HUT67410A - Method for producing optically active alcanols - Google Patents
Method for producing optically active alcanols Download PDFInfo
- Publication number
- HUT67410A HUT67410A HU9303130A HU9303130A HUT67410A HU T67410 A HUT67410 A HU T67410A HU 9303130 A HU9303130 A HU 9303130A HU 9303130 A HU9303130 A HU 9303130A HU T67410 A HUT67410 A HU T67410A
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- atcc
- rhodococcus
- catalyzed
- microorganism
- compound
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
- C07C311/01—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
- C07C311/02—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
- C07C311/08—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
- C07C311/15—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
- C07C311/21—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P11/00—Preparation of sulfur-containing organic compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/872—Nocardia
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/931—Mucor
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
A jelen találmány bizonyos ketocsoportot tartalmazó szulfonamid vegyületeknek a megfelelő, hidroxicsoportöt tartalmazó vegyületekké való sztereoszelektív mikrobiális redukciójára vonatkozik.
Larsen és Lish [Larsen, A. A. és Lish, P. M. (1964)
Natúré, 203, 1283-1284] bizonyos, a benzolgyűrűhöz kapcsolódó szulfonamid-csoportot tartalmazó fenetanol-aminsorozat biológiai aktivitásáról számol be. Ebben a sorozatban néhány vegyület adrenerg és antiadrenerg, többek között alfa-adrenerg béta-adrenerg receptor blokkoló vagy receptor stimuláló, receptor blokkoló vagy receptor stimuláló hatást mutat. A D-(+)-szotalol béta-blokkoló hatású anyag
R. H., Kirk, J. R., Gould, W. A. és Larsen, A. A.
(1966) Sulfonanilides, 9, 88-96]. Más béta-blokkolóktól eltérően III osztályba sorolható antiaritmiás tulajdonságok kal rendelkezik [Lish, P. A., Weikel, J. H. és Dungan, K. W. (1955) J. Pharma. and Exper. Therapeutics, 149, 161-173]. A béta-adrenerg blokkoló gyógyszereket, mint például a propranololt és szotalolt kémiailag jobbra- és balra forgató optikai izomerekre különítették el, és bemutatták, hogy a D-(+)-izomer ötvenszer olyan hatásos, mint a megfelelő L-(-)-izomer [Somani, P., és Bachand, T. (1969) Eur. J. Pharma, 7., 239-247], Ezért nagyon kívánatos volna, hogy egy előnyös sztereoszelektív eljárás álljon rendelkezésre a fentebb leírt szulfonamid-vegyületek enantiomertiszta izomerjeinek előállítására.
Enzimek és mikroorganizmusok bizonyos optikailag aktív vegyületek előállítására való alkalmazása a szakterületen ismert [ld. például az 5 106 736 és 4 857 468 számú amerikai
-3egyesült államokbeli szabadalmi leírásokat; Akita,H. és munkatársai (1984) Chem. Pharm. Bull., 32(4) . 1342-1348;
Hűmmel W. (1990) Biotechnology Letters, 12.(69), 403-408; és Schneider, Μ. P. és munkatársainak cikke a Bioflavour ’87 (szerk. P. Schreier) című monográfia 483-529. oldalán, De Grugter, Berlin (1988)]. Azonban ezideig bizonyos ketocsoportot tartalmazó vegyületek, mint amilyeneket az alábbiakban írunk le, sztereoszelektív mikrobiológiai/enzimatikus redukciója nem volt ismert.
Mi felfedeztük bizonyos ketonoknak, például az N-[4-(2-klór-acetil)-fenil]-metánszulfonamidnak a megfelelő (+)-alkanolokká való sztereoszelektív mikrobiális redukcióját. Az alkanolok vagy maguk is biológiailag aktívak, vagy bizonyos kardiovaszkuláris gyógyszerek, például a D-(+)-szotalol szintézisének királis kulcsintermedierjei.
A jelen találmány eljárást bocsát rendelkezésre ketocsoportot tartalmazó vegyületeknek a megfelelő hidroxilcsoporotot tartalmazó vegyületekké való sztereoszelektív enzimatikus redukciójára.
A jelen találmány közelebbről eljárást szolgáltat (I) általános képletű optikailag aktív alkanolok előállítására, a képletben
R1 kevés szénatomos alkilcsoport, arilcsoport vagy helyettesített arilcsoport;
R 1-4 szénatomos alkiléncsoport, amelynek 1-2 szénatomján keresztül kapcsolódik össze az X csoport és az (a) képletű csoport;
Y hidrogénatom, halogénatom,hidroxilcsoport, nitrocsoport, kevés szénatomos alkoxicsoport, benzil-oxi-csoport,
-4·«·· ·· ·· β · • · · · · t φ · · · · * helyettesített benzil-oxi-csoport, kevés szénatomos alkilcsoport vagy R SC^NH- általános képletű csoport, ✓ z amelyben R jelentése azonos Rj jelentésével, de attól független; és
X klóratom, brómatom, jódatom, aminocsoport, monoalkilamino-csoport, dialkil-amino-csoport vagy az aminocsoport, monoalkil-amino-csoport vagy dialkil-aminocsoport hidrokloridja;
oly módon, hogy egy (II) általános képletű ketonvegyületet, a képletben
RÍ, X és Y jelentése az előzőekben megadott, és o
R 1-4 szénatomos alkiléncsoport, amelynek 1-2 szénatomja kapcsolja össze az -X csoportot és a -(C=0)- csoportot; egy, a (II) általános képletű vegyület (I) általános képletű vegyületté való sztereoszelektív redukcióját katalizálni képes enzimmel vagy mikroorganizmussal hozunk érintkezésbe.
Az (I) általános képletű vegyületek értékes bétaadrenerg blokkolók antianginás, antiaritmiás és magasvérnyomásos állapotok kezelésére vagy ilyen anyagok előállításának hasznos közbenső termékei (ld. például a 3 351 584 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást).
Az alkil vagy alk meghatározás egyedül vagy más csoport részeként alkalmazva adott esetben helyettesített, de előnyösen helyettesítetlen egyenes vagy elágazó szénláncú telített szénhidrogéncsoportokat jelent, amelyek előnyösen egyenes láncúak és 1-10 szénatomot tartalmaznak. A helyettesítetlen csoportok többek között a metil-, etil-, propil-, izopropil-, η-butil-, izobutil-, terc-butil-, pentil-, hexil-, izohexil-, heptil-, 4,4-dimetil-, pentil-, oktil-,
-52,2,4-trimetil-pentil-, nonil-, decil- és hasonló csoportok. Az alkilcsoport alkalmas, azaz olyan csoportokkal lehet helyettesített, amelyek a jelen találmányban való felhasználásra megfelelő vegyületeket alakítanak ki. Az alkilcsoport helyettesítője például egy vagy több, előnyösen három vagy kevesebb klóratom, brómatom vagy jódatom lehet.
A kevés szénatomos alk vagy kevés szénatomos alkil meghatározás adott esetben helyettesített, de előnyösen helyettesitetlen, a fentebb leírt egyenesláncú, 1-4 szénatomos csoportokat jelenti.
A kevés szénatomos alkoxi kifejezés olyan fentebb leírt alkilcsoportokra utal, amelyek oxigénatomon (-0-) keresztül kapcsolódnak. A monoalkil-amino vagy dialkilamino meghatározás egy vagy két, fentebb leírt alkilcsoporttal helyettesített aminocsoportot jelent.
Az arilcsoport a jelen leírásban homociklusos aromás csoport, amely előnyösen 1-2 gyűrűt és 6-12 gyűrűszénatomot tartalmaz. Az arilcsoportokra példaként a fenil-, bifenilés naftilcsoportot említjük. A helyettesített aril meghatározás és a helyettesített benzil-oxi meghatározás olyan csoportokra utal, amelyek aromás gyűrűjéhez vagy gyűrűihez helyettesítők kapcsolódnak. Ilyen helyettesítőkre példaként egy vagy több, előnyösen három vagy kevesebb nitrocsoport, a fentebb leírt alkilcsoport, vagy a fentebb az alkilcsoport helyettesítőiként leírt csoport említhető.
A jelen találmány szerinti eljárás előnye, hogy enantiospecifikus. Az eljárásban elsősorban inkább a D-(+)enantiomer képződik, mint az előnyös és előnytelen enantiomerek racém elegye. Speciális esetben a megvalósítás továb-6···· ·« »* ·· • « · · ♦ • · · · · · · bi előnye például, hogy egyetlen lépésben történik az enantiospecifikus redukció a soklépéses kémiai szintézisekkel szemben. Különösen amikor a redukciót környezeti hőmérsékleten és nyomáson katalizáljuk, a ketonvegyület nagy hozammal alakul át a megfelelő alkoholos vegyület kívánt enantiomerjévé és az alkoholos vegyület enantiomertisztasága igen nagy.
A jelen találmányban használt enzim vagy mikroorganizmus bármely enzim vagy mikroorganizmus lehet, amely a fentebb leírt sztereoszelektív enzimatikus redukciót katalizálni képes. Az enzimatikus vagy mikrobiális anyagokat szabad állapotban vagy egy hordozón fizikai abszorpcióval vagy befogással immobilizált állapotban alkalmazhatjuk.
Megfelelő enzimek, azok eredetétől és tisztáságától függetlenül, azok az enzimek, amelyekre oxido-reduktázokként vagy dehidrogenázokként utalnak. Az enzim lehet például valamely mikroorganizmusból elkülönített, az elkülönítés történhet például sejtszuszpenziók homogenizálásával, amelyet aprítás, centrifugálás, DEAE-cellulózon való kromatografálás, ammónium-szulfáttal végzett frakcionálás, gélszűrő anyagon, például Sephacryl [allil-dextrán és N,N’~ metilén-bisz(akril-amid) térhálós kopolimerje] adszorbensen való kromatográfálás és ioncserélő gyantán, így Mono-Q márkanevű adszorbensen (anioncserélő, amely a negatív töltésű biomolekulát kvaterner aminocsoportokon keresztül köti meg) való kromatografálás követ. Ilyen enzimek például az L-2-hidroxi-izokaproát dehidrogenáz, tejsav dehidrogenáz, élesztő enzim koncentrátum (Sigma) és béta-hidroxibutirát dehidrogenáz, vagy az alábbiakban ismertett
mikroorganizmusokból származó enzimek.
A mikroorganizmusok alkalmazását illetően a jelen találmány szerinti eljárásokat bármely mikrobiális anyaggal végezhetjük, amely a fentebb leírt sztereoszelektiv enzimatikus redukciót katalizálni képes. A sejtek például érintetlen nedves vagy szárított, például liofilizált, permetezve szárított vagy hővel szárított sejtek, vagy kezelt sejtanyag, így szétroncsolt sejt vagy sejtextraktum formájában is alkalmazhatók. A megfelelő mikroorganizmusok magukba foglalnak baktérium, élesztő és gomba nemzetségekhez, így Achromobacter, Acinetobacter, Actinomyces, Alkaligenes, Arthrobac ter, Azotobacter, Bacillus, Brevibactérium, Corynebacterium, Flavobacterium, Methylomonas, Mycobacterium, Nocardia, Pseudomonas, Rhodococcus, Streptomyces, Xanthomonas, Aspergillus, Candida, Fusarium, Geotrichum, Hansenula, Kloeckera, Penicillum, Pichia, Rhizopus, Rhodotorula, Saccharomyces, Trichoderma, Mortierella, Cunninghamella, Torulopsis és Rhodopseudomonas nemzetséghez tartozókat.
Előnyös mikroorganizmusok az Arthrobacter simplex, Nocardia restricta, Nocardia salmonicolor, Rhodococcus fascians, Rhodococcus rhodochrous, Mycobacterium vacca, Nocardia meditteranei, Nocardia autotrophica, Rhodococcus equi, Candida albicans, Geotrichum candidum, Mortierella alpina, Pichia pastoris, Pichia methanolica, Cunninghamella echinalate, Torulopsis polysporium, Torulopsis glabrata és Acinetobacter calcoaceticus és különösen a Rhodococcus globerulus (például ATCC 21505), Candida quilliermondii (például ATCC 20318), Rhodococcus erythropolis (például ATCC 4277), Saccharomyces cerevisiae (például ATCC 24702), Pseudomonas • Λ
putida (például ATCC 11172), Mortierella rammanianna (például ATCC 38191), Hansenula fabiana (például ATCC 58045), Hansenula polymorpha (például ATCC 26012), Trichoderma polysporium (például ATCC 28014), Rhodococcus speciesek (például ATCC 21243, ATCC 12975 és ATCC 29675), Rhodococcus fascians (például ATCC 21950), Rhodococcus equi (például ATCC 14887), Aureobasidiun pullulans (például ATCC 16623), Mucor hilemalis (például ATCC 8977b) and Mortierella alpina (például ATCC 36965).
Genetikai úton előállított organizmusok alkalmazása is szóbajöhet. A gazdasejt bármely sejt, például Escherichia coli lehet, amely a módosítás után gént vagy géneket tartalmaz az itt leírt katalizáló hatás kifejtésére képes egy vagy több enzim kifejezésére.
Különösen előnyösek a Hansenula nemzetségbe tartozó mikroorganizmusok, közelebbről a Hansenula polymorpha fajok, különösen a Hansenula polymorpha ATCC 26012, a Hansenula fabiana fajok, különösen a Hansenula fabiana ATCC 58045, a Rhodococcus nemzetségbe tartozó, különösen a Rhodococcus sp ATCC 21243 és a Rhodococcus fascians sp ATCC 21950, valamint a Nocardia nemzetségbe tartozó mikroorganizmusok alkalmazása. Az ATCC az American Type Culture Collection (12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852) gyűjteményben letétbe helyezett organizmus azonosítási számára utal. Szintén nagyon előnyös, ha ezen organizmusok sejtextraktumait alkalmazzuk vagy ezekből izolált enzimeket használunk. Természetesen két vagy több enzim és/vagy mikroorganiumus kombinációja is a jelen találmány körébe tartozik.
A találmány szerinti sztereoszelektív enzimatikus • · • · * ♦ · ·« · ♦ · · ···· · • · ···« · · ·· ···
-9redukciós eljárás az alkalmazott mikroorganizmus fermentálását követően (két lépés: fermentáció és redukció) vagy azzal egyidejűleg, azaz in situ fermentációval és redukcióval (egy lépés: fermentáció és redukció) is végezhetjük. Az egylépéses eljárásban a mikroorganizmust megfelelő táptalajon addig növesztjük, amig a szükséges növekedés bekövetkezik. Ezután egy (II) általános képletű vegyületet adunk a mikrobiális tenyészethez, és a sztereoszelektív enzimatikus redukciót a fermentációval együtt folytatjuk a teljes átalakulás eléréséig.
A kétlépéses eljárás első lépésében a mikroorganizmust a fermentációhoz megfelelő tápközegben a kívánt enzimatikus (például oxido-redukciós) hatás eléréséig növesztjük. Ezt követően a sejteket centrifugálással összegyűjthetjük, és az összegyűjtött sejteket egy alkalmas pufferoldatban szuszpendálva mikrobiális sejtszuszpenziót állítunk elő. Pufferként trisz-HCl, foszfátok, nátrium-acetát és hasonlók jöhetnek szóba. Vizet is használhatunk a mikrobiális sejtek szuszpenziójának előállításához. A második lépésben a (II) általános képletű vegyületet a mikrobiális sejtszuszpenzióval összekeverjük, és ekkor a vegyület sztereoszelektív enzimatikus redukcióját a mikrobiális sejtszuszpenzió katalizálja. A redukciót előnyösen addig végezzük, amíg az összes vagy majdnem az összes (II) általános képletű vegyület sztereoszelektíven redukálttá válik.
A mikroorganizmusok növekedését a szakember megfelelő tápközeg alkalmazásával érheti el. A mikroorganizmusok tenyésztésére alkalmas tápközegek azok, amelyek a mikrobiális sejtek növekedéséhez szükséges tápanyagokat tártál
-10mazzák. Ezek általában a szükséges szénforrásokat, nitrogénforrásokat és nyomelemeket foglalják magukba. Indukáló anyagokat is adhatunk az elegyhez. Ilyen anyagként bármely olyan vegyület alkalmazható, amely fokozza a kívánt enzimatikus (például oxido-redukciós) aktivitást a mikrobiális sejten belül, ezek közé tartoznak például a ketocsoportot tartalmazó vegyületek. (I) általános képletű' vegyületeket is használhatunk indukáló anyagként a mikroorganizmus növesztése alatt.
Szénforrásként cukrokat, így maltózt, laktózt, glükózt, fruktózt, glicerint, szorbitot, szacharózt, keményítőt, mannitot, propilénglikolt és hasonlókat; szerves savakat, így nátrium-acetátot, nátrium-citrátot és hasonlókat; aminosavakat, így nátrium-glutamátot és hasonlókat; és alkoholokat, így etanolt, propanolt és hasonlókat használhatunk.
A nitrogénforrások közül az N-Z amin A-t, a kukoricalekvárt, szójalisztet, marhaextraktumot, élesztőextraktumot, melaszt, sütőélesztőt, triptont, nutrisoyt, peptont, élesztőamint, nátrium-nitrátot, ammónium-szulfátot és hasonlókat említhetünk.
Nyomelemként például foszfátokat és magnézium-, mangán-, kalcium-, kobalt-, nikkel-, vas-, nátrium- és káliumsókat használhatunk.
Az alkalmazott közeg egynél több szén- vagy nitrogénforrást vagy más tápanyagot tartalmazhat.
Az előnyös táptalaj vizes közegben a következő komponensekből állhat (tömeg%-ban kifejezve):
1.táptalaj
Malátaextraktum
1% «· «4 ·· ·· · · »« « · · · • 4 4·· ·· 9 ·« ««
| Élesztőextraktum | 1% |
| Pepton | 1% |
| Glükóz | 2% |
| pH 7,0 | |
| 2.táptalaj | |
| Pepton | 0,3% |
| Glicerin | 4% |
| Malátaextraktum | 1% |
| Élesztőextraktum | 1% |
| pH 7,0 | |
| 3.táptalaj | |
| Nátrium-szűkeinát | 2% |
| Malátaextraktum | 1% |
| Élesztőextraktum | 1% |
| Pepton | 0,3% |
| pH 7,0 |
A közeg pH-ját előnyösen kb. 6 és 8 közötti értékre, legelőnyösebben 6,5-re állítjuk, a közeget sterilezzük, például 121’C-on 30 percig, és a sterilezés után a pH-t kb.
6,5 és 7,5 közötti, előnyösen 7,0-es értékre állítjuk.
A jelen találmány szerinti eljárást olyan körülmények között végezzük, amely megfelel a kívánt (I) általános képletű vegyületek képződésének. A közeg pH-ját előnyösen
4,0 és 9,0 között, legelőnyösebben 6,0 és 8,0 között tartjuk a mikroorganizmus növekedése és a sztereoszelektív redukció alatt, akár enzimeket akár mikroorganizumusokat használunk az eljáráshoz.
A hőmérséklet a sztereoszelektív redukciós eljárás számára hozzáférhető hőenergiát határozza meg, és ezért ·««« ·· ·· ·· • f · · « · · • · · ·· ♦·
-12·· · · ·« · « «· olyan értéken kell tartani, amely ezen eljárás energiaszükségletét biztosítja. A találmány szerinti eljáráshoz megfelelő a kb. 15°C-tól a kb. 60‘C-ig terjedő hőmérséklettartomány. Előnyös hőmérséklettartomány a kb. 25’C és kb. 40°C közötti.
A nyomás a találmány megvalósítása szempontjából nem kritikus, és kényelmi okok miatt általában atmoszférikus nyomáson dolgozunk.
A találmány szerinti eljárást előnyösen aerob körülmények között játszatjuk le. A reakcióelegy keverése és levegőztetése hatással van a sztereoszelektív redukció alatt a hozzáférhető oxigén mennyiségére, a redukciót rázólombik tenyészetekben vagy fermentáló tankokban a mikroorganizmusok növekedése alatt egylépéses vagy kétlépéses eljárásként valósíthatunk meg. A keverési tartomány 5O-től 1000 rpm-ig előnyös, 50 és 500 rpm között különösen előnyös. A levegőztetés mértéke 0,1 és 10 térfogat levegő/közegtérfogat/perc (azaz 0,1-10 v/vt) között előnyös, és kb. 5 térfogat levegő/közegtérfogat/perc (azaz 5 v/vt) érték esetén a legelőnyösebb .
A (II) általános képletű vegyület teljes átalakulása például kb. 4 és 48 óra, előnyösen 12 és 24 óra közötti idő alatt megy végbe, a (II) általános képletű vegyület mikroorganizmussal vagy enzimmel történő kezelésének megkezdésétől számítva.
A jelen találmány szerinti sztereoszelektív enzimatikus redukciós eljárást kofaktort, így nikotinsavamid-adenindinukleotidőt (NADH-t) alkalmazva is megvalósíthatjuk, különösen, ha elkülönített enzimet használunk. A NADH-t
-1344 4 «44 ·· 44 4
4 · 4 4444
4 44* 44 4 • •4 · 4 4 · · *4 4444 44 44 · · · például ezután regenerálhatjuk, és újra használhatjuk. Egy további olyan enzimet, például formiát dehidrogenázt is alkalmazhatunk, amely a NADH-t in situ regenerálja.
Megfelelő hidrogéndonorok a molekuláris hidrogén, valamely formiát (például alkálifém- vagy ammónium-formiát), hipofoszfit vagy viologén, például metil-viologén jelenlétében egy elektrokémiai redukció. Az is lehetséges, hogy a NADH-t további enzim alkalmazása nélkül, például etanolt vagy formiátot használva regeneráljuk.
Előnyös reakcióközegként vizes folyadékot alkalmazunk, bár szerves folyadék, vagy elegyedő vagy nemelegyedő (kétfázisú) szerves/vizes folyadékelegy is használható.
A (II) általános képletű kiindulási anyagból a vegyület és a reakcióközeg együttes tömegére vonatkoztatva előnyösen 0,1 és 25 tömeg% közötti mennyiséget alkalmazunk. A használt enzim vagy mikroorganizmus kiindulási anyagra vonatkoztatott mennyiségét úgy választjuk meg, hogy a jelen találmány szerinti sztereoszelektív enzimatikus redukció katalízise biztosított legyen.
Előnyös olyan reakciókörülményeket alkalmazni, amelyek 80%-nál nagyobb, legelőnyösebben 90%-nál nagyobb hozamot, és kb. 60%-nál nagyobb, előnyösen 80%-nál nagyobb, előnyösebben kb. 90%-nál nagyobb és legelőnyösebben 99%-nál nagyobb optikai tisztaságú D-(+)-enantiomer képződését teszik lehetővé.
A (II) általános képletű vegyület csoportjai, így például a hidroxilcsoportok a jelen találmány szerinti sztereoszelektív enzimatikus redukciós eljárásban való alkalmazáskor adott esetben védettek lehetnek; az ilyen • 4 4 4 ·· • · · · · · ·* « · ··· 4· * ·· ···· ·4 ·· ···
-14csoportokat aztán adott esetben ismét szabaddá tehetjük.
A jelen találmány szerinti sztereoszelektív redukciós eljárás termékeit ismert módszerekkel, például extrakcióval, desztillációval kristályosítással, oszlopkromatográfiás és hasonló eljárásokkal különíthetjük el és tisztíthatjuk.
A kívánt (I) általános képletű vegyület és a reakcióközegben maradó vegyületek elválasztásának egyik előnyös módszere az extrakció. Olyan esetben, amikor a terméket teljes sejtszuszpenzió alkalmazásával állítjuk elő, például az extrakciós eljárás abból áll, hogy a reakcióközeget, amely a fenti szuszpenziót tartalmazza, etil-acetáttal extraháljuk, a szerves réteget telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, és az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. Ekkor olajos folyadékot kapunk, amelyet preparatív HPLC eljárással, C18 (25μ) oszlopon (4,8 x 24 cm) kromatografálva a kívánt (I) általános képletű vegyülethez jutunk.
A következő példák a találmány szemléltetésére szolgálnak, és nem tekinthetők korlátozó jellegüeknek.
1.példa
Sztereoszelektív enzimatikus redukció: különböző törzsek egész sejtjeinek alkalmazása
A következő enzimatikus redukciós folyamat szubsztrátja N-[ 4-(l-oxo-2-klór-etil)-fenil]-metánszulfonamid (A vegyület), amely az (A) képletnek megfelelő szerkezetű.
A kívánt termék (B vegyület) a (B) képlettel jellemezhető, és a neve (+)-N-[4-(l-hidroxi-2-klór-etil)-fenil]metánszulfonamid. A redukciós eljárásban alkalmazott mik ·«·« ·· ·· · · · • · · · · · · · • · ··· ·♦ · ··· · · · · · ·· ···· «· ♦· ··*
-15roorganiumusokat az 1.Táblázatban soroljuk fel.
A felhasznált mikroorganizmusokat fiolában, folyékony nitrogénben tartjuk. Az inokulum rutinszerű készítéséhez egy fiolát egy 500 ml-es lombikban levő 100 ml 1.táptalajra oltunk (összetételét ld. fentebb), és 28’C-on, 280 rpm mellett egy rázógépen 48 órán át inkubálunk. A mikroorganizmus növekedése után a tenyészetből 10 ml-t egy 500 ml-es lombikban levő 100 ml 1.táptalajra oltunk, és 28°C-on és 250 rpm mellett egy rázógépen inkubálunk.
A sejteket összegyűjtjük és 100 millimólos, 6-os pH-jű kálium-foszfát pufferben szuszpendáljuk. 10 ml 20 tömeg/térfogat%-os sejtszuszpenziót készítünk. Ezt még 25 mg szubsztráttal (A vegyülettel) és 750 mg glükózzal kiegészítjük, és a redukciót (biotranszformációt) 28°C-on, 150 rpm mellett 22-40 órán át végezzük. Egy térfogat mintát kiveszünk, és két térfogat etil-acetáttal extrahálunk, majd az elválasztott szerves fázist 0,2 pm LID/x szűrőn keresztül szűrjük és összegyűjtjük.
A mintákban a szubsztrát és termékkoncentrációt Hewlett Packard gákromatográf segítségével, lángionizációs detektor (FID) alkalmazásával vizsgáljuk. A méréshez Hewlett Packard (Palo Alto, California) kondenzált szilícium kapilláris oszlopot (térhálós metil-szilikon, 15 m hosszúság, 0,33 pm filmvastagság, 0,32 mm belső átmérő), 250°C detektor hőmérsékletet és 190°C injektálási hőmérsékletet alkalmazunk. A kemence kezdeti hőmérséklete 195’C és végső hőmérséklete 205°C. A hőmérsékletet 0,5’C/perc sebességgel emeljük. Vivőgázként 50 ml/perc sebességű héliumot használunk. A szubsztrát (A vegyület) retenciós ideje 1,02 perc, • » • 4
-16és a megfelelő redukált termék (B vegyület) retenciós ideje
9,6 perc. A termék (B vegyület) optikai tisztaságát királis HPLC eljárással határozzuk meg. Baker-bond Chiralcel OB oszlopot használunk környezeti hőmérsékleten. Az injektált térfogat 20 μΐ, mozgó fázisként 65% hexánt és 35% n-butanolt tartalmazó elegyet használunk, az átfolyási sebesség 0,5 ml/perc, és a detektálás 230 nm hullámhossznál történik. Az R-(+)-enantiomer retenciós ideje 16,32 perc, és az S-(-)enantiomer retenciós ideje 13,63 perc.
Az 1.táptalajon növesztett különböző mikroorganizmusokkal és a fenti eljárást követve kapott eredmények az
1.Táblázatban láthatók.
1.Táblázat
Az A vegyület B vegyületté történő mikrobiális redukciója
Mikroorganizmus
Reakcióidő (óra)
A B vegyület hozama optikai (%) tisztasága (%)
| Aureobasidium pullulans ATCC 16623 | 48 | 73 | 75 |
| Hansenula polymorpha | |||
| ATCC 26012 | 20 | 95 | 99 |
| Mucor hilemalis | |||
| ATCC 8977b | 48 | 34 | 70 |
| Mortierella alpina | |||
| ATCC 36965 | 20 | 35 | 80 |
| Trichoderma polysporium | |||
| ATCC 28014 | 20 | 86 | 77 |
···· ·« · · • · · · • · · ·« ·· *·«» ·«
-17(a táblázat folytatása)
| Rhodococcus erythropolis | 63 | 68 | |
| ATCC 4277 | 20 | ||
| Rhodococcus sp. ATCC 12975 | 22 | 44 | 60 |
| Rhodococcus sp. ATCC 29675 | 22 | 53 | 95 |
| Rhodococcus sp. ATCC 21243 | 22 | 64 | 97 |
| Rhodococcus fascians ATCC 21950 | 22 | 45 | 99 |
| Rhodococcus globerulus ATCC 21505 | 22 | 63 | 78 |
| Rhodococcus equi ATCC 14887 | 22 | 75 | 85 |
2.példa
Egész se.itek alkalmazása: a reakcióidő változtatása
Ezen eljárásban a szubsztrát az A vegyület és a kívánt termék a B vegyület, ahogy azt az 1.példában leírtuk.
Hansenula polymorpha ATCC 26012 sejteket 100 ml
1.táptalajt tartalmazó 500 ml-es lombikban növesztünk 25°Con, 48 órán át, 280 rpm mellett. A tenyészetből 100 ml-t egy fermentorban levő 15 liter 2.táptalajra (az összetételét ld. fentebb) oltunk. A fermentálást 25’C-on, 15 liter/perc (LPM) levegő bejuttatása és 500 rpm sebességű keverés mellett 60 órán át végezzük. A fermentorból a sejteket összegyűjtjük, • · ··· ·· · ··· ···· · ·· ··*· ·· ·· ··· és az A vegyület B vegyületté való redukciójához (biotranszformációhoz) használjuk.
200 g sejtet 3 liter 100 millimólos, 6,0-os pH-jú kálium-foszfát pufferben szuszpendálunk, és homogén sejtszuszpenziót állítunk elő. 12 g A vegyületet és 120 g glükózt adunk a sejtszuszepnzióhoz, és az A vegyület B vegyületté való biotranszformációját 22’C-on, 160 rpm mellett 24 órán át végezzük. 24 óra eltelte után még 35 g glükózt adunk az elegyhez, és a biotranszformációt további 72 órán át, 22°C-on, 160 rpm mellett folytatjuk. Mintákat veszünk, és a termék hozamát és optikai tisztaságát az
1. példában leírt módon meghatározzuk. Az eredményeket a
2. Táblázatban foglaljuk össze.
2.Táblázat
| Reakcióidő | A B vegyület | |
| hozama (%) | optikai tisztasága (%) | |
| 6 | 28 | - |
| 12 | 52 | - |
| 18 | 78 | - |
| 22 | 96 | 99 |
3.példa
Egész sejtek és kofaktorok alkalmazása
Ezen eljárásban a szubsztrát az A vegyület és a kívánt termék a B vegyület, ahogy azt az 1.példában leírtuk.
-19Hansenula polymorpha ATCC 26012 sejteket 1.táptalajon és 2.táptalajon növesztünk a 2.példában leírt módon.
150 g sejtet 1,5 liter 0,2 mólos, 6,0-os pH-jú káliumfoszfát pufferben szuszpendálunk. A homogenizált sejtszuszpenziót 4‘C-on, Microfluidizer készülékben, 89 579 kPa (13 000 psi) nyomáson aprítjuk. Az összetört sejteket 12 000 rpm-en 30 percig centrifugáljuk. A tiszta felülúszót ( sejtextraktum) használjuk az A vegyület B vegyületté való biotranszformációjához.
Egy liter sejtextraktumhoz 2,5 g szubsztrátumot (A vegyület), 500 egység formiát dehodrogenázt, 0,7 mM NAD-ot (nikotinsavamid-adenin-dinukleotidőt) és 25 g nátrium-formiátot adunk. A reakciót 6,0-os pH-n, 150 rpm-es keverés mellett és 22°C-on végezzük. Időközönként mintát veszünk, és a reakcióhozamot és a B vegyület optikai tisztaságát az 1.példában leírt módon vizsgáljuk. A kapott eredmények a
3.Táblázatban láthatók.
3.Táblázat
| Reakcióidő | B vegyület | Hozam | Optikai tisztaság |
| (óra) | (g/liter) | (%) | (%) |
| 24 | 2,3 | 90 | 99 |
| A fenti | eljárásban az | A vegyület | B vegyületté való |
biotranszformációjához használt NADH kofaktor képződése és formiát dehidrogenázzal formiát eletkezése közben NAD+ ionná • « ··· való regenerálása a biotranszformációval egyidőben megy végbe az alábbiak szerint.
formiát -----------------------------> COg formiát dehidrogenáz
Miután az A vegyület teljes mértékben B vegyületté alakult, a reakcióelegy pH-ját 7,0-re állítjuk, és az elegyet három alkalommal azonos térfogatú etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist elválasztjuk, és két alkalommal 0,7 mólos nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk. Az elválasztott szerves réteget vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és az etil-acetátot csökkentett nyomáson eltávolítjuk. A kapott olajos maradékot vákuumban, szobahőmérsékleten szárítjuk, így az elkülönített termékre számítva 85%-os hozamban halvány fehér szilárd anyagot kapunk, amelynek optikai tisztasága 99%-os.
Claims (21)
1. Eljárás (I) általános képletű optikailag aktív alkanol vegyületek előállítására, a képletben
R1 kevés szénatomos alkilcsoport, arilcsoport vagy helyettesített arilcsoport;
R 1-4 szénatomos alkiléncsoport, amelynek 1-2 szénatomján keresztül kapcsolódik össze az X csoport és az (a) képletű csoport;
Y hidrogénatom, halogénatom,hidroxilcsoport, nitrocsoport, kevés szénatomos alkoxicsoport, benzil-oxi-csoport, helyettesített benzil-oxi-csoport, kevés szénatomos o alkilcsoport vagy R SC^NH- általános képletű csoport, amelyben R jelentése azonos R^ jelentésével, de attól független; és
X klóratom, brómatom, jódatom, aminocsoport, monoalkilamino-csoport, dialkil-amino-csoport vagy az aminocsoport, monoalkil-amino-csoport vagy dialkil-aminocsoport hidrokloridja, azzal jellemezve, hogy egy (II) általános képletű ketonvegyületet, a képletben
R1, X és Y jelentése az előzőekben megadott, és
R 1-4 szénatomos alkiléncsoport, amelynek 1-2 szénatomján keresztül kapcsolódik össze az -X csoport és a -(C=0)csoport, egy» a (II) általános képletű vegyület (I) általános képletű vegyületté való sztereoszelektív redukcióját katalizálni képes enzimmel vagy mikroorganizmussal hozunk érintkezésbe.
2. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakciót az L-2-hidroxi-izokaproát dehidrogenáz, tejsav • · • 9 :.. · * · *
9 · dehidrogenáz, élesztőenzim koncentrátum és béta-hidroxibutirát dehidrogenáz enzimek valamelyikével katalizáljuk.
3. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakciót az Achromobacter, Acinetobacter, Actinomyces,
Alkaligenes, Arthrobacter, Azotobacter, Bacillus, Brevibacterium, Corynebacterium, Flavobacterium, Methylomonas, Mycobacterium, Nocardia, Pseudomonas, Rhodococcus, Streptomyces, Xanthomonas, Aspergillus, Candida, Fusarium, Geotrichum, Hansenula, Kloeckera, Penicillum, Pichia, Rhizopus, Rhodotorula, Saccharomyces, Trichoderma, Mortierella, Cunninghamella, Torulopsis és Rhodopseudomonas nemzuetségek valamelyikébe tartozó mikroorganizmussal katalizáljuk.
4. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakciót Arthrobacter simplex, Nocardia restricta, Nocardia salmonicolor, Rhodococcus fascians, Rhodococcus rhodochrous, Mycobacterium vacca, Nocardia meditteranei, Nocardia autotrophica, Rhodococcus equi, Candida albicans, Getrichum candidum, Mortierella alpina, Pichia pastoris, Pichia methanolica, Cunninghamella echinalate, Torulopsis polysporium, Torulopsis glabrata, Acinetobacter calcoaceticus, Nocardia globerula, Candida guilliermondii, Rhodococcus erythropolis, Saccharomyces cerevisiae, Pseudomas putida, Mortierella rammanianna, Hansenula fabiana, Hansenula polymorphya, Trichoderma polysporium, Rhodococcus fascians és Nocardia restricta microorganizmusok valamelyikével katalizáljuk .
5. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakciót Rhodococcus globerulus ATCC 21505, Candida guilliermondii ATCC 20318, Rhodococcus erythropolis ATCC 4277, Saccha-23- ···· ·· • · · • · « · · ·· ···· ·· t
• 4* romyces cerevisciae ATCC 24702, Pseudomonas putida ATCC 11172, Mortierella rammanisma ATCC 38191, Hansenula fabiana ATCC 58045, Hansenula polymorpha ATCC 26012, Trichoderma polysporium ATCC 28014, Rhodococcus species ATCC 21243, Rhodococcus fascians ATCC 21950, Rhodococcus equi ATCC
14887, Aureobasidium pullulans ATCC 16623, Mucor hilemalis ATCC 8977b, Mortierella alpina ATCC 36965, Rhodococcus sp. ATCC 12975 és Rhodococcus sp. ATCC 29675 mikroorganizmusok valamelyikével katalizáljuk.
6. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakciót a Hansenula, Rhodococcus és Nocardia nemzetséghez tartozó mikroorganizmusok valamelyikével katalizáljuk.
7. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakciót Hansenula polymorpha ATCC 20012, Hansenula fabiana ATCC 58045, Rhodococcus sp. ATCC 21243 és Rhodococcus fascians ATCC 21950 mikroorganizmusok valamelyikével katalizáljuk.
8. Az 1.igénypont szerinti eljárás R^ helyén kevés szénatomos alkilcsoportot vagy fenilcsoportot, R helyén etilenvagy metiléncsoportot, Y helyén hidrogénatomot vagy kevés szénatomos alkilcsoportot és X helyén klóratomot vagy izopropil-amino-hidroklorid-csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy megfelelően helyettesített kiindulási anyagokat alkalmazunk.
9. Az 1.igénypont szerinti eljárás R^ helyén metilcsoportot, R helyén metiléncsoportot, Y helyén hidrogénatomot es X helyén klóratomot tartalmazó (I) általános képletű vegyület előállítására, azzal jellemezve, hogy megfelelően helyettesített kiindulási anyagot alkalmazunk.
• · «· • · · «···
4 · ·*
10. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy mikroorganizmussal katalizáljuk és egylépéses fermentációként valósítjuk meg.
11. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy mikroorganizmussal katalizáljuk és kétlépéses fermentációként valósítjuk meg.
12. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy mikroorganizmussal katalizáljuk, és indukáló anyag jelenlétében végezzük.
13. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy enzimmel katalizáljuk és egy kofaktor jelenlétében végezzük.
14. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy mikroorganizmussal katalizáljuk, és egy vagy több, maltóz, tejcukor, glükóz, fruktóz, glicerin, szorbit, szacharóz, keményítő, mannit, propilénglikol, nátrium-acetát, nátriumcitrát, nátrium-glutamát, etanol és propanol közül választott szénforrást; N-Z amin A, kukoricalekvár, szójaliszt, marhaextraktum, élesztóextraktum, melasz, sütőélesztő, tripton, nutrisoy, pepton, élesztőamin, nátrium-nitrát és ammónium-szulfát közül választott nitrogénforrást; és egy vagy több, a foszfátok, mangán-, kalcium-, kobalt-, nikkel-, vas-, nátriumsók és káliumsók közül választott nyomelemet tartalmazó közegben végezzük.
15. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kb. 4-es és kb. 9-es közötti pH-η, és kb.
15’C és kb.
60’0 közötti hőmérsékleten végezzük.
16. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kb. 6-os és kb. 8-as közötti pH-η, kb.
25°C és kb.
40’C közötti hőmérsékleten és 4-48 órán át végezzük.
···· ·· ·« • · · · • « «·· • * ···· ·«
-25·» ·· •·
17. az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy mikroorganizmussal katalizáljuk és keverés közben végezzük.
18. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzzal jellemezve, hogy egy további lépésként a kívánt terméket elválasztjuk.
19. A 18.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az elválasztást extrakcióval, desztillációval, kristályosítással vagy oszlopkromatográfiás eljárással végezzük.
20. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kívánt termék hozama kb. 80%-nál nagyobb, és a kívánt termék optikai tisztasága nagyobb, mint kb. 80%.
21. Az 1.igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kívánt terméket hozama kb. 90%-nál nagyobb, és a kívánt termék optikai tisztasága kb. 90%-nál nagyobb.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US97228692A | 1992-11-05 | 1992-11-05 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9303130D0 HU9303130D0 (en) | 1994-01-28 |
| HUT67410A true HUT67410A (en) | 1995-04-28 |
Family
ID=25519464
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9303130A HUT67410A (en) | 1992-11-05 | 1993-11-04 | Method for producing optically active alcanols |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5391495A (hu) |
| EP (1) | EP0596490A3 (hu) |
| JP (1) | JPH06233695A (hu) |
| KR (1) | KR940011636A (hu) |
| CN (1) | CN1091472A (hu) |
| AU (1) | AU5044393A (hu) |
| CA (1) | CA2103932A1 (hu) |
| FI (1) | FI934874A (hu) |
| HU (1) | HUT67410A (hu) |
| IL (1) | IL107312A0 (hu) |
| MX (1) | MX9306727A (hu) |
Families Citing this family (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2126313T3 (es) * | 1994-09-22 | 1999-03-16 | Rhone Poulenc Nutrition Animal | Hidrolisis enzimatica de los 4-metiltiobutironitrilos. |
| NZ300400A (en) * | 1995-01-10 | 1998-10-28 | Upjohn Co | (s)-enantiomeric methanesulphonamide derivatives useful in treating cardiac arrhythmia |
| US5874475A (en) * | 1995-12-21 | 1999-02-23 | Pharmacia & Upjohn Company | Antiarrhythmic (S)-enantiomers of methanesulfonamides |
| US5534422A (en) * | 1995-05-19 | 1996-07-09 | Merck & Co., Inc. | Bioconversion of beta keto-ester to (R) hydroxyester |
| US5900368A (en) * | 1996-09-17 | 1999-05-04 | Merck & Co., Inc. | Process for bioreduction of bisaryl ketone to bisaryl alcohol |
| US5807926A (en) * | 1996-10-11 | 1998-09-15 | Mcgill University | Immobilized cofactor-dependent enzymes |
| JP4012299B2 (ja) * | 1998-02-25 | 2007-11-21 | ダイセル化学工業株式会社 | ハロゲン置換を含む光学活性アルコールの製造方法 |
| KR20040031674A (ko) * | 2000-08-16 | 2004-04-13 | 브리스톨-마이어스스퀴브컴파니 | 치환된 옥소-부탄의 입체선택성 환원 |
| KR20030085012A (ko) | 2001-03-22 | 2003-11-01 | 브리스톨-마이어스스퀴브컴파니 | 치환된 아세토페논의 입체선택적 환원 |
| JP2003000290A (ja) * | 2001-06-25 | 2003-01-07 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 光学活性（ｒ）−２−クロロ−１−（３′−クロロフェニル）エタノールの製造法 |
| EP1487974A4 (en) * | 2002-02-22 | 2005-11-16 | Univ Illinois | NAD PHOSPHITE OXYDOREDUCTASE, NEW CATALYST FROM BACTERIA USEFUL FOR REGENERATING NAD (P) H |
| DE10248277A1 (de) * | 2002-10-16 | 2004-05-06 | X-Zyme Gmbh | Verfahren zur Herstellung optisch aktiver Verbindungen |
| MX2007002247A (es) * | 2004-08-26 | 2007-04-20 | Pfizer | Biotransformacion enantioselectiva para la preparacion de intermedios de inhibidores de la proteina tirosina quinasa. |
| DE102005021241B3 (de) * | 2005-05-09 | 2006-11-16 | Technische Universität München | Verfahren zur Herstellung von organischen Verbindungen |
| US7582468B2 (en) * | 2005-05-25 | 2009-09-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Process for preparing (2R,3S)-1,2-epoxy-3-(protected)amino-4-substituted butane and intermediates thereof |
| WO2006130657A2 (en) * | 2005-05-31 | 2006-12-07 | Bristol-Myers Squibb Company | Stereoselective reduction process for the preparation of pyrrolotriazine compounds |
| AT504542B1 (de) * | 2006-12-07 | 2008-09-15 | Iep Gmbh | Verfahren zur enantioselektiven enzymatischen reduktion von secodionderivaten |
| ES2360336T3 (es) * | 2007-06-22 | 2011-06-03 | Bristol-Myers Squibb Company | Composiciones en comprimidos que contienen atazanavir. |
| ATE500820T1 (de) * | 2007-06-22 | 2011-03-15 | Bristol Myers Squibb Co | Tablettierte atazanavirhaltige zusammensetzungen |
| DK2178513T3 (da) * | 2007-06-22 | 2011-07-11 | Bristol Myers Squibb Co | Sammensætninger i tabletform indeholdende atazanavir |
| MX2009013504A (es) * | 2007-06-22 | 2010-03-26 | Bristol Myers Squibb Co | Composiciones comprimidas que tienen atazanavir. |
| SG10201404330VA (en) * | 2008-08-29 | 2014-10-30 | Codexis Inc | Ketoreductase Polypeptides For The Stereoselective Production Of (4S)-3[(5S)-5(4-Fluorophenyl)-5-Hydroxypentanoyl]-4-Phenyl-1,3-Oxazolidin-2-One |
| CN101760436B (zh) * | 2008-12-26 | 2011-12-07 | 安琪酵母股份有限公司 | 一种酵母菌株,制备方法及其相关应用 |
| MY155662A (en) * | 2009-06-22 | 2015-11-13 | Sk Biopharmaceuticals Co Ltd | Method for preparation of carbamic acid (r)-1-aryl-2-tetrazolyl-ethyl ester |
| US8404461B2 (en) | 2009-10-15 | 2013-03-26 | SK Biopharmaceutical Co. Ltd. | Method for preparation of carbamic acid (R)-1-aryl-2-tetrazolyl-ethyl ester |
| CA2841820C (en) | 2011-07-13 | 2017-01-03 | Foodchek Systems Inc. | Culture medium, method for culturing listeria, and method for detecting listeria |
| CN111019981A (zh) * | 2019-12-27 | 2020-04-17 | 蚌埠丰原医药科技发展有限公司 | 不对称法合成r-去甲肾上腺素的方法 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3342584A (en) * | 1963-07-10 | 1967-09-19 | Ansul Co | Method for killing broadleaf and grassy weeds in cotton |
| US4857468A (en) * | 1985-04-13 | 1989-08-15 | Kanegafuchi Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Process for preparing optically active 2-halo-1-phenyl ethanol |
| DE3724197A1 (de) * | 1987-07-22 | 1989-02-02 | Merck Patent Gmbh | Verfahren zur reduktion von ketonen |
| US5106736A (en) * | 1991-04-23 | 1992-04-21 | E.R. Squibb & Sons, Inc. | Enzymatic process for enantiomer-specific perparation of mercapto alkanoic acid compounds |
-
1993
- 1993-08-12 CA CA002103932A patent/CA2103932A1/en not_active Abandoned
- 1993-10-18 IL IL107312A patent/IL107312A0/xx unknown
- 1993-10-20 JP JP5293772A patent/JPH06233695A/ja active Pending
- 1993-10-25 KR KR1019930022246A patent/KR940011636A/ko not_active Application Discontinuation
- 1993-10-27 US US08/143,976 patent/US5391495A/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-10-28 MX MX9306727A patent/MX9306727A/es unknown
- 1993-11-02 CN CN93119819A patent/CN1091472A/zh active Pending
- 1993-11-04 FI FI934874A patent/FI934874A/fi unknown
- 1993-11-04 AU AU50443/93A patent/AU5044393A/en not_active Abandoned
- 1993-11-04 HU HU9303130A patent/HUT67410A/hu unknown
- 1993-11-04 EP EP93117899A patent/EP0596490A3/en not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MX9306727A (es) | 1994-06-30 |
| FI934874A (fi) | 1994-05-06 |
| EP0596490A2 (en) | 1994-05-11 |
| CA2103932A1 (en) | 1994-05-06 |
| JPH06233695A (ja) | 1994-08-23 |
| CN1091472A (zh) | 1994-08-31 |
| IL107312A0 (en) | 1994-01-25 |
| HU9303130D0 (en) | 1994-01-28 |
| AU5044393A (en) | 1994-05-19 |
| US5391495A (en) | 1995-02-21 |
| KR940011636A (ko) | 1994-06-21 |
| EP0596490A3 (en) | 1995-04-26 |
| FI934874A0 (fi) | 1993-11-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HUT67410A (en) | Method for producing optically active alcanols | |
| EP0449648B1 (en) | Process for producing R(-)-mandelic acid and derivatives thereof | |
| JP2004532017A (ja) | 置換アセトフェノンの立体選択的な還元反応 | |
| JP3843255B2 (ja) | 置換オキソブタンの立体選択的還元 | |
| EP0417785B1 (en) | Process for preparing optically active 3-phenylglycidic acid esters | |
| US5393663A (en) | Stereoselective preparation of halophenyl alcohols from ketones | |
| JPH0630783A (ja) | ３，５−ジオキソエステルの立体選択性微生物的または酵素的還元による３−ヒドロキシ−５−オキソ、３−オキソ−５−ヒドロキシおよび３，５−ジヒドロキシエステルの製造 | |
| AU2001280698A1 (en) | Stereoselective reduction of substituted oxo-butanes | |
| JPH10507360A (ja) | キラル−α−第３級カルボン酸エステルの酵素的調製法 | |
| EP1240347B1 (en) | Yeast-based process for production of l-pac | |
| JP4818507B2 (ja) | 光学活性３−キヌクリジノールの製造法 | |
| EP1273665B1 (en) | Process for the production of optically active beta-amino alcohols | |
| RU2235784C2 (ru) | Стереоизбирательное микробное восстановление рацемического тетралона (его варианты) | |
| JP3703928B2 (ja) | 光学活性ｎ−ベンジル−３−ピロリジノールの製造方法 | |
| US5942644A (en) | Precursors for the production of chiral vicinal aminoalcohols | |
| US6451587B1 (en) | Microbial asymmetric reduction of 2-chloro-1-[-6-(2,5-dimethyl-pyrrol-1-yl)-pyridin-3-yl]-ethanone | |
| Goswami et al. | Microbial reduction of α-chloroketone to α-chlorohydrin | |
| US4981794A (en) | Method of preparing D(-)-β-hydroxyisobutyric acid by fermentation | |
| EP0751224B1 (en) | Process for producing (r)-2-amino-1-phenylethanol or halogenated derivative thereof, process for producing optically active phenylserine or halogenated derivative thereof, and novel compound 3-(3-chlorophenyl)serine | |
| JP2005117905A (ja) | 光学活性１−ベンジル−３−ピロリジノールの製造方法 | |
| US5834261A (en) | Method for the production of chiral vicinal aminoalcohols | |
| JPH0569512B2 (hu) | ||
| JP2003235595A (ja) | 光学活性ヒドロキシケトエステルの製造法 | |
| JPH02291280A (ja) | 光学活性（ｒ）‐（‐）‐３‐ハロ‐１，２‐プロパンジオールの製造法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| DFD9 | Temporary protection cancelled due to non-payment of fee |