JP2002511092A

JP2002511092A - ４−ブロモまたは４−ヨードフェニルアミノベンズヒドロキサム酸誘導体およびそのｍｅｋ阻害剤としての使用

Info

Publication number: JP2002511092A
Application number: JP50722899A
Authority: JP
Inventors: バレット，スティーヴン・ダグラス; ブリッジェス，アレグザンダー・ジェイムズ; ドウアティ，アネット・マリアン; ダドリー，デイヴッド・トマス; サルティール，アラン・ロバート; テクレ，ハイレ
Original assignee: ワーナー−ランバート・コンパニー
Priority date: 1997-07-01
Filing date: 1998-06-24
Publication date: 2002-04-09
Also published as: HUP0003731A2; CA2290506C; PE97999A1; PL337698A1; HRP980368A2; CN1261877A; UY25076A1; MY120994A; IS5256A; NO996491L; DE69826662D1; PT993439E; HUP0003731A3; ATE277895T1; KR20010014362A; CA2290506A1; ES2229515T3; AR016762A1; DE69826662T2; BR9810366A

Abstract

(57)【要約】式(Ｉ) （式中、R₁、R₂、R₃、R₄、R₅およびR₆は、水素またはアルキルのような置換基であり、そしてR₇は、水素または有機基である）のフェニルアミノベンズヒドロキサム酸誘導体は、有力なMEKの阻害剤であって、そのため、癌および、乾癬および再狭窄のようなその他の増殖性疾患を治療する際に有効である。

Description

【発明の詳細な説明】４−ブロモまたは４−ヨードフェニルアミノベンズヒドロキサム酸誘導体およびそのMEK阻害剤としての使用発明の分野本発明は、癌および再狭窄のような増殖性疾患に関係する特定の二重特異性（ dual specificity）キナーゼ酵素を阻害する特定のアントラニル酸のヒドロキサム酸誘導体を提供する。発明の背景増殖性疾患は、細胞内シグナルシステムまたは特定のタンパク質のシグナル形質導入機構における欠陥によって引き起こされる。例えば癌は一般に、その固有活性またはその細胞濃度のいずれかの変化の結果生じる、これらのシグナルタンパク質における一連の欠陥によって引き起こされる。細胞は、それ自体の受容体に結合する増殖因子を産生することができ、その結果オートクリンループが生じ、これが連続的に増殖を刺激する。細胞内シグナルタンパク質の突然変異または過剰発現は、細胞内での偽のマイトジェンシグナルに導くことができる。最も一般的な突然変異のいくつかは、Rasとして公知のタンパク質をコード化する遺伝子に起こるが、このRasは、GTPに結合したとき活性化され、そしてGDPに結合したとき不活性化されるＧ−タンパク質である。上述の増殖因子受容体および多くのその他のマイトジェン受容体は、活性化されたとき、RasをGDP−結合した状態からGTP−結合した状態に変換させる。このシグナルは、ほとんどの細胞型における増殖のための絶対的な必要条件である。このシグナルシステム、特にRas.GTP複合体の失活、における欠陥は、癌においては一般的であり、そしてRasより下のシグナルカスケードを慢性的に活性化させる。活性化されたRasは、今度は、セリン／トレオニンキナーゼのカスケードの活性化につながる。それ自体の活性化のために活性Ras.GTPを必要とすることが公知のキナーゼグループの一つは、Rafファミリーである。これらは今度は、MEKを活性化させ、次にMAPキナーゼを活性化させる。マイトジェンによるMAPキナーゼの活性化は、増殖にとっては必須であると思われ、そしてこのキナーゼの構成性活性化は、細胞の形質転換を誘発するのに十分である。例えば優性ネガティブRaf−１タンパク質の使用による、下流のRasシグナルの遮断は、細胞表面受容体から誘発されたかまたは癌遺伝子Ras突然変異体から誘発されたかにかかわらず、マイトジェネシスを完全に阻害することができる。Rasは、それ自体タンパク質キナーゼではないけれども、おそらくはリン酸化機構によって、 Rafおよびその他のキナーゼの活性化に関係する。一旦活性化されると、Rafおよびその他のキナーゼは、二つのすぐ隣り合ったセリン残基、すなわちMEK−１の場合にはS²¹⁸およびS²²²、上でMEKをリン酸化するが、これらは、キナーゼとしてのMEKの活性化のための必要条件である。MEKは、今度は、単一のアミノ酸によって分離されたチロシン、Y¹⁸⁵、およびトレオニン残基、T¹⁸³、の両者上でMAP キナーゼをリン酸化する。この二重リン酸化は、少なくとも100−倍MAPキナーゼを活性化させ、そしてそれは今や、いくつかの転写因子およびその他のキナーゼを包含する多数のタンパク質のリン酸化を触媒することができる。これらのMAP キナーゼリン酸化の多くは、それが別のキナーゼであっても転写因子であってもまたはその他の細胞タンパク質であっても、標的タンパク質に対してマイトジェンとして活性化するものである。MEKはまた、MEKKを包含するRaf−１以外のいくつかのキナーゼによっても活性化され、それ自体シグナル組み込みキナーゼであると思われる。現在知られている限り、MEKは、MAPキナーゼのリン酸化に対して非常に特異的である。事実、MAPキナーゼ以外のMEKのための基質は、今日までのところ証明されておらず、そしてMEKは、MAPキナーゼリン酸化シークェンスに基づいたペプチドをリン酸化せず、または、変性MAPキナーゼをリン酸化することさえもしない。MEKはまた、それをリン酸化する前にMAPキナーゼと強く会合すると思われ、MEKによるMAPキナーゼのリン酸化が、この二つのタンパク質の間に前もって強い相互作用を必要とすることを示唆している。ME Kのこの要求と異常な特異性の両者は、それが他のタンパク質キナーゼに対してその作用の機構において十分な差異を有し、おそらくATP結合部位の通常の遮断によるよりもむしろアロステリック機構によって作動するMEKの選択的阻害剤が見出されるであろうことを示唆するものである。本発明は、MEKのキナーゼ活性の非常に特異的な阻害剤である化合物を提供する。酵素アッセイおよび全細胞（whole cell）の両方において、これらの化合物は、MEKによるMAPキナーゼのリン酸化を阻害し、その結果Rasカスケードが活性化された細胞におけるMAPキナーゼの活性化を予防する。この酵素阻害の結果には、いくつかの細胞型の形質転換された表現型の逆転が包含され、これは、その形質転換細胞が足場非依存で増殖する能力およびいくつかの形質転換細胞系が外部マイトジェンから独立して増殖する能力の両方によって測定される。本発明によって提供される化合物は、そのフェニル環が４−位でブロモまたはヨードで置換されているフェニルアミノベンズヒドロキサム酸誘導体である。米国特許第5,155,110号には、特定のフェニルアミノベンズヒドロキサム酸誘導体を包含する種々のフェナム(fenamic)酸誘導体が抗炎症剤として開示されている。この参考文献は、本発明の化合物またはそのキナーゼ阻害活性を記述していない。発明の要約本発明は、キナーゼ阻害剤であって、それ自体、癌、乾癬および再狭窄のような増殖性疾患を治療するために有用である４−ブロモおよび４−ヨードフェニルアミノベンズヒドロキサム酸誘導体を提供する。本化合物は、式Ｉ［式中： R₁は、水素、ヒドロキシ、C₁−C₈アルキル、C₁−C₈アルコキシ、ハロ、トリフルオロメチルまたはCNであり； R₂は、水素であり； R₃、R₄およびR₅は独立して、水素、ヒドロキシ、ハロ、トリフルオロメチル、 C₁−C₈アルキル、C₁−C₈アルコキシ、ニトロ、CNまたは（ＯまたはNH)_m-(CH₂)_n- R₉(ここでR₉は、水素、ヒドロキシ、CO₂HまたはNR₁₀R₁₁である）であり；ｎは、０ないし４であり；ｍは、０または１であり； R₁₀およびR₁₁は独立して、水素またはC₁−C₈アルキルであるか、またはこれらが結合している窒素と一緒になって、場合によりＯ、Ｓ、NNまたはＮ−C₁−C₈アルキルから選択される１、２または３個の追加のヘテロ原子を含んでいてもよい３−ないし10−員環を完成することができ；キルまたはC₃−C₁₀シクロアルキルであり； R₇は、水素、C₁−C₈アルキル、C₂−C₈アルケニル、C₂−C₈アルキニル、C₃−C₁ ₀ （シクロアルキルまたは場合によりＯ、ＳまたはNR₉から選択されるヘテロ原子を含んでいてもよいシクロアルキル）であるか；またはR₆およびR₇は、これらが結合しているＮ−Ｏと一緒になって、場合によりＯ、ＳまたはNR₁₀R₁₁から選択される１、２または３個の追加のヘテロ原子を含んでいてもよい５−ないし10−員環を完成することができ；そしてここで上記のアルキル、アルケニルおよびアルキニル基はいずれも、未置換であるかまたはシクロアルキル(または場合によりＯ、ＳまたはNR₉から選択されるヘテロ原子を含んでいてもよいシクロアルキル)、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリールまたはヘテロアリールオキシによって置換されていることができる］によって定義される。好ましい化合物は、式II（式中、R₁、R₃、R₄、R₅、R₆およびR₇は、上記に定義したとおりである）を有する。特に好ましいのは、R₁がメチルまたはハロであり、そしてR₃、R₄およびR₅がフルオロまたはブロモのようなハロである化合物である。もう一つの好ましい化合物群は、式III （式中、R₁、R₃、R₄、R₅およびR₇は、上記に定義したとおりである）を有する。最も好ましい化合物は、R₁がメチルまたはF、Br、ClおよびＩのようなハロであり、R₃が水素またはフルオロのようなハロであり、R₄がフルオロのようなハロであり、そしてR₅が水素またはフルオロまたはブロモのようなハロである化合物である。このような化合物は、式を有する。本発明によって提供される特定の化合物には、以下のものがある： 3,4,5−トリフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−クロロ−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−４−ニトロ−ベンズアミド； 3,4,5−トリフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ） −Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；５−クロロ−3,4−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−４− ニトロ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4,5−トリフルオロ− Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；５−クロロ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−メチル−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4,5−トリフルオロ− Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−５−クロロ−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−ニトロ−ベンズアミド；４−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ −ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ− ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ− Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4,5−トリフルオロ−２−（４−ヨード−２ −メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−クロロ−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−４−ニトロ−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4,5−トリフルオロ−２−（２−フルオロ− ４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−クロロ−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−４−ニトロ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4,5−トリフルオロ−ベンズアミド；５−クロロ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−エトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−エトキシ−４−ニトロ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4,5−トリフルオロ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−５−クロロ−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−４−ニトロ−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−４−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４− ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−４−フルオロ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−４−フルオロ−ベンズアミド：２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−イソプロピル−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4,5−トリフルオロ−２−（４−ヨード−２ −メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−メチル−ベンズアミド；４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−５−ニトロ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−ニトロ−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド（HCl塩）；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−４−フルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ− シクロブチルメトキシ−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−（２− ジメチルアミノ−エトキシ）−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド一塩酸塩；５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ− シクロプロピルメトキシ−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；５−ブロモ−Ｎ−シクロヘキシルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−Ｎ−シクロペンチルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；および５−ブロモ−Ｎ−シクロブチルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド。本発明はまた、式Ｉの化合物ならびに製薬上許容できる賦形剤、希釈剤または担体より成る医薬製剤をも提供する。好ましい製剤は、前記の好ましい化合物のいずれかならびに賦形剤、希釈剤または担体を包含する。式Ｉの化合物は、キナーゼ酵素、特にMEK₁およびMEK₂、の強力で選択的な阻害剤である。そのためこれらは、癌および、乾癬、再狭窄、自己免疫疾患およびアテローム性動脈硬化症のようなその他の増殖性疾患に罹患している患者を治療するために有用である。本化合物は特に、乳癌、結腸癌、前立腺癌、皮膚癌および膵臓癌のような癌を治療するために適切である。本化合物はまた、発作、糖尿病、肝腫、心臓肥大、アルツハイマー病、嚢胞性線維症およびウイルス性疾患を治療するために使用することもできる。本発明は、有効量の式Ｉの化合物を患者に投与することによってMEK酵素および前記の疾患を阻害する方法を提供する。発明の詳細な説明本明細書中で使用するとき、用語“アリール”は、５ないし12個の炭素原子を有する環式、二環式、または三環式芳香環部分を意味する。典型的なアリール基の例としては、フェニル、ナフチル、およびフルオレニルがある。このアリールは、１、２または３個の、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、ニトロまたはアミノから選択される基によって置換されていることができる。典型的な置換されたアリール基には、３−フルオロフェニル、3,5−ジメトキシフェニル、４−ニトロナフチル、２−メチル−４−クロロ− ７−アミノフルオレニルなどがある。用語“アリールオキシ”は、１個の酸素原子を通して結合したアリール基、例えばフェノキシ、３−ブロモフェノキシ、ナフチルオキシおよび４−メチル−１ −フルオレニルオキシを意味する。 “ヘテロアリール”は、４ないし11個の炭素原子、および１、２または３個の、Ｏ、ＳまたはＮから選択されるヘテロ原子を有する環式、二環式、または三環式芳香環部分を意味する。例としては、フリル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、トリアゾリル、チアゾリル、キサンテニル、ピロニル、インドリル、ピリミジル、ナフチリジル、ピリジルおよびトリアジニルがある。このヘテロアリール基は、未置換であるか、または１、２または３個の、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、ニトロまたはアミノから選択される基によって置換されていることができる。置換されたヘテロアリール基の例としては、クロロピラニル、メチルチエニル、フルオロピリジル、アミノ−1,4−ベンズイソキサジニル、ニトロイソキノリニルおよびヒドロキシインドリルがある。ヘテロアリール基は、酸素を通して結合してヘテロアリールオキシ基、例えばチエニルオキシ、イソチアゾリルオキシ、ベンゾフラニルオキシ、ピリジルオキシおよび４−メチルイソキノリニルオキシを作ることができる。用語“C₁−C₈アルキル”は、１ないし８個の炭素原子を有する直鎖および分枝鎖状脂肪族基を意味する。典型的なC₁−C₈アルキル基には、メチル、エチル、イソプロピル、tert−ブチル、2,3−ジメチルヘキシルおよび1,1−ジメチルペンチルがある。このアルキル基は、未置換であるか、またはシクロアルキル、Ｏ、ＳまたはNR₉から選択されるヘテロ原子を含むシクロアルキル、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリールまたはヘテロアリールオキシ（これらの用語は、上記に定義したとおりである）によって置換されていることができる。アリールおよびアリールオキシ置換されたアルキル基の例としては、フェニルメチル、２−フェニルエチル、３−クロロフェニルメチル、1,1−ジメチル−３−（２−ニトロフェノキシ）ブチルおよび3,4,5−トリフルオロナフチルメチルがある。ヘテロアリールまたはヘテロアリールオキシ基によって置換されたアルキル基の例としては、チエニルメチル、２−フリルエチル、６−フリルオキシオクチル、４−メチルキノリルオキシメチルおよび６−イソチアゾリルヘキシルがある。シクロアルキル置換されたアルキル基には、シクロプロピルメチル、２−シクロペンチルエチル、２−ピペリジン−１−イルエチル、３−（テトラヒドロピラン−２−イル）プロピルおよびシクロブチルメチルがある。 “C₂−C₈アルケニル”は、１個以上の二重結合を有する直鎖または分枝鎖の炭素鎖を意味する。例としては、ブタ−２−エニル、２−メチル−プロパ−２−エニル、1,1−ジメチル−ヘキサ−４−エニル、３−エチル−４−メチル−ペンタ−２−エニルおよび３−イソプロピル−ペンタ−４−エニルがある。このアルケニル基は、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリールまたはヘテロアリールオキシで置換されていることができ、例えば３−フェニルプロパ−２ −エニル、６−チエニル−ヘキサ−２−エニル、２−フリルオキシ−ブタ−２− エニルおよび４−ナフチルオキシ−ヘキサ−２−エニルがある。 “C₂−C₈アルキニル”は、２ないし８個の炭素原子および少なくとも１個の三重結合を有する直鎖または分枝鎖の炭素鎖を意味する。典型的なアルキニル基には、プロパ−２−イニル、２−メチル−ヘキサ−５−イニル、3,4−ジメチル− ヘキサ−５−イニルおよび２−エチル−ブタ−３−イニルがある。このアルキニル基は、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリールまたはヘテロアリールオキシで置換されていることができ、例えば４−（２−フルオロフェニル）−ブタ− ３−イニル、３−メチル−５−チエニルペンタ−４−イニル、３−フェノキシ− ヘキサ−４−イニルおよび２−フリルオキシ−３−メチル−ヘキサ−４−イニルがある。アルケニルおよびアルキニル基は、各々１個以上の二重結合または三重結合、または二重結合と三重結合との組み合わせを有することができる。例えば、二重結合および三重結合の両方を有する典型的な基にはヘキサ−２−エン−４−イニル、３−メチル−５−フェニルペンタ−２−エン−４−イニルおよび３−チエニルオキシ−ヘキサ−３−エン−５−イニルがある。用語“C₃−C₁₀シクロアルキル”は、３ないし10個の炭素原子を含む非芳香環または縮合環を意味する。例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチル、ビシクロヘプチル、アダマンチルおよびシクロヘキシルがある。この環は、場合によりＯ、ＳまたはNR₉から選択されるヘテロ原子を含んでいてもよい。このような基には、テトラヒドロフリル、テトラヒドロピロリル、オクタヒドロベンゾフラニル、オクタヒドロインドリルおよびオクタヒドロベンゾチオフラニルがある。 R₃、R₄およびR₅は、用語(ＯまたはNH)_m-(CH₂)_n-R₉によって定義される基を包含することができる。このような基の例は、アミノメチル、２−アミノエチル、２−アミノエチルアミノ、３−アミノプロポキシ、N,N−ジエチルアミノ、３− （Ｎ−メチル−Ｎ−イソプロピルアミノ）−プロピルアミノ、２−（Ｎ−アセチルアミノ）−エトキシ、４−（Ｎ−ジメチルアミノカルボニルアミノ）−ブトキシおよび３−（Ｎ−シクロプロピルアミノ）−プロポキシである。式Ｉの４−ブロモおよび４−ヨードフェニルアミノベンズヒドロキサム酸誘導体は、有機化学の当業者には周知の合成方法論を利用して市販の出発物質から製造することができる。典型的な合成は、４−ブロモまたは４−ヨードアニリンを２−位に脱離基を有する安息香酸と反応させてフェニルアミノ安息香酸を得た後、この安息香酸フェニルアミノ誘導体をヒドロキシルアミン誘導体と反応させることによって実施する。この方法をスキーム１に図示する。スキーム１（ここでＬは、脱離基、例えばフルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードのようなハロ、またはジエチルホスフェート、トリメチルシリルオキシ、ｐ−ニトロフェノキシまたはフェニルスルホンオキシのような活性化されたヒドロキシ基である）。アニリン誘導体と安息香酸誘導体との反応は一般に、リチウムジイソプロピルアミド、ｎ−ブチルリチウム、水素化ナトリウムおよびナトリウムアミドのような塩基の存在下において、安息香酸をテトラヒドロフランまたはトルエンのような非反応性有機溶媒中で等モル量または過剰のアニリンと混合することによって達成される。この反応は一般に、温度約−78℃ ないし約25℃で実施し、通常は約２時間ないし約４日内に完了する。生成物は、例えば減圧蒸発によって、溶媒を除去することによって単離することができ、そして所望によりクロマトグラフィー、結晶化または蒸留のような標準的な方法によってさらに精製することができる。フェニルアミノ安息香酸は次に、ペプチドカップリング試薬の存在下においてヒドロキシルアミン誘導体HNR₆OR₇と反応させる。使用することができるヒドロキシルアミン誘導体としては、メトキシルアミン、Ｎ−エチル−イソプロポキシアミンおよびテトラヒドロ−オキサジンがある。典型的なカップリング試薬には、２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−1,2−ジヒドロキノリン（EEDQ）、1 ,3−ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)、ブロモ−トリス（ピロリジノ）− ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（PyBrOP）および（ベンゾトリアゾリルオキシ）トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(PyBOP)がある。フェニルアミノ安息香酸およびヒドロキシルアミノ誘導体は通常、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、クロロホルムまたはキシレンのような非反応性有機溶媒中でほぼ等モル量で混合し、そして等モル量のカップリング試薬を加える。所望により酸スカベンジャーとして作用するためにトリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンのような塩基を加えることができる。カップリング反応は一般に、約10分ないし２時間後に完了し、そして生成物は、例えば減圧蒸発によって反応溶媒を除去し、生成物をクロマトグラフィーまたはアセトン、ジエチルエーテルまたはエタノールのような溶媒からの結晶化のような標準的な方法によって精製することによって、容易に単離される。本発明の化合物を製造するための別法は、最初に安息香酸をヒドロキサム酸誘導体に変換し、次にこのヒドロキサム酸誘導体をアニリンと反応させることを包含する。この合成順序をスキーム２に図示する。スキーム２（ここでＬは、脱離基である）。スキーム２の両工程のための一般的な反応条件は、スキーム１について上記したものと同一である。本発明の化合物を製造するためのさらにもう一つの方法は、スキーム３に図示するようにフェニルアミノベンズヒドロキサム酸をエステル形成基と反応させることより成る。スキーム３（ここでＬは、ハロのような脱離基であり、そして塩基は、トリエチルアミンまたはジイソプロピルアミンである）。式Ｉの本発明の化合物の合成を下記の詳細な実施例によってさらに具体的に説明する。実施例１４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド (a) ４−フルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−安息香酸の製造 −78℃で撹拌した、テトラヒドロフラン５mL中に２−アミノ−５−ヨードトルエン3.16ｇ（0.0133モル）を含む溶液に、テトラヒドロフラン／ヘプタン／エチルベンゼン中の2.0Ｍリチウムジイソプロピルアミド[アルドリッチ（Aldrich）] 溶液10mL（0.020モル）を加えた。得られた緑色の懸濁液を15分間激しく撹拌し、その後テトラヒドロフラン10mL中の2,4−ジフルオロ安息香酸1.00ｇ(0.00632 モル)の溶液を加えた。反応温度をゆっくり室温まで上昇させて、この温度で混合物を２日間撹拌した。この反応混合物を、溶媒の減圧蒸発によって濃縮した。この濃縮物にHCl水溶液（10％）を加えて、溶液をジクロロメタンで抽出した。有機相を乾燥させ(MgSO₄)、次に蒸気浴上で濃縮して容積を減少させ（10mL）、室温まで冷却した。形成されたオフホワイトの繊維を真空濾過によって集め、ヘキサンですすぎ、真空オーブン（76℃；約10mmHg）内で乾燥させて、1.10ｇ（47％）の所望物質を得た；融点224−229.5 ℃。 (b) ４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミドの製造撹拌した等容積のテトラヒドロフラン−ジクロロメタン溶液31mL中の４−フルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−安息香酸（0.6495ｇ、0.001750モル）、Ｏ−（テトラヒドロ−2H−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミン（0.2590ｇ、0.002211モル）およびジイソプロピルエチルアミン（0.40 mL、0.0023モル）の溶液に、固体のPyB0P([ベンゾトリアゾリルオキシ]トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、Advanced Chem Tech）1.18ｇ（0.00227モル）を直接加えた。反応混合物を30分間撹拌した後、これを真空濃縮した。褐色の油状物を10％塩酸水溶液で処理した。懸濁液をエーテルで抽出した。有機抽出物を10％水酸化ナトリウム、続いて別の10％塩酸で洗浄し、乾燥させ（MgSO₄）、真空濃縮して、1.0ｇの淡褐色泡沫を得た。この中間体をエタノール性塩化水素25mLに溶解させ、この溶液を室温で15分間放置した。この反応混合物を真空濃縮して褐色油状物を得て、これをフラッシュシリカクロマトグラフィーによって精製した。ジクロロメタン→ジクロロメタン−メタノール（166：1）で溶離して、0.2284ｇの淡褐色粘稠油状物を得た。ペンタン−ヘキサンを用いた引っ掻き（scratching）および高真空下での乾燥によって0.1541g（23％）のオフホワイトの泡沫を得た；融点61−75℃。実施例２５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド (a) ５−ブロモ−2,3,4−トリフルオロ安息香酸の製造 −78℃に冷却し撹拌した、無水テトラヒドロフラン95mL中の１−ブロモ−2,3, 4−トリフルオロベンゼン（Aldrich、99％；5.30ｇ、0.0249モル）より成る溶液に、ヘプタン／テトラヒドロフラン／エチルベンゼン中の2.0Ｍリチウムジイソプロピルアミド溶液（Aldrich）12.5mLをゆっくり加えた。この混合物を１時間撹拌し、カニューレによって、−78℃に冷却し撹拌した飽和二酸化炭素エーテル溶液700mL中に移した。冷浴を取り除いて、反応混合物を周囲温度で18時間撹拌した。希（10％）塩酸水溶液（約500mL）を反応混合物中に注ぎ、混合物をその後回転蒸発器上で濃縮して、粗製固体を得た。この固体生成物をジエチルエーテル（150mL）とHCl水溶液(330mL、pH０)との間に分配させた。水性相を第二のジエチルエーテル（100mL）で抽出して、合わせたエーテル抽出物を５％水酸化ナトリウム水溶液（200mL）および水（100mL、pH12）で洗浄した。これらの合わせたアルカリ性水抽出物を濃塩酸水溶液でpH０まで酸性化した。得られた懸濁液をエーテル（２×200mL）で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥させ(MgSO₄)、真空濃縮し、そして一定質量になるまで高真空にして、5.60ｇ（88％収率）のオフホワイトの粉末を得た；融点139−142.5℃。 (b) ５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−安息香酸の製造 −78℃で撹拌した、テトラヒドロフラン10mL中の２−アミノ−５−ヨードトルエン1.88ｇ（0.00791モル）より成る溶液に、テトラヒドロフラン／ヘプタン／エチルベンゼン中の2.0Ｍリチウムジイソプロピルアミド(Aldrich)溶液６mL（0. 012モル）を加えた。得られた緑色の懸濁液を10分間激しく撹拌し、その後テトラヒドロフラン15mL中の５−ブロモ−2,3,4−トリフルオロ安息香酸1.00ｇ(0.00 392モル)の溶液を加えた。続いて冷浴を取り除いて、反応混合物を18時間撹拌した。この混合物を濃縮し、濃縮物を希(10％)塩酸水溶液100mLで処理した。得られた懸濁液をエーテル（２×150mL）で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥させ（MgSO₄）、真空濃縮して、橙色の固体を得た。この固体を沸騰ジクロロメタンで研和し、周囲温度まで冷却し、濾過によって集めた。この固体をジクロロメタンですすぎ、真空オーブン（80℃）内で乾燥させて、1.39ｇ（76％）の黄緑色粉末を得た；融点259.5−262℃。 (c) ５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２− メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミドの製造撹拌した、等容積のテトラヒドロフラン−ジクロロメタン溶液20mL中の５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）− 安息香酸（0.51ｇ、0.0011モル）、Ｏ−（テトラヒドロ−2H−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミン（0.15ｇ、0.0013モル）およびジイソプロピルエチルアミン（0.25mL、0.0014モル）より成る溶液に、固体のPyB0P（Advanced Chem Tec h）0.6794ｇ(0.001306モル)を直接加えた。反応混合物を24℃で10分間撹拌した後、真空で濃縮乾燥させた。濃縮物を10％塩酸水溶液100mL中に懸濁させた。懸濁液をジエチルエーテル125mLで抽出した。エーテル層を分離して10％水酸化ナトリウム水溶液75mLで洗浄した後、希酸100mLで洗浄した。このエーテル溶液を乾燥させ（MgSO₄）、真空濃縮して、0.62ｇ(100％)のオフホワイトの泡沫を得た。この泡沫をメタノール性塩化水素約15mLに溶解させた。５分後にこの溶液を真空濃縮して油状物を得て、この油状物をフラッシュシリカクロマトグラフィーによって精製した。ジクロロメタン→ジクロロメタン−メタノール(99：１)で溶離して、0.2233ｇ(42％)の黄色粉末を得た。この粉末をジエチルエーテルに溶解させ、希塩酸で洗浄した。有機相を乾燥させ(MgSO₄)、真空濃縮して、0.200ｇの泡沫を得た。この生成物をペンタンで研和して0.1525ｇの粉末を得て、これをフラッシュシリカクロマトグラフィーによって再精製した。ジクロロメタンで溶離して、0.0783ｇ（15％）の分析的に純粋な標題化合物を得た、融点80−90℃。下記の表中の実施例３ないし12および78ないし102は、実施例１および２の一般的な手順によって製造した。実施例13−77 実施例13ないし77は、組み合わせ合成方法論を利用して、適当に置換されたフェニルアミノ安息香酸（例えばスキーム１に示したような）とヒド金属ブロック中の0.8mL自動試料採取器バイアルにDMFの酸の0.5Ｍ溶液40μLおよびヒドロキシルアミン［ハニッグ（Hunig's）塩基中の２Ｍ溶液およびDMFのアミン中の１Ｍ］40μLを加えた。PyBropの0.5Ｍ溶液を新しく製造して、50μLをこの自動試料採取器バイアルに加えた。反応を24時間放置した。反応混合物を２ドラムバイアルに移して、２mLの酢酸エチルで希釈した。有機層を３mLの蒸留水で洗浄して、水性層を２mLの酢酸エチルで再洗浄した。合わせた有機層をオープンヒュームフード内で蒸発乾固させた。残留物を水中の50％アセトニトリル２mL中に溶解させ、半−分取（semi−prep ）逆相カラム(10mm×25cm、５μM球状シリカ、C−18で誘導体化した孔サイズ115 A、試料は、100％アセトニトリルまでの直線ランプで4.7mL／分で8.5分かけて溶離した。100％アセトニトリルでの溶離を８分間続けた。)上に注入した。214nM で監視することによって画分を集めた。所望の画分を、ジマークターボバプ(Zym ark Turbovap)を使用して蒸発させた。生成物をクロロホルムに溶解させ、予め秤量したバイアルに移して蒸発させ、再秤量して、収量を測定した。構造は、質量分析によって確認した。実施例３〜102 本発明の化合物は、その選択的な二重特異性（dual specificity）タンパク質キナーゼMEK₁およびMEK₂の阻害によって癌およびその他の増殖性疾患を治療するのに有用である。本発明の化合物は、タンパク質およびキナーゼの阻害を確立するために、そしてこのような阻害に対するマイトジェン応答および代謝応答を測定するために、通常使用される多くの生物学的アッセイにおいて評価した。酵素アッセイ MAPキナーゼ経路の阻害剤に対するカスケードアッセイミエリン塩基性タンパク質（MBP）内への³²Pの組み込みを、p44MAPキナーゼを含むグルタチオンＳ−トランスフェラーゼ融合タンパク質（GST-MAPK）およびp4 5MEKを含むグルタチオンＳ−トランスフェラーゼ融合タンパク質(GST-NEK)の存在下においてアッセイした。アッセイ溶液は、最終容積100μL中に20mM HEPES、 pH7.4、10mM MgCl₂、１mM MnCl₂、１mM EGTA、50μM［γ-³²P］ATP、10μg GST- MEK、0.5μg GST-MAPKおよび40μg MBPを含んでいた。20分後にトリクロロ酢酸の添加によって反応を停止させ、GF／Cフィルターマットを通して濾過した。このフィルターマット上に保持された³²Pは、1205ベータプレート（Betaplate）を使用して測定した。³²Pの組み込みを阻害する能力について化合物を10μMで評価した。化合物がGST-MEKまたはGST-MAPKを阻害しているかどうかを確かめるために、二つの付加的なプロトコルを使用した。第一のプロトコルでは、化合物を、GST- MEKを含有するチューブに加え、続いてGST-MAPK、MBPおよび［γ-³²P］ATPを添加した。第二のプロトコルでは、化合物を、GST-MEKおよびGST-MAPKの両者を含有するチューブに加え、続いて、MBPおよび［γ-³²P］ATPを添加した。両プロトコルにおいて活性を示した化合物は、MAPK阻害剤として記録し、一方第一のプロトコルのみにおいて活性を示す化合物は、MEK阻害剤として記録した。インビトロMAPキナーゼアッセイ阻害活性はまた、直接アッセイにおいても確認した。MAPキナーゼについては、１μgのGST-MAPKを、50mMトリス(pH7.5)、10μM MgCl₂、２μM EGTAおよび10 μM［γ-³²P］ATPを含む最終容積50μL中で40μgのMBPとともに30℃で15分間インキュベートした。この反応をラエムリ（Laemmli）SDS試料緩衝剤の添加によって停止させ、リン酸化MBPを10％ポリアクリルアミドゲル上での電気泳動によって分離した。MBP内に組み込まれた放射能は、オートラジオグラフィーにより、そして次にバンドの切り取りとそれに続くシンチレーション計数により測定した。インビトロMEKアッセイ直接的MEK活性の評価のためには、10μgのGST-MEK1を、71位でリシンのアラニンへの突然変異を起こしたp44MAPキナーゼを含むグルタチオンＳ−トランスフェラーゼ融合タンパク質（GST-MAPK-KA）５μgとともにインキュベートした。この突然変異は、MAPKのキナーゼ活性を除去し、そのため加えられたMEKに帰されるキナーゼ活性のみが残る。インキュベーションは、50mMトリス(pH7.5)、10μM M gCl₂、２μM EGTAおよび10μM［γ-³²P］ATPを含む最終容積50μL中で30℃で15 分間であった。この反応をラエムリSDS試料緩衝剤の添加によって停止させ、リン酸化GST-MAPK-KAを10％ポリアクリルアミドゲル上での電気泳動によって分離した。GST-MAPK-KA内に組み込まれた放射能は、オートラジオグラフィーにより、そして次にバンドの切り取りとそれに続くシンチレーション計数により測定した。さらに、人工的に活性化させたMEKを使用したが、これは、218および222位にセリンのグルタメートへの突然変異を包含した（GST-MEK-2E）。これらの部位がリン酸化されるとき、MEK活性は、増大する。これらの部位のリン酸化は、セリン残基のグルタメートへの突然変異によって模倣することができる。このアッセイのためには、５μgのGST-MEK-2Eを５μgのGST-MAPK-KAとともに、上記のものと同一の反応緩衝剤中で30℃で15分間インキュベートした。反応を上記のように停止させて分析した。全細胞MAPキナーゼアッセイ化合物が全細胞においてMAPキナーゼの活性化を妨げることができるかどうかを決定するために、以下のプロトコルを使用した：細胞を多ウェルプレート中で平板培養し、集密化するまで増殖させた。その後細胞を一晩血清−奪取した。細胞を、所望の濃度の化合物またはビヒクル（DMSO）に30分間暴露し、続いて増殖因子、例えばPDGF（100ng／mL）を加えた。この増殖因子で５分間処理した後、細胞をPBSで洗浄してから、70mM NaCl、10mM HEPES(pH7.4)、50mMグリセロールホスフェートおよび１％トリトンＸ−100より成る緩衝剤に溶解させた。溶解物を13,000×ｇで10分間遠心分離することによって透明にした。得られた上澄み５マイクログラムは、50mMトリス(p H7.4)、10mM MgCl₂、２mM EGTAおよび30μM［γ-³²P］ATPを含む最終容積25μL 中で30℃で15分間、微小管結合タンパク質−２（Map2）10μgとともにインキュベートした。反応をラエムリ試料緩衝剤の添加によって停止させた。リン酸化Ma p2を7.5％アクリルアミドゲル上で分離して、組み込まれた放射能を、オートラジオグラフィーおよびその後のバンドの切り取りとそれに続くシンチレーション計数によって測定した。免疫沈降法および抗ホスホチロシンイムノブロット細胞MAPキナーゼのチロシンリン酸化の状態を決定するために、細胞を溶解させ、内因性MAPキナーゼを特異抗体で免疫沈降させ、そして得られた免疫沈降物を以下のようにしてホスホチロシンの存在について分析した：集密的細胞を一晩血清−奪取し、上記のように化合物および増殖因子で処理した。次に細胞を掻き取って、13,000×ｇで２分間ペレット化した。得られた細胞ペレットを、１mMの NaVO₄を含む１％SDS100μL中に再懸濁させ、溶解させた。沸騰および渦巻き撹拌を交互に行って細胞タンパク質を変性させた後、900μLのRIPA緩衝剤［50mMトリス(pH7.4)、150mM NaCl、１％トリトンＸ−100、0.1％デオキシコレートおよび1 0mM EDTA］を加えた。非特異結合タンパク質の溶解物を透明にするために、この混合物にウサギの免疫グロブリンＧと結合したアガロースビーズ60μLおよびパンソルビン（Pansorbin）細胞60μLを加えた。この混合物を４℃で15分間インキュベートした後、13,000×ｇで10分間遠心分離した。得られた上澄みを新しいチューブに移して、MAPキナーゼのフラグメントに対して生じたポリクローナル抗血清10μLとともに４℃で最低１時間インキュベートした。タンパク質Ｇおよびタンパク質Ａと結合したアガロースビーズのスラリー70マイクロリットルを加えて、インキュベーションを４℃でさらに30分間続けた。ビーズを13,000×ｇで５分間遠心分離することによってペレット化し、１mLのRIPA緩衝剤で３回洗浄した。ラエムリ試料緩衝剤をこの最終的なビーズペレットに加えた。この混合物を５分間沸騰させた後、10％アクリルアミドゲル上で分離した。ゲル上のタンパク質をニトロセルロース膜に移して、この膜上の非特異結合部位を、TBST［150mM NaCl、10mMトリス（pH7.4）および0.05％T ween20］中の１％オボアルブミンおよび１％ウシ血清アルブミンとともにインキュベートすることによってブロックした。次に膜を、市販のホスホチロシンに対する抗体とともにインキュベートした。膜に結合した抗体を、¹²⁵I−タンパク質Ａとともにインキュベートし、続いてオートラジオグラフィーを用いることによって検出した。細胞増殖アッセイ³ H−チミジン組み込み細胞を多ウェルプレート中で平板培養して、ほとんど集密化するまで増殖させた。次に培地を除去して、１％ウシ血清アルブミンを含有する増殖培地で置き換えた。24時間の血清飢餓の後、化合物および特異増殖因子を加えて、さらに24時間インキュベーションを続けた。最後の２時間の間に、培地に³H−チミジンを加えた。インキュベーションを停止させるために、この培地を除去して、細胞層を氷冷リン酸塩−緩衝化生理食塩水で２回洗浄した。最後の洗浄の後、氷冷５％トリクロロ酢酸を加えて、細胞を室温で15分間インキュベートした。次にトリクロロ酢酸溶液を除去して、細胞層を蒸留水で３回洗浄した。最後の洗浄の後、細胞層を、２％ドデシル硫酸ナトリウムの添加によって可溶化した。この溶液中の放射能は、シンチレーション計数によって測定した。その阻害がIC₅₀値３μMでインスリンによるMAPK活性化を妨げる3T3-L1脂肪細胞において、本化合物は、10μM濃度で、インスリンによって刺激される放射能標識付けした２−デオキシグルコースの取り込み、またはインスリンによって刺激される脂質またはグリコーゲンのいずれかの合成には影響を及ぼさなかった。このことは、この阻害剤がインスリンのマイトジェン作用と代謝作用との間に選択性を示すことを証明し、そしてこの阻害剤が、この驚くべき選択性を示さない阻害剤よりも小さい毒性を示すことを証明する。単層増殖細胞を、10ないし20,000細胞／mLで多ウェルプレート中に平板培養した。播種の48時間後に、化合物をこの細胞増殖培地に加えて、さらに２日間インキュベーションを続けた。その後、細胞をトリプシンを用いるインキュベーションによってウェルから除去して、クールター計数器で数えた。軟寒天内増殖 0.3％の寒天を含む増殖培地を使用して、細胞を５ないし10,000細胞／皿で35 −mm皿内に播種した。冷却して寒天を凝固させた後、細胞を37℃のインキュベーターに移した。７ないし10日の増殖の後、目に見えるコロニーを解剖顕微鏡を使用して手で計数した。添加実験の順序は、本発明の化合物は、MEKを阻害しており、MAPキナーゼを阻害していないことを確証した。基質としてのMAPキナーゼのキナーゼ欠陥突然変異体のリン酸化を見る実験(そのため解釈を複雑にするMAPキナーゼの自己リン酸化はあり得ない)は、本阻害剤がカスケードアッセイで得られたものと本質上等しいIC₅₀でMEKを阻害することを確認する。動力学的分析は、本発明の化合物がATPと競合的ではないことを証明する。その結果、これらは、酵素のATP結合部位で結合せず、このことがおそらくは、なぜこれらの化合物がほとんどのキナーゼ阻害剤（これらは、ATP結合部位で結合し、そしてこれらは、ATP競合的である）に典型的な非特異的キナーゼ阻害活性を示さないかに関する説明である。前記のアッセイにおけるいくつかの代表的な式Ｉの化合物のインビトロおよびインビボ生物学的活性を表１に示す。いくつかの公知化合物についてのデータも示す。米国特許第5,155,110号に開示されている下記の化合物もまた、前記のアッセイで評価したが、このような化合物は各々、ほとんどまたは全く阻害活性を示さなかった。実施例 103 実施例95からの化合物である２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロベンズアミドを、ネズミの結腸腫瘍、C26／クローン10、を移植した動物で評価した。オスのCD2F1マウス［ NCI：チャールズリバー(Charles River)、キングストン］に、第０日に腫瘍フラグメント（ほぼ30mg）を右腋窩の領域に皮下移植した。実施例95の化合物は、移植後第１日から第14日まで全体で14日間、腹腔内（IP）または経口（PO）投与した（１グループ当たり６匹のマウス）。試験化合物用および対照動物用のビヒクルは、10％EtOH／10％クレモフォール（Cremophor）−EL［シグマ（Sigma）］／ 80％H₂O、pH5.0であった。腫瘍の体積は、個々の腫瘍の長さおよび幅を測定し、式(ａ×b²)／２(ここでａおよびｂは、腫瘍の長さおよび幅である)に従ってミリグラムで質量を計算することによって週に３回記録した。パーセント治療／対照（T／C）は、定められた測定日の、対照動物の中央腫瘍体積値と比較した治療腫瘍の中央腫瘍体積値の比に基づいて計算した。実施例95の化合物を腹腔内（IP）投与した試験では、用量は、200、124、77および48mg／kg／日であった。本発明の化合物は、第15日に評価したとき、腫瘍の増殖を59％ないし100％阻害した。第15日の対照腫瘍の大きさの中央値は、1594m gであった。表２は、各治療グループにおける動物の死亡数、体重の変化、対照グループと比較した治療グループの中央腫瘍体積値のパーセント、およびパーセント阻害を示す。実施例95の化合物を経口投与した試験では、用量は、300、186、115および71m g／kg／日であった。本発明の化合物は、第17日に評価したとき、腫瘍の増殖を6 4％ないし83％阻害した。第17日の対照腫瘍の大きさの中央値は、1664mgであった。表３は、各治療グループにおける動物の死亡数、体重の変化、対照グループと比較した治療グループの中央腫瘍体積値のパーセント、およびパーセント阻害を示す。前記のアッセイは、式Ｉの本発明の化合物は、結腸癌のような癌を治療するために特に有用であることを立証した。本化合物は特に、癌を治療および制御するために放射線と組み合わせて使用するために適している。本発明の化合物は、癌およびその他の増殖性疾患に罹患しており、治療を必要としている患者を治療するために利用される。本化合物は、乾癬、再狭窄、自己免疫疾患およびアテローム性動脈硬化症を治療するために理想的に適している。本化合物は一般に、医薬製剤として使用されるが、この医薬製剤中には式Ｉの化合物が重量で約５％ないし約95％の濃度で存在する。本化合物は、便利な経口、非経口、局所、直腸などの投与経路用に処方することができる。本化合物は、薬剤に常套的に使用される通常の希釈剤、賦形剤および担体を用いて、例えばグリセリン、エチレングリコール、ソルビトール70のようなポリオール類；エチレングリコールのモノ−およびジ脂肪酸エステル類を用いて、処方される。コーンスターチ、スクロース、ラクトースなどのような澱粉および糖類は、固体製剤用に使用することができる。このような固体製剤は、錠剤、トローチ剤、丸剤、カプセル剤などの形であることができる。ペパーミント、冬緑油などのようなフレーバーを加えることができる。活性化合物の典型的な用量は、哺乳類を苦しめている癌またはその他の増殖性疾患を治療するために有効である用量である。用量は一般に、体重１キログラム当たり約0.1mgから体重１キログラム当たり約500mgまでである。このような用量は、１日に１ないし約４回、または癌、乾癬、再狭窄またはその他の増殖性疾患を効果的に治療するために必要とされるとき、投与される。本発明の化合物を送達するための好ましい方法は、錠剤、カプセル剤、溶液またはシロップ剤による経口的なものである。もう一つの方法は、非経口的なもの、特に等張生理食塩水または５％グルコース水溶液中のベンゾピランの溶液の静脈内注入によるものである。下記は、本発明によって提供される典型的な処方物である。実施例 104 50−mg錠剤の製造ベンズヒドロキサム酸、ラクトースおよびコーンスターチ（配合物用）をブレンドして均一にする。コーンスターチ(ペースト用)を水600mL中に懸濁させ、撹拌しながら加熱してペーストを形成させる。このペーストは、混合粉末を顆粒化するために使用する。この顆粒は、＃８スクリーンを通過させ、12 0°Fで乾燥させる。乾燥した顆粒は、＃16スクリーンを通過させる。混合物を１％ステアリン酸マグネシウムで潤滑化し、圧縮して錠剤にする。この錠剤は、ME K酵素を阻害し、そして再狭窄、アテローム性動脈硬化症および乾癬を治療するために哺乳類に投与される。実施例 105 経口用懸濁液の製造ソルビトール溶液を40mLの蒸留水に加え、ベンズヒドロキサム酸誘導体をその中に懸濁させる。サッカリン、安息香酸ナトリウム、フレーバーおよび染料を加えて、溶解させる。容積を蒸留水で100mLに調整する。シロップ剤１ミリリットルには各々、５mgの本発明の化合物が含まれている。このシロップ剤は、増殖性疾患、特に乳癌および皮膚癌を治療するために啼乳類に投与される。実施例 106 非経口用溶液の製造プロピレングリコール700mLおよび注射用水200mLの溶液中に、20.0ｇの４−フルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（ヒドロキシ）−ベンズアミドを加える。溶液の容積を、注射用水の添加によって1000mLに調整する。この処方物を熱滅菌し、50−mLアンプルに充填して各アンプルが2.0mL［40mgの４−フルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（ヒドロキシ）−ベンズアミド］を含むようにして、窒素下で封止する。このようにして処方した本発明の化合物は、癌、乾癬、再狭窄、アテローム性動脈硬化症および自己免疫疾患のような増殖性疾患に対する治療の必要な哺乳類に、その状態を治療するのに有効な速度および用量で投与されるであろう。本発明の化合物の“抗増殖量”は、標的細胞の増殖の速度を阻害するかまたは低下させる化合物の量である。本発明に従って治療されるべき典型的な癌には、乳癌、結腸癌、前立腺癌、皮膚癌などがある。本化合物は、乾癬、再狭窄およびアテローム性動脈硬化症の治療に、そしてMEK酵素、特にMEK₁およびMEK₂の活性を阻害することに適する。必要とされることのすべては、MEK阻害量の本発明の化合物を哺乳類に投与することである。本発明の化合物の“MEK阻害量”は、哺乳類に投与したときMEK酵素の測定できる阻害を引き起こす量である。典型的なMEK阻害量は、体重１キログラム当たり活性化合物約0.1μgないし約500mgである。上記の増殖性疾患を治療するためには、典型的な用量は、通常１日に１ないし約４回投与して、約0.1ないし約50mg／kgである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/4453 Ａ６１Ｋ 31/4453 31/5375 31/5375 Ａ６１Ｐ 3/10 Ａ６１Ｐ 3/10 9/00 9/00 9/02 9/02 9/10 9/10 17/06 17/06 25/28 25/28 35/00 35/00 37/02 37/02 43/00 １１１ 43/00 １１１Ｃ０７Ｄ 295/08 Ｃ０７Ｄ 295/08 Ｚ 307/42 307/42 309/12 309/12 333/16 333/16 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＵ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＲ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ (72)発明者ドウアティ，アネット・マリアンフランス国エフ―75016 パリ．リュープサン33 (72)発明者ダドリー，デイヴッド・トマスアメリカ合衆国ミシガン州 48108．アンアーバー．ヘイズコート3201 (72)発明者サルティール，アラン・ロバートアメリカ合衆国ミシガン州 48105．アンアーバー．ヴァリービュードライブ2002 (72)発明者テクレ，ハイレアメリカ合衆国ミシガン州 48108．アンアーバー．ターンベリ3048

Claims

【特許請求の範囲】１．式Ｉ［式中： R₁は、水素、ヒドロキシ、C₁−C₈アルキル、C₁−C₈アルコキシ、ハロ、トリフルオロメチルまたはCNであり； R₂は、水素であり； R₃、R₄およびR₅は独立して、水素、ヒドロキシ、ハロ、トリフルオロメチル、C₁−C₈アルキル、C₁−C₈アルコキシ、ニトロ、CNまたは(ＯまたはNH)_m−(CH₂)_n -R₉(ここでR₉は、水素、ヒドロキシ、CO₂HまたはNR₁₀R₁₁である）であり；ｎは、０ないし４であり；ｍは、０または１であり； R₁₀およびR₁₁は独立して、水素またはC₁−C₈アルキルであるか、またはこれらが結合している窒素と一緒になって、場合によりＯ、Ｓ、NHまたはＮ−C₁−C₈ アルキルから選択される１、２または３個の追加のヘテロ原子を含んでいてもよい３−ないし10−員環を完成することができ；ルキルまたはC₃−C₁₀シクロアルキルであり； R₇は、水素、C₁−C₈アルキル、C₂−C₈アルケニル、C₂−C₈アルキニル、C₃− C₁₀（シクロアルキルまたは場合によりＯ、ＳまたはNR₉から選択されるヘテロ原子を含んでいてもよいシクロアルキル）であり；そしてここで上記のアルキル、アルケニルおよびアルキニル基はいずれも、未置換であるかまたはシクロアルキル（または場合によりＯ、ＳまたはNR₉から選択されるヘテロ原子を含んでいてもよいシクロアルキル）、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリールまたはヘテロアリールオキシによって置換されていることができるか；またはR₆およびR₇は、これらが結合しているＮ−Ｏと一緒になって、場合によりＯ、ＳまたはNR₁₀R₁₁から選択される１、２または３個の追加のヘテロ原子を含んでいてもよい５−ないし10−員環を完成することができる］によって定義される化合物。２．R₁がC₁−C₈アルキルまたはハロである、請求項１に記載の化合物。３．R₆が水素である、請求項２に記載の化合物。４．R₁がメチルである、請求項３に記載の化合物。５．式を有する、請求項４に記載の化合物。６．R₄がフルオロであり、そしてR₃およびR₅が水素である、請求項５に記載の化合物。７．４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチルーフェニルアミノ）−ベンズアミド；４−フルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（メトキシ）−ベンズアミド；４−フルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（プロパ−２−イニルオキシ）−ベンズアミド；４−フルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（２−フェノキシエトキシ）−ベンズアミド；４−フルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（２−チエニルメトキシ）−ベンズアミド；４−フルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（プロパ−２−エニルオキシ）−ベンズアミド；４−フルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（シクロプロピルメトキシ）−ベンズアミド；４−フルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（シクロペントキシ）−ベンズアミド；４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−イソプロピル−ベンズアミド；および４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−メチル−ベンズアミド；である、請求項６に記載の化合物。８．R₃およびR₄がフルオロであり、そしてR₅が水素である、請求項５に記載の化合物。９．3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（３−フリルメトキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −エトキシ−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（ブタ−２−エニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（シクロプロピル−メトキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（１−メチルプロパ−２−イニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（３−フェニルプロパ−２−イニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（３−メチル−５−フェニルペンタ−２−エン−４−イニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（プロパ−２−イニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（プロポキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（シクロブチルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（２−チエニルメトキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（２−メチループロパ−２−エニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（２−フェノキシエトキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（ブタ−２−エニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（ブタ−３−イニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（シクロペンチルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（３−（２−フルオロフェニル）−プロパ−２−イニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ） −Ｎ−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ −シクロブチルメトキシ−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ −（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ベンズアミド；および 3,4−ジフルオロ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ −シクロプロピルメトキシ−ベンズアミド；である、請求項８に記載の化合物。 10．R₃およびR₄がフルオロであり、そしてR₅がブロモである、請求項５に記載の化合物。 11．５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２− メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（ｎ−プロポキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−Ｎ−（フラン−３−イルメトキシ）−２− （４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−Ｎ−（ブタ−２−エニルオキシ）−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−Ｎ−ブトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（３−メチル−ブタ−２−エニルオキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（３−メチル−ペンタ−２−エン−４−イニルオキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−ベンジル）−Ｎ−［５−（３−メトキシ−フェニル）−３−メチル−ペンタ−２−エン− ４−イニルオキシ］−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（プロパ−２−イニルオキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−［３−（３−メトキシ−フェニル）−プロパ−２−イニルオキシ］−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（チオフェン−２−イルメトキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（ピリジン−３−イルメトキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（３−（２−フルオロフェニル）−プロパ−２−イニルオキシ） −ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（エトキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（シクロプロピルメトキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（イソプロポキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（ブタ−３−イニルオキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ピペリジン−１−イル−エトキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エトキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−Ｎ−（２−ジエチルアミノ−エトキシ）−3,4−ジフルオロ− （４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−イソブトキシ−ベンズアミド；５−ブロモ−Ｎ−シクロヘキシルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（４− ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−Ｎ−シクロペンチルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（４− ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−Ｎ−シクロブチルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−（２ −ジメチルアミノ−エトキシ）−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド一塩酸塩；５−ブロモ−Ｎ−（２−ジメチルアミノ−プロポキシ）−3,4−ジフルオロ −２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ベンズアミド；および５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミドである、請求項10に記載の化合物。 12．R₃およびR₄が水素であり、そしてR₅がハロである、請求項５に記載の化合物。 13．５−クロロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−クロロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ベンズアミド；５−クロロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−メトキシ−ベンズアミド；４−ブロモ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−フェニルメトキシ−ベンズアミド；４−フルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−フェニルメトキシ−ベンズアミド；５−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ヨード−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−フェニルメトキシ−ベンズアミド；および５−フルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシ）−ベンズアミドである、請求項12に記載の化合物。 14．式を有する、請求項４に記載の化合物。 15．R₃およびR₄がフルオロであり、そしてR₅が水素である、請求項14に記載の化合物。 16．3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（３−フェニルプロパ−２−イニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（３−フリルメトキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（２−チエニルメトキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（ブタ−３−イニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（２−メチル−プロパ−２−エニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（ブタ−２−エニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（メトキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（エトキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（シクロブトキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ） −Ｎ−（イソプロポキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（２−フェノキシエトキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（シクロプロピル−メトキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（ｎ−プロポキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（１−メチル−プロパ−２−イニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（３−（３−フルオロフェニル）−プロパ−２−イニルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −(4,4−ジメチルペンタ−２−イニルオキシ）−ベンズアミド；および 3,4−ジフルオロ−２−（４−ブロモ−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（シクロペントキシ）−ベンズアミドである、請求項15に記載の化合物。 17．3,4,5−トリフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル− フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−クロロ−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２− メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−3,4−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−４− ニトロ−ベンズアミド； 3,4,5−トリフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；５−クロロ−3,4−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−４ −ニトロ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4,5−トリフルオロ −Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−５−ニトロ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−４− ニトロ−ベンズアミド；５−クロロ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−４− メチル−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4,5−トリフルオロ −Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−５−クロロ−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−４− ニトロ−ベンズアミド；４−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ− ヒドロキシ−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）− Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ −ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ −ヒドロキシ−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4,5−トリフルオロ−２−（４−ヨード− ２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−クロロ−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（４− ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（２− フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−４−ニトロ−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4,5−トリフルオロ−２−（２−フルオロ −４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−クロロ−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（２− フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−４−ニトロ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4,5−トリフルオロ−ベンズアミド；５−クロロ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−エトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−エトキシ−４−ニトロ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4,5−トリフルオロ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−５−クロロ−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−４−ニトロ−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−４−フルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４ −ヨード−フェニルアミノ）−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−４−フルオロ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−４−フルオロ−ベンズアミド；２−（２−ブロモ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4,5−トリフルオロ−２−（４−ヨード− ２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−５−ニトロ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−ヒドロキシ−４− ニトロ−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−Ｎ −（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ベンズアミド； 3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−４−フルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド（HCl塩）；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−４−フルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロブチルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ −（テトラヒドローピラン−２−イルオキシ）−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−（２ −ジメチルアミノ−エトキシ）−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド一塩酸塩；５−ブロモ−Ｎ−（２−ジメチルアミノープロポキシ）−3,4−ジフルオロ −２−（４−ヨード−２−メチル−フェニルアミノ）−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ−ヒドロキシ−ベンズアミド；５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−3,4−ジフルオロ−Ｎ−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ベンズアミド；２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミド；および５−ブロモ−２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−Ｎ−シクロプロピルメトキシ−3,4−ジフルオロ−ベンズアミドである、請求項１に記載の化合物。 18．製薬上許容できる賦形剤、希釈剤または担体と混合した請求項１に記載の化合物より成る医薬製剤。 19．式の化合物を包含する、請求項18に記載の処方物。 20．式の化合物を包含する、請求項18に記載の処方物。 21．MEK阻害量の請求項１に記載の化合物を投与することより成る、哺乳類においてMEK酵素を阻害する方法。 22．抗増殖量の請求項１に記載の化合物を投与することより成る、増殖性疾患に罹患していて、治療の必要な哺乳類を治療する方法。 23．増殖性疾患が乾癬、再狭窄、自己免疫疾患またはアテローム性動脈硬化症である、請求項21に記載の方法。 24．増殖性疾患が癌である、請求項21に記載の方法。 25．有効量の請求項１に記載の化合物を投与することより成る、発作に罹患していて、治療の必要な哺乳類を治療する方法。 26．有効量の請求項１に記載の化合物を投与することより成る、心不全に罹患していて、治療の必要な哺乳類を治療する方法。 27．有効量の請求項１に記載の化合物を投与することより成る、肝腫に罹患していて、治療の必要な哺乳類を治療する方法。 28．有効量の請求項１に記載の化合物を投与することより成る、心臓肥大に罹患していて、治療の必要な哺乳類を治療する方法。 29．有効量の請求項１に記載の化合物を投与することより成る、糖尿病に罹患していて、治療の必要な哺乳類を治療する方法。 30．有効量の請求項１に記載の化合物を投与することより成る、アルツハイマー病に罹患していて、治療の必要な哺乳類を治療する方法。 31．通常の放射線療法とともに有効量の請求項１に記載の化合物を投与することより成る、癌に罹患している哺乳類を治療する方法。 32．有効量の請求項１に記載の化合物を投与することより成る、嚢胞性線維症に罹患していて、治療の必要な哺乳類を治療する方法。