HUT62558A - Process for producing n-phenylthiourea derivaties and pharmaceutical compositions comprising same - Google Patents
Process for producing n-phenylthiourea derivaties and pharmaceutical compositions comprising same Download PDFInfo
- Publication number
- HUT62558A HUT62558A HU9202047A HU9202047A HUT62558A HU T62558 A HUT62558 A HU T62558A HU 9202047 A HU9202047 A HU 9202047A HU 9202047 A HU9202047 A HU 9202047A HU T62558 A HUT62558 A HU T62558A
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- formula
- compounds
- compound
- group
- serum
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
- A61K31/17—Amides, e.g. hydroxamic acids having the group >N—C(O)—N< or >N—C(S)—N<, e.g. urea, thiourea, carmustine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C335/00—Thioureas, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
- C07C335/04—Derivatives of thiourea
- C07C335/16—Derivatives of thiourea having nitrogen atoms of thiourea groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Footwear And Its Accessory, Manufacturing Method And Apparatuses (AREA)
Description
A találmány tárgyát N-fenil-tiokarbamid-származékok és ezek gyógyszerészeti felhasználása képezi.
Nevezett vegyületek (I) általános képletnek - ahol
R1 jelentése propil-, izopropil- vagy 2-metil-propil-csoport,
R2 jelentése 9-35 atomszámú halogénatom, és • · *« · • · · ·
R3 jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport.
R^ jelentése előnyösen propil- vagy 2-metil-propil-csoport. R2 jelentése előnyösen klóratom. Rg jelentése előnyösen metil-, etil-, izopropil- vagy terc-butil-csoport, előnyösen metil-, etil- vagy izopropilcsoport, különösen előnyösen metilcsoport.
Az (I) általános képletű vegyületek egy alcsoportjában Rj jelentése propil- vagy metil-propil-csoport és Rg jelentése 1-3 szénatomos alkilcsoport; különösen R^ jelentése propilcsoport, R2 jelentése fluor- vagy klóratom és Rg jelentése metil- vagy etilcsoport; még különösebben Rg jelentése metilcsoport, még különösebben R^ jelentése 2-metilpropil-csoport.
Némely (I) általános képletű vegyületnek aszimmetriacentruma lehet. Ezért az ilyen vegyületek mindegyikének két enantiomerje van. Valamennyi lehetséges izomer és racemát a találmány tárgyát képezi. A vegyületeknek előnyös esetben nincs aszimmetria-centrumuk.
1-4 szénatomos alkilcsoport alatt előnyösen metil- vagy etilcsoportot, különösen metilcsoportot értünk. A halogénatom előnyösen klóratom.
Az (I) általános képletű vegyületek egyik alcsoportjában [(Ip) általános képletű vegyületek] az Rg szubsztituens jelentése nem 4 szénatomos alkilcsoport.
Az (I) általános képletű vegyületek egy másik alcsoportjában az R3 szubsztituens jelentése nem 1-nél nagyobb szénatomszámú alkilcsoport.
Valamely (I) általános képletű vegyület úgy állítható elő, hogy a megfelelő (II) általános képletű - ahol R2 és R3 jelentése a fenti - vegyületet valamely (III) általános képletű - ahol Rj^ jelentése a fenti - vegyülettel reagáltatunk.
Az (I) általános képletű vegyületek fenti előállítási eljárását a szokásos módon hajtjuk végre.
Ez egy izotiocianátnak egy aminnal végbemenő reakciója.
A reakcióhőmérséklet előnyösen körülbelül 10°C-tól körülbelül 40°C-ig terjed, előnyösen 20 - 30°C. A szokásos módon valamely vízmentes, iners oldószert, mint halogénezett, kisebb molekulatömegű alkánt, például metilén-dikloridot vagy valamely 1-3 (2-3) szénatomos alkanoátot, például etil-acetátot használunk.
Az (I) általános képletű vegyület a reakcióelegyből a szokásos módon izolálható és kívánt esetben tisztítható.
Aszimmetria-centrummal rendelkező vegyület például optikailag tiszta formában úgy nyerhető, hogy optikailag tiszta kiindulási anyagot használunk.
A kiindulási anyagként használt vegyületek (amennyiben azok előállítását itt nem írjuk le) önmagában ismert módon, ismert vegyületekből kiindulva állíthatók elő, például úgy, amint azt a példákban írjuk le.
A következő példák a találmányt szemléltetik.
Valamennyi hőfokadat Celsius-fokban értendő. Op.: = olvadáspont.
1. példa
N-(5-Klór-2-metil-fenil)-Ν'-propil-tiokarbamid (R^ = propilcsoport; R2 = klóratom; R3 = metilcsoport)
163 g propil-amint [(III) képletű vegyület] 40 perc alatt cseppenként 390 g 5-klór-2-metil-fenil-izotiocianát [ (II) képletű vegyület] 700 ml etil-acetáttal készült oldatához adunk keverés közben, nitrogéngáz alatt olyan sebességgel, hogy a hőmérsékletet 25 - 30°-on tartjuk. A beadagolás befejezése után a reakcióelegyet 25 - 30°-on 5 percig keverjük^,! liter n-heptánt adunk hozzá és az elegyet 20 percig 0°-on hűtjük. A nyert fehér színű szuszpenziót O’-on 1 órán át keverjük, a szilárd anyagot vákuumszűrőn gyűjtjük össze, kétszer 350 ml mennyiségű (5°-ra hűtött) hideg n-heptánnal mossuk és 25 torr nyomáson és 40°-on körülbelül 18 órán át állandó tömeg eléréséig szárítjuk. A cím szerinti vegyületet kapjuk meg (fehér színű szilárd anyag; op.: 97-98°).
2. példa
N-(5-Klór-2-metil-fenil)-Ν'-2-metil-propil-tiokarbamid (R^ = 2-metil-propil-csoport; R2 = klóratom; R3 = metilcsoport)
25,0 g 25 ml metilén-diklorídban oldott 5-klór-2-metil-fenil-lzotlocianátot [(II képletű vegyület] cseppenként 10,0 g izobutil-amin [ (III) képletű vegyület] 150 ml metilén-dikloriddal készült oldatához adunk 20 - 25°-on cseppenként, és a reakcióelegyet 2 órán át 20 - 25°-on keverjük. A metilén-dikloridot ledesztilláljuk és amint a desztilláció előrehalad, fokozatosan metil-terc-butil-étert adunk hozzá. A kapott metil-terc-butil-éteres oldatot 20 25°-ra engedjük lehűlni, és a nyert szilárd anyagot szűrjük, metil-terc-butil-éterrel mossuk és vákuumban állandó tömeg elréséig szárítjuk. A cím szerinti vegyületet kapjuk (op.: 114-116°).
Az 1. és 2. példában leírtakkal analóg módon kapjuk meg a következő (I) általános képletű vegyületeket:
| példa száma | R1 | R2 R3 | Op. : | |
| 3. | -CH(CH3)2 | -Cl | -ch3 | 126- |
| 4. | -ch2ch2ch3 | -Cl | -ch2ch3 | 79-81° |
| 5. | -ch2ch2ch3 | -F | -ch3 | 68-71° |
| 6. | -ch2ch2ch3 | -Br | -ch3 | 109-112° |
Az (I) általános képletű vegyületeknek érdekes farmakológiai aktivitása van. Javasolt a gyógyszerként! alkalmazásuk.
Közelebbről, e vegyületek emelik a vérszérum nagy sűrűségű lipoprotein (HDL; HDL-koleszterin) és apolipoprotein A-I (Apó A-I) tartalmát. A legtöbb vegyületnek az a további • · · · előnyös hatása Is megvan, hogy csökkentik a vérszérum összes triglicerid szintjét.
Ezt az aktivitást szokásos vizsgálati módszerekkel, például a következő módszerekkel lehet meghatározni.
a) A/ vizsgálat: in vivő HDL-koleszterin teszt:
Hím, 200 -225 g tömegű Sprague-Dawley patkányokat páronként ketrecben helyeztünk el és 0,25 % kőlsavval és 0,75 % koleszterinnel a Purina által kiegészített Purlna Rodent Chow Speclal Mix 5001-S-sel, és igényük szerinti mennyiségű vízzel tápláltunk 7 vagy 8 napig. Ezután minden vizsgált anyagot egy 6 egyedből álló patkánycsoportnak adtunk be a táplálékban 8 vagy 21 napon keresztül. A vizsgált anyagok a táplálék 0,005 - 0,20 %-át tették ki. Az állatok testtömegét és táplálék fogyasztását a diéta megkezdését megelőzően, a vizsgálati anyag beadása előtt és annak befejezése után regisztráltuk. A vizsgált anyagok dózisa 4 - 200mg/kg/nap volt.
A diéta befejezése után az állatokat elaltattuk, kivéreztetéssel megöltük, a vérüket összegyűjtöttük, alvadásig jégen tartottuk, centrifugáltuk, és a szérumot elválasztottuk. Ennek aliquot részét 1,06 g/ml sűrűségre állítottuk be nátrium-klorid oldattal és egy éjszakán át hűtőben tároltuk. A megmaradt szérum aliquot részleteket lehűtöttük és fagyasztás alatt tároltuk.
A HDL-t mikro-ultracentrifugálással (μϋΟ) vagy gyors protein folyadékkromatográfiás technikával (FPLC) izoláltuk.
Az /zUC módszer a következő: az 1,06 g/ml sűrűségre beállított vérszérum 175 μΐ-ét 42000 ford./perc sebességgel Beckmann
42.2 Ti rotorban 20°-on 2,5 órán át centrifugáljuk. A felső rétegről 95 μΐ-t veszünk le és a küvetta alján 80 μΐ-t ha-
D gyünk. Az FPLC frakcionálást Superose 6-tal (nagymértékben térhálós szemcsés agaróz, melynek száraz szemcseátmérője 20 - 40 pm) gélpermeációval végezzük Kieft és munkatársai [J.Lipid Rés., 32, 859-866 (1991)], Francé és munkatársai [Laboratory Robotics and Automation, 2, 155 - 173 (1990)] által módosított technikájával. Az oszlop puffer Trisz-pufférőit sóoldat (vagyis 0,05 mólos Trisz-(2-amino-2-hidroxl-metil-l,3-propán-diol) és 0,15 mólos nátrium-klorid kétszer desztillált ionmentes (ddH2O) vízben, amely 0,01 % nátrium-azidot tartalmaz. 200 pl szérumot injektálunk és 40 0,5 ml frakciót gyűjtünk.
Az összes koleszterin-tartalmat vizsgáltuk. A 42.2 Ti rotor üledéket és FPLC-frakciókat a koleszterin enzimatikus meghatározására szolgáló 352 sz. eljárás szerint a Sigma Diagnostics készlet felhasználásával. A rekonstituált reagens (víz hozzáadása után) 300 U/l koleszterin-oxidázt, 100 U/l koleszterin-észterázt, 1000 U/l peroxidázt (torma), 0,3 mmól/1 4-amino-antipiridint és 30,0 mmól/1 p-hidroxi-benzolszulfonátot tartalmaz 6,5 pH-jú pufferben. Ez a módszer a koleszterin-észterek szabad koleszterinné hidrolizálására koleszterin-észterázt használ. A szabad koleszterint hidrogén-peroxid előállítása céljából oxidáljuk, amit egy kinonImin színezék képzésére használunk fel. Minthogy a reakció kvantitatívan megy végbe, a kolorimetriásan mért színezék-koncentráció egyenesen arányos a minta koleszterin-tartalmával. A kalibráló anyag, a standard és a minta sőoldattal hígítható abban az esetben, ha a koleszterin-koncentrációk a lineáris tartományon kívül eső leolvasott értékeket mutatnak. 20 μΐ kalibráló oldat, a standard vagy vizsgálati mintát a reagens 200 μΐ aliquot mennyiségével keverjük össze egy 96 mérőhelyes mikrotitráló lemezen. Mindegyik keveréket 20 - 25°-on 25 percig inkubáljuk és abszorbciójukat 490, 492 és 500 nm-nél kolorimetriás mikrotiter-lemezleolvasóval meghatározzuk.
A legnagyobb koleszterin-tartalmat (lásd LDLkoleszterint) kivonással határoztuk meg. A mikro-ultracentrifugás elválasztás minőségét Fát Red FB színezőanyaggal végzett Corning univerzális agaróz gélelektroforézissel határoztuk meg.
Az FPLC frakció Apó A-I tartalmát Francé, és mások., J. Lipid. Rés., 30, 1997-2004 (1989)-ben közölt, nem-reduktív SDS-PAGE módszerével határoztuk meg. A HDL-koleszterint az Apó A-I frakciókat tartalmazó, és Apó B immunreaktív proteint nem tartalmazó frakciók koleszterin-tartalmának mérésével határoztuk meg.
A vérszérum összes triglicerid-tartalmát a Boehringer
D
Mannheim Diagnostics Reagentset trigliceridek-GB készlet (katalógusszám: 877557) mikrotiter-lemez vizsgálatok céljára a következők szerint módosított változatával vizsgáltuk: A reagenseket a leírt módszer szerint készítettük el. A Wor king Solution 1 100 μΐ-ét és 20 μΐ hígított vérszérumot (vérszérum/0,15 mólos nátrium-klorid oldat (ddH2O-ban) arány: 1:1) adtunk egy 96 vájatos mlkrotiter-lemez minden vájatába, az elegyet összekeverjük és 20 - 25°-on legalább 5 percig inkubáljuk. 100 μΐ Working solution 2-t adunk minden vájatába, és annak tartalmát összkeverjük, majd 20 - 25°-on legalább 5 percig inkubáljuk, a fényáteresztési értékeket 490, 492 vagy 500 nm hullámhosszon leolvassuk. A vérszérum összes triglicerid-tartalmát (mg/dl értékben) az ismert és ismeretlen minták fényabszorbciőjának összehasonlítása útján számítjuk ki.
A vérszérum HDL-koleszterin- és összes triglicerid-tartalmának meghatározására egyéb konvencionális módszerek is használhatók.
b) B/ vizsgálat: Adó A-I teszt:
Az A/ vizsgálat szerinti vizsgálati állatok Apó A-I vérszérum szintjét patkányok Apó A-I enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálattal (ELISA) a következők szerint határozzuk meg:
1. Nvulak anti-patkánv Adó A-I antitestjének termelése és tisztítása
A patkány Apó A-I-gyet egyesített patkány vérszérumból, ismételt ultracentrifugálással és a patkányok nagy sűrűségű lipoproteinjeinek (HDL) elválasztásával tisztítjuk. A lipidmentesítést követően az Apo A-I-et az egyéb HDL proteinektől gélfiltrációs kromatográfiával választjuk el. Három patkányban (Pocono Rabbit Farms, Candensis, PA) sorozatos tisztított • Λ
4 44 »« 4 444 ·
Apó Α-Ι szubkután injekciókkal a szokásos immunizálás szerint antiszérumokat fejlesztünk ki. Egy éven át tartó ismételt véreztetés után az antiszérumokat egyesítjük, mintamennyiségekre osztjuk és -20“-on fagyasztjuk. A nyers antiszérumokat hagyjuk felengedni, olyan cianogén bromiddal aktivált Sepharose C1-4B oszlopra (60 - 140 μπι száraz szemcseátmérőjű szemcsézett agaróz) visszük fel, amelyen kovalens módon tisztított emberi HDL-t kötöttünk meg, az oszlopot sóoldattal mossuk és a tisztított antitestet 1 mólos, pH = 3-as glicinoldattal eluáljuk. A glicint Tris-pufférőit sóoldat használata mellett végzett dialízissel különítjük el, és egy koncentrált, tiszta nyúl-antipatkány Apó A-I antitest oldatot kapunk.
2. Pufferek, reagensek és sztandardok
- nátrium-karbonát abszorpciós puffer: 2,25 g nátrium-karbonátot, 4,40 g nátrium-bikarbonátot és 0,15 g nátrlum-azidot 1,4 liter ddH2O-ban oldunk, a pH-t nátrium-hidroxiddal 9,6-ra állítjuk be, és a puffért ddH2O-val 1,5 liter össztérfogatra töltjük fel;
- pH = 8-as, 0,5 mólos Tris-oldat: 60,55 g Trls.HCl (2-amino-2-hidroxi-metil)-1,3-propándiol-hidroklorid) 1,0 liter ddH20-val készült oldatát 10M nátrium-hidroxid-oldattal pH= 8,0-ra állítunk be;
- szekunder antitest puffer: 200 ml ρΗ-8-as 0,5 mólos Tris-oldatot adunk 40 g marha szérumalbumin (BSA); (Cohn Fraction V) 1,8 liter ddH20-val készült oldatához, 0,2 g nátrium-azidot és 18,0 g nátrium-kloridot adunk hozzá;
»
- szubsztrátum puffer: 0,1 g nátrium-azidot keverés közben 105,1 g dietanol-aminhoz és 500 ml ddH20-hoz adunk, hozzáadunk 10 ml 0,5 mólos magnézium-klorid-hexahidrát oldatot, az oldat pH-ját 12 M sóssavval 9,8-ra állítjuk be és ddH2O-val 1 liter össztérfogatra töltjük fel;
- 30 x ELISA mosó puffer: 525,96 g nátrium-kloridot, 76,68 g Tris-t, 6 g nátrium-azidot és 30 ml TweenR20-at [poli-oxi-etilén(20)-szorbitán-monolaureát] keverünk össze, a pH-t 12 M sósavval 7,3-ra állítjuk be és az oldatot ddH20-val 2 liter össztérfogatra hígítjuk;
- lxELISA mosó puffer: 1 térfogatrész 30xELISA mosó puffért 29 térfogatrész ddH2O-val hígítunk;
- mlntahígító puffer: 886,34 ml szekunder antitest p
puffért és 113,66 ml Tween 20-at jól összekeverünk, 11,366 tf/tf%-os TweenR20 oldatot kapunk;
- sztandard hígító pufferek: (A) 780 ml szekunder antitest puffért és 220 ml TweenR20-at jól összekeverünk és 22 tf/tf%-os TweenR20 oldatot kapunk. (B) 890 ml szekunder-antitest puffért és 110 ml TweenR20-at jól összekeverünk és 11 tf/tf%-os TweenR20 oldatot kapunk;
- A/ patkány-szérum elegy: ezt a patkány vérszérumot használjuk minden vizsgálatnál a sztandard görbe felvételéhez.
Tisztított Apó A-I-gyel kalibráljuk és 45 ± 2,7 mg Apó A-Igyet tartalmaz/dl vérszérum;
- B/ patkány-szérum elegy: alacsony belső sztandardként használjuk minden meghatározásnál a meghatározás eltérésének mérésére, és 40 mg Apó A-I-gyet tartalmaz/dl vérszérum;
• * • ····
- C/ patkány-szérum elegy: a referencia-vegyülettel (gemfibrozil) kezelt pakányokból származik, magas belső sztandardként használjuk és 70 mg Apó A-I-gyet tartalmaz/dl vérszérum.
3. Eljárás
Fagyasztott készletből származó 942 //g/ml tartalmú tisztított patkány Apó A-I-gyet nátrium-karbonát adszorciós pufferrel 3,7 zzg/ml végső koncentrációra hígítunk. 96 vájatos, számos Nunc polisztirol mikrotiter-lemez minden vájatába ebből az oldatból 100 μΐ-t adagolunk. Az Apó A-I-gyet a lemezekbe hagyjuk adszorbeálni 4°-on 48 órán át. A lemezeket lxELISA mosó pufferrel mossuk, és nem specifikus részeiket éjszakán át végzett ínkubálással blokkoljuk szekunder antitest pufferrel (200 μΐ/fészek) hidegben is. A vizsgálati lemezeket ebben az állapotban tároljuk a használat időpontjáig (amely 3 hétig terjedhet).
A vizsgálat napján az ELISA lemezeket (2 lemezt, melyek lemezenként 36 patkányszérumot tartalmaznak) négyszer lxELISA mosópufferben mossuk. Minden fészekben 100 μΐ lxELISA puffért hagyunk a vizsgálati minta betöltéséig. Minden vizsgálandó patkány vérszérum minta 10 μΐ-ét 290 pl minta-hígító pufferrel keverjük össze 1 : 30 végső hígítási arányban és 11 %-os p végső Tween 20 koncentrációra. A B/ és C/ belső sztandard patkányszérum-elegy hat párhuzamos mintáját ugyanúgy kezeljük.
2,0 ml A/ patkányszérum elegyet azonos térfogatú sztandard A/ hígító pufferrel keverünk össze 1 : 2 hígítási arány p és 11 %-os Tween 20 koncentráció eléréséhez. A mintát ezután • Mii • · ♦ • » ···· 4· * ··· · : 8, 1 : 16, 1 : 32, 1 : 64, 1 : 128 hígítási arányra B/ sztandard hígító pufferben hígítjuk sorozatban.
A hígított sztandardokat és nem-ELISA mikrotiterű lemezekben lévő mintákat 52°-ra fűtött inkubátorba helyezzük óra időtartamra. 20 - 25°-ra történő lehűtés után a mosó puffért eltávolítjuk az ELISA tesztlemezekről. 75 Ml-es sztandardokat és vizsgálati mintákat az ELISA tesztlemezekre viszünk át. 75 μΐ 1 : 75 arányban szekunder antitest pufferrel hígított, tisztított patkány elleni Apó A-I nyúl antitest oldatot adunk azután minden vájatba. Minden lemezt egy rövid ideig rázunk, hogy az antitest és a minta összekeveredését biztosítsuk, azokat lezárjuk és 18 órán át 20 - 25°-on inkubáljuk. Ezután az inkubálás után minden lemezt 4-szer mosunk lxELISA mosópufferrel. Ezután minden vájatba 100 μΐ alkalikus foszfatázhoz kötött 1 : 1000 arányban szekunder antitest pufferrel hígított kecske IgG antitestet adunk. Ezeket 20 - 25°-on 3 órán át hagyjuk egymásra hatni. Mindegyik lemezt újra lemossuk, szárazra szívatjuk és minden vájathoz 1 mg/ml tartalmú dinátrium-p-nítrofenil-foszfátot egy kromogén szubsztrátumot - amely a minta Apó A-I mennyiségével fordítottan arányos színeződést idéz elő - szubsztrátum-puffert adunk. Mindegyik lemezt ELISA spektrofotométerben 1-3 órán át vizsgáljuk. Mihelyt a vájatok, amelyek Apó A-I-gyet kaptak, 405 nm hullámhosszon 1,0-es optikai sűrűséget érnek el, mindegyik lemezt leolvassuk az ELISA leolvasóval.
A sztandard görbét a koncentráció logaritmusa *« · • ·*· · · » · • · ··«·« · 4 • *· * ·· · ι* · · · függvényében mért optikai sűrűség-értékek alapján vesszük fel. Az ismeretleneket ehhez a görbéhez hasonlítjuk, és az
Apó A-I-tartalmat mg/dl dimenzióban fejezzük ki.
A fenti A/ és B/ vizsgálatok azt mutatják, hogy a vegyületek a körülbelül 10 mg/kg/nap-tól 200 mg/kg/nap dózisig terjedő tartományban aktívak.
A vegyületeket ezért ajánljuk a vérszérum nagy sűrűségű lipoprotein (HDL; HDL-koleszterin és apolipoprotein A-I) szintjének növelésére és ezek közül sokat a vérszérum összes trigliceríd-tartalmának csökkentésére is, ily módon az atherosclerosis kezelésére.
Az alkalmazandó pontos dózis természetesen sok tényezőtől függ, így a betegtől magától, a kezelendő állapot természetétől és súlyosságától, az adagolás módjától, valamint az alkalmazott hatóanyag minőségétől. Általában azonban kielégítő eredmények kaphatók 400 mg-tól 2000 mg-ig terjedő, napi 2-4-szeri alkalommal beadott megosztott dózisokkal.
A vegyületek szokásos módon, különösen enterálisan, előnyösen orálisan, például tabletták vagy kapszulák alakjában vagy parenterálisan, például steril injekciós oldatok vagy szuszpenziők alakjában adagolandók.
Az 1., 2., és 3. példában leírt vegyületek előnyösek, különösen az 1. és 2. példában leírtak, leginkább a 2. példában leírt vegyület.
így például a következő aktivitásokat határoztuk meg:
| vegyület dózis (mg/kg/nap) | kezelés időtartama (na] | koleszte- Apo-I szint | összes trigliceridszint növekedés (%) | ||
| rinszint o) növeke- dés (%) | növekedés (%) | ||||
| 1. példa | 60 | 8 | 225 | 65 | 45 |
| 2. példa | 79 | 8 | 267 | 69 | 49 |
| gemfibrozil | 50 | 8 | 100 | 50 | 35 |
| 1. példa | 65 | 21 | 256 | 47 | 70 |
| 2. példa | 73 | 21 | 323 | 102 | 44 |
| gemfibrozil | 44 | 21 | 106 | 44 | 43 |
| Ezért | azt | javasoljuk, | hogy az 1. | és 2. példákban leírt |
vegyületek kisebb dózisban adagolhatok, mint a konvencionálisán ugyanilyen adagolási módon használt gemfibrozil, például orálisan 400 - 1000 mg/nap dózisban.
Az (I) általános képletű hatóanyagot szabad formájában vagy gyógyszerészetileg elviselhető sója alakjában legalább egy gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyaggal vagy hígítőszerrel együtt tartalmazó gyógyszerkészítmények a szokásos módon gyárthatók. Ezek például körülbelül 100 mg-tól körülbelül 500 mg-ig terjedő mennyiségű hatóanyagot tartalmazó ♦ 0 ' « *♦ · Φ « ··· · 4 9* • » 4 ····♦ β ·«·· φ» * «·*9 dőzisegységűek lehetnek.
A találmány tárgyát képezik valamely (I) általános képletű vegyületet legalább egy, gyógyszerészetileg elviselhető hordozóanyaggal vagy hígítószerrel együtt tartalmazó gyógyszerkészítmények is.
A találmány tárgyát képezi továbbá az (I) általános képletű vegyületek gyógyszerként! felhasználása, különösen az atherosclerosis profilaktikus vagy kuratív kezelése.
A találmány tárgyát képezi továbbá eljárás, valamely (I) általános képletű vegyületet, mint hatóanyagot legalább egy, gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyaggal vagy hígítószerrel együtt tartalmazó gyógyszerkészítmény előállítására.
A találmány tárgyát képezi továbbá valamely (I) általános képletű vegyület felhasználása atherosclerosis gyógyítására szolgáló gyógyszerkészítmény gyártására.
1.
Eljárás az (I) általános képletű - ahol
Claims (6)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK jelentése propil-, izopropil- vagy 2-metil-propilcsoport jelentése 9-35 atomszámú halogénatom; és jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely (II) általános képletű - ahol R2 és R^ jelentése a fenti - vegyületet valamely megfelelő (III) általános képletű - ahol Rj jelentése a fenti - vegyülettel reagáltatunk.
- 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás valamely (I) általános képletű vegyület előállítására, azzal jellemezve, hogy R3 jelentése nem 4 szénatomos alkilcsoport.
- 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás az (I) általános képletnek megfelelő N-(5-klór-2-metíl-fenil)-Ν'-propil-tiokarbamid előállítására.
- 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás az (I) általános képletnek megfelelő N-(
- 5-klór-2-metil-fenil)-N'-2-metil-propil-tiokarbamid előállítására.Az 1. igénypont szerinti eljárás valamely (I) általános képletű vegyület előállítására, azzal jellemezve, hogy Rp R2 és R^ jelentése -CH(CH3)2 csoport, 5-helyzetű klóratom és 2-helyzetű metilcsoport vagy-CH2CH2CH3 csoport 5-helyzetű klóratom és 2-helyzetű etilcsoport vagy -CH2CH2CH3 csoport, 5-helyzetű fluoratom és 2-helyzetű metilcsoport, vagy -CH2CH2CH3 csoport, 5-hely···· ···· * · ···· • ·· · zetű brómatom és 2-helyzetű metilcsoport.
- 6. Eljárás atherosclerosis elleni gyógyszerkészítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely 1. igénypont szerinti (I) általános képletű vegyületet legalább egy, gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyaggal vagy hígítószerrel keverünk össze.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US72400191A | 1991-07-01 | 1991-07-01 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU9202047D0 HU9202047D0 (en) | 1992-09-28 |
| HUT62558A true HUT62558A (en) | 1993-05-28 |
Family
ID=24908548
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9202047A HUT62558A (en) | 1991-07-01 | 1992-06-18 | Process for producing n-phenylthiourea derivaties and pharmaceutical compositions comprising same |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0528146B1 (hu) |
| JP (1) | JPH05221959A (hu) |
| KR (1) | KR930002311A (hu) |
| AT (1) | ATE134364T1 (hu) |
| AU (1) | AU657141B2 (hu) |
| CA (1) | CA2072704A1 (hu) |
| CZ (1) | CZ204692A3 (hu) |
| DE (1) | DE69208408T2 (hu) |
| DK (1) | DK0528146T3 (hu) |
| ES (1) | ES2083625T3 (hu) |
| FI (1) | FI923033A (hu) |
| GR (1) | GR3019785T3 (hu) |
| HK (1) | HK73196A (hu) |
| HU (1) | HUT62558A (hu) |
| IE (1) | IE73488B1 (hu) |
| IL (1) | IL102355A0 (hu) |
| MX (1) | MX9203838A (hu) |
| NO (1) | NO922564L (hu) |
| NZ (1) | NZ243352A (hu) |
| RO (1) | RO111933B1 (hu) |
| RU (1) | RU2087467C1 (hu) |
| SK (1) | SK204692A3 (hu) |
| TW (1) | TW213448B (hu) |
| ZA (1) | ZA924823B (hu) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2271728A1 (en) * | 1996-11-14 | 1998-05-22 | American Home Products Corporation | Substituted tetrahydro-1,3,5-triazin-2[1h]-thiones as anti-atherosclerotic agents |
| AU5731098A (en) * | 1997-02-03 | 1998-08-25 | American Home Products Corporation | 2-substituted-1-acyl-1,2-dihydroquinoline derivatives to increase hdl-cholesterol level |
| WO1998057926A1 (en) * | 1997-06-16 | 1998-12-23 | American Home Products Corporation | Elevation of hdl cholesterol by n-[2-[ (aminothioxomethyl)hydrazono] -2-arylethyl]amides |
| US6011053A (en) * | 1997-08-01 | 2000-01-04 | American Home Products Corporation | Substituted indole-1-carbothioic acid amides as novel antiatherosclerotic agents |
| AU9211098A (en) * | 1997-09-03 | 1999-03-22 | American Home Products Corporation | Thiourea for increasing hdl-cholesterol levels, which are useful as anti-atherosclerotic agents |
| US6455566B1 (en) | 1997-09-03 | 2002-09-24 | Wyeth | Substituted 1-aryl-3-heteroaryl-thioureas (or isothioureas) as antiatherosclerotic agents |
| TW415942B (en) * | 1997-09-03 | 2000-12-21 | American Home Prod | Novel substituted 1-aryl-3-heteroaryl-thioureas and substituted 1-aryl-3-heteroaryl-isothioureas as antiatherosclerotic agents |
| WO1999011618A1 (en) * | 1997-09-03 | 1999-03-11 | American Home Products Corporation | Substituted indole-1-carbothioic acid amides as novel antiatherosclerotic agents |
| DE10017881A1 (de) * | 2000-04-11 | 2001-10-25 | Bayer Ag | Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften |
| MXPA03001535A (es) | 2000-08-21 | 2004-12-13 | Pacific Corp | Derivados de tiourea novedosos y las composiciones farmaceuticas que contienen los mismos. |
| DE60120421T2 (de) | 2000-08-21 | 2006-12-28 | Pacific Corp. | Neue (thio)harnstoffverbindungen und arzneimittelkompositionen, die diese enthalten |
| US6472430B2 (en) | 2000-10-02 | 2002-10-29 | Hassan M. Elokdah | Amino thioxomethyl amino oxyacetic acid derivatives |
| US8124625B2 (en) | 2001-09-14 | 2012-02-28 | Shionogi & Co., Ltd. | Method of enhancing the expression of apolipoprotein AI using olefin derivatives |
| EP2168576A3 (en) | 2001-09-14 | 2010-05-26 | Shionogi & Co., Ltd. | Tricyclic compounds for treating dyslipidemia and arteriosclerotic diseases |
| US7429593B2 (en) | 2001-09-14 | 2008-09-30 | Shionogi & Co., Ltd. | Utilities of amide compounds |
| ES2362770B1 (es) * | 2009-12-24 | 2012-05-22 | Universidad De Sevilla | Uso de compuesto n-fenil-n'-(3-metil-2-butenil)tiourea para la elaboración de medicamentos destinados al tratamiento de la encefalopatía hepática. |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3950537A (en) * | 1973-06-29 | 1976-04-13 | Rohm And Haas Company | Gastrointestinally active thioureas |
| IL67417A (en) * | 1982-01-26 | 1989-10-31 | American Cyanamid Co | Antiatherosclerotic substituted ureas,process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| ATE61574T1 (de) * | 1987-07-02 | 1991-03-15 | Warner Lambert Co | N-((2,6-disubstituierte)-phenyl>-harnstoff und - carbamat-inhibitoren der acyl-coenzym a:cholesterol-acyltransferase. |
| US5116848A (en) * | 1988-03-30 | 1992-05-26 | Warner-Lambert Company | N-(((2,6-disubstituted)phenyl)-n-diarylalkyl)ureas as antihyperlipidemic and antiatherosclerotic agents |
| GB8908063D0 (en) * | 1989-04-11 | 1989-05-24 | Beecham Group Plc | Novel compounds |
| JPH0395153A (ja) * | 1989-06-15 | 1991-04-19 | Mitsubishi Kasei Corp | ジフェニル尿素誘導体 |
-
1992
- 1992-06-18 HU HU9202047A patent/HUT62558A/hu unknown
- 1992-06-29 CA CA002072704A patent/CA2072704A1/en not_active Abandoned
- 1992-06-29 DK DK92110945.0T patent/DK0528146T3/da active
- 1992-06-29 JP JP4192818A patent/JPH05221959A/ja active Pending
- 1992-06-29 DE DE69208408T patent/DE69208408T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1992-06-29 IL IL102355A patent/IL102355A0/xx unknown
- 1992-06-29 AT AT92110945T patent/ATE134364T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-06-29 NZ NZ243352A patent/NZ243352A/en unknown
- 1992-06-29 AU AU18677/92A patent/AU657141B2/en not_active Ceased
- 1992-06-29 ZA ZA924823A patent/ZA924823B/xx unknown
- 1992-06-29 RO RO92-0886A patent/RO111933B1/ro unknown
- 1992-06-29 NO NO92922564A patent/NO922564L/no unknown
- 1992-06-29 KR KR1019920011449A patent/KR930002311A/ko not_active Application Discontinuation
- 1992-06-29 EP EP92110945A patent/EP0528146B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-06-29 ES ES92110945T patent/ES2083625T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-06-30 CZ CS922046A patent/CZ204692A3/cs unknown
- 1992-06-30 SK SK2046-92A patent/SK204692A3/sk unknown
- 1992-06-30 FI FI923033A patent/FI923033A/fi not_active Application Discontinuation
- 1992-06-30 RU SU925052139A patent/RU2087467C1/ru active
- 1992-06-30 MX MX9203838A patent/MX9203838A/es unknown
- 1992-07-01 IE IE922132A patent/IE73488B1/en not_active IP Right Cessation
- 1992-07-04 TW TW081105311A patent/TW213448B/zh active
-
1996
- 1996-04-25 HK HK73196A patent/HK73196A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-04-29 GR GR960401165T patent/GR3019785T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HK73196A (en) | 1996-05-03 |
| KR930002311A (ko) | 1993-02-22 |
| NO922564D0 (no) | 1992-06-29 |
| JPH05221959A (ja) | 1993-08-31 |
| RO111933B1 (ro) | 1997-03-31 |
| IE73488B1 (en) | 1997-06-04 |
| ATE134364T1 (de) | 1996-03-15 |
| AU1867792A (en) | 1993-01-07 |
| CA2072704A1 (en) | 1993-01-02 |
| CZ204692A3 (en) | 1993-01-13 |
| SK204692A3 (en) | 1995-02-08 |
| ZA924823B (en) | 1993-12-29 |
| EP0528146B1 (en) | 1996-02-21 |
| IE922132A1 (en) | 1993-01-13 |
| HU9202047D0 (en) | 1992-09-28 |
| IL102355A0 (en) | 1993-01-14 |
| DE69208408D1 (de) | 1996-03-28 |
| RU2087467C1 (ru) | 1997-08-20 |
| FI923033A (fi) | 1993-01-02 |
| DE69208408T2 (de) | 1996-07-18 |
| DK0528146T3 (da) | 1996-05-06 |
| ES2083625T3 (es) | 1996-04-16 |
| TW213448B (hu) | 1993-09-21 |
| NZ243352A (en) | 1995-02-24 |
| NO922564L (no) | 1993-01-04 |
| MX9203838A (es) | 1993-01-01 |
| FI923033A0 (fi) | 1992-06-30 |
| GR3019785T3 (en) | 1996-07-31 |
| EP0528146A1 (en) | 1993-02-24 |
| AU657141B2 (en) | 1995-03-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HUT62558A (en) | Process for producing n-phenylthiourea derivaties and pharmaceutical compositions comprising same | |
| Lux et al. | Studies on the protein defect in Tangier disease: isolation and characterization of an abnormal high density lipoprotein | |
| JPH06265546A (ja) | 免疫学的測定用トロポニン安定化組成物および安定化法 | |
| Angelin et al. | 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase in human liver microsomes: active and inactive forms and cross-reactivity with antibody against rat liver enzyme. | |
| Colman et al. | Kallikrein-kinin system in pathologic conditions | |
| Diana et al. | NAD+-dependent 15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase from porcine kidney: I. Purification and partial characterization | |
| Bekaert et al. | Isolation and partial characterization of lipoprotein A-II (LP-A-II) particles of human plasma | |
| Bennett et al. | Phylogeny of immunoglobulins. Characterization of a 14S immunoglobulin from the gar, Lepisosteus osseus | |
| Perrin et al. | Competitive binding of two drugs for a single binding site on albumin: a circular dichroic study | |
| Lanara et al. | Response of mice and mouse platelets to acetyl glyceryl ether phosphorylcholine | |
| NISHIOKA et al. | Partial replacement of bile salts causes marked changes of cholesterol crystallization in supersaturated model bile systems | |
| Yang et al. | Rapid, reliable method for measuring serum lipase activity | |
| PL167376B1 (pl) | Sposób wytwarzania pochodnych N-fenylotiomocznika | |
| Gaynor et al. | Vitamin B6 enzymes in normal and pre-eclamptic human placentae | |
| GB2065881A (en) | Lipase determination method and reagent | |
| Krietsch et al. | Characterization of a phosphoglycerate kinase deficiency variants not associated with hemolytic anemia. | |
| Cordova et al. | Influence of vitamin E on plasma malondialdehyde-like material in man | |
| Hillman | Mutant analysis of glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase in Escherichia coli | |
| Hoeg et al. | Initial diagnosis of lipoprotein lipase deficiency in a 75-year-old man | |
| Cabral et al. | Heme environment in ferric and ferrous cytochrome c oxidase | |
| Lowe et al. | The effect of adjuvant arthritis and drugs on the ability of rat plasma to inhibit the triton X-100 induced lysis of rabbit polymorphonuclear leucocyte granules | |
| NIEUWENHUIS et al. | Solubilization by Cholate or Deoxycholate of a Dicyclohexylcarbodi-imide-Sensitive Adenosine Triphosphatase Complex from Escherichia coli | |
| Sigalov | Cryopreservation and long-term storage of human low density lipoproteins | |
| Adam et al. | Optimized determination of plasma prokallikrein on a Hitachi 705 analyser | |
| Wang et al. | Structure of Bence—Jones protein, Pav: an initial report |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| DFA9 | Temporary protection cancelled due to abandonment |