞は、指数増殖期の後に集
められた細胞を当該技術においてよく知られる手順によって、塩化カルシウム法
によって処理することで準備することができる。また塩化カルシウムの代わりに
、塩化マグネシウムまたは塩化ルビジウムを使用することもできる。トランスフ
ォーメーションは、また、宿主細胞のプロトプラストを作成した後に、またはエ
レクトロポレーションによって実行することができる。
している核酸の発現によって得ることが可能である。そのような原核生物として
は、本願発明の融合タンパク質をコードするバクテリオファージ、プラスミドDN
A、コスミドDNA発現ベクターによって形質転換された微生物(例えばバクテリア
)が挙げられるが、これによって限定されるものではない。融合タンパク質は、
試験管内での試験において、大腸菌を大規模スケールで培養することによって、
発現させることが可能である。その融合タンパク質のバクテリアからの精製は、
ニッケルキレートクロマトグラフィを用いて、一つの工程で純化するための標識
(tags)を配列中に持たせることによって単純化できる。その作成物にもまた、
融合ポリペプチドの単離を単純化するために標識を含ませることができる。例え
ば、6個のヒスチジン残基のようなポリヒスチジン標識は、蛍光性タンパク質の
アミノ末端に組み込まれることができる。ポリヒスチジン標識によって、ニッケ
ルキレートクロマトグラフィを用いて、一つの工程でタンパク質の単離を効率よ
く行うことができる。本願発明の融合ポリペプチドは、また、タンパク質の回収
を補助する目的で、切断部位を含むように設計されることができる。また別法と
しては、本願発明の融合ポリペプチドは、その位置で(in situ)アッセイを行
うために、所望の宿主細胞中において、直接に発現させることもできる。
ェクション、エレクトロポレーションのようなよく知られた機械的な手法、リポ
ソーム内に封入されたプラスミドの挿入、またはウイルスベクターが、DNAのト
ランスフェクションに使用されるだろう。真核細胞には、また、本願発明の融合
ポリペプチドをコードしているDNAと、選択可能な形質(例えば単純ヘルペスウ
イルスのチミジンキナーゼ遺伝子)をコードしている第2の外部DNA分子とを共
にトランスフェクションすることができる。別の方法としては、真核生物ウイル
スベクター(例えば、シミアンウイルス40(SV40)またはウシパピローマウ
イルス)を使用して、一時的に真核細胞にウイルスベクターを感染させて形質を
転換させ、タンパク質を発現させることが可能である(Eukarvotic Viral Vecto
rs, Cold Spring Harbor Laboratory, Gluzman ed., 1982)。好ましくは、本願
明細書において記載されているように、真核細胞が宿主細胞として利用される。
れた後の適当な翻訳後修飾が生じるのを許容する。転写一次産物の適切なプロセ
シング(例えばグリコシル化、リン酸化)を行ったり、都合よく遺伝子産物を分
泌するための細胞内機構を持っている真核細胞は、蛍光性指示薬によって発現を
確認できるような宿主細胞として使用され得る。かかる宿主細胞株としては、CH
O、VERO、BHK、HeLa、COS、MDCK、Jurkat、HEK-293およびWI38が挙げられるが、
これに限定されるものではない。
発現系(stable expression)が好ましい。そのためには、ウイルスの複製開始
点を含む発現ベクターを使用するよりはむしろ、宿主細胞が、適切な発現調節要
素(例えば、プロモータ、エンハンサ、配列、転写ターミネータ、ポリアデニル
化部位など)によって制御され、かつ本願発明の融合タンパク質をコードしてい
るcDNAと、選択可能なマーカーとによって、形質転換されていることが好ましい
。組換えプラスミドにおける選択可能なマーカーは、細胞に対して選択に対する
耐性を授け、安定してプラスミドをそれらのクロモソームに組み込んで、順番に
クローンをつくることが可能でありかつ細胞株として確立できるような細胞コロ
ニー(foci)を形成することができるようなものが好ましい。例えば、宿主とな
る細胞に対して外来性DNAを導入し、その細胞を1〜2日間を栄養素の豊富な培
地(enriched media)で培養した後に、選択用培地に変更して培養する。次に示
すような多くの選択系が使用されるであろう。例えば、単純ヘルペスウイルスチ
ミジンキナーゼ(Wigler, et al., Cell 11:223, 1977)、ヒポキサンチン−グア
ニンホスホリボシルトランスフェラーゼ(Szybalska& Szybalski, Proc. NatI. A
cad. Sci. USA, 48:2026, 1962)、およびアデニンホスホリボシルトランスフェ
ラーゼ(Lowy, et al., Cell, 22:817, 1980)の選択系においては、選択用の遺
伝子は、それぞれtk-、hgprt-、およびaprt-である。但し、本願発明は、上記の
例によって制限されるものではない。また、代謝系をブロックする選択系(anti
metabolite resistance)として、dhfrはメトトレキセートへの耐性を与える遺
伝子(Wigler, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 3567, 1980; O’Hare
, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 8:1527, 1981);gptはミコフェノール
酸への耐性を与える遺伝子(Mulligan & Berg, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 7
8:2072, 1981);neoはアミノグリコシドG-418への耐性を与える遺伝子(Colber
re-Garapin, et al., J. Mol. Biol., 150:1, 1981);およびhygroはハイグロ
マイシンへの耐性を与える遺伝子(Santerre, et al., Gene 30:147, 1984)で
ある。最近、更なる選択可能な遺伝子が発見されている。例えば、trpBは、細胞
がトリプトファンの代わりにインドールを利用することを許容する;hisDは、細
胞がヒスチジンの代わりにヒスチノールを利用することを許容する(Hartman &
Mulligan, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 8047, 1988);および、ODC(オル
ニチンデカルボキシラーゼ遺伝子)は、オルニチンデカルボキシラーゼ阻害剤で
ある2-(ジフルオロメチル)-DL-オルニチン(DFMO)に対する耐性を与える(Mc
Conlogue L., In: Current Communications in Molecular Biology, Cold Sprin
g Harbor Laboratory, ed., 1987)。
離または精製の技術については、従来より公知の手段、例えばクロマトグラフ分
離、および(モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、または抗原を使用した
)免疫学的な分離のようないかなる手段にもよって、行うことができるだろう。
を提供する。被検者には、いかなる哺乳類(例えば、ハツカネズミ、ラット、ウ
サギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ヒツジおよびヒト)も含む。好ましい実施形態
では、被検者はヒトである。本願発明の方法は、血管形成調整剤を使用して治療
することができる疾患を有する被検者において、局所的な循環を変更するために
使用されることができる。「治療」(”treatment,”)、「治療のため与える」
(”treating,”)、「治療する」(”treat”)等の単語は、本願明細書中にお
いて、通常には、所望の薬理学的および/または生理学的効果を得ることを意味
するために使用される。その効果とは、完全にまたは部分的に疾患またはそれら
の症状を防ぐ観点からの予防的なもの、および/または、疾患の不完全なまたは
完全な安定化または疾患および/またはその疾患に由来する副作用の治癒を意味
している。本願明細書において、「治療」とは、被検者(特に、ヒト)の疾患に
関するあらゆる治療であり、以下のものを含む:(a)ある疾患または症状が生じ
やすいけれども未だその疾患または症状には至っていない被験者について、その
ような疾患または症状が生じるのを防止すること;(b)疾患の症状を抑制し、す
なわち、その疾患の進行をくい止めること;または、(c)疾患の症状を解消する
、すなわち疾患または症状の原因を取り除くこと。本願発明の方法を使用して治
療することができる疾患は、以下の疾患を含むが、これに限定されるものではな
い:心筋梗塞や末梢の動脈疾患のような心臓血管系疾患、バルーン血管形成術後
の血管の再狭窄、潰瘍性および炎症性疾患、遺伝子欠損および腫瘍(下記を参照
)。加えて、本願発明の方法は、心筋レーザ処理血管再生術(transmyocardial
laser revascularization)の効果増強、内皮幹細胞の単離および拡大の促進、
または血管移植片への内皮細胞の増殖を促進するために使用されることができる
。
、本願発明の方法は、ヒトまたは他の被検者の潰瘍部位において、組織回復また
は再生成を援助する際に使用されることができる。別の態様においては、本願発
明は、組織工学の処理の間に、組織の成長を促進する目的のために有用である。
「組織工学」という単語は、身体の組織および器官の作成、増強または置換のた
めに、合成物または自然材料と協力して、生物に対する人工的補充物を創作、デ
ザイン、および製作することを意味する。したがって、その方法は、病気となっ
たり損傷を受けた組織を修復または置換するために、身体の内部における組織の
デザインと成長とを増強する目的で使用されることができる。特別な、しかし本
願発明を限定することにはならない実施形態としては、熱傷および潰瘍の処置と
しての治療のために使用される移植用の皮膚移植片の成長を促進する際に本願発
明の方法を用いることができる。
が生きて活動している器官の機能に障害を生じさせることは、臨床的には最も顕
著なものである。通常の組織と悪性の組織とは、一つの細胞のレベルにおいても
組織のレベルにおいても、同じ増殖特性を共有することができるので、正常組織
の成長に関する概念が、悪性腫瘍組織にも適用できる。腫瘍という疾患は、組織
の成長の調節が乱されている疾患であるのと同程度に、細胞の成長の調節が乱さ
れている疾患でもある。腫瘍の増殖特性としては、新しい細胞の生産が細胞死を
上回るようになっており;腫瘍性の状態では、自己複製を経て増大する幹細胞の
比率が増加し、通常であれば成熟するように進行する幹細胞の比率が減少すると
いう傾向がある(McCulloch, E.A., et al., “The contribution of blast cel
l properties to outcome variation in acute myeloblastic leukemia (AML) ,
Blood 59:601-608, 1982)。
ターンが変化することを意味する。血流量のパターンの変化は、一つの血管の形
状または形態が変化することによって、または血管のパターンが変化することに
よって引き起こされることがあり得る。局所的に循環を変更するためのひとつの
手段は、側枝血管(collateral blood vessels)を形成することである。局所的
に循環を変更するための別の手段は、血管内皮細胞の分裂を促進し、または血管
新生を誘発することである。「血管内皮細胞」とは、内皮を構成している細胞の
ことであり、循環系の内部表面に沿って配置され単なるへん平形状の細胞が単層
となっているものである。これらの細胞は細胞分裂を行うための能力を保持して
いるものの、その増殖は非常にゆっくりとしており、標準状態の下では、おそら
く年に一度程度の細胞分裂しか行わない。血管内皮細胞の増殖は、S期にある細
胞をトリチウムチミジンでラベルすることにより示されることができる。通常の
血管において、ラベルされる血管内皮細胞の比率は、特に動脈が枝分かれしてい
る部位で高いが、それは、ここでの血流の乱れ及び消耗が、血管内皮細胞のター
ンオーバーを刺激するためのようである(Goss, R.J., The Physiology of Grow
th, Academic Press, New York, pp.120-137, 1978)。このように通常の血管内
皮細胞は静止性、すなわち分裂していないので、以下に示すように、血管形成を
行っている血管内皮細胞からは、分離して識別することが可能である。
おいて重要なものである。傷を修復する間や、腫瘍を形成する場合のように、必
要が生じると、血管内皮細胞は生体内において新しいキャピラリ(細い管)を形
成する。新しい血管の形成は、「血管形成」または「血管新生」と呼ばれており
、この過程には、内皮細胞に対して分裂促進または化学的誘因を行う分子(血管
形成因子、または血管新生因子)が関与している(Klagsburn、前出)。血管形
成の際には、血管内皮細胞が、既に存在しているキャピラリから新しい血管を形
成することができるように移動してくる、すなわち、ある血管の内皮細胞は、そ
の血管が延長するようなやりかたで、移動することを許容される(Speidel, C.C
., Am J. Anat. 52:1-79)。試験管内での実験は、血管内皮細胞の増殖および移
動を確認している;培養されている血管内皮細胞は増殖することができ、および
自発的に毛細管を形成することができる(Folkman, J., and Haudenschild, C.,
Nature 288:551-56, 1980)。
は、本願明細書中において、血管形成(上記の定義の通り)を行っている血管内
皮細胞(上記の定義の通り)について、上記の言い方を相互に取り換えながら、
使用するものとする。したがって、血管形成段階の血管内皮細胞は、通常の条件
下のように、粗く言えば年に一度程度の細胞分裂を行っている血管内皮細胞と比
較すると、すさまじい速度で増殖している血管内皮細胞のことである。そのよう
な血管内皮細胞の分裂スピードは、通常の血管内皮細胞の分裂スピードと比べる
と、2,5ないし10倍程度だろうが、それは年齢、患者の状態、腫瘍のタイプ
、血管疾患のタイプなどの要因に従って、大きく変わり得る。通常の血管内皮細
胞と血管形成段階の血管内皮細胞との分裂スピードは大きく異なるので、判別す
ることができるし、生物学上も重要な相違であるので、この細胞の二つのタイプ
は、区別することができる。「調和している血管内皮細胞」、「通常のまたは静
止性の血管内皮細胞」等の言い方によって、(通常の条件下において)同じ組織
の内部で通常の静止性の血管内皮細胞としてとどまっており、その集団のあるも
のは血管形成中であり、またあるものは静止性であるというものを示している。
う意味である。「剤」とは、局所循環を変更できる機能を有する如何なる分子(
例えばタンパク質、核酸または医薬品)をも意味している。
いかなる剤をも意味している。「調整する」とは、血管形成、または局所的な循
環を必要に応じて誘起または増強できるということを意味している。あるいは、
血管形成調整剤は、局所的な循環に影響を及ぼすために、血管形成を抑制するこ
ともあるかも知れない。例えば、血管形成調整剤は、サイトカイン、成長因子、
酵素、酵素のインヒビター(enzymatic inhibitor)または抗体であり得る。
備える融合ポリペプチドを被検者に投与することにより、その被検者の局所的な
循環を変更する方法が提供される。本願発明の制約組成物を「投与する」とは、
当業者にとって知られているいかなる手段によっても達成されるだろう。
の投与単位としては、錠剤、カプセルおよび坐薬である。患者の治療のためには
、化合物の活性、投与の方法、疾患の性質および程度、患者の年齢および体重に
従って、一日当たりの投与量を異ならせることが必要である。しかしながら、特
定の状況の下では、初期に設定された投与量よりも、より高いまたはより低い投
与量を与えることも適切となり得るだろう。1日量の投与は、投与単位量あるい
は細かく分割された細投与単位量を合わせてその投与単位量として、単独投与に
よって与えることができるし、再分割された投与量を適当な間隔を設けながら複
数回に渡って投与することもできる。
与とは、治療が必要とされる生理学的な部位またはその近くに、本願発明の組成
物を送り込むことである。本願発明の製薬組成物の投与方法としては、一般的に
は局所的に、つまり静脈内投与、経口投与、非経口投与(parenterally)、埋め
込み型投与(implants)とされるが、原理的には直腸内投与の方法も可能である
。製薬組成物の固体または液体としての適切な形態としては、例えば顆粒、粉末
、タブレット、コーティング錠、(ミクロの)カプセル、坐薬、シロップ、エマ
ルジョン、懸濁剤、クリーム、エアロゾル、アンプルに封入された液滴または注
射可能な溶液、活性のある薬剤を徐々に放出するように調整された物質(prepar
ations with protracted release of active compounds)があるし、更には上記
の形態については、製法賦形剤および/または添加剤、例えば崩壊剤、結合剤、
コーティング剤、膨潤剤、潤滑剤、香料、甘味料または可溶化剤のようなものを
慣習的に使用することもできる。製薬組成物は、様々なドラッグデリバリーシス
テムを用いながら使用することができる。現在のドラッグデリバリーシステムに
ついては、ランガーの短い総説(Science, 249:1527-1533, 1990)がある。この
総説の内容については、本願明細書に引用したものとする。
効な用量」または「循環を調節するための量」により意味される。この使用のた
めに効果的な量は、もちろん、疾患の状態、体重および患者の一般的な状態によ
って決まる。通常は、生体外で(in vitro)使用される供与量は製薬の組成が投
与されるその場所における(in situ)投与量に対して役立つガイダンスを提供
するだろう、そして動物モデルは特定の疾患の治療のための効果的投与量を判定
するために使用されるだろう。種々の考慮は、例えば、ギルマンほか編集、グッ
ドマン・ギルマン治療のための薬理学的基礎(Goodman And Gilman’s: The phar
macological Bases of Therapeutics, 8th ed., Pergamon Press, 1990)及び、
レミントンの薬学(Remington’s Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack P
ublishing Co., Easton, Pa., 1990)に記載されている。それぞれの著書は、本
願明細書において、引用したものとする。
える融合ポリペプチドをコードしている核酸配列の薬理的有効量を投与すること
によって、被検者の循環を局所的に変更するための方法を提供する。かかる治療
は、疾患を有している細胞に対して生体内で(in vivo)、血管形成調整剤に連
結されるコラーゲン結合ドメインを備える融合ポリペプチドをコードしている治
療用ポリヌクレオチドの導入によって、または、その治療用ポリヌクレオチドを
エクソビボ(ex vivo)で細胞内に導入した後にその細胞を再び患者に戻すこと
によって、その治療の効果を達成するだろう。この治療用ポリヌクレオチドの送
り込み(delivery)は、キメラウイルスなどの組換え発現ベクターやコロイド分
散系を使用して達成されることができる。血管形成調整剤に連結されるコラーゲ
ン結合ドメインを備える融合ポリペプチドをコードしているポリヌクレオチド配
列の治療のための送り込みは、特に目標に到達するようにターゲット化されたリ
ポソームの使用によって達成される。
、本願明細書において教示するように、アデノウイルス、ヘルペスウイルス、ワ
クシニアを含み、好ましくはレトロウイルスのようなRNAウイルスを含む。好ま
しくは、レトロウイルスのベクターは、齧歯類(murine)または鳥類(avian)のレ
トロウイルスの誘導体である。単一の異種遺伝子を導入することが可能なレトロ
ウイルスのベクターの実施例としては、以下のものが挙げられるが、これに限定
されるものではない:モロニーマウス白血病ウイルス(Moloney murine leukemi
a virus 、MoMuLV)、ハーベイマウス肉腫ウイルス(Harvey murine sarcoma vi
rus 、HaMuSV)、マウス乳癌ウイルス(murine mammary tumor virus、 MuMTV)
およびラウス肉腫ウイルス(Rous Sarcoma Virus 、RSV)。被検者がヒトである
場合、テナガザル白血病ウイルス(the gibbon ape leukemia virus、GaLV)の
ようなベクターを利用することが好ましい。他のレトロウイルスのベクターは、
多くの遺伝子を組み込むことができる。遺伝子導入された細胞を同定すること及
びそのような細胞が生き延びることが可能であるために、これらのベクターの全
ては選択可能なマーカー用遺伝子を転送又は組み込むことができる。たとえばあ
る特定の特異的な目的細胞上のリセプタのためのリガンドをコードする別の遺伝
子と一緒に、ウイルスベクターに本願発明の融合ポリペプチドをコードしている
核酸配列を挿入することによって、そのベクターは所定の細胞に対して特異的な
ものとなる。レトロウイルスのベクターは、例えば糖、グリコリピドまたはタン
パク質を結合させることによって、所定のターゲットに対して特異的なものとす
ることができる。好ましいターゲッティングは、レトロウイルスベクターをター
ゲットに特異的なものとするために抗体を使用することにより達成される。当該
技術分野に精通した人々であれば、過度の実験によることなしに、レトロウイル
スゲノムに挿入されることが可能であり、かつ血管形成調整剤に連結されるコラ
ーゲン結合ドメインを備える融合ポリペプチドをコードしているポリヌクレオチ
ド配列を標的特異的に輸送することを可能とするために、ウイルスエンベロープ
に取り付けられることが可能であるような特定のポリヌクレオチド配列を容易に
確認できるだろう。
子を生じるために適切な援助を必要とする。この援助は、例えば、LTR(long
terminal repeat)中の調節遺伝子の制御のもとでレトロウイルスの構造遺伝子の
全てをコードするプラスミドを含むヘルパー細胞株を使用することにより提供で
きる。これらのプラスミドは、カプシド形成のためのRNA転写物を認識するため
のパッケージング機構を可能とするヌクレオチド配列を欠損している。そのよう
なパッケージングシグナルを欠損しているヘルパー細胞株としては、例えばQ2、
PA317およびPA12があるが、これらの例に限定されるものではない。これらの細
胞株では、ゲノムがパッケージングされないので、そのような細胞株は、空のビ
リオンを生じる。もしレトロウイルスベクターが、パッケージング信号は正常で
あるけれども、構造遺伝子が他の目的遺伝子によって置き換えられている細胞に
導入されると、そのベクターはパッケージングされて、ベクターウイルス粒子が
生産される。
ン酸カルシウムトランスフェクション法によって、レトロウイルスの構造遺伝子
であるgag、polおよびenvをコードしているプラスミドを直接にトランスフェク
ションすることができる。次に、これらの細胞には、目的の遺伝子を含んでいる
ベクタープラスミドをトランスフェクションする。結果として生じる細胞は、培
地中にレトロウイルスベクターを放出する。
のシステムとしては、コロイド分散系がある。コロイド分散系の例として、巨大
分子複合体、微細カプセル(nanocapsules)、ミクロスフィア、ビーズおよび脂
質に基づく系(lipid-based systems)例えば、水中油型乳剤、ミセル、混合型
ミセルおよびリポソームなどがある。本願発明の好ましいコロイド系としては、
リポソームがある。リポソームは、人工膜小胞であり、試験管内および生体内で
輸送用小胞体(delivery vehicles)として有効なものである。ラージ・ユニラ
メラ・ベヒクル(large unilamellar vesicles(LUV))は、0.2〜4.0 μmの寸法
において、巨大分子を含んでいる水性緩衝液を十分なパーセンテージでカプセル
化することができることが示されている。RNA、DNAおよび無傷のウイルス粒子は
、LUV内部の水性環境中にカプセル化された状態とすることが可能であり、その
まま生物学的に機能できる形態で細胞に配送することができる(Fraley et al.,
Trends Biochem. Sci 6: 77, 1981)。リポソームは、哺乳類の細胞に加えて、
植物、酵母およびバクテリア細胞に対して、ポリヌクレオチドを導入するために
使用することもできる。リポソームが遺伝子導入のための有効な運搬物であるた
めには、以下の特性を備えているべきである:(1)目的とする遺伝子が生物学的
に活性を失うことなく高い効率でカプセル化されること、(2)標的としていない
細胞との比較において、標的細胞に対する優先的な及び十分な結合性能を持つこ
と、(3)リポソーム内の水性内容物を標的とする細胞の細胞質に効率よく導入す
ること、および(4)遺伝情報の発現を正確にかつ効率的に行えることである(Man
nino et al., Biotechniques, 6: 682 1988)。
gh-phase-transition-temperature)を持つリン脂質が、通常にはステロイド(
特にコレステロール)と組み合わせて用いられる。他のリン脂質や他の脂質もま
た、使用され得る。リポソームの物理的な特性は、pH、イオン強度および二価カ
チオンの存在によって決まる。
ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、
ホスファチジルエタノールアミン、スフィンゴリピド、セレブロシドおよびガン
グリオシド)を含む。特に、ジアシルホスファチジルグリセロール(ここで、脂
質部分の一方は、14〜18個の炭素原子からなり、特に16〜18個の炭素原子からな
り、飽和されているもの)が役に立つ。図示されているリン脂質は、卵のホスフ
ァチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリンおよびジステアロイルホ
スファチジルコリンを含む。
要因に基づいて分類されることができる。解剖学的分類法は、選択作用(例えば
、器官特異性)、細胞特異性、およびオルガネラ特異性(organelle-specific)
のレベルに基づくものである。機械的なターゲッティングは、それが受動的なも
のか、または能動的なものかどうかに基づいて区別されることができる。受動的
なターゲッティングは、シヌソイドに関するキャピラリ(sinusoidal capillari
es)を含む器官の細網内皮系(reticulo-endothelial system,RES)の細胞に分
布するリポソームの自然の傾向を利用する。一方、能動的なターゲッティングは
、特定のリガンド(例えば単クローン抗体、糖、グリコリピドまたはタンパク質
)をリポソームに連結することによって、またはリポソームが自然に局在してい
る部位以外の器官および細胞タイプに対するターゲッティングを達成するために
リポソームの組成または寸法を変えることにより、リポソームを変化させる方法
を含んでいる。
の方法によって修飾されている。リポソームを修飾するターゲットデリバリーシ
ステムの場合には、ターゲット用リガンドが脂質二重層中に安定して留まること
ができるように、脂質グループが、リポソームの脂質二重層中に組み込まれるこ
とができる。種々の結合グループは、ターゲッティングリガンドに脂質鎖を結合
するために使用されることができる。
aft)により提供される。その移植片は、血管内皮細胞と血管形成調整剤に連結
されるコラーゲン結合ドメインを備える融合ポリペプチドとを含んだ単離された
組織を含んでいる。ここで、「単離された組織(isolated tissue)」とは、被
検者における自然の位置から除去された組織のことを意味している。好ましい実
施の形態において、単離された組織は、血管内皮細胞をその要素として有してい
る。その組織は、器官、器官の一部(a portion of an organ)、または単離され
た細胞であり得る。例えば、その組織は、皮膚、皮膚から分離されるいくつかの
細胞層、血管(vessel)または血管から分離される血管組織(vascular tissue)で
あり得る。一つの方法では、移植片は血管であり、例えばバイパス移植のために
使用した血管である。血管には、冠状動脈(aortorenal)、腸骨動脈(aortoili
ac)、腎臓動脈(aortorenal)、および大腿骨動脈(femoropopliteal)が含ま
れる。また、別の態様においては、組織は心臓であり得る。単離された組織は、
その組織が単離された被験者または別の被験者に対して移植される前に、血管形
成調整剤に連結されたコラーゲン結合ドメインを含む融合ポリペプチドの効果的
な量と、生体外において接触させておくことができる。なお「接触する(contac
ting)」とは、その組織と、コラーゲン結合ドメインに連結された血管形成調整
剤を含む融合ポリペプチドとが相互作用を許容される条件を含み、また液相ない
し固相のいずれの場合をも含む。
える融合ポリペプチドの効果的量を単離された組織と接触することによって、組
織移植を準備する方法を提供する。その単離された組織は、自己由来(autologo
us)のまたは非自己由来(heterologous)の組織であり得る。「活性化された(
activated)」移植片とは、試験管内で(in vitro)血管新生が誘導されるよう
に刺激されており、または、その移植片がレシピエントに戻されると直ぐに血管
新生が生じるようにされた単離された組織のことを言う。「異型移植(allograf
t)」とは、同じ種間において遺伝的に異なる者に移植される移植である。「異
種移植片(xenograft)」とは、ある種のものからの移植片が、異なる種のものに
移植される移植である。「ドナー」という語は、ある組織が採取される被検者ま
たは培養(culture)のことを言い、「レシピエント」という語は、その組織が
配置される被検者または培養のことを意味する。レシピエントは、移植の前か後
に免疫抑制因子を投与されることがあるだろう。
験管内で、血管形成調整剤に連結されるコラーゲン結合ドメインを備える融合ポ
リペプチドの効果的量と接触させておくことができる。あるいは、単離された組
織は、その組織を摘出した被験者とは別の被験者においてその組織が摘出された
のと同じ部位に移植することができるし、その組織が摘出された被験者において
その組織が摘出された部位とは異なる部位に移植することもできる。そして、移
植が行われた後に、生体内で、その組織は、血管形成調整剤と連結されたコラー
ゲン結合ドメインを備える融合ポリペプチドと接触させることができる。
メインを備える融合ポリペプチドをコードしている核酸配列の効果的量に接触さ
せることができる。単離された組織は、その組織が単離された被験者または他の
被験者に移植される前に、生体外(in vitro)で血管形成調整剤に連結されるコ
ラーゲン結合ドメインを備える融合ポリペプチドをコードしている核酸配列の効
果的量に接触させることができる。あるいは、単離された組織は、その組織が採
取された被験者とは別の被験者においてその組織が採取された部位に移植するこ
とができるし、その組織が採取された被験者においてその組織が採取された部位
とは異なる部位に移植することもできる。そして、その組織は、移植後に生体内
(in vivo)において、血管形成調整剤に連結されるコラーゲン結合ドメインを
備える融合ポリペプチドをコードしている核酸配列の効果的量に接触させること
ができる。移植片と融合ポリペプチドとの接触は、インビボ(in vivo)または
インビトロ(in vitro)のいずれでも行うことができるし、本願発明の融合ポリ
ペプチドをコードしている核酸配列の取込みおよび発現を許容する条件をも含む
。
シピエントに免疫抑制因子を与えることは望ましいだろう。そのような因子とし
て、サイクロスポリンA(CsA)が好んで使用されるが、免疫抑制作用を起こす他
の因子、例えばラパマイシン、デソキシスペルグアリン(desoxyspergualine)
、およびFK506、またはこれらの薬剤と機能的に同等の物もまた利用されるだろ
う。CsAは、免疫抑制薬用量で注射によって好ましくは投与される。CsAの投与期
間は、約2日から約20日までの間で変動するだろう。
nteral)、皮下内、肺内(intrapulmonary)、鼻腔内への投与を行うことができ
るし、もし局所的に免疫抑制薬治療を行う必要がある場合には、病変への投与(
intralesional)を行うことが好ましい(移植の前に、一面に振りかけておくこ
と(perfusing)、もしそうでなければ、移植片と免疫抑制因子とを移植前に接
触させることをも含む)。非経口的投与には、筋肉内、静脈内、動脈内、または
腹膜内の投与を含む。加えて、特に免疫抑制因子の服用を減少させるには、免疫
抑制因子はパルス注入液によって最適に投与される。投薬は、好ましくは注射(
さらに好ましくは、静脈内または皮下内への注射)によって与えられるが、部分
的にはその投与が簡単でまたは常習的であるかどうかによって決定される。
本願明細書中において図面だけのために提供されている以下の実施例(但し、各
実施例によって、本願発明を制限するものではない)を参照することにより得ら
れるだろう。
学 <VEGF-CBD融合タンパク質の構成> VEGFは、実際に単一遺伝子の選択的スプライシングによって、生じる4つのア
イソフォーム(VEGF-206、189,165および121)からなるファミリーである(Ferr
ara et al., Endocrine Rev. 18:4, 1997, Neufeld et al., Prog. Growth Fact
or Res. 5:89-97, 1994; Tischer et al., J. Biol. Chem. 266:11947, 1991)
。VEGF165(最も豊富に発現されたアイソフォーム)は、一つの糖鎖結合部位を
持つグリコプロテインであり、ヘパリン結合性を示すものであって、ほぼ45kDa
のホモダイマとして分泌される。VEGF165は、プラスミンにより酵素的に切断さ
れ得るが、そのときプラスミンは、血管内皮細胞において分裂促進の活性に関し
てVEGF120と同等の活性を示すVEGF110ダイマーを生じるためにC末端部分のヘパ
リン結合ドメイン(111-165)を除去する(Houck et al., J. Biol. Chem. 267:
26301-26307, 1992)。VEGF165-CBDおよびVEGF110-CBD融合タンパク質は、VEGF1
10アイソフォームと同様に、大腸菌を用いた高度発現のために適切な構築物とし
てクローンされたものである。露出された血管のコラーゲンの認識(Takagi et
al., supra, 1992; Tuan et al., supra, 1996)に関わるウシのフォンビルブラ
ント因子(vWF;CBD)における機能的ドメインから得られたコラーゲン結合配列
を戦略的に修飾したものを利用した。元のフォンビルブラント因子の配列中のシ
ステイン残基は、メチオニン残基によって、保守的に置き換えられたが、これは
この補助的なドメインがこの組換え型成長因子の折畳み(folding)および/ま
たは再形成(renaturation)にとって必要とされる精巧なジスルフィド結合の形
成を阻害しないようにするためである。側部リンカー(flanking linkers)は、
回転を許容する柔軟性を増加させるためおよびステアリン障害を最小にするため
にグリシン残基を含んでデザインされた。またヒスチジン残基は、コラーゲン結
合ドメインの外部コンフォメーション(external conformation)を促進するた
めに含まれたものであった。したがって、VEGF-CBD融合タンパク質(VEGFタンパ
ク質にデカペプチドWREPSFMALS(配列番号1)を結合したものである。)は、損
傷、炎症、疾患または治療的な(reparative)外科手術によって表出されたコラ
ーゲンをターゲットとして、VEGFをターゲティングするために設計された。
に6個の別々のステップの結果として記載することができる: 1) 分子的作成物のデザイン; 2) 発現用プラスミドの分子クローニング; 3) 組換え型融合タンパク質の発現; 4) 融合タンパク質の精製; 5) 組換え型成長因子の再生成(renaturation); 6) 特定の生物学的活性の測定。
めに設計された(図1を参照のこと:ターゲティングされた血管内皮細胞増殖
因子の同属体(congeners)を示す)ものであり、三つの部分は、精製用標識と
しての6xHis(His-His-His-His-His-His)、コラーゲン結合部位としての補助的
なフォンビルブラント因子から派生した部位、そしてヒトVEGF110(VEGF110-CBD
)またはVEGF165(VEGF165-CBD)の成熟した活性化フラグメントをコードしてい
るcDNA配列部位からなる。
物は、まずTAクローニングベクターに組み込まれ、次に組み込まれた塩基配列
は、ダイレクトDNAシークエンスによって確かめられた。正しいDNAの塩基配列の
確認に基づいて、それぞれの挿入配列は制限酵素によって切り出され、pET発現
ベクター(Novagen)にクローニングされた後、その発現ベクターはコンピテン
ト細胞(大腸菌BL21 DE3株)に組み込まれた。ベクターからの融合タンパク質の
発現は、IPTGの存在によって開始できた。発現された融合タンパク質は、大腸菌
封入体から単離されて、6M 塩酸グアニジン(guanidinium HCl)によって可溶
化されて、ニッケルキレートクロマトグラフィ(8Mの尿素)を使用している条
件下で立体構造を破壊された状態(denaturing conditions)で均一化されて精
製され、最適化された還元条件の下(redox conditions)で、酸化的再生成によ
って活性のある状態とされた。VEGF110タンパク質は、高レベルに生産されてお
り(回収は、100mlの細菌培地あたり約8〜10mgである)、金属キレートク
ロマトグラフィーによって、ほぼ均一に近い状態に精製された。また均一性はSD
Sポリアクリルアミドゲル電気泳動によっても確認されている。
パク質(insoluble refractile protein)として確認される。VEGF110モノマー
(約15kDa)は、6Mグアニジン塩酸または、8M尿素のいずれかによって、可溶
化されることができ、そのように可溶化されたモノマーは、慎重に管理された還
元条件下のもとで、非還元条件下で約33kDaのダイマーに移行させることがで
きた。最適の条件下で、精製された組換え型タンパク質のほぼ90%が、活性型
へと再生成され、ダイマーとして回収することができた。
化させて、再生成されるタンパク質の回収率(%回収)を確認した試験(図2を
参照)と、変性剤を透析によって取り除く際の添加物(例えばシュークロース)
による安定性効果(%回収)を確認した試験(図3を参照))を行った。これら
の実験の結果は、最適なタンパク質のリフォールディングと回収率は、0.1mg/ml
以下のタンパク質濃度で得られることを示していた。
たVEGFをコントロール物質として使用しつつ、試験管内(in vitro)の細胞増殖
活性を評価することにより行われた。ヒトの臍帯血管内皮細胞が自発的に変化し
た細胞株は、ATCCから入手した(ECV3O4;ATCC CRL-1998)ものであり、その細
胞株は上記の評価試験のために単層培養されながら維持された。VEGF活性は、低
い血清(1%)の下で48時間プレインキュベートされた上記細胞によるトリチ
ウムチミジン(3H-thymidine)の取り込み(t=16-20hr)により判定された。こ
れらの条件の下で、我々は、商用のVEGFが、2.5ng/mlの低濃度で有意なトリチウ
ムチミジン取り込み活性を示す(最適濃度としては、約5ng/ml)ことを観察した
。図4および図5に示すように、各作成物(VEGF110、VEGF110-CBD、VEGF165-CB
D)の特定の生物学的活性は、商用の標準品の生物学的活性とほとんど同等であ
ることが判明した。このことから、再生成されたVEGF融合タンパク質は、安定性
ダイマーにリフォールディングされただけでなくて、生物学的にも活性を有する
ものであることが示された。
に移動活性を有していることが知られている。したがって、遺伝子工学的に作成
されたコラーゲン結合ドメインを持つ組換え型成長因子を用いることによって、
コラーゲンコートまたはゼラチンコートされた血管の移植片には、生体外(in v
itro)または生体内(in vivo)において、移植を強化するのに役立ち、かつそ
の移植片への血管内皮細胞の増殖を促進させることができるだろう。
細胞性前駆細胞を刺激するのに役立つだろう(Asahara, T. et al., Isolation
of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis, Science 275:9
64-967, 1997)。さらに、我々は以前に、間充織前駆細胞(mesenchymal precur
sor cells)のための生存因子として、コラーゲン結合性TGFβ1が、エクソビボ
(ex vivo)での遺伝子治療に用いる予備実験としての血清を欠乏させた試験管
内(in vitro)の条件下において、選択的な生存によって、幹細胞を“捕獲する
”ために使用でき得ることを示している(Gordon et al., Capture and expansi
on of bone marrow-derived mesenchymal progenitor cells with a transformi
ng growth factor b1-von Willibrand factor fusion protein for retrovirus-
media ted delivery of coagulation factor IX, Human Gene Ther. 8:1835-139
4, 1997)。同様にして、コラーゲン結合ドメインを持つVEGF融合タンパク質は
、同様の方法で内皮細胞の幹細胞(そのような細胞は、VEGFレセプターを持って
いる)を選択または/および“捕獲”するために使用でき、これによってエクソ
ビボ(ex vivo)での遺伝子治療プロトコールまたは、細胞に基づく移植プロト
コルにおいて使用できるであろう。
main)とVEGF110+CBDが、傷ついたラット頸動脈には結合するが、傷ついていな
い動脈に対しては結合しないことを確認している。これに対して、コラーゲン結
合ドメインのないVEGF110は、傷ついている動脈および傷ついていない動脈のい
ずれに対しても結合しなかった。これらの実験は、生体内(in vivo)における
ラット頸動脈損傷モデルにおいて、実行された(Zhu et al., Circulation 96(2
) :628-635, 1997)。
al laser revascularization)の効果の増強を図示したものである。 図7は、CBD―成長因子による処理を行うことによって、合成血管移植片の内
部に血管内皮細胞をトラッピングさせるときの図解である。
かかわらず、本願発明の要旨を逸脱することなく種々の変更を行なうことができ
ると理解されるはずである。したがって、本願発明は、実施例ではなく、請求項
によってのみ制限されるものである。
フである。
の回収率の変化を図示している棒グラフである。
胞増殖を示す図である。パネルAは、異なる濃度のコラーゲンをターゲットとし
たVEGFタンパク質によって誘導されるトリチウムチミジン(3H-thymidine)の取
り込み量を図示している棒グラフである。パネルBは、V110、V110-CBDまたはV16
5-CBDのそれぞれの異なる濃度に接触させた細胞のトリチウムチミジンの取り込
み量を比較しているグラフを示す。
ウムチミジンの取り込み量を比較しているグラフである。
l laser revascularization)の効果の増強を図示している概要図である。
要図である。
細胞性幹細胞捕獲の概要図である。
Claims (77)
- 【請求項1】 コラーゲン結合ドメインと血管形成調整剤とを備える融合ポ
リペプチド。 - 【請求項2】 前記血管形成調整剤が血管内皮細胞の増殖を刺激することを
特徴とする請求項1に記載の融合ポリペプチド。 - 【請求項3】 前記コラーゲン結合ドメインが、フォンビルブラント因子の
コラーゲン結合ドメインであることを特徴とする請求項1に記載の融合ポリペプ
チド。 - 【請求項4】 前記フォンビルブラント因子のコラーゲン結合ドメインがデ
カペプチドWREPSFMALS(配列番号1)を備えることを特徴とする請求項3に記載
の融合ポリペプチド。 - 【請求項5】 前記血管形成調整剤が、サイトカイン、成長因子、酵素、酵
素のインヒビター(enzymatic inhibitor)および抗体からなるグループから選
択されるものであることを特徴とする請求項1に記載の融合タンパク質。 - 【請求項6】 前記サイトカインが、アンジオポエチン1(angiopoeitin-1
)、上皮細胞成長因子(EGF)、肝細胞成長因子(HGF)、腫瘍壊死因子(TNFα
)、血小板由来内皮細胞成長因子(PD-ECGF)、血小板由来成長因子(PDGF)、
インスリン様増殖因子(IGF)、インターロイキン8、成長ホルモン、アンジオ
ポエチン(angiopoietin)および血管内皮細胞増殖因子(vascular endothelial
growth factor, VEGF)からなるグループから選択されるものであることを特徴
とする請求項5に記載の融合ポリペプチド。 - 【請求項7】 前記サイトカインが、血管内皮細胞増殖因子(vascular end
othelial growth factor, VEGF)であることを特徴とする請求項6に記載の融合
ポリペプチド。 - 【請求項8】 コラーゲン結合ドメインと血管形成調整剤とを備える融合ポ
リペプチドをコードしている核酸配列。 - 【請求項9】 操作可能な状態でプロモータに結合されていることを特徴と
する請求項8に記載の核酸配列。 - 【請求項10】 請求項8に記載の核酸配列を備えることを特徴とする発現
ベクター。 - 【請求項11】 前記発現ベクターが、レトロウイルスベクターであること
を特徴とする請求項10に記載の発現ベクター。 - 【請求項12】 請求項8に記載の核酸配列を備えることを特徴とする宿主
細胞。 - 【請求項13】 コラーゲン結合ドメインと血管形成調整剤とを備える融合
ポリペプチドを生産する方法であって、前記核酸配列の発現を許容する条件下で
請求項12に記載の宿主細胞を育てて、前記融合ポリペプチドを回収することを
特徴とする融合ポリペプチドの生産方法。 - 【請求項14】 前記宿主細胞が、原核細胞であることを特徴とする請求項
13に記載の融合ポリペプチドの生産方法。 - 【請求項15】 前記宿主細胞が、真核細胞であることを特徴とする請求項
13に記載の融合ポリペプチドの生産方法。 - 【請求項16】 被検者の循環を局所的に変更するための方法であって、次
の工程を含む方法: 前記被検者に、コラーゲン結合ドメインと血管形成調整剤とを備えた融合ポリ
ペプチドの量を調整しながら投与する工程。 - 【請求項17】 前記被験者が、ヒトであることを特徴とする請求項16に
記載の方法。 - 【請求項18】 前記被検者が、心臓血管疾患、潰瘍性の傷害、炎症性の傷
害、腫瘍および関節炎からなるグループから選択される疾患を有することを特徴
とする請求項16に記載の方法。 - 【請求項19】 前記コラーゲン結合ドメインが、フォンビルブラント因子
のコラーゲン結合ドメインであることを特徴とする請求項16に記載の方法。 - 【請求項20】 前記フォンビルブラント因子のコラーゲン結合ドメインが
、デカペプチドWREPSFMALS(配列番号1)を備えることを特徴とする請求項19
に記載の方法。 - 【請求項21】 前記血管形成調整剤が、血管内皮細胞増殖を刺激すること
を特徴とする請求項16に記載の方法。 - 【請求項22】 前記血管形成調整剤が、サイトカイン、成長因子、酵素、
酵素のインヒビター(enzymatic inhibitor)および抗体からなるグループから
選択されるものであることを特徴とする請求項16に記載の方法。 - 【請求項23】 前記サイトカインが、アンジオポエチン1(angiopoeitin
-1)、上皮細胞成長因子(EGF)、肝細胞成長因子(HGF)、腫瘍壊死因子(TNF
α)、血小板由来内皮細胞成長因子(PD-ECGF)、血小板由来成長因子(PDGF)
、インスリン様増殖因子(IGF)、インターロイキン8、成長ホルモン、アンジ
オポエチン(angiopoietin)および血管内皮細胞増殖因子(vascular endotheli
al growth factor, VEGF)からなるグループから選択されるものであることを特
徴とする請求項22に記載の方法。 - 【請求項24】 前記サイトカインが、血管内皮細胞増殖因子(vascular e
ndothelial growth factor, VEGF)であることを特徴とする請求項23に記載の
方法。 - 【請求項25】 被検者の循環を局所的に変更するための方法であって、次
の工程を含む方法: 前記被検者に、コラーゲン結合ドメインと血管形成調整剤とを備えた融合ポリ
ペプチドをコードした核酸配列の治療的有効量を投与する工程。 - 【請求項26】 前記被検者が、ヒトであることを特徴とする請求項25の
方法。 - 【請求項27】 前記被検者が、心臓血管疾患、潰瘍性の傷害、炎症性の傷
害、腫瘍および関節炎からなるグループから選択される疾患を有することを特徴
とする請求項25の方法。 - 【請求項28】 前記コラーゲン結合ドメインが、フォンビルブラント因子
のコラーゲン結合ドメインであることを特徴とする請求項25の方法。 - 【請求項29】 前記フォンビルブラント因子のコラーゲン結合ドメインが
、デカペプチドWREPSFMALS(配列番号1)を備えることを特徴とする請求項25
に記載の方法。 - 【請求項30】 前記血管形成調整剤が、血管内皮細胞増殖を刺激するもの
であることを特徴とする請求項25の方法。 - 【請求項31】 前記血管形成調整剤が、サイトカイン、成長因子、酵素、
酵素のインヒビター(enzymatic inhibitor)および抗体からなるグループから
選択されるものであることを特徴とする請求項25に記載の方法。 - 【請求項32】 前記サイトカインが、アンジオポエチン1(angiopoeitin
-1)、上皮細胞成長因子(EGF)、肝細胞成長因子(HGF)、腫瘍壊死因子(TNF
α)、血小板由来内皮細胞成長因子(PD-ECGF)、血小板由来成長因子(PDGF)
、インスリン様増殖因子(IGF)、インターロイキン8、成長ホルモン、アンジ
オポエチン(angiopoietin)および血管内皮細胞増殖因子(vascular endotheli
al growth factor, VEGF)からなるグループから選択されるものであることを特
徴とする請求項31に記載の方法。 - 【請求項33】 前記サイトカインが、血管内皮細胞増殖因子(vascular e
ndothelial growth factor, VEGF)であることを特徴とする請求項32の方法。 - 【請求項34】 血管形成調整剤に連結されるコラーゲン結合ドメインを備
える融合ポリペプチドによって処理された血管内皮細胞を備える単離された組織
を備える組織移植片。 - 【請求項35】 前記組織が、血管組織であることを特徴とする請求項34
に記載の組織移植片。 - 【請求項36】 前記組織が、血管であることを特徴とする請求項34に記
載の組織移植片。 - 【請求項37】 前記組織が、皮膚であることを特徴とする請求項34に記
載の組織移植片。 - 【請求項38】 前記組織が、器官であることを特徴とする請求項34の組
織移植片。 - 【請求項39】 前記器官が、心臓であることを特徴とする請求項38に記
載の組織移植片。 - 【請求項40】 前記コラーゲン結合ドメインが、フォンビルブラント因子
のコラーゲン結合ドメインであることを特徴とする請求項34に記載の組織移植
片。 - 【請求項41】 前記フォンビルブラント因子のコラーゲン結合ドメインが
、デカペプチドWREPSFMALS(配列番号1)を備えるものであることを特徴とする
請求項40に記載の組織移植片。 - 【請求項42】 前記血管形成調整剤が、血管内皮細胞増殖を刺激するもの
であることを特徴とする請求項38に記載の組織移植片。 - 【請求項43】 前記血管形成調整剤が、サイトカイン、成長因子、酵素、
酵素のインヒビター(enzymatic inhibitor)および抗体からなるグループから
選択されるものであることを特徴とする請求項38に記載の組織移植片。 - 【請求項44】 前記サイトカインが、アンジオポエチン1(angiopoeitin
-1)、上皮細胞成長因子(EGF)、肝細胞成長因子(HGF)、腫瘍壊死因子(TNF
α)、血小板由来内皮細胞成長因子(PD-ECGF)、血小板由来成長因子(PDGF)
、インスリン様増殖因子(IGF)、インターロイキン8、成長ホルモン、アンジ
オポエチン(angiopoietin)および血管内皮細胞増殖因子(vascular endotheli
al growth factor, VEGF)からなるグループから選択されるものであることを特
徴とする請求項43に記載の組織移植片。 - 【請求項45】 前記サイトカインが、血管内皮細胞増殖因子(vascular e
ndothelial growth factor, VEGF)であることを特徴とする請求項44に記載の
組織移植片。 - 【請求項46】 単離された組織と、血管形成調整剤に連結されるコラーゲ
ン結合ドメインを備える融合ポリペプチドの効果的量とを接触する工程を含む組
織移植片を準備する方法。 - 【請求項47】 前記接触する工程が、生体外(in vitro)で行われること
を特徴とする請求項46に記載の方法。 - 【請求項48】 前記接触する工程が、生体内(in vivo)で行われること
を特徴とする請求項46に記載の方法。 - 【請求項49】 前記組織が、血管組織であることを特徴とする請求項46
に記載の方法。 - 【請求項50】 前記組織が、血管であることを特徴とする請求項46に記
載の方法。 - 【請求項51】 前記組織が、皮膚であることを特徴とする請求項46に記
載の方法。 - 【請求項52】 前記組織が、器官であることを特徴とする請求項46に記
載の方法。 - 【請求項53】 前記器官が、心臓であることを特徴とする請求項52に記
載の方法。 - 【請求項54】 前記コラーゲン結合ドメインが、フォンビルブラント因子
のコラーゲン結合ドメインであることを特徴とする請求項46に記載の方法。 - 【請求項55】 前記フォンビルブラント因子のコラーゲン結合ドメインが
、デカペプチドWREPSFMALS(配列番号1)を備えることを特徴とする請求項54
に記載の方法。 - 【請求項56】 前記血管形成調整剤が、血管内皮細胞増殖を刺激できるこ
とを特徴とする請求項46に記載の方法。 - 【請求項57】 前記血管形成調整剤が、サイトカイン、成長因子、酵素、
酵素のインヒビター(enzymatic inhibitor)および抗体からなるグループから
選択されるものであることを特徴とする請求項46に記載の方法。 - 【請求項58】 前記サイトカインが、アンジオポエチン1(angiopoeitin
-1)、上皮細胞成長因子(EGF)、肝細胞成長因子(HGF)、腫瘍壊死因子(TNF
α)、血小板由来内皮細胞成長因子(PD-ECGF)、血小板由来成長因子(PDGF)
、インスリン様増殖因子(IGF)、インターロイキン8、成長ホルモン、アンジ
オポエチン(angiopoietin)および血管内皮細胞増殖因子(vascular endotheli
al growth factor, VEGF)からなるグループから選択されるものであることを特
徴とする請求項57に記載の方法。 - 【請求項59】 前記サイトカインが、血管内皮細胞増殖因子(vascular e
ndothelial growth factor, VEGF)であることを特徴とする請求項58に記載の
方法。 - 【請求項60】 移植片を活性化させる方法であって、以下の工程を含む方
法: 単離された組織と、血管形成調整剤に連結されるコラーゲン結合ドメインを備
える融合ポリペプチドをコードしている核酸配列(この核酸配列は前記移植片を
活性化するように、前記単離された組織において発現されたものである)の効果
的量とを接触させる工程。 - 【請求項61】 前記核酸配列は、操作可能な状態でプロモータに結合され
ているものであることを特徴とする請求項60に記載の方法。 - 【請求項62】 前記核酸配列が、発現ベクター内に組み込まれていること
を特徴とする請求項60に記載の方法。 - 【請求項63】 前記接触が、生体外(in vitro)で行われることを特徴と
する請求項60に記載の方法。 - 【請求項64】 前記接触が、生体内(in vivo)で行われることを特徴と
する請求項60に記載の方法。 - 【請求項65】 前記組織が、血管組織であることを特徴とする請求項60
に記載の方法。 - 【請求項66】 前記組織が、血管であることを特徴とする請求項60に記
載の方法。 - 【請求項67】 前記組織が、皮膚であることを特徴とする請求項60に記
載の方法。 - 【請求項68】 前記組織が、器官であることを特徴とする請求項60に記
載の方法。 - 【請求項69】 前記器官が、心臓であることを特徴とする請求項68に記
載の方法。 - 【請求項70】 前記コラーゲン結合ドメインが、フォンビルブラント因子
のコラーゲン結合ドメインであることを特徴とする請求項60に記載の方法。 - 【請求項71】 前記フォンビルブラント因子のコラーゲン結合ドメインが
、デカペプチドWREPSFMALS(配列番号1)を備えることを特徴とする請求項70
に記載の方法。 - 【請求項72】 前記血管形成調整剤が、血管内皮細胞増殖を刺激できるこ
とを特徴とする請求項60に記載の方法。 - 【請求項73】 前記血管形成調整剤が、サイトカイン、成長因子、酵素、
酵素のインヒビター(enzymatic inhibitor)および抗体からなるグループから
選択されるものであることを特徴とする請求項60に記載の方法。 - 【請求項74】 前記サイトカインが、アンジオポエチン1(angiopoeitin
-1)、上皮細胞成長因子(EGF)、肝細胞成長因子(HGF)、腫瘍壊死因子(TNF
α)、血小板由来内皮細胞成長因子(PD-ECGF)、血小板由来成長因子(PDGF)
、インスリン様増殖因子(IGF)、インターロイキン8、成長ホルモン、アンジ
オポエチン(angiopoietin)および血管内皮細胞増殖因子(vascular endotheli
al growth factor, VEGF)からなるグループから選択されるものであることを特
徴とする請求項73に記載の方法。 - 【請求項75】 前記サイトカインが、血管内皮細胞増殖因子(vascular e
ndothelial growth factor, VEGF)であることを特徴とする請求項74に記載の
方法。 - 【請求項76】 薬学的に許容可能なキャリアによって、血管形成調整剤に
連結されるコラーゲン結合ドメインを備える融合ポリペプチドを備える製薬組成
物。 - 【請求項77】 薬学的に許容可能なキャリアによって、血管形成調整剤に
連結されるコラーゲン結合ドメインを備える融合ポリペプチドをコードしている
核酸を備える製薬組成物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US09/127,134 | 1998-07-31 | ||
US09/127,134 US6387663B1 (en) | 1998-07-31 | 1998-07-31 | Targeting pharmaceutical agents to injured tissues |
PCT/US1999/017297 WO2000006195A1 (en) | 1998-07-31 | 1999-07-30 | Targeting pharmaceutical agents to injured tissues |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2002521044A true JP2002521044A (ja) | 2002-07-16 |
JP4564657B2 JP4564657B2 (ja) | 2010-10-20 |
Family
ID=22428477
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2000562049A Expired - Fee Related JP4564657B2 (ja) | 1998-07-31 | 1999-07-30 | 傷ついた組織に対するターゲッティング医薬品剤 |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US6387663B1 (ja) |
EP (1) | EP1100535B1 (ja) |
JP (1) | JP4564657B2 (ja) |
AT (1) | ATE467425T1 (ja) |
AU (1) | AU758483B2 (ja) |
CA (1) | CA2337979A1 (ja) |
DE (1) | DE69942365D1 (ja) |
ES (1) | ES2346275T3 (ja) |
IL (3) | IL141141A0 (ja) |
NZ (1) | NZ509804A (ja) |
WO (1) | WO2000006195A1 (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009183250A (ja) * | 2008-02-08 | 2009-08-20 | Tosoh Corp | 血液凝固第viii因子c2ドメインタンパク質の製造方法 |
JP2010519234A (ja) * | 2007-02-22 | 2010-06-03 | エバーハルト・カールス・ユニバーシタット テュービンゲン ユニバーシタットスクリニクム | 治療・診断効果を有する二重特異性融合タンパク質 |
Families Citing this family (41)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU764520B2 (en) * | 1999-07-21 | 2003-08-21 | University Of Southern California | Matrix-targeted fusion polypeptides for tissue regeneration and wound healing |
ES2283398T3 (es) * | 2000-03-15 | 2007-11-01 | Orbusneich Medical, Inc. | Recubrimiento que mejora la adherencia de celulas endoteliales. |
US9522217B2 (en) | 2000-03-15 | 2016-12-20 | Orbusneich Medical, Inc. | Medical device with coating for capturing genetically-altered cells and methods for using same |
US8460367B2 (en) | 2000-03-15 | 2013-06-11 | Orbusneich Medical, Inc. | Progenitor endothelial cell capturing with a drug eluting implantable medical device |
US8088060B2 (en) | 2000-03-15 | 2012-01-03 | Orbusneich Medical, Inc. | Progenitor endothelial cell capturing with a drug eluting implantable medical device |
US7547674B2 (en) | 2001-06-06 | 2009-06-16 | New York Medical College | Methods and compositions for the repair and/or regeneration of damaged myocardium |
EP1314780A4 (en) * | 2000-08-15 | 2004-07-28 | Terumo Corp | Collagen-binding hybrid polypeptides |
AU2002211561A1 (en) * | 2000-10-11 | 2002-04-22 | The Wistar Institute | Regulation of human skin healing |
ES2186501B1 (es) * | 2000-11-23 | 2006-05-16 | Universidad De Malaga | Factor de crecimiento fibroblastico basico con un dominio de union especifico a colegeno. |
US7217570B2 (en) | 2001-08-23 | 2007-05-15 | The Wistar Institute Of Anatomy And Biology | Organotypic intestinal culture and methods of use thereof |
US7205275B2 (en) | 2001-10-11 | 2007-04-17 | Amgen Inc. | Methods of treatment using specific binding agents of human angiopoietin-2 |
US7521053B2 (en) | 2001-10-11 | 2009-04-21 | Amgen Inc. | Angiopoietin-2 specific binding agents |
US7138370B2 (en) | 2001-10-11 | 2006-11-21 | Amgen Inc. | Specific binding agents of human angiopoietin-2 |
US7658924B2 (en) | 2001-10-11 | 2010-02-09 | Amgen Inc. | Angiopoietin-2 specific binding agents |
US7060684B1 (en) | 2002-12-16 | 2006-06-13 | Quijano Rodolfo C | Device for treating diabetes and methods thereof |
WO2005003317A2 (en) * | 2003-07-01 | 2005-01-13 | Regents Of The University Of Minnesota | Engineered blood vessels |
EP2267030A1 (en) * | 2005-08-25 | 2010-12-29 | Repair Technologies, Inc. | Devices, compositions and methods for the protection and repair of cells and tissues |
US8802396B2 (en) | 2005-12-26 | 2014-08-12 | Yantai Zhenghai Bio-Technology Co., Ltd. | Activated collagen scaffold materials and their special fused active restoration factors |
CN101505723A (zh) * | 2006-06-22 | 2009-08-12 | 南佛罗里达大学 | 胶原支架、具有其的医用植入物以及使用方法 |
EP3091075B1 (en) | 2007-04-09 | 2018-06-13 | The Board of Trustees of The University of Arkansas | Fusion proteins of collagen-binding domain and parathyroid hormone |
JO2913B1 (en) | 2008-02-20 | 2015-09-15 | امجين إنك, | Antibodies directed towards angiopoietin-1 and angiopoietin-2 proteins and their uses |
CN101671396B (zh) * | 2008-09-11 | 2012-07-18 | 烟台正海生物技术有限公司 | 与胶原蛋白特异结合的血管内皮生长因子及其应用 |
BR112012029611A2 (pt) | 2010-05-21 | 2017-07-25 | Merrimack Pharmaceuticals Inc | proteína de fusão biespecífica, composição farmacêutica, método de tratamento de dano ao tecido em um indivíduo, método de promoção da regeração ou sobrevivência do tecido em um indivíduo e molécula de ácido nucleico |
KR20130055647A (ko) * | 2010-07-19 | 2013-05-28 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 항암요법에 반응할 가능성이 증가된 환자를 확인하는 방법 |
WO2012112767A2 (en) * | 2011-02-16 | 2012-08-23 | Purdue Research Foundation | Collagen-targeted nanoparticles |
EP3391899B1 (en) | 2011-12-14 | 2020-07-15 | The Board of Trustees of the University of Arkansas | Delivery of therapeutic agents by a collagen binding protein |
WO2013120060A1 (en) | 2012-02-09 | 2013-08-15 | The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas | Delivery of therapeutic agents by a collagen binding protein |
US10420820B2 (en) | 2014-09-29 | 2019-09-24 | Counterpoint Biomedia LLC | Targeting of pharmaceutical agents to pathologic areas using bifunctional fusion polypeptides |
CN106188306B (zh) * | 2015-05-04 | 2020-07-24 | 北京同建再生医学技术有限公司 | 治疗性重组抗体、其编码基因及应用 |
CN115960249A (zh) | 2015-10-02 | 2023-04-14 | 银溪制药股份有限公司 | 用于组织修复的双特异性治疗性蛋白质 |
US10981980B2 (en) | 2016-06-15 | 2021-04-20 | Counterpoint Biomedica Llc | Polypeptide targeting aptamers for characterization, capture, and clinical management of circulating tumor cells |
WO2018057522A1 (en) * | 2016-09-20 | 2018-03-29 | University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Harnessing protein-based drugs comprising an anchor domain for use on the ocular surface |
US10913779B2 (en) | 2017-01-25 | 2021-02-09 | Counterpoint Biomedica Llc | Exposed collagen-targeted fusion cytokine for immune modulation in invasive cancers and lesions of infections |
JP7397440B2 (ja) | 2017-02-10 | 2023-12-13 | ザ ボード オブ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ アーカンソー | コラーゲン結合薬剤組成物およびその使用方法 |
CN109125710A (zh) * | 2017-06-15 | 2019-01-04 | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 胶原靶向血管内皮生长因子在陈旧性心肌梗死治疗中的应用 |
WO2019173829A1 (en) | 2018-03-09 | 2019-09-12 | University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Delivering biological drugs to tissues |
EP3870598A1 (en) | 2018-10-23 | 2021-09-01 | Dragonfly Therapeutics, Inc. | Heterodimeric fc-fused proteins |
US20220281936A1 (en) * | 2019-07-25 | 2022-09-08 | The University Of Chicago | Compositions and methods comprising protease-activated therapeutic agents |
CN113121700B (zh) * | 2019-12-30 | 2023-06-13 | 独步吾奇生物医疗科技(江苏)有限公司 | 与胶原特异结合的重组蛋白、其编码基因及应用 |
IL297495A (en) | 2020-04-22 | 2022-12-01 | Dragonfly Therapeutics Inc | Dosing regimen, formulation and manufacturing process for fc fusion heterodimeric proteins |
WO2022256568A1 (en) * | 2021-06-02 | 2022-12-08 | Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona | Methods and compositions for localization of growth factors |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH08337596A (ja) * | 1986-05-30 | 1996-12-24 | Scripps Clinic Res Found | フォン・ウィレブラント因子の52/48kDaポリペプチドフラグメントから誘導可能なペプチド |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5800811A (en) * | 1995-06-06 | 1998-09-01 | Hall; Frederick L. | Artificial skin prepared from coclagen matrix containing transforming growth factor-β having a collagen binding site |
WO1998044938A1 (en) * | 1997-04-10 | 1998-10-15 | University Of Southern California | Modified proteins which bind extracellular matrix components |
US6004798A (en) * | 1997-05-14 | 1999-12-21 | University Of Southern California | Retroviral envelopes having modified hypervariable polyproline regions |
-
1998
- 1998-07-31 US US09/127,134 patent/US6387663B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1999
- 1999-07-30 DE DE69942365T patent/DE69942365D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-30 JP JP2000562049A patent/JP4564657B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1999-07-30 NZ NZ509804A patent/NZ509804A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-07-30 AU AU53286/99A patent/AU758483B2/en not_active Ceased
- 1999-07-30 CA CA002337979A patent/CA2337979A1/en not_active Abandoned
- 1999-07-30 WO PCT/US1999/017297 patent/WO2000006195A1/en active Application Filing
- 1999-07-30 IL IL14114199A patent/IL141141A0/xx unknown
- 1999-07-30 AT AT99938902T patent/ATE467425T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-07-30 EP EP99938902A patent/EP1100535B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-07-30 ES ES99938902T patent/ES2346275T3/es not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-01-28 IL IL141141A patent/IL141141A/en not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-04-17 US US10/125,332 patent/US6955898B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-04-10 IL IL190793A patent/IL190793A0/en unknown
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH08337596A (ja) * | 1986-05-30 | 1996-12-24 | Scripps Clinic Res Found | フォン・ウィレブラント因子の52/48kDaポリペプチドフラグメントから誘導可能なペプチド |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
JPN5001017774, Human gene therapy. 1997, Vol.8, No.11, p.1385−1394 * |
JPN6009031132, Ivan Roitt、外2名, 免疫学イラストレイテッド(原書第2版), 19900710, p.323−325, 南江堂 * |
JPN6009031134, Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 1998 Jun, Vol.95, N * |
JPN6009031136, FEBS letters. 1992, Vol.298, No.2−3, p.126−128 * |
JPN6009031138, Biochemical and molecular medicine. 1996, Vol.58, No.2, p.227−233 * |
JPN6009031140, Endocrine reviews. 1997, Vol.18, No.1, p.4−25 * |
JPN6009032481, Annals of the New York Academy of Sciences. 1991, Vol.636, p.233−250 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010519234A (ja) * | 2007-02-22 | 2010-06-03 | エバーハルト・カールス・ユニバーシタット テュービンゲン ユニバーシタットスクリニクム | 治療・診断効果を有する二重特異性融合タンパク質 |
JP2009183250A (ja) * | 2008-02-08 | 2009-08-20 | Tosoh Corp | 血液凝固第viii因子c2ドメインタンパク質の製造方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE69942365D1 (de) | 2010-06-24 |
ATE467425T1 (de) | 2010-05-15 |
JP4564657B2 (ja) | 2010-10-20 |
IL141141A0 (en) | 2002-02-10 |
ES2346275T3 (es) | 2010-10-13 |
AU758483B2 (en) | 2003-03-20 |
WO2000006195A1 (en) | 2000-02-10 |
CA2337979A1 (en) | 2000-02-10 |
EP1100535A4 (en) | 2004-12-29 |
EP1100535A1 (en) | 2001-05-23 |
AU5328699A (en) | 2000-02-21 |
US6387663B1 (en) | 2002-05-14 |
US20020164719A1 (en) | 2002-11-07 |
IL141141A (en) | 2008-07-08 |
IL190793A0 (en) | 2008-11-03 |
US6955898B2 (en) | 2005-10-18 |
EP1100535B1 (en) | 2010-05-12 |
NZ509804A (en) | 2003-07-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4564657B2 (ja) | 傷ついた組織に対するターゲッティング医薬品剤 | |
Yao et al. | Expression of human factor IX in mice after injection of genetically modified myoblasts. | |
CA2213198C (en) | Gene therapy by anti-tgf-b agents | |
JP6018648B2 (ja) | キメラのコイルドコイル(二重コイル)分子を使用する方法 | |
JP4767983B2 (ja) | 骨髄に由来するTGFβ1応答細胞 | |
US20030125537A1 (en) | Vascular endothelial growth factor D(VEGF-D) antibodies and vectors, and methods of use | |
JP2001524828A (ja) | 切断型vegf関連蛋白質 | |
JP2001523951A (ja) | 血管内皮増殖因子c(vegf−c)タンパク質およびその遺伝子、変異体、ならびにその使用 | |
JP2001519767A (ja) | 損傷治癒のためのin vivo遺伝子導入法 | |
JPH11509187A (ja) | 内皮細胞増殖の調節 | |
NL8900178A (nl) | Groei regulerende clycoproteinen. | |
JP2003501092A (ja) | 標的化新脈管形成 | |
JP2002531127A (ja) | 成長因子相同体zvegf3 | |
JP2002514043A (ja) | 内胚葉、心臓、および神経の誘導因子 | |
JP2003517007A (ja) | 内皮細胞増殖阻害組成物および方法 | |
JP2003517809A (ja) | 新規ペプチド | |
JP2003516110A (ja) | Comp/tsp−1、comp/tsp−2および他のtspキメラタンパク質 | |
JP4408615B2 (ja) | 好酸球カチオン性タンパク質を含有する組成物 | |
TW202328443A (zh) | 一種生產具高生理穩定性與高效能二聚體之單鏈vegf融合蛋白的核酸載體及其製備方法和用途 | |
EP1262199A1 (en) | Vectors for enhanced expression of VEGF for disease treatment | |
Ojalvo et al. | Therapeutic angiogenesis following intramuscular gene transfer of vascular endothelialgrowth factor 121 in a dog model of hindlimb ischemia | |
JP4583763B2 (ja) | 切断型24kDa塩基性線維芽細胞成長因子 | |
JP2004269423A (ja) | Hgf誘導体 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060622 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090630 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20090930 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20091015 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20091019 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20091027 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20091228 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100127 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100423 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20100706 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100802 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130806 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |