JP2000511765A - 精製SR―p70タンパク質 - Google Patents
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Description
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- 【特許請求の範囲】 1. a)配列番号2の配列; b)配列番号4の配列; c)配列番号6の配列; d)配列番号8の配列; e)配列番号10の配列; f)配列番号13の配列; g)配列番号15の配列; h)配列番号17の配列; i)配列番号19の配列; およびj)配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番号8、配列番号10、 配列番号13、配列番号15、配列番号17または配列番号19から由来のいず れかの生物学的に活性な配列 よりなる群から選択されたアミノ酸配列を含む精製されたペプチド。 2.配列番号6、配列番号13、配列番号15、配列番号17および配列番号 19よりなる群から選択されたアミノ酸配列を含むことを特徴とする請求項1記 載のポリペプチド。 3.‐配列番号2または6の残基110〜残基310; ‐配列番号8の残基60〜残基260 に位置する配列を含むことを特徴とする請求項1記載のポリペプチド。 4.対応する遺伝子のメッセンジャーRNAの別法でのスプライシングの結果 生じることを特徴とする請求項1記載のポリペプチド。 5.融合タンパク質の形態で製造される組換えポリペプチドであることを特徴 とする、前記の請求項のいずれか1項記載のポリペプチド。 6.前記の請求項のいずれか1項記載のポリペプチドをコードする単離された 核酸配列。 7.請求項6記載の単離された核酸配列であって: a)配列番号1の配列; b)配列番号3の配列; c)配列番号5の配列; d)配列番号7の配列; e)配列番号9の配列; f)配列番号11の配列; g)配列番号12の配列; h)配列番号14の配列; i)配列番号16の配列; j)配列番号18の配列; k)配列番号1、配列番号3、配列番号5、配列番号7、配列番号9、配列番 号11、配列番号12、配列番号14、配列番号16もしくは配列番号18の配 列またはそれらに相補的な配列と特異的にハイブリダイズする、あるいはそれら の隣接する配列と特異的にハイブリダイズすることができる核酸配列; およびl)遺伝コードの縮重、突然変異、欠失、挿入、および別法のスプライシ ングまたは対立遺伝子変異性の結果として、配列a)、b)、c)、d)、e)、f) 、g)、h)、i)、j)またはk)から得られた配列 よりなる群から選択されることを特徴とする核酸配列。 8.請求項6記載の核酸配列であって、各々、配列番号6、配列番号13、配 列番号15、配列番号17および配列番号19の配列のポリペプチドをコードす る配列番号5、配列番号12、配列番号14、配列番号16および配列番号18 から選択される配列であることを特徴とする核酸配列。 9.請求項6〜8のいずれか1項記載の核酸配列を含むコーディングおよび/ または発現ベクター。 10.プラスミドpSE1であることを特徴とする請求項9記載のベクター。 11.請求項9または10記載のベクターによてトランスフェクトされた宿主 細胞。 12.イー・コリMC 1061であることを特徴とする請求項11記載のトランス フェクトされた宿主細胞。 13.請求項6〜8記載の配列またはそれらに相補的な配列または対応するメ ッセンジャーRNAまたは対応する遺伝子のうちいずれか1つと、ストリンジェ ントな条件下で特異的にハイブリダイズすることを特徴とする、ヌクレオチドプ ローブまたはヌクレオチドプライマー。 14.少なくとも16個のヌクレオチドを含むことを特徴とする請求項13記 載のプローブまたはプライマー。 15.請求項13記載のプローブまたはプライマーであつて、請求項1のポリ ペプチドの1つをコードする遺伝子の配列の全てを含むことを特徴とするプロー ブまたはプライマー。 16. で示されるオリゴヌクレオチドまたはそれらに相補的な配列よりなる群から選択 されるヌクレオチドプローブまたはプライマー。 17.請求項6〜8のいずれか1項記載の配列の使用であって、配列決定反応 あるいはPCR技法またはそのいずれかの変法による特異的増幅反応のためのオ リゴヌクレオチドプライマーの製造に関する使用。 18.以下の配列: よりなる群から選択されたプライマーを含むことを特徴とするヌクレオチドプラ イマー対。 19.遺伝子治療に使用できる請求項6〜8のいずれか1項記載の配列の使用 。 20.請求項6〜8のいずれか1項記載の配列の使用であって、診断上のヌク レオチドプローブまたはプライマー、あるいは遺伝子治療に使用できるアンチセ ンス配列の製造に関する使用。 21.配列決定に関する請求項6〜8のいずれか1項記載のヌクレオチドプラ イマーの使用。 22.請求項13〜16のいずれか1項記載のプローブまたはプラィマーの使 用であって、ハイブリダイゼーション実験による生物学的試料における請求項1 〜4のいずれか1項記載のポリペプチドをコードする核酸配列の検出のための、 または異常型の合成もしくは遺伝子異常の証明のためのイン・ビトロでの診断道 具としての使用。 23.請求項1〜4のいずれか1項記載のポリペプチドをコードする核酸配列 における異常型の合成または遺伝子異常の検出のためのイン・ビトロでの診断方 法であって: ‐適当には前記のヌクレオチド配列の増幅の前工程後に、請求項13〜16の いずれか1項記載のヌクレオチドプローブと前記のヌクレオチド配列との間のハ イブリダイゼーション複合体の形成を可能にする条件下で、該プローブを生物学 的試料へ接触させること; ‐おそらく形成されるハイブリダイゼーション複合体の検出; ‐適当には、本発明のプローブとハィブリダイゼーション複合体を形成するヌ クレオチド配列の配列決定 を含むことを特徴とする方法。 24.請求項6〜8のいずれか1項記載の核酸配列の使用であって、請求項1 〜5のいずれか1項記載の組換えポリペプチドの製造に関する使用。 25.組換えSR-p70タンパク質の製造方法であって、請求項10または11に 記載のトランスフェクト細胞を、配列番号2、配列番号4、配列番号6、配列番 号8、配列番号10、配列番号13、配列番号15、配列番号17または配列番 号19の配列またはいずれかの生物学的に活性なフラグメントもしくは誘導体の 組換えポリペプチドの発現を可能にする条件下で培養すること、および該組換え ポリペプチドを回収することを特徴とする方法。 26.請求項1〜4のいずれか1項記載のポリペプチドを特異的に認識できる ことを特徴とする、モノ−またはポリクローナル抗体またはそれらのフラグメン ト、キメラ抗体またはイムノコンジュゲート。 27.前記の請求項記載の抗体の使用であって、生物学的試料において請求項 1〜4のいずれか1項記載のポリペプチドの精製または検出に関する使用。 28.生物学的試料由来のSR-p70タンパク質の発現または異常な蓄積に相関す る病状、特に発癌現象のイン・ビトロでの診断方法であって、請求項25記載の 少なくとも1つの抗体を、SR-p70タンパク質と該抗体または複数の抗体間の特異 的免疫学的複合体の可能な形成を可能にする条件下で該生物学的試料に接触させ ること、およびおそらく形成される特異的免疫学的複合体を検出することを特徴 とする方法。 29.生物学的試料においてSR-p70タンパク質の発現または異常な蓄積をイン ・ビトロで診断するための、および/または該試料においてこれらのタンパク質 の発現レベルを測定するためのキットであって: ‐支持体に結合されていてもよい、請求項25記載の少なくとも1つの抗体 ‐SR-p70タンパク質と該抗体間の特異的抗原-抗体複合体の形成の視覚化方法 、および/またはこれらの複合体の定量方法 を含むキット。 30.腫瘍形成の初期診断方法であって、支持体に結合されていてもよい本発 明のポリペプチドと個体から得られた血清試料中におそらく存在する自己抗体間 の特異的免疫学的複合体の形成を可能にする条件下で、血清試料を該ポリペプチ ドに接触させることよりなる工程によつて、SR-p70タンパク質に向けられた自己 抗体を個体から得られた血清試料において証明すること、およびおそらく形成さ れる特異的免疫学的複合体を検出することを特徴とする方法。 31.対立遺伝子変異性、突然変異、欠失、挿入、ヘテロ接合性の喪失または SR-p70遺伝子の遺伝子異常の決定方法であって、請求項6〜8のいずれか1項記 載の少なくとも1つのヌクレオチド配列を利用することを特徴とする方法。 32.病状を伴い得るエキソン2の開始ATGに関して−30および−20位 置でのSR-p70遺伝子の対立遺伝子変異性の決定方法であって、少なくとも: ‐標的配列を有するSR-p70遺伝子のエキソン2を請求項6〜8のいずれか1項 記載のオリゴヌクレオチドプライマー対を用いるPCRによって増幅する間の工 程; ‐切断部位が目的の対立遺伝子に対応する制限酵素で増幅産物を処理する間の 工程; ‐酵素反応の産物の少なくとも1つを検出またはアッセイする間の工程を含む ことを特徴とする方法。 33.請求項1〜4のいずれか1項記載のポリペプチドを活性素因として含む 医薬組成物。 34.請求項2記載のポリペプチドを含むことを特徴とする前記の請求項記載 の医薬組成物。 35.SR-p70活性の阻害剤または活性剤を含有する医薬組成物。 36.請求項1〜5のいずれか1項記載のポリペプチドから由来のポリペプチ ドを含有する医薬組成物であって、SR-p70の阻害剤または活性剤であることを 特徴とする医薬組成物。
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