JP2001526773A

JP2001526773A - 液体検体から細胞試料を収集する方法および装置

Info

Publication number: JP2001526773A
Application number: JP52170698A
Authority: JP
Inventors: ゴードン，ジユリアン
Original assignee: アボツト・ラボラトリーズ
Priority date: 1996-11-05
Filing date: 1997-11-05
Publication date: 2001-12-18
Also published as: WO1998020352A3; EP0937256A2; WO1998020352A2; CA2269639A1; US5976824A

Abstract

(57)【要約】液体検体から当該結合メンバーを収集する方法および装置は、検体を入れる収集レセプタクルを、収集レセプタクルの排出口と連絡している親和性フィルター媒体、および当該結合メンバーを捕獲するために、収集レセプタクルからフィルターを通して検体を引き出すための移送装置と共に使用する。収集レセプタクル、親和性フィルター媒体およびその担体、移送装置は臨床環境で使用するためのキットの形で供給することができる。減圧容器を使用することができ、移送装置およびこの容器もフィルター媒体を通過した液体検体用の処理レセプタクルとしても作用できる。

Description

【発明の詳細な説明】液体検体から細胞試料を収集する方法および装置本出願は、１９９３年１１月２４日出願の同時係属出願である米国特許出願第０８／１５８，２３３号の部分継続出願であり、前記出願の開示全体を参考として本明細書に含めるものとする。発明の分野本発明は一般に、液体検体から成分を単離して、これらの成分をその後の分析に使用できるようにする装置に関する。より詳細には、本発明は、尿やマウスウォッシュなどの大量の液体検体を採取し、その液体成分から種々の成分を分離し、細胞成分を顕微鏡観察およびＤＮＡ分析を含めた分析に使用する装置を対象とする。発明の背景患者における特定の疾患または疾病状態の存在を検出するための臨床分析用液体検体の採取についてはよく知られている。典型的には、液体検体またはスワブを採取し、所望のアッセイに依存して、検体の適当な成分を抽出する。所望の成分が細胞または亜細胞成分である場合、一般に、検体を遠心分離して、細胞ペレットを得る。細胞ペレットを、任意に溶解させると、亜細胞成分が放出される。また、遠心の前に溶解させることも可能であり、この場合には、ペレット化した破片を分析することができる。遠心分離装置は持ち運びが容易ではないため、検体の採取、特に大量の液体検体の採取は、臨床または実験室の環境にのみ限定されてきた。長年にわたりスワブの輸送が行れてきたが、この採取プロセスでは、確実に、有用な検体を採取し、スワブからの再縣濁した細胞を注意深く保存し、輸送するのに、訓練された技術者が一般に必要とされる。最近、分析用に患者の細胞検体を採取する方法として、マウスウォッシュ検体が導入された。典型的には、口内リンスまたはマウスウォッシュを患者に与える。口内リンスまたはマウスウォッシュを、リンスステップ終了の際に、採取容器に吐き出す。得られたマウスウォッシュ検体は、吐き出されたリンスと混じった唾液および剥離した口腔内細胞を含んでいる。このようなマウスウォッシュ検体を分析して、種々の成分またはある種の患者の属性を決定することができる。例えば、The Lancet，Vol．340、１９９２年７月２５日、２１４〜２１６ページに報告されているように、英国では、嚢胞性線維症スクリーニング用に患者の細胞を採取するためのマウスウォッシュ検体採取方法が研究されてきた。Cellmark DiagnosticsはＣＦ変異分析システムの一環として、マウスウォッシュ検体からＤＮＡを抽出する方法を開発した。Ｃｅｌｌｍａｒｋの方法では、マウスウォッシュ検体を採取した後、遠心し、ペレット化した細胞から所望の成分を抽出する。遠心分離ステップは通常、採取場所で実施する。このシステムを使用して採取、分析を実施するためには、遠心分離および抽出用の機器が利用できる場所で検体を採取しなければならない。さらに、全検体のほんの一部しか試験に必要ではない。これは、検体全体を生存させておく必要があるために、抽出ステップが終了するまで、全検体を保存しておく必要があることを意味している。典型的な例では、検体の１％しか分析に必要ではない。これは、保存検体の９９％が最終的に廃棄されることを意味する。このように大量の検体を維持するためには、検体の輸送、保存および廃棄にかかる費用が重要になる。マウスウォッシュの採取は、ヒト患者から細胞検体を採取する、効率的で、望ましい非侵襲方法であることが認められているが、輸送、保存および廃棄の問題から、広く受け入れられてはいない。さらに、主要な細胞採取ステップを中枢の場所で実施しなければならないことから、この採取方法の価値がさらに低下している。マウスウォッシュ検体を適切に分析するためには、滅菌した容器内に検体を液体の形で採取し、密封し、中枢の遠心分離および抽出場所に輸送しなければならない。これは多くの他の採取した体液の液体検体についても同様である。従って、検体採取の利点より、検体の保存および分析場所への輸送に必要とされるやっかいで、不便で、コストのかかるステップの不都合さの影響の方が大きいことが多い。液体検体技法が広く受け入れられるには、液体溶液から得られる検体の採取、保存および輸送の難しさを最小限にするという要求を満たさなければならない。例えば、１９７５年６月１０日にK.D．Bagshaweに発行された「Performance of Chemical or Biological Reactions within Absorbent Matrix Pad」という名称の米国特許第３，８８８，６２９号は、抗原成分分析用の、離散マトリックスパッドを通して液体検体を排出するシステムを示している。しかし、この特許は、もとの検体の採取にも、分析用の細胞の単離にも関係していない。１９９０年１月２日にJ．Vcelkaに発行された「Specimen Filtration Device」という名称の米国特許第４，８９１，１３４号も同様である。これらの特許のいずれも、細胞を溶解させ、当該抗原成分を放出させてから、マトリックスフィルターにかける。検体をマトリックスパッドなどの試験媒体に導入する多くの例が入手できるが、このようなシステムの臨床的な使用は一般に限られている。その理由は、採取場所から分析施設まで全液体試験検体を輸送する必要があり、その結果、密封し、滅菌した容器や出荷用の小包が必要となり、この取り扱いには非常に注意が必要とされるからである。これは、検体が（血液検体の採取などの）侵襲的技法を使用して得られたものであっても、非侵襲的に得られたもの（尿やマウスウォッシュ検体など）であっても、同様である。従って、液体検体を採取し、輸送するための臨床環境の改善がいまだに必要とされている。種々の代謝異常産物について新生児全血をスクリーニングするためには、いわゆる「ガスリースポット」が全世界で使用されている｛Neonatal screening for inborn error of metabolism (H.Bickel、R.GuthrieおよびG.Hammersen編)、Spring Verlag、ベルリン、１９８０年の２５９〜２７０ページ、R．Guthrieの「Organization of ａ regional newborn screening laboratory」｝。乾燥させた血液スポットは、輸送能および１つのサンプルで複数の分析を実施し、成功させる能力が促進されるため、非常に有用である。より最近、このような乾燥血液スポットの有用性は、ＤＮＡ増幅および分析を含む試験にも広がっている(AcCabe ERB．１９９１年、「Utility o f PCR for DNA Analysis from Dried Blood Spots on Filter Paper Blotters」，PCR Method and Applications，Volume 1:pp 99-106)。しかし、この技術の適用は限られており、血液試料の分析にのみ使用されている。発明の概要本発明は、液体検体から収集される結合メンバーの採取および輸送を効率的にする方法、装置およびキットを対象とする。本発明は特に、大量の液体検体、特に、非侵襲的方法で採取した大量の液体検体からの細胞成分の単離、例えば、マウスウォッシュや尿検体から収集できる抗体の単離に有用である。しかし、本発明は、血液やＣＳＦ検体などの侵襲的技法で採取した他の液体検体の採取および分析にも有用でありうると理解されたい。１つの実施形態のよると、第一結合メンバーを含有する液体検体を、排出口を有する収集レセプタクルの開放端に入れることにより、検体から結合メンバーを収集する。排出口は、親和性フィルター媒体と排出口との間の密封通路により、媒体と流体連絡している。基本的には、親和性フィルター媒体は、フィルターと、フィルターに固定された、第一結合メンバーに特異的な第二結合メンバーを含む。フィルター媒体は、フィルターコンテナの入口と出口の間に収容され、入口は排出口と密封可能に係合されるようになされている。フィルター媒体に差圧をかけるが、この差圧は密封通路により液体検体にまで及び、液体検体を収集レセプタクルの排出口および親和性フィルター媒体を通過させる。この差圧をかけるには、閉鎖減圧チャンバーの貫通可能なクロージャー要素に出口を刺し込み、それによって前記出口と閉鎖減圧チャンバーとを密封流体連絡させ、その結果、フィルターコンテナを相対真空下におき、前記第一結合メンバーをフィルター媒体上に捕獲する。液体検体から結合メンバーを収集する収集装置も提供される。この装置は、（ｉ）収集レセプタクルであって、液体検体を受ける開放端と、そこを通って前記液体検体が収集レセプタクルから出る排出口とを有する収集レセプタクルと、（ｉｉ）フィルターコンテナであって、前記収集レセプタクルの排出口と密封可能に係合するようなされた入口と、そこを通って前記液体検体がフィルターコンテナから出る出口と、フィルターコンテナ内で前記入口と出口の間で支持されている親和性フィルター媒体とを含み、入口を介して前記フィルターコンテナに入ってきた液体検体は、前記親和性フィルター媒体を通過した後、前記出口を介してフィルターコンテナを出、前記親和性フィルター媒体はフィルターに固定された結合メンバーを含み、前記出口は破裂可能な封止材に密封可能に刺し込むようになされているフィルターコンテナと、（ｉｉｉ）破裂可能な封止材を有する減圧容器であって、前記破裂可能な封止材に前記出口を刺し込むことによりこれらを密封連絡して、出口に相対真空がかかり、その結果、親和性フィルター媒体を通して液体検体を排出する減圧容器とを含む。液体検体から特異的結合メンバーを収集する細胞試料収集キットも提供される。キットは、（ｉ）入口と出口を有するフィルターコンテナと、（ｉｉ）フィルターコンテナの入口と出口の間に取り外し可能なように収容された親和性フィルター媒体と、（ｉｉｉ）液体検体を受ける開放端と、フィルターコンテナの入口と連通して選択的に取り付けられるようになされた排出口を有する収集レセプタクルと、（ｉｖ）収集レセプタクルから液体検体を引き出し、親和性フィルター媒体を通して、フィルター媒体で結合メンバーを捕獲するため、フィルター媒体に圧力差を発生させるように、フィルターコンテナの出口と連通するようなされている減圧チャンバーと、（ｖ）親和性フィルター媒体を試験のための遠隔場所に送ることを求める命令とを含んでいる。本発明の別の実施形態によれば、特異的結合メンバーの１つは固体支持体材料に結合し、収集レセプタクル内に含まれている。好ましい固体支持体材料には、例えば、本発明方法でフィルター媒体上に収集されるラテックスの微粒子などの微粒子が含まれる。図面の簡単な説明第１図は、本発明の検体収集装置であって、特にマウスウォッシュ検体とともに使用するのに十分に適する装置の斜視図である。第２図は、第１図に示す検体収集装置の縦割の断面図である。第３図は第２図と同じ方向から見た図であり、検体の細胞成分を含有する試料をフィルター媒体上に収集するために、検体がフィルターコンテナを通って吸引された後の収集装置を示す。第４図は、フィルター媒体上における液体検体の細胞成分の捕獲を概略的に示す拡大破断図である。第５図は、本発明を具体化する典型的なキットの構成要素を示す。第６図は、本発明によるフィルターコンテナの他の実施形態の断面図である。第７図は第６図と同様の断面図であり、フィルター媒体とアクセスできるように、結合する半体同士に分離したコンテナを示す。第８図は、通常通り第７図の線８−８に沿って得られた断面図である。第９図は第３図に類似し、第６図、第７図、および第８図のフィルターコンテナを利用している。第１０図は、収集した細胞をフィルター媒体から検定管へと取り外す方法を示す。第１１図は、第５図のキットアセンブリに示されるようなフィルターコンテナの代替の実施形態を示し、フィルター媒体とアクセスできるように、フィルターコンテナが分解された状態で示してある。第１２図は第１１図の装置の平面図であり、上半体の下側を示す。第１３図は第１１図の装置の平面図であり、底半体の上側を示す。第１４図は、一般に第１１図の線１４−１４に沿って得られた拡大断面図であるが、上半体と底半体が結合した関係を示す。第１５図および第１６図は、実施例４および５で使用される特定のＬＣＲプローブが、それらの各標的上にそれぞれどのように位置しているかを示す。第１７図および第１８図は、本発明によって細胞を収集した後にＤＮＡを試験したストリップの写真であり、実施例４および実施例５にそれぞれより詳細に説明する。発明の詳細な説明以下に、方法および理論の説明と共に、種々の実施形態および実施例を含め、本発明を詳細に説明する。第Ｉ部：一般的な説明本発明の収集装置は、分析用の液体検体から抽出した細胞を収集、保管するのに特に適している。本発明では、「検体」とは患者から採取した原材料であり、「試料」とは何らかの方法で、例えばもとの検体の液体部分の大部分を除去することにより試料の細胞を濃縮して、予処理済み検体を表すように、液体「検体」と「試料」を区別している。液体検体は、血液および脳脊髄液（ＣＳＦ）の場合のように侵襲的技法で得ることができるが、尿や、膣洗浄液、マウスウォッシュなどを含むがこれらに限定されない種々の体部や体腔のリンスなどのように非侵襲的に得ることもできる。「リンス」または「洗浄」とは、体部または体腔から液体と細胞の混合物が得られるように、体部または体腔を洗う液体を大量使用することを意味する。液体検体とは、所望の試料成分の量が存在する液体の量に対して比較的少ない場合の、「高体積」検体と考えれらる。例えば、予期される細胞成分（典型的には、各々、細菌および口腔内細胞）含量が検体として得られる液体の体積に対して比較的少量であるため、尿およびマウスウォッシュは「高体積」検体と考えられる。高体積検体は、少量の希釈溶液に再縣濁することの多い培養スワブや遠心ペレットなどの検体と区別しなければならない。検体は、ヒト、動物、食物、環境等を限定なしに含むほぼすべての供給源から採取することができる。これらの液体検体は収集レセプタクルに集められ、そこから、所望の成分、一般には当該の結合メンバーを検体から抽出するよう選択されたフィルター媒体を通して排出される。次いて、フィルター媒体上の所望の成分をアッセイすることができる。本発明は、臨床技術者になじみのある方法論を取り入れるよう設計されており、フィルター媒体に圧力をかけ、検体をフィルターに通過させることによるものである。一般に、本発明のシステムは、３つの成分、すなわち、収集レセプタクル、親和性フィルター媒体（一般にハウジング内に封入されている）、流体収集管を含んでいる。本明細書で使用する「親和性フィルター媒体」とは、特異的結合メンバーを固定させたフィルター媒体を意味する。本明細書で使用する「特異的結合メンバー」とは、特異的結合対のメンバーを意味し、特異的結合対とは、当技術分野で一般に、分子の一方が化学的または物理的手段を介してもう一方の分子を特異的に結合する２つの異なる分子を意味するものとして知られている。抗原−抗体の特異的結合対の他に、ハプテン−抗体、ビオチン−アビジンまたはストレプトアビジン、相補的な核酸配列、酵素−基質またはコファクター等が特異的結合対の例である。従って、本発明によれば、特異的結合対の一方をフィルター媒体に固定し、検体から特異的結合対のもう一方のメンバーを抽出するように設計した親和性フィルター媒体を形成することができる。任意のよく知られた化学的または物理的技法を使用して、結合メンバーをフィルター媒体に固定させて、親和性フィルター媒体を形成することができる。親和性フィルター媒体を合成するこのような技法は当業者が選択できるものであり、例えば、その特異的結合メンバーの特異的結合特性を破壊しない任意の化学的手段および／または物理的手段が含まれる。別の実施形態では、特異的結合対のメンバーを固体支持体材料に結合させ、収集レセプタクル内に置くこともできる。固体支持体材料は、当技術分野でよく知られており、その例には、プラスチック、ガラス、ラテックス、コロイド状物質、磁性物質を含み、任意のよく知られた形状であり、好ましくは粒状である。もちろん、収集レセプタクルの側部は適当な固体支持体材料としても機能でき、固体支持体材料に結合させ、収集レセプタクル内に置かれた特異的結合メンバーのメンバーという言葉に含まれることを理解されたい。従って、支持体材料が収集レセプタクルから離れた実体（例えば微粒子）である場合には、液体検体がフィルターを通って流れるにつれて、支持体材料および任意の付着した結合メンバーをフィルター上で収集することができる。特異的結合対のメンバーを固体支持体材料に固定する方法はよく知られており、当業者が選択できるものである。収集装置の第１実施形態を第１図から第４図に示す。ここに示す収集装置は、わずかに拡がった開口部１２を有する収集レセプタクル１０と共に使用するのに適切であり、この開口部１２を通してマウスウォッシュなどの高体積の検体を入れることができる。このレセプタクル１０はその他の収集レセプタクルで置き換えることができ、それによって、その他の液体検体を収集しかつ保存するために本発明の収集装置を使用できることが容易に理解されよう。第１図および第２図に最も良く示すように、本発明の収集装置は、親和性フィルター媒体２０を入口２４と出口２６の間に支持するためのフィルターコンテナ１８を含む。入口２４は、収集レセプタクルの排出口１４と連絡するように適合され、それによって、収集レセプタクル１０に収集した流体検体を入口２４に排出し、親和性フィルター２０を通して出口２６に移動させることができる。流体検体がフィルターコンテナ１８を貫流するとき、当該特異的結合メンバーは、フィルター媒体上に固定された特異的結合対の他方のメンバーに捕獲されてフィルター媒体上に収集され、それによって、当該特異的結合メンバーを濃縮し、かつ／または精製する。次いでフィルター２０上に捕獲された結合メンバーを保存し、かつ／または後の分析のために輸送する。親和性フィルター２０は、乾燥させ、臨床分析施設に簡単に輸送するために保存することができる。様々な市販のフィルター要素をフィルターとして使用することができ、そこに特異的結合メンバーを固定して親和性フィルターを形成することができる。フィルター媒体は、主に検体の粘度によって決定される深さおよびポアサイズを持つ。本発明の好ましい実施形態では、フィルターは、通常プレフィルターとして使用されるタイプなどの結合したガラスファイバ長のフィルターである。収集レセプタクル１０中の液体検体は、排出口１４、入口２４、およびフィルター媒体２０を通るように強いられ、その後出口２６を経てフィルターコンテナ１８から出る。この出口は、廃棄されるろ液を収集する処理容器４０に接続されることが好ましい。この液体の動きの推進力は、フィルター媒体を横切る圧力差である。圧力差は、フィルター２０の上方からの正の圧力によって生み出すことができるが、好ましい方法では、フィルター２０の下側にかけられる負の圧力または真空を利用する。このため、検体の細胞成分がフィルター上に収集されると、液体はフィルター媒体を通って引き込まれる。最も好ましい構成によれば、処理容器４０によっても、フィルターの下面に負の圧力がかけられる。これは、出口２６に接続する状態で排気容器または排気管を使用することにより容易に達成され、液体はフィルターを通して処理管４０に排出される。このような排気容器は完全な真空を示すことを必要としないが、フィルター媒体を通して十分な体積の液体を排出させるのに十分に低い圧力を示すことのみ必要とする。従って、このような容器を本明細書では「減圧」または「部分真空」容器またはチャンバーと呼ぶ。減圧容器の適切な例は、Becton-Dicki nson，Rutherford，NJにより製造され販売されている、Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ^TMとして知られる排気管である。減圧容器は、フィルターコンテナ１８の出口２４に向かって選択的に開放可能な栓または隔壁などのクロージャー３８を含むことが好ましい。代替案として、バルブ手段を選択的クロージャーとして使用することができる。理想的には、収集レセプタクルの排出口とフィルターコンテナの入口との間の接続、またフィルターコンテナの出口とフィルターにかかる圧力差の発生手段との間の接続が「密封状態で係合する」ことであり、これは、接続が実質上気密であることを意味する。この接続は、適切な操作のために実質上気密であることが重要である。推進力である大気圧が流体上方の収集レセプタクルの開口端にかけられると、フィルターコンテナの出口での減圧によって、液体検体がフィルター媒体を通して排出される。漏れや不十分な封止によって大気圧が液体検体の頂部の下側のシステムに入ると、流れおよび濾過は非能率的になる。この警告は、２つの結合する半体として形成されたフィルターコンテナのハウジングに適用されるとともに、装置の構成部品間の接続にも適用される。収集装置を支配する物理的原理は、圧力推進濾過を説明する理論によって理解できる。圧力勾配Ｐをフィルター媒体にかけると、流量は単位時間ｔ当たりの液体の体積Ｖになる。これらの変数に関する方程式は、であり、但し、ｕは液体の粘度であり、Ｋは流量係数である。排気チャンバーによって圧力勾配がもたらされるシステムでは、Ｐは１気圧に等しいと仮定することができる。流量係数Ｋは、膜を貫流する液体の流れに対する抵抗Ｒの逆数に等しく、Ｋ＝１／Ｒである。加えて、収集膜を通過する検体流体の体積は細胞を含有する。細胞が膜にトラップされると、流動に対する抵抗Ｒは増加する。このモデルを単純化するため、流動に対する抵抗は、膜の負荷とともに線形状に変化すると仮定し、あるいはＫ＝Ｋｍ（１−ＣＶ／Ｗ）であって、但し、Ｋｍは初期の膜係数、Ｃは単位体積Ｖ当たりの細胞の数、Ｗは膜が保持することのできる細胞の最大数である。この近似では、膜を通過する液体のヴォリュームが、その膜が保持することのできる細胞の最大数を含有するとき、流量係数はＫｍで開始して０に減少する。濾過工程の結果、膜抵抗が増加する現象は、一般に「膜汚損」と呼ばれている。膜汚損についてさらに正確な説明を導くことができるが、その説明は本発明の試料収集装置の性質上の説明を実質的に変えるものではない。本発明のシステムの他の特徴は、検体の濾過を行うための推進力をもたらすための、容積が有限である減圧容器の使用である。液体検体が減圧容器内に引き入れられると、圧力は方程式ＰＶ＝ｎＲＴで予測されるように変化し、但し、Ｐは圧力であり、Ｖは容器の体積であり、ｎは気体濃度、Ｒは気体定数、Ｔは温度である。減圧容器またはＶａｃｕｔａｉｎｅｒ^TM管の充填を説明する方程式は、であり、但し、Ｐ_Oは体積Ｖ_Oの容器の内側の初期圧力であり、Ｐ_iは体積Ｖの検体を濾過した後の容器の内側の圧力である。完全な真空を生み出すことは可能ではないが、できるだけ最良の真空を生み出す努力が常になされている。我々の目的のためにＰ_O＝０と仮定し、即ち試料収集の間、Ｐ_iが一定かつ０に等しくあり続けるように減圧容器の内側に完璧な真空を保持するものと仮定する。このため、検体収集装置内での濾過は、１気圧の一定圧力下で実施されると仮定することができる。従って液体検体の流量は、方程式で表され、その解は、ある。経験的にマウスウォッシュ検体流は、初めは非常に速く流れ、液体約１０ｃｃを濾過した後は急激に遅くなって約３０秒の流速になることが観察される。このシステムの長期の動作は、非常に遅い流れによって、または実用的な目的で流れが停止することによって特徴付けられる。従って、観察される動作は、我々の簡単な指数関数モデルと質的に完全に一致する。加えてＳの経験的推定値は典型的な試料で得ることができ、これは、指数関数的に緩和するシステムの長期動作が６×Ｓで、従ってＳ＝３０／６＝５秒で得られるということが一般に受け入れられるためである。この単純なモデルから、装置が開始時の細胞濃度とは無関係にほぼ同じ数の細胞を収集するということを予測することができる。例えば、１つの試料が検体１０ｃｃを濾過して３０秒で終了する場合、細胞濃度が２倍の検体は５ｃｃを１５秒で濾過し、収集された両方の試料は同数の細胞を含有する。検体が十分な濃度の細胞を含有しない場合、膜の最大負荷Ｗは、減圧容器の容積が有限であるために達成されない。しかしこの状況は、処理容器にヴォリュームマークを付けることによって、またこの値よりも大きい濾過体積を生じさせる任意の検体および関連する試料を廃棄することによって、回避することができる。当然ながら実際に、完璧な真空は必要ではなく、または達成されない。一般に真空は、規定された体積を吸引するよう調整される。これは、Ｐ_Oが実際には０に等しくなく、また推進圧力勾配が一定ではなく、処理管にその規定された体積の液体が獲得されると均一性に近づくことを意味する。この事実はモデル方程式をいくらか複雑にするが、その結果に質的な影響を与えるものではない。検体の結合メンバー成分が親和性フィルター媒体に一旦捕獲されると、その捕獲された成分を、次の分析用に調製することができる。調製段階および次の分析段階の両方は、状況に応じて大幅に変えることができる。例えば、フィルターとそこに結合される当該任意の結合メンバーを、保管しかつ／または次の分析のために地方または遠隔の分析地に輸送することができる。望ならば、フィルター媒体を複数の試験用の部分に区分することができる。このような細胞試料で行われる典型的な分析には制限がなく、ＤＮＡ分析、免疫分析、および顕微鏡分析による観察のための直接染色が含まれる。ある場合では、捕獲された成分を適切な緩衝剤または希釈液で親和性フィルターから溶離することができる。別法として、洗浄段階の前または後に、フィルターとその上の任意の固定成分を、フィルター上の当該結合メンバーの存在を判別するための結合体と接触させることができる。結合体は、当技術分野でよく知られており、一般に、特異的結合メンバーに結合する検出可能な一部分を含む。検出可能な一部分には、酵素や放射性同位体、蛍光化合物、化学発光化合物などの検出可能な性質を持つ任意の実体が含まれる。さらにフィルターを、任意選択で洗剤または不活性剤で処理し、そのフィルター上に存在する可能性がある任意の感染物質も浄化することができる。手短に言えば、事実上任意の分析方法または処理を、本発明によって収集した結合メンバーに用いることができることを、明らかにするべきである。第ＩＩ部：様々な具体的実施形態上述の一般概念を、ここに述べる３種類の具体的な実施形態でさらに示す。第１図から第４図に示す実施形態では、構成部品は容易に入手でき、またよく知られている部品である。例えば、針を取り外した２０ｍｌ〜５０ｍｌの注射容器は適切な収集レセプタクル１０であることが見出されたが、その他の収集レセプタクルを、当業者によく知られる方法によって本発明の方法および装置に容易に適用することができる。収集レセプタクル１０のデザインおよび構成は、収集しなければならない液体検体の体積および供給源によって決定されることが理想的である。例えば開口１２は、検体体積の流出または損失を最小限にするよう、検体の供給源との密接な接触を容易にするために特別に構成することができる。注射容器レセプタクル１０の排出口１４は円筒状であって、外部スレッドを１６に持つ突出したオス型要素である。このスレッドは、フィルターコンテナ１８の入口２４を密封した状態で係合するよう設計されている。排出口１４は、任意選択で取外し可能な封止材または停止栓またはバルブ（他の実施形態に関する第９図の１５で示される）を含み、その結果、検体を漏出させることなく流体検体を収集した後に、フィルターコンテナ１８を収集レセプタクルに接続することができる。別法として、バルブを利用する場合は、バルブをフィルターコンテナに直接配置することができる。好ましい実施形態では、フィルターコンテナ１８は、そこに結合する結合メンバーを有するろ紙２０などの親和性フィルター媒体を収容して包みこむよう適合される。望むならば、コンテナ１８の内側壁に設けられた１対の環状フランジで画定される周状または環状溝２２などのフィルター支持体で、親和性ろ紙２０を支持し、または維持することができる。述べたように、コンテナ１８の入口２４は、レセプタクル１０の排出口１４にねじ式に固定されるよう適合する、メス型で内部がねじ状のレセプタクルである。レセプタクル１０をフィルターコンテナ１８に接続する手段は、その接続で漏れが生じない限り重要ではない。ねじ式の接続は、選択の問題として用いられるだけであるが、その他の知られている封止用機構（例えばＬｕｅｒ−Ｌｏｋ^TMまたは差込み式）も本発明の範囲内である。コンテナ１８は出口２６を含み、濾過された液体検体がそこを通ってフィルターコンテナから出る。この実施形態において、その出口は外部がネジ型の円筒状延長部であり、一般的な皮下針３０の基部２８を受容するよう適合される。一般に針３０の基部２８は、出口２６と密封状態で係合するように、その内部がネジ状である。さらに典型的には、皮下針３０は、中空ボア３２を有し、３４で示すように斜めにカットされて、３６で鋭点を形成する。殺菌を確実にし、また針を封止するため、一般には薄く壊れやすい膜が管のチャネル３０を閉じるために先端の開口を覆うよう設けられる。フィルターコンテナ１８は、共に結合するように適合される少なくとも２つのセクションから作成されることが好ましく、その結果、それらセクションを分離して親和性フィルター媒体２０を破損することなく取り外すことができる。この第１の実施形態では、１６ゲージの皮下針がコンテナの出口２６に取り付けられ、使用済み検体用の処理容器４０としての役割も果たす１４ｍｌのＶａｃｕｔａｉｎｅｒ^TM減圧チャンバとの組合せで使用される。示される実施形態で容器４０は、第２図または第３図に示す針３０の尖端３６を容器４０の封止キャップまたは栓３８の中へ、かつそこを通して挿入することによって、フィルターコンテナ１８の出口２６に密封状態で連絡するよう配置される。針が容器４０の減圧内部と密封状態で連絡するとき、前述のように親和性フィルター媒体２０に圧力勾配が生み出される。これによって、液体検体３９は、収集レセプタクル１０から親和性フィルター媒体２０を通って最終的に処理容器４０に引き込まれる（第３図参照）。収集レセプタクルからフィルターコンテナを通って減圧チャンバ内へと液体の流れを発生させるために、その他の手段を使用することができるが、Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ^TM 型管などの減圧容器の使用は、液体の規定された体積を引き込むための、測定値が一定な初期力をもたらすという明らかな利点を有し、これによって、首尾一貫して予測可能な収集結果が得られる。親和性フィルターは、検体がそこを通過するときに、当該任意の結合メンバーを捕獲し収集する。検体の排出された部分は、適切に処分するための容器４０に収集される。本発明の利点の１つは、同じ試料で複数の分析を実施する能力である。以下の２種類の実施形態のデザインは、フィルター材料自体の物理的操作または細分化を回避しまたは最小限にすることによって、この利点を増強することを目的とするものである。一実施形態は、フィルターがまだハウジング内に閉じ込められているときにそのフィルターからディスクを打ち抜くのを容易にし、一方他の実施形態では、複数の分離したフィルター上での収集を可能にし、このフィルターはいかなる物理的分離工程または細分化工程も行うことなく別々に取り扱うことができる。収集装置の第２の実施形態を第９図に示し、フィルターコンテナの詳細を第６図から第８図に示す。この実施形態では、処理容器４０は前述の実施形態と実質上同じ減圧チャンバである。収集レセプタクル８０はじょうご形状であり、特に、尿検体などの採取に適切である。また、この実施形態のフィルターコンテナの入口２４と密封状態で結合するよう適合された排出口１４を含む。様々な収集レセプタクル、処理容器、およびフィルターコンテナが、実施形態間で実質上交換可能であることが理解されるべきである。排出口と入口を密封状態で係合させ、また例えば前述のように、次にレセプタクル８０の排出口を通ってフィルターコンテナ５８に流体を引き込むため、一般的な減圧装置に挿入可能な皮下針３０（第９図参照）によって、出口と減圧チャンバを選択的に密封可能に連絡するよう配置させることを確実にしなければならないだけである。第６図から第８図に示すフィルターコンテナ５８を参照すると、フィルターコンテナのこの実施形態は、１対の結合したセクション６０および６２を含み、使用中に密封可能に係合するよう適合される。上方セクション６０（図示）は、環状親和性フィルター７２を支持するフィルター支持プレート７０を含む（第８図参照）。このフィルター支持体７０は、親和性フィルター媒体の挿入が容易になるように、上方ハウジングセクション６０と脱着可能であることが好ましい。環状親和性フィルター７２は、支持表面に対して適切に親和性フィルター７２を据えるため、支持プレート７０上に設けられた、一段高くなったボス７１に受容されるように適合する中央開口７４を含む。支持プレート７０は、液体検体が通過できる複数の開口７６を含み、それによってフィルターコンテナ５８を通して液体検体を引き込むことができる。下方コンテナセクション６２は、ディスク形状のプレートまたは支持体６４を含み、コンテナ５８が第６図に示すように組み立てられるとき、上方セクション６０の支持体７０に接する。プレート６０は、支持表面７０の開口７６と整合する複数の開口１６６を含む。一変形例（第１０図に示す）では、支持プレート７０を支持プレート６０と一体的に形成し、または融着させることができる。多孔質プラグ６８を開口６６、７６に配置し、さらにそこを液体が通過できるようにする。これによって、当該結合メンバーの十分な捕獲を行うために親和性フィルター媒体と液体検体との間の十分な接触を確実にし、また開口７６の位置を取り囲む親和性フィルター７２上の離散領域７７内の結合メンバーの収集にチャネルを設け、かつ集中的に行わせる役割を果たすことができる。この離散ゾーン収集を第８図に示し、結合メンバーが中央領域４２に「一まとめに」収集される第４図と比較することができる。親和性フィルター上に固定された結合メンバーの離散ゾーンは、３種類の利点をもたらす。第１にこれらのゾーンは、複数の分析を実施するために均等に分割しまたは細分化するのが容易である。第２に、フィルター７２の離散領域への検体流が分散することによって、膜汚損を最小限にし、かつ遅らせることができる。この分散またはチャネリングは、親和性フィルター媒体の下にあるチャネルまたは開口（例えば開口７６）によって、あるいは親和性フィルター媒体に通じる通路または「マニフォールド」(例えば第１１図から第１４図に関して以下に説明するマニフォールド１０６)によって達成することができる。第３に、異なる結合メンバーを様々な離散ゾーンに固定することができ、それによって、複数の異なる当該結合メンバーを１つの検体から単離することができる。任意の当該結合メンバーを収集した後、フィルターコンテナ５８の半体６０、６２を分離することができ、親和性フィルター７２を取り外す。その他のフィルター２０と同じように、任意の所望の手段によってフィルター７２を乾燥し、細分化し、輸送および／または分析することができる。細胞試料４２をフィルターコンテナ５８から除去する異なる方法を、第１０図に示す。この変形例では、フィルターコンテナ５８は、フィルターハウジング部材６０の上壁８３の周のまわりに複数の開口８４を含む。開口８４は、開口６６、７６および関連するゾーン７７と軸方向に整合し、初めに除去可能な膜または封止材８１で閉じられる。任意の当該結合メンバーをフィルター上の様々なゾーン７７のそれぞれに収集した後、コンテナ５８の底部材６２を取り外す。次いでガラス瓶８５などの適切なレセプタクルを、第１０図に示すように、選択されたゾーン７７に連絡するよう配置する。典型的には、ガラス瓶８５は開口を含み、その開口は、それぞれの開口７６に挿入しまたは接続するよう適合される外側リップまたはリム８７を有している。パンチ８６などのツールは、関連する試料ゾーン７７をディスクから打ち抜いて分析用に保管することができるガラス瓶８５の中に入れるよう適合されるチップ８９を含む。パンチ８６を使用する前に、封止材８１を上方ハウジング部材６０の開口８４から剥がすことができ、あるいは封止材８１に刺し込むようにさらにパンチを適合させることができる。細胞試料を除去するこの代替方法では、フィルター全体をハウジングから取外し可能にする必要がない。フィルターコンテナの第３の実施形態を第１１図から第１４図に示す。そこに示すように、マニフォールドフィルターコンテナ８８は、１対の実質上長方形のセクション部材または半体９１および９２を含む。これらのセクションのそれぞれは、当業者によく知られる方法によって、一体的流路を備える単一の金型から形成することができる。第１１図および第１３図に示すように、入口２４は、下方セクション９２の右端から外方に延びるニップル１００の内部に設けられる。出口２６は、上方セクション９１の左端から延びる出口ニップル９６の内部に設けられる（第１１図および第１２図参照）。長手方向の溝１０３は上方セクション９１に形成され、長手方向のランドまたはリブ１０８を画定する。同様の長手方向の溝１０７を下方セクション９２に形成し、長手方向のランドまたはリブ１０８を画定する。一体的に通るチャネル１０２はニップル９６に設けられ、マニフォールド１０５を介して上方フィルターの溝１０３と出口２６を連絡させる。同様にして、一体的に通るチャネル１０６が入口ニップル１００に設けられ、マニフォールド１０９を介して下方フィルターの溝１０７と入口２４とを連絡させる。リブ１０４および１０８は互い違いに設けられ（第１５図参照）、親和性フィルター媒体要素１１０を通る対角状の流路を生み出し、それによって、フィルターコンテナを通って引き込まれる検体がさらされる領域を最大にし、その結果フィルターで捕獲される結合メンバを最大にすることが好ましい。使用中、親和性フィルター媒体要素１１０は、リブ１０８上の長手方向の溝に配置され、第１５図に示すように、組立て時に上方および下方セクション間に狭まれる。入口ニップル９６は、前述の方法で、適切な収集レセプタクルの排出口に固定されるよう適合し、また出口ニップル１００は適切な処理容器に固定されるよう適合する。使用中、親和性フィルター媒体は各溝内に配置され、それら半体は共に封止される。タブまたはクランプ（図示せず）をロックすることによって、コンテナの半体を密封状態で係合させることができる。収集レセプタクルは、入口端と密封状態で係合する。入口９４と出口９８の間に圧力差が生み出されるとき、収集レセプタクル内の液体は、リブと溝で画定された一体的チャネルを貫流し、第１５図に示すように、当該結合メンバーを捕獲する。この実施形態の１つの利点は、フィルターを詰まらせることなく体積が増加した検体を濾過できるということである。リブおよび溝の特定の構成はデザインの選択の問題であり、検体の粘度に大きく影響されることが当業者に容易に理解されよう。第５図に特に示すように、臨床環境ですぐに使用できるように、本発明の収集装置をキット形状に組み立てることができる。キットは、一般に収集レセプタクル１０、１個または複数のフィルターコンテナ５８、８８、キャップ３８などの封止材を備えた減圧容器４０、およびフィルターコンテナの出口２６に容器４０の圧力差をかける手段を含む。圧力をかける手段は、受容フィルターコンテナの排出端２６に取り付けられるよう適合し、かつ容器４０の封止材３８を打ち抜くよう適合される針アセンブリ３０でよい。構成フィルターコンテナ５８、８８、収集レセプタクル１０、針アセンブリ３０、および減圧チャンバ４０のすべての詳細は上述されている。第ＩＩＩ部：実施例実施例は、本明細書に開示されるように実験室の条件下で行われ、本発明の相関関係を実証する。実施例については以下の略語を一貫して使用する。ＢＳＡ：ウシ血清アルブミンＣＦ：嚢胞性繊維症ＣＦＴＲ：濃胞性繊維症経膜的レギュレータＥＰＰＳ：Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（３−プロパンスルホン酸）を含む緩衝液オリゴ：オリゴヌクレオチド、一般にはオリゴ−２−デオキシリボヌクレオチドＮＡＤ：ニコチンアデニンジヌクレオチドＴＲＩＳ：トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンを含む緩衝液単位：酵素の濃度の測定単位。ポリメラーゼ用の単位は製造業者により表示され、リガーゼ用の単位は、純度９５％のＤＮＡリガーゼ１ｍｇが約１×１０⁸ 単位の比活性を有すると定義される。実施例１：一般細胞収集装置本発明による濾過−収集装置を以下のようにして組み立てた。Millipore（Mil lipore Corporation，Bedford，Mass）AP25、直径１インチ（約２．５４ｃｍ）のガラス繊維プレフィルターを、２５ｍｍのSwinnex Disc Filter Holders(Mill ipore，Bedford，MA)に組み立てた。次にこれらを２０ｍｌまたは５０ｍｌの標準注射容器にＬｕｅｒエントリーポートを介して取り付けた。中空ボアの皮下針で１６ゲージ、長さ１インチ（約２．５４ｃｍ）のものを出口でＬｕｅｒフィッティングに取り付けた。試料を、便利な漏斗としての役割を果たす注射容器に採取し(詳細については以下の実施例参照)、Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ^TM管(Becton Dickinson，Rutherford，NJ)のゴム栓を通して針を挿入し、濾過を行うことによって終了させる。濾過工程が終了したら過剰な液体試料を廃棄し、装置を分解して、フィルターを以下の実施例のように処理した。実施例２：検体収集Ａ．水リンス：各個体に飲料水１０ｍｌを摂取させ、口内を数回リンスして液体検体を構成し、次いでその検体を収集レセプタクルの開口に吐き出させた。Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ^TM容器を接続して圧力勾配をかけ、細胞試料を上述のようにフィルター上に収集した。収集後、フィルターを収集装置から取り外し、実験合で風乾させた。乾燥したフィルターを処理し、または処理を行うまでの４７日以内の間、プラスチックバッグに入れて室温で保管した。Ｂ．抗菌マウスウォッシュリンス：個体に、市販の抗菌マウスウォッシュ(Ｓｃｏｐｅ^(R),Proctor & Gamble,Cincinnati,OH)１０ｍｌを使用した他は、パートＡのように試料を収集して液体検体を構成した。収集後ＡＰ４０フィルターを取り外し、試料を処理した（以下参照）。実施例３：収集した細胞資料の処理Ａ．収集したフィルターのいくつかを１．７ｍｌの遠心管に入れ、滅菌ＨＰＬＣ水０．５ｍｌを添加した。次いで試料管を沸騰水中に２０分間定置し、ついで室温に冷却した。高速回転させた後、液体を新たな管に取り出した。Ｂ．その他の試料を上述のように収集し、その後、代替のＫＯＨ抽出を行った。これらの試料フィルターを、５０ｍＭＫＯＨの０．５ｍｌで処理した。沸騰水中に２０分間定置した後、ｐＨ７．５である０．１ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌの１００μＬを添加し溶液を中和した。次いでこの溶液を１４，０００ｒｐｍで２０分間遠心させ、上清を新たな管に移した。実施例４：ＬＣＲ^(R)増幅およびＣＦＴＲ遺伝子の検出Ａ．増幅：Backman他の欧州特許出願第０，４３９，１８３号（１９９１年）に記載のような、いわゆる「ダブルキャップ」法を使用して、ＬＣＲ^(R)増幅を実施した。当技術分野で知られている標準技法を使用して、４つのプローブ（配列番号１、２、３および４）を合成し、下記のようにビオチンまたはフルオレセインハプテンで標識した。ＣＦＴＲ遺伝子のエキソン１０（配列番号５）と共にこれらのプローブの配列を第１５図に示す。標的となるのは、Zielenski他、Genomics 10、２１４−２２８（１９９１）で番号付けした１６１２〜１６９０の領域である。最終濃度ＥＰＰＳ（ｐＨ７．８）５０ｍＭ、カリウム２０ｍＭ（緩衝液のｐＨを調節するためにＫＯＨとして添加し、Ｋ⁺を２０ｍＭとするためにＫＣｌとして添加）、ＭｇＣｌ₂３０ｍＭ、ＮＡＤ１００μＭ、ヌクレオシド三リン酸ｄＣＴＰおよびｄＴＴＰ１０μＭ、４つの各プローブ１００μＭ、ＤＮＡポリメラーゼ（Ａｍｐｌｉｔａｑ^(R)、Perkin-Elmer/Cetus、カリフォルニア州、エメリービル）３単位、Thermus termophilusのＤＮＡリガーゼ３４００単位、総体積１００μＬとして、ＬＣＲを４つの各プローブ（配列番号１、２、３および４）について４０サイクル実施した。各増幅には、実施例３Ａで処理した細胞試料１０ μＬを使用した。ヒト胎盤ＤＮＡ（５０ｎｇ）ス自体は、９５℃、３分間の変性プロフィールに次いで８５℃、３０秒間および５７℃、６０秒間のサイクリングプロフィールを使用して、４８０型Thermal Cy cler（Perkin-Elmer、コネチカット州、ノルウォーク）で実施した。Ｂ．免疫クロマトグラフィによる検出：ウサギでアダマンタン−ＢＳＡ、フルオレセイン−ＢＳＡまたはビオチン−ＢＳＡに対しアダマンタン、フルオレセインおよびビオチンに対する抗血清を作製した。これらの抗血清は、プロテインＡセファージャージ州、Piscataway）で精製し、ＮａＣｌ０．９％、ＢＳＡ０．１％、蔗糖１％および微量のフェノールレッドを含有する０．１Ｍトリス緩衝液（ｐＨ７．８）で希釈した。これらの希釈した抗アダマンタン抗血清および抗フルオレセイン抗血清の一部（０．２μＬ）を７．３×４．０ｍｍのニトロセルロール片（ＡＥ９８、５μｍ、SchleicherおよびSchuell、Dassel、ドイツ）に吹き付けた。抗ビオチン抗血清を、ポリスチレン製の均一に染色した青色のラテックス粒子（Bang Laboratories、インジアナ州、Carmel）と結合させた。粒子（直径３８０ｎｍ）を水で１．２５倍に希釈すると、固体分０．４％のものが１ｍｌ得られ、１ｍｇ／ｍＬの抗ビオチンを１０μＬ加えた。縣濁液をホルテックスミキサーで４５秒間混合し、０．１ＭＴＲＩＳ（ｐＨ７．８）中５％のカゼインを５μＬ加えた。検出には、抗ビオチンとの結合体（青色のラテックス）２１μＬを、緩衝液（ＮａＣｌ０．９％、アルカリ処理済みカゼイン３％を含有する０．１ＭＴＲＩＳ（ｐＨ７．８））１６μＬンまたは抗アダマンタンまたはその両者を含むニトロセルロースストリップを結合体の縣濁液に導入し、実質的に公開された出願ＥＰ０３５７０１１Ａ２に記載されているように５分間クロマトグラフィを実施した。ストリップを乾燥させ、第１７図に示す。抗フルオレセインを載せた場所に有色スポットが存在第１７図は、下記のように、種々の個体からの、フィルターに収集後異なる時点で処理した試料のストリップを示している。ストリップＣは精製した胎盤ＤＮＡである。ストリツプ１〜５は、収集の４７日後（ストリップ１）、４５日後（ストリップ２）、１日後（３個体、ストリップ３、４および５）にフィルターから処理した異なる５個体からの試料である。ストリップＢはＤＮＡを添加していないブランク対照である。Ａ．増幅：Backman他の欧州特許出願第０，４３９，１８３号（１９９１年）に記載のような、いわゆる「ダブルキャップ」いる標準技法を使用して、４つのプローブ（配列番号６、７、８および９）を合成し、下記のようにビオチンまたはフルオレセインハプテンで標識した。βグロブリン遺伝子（配列番号１０）上の各プローブの配列を第１６図に示す。これらのプローブではギャップを充填するためにｄＴＴＰのみが必要であることと、水およびＫＯＨ抽出物の両者で処理した細胞試料を１０μＬ使用したこと以外は、実施例４Ａと同様Ｂ．免疫クロマトグラフィによる検出実施例４Ｂと同様に免疫クロマトグラフィストリップを作成した。増幅産物の検出は、下記の結合体を使用すること以外、上記と同様に実施した。抗ビオチン抗血清をポリスチレン製の均一に染色した青色のラテックス粒子（ Molecular Probes社、オレゴン州、Eugene）と結合させた。粒子（直径３０６ｎｍ）を水で４０倍に希釈すると、固体分０．０５％のものが５ｍｌ得られ、１ｍｇ／ｍＬの抗ビオチンを５０μＬ加えた。縣濁液を５分間混合した。次いで、０．１ＭＴＲＩＳ（ｐＨ７．８）中５％のカゼインを５０μＬ加え、１５分間混合した。この溶液を１．７ｍｌのミクロ遠沈管に移し、１６１０，０００ｒｐｍで１０分間遠心した。次いで、上清を除去した。もとの溶液１ｍｌからのペレットをＨＰＬＣ級の水９８０ｍＬに再縣濁し、５ｍｌすべてを合わせた。この実施例のデータは第１８図に示すが、以下の注釈を使用した。ストリップＣは精製した胎盤ＤＮＡ（５０ｎｇ）であり、ストリップ１から３は、実施例３Ａで水抽出により処理したフィルターから得たものであり、ストリップ４および５は実施例３ＢでＫＯＨ抽出により処理したフィルターから得たものであり、スパイクインした純粋な胎盤ＤＮＡ（５０ｎｇ）を加えたものである。これらの実験やその他の実験（データは示さない）から、従来のＫＯＨ抽出は平滑末端（blunt）ＬＣＲには使用できるが、ギャップＬＣＲには適していないことが認められた（第１８図のストリップ４および５ではシグナルがないことに注目されたい）。明らかに、ＫＯＨ抽出のプロトコールでは、ＡｍｐｌｉップＬＣＲの場合、もう一方の水抽出のプロトコールの方が好ましい。経験から、おそらくこの市販の製品に含まれるアルコールによって、フィルターが完全に分解されることが示されている。本明細書の一部の特徴および実施形態を詳細に示してきたが、本発明が他の変形や拡張を含みうることは容易に理解されよう。保護が求められる発明は下記の請求の範囲に定義されている。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ｇ０１Ｎ 33/53 Ｇ０１Ｎ 33/53 Ｙ

Claims

【特許請求の範囲】１．液体検体から結合メンバーを収集する方法であって、排出口を有する収集レセプタクルの開放端に第一結合メンバーを含有する液体検体を入れるステップと、排出口と親和性フィルター媒体とをその間にある密封通路により流体連絡させるステップであって、親和性フィルター媒体がフィルターと、前記フィルターに固定した、前記第一結合メンバーに特異的な第二結合メンバーとを有し、フィルター媒体がフィルターコンテナの入口と出口の間に収容され、入口が排出口と密封可能に係合されるようなされているステップと、フィルター媒体に差圧をかけ、この差圧が密封通路により液体検体に及び、液体検体を収集レセプタクルの排出口および親和性フィルター媒体を通過させるステップであって、閉鎖減圧チャンバの貫通可能なクロージャー要素に前記出口を刺し込むことによって前記差圧をかけ、それによって前記出口と閉鎖減圧チャンバとを密封流体連絡させ、その結果、フィルターコンテナを相対真空下におき、第一結合メンバーをフィルター媒体上に捕獲するステップとを含む方法。２．フィルターコンテナから親和性フィルター媒体の少なくとも一部を除去するステップと、親和性フィルター媒体上で収集された結合メンバーを乾燥させるステップとをさらに含む請求の範囲第１項に記載の方法。３．フィルター媒体と捕獲された結合メンバーを別々に分析するための別々のセクションに分けるステップを含む請求の範囲第２項に記載の方法。４．フィルターコンテナが、液体検体を親和性フィルター媒体の離散領域に分配する手段を含む請求の範囲第３項に記載の方法。５．前記親和性フィルター媒体上で乾燥させた結合メンバーを保存することまたは輸送することから選択する１つまたは複数のステップをさらに含む請求の範囲第２項に記載の方法。６．前記第一結合メンバーの存在または量を分析するために親和性フィルター媒体を処理するステップをさらに含む請求の範囲第１項に記載の方法。７．前記第一結合メンバーが抗体である請求の範囲第６項に記載の方法。８．液体検体から結合メンバーを収集する装置であって、収集レセプタクルであって、液体検体を受ける開放端と、そこを通って前記液体検体が収集レセプタクルから出る排出口とを有する収集レセプタクルと、フィルターコンテナであって、前記収集レセプタクルの排出口と密封可能に係合するようなされた入口と、そこを通って前記液体検体がフィルターコンテナから出る出口と、フィルターコンテナ内で前記入口と出口の間で支持されている親和性フィルター媒体とを含み、入口を介して前記フィルターコンテナに入ってきた液体検体が前記親和性フィルター媒体を通過した後、前記出口を介してフィルターコンテナを出、前記親和性フィルター媒体がフィルターに固定された結合メンバーを含み、前記出口が破裂可能な封止材に密封可能に刺し込むようになされているフィルターコンテナと、破裂可能な封止材を有する減圧容器であって、前記破裂可能な封止材に前記出口を刺し込むことによりこれらを密封連絡して、出口に相対真空がかかり、その結果、親和性フィルター媒体を通して液体検体を引き出す減圧容器とを含む装置。９．前記減圧容器が、フィルター媒体を通過する液体検体を受ける排出容器およびフィルターコンテナの出口として作用する請求の範囲第８項に記載の装置。１０．親和性フィルター媒体が離散要素で、その全部または一部が前記フィルターコンテナから取り外し可能である請求の範囲第８項に記載の装置。１１．親和性フィルター媒体を支持するフィルター支持手段をさらに含んでいる請求の範囲第８項に記載の装置。１２．前記フィルター支持手段が、捕獲された結合メンバーを前記開口部に対応する離散領域に局在させるための複数の開口部を有するプレートを含む請求の範囲第１１項に記載の装置。１３．前記フィルターコンテナが、前記プレートの開口部と合わせた穴を画定し、前記穴および開口部がパンチを受けて打ち抜かれ、フィルターコンテナから結合した特異的結合メンバーの部分を取り外すようになされている請求の範囲第１２項に記載の装置。１４．液体検体を親和性フィルター媒体の離散領域または別な親和性フィルターに分配するためのチャネル手段をさらに含む請求の範囲第８項に記載の装置。１５．液体検体から特異的結合メンバーを収集する細胞試料収集キットであって、入口と出口を有するフィルターコンテナと、フィルターコンテナの入口と出口の間に取り外し可能なように収容されたフィルター媒体と、液体検体を受ける開放端と、フィルターコンテナの入口と連通して選択的に取り付けられるようになされた排出口を有する収集レセプタクルと、収集レセプタクルから液体検体を引き出し、親和性フィルター媒体を通して、フィルター媒体上で結合メンバーを捕獲するために、フィルター媒体に圧力差を発生させるように、フィルターコンテナの出口と連通するようなされている減圧チャンバと、前記収集レセプタクル内に収容された支持体材料に結合した第一特異的結合メンバーまたは前記フィルター媒体に結合した第一特異的結合メンバーと、親和性フィルター媒体を試験のための遠隔場所に送るよう求める命令とを含むキット。１６．フィルターコンテナの出口に取り付けられるようなされた中空の穴あき針をさらに含み、取り付けられたときに針の穴がフィルターコンテナの出口と連絡し、減圧チャンバが、液体検体を収集レセプタクルからフィルターコンテナに引き出し、フィルター媒体を通り、出口を介して減圧チャンバに排出されるように、フィルターコンテナ針の先端が刺し込まれるようなされているクロージャーを含む請求の範囲第１５項に記載のキット。１７．液体検体から結合メンバーを収集する方法であって、特異的結合対の第一メンバーを含むことが疑われる液体検体を、排出口を有する収集レセプタクルの開放端に入れるステップであって、固体支持体材料に固定された、前記収集レセプタクルが前記特異的結合対の第二メンバーを含有しているステップと、排出口とフィルター媒体をその間にある密封通路により流体連絡させるステップであって、フィルター媒体がフィルターコンテナの入口と出口の間に収容されており、入口が排出口と密封可能に係合されるようなされているステップと、フィルター媒体に差圧をかけ、この差圧が密封通路により液体検体に及び、液体検体を収集レセプタクルの排出口およびフィルター媒体を通過させるステップであって、閉鎖減圧チャンバの貫通可能なクロージャー要素に前記出口を刺し込むことによって前記差圧をかけ、それによって前記出口と閉鎖減圧チャンバとを密封流体連絡させ、その結果、フィルターコンテナを相対真空下におき、それによって前記第一結合メンバーを収集するステップとを含む方法。１８．前記固体支持体材料がミクロ粒子であり、方法が前記ミクロ粒子を前記フィルター媒体上に収集し、それにより前記第一結合メンバーを収集するステップをさらに含む請求の範囲第１７項に記載の方法。１９．液体検体から結合メンバーを収集する装置であって、収集レセプタクルであって、液体検体を受ける開放端と、そこを通って前記液体検体が収集レセプタクルから出る排出口とを有し、固体支持体材料に固定された特異的結合対のメンバーを含有する収集レセプタクルと、フィルターコンテナであって、前記収集レセプタクルの排出口と密封可能に係合するようなされた入口と、そこを通って前記液体検体がフィルターコンテナから出る出口と、フィルターコンテナ内で前記入口と出口の間で支持されているフィルター媒体とを含み、入口を介して前記フィルターコンテナに入ってきた液体検体が、前記フィルター媒体を通過した後、出口を介してフィルターコンテナを出、前記出口が破裂可能な封止材に密封可能に刺し込むようになされているフィルターコンテナと、破裂可能な封止材を有する減圧容器であって、前記破裂可能な封止材に前記出口を刺し込むことによりこれらを密封連絡して、出口に相対真空がかかり、その結果、フィルター媒体を通して液体検体を引き出す減圧容器とを含む装置。