JP2001114637A

JP2001114637A - ヒアルロン酸産生促進剤、及びこれを含有して成る皮膚外用剤

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Publication number: JP2001114637A
Application number: JP29237099A
Authority: JP
Inventors: Yoshiko Tsurumi; 淑子鶴見
Original assignee: Noevir Co Ltd
Current assignee: Noevir Co Ltd
Priority date: 1999-10-14
Filing date: 1999-10-14
Publication date: 2001-04-24
Anticipated expiration: 2019-10-14
Also published as: JP3522609B2

Abstract

(57)【要約】【課題】線維芽細胞に対し優れたヒアルロ
ン酸産生促進作用を有し、しかも安定性及び安全性にお
いても良好で、外用に適するヒアルロン酸産生促進剤を
得、さらにそれを応用して、皮膚の老化症状の防止，改
善、創傷治癒促進、及びヒアルロン酸の異常分解を伴う
疾病の治療に有用な皮膚外用剤を提供する。【解決手段】ドクダミ（Houttuynia cordata T
hunb.）の抽出物及びセイヨウノコギリソウ（Achillea
millefolium L.）の花の抽出物の１種又は２種以上を、
そのまま、或いは担体又は基剤に含有させてヒアルロン
酸産生促進剤とする。そして、前記ヒアルロン酸産生促
進剤の１種又は２種以上を外用剤基剤に含有させ、皮膚
外用剤とする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、皮膚線維芽細胞の
ヒアルロン酸産生を促進する作用を有し、皮膚の老化防
止や創傷治癒促進、或いはヒアルロン酸の異常分解を伴
う疾病の治療に有用なヒアルロン酸産生促進剤、及びこ
れを含有する皮膚外用剤に関する。さらに詳しくは、ド
クダミ（Houttuynia cordata Thunb.）の抽出物及びセ
イヨウノコギリソウ（Achillea millefolium L.）の花
の抽出物の１種又は２種以上を含有して成るヒアルロン
酸産生促進剤、及びこれを含有して成る皮膚外用剤に関
する。

【０００２】

【従来の技術】ヒアルロン酸は、D-N-アセチルグルコサ
ミンとD-グルクロン酸が交互に結合して形成された直鎖
状の高分子多糖であり、コラーゲン，フィブロネクチ
ン，プロテオグリカンとともに細胞外マトリックスを構
築し、細胞の保持，組織の潤滑性の保持，物理的傷害な
どの外力への抵抗，細菌感染の防止など、多くの機能を
有している。特に皮膚真皮においては、線維芽細胞によ
り産生され、皮膚の弾性保持や創傷の治癒過程に関与す
ることが知られている。また、特異的な受容体を介し
て、細胞接着や細胞の移動を制御していることも知られ
ている。

【０００３】加齢や紫外線曝露等、種々の外的ストレス
によるヒアルロン酸の分解や、線維芽細胞のヒアルロン
酸産生能の低下が、皮膚弾性の低下やしわの形成といっ
た皮膚の老化症状の進行の一因となり、創傷の治癒の遅
延にも関与すると考えられる。また、慢性関節リウマ
チ，化膿性関節炎，通風性関節炎，外傷性関節症，骨関
節炎，変形性関節症といった疾病においては、ヒアルロ
ン酸の異常分解が観察される。それゆえ、かかる皮膚の
老化症状の防止や改善、創傷治癒の促進、或いはヒアル
ロン酸の異常分解を伴う疾病の治療において、ヒアルロ
ン酸を外用等により補充する試みがなされてきた。

【０００４】皮膚外用剤の分野においては、外用剤基剤
にヒアルロン酸又はその塩を含有させて適用する試みが
多くなされ（特公昭６０−１９７２５，同６１−３８１
６８，同６２−５３４８４等）、上記ヒアルロン酸の異
常分解を伴う疾病の治療においては、ヒアルロン酸の関
節注入療法が行われている。しかしながら、ヒアルロン
酸類を含有する皮膚外用剤の適用については、ヒアルロ
ン酸が高分子量の多糖類であって経皮吸収されにくい，
経時的にヒアルロン酸が分解されて皮膚外用剤の粘度が
低下するといった問題があった。また、ヒアルロン酸の
関節注入療法においては、長期にわたる治療が必要で、
医師の処方を必要とするため、日常行う処置には向かな
いといった問題があった。

【０００５】そこで、皮膚外用剤においてヒアルロン酸
の粘度低下を抑制して製剤の安定性を向上させたり（特
公平１−７０４３，同１−１０４８５等）、低分子量の
ヒアルロン酸を用いたり（特許第２５４９１１９号）、
ヒアルロン酸の誘導体を用いたりする（特許第２５６９
０１２号，同第２６０４９３０号，同第２６４８３０８
号等）試みの他、生体のヒアルロン酸産生を促進させた
り、又はヒアルロニダーゼの活性を阻害して、ヒアルロ
ン酸の分解を抑制する試みも多く開示されている。

【０００６】かかるヒアルロン酸産生促進剤としては、
アオサ科アオサ属，アオノリ属、フノリ科フノリ属、ダ
ービリア科ダービリア属等の海藻の抽出物（特開平７−
１０１８７１，同８−１９８７４１，同９−１７６０３
６）、メソイ，レグロ，シソ科植物等の植物抽出物（特
開平９−８７１６３，同１０−２９９２２，同１０−９
５７３５）、酵母抽出物（特開平８−１６３９８３）、
牛血清の分子量５，０００以下の画分（特開平８−２３
９４０４）等を含有するものが開示されている。一方ヒ
アルロニダーゼ阻害剤としては、ボタン，シャクヤクの
抽出物を含有するもの（特開平１−１２８９３３）、ロ
ズマリン酸を有効成分とするもの（特開平９−６７２５
１）等が開示されている。

【０００７】しかしながら、上記したような従来のヒア
ルロン酸産生促進剤やヒアルロニダーゼ阻害剤において
は、ヒアルロン酸産生促進効果又はヒアルロニダーゼ阻
害効果，品質，安定性又は安全性のいずれかの面で不十
分なものも存在しており、さらに新規なヒアルロン酸産
生促進作用を有するものが求められているのが実状であ
った。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】そこで本発明において
は、線維芽細胞に対し優れたヒアルロン酸産生促進作用
を有し、しかも安定性及び安全性においても良好で、外
用に適するヒアルロン酸産生促進剤を得、さらにそれを
応用して、皮膚の老化症状の防止，改善、創傷治癒促
進、及びヒアルロン酸の異常分解を伴う疾病の治療に有
用な皮膚外用剤を提供することを目的とした。

【０００９】

【課題を解決するための手段】上記課題を解決するべ
く、細胞毒性を示すことなく線維芽細胞のヒアルロン酸
産生能を増強する物質のスクリーニングを行ったとこ
ろ、ドクダミ（Houttuyniacordata Thunb.）の抽出物及
びセイヨウノコギリソウ（Achillea millefoliumL.）の
花の抽出物に高いヒアルロン酸産生促進活性を見いだ
し、前記抽出物を用いることにより本発明を完成するに
至った。

【００１０】すなわち本発明においては、ドクダミ（Ho
uttuynia cordata Thunb.）の抽出物及びセイヨウノコ
ギリソウ（Achillea millefolium L.）の花の抽出物の
１種又は２種以上を、そのまま、或いは担体又は基剤に
含有させてヒアルロン酸産生促進剤とする。そして、前
記ヒアルロン酸産生促進剤の１種又は２種以上を外用剤
基剤に含有させ、皮膚外用剤とする。

【００１１】

【発明の実施の形態】本発明に係るヒアルロン酸産生促
進剤を得る際に出発原料として用いるドクダミ（Houttu
ynia cordata Thunb.）は、日本各地の陰湿地に自生す
るドクダミ科（Saururaceae）に属する多年草植物で、
生薬「ジュウヤク（Houttuyniae Herba）」の基原植物
として用いられる。抽出には、葉，茎，花，根の各部位
及び全体を用いることができるが、地上部の全草を用い
ることが好ましい。一方セイヨウノコギリソウ（Achill
ea millefolium L.）は、キク科（Compositae）に属す
る多年草で、北米及びヨーロッパに野生し、日本では観
賞用に栽培されている。本発明においては、「ヤローフ
ラワー」と呼ばれる花部を用いる。

【００１２】これらは生のまま抽出操作に供してもよい
が、抽出効率を考えると、細切，乾燥，粉砕等の処理を
行った後抽出を行うことが好ましい。抽出は、抽出溶媒
に浸漬して行う。抽出効率を上げるため撹拌を行った
り、抽出溶媒中でホモジナイズしてもよい。抽出温度と
しては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度とする
のが適切である。抽出時間は抽出溶媒の種類や抽出温度
によっても異なるが、４時間〜１４日間程度とするのが
適切である。

【００１３】抽出溶媒としては、水の他、メタノール，
エタノール，プロパノール，イソプロパノール等の低級
アルコール、1,3-ブチレングリコール，プロピレングリ
コール，ジプロピレングリコール，グリセリン等の多価
アルコール、エチルエーテル，プロピルエーテル等のエ
ーテル類、酢酸エチル，酢酸ブチル等のエステル類、ア
セトン，エチルメチルケトン等のケトン類などの極性有
機溶媒が好ましく用いられ、これらより１種又は２種以
上を選択して用いる。また、生理食塩水，リン酸緩衝
液，リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよい。

【００１４】ドクダミ及びセイヨウノコギリソウの花の
上記溶媒による抽出物は、そのままでもヒアルロン酸産
生促進剤として用いることができるが、濃縮，乾固した
ものを水や極性溶媒に再度溶解したり、或いはヒアルロ
ン酸産生促進作用を損なわない範囲で脱色，脱臭，脱塩
等の精製処理や分画処理を行った後に用いてもよい。ま
た保存のためには、精製処理の後凍結乾燥し、用時に溶
媒に溶解して用いることが好ましい。本発明において
は、ドクダミ及びセイヨウノコギリソウの花の抽出物又
は前記処理物をそのまま、或いは水，アルコール等の水
性担体、乳剤，ゲル，クリーム，軟膏等の基剤に含有さ
せてヒアルロン酸産生促進剤とする。また、リポソーム
等のベシクルやマイクロカプセル等に内包させることも
できる。

【００１５】さらに本発明においては、上記ヒアルロン
酸産生促進剤の１種又は２種以上を外用剤基剤に含有さ
せ、皮膚外用剤として提供する。本発明に係る皮膚外用
剤は、ローション剤，乳剤，ゲル剤，クリーム剤，軟膏
等の剤型で提供することができる。また、化粧水，乳
液，クリーム，パック等の皮膚化粧料、メイクアップベ
ースローション，メイクアップベースクリーム，乳液状
又はクリーム状或いは軟膏型のファンデーション，アイ
カラー，チークカラーといったメイクアップ化粧料、ハ
ンドクリーム，レッグクリーム，ボディローション等の
身体用化粧料などとしても提供することができる。

【００１６】なお本発明に係る皮膚外用剤には、本発明
に係るヒアルロン酸産生促進剤の他、油類，界面活性
剤，保湿剤，紫外線吸収剤，顔料，香料，防腐剤等の一
般的な医薬品及び化粧料用原料や、活性酸素消去剤，抗
炎症剤，美白剤，皮膚細胞賦活剤等の生理活性成分も含
有させることができる。また本発明に係る皮膚外用剤へ
の本発明に係るヒアルロン酸産生促進剤の配合量として
は、その剤型により異なるが、０．０００１〜１０．０
重量％程度とするのが適当である。

【００１７】

【実施例】さらに実施例により、本発明の特徴について
詳細に説明する。

【００１８】［実施例１］ヒアルロン酸産生促進剤１ドクダミ（Houttuynia cordata Thunb.）の地上部全草
の乾燥粉末５００ｇを５０容量％エタノール水溶液１，
０００ｍｌに浸漬し、２５℃で７日間静置した。その後
植物粉末をろ別除去し、ヒアルロン酸産生促進剤１とし
た。

【００１９】［実施例２］ヒアルロン酸産生促進剤２セイヨウノコギリソウ（Achillea millefolium L.）の
花５００ｇを５０容量％エタノール水溶液１，５００ｍ
ｌ中にて粉砕し、２５℃で７日間撹拌抽出した。その後
植物粉砕片をろ別除去し、ヒアルロン酸産生促進剤２と
した。

【００２０】本発明の実施例１及び実施例２のヒアルロ
ン酸産生促進剤について、正常ヒト線維芽細胞のヒアル
ロン酸産生能に及ぼす影響を調べた。すなわち、正常ヒ
ト線維芽細胞を、１ウェル当たり２．０×１０⁴個とな
るように９６穴マイクロプレートに播種し、実施例１又
は実施例２を各試験濃度含有する０．５容量％牛胎仔血
清添加タルベッコ修正基礎培地（ＤＭＥＭ）にて５日間
培養後、培養上清のヒアルロン酸量をEnzyme-linked im
munosorbent assay（ＥＬＩＳＡ）により測定した。同
時に線維芽細胞数を計測し、細胞当たりのヒアルロン酸
産生量を算出して、試料を含有しない対照のヒアルロン
酸産生量を１００として表したヒアルロン酸産生インデ
ックスにて表１及び表２に示した。

【００２１】

【表１】

【００２２】表１において示されるように、本発明の実
施例１に係るヒアルロン酸産生促進剤１は、７．５〜５
０μｇ／ｍｌの濃度で有意に線維芽細胞のヒアルロン酸
産生を促進し（危険率５％）、１２．５〜５０μｇ／ｍ
ｌにおいて前記産生促進効果は最大（約２００％）とな
っていた。

【００２３】

【表２】

【００２４】また表２において示されるように、本発明
の実施例２に係るヒアルロン酸産生促進剤２は、７．５
〜１２．５μｇ／ｍｌの濃度範囲で有意に線維芽細胞の
ヒアルロン酸産生を促進し（危険率５％）、１２．５μ
ｇ／ｍｌにおいて前記産生促進効果は最大（約１３０
％）となっていた。なお、実施例１及び実施例２のいず
れについても、試験した濃度範囲において細胞毒性は認
められなかった。

【００２５】さらに、本発明に係るヒアルロン酸産生促
進剤についての他の実施例を示す。

【００２６】［実施例３］ヒアルロン酸産生促進剤３オリーブ油１０ｇを１０重量％のゼラチン水溶液３０ｇ
に撹拌しながら４０℃で分散，乳化し、Ｏ／Ｗ型エマル
ションを形成する。このエマルションに、あらかじめ４
０℃に加温した１０重量％のアラビアガム水溶液３０ｇ
を撹拌しながら混合する。さらに、この混合液に４０℃
の温水１４０ｍｌを加え、次いで酢酸を少量ずつ加えて
ｐＨを４．０として、コアセルベート滴を生成させる。
この系を５℃まで冷却してコアセルベート滴を凝固さ
せ、１０重量％のグルタルアルデヒド水溶液１ｍｌを添
加し、水酸化ナトリウム水溶液によりｐＨを９．０とし
た後、ほぼ１時間のうちに５０℃まで昇温する。生成し
たゼラチン−アラビアガムマイクロカプセルを遠心分離
により回収し、アセトンによりオリーブ油を抽出した
後、アセトン中でふるいにより分級し、アセトンを蒸発
させて水中に浸漬し含水させた。次に、含水ゼラチン−
アラビアガムマイクロカプセルを、上記実施例１にて調
製したドクダミの地上部全草の５０容量％エタノール水
溶液による抽出物中に浸漬し、これを内包するゼラチン
−アラビアガムマイクロカプセルを調製して遠心分離に
より回収し、ヒアルロン酸産生促進剤３とした。

【００２７】［実施例４］ヒアルロン酸産生促進剤４上記実施例２で調製したセイヨウノコギリソウの花の抽
出物を減圧濃縮して乾固した後、５０容量％エタノール
１０ｍｌに溶解し、これを１００ｍｌの精製水に添加し
て溶解する。これに大豆レシチン８０ｇを添加して６５
℃で懸濁し、次いで超音波処理してリポソームを調製
し、遠心分離により回収してヒアルロン酸産生促進剤４
とした。

【００２８】［実施例５］ヒアルロン酸産生促進剤５ドクダミ（Houttuynia cordata Thunb.）の地上部全草
の細切物５００ｇを３０容量％の1,3-ブチレングリコー
ル水溶液２，０００ｍｌ中に浸漬し、２０℃で５日間撹
拌抽出した後、ろ過してろ液を回収し、５００ｍｌとな
るまで濃縮してヒアルロン酸産生促進剤５とした。

【００２９】［実施例６］ヒアルロン酸産生促進剤６セイヨウノコギリソウ（Achillea millefolium L.）の
花の乾燥粉砕物５００ｇを1,2-ペンタンジオール１，０
００ｍｌ中に浸漬し、２０℃で５日間撹拌抽出した後、
ろ過してろ液を回収し、２５０ｍｌとなるまで濃縮し
た。これを精製水に溶解し、全量を１，０００ｍｌとし
てヒアルロン酸産生促進剤６とした。

【００３０】［実施例７］ヒアルロン酸産生促進剤７ドクダミ（Houttuynia cordata Thunb.）の地上部全草
５００ｇを生理食塩水２，０００ｍｌ中にてホモジネー
トし、そのまま１０℃で一昼夜撹拌した後遠心分離し、
上清を回収して凍結乾燥し、ヒアルロン酸産生促進剤７
とした。

【００３１】［実施例８］ヒアルロン酸産生促進剤８セイヨウノコギリソウ（Achillea millefolium L.）の
花５００ｇをリン酸緩衝生理食塩水２，０００ｍｌ中に
てホモジネートし、そのまま１０℃で一昼夜撹拌した後
遠心分離し、上清を回収して凍結乾燥し、ヒアルロン酸
産生促進剤８とした。

【００３２】続いて、本発明に係る皮膚外用剤について
の実施例の処方を示す。

【００３３】［実施例９］皮膚用ローション剤（１）エタノール１０．０（重量％）（２）ヒドロキシエチルセルロース１．０（３）ヒアルロン酸産生促進剤１０．５（４）パラオキシ安息香酸メチル０．１（５）精製水８８．４製法：(1)〜(4)を順次(5)に添加し、均一に溶解する。

【００３４】［実施例１０］皮膚用乳剤（１）ステアリン酸０．２０（重量％）（２）セタノール１．５０（３）ワセリン３．００（４）流動パラフィン７．００（５）ポリオキシエチレン(10E.O.)モノオレイン酸１．５０エステル（６）酢酸トコフェロール０．５０（７）グリセリン５．００（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）水酸化カリウム０．０２（10）精製水８０．１８（11）ヒアルロン酸産生促進剤２１．００製法：(1)〜(6)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７０℃とする。一方、(7)〜(10)の水相成分を混
合，加熱して均一とし、７０℃とする。この水相成分に
前記油相成分を撹拌しながら徐々に添加して乳化し、冷
却した後４０℃にて(11)を添加，混合する。

【００３５】［実施例１１］皮膚用ゲル剤（１）ジプロピレングリコール１０．０（重量％）（２）カルボキシビニルポリマー０．５（３）水酸化カリウム０．１（４）パラオキシ安息香酸メチル０．１（５）精製水８６．８（６）ヒアルロン酸産生促進剤３２．５製法：(5)に(2)を均一に溶解した後、(1)に(4)を溶解し
て添加し、次いで(3)を加えて増粘させ、(6)を添加，分
散する。

【００３６】［実施例１２］皮膚用クリーム（１）ミツロウ６．０（重量％）（２）セタノール５．０（３）還元ラノリン８．０（４）スクワラン２７．５（５）グリセリル脂肪酸エステル４．０（６）親油型グリセリルモノステアリン酸エステル２．０（７）ポリオキシエチレン(20E.O.)ソルビタン５．０モノラウリン酸エステル（８）プロピレングリコール５．０（９）ヒアルロン酸産生促進剤５３．０（10）パラオキシ安息香酸メチル０．１（11）精製水３４．４製法：(1)〜(7)の油相成分を混合，溶解して７５℃とす
る。一方、(8)〜(11)の水相成分を混合，溶解して７５
℃に加熱する。次いで、この水相成分に前記油相成分を
添加して予備乳化した後ホモミキサーにて均一に乳化
し、冷却する。

【００３７】［実施例１３］皮膚用リポソーム剤（１）グリセリン２．０（重量％）（２）1,3-ブチレングリコール３．０（３）ポリオキシエチレン(25E.O.)オレイルエーテル０．２（４）エタノール１０．０（５）パラオキシ安息香酸メチル０．１（６）香料０．１（７）精製水７４．６（８）ヒアルロン酸産生促進剤４１０．０製法：(5)，(6)を(4)に溶解し、(1)〜(3)とともに(7)に
添加して均一に混合し、これに(8)を加えて分散する。

【００３８】［実施例１４］水中油型乳剤性軟膏（１）白色ワセリン２５．０（重量％）（２）ステアリルアルコール２５．０（３）グリセリン１２．０（４）ラウリル硫酸ナトリウム１．０（５）ヒアルロン酸産生促進剤６１．５（６）ヒアルロン酸産生促進剤７０．２（７）パラオキシ安息香酸メチル０．１（８）精製水３５．２製法：(1)〜(4)の油相成分を混合，加熱して均一に溶解
し、７５℃とする。一方、(5)〜(8)の水相成分を混合，
加熱して均一とし、７５℃とする。この水相成分に前記
油相成分を撹拌しながら徐々に添加して乳化し、冷却す
る。

【００３９】［実施例１５］油中水型エモリエントクリーム（１）流動パラフィン３０．００（重量％）（２）マイクロクリスタリンワックス２．００（３）ワセリン５．００（４）ジグリセリルジオレイン酸エステル５．００（５）L-グルタミン酸ナトリウム１．６０（６）L-セリン０．４０（７）プロピレングリコール３．００（８）ヒアルロン酸産生促進剤８０．０５（９）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（10）精製水５２．７５（11）香料０．１０製法：(5)，(6)を(10)の一部に溶解して５０℃とし、あ
らかじめ５０℃に加温した(4)に撹拌しながら徐々に添
加する。これをあらかじめ混合し、７０℃に加熱溶解し
た(1)〜(3)に均一に分散し、次いで(7)〜(9)を(10)の残
部に溶解して７０℃に加熱したものを撹拌しながら添加
し、ホモミキサーにて乳化する。冷却後、５０℃にて(1
1)を添加，混合する。

【００４０】［実施例１６］メイクアップベースクリーム（１）ステアリン酸１２．００（重量％）（２）セタノール２．００（３）グリセリルトリ2-エチルヘキサン酸エステル２．５０（４）自己乳化型グリセリルモノステアリン酸２．００エステル（５）プロピレングリコール１０．００（６）水酸化カリウム０．３０（７）ヒアルロン酸産生促進剤５０．０５（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）精製水６９．４５（10）酸化チタン１．００（11）ベンガラ０．４０（12）黄酸化鉄０．１０（13）香料０．１０製法：(1)〜(4)の油相成分を混合，溶解して７５℃とす
る。一方、(5)〜(9)の水相成分を混合，加熱溶解し、こ
れに(10)〜(12)の顔料成分を添加してホモミキサーにて
均一に分散して７５℃とする。次いで、この水相成分に
前記油相成分を添加してホモミキサーにて均一に乳化
し、冷却後４０℃にて(13)を添加，混合する。

【００４１】［実施例１７］乳液状ファンデーション（１）ステアリン酸２．００（重量％）（２）スクワラン５．００（３）ミリスチン酸オクチルドデシル５．００（４）セタノール１．００（５）デカグリセリルモノイソパルミチン酸エステル９．００（６）1,3-ブチレンクリコール６．００（７）水酸化カリウム０．０８（８）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（９）精製水５３．４２（10）酸化チタン９．００（11）タルク７．４０（12）ベンガラ０．５０（13）黄酸化鉄１．１０（14）黒酸化鉄０．１０（15）香料０．１５（16）ヒアルロン酸産生促進剤１０．１５製法：(1)〜(5)の油相成分を混合，溶解して７５℃とす
る。一方、(6)〜(9)の水相成分を混合，加熱溶解し、こ
れに(10)〜(14)の顔料成分を添加してホモミキサーにて
均一に分散して７５℃とする。次いで、この水相成分に
前記油相成分を添加してホモミキサーにて均一に乳化
し、冷却後４０℃にて(15)，(16)を添加，混合する。

【００４２】［実施例１８］ハンドクリーム（１）セタノール４．００（重量％）（２）ワセリン２．００（３）流動パラフィン１０．００（４）グリセリルモノステアリン酸エステル１．５０（５）ポリオキシエチレン(60E.O.)グリセリル２．５０イソステアリン酸エステル（６）酢酸トコフェロール０．２５（７）グリセリン２０．００（８）ヒアルロン酸産生促進剤６０．０２（９）パラオキシ安息香酸メチル０．１０（10）精製水５９．５８（11）ヒアルロン酸産生促進剤２０．０５製法：(1)〜(6)の油相成分を混合，溶解して７５℃とす
る。一方、(7)〜(10)の水相成分を混合，加熱溶解し７
５℃とする。次いで、この水相成分に前記油相成分を添
加してホモミキサーにて均一に乳化した後、冷却して４
０℃にて(11)を添加，混合する。

【００４３】上記本発明の実施例のうち実施例９〜実施
例１４について、紫外線による皮膚のしわの形成に対す
る防御効果を評価した。その際各実施例において、ヒア
ルロン酸産生促進剤１及び２を５０容量％エタノール水
溶液に、ヒアルロン酸産生促進剤３を５０容量％のエタ
ノール水溶液を含浸させたゼラチン−アラビアガムマイ
クロカプセルに、ヒアルロン酸産生促進剤４をセイヨウ
ノコギリソウの花の抽出濃縮乾固物を添加しないで同様
に調製したリポソームに、ヒアルロン酸産生促進剤５を
３０容量％の1,3-ブチレングリコール水溶液に、ヒアル
ロン酸産生促進剤６を２５容量％の1,2-ペンタンジオー
ルに、ヒアルロン酸産生促進剤７を精製水にそれぞれ代
替して調製した比較例１〜比較例６についても、同時に
評価を行った。

【００４４】紫外線によるしわの形成に対する防御効果
は、ヘアレスマウス５匹を１群とし、各群について実施
例及び比較例をそれぞれ１日１回背部に塗布し、１Ｊ／
ｃｍ ²／週の長波長紫外線（ＵＶＡ）を５０週間照射
し、ヘアレスマウス皮膚におけるしわの形成状況を観察
し、次に示す判定基準に従って点数化して評価した。こ
の際、精製水のみを塗布した群を対照とした。結果は各
群の平均値を算出し、ＵＶＡ照射日数との関係により表
３に示した。

【００４５】［皮膚におけるしわの形成状況］しわの形成を全く認めない０点微小なしわの形成をわずかに認める１点軽微なしわの形成を明確に認める２点中程度のしわの形成を認める３点深いしわの形成を認める４点

【００４６】

【表３】

【００４７】表３より明らかなように、対照群において
は、ＵＶＡ照射日数が４０週を越える頃には皮膚に形成
されたしわの深さは中程度にまで達し、５０週後には深
いしわの形成が認められていた。これに対し本発明の実
施例塗布群では、いずれにおいても５０週後に微小或い
は軽微なしわの形成を認めた程度で、しわの形成は顕著
に抑制されていた。一方比較例塗布群では、酢酸トコフ
ェロールを含有する比較例２塗布群で形成されたしわの
程度の軽減がわずかに見られた他は、有意なしわの形成
抑制或いは軽減は認められなかった。

【００４８】続いて、上記実施例９〜実施例１４及び比
較例１〜比較例６について、抗炎症作用及び創傷治癒促
進作用を評価した。背部皮膚に人工的に炎症又は創傷を
形成したマウス５匹を１群とし、各群において、実施例
及び比較例をそれぞれ０．５ｇずつ炎症部位又は創傷部
位に１日２回、７日間塗布した。７日目に各部位の状態
を観察し、抗炎症作用については「有効」，「やや有
効」，「無効」、創傷治癒促進作用については「完全治
癒」，「ほぼ治癒」，「治癒不完全」の３段階でそれぞ
れ評価し、各評価を得たマウスの数にて表４に示した。

【００４９】

【表４】

【００５０】表４より明らかなように、抗炎症作用につ
いては、本発明の実施例塗布群ではいずれにおいても無
効と評価されたマウスは見られず、２例以上のマウスに
おいて有効な抗炎症作用が認められていた。また創傷治
癒促進効果についても、本発明の実施例塗布群では創傷
治癒の不完全なマウスはいずれにおいても認められてお
らず、２例以上のマウスで完全な治癒を認めていた。こ
れに対し、比較例塗布群では、比較例２塗布群で１例に
やや有効な抗炎症作用が見られた他は、有効な抗炎症作
用は認められなかった。またいずれの塗布群において
も、創傷の治癒は不完全であった。

【００５１】次に、本発明の実施例９〜実施例１８につ
いて、６カ月間の実使用試験を行った。この際、実施例
１５〜実施例１８において、ヒアルロン酸産生促進剤１
及び２を、上記と同様に５０容量％エタノール水溶液
に、ヒアルロン酸産生促進剤５及び６を３０容量％の1,
3-ブチレングリコール及び２５容量％の1,2-ペンタンジ
オールに、ヒアルロン酸産生促進剤８を精製水にそれぞ
れ代替したものを比較例７〜比較例１０とした。実使用
試験は、パネラーとして、しわや皮膚弾性の低下といっ
た皮膚の老化症状を顕著に呈する４０才〜６０才代の女
性を１群２０名として用い、各群に実施例及び比較例を
それぞれブラインドにて１日２回使用させて行った。使
用試験開始前及び終了後に皮膚の状態を観察し、しわ及
び皮膚の弾性の改善状況について「改善」，「やや改
善」，「変化なし」の３段階にて評価した。なお、しわ
の程度については写真撮影及びレプリカ採取により、皮
膚の弾性についてはキュートメーターにより測定して評
価した。結果は、各評価を得たパネラー数にて表５に示
した。

【００５２】

【表５】

【００５３】表５より明らかなように、本発明の実施例
使用群ではいずれにおいても、しわ，皮膚弾性ともに全
パネラーで症状の改善傾向が見られた。特に実施例９〜
実施例１４使用群では、しわについては４０％以上、皮
膚弾性については５０％以上のパネラーで明らかな改善
を認めていた。これに対して、比較例使用群ではいずれ
においても、しわ，皮膚弾性ともに明確な改善の見られ
たパネラーは存在せず、しわについては８０％以上、皮
膚弾性については７５％以上のパネラーで皮膚の状態に
変化は見られなかった。

【００５４】なお、本発明の実施例１〜実施例８におい
ては、１０℃以下で保存した場合、６カ月間にわたって
ヒアルロン酸産生促進作用はほぼ変化なく維持されてい
た。また、本発明の実施例９〜実施例１８についても、
２５℃で６カ月間保存した場合、何らの状態変化をも認
めなかった。さらに上記実使用試験において、本発明の
実施例使用群では、皮膚刺激性反応や皮膚感作性反応を
認めたパネラーは存在せず、使用時に痛みや温感，ヒリ
ヒリ感，チクチク感といった刺激感又は不快感を訴えた
パネラーも存在しなかった。

【００５５】

【発明の効果】以上詳述したように、本発明により、線
維芽細胞に対し優れたヒアルロン酸産生促進作用を有
し、しかも安定性及び安全性においても良好で、外用に
適するヒアルロン酸産生促進剤を得ることができ、さら
にそれを応用することにより、皮膚の老化症状の防止，
改善、創傷治癒促進及びヒアルロン酸の異常分解を伴う
疾病の治療に有用な皮膚外用剤を提供することができ
た。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続きＦターム(参考） 4C083 AA082 AA111 AA112 AB032 AB232 AB242 AB432 AC012 AC022 AC072 AC102 AC122 AC182 AC242 AC352 AC402 AC422 AC442 AC482 AC582 AC782 AD042 AD092 AD282 AD512 AD662 BB51 CC02 CC03 CC05 CC12 DD22 DD23 DD31 DD33 DD41 DD45 EE12 EE13 FF01 FF05 4C088 AB26 AB47 AC03 BA09 BA10 CA03 MA07 MA63 ZA89

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ドクダミ（Houttuynia cordata Thun
b.）の抽出物及びセイヨウノコギリソウ（Achillea mil
lefolium L.）の花の抽出物の１種又は２種以上を含有
することを特徴とする、ヒアルロン酸産生促進剤。
【請求項２】抽出物が、極性溶媒による抽出物である
ことを特徴とする、請求項１に記載のヒアルロン酸産生
促進剤。
【請求項３】請求項１及び請求項２に記載のヒアルロ
ン酸産生促進剤より選択した１種又は２種以上を含有し
て成る、皮膚外用剤。