JP2001316398A

JP2001316398A - 抗アレルギー剤

Info

Publication number: JP2001316398A
Application number: JP2001045725A
Authority: JP
Inventors: Susumu Kitanaka; 進北中; Keiichi Matsuzaki; 桂一松崎
Original assignee: OS Industry Co Ltd
Current assignee: OS Industry Co Ltd
Priority date: 2000-02-21
Filing date: 2001-02-21
Publication date: 2001-11-13

Abstract

(57)【要約】（修正有）【課題】ふともも科バンジロウ族植物シジュム（グア
バ）の葉の乾燥粉末又はその乾燥粉末から溶媒抽出され
るエキス中に含まれるアレルギー疾患治療効果を有する
新規化合物の提供。【解決手段】化学式（Ｉ）で示されるベンゾフェノン
配糖体やセスキテルペン系物質、フラボノイド及びそれ
らを含む抗アレルギー剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の技術分野】本発明は、シジュム（グアバ）の葉
の乾燥粉末またはその乾燥粉末から溶媒抽出されたエキ
ス中に含まれる新規なアレルギー疾患治療効果を有する
新規な物質に関する。

【０００２】

【従来の技術】気管支喘息、アトピー性皮膚炎、アレル
ギー性鼻炎、花粉症などのアレルギー疾患が増え続けて
いる。これらのアレルギー疾患は、主にＩ型アレルギー
反応によるものであり、多量に生じた、アレルゲンに対
する免疫グロブリンＥ抗体が、肥満細胞の表面でアレル
ゲンと結合することにより起こる化学伝達物質の遊離に
よって引き起こされることが知られている。

【０００３】従来、これらのアレルギー疾患に対する治
療剤として、ステロイド剤が一般に使用されている。し
かしながら、ステロイド剤は副作用が大きいことが多
く、慎重な適用が必要とされている。

【０００４】一方、シジュウム（グアバ（学名：Ｐｓｉ
ｄｉｕｍｇｕａｊａｖａＬ．））は、南米が原産地
の、ふともも科、バンジロウ属の植物である。この植物
は古くから薬用植物の一つとして知られており、その葉
が、傷薬、胃腸薬などとして用いられている。また、葉
の溶媒抽出物が化粧品に使用されている（特開平５−２
４６８３７号公報参照）。

【０００５】出願人は、特開平９−２９６９号公報にお
いて、グアバの葉の乾燥粉末またはその乾燥粉末から溶
媒抽出されたエキスを含むアレルギー疾患治療剤で、好
ましくは、液剤、ローション、懸濁剤、クリーム、軟
膏、噴霧液、入浴剤などの剤形とされ、アトピー性皮膚
炎を始め、ヒスタミンの関与する、気管支喘息、アレル
ギー性鼻炎、花粉症などのいずれのアレルギー疾患にも
適用できるものを提案した。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上記エ
キスに対する抗アレルギー性成分に対する解明がされて
いなかった。そこで、本発明は、グアバから抽出された
抗アレルギー性に効果がある有効成分を提供することを
目的とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明は、前記目的を達
成するために、特許請求の範囲に記載したように、
（Ｉ）乃至（IV）でそれぞれ示される新規物質及び抗ア
レルギー性物質を提供するものである。

【０００８】

【発明の実施形態】以下、本発明を詳細に説明する。シ
ジュムは広く栽培されているので、その葉は容易に入手
できる。シジュムの葉は、乾燥した後、粉砕して、乾燥
粉末とする。乾燥および粉砕は常法によって行えばよ
い。乾燥は、熱を加えない自然乾燥が好ましい。粉砕の
程度は、剤形に合わせて適宜選択される。

【０００９】エキスは、上記の乾燥粉末を溶媒を用いて
抽出し、抽出液から溶媒を減圧濃縮などにより除去して
得ることが出来る。この溶媒としては、水、メタノー
ル、エタノールなどのアルコール、アセトン、および、
これらの混合物が使用できる。好ましくは、アルコール
またはアセトンが使用される。エキスは、必要により、
さらに、カラムクロマトグラフィーなどの常用の手段を
用いて精製してもよい。

【００１０】上記のエキスは、通常、(1)第２鉄塩と反
応して暗青ないし暗緑色を呈する、(2)クロム酸または
クロム酸塩と反応して沈殿する、(3)フェリシアン酸カ
リウムおよびアンモニアと反応して深赤色を呈するなど
の性質を有している。

【００１１】前記物質を含む抗アレルギー剤は、通常、
従来の方法にしたがって製剤化される。製剤化の際に
は、医薬用に使用されている種々の補助剤、すなわち、
蒸留水、白色ワセリンなどの担体やその他の助剤、例え
ば、安定剤、防腐剤、乳化剤などを必要に応じて使用す
る。剤形の例としては、錠剤、散剤、顆粒剤、液剤、ロ
ーション、懸濁剤、クリーム、軟膏、噴霧液、入浴剤な
どがあり、これらの剤形は投与方法に合わせ適宜選択さ
れる。例えば、外用剤の場合、液剤、ローション、懸濁
剤、クリーム、軟膏、噴霧液、入浴剤などの剤形が選択
される。製剤への物質の配合量は、通常、１〜３０重量
％、好ましくは、２〜１５重量％である。

【００１２】本発明のアレルギー疾患治療剤は、通常、
経口、外用（局所）、吸入ないし通気、および、これら
の組み合わせにより投与され、好ましくは、外用により
投与される。投与量は、投与方法によって異なるが、例
えば、局所投与の場合、乾燥粉末を５〜１５重量％含有
する製剤を１日１回ないし数回塗布する。また、経口投
与の場合、通常、成人で、乾燥粉末では０．３〜０．５
ｇを１日１回ないし数回投与する。

【００１３】なお、上記の用量および用法は、患者の年
齢、性別、症状および重傷度ならびに、他の薬剤の使用
などの条件により変化するものであり、上記の範囲にと
らわれることなく変更することが可能である。

【００１４】本発明のアレルギー疾患治療剤では、特
に、アトピー性皮膚炎に対する治療効果が著しい。その
効果は、アレルギーに対して良い効果を有するとされる
インターロイキン１２の生成促進が確認され、さらに、
肥満細胞を用いたヒスタミン遊離抑制試験によってヒス
タミン遊離抑制活性が確認されている。したがって、ア
トピー性皮膚炎に限らず、気管支喘息、アレルギー性鼻
炎、花粉症などのいずれのアレルギー疾患にも適用でき
ると期待される。

【００１５】なお、シジュムの葉の煎じ液は、古くから
飲用されており、その安全性は確認されている。

【００１６】

【実施例】乾燥シジュム葉５．８ｋｇを７０或いは８０
％メタノール５Ｌで３回、室温にて超音波抽出し、抽出
液を減圧下濃縮し、抽出物（エキス）を得た。この収出
物に水或いはメタノールを加え、ＤｉａｉｏｎＨＰ−
２０（商品名）或いはSephadex LH20（商品名）を充填
したカラムに吸着させた。次いで、水−メタノール混合
溶媒を用いてメタノール濃度を上げながら溶出し、さら
に図１及び図２にそれぞれ示すような抽出操作を行っ
た。

【００１７】図１に示す抽出操作について更に詳述す
る。尚、以下の（）は、１００μｇ／ｍＩでの阻害の％
を示す。シジュム葉の８０％メタノール抽出物に水１．
５リットル加えて溶解した。これを、水〜１００％メタ
ノールと展開溶媒を変化させつつ、ＤｉａｉｏｎＨＰ
−２０カラムクロマトグラフィにより溶出し、水溶出
液、２０％メタノール溶出液、７０％メタノール溶出
液、及び１００％メタノール溶出液それぞれを得た。上
記溶出液のうち、７０％メタノール溶出液について、更
に、ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０によるエタノール流出
液を得、次いで、この流出液についてのＤｉａｉｏｎ
ＣＨＰ−２０Ｐによる５０〜７０％メタノール溶出液と
して、フラクション１〜４を得た。上記フラクションの
うち、フラクション２について、ＳｅｐｈａｄｅｘＬ
Ｈ２０によりクロロホルム−メタノール（１：１）を展
開溶媒として、分画してフラクション１〜４を得た。こ
こでのフラクション２は７７０ｍｇ、フラクション３は
１２ｍｇ、フラクション４は２８０ｍｇ得た。さらに、
上記フラクションのうち、フラクション２について、Ｓ
ＳＣ、ＯＤＳにより０〜２５％メタノールを用いて逐次
溶出し、フラクション１〜４を得た。ここでのフラクシ
ョン１は４７ｍｇ（３７．５４％）、フラクション２は
１９０ｍｇ（９５．９７％）、フラクション３は１３０
ｍｇ（９６．６１％）、フラクション４は１２４ｍｇ
（９４．４１％）得た。そして、上記フラクション２を
再結晶することにより、ＰＧＳ−１が単離され（４７．
１ｍｇ、６５．９％）、上記フラクション３をＨＰＬＣ
を使用することにより、ＰＧＳ−３が単離され（１４．
００ｍｇ、１０１．２％）、ＰＧＳ−２が単離される
（４４．２２ｍｇ、４６．２％）。

【００１８】図１のＰＧＳ−１は、Ｒ＝Ｈである既述の
分子（Ｉ）であり、ＰＧＳ−２は、Ｒ＝メチル基である
既述の物質（Ｉ）である。ＰＧＳ−３は、Ｒが5-galloy
l-arabinofuranose（新規物質（IV））である。

【００１９】また、図２に示す抽出操作について更に詳
述する。シジュム葉の７０％メタノール溶出物〔図１の
シジュム葉の８０％メタノール抽出物をＤｉａｉｏｎ
ＨＰ−２０カラムに付して得られた７０％メタノール溶
出液に相当〕７．７１ｇにメタノールを加えて溶解し
た。これを、ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０カラム（３×
２６ｃｍ）に付し、メタノールで展開することにより、
フラクション１〜１０を得た。フラクション１は８２３
ｍｇ、フラクション２は１．１９ｇ、フラクション３は
１．９８ｇ、フラクション４は５８３ｍｇ、フラクショ
ン５は４２７ｍｇ、フラクション６は２．１１ｇ、フラ
クション７は１０８ｍｇ、フラクション８は１９２ｍ
ｇ、フラクション９は１３０ｍｇ、フラクション１０は
２５５ｍｇ得た。上記フラクションのうち、フラクショ
ン３の１．９０ｇについて、シリカゲルカラム（２．７
×３０ｃｍ）を使用してクロロホルム−メタノールで逐
次溶出し、フラクション１〜８を得た。ここでのフラク
ション１は１１．２７ｍｇ、フラクション２は１３．７
９ｍｇ、フラクション３は５４．３ｍｇ、フラクション
４は６４．５ｍｇ、フラクション５は４４．８ｍｇ、フ
ラクション６は５１５ｍｇ、フラクション７は２８１ｍ
ｇ、フラクション８は６８８ｍｇ得た（フラクション３
〜８は黄色がかった色素であった）。

【００２０】フラクション６をＨＰＬＣ（カラム：Ｓｈ
ｉｓｅｉｄｏＣｐｐｃｅｌｌｐａｋＣ１８ＵＧ１２
０，１０Ｘ２５０ｍｍ、移動相アセトニトリル−水（１
８：８２）、流速３．０ｍＬ／分、検出波長２５０ｎ
ｍ、カラム温度４０℃）で分離することにより、Ｒ＝ア
ラビノフラノースである既知物質（IV）およびＲ＝アラ
ビノピラノースである既知物質（IV）を得た。フラクシ
ョン７を同様の条件で精製することにより、Ｒ＝キシロ
ースである既知物質（IV）を得た。フラクション８を同
様の条件で精製することにより、Ｒ＝キシロースである
既知物質（IV）、Ｒ＝ガラクトースである既知物質（I
V）およびＲ＝グルコースである既知物質を得た。

【００２１】図２の抽出操作で得られた前記のフラクシ
ョン６、７及び８の各分画分に対応するＨＰＬＣデータ
を図７に示す。図７におけるＨＰＬＣデータのうち、左
側のものがフラクション６に対応し、真中のものがフラ
クション７に対応し、右側のものがフラクション８にそ
れぞれ対応する。図７のｆｒ．１（２）は、Ｒ＝アラビ
ノフラノースである既知物質（IV）であり、図７のｆ
ｒ．２（３）は、Ｒ＝アラビノピラノースである既知物
質（IV）であり、図７のｆｒ．４（４）は、Ｒ＝キシロ
ースである既知物質（IV）であり、図７のｆｒ．３
（５）は、Ｒ＝ガラクトースである既知物質（IV）であ
り、図７のｆｒ．４（６）は、Ｒ＝グルコースである既
知物質（IV）である。尚、上記の（）内の番号は、図７
の下に示す既知物質（IV）の化学構造式中の置換基Ｒの
種類を示す番号に相当する。

【００２２】図３は、既述の物質（II）、（III）に対
する抽出操作を示すものである。図３に示す抽出操作に
ついて更に詳述する。尚、図中の（）は、収率％を示
す。シジュム葉の８０％アセトン抽出物（１９５ｇ）に
水を加えて溶解した。これを、ＤｉａｉｏｎＨＰ２０
カラムで溶出分離することにより、水溶出液７４．８４
ｇ、４０％メタノール溶出液６３．９８ｇ、７０％メタ
ノール溶出液２６．５４ｇ、１００％メタノール溶出液
４．０４ｇ、７０％アセトン溶出液１５６ｍｇを得た。
上記溶出液のうち、１００％メタノール溶出液の３ｇを
メタノールに溶解して、ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０カ
ラムにより分離し、フラクション１〜６を得た。フラク
ション１は１０５．９ｍｇ、フラクション２は３５７．
１ｍｇ、フラクション３は１．３６ｇ、フラクション４
は３８９．６ｍｇ、フラクション５は１１２．３ｍｇ、
フラクション６は７５．６ｍｇ得た。上記フラクション
のうち、フラクション３の１．３０ｇについて、ＯＤＳ
カラムを使用してメタノール−水（５０：５０）、（６
０：４０）、（７０：３０）、（８０：２０）、及び
（１００：０）で溶出し、フラクション２３〜３６を２
８２ｍｇ、フラクション３７〜４７を２５０ｍｇ得た。
そして、フラクション２３〜３６は、ＨＰＬＣ，ＯＤＳ
カラムを使用し、メタノール−水（２：１）で分離し
て、ｆｒ．１を９．６１ｍｇ、ｆｒ．２を２３４ｍｇ及
びｆｒ．３を４．４２ｍｇの収量で得た。一方、フラク
ション３７〜４７も、ＨＰＬＣ，ＯＤＳカラムを使用
し、メタノール−水（２：１）で分離して、ｆｒ．１を
１４２．３ｍｇ及びｆｒ．２を１０６．４ｍｇの収量で
得た。図３のフラクション２３〜３６から得られたｆ
ｒ．２は物質（II）に対応し、ｆｒ．３は物質（III）
に対応することを示している。

【００２３】これらの物質の構造は、核磁気共鳴スペク
トル或いは赤外線吸収スペクトルを用いた機器分析の手
法によって確認された。新規物質である（Ｉ）と新規物
質であるＲ＝5-galloyl-arabinofuranoseの物質（新規
物質IV）の構造式は、図４に示すところにより確認され
ている。既知物質（II）の構造式は、図５に示すところ
により確認されている。この物質は図５に示す文献にそ
の構造や性状が紹介されている。物質（III）の構造式
は、図６に示すところにより確認されている。

【００２４】次に既述の化合物の抗アレルギー作用を確
認した結果について説明する。マクロファージはマウス
マクロファージ様分化細胞（ＲＡＷ２６４．７細胞）を
使用した。Ｈａｍ'sＦ１２培地（含ウシ胎児血清）に
１．２×１０^６cells／mlとなるように懸濁し、３５mm
ペトリディシュに播き、１時間培養後、既述の物質を１
００μｇ／mlと同時にＩＦＮ−γ（１００Ｕ／ml）した
後２４時間後の上清を採取するか、ＩＦＮ−γ（１００
Ｕ／ml）を加え８時間後ＬＰＳ（１μｇ／ml）加えて１
６時間後上清を採取した。そして、上清を採取し、２５
倍に希釈し、これにバイオソースインターナショナル社
製のELISA試薬を用いたイライザ法を適用してインター
ロイキン１２（ｐ４０）産生率（コントロールを１００
パーセントとした時）を測定した。その結果を次の通り
示す。Ｒ＝Ｈ（物質Ｉ）：産生率１４３．２パ−セントＲ＝ＣＨ_３（物質Ｉ）：産生率１３３．７パ−セント物質II：産生率１４９．３パーセント物質III：産生率５１８．１パーセント新規物質（物質IV）：産生率３５０．６パーセント次に既述の物質（IV）のうち既知物質については、ヒス
タミン遊離試験を行った。すなわち、ラット腹腔マスト
細胞を５×１０^５cells／mlとなるように懸濁し、試料
を終濃度１００μｇ／ｍｌで添加した。脱顆粒物質como
pound４８／８０を用いた。遊離したヒスタミン量をオ
ルトフタルアルデヒド（ＯＰＡ）を用いたポストラベル
法によるＨＰＬＣで定量した。その結果は次のとおりで
ある。

【００２５】Ｒ＝アラビノフラノース阻害率４０．４パーセントＲ＝アラビノピラノース同４８．５パーセントＲ＝キシロース同１００パーセントＲ＝ガラクトース同３０．７パーセントＲ＝グルコース同４２．６パーセント

【００２６】

【発明の効果】以上に説明した本発明によれば、副作用
の少ない、新規な抗アレルギー物質が提供される。

【図面の簡単な説明】

【図１】物質（Ｉ）及び（IV）の抽出操作を示す工程図
である。

【図２】物質（IV）の抽出操作を示す工程図である。

【図３】物質（II）、（III）の抽出操作を示す工程図
である。

【図４】物質（Ｉ）及び（IV）の構造の確認データを示
す特性図である。

【図５】物質（II）の構造確認データを示す特性図であ
る。

【図６】物質（III）の構造確認データを示す特性図で
ある。

【図７】図２のフラクション６、７及び８の各分画分に
対応するＨＰＬＣデータを示す特性図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 35/78 Ａ６１Ｋ 35/78 ＣＡ６１Ｐ 27/14 Ａ６１Ｐ 27/14 37/08 37/08 Ｃ０７Ｄ 493/08 Ｃ０７Ｄ 493/08 Ａ // Ｃ０７Ｈ 17/07 Ｃ０７Ｈ 17/07 Ｆターム(参考） 4C057 JJ23 KK08 4C071 AA03 AA07 BB01 CC11 EE05 FF15 GG01 JJ01 KK17 LL01 4C086 AA01 AA02 AA03 CA01 EA08 EA11 MA01 MA04 NA14 ZB13 4C088 AB57 AC05 BA10 BA13 BA14 BA32 CA06 CA07 NA14 ZB13 4C206 AA01 AA02 AA03 CA05 CA14 KA18 MA01 MA04 NA14 ZB13

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】次の化学式（Ｉ）示される新規なベンゾ
フェノン系物質。（Ｉ）
【請求項２】次の化学式（Ｉ）で示されるベンゾフェ
ノン系物質を有する抗アレルギー剤。（Ｉ）
【請求項３】次の化学式（II）で示されるセスキテル
ベン系物質を有する抗アレルギー剤。（II）
【請求項４】次の化学式（III）で示される新規なセ
スキテルペン系物質。（III）
【請求項５】次の化学式（III）で示されるセスキテ
ルペン系物質を有する抗アレルギー剤。（III）
【請求項６】次の化学式（IV）で示される新規なフラ
ボノイド系物質又はこの物質を有する抗アレルギー剤。（IV）