JP2001318099A - Ｃ−反応性蛋白質測定方法及び測定試薬 - Google Patents
Ｃ−反応性蛋白質測定方法及び測定試薬Info
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Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 プロゾーン現象を回避して高濃度のＣ−反応
性蛋白質を含む検体を希釈せずに測定する方法およびそ
れに用いる試薬を提供すること。 【解決手段】 ホスホリルコリン基と一般式（Ｉ）［式
（Ｉ）中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ 3は水素、置換もしくは非置換
アルキル、置換もしくは非置換アルケニル、Ｘ-は無機
性陰イオンや有機性陰イオン］で示されるカチオン性基
とを有する化合物及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を
用いてＣ−反応性蛋白質を測定する。また、ホスホリル
コリン基を有する界面活性剤、式（II）［Ｙ1は疎水性
基、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3は水素、置換もしくは非置換アルキ
ル、置換もしくは非置換アルケニル］で示されるカチオ
ン性基を有する界面活性剤及びＣ−反応性蛋白質に対す
る抗体を用いてＣ−反応性蛋白質を測定する。Ｃ−反応
性蛋白質に対する抗体としては、ポリスチレン系ラテッ
クス等の水不溶性担体に担持されている抗体が好まし
い。 【化１】 【化２】
性蛋白質を含む検体を希釈せずに測定する方法およびそ
れに用いる試薬を提供すること。 【解決手段】 ホスホリルコリン基と一般式（Ｉ）［式
（Ｉ）中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ 3は水素、置換もしくは非置換
アルキル、置換もしくは非置換アルケニル、Ｘ-は無機
性陰イオンや有機性陰イオン］で示されるカチオン性基
とを有する化合物及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を
用いてＣ−反応性蛋白質を測定する。また、ホスホリル
コリン基を有する界面活性剤、式（II）［Ｙ1は疎水性
基、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3は水素、置換もしくは非置換アルキ
ル、置換もしくは非置換アルケニル］で示されるカチオ
ン性基を有する界面活性剤及びＣ−反応性蛋白質に対す
る抗体を用いてＣ−反応性蛋白質を測定する。Ｃ−反応
性蛋白質に対する抗体としては、ポリスチレン系ラテッ
クス等の水不溶性担体に担持されている抗体が好まし
い。 【化１】 【化２】
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、Ｃ−反応性蛋白質
測定用試薬及び測定方法、詳しくは、ホスホリルコリン
基とカチオン性基とを有する化合物及びＣ−反応性蛋白
質に対する抗体を含有するＣ−反応性蛋白質測定用試
薬、並びに該試薬を用いてＣ−反応性蛋白質を測定する
Ｃ−反応性蛋白質の測定方法や、ホスホリルコリン基を
有する界面活性剤、カチオン性基を有する界面活性剤及
びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を含有するＣ−反応性
蛋白質測定用試薬、並びに該試薬を用いてＣ−反応性蛋
白質を測定するＣ−反応性蛋白質の測定方法に関する。
測定用試薬及び測定方法、詳しくは、ホスホリルコリン
基とカチオン性基とを有する化合物及びＣ−反応性蛋白
質に対する抗体を含有するＣ−反応性蛋白質測定用試
薬、並びに該試薬を用いてＣ−反応性蛋白質を測定する
Ｃ−反応性蛋白質の測定方法や、ホスホリルコリン基を
有する界面活性剤、カチオン性基を有する界面活性剤及
びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を含有するＣ−反応性
蛋白質測定用試薬、並びに該試薬を用いてＣ−反応性蛋
白質を測定するＣ−反応性蛋白質の測定方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】急性相反応物質の一つであるＣ−反応性
蛋白質（C-reactive protein）は、各種の感染症、炎症
性疾患及び組織破壊をきたす疾患の診断や経過観察のマ
ーカーとして、臨床検査の分野ではよく測定されている
項目の一つとなっている。かかるＣ−反応性蛋白質の測
定法としては、Ｃ−反応性蛋白質と特異的に結合する抗
体もしくは抗血清を用いて、毛細管法、一次元免疫拡散
法、免疫比濁法、ラテックス免疫比濁法等で測定する方
法が知られている。これらの測定方法は、抗原であるＣ
−反応性蛋白質と抗体が結合すると大きな凝集体となる
ことを利用して、この凝集を検出することにより行うも
のである。
蛋白質（C-reactive protein）は、各種の感染症、炎症
性疾患及び組織破壊をきたす疾患の診断や経過観察のマ
ーカーとして、臨床検査の分野ではよく測定されている
項目の一つとなっている。かかるＣ−反応性蛋白質の測
定法としては、Ｃ−反応性蛋白質と特異的に結合する抗
体もしくは抗血清を用いて、毛細管法、一次元免疫拡散
法、免疫比濁法、ラテックス免疫比濁法等で測定する方
法が知られている。これらの測定方法は、抗原であるＣ
−反応性蛋白質と抗体が結合すると大きな凝集体となる
ことを利用して、この凝集を検出することにより行うも
のである。
【０００３】例えば、ラテックス免疫比濁法では、抗体
を担持（感作）させた粒径０．１〜１μｍ程度のポリス
チレンラテックス等の担体を用い、対応する抗原により
抗原抗体反応を起こさせると、反応液中の散乱光は増加
し、透過光は減少するので、この変化を吸光度あるいは
積分球濁度として検出することによりＣ−反応性蛋白質
を測定することができる。しかし、これら抗原抗体反応
による凝集を観察する方法においては、プロゾーン現象
と呼ばれる問題が生起することも知られている。かかる
プロゾーン現象とは、抗原量が抗体量に比して高濃度に
なるに従い、逆に濁度が減少する現象をいう。この結
果、測定すべき試料中に抗原が高濃度に存在するにもか
かわらず、抗原が低濃度であるという誤った結果がもた
らされることになる。このプロゾーン現象を回避するに
は、測定すべき試料を希釈するか、あるいは測定に使用
する抗体を増加して再度測定を行うこと等が必要である
が、操作が煩雑となる。
を担持（感作）させた粒径０．１〜１μｍ程度のポリス
チレンラテックス等の担体を用い、対応する抗原により
抗原抗体反応を起こさせると、反応液中の散乱光は増加
し、透過光は減少するので、この変化を吸光度あるいは
積分球濁度として検出することによりＣ−反応性蛋白質
を測定することができる。しかし、これら抗原抗体反応
による凝集を観察する方法においては、プロゾーン現象
と呼ばれる問題が生起することも知られている。かかる
プロゾーン現象とは、抗原量が抗体量に比して高濃度に
なるに従い、逆に濁度が減少する現象をいう。この結
果、測定すべき試料中に抗原が高濃度に存在するにもか
かわらず、抗原が低濃度であるという誤った結果がもた
らされることになる。このプロゾーン現象を回避するに
は、測定すべき試料を希釈するか、あるいは測定に使用
する抗体を増加して再度測定を行うこと等が必要である
が、操作が煩雑となる。
【０００４】ホスホリルコリンはカルシウムイオンの存
在下にＣ−反応性蛋白質と特異的に結合し、凝集体を形
成することが知られている［J. Immunol., 124, 1396(1
980)］。また、Ｃ−反応性蛋白質の精製を、ｐ−ニトロ
フェニルホスホリルコリンセファロース４Ｂカラムを用
いたアフィニティークロマトグラフィーにより行うこと
が知られている［検査と技術，24(5), 409(1996)］。そ
してまた、Ｃ−反応性蛋白質の定量方法として、ホスフ
ァチジルコリン、コレステロール、塩化コリン、カルシ
ウム等を含有する試薬を用いる方法(特開昭５２−１２
３２９５号公報)や、ホスホリルコリン基を結合した高
分子を含有する試薬を用いる方法、及びホスホリルコリ
ン基を結合した高分子とＣ−反応性蛋白質に対する特異
抗体とを含有する試薬を用いる方法（特開昭６２−２５
９０６３号公報）が知られている。また、積分球濁度に
より検出を行うラテックス試薬を用いるＣ−反応性蛋白
質の測定方法としては、例えば協和メデックス社のＣ−
反応性蛋白質用ラテックス試薬（エクステルＣＲＰ Ｅ
Ｌ−１２００用）を用いる方法が知られている。
在下にＣ−反応性蛋白質と特異的に結合し、凝集体を形
成することが知られている［J. Immunol., 124, 1396(1
980)］。また、Ｃ−反応性蛋白質の精製を、ｐ−ニトロ
フェニルホスホリルコリンセファロース４Ｂカラムを用
いたアフィニティークロマトグラフィーにより行うこと
が知られている［検査と技術，24(5), 409(1996)］。そ
してまた、Ｃ−反応性蛋白質の定量方法として、ホスフ
ァチジルコリン、コレステロール、塩化コリン、カルシ
ウム等を含有する試薬を用いる方法(特開昭５２−１２
３２９５号公報)や、ホスホリルコリン基を結合した高
分子を含有する試薬を用いる方法、及びホスホリルコリ
ン基を結合した高分子とＣ−反応性蛋白質に対する特異
抗体とを含有する試薬を用いる方法（特開昭６２−２５
９０６３号公報）が知られている。また、積分球濁度に
より検出を行うラテックス試薬を用いるＣ−反応性蛋白
質の測定方法としては、例えば協和メデックス社のＣ−
反応性蛋白質用ラテックス試薬（エクステルＣＲＰ Ｅ
Ｌ−１２００用）を用いる方法が知られている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、プロ
ゾーン現象を回避して高濃度のＣ−反応性蛋白質を含む
検体を希釈せずに測定する方法及びそれに用いる試薬を
提供することにある。
ゾーン現象を回避して高濃度のＣ−反応性蛋白質を含む
検体を希釈せずに測定する方法及びそれに用いる試薬を
提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために鋭意研究し、（Ａ）ホスホリルコリン
基とカチオン性基とを有する化合物及びＣ−反応性蛋白
質に対する抗体を用いると、あるいは、（Ｂ）ホスホリ
ルコリン基を有する界面活性剤、カチオン性基を有する
界面活性剤及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を用いる
と、検体中のＣ−反応性蛋白質を測定しうること、また
高濃度のＣ−反応性蛋白質を含む検体であっても、希釈
することなくプロゾーン現象を回避して検体中のＣ−反
応性蛋白質を測定しうることを見い出し、本発明を完成
するに至った。
を解決するために鋭意研究し、（Ａ）ホスホリルコリン
基とカチオン性基とを有する化合物及びＣ−反応性蛋白
質に対する抗体を用いると、あるいは、（Ｂ）ホスホリ
ルコリン基を有する界面活性剤、カチオン性基を有する
界面活性剤及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を用いる
と、検体中のＣ−反応性蛋白質を測定しうること、また
高濃度のＣ−反応性蛋白質を含む検体であっても、希釈
することなくプロゾーン現象を回避して検体中のＣ−反
応性蛋白質を測定しうることを見い出し、本発明を完成
するに至った。
【０００７】すなわち本発明は、ホスホリルコリン基と
ホスホリルコリン基を除くカチオン性基とを有する化合
物及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を用いて、あるい
は、ホスホリルコリン基を有する界面活性剤、ホスホリ
ルコリン基を除くカチオン性基を有する界面活性剤及び
Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体を用いて、Ｃ−反応性蛋
白質を測定することを特徴とするＣ−反応性蛋白質の測
定方法（請求項１）に関する。
ホスホリルコリン基を除くカチオン性基とを有する化合
物及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を用いて、あるい
は、ホスホリルコリン基を有する界面活性剤、ホスホリ
ルコリン基を除くカチオン性基を有する界面活性剤及び
Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体を用いて、Ｃ−反応性蛋
白質を測定することを特徴とするＣ−反応性蛋白質の測
定方法（請求項１）に関する。
【０００８】また本発明は、ホスホリルコリン基とホス
ホリルコリン基を除くカチオン性基とを有する化合物に
おけるカチオン性基が、一般式（Ｉ）
ホリルコリン基を除くカチオン性基とを有する化合物に
おけるカチオン性基が、一般式（Ｉ）
【化７】 ［式（Ｉ）中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は、同一又は異なって
もよく、水素、置換もしくは非置換アルキル、又は置換
もしくは非置換アルケニルを示し、Ｘ1 -は無機性陰イオ
ン又は有機性陰イオンを示す。］で示される基であるこ
とを特徴とする請求項１記載のＣ−反応性蛋白質の測定
方法（請求項２）や、ホスホリルコリン基とホスホリル
コリン基を除くカチオン性基とを有する化合物が、ホス
ホリルコリン基を有する単量体とカチオン性基を有する
単量体とを結合させた共重合体であることを特徴とする
請求項１又は２記載のＣ−反応性蛋白質の測定方法（請
求項３）や、ホスホリルコリン基を有する単量体とカチ
オン性基を有する単量体が、それぞれホスホリルコリン
基とビニル基を有する単量体と、カチオン性基とビニル
基を有する単量体であることを特徴とする請求項３記載
のＣ−反応性蛋白質の測定方法（請求項４）や、ホスホ
リルコリン基とビニル基を有する単量体及びカチオン性
基とビニル基を有する単量体が、それぞれ２−メタクリ
ロイルオキシエチルホスホリルコリンと、２−ヒドロキ
シ−３−メタクリロイルオキシプロピルトリメチルアン
モニウムクロライドであることを特徴とする請求項４記
載のＣ−反応性蛋白質の測定方法（請求項５）や、ホス
ホリルコリン基を有する界面活性剤が、一般式（II）
もよく、水素、置換もしくは非置換アルキル、又は置換
もしくは非置換アルケニルを示し、Ｘ1 -は無機性陰イオ
ン又は有機性陰イオンを示す。］で示される基であるこ
とを特徴とする請求項１記載のＣ−反応性蛋白質の測定
方法（請求項２）や、ホスホリルコリン基とホスホリル
コリン基を除くカチオン性基とを有する化合物が、ホス
ホリルコリン基を有する単量体とカチオン性基を有する
単量体とを結合させた共重合体であることを特徴とする
請求項１又は２記載のＣ−反応性蛋白質の測定方法（請
求項３）や、ホスホリルコリン基を有する単量体とカチ
オン性基を有する単量体が、それぞれホスホリルコリン
基とビニル基を有する単量体と、カチオン性基とビニル
基を有する単量体であることを特徴とする請求項３記載
のＣ−反応性蛋白質の測定方法（請求項４）や、ホスホ
リルコリン基とビニル基を有する単量体及びカチオン性
基とビニル基を有する単量体が、それぞれ２−メタクリ
ロイルオキシエチルホスホリルコリンと、２−ヒドロキ
シ−３−メタクリロイルオキシプロピルトリメチルアン
モニウムクロライドであることを特徴とする請求項４記
載のＣ−反応性蛋白質の測定方法（請求項５）や、ホス
ホリルコリン基を有する界面活性剤が、一般式（II）
【化８】 ［式（II）中、Ｙ1は疎水性基を示す。]で示される化合
物であることを特徴とする請求項１記載のＣ−反応性蛋
白質の測定方法（請求項６）に関する。
物であることを特徴とする請求項１記載のＣ−反応性蛋
白質の測定方法（請求項６）に関する。
【０００９】また本発明は、式（II）で表される化合物
が、リゾホスファチジルコリンカプロイル、リゾホスフ
ァチジルコリンミリストイル、リゾホスファチジルコリ
ンパルミトイル、リゾホスファチジルコリンステアロイ
ル、大豆由来リゾホスファチジルコリン、ホスファチジ
ルコリンジブチロイル、ホスファチジルコリンジカプロ
イル、ホスホリルコリンオレイルオキシエチルエステ
ル、スフィンゴシルホスホリルコリンから選ばれる１種
又は２種以上の化合物であることを特徴とする請求項６
記載のＣ−反応性蛋白質の測定方法（請求項７）や、カ
チオン性基を有する界面活性剤が、アンモニウム塩の界
面活性剤であることを特徴とする請求項１、６及び７の
いずれか１項に記載のＣ−反応性タンパク質の測定方法
（請求項８）や、アンモニウム塩の界面活性剤が、一般
式（III）
が、リゾホスファチジルコリンカプロイル、リゾホスフ
ァチジルコリンミリストイル、リゾホスファチジルコリ
ンパルミトイル、リゾホスファチジルコリンステアロイ
ル、大豆由来リゾホスファチジルコリン、ホスファチジ
ルコリンジブチロイル、ホスファチジルコリンジカプロ
イル、ホスホリルコリンオレイルオキシエチルエステ
ル、スフィンゴシルホスホリルコリンから選ばれる１種
又は２種以上の化合物であることを特徴とする請求項６
記載のＣ−反応性蛋白質の測定方法（請求項７）や、カ
チオン性基を有する界面活性剤が、アンモニウム塩の界
面活性剤であることを特徴とする請求項１、６及び７の
いずれか１項に記載のＣ−反応性タンパク質の測定方法
（請求項８）や、アンモニウム塩の界面活性剤が、一般
式（III）
【化９】 ［式（III）中、Ｙ2は疎水性基を示し、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3
は同一又は異なってもよく、水素、置換もしくは非置換
アルキル、又は置換もしくは非置換アルケニルを示し、
Ｘ2 -は無機性陰イオン又は有機性陰イオンを示す。］で
示される化合物である請求項８記載のＣ−反応性蛋白質
の測定方法（請求項９）や、式（III）で表される化合
物が、オクタデシルトリメチルアンモニウムクロライ
ド、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロライド、
テトラデシルトリメチルアンモニウムクロライド、ドデ
シルトリメチルアンモニウムクロライドから選ばれる１
種又は２種以上の化合物であることを特徴とする請求項
９記載のＣ−反応性蛋白質の測定方法。（請求項１０）
や、Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体が、水不溶性担体に
担持されていることを特徴とする請求項１〜１０のいず
れか１項に記載のＣ−反応性蛋白質の測定方法（請求項
１１）や、不溶性担体が、ポリスチレン系ラテックスで
あることを特徴とする請求項１１記載のＣ−反応性蛋白
質の測定方法（請求項１２）に関する。
は同一又は異なってもよく、水素、置換もしくは非置換
アルキル、又は置換もしくは非置換アルケニルを示し、
Ｘ2 -は無機性陰イオン又は有機性陰イオンを示す。］で
示される化合物である請求項８記載のＣ−反応性蛋白質
の測定方法（請求項９）や、式（III）で表される化合
物が、オクタデシルトリメチルアンモニウムクロライ
ド、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロライド、
テトラデシルトリメチルアンモニウムクロライド、ドデ
シルトリメチルアンモニウムクロライドから選ばれる１
種又は２種以上の化合物であることを特徴とする請求項
９記載のＣ−反応性蛋白質の測定方法。（請求項１０）
や、Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体が、水不溶性担体に
担持されていることを特徴とする請求項１〜１０のいず
れか１項に記載のＣ−反応性蛋白質の測定方法（請求項
１１）や、不溶性担体が、ポリスチレン系ラテックスで
あることを特徴とする請求項１１記載のＣ−反応性蛋白
質の測定方法（請求項１２）に関する。
【００１０】そしてまた本発明は、ホスホリルコリン基
とホスホリルコリン基を除くカチオン性基とを有する化
合物及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を含有する、あ
るいは、ホスホリルコリン基を有する界面活性剤、ホス
ホリルコリン基を除くカチオン性基を有する界面活性剤
及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を含有することを特
徴とするＣ−反応性蛋白質測定用試薬（請求項１３）
や、ホスホリルコリン基とホスホリルコリン基を除くカ
チオン性基とを有する化合物におけるカチオン性基が、
一般式（Ｉ）
とホスホリルコリン基を除くカチオン性基とを有する化
合物及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を含有する、あ
るいは、ホスホリルコリン基を有する界面活性剤、ホス
ホリルコリン基を除くカチオン性基を有する界面活性剤
及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を含有することを特
徴とするＣ−反応性蛋白質測定用試薬（請求項１３）
や、ホスホリルコリン基とホスホリルコリン基を除くカ
チオン性基とを有する化合物におけるカチオン性基が、
一般式（Ｉ）
【化１０】 ［式（Ｉ）中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は、同一又は異なって
もよく、水素、置換もしくは非置換アルキル、又は置換
もしくは非置換アルケニルを示し、Ｘ1 -は無機性陰イオ
ン又は有機性陰イオンを示す。］で示される基であるこ
とを特徴とする請求項１３記載のＣ−反応性蛋白質測定
用試薬（請求項１４）や、ホスホリルコリン基とホスホ
リルコリン基を除くカチオン性基とを有する化合物が、
ホスホリルコリン基を有する単量体とカチオン性基を有
する単量体とを結合させた共重合体であることを特徴と
する請求項１３又は１４記載のＣ−反応性蛋白質測定用
試薬（請求項１５）や、ホスホリルコリン基を有する単
量体とカチオン性基を有する単量体が、それぞれホスホ
リルコリン基とビニル基を有する単量体と、カチオン性
基とビニル基を有する単量体であることを特徴とする請
求項１５記載のＣ−反応性蛋白質測定用試薬（請求項１
６）や、ホスホリルコリン基とビニル基を有する単量体
及びカチオン性基とビニル基を有する単量体が、それぞ
れ２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン
と、２−ヒドロキシ−３−メタクリロイルオキシプロピ
ルトリメチルアンモニウムクロライドであることを特徴
とする請求項１６記載のＣ−反応性蛋白質測定用試薬
（請求項１７）に関する。
もよく、水素、置換もしくは非置換アルキル、又は置換
もしくは非置換アルケニルを示し、Ｘ1 -は無機性陰イオ
ン又は有機性陰イオンを示す。］で示される基であるこ
とを特徴とする請求項１３記載のＣ−反応性蛋白質測定
用試薬（請求項１４）や、ホスホリルコリン基とホスホ
リルコリン基を除くカチオン性基とを有する化合物が、
ホスホリルコリン基を有する単量体とカチオン性基を有
する単量体とを結合させた共重合体であることを特徴と
する請求項１３又は１４記載のＣ−反応性蛋白質測定用
試薬（請求項１５）や、ホスホリルコリン基を有する単
量体とカチオン性基を有する単量体が、それぞれホスホ
リルコリン基とビニル基を有する単量体と、カチオン性
基とビニル基を有する単量体であることを特徴とする請
求項１５記載のＣ−反応性蛋白質測定用試薬（請求項１
６）や、ホスホリルコリン基とビニル基を有する単量体
及びカチオン性基とビニル基を有する単量体が、それぞ
れ２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン
と、２−ヒドロキシ−３−メタクリロイルオキシプロピ
ルトリメチルアンモニウムクロライドであることを特徴
とする請求項１６記載のＣ−反応性蛋白質測定用試薬
（請求項１７）に関する。
【００１１】また本発明は、ホスホリルコリン基を有す
る界面活性剤が、一般式（II）
る界面活性剤が、一般式（II）
【化１１】 ［式（II）中、Ｙ1は疎水性基を示す。]で示される化合
物であることを特徴とする請求項１３記載のＣ−反応性
蛋白質測定用試薬（請求項１８）や、式（II）で表され
る化合物が、リゾホスファチジルコリンカプロイル、リ
ゾホスファチジルコリンミリストイル、リゾホスファチ
ジルコリンパルミトイル、リゾホスファチジルコリンス
テアロイル、大豆由来リゾホスファチジルコリン、ホス
ファチジルコリンジブチロイル、ホスファチジルコリン
ジカプロイル、ホスホリルコリンオレイルオキシエチル
エステル、スフィンゴシルホスホリルコリンから選ばれ
る１種又は２種以上の化合物であることを特徴とする請
求項１８記載のＣ−反応性蛋白質測定用試薬（請求項１
９）や、カチオン性基を有する界面活性剤がアンモニウ
ム塩の界面活性剤であることを特徴とする請求項１３、
１８及び１９のいずれか１項に記載のＣ−反応性蛋白質
測定用試薬（請求項２０）アンモニウム塩の界面活性剤
が、一般式（III）
物であることを特徴とする請求項１３記載のＣ−反応性
蛋白質測定用試薬（請求項１８）や、式（II）で表され
る化合物が、リゾホスファチジルコリンカプロイル、リ
ゾホスファチジルコリンミリストイル、リゾホスファチ
ジルコリンパルミトイル、リゾホスファチジルコリンス
テアロイル、大豆由来リゾホスファチジルコリン、ホス
ファチジルコリンジブチロイル、ホスファチジルコリン
ジカプロイル、ホスホリルコリンオレイルオキシエチル
エステル、スフィンゴシルホスホリルコリンから選ばれ
る１種又は２種以上の化合物であることを特徴とする請
求項１８記載のＣ−反応性蛋白質測定用試薬（請求項１
９）や、カチオン性基を有する界面活性剤がアンモニウ
ム塩の界面活性剤であることを特徴とする請求項１３、
１８及び１９のいずれか１項に記載のＣ−反応性蛋白質
測定用試薬（請求項２０）アンモニウム塩の界面活性剤
が、一般式（III）
【化１２】 ［式（III）中、Ｙ2は疎水性基を示し、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3
は同一又は異なってもよく、水素、置換もしくは非置換
アルキル、又は置換もしくは非置換アルケニルを示し、
Ｘ2 -は無機性陰イオン又は有機性陰イオンを示す。］で
示される化合物であることを特徴とする請求項２０記載
のＣ−反応性蛋白質測定用試薬（請求項２１）や、式
（III）で表される化合物が、オクタデシルトリメチル
アンモニウムクロライド、ヘキサデシルトリメチルアン
モニウムクロライド、テトラデシルトリメチルアンモニ
ウムクロライド、ドデシルトリメチルアンモニウムクロ
ライドから選ばれる１種又は２種以上の化合物であるこ
とを特徴とする請求項２１記載のＣ−反応性蛋白質測定
用試薬（請求項２２）や、Ｃ−反応性蛋白質に対する抗
体が、水不溶性担体に担持されていることを特徴とする
請求項１３〜２２のいずれか１項に記載のＣ−反応性蛋
白質測定用試薬（請求項２３）や、不溶性担体が、ポリ
スチレン系ラテックスであることを特徴とする請求項２
３に記載のＣ−反応性蛋白質測定用試薬（請求項２４）
に関する。
は同一又は異なってもよく、水素、置換もしくは非置換
アルキル、又は置換もしくは非置換アルケニルを示し、
Ｘ2 -は無機性陰イオン又は有機性陰イオンを示す。］で
示される化合物であることを特徴とする請求項２０記載
のＣ−反応性蛋白質測定用試薬（請求項２１）や、式
（III）で表される化合物が、オクタデシルトリメチル
アンモニウムクロライド、ヘキサデシルトリメチルアン
モニウムクロライド、テトラデシルトリメチルアンモニ
ウムクロライド、ドデシルトリメチルアンモニウムクロ
ライドから選ばれる１種又は２種以上の化合物であるこ
とを特徴とする請求項２１記載のＣ−反応性蛋白質測定
用試薬（請求項２２）や、Ｃ−反応性蛋白質に対する抗
体が、水不溶性担体に担持されていることを特徴とする
請求項１３〜２２のいずれか１項に記載のＣ−反応性蛋
白質測定用試薬（請求項２３）や、不溶性担体が、ポリ
スチレン系ラテックスであることを特徴とする請求項２
３に記載のＣ−反応性蛋白質測定用試薬（請求項２４）
に関する。
【００１２】
【発明の実施の形態】本発明のＣ−反応性蛋白質の測定
方法は、ホスホリルコリン基とホスホリルコリン基を除
くカチオン性基とを有する化合物及びＣ−反応性蛋白質
に対する抗体を用いて、Ｃ−反応性蛋白質を測定するこ
とを特徴とする測定方法（以下、「本発明のＣ−反応性
蛋白質の測定方法（Ａ）」という）と、ホスホリルコリ
ン基を有する界面活性剤、カチオン性基を有する界面活
性剤及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を用いて、Ｃ−
反応性蛋白質を測定することを特徴とする測定方法（以
下、「本発明のＣ−反応性蛋白質の測定方法（Ｂ）」と
いう）から構成され、また、本発明のＣ−反応性蛋白質
測定用試薬は、ホスホリルコリン基とホスホリルコリン
基を除くカチオン性基とを有する化合物及びＣ−反応性
蛋白質に対する抗体を含有することを特徴とする試薬
（以下、「本発明のＣ−反応性蛋白質測定用試薬
（Ａ）」という）と、ホスホリルコリン基を有する界面
活性剤、カチオン性基を有する界面活性剤及びＣ−反応
性蛋白質に対する抗体を含有することを特徴とする試薬
（以下、「本発明のＣ−反応性蛋白質測定用試薬
（Ｂ）」という）から構成される。
方法は、ホスホリルコリン基とホスホリルコリン基を除
くカチオン性基とを有する化合物及びＣ−反応性蛋白質
に対する抗体を用いて、Ｃ−反応性蛋白質を測定するこ
とを特徴とする測定方法（以下、「本発明のＣ−反応性
蛋白質の測定方法（Ａ）」という）と、ホスホリルコリ
ン基を有する界面活性剤、カチオン性基を有する界面活
性剤及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を用いて、Ｃ−
反応性蛋白質を測定することを特徴とする測定方法（以
下、「本発明のＣ−反応性蛋白質の測定方法（Ｂ）」と
いう）から構成され、また、本発明のＣ−反応性蛋白質
測定用試薬は、ホスホリルコリン基とホスホリルコリン
基を除くカチオン性基とを有する化合物及びＣ−反応性
蛋白質に対する抗体を含有することを特徴とする試薬
（以下、「本発明のＣ−反応性蛋白質測定用試薬
（Ａ）」という）と、ホスホリルコリン基を有する界面
活性剤、カチオン性基を有する界面活性剤及びＣ−反応
性蛋白質に対する抗体を含有することを特徴とする試薬
（以下、「本発明のＣ−反応性蛋白質測定用試薬
（Ｂ）」という）から構成される。
【００１３】本発明のＣ−反応性蛋白質の測定方法
（Ａ）やＣ−反応性蛋白質測定用試薬（Ａ）におけるホ
スホリルコリン基とホスホリルコリン基を除くカチオン
性基とを有する化合物としては、少なくとも一対のホス
ホリルコリン基とホスホリルコリン基を除くカチオン性
基とを同一分子内に有する化合物であれば、いかなる化
合物でも用いることができるが、ホスホリルコリン基と
ホスホリルコリン基を除くカチオン性基とを同一分子中
に複数有する化合物がプロゾーン現象を充分に回避しう
る点からして好ましく、例えば油脂、炭水化物、蛋白
質、多糖類、核酸といった天然化合物にこれら二つの基
を導入して製造した合成化合物や、合成化合物にこれら
二つの基を導入して製造した合成化合物や、これらの基
を別々に含有する化合物を合成により結合させて製造し
た合成化合物等を挙げることができる。また、本発明に
おけるホスホリルコリン基とホスホリルコリン基を除く
カチオン性基とを有する化合物の分子量としては、特に
制限されないが、プロゾーン現象を充分に回避しうる点
からして５００〜５，０００，０００が好ましく、１，
０００〜１，０００，０００がより好ましく、５，００
０〜１００，０００が特に好ましい。
（Ａ）やＣ−反応性蛋白質測定用試薬（Ａ）におけるホ
スホリルコリン基とホスホリルコリン基を除くカチオン
性基とを有する化合物としては、少なくとも一対のホス
ホリルコリン基とホスホリルコリン基を除くカチオン性
基とを同一分子内に有する化合物であれば、いかなる化
合物でも用いることができるが、ホスホリルコリン基と
ホスホリルコリン基を除くカチオン性基とを同一分子中
に複数有する化合物がプロゾーン現象を充分に回避しう
る点からして好ましく、例えば油脂、炭水化物、蛋白
質、多糖類、核酸といった天然化合物にこれら二つの基
を導入して製造した合成化合物や、合成化合物にこれら
二つの基を導入して製造した合成化合物や、これらの基
を別々に含有する化合物を合成により結合させて製造し
た合成化合物等を挙げることができる。また、本発明に
おけるホスホリルコリン基とホスホリルコリン基を除く
カチオン性基とを有する化合物の分子量としては、特に
制限されないが、プロゾーン現象を充分に回避しうる点
からして５００〜５，０００，０００が好ましく、１，
０００〜１，０００，０００がより好ましく、５，００
０〜１００，０００が特に好ましい。
【００１４】上記ホスホリルコリン基とホスホリルコリ
ン基を除くカチオン性基とを有する化合物におけるカチ
オン性基としては、ホスホリルコリン基を除く正の電荷
をもつ基であれば特に制限されるものではないが、一般
式（Ｉ）［式（Ｉ）中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は、同一又は
異なってもよく、水素、置換もしくは非置換アルキル、
又は置換もしくは非置換アルケニルを示し、Ｘ1 -は無機
性陰イオン又は有機性陰イオンを示す。］で表されるカ
チオン性基がプロゾーン現象を充分に回避しうる点から
して好ましい。
ン基を除くカチオン性基とを有する化合物におけるカチ
オン性基としては、ホスホリルコリン基を除く正の電荷
をもつ基であれば特に制限されるものではないが、一般
式（Ｉ）［式（Ｉ）中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は、同一又は
異なってもよく、水素、置換もしくは非置換アルキル、
又は置換もしくは非置換アルケニルを示し、Ｘ1 -は無機
性陰イオン又は有機性陰イオンを示す。］で表されるカ
チオン性基がプロゾーン現象を充分に回避しうる点から
して好ましい。
【００１５】
【化１３】
【００１６】一般式（Ｉ）におけるアルキルとしては、
直鎖又は分岐状の、好ましくは炭素数１〜２４のアルキ
ル、より好ましくは炭素数１〜１２のアルキル、特に好
ましくは炭素数１〜６のアルキルを挙げることができ、
メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イ
ソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチ
ル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノ
ニル、デシル等を具体的に例示することができ、また、
アルケニルとしては、直鎖又は分岐状の、好ましくは炭
素数２〜２４のアルケニル、より好ましくは炭素数２〜
１２のアルケニル、特に好ましくは炭素数２〜６のアル
ケニルを挙げることができ、ビニル、アリル、２−ブテ
ニル、２−ペンテニル、２−ヘキセニル等を具体的に例
示することができる。また、置換アルキル及び置換アル
ケニルの置換基としては、例えばアルコキシ、アルカノ
イル、アルカノイルオキシ、アルケニルオキシ、アルケ
ノイル、アルケノイルオキシ、アロイル、置換もしくは
非置換フェニル、置換もしくは非置換のナフチル等を例
示することができ、アルコキシ、アルカノイル及びアル
カノイルオキシのアルキル部分はそれぞれ前記のアルキ
ルと同意義である。また、アルケニルオキシ、アルケノ
イル及びアルケノイルオキシのアルケニル部分はそれぞ
れ前記のアルケニルと同意義である。アロイルとして
は、ベンゾイル、ナフトイル等を挙げることができる。
そして、置換フェニル、置換ナフチルの置換基として
は、アルキル、アルケニル等を挙げることができ、アル
キル、アルケニルはそれぞれ前記アルキル、アルケニル
と同意義である。無機性陰イオンとしては、フッ素、塩
素、臭素、ヨウ素等のハロゲン、硝酸等無機酸の陰イオ
ンなどを挙げることができる。有機性陰イオンとして
は、ギ酸、酢酸等の有機カルボン酸イオン等を挙げるこ
とができる。
直鎖又は分岐状の、好ましくは炭素数１〜２４のアルキ
ル、より好ましくは炭素数１〜１２のアルキル、特に好
ましくは炭素数１〜６のアルキルを挙げることができ、
メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イ
ソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチ
ル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノ
ニル、デシル等を具体的に例示することができ、また、
アルケニルとしては、直鎖又は分岐状の、好ましくは炭
素数２〜２４のアルケニル、より好ましくは炭素数２〜
１２のアルケニル、特に好ましくは炭素数２〜６のアル
ケニルを挙げることができ、ビニル、アリル、２−ブテ
ニル、２−ペンテニル、２−ヘキセニル等を具体的に例
示することができる。また、置換アルキル及び置換アル
ケニルの置換基としては、例えばアルコキシ、アルカノ
イル、アルカノイルオキシ、アルケニルオキシ、アルケ
ノイル、アルケノイルオキシ、アロイル、置換もしくは
非置換フェニル、置換もしくは非置換のナフチル等を例
示することができ、アルコキシ、アルカノイル及びアル
カノイルオキシのアルキル部分はそれぞれ前記のアルキ
ルと同意義である。また、アルケニルオキシ、アルケノ
イル及びアルケノイルオキシのアルケニル部分はそれぞ
れ前記のアルケニルと同意義である。アロイルとして
は、ベンゾイル、ナフトイル等を挙げることができる。
そして、置換フェニル、置換ナフチルの置換基として
は、アルキル、アルケニル等を挙げることができ、アル
キル、アルケニルはそれぞれ前記アルキル、アルケニル
と同意義である。無機性陰イオンとしては、フッ素、塩
素、臭素、ヨウ素等のハロゲン、硝酸等無機酸の陰イオ
ンなどを挙げることができる。有機性陰イオンとして
は、ギ酸、酢酸等の有機カルボン酸イオン等を挙げるこ
とができる。
【００１７】天然化合物や合成化合物にホスホリルコリ
ン基及びカチオン性基を導入する方法としては、従来公
知の方法、例えば天然化合物や合成化合物の水酸基、カ
ルボキシル基、アミノ基等の官能基と、ホスホリルコリ
ン基及びカチオン性基を有する化合物に公知の方法によ
り導入した官能基とを反応させる方法を挙げることがで
き、かかるホスホリルコリン基及びカチオン性基に導入
する官能基としては、例えば天然化合物及び合成化合物
のもつ上記の官能基と結合するものであればよく、水酸
基、アミノ基、カルボキシル基、アルデヒド基等を例示
することができる。
ン基及びカチオン性基を導入する方法としては、従来公
知の方法、例えば天然化合物や合成化合物の水酸基、カ
ルボキシル基、アミノ基等の官能基と、ホスホリルコリ
ン基及びカチオン性基を有する化合物に公知の方法によ
り導入した官能基とを反応させる方法を挙げることがで
き、かかるホスホリルコリン基及びカチオン性基に導入
する官能基としては、例えば天然化合物及び合成化合物
のもつ上記の官能基と結合するものであればよく、水酸
基、アミノ基、カルボキシル基、アルデヒド基等を例示
することができる。
【００１８】ホスホリルコリン基を有する化合物とカチ
オン性基を有する化合物とを合成により結合させて製造
する方法としては特に制限がなく、ホスホリルコリン基
を有する化合物及びカチオン性基を有する化合物を単量
体として、付加重合等により高分子化させて製造するこ
とができる。かかる単量体としては、ホスホリルコリン
基とビニル基とを有する化合物及びカチオン性基とビニ
ル基とを有する化合物や、ホスホリルコリン基もしくは
カチオン性基を有するジオール化合物及びカチオン性基
もしくはホスホリルコリン基を有するジカルボン酸化合
物や、ホスホリルコリン基もしくはカチオン性基を有す
るジアミン化合物及びカチオン性基もしくはホスホリル
コリン基を有するジカルボン酸化合物等を例示すること
ができるが、特に、ホスホリルコリン基とビニル基とを
有する化合物及びカチオン性基とビニル基とを有する化
合物を高分子化させて製造する方法が分子量又は組成比
を制御しやすい点で好ましい。
オン性基を有する化合物とを合成により結合させて製造
する方法としては特に制限がなく、ホスホリルコリン基
を有する化合物及びカチオン性基を有する化合物を単量
体として、付加重合等により高分子化させて製造するこ
とができる。かかる単量体としては、ホスホリルコリン
基とビニル基とを有する化合物及びカチオン性基とビニ
ル基とを有する化合物や、ホスホリルコリン基もしくは
カチオン性基を有するジオール化合物及びカチオン性基
もしくはホスホリルコリン基を有するジカルボン酸化合
物や、ホスホリルコリン基もしくはカチオン性基を有す
るジアミン化合物及びカチオン性基もしくはホスホリル
コリン基を有するジカルボン酸化合物等を例示すること
ができるが、特に、ホスホリルコリン基とビニル基とを
有する化合物及びカチオン性基とビニル基とを有する化
合物を高分子化させて製造する方法が分子量又は組成比
を制御しやすい点で好ましい。
【００１９】上記ホスホリルコリン基とビニル基とを有
する単量体としては、共重合が可能なものであれば特に
限定されるものではなく、例えば、２−アクリロイルオ
キシエチルホスホリルコリン、２−メタクリロイルオキ
シエチルホスホリルコリン（以下、ＭＰＣと略す）、２
−（メタ）アクリロイルオキシエトキシエチルホスホリ
ルコリン、６−（メタ）アクリロイルオキシヘキシルホ
スホリルコリン、１０−（メタ）アクリロイルオキシエ
トキシノニルホスホリルコリン、アリルホスホリルコリ
ン、ブテニルホスホリルコリン、ヘキセニルホスホリル
コリン、オクテニルホスホリルコリン、デセニルホスホ
リルコリン等を具体的に挙げることができる。また、こ
れら単量体は、例えば、特開昭５４−６３２５号公報、
特開昭５８−１５４５９１号公報に示された公知の方法
等によって製造することができる。
する単量体としては、共重合が可能なものであれば特に
限定されるものではなく、例えば、２−アクリロイルオ
キシエチルホスホリルコリン、２−メタクリロイルオキ
シエチルホスホリルコリン（以下、ＭＰＣと略す）、２
−（メタ）アクリロイルオキシエトキシエチルホスホリ
ルコリン、６−（メタ）アクリロイルオキシヘキシルホ
スホリルコリン、１０−（メタ）アクリロイルオキシエ
トキシノニルホスホリルコリン、アリルホスホリルコリ
ン、ブテニルホスホリルコリン、ヘキセニルホスホリル
コリン、オクテニルホスホリルコリン、デセニルホスホ
リルコリン等を具体的に挙げることができる。また、こ
れら単量体は、例えば、特開昭５４−６３２５号公報、
特開昭５８−１５４５９１号公報に示された公知の方法
等によって製造することができる。
【００２０】上記カチオン性基とビニル基とを有する単
量体としては、ラジカル重合が可能なものであれば特に
限定されるものではなく、例えば、［３−（メタクリロ
イルオキシアミノ）プロピル］トリメチルアンモニウム
クロライド、［３−（アクリロイルオキシアミノ）プロ
ピル］トリメチルアンモニウムクロライド、［２−（メ
タクリロイルオキシ）エチル］トリメチルアンモニウム
クロライド、［２−（アクリロイルオキシ）エチル］ト
リメチルアンモニウムクロライド、２−ヒドロキシ−３
−メタクリロイルオキシプロピルトリメチルアンモニウ
ムクロライド（以下、ＱＡと略す）、２−ヒドロキシ−
３−アリロイルオキシプロピルトリメチルアンモニウム
クロライド等を具体的に挙げることができる。また、こ
れら単量体は、一般試薬として入手することが可能であ
る。
量体としては、ラジカル重合が可能なものであれば特に
限定されるものではなく、例えば、［３−（メタクリロ
イルオキシアミノ）プロピル］トリメチルアンモニウム
クロライド、［３−（アクリロイルオキシアミノ）プロ
ピル］トリメチルアンモニウムクロライド、［２−（メ
タクリロイルオキシ）エチル］トリメチルアンモニウム
クロライド、［２−（アクリロイルオキシ）エチル］ト
リメチルアンモニウムクロライド、２−ヒドロキシ−３
−メタクリロイルオキシプロピルトリメチルアンモニウ
ムクロライド（以下、ＱＡと略す）、２−ヒドロキシ−
３−アリロイルオキシプロピルトリメチルアンモニウム
クロライド等を具体的に挙げることができる。また、こ
れら単量体は、一般試薬として入手することが可能であ
る。
【００２１】ホスホリルコリン基とビニル基とを有する
単量体と、カチオン性基とビニル基とを有する単量体の
組合せは特に限定されるものではないが、前述のＭＰＣ
とＱＡとの組合せがプロゾーン現象を充分に回避しうる
点からして好ましい。また、ホスホリルコリン基とビニ
ル基とを有する単量体と、カチオン性基とビニル基とを
有する単量体を高分子化させるときには、他のラジカル
重合可能なビニル基を有する単量体を混合して用いるこ
ともできる。かかる他のラジカル重合可能なビニル基を
有する単量体としては、例えば、（メタ）アクリル酸メ
チル、（メタ）アクリル酸エチル、（メタ）アクリル酸
−ｎ−ブチル、（メタ）アクリル酸イソブチル、（メ
タ）アクリル酸ペンチル、（メタ）アクリル酸ヘキシ
ル、（メタ）アクリル酸ヘプチル、（メタ）アクリル酸
オクチル、（メタ）アクリル酸トリデシル、２−ヒドロ
キシエチルメタクリレート等の（メタ）アクリル酸エス
テル；スチレン、α−メチルスチレン、メチル核置換ス
チレン、クロロ置換スチレン等のスチレン系単量体；塩
化ビニル、塩化ビニリデン、エチレン、プロピレン、イ
ソブチレン等の置換もしくは非置換の炭化水素系単量
体；エチルビニルエーテル、ｎ−ブチルビニルエーテル
等のビニルエーテル系単量体等を挙げることができる。
単量体と、カチオン性基とビニル基とを有する単量体の
組合せは特に限定されるものではないが、前述のＭＰＣ
とＱＡとの組合せがプロゾーン現象を充分に回避しうる
点からして好ましい。また、ホスホリルコリン基とビニ
ル基とを有する単量体と、カチオン性基とビニル基とを
有する単量体を高分子化させるときには、他のラジカル
重合可能なビニル基を有する単量体を混合して用いるこ
ともできる。かかる他のラジカル重合可能なビニル基を
有する単量体としては、例えば、（メタ）アクリル酸メ
チル、（メタ）アクリル酸エチル、（メタ）アクリル酸
−ｎ−ブチル、（メタ）アクリル酸イソブチル、（メ
タ）アクリル酸ペンチル、（メタ）アクリル酸ヘキシ
ル、（メタ）アクリル酸ヘプチル、（メタ）アクリル酸
オクチル、（メタ）アクリル酸トリデシル、２−ヒドロ
キシエチルメタクリレート等の（メタ）アクリル酸エス
テル；スチレン、α−メチルスチレン、メチル核置換ス
チレン、クロロ置換スチレン等のスチレン系単量体；塩
化ビニル、塩化ビニリデン、エチレン、プロピレン、イ
ソブチレン等の置換もしくは非置換の炭化水素系単量
体；エチルビニルエーテル、ｎ−ブチルビニルエーテル
等のビニルエーテル系単量体等を挙げることができる。
【００２２】本発明に用いられるホスホリルコリン基と
ビニル基とを有する単量体、カチオン性基とビニル基と
を有する単量体、及び必要に応じて用いられる他のラジ
カル重合可能なビニル基を有する単量体を含む組成物を
重合させる方法としては、例えば、特開平９−３１３２
号公報、特開平８−３３３４２１号公報、特開平１１−
３５６０５号公報等に記載された公知の重合方法等を挙
げることができる。具体的には、重合温度３０〜１５０
℃、重合時間２〜７２時間の条件でラジカル重合させる
方法等により重合することができる。また、ラジカル重
合反応における開始剤としては、２，２′−アゾビス
（２−メチルプロピオノアミヂン）二塩酸塩、４，４′
−アゾビス（４−シアノ吉草酸）、２，２′−アゾビス
［２−（５−メチル−２−イミダゾリン−２−イル）プ
ロパン］二塩酸塩、２，２′−アゾビスイソブチルアミ
ド二水和物、２，２′−アゾビスイソブチロニトリル、
過硫酸アンモニウム、過硫酸カリウム、過酸化ベンゾイ
ル、ジイソプロピルペルオキシジカーボネート、ｔｅｒ
ｔ−ブチルペルオキシ−２−エチルヘキサノエート、ｔ
ｅｒｔ−ブチルペルオキシピバレート、ｔｅｒｔ−ブチ
ルペルオキシジイソブチレート、過酸化ラウロイル、ア
ゾビスイソブチロニトリル、２，２′−アゾビス（２，
４−ジメチルバレロニトリル）、ｔｅｒｔ−ブチルペル
オキシネオデカノエート、又はこれら混合物等を挙げる
ことができる。また、重合溶媒としては、水、エタノー
ル、メタノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ−ブタノ
ール、ベンゼン、トルエン、ジメチルホルムアミド、テ
トラヒドロフラン、クロロホルム及びこれらの混合物等
を例示することができる。
ビニル基とを有する単量体、カチオン性基とビニル基と
を有する単量体、及び必要に応じて用いられる他のラジ
カル重合可能なビニル基を有する単量体を含む組成物を
重合させる方法としては、例えば、特開平９−３１３２
号公報、特開平８−３３３４２１号公報、特開平１１−
３５６０５号公報等に記載された公知の重合方法等を挙
げることができる。具体的には、重合温度３０〜１５０
℃、重合時間２〜７２時間の条件でラジカル重合させる
方法等により重合することができる。また、ラジカル重
合反応における開始剤としては、２，２′−アゾビス
（２−メチルプロピオノアミヂン）二塩酸塩、４，４′
−アゾビス（４−シアノ吉草酸）、２，２′−アゾビス
［２−（５−メチル−２−イミダゾリン−２−イル）プ
ロパン］二塩酸塩、２，２′−アゾビスイソブチルアミ
ド二水和物、２，２′−アゾビスイソブチロニトリル、
過硫酸アンモニウム、過硫酸カリウム、過酸化ベンゾイ
ル、ジイソプロピルペルオキシジカーボネート、ｔｅｒ
ｔ−ブチルペルオキシ−２−エチルヘキサノエート、ｔ
ｅｒｔ−ブチルペルオキシピバレート、ｔｅｒｔ−ブチ
ルペルオキシジイソブチレート、過酸化ラウロイル、ア
ゾビスイソブチロニトリル、２，２′−アゾビス（２，
４−ジメチルバレロニトリル）、ｔｅｒｔ−ブチルペル
オキシネオデカノエート、又はこれら混合物等を挙げる
ことができる。また、重合溶媒としては、水、エタノー
ル、メタノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ−ブタノ
ール、ベンゼン、トルエン、ジメチルホルムアミド、テ
トラヒドロフラン、クロロホルム及びこれらの混合物等
を例示することができる。
【００２３】前記ＭＰＣとＱＡとを重合させる際には、
重合性などの点から、重合開始剤として２，２′−アゾ
ビス（２−メチルプロピオノアミヂン）二塩酸塩を用い
ることが好ましく、その使用量としては、単量体成分１
００重量部に対して０．０１〜１０重量部が好ましく、
０．１〜５重量部がより好ましい。また、ＭＰＣとＱＡ
の重合溶媒としては、溶解性や重合性などの点から、
水、エタノールが特に好ましい。また、重合体の精製
は、再沈殿法、透析法、限外濾過法など一般的な精製方
法により行うことができる。
重合性などの点から、重合開始剤として２，２′−アゾ
ビス（２−メチルプロピオノアミヂン）二塩酸塩を用い
ることが好ましく、その使用量としては、単量体成分１
００重量部に対して０．０１〜１０重量部が好ましく、
０．１〜５重量部がより好ましい。また、ＭＰＣとＱＡ
の重合溶媒としては、溶解性や重合性などの点から、
水、エタノールが特に好ましい。また、重合体の精製
は、再沈殿法、透析法、限外濾過法など一般的な精製方
法により行うことができる。
【００２４】本発明で用いられる重合体の分子量は特に
限定されないが、好ましくは５００〜５，０００，００
０、より好ましくは１，０００〜１，０００，０００、
特に好ましくは５，０００〜１００，０００である。こ
の分子量は、ゲルパーミエーションクロマトグラフィー
（ＧＰＣ）を用いて分析し、ポリエチレングリコール換
算した値として示されている。また、ホスホリルコリン
基を有する単量体及びカチオン性基を有する単量体を構
成単位として含む共重合体中におけるカチオン性基のモ
ル含量率は、ホスホリルコリン基に対し１〜９５％が好
ましく、５〜９０％がより好ましく、１０〜３０％が特
に好ましい。
限定されないが、好ましくは５００〜５，０００，００
０、より好ましくは１，０００〜１，０００，０００、
特に好ましくは５，０００〜１００，０００である。こ
の分子量は、ゲルパーミエーションクロマトグラフィー
（ＧＰＣ）を用いて分析し、ポリエチレングリコール換
算した値として示されている。また、ホスホリルコリン
基を有する単量体及びカチオン性基を有する単量体を構
成単位として含む共重合体中におけるカチオン性基のモ
ル含量率は、ホスホリルコリン基に対し１〜９５％が好
ましく、５〜９０％がより好ましく、１０〜３０％が特
に好ましい。
【００２５】本発明のＣ−反応性蛋白質の測定方法(Ａ)
やＣ−反応性蛋白質測定用試薬(Ａ)を用いたＣ−反応性
蛋白質の測定は、ホスホリルコリン基とカチオン性基と
を有する化合物及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を、
反応液中でＣ−反応性蛋白質を含む被測定検体と接触さ
せることにより行われる。かかる反応液としては、水性
媒体であれば特に制限がないが、緩衝液が好ましい。緩
衝液としては、グリシン緩衝液、トリス緩衝液、リン酸
緩衝液、ＨＥＰＥＳ緩衝液等を例示することができる。
また、反応液には、塩化カルシウム等のカルシウムイオ
ンを加えるとプロゾーン回避効果が高まり測定範囲が拡
大するので好ましい。カルシウムイオン濃度としては、
例えば１〜２０ｍｍｏｌ／Ｌが好ましく、２〜１０ｍｍ
ｏｌ／Ｌがより好ましい。Ｃ−反応性蛋白質測定の反応
液中のホスホリルコリン基及びカチオン性基を有する化
合物濃度は特に限定されないが、０．０００１〜１重量
％が好ましく、０．００５〜０．５重量％がより好まし
く、０．０１〜０．１重量％が特に好ましい。ホスホリ
ルコリン基及びカチオン性基を有する重合体は、上記の
様に比較的僅かな添加量でもプロゾーン回避及び測定範
囲の拡大に効果を発揮する。
やＣ−反応性蛋白質測定用試薬(Ａ)を用いたＣ−反応性
蛋白質の測定は、ホスホリルコリン基とカチオン性基と
を有する化合物及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を、
反応液中でＣ−反応性蛋白質を含む被測定検体と接触さ
せることにより行われる。かかる反応液としては、水性
媒体であれば特に制限がないが、緩衝液が好ましい。緩
衝液としては、グリシン緩衝液、トリス緩衝液、リン酸
緩衝液、ＨＥＰＥＳ緩衝液等を例示することができる。
また、反応液には、塩化カルシウム等のカルシウムイオ
ンを加えるとプロゾーン回避効果が高まり測定範囲が拡
大するので好ましい。カルシウムイオン濃度としては、
例えば１〜２０ｍｍｏｌ／Ｌが好ましく、２〜１０ｍｍ
ｏｌ／Ｌがより好ましい。Ｃ−反応性蛋白質測定の反応
液中のホスホリルコリン基及びカチオン性基を有する化
合物濃度は特に限定されないが、０．０００１〜１重量
％が好ましく、０．００５〜０．５重量％がより好まし
く、０．０１〜０．１重量％が特に好ましい。ホスホリ
ルコリン基及びカチオン性基を有する重合体は、上記の
様に比較的僅かな添加量でもプロゾーン回避及び測定範
囲の拡大に効果を発揮する。
【００２６】本発明のＣ−反応性蛋白質の測定方法(Ｂ)
やＣ−反応性蛋白質測定用試薬(Ｂ)におけるホスホリル
コリン基を有する界面活性剤としては、ホスホリルコリ
ン基を有し、かつ界面活性を示す物質であればどのよう
な物質をも用いることができるが、一般式（II）［式
（II）中、Ｙ1は疎水性基を示す。］で表される界面活
性剤がプロゾーン現象を充分に回避しうる点からして好
ましい。
やＣ−反応性蛋白質測定用試薬(Ｂ)におけるホスホリル
コリン基を有する界面活性剤としては、ホスホリルコリ
ン基を有し、かつ界面活性を示す物質であればどのよう
な物質をも用いることができるが、一般式（II）［式
（II）中、Ｙ1は疎水性基を示す。］で表される界面活
性剤がプロゾーン現象を充分に回避しうる点からして好
ましい。
【００２７】
【化１４】
【００２８】一般式（II）で表される界面活性剤におけ
る疎水性基としては、ホスホリルコリン基の親水性に対
し、疎水性を示す基であれば特に制限されるものではな
いが、炭化水素を基本とする基を挙げることができ、置
換もしくは非置換のアルキル、又は置換もしくは非置換
のアルケニルを具体的に例示することができる。式（I
I）におけるアルキルとしては、直鎖又は分岐状の、好
ましくは炭素数１〜３０のアルキル、より好ましくは炭
素数２〜２４のアルキル、特に好ましくは炭素数３〜２
０のアルキルを挙げることができ、メチル、エチル、プ
ロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−
ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、
ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ドデ
シル、ペンタデシル、エイコシル等を具体的に例示する
ことができ、また、アルケニルとしては、直鎖又は分岐
状の、好ましくは炭素数２〜２４のアルケニル、より好
ましくは炭素数３〜１２のアルケニル、特に好ましくは
炭素数３〜６のアルケニルを挙げることができ、ビニ
ル、アリル、２−ブテニル、２−ペンテニル、２−ヘキ
セニル等を具体的に例示することができる。また、置換
アルキル及び置換アルケニルの置換基としては、アルコ
キシ、アルカノイル、アルカノイルオキシ、アルケニル
オキシ、アルケノイル、アルケノイルオキシ、アロイ
ル、ヒドロキシ、置換もしくは非置換アミノ、置換もし
くは非置換フェニル、置換もしくは非置換のナフチル等
を例示することができ、アルコキシ、アルカノイル及び
アルカノイルオキシのアルキル部分はそれぞれ前記のア
ルキルと同意義であり、また、アルケニルオキシ、アル
ケノイル及びアルケノイルオキシのアルケニル部分はそ
れぞれ前記のアルケニルと同異義である。アロイルとし
ては、ベンゾイル、ナフトイル等を挙げることができ
る。そして、置換アミノの置換基としては、アルキル、
アルケニル等があげられ、置換フェニルおよび置換ナフ
チルの置換基としては、ヒドロキシ、アルキル、アルケ
ニル等を挙げることができ、ここで、アルキル、アルケ
ニルはそれぞれ前記アルキル、アルケニルと同意義であ
る。
る疎水性基としては、ホスホリルコリン基の親水性に対
し、疎水性を示す基であれば特に制限されるものではな
いが、炭化水素を基本とする基を挙げることができ、置
換もしくは非置換のアルキル、又は置換もしくは非置換
のアルケニルを具体的に例示することができる。式（I
I）におけるアルキルとしては、直鎖又は分岐状の、好
ましくは炭素数１〜３０のアルキル、より好ましくは炭
素数２〜２４のアルキル、特に好ましくは炭素数３〜２
０のアルキルを挙げることができ、メチル、エチル、プ
ロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−
ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、
ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ドデ
シル、ペンタデシル、エイコシル等を具体的に例示する
ことができ、また、アルケニルとしては、直鎖又は分岐
状の、好ましくは炭素数２〜２４のアルケニル、より好
ましくは炭素数３〜１２のアルケニル、特に好ましくは
炭素数３〜６のアルケニルを挙げることができ、ビニ
ル、アリル、２−ブテニル、２−ペンテニル、２−ヘキ
セニル等を具体的に例示することができる。また、置換
アルキル及び置換アルケニルの置換基としては、アルコ
キシ、アルカノイル、アルカノイルオキシ、アルケニル
オキシ、アルケノイル、アルケノイルオキシ、アロイ
ル、ヒドロキシ、置換もしくは非置換アミノ、置換もし
くは非置換フェニル、置換もしくは非置換のナフチル等
を例示することができ、アルコキシ、アルカノイル及び
アルカノイルオキシのアルキル部分はそれぞれ前記のア
ルキルと同意義であり、また、アルケニルオキシ、アル
ケノイル及びアルケノイルオキシのアルケニル部分はそ
れぞれ前記のアルケニルと同異義である。アロイルとし
ては、ベンゾイル、ナフトイル等を挙げることができ
る。そして、置換アミノの置換基としては、アルキル、
アルケニル等があげられ、置換フェニルおよび置換ナフ
チルの置換基としては、ヒドロキシ、アルキル、アルケ
ニル等を挙げることができ、ここで、アルキル、アルケ
ニルはそれぞれ前記アルキル、アルケニルと同意義であ
る。
【００２９】上記本発明における式（II）で表される界
面活性剤としては、疎水性基として、炭素数２〜２４の
アルキルもしくはアルケニル（ホスホリルコリン基と該
アルキルもしくはアルケニルの間に、オキシメチレニ
ル、オキシエチレニル、オキシプロピレニルを有する場
合も含む）、アシル鎖の炭素数が４〜２４の１位もしく
は２位のモノグリセリド、同一又は異なっていてもよい
アシル鎖の炭素数が４〜２４のジグリセリド、又はスフ
ィンゴシン構造を有する界面活性剤が好ましく、リゾホ
スファチジルコリンカプロイル、リゾホスファチジルコ
リンミリストイル、リゾホスファチジルコリンパルミト
イル、リゾホスファチジルコリンステアロイル、大豆由
来リゾホスファチジルコリンなどのリゾホスファチジル
コリン（リゾレシチン）や、ホスファチジルコリンジブ
チロイル、ホスファチジルコリンジカプロイル等のアシ
ル鎖長の短いホスファチジルコリン、ホスホリルコリン
オレイルオキシエチルエステル、スフィンゴシルホスホ
リルコリン等を具体的に例示することができる。
面活性剤としては、疎水性基として、炭素数２〜２４の
アルキルもしくはアルケニル（ホスホリルコリン基と該
アルキルもしくはアルケニルの間に、オキシメチレニ
ル、オキシエチレニル、オキシプロピレニルを有する場
合も含む）、アシル鎖の炭素数が４〜２４の１位もしく
は２位のモノグリセリド、同一又は異なっていてもよい
アシル鎖の炭素数が４〜２４のジグリセリド、又はスフ
ィンゴシン構造を有する界面活性剤が好ましく、リゾホ
スファチジルコリンカプロイル、リゾホスファチジルコ
リンミリストイル、リゾホスファチジルコリンパルミト
イル、リゾホスファチジルコリンステアロイル、大豆由
来リゾホスファチジルコリンなどのリゾホスファチジル
コリン（リゾレシチン）や、ホスファチジルコリンジブ
チロイル、ホスファチジルコリンジカプロイル等のアシ
ル鎖長の短いホスファチジルコリン、ホスホリルコリン
オレイルオキシエチルエステル、スフィンゴシルホスホ
リルコリン等を具体的に例示することができる。
【００３０】本発明のＣ−反応性蛋白質の測定方法
（Ｂ）やＣ−反応性蛋白質測定用試薬（Ｂ）におけるカ
チオン性基を有する界面活性剤としては、ホスホリルコ
リン基を除くカチオン性基を有し、かつ界面活性を示す
物質であればどのような物質をも用いることができる
が、アンモニウム塩の界面活性剤が好ましく、一般式
（III）［式（III）中、Ｙ2は疎水性基を示し、Ｒ1、Ｒ
2、Ｒ3は同一又は異なってもよく、水素、置換もしくは
非置換アルキル、又は置換もしくは非置換アルケニルを
示し、Ｘ2 -は無機性陰イオン又は有機性陰イオンを示
す。］で表される界面活性剤がプロゾーン現象を充分に
回避しうる点からして特に好ましい。
（Ｂ）やＣ−反応性蛋白質測定用試薬（Ｂ）におけるカ
チオン性基を有する界面活性剤としては、ホスホリルコ
リン基を除くカチオン性基を有し、かつ界面活性を示す
物質であればどのような物質をも用いることができる
が、アンモニウム塩の界面活性剤が好ましく、一般式
（III）［式（III）中、Ｙ2は疎水性基を示し、Ｒ1、Ｒ
2、Ｒ3は同一又は異なってもよく、水素、置換もしくは
非置換アルキル、又は置換もしくは非置換アルケニルを
示し、Ｘ2 -は無機性陰イオン又は有機性陰イオンを示
す。］で表される界面活性剤がプロゾーン現象を充分に
回避しうる点からして特に好ましい。
【００３１】
【化１５】
【００３２】一般式（III）における疎水性基Ｙ2として
は、カチオン性基の親水性に対し、疎水性を示す基であ
れば特に制限されるものではないが、炭化水素を基本と
する基を挙げることができ、置換もしくは非置換のアル
キル、又は置換もしくは非置換のアルケニルを具体的に
例示することができ、上記アルキルとしては、直鎖又は
分岐状の、好ましくは炭素数１〜３０のアルキル、より
好ましくは炭素数２〜２４のアルキル、特に好ましくは
炭素数３〜２０のアルキルを挙げることができ、メチ
ル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブ
チル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、
ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニ
ル、デシル、ドデシル、ペンタデシル、エイコシル等を
具体的に例示することができ、また、アルケニルとして
は、直鎖又は分岐状の、好ましくは炭素数２〜２４のア
ルケニル、より好ましくは炭素数３〜１２のアルケニ
ル、特に好ましくは炭素数３〜６のアルケニルを挙げる
ことができ、ビニル、アリル、２−ブテニル、２−ペン
テニル、２−ヘキセニル等を具体的に例示することがで
きる。また、置換アルキル及び置換アルケニルの置換基
としては、アルコキシ、アルカノイル、アルカノイルオ
キシ、アルケニルオキシ、アルケノイル、アルケノイル
オキシ、アロイル、ヒドロキシ、置換もしくは非置換ア
ミノ、置換もしくは非置換フェニル、置換もしくは非置
換のナフチル等を例示することができ、アルコキシ、ア
ルカノイル及びアルカノイルオキシのアルキル部分はそ
れぞれ前記のアルキルと同意義であり、また、アルケニ
ルオキシ、アルケノイル及びアルケノイルオキシのアル
ケニル部分はそれぞれ前記のアルケニルと同異義であ
る。アロイルとしては、ベンゾイル、ナフトイル等を挙
げることができる。そして、置換アミノの置換基として
は、アルキル、アルケニル等があげられ、置換フェニル
および置換ナフチルの置換基としては、ヒドロキシ、ア
ルキル、アルケニル等を挙げることができ、ここで、ア
ルキル、アルケニルはそれぞれ前記アルキル、アルケニ
ルと同意義である。
は、カチオン性基の親水性に対し、疎水性を示す基であ
れば特に制限されるものではないが、炭化水素を基本と
する基を挙げることができ、置換もしくは非置換のアル
キル、又は置換もしくは非置換のアルケニルを具体的に
例示することができ、上記アルキルとしては、直鎖又は
分岐状の、好ましくは炭素数１〜３０のアルキル、より
好ましくは炭素数２〜２４のアルキル、特に好ましくは
炭素数３〜２０のアルキルを挙げることができ、メチ
ル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブ
チル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、
ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニ
ル、デシル、ドデシル、ペンタデシル、エイコシル等を
具体的に例示することができ、また、アルケニルとして
は、直鎖又は分岐状の、好ましくは炭素数２〜２４のア
ルケニル、より好ましくは炭素数３〜１２のアルケニ
ル、特に好ましくは炭素数３〜６のアルケニルを挙げる
ことができ、ビニル、アリル、２−ブテニル、２−ペン
テニル、２−ヘキセニル等を具体的に例示することがで
きる。また、置換アルキル及び置換アルケニルの置換基
としては、アルコキシ、アルカノイル、アルカノイルオ
キシ、アルケニルオキシ、アルケノイル、アルケノイル
オキシ、アロイル、ヒドロキシ、置換もしくは非置換ア
ミノ、置換もしくは非置換フェニル、置換もしくは非置
換のナフチル等を例示することができ、アルコキシ、ア
ルカノイル及びアルカノイルオキシのアルキル部分はそ
れぞれ前記のアルキルと同意義であり、また、アルケニ
ルオキシ、アルケノイル及びアルケノイルオキシのアル
ケニル部分はそれぞれ前記のアルケニルと同異義であ
る。アロイルとしては、ベンゾイル、ナフトイル等を挙
げることができる。そして、置換アミノの置換基として
は、アルキル、アルケニル等があげられ、置換フェニル
および置換ナフチルの置換基としては、ヒドロキシ、ア
ルキル、アルケニル等を挙げることができ、ここで、ア
ルキル、アルケニルはそれぞれ前記アルキル、アルケニ
ルと同意義である。
【００３３】Ｒ1、Ｒ2及びＲ3におけるアルキルとして
は、直鎖又は分岐状の、好ましくは炭素数１〜１２のア
ルキル、より好ましくは炭素数１〜６のアルキルを挙げ
ることができ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピ
ル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−
ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチ
ル、オクチル、ノニル、デシル等を具体的に例示するこ
とができ、また、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3におけるアルケニル
としては、直鎖または分岐状の、好ましくは炭素数２〜
１２のアルケニル、より好ましくは炭素数３〜６のアル
ケニルを挙げることができ、ビニル、アリル、２−ブテ
ニル、２−ペンテニル、２−ヘキセニル等を具体的に例
示することができる。また、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3における
置換アルキル及び置換アルケニルの置換基としては、ア
ルコキシ、アルカノイル、アルカノイルオキシ、アルケ
ニルオキシ、アルケノイル、アルケノイルオキシ、アロ
イル、ヒドロキシ、置換もしくは非置換のアミノ、置換
もしくは非置換フェニル、置換もしくは非置換のナフチ
ル等を例示することができ、アルコキシ、アルカノイル
及びアルカノイルオキシのアルキル部分はそれぞれ前記
のＲ1、Ｒ2及びＲ3のアルキルと同意義であり、また、
アルケニルオキシ、アルケノイル及びアルケノイルオキ
シのアルケニル部分はそれぞれ前記のＲ1、Ｒ2及びＲ3
のアルケニルと同意義である。アロイルとしては、ベン
ゾイル、ナフトイル等を挙げることができる。そして、
置換アミノの置換基としては、アルキル、アルケニル等
を挙げることができ、置換フェニルおよび置換ナフチル
の置換基としては、ヒドロキシ、アルキル、アルケニル
等を挙げることができる。ここで、アルキル、アルケニ
ルはそれぞれ前記アルキル、アルケニルと同意義であ
る。無機性陰イオンとしては、フッ素、塩素、臭素、ヨ
ウ素等のハロゲン、硝酸等無機酸の陰イオン等を挙げる
ことができる。有機性陰イオンとしては、ギ酸、酢酸等
の有機カルボン酸イオン等を挙げることができる。
は、直鎖又は分岐状の、好ましくは炭素数１〜１２のア
ルキル、より好ましくは炭素数１〜６のアルキルを挙げ
ることができ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピ
ル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−
ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチ
ル、オクチル、ノニル、デシル等を具体的に例示するこ
とができ、また、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3におけるアルケニル
としては、直鎖または分岐状の、好ましくは炭素数２〜
１２のアルケニル、より好ましくは炭素数３〜６のアル
ケニルを挙げることができ、ビニル、アリル、２−ブテ
ニル、２−ペンテニル、２−ヘキセニル等を具体的に例
示することができる。また、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3における
置換アルキル及び置換アルケニルの置換基としては、ア
ルコキシ、アルカノイル、アルカノイルオキシ、アルケ
ニルオキシ、アルケノイル、アルケノイルオキシ、アロ
イル、ヒドロキシ、置換もしくは非置換のアミノ、置換
もしくは非置換フェニル、置換もしくは非置換のナフチ
ル等を例示することができ、アルコキシ、アルカノイル
及びアルカノイルオキシのアルキル部分はそれぞれ前記
のＲ1、Ｒ2及びＲ3のアルキルと同意義であり、また、
アルケニルオキシ、アルケノイル及びアルケノイルオキ
シのアルケニル部分はそれぞれ前記のＲ1、Ｒ2及びＲ3
のアルケニルと同意義である。アロイルとしては、ベン
ゾイル、ナフトイル等を挙げることができる。そして、
置換アミノの置換基としては、アルキル、アルケニル等
を挙げることができ、置換フェニルおよび置換ナフチル
の置換基としては、ヒドロキシ、アルキル、アルケニル
等を挙げることができる。ここで、アルキル、アルケニ
ルはそれぞれ前記アルキル、アルケニルと同意義であ
る。無機性陰イオンとしては、フッ素、塩素、臭素、ヨ
ウ素等のハロゲン、硝酸等無機酸の陰イオン等を挙げる
ことができる。有機性陰イオンとしては、ギ酸、酢酸等
の有機カルボン酸イオン等を挙げることができる。
【００３４】また、上記カチオン性基を有する界面活性
剤としては、オクタデシルトリメチルアンモニウムクロ
ライド、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロライ
ド、テトラドデシルトリメチルアンモニウムクロライ
ド、ドデシルトリメチルアンモニウムクロライドなどの
長鎖アルキルアンモニウム塩や、ヘキサデシルアミン酢
酸塩、オクタデシルアミン塩酸塩などの長鎖アルキルア
ミン塩や、アルキルピリジニウム塩等を具体的に例示す
ることができる。
剤としては、オクタデシルトリメチルアンモニウムクロ
ライド、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロライ
ド、テトラドデシルトリメチルアンモニウムクロライ
ド、ドデシルトリメチルアンモニウムクロライドなどの
長鎖アルキルアンモニウム塩や、ヘキサデシルアミン酢
酸塩、オクタデシルアミン塩酸塩などの長鎖アルキルア
ミン塩や、アルキルピリジニウム塩等を具体的に例示す
ることができる。
【００３５】ホスホリルコリン基を有する界面活性剤と
カチオン性基を有する界面活性剤の組合せは任意である
が、ホスホリルコリン基を有する界面活性剤の疎水性基
とカチオン性基を有する界面活性剤の疎水性基の鎖長が
同程度のものを用いることがプロゾーン現象を充分に回
避しうる点からして好ましい。例えば、前者におけるア
シル鎖の炭素数が１６のリゾホスファチジルコリンパル
ミトイルと、後者におけるアルキル鎖の炭素数が１６の
ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロライド、ある
いは前者におけるアシル鎖の炭素数が１８のリゾホスフ
ァチジルコリンステアロイルと、後者におけるアルキル
鎖の炭素数が１８のオクタデシルトリメチルアンモニウ
ムクロライド等の組合せが好ましい。
カチオン性基を有する界面活性剤の組合せは任意である
が、ホスホリルコリン基を有する界面活性剤の疎水性基
とカチオン性基を有する界面活性剤の疎水性基の鎖長が
同程度のものを用いることがプロゾーン現象を充分に回
避しうる点からして好ましい。例えば、前者におけるア
シル鎖の炭素数が１６のリゾホスファチジルコリンパル
ミトイルと、後者におけるアルキル鎖の炭素数が１６の
ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロライド、ある
いは前者におけるアシル鎖の炭素数が１８のリゾホスフ
ァチジルコリンステアロイルと、後者におけるアルキル
鎖の炭素数が１８のオクタデシルトリメチルアンモニウ
ムクロライド等の組合せが好ましい。
【００３６】ホスホリルコリン基を有する界面活性剤及
びカチオン性基を有する界面活性剤は、Ｃ−反応性蛋白
質測定反応液中の濃度が、それぞれ０．０００１〜５重
量％、好ましくは０．００１〜１重量％、より好ましく
は０．０１〜０．５重量％になる量を用いることが望ま
しい。また、ホスホリルコリン基を有する界面活性剤と
カチオン性基を有する界面活性剤のモル比率は任意であ
るが、１：１０〜５：１０程度が好ましい。
びカチオン性基を有する界面活性剤は、Ｃ−反応性蛋白
質測定反応液中の濃度が、それぞれ０．０００１〜５重
量％、好ましくは０．００１〜１重量％、より好ましく
は０．０１〜０．５重量％になる量を用いることが望ま
しい。また、ホスホリルコリン基を有する界面活性剤と
カチオン性基を有する界面活性剤のモル比率は任意であ
るが、１：１０〜５：１０程度が好ましい。
【００３７】本発明におけるＣ−反応性蛋白質に対する
抗体としては、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗
体のいずれでもよく、これら抗体としては、市販品又は
公知の方法により調製した抗体を用いることができる。
また、Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体は水不溶性担体に
担持（感作）されているものを使用するのが好ましい。
水不溶性担体としてはラテックス特にポリスチレン系ラ
テックスが、抗体を担持させることが容易なことから好
ましい。かかる水不溶性担体の粒径としては、０．１〜
１μｍのものが好ましい。抗体の水不溶性担体への担持
は、公知の感作方法により行うことができる。使用する
抗体の濃度については特に制限がないが、単独でＣ−反
応性蛋白質を測定できる濃度が好ましい。
抗体としては、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗
体のいずれでもよく、これら抗体としては、市販品又は
公知の方法により調製した抗体を用いることができる。
また、Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体は水不溶性担体に
担持（感作）されているものを使用するのが好ましい。
水不溶性担体としてはラテックス特にポリスチレン系ラ
テックスが、抗体を担持させることが容易なことから好
ましい。かかる水不溶性担体の粒径としては、０．１〜
１μｍのものが好ましい。抗体の水不溶性担体への担持
は、公知の感作方法により行うことができる。使用する
抗体の濃度については特に制限がないが、単独でＣ−反
応性蛋白質を測定できる濃度が好ましい。
【００３８】本発明のＣ−反応性蛋白質の測定方法
（Ａ）は、ホスホリルコリン基とカチオン性基とを有す
る化合物及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を用いて、
Ｃ−反応性蛋白質を測定することを特徴とする抗原抗体
反応を利用する測定方法であり、また、本発明のＣ−反
応性蛋白質の測定方法（Ｂ）は、ホスホリルコリン基を
有する界面活性剤、カチオン性基を有する界面活性剤及
びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を用いて、Ｃ−反応性
蛋白質を測定することを特徴とする抗原抗体反応を利用
する測定方法である。これらの抗原抗体反応を利用する
測定方法としては、公知の免疫比濁法、ラテックス免疫
比濁法、ゼラチン凝集反応、リポソーム免疫測定法、蛍
光免疫測定法、酵素免疫測定法等いかなる測定方法も使
用できるが、プロゾーン現象を充分に回避しうる点から
してラテックス免疫比濁法が好ましい。ラテックスとし
ては、ポリスチレン系が好ましく、また該ラテックスの
粒径としては、０．１〜１μｍのものが好ましい。これ
らの方法は、所定量の抗体感作ラテックス懸濁液と所定
量の緩衝液及び濃度が既知である標準液又は被測定検体
の一定量を加えて充分に攪拌した後、積分球式濁度計を
用いて所定時間間隔における濁度変化による積分球式濁
度変化量（ΔＩＳＴ値）や、吸光度測定計を用いて所定
時間間隔における吸光度変化量（ΔｍＡｂｓ．値）を測
定することにより行うことができる。
（Ａ）は、ホスホリルコリン基とカチオン性基とを有す
る化合物及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を用いて、
Ｃ−反応性蛋白質を測定することを特徴とする抗原抗体
反応を利用する測定方法であり、また、本発明のＣ−反
応性蛋白質の測定方法（Ｂ）は、ホスホリルコリン基を
有する界面活性剤、カチオン性基を有する界面活性剤及
びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を用いて、Ｃ−反応性
蛋白質を測定することを特徴とする抗原抗体反応を利用
する測定方法である。これらの抗原抗体反応を利用する
測定方法としては、公知の免疫比濁法、ラテックス免疫
比濁法、ゼラチン凝集反応、リポソーム免疫測定法、蛍
光免疫測定法、酵素免疫測定法等いかなる測定方法も使
用できるが、プロゾーン現象を充分に回避しうる点から
してラテックス免疫比濁法が好ましい。ラテックスとし
ては、ポリスチレン系が好ましく、また該ラテックスの
粒径としては、０．１〜１μｍのものが好ましい。これ
らの方法は、所定量の抗体感作ラテックス懸濁液と所定
量の緩衝液及び濃度が既知である標準液又は被測定検体
の一定量を加えて充分に攪拌した後、積分球式濁度計を
用いて所定時間間隔における濁度変化による積分球式濁
度変化量（ΔＩＳＴ値）や、吸光度測定計を用いて所定
時間間隔における吸光度変化量（ΔｍＡｂｓ．値）を測
定することにより行うことができる。
【００３９】本発明のＣ−反応性蛋白質測定用試薬
（Ａ）は、ホスホリルコリン基とカチオン性基を有する
化合物及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を含有するこ
とを特徴とし、また、本発明のＣ−反応性蛋白質測定用
試薬（Ｂ）は、ホスホリルコリン基を有する界面活性
剤、カチオン性基を有する界面活性剤及びＣ−反応性蛋
白質に対する抗体を含有することを特徴とするが、これ
ら化合物及び抗体のほか、各種界面活性剤、無機塩類、
緩衝液等を含有していてもよい。界面活性剤としては、
例えばトリトンＸ−１００、ツイーン２０等を、無機塩
としては例えば塩化カルシウムなどのカルシウム塩等
を、緩衝液としてはグリシン緩衝液、トリス緩衝液、リ
ン酸緩衝液、ＨＥＰＥＳ緩衝液等を、それぞれ例示する
ことができる。Ｃ−反応性蛋白質測定用試薬中の界面活
性剤、無機塩類及び緩衝液の含量は、反応液中の濃度が
それぞれ０．００１〜０．１重量％、特に１〜７ｍｍｏ
ｌ／Ｌ、０．１〜１０ｍｍｏｌ／Ｌ及び１０〜２００ｍ
ｍｏｌ／Ｌになる量が好ましい。
（Ａ）は、ホスホリルコリン基とカチオン性基を有する
化合物及びＣ−反応性蛋白質に対する抗体を含有するこ
とを特徴とし、また、本発明のＣ−反応性蛋白質測定用
試薬（Ｂ）は、ホスホリルコリン基を有する界面活性
剤、カチオン性基を有する界面活性剤及びＣ−反応性蛋
白質に対する抗体を含有することを特徴とするが、これ
ら化合物及び抗体のほか、各種界面活性剤、無機塩類、
緩衝液等を含有していてもよい。界面活性剤としては、
例えばトリトンＸ−１００、ツイーン２０等を、無機塩
としては例えば塩化カルシウムなどのカルシウム塩等
を、緩衝液としてはグリシン緩衝液、トリス緩衝液、リ
ン酸緩衝液、ＨＥＰＥＳ緩衝液等を、それぞれ例示する
ことができる。Ｃ−反応性蛋白質測定用試薬中の界面活
性剤、無機塩類及び緩衝液の含量は、反応液中の濃度が
それぞれ０．００１〜０．１重量％、特に１〜７ｍｍｏ
ｌ／Ｌ、０．１〜１０ｍｍｏｌ／Ｌ及び１０〜２００ｍ
ｍｏｌ／Ｌになる量が好ましい。
【００４０】以上のように、本発明のＣ−反応性蛋白質
の測定方法やＣ−反応性蛋白質測定用試薬を用いるＣ−
反応性蛋白質の測定は、Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体
を用いて、Ｃ−反応性蛋白質を測定するものであるが、
これらＣ−反応性蛋白質の測定方法やＣ−反応性蛋白質
測定用試薬における抗体を抗原に置換、すなわちＣ−反
応性蛋白質に対する抗体を、Ｃ−反応性蛋白質抗原に置
換することにより、Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体の測
定方法やＣ−反応性蛋白質に対する抗体測定用試薬を提
供することができる。上記Ｃ−反応性蛋白質抗原として
は、Ｃ−反応性蛋白質自体又はＣ−反応性蛋白質のホス
ホリルコリン結合領域と抗Ｃ−反応性蛋白質のエピトー
プ部分とを含むペプチドを例示することができる。ま
た、かかるＣ−反応性蛋白質抗原は、Ｃ−反応性蛋白質
に対する抗体の場合と同様に、粒径０．１〜１μm程度
のポリスチレンラテックス等の担体に担持させて用いる
ことが好ましい。
の測定方法やＣ−反応性蛋白質測定用試薬を用いるＣ−
反応性蛋白質の測定は、Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体
を用いて、Ｃ−反応性蛋白質を測定するものであるが、
これらＣ−反応性蛋白質の測定方法やＣ−反応性蛋白質
測定用試薬における抗体を抗原に置換、すなわちＣ−反
応性蛋白質に対する抗体を、Ｃ−反応性蛋白質抗原に置
換することにより、Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体の測
定方法やＣ−反応性蛋白質に対する抗体測定用試薬を提
供することができる。上記Ｃ−反応性蛋白質抗原として
は、Ｃ−反応性蛋白質自体又はＣ−反応性蛋白質のホス
ホリルコリン結合領域と抗Ｃ−反応性蛋白質のエピトー
プ部分とを含むペプチドを例示することができる。ま
た、かかるＣ−反応性蛋白質抗原は、Ｃ−反応性蛋白質
に対する抗体の場合と同様に、粒径０．１〜１μm程度
のポリスチレンラテックス等の担体に担持させて用いる
ことが好ましい。
【００４１】そして、（ａ）ホスホリルコリン基とカチ
オン性基とを有する化合物及びＣ−反応性蛋白質抗原を
用いるＣ−反応性蛋白質に対する抗体の測定方法や、ホ
スホリルコリン基とカチオン性基とを有する化合物及び
Ｃ−反応性蛋白質抗原を含有するＣ−反応性蛋白質に対
する抗体測定用試薬、あるいは、（ｂ）ホスホリルコリ
ン基を有する界面活性剤、カチオン性基を有する界面活
性剤及びＣ−反応性蛋白質抗原を用いるＣ−反応性蛋白
質に対する抗体の測定方法や、ホスホリルコリン基を有
する界面活性剤、カチオン性基を有する界面活性剤及び
Ｃ−反応性蛋白質抗原を含有するＣ−反応性蛋白質に対
する抗体測定用試薬においても、本発明のＣ−反応性蛋
白質の測定方法やＣ−反応性蛋白質測定用試薬における
場合と同様に、Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体測定にお
けるプロゾーン現象の回避と、測定レンジの拡大がで
き、検体中に高濃度のＣ−反応性蛋白質に対する抗体が
含まれる場合であっても、検体を希釈することなく原液
のまま定量することが可能となる。
オン性基とを有する化合物及びＣ−反応性蛋白質抗原を
用いるＣ−反応性蛋白質に対する抗体の測定方法や、ホ
スホリルコリン基とカチオン性基とを有する化合物及び
Ｃ−反応性蛋白質抗原を含有するＣ−反応性蛋白質に対
する抗体測定用試薬、あるいは、（ｂ）ホスホリルコリ
ン基を有する界面活性剤、カチオン性基を有する界面活
性剤及びＣ−反応性蛋白質抗原を用いるＣ−反応性蛋白
質に対する抗体の測定方法や、ホスホリルコリン基を有
する界面活性剤、カチオン性基を有する界面活性剤及び
Ｃ−反応性蛋白質抗原を含有するＣ−反応性蛋白質に対
する抗体測定用試薬においても、本発明のＣ−反応性蛋
白質の測定方法やＣ−反応性蛋白質測定用試薬における
場合と同様に、Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体測定にお
けるプロゾーン現象の回避と、測定レンジの拡大がで
き、検体中に高濃度のＣ−反応性蛋白質に対する抗体が
含まれる場合であっても、検体を希釈することなく原液
のまま定量することが可能となる。
【００４２】
【実施例】以下、本発明を実施例、比較例及び参考例に
より、更に詳細に説明するが、本発明の技術的範囲は、
かかる実施例等により何ら制限を受けるものではない。 実施例Ａ−１ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液、ｐＨ８．６（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ 参考例４（後記）で製造したポリマー ２０ｍｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１（後記）で調製） １ｇ／Ｌ
より、更に詳細に説明するが、本発明の技術的範囲は、
かかる実施例等により何ら制限を受けるものではない。 実施例Ａ−１ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液、ｐＨ８．６（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ 参考例４（後記）で製造したポリマー ２０ｍｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１（後記）で調製） １ｇ／Ｌ
【００４３】比較例Ａ−１ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液ｐＨ８．６（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１で調製） １ｇ／Ｌ
【００４４】比較例Ａ−２ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液、ｐＨ８．６（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ 参考例６（後記）で製造したポリマー ２０ｍｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１で調製） １ｇ／Ｌ
【００４５】 比較例Ａ−３ 第１試薬 グリシン緩衝液、ｐＨ８．６（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ 参考例７（後記）で製造したポリマー ２０ｍｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１で調製） １ｇ／Ｌ
【００４６】比較例Ａ−４ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液、ｐＨ８．６（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ 参考例４で製造したポリマー ２０ｍｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体未感作ラテックス（参考例２（後記）で調製） １ｇ／Ｌ
【００４７】実施例Ａ−２ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液、ｐＨ８．６（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ 参考例５（後記）で製造したポリマー ３０ｍｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例３（後記）で調製） １ｇ／Ｌ
【００４８】比較例Ａ−５ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液ｐＨ８．６（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例３で調製） １ｇ／Ｌ
【００４９】実施例Ａ−３ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液、ｐＨ８．６（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ 参考例４で製造したポリマー １５ｍｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例３で調製） １ｇ／Ｌ
【００５０】実施例Ａ−４ 実施例Ａ−１と比較例Ａ−１〜Ａ−３で調製したＣ−反
応性蛋白質測定用ラテックス試薬を用いて各濃度のＣ−
反応性蛋白質を含む標準血清（０〜１００ｍｇ／ｄＬ）
を、積分球濁度方式の専用機ＥＬ−１０６０（協和メデ
ックス社製）で測定を行った。３７℃にて、それぞれ実
施例Ａ−１と比較例Ａ−１〜Ａ−３の第１試薬１４８μ
Ｌ、第２試薬１５０μＬ、及びＣ−反応性蛋白質標準血
清２μＬを混合後、７２秒と６１２秒の間（２３〜５３
ポイント）の積分球濁度変化量を測定した。結果を図１
に示す。なお図１中、横軸のＣＲＰはＣ−反応性蛋白質
の濃度を示し、縦軸のΔＩＳＴは積分球式濁度の変化量
を示す。
応性蛋白質測定用ラテックス試薬を用いて各濃度のＣ−
反応性蛋白質を含む標準血清（０〜１００ｍｇ／ｄＬ）
を、積分球濁度方式の専用機ＥＬ−１０６０（協和メデ
ックス社製）で測定を行った。３７℃にて、それぞれ実
施例Ａ−１と比較例Ａ−１〜Ａ−３の第１試薬１４８μ
Ｌ、第２試薬１５０μＬ、及びＣ−反応性蛋白質標準血
清２μＬを混合後、７２秒と６１２秒の間（２３〜５３
ポイント）の積分球濁度変化量を測定した。結果を図１
に示す。なお図１中、横軸のＣＲＰはＣ−反応性蛋白質
の濃度を示し、縦軸のΔＩＳＴは積分球式濁度の変化量
を示す。
【００５１】図１からもわかるように、比較例Ａ−１の
試薬を用いて測定した場合（−◆−プロット）、比較例
Ａ−２の試薬を用いて測定した場合（−■−プロッ
ト）、及び比較例Ａ−３の試薬を用いて測定した場合
（−▲−）は、Ｃ−反応性蛋白質が１０ｍｇ／ｄＬ以上
の濃度ではプロゾーンとなり、プロゾーン回避の効果は
得られなかった。これに対して、実施例Ａ−１の試薬を
用いて測定した場合(−●−)、少なくとも１００ｍｇ／
ｄＬまでプロゾーンを回避することができた。なお、比
較例Ａ−２の第１試薬中のポリマーを１０ｍｇ／Ｌ〜１
ｇ／Ｌの特定の濃度にした試薬、及び比較例Ａ−３の第
１試薬中のポリマーを１０ｍｇ／Ｌ〜１ｇ／Ｌの特定の
濃度にした試薬を使用した場合でも、プロゾーンを回避
することはできなかった。また、実施例Ａ−１の第１試
薬中のポリマーを５ｍｇ／Ｌの濃度にした試薬も、プロ
ゾーンが回避できることを確認した。
試薬を用いて測定した場合（−◆−プロット）、比較例
Ａ−２の試薬を用いて測定した場合（−■−プロッ
ト）、及び比較例Ａ−３の試薬を用いて測定した場合
（−▲−）は、Ｃ−反応性蛋白質が１０ｍｇ／ｄＬ以上
の濃度ではプロゾーンとなり、プロゾーン回避の効果は
得られなかった。これに対して、実施例Ａ−１の試薬を
用いて測定した場合(−●−)、少なくとも１００ｍｇ／
ｄＬまでプロゾーンを回避することができた。なお、比
較例Ａ−２の第１試薬中のポリマーを１０ｍｇ／Ｌ〜１
ｇ／Ｌの特定の濃度にした試薬、及び比較例Ａ−３の第
１試薬中のポリマーを１０ｍｇ／Ｌ〜１ｇ／Ｌの特定の
濃度にした試薬を使用した場合でも、プロゾーンを回避
することはできなかった。また、実施例Ａ−１の第１試
薬中のポリマーを５ｍｇ／Ｌの濃度にした試薬も、プロ
ゾーンが回避できることを確認した。
【００５２】実施例Ａ−５ 実施例Ａ−１、比較例Ａ−１及び比較例Ａ−４で調製し
たＣ−反応性蛋白質測定用ラテックス試薬を用い各濃度
のＣ−反応性蛋白質を含む標準血清（０〜１００ｍｇ／
ｄＬ）を、積分球濁度方式の専用機ＥＬ−１０６０で測
定を行った。３７℃にて、それぞれ実施例Ａ−１、比較
例Ａ−１及び比較例Ａ−４の第１試薬１４８μＬ、第２
試薬１５０μＬ、及びＣ−反応性蛋白質標準血清２μＬ
を混合後、７２秒と２１６秒の間（２３〜３１ポイン
ト）の積分球濁度変化量を測定した。結果を図２に示
す。なお図２中、横軸のＣＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃
度を示し、縦軸のΔＩＳＴは積分球式濁度の変化量を示
す。
たＣ−反応性蛋白質測定用ラテックス試薬を用い各濃度
のＣ−反応性蛋白質を含む標準血清（０〜１００ｍｇ／
ｄＬ）を、積分球濁度方式の専用機ＥＬ−１０６０で測
定を行った。３７℃にて、それぞれ実施例Ａ−１、比較
例Ａ−１及び比較例Ａ−４の第１試薬１４８μＬ、第２
試薬１５０μＬ、及びＣ−反応性蛋白質標準血清２μＬ
を混合後、７２秒と２１６秒の間（２３〜３１ポイン
ト）の積分球濁度変化量を測定した。結果を図２に示
す。なお図２中、横軸のＣＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃
度を示し、縦軸のΔＩＳＴは積分球式濁度の変化量を示
す。
【００５３】図２からもわかるように、比較例Ａ−１の
試薬で測定した場合（−●−プロット）、Ｃ−反応性蛋
白質濃度１０ｍｇ／ｄＬ以上ではプロゾーンとなりΔＩ
ＳＴ値は減少した。また、抗体を感作させていないラテ
ックスのみを使用する比較例Ａ−４の試薬で測定した場
合（−■−プロット）、ΔＩＳＴ値の増加は認められな
かった。一方、実施例Ａ−１の試薬で測定した場合（−
▲−プロット）、少なくともＣ−反応性蛋白質濃度１０
０ｍｇ／ｄＬまでプロゾーン現象が見られずにΔＩＳＴ
値は濃度依存的に増加し、測定レンジが拡大した。これ
らの結果から、本発明の測定方法においては、ホスホリ
ルコリン基とカチオン性基とを有する化合物とＣ−反応
性蛋白質との反応による濁度上昇及びＣ−反応性蛋白質
抗体とＣ−反応性蛋白質との反応による濁度上昇の相加
効果によりプロゾーン現象が回避されたものではなく、
Ｃ−反応性蛋白質との反応における、ホスホリルコリン
基とカチオン性基とを有する化合物及びＣ−反応性蛋白
質抗体の相乗効果によりプロゾーン現象が回避されるも
のと考えられる。
試薬で測定した場合（−●−プロット）、Ｃ−反応性蛋
白質濃度１０ｍｇ／ｄＬ以上ではプロゾーンとなりΔＩ
ＳＴ値は減少した。また、抗体を感作させていないラテ
ックスのみを使用する比較例Ａ−４の試薬で測定した場
合（−■−プロット）、ΔＩＳＴ値の増加は認められな
かった。一方、実施例Ａ−１の試薬で測定した場合（−
▲−プロット）、少なくともＣ−反応性蛋白質濃度１０
０ｍｇ／ｄＬまでプロゾーン現象が見られずにΔＩＳＴ
値は濃度依存的に増加し、測定レンジが拡大した。これ
らの結果から、本発明の測定方法においては、ホスホリ
ルコリン基とカチオン性基とを有する化合物とＣ−反応
性蛋白質との反応による濁度上昇及びＣ−反応性蛋白質
抗体とＣ−反応性蛋白質との反応による濁度上昇の相加
効果によりプロゾーン現象が回避されたものではなく、
Ｃ−反応性蛋白質との反応における、ホスホリルコリン
基とカチオン性基とを有する化合物及びＣ−反応性蛋白
質抗体の相乗効果によりプロゾーン現象が回避されるも
のと考えられる。
【００５４】実施例Ａ−６ 実施例Ａ−２及び比較例Ａ−５で調製したＣ−反応性蛋
白質測定用ラテックス試薬を用い各濃度のＣ−反応性蛋
白質を含む標準血清（０〜１００ｍｇ／ｄＬ）を、積分
球濁度方式の専用機ＥＬ−１２００（協和メデックス社
製）で測定を行った。３７℃にて、それぞれ実施例２及
び比較例５の第１試薬２４８μＬ、第２試薬２５０μ
Ｌ、及びＣ−反応性蛋白質標準血清２μＬを混合後、１
０８秒と２７０秒の間（６〜１５ポイント）の積分球濁
度変化量を測定した。結果を図３に示す。なお図３中、
横軸のＣＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃度を示し、縦軸の
ΔＩＳＴは積分球式濁度の変化量を示す。
白質測定用ラテックス試薬を用い各濃度のＣ−反応性蛋
白質を含む標準血清（０〜１００ｍｇ／ｄＬ）を、積分
球濁度方式の専用機ＥＬ−１２００（協和メデックス社
製）で測定を行った。３７℃にて、それぞれ実施例２及
び比較例５の第１試薬２４８μＬ、第２試薬２５０μ
Ｌ、及びＣ−反応性蛋白質標準血清２μＬを混合後、１
０８秒と２７０秒の間（６〜１５ポイント）の積分球濁
度変化量を測定した。結果を図３に示す。なお図３中、
横軸のＣＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃度を示し、縦軸の
ΔＩＳＴは積分球式濁度の変化量を示す。
【００５５】図３からもわかるように、比較例Ａ−５の
試薬で測定した場合（−▲−）、Ｃ−反応性蛋白質が２
０ｍｇ／ｄＬ以上の濃度ではプロゾーン現象によりΔＩ
ＳＴ値は減少した。これに対して、実施例Ａ−２の試薬
で測定した場合（−●−）、プロゾーンが１００ｍｇ／
ｄＬまで回避され、定量性も大幅に向上した。なお、実
施例Ａ−２の第１試薬のポリマー濃度を１０ｍｇ／Ｌの
濃度とした試薬を用いて同様な効果が認められた。
試薬で測定した場合（−▲−）、Ｃ−反応性蛋白質が２
０ｍｇ／ｄＬ以上の濃度ではプロゾーン現象によりΔＩ
ＳＴ値は減少した。これに対して、実施例Ａ−２の試薬
で測定した場合（−●−）、プロゾーンが１００ｍｇ／
ｄＬまで回避され、定量性も大幅に向上した。なお、実
施例Ａ−２の第１試薬のポリマー濃度を１０ｍｇ／Ｌの
濃度とした試薬を用いて同様な効果が認められた。
【００５６】実施例Ａ−７ 実施例Ａ−３及び比較例５で調製したＣ−反応性蛋白質
測定用ラテックス試薬を用い各濃度のＣ−反応性蛋白質
を含む標準血清（０〜１００ｍｇ／ｄＬ）を、吸光度測
定方式の自動分析装置７０７０（日立製作所製）で測定
を行った。３７℃にて、それぞれ実施例Ａ−３及び比較
例Ａ−５の第１試薬２２５μＬ、第２試薬７５μＬ、及
びＣ−反応性蛋白質標準血清３μＬを混合後１９ポイン
トと２７ポイントの間の吸光度変化量（波長５７０ｎ
ｍ）を測定した。結果を図４に示す。なお図４中、横軸
のＣＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃度を示し、縦軸のΔｍ
Ａｂｓ．は吸光度の変化量を示す。図４からもわかるよ
うに、比較例Ａ−５の試薬で測定した場合（−▲−）、
Ｃ−反応性蛋白質が１０ｍｇ／ｄＬ以上の濃度ではプロ
ゾーンとなり測定値は減少した。これに対して、実施例
Ａ−３の試薬で測定した場合（−●−）、プロゾーンが
少なくとも１００ｍｇ／ｄＬまで回避され、定量性も大
幅に向上した。
測定用ラテックス試薬を用い各濃度のＣ−反応性蛋白質
を含む標準血清（０〜１００ｍｇ／ｄＬ）を、吸光度測
定方式の自動分析装置７０７０（日立製作所製）で測定
を行った。３７℃にて、それぞれ実施例Ａ−３及び比較
例Ａ−５の第１試薬２２５μＬ、第２試薬７５μＬ、及
びＣ−反応性蛋白質標準血清３μＬを混合後１９ポイン
トと２７ポイントの間の吸光度変化量（波長５７０ｎ
ｍ）を測定した。結果を図４に示す。なお図４中、横軸
のＣＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃度を示し、縦軸のΔｍ
Ａｂｓ．は吸光度の変化量を示す。図４からもわかるよ
うに、比較例Ａ−５の試薬で測定した場合（−▲−）、
Ｃ−反応性蛋白質が１０ｍｇ／ｄＬ以上の濃度ではプロ
ゾーンとなり測定値は減少した。これに対して、実施例
Ａ−３の試薬で測定した場合（−●−）、プロゾーンが
少なくとも１００ｍｇ／ｄＬまで回避され、定量性も大
幅に向上した。
【００５７】実施例Ａ−８ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液、ｐＨ８．６（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ 参考例５で製造したポリマー ２０ｍｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１で調製） １ｇ／Ｌ
【００５８】実施例Ａ−９ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液ｐＨ８．６（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ 参考例８（後記）で製造した分子量１０，０００以下の成分 ２０ｍｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１で調製） １ｇ／Ｌ
【００５９】実施例Ａ−１０ 実施例Ａ−９及び比較例Ａ−１で調製したＣ−反応性蛋
白質測定用ラテックス試薬を用い各濃度のＣ−反応性蛋
白質を含む標準血清（０〜１００ｍｇ／ｄＬ）を吸光度
測定方式の自動分析装置７０７０（日立製作所製）で測
定を行った。３７℃にて、それぞれ実施例Ａ−９及び比
較例Ａ−１の第１試薬２２５μＬ、第２試薬７５μＬ、
及びＣ−反応性蛋白質標準血清３μＬを混合後１９ポイ
ントと２７ポイントの間の吸光度変化量（波長５７０ｎ
ｍ）を測定した。結果を図５に示す。なお図５中、横軸
のＣＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃度を示し、縦軸のΔｍ
Ａｂｓ．は吸光度変化量を示す。図５からもわかるよう
に、比較例Ａ−１の試薬で測定した場合（−▲−）、Ｃ
−反応性蛋白質が１０ｍｇ／ｄＬ以上の濃度ではプロゾ
ーンとなり測定値は減少した。これに対して、実施例Ａ
−９の試薬で測定した場合（−●−）、プロゾーンは少
なくとも１００ｍｇ／ｄＬまで回避され、定量性も大幅
に向上した。
白質測定用ラテックス試薬を用い各濃度のＣ−反応性蛋
白質を含む標準血清（０〜１００ｍｇ／ｄＬ）を吸光度
測定方式の自動分析装置７０７０（日立製作所製）で測
定を行った。３７℃にて、それぞれ実施例Ａ−９及び比
較例Ａ−１の第１試薬２２５μＬ、第２試薬７５μＬ、
及びＣ−反応性蛋白質標準血清３μＬを混合後１９ポイ
ントと２７ポイントの間の吸光度変化量（波長５７０ｎ
ｍ）を測定した。結果を図５に示す。なお図５中、横軸
のＣＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃度を示し、縦軸のΔｍ
Ａｂｓ．は吸光度変化量を示す。図５からもわかるよう
に、比較例Ａ−１の試薬で測定した場合（−▲−）、Ｃ
−反応性蛋白質が１０ｍｇ／ｄＬ以上の濃度ではプロゾ
ーンとなり測定値は減少した。これに対して、実施例Ａ
−９の試薬で測定した場合（−●−）、プロゾーンは少
なくとも１００ｍｇ／ｄＬまで回避され、定量性も大幅
に向上した。
【００６０】実施例Ｂ−１ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロライド （カチオンＰＢ−４０、日本油脂社製） ０．５ｇ／Ｌ リゾレシチン（シグマ社製） ０．１ｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１で調製） １ｇ／Ｌ
【００６１】実施例Ｂ−２ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロライド （カチオンＰＢ−４０、日本油脂社製） ０．５ｇ／Ｌ リゾレシチン（シグマ社製） ０．２ｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１で調製） １ｇ／Ｌ
【００６２】比較例Ｂ−１ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１で調製） １ｇ／Ｌ
【００６３】比較例Ｂ−２ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロライド （カチオンＰＢ−４０、日本油脂社製） ０．５ｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１で調製） １ｇ／Ｌ
【００６４】 比較例Ｂ−３ 第１試薬 グリシン緩衝液（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ リゾレシチン（シグマ社製） ０．２ｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１で調製） １ｇ／Ｌ
【００６５】比較例Ｂ−４ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロライド （カチオンＰＢ−４０、日本油脂社製） ０．５ｇ／Ｌ リゾレシチン（シグマ社製） ０．１ｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体未感作ラテックス（参考例２で調製） １ｇ／Ｌ
【００６６】実施例Ｂ−３ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ ヘキサデシルトリメチルアンモニウムクロライド （カチオンＰＢ−４０、日本油脂社製） ０．５ｇ／Ｌ リゾレシチン（シグマ社製） ０．２ｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例３で調製） １ｇ／Ｌ
【００６７】比較例Ｂ−５ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例３で調製） １ｇ／Ｌ
【００６８】実施例Ｂ−４ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ オクタデシルトリメチルアンモニウムクロライド （カチオンＡＢ、日本油脂社製） ０．５ｇ／Ｌ ホスホリルコリンオレイルオキシエチルエステル （シグマ社製） ０．３ｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１で調製） １ｇ／Ｌ
【００６９】実施例Ｂ−５ 下記のＣ−反応性蛋白質測定試薬を調製した。 第１試薬 グリシン緩衝液（関東化学社製） １００ｍｍｏｌ／Ｌ 塩化カルシウム（関東化学社製） ５ｍｍｏｌ／Ｌ オクタデシルトリメチルアンモニウムクロライド （カチオンＰＢ、日本油脂社製） ０．５ｇ／Ｌ スフィンゴシルホスホリルコリン（シグマ社製） ０．３ｇ／Ｌ 第２試薬 抗Ｃ−反応性蛋白質抗体感作ラテックス（参考例１で調製） １ｇ／Ｌ
【００７０】実施例Ｂ−６ 実施例Ｂ−１〜Ｂ−２及び比較例Ｂ−１〜Ｂ−４で調製
したＣ−反応性蛋白質測定用試薬を使用して各濃度のＣ
−反応性蛋白質を含む血清溶液（Ｃ−反応性蛋白質濃
度：０〜１００ｍｇ／ｄＬ）中のＣ−反応性蛋白質濃度
を測定した。３７℃にて、第１試薬１４７μＬ、第２試
薬１５０μＬ、及びＣ−反応性蛋白質標準血清３μＬを
混合後、積分球濁度測定器ＥＬ−１０６０（協和メデッ
クス社製）にて７２秒と２１６秒の間（２３〜３１ポイ
ント）の積分球濁度変化量を測定した。
したＣ−反応性蛋白質測定用試薬を使用して各濃度のＣ
−反応性蛋白質を含む血清溶液（Ｃ−反応性蛋白質濃
度：０〜１００ｍｇ／ｄＬ）中のＣ−反応性蛋白質濃度
を測定した。３７℃にて、第１試薬１４７μＬ、第２試
薬１５０μＬ、及びＣ−反応性蛋白質標準血清３μＬを
混合後、積分球濁度測定器ＥＬ−１０６０（協和メデッ
クス社製）にて７２秒と２１６秒の間（２３〜３１ポイ
ント）の積分球濁度変化量を測定した。
【００７１】結果を図６に示す。なお、図６中、横軸の
ＣＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃度を示し、縦軸のΔＩＳ
Ｔは積分球式濁度の変化量を示す。比較例Ｂ−１の試薬
を用いて測定した場合（−×−）、Ｃ−反応性蛋白質が
１０ｍｇ／ｄＬ以上の濃度ではプロゾーンとなった。ま
た、比較例Ｂ−２の試薬を用いて測定した場合（−■
−）、プロゾーンが回避される傾向が見られたが測定レ
ンジの改善は認められなかった。比較例Ｂ−３の試薬を
用いて測定した場合（−▲−）、プロゾーン回避の効果
は得られなかった。比較例Ｂ−４の試薬を用いて測定し
た場合（−○−）、全く検出がでなかった。これに対し
て、実施例Ｂ−１の試薬を用いた場合（−◆−）、測定
レンジが大幅に改善された。実施例Ｂ−２の試薬を用い
て測定した場合（−●−）、少なくともプロゾーンが１
００ｍｇ／ｄＬまで回避されかつ、定量性が大幅に向上
した。
ＣＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃度を示し、縦軸のΔＩＳ
Ｔは積分球式濁度の変化量を示す。比較例Ｂ−１の試薬
を用いて測定した場合（−×−）、Ｃ−反応性蛋白質が
１０ｍｇ／ｄＬ以上の濃度ではプロゾーンとなった。ま
た、比較例Ｂ−２の試薬を用いて測定した場合（−■
−）、プロゾーンが回避される傾向が見られたが測定レ
ンジの改善は認められなかった。比較例Ｂ−３の試薬を
用いて測定した場合（−▲−）、プロゾーン回避の効果
は得られなかった。比較例Ｂ−４の試薬を用いて測定し
た場合（−○−）、全く検出がでなかった。これに対し
て、実施例Ｂ−１の試薬を用いた場合（−◆−）、測定
レンジが大幅に改善された。実施例Ｂ−２の試薬を用い
て測定した場合（−●−）、少なくともプロゾーンが１
００ｍｇ／ｄＬまで回避されかつ、定量性が大幅に向上
した。
【００７２】実施例Ｂ−７ 実施例Ｂ−３及び比較例Ｂ−５で作製したＣ−反応性蛋
白質測定用試薬を使用して各濃度のＣ−反応性蛋白質を
含む血清溶液（Ｃ−反応性蛋白質濃度：０〜１００ｍｇ
／ｄＬ）中のＣ−反応性蛋白質濃度を測定した。３７℃
にて、第１試薬２２５μＬ、第２試薬７５μＬ、及びＣ
−反応性蛋白質標準血清３μＬを混合後、吸光度測定方
式の自動分析装置７０７０（日立社製）にて１９ポイン
トと２７ポイントの間の吸光度変化量（波長５７０ｎ
ｍ）を測定した。
白質測定用試薬を使用して各濃度のＣ−反応性蛋白質を
含む血清溶液（Ｃ−反応性蛋白質濃度：０〜１００ｍｇ
／ｄＬ）中のＣ−反応性蛋白質濃度を測定した。３７℃
にて、第１試薬２２５μＬ、第２試薬７５μＬ、及びＣ
−反応性蛋白質標準血清３μＬを混合後、吸光度測定方
式の自動分析装置７０７０（日立社製）にて１９ポイン
トと２７ポイントの間の吸光度変化量（波長５７０ｎ
ｍ）を測定した。
【００７３】結果を図７に示す。なお図７中、横軸のＣ
ＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃度を示し、縦軸のΔｍＡｂ
ｓ．（５７０ｎｍ）は５７０ｎｍの吸光度の変化量を示
す。比較例Ｂ−５の試薬を用いて測定した場合（−▲
−）、Ｃ−反応性蛋白質が５ｍｇ／ｄＬ以上の濃度では
プロゾーンとなり吸光度変化量は低下した。これに対し
て、実施例Ｂ−３の試薬を用いて測定した場合（−●
−）、少なくとも１００ｍｇ／ｄＬまで吸光度変化量が
低下せず、プロゾーンが回避され、定量性も大幅に向上
した。
ＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃度を示し、縦軸のΔｍＡｂ
ｓ．（５７０ｎｍ）は５７０ｎｍの吸光度の変化量を示
す。比較例Ｂ−５の試薬を用いて測定した場合（−▲
−）、Ｃ−反応性蛋白質が５ｍｇ／ｄＬ以上の濃度では
プロゾーンとなり吸光度変化量は低下した。これに対し
て、実施例Ｂ−３の試薬を用いて測定した場合（−●
−）、少なくとも１００ｍｇ／ｄＬまで吸光度変化量が
低下せず、プロゾーンが回避され、定量性も大幅に向上
した。
【００７４】実施例Ｂ−８ 実施例Ｂ−２、実施例Ｂ−４、実施例Ｂ−５及び比較例
Ｂ−１で調製したＣ−反応性蛋白質測定用試薬を使用し
て各濃度のＣ−反応性蛋白質を含む血清溶液（Ｃ−反応
性蛋白質濃度：０〜１００ｍｇ／ｄＬ）中のＣ−反応性
蛋白質濃度を測定した。３７℃にて、第１試薬２２５μ
Ｌ、第２試薬７５μＬ、及びＣ−反応性蛋白質標準血清
３μＬを混合後、吸光度測定方式の自動分析装置７０７
０（日立社製）にて１９ポイントと２７ポイントの間の
吸光度変化量（波長５７０ｎｍ）を測定した。
Ｂ−１で調製したＣ−反応性蛋白質測定用試薬を使用し
て各濃度のＣ−反応性蛋白質を含む血清溶液（Ｃ−反応
性蛋白質濃度：０〜１００ｍｇ／ｄＬ）中のＣ−反応性
蛋白質濃度を測定した。３７℃にて、第１試薬２２５μ
Ｌ、第２試薬７５μＬ、及びＣ−反応性蛋白質標準血清
３μＬを混合後、吸光度測定方式の自動分析装置７０７
０（日立社製）にて１９ポイントと２７ポイントの間の
吸光度変化量（波長５７０ｎｍ）を測定した。
【００７５】結果を図８に示す。なお図８中、横軸のＣ
ＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃度を示し、縦軸のΔｍＡｂ
ｓ．は吸光度変化量を示す。比較例Ｂ−１の試薬を用い
て測定した場合（−◆−）、Ｃ−反応性蛋白質が１０ｍ
ｇ／ｄＬ以上の濃度ではプロゾーンとなり吸光度変化量
は低下した。これに対して、実施例Ｂ−２の試薬を用い
て測定した場合（−■−）、実施例Ｂ−４の試薬を用い
て測定した場合（−▲−）、及び実施例Ｂ−５の試薬を
用いて測定した場合（−×−）では、少なくとも１００
ｍｇ／ｄＬまで吸光度変化量が低下せず、プロゾーンが
回避され、定量性も大幅に向上した。
ＲＰはＣ−反応性蛋白質の濃度を示し、縦軸のΔｍＡｂ
ｓ．は吸光度変化量を示す。比較例Ｂ−１の試薬を用い
て測定した場合（−◆−）、Ｃ−反応性蛋白質が１０ｍ
ｇ／ｄＬ以上の濃度ではプロゾーンとなり吸光度変化量
は低下した。これに対して、実施例Ｂ−２の試薬を用い
て測定した場合（−■−）、実施例Ｂ−４の試薬を用い
て測定した場合（−▲−）、及び実施例Ｂ−５の試薬を
用いて測定した場合（−×−）では、少なくとも１００
ｍｇ／ｄＬまで吸光度変化量が低下せず、プロゾーンが
回避され、定量性も大幅に向上した。
【００７６】参考例１ （ＣＲＰ測定用ラテックス試薬
の調製） 平均粒径１３０ｎｍのポリスチレンラテックス溶液（協
和メデックス社製、１００ｍｇ／ｍＬ）０．８ｍＬとヤ
ギ抗Ｃ−反応性蛋白質ポリクローナル抗体溶液（オリエ
ンタル酵母社製、１０ｍｇ／ｍＬ、５０ｍＭリン酸−Ｎ
ａＣｌ １５０ｍＭ ｐＨ７．２）１ｍＬとを混合し、
３７℃にて３０分間攪拌した。次に、牛血清アルブミン
（ＢＳＡ、シグマ社製）溶液１ｍＬ（２０ｍｇ／ｍＬ、
５０ｍＭリン酸−ＮａＣｌ １５０ｍＭ ｐＨ７．２）
を添加して３７℃にて２時間攪拌を行いブロッキング処
理を実施した。その後、遠心分離（５０，０００回転、
３０分間）によりラテックスをペレット状に沈降させて
上清を廃棄した後、３ｍｇ／ｍＬのＢＳＡを含む５０ｍ
Ｍイミダゾール−塩酸溶液（ｐＨ７．８）１０ｍＬを添
加し、よく攪拌した後、超音波破砕機により分散処理を
行った。上記の操作を３回繰り返して行うことにより過
剰に存在する抗体溶液の除去を行った。最終的にはラテ
ックス濃度を１ｍｇ／ｍＬに調整し、Ｃ−反応性蛋白質
測定用ラテックス試薬とした。この試薬は４℃で保存し
た。
の調製） 平均粒径１３０ｎｍのポリスチレンラテックス溶液（協
和メデックス社製、１００ｍｇ／ｍＬ）０．８ｍＬとヤ
ギ抗Ｃ−反応性蛋白質ポリクローナル抗体溶液（オリエ
ンタル酵母社製、１０ｍｇ／ｍＬ、５０ｍＭリン酸−Ｎ
ａＣｌ １５０ｍＭ ｐＨ７．２）１ｍＬとを混合し、
３７℃にて３０分間攪拌した。次に、牛血清アルブミン
（ＢＳＡ、シグマ社製）溶液１ｍＬ（２０ｍｇ／ｍＬ、
５０ｍＭリン酸−ＮａＣｌ １５０ｍＭ ｐＨ７．２）
を添加して３７℃にて２時間攪拌を行いブロッキング処
理を実施した。その後、遠心分離（５０，０００回転、
３０分間）によりラテックスをペレット状に沈降させて
上清を廃棄した後、３ｍｇ／ｍＬのＢＳＡを含む５０ｍ
Ｍイミダゾール−塩酸溶液（ｐＨ７．８）１０ｍＬを添
加し、よく攪拌した後、超音波破砕機により分散処理を
行った。上記の操作を３回繰り返して行うことにより過
剰に存在する抗体溶液の除去を行った。最終的にはラテ
ックス濃度を１ｍｇ／ｍＬに調整し、Ｃ−反応性蛋白質
測定用ラテックス試薬とした。この試薬は４℃で保存し
た。
【００７７】参考例２ ヤギ抗Ｃ−反応性蛋白質ポリクローナル抗体を使用する
ことなく、その他は参考例１と同様の方法により、抗Ｃ
−反応性蛋白質抗体を含まない対照試薬を調製した。
ことなく、その他は参考例１と同様の方法により、抗Ｃ
−反応性蛋白質抗体を含まない対照試薬を調製した。
【００７８】参考例３ 平均粒径２２０ｎｍのポリスチレンラテックス溶液（協
和メデックス社製、１００ｍｇ／ｍＬ）０．８ｍＬを用
いる以外は、参考例１と同様の方法により、Ｃ−反応性
蛋白質測定用ラテックス試薬を調製した。最終濃度も参
考例１と同様に１ｍｇ／ｍＬに調整し、４℃で保存し
た。
和メデックス社製、１００ｍｇ／ｍＬ）０．８ｍＬを用
いる以外は、参考例１と同様の方法により、Ｃ−反応性
蛋白質測定用ラテックス試薬を調製した。最終濃度も参
考例１と同様に１ｍｇ／ｍＬに調整し、４℃で保存し
た。
【００７９】参考例４ ３７．２ｇの２−メタクリロイルオキシエチルホスホリ
ルコリン（日本油脂社製）、１２．８ｇの２−ヒドロキ
シ３−メタクリロイルオキシプロピルトリメチルアンモ
ニウムクロライド（日本油脂社製）、０．３ｇの重合開
始剤２，２′−アゾビス（２−メチルプロピオノアミヂ
ン）二塩酸塩（和光純薬工業社製「Ｖ−５０」）、重合
媒としての水１５０ｇを用い、４時間、７０℃に加温す
ることにより重合反応を行った。重合反応終了後、反応
液をアセトン１．５Ｌにゆっくり滴下して、重合物を沈
殿させた。沈殿物を濾別、乾燥後、５．０重量％となる
よう蒸留水に溶解させた。分子量は、重合体のリン酸緩
衝溶液をゲルパーミエーションクロマトグラフィー（Ｇ
ＰＣ）用いて分析した結果、ポリエチレングリコール換
算で重量平均分子量３７，０００であった。本化合物
は、ホスホリルコリン基とカチオン基を７：３のモル比
で含有する。
ルコリン（日本油脂社製）、１２．８ｇの２−ヒドロキ
シ３−メタクリロイルオキシプロピルトリメチルアンモ
ニウムクロライド（日本油脂社製）、０．３ｇの重合開
始剤２，２′−アゾビス（２−メチルプロピオノアミヂ
ン）二塩酸塩（和光純薬工業社製「Ｖ−５０」）、重合
媒としての水１５０ｇを用い、４時間、７０℃に加温す
ることにより重合反応を行った。重合反応終了後、反応
液をアセトン１．５Ｌにゆっくり滴下して、重合物を沈
殿させた。沈殿物を濾別、乾燥後、５．０重量％となる
よう蒸留水に溶解させた。分子量は、重合体のリン酸緩
衝溶液をゲルパーミエーションクロマトグラフィー（Ｇ
ＰＣ）用いて分析した結果、ポリエチレングリコール換
算で重量平均分子量３７，０００であった。本化合物
は、ホスホリルコリン基とカチオン基を７：３のモル比
で含有する。
【００８０】参考例５ ４５．９ｇの２−メタクリロイルオキシエチルホスホリ
ルコリン（日本油脂社製）、４．１ｇの２−ヒドロキシ
３−メタクリロイルオキシプロピルトリメチルアンモニ
ウムクロライド（日本油脂社製）、０．３ｇの重合開始
剤２，２′−アゾビス（２−メチルプロピオノアミヂ
ン）二塩酸塩（和光純薬工業社製「Ｖ−５０」）、重合
媒としての水１５０ｇを用い、４時間、７０℃に加温す
ることにより重合反応を行った。重合反応終了後、反応
液をアセトン１．５Ｌにゆっくり滴下して、重合物を沈
殿させた。沈殿物を濾別、乾燥後、５．０重量％となる
よう蒸留水に溶解させた。分子量は、重合体のリン酸緩
衝溶液をゲルパーミエーションクロマトグラフィー（Ｇ
ＰＣ）用いて分析した結果、ポリエチレングリコール換
算で重量平均分子量３３，０００であった。本化合物
は、ホスホリルコリン基とカチオン基を９：１のモル比
で含有する。
ルコリン（日本油脂社製）、４．１ｇの２−ヒドロキシ
３−メタクリロイルオキシプロピルトリメチルアンモニ
ウムクロライド（日本油脂社製）、０．３ｇの重合開始
剤２，２′−アゾビス（２−メチルプロピオノアミヂ
ン）二塩酸塩（和光純薬工業社製「Ｖ−５０」）、重合
媒としての水１５０ｇを用い、４時間、７０℃に加温す
ることにより重合反応を行った。重合反応終了後、反応
液をアセトン１．５Ｌにゆっくり滴下して、重合物を沈
殿させた。沈殿物を濾別、乾燥後、５．０重量％となる
よう蒸留水に溶解させた。分子量は、重合体のリン酸緩
衝溶液をゲルパーミエーションクロマトグラフィー（Ｇ
ＰＣ）用いて分析した結果、ポリエチレングリコール換
算で重量平均分子量３３，０００であった。本化合物
は、ホスホリルコリン基とカチオン基を９：１のモル比
で含有する。
【００８１】参考例６ ５０．０ｇの２−メタクリロイルオキシエチルホスホリ
ルコリン（日本油脂社製）、０．２４ｇの重合開始剤ア
ゾビスイソブチルニトリル（和光純薬工業社製「ＡＩＢ
Ｎ」）、重合媒としてのエタノール１００ｇを用い、４
時間、７０℃に加温することにより重合反応を行った。
重合反応終了後、反応液をアセトン１．５Ｌにゆっくり
滴下して、重合物を沈殿させた。沈殿物を濾別、乾燥
後、５．０重量％となるよう蒸留水に溶解させた。分子
量は、重合体のリン酸緩衝溶液をゲルパーミエーション
クロマトグラフィー（ＧＰＣ）用いて分析した結果、ポ
リエチレングリコール換算で重量平均分子量１０８，０
００であった。
ルコリン（日本油脂社製）、０．２４ｇの重合開始剤ア
ゾビスイソブチルニトリル（和光純薬工業社製「ＡＩＢ
Ｎ」）、重合媒としてのエタノール１００ｇを用い、４
時間、７０℃に加温することにより重合反応を行った。
重合反応終了後、反応液をアセトン１．５Ｌにゆっくり
滴下して、重合物を沈殿させた。沈殿物を濾別、乾燥
後、５．０重量％となるよう蒸留水に溶解させた。分子
量は、重合体のリン酸緩衝溶液をゲルパーミエーション
クロマトグラフィー（ＧＰＣ）用いて分析した結果、ポ
リエチレングリコール換算で重量平均分子量１０８，０
００であった。
【００８２】参考例７ ３５．７ｇの２−メタクリロイルオキシエチルホスホリ
ルコリン（日本油脂社製）、４．３ｇのブチルメタクリ
レート（和光純薬工業社製）、０．８２ｇの重合開始剤
アゾビスイソブチルニトリル（和光純薬工業社製「ＡＩ
ＢＮ」）、重合媒としてのエタノール１６０ｇを用い、
４時間、７０℃に加温することにより重合反応を行っ
た。重合反応終了後、反応液をアセトン１．５Ｌにゆっ
くり滴下して、重合物を沈殿させた。沈殿物を濾別、乾
燥後、５．０重量％となるよう蒸留水に溶解させた。分
子量は、重合体のリン酸緩衝溶液をゲルパーミエーショ
ンクロマトグラフィー（ＧＰＣ）用いて分析した結果、
ポリエチレングリコール換算で重量平均分子量８７，０
００であった。本化合物は、ホスホリルコリン基とブチ
ル基を８：２のモル比で含有する。
ルコリン（日本油脂社製）、４．３ｇのブチルメタクリ
レート（和光純薬工業社製）、０．８２ｇの重合開始剤
アゾビスイソブチルニトリル（和光純薬工業社製「ＡＩ
ＢＮ」）、重合媒としてのエタノール１６０ｇを用い、
４時間、７０℃に加温することにより重合反応を行っ
た。重合反応終了後、反応液をアセトン１．５Ｌにゆっ
くり滴下して、重合物を沈殿させた。沈殿物を濾別、乾
燥後、５．０重量％となるよう蒸留水に溶解させた。分
子量は、重合体のリン酸緩衝溶液をゲルパーミエーショ
ンクロマトグラフィー（ＧＰＣ）用いて分析した結果、
ポリエチレングリコール換算で重量平均分子量８７，０
００であった。本化合物は、ホスホリルコリン基とブチ
ル基を８：２のモル比で含有する。
【００８３】参考例８ ７４．３ｇの２−メタクリロイルオキシエチルホスホリ
ルコリン（日本油脂社製）、２５．７ｇの２−ヒドロキ
シ３−メタクリロイルオキシプロピルトリメチルアンモ
ニウムクロライド（日本油脂社製）、０．４５ｇの重合
開始剤２，２′−アゾビス（２−メチルプロピオノアミ
ヂン）二塩酸塩（和光純薬工業社製「Ｖ−５０」）、重
合媒として水９００ｇを用い、４時間、６０℃に加温す
ることにより重合反応を行った。重合反応終了後、反応
液をアセトン１．５Ｌにゆっくり滴下して、重合物を沈
殿させた。沈殿物を濾別、乾燥後、５．０重量％となる
よう蒸留水に溶解させた。分子量は、重合体のリン酸緩
衝溶液をゲルパーミエーションクロマトグラフィー（Ｇ
ＰＣ）用いて分析した結果、ポリエチレングリコール換
算で重量平均分子量１３，０００であった。本化合物
は、ホスホリルコリン基とカチオン基を７：３のモル比
で含有する。次に、遠心濾過チューブ（限外分子量１
０，０００、ミリポア社製）を用いた遠心分離（３，０
００×ｇ、３０分）を行い、濾液として得られた分子量
１０，０００以下の成分を回収した。
ルコリン（日本油脂社製）、２５．７ｇの２−ヒドロキ
シ３−メタクリロイルオキシプロピルトリメチルアンモ
ニウムクロライド（日本油脂社製）、０．４５ｇの重合
開始剤２，２′−アゾビス（２−メチルプロピオノアミ
ヂン）二塩酸塩（和光純薬工業社製「Ｖ−５０」）、重
合媒として水９００ｇを用い、４時間、６０℃に加温す
ることにより重合反応を行った。重合反応終了後、反応
液をアセトン１．５Ｌにゆっくり滴下して、重合物を沈
殿させた。沈殿物を濾別、乾燥後、５．０重量％となる
よう蒸留水に溶解させた。分子量は、重合体のリン酸緩
衝溶液をゲルパーミエーションクロマトグラフィー（Ｇ
ＰＣ）用いて分析した結果、ポリエチレングリコール換
算で重量平均分子量１３，０００であった。本化合物
は、ホスホリルコリン基とカチオン基を７：３のモル比
で含有する。次に、遠心濾過チューブ（限外分子量１
０，０００、ミリポア社製）を用いた遠心分離（３，０
００×ｇ、３０分）を行い、濾液として得られた分子量
１０，０００以下の成分を回収した。
【００８４】
【発明の効果】本発明のＣ−反応性蛋白質用試薬を用い
ると、Ｃ−反応性蛋白質測定におけるプロゾーン現象の
回避と、測定レンジの拡大ができる。これにより、検体
中に高濃度のＣ−反応性蛋白質が含まれる場合であって
も、検体を希釈することなく原液のまま定量することが
可能となる。
ると、Ｃ−反応性蛋白質測定におけるプロゾーン現象の
回避と、測定レンジの拡大ができる。これにより、検体
中に高濃度のＣ−反応性蛋白質が含まれる場合であって
も、検体を希釈することなく原液のまま定量することが
可能となる。
【図１】実施例Ａ−１及び比較例Ａ−１〜Ａ−３の試薬
を用い、０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応性蛋白質を測
定した結果を示す図である。
を用い、０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応性蛋白質を測
定した結果を示す図である。
【図２】実施例Ａ−１、比較例Ａ−１及び比較例Ａ−４
の試薬を用い、０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応性蛋白
質を測定した結果を示す図である。
の試薬を用い、０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応性蛋白
質を測定した結果を示す図である。
【図３】実施例Ａ−２及び比較例Ａ−５の試薬を用い、
０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応性蛋白質を測定した結
果を示す図である。
０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応性蛋白質を測定した結
果を示す図である。
【図４】実施例Ａ−３及び比較例Ａ−５の試薬を用い、
０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応性蛋白質を測定した結
果を示す図である。
０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応性蛋白質を測定した結
果を示す図である。
【図５】実施例Ａ−９及び比較例Ａ−１の試薬を用い、
０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応性蛋白質を測定した結
果を示す図である。
０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応性蛋白質を測定した結
果を示す図である。
【図６】実施例Ｂ−１及びＢ−２並びに比較例Ｂ−１〜
Ｂ−４の試薬を用い、０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応
性蛋白質を測定した結果を示す図である。
Ｂ−４の試薬を用い、０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応
性蛋白質を測定した結果を示す図である。
【図７】実施例Ｂ−３及び比較例Ｂ−５の試薬を用い、
０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応性蛋白質を測定した結
果を示す図である。
０〜１００ｍｇ／ｄＬのＣ−反応性蛋白質を測定した結
果を示す図である。
【図８】実施例Ｂ−２、実施例Ｂ−４、実施例Ｂ−５及
び比較例Ｂ−１の試薬を用い、０〜１００ｍｇ／ｄＬの
Ｃ−反応性蛋白質を測定した結果を示す図である。
び比較例Ｂ−１の試薬を用い、０〜１００ｍｇ／ｄＬの
Ｃ−反応性蛋白質を測定した結果を示す図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 梅原 晴美 静岡県駿東郡長泉町南一色字上山地600番 １ 協和メデックス株式会社協和メデック ス研究所内 (72)発明者 松森 繁 静岡県駿東郡長泉町南一色字上山地600番 １ 協和メデックス株式会社協和メデック ス研究所内 (72)発明者 山田 智 茨城県つくば市梅園２−24−５ (72)発明者 首藤 健志郎 茨城県つくば市花畑３−７−１ (72)発明者 榊 秀次郎 茨城県つくば市梅園２−15−５ (72)発明者 鈴木 憲 茨城県つくば市吾妻１−４−３
Claims (24)
- 【請求項１】 ホスホリルコリン基とホスホリルコリン
基を除くカチオン性基とを有する化合物及びＣ−反応性
蛋白質に対する抗体を用いて、あるいは、ホスホリルコ
リン基を有する界面活性剤、ホスホリルコリン基を除く
カチオン性基を有する界面活性剤及びＣ−反応性蛋白質
に対する抗体を用いて、Ｃ−反応性蛋白質を測定するこ
とを特徴とするＣ−反応性蛋白質の測定方法。 - 【請求項２】 ホスホリルコリン基とホスホリルコリン
基を除くカチオン性基とを有する化合物におけるカチオ
ン性基が、一般式（Ｉ） 【化１】 ［式（Ｉ）中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は、同一又は異なって
もよく、水素、置換もしくは非置換アルキル、又は置換
もしくは非置換アルケニルを示し、Ｘ1 -は無機性陰イオ
ン又は有機性陰イオンを示す。］で示される基であるこ
とを特徴とする請求項１記載のＣ−反応性蛋白質の測定
方法。 - 【請求項３】 ホスホリルコリン基とホスホリルコリン
基を除くカチオン性基とを有する化合物が、ホスホリル
コリン基を有する単量体とカチオン性基を有する単量体
とを結合させた共重合体であることを特徴とする請求項
１又は２記載のＣ−反応性蛋白質の測定方法。 - 【請求項４】 ホスホリルコリン基を有する単量体とカ
チオン性基を有する単量体が、それぞれホスホリルコリ
ン基とビニル基を有する単量体と、カチオン性基とビニ
ル基を有する単量体であることを特徴とする請求項３記
載のＣ−反応性蛋白質の測定方法。 - 【請求項５】 ホスホリルコリン基とビニル基を有する
単量体及びカチオン性基とビニル基を有する単量体が、
それぞれ２−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコ
リンと、２−ヒドロキシ−３−メタクリロイルオキシプ
ロピルトリメチルアンモニウムクロライドであることを
特徴とする請求項４記載のＣ−反応性蛋白質の測定方
法。 - 【請求項６】 ホスホリルコリン基を有する界面活性剤
が、一般式（II） 【化２】 ［式（II）中、Ｙ1は疎水性基を示す。]で示される化合
物であることを特徴とする請求項１記載のＣ−反応性蛋
白質の測定方法。 - 【請求項７】 式（II）で表される化合物が、リゾホス
ファチジルコリンカプロイル、リゾホスファチジルコリ
ンミリストイル、リゾホスファチジルコリンパルミトイ
ル、リゾホスファチジルコリンステアロイル、大豆由来
リゾホスファチジルコリン、ホスファチジルコリンジブ
チロイル、ホスファチジルコリンジカプロイル、ホスホ
リルコリンオレイルオキシエチルエステル、スフィンゴ
シルホスホリルコリンから選ばれる１種又は２種以上の
化合物であることを特徴とする請求項６記載のＣ−反応
性蛋白質の測定方法。 - 【請求項８】 カチオン性基を有する界面活性剤が、ア
ンモニウム塩の界面活性剤であることを特徴とする請求
項１、６及び７のいずれか１項に記載のＣ−反応性タン
パク質の測定方法。 - 【請求項９】 アンモニウム塩の界面活性剤が、一般式
（III） 【化３】 ［式（III）中、Ｙ2は疎水性基を示し、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3
は同一又は異なってもよく、水素、置換もしくは非置換
アルキル、又は置換もしくは非置換アルケニルを示し、
Ｘ2 -は無機性陰イオン又は有機性陰イオンを示す。］で
示される化合物である請求項８記載のＣ−反応性蛋白質
の測定方法。 - 【請求項１０】 式（III）で表される化合物が、オク
タデシルトリメチルアンモニウムクロライド、ヘキサデ
シルトリメチルアンモニウムクロライド、テトラデシル
トリメチルアンモニウムクロライド、ドデシルトリメチ
ルアンモニウムクロライドから選ばれる１種又は２種以
上の化合物であることを特徴とする請求項９記載のＣ−
反応性蛋白質の測定方法。 - 【請求項１１】 Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体が、水
不溶性担体に担持されていることを特徴とする請求項１
〜１０のいずれか１項に記載のＣ−反応性蛋白質の測定
方法。 - 【請求項１２】 不溶性担体が、ポリスチレン系ラテッ
クスであることを特徴とする請求項１１記載のＣ−反応
性蛋白質の測定方法。 - 【請求項１３】 ホスホリルコリン基とホスホリルコリ
ン基を除くカチオン性基とを有する化合物及びＣ−反応
性蛋白質に対する抗体を含有する、あるいは、ホスホリ
ルコリン基を有する界面活性剤、ホスホリルコリン基を
除くカチオン性基を有する界面活性剤及びＣ−反応性蛋
白質に対する抗体を含有することを特徴とするＣ−反応
性蛋白質測定用試薬。 - 【請求項１４】 ホスホリルコリン基とホスホリルコリ
ン基を除くカチオン性基とを有する化合物におけるカチ
オン性基が、一般式（Ｉ） 【化４】 ［式（Ｉ）中、Ｒ1、Ｒ2及びＲ3は、同一又は異なって
もよく、水素、置換もしくは非置換アルキル、又は置換
もしくは非置換アルケニルを示し、Ｘ1 -は無機性陰イオ
ン又は有機性陰イオンを示す。］で示される基であるこ
とを特徴とする請求項１３記載のＣ−反応性蛋白質測定
用試薬。 - 【請求項１５】 ホスホリルコリン基とホスホリルコリ
ン基を除くカチオン性基とを有する化合物が、ホスホリ
ルコリン基を有する単量体とカチオン性基を有する単量
体とを結合させた共重合体であることを特徴とする請求
項１３又は１４記載のＣ−反応性蛋白質測定用試薬。 - 【請求項１６】 ホスホリルコリン基を有する単量体と
カチオン性基を有する単量体が、それぞれホスホリルコ
リン基とビニル基を有する単量体と、カチオン性基とビ
ニル基を有する単量体であることを特徴とする請求項１
５記載のＣ−反応性蛋白質測定用試薬。 - 【請求項１７】 ホスホリルコリン基とビニル基を有す
る単量体及びカチオン性基とビニル基を有する単量体
が、それぞれ２−メタクリロイルオキシエチルホスホリ
ルコリンと、２−ヒドロキシ−３−メタクリロイルオキ
シプロピルトリメチルアンモニウムクロライドであるこ
とを特徴とする請求項１６記載のＣ−反応性蛋白質測定
用試薬。 - 【請求項１８】 ホスホリルコリン基を有する界面活性
剤が、一般式（II） 【化５】 ［式（II）中、Ｙ1は疎水性基を示す。]で示される化合
物であることを特徴とする請求項１３記載のＣ−反応性
蛋白質測定用試薬。 - 【請求項１９】 式（II）で表される化合物が、リゾホ
スファチジルコリンカプロイル、リゾホスファチジルコ
リンミリストイル、リゾホスファチジルコリンパルミト
イル、リゾホスファチジルコリンステアロイル、大豆由
来リゾホスファチジルコリン、ホスファチジルコリンジ
ブチロイル、ホスファチジルコリンジカプロイル、ホス
ホリルコリンオレイルオキシエチルエステル、スフィン
ゴシルホスホリルコリンから選ばれる１種又は２種以上
の化合物であることを特徴とする請求項１８記載のＣ−
反応性蛋白質測定用試薬。 - 【請求項２０】 カチオン性基を有する界面活性剤がア
ンモニウム塩の界面活性剤であることを特徴とする請求
項１３、１８及び１９のいずれか１項に記載のＣ−反応
性蛋白質測定用試薬。 - 【請求項２１】 アンモニウム塩の界面活性剤が、一般
式（III） 【化６】 ［式（III）中、Ｙ2は疎水性基を示し、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3
は同一又は異なってもよく、水素、置換もしくは非置換
アルキル、又は置換もしくは非置換アルケニルを示し、
Ｘ2 -は無機性陰イオン又は有機性陰イオンを示す。］で
示される化合物であることを特徴とする請求項２０記載
のＣ−反応性蛋白質測定用試薬。 - 【請求項２２】 式（III）で表される化合物が、オク
タデシルトリメチルアンモニウムクロライド、ヘキサデ
シルトリメチルアンモニウムクロライド、テトラデシル
トリメチルアンモニウムクロライド、ドデシルトリメチ
ルアンモニウムクロライドから選ばれる１種又は２種以
上の化合物であることを特徴とする請求項２１記載のＣ
−反応性蛋白質測定用試薬。 - 【請求項２３】 Ｃ−反応性蛋白質に対する抗体が、水
不溶性担体に担持されていることを特徴とする請求項１
３〜２２のいずれか１項に記載のＣ−反応性蛋白質測定
用試薬。 - 【請求項２４】 不溶性担体が、ポリスチレン系ラテッ
クスであることを特徴とする請求項２３に記載のＣ−反
応性蛋白質測定用試薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001052108A JP4716067B2 (ja) | 2000-02-29 | 2001-02-27 | Ｃ−反応性蛋白質測定方法及び測定試薬 |
Applications Claiming Priority (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000-54096 | 2000-02-29 | ||
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| JP2000054102 | 2000-02-29 | ||
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| JP2001052108A JP4716067B2 (ja) | 2000-02-29 | 2001-02-27 | Ｃ−反応性蛋白質測定方法及び測定試薬 |
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|---|---|
| JP2001318099A true JP2001318099A (ja) | 2001-11-16 |
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|---|---|---|---|
| JP2001052108A Expired - Lifetime JP4716067B2 (ja) | 2000-02-29 | 2001-02-27 | Ｃ−反応性蛋白質測定方法及び測定試薬 |
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Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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-
2001
- 2001-02-27 JP JP2001052108A patent/JP4716067B2/ja not_active Expired - Lifetime
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| JP7278950B2 (ja) | 2017-01-27 | 2023-05-22 | エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー | 相互作用アッセイにおけるシグナル強度を調節する方法 |
| WO2024075847A1 (ja) * | 2022-10-06 | 2024-04-11 | 積水メディカル株式会社 | 非特異反応抑制剤、非特異反応抑制剤の使用方法、非特異反応抑制方法、生化学的測定用試薬、検体前処理液、及び生化学的測定用試薬キット |
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