JP2000516971A

JP2000516971A - 抗ウイルス性直鎖状ポリマー

Info

Publication number: JP2000516971A
Application number: JP10506371A
Authority: JP
Inventors: マシューズ，バリー・ロス; ホーラン，ジョージ
Original assignee: Biomolecular Research Institute Ltd
Current assignee: Biomolecular Research Institute Ltd
Priority date: 1996-07-17
Filing date: 1997-07-17
Publication date: 2000-12-19
Also published as: EP0928306A1; KR100589022B1; AU730899B2; CN1225653A; EP0928306A4; AU3330197A; KR20000067865A; US20020025919A1; NZ333541A; CN1163235C; US6740635B2; BR9710376A; AUPO104396A0; CA2262863A1; WO1998003572A1

Abstract

(57)【要約】直鎖状非炭水化物ポリマーであって、複数の側鎖を有し、この側鎖の少なくとも１がアニオン性またはカチオン性部分と結合している化合物を含む、抗ウイルス性化合物。

Description

【発明の詳細な説明】抗ウイルス性直鎖状ポリマー技術分野本発明は抗ウイルス剤に関する。詳細には、ポリイオン性、特にポリアニオン性直鎖状ポリマーであって、顕著な抗ウイルス活性が、特にヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）およびヒトインフルエンザＡおよびＢ、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）および他のエンベロープウイルスに対して認められる化合物に関する。背景技術ＨＩＶウイルスに対してスクリーニングした場合、特定のスルホン酸化ポリサッカライド化合物が抗ウイルス活性を有することが示されている。しかしながら、これらの化合物は比較的不安定であって、そのため所望の有効な抗ウイルス活性を得るためには大量の化合物が必要となる。さらに、ヘパリンおよびデキストランスルフェートを含む、かかる化合物の多くは、強い抗凝固剤であり、この活性のため、臨床上は抗ウイルス剤として好ましくなかった。国際特許出願ＰＣＴ／ＡＵ９５／００３５０(ＷＯ９５／３４５９５)はポリアミドアミンまたはポリリシンデンドリマーのごとき、複数の末端基を有し、末端基のうちの少なくとも１つがアニオン性もしくはカチオン性含有部分、特に、スルホン酸含有、カルボン酸含有またはトリメチルアンモニウム含有部分、と結合もしくは連結しているデンドリマーを含む抗ウイルス性化合物を開示している。本発明は、直鎖状の骨格を有するボリイオン性ポリマーという、新規な型の抗ウイルス剤を提供する。この抗ウイルス剤は、ＨＩＶ１およびＨＩＶ２、ＲＳＶ、ＨＢＶおよびヒトインフルエンザＡおよびＢに実質的な抗ウイルス活性を示す。かかる化合物は、予防および治療のために、ヒトへの抗ウイルス剤として用いるのに適している。発明の開示本発明によって、複数の側鎖基を有する直鎖状非炭水化物ポリマーであって、少なくともこの側鎖のひとつにアニオン性またはカチオン性部分が結合あるいは連結しているものを含む抗ウイルス性化合物を提供する。本発明において特に好ましい化合物は、スルホン酸含有部分、カルボン酸含有部分、リン酸又はホスホン酸含有部分、ホウ酸含有部分、ノイラミン酸またはシアル酸含有部分もしくは４位またはその他の部位が修飾されているノイラミン酸またはシアル酸を含有する部分が、その側鎖基に結合している直鎖状ポリマーである。本明細書において、本発明の化合物をポリイオン性ポリマーと呼ぶ。この用語は本明細書において、ポリマー自身のみでなく、薬学上もしくは獣医学上許容されるその塩、例えばナトリウム、カリウムまたはカルシウム塩のごときアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属塩、も含むよう使用される。発明の詳細な説明本発明において好ましいポリイオン性ポリマーは、以下の一般式を有する直鎖状ポリマーである：（式中、Ｒは直鎖状ポリマーの骨格を構成する、非炭水化物モノマーユニットである；ＸはモノマーユニットＲの側鎖基上の、任意の連結基である。Ａはアニオン性含有部分である）。即ち、本発明において、好ましい直鎖状ポリマーは、アニオン性部分(Ａ)が直鎖状非炭水化物ポリマー骨格(複数個のモノマーユニットＲにより構成されている)に、任意に結合基(Ｘ)を介して結合しているポリアニオン性物質である。得られるポリアニオン性直鎖状ポリマーは、所望の分子量分布のメジアン値を得られるよう、繰り返し単位の分子量分布を有している。好ましくは、分子量分布のメジアン値は１，０００から１，０００，０００、好ましくは１０，０００から６００，０００である。モノマーユニットＲは、好ましくはアミンもしくはアミド部分であり、より好ましくはアミノ酸部分である。特に好ましいモノマーユニットは、リシンである。様々な分子量のポリ−Ｌ-リシンはシグマケミカルカンパニーより市販されている。アニオン性部分Ａは直鎖状ポリマー骨格の反応性側鎖へ、直接結合、あるいは様々な官能性連結基Ｘ、例えばエステル、アミド、エーテル、チオエーテル、アミン、ウレア、チオウレア、カーバメートおよびカーボネートなど、ただしこれらに限定されない、を介しての連結により結合させることができる。任意の結合基Ｘはまた、ポリマーとアニオン性部分Ａとの間のスペーサーとしても働くものであってよく、またアルキル鎖(任意に置換または分岐されている) 、アルコキシ、ポリアルコキシ、アルキルチオまたはポリアルキルチオ鎖(任意に置換されている)、またはアルケニル、多価アルケニル、アルキニルまたは多価アルキニル鎖(任意に置換されている)から構成されていてもよい。好ましいスペーサー鎖は式：-(ＣＨ₂)_n-Ｚ-(ＣＨ₂)_n- （式中、Ｚは-ＣＨ₂-、‐ＣＨ＝ＣＨ‐、-Ｃ≡Ｃ‐、-Ｏ-または-Ｓ-であり、ｎは１から１５の整数である）で示される基を有している。本発明において、少なくとも１の、そして好ましくは実質的な数の、直鎖状ポリマー骨格上の反応性側鎖基は、共有結合によって結合したアニオン性またはカチオン性含有部分を有している。ポリマー骨格の側鎖の末端は、アミノ基もしくはＯＨ、ＳＨ等の他の反応性官能基であってもよい。ポリマー骨格の側鎖基の末端がアミン基である場合、アニオン-またはカチオン含有部分はこのポリマー骨格に、アミド結合およびチオウレア結合を含む様々な官能基によって結合される。ポリマー骨格に結合し得る、好ましいアニオンまたはカチオン含有部分はスルホン酸含有部分、カルボン酸含有部分(ノイラミン酸およびシアル酸含有部分および修飾したノイラミン酸およびシアル酸含有部分を含む)、ホウ酸含有部分、リン酸およびホスホン酸含有部分(エステル化したリン酸およびホスホン酸含有部分を含む)およびトリメチルアンモニウムを含む部分が含まれる。直鎖状ポリマーのアミノ基または他の側鎖に結合し得る、好ましいアニオンおよびカチオン含有部分には、以下の例示される基が含まれる(以下の式において、ｎはゼロまたは正の整数、より好ましくはｎはゼロまたは１から２０までの整数である)： ―NH(CH₂)_nSO₃ ^- ―(CH₂)_nSO₃ ^- ―AR(SO₃ ^-)_n ―CH₂CH(SO₃ ^-)COOH ―CH(SO₃ ^-)CH₂COOH ArX(CH₂)_nSO₃ ^- X=O,S,NH ―(CH₂)_n ⁺NMe₃ ―Ar(N⁺Me₃)_n ―Ar(CH₂N⁺Me₃)_n ―ArXP(=O)(OR)₂ X=O，CH₂，CHF，CF₂ R=アルキル、アリール、H，Na ―ArXP(=O)(OR¹)(NR²R³) X=O，CH₂，CHF，CF₂ R¹=アルキル、アリール,H，Na 、R²，R³=アルキル、アリール ―Ar[P(=O)(OR)₂]_n R=アルキル、アリール、H，Na n=1-3 ―Ar[B(OH)₂]_n n=1-3 ―Ar[COOH]_n n=1-3 上記に加えて本発明においては、様々なノイラミン酸またはシアル酸含有部分または修飾されたノイラミン酸またはシアル酸含有部分が、側鎖基に結合または連結していてもよい。これらの部分には、ノイラミン酸の様々なＮ-およびＯ-置換誘導体、特にＮ-アセチル、Ｏ-アセチルおよびＮ-グリコリル誘導体のごときＮ−およびＯ−アシル誘導体、およびノイラミン酸が修飾されている、特にノイラミン酸の４位がアミノ、アミド、シアノ、アジド、またはグアニジノ基にて置換されて修飾されている部分が含まれる。本発明のポリイオン性ポリマーは、当業者に良く知られている標準的な化学的方法にて調製すればよい。好ましい方法の例を、以下の実施例に一例として開示した。上述の通り、本発明のポリイオン性ポリマーは顕著な抗ウイルス活性を、特にエンベロープウイルスに対して示すことが認められた。したがって、本発明のポリイオン性ポリマーは、ウイルス感染の予防および治療のための処置に有用である。例えば、ＨＩＶ１およびＨＩＶ２、そして他のエンベロープウイルス、例えばＢ型肝炎ウイルスのごときＤＮＡウイルスおよびＣ型肝炎、ウシウイルス性下痢および日本脳炎ウイルス(ＥＪＶ)のごときフラビウイルスを含むＲＮＡウイルス感染に有用である。本発明のポリイオン性ポリマーは、ヒトインフルエンザウイルスＡおよびＢ、ライノウイウルス、コロナウイルス、ヒトパラインフルエンザウイルス、呼吸器合胞体ウイルス(ＲＳＶ)、水痘帯状庖疹ウイルス(ＶＺＶ)、ヒトサイトメガロウイルス(ＣＭＶ)、エプスタインバーウイルス(ＥＢＶ)、ヒトパピローマウイルス(ＨＰＶ)、アデノウイルス、１型および２型単純ヘルペスウイルス(ＨＳＶ)、麻疹ウイルスおよび水疱性口内炎ウイルス(ＶＳＶ)による感染の予防および治療のための処置において有用である。別の観点からは、本発明は、上記に説明したポリイオン性ポリマーを、少なくとも１つの薬学上または獣医学上許容される担体もしくは希釈剤と共に含有する、ヒトおよび非ヒト動物の予防的または治療的抗ウイルス処置のための医薬または獣医薬組成物を提供する。かかる組成物の処方は、この分野の当業者にはよく知られている。適当な薬学上許容され得る担体および／または希釈剤には、従来の溶剤、分散媒体、フィラー、固体担体、水溶液、被覆、抗生物質、全てがいずれも含まれる。かかる媒体および剤を薬理活性物質と共に用いることは当業者にはよく知られており、例えば「レミントンズ・ファーマシューティカル・サイエンス」第１８版、マック・パブリッシングカンパニー米国ペンシルバニア州、に開示されている。従来の媒体もしくは剤が活性物質と配合禁忌である場合を除き、これらを本発明の組成物に用いることは意図されている。追加の活性物質をこの組成物に添加してもよい。組成物の投与を容易にし、用量を均一にするため、本発明の組成物を投薬単位の製剤とすることが、非常に望ましい。本明細書において、投薬単位の製剤とは処置しようとするヒトへの一回投与量となるように調製した、物理的に分離した製剤をいう。各単位製剤には、所望の治療効果を生ずるよう計算された予め定められた量の活性物質が、必要な医薬用担体および／または希釈剤と共に含まれている。本発明の新規投薬単位製剤は、(Ａ)活性物質のユニークな性質と達成される特定の治療効果、および(ｂ)特定の治療のための活性物質の調合の業界特有の制限に依存し、またこれから説明されるものである。他の点において、本発明はヒトまたは非ヒト動物におけるウイルス感染の予防的または治療的処置のための方法であって、該ヒトまたは動物に対して予防または治療的抗ウイルス有効量の、上述のポリイオン性ポリマーを投与することを含む、処置方法を提供する。さらに他の点においては、本発明は上述のポリイオン性ポリマーの予防的または治療的抗ウイルス処置有効量を、ヒトまたは非ヒト動物のウイルス感染に対する予防的または治療的処置のため、または予防的または治療的処置のための医薬品の製造のために使用することも、提供する。様々な投与経路を用いることができる。個々の投与方法はもちろん、処置対象の症状、および治療効果を得るために必要な用量に依存して選択される。本発明の方法は、一般的にいって、医学上許容されるいずれの投与方法を用いて実施してもよい。医学上許容とは、治療レベルの本発明の活性成分を臨床上許容できない副作用を示すことなく生じさせるいずれの投与態様でもよいことを意味する。かかる投与態様には、経口、直腸、局所、鼻内、吸入、経皮または注射(例えば皮下、筋肉内および静脈内)経路の投与を含む。経口投与のための製剤には、カプセル、錠剤、トローチ剤などの個々に分離した剤を含む。他の経路には、髄液内に直接投与するくも膜下投与、様々なカテーテルおよびバルーンなどの当業者に良く知られている血管形成術用デバイスを用いての直接導入、および標的領域内への柔組織内投与などが含まれる。本発明の組成物は、投与単位製剤とするのが便利であり、製薬業界においてよく知られているいずれの方法を用いて調製してもよい。かかる方法には、活性成分を１または複数のアクセサリー成分を構成する担体と組み合わせる工程を含む。一般に、組成物は活性成分を液体担体、微細固体担体または両方と均一に、そして完全に共同するよう操作し、そして必要な場合には製品を成形すればよい。経口投与に適した本発明の化合物は、カプセル、カシェ剤、錠剤またはトローチ剤のごとき形態にしてもよく、それぞれが予め定めた量の活性成分を、リポソーム内または水性液体内もしくはシロップ、エリクシルまたはエマルジョンなどの非水性液体内の懸濁液として、含有しているものであってよい。注射による投与に適した組成物は、活性成分の滅菌水性剤であって、投与対象の血液と等張であるものを含有するのが便利である。この水性製剤は、適当な分散または湿潤剤および懸濁剤を用いて公知の方法にて調製すればよい。滅菌注射可能製剤はまた、非毒性注射許容希釈剤もしくは溶剤、例えば、ポリエチレングリコールの滅菌注射可能溶液もしくは縣濁液であってもよい。使用可能な、許容されるビヒクルおよび溶剤には、水、リンゲル液および等張塩水が含まれる。これらに加えて、滅菌固定油は従来から溶剤または懸濁用媒体に用いられてきた。この目的のため、合成モノまたはジグリセライドを含むいずれのブランドの固定油を用いてもよい。さらに、オレイン酸などの脂肪酸も注射剤の製剤に見られる。活性組成物はまた、鼻内またはインハレーションによって活性成分を投与するようにデザインされているシステムで投与するように、処方してもよく、例えば活性成分を含有する微細なエアロゾルスプレーなどが例示される。他の系には、徐放性製剤も含まれる。好ましい徐放性分配系は、本発明の活性成分の放出を、徐放性のペレットもしくはカプセルにて実施するものである。数多くの徐放性分配系が入手可能である。例えば(ａ)活性物質がマトリックス内に含まれている、侵食系(ｂ)活性物質がポリマーから制御された速度で浸出する、分散系などが例示されるが、これらに限定されない。さらに、ポンプを有するハードウエアの分配系を用いることもできる。これらのうちのいくつかは、埋め込み用である。活性成分は、予防もしくは治療有効量投与する。予防または治療有効量は、所望の効果の少なくとも一部を得る、または処置する症状の、兆候の発生を遅らせる、進行を阻害する、全体として停止させるのに必要な量を意味する。かかる量は、もちろん処置するそれぞれの症状、症状の重篤性および年齢、生理的状況、寸法、体重および並行する治療などの患者の状態に依存する量である。これらの要因は、当業者には良く知られており、取り扱うのにルーチンとしての労力以上がかかるわけではない。一般には、最大用量、即ち健常者に対する試験により判断された最高安全用量を用いるのが好ましい。しかしながら、医薬、生理学または実質的な他の要因により、低用量、許容量を投与してもよいことは、当業者が当然理解することである。一般に、活性成分の毎日の経口投与の用量は、薬０.０１ｍｇ／ｋｇ日から１０００ｍｇ／ｋｇ日である。少用量(０.０１-１ｍｇ)を最初に投与して、次いで徐々に用量を増やし、約１０００mg／kg日までとしてもよい。かかる用量で投与対象の応答が不充分である場合、幾分高い容量(または、別のより局所に特化した投与経路にて、有効なより高い容量)を、患者の耐性が許容するまで、用いることができる。１日に多数回投与する場合には、化合物の適当な全身レベルに到達するように、調整すればよい。本発明の活性成分はまた、獣医用組成物として用いるよう、提供されても良く、この場合には、例えばこの業界で従来用いられている方法にて製剤すればよい。獣医用組成物の例としては、 (ａ)経口投与、外用組成物、例えば牛馬用水薬(例えば、水溶液、非水性溶液または縣濁液)、錠剤もしくはボーラス、；餌と混合するための粉末剤、顆粒剤、ペレット；舌へ投与するためのペーストなど； (ｂ)注射による投与用、例えば皮下、筋肉内または静脈内投与用の、例えば、滅菌溶液または縣濁液として；または(適当な場合には)溶液または縣濁液を、乳頭を通して乳腺内へ導く、乳房内注入用として； (ｃ)局所投与、例えば皮膚に投与するためのクリーム、軟膏またはスプレー； (ｄ)経膣投与、例えばペッサリー、クリームもしくはフォーム、等が含まれる。この明細書全体および添付のクレイムにおいて、文脈上別の意味に読めない場合には、「含有する」との語は、そこに述べられている成分、あるいは一群の述べられた成分を含んでいることを意味するが、他の成分、成分の群がのぞかれていることを意味するのではないと、理解されなくてはならない。本発明の詳細は、以下の実施例からさらに詳細に説明する。実施例１末端が４-スルホフェニルチオウレアナトリウムであるポリリシンの調製Ａ固形４-スルホフェニルイソチオシアネートモノハイドレートナトリウム(２．５５ｇ;１０ｍｍｏｌ)を、ポリＬ-リシン(１５‐３０Ｋ)(シグマ・ケミカル・カンパニー)(１.０ｇ)を水(２０ｍｌ)とＮ,Ｎ‐ジメチル‐Ｎ‐アリルルアミンバッファー(ｐＨ９.5；１５ｍｌ)の混合液に溶解した溶液に添加した。得られた混合物を５３℃にて窒素雰囲気下で加熱し、ニンヒドリン試験が陰性となるまで、３時間加熱した。冷却した混合物を濾過し、濾液を濃縮して灰色の固体を析出させた。固体を再度水に溶解し、アンバーライトカラムＩＲ１２０(Ｎａ)にかけ、その後濃縮した。粗生成物はゲル濾過(セファデックスＬＨ２０；ウォーター社)にて精製し、末端が４-スルホフェニルチオウレアナトリウムであるポリリシンＢＲＩ２９９５を、白色綿毛状固体として得た(１.２５ｇ)。Ｂ同様にして、末端が４-スルホフェニルチオウレアナトリウムであるポリリシンの、分子量フラクションが１-４ＫのものＢＲＩ２９９４、４-１５Ｋのもの、ＢＲＩ２９６７、１５-３００Ｋのもの、ＢＲＩ２９９６を得た。実施例２末端が３，６-ジスルフォンナフチルチオウレアナトリウムである、ポリリシンの製造固形３,６-ジスルフォナフチルイソチオシアネート(２００ｍｇ；０.５１ｍｍｏｌ)を、ポリＬ-リシン(１５‐３０Ｋ)の水(２ｍｌ)とＮ,Ｎ‐ジメチル‐Ｎ‐アリルアミンバッファー(ｐＨ９.５;２ｍｌ)の混合液に溶解した溶液に添加した。得られた混合物を５３℃にて窒素雰囲気下、ニンヒドリン試験が陰性となるまで、３時間加熱した。冷却した混合物を濾過し、濾液を濃縮して褐色の固体を析出させた。固体を再度水に溶解し、アンバーライトカラムＩＲ１２０ (Ｎａ)にかけ、その後濃縮した。粗生成物はゲル濾過(セファデックスＬＨ２０；ウォーター社)にて精製し、末端が３，６-ジスルフォンナフチルチオウレアナトリウムであるポリリシンＢＲＩ６０４７、白色綿毛状固体として得た(８７mg) 。実施例３ポリＬ-リシル［(８-オクタンアミド)-５-アセトアミド-３,５-ジデオキシ-２- チオ-Ｄ-グリセロ-α-Ｄ-ガラクト-２-ノヌロピラノシドイックアシッド］_nＢＲＩ６１５０の調製ポリ-Ｌ-リシン―(ＮＨＣＯ[ＣＨ₂]₇)―Ｘメチル［(８-オクタノイックアシッドＮ-ヒドロキシスクシンイミドエステル) ５-アセトアミド-４,７,８,９-テトラ-Ｏ-アセチル-３,５-ジデオキシ-２-チオ- Ｄ-グリセロ-α-Ｄ-ガラクト-２-ノヌロピラノシド］オネートは、以下の手法により調製した。メチル５-アセトアミド―４,７,８,９―テトラ-Ｏ-アセチル-２- Ｓ-アセチル-３,５-ジデオキシ-２-チオ-Ｄ-グリセロ-α-Ｄ-ガラクト-２-ノヌロピラノソネート(Ａ．ハセガワ、Ｊ．ナカムラおよびＭ．キソ、ジャーナル・オブ・カルボハイドレート・ケミストリー、５(１)、１１-１９１９８６(１００ｍｇ)のドライジメチルホルムアミド(１ｍｌ)溶液へ、８-ブロモオクタン酸 (４１ｍｇ)およびジエチルアミン(２８０ｍｇ)を添加しこの溶液を２０℃にて１７時間攪拌した。溶媒を真空下で除き、残査をエチルアセテートと氷冷(５℃)塩酸にて分離した。有機層を水で洗浄し、硫酸ナトリウムにて脱水し、エバポレーションして残査を得た(１３０ｍｇ)。残査をエチルアセテート(５ｍｌ)に溶解し、Ｎ-ヒドロキシスクシンイミド(２６ｍｇ)とジシクロヘキシルカルボジイミド( ４６ｍｇ)を添加した。混合物を２０℃にて１７時間攪拌し、次いで白色析出物を濾過して除いた。濾液を濃縮し、シリカゲル上フラッシュクロマトグラフィーによって、エチルアセテートにて溶出させて精製した。生成物を含有するフラクションをあわせ、エバポレーションを行い９７ｍｇの白色泡を得た(７１％)。ポリＬ-リシンＨＢｒ(分子量１５０-３００Ｋｄ)(２２ｍｇ)のドライジメチルスルホキシド(１ｍｌ)溶液中へ、ジイソプロピルエチルアミン(１５ｍｇ)とメチル［(８-オクタノイックアシッドＮ-ハイドロスクシンイミドエステル)５-アセトアミド-４,７,８,９-テトラ-Ｏ-アセチル-３,５-ジデオキシ-２-チオ-Ｄ-グリセロ-α-Ｄ-ガラクト-２-ノヌロピラノシド］オネート(９０ｍｇ)を添加した。混合物をアルゴン雰囲気下、２０℃、で６０時間混合し、次いで溶媒を真空下で除いた。残査を新たに作成した０.５Ｍのナトリウムメトキシドのメタノール溶液(４ｍｌ)中へ溶解させ、混合物を４８時間アルゴン雰囲気下、２０℃にて攪拌した。溶媒を蒸発させて、残査を水(１．５ｍｌ)に溶解し、２４時間攪拌した。溶液をセファデックスＬＨ２０、サイズ排除クロマトグラフィーにかけ、水で溶離した。凍結乾燥した後、生成物、ポリＬ-リシル［(８-オクタンアミド)-５-アセトアミド-３,５-ジデオキシ-２-チオ-Ｄ-グリセロ-α-Ｄ-ガラクト-２-ノヌロピラノシドイックアシッド］_n４９ｍｇを白色粉末として得た(９４％)。実施例４末端が３，５-ジカルボキシフェニルチオウレアナトリウムであるポリリシンの調製ポリＬ-リシンハイドロブロマイド(4４-１５Ｋｄ(シグマ・ケミカル・カンパニー)(５０ｍｇ)の水溶液(２ｍｌ)へ、３,５-ジカルボキシフェニルイソチオシアネートナトリウム(３０５ｍｇ)の水溶液(３ｍｌ)を添加し、得られた溶液のｐＨを重炭酸ナトリウム水溶液にて９に調節した。溶液を次いで窒素雰囲気下、５３℃に４時間、加熱した。溶液を冷却し、濾過し、濾液を濃縮してオフホワイト色の固体を得た。粗性生物をゲル濾過(セファデックスLH２０：水)によって精製し、凍結乾燥して、末端が３，５-ジカルボキシフェニルチオウレアナトリウムであるポリ-Ｌ-リシンを白色綿状固体として得た(７１ｍｇ)。実施例５末端が４−(ホスホノメチル)フェニルチオウレアデアルポリリシンの調製固形４−(ホスホノメチル)フェニルイソチオシアネート(２３１ｍｇ；１.０ｍｍｏｌ)を、ポリ-Ｌ-リシンハイドロブロマイド(３０-７０Ｋ)(シグマ・ケミカル・カンパニー)(５０ｍｇ)の１：１ピリジン／水混合溶媒溶液内へ添加した。１Ｍ炭酸ナトリウムにて混合物のｐＨを９.５に調節し、溶液を窒素雰囲気下、５３℃にて一晩加熱した。混合物を冷却、濾過し、濾液を濃縮して褐色の固体残査を得た。粗性生物をゲル濾過(セファデックスＬＨ２０；水)により精製し、褐色の固体を得た（８２ｍｇ）。実施例６末端が１-ホスホノ-オキシフェニル-４-チオウレアナトリウムである、ポリＬ- リシンの調製ポリ-Ｌ-リシンハイドロブロマイド(５０ｍｇ，シグマＰ２６３６、３０−７０キロダルトン)の水溶液(１０ｍｌ)を、５３℃に加熱、攪拌したものへ、４-ホスホノーオキシフェニル-イソチオシアネート(１５３mg)を添加し、混合物のｐＨを１Ｍ重炭酸ナトリウムにて９.５-１０へ調節した。混合物を５３℃に加熱し、５時間攪拌した後、濾過した。透明な溶液をセファデックスLH２０上でゲル濾過し、水で溶離して精製した。溶離物を凍結乾燥して、生成物を白色泡として得た。７７ｍｇ，９４％。実施例７末端がベンズアミド-４-ホウ酸であるポリ-Ｌ-リシンの調製ポリ-Ｌ-リシンハイドロブロマイド(５０ｍｇ、シグマＰ２６３６、３０-７０キロダルトン)のＤＭＳＯ溶液(１０ｍｌ)へ、不活性雰囲気下で、４-カルボキシフェニルホウ酸Ｎ-ヒドロキシスクシンイミドエステル(９０ｍｇ)と１Ｍの炭酸ナトリウム溶液(２ｍｌ)を添加し、混合物を２０℃にて６０時間攪拌した。溶媒を真空下で除き、残査を水(５ｍｌ)に溶解し、濾過した。透明な溶液をセファデックスＬＨ２０上でゲル濾過し、水で溶離させて精製した。溶離物を凍結乾燥して、白色泡の生成物を得た。５０ｍｇ、９０％。実施例８抗ウイルス活性試験本発明のポリイオン性直鎖状ポリマーのＨＩＶ１、ヒトおよびマウスＣＭＶ、ＨＳＶ１および２およびヒトインフルエンザＡに対する抗ウイルス活性試験の結果を表１から４へそれぞれ示した。表５は、実施例１の化合物の広い範囲のウイルスに対する抗ウイルス活性を示す。表６および７は実施例２および３それぞれの化合物のＲＳＶ、ＭＶおよびインフルエンザウイルスに対する抗ウイルス活性を示す。標準的な試験手順に従い、試験した細胞の少なくとも５０％をウイルスの影響から保護する試験化合物の濃度である、試験化合物の有効濃度(ＥＣ₅₀)として、抗ウイルス活性を測定した。さらに、試験化合物の細胞に対する安全性も要求されるため、細胞毒性(ＣＣ₅₀)を、非感染細胞の５０％を殺す試験化合物の濃度として、測定した。総合的な抗ウイルス活性は、選択性インデックス、即ちＳＩ＝ＣＣ₅₀/ＥＣ₅₀にて表示し得る。表１ＢＲＩ直鎖状ポリマーのＨＩＶに対する抗ウイルス活性標準表２培養細胞における、サイトメガロウイルス(デイビス株)に対する抗ウイルス活性。ＨＣＭＶ＝ヒトサイトメガロウイルス；ＭＣＭＶ＝マウスサイトメガロウイルスヒト胎児肺細胞(HEL)、ヒト包皮繊維芽細胞(HFF)およびマウス胎児ファイブロブラスト(MEF)を用いて試験した。ＥＣ₅₀ＣＰＥ＝ウイルスの細胞変性作用を50％減少させるのに必要な、抑制濃度ＣＰ₅₀＝ＨＥL細胞の増殖を50％減少させるのに必要な、細胞毒性濃度。表３培養細胞におけるヘルペス単純ウイルス１および２に対する抗ウイルス効果 HSV-1=ヒト単純ヘルペスウイルス-１(粘膜ヘルペス) HSV-2=ヒト単純ヘルペスウイルス-２(陰部ヘルペス) ヒト包皮繊維芽細胞(HFF)にて試験した。ＥＣ₅₀ＣＰＥ＝ウイルスの細胞変性作用を50％減少させる、抑制濃度ＥＣ₅₀プラーク減少＝ウイルスのプラークを50％減少させる、抑制濃度ＣＣ₅₀＝細胞の増殖を50％減少させる、細胞毒性濃度表４ＢＲＩ６１５０ポリ-Ｌ-リシン（５９０Ｋ平均(ＮＨＣＯ[ＣＨ₂]₇-)-ＸインフルエンザＡウイルスの２株に対する、抗ウイルス活性表５ポリ-Ｌ-リシン(ＮＨＣＳＮＨＰｈＳＯ₃Ｎａ)x２６-Ｋ-５３Ｋウイルス：ＲＳＶ＝呼吸器合胞体ウイルスＨＳＶ＝単純ヘルペスウイルス(１型＝粘膜；２型＝陰部）ＣＭＶ＝サイトメガロウイルスＶＺＶ＝水痘帯状疱疹ウイルスＭＣＭＶ＝マウスサイトメガロウイルスＦｌｕＡ＝インフルエンザＡウイルスＦｌｕＢ＝インフルエンザＢウイルスＨＩＶ−１および２＝ヒト免疫不全ウイルスタイプ１および２用語：ＣＰＥ=感染細胞上の細胞変性作用または細胞毒性（ＣＣ₅₀）を測定する際には、化合物単独での、細胞に対する作用表６ポリ-Ｌ-リシンＣＯＮＨ.ＣＨ₂ＣＨ₂ＮＨＣＳＮＨ[ナフス-３,６-(ＳＯ₃Ｎａ)₂] ３７Ｋ−７５Ｋ表７ポリ-Ｌ-リシン-{ＮＨ.ＣＯ.(ＣＨ₂)₇Ｓ-[２,５−アセチルノイラミン酸] }ｘ（５９０Ｋ）

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 31/16 Ａ６１Ｐ 31/18 31/18 31/20 31/20 31/22 31/22 Ａ６１Ｋ 37/02 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ

Claims

【特許請求の範囲】１.複数の側鎖基を有し、側鎖基の少なくともひとつにアニオン性またはカチオン性部分が結合又は連結している、直鎖状非炭水化物ポリマーを含有する抗ウイルス性化合物。２.一般式Ｉ（式中、Ｒは直鎖状ポリマー骨格を形成している非炭水化物モノマーユニットである、ＸはモノマーユニットＲの側鎖基上の、任意の連結基である、Ａはアニオン性含有部分である）で示される直鎖状ポリマーを含有する、請求項１の化合物。３.直鎖状ポリマーの分子量分布のメジアン値が１，０００から１，０００，０００である、請求項２記載の化合物。４.分子量分布のメジアン値が１０，０００から６００，０００である、請求項３記載の化合物。５.モノマーユニットＲがアミン又はアミド部分である、請求項２記載の化合物。６.モノマーユニットＲがリシンまたは他のものである、請求項５記載の化合物。７.連結基Ｘが存在する場合、これがエステル、アミド、エーテル、チオエーテル、アミン、ウレア、チオウレア、カーバメートおよびカーボネートからなる群から選択される連結性官能基である、請求項２記載の化合物。８.連結基Ｘが存在する場合、任意に置換又は分岐していて良いアルキル鎖；アルコキシ、ポリアルコキシ、任意に置換されていてよい、アルキルチオまたはポリアルキルチオ鎖；アルケニル、多価アルケニル、任意に置換されていてもよいアルキニル又は多価アルキニル鎖；および式-(-ＣＨ₂)_n-２-(-ＣＨ₂)_n-(式中、Ｃは-ＣＨ₂-、-ＣＨ=ＣＨ-、-Ｃ≡Ｃ-、-Ｏ-または-Ｓ-である。ｎは１から１５の間の整数である）からなる群、から選択されるスペーサー基である、請求項２記載の化合物。９.アニオン性又はカチオン性部分が、直鎖状ポリマーのアミン、スルフヒドリル、ヒドロキシ、又は他の側鎖反応性官能基とアミド又はチオウレア結合にて結合している、請求項１から８いずれかに記載の化合物。１０.アニオン性含有部分が、スルホン酸含有部分、ノイラミン酸およびシアル酸、修飾ノイラミン酸およびシアル酸含有部分を含むカルボン酸含有部分、ホウ酸含有部分、およびエステル化リン酸およびホスホン酸含有部分を含む、リン酸およびホスホン酸含有部分、からなる群から選択される、請求項１から９いずれかに記載の化合物。１１.側鎖基のアミノ又は他の反応性官能基に結合している部分が、以下の式(式中、Ｎはゼロまたは正の整数を示す)からなる群から選択される、請求項１から９いずれかに記載の化合物： ―NH(CH₂)_nSO₃ ^- ―(CH₂)_nSO₃ ^- ―AR(SO₃ ^-)_n ―CH₂CH(SO₃ ^-)COOH ―CH(SO₃ ^-)CH₂COOH ArX(CH₂)_nSO₃ ^- X=O,S,NH ―(CH₂)_n ⁺NMe₃ ―Ar(N⁺Me₃)_n ―Ar(CH₂N⁺Me₃)_n ―ArXP(=O)(OR)₂ X=O，CH₂，CHF，CF₂R=アルキル、アリール、H，Na ―ArXP(=O)(OR¹)(NR²R³) X=O，CH₂，CHF，CF₂ R¹=アルキル、アリール,H，Na 、R²，R³=アルキル、アリール ―Ar[P(=O)(OR)₂]_n R=アルキル、アリール、H，Na n=1-3 ―Ar[B(OH)₂]_n n=1-3 ―Ar[COOH]_n n=1-3 １２.以下の群から選択される、請求項１または２記載の化合物: ｉ末端が４−スルホフェニルチオウレアであるポリＬ−リシン ii 末端が３，６−ジスルホナフチルチオウレアである、ポリ-Ｌ-リシン； iii 末端が(８-オクタンアミド)-５-アセトアミド-３,５-ジデオキシ-２- チオ-Ｄ−グリセロ-α-Ｄ−ガラクト-２-ノヌロピラノシディックアシッドである、ポリ-Ｌ-リシン； iv 末端が３,５-ジカルボキシフェニルチオウレアである、ポリ-Ｌ-リシン； v 末端が４−(ホスフォノメチル)フェニルチオウレアである、ポリ-Ｌ-リシン； vi 末端が１−ホスホノオキシフェニル-４−チオウレアである、ポリ-Ｌ- リシン； vii 末端が、ベンズアミド-４−ホウ酸である、ポリ-Ｌ-リシン。１３.請求項１から１２に記載の化合物のいずれかを、少なくとも１の薬学または獣医学上許容される担体もしくは希釈剤と共に含有する、ヒトまたは非ヒト動物の予防的又は治療的抗ウイルス処置のための医薬または獣医薬組成物。１４.請求項１から１２いずれかに記載の化合物の予防的もしくは治療的抗ウイルス有効量を、ヒト又は動物に投与することを含む、ヒトまたは非ヒト動物の予防的もしくは治療的抗ウイルス処置方法。１５.抗ウイルス処置が、ＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２、Ｂ型またはＣ型肝炎、ウシウイルス性下痢ウイルス、日本脳炎ウイルス（ＪＥＶ）、ヒトインフルエンザウイルスＡおよびＢ、ライノウイルス、コロナウイルス、ヒトパラインフルエンザウイルス、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＳＶ）、ヒトサイトメガロウイノレス（ＣＭＶ）、エプステインバーウイノレス（ＥＢＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、アデノウイルス、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）１型および２型、麻疹ウイルス、または水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）による感染に対する処置である、請求項１４記載の方法。１６.ヒト又は非ヒト動物の予防的または治療的抗ウイルス処置のための、または、ヒト又は非ヒト動物の予防的または治療的抗ウイルス処置のための医薬粗性物を製造するための、請求項１から１２いずれかに記載の化合物の使用。