ES2245643T5 - Uso de aceites con un contenido alto de oleico y alto de estearico. - Google Patents

Uso de aceites con un contenido alto de oleico y alto de estearico. Download PDF

Info

Publication number
ES2245643T5
ES2245643T5 ES00938760T ES00938760T ES2245643T5 ES 2245643 T5 ES2245643 T5 ES 2245643T5 ES 00938760 T ES00938760 T ES 00938760T ES 00938760 T ES00938760 T ES 00938760T ES 2245643 T5 ES2245643 T5 ES 2245643T5
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
oil
weight
seeds
oleic
acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES00938760T
Other languages
English (en)
Other versions
ES2245643T3 (es
Inventor
Enrique Martinez-Force
Juan Muñoz-Ruz
Jose Maria Fernandez-Martinez
Rafael Garces
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Consejo Superior de Investigaciones Cientificas CSIC
Original Assignee
Consejo Superior de Investigaciones Cientificas CSIC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27240153&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2245643(T5) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from US09/326,501 external-priority patent/US6388113B1/en
Application filed by Consejo Superior de Investigaciones Cientificas CSIC filed Critical Consejo Superior de Investigaciones Cientificas CSIC
Application granted granted Critical
Publication of ES2245643T3 publication Critical patent/ES2245643T3/es
Publication of ES2245643T5 publication Critical patent/ES2245643T5/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G9/00—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor
    • A23G9/32—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G9/327—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds characterised by the fatty product used, e.g. fat, fatty acid, fatty alcohol, their esters, lecithin, glycerides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H5/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
    • A01H5/10—Seeds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H6/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their botanic taxonomy
    • A01H6/14—Asteraceae or Compositae, e.g. safflower, sunflower, artichoke or lettuce
    • A01H6/1464—Helianthus annuus [sunflower]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A21—BAKING; EDIBLE DOUGHS
    • A21D—TREATMENT, e.g. PRESERVATION, OF FLOUR OR DOUGH, e.g. BY ADDITION OF MATERIALS; BAKING; BAKERY PRODUCTS; PRESERVATION THEREOF
    • A21D2/00—Treatment of flour or dough by adding materials thereto before or during baking
    • A21D2/08—Treatment of flour or dough by adding materials thereto before or during baking by adding organic substances
    • A21D2/14—Organic oxygen compounds
    • A21D2/16—Fatty acid esters
    • A21D2/165—Triglycerides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D7/00—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines
    • A23D7/001—Spread compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D7/00—Edible oil or fat compositions containing an aqueous phase, e.g. margarines
    • A23D7/003—Compositions other than spreads
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS, COOKING OILS
    • A23D9/00—Other edible oils or fats, e.g. shortenings, cooking oils
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G3/00—Sweetmeats; Confectionery; Marzipan; Coated or filled products
    • A23G3/34—Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof
    • A23G3/346—Finished or semi-finished products in the form of powders, paste or liquids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G9/00—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor
    • A23G9/52—Liquid products; Solid products in the form of powders, flakes or granules for making liquid products ; Finished or semi-finished solid products, frozen granules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L23/00—Soups; Sauces; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/115—Fatty acids or derivatives thereof; Fats or oils
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/115—Fatty acids or derivatives thereof; Fats or oils
    • A23L33/12—Fatty acids or derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/92—Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof
    • A61K8/922—Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof of vegetable origin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q1/00—Make-up preparations; Body powders; Preparations for removing make-up
    • A61Q1/02—Preparations containing skin colorants, e.g. pigments
    • A61Q1/04—Preparations containing skin colorants, e.g. pigments for lips
    • A61Q1/06—Lipsticks
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G2200/00—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents
    • A23G2200/08—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents containing cocoa fat if specifically mentioned or containing products of cocoa fat or containing other fats, e.g. fatty acid, fatty alcohol, their esters, lecithin, paraffins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q5/00—Preparations for care of the hair

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)
  • Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)
  • Seeds, Soups, And Other Foods (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Lubricants (AREA)

Abstract

El uso de un aceite que tiene un contenido de ácido oleico de más de 40% en peso y un contenido de ácido esteárico de más de 12% en peso, basado en el contenido total de ácidos grasos de dicho aceite, y en el que un máximo de 10% en peso de los grupos de ácidos grasos en la posición sn-2 de las moléculas TAG que constituyen el aceite son grupos de ácidos grasos saturados, en un producto alimentario o producto cosmético.

Description

Uso de aceites con un contenido alto de oleico y alto de esteárico.
La presente invención se refiere al uso de un aceite de girasol que tiene un contenido alto de oleico y alto de esteárico en diferentes productos.
Los usos de los aceites están determinados por su composición en ácidos grasos. El componente principal de los aceites son las moléculas triacilglicerol (TAG), que normalmente constituyen más de 95% del aceite. Para hacer el TAG se unen tres ácidos grasos a una molécula de glicerol. Si estos ácidos grasos son principalmente ácidos grasos saturados ("saturados") el producto se llama grasa y es sólido a temperatura ambiente. Por otro lado, si los ácidos grasos son principalmente insaturados entonces se llama aceite y es líquido a temperatura ambiente.
Los aceites obtenidos a partir de semillas cultivadas en clima templado (girasol, soja, colza, etc.) tienen principalmente ácidos grasos insaturados, como ácidos linoleico y oleico, por lo tanto son líquidos y se usan principalmente para cocinar, aderezar ensaladas, etc. Las grasas se obtienen a partir de animales (margarina, manteca, etc.), de algunos árboles tropicales (coco, palma) o de aceites vegetales líquidos modificados químicamente (hidrogenación y transesterificación). Tienen principalmente ácidos grasos saturados (ácidos palmítico o esteárico) o modificados químicamente (ácidos grasos trans) todos con punto de fusión alto.
La tabla 1 muestra como un ejemplo la composición de ácidos grasos y otras propiedades de algunas grasas y aceites. Las grasas son necesarias para la mayoría de la industria alimentaria para hacer margarina, grasa culinaria, productos de panadería, productos de confitería, aperitivos, etc. La industria alimentaria usa la grasa con estos propósitos por sus propiedades plásticas (no se derriten, se pueden untar, o no se pegan en las manos) y estabilidad (tienen buena resistencia a la oxidación a temperaturas ambiente lo mayores).
TABLA 1
1
^{1}"otros" son palmitoleico en el caso de manteca y aceite de oliva y también ácidos grasos más cortos que 12 carbonos en mantequilla.
* depende del nivel de hidrogenación.
\vskip1.000000\baselineskip
Sin embargo, las grasas disponibles actualmente no son una buena opción porque tienen propiedades nutricionales negativas. El problema principal es que elevan la forma mala del colesterol sérico (lipoproteína de baja densidad, LDL). Esto se debe a varios hechos, algunos relacionados con el origen de la grasa y otros con su manipulación. Las grasas animales tienen la mayoría de los ácidos grasos saturados en la posición 2 de la molécula TAG. Sin embargo, la mayoría de las grasas y aceites vegetales sólo tienen cantidades menores de ácidos grasos saturados en esta posición y por lo tanto son más saludables.
Durante la digestión la molécula TAG se hidroliza por enzimas llamadas lipasas (figura 1). Los ácidos grasos en las posiciones 1 y 3 se liberan como ácidos grasos libres. Si estos ácidos grasos son saturados forman sales insolubles con calcio y magnesio, siendo la mayoría excretadas. Pero los ácidos grasos en la posición 2 forman con el glicerol una molécula de monoacilglicerol, que tiene propiedades detergentes y se absorbe fácilmente en el cuerpo. Después los ácidos grasos saturados a partir de grasas animales se absorben, aumentando así el LDL.
\global\parskip0.880000\baselineskip
Para incrementar el porcentaje de ácidos grasos saturados, se hidrogenan y/o transesterifican aceites vegetales. El proceso de hidrogenación produce ácidos grasos trans que probablemente son incluso peores que los ácidos grasos saturados, como puso de manifiesto Willett, W.C. & Ascherio, A. (1994) Trans fatty acids: Are the effects only marginal? American Journal of Public Health 84:722-724. El proceso de transesterificación cambia al azar los ácidos grasos en las tres posiciones, transformando un aceite vegetal saludable con ácidos grasos poco saturados en la posición 2, en un aceite que tiene cerca de 30% de ácidos grasos saturados. Por tanto ninguna de las dos modificaciones químicas conduce a un producto saludable.
Sin embargo, no todas las grasas son insaludables. Se ha demostrado que la mantequilla de coco, que tiene alrededor de 60% de ácidos grasos saturados, siendo el resto principalmente ácido oleico, no eleva el colesterol sérico. Esto se debe a dos razones principales. Una es que sólo 4% de los ácidos grasos saturados están en la posición 2 y la otra es que el principal ácido graso saturado es ácido esteárico. El ácido esteárico no tiene un efecto negativo sobre el colesterol sérico. Probablemente la cantidad de 35% de ácido oleico en la mantequilla de coco también aumenta sus propiedades saludables.
Es importante señalar que excepto en la mantequilla de coco, el ácido palmítico es el principal ácido graso saturado de las materias grasas. Sin embargo, el palmítico no es una grasa muy saludable.
El cultivo tradicional y la mutagénesis no han sido las únicas herramientas usadas para formar semillas que produzcan aceite con diferentes perfiles de ácidos grasos. Se han realizado incrementos de ácido esteárico en plantas oleaginosas cultivadas mediante la introducción de transgenes en el germoplasma, para alterar la vía de biosíntesis de ácidos grasos en el aceite vegetal. La biosíntesis de ácidos grasos en aceite vegetal, pero más particularmente en aceite de girasol, incluye la biosíntesis de básicamente dos saturados (palmitato, estearato) y dos insaturados (oleato y linoleato). En semillas oleaginosas, la estearoil-ACP desaturasa es la enzima que introduce el primer doble enlace en estearoil-ACP para formar oleoil-ACP. Así, esta es una enzima que ayuda a la determinación de la instauración en los ácidos grasos de longitud C18.
En la patente de EE.UU. número 5.443.974 se describió la inhibición de la enzima de canola estearoil-ACP desaturasa. Los niveles de estearato incrementaron pero los niveles de palmitato básicamente no se vieron afectados. Knutzon et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:2624-28 (1992) también informó de la inhibición de la enzima estearoil-ACP desaturasa de la planta de canola. Estos resultados mostraron un incremento en el nivel de estearato producido en la semilla de canola. La investigación también mostró que la inhibición por antisentido en semillas de canola y soja, respectivamente, mostró incremento de estearato. Cuando se introdujo en canola un plásmido que contenía un gen codificado para estearoil-ACP desaturasa, esta inhibición dio como resultado un incremento de ácido esteárico pero desafortunadamente una reducción de oleato. Sin embargo, en la soja esta inhibición de estearato dio como resultado una reducción de oleato menos drástica. Sin embargo, esta disminución más lenta de oleato puede haber sido una función de los niveles iniciales pequeños de oleato en la soja. La vía de ácidos grasos en la mayoría de las plantas de semilla oleaginosa parece oponerse a mantener en niveles elevados tanto oleico como esteárico.
La patente PCT/US97/01419 describe niveles incrementados tanto de ácido esteárico como de ácido palmítico en girasoles a través de la inhibición de la enzima estearoil-ACP desaturasa de la planta. Sin embargo, como se indicó anteriormente, el aceite palmítico no está visto como un aceite muy saludable.
La patente PTC/US96/09486 describe que los niveles en aceite de girasol de los ácidos tanto palmítico como oleico podrían incrementar, las semillas que tienen niveles incrementados de ácido palmítico de 21-23% y de ácido oleico de 61%. El aceite de girasol es líquido a temperatura ambiente. Pero se presume que el nivel incrementado de ácido graso palmítico permite que el aceite se use en grasa culinaria y en margarina con un nivel de hidrogenación relativamente bajo, que conduce a un nivel de ácidos grasos trans relativamente bajo en el producto que resulta. Sin embargo, se puede cuestionar el valor comercial por el alto nivel de ácido palmítico.
Así hay una necesidad de un aceite de girasol que sea tanto saludable como útil con propósitos industriales. Además, es deseable tener un aceite de girasol que tenga un equilibrio de saturados buenos e insaturados buenos, es decir, que sea rico en insaturados pero tenga suficientes saturados para usarse para margarinas o fase sólida sin niveles altos de hidrogenación, sin conducir, así, a ácidos grasos trans en el producto que resulta. Básicamente, hay una necesidad de una planta de girasol que pueda producir semillas que contengan aceite que sea rico en ácido oleico y en ácido esteárico con niveles reducidos de linoleico.
Por lo tanto el objetivo de la presente invención es proporcionar un aceite de girasol con contenidos altos de ácido esteárico (como ácido graso saturado) y contenidos altos de ácido oleico (como ácido graso insaturado) que reducirá los problemas con la grasa para ser usada en diferentes productos, descritos anteriormente. En este aceite el ácido esteárico debería estar preferentemente en las posiciones 1 y 3 de TAG.
La presente invención se basa en las siguientes consideraciones. La biosíntesis de ácido graso de la semilla tiene lugar dentro del plastidio (figura 2). Una sucesión de reacciones cíclicas catalizadas por el complejo enzimático FAS I produce el palmitoil-ACP que tiene 16 carbonos. Un segundo complejo enzimático llamado FAS II elonga el palmitoil-ACP a estearoil-ACP (18 carbonos), que después es modificado por la estearato desaturasa para producir oleoil-ACP. Estos son los tres ácidos grasos principales sintetizados por el plastidio, que son separados del ACP por la acción de la enzima tioesterasa y después se exportan fuera del plastidio. Después en el citoplasma, el ácido oleico se puede desaturar para formar los ácidos linoleico y linolénico.
\global\parskip1.000000\baselineskip
El TAG (reserva de aceite) se produce en el citoplasma usando la reserva de ácidos grasos en el citoplasma. Esta reserva de ácidos grasos consiste en los ácidos grasos exportados a partir del plastidio y el ácido linoleico formado en el citoplasma por desaturación. Así, la composición de ácidos grasos de TAG está determinada por los ácidos grasos exportados fuera del plastidio más el ácido linoleico producido en el citoplasma.
Después se consideró que se podía seleccionar una nueva planta que fuera rica en ácidos esteárico y oleico si se combina una actividad estearato desaturasa reducida (que conduce a una disminución de la cantidad de oleoil-ACP formado y por lo tanto a un incremento de la estearoil-ACP) con una actividad tioesterasa buena sobre estearoil-ACP (que conduce a que el ácido esteárico sea transportado fuera del plastidio al citoplasma). Esta planta producirá una acumulación de estearoil-ACP dentro del plastidio y la actividad buena de la tioesterasa sobre estearoil-ACP debería exportarlo fuera del plastidio, teniendo ahí un contenido alto de ácido esteárico disponible para la biosíntesis de TAG.
En el citoplasma, fuera del plastidio, es necesario el carácter rico en oleico para mantener el contenido de ácido linoleico bajo. En líneas ricas en oleico, la vía de transformación no funciona adecuadamente, por lo tanto no hay transformación de ácido oleico en ácido linoleico.
Así, la presente invención está basada en la conclusión de que mediante selección de, por un lado, una línea parental que tiene un contenido alto de ácido esteárico (HS), y por otro lado, una segunda línea parental que es rica en oleico y tiene alta actividad tioesterasa sobre estearoil-ACP (HOHT), se pueden hacer cruzamientos que dan como resultado semillas que tienen una combinación de las propiedades rica en esteárico y rica en oleico (HSHO). Además, sorprendentemente se encontró que en dicho aceite un máximo de 10% en peso de los grupos de ácidos grasos en la posición sn-2 de las moléculas de TAG son grupos de ácidos grasos saturados.
Por lo tanto, la presente invención se refiere al uso de un aceite de girasol que comprende un contenido de ácido oleico de más de 40% en peso y un contenido de ácido esteárico de más de 12% en peso, basado en el contenido total de ácidos grasos de dicho aceite, y en el que un máximo de 10% en peso de los grupos de ácidos grasos en la posición sn-2 de las moléculas de TAG que constituyen el aceite son grupos de ácido grasos saturados, en productos alimentarios o cosméticos. Preferentemente, los grupos de ácidos grasos saturados son grupos de ácido esteárico. Es preferente que el aceite tenga en la posición sn-2 de las moléculas TAG un máximo de 8%, más preferentemente un máximo de 5% en peso, de grupos de ácidos grasos saturados, en particular grupos de ácido esteárico.
En lo que respecta a los otros ácidos grasos, se prefiere que el contenido de ácido oleico sea de 55 a 75% en peso, el contenido de ácido esteárico sea de 15 a 50% en peso, en particular 20 a 40% en peso, y el contenido de ácido linoleico sea menor que 20% en peso. Preferentemente el nivel total de ácidos grasos saturados es al menos 20% en peso.
La selección de los parentales se puede lograr como sigue.
Las líneas con contenido alto de ácido esteárico son líneas que tienen un contenido de ácido esteárico de más de 12%, preferentemente más de 20%. Un ejemplo de tal línea parental rica en esteárico (HS), que se seleccionó después de mutagénesis y tiene un contenido de ácido esteárico de 26% en peso, está disponible como "CAS-3" (ATCC depósito número 75.968, depositada el 14 de diciembre, 1994). Otro ejemplo es "CAS-4", que tiene un contenido de ácido esteárico de 16,1% en peso (ATCC depósito número 75.969, depositada el 14 de diciembre, 1994). Analizando la composición de ácidos grasos del aceite que proviene de semillas de otras líneas candidatas, el experto en la técnica será capaz de seleccionar otras líneas parentales apropiadas.
Se encontró que algunas de las variedades ricas en oleico usuales no podían usarse con el propósito de la invención porque se encontró que tenían muy baja actividad tioesterasa sobre la estearoil-ACP. Para solucionar esto, midiendo la actividad tioesterasa, se pueden seleccionar líneas con buena actividad sobre estearoil-ACP a partir de colecciones de líneas ricas en oleico disponibles.
En resumen, primero se analiza la composición de ácidos grasos del aceite de varias líneas que prometen. Una línea parental HOHT apropiada tiene más de 7-8% de ácido esteárico y o bien menos de 5% de ácido linoleico o más de 75% de ácido oleico. Posteriormente, las líneas seleccionadas deben crecer y autopolinizarse. La actividad tioesterasa total se mide en semillas 15 días después de la floración (15DAF) tanto sobre oleoil-ACP como estearoil-ACP. En las líneas adecuadas, la actividad sobre estearoil-ACP debe ser más de 10% de la actividad sobre oleoil-ACP. La proporción entre ambas actividades determina si la línea es adecuada como una línea parental o no.
La tabla 2 ilustra la composición de ácidos grasos y la actividad tioesterasa de dos líneas de girasol ricas en oleico.
TABLA 2 Contenido de ácido esteárico y Vmax tioesterasa sobre la estearoil-ACP en semillas de dos líneas de girasol ricas en oleico 15 días después de la floración
2
La línea HOHT es una línea rica en oleico con actividad tioesterasa sobre estearoil-ACP (HOHT) de más de dos veces la Vmax tioesterasa sobre estearoil-ACP que una línea rica en oleico (HOLT) usual. La figura 3 ilustra la actividad relativa de las enzimas sobre la estearoil-ACP estandarizada con respecto a la actividad sobre oleoil-ACP. Como consecuencia, esta línea tiene más ácido esteárico 15 días después de la floración (tabla 2) y también en el aceite obtenido a partir de la semilla madura (tabla 3).
TABLA 3 Composición de ácidos grasos (%) de semillas de dos líneas de girasol ricas en oleico
3
Esta línea parental HOHT se depositó el 7 de septiembre, 1999 en American Type Culture Collection (10.801 University Boulevard, Manassas, Va 20110-2209) y se le asignó el número PTA-628.
Se han cruzado líneas de ambos tipos (HOHT y HOLT) con la línea CAS-3 rica en esteárico. En las figuras 4 (para HOHT) y 5 (para HOLT), se muestra la segregación en F2 para ambos caracteres (contenido alto de ácido esteárico y contenido alto de ácido oleico). Las semillas con los contenidos más altos de ácidos esteárico y oleico están en un círculo. De las figuras se deduce que la línea HOHT con alta actividad tioesterasa sobre estearoil-ACP tiene semillas ricas el oleico y ricas en esteárico y la línea sin alta actividad tioesterasa no tiene semillas de este tipo. La tabla 4 muestra la composición de ácidos grasos de estas líneas.
TABLA 4 Composición de ácidos grasos de líneas seleccionadas ricas el oleico y esteárico, con alta y baja actividad tioesterasa sobre estearoil-ACP, después del cruzamiento con la línea CAS-3 HS
4
Las líneas F2 seleccionadas se autopolinizan durante 5 ó 6 generaciones en condiciones aisladas para evitar contaminación. Se seleccionan las generaciones que resultan, basándose en el contenido alto de ácido oleico y esteárico. Se puede analizar la actividad tioesterasa para ayudar al proceso de selección. Asimismo, se puede emplear un cultivo asistido por marcador para seguir la traza de cualquiera o todos de los tres caracteres para hacer más rápido el proceso de selección. Se pueden emplear varios marcadores tales como microsatelite SSR, ASO, RFLP y similares. El uso de marcadores no es necesario, ya que se conocen pruebas estándar para la determinación de oleico, esteárico y actividad tioesterasa. Sin embargo, una vez identificados los marcadores hacen el seguimiento del carácter más fácil y antes en la vida de la planta.
Las plantas puras cultivadas producen un aceite que tiene una composición de ácidos grasos similar a las semillas F2 seleccionadas con un bajo contenido de ácidos grasos saturados en la posición 2 de la molécula TAG (tabla 5).
TABLA 5 Composición de ácidos grasos de aceite, TAG y posiciones sn de plantas puras cultivadas seleccionadas HSHO. N.d.= no detectado
5
Las plantas y semillas que producen el aceite para usar según la invención se pueden obtener mediante un método que comprende:
a) proporcionar semillas que contienen un aceite que tiene un contenido de ácido esteárico de al menos 12% en peso, basado en el contenido total de ácidos grasos del aceite;
b) proporcionar semillas que contienen un aceite que tiene un contenido de ácido oleico de al menos 40% en peso, basado en el contenido total de ácidos grasos del aceite, y que tiene una actividad tioesterasa sobre estearoil-ACP que es al menos 10% de la actividad tioesterasa sobre oleoil-ACP;
c) cruzar plantas producidas a partir de las semillas proporcionadas en la etapa (a) y (b);
d) cosechar la semilla F1 progenie.
\vskip1.000000\baselineskip
Preferentemente, el método además comprende las etapas:
e) plantar las semillas F1 progenie para producir plantas;
f) autopolinizar las plantas así producidas para producir semilla F2;
g) realizar pruebas a la semilla de presencia de un contenido de ácido esteárico en el aceite de al menos 12% en peso y un contenido de ácido oleico de al menos 40% en peso y una actividad tioesterasa sobre estearoil-ACP que es al menos 10% de la actividad tioesterasa sobre oleoil-ACP;
h) plantar las semillas que tienen los niveles deseados de contenido de ácido esteárico, contenido de ácido oleico y actividad tioesterasa para producir plantas;
i) autopolinizar las plantas así producidas para producir semilla F3; y
j) opcionalmente repetir las etapas g), h) e i) hasta que se fijen los niveles deseados de contenido de ácido esteárico, contenido de ácido oleico y actividad tioesterasa.
\vskip1.000000\baselineskip
Preferentemente, el contenido de ácido esteárico es al menos 15% en peso, preferentemente al menos 20% en peso.
Un aceite de girasol, para usar según la invención y que tiene un contenido de ácido oleico de más de 40% en peso y un contenido de ácido esteárico de más de 12% en peso, basado en el contenido total de ácidos grasos del aceite, se puede obtener por extracción de aceite a partir de semillas. El método preferentemente incluye un proceso de extracción que no implica una modificación importante del aceite (de girasol).
Además, en el proceso de extracción del aceite a partir de semillas preferentemente no hay modificación química o física importante ni tiene lugar redisposición enzimática y preferentemente no hay endurecimiento importante del aceite.
El uso de la invención incluye el uso del aceite en productos alimentarios. Los productos alimentarios que son particularmente útiles para este tipo de aceite incluyen productos untables, margarinas, grasa culinarias, salsas, helados, sopas, productos de panadería, productos de confitería, y similares. En estos productos alimentarios el nivel de aceite (de girasol) es preferentemente de 3 a 100% en peso, en relación con el peso total de aceite en el producto. Cuando se usa, según la presente invención, para formar un producto untable, el aceite (de girasol) preferentemente se usa como una fase sólida a niveles de 5 a 20% en peso.
El uso del aceite en productos alimentarios también puede englobar el uso en semillas de girasol per se para consumo humano o animal.
El uso de la presente invención también engloba el uso del aceite en productos cosméticos. Estos productos cosméticos preferentemente pueden contener niveles de aceite (de girasol) de 3 a 100% en peso. Algunos ejemplos de estos productos cosméticos incluirían cremas, lociones, barras de labios, pastillas de jabón y aceites para piel o cabello.
Un proceso para seleccionar plantas de Helianthus annuus, capaces de producir semillas que tienen el nivel de aceite deseado para usar según la invención comprende las etapas de a) seleccionar un número de plantas de Helianthus annuus, recolectar las semillas, cuyo aceite tiene un contenido de ácido esteárico de al menos 12% en peso y preferentemente 18% en peso, basado en el contenido total de ácidos grasos; b) seleccionar un número de plantas de Helianthus annuus, recolectar las semillas, que expresan un contenido de ácido oleico de al menos 40% en peso, basado en el aceite presente en la semilla, y una actividad tioesterasa sobre estearoil-ACP que es al menos 10% de la actividad tioesterasa sobre oleoil-ACP; c) cruzar las plantas producidas a partir de las semillas de (a) y (b); y, cosechar la semilla F1 progenie.
Etapas adicionales incluyen las etapas de: (d) plantar las semillas o rescate de embriones de los embriones de la progenie F1 obtenida para formar semillas F2 segregantes; (e) seleccionar a partir de las semillas F2 que desarrollan plantas, esas plantas que producen semillas que tienen un contenido de ácido oleico de más de 40% en peso y un contenido de ácido esteárico de más de 12% en peso, basado en el contenido total de ácidos grasos del aceite, opcionalmente autopolinizar las plantas seleccionadas para formar cultivos endogámicos puros.
Además, el aceite para usar según la invención se puede obtener a partir de semilla F1 híbrida. Las etapas de un método para producir estas semillas son a) plantar semillas de dos endogámicos que tienen contenido alto de ácido oleico de al menos 40% en peso y actividad tioesterasa sobre estearoil-ACP que es al menos 10% de la actividad tioesterasa sobre oleoil-ACP, uno de los cuales puede ser macho estéril, b) cruzar los dos endogámicos, y c) cosechar la semilla F1 capaz de producir la semilla F2 con contenido de ácido oleico de al menos 40% en peso y contenido de ácido esteárico de al menos un 12% en peso.
La presente invención engloba el uso de aceite vegetal con una nueva y única composición de ácidos grasos producido en girasol. Esta planta se usó para hacer esta invención. Cuando se usa mutación para hacer uno o los dos parentales, el cultivo debería ser susceptible de inducir mutagénicamente cambios de aceite. El girasol satisface todos estos requerimientos. Este cultivo es actualmente el cultivo más útil para la producción de esta nueva y única composición de ácidos grasos en el aceite de sus semillas.
En esta solicitud se hace referencia a las siguientes figuras:
Figura 1: hidrólisis de triacilgliceroles mediante lipasa.
Figura 2: plastidio que muestra la biosíntesis de ácidos grasos en semillas oleaginosas.
Figura 3: elevada actividad tioesterasa mostrada como la actividad relativa de la tioesterasa sobre estearoil-ACP y oleoil-ACP de HOHT y HOLT.
Figura 4: la segregación de F2 para los ácidos esteárico y oleico del cruce entre la línea rica en oleico con alta actividad tioesterasa sobre estearoil-ACP (HOHT) y una línea rica en ácido esteárico (CAS-3).
Figura 5: la segregación de F2 para los ácidos esteárico y oleico del cruce entre la línea rica en oleico con baja actividad tioesterasa sobre estearoil-ACP (HOLT) y una línea rica en ácido esteárico (CAS-3).
Definiciones 
\global\parskip0.900000\baselineskip
"GIRASOL" significa Helianthus annuus.
"PLANTA" incluye la planta completa y todas las partes de planta y célula incluyendo polen, grano, aceite, embrión, tallo, cabeza, raíces, células, meristemos, óvulo, anteras, microesporas, embriones, ADN, ARN, pétalos, semillas y similares y protoplastos, callos o suspensiones de cualquiera de los anteriores.
"15DAF" significa 15 días después de la floración.
"CONTENIDO TOTAL DE ÁCIDOS GRASOS" del aceite de girasol se refiere a la suma de C16:0, 18:0, 18:1, 18:2, 20:0, 22:0 y las trazas de otros ácidos grasos que se determinan simultáneamente en el aceite a partir de la semilla.
"HOLT" significa que tiene niveles de altos a medio altos (40%-90%) de ácido oleico en el aceite cuando se compara con la semilla de girasol salvaje normal (niveles de ácido oleico de 17%-20%) en el que hay "NIVELES BAJOS DE ACTIVIDAD TIOESTERASA". Una "LÍNEA HOLT" es una línea, en particular una línea de girasol, que tiene el carácter HOLT.
"HOHT" significa que tiene niveles de altos a medio altos (40%-90%) de ácido oleico en el aceite cuando se compara con la semilla de girasol salvaje normal (niveles de ácido oleico de 17%-20%) en el que hay "NIVELES ALTOS DE ACTIVIDAD TIOESTERASA". Una "LÍNEA HOHT" es una línea, en particular una línea de girasol, que tiene el carácter HOHT.
"NIVELES ALTOS DE ACTIVIDAD TIOESTERASA" significa niveles (a 15DAF) de actividad tioesterasa sobre estearoil-ACP que son al menos 10% de la actividad tioesterasa sobre oleoil-ACP. Como consecuencia, "NIVELES BAJOS DE ACTIVIDAD TIOESTERASA" significa niveles que están por debajo de los "NIVELES ALTOS DE ACTIVIDAD TIOESTERASA".
"HS" significa que tiene niveles de ácido esteárico en el aceite de al menos 12% en peso y preferentemente al menos 15% en peso o más preferentemente 18% en peso o incluso al menos 20% en peso, basado en el contenido total de ácidos grasos. "LÍNEA RICA EN ESTEÁRICO" o "LÍNEA HS" significa una línea, en particular una línea de girasol, que tiene el carácter HS.
"HOHS" significa que tiene niveles de ácido oleico por encima de 40% y al menos 12% en peso de ácido esteárico en el aceite y preferentemente que tiene niveles de al menos 15% en peso, más preferentemente al menos 18% en peso o incluso al menos 20% en peso de ácido esteárico en el aceite. Una "LÍNEA HOHS" significa una línea que tiene el carácter HOHS.
Ejemplos Introducción Preparación del parental HS
Para obtener el parental HS se puede usar un método para preparar semillas de girasol que tienen un contenido incrementado de ácido esteárico y ácido oleico comparado con semillas de tipo salvaje. Este método incluye la etapa de tratar semillas parentales con un agente mutágeno durante un periodo de tiempo y en una concentración suficientes para inducir una o más mutaciones en el carácter genético implicado en la biosíntesis de ácido esteárico o ácido oleico. Esto da como resultado una producción incrementada de ácido esteárico y/o un nivel incrementado de ácido oleico. Estos agentes mutágenos incluyen agentes tales como ázida sódica o un agente alquilante, como etil metano sulfonato, por supuesto que también se puede usar cualquier otro agente mutágeno que tenga los mismo o similares efectos. Las semillas tratadas contendrán cambios genéticos heredables. Después estas semillas mutadas germinan y de ahí se desarrollan plantas progenie. Para incrementar los caracteres en las líneas la progenie se puede cruzar o autopolinizar. Las semillas progenie se recolectan y analizan.
En el ejemplo 1 se usaron ázida sódica y etil metano sulfonato como agentes mutágenos. Se han obtenido varias líneas de girasol con un contenido de ácido esteárico entre 12 y 45%. En todos estos casos la línea parental original de girasol usada para la producción de líneas ricas en ácido esteárico fue RDF-1-532 (Colección de Girasol del Instituto de Agricultura Sostenible, CSIC, Córdoba, España) que tiene de 4 a 7% de contenido de ácido esteárico en el aceite de semilla.
Selección del parental HOHT
En principio es suficiente examinar líneas oleicas para encontrar un fenotipo HOHT y usar esta línea para cada transformación o para cruzamiento con una línea rica en esteárico para desarrollar una línea HOHS. Una línea adecuada es al menos la línea parental HOHT que se depositó el 7 de septiembre, 1999 en American Type Culture Collection (10.801 University Boulevard, Manassas, Va 20110-2209) y se le asignó el número PTA-628.
Producción de la línea HOHS
Se pueden cruzar semillas que tienen el carácter HOHT o el carácter esteárico entre ellas para formar la línea HOHS. Opcionalmente puede haber ciclos adicionales de germinación, cultivo, y autopolinización para fijar la homocigocidad de los caracteres en las líneas y cruzar y recolectar las semillas.
Materiales y métodos Condiciones de crecimiento de las plantas
Se usaron las semillas de girasol (Helianthus annuus L.) de líneas ricas en oleico con contenido de ácidos grasos en la semilla alterado, para realizar pruebas de las actividades tioesterasa sobre estearoil-ACP. Las plantas se cultivaron en cámaras de crecimiento a temperatura 25/15ºC (día/noche), fotoperiodo de 16 horas y densidad de flujo fotónico de 300 micromol m^{-2}s^{-1}. Las semillas para el análisis se cosecharon 15 días después de la floración y se mantuvieron a -20ºC.
Reactivos radiactivos y preparación de acil-ACP
Se obtuvieron ácido oleico [1-^{14}C] con radiactividad específica de 2,1 GBq/mmol y ácido esteárico [9, 10 (n)-^{3}H] con radiactividad específica de 1,9 GBq/mmol, de American Radiolabeled Chemicals Inc. (St. Louis, Mo., EEUU). Para preparar la sal sódica de ácido graso, se transfirió un volumen apropiado de disolución de ácido graso a un tubo de vidrio, se eliminó el disolvente bajo una corriente de nitrógeno, y el residuo se disolvió en 10% Triton X-100, 0,6 mM NaOH. Para asegurar la homogeneidad esta disolución se calentó a 55ºC durante 1 hora.
Se prepararon acil-ACP usando una modificación del procedimiento de síntesis enzimática de Rock C.O. et al (1981) Methods Enzymology 72:397-403. Los ensayos contenían 0,1 M Tris-HCl (pH 8,0), 0,4 M LiCl, 5 mM ATP, 10 mM MgCl_{2}, 2 mM DTT, 130 microM sal sódica de ácido graso, 0,27 mM ACP-SH y 1,8 mU de acil-ACP sintetasa (los dos últimos componentes se adquirieron de Sigma-Aldrich Química S.A., Madrid, España), en un volumen final de 110 microlitros. Las reacciones se incubaron a 37ºC durante 3 horas. Después de este tiempo se acidificó el pH a 6,0 añadiendo 1 microlitro de 3,6 M HCl y de la mezcla se eliminaron los ácidos grasos libres usando una modificación del método descrito por Mancha M. et al.((1975) Anal. Biochem. 68:600-608), cuyo método consiste en añadir un volumen igual de isopropanol y lavar tres veces con hexano saturado en agua/isopropanol (1:1; v:v).
Preparación de extractos crudos para ensayos de enzimas y determinación de proteína
Se pelaron y molieron semillas congeladas en un extracto tampón que contenía 20 mM Tris-HCl (pH 8,5), 2 mM DTT y 5% (v/v) de glicerol (Dörmann P. et al. (1994) Biochim. Biophys. Acta 1212.134-136) a 1 g de tejidos/10 ml de tampón. Se midieron las concentraciones de proteína usando un equipo de ensayo de proteínas (Bio-Rad) según las recomendaciones del fabricante, con BSA como patrón.
Ensayos de enzimas
Se realizaron ensayos de actividad acil-ACP tioesterasa en un volumen final de 170 microlitros usando 130 microlitros de extracto crudo. Los ensayos testigo no tenían extracto crudo. Las mezclas de las reacciones contenían 20 mM Tris-HCl (pH 8,5), 5% de glicerol y 2 mM de ditiotreitol (DTT) y diferentes concentraciones de substratos (estearoil-ACP y oleoil-ACP). Las incubaciones se llevaron a cabo durante 20 minutos a 25ºC. Las reacciones se pararon por la adición de 170 microlitros de ácido acético 1M en isopropanol que contenía 1 mM de ácido oleico. Después las mezclas se lavaron tres veces con hexano saturado en agua/isopropanol (1:1, v/v).
Se determinó la actividad acil-ACP tioesterasa contando la radiactividad de la fase acuosa, que contenía los substratos no hidrolizados. Después se añadieron 3 ml de disolvente de centelleo (adquirido de National Diagnostics, Hessle, Inglaterra) y se midió la radiactividad usando un contador de centelleo (Rackbeta II; LKB, Suecia). Se ajustaron datos a partir de ensayos de acil-ACP tioesterasa a la ecuación de Michaelis-Menten por análisis de regresión no lineal por mínimos cuadrados, usando Microcal Origin 4.1, y correlativo a P<0,05, como se determina por el ensayo de Student pareado. De estas curvas se obtienen Vmax y Km.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 1 Preparación de una línea HS 1. Mutación con EMS
Se mutagenizaron semillas con una disolución de 70 mM de etil metano sulfonato (EMS) en agua. El tratamiento se realizó a temperatura ambiente durante 2 horas mientras se agitaba (60 rpm). Después de la mutagénesis se desechó la disolución de EMS y las semillas se lavaron durante 16 horas bajo agua corriente.
\global\parskip1.000000\baselineskip
Las semilla tratadas germinaron en el campo y las plantas se autopolinizaron. Las semillas recolectadas a partir de estas plantas se usaron para seleccionar nuevas líneas de girasol con modificaciones en la composición de ácidos grasos. Usando el método de Garcés, R. y Mancha M. ((1993) Anal. Biochem. 211, 139-143) se determinó la composición de ácidos grasos de la semilla por cromatografía de gas líquido, después de transformar los ácidos grasos en sus correspondientes ésteres metílicos.
Se seleccionó una primera planta con 9 a 17% de contenido de ácido esteárico en el aceite. Se cultivó la progenie durante cinco generaciones en las que el contenido de ácido esteárico incrementó y el nuevo carácter genético se fijó establemente en el material genético de la semilla. Esta línea se llama CAS-3. Los contenidos mínimo y máximo de ácido esteárico de la línea fueron 19 y 35%, respectivamente. El contenido de ácido esteárico del aceite extraído a partir de semillas de esta línea celular se puede encontrar entre 19 y 35%.
2. Mutación con ázida sódica
Se mutagenizaron semillas de girasol con ázida sódica, a una concentración de 2 mM en agua. El tratamiento se realizó a temperatura ambiente durante 2 horas mientras se agitaba (60 rpm). Después se desechó la disolución de mutagénesis y las semillas se lavaron durante 16 horas con agua corriente.
Las semillas se plantaron en el campo y las plantas se autopolinizaron. Se recolectaron semillas de estas plantas, y se determinó la composición de ácidos grasos por cromatografía de gas líquido, después de transformar los ácidos grasos en sus correspondientes ésteres metílicos usando el método descrito en el ejemplo 1.
Se seleccionaron semillas a partir de una planta que tenía alrededor de 10% de ácido esteárico en el aceite y se cultivaron durante cinco generaciones. Durante este procedimiento el contenido de ácido esteárico incrementó y se fijó el nuevo carácter genético. Esta línea se llama CAS-4. Se analizó una muestra seleccionada de esta línea dando como resultado un contenido de ácido esteárico de 16,1%. Los valores mínimo y máximo fueron 12 y 19%, respectivamente.
TABLA 6
7
CAS-3 y CAS-4 están en depósito en American Type Culture Collection, y tienen número ATCC 75.968 y 75.969, respectivamente.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 2 Producción de una línea HSHO 1. General
Se produjeron plantas de girasol a partir de semillas de girasol de la línea HOHT, semillas que están en depósito en ATCC (PTA-628). También se produjeron plantas de girasol a partir de semillas de las girasol CAS-3. Las líneas se cruzaron. A las plantas se las hizo polinización artificial para asegurar que tuviera lugar una adecuada producción de semilla. La semilla F1 se produjo en la línea HOHT, o viceversa, y se cosechó. Se seleccionaron las semillas F2 con más de 20% de estearato y más de 40% de oleato. Aunque esto produce el aceite para usar según la presente invención el nivel de producción está limitado.
Por lo tanto son deseables líneas endogámicas fijas que den semillas que manifiesten estos perfiles de aceites. Después estas líneas endogámicas fijas homocigóticas HSHO se pueden cruzar para formar semilla híbrida, que producirá semilla F2 que manifieste los caracteres de aceite deseados para usar según la presente invención.
Para este fin se plantaron las semillas F1 y las plantas producidas se autopolinizaron en condiciones aisladas y se produjo semilla F2. Se realizaron pruebas a la semilla F2 de los tres caracteres, rico en esteárico, rico en oleico y niveles altos de actividad tioesterasa. La porción que queda de las semillas que manifiestan estos caracteres se empleó para producir plantas para formar semilla F3. El proceso de autopolinización y examen y selección se repitió para desarrollar la línea fija homocigótica HSHO, que tiene el siguiente perfil de ácidos grasos, C:16 5,4, C:18.0 24,8, C:18.1 58,5, C:18.2 7,2. Una vez que se fija el carácter se pueden cruzar líneas HSHO similares para formar semilla híbrida que tenga ambos caracteres.
Las plantas y semillas de girasol de las que se puede extraer el aceite para usar según la invención, se han obtenido por medio de un proceso biotecnológico. Este contenido alto de ácido esteárico es un carácter hereditable y es bastante independiente de las condiciones de crecimiento.
2. Primer cruce
Se produjo una planta de girasol a partir de una semilla de girasol de una línea HOHT que tiene un contenido de ácido esteárico de 10,7% en peso y un contenido de ácido oleico de 74,6% en peso. También se produjo una planta de girasol a partir de una semilla de girasol CAS-3. Las plantas se cruzaron. A las plantas se las hizo polinización artificial para asegurar que tuviera lugar una adecuada producción de semilla. Se produjo semilla F1 en la línea HOHT, o viceversa, y se cosechó.
Se seleccionó una semilla F1 que tenía un contenido de ácido esteárico de 9,8% en peso y un contenido de ácido oleico de 80,7% en peso. Esta semilla F1 se plantó y produjo una planta que se autopolinizó en condiciones aisladas y se produjeron semillas F2. Se realizaron pruebas a estas semillas F2 de contenidos de ácido oleico y esteárico. Se seleccionó una semilla que contenía 23,6% en peso de ácido esteárico y 65,5% en peso de ácido oleico.
Se plantó esta semilla F2 y produjo una planta que se autopolinizó en condiciones aisladas y 15 días después de la floración se recolectaron varias semillas y se analizó la actividad estearoil-ACP tioesterasa. Se seleccionaron plantas que daban más de 10% estearoil-ACP tioesterasa referido a actividad oleoil-ACP tioesterasa de la misma planta.
Las semillas maduras de las plantas seleccionadas en la etapa anterior y que tenían contenido de ácido esteárico más alto que 20% en peso y contenido de ácido oleico más alto que 40% en peso se sometieron al proceso de autopolinización, examen y selección repetidamente para desarrollar la línea rica en esteárico rica en oleico fija homocigótica que tiene el siguiente perfil de ácidos grasos en el aceite:
8
Una vez que se fija el carácter, se pueden cruzar líneas ricas en esteárico ricas en oleico similares para formar semilla híbrida que tenga los caracteres seleccionados anteriores.
Un análisis de la posición sn-2 y las posiciones sn-1, 3 de las moléculas TAG de este aceite indica las siguiente distribución de ácidos grasos (en % en peso):
\vskip1.000000\baselineskip
9
Así, la cantidad total de grupos de ácidos grasos saturados en la posición sn-2 de las moléculas TAG de este aceite es 6,7% en peso.
3. Segundo cruce
Se produjo una planta de girasol a partir de una semilla de girasol de una línea HOHT que tiene un contenido de ácido esteárico de 8,4% en peso y un contenido de ácido oleico de 78,5% en peso. También se produjo una planta de girasol a partir de una semilla de girasol CAS-3. Las plantas se cruzaron. A las plantas se las hizo polinización artificial para asegurar que tuviera lugar una adecuada producción de semilla. Se produjo semilla F1 en la línea HOHT, o viceversa, y se cosechó. Se seleccionó una semilla F1 que tenía un contenido de ácido esteárico de 7,1% en peso y un contenido de ácido oleico de 84,6% en peso. Esta semilla F1 se plantó y produjo una planta que se autopolinizó en condiciones aisladas y se produjeron semillas F2. Se realizaron pruebas a estas semillas F2 de contenidos de ácido oleico y esteárico. Se seleccionó una semilla que contenía 22,8% en peso de ácido esteárico y 64,8% en peso de ácido oleico.
Se plantó esta semilla F2 y produjo una planta que se autopolinizó en condiciones aisladas y 15 días después de la floración se recolectaron varias semillas y se analizó la actividad estearoil-ACP tioesterasa. Se seleccionaron plantas que daban más de 10% estearoil-ACP tioesterasa referido a la actividad oleoil-ACP tioesterasa de la misma planta. Las semillas maduras de las plantas seleccionadas en la etapa anterior y que tenían contenido de ácido esteárico más alto que 20% en peso y contenido de ácido oleico más alto que 40% en peso se sometieron al proceso de autopolinización, examen y selección repetidamente para desarrollar la línea rica en esteárico rica en oleico fija homocigótica que tiene el siguiente perfil de ácidos grasos en el aceite:
10
Una vez que se fija el carácter, se pueden cruzar líneas ricas en esteárico ricas en oleico similares para formar semilla híbrida que tenga los caracteres seleccionados anteriores.
Un análisis de la posición sn-2 y las posiciones sn-1, 3 de las moléculas TAG de este aceite indica las siguiente distribución de ácidos grasos (en % en peso):
11
Así, la cantidad total de grupos de ácidos grasos saturados en la posición sn-2 de las moléculas TAG de este aceite es 3,6% en peso.
\vskip1.000000\baselineskip
4. Tercer cruce
Se produjo una planta de girasol a partir de una semilla de girasol de una línea HOHT que tiene un contenido de ácido esteárico de 9,9% en peso y un contenido de ácido oleico de 81,2% en peso. También se produjo una planta de girasol a partir de semilla de girasol CAS-3. Las plantas se cruzaron. A las plantas se las hizo polinización artificial para asegurar que tuviera lugar una adecuada producción de semilla. Se produjo semilla F1 en la línea HOHT, o viceversa, y se cosechó.
Se seleccionó una semilla F1 que tenía un contenido de ácido esteárico de 8,9% en peso y un contenido de ácido oleico de 82,3% en peso. Esta semilla F1 se plantó y produjo una planta que se autopolinizó en condiciones aisladas y se produjeron semillas F2. Se realizaron pruebas a estas semillas F2 de contenidos de ácido oleico y esteárico. Se seleccionó una semilla que contenía 23,9% en peso de ácido esteárico y 64,0% en peso de ácido oleico.
Esta semilla F2 se plantó y produjo una planta que se autopolinizó en condiciones aisladas y 15 días después de la floración se recolectaron varias semillas y se analizó la actividad estearoil-ACP tioesterasa. Se seleccionaron plantas que daban más de 10% estearoil-ACP tioesterasa referido a la actividad oleoil-ACP tioesterasa de la misma planta. Las semillas maduras de las plantas seleccionadas en la etapa anterior y que tenían contenido de ácido esteárico más alto que 20% en peso y contenido de ácido oleico más alto que 40% en peso se sometieron al proceso de autopolinización, examen y selección repetidamente para desarrollar la línea rica en esteárico rica en oleico fija homocigótica que tiene el siguiente perfil de ácidos grasos en el aceite:
\vskip1.000000\baselineskip
12 
\vskip1.000000\baselineskip
Una vez que se fija el carácter, se pueden cruzar líneas ricas en esteárico ricas en oleico similares para formar semilla híbrida que tenga los caracteres seleccionados anteriores.
Un análisis de la posición sn-2 y las posiciones sn-1, 3 de las moléculas TAG de este aceite indica las siguiente distribución de ácidos grasos (en % en peso):
\vskip1.000000\baselineskip
13
130
Así, la cantidad total de grupos de ácidos grasos saturados en la posición sn-2 de las moléculas TAG de este aceite es 5,1% en peso.

Claims (4)

1. El uso de un aceite de girasol que tiene un contenido de ácido oleico de más de 40% en peso y un contenido de ácido esteárico de más de 12% en peso, basado en el contenido total de ácidos grasos de dicho aceite, y en el que un máximo de 10% en peso de los grupos de ácidos grasos en la posición sn-2 de las moléculas TAG que constituyen el aceite son grupos de ácidos grasos saturados, en un producto alimentario o producto cosmético.
2. El uso según la reivindicación 1, en el que el producto alimentario se selecciona a partir del grupo de productos untables, salsas, helados, sopas, productos de panadería y productos de confitería.
3. El uso según la reivindicación 2, en el que el producto alimentario es un producto untable en el que el aceite de girasol se usa como una fase sólida a un nivel de 5 a 20% en peso.
4. El uso según la reivindicación 1, en el que el producto cosmético se selecciona a partir del grupo de cremas, lociones, barras de labios, pastillas de jabón y aceites para piel o cabello.
ES00938760T 1999-06-04 2000-06-05 Uso de aceites con un contenido alto de oleico y alto de estearico. Expired - Lifetime ES2245643T5 (es)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US326501 1999-06-04
US09/326,501 US6388113B1 (en) 1999-06-04 1999-06-04 High oleic/high stearic sunflower oils
EP99204384 1999-12-17
EP99204384 1999-12-17
US18045500P 2000-02-04 2000-02-04
US180455P 2000-02-04

Publications (2)

Publication Number Publication Date
ES2245643T3 ES2245643T3 (es) 2006-01-16
ES2245643T5 true ES2245643T5 (es) 2010-10-26

Family

ID=27240153

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES00936860T Expired - Lifetime ES2265945T3 (es) 1999-06-04 2000-06-05 Plantas, semillas y aceites de girasol con un contenido alto de oleico y alto de estearico.
ES00938760T Expired - Lifetime ES2245643T5 (es) 1999-06-04 2000-06-05 Uso de aceites con un contenido alto de oleico y alto de estearico.

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES00936860T Expired - Lifetime ES2265945T3 (es) 1999-06-04 2000-06-05 Plantas, semillas y aceites de girasol con un contenido alto de oleico y alto de estearico.

Country Status (10)

Country Link
US (2) US6956155B1 (es)
EP (3) EP1554925A1 (es)
AT (2) ATE303718T1 (es)
AU (2) AU783462B2 (es)
CA (2) CA2374107A1 (es)
DE (2) DE60030280T2 (es)
ES (2) ES2265945T3 (es)
HU (2) HU228892B1 (es)
TR (2) TR200103523T2 (es)
WO (2) WO2000074470A1 (es)

Families Citing this family (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1290119B1 (en) * 2000-06-15 2005-10-12 Unilever N.V. Preparation of a blend of triglycerides
WO2002065829A2 (en) * 2001-02-16 2002-08-29 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas Plant, seeds and oil with increased saturated triacylglycerols content and oil having a high stearic acid content
AU2003248335B2 (en) * 2002-02-28 2006-03-02 Upfield Europe B.V. Triglyceride fat suitable for spread manufacture
EP1551230B1 (en) 2002-08-12 2011-02-16 Unilever N.V. Triglyceride fat
EP1689222B1 (en) * 2003-11-14 2010-03-03 Consejo Superior De Investigaciones Científicas Sunflower oil, seeds and plants with modified fatty acid distribution in the triacylglycerol molecule
US7294711B2 (en) 2004-09-24 2007-11-13 Monsanto Technology Llc Promoter molecules for use in plants
WO2010078493A1 (en) 2008-12-31 2010-07-08 Battelle Memorial Institute Solvent-less preparation of polyols by ozonolysis
US8247582B2 (en) 2006-02-07 2012-08-21 Battelle Memorial Institute Esters of 5-hydroxymethylfurfural and methods for their preparation
AR061984A1 (es) * 2006-07-14 2008-08-10 Consejo Superior Investigacion Aceites fraccionados liquidos y estables
UA97127C2 (uk) 2006-12-06 2012-01-10 Бандж Ойлз, Инк. Спосіб безперервної ферментативної обробки композиції, що містить ліпід, та система для його здійснення
MY154965A (en) 2007-06-01 2015-08-28 Solazyme Inc Production of oil in microorganisms
ES2325516B1 (es) * 2007-12-21 2010-06-17 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas Aceite de girasol con elevada termoestabilidad.
AU2009303354C9 (en) * 2008-10-14 2017-09-07 Corbion Biotech, Inc. Food compositions of microalgal biomass
SG171428A1 (en) 2008-11-28 2011-07-28 Solazyme Inc Manufacturing of tailored oils in recombinant heterotrophic microorganisms
CA2748614C (en) 2008-12-31 2016-02-23 Battelle Memorial Institute Pre-esterification of primary polyols to improve solubility in solvents used in polyol process
CN102333755B (zh) 2008-12-31 2016-02-24 巴特尔纪念研究院 通过初始的脂肪酸氧化分解后的酯化反应制备酯和多元醇
CA2748555C (en) 2008-12-31 2017-04-18 Battelle Memorial Institute Use of fatty acids as feed material in polyol process
EP2799528A1 (en) 2009-03-13 2014-11-05 Battelle Memorial Institute Modified vegetable oil lubricants
EP2319329A1 (en) * 2009-10-22 2011-05-11 Consejo Superior De Investigaciones Científicas (CSIC) High melting point sunflower fat for confectionary
AU2011257983B2 (en) 2010-05-28 2016-02-11 Corbion Biotech, Inc. Food compositions comprising tailored oils
ES2909143T3 (es) 2010-11-03 2022-05-05 Corbion Biotech Inc Microbios de Chlorella o Prototheca modificados genéticamente y aceite producido a partir de estos
MX339607B (es) 2011-05-06 2016-05-31 Solazyme Inc Microorganismos geneticamente modificados que metabolizan xilosa.
DE102012101935A1 (de) 2012-03-07 2013-09-12 Sigco Warenhandelgesellschaft Mbh Sonnenblumenkerne als Haselnussersatz
SG11201406711TA (en) 2012-04-18 2014-11-27 Solazyme Inc Tailored oils
US9719114B2 (en) 2012-04-18 2017-08-01 Terravia Holdings, Inc. Tailored oils
GB201208902D0 (en) * 2012-05-21 2012-07-04 Univ Nottingham Method and use
US10098371B2 (en) 2013-01-28 2018-10-16 Solazyme Roquette Nutritionals, LLC Microalgal flour
JP6449235B2 (ja) 2013-03-27 2019-01-09 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 治療に対する応答性を予測するための遺伝マーカー
EP2993993A2 (en) 2013-04-26 2016-03-16 Solazyme, Inc. Low polyunsaturated fatty acid oils and uses thereof
US10053715B2 (en) 2013-10-04 2018-08-21 Corbion Biotech, Inc. Tailored oils
US9394550B2 (en) 2014-03-28 2016-07-19 Terravia Holdings, Inc. Lauric ester compositions
ES2764273T3 (es) 2014-07-10 2020-06-02 Corbion Biotech Inc Nuevos genes de cetoacil ACP sintasa y uso de los mismos
PT3174995T (pt) 2014-07-30 2020-10-15 Hoffmann La Roche Marcadores genéticos para prever o tipo de resposta ao tratamento com um fármaco de aumento do hdl ou mimetizador do hdl
JP6725335B2 (ja) * 2016-06-20 2020-07-15 株式会社ジャパンディスプレイ 半導体装置
AU2019226375B2 (en) 2018-03-01 2024-01-25 Bunge Növényolajipari Zártköruen Muködo Részvénytársaság New high stearic oilseed stearin fat and process for its preparation
CA3112013A1 (en) * 2018-09-14 2020-03-19 Bunge Novenyolajipari Zartkoruen Mukodo Reszvenytarsasag Fat spread product, process for preparing the same, and its use as table spread or in bakery

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4627192B1 (en) 1984-11-16 1995-10-17 Sigco Res Inc Sunflower products and methods for their production
US5147792A (en) 1986-10-09 1992-09-15 Calgene, Inc. Method of shifting the fatty acid distribution in plastids towards shorter-chained species by using thioesterase II and acyl carrier protein
ATE131206T1 (de) 1987-10-13 1995-12-15 Lubrizol Corp Verfahren zur herstellung von hochreiner ölsäure durch hydrolyse von sonnenblumenkernöl.
DE3831516A1 (de) 1988-09-16 1990-03-22 Henkel Kgaa Verfahren zum anreichern von oelsaeure und/oder elaidinsaeure
US5557037A (en) * 1989-12-05 1996-09-17 Iowa State University Research Foundation, Inc. Soybeans having elevated contents of saturated fatty acids
US5512482A (en) 1990-04-26 1996-04-30 Calgene, Inc. Plant thioesterases
US5344771A (en) 1990-04-26 1994-09-06 Calgene, Inc. Plant thiosterases
US5298421A (en) 1990-04-26 1994-03-29 Calgene, Inc. Plant medium-chain-preferring acyl-ACP thioesterases and related methods
EP0537178B2 (en) 1990-05-25 2007-06-13 E.I. Du Pont De Nemours And Company Nucleotide sequence of soybean stearoyl-acp desaturase gene
DK0563191T4 (da) 1990-12-20 2000-07-17 Du Pont Nucleotidsekvenser af sojabønne-acyl-ACP-thioesterase-gener
GB9204583D0 (en) 1992-03-03 1992-04-15 Unilever Plc Recombinant plant enzyme
DK0561569T3 (da) 1992-03-13 2003-10-06 Agrigenetics Inc Modifikation af vegetabilske olier ved anvendelse af desaturase
FR2714831B1 (fr) * 1994-01-10 1996-02-02 Oreal Composition cosmétique et/ou dermatologique contenant des dérivés d'acide salicylique et procédé de solubilisation de ces dérivés.
BR9506659B1 (pt) * 1994-01-31 2014-09-30 Consejo Superior Investigacion Óleo de girassol, e produto alimentício.
CA2198222C (en) 1994-08-31 2011-10-25 William Dean Hitz Nucleotide sequences of canola and soybean palmitoyl-acp thioesterase genes and their use in the regulation of fatty acid content of the oils of soybean and canola plants
US5710366A (en) 1995-06-07 1998-01-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Helianthus annuus bearing an endogenous oil wherein the levels of palmitic acid and oleic acid are provided in an atypical combination via genetic control
WO1997012047A1 (en) 1995-09-29 1997-04-03 Calgene, Inc. Plant stearoyl-acp thioesterase sequences and methods to increase stearate content in plant seed oils
US6084164A (en) 1996-03-25 2000-07-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Sunflower seeds with enhanced saturated fatty acid contents
US5885643A (en) * 1996-05-21 1999-03-23 Cargill, Incorporated High stability canola oils
US5850026A (en) 1996-07-03 1998-12-15 Cargill, Incorporated Canola oil having increased oleic acid and decreased linolenic acid content
US6365802B2 (en) * 1998-08-14 2002-04-02 Calgene Llc Methods for increasing stearate content in soybean oil
US6388113B1 (en) * 1999-06-04 2002-05-14 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas ( Csic) High oleic/high stearic sunflower oils
US6348610B1 (en) * 1999-06-04 2002-02-19 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas (Csic) Oil from seeds with a modified fatty acid composition

Also Published As

Publication number Publication date
WO2000074470A1 (en) 2000-12-14
AU5219600A (en) 2000-12-28
US7435839B2 (en) 2008-10-14
TR200103522T2 (tr) 2002-09-23
DE60022503T2 (de) 2006-06-29
EP1187527A1 (en) 2002-03-20
EP1185160B1 (en) 2006-08-23
AU783462B2 (en) 2005-10-27
HUP0201449A3 (en) 2012-02-28
EP1187527B1 (en) 2005-09-07
ATE336884T1 (de) 2006-09-15
WO2000074471A1 (en) 2000-12-14
EP1554925A1 (en) 2005-07-20
TR200103523T2 (tr) 2002-04-22
AU5402500A (en) 2000-12-28
ATE303718T1 (de) 2005-09-15
HU228802B1 (en) 2013-05-28
AU783474B2 (en) 2005-10-27
DE60022503D1 (de) 2005-10-13
EP1187527B2 (en) 2010-06-09
ES2265945T3 (es) 2007-03-01
ES2245643T3 (es) 2006-01-16
EP1185160A1 (en) 2002-03-13
DE60030280T2 (de) 2007-10-11
HUP0201476A2 (en) 2002-09-28
DE60030280D1 (de) 2006-10-05
HUP0201449A2 (en) 2002-08-28
US6956155B1 (en) 2005-10-18
HU228892B1 (en) 2013-06-28
US20060026714A1 (en) 2006-02-02
DE60022503T3 (de) 2010-10-14
CA2374107A1 (en) 2000-12-14
CA2374100A1 (en) 2000-12-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2245643T5 (es) Uso de aceites con un contenido alto de oleico y alto de estearico.
US6388113B1 (en) High oleic/high stearic sunflower oils
ES2179640T5 (es) Procedimiento para el incremento selectivo de los glucosinolatos anticarcinogénicos de la especie Brassica.
US7592015B2 (en) Use of high oleic high stearic oils
Singh et al. Variation of major fatty acids in F8 generation of opium poppy (Papaver somniferum× Papaver setigerum) genotypes
Garcés Mancheño et al. High oleic high stearic plants, seeds and oils
Martínez-Force et al. Use of high oleic high stearic oils
ES2309158T3 (es) Planta, semillas y aceite con un contenido incrementado de triacilgliceroles saturados y aceite que tiene un elevado contenido de acido estearico.
Martinez Force High oleic/high stearic sunflower oils
ES2292265B1 (es) Mejoras introducidas en la patente principal n. 9902552, aceite de semilla de mostaza etiope con alto contenido en acido oleico.
Daun Modified fatty acid profiles in Canadian oilseeds
Gadpayale et al. Nutritional quality evaluation of oil and fatty acid profile in various genotypes/varieties of Indian mustard [Brassica juncea Czern & Coss (L.)]
McVetty et al. Brassica seed quality breeding at the university of Manitoba
CA3213206A1 (en) Fertilizer management
Ntiamoah Inheritance and characterization of EMS-induced fatty acid mutations in McGregor flax
Goswami1&2 et al. International Journal of BioResearch
Silver et al. A technique for selecting for stability of oil composition in sunflowers
SI BREEDING FOR OF OLEIC ACID
LAGRAVERE et al. SUNFLOWER (Helianthus annuus L.) HYBRIDS
Malau-Aduli Genetic variation in fatty acid composition of cattle/by Enoch Othniel Malau Aduli.