JP2000501067A

JP2000501067A - 医薬化合物

Info

Publication number: JP2000501067A
Application number: JP9510549A
Authority: JP
Inventors: ムーア，リチャード・イー; ペイテル，ビノド・エフ; レイ，ジェイムズ・イー; トス，ジョン・イー
Original assignee: University of Hawaii; Eli Lilly and Co
Current assignee: University of Hawaii; Eli Lilly and Co
Priority date: 1995-08-30
Filing date: 1996-08-30
Publication date: 2000-02-02
Also published as: EP0850057A1; BR9610214A; WO1997007798A1; AU7109096A; AU709828B2; EP0850316A4; CA2246117A1; WO1997008334A1; CA2230540A1; AU6904896A; EP0850316A1; JP2000507805A; EP0850057A4

Abstract

(57)【要約】本発明は微小管システムの崩壊のため、抗新生物剤として、抗真菌剤として、および癌の治療のため、に有用なことのある新規クリプトフィシン化合物を提供する。本発明はさらにこの新規クリプトフィシン化合物を投与するための製剤も提供する。

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称医薬化合物発明の領域この発明は医薬品および有機化学の技術分野に関し、抗微小管薬剤として有用な新規クリプトフィシン（cryptophycin）化合物を提供する。発明の背景細胞増殖の正常な制御に従わない細胞増殖によって特徴付けられる新生物疾患はヒトおよび他の哺乳類における主たる死因の一つである。癌化学療法における臨床的体験はこれらの疾病を処置するためにはさらに効果の優れた新規な薬品が望ましいことを証明している。そのような臨床的体験は細胞骨格における微小管システムを崩壊させる薬剤は新生物細胞の増殖を阻止するために有効なものもありうることを証明している。真核細胞の微小管システムは細胞骨格の主たる成分の一つであって、形成および解体の動的な状態である。すなわちチューブリンのヘテロダイマーが重合して微小管を形成する。微小管は細胞の構造、代謝および分裂の調節において鍵となる役割を果たしている。微小管のこの動的状態はその正常な機能にとっては必須である。細胞分裂に関して言えばチューブリンが重合して微小管となり、これが有糸分裂紡錘体を形成する。次いで有糸分裂紡錘体の使用が終わるとこの微小管は脱重合する。従って、微小管の重合または脱重合を妨害し、従って有糸分裂を阻止する薬剤には臨床的使用における最も有効な癌化学療法剤をいくつか含む。これに加えて、本発明の化合物は殺真菌性を有する。さらに微小管システムを崩壊する性能を有する薬剤は研究目的のために有用でありうる。ある種のクリプトフィシン化合物は文献既知である。しかしながら、溶解性が改善され、強力な力価を有するクリプトフィシン化合物はほとんどの医薬的使用に対して望ましいものであって、広範囲なクリプトフィシン化合物の集団は処置の追加的な選択を提供できるであろう。本出願人はそのような望ましい溶解性を有する新規化合物ならびに微小管システムを崩壊する性能を有する新規化合物を今回発見した。そのような化合物は全合成法を使用して製造できるので医薬的に有用な薬剤として開発する目的によく適合するものである。発明の要約本発明は式Ｉ：［式中、Ａｒはフェニルまたは単なる非置換または置換の芳香族またはヘテロ芳香族基、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキンのいずれかである。Ｒ¹はハロゲン、ＳＨ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニウム、アルキルチオ、ジアルキルスルホニウム、スルフェート、またはホスフェートであってＲ²はＯＨまたはＳＨであるか、またはＲ¹およびＲ²が互いに結合して、エポキシ環、アチリジン環、エピスルフィド環、スルフェート環、シクロプロピル環、またはモノアルキルホスフェート環を形成してもよく、またはＲ¹およびＲ²が互いに結合して、Ｃ₁₈とＣ₁₉の間に第二の結合を形成してもよい。Ｒ³は低級アルキル基である。Ｒ⁴はＨである。Ｒ⁵はＨである。Ｒ⁴およびＲ⁵は互いに結合して、Ｃ₁₃とＣ₁₄の間に第二の結合を形成してもよい。Ｒ⁶はＢ環ヘテロ芳香族、置換ヘテロ芳香族、Ｂ環(Ｃ₁〜Ｃ₆)アルキル、(Ｃ₃ 〜Ｃ₈)シクロアルキル、置換Ｃ₃〜Ｃ₈シクロアルキル、置換(Ｃ₁〜Ｃ₆)アルキル、式III'：で示される基、および式ＩＩＩ”：で示される基から構成される群から選択される置換基である。Ｒ⁷はＮＲ⁵¹Ｒ⁵²、Ｒ⁵³ＮＲ⁵¹Ｒ⁵²、ＯＲ⁵³、Ｈ、および低級アルキル基から構成される群から選択される。Ｒ⁵¹およびＲ⁵²は独立にＣ₁〜Ｃ₃−アルキルから構成される群から選択され、Ｒ⁵³はＣ₁〜Ｃ₃−アルキルである。Ｒ⁸はＨまたは低級アルキル基である。Ｒ⁷およびＲ⁸は所望ならばシクロプロピル環を形成できる。Ｒ⁹はＨ、低級アルキル基、不飽和低級アルキル、および低級アルキル−Ｃ₃〜Ｃ₅−シクロアルキルから構成される群から選択される。Ｒ¹⁰はＨまたは低級アルキル基である。Ｒ⁹およびＲ¹⁰は所望ならば結合してシクロプロピル環を形成する。Ｒ¹¹はＨ、ＯＨ、単なるアルキル、フェニル、置換フェニル、ベンジルおよび置換ベンジルから構成される群から選択される。Ｒ¹⁴はＨまたは低級アルキル基である。Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、およびＲ¹⁷はおのおの独立して水素、(Ｃ₁〜Ｃ₆)アルキル、ＯＲ¹⁸ 、ハロ、ＮＲ¹⁸'Ｒ¹⁹'、ＮＯ₂、ＯＰＯ₄Ｈ₂、ＯＲ¹⁹フェニル、ＳＣＨ₂フェニル、ＣＯＮＨ₂、ＣＯ₂Ｈ、ＰＯ₃Ｈ₂、およびＳＯ₂Ｒ²³、およびＺＺから構成される群から選択される。Ｒ¹⁸は水素、アリール、およびＣ₁〜Ｃ₆−アルキルから構成される群から選択される。Ｒ¹⁸'は水素および（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキルから構成される群から選択される。Ｒ¹⁹はＣ₁〜Ｃ₆−アルキルである。Ｒ¹⁹'は水素および（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキルから構成される群から選択される。Ｒ²³は水素および（Ｃ₁〜Ｃ₃）アルキルから構成される群から選択される。Ｒ³⁰は水素またはＣ₁〜Ｃ₆−アルキルである。ｎは０、１、または２である。ｐは０、１、または２である。ｍは０、１、または２である。ＸはＯ、ＮＨ、およびアルキルアミノから構成される群から選択される。ＹはＯ、ＮＨ、およびアルキルアミノから構成される群から選択される。Ｚは−(ＣＨ₂)_n−、−(ＣＨ₂)_p−Ｏ−(ＣＨ₂)_m−、および(Ｃ₃〜Ｃ₅)シクロアルキルから構成される群から選択される。ＺＺは芳香族基および置換芳香族基から構成される群から選択される］で示される新規クリプトフィシン化合物またはその医薬的に許容される塩または溶媒和物を提供する。但し、Ｒ⁶が式ＩＩＩ’で示される基であって、ｎが１である時には、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶およびＲ¹⁷から構成される群の少なくとも１個は非水素基でなければならないものとする。また、但し、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶およびＲ¹⁷の中で１個のみがＯＨまたはＯＲ²⁹であって、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶およびＲ¹⁷から構成される群の１個がハロであるならば、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、およびＲ¹⁷から構成される群の残りの基は水素またはハロであってはならず、Ｒ²⁹は（Ｃ₁〜Ｃ₅）アルキルであるものとする。さらに、但し、この化合物は次の各式で示されるクリプトフィシン類：から構成される群から選択されるクリプトフィシンではないものとする。本発明は医薬的製剤、式Ｉで示される化合物を有効量使用して微小管システムを崩壊する方法、式Ｉで示される化合物を有効量投与することを含む哺乳類細胞の増殖を阻止する方法、および式Ｉで示される化合物を有効量投与することを含む哺乳類における新生物を処置する方法を提供する。発明の詳細な記載本明細書で使用する用語「単なるアルキル」はＣ₁〜Ｃ₇−アルキルを示すものとするが、ここにアルキルは飽和でも、不飽和でも、分枝でも、直鎖でもよい。これに限定するものではないが、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、プロペニル、２級ブチル、ｎ−ペンチル、イソブチル、３級ブチル、２級ブチル、メチル化ブチル基、ペンチル、３級ペンチル、２級ペンチル、メチル化ペンチル基、その他を含む。本明細書で使用する用語「Ｂ環Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル」は飽和、不飽和、分枝および直鎖のアルキルを示すが、ここではＢ環Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル基には非炭素置換基を３個まで含んでいてもよい。このような非炭素置換基は最も好適にはＯＨ、ＳＣＨ₂フェニル、ＮＨ₂、ＣＯ、ＣＯＮＨ₂、ＣＯ₂Ｈ、ＰＯ₃Ｈ₂、ＳＯ₂Ｒ²¹ から構成される群から選択される。ここにＲ²¹は水素およびＣ₁〜Ｃ₃−アルキルから選択される。本明細書で使用する用語「置換フェニル」は非炭化水素置換基を１個から３個有するフェニル基を示すものとするが、ここに非炭化水素置換基は単なるアルキル、Ｃl、Ｂr、Ｆ、およびＩから構成される群から独立に選択してもよい。本明細書で使用する用語「置換ベンジル」は非炭化水素置換基を１個から３個有するベンジル基を示すものとするが、ここに非炭化水素置換基は単なるアルキル、Ｃl、Ｂr、Ｆ、およびＩから構成される群から独立に選択してもよく、こここにこれらの置換基は可能な炭素原子のいずれに結合していてもよい。本明細書で使用する「Ｂ環ヘテロ芳香族基」は酸素、窒素、および硫黄から構成される群から選択される非炭素置換基を１個またはそれ以上含む芳香族環を示す。これに限定するものではないが、特に好適なＢ環ヘテロ環基は式：［式中、Ｒ²⁰は水素およびＣ₁〜Ｃ₆−アルキルから選択される］から構成される群から選択される。「Ｂ環ヘテロ芳香族基」が式：から構成される群から選択される置換基を示すことは特に好適である。本明細書で使用する「シクロアルキル」は飽和Ｃ₁〜Ｃ₈−シクロアルキル基を示すが、ここにこの基はＣ₁〜Ｃ₃−アルキル、ハロ、およびＯＲ²²から構成される群から選択される置換基をゼロ個から３個含んでいてもよい。ここにＲ²²は水素およびＣ₁〜Ｃ₃−アルキルから選択される。このような置換基は可能な炭素原子のいずれに結合していてもよい。シクロアルキルが置換または非置換シクロヘキシルを示すことは特に好適である。本明細書で使用する「低級アルコキシ基」は酸素原子に結合している炭素原子数１個から５個のアルキル基のいずれかを意味する。本明細書で使用する「低級アルキル基」は炭素原子数１個から５個のアルキル基を意味し、直線状および非直線状炭化水素鎖を含み、これに限定するものではないが、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、３級ブチル、２級ブチル、メチル化ブチル基、ペンチル、３級ペンチル、２級ペンチル、およびメチル化ペンチル基を含む。本明細書で使用する「アリル性置換アルケン」はアルキル置換を含む炭素原子数１個から７個を有するアルケンのいずれかを意味する。本明細書で使用する用語「不飽和低級アルキル」は前記に定義した低級アルキル基を意味し、ここにその不飽和低級アルキル置換基には二重結合１個から２個までが存在する。好適な不飽和低級アルキルの一つには−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ₂がある。用語「低級アルキル−Ｃ₃〜Ｃ₅−シクロアルキル」はＣ₃〜Ｃ₅−シクロアルキル基で置換されたＣ〜Ｃ−アルキルを示す。好適な低級アルキル−Ｃ₃〜Ｃ₅−シクロアルキル基には−ＣＨ₂−シクロプロピルがある。ここに、この基はクリプトフィシン骨格構造のＲ⁹にＣＨ₂を介して結合する。本明細書で使用する「エポキシ環」は骨格が炭素２個および酸素原子１個から構成される３員環を意味する。本明細書で使用する「アチリジン環」は骨格が炭素２個および窒素原子１個から構成される３員環を意味する。本明細書で使用する「スルフィド環」は骨格が炭素２個および硫黄原子１個から構成される３員環を意味する。本明細書で使用する「エピスルフィド環」は骨格が炭素２個および硫黄原子１個から構成される３員環を意味する。本明細書で使用する「スルフェート基」は炭素−炭素−酸素−硫黄−酸素骨格から構成され、さらにこの硫黄原子には追加的な酸素原子２個が結合している５員環を意味する。本明細書で使用する「シクロプロピル環」は骨格が炭素３個から構成される３員環を意味する。本明細書で使用する「モノアルキルホスフェート環」は炭素−炭素−酸素−燐− 酸素骨格から構成され、さらにこの燐原子に追加的な酸素原子２個が結合しているものである５員環を意味する。燐原子に結合するその追加的な酸素原子の中の１個は低級アルキル基を有する。本明細書で使用する「単なる非置換芳香族基」は４ｎ＋１電子を有する通常の芳香環を示し、これに限定するものではないが、例えばフリル、ピロリル、チエニル、ピリジル、その他の単環共役系またはこれに限定するものではないが、例えばインドリルまたはナフチルの双環共役系をなす。本明細書で使用する「単なる置換芳香族基」はハロゲンおよび低級アルキル基から構成される群から選択された１種の基で置換されたフェニル基を示す。本明細書で使用する「ヘテロ芳香族基」は酸素、窒素、および硫黄から構成される群から選択された非炭素置換基１個またはそれ以上を含む芳香族環を示す。本明細書で使用する「ハロゲン」または「ハロ」は歴史的にハロゲンとして知られている周期律表の群の構成員を示す。これに限定するものではないが、ハロゲン化の方法にはハロゲン化水素の付加反応、高温での置換反応、光ハロゲン化反応、その他を含み、これらの方法は熟練した専門家に知られている。本明細書で使用する用語「哺乳類」は高等脊椎動物の哺乳類綱を示すものとする。これに限定するものではないが、用語「哺乳類」にはヒトを含む。本明細書で使用する用語「処置」は指摘した病状の予防またはすでに定着している病状の緩和または排除を含む。この明細書で請求するクリプトフィシン化合物はヒトの患者の処置と同様に動物の健康目的のためにも有用であることができる。この発明の好適な特徴のいくつかを次に表の形式で示すが、ここではその特徴はこの発明の好適な態様を提供するために独立に選択してもよい。この発明は決して下記に記載する特徴に限定されるものではない：Ａ）Ｒ⁸がエチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルまたはイソペンチルであるもの。Ｂ）Ｒ⁷がエチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、またはイソペンチルであるもの。Ｃ）Ｒ⁷がＨであり、Ｒ⁸がメチルであり、Ｒ³がメチルであって、ＸおよびＹの双方がＯであることはないもの。Ｄ）Ｒ³がエチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチルまたはイソペンチルであるもの。Ｅ）Ｒ⁹がメチル、エチル、プロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、またはイソペンチルであるもの。Ｆ）Ｒ¹⁰がメチル、エチル、プロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、またはイソペンチルであるもの。Ｇ）クリプトフィシン化合物であって、ここにＣ−３、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ− １０、Ｃ−１６、Ｃ−１７およびＣ−１８（番号付けは前記式Ｉに示したものである）から構成される群から選択した基の少なくとも１個がＲ立体化学を有するもの。Ｈ）クリプトフィシン化合物であって、ここにＣ−３、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ− １０、Ｃ−１６、Ｃ−１７およびＣ−１８（番号付けは前記式Ｉに示したものである）から構成される群から選択した基の少なくとも１個がＳ立体化学を有するもの。Ｉ）Ａｒが水素、ハロゲン、および単なるアルキルから構成される群から選択した置換基を有するフェニルであるもの。Ｊ）ＹがＯである化合物。Ｋ）ＹがＯであり、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、およびＲ¹⁰がおのおの水素であり、およびＲ¹およびＲ²がエポキシドを形成する化合物。Ｌ）Ｒ⁷、Ｒ⁸がおのおの水素であるもの。Ｍ）Ｒ⁷およびＲ⁸がおのおの水素およびＣＨ₃から選択されるもの。Ｎ）ＹがＯであるもの。Ｏ）Ｒがメチル、エチル、ｎ−プロピル、およびフェニルから構成される群から選択されるもの。Ｐ）Ｒ¹およびＲ²がエポキシド環を形成するもの。Ｑ）ＸおよびＹの双方がＯであるもの。Ｒ）Ｒ⁴およびＲ⁵が二重結合を形成するもの。Ｓ）ｎが０であり、Ｒ⁶が置換ベンジルであって、その置換基１個がハロゲンであり、もう一つがＯＲ¹²基であるもの。ここにＲ¹²は低級アルキルである。Ｔ）式Ｉで示される化合物を微小管システムの崩壊のために使用すること。Ｕ）式Ｉで示される化合物を抗新生物薬剤として使用すること。Ｖ）式Ｉで示される化合物を哺乳類における癌の処置のために使用すること。Ｗ）式Ｉで示される化合物を抗糸状菌薬剤として使用すること。Ｘ）Ｒ⁶が式ＩＩＩ’であって、ｐ−ヒドロキシ置換されているもの。Ｙ）Ｒ⁶が式：から構成される群から選択されるもの。Ｚ）Ｚが−（ＣＨ₂）_n−であるもの。ここにｎは０である。ＡＡ）Ｚが−（ＣＨ₂）_n−であるもの。ここにｎは２である。ＢＢ）Ｚが−（ＣＨ₂）_n−であるもの。ここにｎは１である。ＣＣ）Ｒ⁶が式III’であるもの。ＤＤ）Ｒ⁶が式III”であるもの。ＥＥ）Ｒ⁶がＣ₃〜Ｃ₆−シクロアルキルであるもの。ＦＦ）Ｒ⁶がＢ環ヘテロ芳香族、置換ヘテロ芳香族、Ｂ環アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、式III’および式III”から構成される群から選択されるもの。ＧＧ）Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、およびＲ¹⁷の少なくとも１個がＳＣＨ₂フェニル、ＮＨ₂、ＣＯ、ＣＯＮＨ₂、ＣＯ₂Ｈ、ＰＯ₃Ｈ₂、およびＳＯ₂Ｒ^2Iから構成される群から選択されるもの。ここにＲ²¹は水素およびＣ₁〜Ｃ₃−アルキルから選択される。ＨＨ）Ａrがフェニルであるもの。ＩＩ）ＡｒがＯＨ、ＯＣＨ₃、ハロ、およびメチルから構成される群から選択した基１個または２個で置換されているフェニルであるもの。およびＪＪ）Ａrがナフチルであるもの。ＫＫ）Ｒ⁶がＺ基を有し、そのＺ基の第一炭素がクリプトフィシン分子への結合点に関して式：の基であるもの。ＬＬ）Ｒ⁶がヘテロ芳香族環であるもの。ＭＭ）Ｒ⁷がＮ(ＣＨ₃)₂、ＣＨ₂Ｎ(ＣＨ₃)₂から構成される群から選択されるもの。ＮＮ）Ｒ⁷がＣＨ₂ＯＣＨ₃であるもの。ＯＯ）Ｒ⁷がシクロプロピルであるもの。ＰＰ）Ｒ⁹がＣＨ₂シクロプロピルであるもの。ＱＱ）Ｒ⁹がＣＨ₂ＣＨ＝ＣＨ₂であるもの。本明細書が目指す化合物をさらに例示するために、次の特に好適な化合物の表を提供する。この例示は決してこれらに限定する目的ではない。Ｒ³がＣＨ₃であり、Ｒ⁴およびＲ⁵が結合して第二の結合を形成し、Ｒ¹⁴が水素であり、Ｒ³⁰が水素であり、Ｒ⁷およびＲ⁸がおのおのメチルであり、Ｒ¹⁰が水素であり、Ｒ⁹が−ＣＨ₂ＣＨ(ＣＨ₃)₂であり、ＸおよびＹが各々Ｏであり、Ａrがフェニルであって、Ｒ¹、Ｒ²およびＲ⁶が下記に表示するもの：追加的な好適化合物は、Ａｒがフェニルでなくて式：で示される基である点を除外すれば、前記の通りの化合物である。別の好適化合物は、Ａrが式：で示される基である点を除外すれば、前記の通りの化合物である。本発明は対象に本明細書に開示する医薬的または動物薬的組成物の有効量を投与して細胞の増殖を阻止することを含む哺乳類細胞の過剰増殖に起因する病理学的状態を緩和する方法を提供する。この発明の好適な態様においては、本方法はさらに病理学的状態の緩和を指向する少なくとも１種の追加的治療剤を対象に投与することを含む。本発明の好適な態様において、この病理学的状態は新生物の形成によって特徴付けられる。本発明のさらに好適な態様においては、この新生物は乳腺、肺臓の小細胞、肺臓の非小細胞、結腸直腸、白血病、黒色腫、膵臓の腺癌、中枢神経系(ＣＮＳ)、卵巣、黄体、軟組織または骨の肉腫、頭部および頚部、膵臓および食道を含む消化器、胃、骨髄腫、膀胱、腎臓、甲状腺および非ホジキン病およびホジキン病を含む神経内分泌の新生物から構成される群から選択される。本明細書で使用する「新生物性」は新生物を示し、これは異常増殖であって、この増殖は通常の増殖の限界に従わない細胞の増殖のために起きるものである。本明細書で使用する「抗新生物薬剤」は新生物表現型の細胞を阻止し、除去し、抑制し、または逆転する、化合物、組成物、混合物、共混合物、または配合物のいずれかである。抗有糸分裂剤は作用の分子的機構に基づいて、三群に分類されることがある。第一の群はコルヒチンおよびコルセミドを含む薬剤から構成され、これはチューブリンを差押ることによって微小管の形成を阻止する。第二の群はビンブラスチンおよびビンクリスチンを含む薬剤から構成され、これはチューブリンの準結晶性凝集体の形成を誘導する。ビンブラスチンおよびビンクリスチンはよく知られている抗癌剤であって、有糸分裂紡錘体の微小管を崩壊するそれらの作用は過剰増殖細胞を優先的に阻害する。第三の群はタキソールを含む薬剤から構成され、チューブリンの重合を促進し、微小管を安定化する。多数の腫瘍細胞による薬剤耐性および多剤耐性表現型の発現および新生物細胞に対する臨床的に証明された抗微小管薬剤の作用機構は、非薬剤耐性新生物細胞に対して細胞傷害性があり、同様に薬剤耐性表現型を持つ新生物細胞に対しても細胞傷害性のある抗微小管薬剤の開発を要請している。化学療法、外科手術、放射線療法、生物反応調節剤、および免疫療法が最近の癌治療に使用されている。各療法には当技術分野の通常の熟練者に知られている特定的適応があり、新生物細胞の完全な破壊に達することを目指してその１部または全部を採用することがある。さらにその上、併用療法は一般に単一抗新生物薬剤の使用よりもさらに有効なので、式Ｉで示される化合物を別の新生物薬剤と組合せる併用化学療法も本発明が提供する。そこで、本発明の別の側面は前記利益を提供するのに役立つ非毒性付加塩を含めて式Ｉで示される化合物少なくとも１種の治療的有効量を含む組成物を提供する。かかる組成物はまた生理学的に許容できる液体、ゲル、または固体の担体、希釈剤、アジュバント、および添加剤とともに提供できる。このような担体、アジバント、および添加剤は米国薬局方第XXII版および米国民医薬品集第XVII版、U.S．Pharmacopeia Convention社、ロックビル、ＭＤ（１９８９年）にも見出される。これとは別の処置法はAmerican Hospital Formulary Service社による「ＡＨＦＳ医薬品情報(AHFS Drug Informa tion)」、１９９３年ｅの５２２〜６６０頁にも記載がある。これらの参考文献はいずれも熟練した専門家によく知られており、容易に入手できる。本発明はさらに新生物疾患を処置するために使用される式Ｉで示される化合物少なくとも１種および別の抗新生物薬剤少なくとも１種を含有する医薬的組成物を提供する。式Ｉで示される化合物と組合せて利用することのある抗新生物薬剤にはMerck社「メルクインデックス(Merck Index)」１１版、１６〜１７頁（１９８９年）に提供されているものを含む。このメルクインデックスは広く認識されており、熟練した専門家には容易に入手できる。この発明の別の態様において、抗新生物薬剤は抗代謝剤であってもよく、決してこれらに限定するものではないが、これにはメトトレキセート、５−フルオロウラシル、６−メルカプトプリン、シトシンアラビノシド、ヒドロキシ尿素、および２−クロロデオキシアデノシンから構成される群から選択されるものを含むこともある。本発明の他の態様においては、意図する抗新生物薬剤はアルキル化薬剤であって、決してこれらに限定するものではないが、これにはサイクロホスファミド、メファラン、ブスルファン、パラプラチン、クロロアンブシル、およびナイトロゲンマスタードから構成される群から選択されるものを含むこともある。さらに別の態様において、この抗新生物薬剤は植物アルカロイドであって、決してこれらに限定するものではないが、これにはビンクリスチン、ビンブラスチン、タキソール、およびエトポシドから構成される群から選択されるものを含むこともある。本発明の別の態様においては、意図する抗新生物薬剤は抗生物質であり、決してこれらに限定するものではないが、これにはドキソルビシン、ダウノルビシン、マイトマイシンＣ、およびブレオマイシンから構成される群から選択されるものを含むこともある。さらに別の態様においては、意図する抗新生物薬剤はホルモンであって、決してこれらに限定するものではないが、これにはカルステロン、プロピオン酸ジオモスタボロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン、タモキシフェン、燐酸ポリエストラジオール、酢酸メガステロール、フルタミド、ニルタミド、およびトリロタンから構成される群から選択されるものを含むこともある。さらに別の態様では、意図する抗新生物薬剤は酵素を含み、決してこれらに限定するものではないが、これにはＬ−アスパラギナーゼと、決してこれらに限定するものではないがアムサクリンのようなアミノアクリジン誘導体とから構成される群から選択されるものを含むこともある。その他の抗新生物薬剤にはLittle Brown社の「癌化学療法ハンドブック(Handbook of Cancer Chemotherapy)」、第３版（１９９１年）のSkeel，Roland T．執筆「抗新生物剤および生物反応修飾剤：臨床的に使用される薬剤の分類、使用および毒性(Antineoplastic Drugs an d Biologic Response Modifier:Classification,Use and Toxicity of Clinical ly Useful Agents)」に記載のものを含む。これらの化合物および組成物は動物薬的使用のために哺乳類に投与することもできる。例えば家畜動物は臨床的なヒトの患者と殆ど同じ様式で処置することができる。一般に治療的効果に必要な用量は使用の型、投与の様式、ならびに各対象の特定的な必要性に従って変化するものである。典型的には用量は約０.００１から１０００mg／対象体重kg、さらに通常には０.０１から１０mg／対象体重k gの範囲にあるものである。あるいは、これらの範囲内の用量を所期の治療効果が得られるまで通常は２４時間を超える長時間にわたって定常的に投与することもできる。実際、薬剤用量ならびに投与経路は相対的有効性、相対的毒性、腫瘍の増殖特性および細胞周期に対する式Ｉで示される化合物の効果、薬剤の薬動力学、患者の年齢、性別、体力的状況、および以前の処置に基づいて選択されなければならず、これらは熟練した専門家が決定できるものである。式Ｉで示される化合物は追加的抗新生物薬剤の存否にかかわらず、そのままでまたは塩の形で治療用組成物に製剤化してもよい。医薬的に許容される非毒性塩には塩基付加塩を含むが、たとえばナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、または鉄の水酸化物のような無機塩基、およびたとえばイソプロピルアミン、トリエチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカイン、その他のような有機塩基から誘導してもよい。このような塩はまた、遊離のカチオン性基とともに酸付加塩として形成することもあり、一般的にはたとえば塩酸または燐酸のような無機酸またはたとえば酢酸、シュウ酸、クエン酸、マンデル酸、その他のような有機酸とともに形成するものである。本発明がさらに熟練した専門家に提供するその他の添加剤は例えば米国薬局方に見出される。所与の治療用組成物中に含ませるべき特定的担体の適合性は好適な投与経路に依存する。例えば、抗新生物性組成物は経口投与用に製剤化することもある。このような組成物は典型的には液体の液剤または懸濁液剤または固体の形で調製される。経口投与剤は通常、例えば結合剤、増量剤、担体、保存剤、安定化剤、乳化剤、緩衝剤、マンニトール、ラクトース、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルルース、炭酸マグネシウム、その他のような添加剤を含む。これら組成物は液剤、懸濁剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、持続放出剤、または粉剤の剤型であってもよく、典型的には活性成分を１％から９５％まで含む。より好ましくはこの組成物は約２％から約７０％の活性成分を含む。本発明の組成物は液体の液剤、懸濁剤、または乳化剤として、または注射直前に液体に溶解または懸濁するのに適する固体としてのいずれか注射剤として調製することもある。このような注射剤は皮下、血管内、腹腔内、筋肉内、髄腔内、または胸膜内に投与することもある。単数または複数の活性成分は生理学的に許容され、活性成分と適合する希釈剤、担体または添加剤と混合することが多い。適当な希釈剤および添加剤は、例えば水、食塩水、デキストロース、グリセリンまたはその他およびこれらの組合せである。所望なら、これに加えて組成物には例えば湿潤剤または乳化剤、安定化剤、またはｐＨ緩衝剤のような少量の助剤を含めてもよい。本発明はさらに哺乳類細胞の増殖を阻止するためにこれらの細胞を式Ｉで示される化合物の哺乳類細胞の増殖阻止に十分な量と接触することによる式Ｉで示される化合物の使用方法を提供する。好適な態様は過剰増殖する哺乳類細胞の増殖を阻止する方法である。この発明の目的について「過剰増殖する哺乳類細胞」は増殖の特徴的な限界（例えばプログラムされた細胞死）に従わない哺乳類細胞である。さらに好適な態様はこの哺乳類細胞がヒトの細胞の場合である。本発明はさらにこの哺乳類細胞を式Ｉで示される化合物少なくとも１種および抗新生物薬剤少なくとも１種と接触させることを提供する。ここに意図する抗新生物薬剤の型については前記した。本発明はさらにこれらの細胞を過剰増殖哺乳類細胞の増殖阻止に十分な量の式Ｉで示される化合物と接触させることによって多剤耐性表現型を含む薬剤耐性表現型を有する過剰増殖細胞の増殖を阻止するために式Ｉで示される化合物を使用する方法を提供する。好適な態様はこの哺乳類細胞がヒトの細胞である場合である。この発明はさらに式Ｉで示される化合物少なくとも１種および前記のような別種の抗新生物薬剤少なくとも１種と接触させることを提供する。本発明は対象に有効量の式Ｉで示される化合物を含む医薬的組成物を過剰増殖細胞の増殖を阻止するために投与することによって、例えば新生物のような過剰増殖哺乳類細胞に起因する病理学的状態を緩和する方法を提供する。本明細書で使用する「病理学的状態」は正常な増殖限界に従わない哺乳類細胞の増殖に起因する病理のいずれかを示す。そのような細胞増殖は前記のような新生物に起因することもある。さらに好適な態様ではその新生物細胞がヒトの細胞である。本発明は式Ｉで示される化合物を別の治療法ならびにその他の抗新生物薬剤と組合わせて利用することによってそのような病理学的状況を緩和する方法を提供する。本発明化合物の有効性は熟練した専門家に知られている標準的な方法を使用して評価できる。そのような方法の例は以下の通り：この発明の化合物は病原性糸状菌に対して有用であることが見出されている。例えば、Cryptococcus neoformans処置のための有用性は酵母窒素塩基デトロース寒天培地を使用するCryptococcus neoformansに対する試験結果によって証明できる。この検定を実施するに当たって、この発明の化合物はトゥイーン２０添加ジメチルスルホキシドに溶解する。無菌蒸留水／１０％ＤＭＳＯで２倍希釈を行って、８４株のCryptococcus neoformansの広範囲パネルに対して寒天希釈検定プレート中の最終薬剤濃度を０.００８μｇ／ｍＬから１６.０μｇ／ｍＬの範囲とする。Cryptococcus neoformans分離株８４株に対する最小阻止濃度を決定して所望の抗カビ作用を証明する。本化合物はCorbett検定法（Corbett，T．H．など、「細胞傷害性抗癌性薬剤：医薬発見および開発のためのモデルおよび構想(Cytotoxic Anticancer Drugs:Mo dels and Concepts for Drug Discovery and Development)」、３５頁〜８７頁、 Kluwer Academic出版社：ノーウェル、１９９２年）を使用してヒトの鼻咽喉癌細胞系統ＫＢ、ヒトの結腸直腸腺癌細胞系統ＬoＶoに対する最終阻止濃度について検定する。検定法についてはValerioteなど著、「抗癌性薬剤の発見および開発 (Discovery and Development of Anticancer Agents)」、Kluwer Academic出版社：ノーウェル、１９９３年も参照してこの化合物評価に使用する。最も活性のある化合物群はCorbett検定法を使用して別の細胞型４種、例えばマウス白血病、マウス固形腫瘍、ヒト固形腫瘍および悪性度の低い繊維芽細胞に対する細胞傷害性についてさらに評価する。この化合物群はマウスに移植された薬剤耐性腫瘍を含むさらに広範囲なマウスおよびヒト腫瘍に対して評価する。担癌率（Ｔ／Ｃ）（処置動物における平均担癌率対無処置動物における平均担癌率）を以後の評価に使用する。米国立癌研究所の標準によれば４２％以下のＴ／Ｃ値を活性であり、米国立癌研究所の標準によれば１０％以下のＴ／Ｃ値を優れた活性であって、臨床的作用の候補であると解釈する。材料ビンブラスチン、サイトカラシンＢ、イソチオシアン酸テトラメチルロダミン (ＴＲＩＴＣ)−ファロイジン、スルホロダミンＢ（ＳＲＢ）およびβ−チューブリンに対する抗体およびビメンチンに対する抗体は有力な販売者から購入可能である。イーグル塩を含む基本イーグル培地（ＢＭＥ）およびウシ胎児血清（ＦＢＳ）も購入可能である。細胞系統ジャーカットＴ細胞白血病系統およびＡ−１０ラット大動脈平滑筋細胞はアメリカンタイプカルチャーコレクションから入手し、１０％ＦＢＳおよび５０μｇ／ｍＬ硫酸ゲンタマイシン含有ＢＭＥ中で培養する。ヒト卵巣癌腫細胞（ＳＫＯＶ３）およびビンブラスチンに対する耐性で選択したサブ系統（ＳＫＶＬＢ１）はオンタリオ癌研究所のVictor Ling博士のご厚意からの恵与によるものである。両細胞系統は１０％ＦＢＳおよび５０μｇ／ｍＬ硫酸ゲンタマイシン含有ＢＭＥ中で維持した。Ｐ−グリコプロテイン過剰発現細胞に対する選択圧を維持するように継代の２４時間後にビンブラスチンを最終濃度１μｇ／ｍＬでＳＫＶＬＢ１細胞に添加した。細胞増殖および細胞周期休止検定細胞増殖検定法はSkehanなどが記載した通りに行う。ジャーカット細胞については培養物を指摘した薬剤でSkehanなどの記載したように処理して全細胞数をヘマチトメーターの細胞を計数することによって測定する。有糸分裂中の細胞の百分率はＰＢＳ中０.４％ギムザ染色し、続いて迅速にＰＢＳで洗浄することによって測定する。毎処置には少なくとも１０００細胞について有糸分裂像の存在について測定し、計数した全細胞数に対する有糸分裂像を有する細胞比率として有糸分裂係数を算出する。免疫螢光検定Ａ−１０細胞をＢＭＥ／１０％ＦＢＳ中のカバーグラス上で全面生長近くまで増殖させる。化合物をＰＢＳに溶解し、指定最終濃度まで添加して細胞をその後２４時間インキュベーションする。微小管および中間径フィラメントの染色には細胞を冷メタノールで固定し、１０％ウシ血清含有ＰＢＳとインキュベーションして非特異的結合部位を遮断する。次に細胞を製造社が推奨する濃度の抗β−チューブリンモノクローナル抗体または抗ビメンチンモノクローナル抗体のいずれかと３７℃で６０分間インキュベーションする。続いて結合するプライマリー抗体をフルオレッセイン結合ウサギ抗マウスＩｇＧと４５分間インキュベーションすることによって可視化する。カバーグラスを顕微鏡のスライドグラスに装着して螢光のパターンを検査し、フルオレッセインに対するエピ螢光オプティックスを装備したツァイス社の光学顕微鏡Ｉ１１を使用して写真撮影する。ミクロフィラメントの染色には細胞を３％パラホルムアルデヒドで固定し、０.２％トリトンＸ−１００で透過性にし、水素化ホウ素ナトリウム（１mg／ｍＬ）で化学的に還元する。次に１００ｎＭ−ＴＲＩＴＣ−ファロイジンを含むＰＢＳを添加して混合物を３７℃で４５分間インキュベーションする。細胞をＰＢＳで迅速に洗浄した後、カバーグラスを装着して、直ちに前記のようにして写真撮影する。ジャーカット細胞の増殖および細胞周期に及ぼすクリプトフィシン群およびビンブラスチンの影響細胞の増殖および有糸分裂中細胞の百分率に及ぼすクリプトフィシン化合物群およびビンブラスチンの影響について用量−応答曲線を測定する。細胞骨格に及ぼすサイトカラシンＢ、ビンブラスチンおよびクリプトフィシン化合物の効果大動脈平滑筋（Ａ−１０）細胞をカバーグラス上に増殖させ、ＰＢＳ、２μＭ −サイトカラシンＢ、１００ｎＭ−ビンブラスチンまたは１０ｎＭ−クリプトフィシン化合物で処理する。２４時間後、微小管およびビメンチン中間径フィラメントを間接的免疫螢光法によって可視化し、ミクロフィラメントはＴＲＩＴＣ− ファロイジンを使用して染色する。各薬剤の形態学的効果を検査する。無処置の細胞は核周辺に完全な微小管形成中心を有する広範な微小管網目組織を示した。ビメンチン中間径フィラメントは細胞質全体に平等に分布し、ミクロフィラメント束は細胞の主軸に沿って集中していた。サイトカラシンＢは準結晶性断片の蓄積を伴ってミクロフィラメントの完全な脱重合を起こした。この化合物は微小管または中間径フィラメントの分布にはいずれも影響を与えなかった。クリプトフィシン化合物で処理した微小管およびビメンチン中間径フィラメントでは微小管喪失およびビメンチン中間径フィラメント崩壊が観察された。タキソール安定化微小管に及ぼすクリプトフィシン化合物およびビンブラスチンの効果Ａ−１０細胞を０または１０μＭ−タキソールで３時間処理した後、ＰＢＳ、１００ｎＭ−ビンブラスチンまたは１０ｎＭ−クリプトフィシン化合物を添加する。２４時間後、微小管の構造を前記のような免疫螢光によって検査する。対照細胞におけるものと比較してタキソール処理細胞での微小管は広範囲、特に細胞極領域、に配列している。前記と同様にビンブラスチンは非前処理細胞では微小管の完全な脱重合を起こした。しかしながら、タキソールでの前処理はビンブラスチンに応答する微小管の脱重合を防止した。同様に、タキソールで前処理した微小管はクリプトフィシン化合物処理でも観察された。ビンブラスチンおよびクリプトフィシン化合物による微小管脱重合の可逆性Ａ−１０細胞を１００ｎＭ−ビンブラスチンまたは１０ｎＭ−クリプトフィシン化合物のいずれかで２４時間処理すると完全な微小管脱重合を起こす。次に、細胞を洗浄して薬剤不含培地中で１時間または２４時間の間インキュベーションする。微小管はビンブラスチン除去後に迅速に再重合し、１時間の後には微小管は顕著な水準に達し、２４時間の後には完全な形態学的回復を示した。この発明のクリプトフィシン化合物で処置し、そのクリプトフィシン化合物除去の１時間または２４時間後に細胞の微小管状態を可視化する。細胞増殖に及ぼすビンブラスチンおよびクリプトフィシン化合物の併用の影響ＳＫＯＶ３細胞をクリプトフィシン化合物とビンブラスチンとの組合せで４８時間処理する。次に生存細胞の百分率を測定して各組合せについてＩＣ₅₀を算出する。ＳＫＯＶ３およびＳＫＶＬＢ１細胞に及ぼすクリプトフィシン化合物、ビンブラスチン、およびタキソールの傷害性ＳＫＶＬＢ１細胞はＰ−グリコプロテインを過剰発現するため天然産物抗癌薬剤に対して耐性である。タキソール、ビンブラスチン、およびクリプトフィシン化合物のＳＫＯＶ３およびＳＫＶＬＢ１細胞の増殖を阻止する性能を観察する。タキソールは、ＳＫＶＬＢ１およびＳＫＯＶ３についてＩＣ₅₀おのおの１および８０００ｎＭで用量依存的に両細胞系統の増殖阻止を起こす。ビンブラスチンもＳＫＯＶ３およびＳＫＶＬＢ１についてＩＣ₅₀おのおの０.３５および４２００ｎＭで両細胞系統の増殖阻止を起こす。本発明のクリプトフィシン化合物はＳＫＯＶ３およびＳＫＶＬＢ１に対してＩＣ₅₀約１から約１０００ｎＭを示す。そこで、本発明では微小管網目構造崩壊および有糸分裂阻止によって作用して細胞増殖を強力に阻害する新規クリプトフィシン化合物を提供することを証明できる。これらの研究はクリプトフィシン化合物が微小管構造を崩壊し、有糸分裂の機能を含む正常な細胞機能を阻害することを証明できる。古典的抗微小管薬剤、たとえばコルヒチンおよびビンカアルカロイドのようなものは細胞分裂を有糸分裂段階で休止させる。これらの薬剤の効果の一つをクリプトフィシン化合物の効果と比較することは適切であると思われる。この目的のためにビンカアルカロイドであるビンブラスチンを古典的抗微小管薬剤の代表に選択した。従ってクリプトフィシン化合物およびビンブラスチンのジャーカットＴ細胞白血病細胞系統の増殖および細胞周期進捗に及ぼす影響を比較した。抗有糸分裂効果は共通に有糸分裂紡錘体の中の微小管崩壊を介して起こされるので、細胞骨格構造に対するクリプトフィシン化合物の効果は、螢光顕微鏡法によって測定する。クリプトフィシン化合物またはビンブラスチンのいずれかで処理した細胞の免疫螢光染色は両化合物が微小管の完全な消失を起こすことが証明される。ＳＫＯＶ３細胞についての同様な研究から、クリプトフィシン化合物の抗微小管効果が平滑筋細胞系統にのみ独特なものではないことを証明できる。ヒト結腸癌ＧＣ３による検索９６ウェルプレートのウェルいくつかにＧＣ３ヒト結腸癌腫細胞（１×１０ⁿ 細胞／１００μＬ検定用ウェル）を接種して、２４時間後に被検化合物を添加した。９６ウェルプレートの別のウェルには細胞不含培地を添加した。検定用培地（使用した培地はＲＰＭＩ−１６４０：しかしながら細胞が生存できる培地ならばいずれも許容されるであろう）には１０％透析ウシ胎児血清および２５ｍＭ− ＨＥＰＥＳ緩衝液を添加した。被検化合物は検定前には褐色ビンに貯蔵した。新鮮ジメチルスルホキシド貯蔵溶液（２００μｇ／ｍＬ）は燐酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）で被験試料の希釈液を調製する直前に調製した。ＰＢＳ中１：２０ジメチルスルホキシド溶液の希釈液は最終濃度が１０μｇ／ｍＬになるように調製した。ＰＢＳを使用して、１：３順次希釈液（前回試料０.５ｍＬをＰＢＳ１ｍＬで希釈）を調製した。この検定にはファルコン社２０５４チューブを使用した。被験化合物の各希釈液の１０μＬ試料をＧＣ３プレートのウェル３個に添加した。プレートは３７℃で７２時間インキュベーションした。臭化３−[４,５−ジメチル−２−イル]−２,５−ジフェニルテトラゾリウム（「ＭＴＴ」５mg／ｍＬＰＢＳ）の貯蔵試料１０μＬを各ウェルに添加した。プレートを３７℃で約１時間インキュベーションした。プレートを遠心分離し、培地をウェルからデカンテーションして除き、各ウェルに酸性イソプロパノール（イソプロパノール中０.０４Ｎ−ＨＣｌ）１００μＬを添加した。波長５７０nmを使用して１時間以内にプレートを測定した(SpectraMax読取機)。式Ｉで示される化合物の評価の結果は本化合物が本明細書の発明の処置方法において有用であることができることを示唆する。さらに本化合物は微小管システムの崩壊に有用なものである。式Ｉで示される化合物は式ＩＩ：［式中、Ａr、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰は式Ｉについて前記した意義を有する。Ｒ¹³はｔ−ブチルカルバメート（ＢＯＣ）から構成される群から選択される。Ｒ²⁴は式：で示される(Ｎ−ヒドロキシサクシンイミド、本明細書では「ＮＨＳ」)、Ｎ−ヒドロキシスルホサクシンイミドおよびその塩、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニルおよび２,４−ジクロロフェニルから構成される群から選択される。ＸはＯ、ＮＨまたはアルキルアミノである。ＹはＯ、ＮＨまたはアルキルアミノである。］で示される化合物を使用して製造できる。式III：［式中、Ｒ基および様々な置換基は本明細書に前記し本明細書全体を通して定義するものである］で示される化合物は式ＩＶ：［式中、Ｒ²⁵は活性エステル型置換基である］で示される化合物に式：［式中、Ｒ²⁷はＨ、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキルおよびアリールから構成される群から選択される］で示される酸とシリル化剤とを接触させることによって製造できる。ビス−Ｎ，Ｏ−トリメチルシリルアセトアミド（ＢＳＡ）は特に好適なシリル化剤である。Ｒ²⁵に関して使用する用語「活性エステル型置換基」はＯＲ²⁴置換基を良好な脱離基にする置換基を示す。適当な置換基は、例えば「有機化学における保護基 (Protective Groups in Organic Chemistry)」、Plenum出版社(ロンドンおよびニューヨーク、１９７３年)；Greene，T．W.、「有機合成における保護基(Protecti ng Groups in Organic Synthesis)」、Wiley出版社（ニューヨーク、１９８１年）のような標準的参考文献からの知識によって選択できる。特に好適なＲ²⁵基はＮ−ヒドロキシサクシンイミド（ＮＨＳ）である。本明細書に記載する製法は最も好ましくは溶媒存在下に完成される。専門家は前記製法に対して適当な溶媒を選択できる。不活性有機溶媒は特に好適である。しかしながら、ある条件下では水性溶媒が適当である。例えば、Ｒ²⁷が水素であって、Ｒ¹³がＢＯＣであるなら、溶媒として水性塩基は有効なものである。式Ｉで示される化合物の所望のＲ⁶置換基がアミンを含むならば、Ｒ⁶基のアミン置換基はアミノ保護基を使用して保護しなければならない。専門家は、例えば「有機化学における保護基(Protective Groups in Organic Chemistry)」、Plenum 出版社(ロンドンおよびニューヨーク、１９７３年)；Greene，T．W.、「有機合成における保護基(Protecting Groups in Organic Synthesis)」、Wiley出版社（ニューヨーク、１９８１年）を含む標準的な著作に従って適当なアミノ保護基を容易に選択できる。Ｒ²⁷は酸性、中性、または緩和な塩基性条件を使用して−ＣＯ₂Ｒ²⁷置換基の除去ができる基であるべきである。好適なＲ²⁷基は決してこれらに限定するものではないが水素、Ｃ₁〜Ｃ₆−アルキル、トリクロロメチル、トリクロロエチル、およびメチルチオメチルを含む。Ｒ²⁷が水素であることは特に好適である。以下の反応式は専門家にさらに教示するために提供する。反応式Ｉ反応式Ｉ’ 反応式Ｉ’および本明細書を通じて使用するＲ¹'はハロゲン、ＳＨ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニウム、アルキルチオ、ジアルキルスルホニウム、スルフェート、ホスフェート、または保護ＯＨまたは保護ＳＨ基である。Ｒ²はＯＨまたはＳＨである。Ｒ²⁶は保護しなければ化学操作の過程で反応するかも知れないアルコールを合成過程の一部の間に保護し、後の合成段階で除去するために導入されるアルコール保護基である。このような保護基の形成および除去について多数の反応が、例えば「有機化学における保護基(Protective Groups in Organic Chemistry)」、Plenum出版社(ロンドンおよびニューヨーク、１９７３年)；Greene，T．W.、「有機合成における保護基(Pr otecting Groups in Organic Synthesis)」、Wiley出版社（ニューヨーク、１９８１年）を含む多数の標準的著作に記載されている。熟練した専門家は殊にこれらの著作に提供される教示に従って、適当なアルコール保護基を選択できる。特に有用なアルコール保護基の一つは３級ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）である。［Ｒ⁶は前記に定義した意義を有する］本明細書に提供する複数の反応式による生成物は標準的方法を使用して別のクリプトフィシン化合物を提供するためにさらに別の誘導体にできる。専門家は前記の反応式および下記の実施例に従って適当な出発物質および試薬を利用して所望の化合物を製造できる。エステル出発物質は、例えば次の通りにして製造できる。［Ｒ⁶は前記に定義した意義を有する］エステル製造の方式は熟練した専門家の便宜のために反応式の特定的応用の一つを提供する本明細書の製造例の部によってさらに説明する。エステル製造の反応式は本明細書がクレームするＡｒ置換基にも適用される。この反応式の記載には合成反応方式を図示したフェニル環のみに限定する意図はない。そうではなくてこの工法を広く適用できる専門家に本明細書にクレームする化合物の所望の出発物質を提供するものである。必要な反応時間は出発物質および操作温度に関係する。所与の工程についての最適反応時間は、いつもそうであるように、短い反応時間が望ましい処理量および長い反応時間が望ましい最高収率との競合的目標を考慮することによって決定される妥協の産物である。本発明をさらに例示するために下記の実施例を提供する。本発明の範囲を下記実施例に、および下記実施例によって限定することは決して意図していない。製造例１工程１．５−フェニル−２（Ｅ）−ペンテン酸メチルエステル：ホスホノ酢酸トリメチルエステル（３７６ｇ、４１７mＬ、２.０７モル）のＴＨＦ（７５０mＬ）溶液を０℃でメカニカルスターラーおよびＮ₂導入口を装着した３Ｌの三頚丸底フラスコ中で撹拌した。冷溶液に滴下漏斗からニートのテトラメチルグアニジン（２３９ｇ、２６０mＬ、２.０７モル）を滴加した。透明淡黄色冷溶液を０℃ で２５分間撹拌した。ヒドロ桂皮アルデヒド（９０％、２５３ｇ、２４８mＬ、１.９モル）のＴＨＦ（１２５mＬ）溶液を反応溶液中に徐々に滴加した。添加終了後、反応物を１０時間撹拌して室温に戻した。ＧＣは生成物対出発物質の比率９５：５を示した。水５００mＬを反応容器に添加し、反応物を一夜撹拌すると二層に分離した。有機層を分離し、水層はｔ−ＢuＯＭeで抽出した。両有機層を集めてＭgＳＯ₄上で乾燥し、次に真空濃縮して橙色の油状物を得た。粗製生成物を１２９℃／０.３mmＨgで蒸留して透明な淡黄色油状物３６０.５ｇ、収率９１.７％を得た。ＥＩＭＳm／z：１９０(１３；Ｍ＋)，１５９(４１０，１５８(３９)，１３１( ９０)，１３０(６２)，１１７(２２)，１０４(１２)，９５(５７)，９１(１００)，７７(２１)，６５(５９)。ＨＲＥＩＭＳm／z：１９０.０９９８(Ｃ₁₂Ｈ₁₄Ｏ₂，Ｄ−０.４mnu)。ＵＶlmax(ｅ)２１０(８４００)，２６０（２３０）nm。ＩＲnmax：３０２７，２９４９，１７２３，１６５８，１４５４，１３１９，１２０３，９７８，７００ｃｍ^-1。 ¹Ｈ−ＮＭＲδ（ＣＤＣl₃）：７.１５〜７.３(Ｐｈ−Ｈ５；bm)，７.００(３ −Ｈ，ｄｔ，１５.６／６.６)，５.８４(２−Ｈ；dt，１５.６／１.２)，３.７０（ＯＭe；s)，２.７６(５−Ｈ２；ｔ，７.２)，２.５１(４−Ｈ２；bdt，６. ６／７.２)。 ¹³Ｃ−ＮＭＲδ（ＣＤＣl₃)：１６６.９(１)，１４８.３(３)，１４０.６(Ｐh −１')，１２８.４／１２８.２(Ｐh２'／３'／５'６')，１２６.１(Ｐh４')，１２１.４(２)，５１.３(ＯＭｅ)，３４.２／３３.８(４／５)。工程２．５−フェニル−２−ペンテン−１−オール：熱電対、メカニカルスターラーおよびＮ₂導入口を装着した１２Ｌ四頚丸底フラスコにこのエノエートエステル（３１０.５ｇ、１.５モル）のＴＨＦ（１.５Ｌ）溶液を入れ、ｉ−ＰrＯＨ／ＣＯ₂浴で−７１℃に冷却した。反応温度＜−５０℃に維持する速度で反応器にＤＩＢＡＬ（２.５Ｌ、１.５Ｍトルエン溶液、３.７５モル）を滴加した。添加終了後、反応温度−５０℃以下で反応物を一夜撹拌した。ＴＬＣ（３：１、ヘキサン：ＥtＯＡc、ＳiＯ₂）は１６時間後に出発物質不在を示した。反応温度を−１５℃まで上昇させた。１Ｎ−ＨＣl（１５０mＬ）で徐々に反応を停止させた。この時点で反応物はゼラチン状の固体になった。スパーテルを用いてこの半固体を崩し、１Ｎ−ＨＣl（２００mＬ）を添加して混合物を流動性にした。濃ＨＣl（６２５mＬ）を入れて二層系を形成させた。両層を分離し、生成物をｔ−ＢuＯＭeで抽出した。有機層をＭｇＳＯ₄上で乾燥し、真空濃縮して透明な淡黄色油状物２４７.８ｇを得た。この粗製生成物を１４５℃／０.２５mmＨg で蒸留し、２０９.７ｇ、８６.２％を得た。ＥＩＭＳm／z：１６２(１；Ｍ＋)，１４４(１６)，１２９(７)，１１７(９)，１０８(６)，９２(１７)，９１(１００)，７５(５)，６５(１２)。ＨＲＥＩＭＳm／z：１６２.１０４９(Ｃ₁₁Ｈ₁₄Ｏ，Ｄ−０.４mmu)。ＵＶlmax（ｅ）２０６(９９００)，２６０(３６０)。ＩＲnmax：３３５６，２９２４，１６０３，１４９６，１４５４，９７０，７４６，７００cm^-1。 ¹Ｈ−ＮＭＲδ：７.１５〜７.３(Ｐh−Ｈ５；m)，５.７０(３−Ｈ，dt，１５. ６／６.０)，５.６１(２−Ｈ；dt，１５.６／４.８)，４.０２(１−Ｈ２；d４. ８)，２.６８(５−Ｈ２；ｔ，７.２)，２.４０(ＯＨ；bs)，２.３６(４−Ｈ２； dt，６.０／７.２)。 ¹³Ｃ−ＮＭＲδ：１４１.６(Ｐｈ１')，１３１.８(３)，１２９.５(２)，１２８.３／１２８.２(Ｐｈ２'／３'／５'／６')，１２５.７(Ｐｈ４')，６３.３(１ )，３５.４／３３.８(４／５)。工程３．(２Ｓ，３Ｓ)−２,３−エポキシ−５−フェニル−１−ペンタノール：メカニカルスターラー、熱電対および窒素導入口を装着した１Ｌ三頚丸底フラスコにＣＨ₂Ｃl₂（３５０mＬ）、乾燥４Åモレキュラーシーブス(３０ｇ)、およびＬ−(＋)酒石酸ジエチルエステル（７.６２ｇ、０.０３７モル）を添加した。得られた混合物を−２０℃に冷却し、Ｔi(Ｏ−i−Ｐr)₄（９.２mＬ、０.０３１モル）で処理、続いてｔ−ブチルハイドロパーオキシド（４.０Ｍ−ＣＨ₂Ｃl₂溶液、１８２mＬ、０.７８モル）を反応温度≦−２０℃に維持する速度で添加した。添加終了後、反応混合物をさらに３０分間撹拌し、これを次に反応温度≦−２０ ℃に維持する速度で前記アリルアルコール（５０ｇ、０.３１モル）のＣＨ₂Ｃl₂ （３０mＬ）溶液で処理した。反応物を同温度で５時間撹拌し、次いで濾過して０℃の硫酸第一鉄七水和物（１３２ｇ）および酒石酸（４０ｇ）の水（４００m Ｌ）溶液中に入れた。混合物を２０分間撹拌し、次に分液漏斗に移し、ｔ−Ｂu ＯＭe（２×２００mＬ）で抽出した。有機層を集めてＮaＣl含有３０％ＮaＯＨ溶液と０℃で１時間撹拌した。両層を再分離し、水層はｔ−ＢuＯＭeで抽出した。有機層を集めて食塩水で洗浄し、ＭgＳＯ₄上で乾燥し、濃縮してコハク色油状物５２.８ｇを得た。工程４．(２Ｒ，３Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−メチル−５−フェニルペンタン −１−オール：メカニカルスターラー、熱電対およびＮ₂導入口を装着した５Ｌ三頚丸底フラスコにヘキサン（１Ｌ）を入れ、０℃に冷却した。これに２.０Ｍ −Ｍｅ₃Ａlのヘキサン溶液（８００mＬ、１.６モル）を添加し、続いて温度−２０℃以下に維持しながらこのエポキシド（１２０ｇ、０.６７７モル）のヘキサン（２５０mL）／ＣＨ₂Ｃl₂（５０mＬ）溶液を添加した。添加完了後、曇った反応混合物を５℃で３５分間撹拌し、次に１０％ＨＣl（３００mＬ）の溶液を滴加し、続いて濃ＨＣl（３５０mＬ）を加えた。両層を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、ＭgＳＯ₄上で乾燥した。揮発性物質を減圧除去後、油状物１２２.１グラムを得た。工程５．トルエンスルホン酸(２Ｒ，３Ｒ)−２−ヒドロキシ−３−メチル−５− フェニルペンタン−１−イルエステル：メカニカルスターラーおよび窒素導入口を装着した２Ｌ三頚丸底フラスコにこのジオール(５８ｇ、０.３０モル)、酸化ジブチル錫(１.５ｇ、０.００６モル、２モル％)、トルエンスルホニルクロリド（５７.５ｇ、０.３０モル)、ＣＨ₂Ｃl₂（５８０mＬ）およびトリエチルアミン（４２.０mＬ、０.３０モル）を加えた。得られた混合物を室温で２時間（反応は１時間で完了したが）撹拌し、濾過し、水洗し、ＭgＳＯ₄で乾燥した。真空で揮発性物質を除いて希琥珀色油状物１０４.１グラムを得た。工程６．トルエンスルホン酸(２Ｒ，３Ｒ)−２−[(３級ブチルジメチルシリル) オキシ]−３−メチル−５−フェニルペンタン−１−イルエステル：このトジレート（１００ｇ、０.２９モル）およびトリエチルアミン（８１.０mＬ、０.５８モル）のＣＨ₂Ｃl₂（１２００mＬ）溶液にニートＴＢＳ−ＯＴf（９９mＬ、０. ４３モル）を滴加し、続いてさらに２０分間撹拌した。反応物を食塩水で２回洗浄し、ＭgＳＯ₄上で乾燥し、濃縮乾固した。得られた油状物を最小量のヘキサンに溶解し、シリカ床で濾過し、ヘキサン：ＥtＯＡc（９：１）で溶離して希コハク色油状物１３４ｇを得た。工程７．トルエンスルホン酸(２Ｒ，３Ｒ，５ＲＳ)−２−[(３級ブチルジメチルシリル)オキシ]−３−メチル−５−ブロモ−５−フェニルペンタン−１−イルエステル：メカニカルスターラー、還流凝縮器および窒素導入口を装着した５Ｌ三頚丸底フラスコにＣＣl₄(１６８０mＬ)、ＴＢＳＴs(１４０ｇ、０.３０モル) 、ＮＢＳ（６５ｇ、０.３６５モル）およびＡＩＢＮ（１６.５ｇ、０.１０モル）を入れた。撹拌しながら真空にして混合物を脱ガスし、窒素を逆充填（３×）した。反応混合物を還流まで加熱すると色が暗褐色になった。１５分間激しく還流の後、反応混合物が明黄色になり、クロマトグラフィー分析は反応完了を示した。室温まで冷却後、反応物を濾過し、濾液を濃縮乾固した。残渣をヘキサンに再溶解し、再濾過し、濃縮乾固してコハク色油状物１７０.３グラムを得た。工程８．トルエンスルホン酸(２Ｒ，３Ｒ)−２−[(３級ブチルジメチルシリル) オキシ]−３−メチル−５−フェニルペンタン−４(Ｅ)−エン−１−イルエステル：メカニカルスターラー、還流凝縮器および窒素導入口を装着した２Ｌ三頚丸底フラスコにこの臭化物（１００ｇ、０.１８６モル）のアセトニトリル（７００mＬ）溶液を添加した。ＤＢＵ（８３.６mＬ、０.５５７モル）を加えて得られる暗褐色溶液を１５分間還流した。室温まで冷却後、溶媒を真空除去し、残渣をＣＨ₂Ｃl₂（２００mＬ）中で潰し、シリカ床で濾過した。揮発性物質を再蒸発し、残渣をＥtＯＡcに溶解し、水、食塩水で洗い、ＭgＳＯ₄上で乾燥し、濃縮乾固した。分取mplc（Prep ５００）クロマトグラフィーで所望の不飽和化合物（５０.３ｇ、４工程にわたり収率６０％）を得た。工程９．(３Ｓ，４Ｒ)−３−[(３級ブチルジメチルシリル)オキシ]−４−メチル −６−フェニルヘキサン−５(Ｅ)−エン−１−イルニトリル：このトシレート（５０ｇ、０.１１モル）をＤＭＳＯ（１Ｌ）に溶解し、ＫＣＮ（１４.２ｇ、０. ２２モル）および水（２５mＬ）で処理し、得られた混合物を窒素中６０℃で１８時間撹拌した。室温まで冷却後、反応混合物をＥtＯＡc（１Ｌ）および水（１Ｌ）の間に分配した。水層をＥtＯＡc（５００mＬ）で抽出し、有機層を集めて食塩水で洗い、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥した。ＣＨ₂Ｃl₂によるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーは所望のニトリルを収率９２％で与えた。工程１０．(５Ｓ，６Ｒ)−５−[(３級ブチルジメチルシリル)オキシ]−６−メチル−８−フェニルオクタ−２(Ｅ)，７(Ｅ)−ジエン酸メチルエステル：このニトリル（１４.６７ｇ、４６.５ミリモル）をトルエン（２００mＬ）に溶解し、窒素中で−７８℃に冷却した。激しく撹拌しながら１.５Ｍ−ＤＩＢＡＬトルエン溶液（３７.２mＬ、５５.８ミリモル）を滴加した。添加の完了後、冷浴を除き、反応物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を注意深く１Ｎ−ＨＣl中に注入し、混合物を室温で３０分間撹拌した。両層を分離し、有機層を酒石酸ナトリウムカリウムの飽和水溶液(２×)、食塩水で洗浄し、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥した。揮発性物質を真空で除去し、粗製の淡黄色油状物を直接次の縮合に使用した。前記からの粗製アルデヒドをＴＨＦ（９０mＬ）に溶解し、窒素中室温で、ホスホノ酢酸トリメチルエステル（９.０３mＬ、５５.８ミリモル）およびテトラメチルグアニジン（７．０ｍＬ、５５．８ミリモル）で処理した。反応混合物を１６時間撹拌し、次にＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）の間で分配した。水層はＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で逆抽出し、有機層を集めて水、食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。揮発性物質を真空除去し、粗製の黄色油状物（１７．０ｇ）をシリカゲルでＣＨ₂Ｃl₂：シクロヘキサン（１：１から２：１）を用いてクロマトグラフして所望のエステル１３．６７グラムを得た。収率７８．５％。製造例２メチルエステル（２．６７３ミリモル）をアセトンに溶解し、次に室温で１Ｎ− ＬｉＯＨ水（２６ｍＬ）を加えた。曇った混合物をさらにアセトン（２０ｍＬ）で希釈して得られた黄色混合物を室温で２３．５時間撹拌した。反応物をジエチルエーテル（４００ｍＬ）で希釈し、有機層を１Ｎ−ＨＣｌ（１２０ｍＬ）、食塩水（２００ｍＬ）、Ｈ₂Ｏ（１６０ｍＬ）で洗った。有機層を乾燥し、真空濃縮して黄色油状物を得、これをカラムクロマトグラフィー（勾配：５％ＡｃＯＨ＋２０％〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、カルボン酸（９６０ｍｇ、１００％）を黄色油状物として得た。 ¹Ｈ−ＮＭＲδ（ＣＤＣl₃）：７.３８〜７.１９（ｍ，ＰｈＨ₅），７．０９（ｄｄｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，３−Ｈ），６．３８（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，８−Ｈ），６．１６（ｄｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，Ｊ＝８Ｈｚ，７−Ｈ），５．８５（ｄ，Ｊ＝１５．８Ｈｚ，２−Ｈ），３．８１〜３．７５（ｍ，５−Ｈ），２．４９〜２．３７（ｍ，６−Ｈ，４−ＣＨ₂），１．１２（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，６−Ｍｅ），０．９１（ｓ，ＳｉＣＭｅ₃），０．０６５（ｓ，ＳｉＭｅ），０．０６８（ｓ，ＳｉＭｅ）ｐｐｍ。ＩＲμ（ＣＨＣｌ₃）：２９５７，２９３０，２８５８，１６９７，１２５８，１０９８，８３８ｃｍ^-1。ＭＳ（ＦＤ）３６０．２（Ｍ⁺，１００）。［α］_D＋８７．６°（ｃ１０．５，ＣＨＣｌ₃）。元素分析：Ｃ₂₁Ｈ₃₂Ｏ₃として計算値：Ｃ６９．９５；Ｈ８．９５％。実験値：Ｃ６９．１９；Ｈ８．３９％。製造例３カルボン酸（２ミリモル）の乾燥ジメチルホルムアミド（５．５０ｍＬ）溶液を撹拌しつつ、これに１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（２．４ミリモル）およびＮ−ヒドロキシサクシンイミド（２．６ミリモル）を室温で添加した。この混合物を２８時間撹拌し、次にＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、１Ｎ−ＨＣｌ水（２×５０ｍＬ）、Ｈ₂Ｏ（７５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、真空濃縮して油状物を得た。粗製生成物をカラムクロマトグラフィー（勾配：５〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して活性エステルを淡黄色油状物（７２４ｍｇ、８０％）として得た。 ¹Ｈ−ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ₃）：７．３６〜７．２０（ｍ，ＰｈＨ₅，３−Ｈ），６．３８（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，８−Ｈ），６．１４（ｄｄ，Ｊ＝１６．１Ｈｚ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，７−Ｈ），６．０３（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，２−Ｈ），３．７９（ｑ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，５−Ｈ），２．９４（ｂｒｓ，ＣＨ₂ＣＨ₂），２．５８〜２．４２（ｍ，６−Ｈ，４−ＣＨ₂），１．１０（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６− Ｍｅ），０．９０（ｓ，ＳｉＣＭｅ₃），０．０５（ｓ，ＳｉＭｅ₂）ｐｐｍ。ＩＲμ（ＣＨＣｌ₃）：２９５７，２９３１，２８５８，１７７２，１７４１，１６４８，１３６４，１２５４，１０９２，１０６９，８３８ｃｍ^-1。ＭＳ（ＦＤ）：４５７（Ｍ⁺，１００）。［α］_D＋７１．３°（ｃ１０．１，ＣＨＣｌ₃）。元素分析：Ｃ₂₅Ｈ₃₅ＮＯ₅として計算値：Ｃ６５．６１；Ｈ７．７１；Ｎ３．０６％。実験値：Ｃ６５．５１；Ｈ７．５６；Ｎ３．０２％。製造例４シリルエーテル（２．５０ｇ、５。４７ミリモル）のＣＨ₃ＣＮ（１３０ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、これに４８％ＨＦ水（１５ｍＬ）を０℃で添加した。この溶液を０℃で０．７５時間、次に室温で４時間撹拌した。反応物をジエチルエーテル（３００ｍＬ）で希釈し、洗液が〜ｐＨ７になるまでＨ₂Ｏで洗浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、真空濃縮して黄色残渣を得、これをＥｔ₂ Ｏから再結晶して白色結晶（１．４６ｇ、７８％）としてアルコールを得た。 ¹Ｈ−ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ₃）：７．４１〜７．２０（ｍ，ＰｈＨ₅，３−Ｈ），６．４８（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，８−Ｈ），６．１５〜６．０７（ｍ，７−Ｈ，２−Ｈ），３．７１〜３．６５（ｍ，５−Ｈ），２．８３（ｂｒｓ，ＣＨ₂ＣＨ₂ ），２．６０〜２．３３（ｍ，６−Ｈ，４−ＣＨ₂），１．９５（ｂｒｓ，５− ＯＨ），１．１４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６−Ｍｅ）ｐｐｍ。ＩＲμ（ＫＢｒ）：３４５７，１８０４，１７７３，１７３５，１７２４，１２０９，１０９９，１０６７，１０４９，９７５，７４４，６９４ｃｍ^-1。ＵＶ（ＥｔＯＨ）１ｍａｘ２５０（ｅ＝２０５３５）ｎｍ。ＭＳ（ＦＤ）：３４３．２（Ｍ⁺，１００）。［α］_D−５７．８°（ｃ１０．５６，ＣＨＣｌ₃）。元素分析：Ｃ₁₉Ｈ₂₁ＮＯ₅Ｓとして計算値：Ｃ６６．４６；Ｈ６．１６；Ｎ４．０８％。実験値：Ｃ６６．４９；Ｈ６．１６；Ｎ４．０７％。実施例１カルボン酸（１．２８ｇ、３．８７ミリモル）の乾燥塩化メチレン（６ｍＬ）懸濁液にＥＤＣ（７４２ｍｇ、３．８７ミリモル）およびＤＭＡＰ（７３ｍｇ、０．６０ミリモル）を加え、混合物を室温で０．５時間撹拌した。この反応混合物にアルコール（１．０２ｇ、２．９７ミリモル）のジクロロメタン（５．５ｍＬ）溶液を添加し、さらに０．３時間撹拌した。反応物をＣＨ₂Ｃｌ₂（２００ｍＬ）で希釈し、１Ｎ−ＨＣｌ水（２×５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ₃（２×５０ｍＬ）、Ｈ₂Ｏ（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、真空濃縮して油状残渣を得、これをカラムクロマトグラフィー（勾配：１０〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して所望のエステルを黄色固体（１．６８ｇ、７９％）として得た。 ¹Ｈ−ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ₃）ユニットＡ：７．３５〜７．２０（ｍ，ＰｈＨ₅ ，３−Ｈ），６．４３（ｄ，Ｊ＝１５．８Ｈｚ，８−Ｈ），６．１２（ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ，２Ｈ），５．９９（ｄｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，Ｊ＝１５．８Ｈｚ，７−Ｈ），５．０６〜５．０８（ｍ，５−Ｈ），２．８５（ｂｒｓ，ＣＨ₂ＣＨ₂ ），２．６８〜２．６１（ｍ，６−Ｈ，４−ＣＨ₂），１．１３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６−Ｍｅ）。ユニットＣ：５．３１（ｂｒｔ，ＮＨ），３．２８〜３．２５（ｍ，３−ＣＨ₂），１．４３（ｓ，ＣＭｅ₃），１．２１（ｓ，２−Ｍｅ），１．１９（ｓ，２−Ｍｅ）。ユニットＤ：４．９５（ｄｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，２−Ｈ），１．７３〜１．６４（ｍ，３−Ｈ，４−Ｈ），１．５９〜１．４９（ｍ，３−Ｈ ’），０．８５（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，５−Ｍｅ），０．８２（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，４−Ｍｅ）ｐｐｍ。ＩＲμ（ＫＢｒ）：３４００，２９７５，１７４３，１３６７，１２０６，１１２６，１１４５，１０６８ｃｍ^-1。ＭＳ（ＦＤ）６５７（Ｍ⁺，１００）。［α］_D＋３９．５°（ｃ１０．３８，ＣＨＣｌ₃）。元素分析：Ｃ₃₅Ｈ₄₈Ｎ₂Ｏ₁₀として計算値：Ｃ６４．０１；Ｈ７．３７；Ｎ４．２７％。実験値：Ｃ６４．１９；Ｈ７．２７；Ｎ４．５２％。実施例２活性エステル（１５０ｍｇ、０．２２９ミリモル）の乾燥ＤＭＦ溶液（２．５ｍＬ）を撹拌しながら、これにＮ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド（２８２μＬ、１．１４３ミリモル）、続いてＤ−ヒドロキシフェニルグリシン（５７ｍｇ、０．３４３ミリモル）を加えた。この混合物を封管中でＮ₂下に５５℃で２０時間加熱した。反応溶液をＥｔＯＡｃ（１８０ｍＬ）で希釈し、１Ｎ −ＨＣｌ水（５０ｍＬ）、Ｈ₂Ｏ（５０ｍＬ）、食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、真空濃縮して黄色固体を得た。この粗製固体をカラムクロマトグラフィー（勾配：５〜２０％ＭｅＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂）で精製してアミド（１２２ｍｇ、７５％）を得た。¹Ｈ−ＮＭＲδ（ＣＤ₃ＯＤ／ＣＤＣｌ₃）ユニットＡ：７．２７〜７．２０（ｍ，ＰｈＨ₅），６．７５〜６．６９（ｍ，３−Ｈ），６．４３（ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ，８−Ｈ），５．９６（ｄ，Ｊ＝１５．７Ｈｚ，７−Ｈ），５．９３（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，２−Ｈ），４．９５〜４．９３（ｍ，５−Ｈ），２．５６〜２．４９（ｍ，６−Ｈ，４−ＣＨ₂），１．０４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６ −Ｍｅ）。ユニットＢ：７．１６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，ＡｒＨ₂），６．６６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，ＡｒＨ₂），５．６２（ｂｒｔ，ＮＨ），５．１９〜５．１８（ｍ，２−Ｈ）。ユニットＣ：３．１５（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３−ＣＨ₂），１．３６（ｓ，ＣＭｅ₃），１．１１（ｓ，２−Ｍｅ），１．０８（ｓ，２−Ｍｅ）。ユニットＤ：４．８５（ｄｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，２−Ｈ），１．６４〜１．５７（ｍ，３−Ｈ，４−Ｈ），１．５５〜１．４７（ｍ，３−Ｈ ’），０．７６（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，５−Ｍｅ），０．７３（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，４−Ｍｅ）ｐｐｍ。ＩＲμ（ＫＢｒ）：３４００，２９７２，１７２８，１６７２，１６１４，１５１５，１４５０，１４１６，１１７１，１１４７ｃｍ^-1。ＭＳ（ＦＡＢ）６１０．６（［ＭＨ₂−Ｂｏｃ］⁺，１００）。［α］_D−１９．９°（ｃ６．５３，ＭｅＯＨ）。実施例３実施例２で製造したＢＯＣアミン（１０９ｍｇ、０．１５４ミリモル）をトリフルオロ酢酸（５ｍＬ、５ミリモル）に溶解し、室温で２時間撹拌した。反応物を真空濃縮し、高真空で乾燥してアミンのトリフルオロ酢酸塩を明黄褐色泡状物として得た。粗製のアミン塩（ｍａｘ．０．１５４ミリモル）を乾燥ＤＭＦ（３１ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（８０μＬ、０．４６２ミリモル）に溶解し、続いてペンタフルオロフェニルジフェニルホスフィネート（７７ｍｇ、０．２ミリモル）を添加した。得られた溶液を室温で乾燥Ｎ₂下に１５時間撹拌し、真空濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（勾配：１〜４％ＭｅＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂）で精製してクリプトフィシンを黄褐色固体（５４ｍｇ、５９％）として得た。 ¹Ｈ−ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ₃）ユニットＡ：７．３６〜７．１５（ｍ，ＰｈＨ₅ ），６．７９〜６．６９（ｍ，３−Ｈ），６．５４（ｄ，Ｊ＝１５．８Ｈｚ，８ −Ｈ），５．９８（ｄｄ，Ｊ＝１５．８Ｈｚ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，７−Ｈ），５．０６〜５．０（ｍ，５−Ｈ），２．６１〜２．４９（ｍ，６−Ｈ，４−Ｈ），２．３９〜２．３０（ｍ，３−Ｈ’），１．１０（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６−Ｍｅ）。ユニットＢ：７．９０（ｄｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，Ｊ＝１．６８Ｈｚ，ＯＨ），７．６５（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，ＮＨ），７．１０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，ＡｒＨ₂ ），６．７１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，ＡｒＨ₂），５．２８（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２−Ｈ）。ユニットＣ：３．５５〜３．４７（ｄｄ，Ｊ＝１３．３Ｈｚ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，３−ＣＨ₂），３．００（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，ＮＨ），１．１９（ｓ，２−Ｍｅ），１．１６（ｓ，２−Ｍｅ）。ユニットＤ：４．９０（ｄｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，２−Ｈ），１．６６〜１．５４（ｍ，３−Ｈ，４−Ｈ），１．３２〜１．２５（ｍ，３−Ｈ’ ），０．６７（見掛ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，５−Ｍｅ，４−Ｍｅ）ｐｐｍ。ＩＲμ（ＫＢｒ）：３４１８，３３４０，２９６０，１７４０，１７１３，１６７１，１５１４，１２７１，１１９８，１１５５，９７２ｃｍ^-1。ＭＳ（ＦＤ）５９０（Ｍ⁺，１００）。［α］_D＋１５．３５°（ｃ３．９１，ＣＨＣｌ₃）。実施例４実施例３で製造したスチレン（４２ｍｇ、０．０７１２ミリモル）を乾燥ジクロロメタン（２．２ｍＬ、０．０３５ミリモル）に懸濁し、室温でｍ−ＣＰＢＡ（４９ｍｇ、０．２８５ミリモル）を一度に添加した。乾燥テトラヒドロフラン（０．３ｍＬ）を添加して均質な溶液とした。反応物をＮ₂下に室温で２１時間撹拌し、次に別のＣＨ₂Ｃｌ₂（１５ｍＬ）でさらに希釈した。有機層を１０％− Ｎａ₂Ｓ₂Ｏ₅水（１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ₃水（１０ｍＬ）、Ｈ₂Ｏ（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、真空濃縮して黄色固体を得た。粗製の生成物を最初にカラムクロマトグラフィー（勾配：１〜５％ＭｅＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂ ）により精製して、（α：β）−Ｃ７−Ｃ８エポキシドの１：１．１５混合物を白色固体（２３ｍｇ、５４％）として得た。この（α：β）−混合物の逆相ＨＰＬＣ（カラム：４．６×２５０ｍｍ、Ｋｒｏｍｓｉｌ−Ｃ１８、溶離剤：６０％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ、流速：１．０ｍＬ／分、ＵＶ：２２０ｎｍ）分離はα−エポキシド（２．３ｍｇ、ｔ＝１３．７分）およびβ−エポキシド（５．８ｍｇ、ｔ＝１２．１分）を白色固体として与えた。実施例５上に図示した化合物は実施例１〜４の操作法を使用して実質的に前記のようにして製造した。 α−エポキシド：¹ Ｈ−ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ₃）実施例６上に図示した化合物は実施例１〜４の操作法を使用して実質的に前記のようにして製造した。 β−エポキシド： ¹Ｈ−ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ₃）ユニットＡ：７．３６〜７．１６（ｍ，ＰｈＨ₅ ），６．７０〜６．７９（ｍ，３−Ｈ），５．９１（ｄｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，Ｊ＝５．１８Ｈｚ，２−Ｈ），５．２３〜５．１８（ｍ，５−Ｈ），３．７５（ｄ，Ｊ＝１．６７Ｈｚ，８−Ｈ），２．９６（ｄｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，７−Ｈ），２．７２〜２．６７（ｍ，４−Ｈ），２．４４〜２．３９（ｍ，４−Ｈ’），１．８１〜１．８８（ｍ，６−Ｈ），１．１３（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６−Ｍｅ）。ユニットＢ：７．６６（ｓ，ＮＨ），７．１３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，ＡｒＨ₂ ），６．７４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，ＡｒＨ₂），５．２７（ｓ，２−Ｈ）。ユニットＣ：７．６６（ｓ，ＮＨ），３．４９（ｄｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，Ｊ＝１０Ｈｚ，３−ＣＨ₂），１．２０（ｓ，２−Ｍｅ），１．１８（ｓ，２−Ｍｅ）。ユニットＤ：４．９３（ｄｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，２−Ｈ），１．６９〜１．５９（ｍ，３−Ｈ，４−Ｈ），１．３０〜１．２２（ｍ，３−Ｈ’ ），０．７９（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，５−Ｍｅ），０．７８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，４−Ｍｅ）ｐｐｍ。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ムーア，リチャード・イーアメリカ合衆国96816ハワイ州ホノルル、パホア・アベニュー4494番 (72)発明者ペイテル，ビノド・エフアメリカ合衆国46032インディアナ州カーメル、フリートウッド・ドライブ・ノース 13002番 (72)発明者レイ，ジェイムズ・イーアメリカ合衆国46268インディアナ州インディアナポリス、グランジャー・レイン 6640番 (72)発明者トス，ジョン・イーアメリカ合衆国46278インディアナ州インディアナポリス、ペリエ・コート6759番

Claims

【特許請求の範囲】１．式Ｉ：［式中、Ａｒはフェニルまたは単なる非置換または置換の芳香族またはヘテロ芳香族基、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₁₂−アルキンのいずれかである。Ｒ¹はハロゲン、ＳＨ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニウム、アルキルチオ、ジアルキルスルホニウム、スルフェート、またはホスフェートであってＲ²はＯＨまたはＳＨであるか、またはＲ¹およびＲ²が互いに結合して、エポキシ環、アチリジン環、エピスルフィド環、スルフェート環、シクロプロピル環、またはモノアルキルホスフェート環を形成してもよく、またはＲ¹およびＲ²が互いに結合して、Ｃ₁₈とＣ₁₉の間に第二の結合を形成してもよい。Ｒ³は低級アルキル基である。Ｒ⁴はＨである。Ｒ⁵はＨである。Ｒ⁴およびＲ⁵は互いに結合して、Ｃ₁₃とＣ₁₄の間に第二の結合を形成してもよい。Ｒ⁶はＢ環ヘテロ芳香族、置換ヘテロ芳香族、Ｂ環（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキル、（Ｃ₃ 〜Ｃ₈）シクロアルキル、置換Ｃ₃〜Ｃ₈シクロアルキル、置換（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキル、式ＩＩＩ’ で示される基、および式ＩＩＩ”：で示される基から構成される群から選択される置換基である。Ｒ⁷はＮＲ⁵¹Ｒ⁵²、Ｒ⁵³ＮＲ⁵¹Ｒ⁵²、ＯＲ⁵³、Ｈ、および低級アルキル基から構成される群から選択される。Ｒ⁵¹およびＲ⁵²は独立にＣ₁〜Ｃ₃−アルキルから構成される群から選択され、Ｒ⁵³はＣ₁〜Ｃ₃−アルキルである。Ｒ⁸はＨまたは低級アルキル基である。Ｒ⁷およびＲ⁸は所望ならばシクロプロピル環を形成できる。Ｒ⁹はＨ、低級アルキル基、不飽和低級アルキル、および低級アルキル−Ｃ₃〜Ｃ₅−シクロアルキルから構成される群から選択される。Ｒ¹⁰はＨまたは低級アルキル基である。Ｒ⁹およびＲ¹⁰は所望ならば結合してシクロプロピル環を形成する。Ｒ¹¹はＨ、ＯＨ、単なるアルキル、フェニル、置換フェニル、ベンジルおよび置換ベンジルから構成される群から選択される。Ｒ¹⁴はＨまたは低級アルキル基である。Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、およびＲ¹⁷はおのおの独立して水素、（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキル、ＯＲ¹⁸、ハロ、ＮＲ¹⁸'Ｒ¹⁹'、ＮＯ₂、ＯＰＯ₄Ｈ₂、ＯＲ¹⁹フェニル、ＳＣＨ₂フェニル、ＣＯＮＨ₂、ＣＯ₂Ｈ、ＰＯ₃Ｈ₂、およびＳＯ₂Ｒ²³、およびＺＺから構成される群から選択される。Ｒ¹⁸は水素、アリール、およびＣ₁〜Ｃ₆−アルキルから構成される群から選択される。Ｒ¹⁸'は水素および（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキルから構成される群から選択される。Ｒ¹⁹はＣ₁〜Ｃ₆−アルキルである。Ｒ¹⁹'は水素および（Ｃ₁〜Ｃ₆）アルキルから構成される群から選択される。Ｒ²³は水素および（Ｃ₁〜Ｃ₃）アルキルから構成される群から選択される。Ｒ³⁰は水素またはＣ₁〜Ｃ₆−アルキルである。ｎは０、１、または２である。ｐは０、１、または２である。ｍは０、１、または２である。ＸはＯ、ＮＨ、およびアルキルアミノから構成される群から選択される。ＹはＯ、ＮＨ、およびアルキルアミノから構成される群から選択される。Ｚは−（ＣＨ₂）_n−、−（ＣＨ₂）_p−Ｏ−（ＣＨ₂）_m−、および（Ｃ₃〜Ｃ₅）シクロアルキルから構成される群から選択される。ＺＺは芳香族基および置換芳香族基から構成される群から選択される］で示される化合物またはその医薬的に許容される塩または溶媒和物。但し、Ｒ⁶が式ＩＩＩ’で示される基であって、ｎが１である時には、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、およびＲ¹⁷から構成される群の少なくとも１個は非水素基でなければならないものとする。また、但し、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶およびＲ¹⁷の中の１個のみがＯＨまたはＯＲ²⁹であって、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶およびＲ¹⁷から構成される群の１個がハロであるならば、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、およびＲ¹⁷から構成される群の残りの基は水素またはハロであってはならず、Ｒ²⁹は（Ｃ₁〜Ｃ₅）アルキルであるものとする。さらに、但し、この化合物は次の各式で示されるクリプトフィシン類：から構成される群から選択されるクリプトフィシンではないものとする。２．ＹがＯである請求項１の化合物。３．ＸがＯである請求項２の化合物。４．Ｒ⁶が式：で示される基である請求項３の化合物。５．Ｒ⁹がイソブチルであり、Ｒ¹⁰が水素である請求項４の化合物。６．Ｒ⁸およびＲ⁷がおのおの独立にメチルおよび水素から構成される群から選択される請求項５の化合物。７．Ｒ¹およびＲ²がエポキシド基を形成する請求項６の化合物。８．Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、およびＲ¹⁷のいずれもがＣ₁〜Ｃ₃−アルキルではない請求項１の化合物。９．ＸがＯである請求項８の化合物。１０．Ｒ⁶が式：で示される基である請求項９の化合物。１１．Ｒ⁸およびＲ⁷がおのおのメチルである請求項１０の化合物。１２．Ｒ⁹がイソブチルであり、Ｒ¹⁰が水素である請求項１１の化合物。１３．Ｒ¹およびＲ²がエポキシド基を形成する請求項１２の化合物。１４．ｎが０である請求項１の化合物。１５．ｎが０である請求項９の化合物。１６．ｎが０である請求項３の化合物。１７．Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、およびＲ¹⁷から構成される群のいずれもがハロまたはＯＣＨ₃ではない請求項１の化合物。１８．ｎが０である請求項１７の化合物。１９．ｎが２である請求項１７の化合物。２０．ｎが１である請求項１７の化合物。２１．Ｒ³⁰がメチルである請求項３の化合物。２２．Ｒ³⁰が水素である請求項２０の化合物。２３．Ｒ⁶が式：から選択される請求項３の化合物。２４．Ｒ⁶が次のヘテロ芳香環８個：から構成される群から選択される請求項１の化合物。２５．化合物が：から構成される群から選択される請求項１の化合物。２６．請求項１の化合物を有効量投与することを含む哺乳類における微小管結合を崩壊する方法。２７．請求項１の化合物を有効量投与することを含む試験管内で微小管結合を崩壊する方法。２８．必要とする患者に請求項１の化合物を有効量投与することを含む哺乳類における新生物を処置する方法。２９．請求項１の化合物およびそれのための医薬的に許容される希釈剤または担体の１種またはそれ以上を含む製剤。３０．請求項１の化合物を有効量投与することを含む、真菌感染症に罹患しているか、または罹患のおそれのある哺乳類を処置する方法。