HU228892B1 - High oleic high stearic plants, seeds and oils - Google Patents

High oleic high stearic plants, seeds and oils Download PDF

Info

Publication number
HU228892B1
HU228892B1 HU0201476A HUP0201476A HU228892B1 HU 228892 B1 HU228892 B1 HU 228892B1 HU 0201476 A HU0201476 A HU 0201476A HU P0201476 A HUP0201476 A HU P0201476A HU 228892 B1 HU228892 B1 HU 228892B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
oil
acid
seeds
weight
sunflower
Prior art date
Application number
HU0201476A
Other languages
English (en)
Inventor
Enrique Martinez-Force
Juan Munoz-Ruz
Jose Maria Fernandez-Martinez
Rafael Garces
Original Assignee
Consejo Superior Investigacion
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27240153&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=HU228892(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from US09/326,501 external-priority patent/US6388113B1/en
Application filed by Consejo Superior Investigacion filed Critical Consejo Superior Investigacion
Publication of HUP0201476A2 publication Critical patent/HUP0201476A2/hu
Publication of HU228892B1 publication Critical patent/HU228892B1/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G9/00—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor
    • A23G9/32—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G9/327—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds characterised by the fatty product used, e.g. fat, fatty acid, fatty alcohol, their esters, lecithin, glycerides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H5/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
    • A01H5/10—Seeds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H6/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their botanic taxonomy
    • A01H6/14—Asteraceae or Compositae, e.g. safflower, sunflower, artichoke or lettuce
    • A01H6/1464—Helianthus annuus [sunflower]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A21—BAKING; EDIBLE DOUGHS
    • A21D—TREATMENT, e.g. PRESERVATION, OF FLOUR OR DOUGH, e.g. BY ADDITION OF MATERIALS; BAKING; BAKERY PRODUCTS; PRESERVATION THEREOF
    • A21D2/00—Treatment of flour or dough by adding materials thereto before or during baking
    • A21D2/08—Treatment of flour or dough by adding materials thereto before or during baking by adding organic substances
    • A21D2/14—Organic oxygen compounds
    • A21D2/16—Fatty acid esters
    • A21D2/165—Triglycerides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D7/00—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines
    • A23D7/001—Spread compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D7/00—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines
    • A23D7/003—Compositions other than spreads
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D9/00—Other edible oils or fats, e.g. shortenings, cooking oils
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G3/00—Sweetmeats; Confectionery; Marzipan; Coated or filled products
    • A23G3/34—Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof
    • A23G3/346—Finished or semi-finished products in the form of powders, paste or liquids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G9/00—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor
    • A23G9/52—Liquid products; Solid products in the form of powders, flakes or granules for making liquid products ; Finished or semi-finished solid products, frozen granules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L23/00—Soups; Sauces; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/115—Fatty acids or derivatives thereof; Fats or oils
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/115—Fatty acids or derivatives thereof; Fats or oils
    • A23L33/12—Fatty acids or derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/92—Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof
    • A61K8/922—Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof of vegetable origin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q1/00—Make-up preparations; Body powders; Preparations for removing make-up
    • A61Q1/02—Preparations containing skin colorants, e.g. pigments
    • A61Q1/04—Preparations containing skin colorants, e.g. pigments for lips
    • A61Q1/06—Lipsticks
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G2200/00—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents
    • A23G2200/08—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents containing cocoa fat if specifically mentioned or containing products of cocoa fat or containing other fats, e.g. fatty acid, fatty alcohol, their esters, lecithin, paraffins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q5/00—Preparations for care of the hair

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)
  • Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)
  • Lubricants (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Seeds, Soups, And Other Foods (AREA)

Description

Nagy olsjsav és «agy ssetearíasav íarfalmő napraforgó növények, magok és olajok
A találmány tárgyát napraforgó magok képezik, amelyek magas olaisav és magas szíearinsav tartalmú olajat tartalmaznak. A találmány tárgyát képezik továbbá s magokat termelő sövények, és a magokban lévő olaj. Ezeníéiül a találmány tárgyát képezik eljárások a napraforgó magok, napraforgó növények és olaj előállítására.
Olajok alkalmazással a zsirsav-összetéíeiök: határozza meg. Az olajok fő komponensei a triacilglicerol (TAG) molekulák, amelyek nomtáilssn az olajnak több, mint 95%-át alkotják. Három zsírsav kötődik egy glicerinhez a TAG-ot alkotva. Ha ezen zsírsavak főleg telített zsírsavak („telítettek”), a terméket zsírnak nevezzük, és szilárd szobahőmérsékleten. Másrészről ha a zsírsavak főleg telítetlenek, olajnak nevezzük, és folyékony szobahőmérsékleten.
A mérsékelt égövén termesztett magokból (napraforgó, szója, repce, stb.) kapott olajok főleg telítetlen zsírsavakat tartalmaznak, mint llnolénsavat és olajsavak és elsősorban főzésre, salátaöntetek, stb. alkalmazzák azokat. A zsírokat áriatokból (margarin, sertészsír, stb.), néhány trópusi fából (kakaó, pálma) vagy kémiailag módosított ílódrpgésezés és átészteresltés) folyékony növényi olajakból kapjuk. Főleg telített (palmitissav vagy sztearinsav) vagy kémiailag módosított zsírsavakat (bánsz-zsírsavak) tartalmaznak, magas olvadásponttal.
Az 1. táblázatban néhány zsír és olaj zsírsav -összetételét és egyéb tulajdonságait mutatjuk be. A zsírok az élelmiszeriparban szükségesek leginkább margarin, fozónsargarin, péksütemények, cukrászsütemények, aprósütemények („snaek”), stb. készítésére. Az: élelmiszeripar a képlékenységilk (nem olvadnak, kenhetők, vagy nem ragadnak a kézhez) és stabilhástík (jól ellenállnak az oxidációnak szoba- vagy magas hőmérsékleteit) miatt: alkalmazza a zsírokat ezekre a célokra.
I. Táblázat
Olaj vagy1 zsír Zsírsav-összetétel <%) Tulajdonságok
Egyéb1 Mirísztiü Pahaitm Sztearin Okin Linóiéin Transz Telített
Sertészsír 3 2 25 12 45 10 1 79
Vaj 14 10 26 12 28 3 3 84
Margarin 10 7 4Ő 34 23 *
Fálmaolaj 1 45 5 39 9 18
Olívaolaj 1 14 3 71 IÖ 2
Kakaóval 26 35 35 3 4
Normái napraforgóolaj 7 5 30 .57 1
Magas olajsav- fartalmú napraforgóolaj 5 4 88 -> Á. i
„egyéb jelentése pahniíoiem a sertészsír és olívaolaj esetében, és 12 szénatomnál rővidebb zsírsavak vajban * a hídrogénezettség szintjétől függ
Akíaszámunk: 9591 1-3615A/LT
A aktuálisan hozzáférhető zsírok azonban m jók, mert negatív táplálkozási tulajdonságaik vannak, A. fő· probléma az, hogy emelik a. szémmkoleszterlu rossz tonnájának (alacsony sűrűségű llpoproteta, LDL) szintjét. .Ez számos tény mind: van, amelyek némelyike a zsír eredetével kapcsolatos, és mások annak manipulálásával. As állati zsírokban a telített zsírsavak legtöbbje a TAG-molekola 2. pozíciójában van, A legtöbb növényi zsírban és olajban azonban a telítek zsírsavaknak csak kis része van ebben a pozícióban, és ezáltal egészségesebbek.
Az emésztés folyamán a TAG-molekula lipázoknák nevezett enzimek által hsárollzál (1. ábra). Az l. és 3, pozícióban lévő zsírsavak felszabadó bak szabad zsírsavként. Ha ezen zsírsavak telítettek, oldhatatlan sét alkotnak kalciummal és magnéziummal, és legnagyobbrészt kiválasztódnak. De a 2. pozícióban lévő zsírsavak a glicerinnel monoaellglleeria molekulát alkotnak, amely detergens tulajdonságú, és könnyen abszorbeálódtk a szervezetbe. Az: állati zsírokból származó telített zsírsavak azután abszorbeálódnak, ezáltal emelik az. Í..DL szintjét.
Annak érdekében, hogy emeljék a telített zsírsavak százalékát, a növényi olajokat hidrogénezik és/vagy átészteresitsk, Például a kanola ólja hidrogénezését ismertetik az US 5 885 643 és US 5 885 643· számú egyesült államokbeli szabadalmi iratok, amelyek azt tárják léi, hogy a kanola olaj itídrogénezése & transz: zsírsavak sziníéjénelt növekedését eredményezi, and még rosszabb, mint a telített zsírsavak, amint ezt Wsííett, W.C, és Ascberío, A. („Trans fatty acids: Are 'öté eflects oniy margmal?” American Journal of Public Health 84, 722724. old. (1994)) bemutatják. Az átészteresítési eljárás véletlenszerűen változtatja a zsírsavakig a bárom pozíció között, átalakítva az egészséges. 2-es pozícióban alacsony telített zsírsavt&riaimú növényi olajokat olyas olajjá, amelyben közel 30% telített zsírsav van. Tehát a két kémiai módosítás egyike sem vezet egészséges termékhez.
Azonban nem minden zsír egészségtelen. Kimutatták, hogy a kakaóvaj, amelyben, körülbelül 6Ö% telített zsírsav vart, és a maradék főleg olajsav, nem emeli a szénankolesaeriat Ez két fó ok miatt vsa. Az egyik az, hogy a telített zsírsavaknak csak 4%-a van a 2. pozícióban, és a másik az, hogy a fő telített zsírsav sztemlnsav, A sztearinsavnak nincs negatív hatása a szérmokoleszíerinre, valószínűleg a 35% olajsas' a kakaóvajfean is hozzáad annak egészséges tulajdonságaihoz.
Fontos megjegyeznünk, hogy a kakaövaj kivételével a pahnltinssv a fo telített zsírsav az árult zsírokban. A paimitínsav-tmáahnű azonban nem. nagyon egészséges zsír.
Nemcsak a hagyományos nemesítés és mutagenezís volt az egyetlen eszköz különböző zsírsav-profilú olajat termelő- magok kialakításában. A szísartasav-íartalom növelését olajtartalmú növényekben szintén megcélozták transzgének bejuttatásával a csiraplazmába, hogy módosítsák a növényi olaj zsírsav-bioszintetikus útvonalát, A zsírsav-bioszintetikus útvonal növényi olajban, de különösen napraforgóolajban alapvetően két telíted zsírsav (pálinkát, sziearát), és két telítetlen zsírsav (oleát és Imoláét) híoszintézisct tartalmazza. Olajos magvakban a sztearoí l-A CP-deszaturÁz az az enzim, amely az első kettős kötést beépíti a sztearoík/kCP-be oleil-ACP-í kialakítva. Ezáltal ez egy olyan enzim, amely segít a 18 szénatomszámú zsírsavak teliíetleuségénsk meghatározásában.
Az 5 443 974, számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi iratban a „canoia'' (egy .repce fajta) szíearoil-ACP-deazaturáz enzimjének gátlását tárják fel, A sztearát-szintek növekedtek, de a palmiiáí alapvetően nem változott, A szleartnl-ACP-deszaíuráz növényi enzim gátlásáról canoíáhas Knutzon és mtsai. (Proc, NaŰ. .Acad. Seb USA 89, 2Ö24-262S. old. (1992)] is beszámoltak. Ezen eredmények növekedést mutattak a canoia
-3magban a termeli sztearát szintjében. A kutatás anílszensszel való gátlással Is kimutatta eanolában és száj ában a sztearát növekedését Amikor sstearoö-ACP-di^^sizt kódoló gént tartalmazó ptemidot juttattak be caaolába, ez a gátlás a sztearát növekedését eradméayezte, de balszerencsésen az oleát csökkenését is. .ózonban szójában a sztearát ezen gátlása az oleát kevésbé drámai csökkenését eredményezte. Ez a lassabb csökkenés az· oíeát szintjében azonban lehet, hogy-az okát szójában lévé kisebb kezded szintjének a foggvényc, A zsírsav-útvonal a legtöbb olajos növényben úgy túmk, hogy ellenáll annak, hogy mind az olajsav, mind a sztearinsav emelt szintjét fenntartsa.
A PC17US97/©M49. szántó szabadalmi irat mind sztearinsav, mind pateútmsav megnövelt szintjét tótja fel napraforgóban a sztearoii-ACP-deszatóráz növény enzim gátlása révén. Mint ahogy fent jeleztük, a patótm-olajat azonban nem tekintik nagyon egészséges olajnak.
A PCTAJS96/09486. számú szabadalmi irat feltárja, hogy a napraforgóolaj palmitinsav és olajsav szintje növelhető, a magoknak 21-23% palrnitinsav, és 61% megnövelt olajsav szintje lehet. A napraforgóolaj folyékony szobahőmérsékleten. De a megnövel: paimiiinsav-szintrői azt állítják, hogy lehetővé teszi az olaj alkalmazását növényi zsiradékban, és margarinban viszonylag kismértékű hteragénezéssel, ami viszonylag alacsony szintű transz-zsírsavhoz vezet a kapott termékben. Azonban a kereskedelmi érték kérdéses a palmitinsav magas szintje miatt.
Tehát igény van olyan napraforgtfolaira, amely mind egészséges, mind hasznos ipari célokra. Ezenkívül kívánatos terme oiyaa napraforgóolaj, amelyben jó telített zsírsavak, és jó telítetlen zsírsavak egyensúlyban vannak, azaz magas a telítetlen zsírsav koncentrációja, de elegendő telített zsírsav van benne ahhoz, hogy margarinokban és zsírokban afahnazhato legyen nagymértékű hidrogénezés nélkül, ezáltal sem vezetve transzzsírsavakhoz a kapott termékben, Alapvetően igény van olyan napraforgó nöyényre, amely olyan olajat tartalmazó magot képes termetei, amely magas olajsavhas és sztearínsavban csökkeni linolénsav szintek mellett.
Tehát a találmány célja magas .sztearinsav (mint telített zsírsav) és magas olajsav (mint telítetlen zsírsav) tartalmú növényi olaj biztosítósa, amely csökkentheti a fesd feltárt, zsírral kapcsolatos problémákat Ebben az olajban a sztearinsav előnyösen a TAG 1. és 3. pozíciójában van.
A találmány az alábbi megfontolásokon alapul, A.roag· zsírsav-bíoszintézisc a plaszdszban megy végbe (2, ábra). A FÁS I enztetóííkus komplex által katalizált cíkfosos reakciók sorozata hozzá létre a pahnifoí.1ÁCP-t, amely lő szénatomot íartalmaz, Egy második, FÁS 11 nevű enzímstikus komplex meghosszabbítja a patehoil-ACP-t sztcaroíl-ACP-vé (18 szénatom), ami tovább módosai szíearoíi-ACP-deszatméx áltól oleoilACP-vó. Ez a három lő, píasztisz által szintetizált zsírsav, amelyeket a tíoészteráz vág le az ACE-ről, és azután exportálódnak a plasztiszbol. Később a cíiopiazmában az olajsav deszntnrálődhst íiaolsavvá és hnolénsavvá,
A TAG (tárolt ólai) a clfopiazmában keletkezik a eitopkszrnában leste zsírsavak készletéből. Ez a zsírsav-készlet a plasztiszból exportált zsírsavakból és a áeszahtrálással a ciíoplaztnában keletkezett íinolénsavhőí áll. Ezáltal a TAG zsírsav-összetételét a plasztiszból kfexportólt zsírsavak és a citeplazmában keletkezett Iteolénsav határozza meg.
Azt terveztük, hogy szteartessvfean ás olsjsavban gazdag napraforgó növényt szelektálhatunk, ha csökkent sztearát-deszatnráz aktivitást (ami a keletkezett oíeoil-ACF mennyiségének csökkenéséhez, és ezáltal a sztearoil-ÁCP növekedéséhez vezet) kombináljak jó tioészferáz aktivitással a sztearoil-ACP-n (ami a sztearinsav plasztiszból a cítöplazmába történő kiexportálásához vezet). Ez a növény sztearoil-ÁCP felhalmozását hozza lét-4re a piasztíszban, és a tioészteráz jó aktivitása a sztesroií-ÁCP-n jói klexportáiná szí a plasztiszbók magas sztesrinsav tartalmat biztosítva. a TAG-bíoszintézishez.
A plasztiszon kívül, a eitoplaamában a nagymértékben ©Ujsavas jelleg szükséges a linoiénsevtartalom alacsony szinten tartásához, A magas elajsav-tartalmá vonalakban az átalakítási útvonal nem működik tökéletesen, tehát sz olajsav nem alakul át linolénsavvá.
A találmány tehát; azon a felismerésen alapul, hogy egyrészről egy magas sztearinsav-ttirtaimú (HS) szülői vonal, és másrészről egy második, magas elajsav- és sztearoil-ACP-n magas aktivitású tioAszteráztartalmú (HOHT) szülői vonal szelektálásával olyan keresztezéseket végezhetőnk, amelyek magas sztearinsavés magas olajsav-íartalnni tulajdonság (HSHÖ) kombinációját tartalmazó magokat eredményez. Ezenfelül meglepő módon azt találtuk, hogy az olajban a TAG-molekula sn-2 pozíciójában lévő zsírsav-csoportoknak maximálisa® 10 tőmegiA-a telíted zsírsav-csoport.
Tehát a találmány tárgyát napraforgó magok képezik, amelyek -olyas olajat tartalmaznak, amelynek olajsav-tartalmanagyobb, mint 4Ö íőmeg%, és szíearissav-tartalms nagyobb, mint 12 íömeg% az olaj totál zssrsavtartalma alapján, és az olajat alkotó TAG-molekulák sn-2 pozíciójában lévő. zsirsav-csopertok maximum 10 tőmeg%-a telített zsírsav-csoport. Előnyösen a telített zssrsay-csöportok sztearínsav-csoportok. Előnyösen az olajban a TAG-molekula sn-2 pozíciójában maximum Sók, előnyösebben maximum 5% telített zsírsav, különösen sztearinsav van.
Az egyéb zsírsavak vonatkozásában előnyösen az olajsav-tartalom 55 és 75 tömeg% között, a sztesrínsav-tartalom IS és 50 íömeg% között vas, különösen 20 és 40 tÖroeg% között van, és a linolénsav-tartalom kevesebb, mint 20 t8meg%. Előnyösen a telített zsírsavak totói szintje legalább 2ő tömeg%.
A szülők szelekcióját az alábbiak szerint érhetjük el,
A magas szteariRsav-tartateú vonalak azok, atnelyek sztcarmsav-lartalma nagyobb mint 12%, előnyösen nagyobb mint 20%. ilyen magas szteariasav-tartalmú (HS) szülői vonal egy példája, amelyet nmtageaezis oíátt szelektáltunk, és a szteadnsav-íartalsna 26%, „CAS-3”4tést férhető hozzá (ATCC letéti szánta 75968, letétbe helyezve 1994. december 14-én). Másik példa a „CAS-4”, amelynek sztearinsav-tartalma ló, 1% (ATCC letéti száma 759-69, letétbe helyezve-1994. december 14-és), Más jelölt vonalak mágiáiból származó olajak elemzésével a szakember képes kiszeiekíálni más alkalmas szülői vonalakat.
Azt. találtuk, hogy a szokásos tnagas oljasav-íartalmú változatok némelyike nem alkalmazható a találmány szerinti célokra, mert azt találtuk, hogy nagyon alacsony a tíoészteráz-aktivitásak a. sztearíl-ÁCP-n. Azért,· hogy feiülkerekedjtink ezs®, a tioésrtersz-aktivitás mérésével a szteml-ACP-a jó tioészteráz-aktívitásá vonalakat kiszelektálhatjuk az elérhető magas olajsav-tartalmú vonalak gyűjteményeiből.
Röviden, először elemezzük néhány Ígéretes vonal olajának a zsírsav-összetételét Alkalmas HOHT szülői vonalnak nagyobb mint 7-8% sztearinw-tartalma, és akár kevesebb, mint 5% iinolénsav-tartaima, akár nagyobb mist 75% olajsav-tartalma van. Ezt követően a szelektált vonalakat feluöveszíjük és beporozzuk. Mérjük a totál tíoészteráz-aktivitási a magokban 15 nappal a virágzás után (15DÁE), mind οΙοοΠ-ΑΟΡ-η, mind sztearoll-ÁCF-n. A megfelelő vonalakban a sztcaroil-ACP-n mért aktivitás az oleoil-ACF-n mért aktivitás több mim 10%-ának kell lennie. A. két aktivitás aranya határozza meg, hogy egy vonal megfelelő-e szülői vonalnak, vagy sem.
- 5 A 2, táblázatta két magas olajsav-tartateü napraforgó-vonal zsírsav-összetételét ős tioészteráza&tivitását mutatjuk be.
2. Táblázat: Sztearlnsav-tartaloín és dcészteráz-Vmax sztearoií-ACP-n 15 nappal virágzás után két magas olajsav-tatamú napraforgó-vonalban.
Napraforgó-vonal Sztesrlnsav (%) Tíísészteráz-íikíivitás Vmax
HOHT 17, § 2,03
HOLT 8,ö •3.82
A HOHT-vonsl magas elajsav-tarialmú, több mint kétszer nagyobb sztearoit-ACP-n mért tioészterázakövitásá - .sztearoil-ACP-n mért: tíoészteráz-Vmax - (HOHT) vonal; tóim egy szokásos magas oiajsav-tartafem vonal (HOLT). Az enzimek relatív aktivitását sztearoíl-ACP-n az oteolt-ACP-n mérthez képest standardizálva a 3. ábrán mutatjuk: be. Ezen vonal ennek következtében több szteariösavat tartalmaz 1$ nappal virágzás után (2. táblázat), és többet tartalmaz az érért magból kapott olajban is (3, táblázat).
3, Táblázat; Két magas olajsav-tartateő napraforgó-vonal magjainak zsírsav-összetétele.
1 Napraforgó-vonal Zsírsav-összetétel <%)
pálmáin sziearm ölein linóiéin | araqam bekend·
HOHT 4,3 9,7 78,5 3.9 1,0 2,ó
8 HOLT 3,8 4,9 84,3 4,8 0,5 1,7
Ezt a HOHT szülői vonalat letétbe helyeztük az Aanericaa Type Cuitare Collection-néi (10891 Vniversity Soulevard, Manassas, VA.20110-2209) 1999, szeptember ?-én, és a FTA-62.8 számot kapta,
Mindkét típus (HOHT és HOLT) vonalait kereszteztük a magas szíe&fin-tartalmó CAS-3 vonallal., tk
4. ábrán (a HOHT vonalra) és az 5. ábrán (a HOLT vonalra) a két tulajdonság (magas sztesrinsav-tartalom. és magas olaj sav-tartalom) Pz-semzedékbelí szegregációját mutatjuk be. A magasabb szteariossv-tartalmá és otajssv-iartalmú magok egy körön belül vannak. Az ábrákból az következik, hegy a sztearoíi-ACP-n magas tíoészter-akíivításá HOHT vonalnak magas olasav-tartalmü és sztearinsav-tartalmú magjai vannak, és a. magas tiöészteráz-aktívltás nélküli vonalnak nincsenek ilyen magjai. A 4. táblázatban mutatjuk be ezen vonalak zsírsavösszetételét,
4. Táblázat: Kiválasztott magas olajsav- és sztenrissav-tartalmá vonalak, magas és alacsony tíoészturaz-aktíví· fással sztsaroil-ACP-n. a OAS-3-vonal HS-vonallal történő keresztezése után.
Napraforgó-vonal Zsírsav-összetétel (%)
padnibn szíearm ölein linóiéin sraquln behenin
HOHTxCAS-3 5,2 24,6 59,2 6,8 LS 2,4
HOLT x CAS-3 4,3 17,4 72,1 4,0 1,3 2,8
-6Á kiszelektált F2-vonalakat 5-6 generáción kérésziül beporoztuk elkülönített körüintények között, hogy elkerüljük a kontaminációi. A kapott generációkat & magas olaj sav-tartalom és sztearínsav-tartalom alapján szelektáltuk. Elemezhetjük a ttoészteráz-aktívítást, hogy segítsen a szelekciós eljárásban. Hasonlóképpen marker-támogatta nemesítést is alkalmazhatunk a három sajátosság bánnelytkéaek vagy mindegyikének követésére, hogy a szelekciós eljárást gyorsabbá tegyük. Különféle markerek, mist példáid SSR-mikroszatellit, ASO, RFLP és hasonlók alkalmazhatók. Markerek alkalmazása nem szükséges, mivel szokásos tesztek ismeretesek oíaísav, sztearinsav és tfoészteráz-aktíviíás meghatározására. Azonban az azonosított markerek & sajátosságok követését
könnyebbé teszik, és hamarabb a napraforgó A valódi tenyész napraforgónövét növény életében. ryek olyan olajat termelnek, ameiye k hasonló a zsírsav-összetétele a
szelektált, a TAö-moiékuia 2. pozíciójában dacsony telített zsírsavtartalmú P2-s Ragokhoz (5. t áblázat).
S, Táblázat: Kíszeíektáit valódi HSHO-tenj 'észnövények olajának zstrsav-összc o»yv< «'í/xF.·» Λ Ifo s is fotel, TAG- és sn-pozíeíóí, u,d.
Napraforgó-vonal paimítin Zsírsav-összetétel (mól?· sztearin ölein linoleü Ö '! araquiu hohemn
Totál olaj 5,5 24.9 57,8 8,2 1,7 1,8
TAG 5,6 26, t 57,6 7,4 1,6 1,7
sa-2 pozíció 1,? 1,9 87,4 9,0 n.d. n,d.
sn-1 és sn-3 pozíció 7,2 33,1 46,8 7,3 2,7 2,9
A találmány tárgyát képezik tóvá rííí-ti nfoífík'ísf ϊΤίϊίíw’íÍísí •Aí'jYíí'tapl dbá olyan napraforgó növények, au Ac <5*7 A«:ílí W<sO'ii V^íírrtvttf ít ieiyek a fent lt 'irt találmány sze-
A JA t i. t í «Xj V· Jkw VkÍA víüt^K.'cN-a JA i VaÍí-S-Í például lisztek és sajtolt magok. A taiálmásp zj.lV2 AVÍSV .Λ f ><t 3“'3«? O S V t,, <3/. v.«3j .lí.vdtiii. ViUíUiiiiU. » íilviij szerinti napraforgó növények és rí UíxSJUa aóűtttUíw spraforgó magi ΛΖ It'.fííjV.ftk'Aj iUAíil )k előállíthatok az
«.JáU>öi vtjdFdSSdL a) az olaj totál zsírsavtartaima alapján legalább 12 tömeg% sztea hnsav-Urtahrtú olajat tartalmazó
magokat biztosítunk: i) kevesebb mint 12 % sztearinsav -tartalmú olajat tartalmazó magok n míagemzálö te szelesével;
ti) azokból napraforgó növények döáiliíásávat amelyeket beporzónk magok létrába zására;
iii) a magok tesztelésével a kívánt sztearinsav-tartalomra; és iv> adott esetben a b) és c> lépések megismétlésével; b) az olaj totál zsírsavtartaima alapján legalább 40 tömeg% olajsa v-tartalmú ela at tartalmazó ma-
gokat biztosítunk, melyeknek a tioészteráz-akdvdtása sztearoíl-ACP-o legalább 10%-a az oleoil-ÁCP-n mért tioésztsráz-aktiviíásáuak;
c) az a) és b) lépésekben adott magokból növesztett növényeket keresztezzük;.
d) betakarítjuk az F I -utódmagokat.
Előnyösen az eljárás tartalmazza az alábbi lépeseket is:
e) elültetjük az F1 -utódmagokat, és napraforgó növényeket növesztünk;
í) az így növesztett napraforgó növényeket önporozzuk E2-rsagokat létrehozva;
'•f / g) teszteljük a magokat legalább 12 tömeg% sztearinsav-tariafotn és legalább 4Ö tömeg% olajsavtartalom jelenlétére az olajban, és hogya tloészteráz-akílvitás sztearoií-ACF-a az oleoü-ACE-n snért tíoászterázaktivitásnak legalább 10%-a:
b) elültetjük a kívánt szte&rinsav-taríalmú, oiajsov-tartehuű és íloészteráz-aktivitású napraforgó magokat napraforgó növények növesztésére;
i) az így növeszted növényeket őnporozzuk F3-magokat létrehozva;
j) adott esetben megismételjük a g), h) és i) lépéseket, amíg a kívánt sztesrinsav-tartafom, olajsavtartalom és tioészteráz-aktivitás rögzül,
Előnyősén a .srtearinsav-twrföleía legalább 15 tömeg%, előnyős 29 tőmeg%.
A találmány szerinti napraforgó olaj, amelynek a sztearinsav-íartafena nagyobb mint 49 tömeg%, és a sztearinsav-tartalma nagyobb, mint 12 tötneg% nz olaj totál zsírsavlarttthoa alapjíin, az olajnak a magokból történő kivonásával állítható elő. Az eljárás előnyösen olyan kivonási folyamatot tartalmaz, amely során a (napraforgó) olaj séta módosai lényegesen.
Ezenfelül sz olaj magokból történő kivonásának folyamata során előnyösen nem történik lényeges kémiai vagy llzíkai módosulás, séta enziruatikus átrendeződés, és előnyösen az olaj lényeges keményedáse sem.
A találmány szerinti olaj különösen alkalmas élelmiszeripari termékekben történő alkalmaztisra. Az ilyen típusa olaj szempontjából különösen hasznos élelmiszer-ipari termékek közé tartoznak ,,spreaá”-ek (kenhető krém), margarinok, fozőmargarin, szószok, jégkrém, levesek, péksütemények, etíkrászsüíemények, és hasonlók. Ezekben az. élelmiszeripari termékekben a napraforgó olaj színije előnyösen 3 és 1ÖÖ tömeg% között van & termékben lévő ólai totál tömegéhez viszonyítva. Amikor találmány szerinti „spread” készítésre alkalmazzuk, a napraforgó olajat előnyösen keménylfoanyagkéuí alkalmazzuk 5 és 20 tőmeg% közötti mennyiségben,
A találmány szermti napraforgóolaj önmagában is alkalmas emberi és állati fogyasztásra,
A találmány szerinti olaj, amelynek a aztearinsav-turtalma nagyobb, mást 49 tömeg%, és a sztesrmsav-tartalma nagyobb, míat 12 íömeg% az olaj totál asírsavtartalma alapján, szinté® alkalmas kozmetikai termékekben történő alkaímtszásra. Ezekben kozmetikai termékekben a napraforgó olaj szőttje előnyösen 3 és 100 tömeg% között vas. Ezen kozmetikai termékek néhány példája közé tartoznának krémek, Iemosók, rúzsok, szappanok, és bőr- vagy' haj olajok.
A kívánt olajat tartalmazó magokat termelő AfoífoHífoo uannus' növények a következő eljárással szeiektálhatők ki: (a) kiválasztunk néhány íAfowdse? ou«a.vs növényt, és olyan magokat gyűjtőnk róluk, amelyeknek legalább 12 íömeg% és előnyösen legalább IS tömeg% a sztesrinsav-tart&lma & totál zsírsavtartalom alapján; (b) kiválasztunk néhány ifoíforsrinzr orae növényt, és olyan magokat gyűjtünk róluk, amelyeknek legalább 40 tömeg% az olajsav-tartalma a magban lévő olaj alapján, és a tfoészteráz-áktlvlíás sztearoll-ACP-n az oleoilACE-n méri tloésriersfo-sktivításnak legalább 10%~a; (c) az (a) és (b) lépés: szerinti magokból növesztett növényeket keresztezőik, és betakarítjuk az Fl-utódtnagokaí.
További lépések közé tartozhatnak: (d) elvetjük a magokat, vagy a kapott El-utódok embrióiból embriókat mentünk E2-generációban szegregálódó magok kialakítására; (e) kiszelektáljuk az P2-generáeíóban azokat a magokat, amelyekből olyas magokat termelő növények fejlődtek,. amely magoknak a szteatinssv-tartnlma nagyobb, mint 40 tteeg%, és a sztearinsav-tartelttm nagyobb, mint: 12 íőmeg% az olaj totál zsfcsavtartalma alapείδη, és adott esetben önporozzak a szelektált növényeket, hegy valódi beltenyésztést növényeket kapjunk szaporításra.
Fí hibridmag a kővetkező lépéseket tartalmazó eljárással állítható' elő: a) kát: olyan haltenyésztőit növény magjait tlltetjök el, amelynek magas, legalább 40 tőmeg% olajsav-tiatateoa, és a tioészterás-iériivítás sztearoil-ÁCP-n az olooil-.ACP-n mért íiöésrtsráz-skíiviíúsnsk legalább 10%-a, és amelyeknek az egyike hímstenl lehet, b) keresztesük a két beltenyésztett növényt, és c) betakarítjuk az FI-magokat, amelyek olyan F2-magot képesek termeim, amelynek legalább 40 tömeg% az olajsav-tamtaa és legalább 12 tómeg% a .sztearinsav-tartalma,
A találmány tárgya öj és egyedi zsúpav-összetételd, könnyen termeszthető napraforgó haszonnövényekben előállított növényi olaj. Azonban további tehetségek haszonnövények közé tartoznának legalább .Sraaadca fajok, földimogyorók, pálmák, és egyéb olajtermelő növények. Amikor mutációt alkalmazunk a szülők egyikének vagy mindkettőjüknek előállítására, a haszennővényaek érzékenynek kell lennie mutagenezissel kiváltott olaj változásokra. & repce elegei tesz. mindezen követelményeknek, mhst ahogyan a napraforgó is, ezen haszonnövények jelenleg a leghasznosabb haszonnövények' az új és egyedi zsírsav-összetételű olajok előállításáéi a. magjukban.
Az alábbiakban röviden ismertetjük a leíráshoz tartozó ábrákat:
Az L ábrán triaeilgiicerolok lipáz általi hidrolízisét mutatjuk be,
A 2. ábrán olajos magvak zsirsav-fesoszmtézjsét ábrázoló plasstiszt mutatunk be,
A 3. ábrán emelt tioészíeráz-akíivitást mutatunk be a HO.HT és HOLT sztearoti-ACFm és oteoílACF-n márt doészteráz-akílvifáskhoz viszonyítva.
A 4. ábrán sztearinsav és olajsav F2-generá«íés szegregációját mutatjuk be a magas oiajsav-taríaimú és sztearoil-ACP-s magas ttoésAer-aktivltmsá (HOHT) és magas sztearínsav-iartalmú (HS) vonalak közötti keresztezésben.
Az 5. ábrán sztearinsav és olajsav F2-g,eneráeiős szegregációját mutatjuk be a magas olajsav-tartaknö és sztearoil-ACP-n alacsony tioészter-aktivitású {HÖLT} és magas sztearinsav-taríalmó (HS) vonalak közötti keresztezésben.
Az alábbiakban röviden ismertetjük a leírásban alkalmazod defene lókat:
„NAPRAFORGÓ” atett /fo/fcfwítee n.unaus-t értünk.
„NÖVÉNY” alatt a teljes növényt értjük, és az összes növényi és sejtes részeket, beleértve pollent, magszemeí, olajat, embriót, szárat, fejet, gyökereket, sejteket, merisstémákaí, wagkezdsményt, portökokaí. mikrospórákot, embriókat, DNS-t, RNS-t,. szirmokat, magokat és hasonlókat, és protoptesztokat, kallnszokat vagy a lentiek bármelyikének szuszpenzióit.
,,l 5.DAF5 alatt a „I5 nappal virágzás után’’ kifejezést értjük.
A napraforgóolaj „TOTÁL ZSÍRSAVTARTALM.A” alatt a CIO, lk:Ö, 18:1, 18:2»20:1), 22:ö és egyéb zsírsavak nyumnyí mennyiségeinek ősszeggét értjük, egyidejűén meghatározva a magból, „HÖLT” alatt normális vad típusú napraforgómaghoz (l?%~2.0% olajsav-tartalom) viszonyítva magas és középmagas közötti (4Ö%-9Ö%) olajs&v-szinteí tartalmazó olajat értünk, amelynek .„ALACSONY TIOÉSZTERÁZ-ARTIVÍTÁSA” vsa. Egy „HOLT-VONAL” az HOLT sajátosságú vonal, előnyösen napraforgó-vonal.
-9,,ΗΟΪ-ίΤ’5 alatt normális vad típusú napraforgómaghoz (!?%-2Ő% olajsav-tartalom) viszonyítva magas és középmagas közötti (4034-90%) olajsav-szintet tartalmazó olajat értitek, amelynek „MAGAS TIOÉSZTERÁZ-AKTIVITÁSA” vasa. Bgy „HOHT-VÖNAL” az HOH'F sajátosságú vonal, előnyösen napraforgó-vonat „MAGAS TÍÖÉSZTERÁZrAKTIVITÁS alatt sztearoü-ACR-n mért olyan tioéezseráz-aktívstást értőnk (1SDAF mérve), amely az oleoil-ACP-n átért tloészteráz-aktlvitásnak legalább lÖ%-&, Következésképpen .„ALACSONY 'nOÉSZTERÁZ-AKTlVlTÁS alatt a „MAGAS TIOÉSZTERÁZ-AKTIVIFÁS’’ stelti szintet értünk.
„HS” alatt az olajnak legalább 12 főt»eg%, előnyőseit legalább 15 tötneg%, előnyösebben legalább I S tömegbe, vagy akár legalább 2Ö tSmeg% szíearinsav-szintjét értjük a totál zsírsavtartteoinra vonatkoztatva. „MAGAS SZTEARINSAV-TARTALMÚ VONAL” vagy JHS-VÖNAL alatt kíS sajátosságú venalat, előnyösen napraforgó-vonalat értitek, „í-IOHS” alatt 40% feletti olajsav-szintet, és legalább 1.2 tömegbe, előnyösen legalább 15 tömeg%, előnyösebben legalább ! 8 töm«g%, vagy akár legalább 20 tömeg% szteartírsav-szlnteí értőnk az olajban. Egy „HOHS-VONAL” alatt HÖHS sajátosságú vonalat értünk.
Szabadalmi példák
BEVEZETÉS
H&S^iiöteőállltesa
Anmk érdekében, hogy a MS-szüiőí megkapunk, a vad típusú magokhoz képest megnövelt sztearínsav- és olajsav-tartalmú napraforgómag előállítására szolgáló eljárást alkalmazhatunk. Ezen eljárás szerint a szőlői magot mutagén szerrel kezeljük egy ideig olyan koneenteáelőban, amely elegendő egy vagy több mutáció létrehozására a sziearínsav- és olajsav-biosziteézisben részt vevő genetikai sajátosságban. Ez sztearinsav megnövékedett termelését és/vagy olaj sav megnövekedőit szintjét eredményezi. Ezen matagén szerek közé tartoznak olyan szerek, mint például nátrium-azld, vagy alkilálószer, mint efii-mteán-sznlfbnáf, és természetesen bármilyen egyéb .taatagés szert alkalmazhatunk, amelynek ugyanolyan vagy' hasonló hatása van. A kezelt magok örökölhető genetikai változásokat tartalmazhatnak, A matáliatotf magokat azután csíráztatjuk, és módnövényeket nevelünk belőlük. A sajátosságok növelésére az utódokat keresztezhetjük vagy őntormékenyíthetjük. Az utódmagokat összegyűjtjük és elemezzük.
Az I- példában n&trium-azídot és stil-metán-szulíonátot slkalmaz&tík matagén szerként Számos, 12 és 45% közötti szteartesav-iartahná napraforgó-vonalat kaptunk. Az összes esetben az RDE-1-532 eredeti szülői napraforgó-vonalat (Sunilower Coliectioo of Instihrto de .Agricuiturs Sostenlble, CS1C, Cordoba, Spate) alkalmaztak a magas sztearmsav-tartalmú vonal előállítására, amely 4-7% sztearmsavat tartalmaz az olajban.
OOHT-szőlő,szeIektálása
Elvben elegendő olajsav-tartalmú vonalakat HÖHT-féwűpusra szkríselm, és ezt a vonalat alkalmazni magas sateanssav-íartelmú vonal transzformálására vagy keresztezésére. Alkalmas vonal legalább az, amelyet 1999. szeptember 7-én helyezőink letétbe az American Type Culíare Colieedors-oél (108ΘΙ Umversiiy Boulevard, Manassas, VA 2Ő110-2209), és a ΡΊΆ-628 számot kapta.
A HOBS-yonal.készítess
-10Α HOHT-sajátosságú vagy a szteariírtav-sajátosságű magokat azután kereszteztek egymással a HOHS-vonslat létrehozva. Adott esetben további esírázíatási, tenyésztési és ösbeporzásí ciklusokat végezhetitek a sajátosságok itomícúgöfaságának rögzítésre a vonalakban, és keresztezést és magok gyűjtését.
ANYAGOK ÉS ELJÁRÁSOK
Nővénylermesztési kőrtibnénvek
Magas oiajsav-taríaiinú. voaalakból származó, módosított .zsirsav-ősszctételű napraforgó· (öébA® ewfttus· L.) magokat alkalmaztunk a szteared~A€P~s mért tioészteráz-aktívútás tesztelésére, A sövényeket temtesztőkamrákban termesztettük 25/15’C-os (nappalí/éjsz&kai) hőmérsékleten, 16 órás fényperfodossal és 300 |tmóis»'V! fotonáramlási sűrűséggel. Az elemzésre a magokat 15 nappal a virágzás teán takarítottuk be, és -2Ö“C«oa taroltok.
BbáÉibÁtívresgertsekésaciMC&LglóOiÁsb
A 2,1 GBq/tomőt specifikus aktivitású l-:4G-olajsavat és az 1,9 OBq/aaaöt specifikus aktivitású j9,10(n)-''B}sztearmsavaí az American RadfotoMed Chemicals, Inc, cégtől (St. Losris, M.O, OS A) szereztük be. A zsírsav nátriumsójának előállítására megfelelő térfogatú zsírsav-oldatot üvegcsőbe vittünk át, az oldószert eltávolítóitok nitrogén alatt, és: a. maradékot 19% Triton X-191), 0,6 mM NaOH oldatban feloldottuk. Ezt az oldatot 55’C-on melegen tartottuk 1 őrárt keresztül a homogenitás biztosítására.
Az acii-AGR-kef Rock, C.O. és mtsai, [Metbods Enzymology 72, 397-403. old. (1981)] enzímaíífcus szintézis eljárásának módosításával állítottuk elő. A vizsgálati eljárás 0,1 M Tris-HCl-t (pH S,ö), 0,4 M LiCi-i, 5 mM ATP-t, 1Ö mM MgCk-f 139 p.M zsirsav-nátóamsóf 0,27 stM ACP-SR-t és 1,8 mii acíl-ACP-színtetázt tartalmazott (a két utóbbi komponenst a Sigtos-Áldrlch Quhnica S.A. cégtől. Madrid, Spam vásároltok), 116 μΐ végíérfogafban. A reakciókat 3 órán keresztel inkubáitek 37’C-on, Az idő letelte után a pH-t 1 pl 3,6 M HCi hozzaaádásáv&l 6,ö-ra savanyítottuk, és az elegyet megtisztítottuk a szabad zsírsavaktól Manóba, 'M. és. mtsai, [Anni. Bíochem. 68, 609-008. old.. (197S)j által leírt eljárás módosításénak alkalmazásával, amely eljárás szerint egyenlő térfogatú Izopropanolt adtunk az elegyhez, és háromszor mostuk hexánnal telített vizűzopropanoiial (1:1, V/V).
Nyers extraktemok előállítása enzimes vizsgálati eljárásra és fehérie-meghatározásra
A fagy ott magokat meghámoztuk és megőrültük extrakciós puíferbes - amely 29 mM Tris-BCl-t (pH 8,5), 2 mM DTT-t és 5% (V/V) glicerint tartalmaz [Dörtoann, P. és mtsai,, Biochkn, Blophys. Aeta 1212, 134136. old, 0994)]-- 1 g szövet per lő nrl pnifer arányban. A fehérjekoncentrációkat a Aroíten Asmy ,fö (BinRsd) alkalmazásával mértük a gyártó utasításai szerint standardként BSA-i alkalmazva.
Az aolí-ACP-doészteráz-uktivitást 179 pl végtérfogatban mértük í 30 μΙ nyers eximkfenn alkalmazásával A kontrollokból a nyers extraknunoí kihagytak. A reakcíóelegyek 20 mM Tris-BCl-t (pH 8,5), S% glicerint és 2 mM düfetreitolt (DTT) tartalmatok, és szubsztrátok (sztearoílvkCP és olenil-ACP) különböző koncentrációit. Az inkubációt 25“C-oa végeztük 29 percen keresztül. A reakciókat 179 μΐ, i mM olajsavat tartalmazó ízopröpanoihan oldott 1 M eeetsav hozzáadásával állítottuk is. Azután az «legyeket háromszor mostuk hexánnal telített vitedzopropanolbl (1:1, V/V),
Az acíl-ACP-tioészteráz-akíívitást a vizes iázís radioaktívitesának mérésével határoztuk msg, amely a nern hldrolizák: sznbsztrátokaf tartalmazta. Azután 3 ml szcíntillációs folyadékot (National Diagnos-tíes, Hessle,
-11England) adtunk a mlníákhoz, és a radíoakhviiást szeistliláclós számlálóval (Rackbeta 11; LKB, Sweáes) mértük. Az acíl-ACP-tloészterás vizsgálati eljárások adatait a Miehaelis-Meste» egyenletre illesztettük nemlineáris legkisebb négyzetek regressziós elemzéssel a M/cromf örsgm 4. / program alkalmazásával és P<Ö,Ö5 értékre korreláltuk, amit a páros Student-féle teszttel határoztunk meg. Ezekből a görbékből Vmax és Kst értékeket számoltunk.
EMytádéEMM
A magokat 70 mM etil-metán-szuiíenát (EMS) vizes oldatával mutáhattuk. A kezelést szobahőmérsékleten hajtottuk végre '2 órán keresztül ráz&tássai (60 rpruk A matagenezis után az EMS-oldutot eldoblak, és a magokat csapvizzel mostuk lö órán kérésztől.
A kezelt magokat termőföldön esirázíattak, és a növényeket önporoztuk. Az ezen növényektől gyűjtött magokat alkalmaztuk módositott zsírsav-ősszetételő napraforgó-vonalak szelektálására. Gareés, R. és Manóba, M [Auai. Bíochem. 211 139-143. old, (1993)] eljárását alkalmazva meghatároztuk a mag zsírsavösszetételét gáz-folyadék kromatográftával, miután a zsírsavakat a megfelelő tnetilészterekké alakítottuk.
Egy, az olajban 9-17% sztearmsav-tartaimö, első növényt szelektáltunk ki. Áz utódokat öt generáción keresztül termesztettük, amely során a szteariasav-tartalsm növekedett, és az új genetikai sajátosság stabilan rögzítetté váll a mag genetikai anyagában. Ezt a vonalat CAS-3-nak nevezzük. A vonal minimum és maximum saeariasav-tattateist sorrendben 19 és 35% volt. Az ezen sejtvonal magjaiból kivont olaj szteamw-isrtalma ezáltal 19 és 35¾ között lehet.
Napraforgómagokat vizbea oldott, 2 mM koncentrációjú nátrium-azíddal mutáitattuk. A kezelést szobahőmérsékleten hajtottuk végre 2 órán keresztül rázatással (óö rpm). Azután a muíagenezis-oldáíot eldobtuk, és a magokat csapvizzel mostuk 16 órást keresztül
Á kezeit magokat termőföldön csíráztattuk, és a növényeket Őnporoztak, Ezen növényektől magokat gyűjtöttünk, és a zsírsav-összetételüket sz I, példában leírt gáz-folyadék kmmatográűa alkalmazásával meghatároztuk, miután a zsírsavakat a megfelelő metiíészterekké alakítottuk.,
Áz olajban körülbelül 10% szteariusasr-tartsimö első növény magjait szelektáltuk ki, és öt generáción keresztül termesztettük. Ennek során a szteítriusav-tartalom növekedett, és az üj genetikai sajátosság stabilan rögzült. Est a vonalai CAS-4-nek nevezzük. Ezen. vonal egy kiválasztott mintáját elemeztük, ami ló, 1% sztearinsav-íartalmat eredményezett.. A minúnum és maximum értékeké sorrendben 12 és 19% volt.
δ. Táblázat
Vonal Zsírsav-összetétel (%)
palmitis szfearin ölein linóiéin
CAS-3 5,1 2.6,1) 13,8 55,1
c.ás-4 5,5 ÍÓ,1 24,3 54,1
-12Á CAS-3 és CAS-4 vonal letétbe » helyezve az American Tvps Culture Coilection-nél, sorrendben a 75968 és 75969 ATCC-lajslromszámoo,
2. példa
1. Általános rész
A. HöídT-vonal napraforgóinak magjaiból (amelyeket az ATCC-nél letétben helyeztünk PTA-628 szánton) napraforgőnövényeket növesztettünk. Szintén n&prafergonövésyekeí növesztettünk a CAS-3 napraforgómagokból. A vonalakat kereszteztük. A növényeket mesterséges beporzással segítettük annak érdekében, hogy biztosítsuk a megfelelő magkeletkezés megtörténtét. Az Fi-magokat a HÖHT-növényeken állifotrtik elő, vagy fordítva, és betakarítottuk azokat. A több mint 28% sztearát-tartalmú és több mint 48% oieát-íartahná magokat szelektáltok. Habár ez termeli a találmány szerinti ©fajai, a termelés szintje korlátozott
Tehát kívánatosak, az ezen olajprsSUal rendelkező magokat termelő rögzített feelíenyésztett vonalak. Ezeket a homozigóta be-teny észtett HSHO vonalakat azután keresztezhetjük hibrid magot létrehozva, amely a találmány szerinti kívánatos oiajsajátságokat mutató F2-magokat termei,
Ebből a célból az FI-magokat elültettük, és a keletkezeit növényeket ösporoztok izolált körülmények között, és Fz-roagot hoztunk: léire. .Az F2-magot teszteltük a három sajátosságra, magas sztearinsav-íartalomra, magas okdsav-tartalomra, és tíoészteráz-aktívííás magas szintjére. Az: ezen sajátosságokat mutató magok fennmaradó részét növények, növesztésére alkalmaztak, F3-magokat létrehozva. Az ösporzási és szkrraelési ás szelekciós eljárást megismételtük a rögzített Itomozlgóht .HSfíO-vonal kialakítására, amelynek az alábbi zsírsavproSIja van: C: 16 5,4, €:18,0 24,8 C:18.f 58,5 C:Í8.2 7,2. Ha egyszer a sajátosság rögzült, hasonló HSHOvonalat keresztezhetünk mindkét tulajdonságot hordozó hibridmagok előállítására.
A találmány szerint napraforgönövényeket és magokat, amelyekből az olaj kivonható, biotechnológiai eljárással is előállítottunk. A magas sztearmsav-tartalom örökölhető sajátosság, és teljesen független, a termesztési körülményektől,
10,7 tŐmeg% sztearínsav-tartalmú és 76,4 tömegük olajsav-tartabná HOHT-vonal napraforgómagjaiból napraforgőr-övényt növesztettünk Szintén aíspraforgónóvényekeí növesztettünk CAS-3 napraforgómagból, A növényeket kereszteztük, A növényeket mesterséges beporzással segítettük annak érdekében, hogy biztosítsuk a. megfelelő magkeleikezés megtörténtét. Az Fl-magokat a HQHT-nővényeken állítottuk elő, vagy fordítva, és betakarítotok azokat.
9,8 tötneg% sztearinsav-tartalmú és 88,7 íomeg% olajsav-tartalmd .FI-magot szelektáltunk ki. Ezen FI-magol elültettük, és a keletkezeit növényt Önporezfok izolált körülmények között, és F.2-magökai hoztunk létre. Ezwn F2-magokal teszteltük olaj sav-tartalomra és sztearmsav-tartalomra. 23,6 tömeg?· » szíearínsav-tartalntü és 65,5 íöt»eg% oiájsav-isftafen magot szelektáltunk ki.
Ezt az FS-magot elültettük, és a keletkezett növényt önporozíuk Izolált körülmények között, és 15DAF számos tnagot begyűjtöttünk, és sztearoíl-ACF-tfoészteráz-aktivitásrn elemeztünk. Az ugyanazon növény oleoíl-ACF-n mért tloészteráz-aktlvitáshoz képest több mint 18% sztearoíi-ACF-n mért tloészterázáktivitást adó magokat hozó növényeket szelektáltunk ki.
-ΛΟÁz előző lépésben kiszelektált sövények magasabb mint 2Θ tömegíá sztearinsav-tartalmá és magasabb mint 40 tömeg% olajsav-tartalmá érett magjait ismételten őnporoztuk, szkríneitük és szelektáltuk, hogy rögzített tamigéta magas sztearmsav-tart&hná és magas oíajsav-tahateó vonalat fejlesszünk ki, amely olajának az alábbi a zsírsav-profilja:;
palmjtinsav: 7,8· tö?neg%; sztcarlnsav: 24 tömeg%: olajs&v; 57,? töraeg%;
Imolénsav: 5,9 tömeg%: araqumsav: 1,9 tömeg%: beheninsav: 2,7 tömeg%;
Ha egyszer s sajátosság rögzült hasonló magas sztearinsav-tartaiínu és magas ölajsav-tartateü vonalat keresztezhettek a festi szelektált sajátosságokat hordozó hibridstagok előállítására.
A TAG-moíekula sn-2. és az sn-1,3 pozícióinak elemzése az olajban az alábbi zsírsav-eloszlást mutálja (tömeg%-ban):
sö-2:
patótfesav: 3,3%; szteariasav: 3,4%; olajsav: 88,8%; línoléítsav: 4,5%; arsquinsav: 0%; beheaiasav: ö%; sn-1,3:
pafontsnsav: 934; sztearinsav: '29,9%; olajsav: 51,1%; linolénsav; 4,7%; aragainsav: 2,3%; behesínsav: 3%;
Tehát a telített zsímv-cseportok totál mennyisége .a TAG-molskala sn-2 pozfelöjáha.0 az olajban 6,7 töjseg%.
3- Második keres&gzés
8,4 tömeg% sztfisarteav-íarjabsú és ?S,S íütaeg% olajsav-tarlalmú HÖHT-vaaal nspraforgórsagjaibéi napraförgónővényt növesztettünk. Szintén naprafórgánöványeket növesztettünk CAS-3 napraforgómagból. A aö vényekéi kereszteztük, A növényeket mesterséges beporzással segítettük annak érdekében, hogy biztosítsuk a megfelelő magkeietkezes megtörténtét. Az H-magokat a ΉΟΗΤ-aövényeken állítottak elő, vagy fordítva, és betakaritoímk azokat. ?,1 tömeg% sztearinsav-tartalmá és 84,6 tőra«g% olajsav-tartalmú F!-magot szelektáltunk ki. Ezen Fl-magoí elültettük, és a keletkezett növényt önpomzaáí Izolált körülmények közölt, és F2-magokat
-14hoztunk létre. Ezen F2-magokat teszteltük oity sav-tarlalomra és sztearissav-tartalomra. 22,3 tömeg% sztearínsav-tartaímú és 64,8 tömeg% olajsav-tartahnú magot szelektáltunk ki.
Ezt az. F2-mag<4 elttttettük, és a keletkezett növényt öaporoztok izolált körülmények között és 15DAF .számos magot begyűjtöttünk, és sztearoil-ACP-tioésAeráz-akíivitásra elemeztünk. Az ugyanazon növény oleoil-ACP-n mért fioéssferáz/aktí vitáshoz képest több ont 10% sztearoil-ACP-n mért öoéssstózaktivitást adó magokat hozó növényeket szelektáltunk ki, Az előző lépésben kiszelektált növények magasabb mint 20 íőtneg% sztearinsav-iartahRÓ es magasabb mint 40 iömeg% oiajsav-tartalmá érett magjait ismételten őnporoztuk, szkrlrseliük és szelektáltuk, hogy rögzített homozigóta magas szteiuinsav-tartalmú és magas olajsavtartaimű vonalat fejlesszünk ki, amely olajának az alábbi a zsírsav-profilja:
palmitinssv: 5,8 tömeg%; sztearínsav: 24,7 tömeg6/»; olajsav: 57,δ tömeg%; iinoiénsav: 8,2 tömeg%; araquirisav; 1,8 tömegé behentnsav: 1,9 tömegbe;
Ha egyszer a sajátosság rögzült, hasonló magas szíearinsav-tartalmá és magas olaj sav-tartalmú vonalat keresztezhetünk a fenő szelektált sajátosságokat hordozó hsbridrnagok előállítására,
A lAG-molekuia sn-2 és az sn-1,3 pezíeióín&k elemzése az olajban az alábbi zsírsav-eloszlást imitálja (tönteg%-b&n):
sn-2:
palmítiínsav: 1,7%; sztearínsav; 1.9%; olaj sav: 87,5%; iinoiénsav: 8,9%; araqninsav: Ö%; bebentössv: ö%; so-1,3:
palmítínsav: 7,2%; szteamsav: 33,2%; olajsav: 46,9%; hnolénsav: 7,3%; arapninsav: 2,ő%; befeeninsav: 2,8%;
Tehát a telített zsírsav-csoportok totál mennyisége a TAG-molekula sn-2 pozíciójában az olajban 3,6 tömeg%.
9,9 tömeg% sHearinsüv-üsríaimáés 83,2 tötneg% otejsav-tartalmó HÖHT-vonaJ napraforgómagjaiból napratőfgőnbvényt növesztettünk. Szintén napmiorgonővényeket növesztettünk C.AS-3 napraforgómagból. A
-15növényeket kereszteztek. A növényeket mesterséges beporzással segítettük annak érdekében, hogy blztssitsok a megfelelő tnagkeletkezés megtörténtét. .Az FI-magokat a HOHT~ttövény«ken állítottuk elő, vagy Fordítva, és betakarítottak azokat.
S.9 tömeg% sztearmsav-tartalmú és 82,3 tÖmeg% olajsav-tartalmd Fl-raagot szelektáltunk ki. Ezen F I -magot elültettük, és a keletkezett növényt őnporoztak izolált körülményiek között, és F2-magokat hoztunk létre, Ezen F2-magokat toszteh?3k oiajsav-tartalomm és sztearlsstiv-tartalomrs. 23,9 tömeg% sztearisssv-sartalmó és ó4,8 íö:tneg% olajsav-tartslmü magot szelektáltunk ki.
Ezt az F2-magot elültettük, és a keletkezett növényt önperoztuk Izolált körülmények között, és 15D.AF szátnos magot begyűjtöttünk, és sztem-níl-ACF-jdoéssferáz-aktlvitásra elemeztünk, Az ugyanazon növény oleoíFÁCF-n mért ti.oé&zteráz-abtlvrtáshoz képest több mint 1Ö% sriearoil-ACP-n mért tíoészterázakílvitást adó magokat hozó növényeket szelektáltunk ki. Az előző lépósbea kiszelektált növények magasabb mint 20 tömeg% sztearinsav-tartaimú és magasabb mint 40 tőmeg% olaisav-tartalmö érett magjait ismételten ősporoztnk, szkrinelíük és szelektáltak, hogy rögzített homozigóta magas sztearinsav-tartaimú és magas olajsavtarialmú vonalat fejlesszünk ki, amely olajának az alábbi a zsirsav-profiljat paimitinsav; 5,4 tőmeg%; sztearmsav; 24,2 tömegké; olajsav': 62,1 tömeg%; linolénsav: 4,7 Eömeg%; araqttmsav: 1,6 törneg%: bebeninsav: 2,0 tömeg%;
Ma egyszer a sajátosság rögzült, hasonló: magas sztearínsav-tartalmá és magas olajsav-tattaimú vonalat keresztezhetünk a fenti szelektált sajátoss.ágokat hordozó hibridmagok előállítására.
A TÁG-molaknla sn-2 és azsn-1,3 pozícióinak elemzése az olaj ban az alábbi zsírsav-eloszlást mutatja <tösneg%-btin):
Stt-2;
paimitinsav; í ,g%; szíearínsav: 3.3%; olajsav; §9,6%; linolénsav: 5,3%:, araqninsav: 8%; öehesmsay; -ö%; sn-1,3:
paimitinsav: 9,5%; sztearmsav: 33,5%; olajsav; 48,2%; linolénsav; 4,359: araqamsav: 2,2%; beheníassv: 2,3%;.
-16Tehát a telített zsirsav-esopottok totál mennyisége a TAG-moiekuia sn-2 pozíciójában az olajban 5,1 tömeg%.
A taiálmsfoy tárgya genetikai anyag, amelyet magok képeznek, a bennük lévő olajjal, liszt és sajtóit magok, valamint eljárás a magok és olyan növények termesztésére, amelyek a magok és a magokat termelő növények termesztéséből erednek.

Claims (13)

  1. Szabadalmi igénypontok
    1. Napníforgömag, amely olyan olajat tartalmaz, amelynek több mint 40 t&neg% elajsav-tartalma és több mint 12 íőmeg% sztearinsav-tsttalma az olaj totál zsírsavtartahna alapján, és az olajat alkotó triacilglicerol (TAG) molekulák sn~2 pozíciójában lévő zsírsav-csoportok maximum, 1Ö tömog%~3 telített zsírsav-csoport.
  2. 2. Az I. igénypont szerinti mag, amely olyan olajat tartalmaz, amelyben az olajat alkotó TAG-moíekulák sn-2 pozíciójában, lévő zsírsav-csoportok maximum 8 tömeg%-a telített zsírsav-csoport.
  3. 3. Az 1. vagy- 2. igénypont szerinti mag, amely olyan olajat tartalmaz, amelyben az olajat alkotó TA.Gmolekulák' sn~2 pozíciójában lévő zsírsav-csoportok maximum 5 í.ömeg%-a telített zsfcav-csoport.
  4. 4. Az 1-3 . Igénypontok bármelyike szerinti mag, amelyben az olajsav-tartalom 55 és 75 tőnieg% között van,
  5. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti mag, amelyben a sztearinsav-tartalora 1.5 és 50 tömeg% között vas.
    ó. Az 5. igénypontok bármelyike szerinti mag, amelyben a sztesrinsav-tartalom 20 és 4ö törneg% között van.
  6. 7. Az 1 -6. igénypontok bármelyike szerinti mag, amelyben az olaj összes telített zsttssvtüttafesa legalább 20 töfneg%.
  7. 8. Az 1-7. igénypontok bármelyike szerinti mag, amelyben az olaj lisoiénsav-tartaboa kevesebb, műit 20 tömegbe.
  8. 9. Napraforgó olaj, amelynek több mint 4Ö tömeg% az olaj sav-tartalma és több mint 12 tömeg% a sztearistsav-taríaima az olaj totál zsirsavtartalssa alapján, és az olajat alkotó TAG-molekulák sn-2 pozíciójában lévő zsírsav-csoportok maximum 19 fomeg%-a telített zsírsav-csoport.
  9. 10. A 9. igénypont szerratl olaj, amely 1-8. igénypontok bármelyike szerinti napraforgómagban található, i 1. Napraforgó növény, amely 1 -S. igénypontok bármelyike szerinti napraforgómagból van növesztve.
  10. 12, Napraforgó növény, amely 1-8. Igénypontok bármelyike szerinti napraforgómagot termei.
  11. 13, Eljárás 1-8. igénypontok bármelyike szerinti magot termelő napraforgó növény előállítására, azzal jellemezve, hogy
    a) legalább 12 tömeg% sztearissav-taAaimó olajat tartalmazó magokat biztosítónk:
    i) kevesebb mint 12 % szieífonsav-tartalmú olajat tanaim,azó magok mutagenízáló kezelésével;
    ii) azokból napraforgó növények előállításával, amelyeket beporzónk magok létrehozására; ílí) a magok tesztelésével a kívánt sztearinsav-íattalomra; és ív) adott esetben a b) és c) lépések megismétlésével;
    b) legalább 4Θ lötneg% olaissv-taríalnfo olajat tartalmazó magokat biztosítunk, amelyeknek a fiöészieráz-akiivliása sztearoil-vkCP-n legalább 10%-a az oleoH-ACP-s mért tioészíeráz-aktivitásnak; s) az a) és b) lépésekben adott magokból növesztett napraforgókat keresztezzük;
    d) betakarítják az F1 -etódmngokaL
  12. 14. A 13. igénypont szerint: eljárás, azzal jellemezve, hogy a kővetkező további lépéseket tartalmazza:
    e) elültetjük az F1 -atódntagokaí,. ily módon napraforgó növényeket növesztünk;
    f) az Így növesztett napraforgó növényeket önporozzak, ily mádén F2-msgokat állítunk elő;
    g) teszteljük a magokat legalább 12 fontog% sztearínsav-tartafom. legalább 48 tömeg% olajsav-ísrlaiom jelenlétére, és hogy a sztearoil-ACP-n mért tioészieráz-akiivitás az öleoii-ACP-n mért. ttoésztetáz-áfctiviíásnsk legalább 10%-a;
    h) elültetjük a kívánt sztearinssv-iaríalmú, olajsav-tarfalmú és tíoészteraz-aktivitásö napraforgómagokat, ily módon napraforgó sövényeket nővesztőnk;
    i) az Igy növesztett napraforgó növényeket Soporozznk, ily módon- F3-magokaf állitaok elő; és
    j) adott esetben megismeteljiik a g'i, h) és íj lépéseket, amis; a kívánt szíearinsav-tarlalom, olajsaviartalom és tioészteráz-aktivüás rögzül.
  13. 15, Liszt vagy sajtolt mag, amely az 1-8, igénypontok báj-melyike szerinti magból származik.
HU0201476A 1999-06-04 2000-06-05 High oleic high stearic plants, seeds and oils HU228892B1 (en)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US09/326,501 US6388113B1 (en) 1999-06-04 1999-06-04 High oleic/high stearic sunflower oils
EP99204384 1999-12-17
US18045500P 2000-02-04 2000-02-04
PCT/EP2000/005150 WO2000074470A1 (en) 1999-06-04 2000-06-05 High oleic high stearic plants, seeds and oils

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUP0201476A2 HUP0201476A2 (en) 2002-09-28
HU228892B1 true HU228892B1 (en) 2013-06-28

Family

ID=27240153

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0201449A HU228802B1 (en) 1999-06-04 2000-06-05 Use of high oleic and high stearic oils
HU0201476A HU228892B1 (en) 1999-06-04 2000-06-05 High oleic high stearic plants, seeds and oils

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0201449A HU228802B1 (en) 1999-06-04 2000-06-05 Use of high oleic and high stearic oils

Country Status (10)

Country Link
US (2) US6956155B1 (hu)
EP (3) EP1187527B2 (hu)
AT (2) ATE303718T1 (hu)
AU (2) AU783474B2 (hu)
CA (2) CA2374100A1 (hu)
DE (2) DE60030280T2 (hu)
ES (2) ES2265945T3 (hu)
HU (2) HU228802B1 (hu)
TR (2) TR200103523T2 (hu)
WO (2) WO2000074470A1 (hu)

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE60113993T2 (de) * 2000-06-15 2006-07-06 Unilever N.V. Herstellung von triglyceridmischungen
AR032701A1 (es) * 2001-02-16 2003-11-19 Consejo Superior Investigacion Una planta, semillas y un aceite con contenido aumentado de triacilgliceroles saturados y un aceite que tiene un elevado contenido de acido estearico
WO2003071876A1 (en) 2002-02-28 2003-09-04 Unilever N.V. Triglyceride fat suitable for spread manufacture
MXPA05001630A (es) 2002-08-12 2005-04-25 Unilever Nv Grasa de trigliceridos.
BR0318602A (pt) * 2003-11-14 2006-10-17 Consejo Superior Investigacion óleo de girassol, planta de girassol, sementes de girassol, método para produção de uma planta que forma sementes contendo um óleo endógeno, planta hìbrida, progenitura de planta hìbrida, óleo, e produto alimentìcio
CN101065490B (zh) 2004-09-24 2013-07-17 孟山都技术有限公司 用于植物的启动子分子
US8871960B2 (en) 2005-04-26 2014-10-28 Battelle Memorial Institute Preparation of esters and polyols by initial oxidative cleavage of fatty acids followed by esterification reactions
US8859794B2 (en) 2005-04-26 2014-10-14 Battelle Memorial Institute Use of fatty acids as feed material in polyol process
US8247582B2 (en) 2006-02-07 2012-08-21 Battelle Memorial Institute Esters of 5-hydroxymethylfurfural and methods for their preparation
AR061984A1 (es) * 2006-07-14 2008-08-10 Consejo Superior Investigacion Aceites fraccionados liquidos y estables
UA97127C2 (uk) 2006-12-06 2012-01-10 Бандж Ойлз, Инк. Спосіб безперервної ферментативної обробки композиції, що містить ліпід, та система для його здійснення
WO2008151149A2 (en) 2007-06-01 2008-12-11 Solazyme, Inc. Production of oil in microorganisms
ES2325516B1 (es) * 2007-12-21 2010-06-17 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas Aceite de girasol con elevada termoestabilidad.
BRPI0920280B8 (pt) * 2008-10-14 2022-11-16 Corbion Biotech Inc Composição alimentícia, e, método para fabricar uma composição alimentícia
US20100303989A1 (en) 2008-10-14 2010-12-02 Solazyme, Inc. Microalgal Flour
ES2583639T3 (es) 2008-11-28 2016-09-21 Terravia Holdings, Inc. Producción de aceites específicos en microorganismos heterótrofos
EP2382292B1 (en) 2008-12-31 2018-02-21 Battelle Memorial Institute Pre-esterification of primary polyols to improve solubility in solvents used in polyol process
BRPI0923801B1 (pt) 2008-12-31 2020-10-13 Battelle Memorial Institute Métodos para produzir um éster, e para produzir amidas
BRPI1009394B1 (pt) 2009-03-13 2021-08-17 Battelle Memorial Institute Método para produzir um lubrificante, e, composição lubrificante
EP2319329A1 (en) * 2009-10-22 2011-05-11 Consejo Superior De Investigaciones Científicas (CSIC) High melting point sunflower fat for confectionary
JP5996527B2 (ja) 2010-05-28 2016-09-21 テラヴィア ホールディングス， インコーポレイテッド 用途に応じた油を含む食品成分
SG10201509035WA (en) 2010-11-03 2015-12-30 Solazyme Inc Microbial Oils With Lowered Pour Points, Dielectric Fluids Produced Therefrom, And Related Methods
BR112013028621A2 (pt) 2011-05-06 2016-11-29 Solazyme Inc "microalgas oleaginosas recombinantes, método para produzir biomassa de microalga ou um produto produzido da biomassa, e método para produzir uma composição lipídica de microalga".
DE102012101935A1 (de) 2012-03-07 2013-09-12 Sigco Warenhandelgesellschaft Mbh Sonnenblumenkerne als Haselnussersatz
US9719114B2 (en) 2012-04-18 2017-08-01 Terravia Holdings, Inc. Tailored oils
SG11201406711TA (en) 2012-04-18 2014-11-27 Solazyme Inc Tailored oils
GB201208902D0 (en) * 2012-05-21 2012-07-04 Univ Nottingham Method and use
US10098371B2 (en) 2013-01-28 2018-10-16 Solazyme Roquette Nutritionals, LLC Microalgal flour
RU2707533C2 (ru) 2013-03-27 2019-11-27 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Генетические маркеры для прогнозирования восприимчивости к терапии
US9249252B2 (en) 2013-04-26 2016-02-02 Solazyme, Inc. Low polyunsaturated fatty acid oils and uses thereof
WO2015051319A2 (en) 2013-10-04 2015-04-09 Solazyme, Inc. Tailored oils
US9394550B2 (en) 2014-03-28 2016-07-19 Terravia Holdings, Inc. Lauric ester compositions
CN106574255A (zh) 2014-07-10 2017-04-19 泰拉瑞亚控股公司 酮脂酰acp合酶基因及其用途
CN106559998B (zh) 2014-07-30 2022-01-25 豪夫迈·罗氏有限公司 预测对hdl升高剂或hdl模拟剂疗法的应答性的遗传标记
JP6725335B2 (ja) * 2016-06-20 2020-07-15 株式会社ジャパンディスプレイ 半導体装置
AU2019226375B2 (en) 2018-03-01 2024-01-25 Bunge Növényolajipari Zártköruen Muködo Részvénytársaság New high stearic oilseed stearin fat and process for its preparation
BR112021004497A2 (pt) 2018-09-14 2021-06-08 Bunge Növényolajipari Zártköruen Muködo Részvénytársaság produto de gordura em pasta, processo de preparação do mesmo e seu uso como pasta de mesa ou em panificação
WO2024127219A1 (en) * 2022-12-15 2024-06-20 I.T.P. S.R.L. Innovation & Technology Provider Procedure for preparing compositions with a high content of bioactive compounds

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4627192B1 (en) 1984-11-16 1995-10-17 Sigco Res Inc Sunflower products and methods for their production
US5147792A (en) 1986-10-09 1992-09-15 Calgene, Inc. Method of shifting the fatty acid distribution in plastids towards shorter-chained species by using thioesterase II and acyl carrier protein
AU615969B2 (en) * 1987-10-13 1991-10-17 Lubrizol Corporation, The Method of producing cis-9-octadecenoic acid compositions
DE3831516A1 (de) 1988-09-16 1990-03-22 Henkel Kgaa Verfahren zum anreichern von oelsaeure und/oder elaidinsaeure
US5557037A (en) * 1989-12-05 1996-09-17 Iowa State University Research Foundation, Inc. Soybeans having elevated contents of saturated fatty acids
US5344771A (en) 1990-04-26 1994-09-06 Calgene, Inc. Plant thiosterases
US5512482A (en) 1990-04-26 1996-04-30 Calgene, Inc. Plant thioesterases
US5298421A (en) 1990-04-26 1994-03-29 Calgene, Inc. Plant medium-chain-preferring acyl-ACP thioesterases and related methods
EP0537178B2 (en) 1990-05-25 2007-06-13 E.I. Du Pont De Nemours And Company Nucleotide sequence of soybean stearoyl-acp desaturase gene
EP0563191B2 (en) 1990-12-20 2000-01-19 E.I. Du Pont De Nemours And Company Nucleotide sequences of soybean acyl-acp thioesterase genes
GB9204583D0 (en) 1992-03-03 1992-04-15 Unilever Plc Recombinant plant enzyme
JPH0614667A (ja) 1992-03-13 1994-01-25 Lubrizol Corp:The デサチュラーゼを使用しての植物油の改変
FR2714831B1 (fr) * 1994-01-10 1996-02-02 Oreal Composition cosmétique et/ou dermatologique contenant des dérivés d'acide salicylique et procédé de solubilisation de ces dérivés.
DE69511844T2 (de) * 1994-01-31 1999-12-16 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas, Sevilla Sonnenblumenöl mit hohem stearinsäuregehalt
HUT76842A (en) 1994-08-31 1997-11-28 Du Pont Nucleotide sequences of canola and soybean palmitoyl-acp thioesterase genes and their use in the regulation of fatty acid content of the oils of soybean and canola plants
US5710366A (en) 1995-06-07 1998-01-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Helianthus annuus bearing an endogenous oil wherein the levels of palmitic acid and oleic acid are provided in an atypical combination via genetic control
CA2205657A1 (en) 1995-09-29 1997-04-03 Calgene, Inc. Plant stearoyl-acp thioesterase sequences and methods to increase stearate content in plant seed oils
US6084164A (en) 1996-03-25 2000-07-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Sunflower seeds with enhanced saturated fatty acid contents
US5885643A (en) * 1996-05-21 1999-03-23 Cargill, Incorporated High stability canola oils
US5850026A (en) 1996-07-03 1998-12-15 Cargill, Incorporated Canola oil having increased oleic acid and decreased linolenic acid content
US6365802B2 (en) * 1998-08-14 2002-04-02 Calgene Llc Methods for increasing stearate content in soybean oil
US6348610B1 (en) * 1999-06-04 2002-02-19 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas (Csic) Oil from seeds with a modified fatty acid composition
US6388113B1 (en) * 1999-06-04 2002-05-14 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas ( Csic) High oleic/high stearic sunflower oils

Also Published As

Publication number Publication date
EP1554925A1 (en) 2005-07-20
AU5402500A (en) 2000-12-28
EP1187527B1 (en) 2005-09-07
ES2245643T3 (es) 2006-01-16
ES2265945T3 (es) 2007-03-01
DE60022503T3 (de) 2010-10-14
US7435839B2 (en) 2008-10-14
DE60030280T2 (de) 2007-10-11
EP1187527B2 (en) 2010-06-09
EP1187527A1 (en) 2002-03-20
ATE336884T1 (de) 2006-09-15
DE60030280D1 (de) 2006-10-05
CA2374107A1 (en) 2000-12-14
WO2000074470A1 (en) 2000-12-14
AU783462B2 (en) 2005-10-27
ATE303718T1 (de) 2005-09-15
CA2374100A1 (en) 2000-12-14
TR200103523T2 (tr) 2002-04-22
ES2245643T5 (es) 2010-10-26
HUP0201476A2 (en) 2002-09-28
WO2000074471A1 (en) 2000-12-14
DE60022503T2 (de) 2006-06-29
AU5219600A (en) 2000-12-28
DE60022503D1 (de) 2005-10-13
AU783474B2 (en) 2005-10-27
US6956155B1 (en) 2005-10-18
HU228802B1 (en) 2013-05-28
HUP0201449A2 (en) 2002-08-28
HUP0201449A3 (en) 2012-02-28
EP1185160A1 (en) 2002-03-13
TR200103522T2 (tr) 2002-09-23
EP1185160B1 (en) 2006-08-23
US20060026714A1 (en) 2006-02-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU228892B1 (en) High oleic high stearic plants, seeds and oils
US6388113B1 (en) High oleic/high stearic sunflower oils
AU706751B2 (en) Sunflower seeds and oil having a high stearic acid content
CA2541982C (en) Method of improving oil quality in brassica
JP4800034B2 (ja) トリアシルグリセロール分子中の脂肪酸分布が改変されたヒマワリの油、種子及び植物
ES2222908T3 (es) Aceite de semillas con una composicion de acidos grasos modificada.
US7592015B2 (en) Use of high oleic high stearic oils
ES2309158T3 (es) Planta, semillas y aceite con un contenido incrementado de triacilgliceroles saturados y aceite que tiene un elevado contenido de acido estearico.
Martínez-Force et al. Use of high oleic high stearic oils
Garcés Mancheño et al. High oleic high stearic plants, seeds and oils
Ntiamoah Inheritance and characterization of EMS-induced fatty acid mutations in McGregor flax
Martinez Force High oleic/high stearic sunflower oils
MXPA06005432A (en) Sunflower oil, seeds and plants with modified fatty acid distribution in the triacylglycerol molecule