JP2002363184A

JP2002363184A - 生理活性物質ｎｋ１２８３８、その製造法及び用途

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Publication number: JP2002363184A
Application number: JP2001163377A
Authority: JP
Inventors: Koichi Tsuchiya; 耕一土屋; Yoshikazu Sukenaga; 義和助永; Shunsuke Kuroiwa; 俊介黒岩
Original assignee: Nippon Kayaku Co Ltd
Current assignee: Nippon Kayaku Co Ltd
Priority date: 2001-05-30
Filing date: 2001-05-30
Publication date: 2002-12-18

Abstract

(57)【要約】【課題】新規な抗腫瘍剤が要望されている。【解決手段】抗腫瘍活性を有する生理活性物質ＮＫ１２
８３８を提供する。さらに、該化合物またはそれらの薬
理学上許容し得る塩および医薬用添加剤とからなる抗腫
瘍剤を提供する。例えば、ＮＫ１２８３８の構造は下記
式（１）に示すとおりである。【化１】

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、生理活性物質ＮＫ
１２８３８、その製造法及びそれらの用途に関する。本
発明の化合物は、細胞増殖抑制作用を示し、悪性腫瘍に
対する化学療法剤などとして使用される抗癌物質として
期待される。

【０００２】

【従来の技術】従来、抗腫瘍剤としては、アドリアマイ
シン、マイトマイシンＣ等が知られている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】しかし、これらは毒性
が強く、満足すべきものではない。これらの用途に適す
る新規化合物の発明が待たれている。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、微生物の
代謝産物について、種々検索した結果、糸状菌に属する
一菌株が、哺乳動物の癌細胞に対する細胞増殖抑制作用
を有する生理活性物質ＮＫ１２８３８を産生し、ＮＫ１
２８３８またはその薬理学上許容される塩が癌細胞に対
する細胞増殖抑制作用を有する事を見出した。さらに、
本発明者らはこれらの知見を基に鋭意検討の結果、本発
明を完成するに至った。即ち、本発明は次の（１）〜
（６）に関する。

【０００５】（１）式（１）

【化２】で表される新規生理活性物質ＮＫ１２８３８、またはそ
の薬理学上許容される塩。

【０００６】（２）下記の理化学的性質をもつ生理活性
物質ＮＫ１２８３８、またはその薬理学上許容される
塩。１）外観：白色粉末２）融点：１７９−１８０°Ｃ３）分子式：Ｃ３７Ｈ５１ＮＯ９（高分解能マススペク
トル法により測定）４）分子量：６５３（ＦＡＢ−ＭＳ法により測定した
（Ｍ＋Ｎａ）^＋＝６７６）５）紫外線吸収スペクトル：メタノール中で測定した
結果は、第１図に示す通りで、２１２ｎｍ（ε３４８０
０）、２５３ｎｍ（ε１２０５０）、３０４ｎｍ（ε３
２５０）に極大吸収を示す。６）赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤で測定し
たスペクトルを第２図に示す。７）水素核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム中、４
００ＭＨｚで測定したスペクトルを第３図に示す。８）炭素核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム中、１
００ＭＨｚで測定したスペクトルを第４図に示す。９）溶解性：メタノール、アセトン、酢酸エチル、クロ
ロホルム、ジメチルスルホキシドに易溶。水に難溶。１０）呈色反応：りん酸モリブデン酸硫酸、硫酸、過マ
ンガン酸カリウムに陽性１１）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値：０．４１シリカゲル（メルク社製シリカゲル６０Ｆ２５４）薄
層を用い、展開溶媒として、ヘキサン−アセトン（３：
２）を用いた。

【０００７】（３）１または２項に記載の生理活性物質
ＮＫ１２８３８あるいは、その薬理学上許容される塩お
よび医薬用添加剤とからなる医薬。（４）１または２項に記載の生理活性物質ＮＫ１２８３
８あるいは、その薬理学上許容される塩および医薬用添
加剤とからなる抗腫瘍剤。（５）Ｓｔｉｌｂｅｌｌａ属に属し、前記１または２項
に記載された生理活性物質ＮＫ１２８３８を生産する能
力を有する微生物を、栄養培地にて培養し、培養物中に
生理活性物質ＮＫ１２８３８を生成蓄積せしめ、これを
採取することを特徴とする生理活性物質ＮＫ１２８３８
の製造法。（６）スティルベラエスピーエヌエフ１２８３８
（Ｓｔｉｌｂｅｌｌａｓｐ．ＮＦ１２８３８）株
（独立行政法人産業技術総合研究所寄託番号ＦＥＲ
ＭＰ−１８２９３）またはその変異株。

【０００８】

【発明の実施の形態】以下に本発明について詳細に述べ
るが、本発明はこれらに限定されるものではない。本発
明において、生理活性物質ＮＫ１２８３８は、Ｓｔｉｌ
ｂｅｌｌａ属に属するその生産菌を培養し、該化合物を
生成せしめ、この培養物より採取する事により得られ
る。ＮＫ１２８３８は、下記の平面構造式（１）を有す
る。

【０００９】

【化３】

【００１０】ＮＫ１２８３８の生産菌の代表的なものと
して、例えば土壌より分離したスティルベラ・エスピー
（Ｓｔｉｌｂｅｌｌａｓｐ．）ＮＦ１２８３８株が
挙げられる。以下に、本菌株の菌学的性状を示す。

【００１１】１．各種培地での生育各種培地上で２５℃、１４日間培養したときの生育状態
を表１に示す。本菌株は、オートミール寒天培地上で気
中菌糸の形成は少なく、培地表面から束状の分生子柄
（ｓｙｎｎｅｍａｔａ）を形成し、同心円状に広がる。
分生子の形成に伴い培地表面は粒状となる。周縁は全縁
となる。集落表面の色調は淡黄色（Ｓｔｒａｗ）から淡
卵黄色（ＰａｌｅＬｕｔｅｕｓ）となる。培地は淡赤
ワイン色(ＰａｌｅＶｉｎａｃｅｕｓ)を呈する。裏面
色調は淡赤ワイン色(ＰａｌｅＶｉｎａｃｅｕｓ)から暗
赤紫褐色（ＶｉｎａｃｅｕｓＢｕｆｆ）となる。２％
麦芽エキス寒天培地上で気中菌糸の形成は少なく、培地
表面から束状あるいは単生の分生子柄を形成し、同心円
状に広がる。分生子の形成は豊富で培地表面は粒状とな
る。周縁は全縁となる。集落表面の色調は淡黄色（Ｓｔ
ｒａｗ）から黄褐色（Ｂｕｆｆ）となる。培地裏面はオ
ーカー色(Ｏｃｈｒｅｏｕｓ)から黄褐色（Ｂｕｆｆ）と
なる。ポテトデキストロース寒天培地上で気中菌糸の形
成は良好で綿毛状、白色を呈する。同心円状に分生子柄
束を形成し分生子を豊富に着生する。周縁は全縁とな
る。集落表面の色調は淡黄色（Ｓｔｒａｗ）から淡卵黄
色（ＰａｌｅＬｕｔｅｕｓ）となる。培地裏面は黄褐
色（Ｂｕｆｆ）から淡赤ワイン色(ＰａｌｅＶｉｎａｃ
ｅｕｓ)、暗赤紫褐色（ＶｉｎａｃｅｕｓＢｕｆｆ）と
なる。

【００１２】

【表１】表１培地形態表面色調裏面色調分生子形成可溶性色素集落直径(mm) ＯＭＡ平坦−粒状淡黄色淡赤ワイン色良好赤紫褐色５８−６０淡卵黄色暗赤紫褐色ＭＡ平坦−粒状淡黄色オーカー色良好無し５３−５５黄褐色黄褐色ＰＤＡ綿毛状淡黄色黄褐色良好赤紫褐色５０−５２淡卵黄色暗赤紫褐色ＣＺＡ綿毛状黄褐色黄褐色不良無し６０−６２白色ＣＭＡ平坦無色無色不良無し５３−５５白色白色

【００１３】２．形態的特徴オートミール寒天培地上で２５℃、２週間培養した本菌
を光学顕微鏡下で観察したときの形態的特徴を以下に記
載する。菌糸は、無色、滑面、隔壁を有し、幅は、１−
３μｍとなる。分生子柄は無色、滑面、隔壁を有し基中
菌糸より生じる。そして分生子柄は平行に重なり合い束
状となり円筒形の分生子柄束を形成する。分生子柄束は
淡黄色（Ｓｔｒａｗ）を呈し、高さは２５０−９５０μ
ｍ、幅は２５−１００μｍとなる。分生子柄は分枝を数
回繰り返しながら伸長し、それぞれの分枝部で２−４本
分枝を生じる。分枝部細胞は無色、滑面で、大きさは１
３−３０×１−２μｍとなる。最後の分枝上部で分生子
形成細胞を形成する。分生子形成細胞は、単生あるいは
３−５本輪生する。分生子形成細胞はフィアライド型で
無色、滑面で円筒形となり、先端の開口部は細くくびれ
る。大きさは１８−３０×１−１．５μｍ（開口部幅は
０．８−１μｍ）となる。分生子はフィアロ型でフィア
ライドの先端から生じる。分生子は湿性で分生子柄束先
端に球状の分生子塊を形成する。分生子塊の色調は淡黄
色（Ｓｔｒａｗ）から淡卵黄色（ＰａｌｅＬｕｔｅｕ
ｓ）となる。分生子塊の直径は１２５−５７５μｍとな
る。分生子は無色、滑面、単細胞、楕円形となる。大き
さは５−８×２−３μｍとなる。

【００１４】３．生理学的性質本菌株は、好気性で、至適ｐＨは６前後である。オート
ミール寒天培地上において生育至適温度は２５℃付近
で、４℃では生長しない。また、３７℃では生育出来な
い。

【００１５】以上の菌学的および生理学的性質より本菌
株は、ホークスワース(Ｄ．Ｌ．Ｈａｗｋｓｗｏｒｔ
ｈ)、サットン(Ｂ．Ｃ．Ｓｕｔｔｏｎ)、エーンズワー
ス(Ｇ．Ｃ．Ａｉｎｓｗｏｒｔｈ)編、「エーンズワース
・アンド・ビスビーズ・ディクショナリー・オブ・ザ・
ファンジャイ第７版（ＡｉｎｓｗｏｒｔｈａｎｄＢ
ｉｓｂｙ‘ｓＤｉｃｔｉｏｎａｒｙｏｆｔｈｅ
Ｆｕｎｇｉ，７ｔｈｅｄ．（１９８３））」に従
い、真菌門、不完全菌亜門、不完全糸状菌綱、スティル
ベラ属菌に分類されることが判明したので本菌株をステ
ィルベラエスピーエヌエフ１２８３８（Ｓｔｉｌｂ
ｅｌｌａｓｐ．ＮＦ１２８３８）と同定した。な
お、該菌株は、独立行政法人産業技術総合研究所に寄託
番号ＦＥＲＭＰ−１８２９３として寄託されてい
る。

【００１６】本発明に用いるスティルベラ属に属する菌
株は他のスティルベラ属の菌株と同様、その性状が変化
しやすい。例えば、紫外線、エックス線および薬品など
を用いる人工的な変異手段で容易に変異しうるものであ
る。このように得られたどの様な変異株であっても本発
明の対象とする生理活性物質ＮＫ１２８３８の生産能を
有するものは、全て本発明に使用する事ができる。

【００１７】本発明によりＮＫ１２８３８を製造するに
は、まず前記菌株を放線菌が利用し得る栄養物を含有す
る培地で好気的に培養する。栄養源としては、従来から
放線菌の培養に利用されている公知のものが使用でき、
例えば炭素源としては、グルコース、グリセリン、ガラ
クトース、水飴、デキストリン、シュクロース、でんぷ
ん、糖蜜、動・植物油等を使用できる。また、窒素源と
しては、大豆粉、小麦、小麦胚芽、コーンスティープ・
リカー、肉エキス、ペプトン、酵母エキス、硫酸アンモ
ニウム、硝酸ソーダ、尿素等を単独かまたは組み合わせ
て用いることができる。その他、必要に応じ、ナトリウ
ム、コバルト、塩素、硫酸、燐酸、およびその他のイオ
ンを生成することのできる無機塩類を添加することは有
効である。また、菌の生育を助け、生理活性物質ＮＫ１
２８３８の生産を促進するような有機および無機物を適
当に添加することができる。

【００１８】培養法としては、液体培養法、、特に深
部攪拌培養法が適している。培養に適当な温度は１５〜
３７°Ｃであるが、多くの場合、２６〜３０°Ｃ付近で
培養する。生理活性物質ＮＫ１２８３８の生産は、培地
や培養条件により異なるが、振盪培養、タンク培養とも
通常１〜１０日の間でその蓄積が最高に達する。培養物
中の生理活性物質ＮＫ１２８３８の蓄積量が最高になっ
た時に、培養を停止し、培養液から目的物質を単離す
る。

【００１９】生理活性物質ＮＫ１２８３８の培養液から
の採取にあたっては、その性状を利用した通常の分離手
段を適宜組み合わせて精製することができる。すなわ
ち、培養液を遠心分離あるいはろ過によりろ液と菌体部
に分離し、ろ液からはそれをダイアイオンＨＰ−２０
（商品名：三菱化成製）などに吸着させ、メタノ−ル等
の低級アルコールやアセトン等により溶出するか、ある
いは酢酸エチルまたは１−ブタノ−ル等の有機溶媒で抽
出することにより、一方の菌体部からはそれをメタノ−
ル等の低級アルコールやアセトン等で抽出することによ
りＮＫ１２８３８の画分を得ることができる。

【００２０】上述の方法に加え、物質の採取に用いられ
る公知の方法、たとえば吸着クロマトグラフィー、ゲル
濾過クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィーより
のかき取り、高速液体クロマトグラフィー等を適宜組み
合わせ、あるいは繰り返すことによってＮＫ１２８３８
を純粋に単離することができる。

【００２１】上記のようにして得られたＮＫ１２８３８
の理化学的性質を下記に示す。１）外観：白色粉末２）融点：１７９−１８０°Ｃ３）分子式：Ｃ３７Ｈ５１ＮＯ９（高分解能マススペク
トル法により測定）４）分子量：６５３（ＦＡＢ−ＭＳ法により測定した
（Ｍ＋Ｎａ）^＋＝６７６）５）紫外線吸収スペクトル：メタノール中で測定した
結果は、第１図に示す通りで、２１２ｎｍ（ε３４８０
０）、２５３ｎｍ（ε１２０５０）、３０４ｎｍ（ε３
２５０）に極大吸収を示す。６）赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤で測定し
たスペクトルを第２図に示す。７）水素核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム中、４
００ＭＨｚで測定したスペクトルを第３図に示す。８）炭素核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム中、１
００ＭＨｚで測定したスペクトルを第４図に示す。９）溶解性：メタノール、アセトン、酢酸エチル、クロ
ロホルム、ジメチルスルホキシドに易溶。水に難溶。１０）呈色反応：りん酸モリブデン酸硫酸、硫酸、過マ
ンガン酸カリウムに陽性１１）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値：０．４１シリ
カゲル（メルク社製シリカゲル６０Ｆ２５４）薄層を
用い、展開溶媒として、ヘキサン−アセトン（３：２）
を用いた。

【００２２】本発明において薬理学上許容される塩と
は、通常とり得る塩であれば何でも良いが、アルカリと
の塩すなわち、ナトリウム塩、カリウム塩等、または酸
との塩、例えば塩酸塩、硫酸塩、燐酸塩等が好ましい。

【００２３】医薬品として使用する場合の製剤化および
投与方法は従来公知の種々の方法が適用できる。すなわ
ち、投与方法としては例えば注射、経口または直腸投与
などが可能である。製剤形態としては、例えば注射剤、
粉末剤、顆粒剤、錠剤、座剤またはカプセル剤などの形
態がとり得る。

【００２４】製剤化の際にＮＫ１２８３８またはそれら
の薬理学上許容される塩に悪影響を与えない限り、医薬
用に用いられる種々の医薬用添加剤、すなわち、担体や
その他の助剤、例えば安定剤、防腐剤、無痛化剤、乳化
剤等が必要に応じて使用され得る。製剤において、ＮＫ
１２８３８またはその薬理学上許容される塩の含量は製
剤形態等により広範囲に変えることが可能であり、一般
には０．０１〜１００％（重量）、好ましくは０．１〜
７０％（重量）含有し、残りは通常医薬用に使用される
添加剤からなる。

【００２５】ＮＫ１２８３８またはその薬理学上許容さ
れる塩の投与量は症状、投与方法等により異なるが、成
人１人１日あたり０．０１〜８００ｍｇ程度である。

【００２６】以下に試験例を挙げて、ＮＫ１２８３８
の、哺乳動物の癌細胞に対する細胞増殖抑制作用につい
て述べる。

【００２７】試験例細胞増殖抑制作用１０％牛胎児血清を添加したＲＰＭＩ１６４０培地を用
いて、ヒト乳癌細胞ＭＤＡ−ＭＢ−４５３およびＴ−４
７Ｄ，ヒト大腸癌細胞ＨＣＴ１１６及びヒト前立腺癌細
胞ＬＮＣａＰを、３７°Ｃ、５％ＣＯ_２下で培養し
た。この細胞を、９６穴プレートへ播種し、１日間培養
した後、ＮＫ１２８３８を添加した。薬剤処理は、６日
間行い、増殖度は、メチレンブルー法により評価した。
結果は、用量−反応曲線からＩＣ_５０値を求め、その値
を表２に示した。

【００２８】

【表２】

【００２９】試験例から明らかな様に、本発明のＮＫ１
２８３８は、哺乳動物の癌細胞に対する細胞増殖抑制作
用を示す。

【００３０】

【実施例】以下に本発明の実施例を示すが、これは単な
る一例示であって何等、本発明を限定するものではな
く、種々の変法が可能である。

【００３１】実施例１ＮＫ１２８３８の醗酵法による生産（１）発酵種母作成用の培地として、スターチ３．０％、グルコー
ス２．０％、アジプロン（味の素社製）１．０％、グル
テンミール１．０％、酵母エキス（日本製薬社製）０．
２％、燐酸水素二カリウム０．０５％、硫酸マグネシウ
ム０．０５％、塩化カリウム０．１％、硫酸銅０．００
０６４％、硫酸亜鉛０．０００１５％、硫酸鉄０．００
０１１％、塩化コバルト０．０００１％、塩化マンガン
０．０００７９％から成る培地を用いた。なお、滅菌前
の培地はｐＨ６．７に調整して使用した。

【００３２】５００ｍｌ容三角フラスコに上記培地を１
００ｍｌ分注し、１２０℃で２０分間滅菌し、これにス
ティルベラエスピーエヌエフ１２８３８（Stilbell
a sp.NF 12838）の斜面培養の１〜２白金耳を接種し、
２５℃、２００回転／分の回転式振盪機にて２日間培養
し、これを種母とした。

【００３３】さらにこの種母を、同様の培地１００ｍｌ
を含む４０本の５００ｍｌ容三角フラスコに、接種量が
１％となるように接種し、同一条件下で４日間培養を行
った。培養終了後、培養液４リットルをろ過し、培養ろ
液３リットルを得た。

【００３４】（２）精製このろ液を０．３リットル（φ６×１１ｃｍ）のダイア
イオンＨＰ−２０（三菱化成製）のカラムに吸着させ、
１リットルの水と１リットルの４０％メタノール水溶
液、１リットルの８０％メタノール水溶液にて順次洗浄
した後、１リットルのメタノールにて溶出し、さらに溶
出液を１００ｍｌに濃縮した。この濃縮液を１５０ｍｌ
の酢酸エチルで２回抽出した。得られた酢酸エチル層を
濃縮乾固しＮＫ１２８３８を含む粗画分１７７．５ｍｇ
を得た。

【００３５】このＮＫ１２８３８を含む濃縮乾固物１７
７．５ｍｇをヘキサン−アセトン（１０：１）混合液に
溶解後、あらかじめ同混合溶媒で充填したシリカゲルカ
ラム（ＢＷ−７００、富士シリシア化学社製）４７ｍｌ
（φ２×１５ｃｍ）のカラムにかけ、同混合溶媒を２０
０ｍｌ、５：１の混合溶媒を２００ｍｌ流した後、５：
２の混合溶媒で溶出、分画した。溶出した分画のうち、
ＮＫ１２８３８を多く含む画分を確認してから濃縮乾固
しＮＫ１２８３８を含む粗画分６３．６ｍｇを得た。

【００３６】次いでこの混合物（６３．６ｍｇ）を逆相
高速液体クロマトグラフィーにて精製した。即ち、逆相
カラムのペガシルＯＤＳ（３０φ×２５０ｍｍ、センシ
ュー科学社製）を用い、流速２０ｍｌ／分、５５％アセ
トニトリル水溶液を用いて溶出した。ＮＫ１２８３８
は、保持時間５０分に溶出された。この溶出画分（６０
ｍｌ）を集めアセトニトリルを留去し、３０ｍｌの酢酸
エチルで２回抽出した。得られた酢酸エチル層を濃縮乾
固し、純粋なＮＫ１２８３８（４５．９ｍｇ、白色粉
末）を得た。

【００３７】

【発明の効果】本発明では細胞増殖抑制作用を示す生理
活性物質ＮＫ１２８３８またはその薬理上許容される塩
が提供された。これらは、悪性腫瘍に対する化学療法剤
などとして利用できる。

【図面の簡単な説明】

【図１】ＮＫ１２８３８のメタノール溶液の紫外線吸収
スペクトルを図１に示す。

【図２】ＮＫ１２８３８の臭化カリウム錠内での赤外線
吸収スペクトルを図２に示す。

【図３】ＮＫ１２８３８の重クロロホルム中で測定した
４００ＭHz水素核磁気共鳴スペクトルを図３に示す。

【図４】ＮＫ１２８３８の重クロロホルム中で測定した
１００ＭHz炭素核磁気共鳴スペクトルを図４に示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考） //(Ｃ１２Ｎ 1/14 Ｃ１２Ｒ 1:645 Ｃ１２Ｒ 1:645） (Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ１２Ｒ 1:645） (72)発明者黒岩俊介埼玉県熊谷市石原2138−９Ｆターム(参考） 4B064 AE59 CA05 CC06 CE10 DA01 4B065 AA57X BA22 BB02 BB12 BB14 BB19 BB26 BB29 BC03 BC08 BC26 CA18 CA44 4C050 AA01 BB04 CC14 DD08 EE01 FF02 GG03 HH02 4C086 AA01 AA02 AA03 AA04 CB22 MA01 MA04 NA14 ZB26

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式（１）【化１】で表される新規生理活性物質ＮＫ１２８３８、またはそ
の薬理学上許容される塩。
【請求項２】下記の理化学的性質をもつ生理活性物質Ｎ
Ｋ１２８３８、またはその薬理学上許容される塩。１）外観：白色粉末２）融点：１７９−１８０°Ｃ３）分子式：Ｃ３７Ｈ５１ＮＯ９（高分解能マススペク
トル法により測定）４）分子量：６５３（ＦＡＢ−ＭＳ法により測定した
（Ｍ＋Ｎａ）^＋＝６７６）５）紫外線吸収スペクトル：メタノール中で測定した
結果は、第１図に示す通りで、２１２ｎｍ（ε３４８０
０）、２５３ｎｍ（ε１２０５０）、３０４ｎｍ（ε３
２５０）に極大吸収を示す。６）赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤で測定し
たスペクトルを第２図に示す。７）水素核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム中、４
００ＭＨｚで測定したスペクトルを第３図に示す。８）炭素核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム中、１
００ＭＨｚで測定したスペクトルを第４図に示す。９）溶解性：メタノール、アセトン、酢酸エチル、クロ
ロホルム、ジメチルスルホキシドに易溶。水に難溶。１０）呈色反応：りん酸モリブデン酸硫酸、硫酸、過マ
ンガン酸カリウムに陽性１１）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値：０．４１シリカゲル（メルク社製シリカゲル６０Ｆ２５４）薄
層を用い、展開溶媒として、ヘキサン−アセトン（３：
２）を用いた。
【請求項３】請求項１または２に記載の生理活性物質Ｎ
Ｋ１２８３８あるいは、その薬理学上許容される塩およ
び医薬用添加剤とからなる医薬。
【請求項４】請求項１または２に記載の生理活性物質Ｎ
Ｋ１２８３８あるいは、その薬理学上許容される塩およ
び医薬用添加剤とからなる抗腫瘍剤。
【請求項５】Ｓｔｉｌｂｅｌｌａ属に属し、請求項１ま
たは２に記載された生理活性物質ＮＫ１２８３８を生産
する能力を有する微生物を、栄養培地にて培養し、培養
物中に生理活性物質ＮＫ１２８３８を生成蓄積せしめ、
これを採取することを特徴とする生理活性物質ＮＫ１２
８３８の製造法。
【請求項６】スティルベラエスピーエヌエフ１２８
３８（Ｓｔｉｌｂｅｌｌａｓｐ．ＮＦ１２８３８）
株（独立行政法人産業技術総合研究所寄託番号ＦＥＲ
ＭＰ−１８２９３）またはその変異株。