JP2000327691A - イソフラボン誘導体ならびに動植物由来の有用成分の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 イソフラボン誘導体ならびに動植物由来の有
用成分を効率よく精製する。 【構成】 糖転移酵素を用いることでイソフラボン誘
導体ならびに動植物由来の有用成分を効率よく精製す
る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はイソフラボン誘導体なら
びに動植物由来の有用成分を高純度でかつ高収率で製造
する方法に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】イソフラボンとはフラボノイド類の一種
で、狭義には３−フェニルクロモンを指し、この骨格の
一部に各種官能基やグルコース等が結合した各種イソフ
ラボン誘導体が一部の食品には含まれる。広義にはイソ
フラボン誘導体を包括してイソフラボン、あるいはイソ
フラボン化合物と示される場合もある。とりわけ大豆に
は多種のイソフラボン誘導体が含まれる。イソフラボン
誘導体としては３−フェニルクロモンにグルコース１残
基がβ結合した図２の骨格を持つ化合物が天然界には多
く、その代表的なものとしてダイジン、ゲニスチン及び
これらのアグリコン（β結合したグルコース残基がはず
れたもの）としてダイゼイン、ゲニステインがある。ダ
イゼイン、ゲニステインはそれぞれ図３、図４に示す化
合物である。これら多種のイソフラボン誘導体にはエス
トロゲン様作用、抗菌作用、抗酸化作用、制ガン作用な
どの薬理効果があることが明らかとなっている。本願に
おいては以下単にイソフラボン誘導体という場合には、
天然物由来のイソフラボン誘導体をさすものとする。

【０００３】しかしながらこれら天然のイソフラボン誘
導体は水に対して難溶性であるため従来の精製法では効
率よく安価に大量に得ることが困難であった。すなわ
ち、従来抽出はアルカリ、有機溶媒、熱水などによるも
のであったが、抽出した後は沈澱させて得る、あるいは
抽出した（溶解した）状態でアルミナ、活性炭などを吸
着剤とするカラムクロマトグラフィーで精製する方法が
とられていた。この精製法は各種フラボノイド類の精製
法として一般的な方法であり、通常のフラボノイドは沈
澱させて得るだけでもある程度の純度、収率で得ること
ができた。しかしながらイソフラボン誘導体の場合、大
豆をはじめとした豆類のような蛋白などを多量に含んだ
原料から抽出するため、単にアルカリ性抽出液を酸性に
する、有機溶媒抽出液より有機溶媒を除去する、熱水抽
出液を冷却するなどの方法で沈澱として得るのでは蛋白
をはじめとした不純物も同時に大量に沈澱してしまい、
純度が低いためそのままでは使用できない。蛋白との混
合沈澱よりイソフラボン誘導体のみを分離するのは困難
である。抽出液よりカラムクロマトグラフィーで精製す
るとしても不純物が多ければ効率よく安価に大量に得る
ことが困難である。さらに食品に用いるには有機溶媒は
好まれず、また有機溶媒で抽出しても吸着剤に吸着させ
る場合、有機溶媒を除去する必要がある。さらに有機溶
媒を除去すると各種イソフラボン誘導体は中性あるいは
酸性の水には難溶性であるため析出してしまい精製でき
ないといった問題点もある。同様のことが、漢方薬など
に含まれる各種動植物由来の有用成分においても問題と
されていた。

【０００４】

【本発明が解決しようとする課題】従来法では部分精製
されたイソフラボン誘導体を得るためにはアルカリ、有
機溶媒、熱水などで抽出した後、カラムクロマトグラフ
ィーで精製する方法がとられていたが、高収率で安価に
大量に得るためには蛋白などの不純物の大部分を除去す
るステップが必要であった。各種動植物由来の有用成分
においても同様である。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者は食品（とりわ
け大豆及び大豆加工品）に多く含まれるβ−結合したグ
ルコースを分子内に１分子含むイソフラボン誘導体（以
下、β−Ｇ−イソフラボンと称する。）をはじめとする
さまざまのイソフラボン誘導体を抽出し、高濃度の抽出
液から難溶性のこれらイソフラボン誘導体が析出するこ
となく不純物の大部分を除去しこれらイソフラボン誘導
体を分取及び精製する方法について鋭意検討した。その
結果、食品組成物とりわけ大豆あるいは大豆加工品から
アルカリ溶液で抽出し、抽出液にα−グリコシル糖化合
物と糖転移酵素を作用させることでイソフラボン誘導体
に転移反応により糖を脱水縮合させて酸性、中性での溶
解度を高めた。そののち、ｐＨを５．５以下の酸性にす
ることで、難溶性のこれらイソフラボン誘導体に1個の
グルコースもしくは２個以上のα−重合したグルコース
がα−結合した配糖体（以下、α−グリコシルイソフラ
ボン誘導体と称する）及び後述する理由で沈澱とならな
い共存する未反応イソフラボン誘導体を溶解させたま
ま、高分子の蛋白を等電点沈澱として除去することによ
り精製を行った。これによって蛋白の９割以上を除去す
ることが可能であった。こののち、グルコアミラーゼな
どのα―１，４−グルカノハイドロラーゼを作用させ、
もとのイソフラボン誘導体にすることが可能であった。
さらにもとのイソフラボン誘導体がβ−Ｇ−イソフラボ
ンの場合にはβ―グルコシダーゼなどのβ―グルカノハ
イドロラーゼを作用させることによりアグリコンまです
ることも容易である事を見出し本発明を完成させた。

【０００６】フラボノイド類の配糖体自体は過去に報告
があり、ヘスペリジン、カルタミンをはじめとするフラ
ボノイド類において本発明者は配糖体の製造をおこなっ
てきた（特開平１０−１０１７０５、特願平１０−２２
３５７４）。しかし、たとえばヘスペリジン、カルタミ
ンをはじめとする通常のフラボノイド類は先述のとおり
精製は比較的容易であり、従来のフラボノイド配糖体の
報告は、高純度フラボノイド類含有物から配糖体を製造
して物性を改良するにとどまるものであった。本特許願
は配糖体を製造する技術を、フラボノイド類のなかでも
従来精製が困難であったイソフラボン誘導体の精製に組
み込んだものであり、食品抽出物中にある水に難溶性の
イソフラボン誘導体を、粗抽出液の状態のままで可溶性
の配糖体にいったん変化させてから蛋白等の不純物のみ
を沈澱除去し、しかるのちいったん可溶性の配糖体とな
ったイソフラボン誘導体を再度難溶性のイソフラボン誘
導体に変化させて沈澱として得るという発想はこれまで
いっさい報告されていなかった。すなわち、イソフラボ
ン誘導体は大豆等の豆類などに多く含まれるが、これら
食品の抽出物の多くは蛋白等を多く含んだ粘稠な溶液で
あり、イソフラボン誘導体を単にα−グリコシル化した
としても蛋白等を除去するのは困難である。精製に当た
っていったんｐＨを蛋白の等電点付近に維持して蛋白を
等電点沈澱の形で除去し、その後に配糖体からα−グリ
コシル基を除去して、酸性又は中性でイソフラボン誘導
体を析出させることで、高純度のイソフラボン誘導体を
高収率で得るものである。さらにα−グリコシル基およ
びβ−グルコシル基の両方を除去することにより、本来
存在しないイソフラボン誘導体のアグリコンを高純度に
生成することができる。このアグリコンは体内に吸収さ
れやすく、生理活性を発揮する活性タイプである。な
お、α−グリコシル化される部位は、フェノール性水酸
基であってもよいし、β−Ｇ−イソフラボンのような構
造の場合は、分子内のβ−結合したグルコースの中の水
酸基でもかまわない。使用する糖転移酵素を選択するこ
とによってどちらをグリコシル化してもよい。この手法
は例えば漢方薬に代表される各種動植物由来の有用成分
においても用いることができる。

【０００７】糖転移酵素による配糖化をおこなうｐＨ
は、ｐＨ８以上１０以下で酵素が作用できるｐHを選択
すればよいのだが、イソフラボン誘導体の収量を高める
工夫として、アルカリ抽出ののちにｐＨ８以上１０以下
でいったんα−グリコシル糖化合物と糖転移酵素を作用
させ、しかるのち一回目より低ｐＨ（好ましくは７以上
１０以下）で再度α−グリコシル糖化合物と糖転移酵素
を作用させる方法がある。酵素の種類により耐アルカリ
性は様々なので、酵素によりｐHはこの範囲内で適宜選
択すればよい。糖転移酵素の多くは至適ｐＨは弱酸性か
ら中性付近のため中性に近いｐＨで反応させれば配糖化
反応が進行しやすいが、アルカリ抽出ののちにいきなり
弱酸性から中性に近いｐＨとするとこの段階でイソフラ
ボン誘導体が一部析出してしまうため、最終的なイソフ
ラボン誘導体収量が減るからである。またｐＨ８以上１
０以下で配糖化を一段階で行うのでもイソフラボン誘導
体を従来の手法よりも簡便に高収率で得ることができる
ものの、アルカリ性が強いため酵素が失活しやすい。

【０００８】好ましくはｐＨ８以上１０以下でいったん
α−グリコシル糖化合物と糖転移酵素を作用させて、し
かるのちいくぶん低ｐＨに調整して（好ましくはｐＨ７
以上１０以下）、再度α−グリコシル糖化合物と糖転移
酵素を作用させるとよい。これによって、一回目の酵素
反応で配糖体の生成が不十分で未反応の難溶性のイソフ
ラボン誘導体が残っていたとしても、ｐＨを下げても可
溶性のα−グリコシルイソフラボン誘導体の共存によっ
て溶解度が上昇するため沈澱しにくくなる。これにより
糖転移酵素が作用しやすいｐＨとして酵素反応を行うこ
とで配糖化を十分に行うことができる。この手法によ
り、同様に動植物由来の有用物質も高収率で得ることが
可能である。

【０００９】以下に本発明を詳細に説明する。０．１Ｎ
ＮａＯＨ水に大豆およびおから等の大豆加工品を添加
し、攪拌することによりイソフラボン誘導体を抽出す
る。このようにした溶液にα−グリコシル糖化合物（例
えばデキストリン、澱粉、アミロペクチン）であるデキ
ストリンを添加して溶解し、酸性溶液の添加によりｐＨ
８から１０程度に調整した。糖転移酵素（例えばサイク
ロデキストリングルカノトランスフェラーゼ）を添加し
α−グリコシルイソフラボン誘導体を生成させた。この
とき、配糖体の生成率をあげるため、ｐＨをいくぶん中
性に近く調整して再度糖転移酵素作用させてもよい。糖
転移反応終了後酸性溶液を添加しｐＨ５．５〜２．０程
度にした。α−グリコシルイソフラボン誘導体は水溶性
の高い配糖体に変化しているため析出することは無く、
タンパク質を沈澱として除去し、イソフラボン化合物及
びα−グリコシルイソフラボン誘導体が高濃度溶解して
いる溶液を得ることができた。尚ｐＨを酸性にした際に
も配糖化の過程で未反応のイソフラボン誘導体も酵素反
応で生成したα−グリコシルイソフラボン誘導体の可溶
化作用により析出することはない。これは難溶性のイソ
フラボン誘導体が可溶性のα−グリコシルイソフラボン
誘導体の共存によって溶解度が上昇するという性質によ
るものと考えられる。ここにα−１，４−グルカノハイ
ドロラーゼを作用させれば配糖体から糖を除去してもと
のイソフラボン誘導体を得ることが可能である。グリコ
シル化されていないイソフラボン誘導体は難溶性である
ため、イソフラボン誘導体が沈澱として高純度で得られ
る。さらにα−１，４−グルカノハイドロラーゼを作用
させる際に、β−グルコシダーゼ等のイソフラボン骨格
と結合している糖残基間の結合を水解する酵素を併用す
ることにより、アグリコンだけを高純度に得ることも可
能である。ここまでの操作でもイソフラボン誘導体粗精
製物として食品などへの添加は十分可能であるが、さら
に必要に応じて合成吸着樹脂、例えば「ダイヤイオンＨ
Ｐ」「デュオライトＳ」「アンバーライトＸＡＤ」等に
吸着させ、エタノール等の有機溶媒で溶出すればさらに
純度の高いイソフラボン誘導体を得ることが可能であ
る。なお、イソフラボン誘導体がダイジン、ゲニスチン
などのβ−Ｇ−イソフラボンの場合はα−１，４−グル
カノハイドロラーゼとβ−グルコシダーゼを併用すれ
ば、β−Ｇ−イソフラボンのアグリコンを同様に得るこ
とが可能である。

【００１０】本発明にいう大豆加工品とは、大豆胚軸、
大豆粉、脱脂加工大豆、きな粉、豆乳、おから、味噌、
納豆その他、大豆を原料とした製品全般をさす。β−Ｇ
−イソフラボンのアグリコンとは図３及び４に示すよう
にβ−Ｇ−イソフラボンからβ結合しているグルコース
１分子が分離したフラボノイドをさす。α−グリコシル
化とは、転移反応により１分子以上のグルコースがα−
結合でイソフラボン化合物に脱水縮合することをいう。
α−グリコシル糖化合物とは、分子内にD-グルコース残
基が１分子あるいは２分子以上α結合した残基を有する
物質をさす。

【００１１】イソフラボン誘導体に用いた手法を各種動
植物の有用成分を抽出精製する手法として用いることが
可能である。すなわち動植物の抽出物中の中性から酸性
域では難溶性かあるいは不溶性である有用成分に糖鎖を
付加することで中性から酸性域においても可溶性である
性質を付与し、次いでこの水溶液を中性から酸性域にす
ることにより中性から酸性域に不溶性の蛋白質等の不純
物を沈澱化した後、上清中に含まれる可溶化された配糖
体の糖鎖を加水分解することにより、容易に有用成分を
分離・精製しようとするものである。また必要に応じて
糖転移反応で糖鎖を付加した後溶液を濃縮することも可
能である。

【００１２】本発明にいう動植物とは、大豆、大豆加工
品、海参、五倍子、黄ごん、アロエ、地黄、薬用人参、
芍薬、梔、甘草、柴胡、大黄、ドクダミをいう。本発明
に言う有用成分とはα−グリコシル基の結合する水酸基
を有する構造であればよく、β−Ｇ−イソフラボンのよ
うなグルコース残基が１個β結合した形状の化合物のほ
か、たとえばグルクロン酸残基、ラムノース残基、ガラ
クトース残基、キシロース残基などを持つ配糖体であれ
ばよく、イソフラボノイド配糖体、フラボノイド配糖
体、アントラセン配糖体、テルペン配糖体、カルコン配
糖体、ステロイド配糖体、トリテルペノイド配糖体、ア
ルカロイド配糖体、Ｃ−配糖体がある。

【００１３】

【実施例】次に実施例を示して本発明を更に詳しく説明
するが、本発明はこれにより何ら制限されるものではな
い。

【００１４】（実施例１）市販のおから１ｋｇを１０リ
ットルの０．１ＮＮａＯＨ水に添加し攪拌した。３００
ｇのデキストリンを加え、１ＮＨＣｌを添加しｐＨを
９．１に調整したのちサイクロデキストリングルカノト
ランスフェラーゼを１０００ユニット添加し、４０℃で
５時間放置した。さらにＨＣｌを添加しｐＨ８．５に調
整したのち、再度サイクロデキストリングルカノトラン
スフェラーゼを５００ユニット添加し、４０℃で１６時
間放置した。次に１ＮのＨＣｌを添加しｐＨを４．２に
調整しタンパク質を沈澱とした後上清を回収した。ｐＨ
を４．２に調整する前の溶液中の蛋白量をＢｉｏ−Ｒａ
ｄ社のＰｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙキットで測定したと
ころ３０８ｇであったのに対し、ＨＣｌを添加しタンパ
ク質を沈澱とした後の上清中の蛋白量は７．１ｇであっ
た。

【００１５】この方法で得たダイジン配糖体、ゲニスチ
ン配糖体をさらにＯＤＳカラムを用いたＨＰＬＣにより
精製し、Ｃ１３−ＮＭＲによる分析を行った結果を表１
に示す。これからも明らかなようにダイジンモノグルコ
サイドとは、ダイジン中のグルコース残基の４位にグル
コースがα−１，４結合した構造である。またダイジン
ダイグルコサイドとはダイジン中のグルコース残基の４
位にマルトースがα−１，４結合した構造である。同様
にゲニスチンモノグルコサイドとは、ゲニスチン中のグ
ルコース残基の４位にD-グルコースがα１．４結合した
構造である。またゲニスチンダイグルコサイドとはダイ
ジン中のグルコース残基の４位にマルトースがα１．４
結合した構造である。また、Ｈ１−ＮＭＲによっても、
転移したＤ-グルコース残基の1位のカップリングコンス
タントがＪ＝３．７または３．５であったことより結合
がα結合であり、このことが裏付けられた。さらにＦＡ
Ｂ−ＭＳ分析によりこれらの分子量を測定したところ５
７８，７４０でありそれぞれダイジンモノグルコサイ
ド、ダイジンダイグルコサイドであることが裏付けられ
た。同様にゲニスチンモノグルコサイド、ゲニスチンダ
イグルコサイドの分子量もそれぞれ５９４，７５６であ
ったことからこれらの構造も確認された。さらに本願方
法により生成される一連の配糖体をＴＯＦ−ＭＳ分析に
より分子量を測定したところ、ダイジンおよびゲニスチ
ンにＤ−グルコースが１から１０個程度結合した構造を
持つ一連の配糖体が生成されていることが示された。こ
の上清にグルコアミラーゼを５００ユニット添加し、４
０℃で５時間放置した。得られた沈澱からダイジン約２
５０ｍｇ、ゲニスチン約１５０ｍｇを得た。

【００１６】

【表１】

【００１７】（実施例２）市販のきな粉１ｋｇを１０リ
ットルの０．１ＮＮａＯＨ水に添加し攪拌した。３００
ｇのデキストリンを加え、１ＮＨＣｌを添加しｐＨを
９．１に調整したのちサイクロデキストリングルカノト
ランスフェラーゼを１０００ユニット添加し、４０℃で
５時間放置した。さらにＨＣｌを添加しｐＨ８．５に調
整したのち、再度サイクロデキストリングルカノトラン
スフェラーゼを５００ユニット添加し、４０℃で１６時
間放置した。この酵素反応で含まれているイソフラボン
誘導体のうちダイジンの約８５％、ゲニスチンの約６０
％がグルコースが１個以上転移結合した一連の配糖体に
変化していた。さらにＨＣｌを添加しｐＨを４．２に調
整しタンパク質を沈澱化した後上清を回収した。ｐＨを
４．２に調整する前の溶液中の蛋白量をＢｉｏ−Ｒａｄ
社のＰｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙキットで測定したとこ
ろ１２５ｇであったのに対し、ＨＣｌを添加しタンパク
質を沈澱とした後の上清中の蛋白量は４．９ｇであっ
た。この上清にグルコアミラーゼを５００ユニット添加
し、３５℃で５時間放置した。得られた沈澱からダイジ
ン約３５０ｍｇ、ゲニスチン約２００ｍｇを得た。

【００１８】（実施例３）実施例１及び２で得たＨＣｌ
添加でｐＨを４．２に調整しタンパク質を沈澱化した上
清にそれぞれ１００ユニットのグルコアミラーゼ及び１
００ユニットのβ−グルコシダーゼを添加し、３５℃で
５時間放置した。反応終了後一連の配糖体はダイゼイ
ン、ゲニステインなどのイソフラボン誘導体にまで分解
されていた。４℃に冷却することでダイゼイン及びゲニ
ステインそれぞれ実施例１ではおからより約２００ｍｇ
と約７０ｍｇ、実施例２ではきな粉より約１５０ｍｇと
約４０ｍｇを沈澱として得ることができた。

【００１９】（実施例４）大豆胚軸１００ｇを３００ｍ
ｌの０．１ＮＮａＯＨ水に添加し攪拌した。９０ｇのデ
キストリンを加えた後、１ＮＨＣｌを添加しｐＨを９．
１に調整したのちサイクロデキストリングルカノトラン
スフェラーゼを３００ユニット添加し、４０℃で５時間
放置した。さらにＨＣｌを添加しｐＨ８．５に調整した
のち、再度サイクロデキストリングルカノトランスフェ
ラーゼを２００ユニット添加し、４０℃で１６時間放置
した。この酵素反応で含まれているイソフラボン誘導体
が配糖化され、ダイジンで約８５％、ゲニスチンで約６
０％がグルコースが１個以上転移結合した一連の配糖体
に変化していた。さらにＨＣｌを添加しｐＨを３．５に
調整しタンパク質を沈澱化した後上清を回収した。ｐＨ
を３．５に調整する前の溶液中の蛋白量をＢｉｏ−Ｒａ
ｄ社のＰｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙキットで測定したと
ころ２１ｇであったのに対し、ＨＣｌを添加しタンパク
質を沈澱とした後の上清中の蛋白量は０．４ｇであっ
た。この上清にグルコアミラーゼを５００ユニット添加
し、３５℃で５時間放置した。ダイジン約２５０ｍｇ、
ゲニスチン約１００ｍｇ等のイソフラボン誘導体を沈澱
として得た。

【００２０】（実施例５）大黄からの希アルコール抽出
液の濃縮ペースト１００ｇを２００ｍｌの０．１ＮＮａ
ＯＨ水に添加し攪拌した。１０ｇのデキストリンを加
え、１ＮＨＣｌを添加しｐＨを９．１に調整したのちサ
イクロデキストリングルカノトランスフェラーゼを８０
ユニット添加し、４０℃で５時間放置した。さらにＨＣ
ｌを添加しｐＨ８．５に調整したのち、再度サイクロデ
キストリングルカノトランスフェラーゼを５０ユニット
添加し、４０℃で１６時間放置した。この酵素反応で含
まれているセンノサイドの約７０％がグルコースが１個
以上転移結合した一連の配糖体に変化していた。さらに
ＨＣｌを添加しｐＨを４．２に調整し不溶物を沈澱化し
た後上清を回収した。この上清にグルコアミラーゼを７
０ユニット添加し、１０℃で５時間放置した。得られた
沈澱から高純度のセンノサイド７０ｍｇを得た。

【００２１】（実施例６）ドクダミからの希アルコール
抽出液の濃縮ペースト１００ｇを２００ｍｌの０．１Ｎ
ＮａＯＨ水に添加し攪拌した。１０ｇのデキストリンを
加え、１ＮＨＣｌを添加しｐＨを９．１に調整したのち
サイクロデキストリングルカノトランスフェラーゼを８
０ユニット添加し、４０℃で５時間放置した。さらにＨ
Ｃｌを添加しｐＨ８．５に調整したのち、再度サイクロ
デキストリングルカノトランスフェラーゼを５０ユニッ
ト添加し、４０℃で１６時間放置した。この酵素反応で
含まれているケルシトリンの約２５％がグルコースが１
個以上転移結合した一連の配糖体に変化していた。さら
にＨＣｌを添加しｐＨを４．２に調整し不溶物を沈澱化
した後上清を回収した。この上清にグルコアミラーゼを
７０ユニット添加し、１０℃で５時間放置した。得られ
た沈澱から高純度のケルシトリン２０ｍｇを得た。

【００２２】（実施例７）黄ごんからの希アルコール抽
出液の濃縮ペースト１００ｇを２００ｍｌの０．１ＮＮ
ａＯＨ水に添加し攪拌した。１０ｇのデキストリンを加
え、１ＮＨＣｌを添加しｐＨを９．１に調整したのちサ
イクロデキストリングルカノトランスフェラーゼを８０
ユニット添加し、４０℃で５時間放置した。さらにＨＣ
ｌを添加しｐＨ８．５に調整したのち、再度サイクロデ
キストリングルカノトランスフェラーゼを５０ユニット
添加し、４０℃で１６時間放置した。この酵素反応で含
まれているバイカリンの約８０％がグルコースが１個以
上転移結合した一連の配糖体に変化していた。さらにＨ
Ｃｌを添加しｐＨを４．２に調整し不溶物を沈澱化した
後上清を回収した。この上清にグルコアミラーゼを７０
ユニット添加し、１０℃で５時間放置した。得られた沈
澱から高純度のバイカリン１５０ｍｇを得た。

【００２３】

【発明の効果】イソフラボン誘導体の精製過程にα−グ
リコシル糖化合物と糖転移酵素を作用させ、配糖体をつ
くり溶解度を高めることでイソフラボン誘導体を効率よ
く精製した。

【００２４】

【図面の簡単な説明】

【図１】グルコース残基の水酸基がα−グリコシル化さ
れたイソフラボン誘導体の基本構造

【図２】β−結合したグルコースを分子内に1分子含む
イソフラボン誘導体の基本構造

【図３】ダイゼインの分子構造

【図４】ゲニステインの分子構造

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 滝井 寛 奈良県北葛城郡広陵町笠65−１ Ｆターム(参考） 4B064 AF41 CA11 CA21 CC03 CC07 CD06 CD19 CE08 DA01 4C057 AA05 BB02 BB03 DD01 KK08

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 製造過程において分子内の水酸基がα−
   グリコシル化されたイソフラボン誘導体が生成すること
   を特徴とする、イソフラボン誘導体の製造方法
2. 【請求項２】 製造過程において分子内のグルコース残
   基の水酸基がα−グリコシル化されたイソフラボン誘導
   体（図１の基本構造を有する各種化合物）が生成するこ
   とを特徴とする、β−結合したグルコースを分子内に1
   分子含むイソフラボン誘導体（図２の基本構造を有する
   各種化合物）またはそのアグリコンの製造方法
3. 【請求項３】 イソフラボン誘導体を含む組成物にα−
   グリコシル糖化合物と糖転移酵素を作用させα−グリコ
   シルイソフラボン誘導体を生成させる工程を含む請求項
   1又は２記載のイソフラボン誘導体または請求項２記載
   のイソフラボン誘導体アグリコンの製造方法。
4. 【請求項４】 大豆及び／または大豆加工品からｐＨ８
   以上のアルカリ性溶液で請求項１または２記載のイソフ
   ラボン誘導体を抽出し、α−グリコシル糖化合物と糖転
   移酵素を作用させα−グリコシルイソフラボン誘導体を
   生成した後ｐＨ５．５以下の酸性にすることにより不純
   物を沈澱として除去する工程を含む大豆由来イソフラボ
   ン誘導体またはそのアグリコンの製造方法
5. 【請求項５】大豆及び／または大豆加工品から熱水また
   は有機溶媒で請求項１または２記載のイソフラボン誘導
   体を抽出し、α−グリコシル糖化合物と糖転移酵素を作
   用させα−グリコシルイソフラボン誘導体を生成した後
   ｐＨ５．５以下の酸性にするか冷却することにより不純
   物を沈澱として除去する工程を含む大豆由来イソフラボ
   ン誘導体またはそのアグリコンの製造方法。
6. 【請求項６】 α−１，４グルカノハイドロラーゼの
   み、またはα−１，４−グルカノハイドロラーゼとβ−
   １，４−グルカノハイドロラーゼを併用して作用させα
   −グリコシル化されたイソフラボン誘導体よりイソフラ
   ボン誘導体を難溶性の沈澱として得ることを特徴とする
   請求項１−５のいずれかに記載のイソフラボン誘導体ま
   たはそのアグリコンの製造方法。
7. 【請求項７】イソフラボン誘導体がダイジン(daidzin)
   及び／またはゲニスチン(genistin)であることを特徴と
   する請求項１〜６のいずれかのイソフラボン誘導体の製
   造方法
8. 【請求項８】大豆、大豆加工品、海参、五倍子、黄ご
   ん、アロエ、地黄、薬用人参、芍薬、梔、甘草、柴胡、
   大黄、ドクダミから選択される動植物原料よりｐＨ８以
   上のアルカリ性溶液、熱水、有機溶媒のいずれか、また
   はこれらのうち2種以上を併用して用いることで有用成
   分を抽出し、α−グリコシル糖化合物と糖転移酵素を作
   用させα−グリコシルイソフラボン誘導体を生成した後
   ｐＨ５．５以下の酸性にすることにより不純物を沈澱と
   して除去する工程を含む有用成分の製造方法
9. 【請求項９】イソフラボン誘導体または有用物質を抽出
   した後ｐＨ８〜１０でα−グリコシル糖化合物と糖転移
   酵素を作用させ、しかるのちこれより低ｐＨにて再度α
   −グリコシル糖化合物と糖転移酵素を作用させることを
   特徴とする請求項１〜８のいずれかのイソフラボン誘導
   体または動植物由来の有用物質の製造方法