HU226908B1 - Egyszer használatos készülék, telep és eljárás sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történõ, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére - Google Patents
Egyszer használatos készülék, telep és eljárás sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történõ, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére Download PDFInfo
- Publication number
- HU226908B1 HU226908B1 HU9904529A HUP9904529A HU226908B1 HU 226908 B1 HU226908 B1 HU 226908B1 HU 9904529 A HU9904529 A HU 9904529A HU P9904529 A HUP9904529 A HU P9904529A HU 226908 B1 HU226908 B1 HU 226908B1
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- container
- cells
- sterile
- tissues
- additive
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 21
- 238000012258 culturing Methods 0.000 title claims description 17
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 title description 7
- 230000003816 axenic effect Effects 0.000 title 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 65
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 51
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 33
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 32
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 30
- 238000011109 contamination Methods 0.000 claims description 29
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 27
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 26
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 18
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 17
- 239000002912 waste gas Substances 0.000 claims description 13
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 11
- 239000004033 plastic Substances 0.000 claims description 11
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 claims description 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 8
- 238000007599 discharging Methods 0.000 claims description 4
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 4
- GNFTZDOKVXKIBK-UHFFFAOYSA-N 3-(2-methoxyethoxy)benzohydrazide Chemical compound COCCOC1=CC=CC(C(=O)NN)=C1 GNFTZDOKVXKIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 claims description 3
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 claims description 3
- -1 polyethylene Polymers 0.000 claims description 3
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 claims description 3
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 claims description 3
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 claims description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 claims description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 claims description 2
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 claims 1
- 229920001756 Polyvinyl chloride acetate Polymers 0.000 claims 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 claims 1
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 claims 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 claims 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 claims 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 77
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 8
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000013461 design Methods 0.000 description 5
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 5
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 239000004687 Nylon copolymer Substances 0.000 description 3
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 3
- 230000003373 anti-fouling effect Effects 0.000 description 3
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 3
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 3
- 241000863480 Vinca Species 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 2
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 238000003466 welding Methods 0.000 description 2
- 239000005631 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid Substances 0.000 description 1
- HXKWSTRRCHTUEC-UHFFFAOYSA-N 2,4-Dichlorophenoxyaceticacid Chemical compound OC(=O)C(Cl)OC1=CC=C(Cl)C=C1 HXKWSTRRCHTUEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HABAPWZXRLIZDL-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-2-phenoxyacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)OC1=CC=CC=C1 HABAPWZXRLIZDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NEZONWMXZKDMKF-JTQLQIEISA-N Alkannin Chemical compound C1=CC(O)=C2C(=O)C([C@@H](O)CC=C(C)C)=CC(=O)C2=C1O NEZONWMXZKDMKF-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N Kinetin Natural products N=1C=NC=2N=CNC=2C=1N(C)C1=CC=CO1 FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001071917 Lithospermum Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 238000004378 air conditioning Methods 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- UNNKKUDWEASWDN-UHFFFAOYSA-N alkannin Natural products CC(=CCC(O)c1cc(O)c2C(=O)C=CC(=O)c2c1O)C UNNKKUDWEASWDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 230000000712 assembly Effects 0.000 description 1
- 238000000429 assembly Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000005219 brazing Methods 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000779 depleting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 description 1
- QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N kinetin Chemical compound N=1C=NC=2N=CNC=2C=1NCC1=CC=CO1 QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001669 kinetin Drugs 0.000 description 1
- 235000021073 macronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012092 media component Substances 0.000 description 1
- 239000011785 micronutrient Substances 0.000 description 1
- 235000013369 micronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 239000003595 mist Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/02—Form or structure of the vessel
- C12M23/14—Bags
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/22—Transparent or translucent parts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/28—Constructional details, e.g. recesses, hinges disposable or single use
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M33/00—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/44—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of volume or liquid level
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Clinical Laboratory Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Description
Eljárás sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére, amelynek során egy találmány szerinti készülékbe annak ürítőszervén keresztül biológiailag semleges oltóanyagot juttatnak be, a készülék (10) adalékanyag-bevezető szervén keresztül steril tenyésztő tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatnak be, adott esetben a készülék (10) tartályát (20) kívülről megvilágítják, a sejteket és/vagy szöveteket a táptalajban kívánt hozam eléréséig tenyésztik, a tartályból (20) a felesleges levegőt és/vagy hulladék gázokat folyamatosan eltávolítják a készülék (10) gázkivezetö szervén keresztül, a tartályban (20) előállított sejtek és/vagy szövetek szennyeződését és/vagy minőségét megvizsgálják, és ha szennyeződést találnak, vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek gyenge minőségűek, a készüléket (10) tartalmával együtt hulladéknak minősítve eldobják, ha nem találnak szennyeződést, vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek jó minőségűek, akkor a sejteket és/vagy szövetet tartalmazó tápközeg meghatározott részét ürítik, maradék részét a tartályban (20) hagyják, amelyet egy következő tenyésztési és ürítési ciklus számára oltóanyagként hasznosítják, a következő tenyésztési és ürítési ciklushoz az adalék anyag bevezető szervén keresztül steril tenyésztési tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatnak be, a fenti lépéseket mindaddig ismétlik, amíg a megvizsgált sejtekben és/vagy szövetekben szennyeződést nem találnak vagy azokat gyenge minőségűnek nem minősítik. Ezt követően a készüléket (10) tartalmával együtt eldobják.
A találmány tárgya egyszer használatos készülék sej- 20 tek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére, amelynek felső véggel és alsó véggel rendelkező, sterilizálható átlátszó és/vagy áttetsző egyszer használatos, legalább részben tenyésztésre alkalmas steril biológiai 25 sejt- és/vagy szövettenyésztő tápközeggel és/vagy biológiailag steril oltóanyaggal és/vagy steril levegővel és/vagy egyéb szükséges steril adalék anyaggal feltölthető tartálya van, mely tartálynak felesleges levegőt és/vagy hulladék gázokat a tartályból eltávolító gázki- 30 vezető szerve, valamint oltóanyagot és/vagy tenyésztő tápközeget és/vagy adalék anyagot a tartályba bevezető adalékanyag-bevezető szerve van. A találmány tárgya továbbá ilyen készülékekből összeállított telep sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, 35 biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére. A találmány tárgya fentieken túlmenően eljárás sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére. Ezen belül találmányunk fő tárgya olyan berendezés, amely ugyan 40 egyszer használatos, azonban eldobásáig folyamatosan használhatjuk egymást követő tenyésztési és kinyerési ciklusokhoz, valamint találmányunk tárgyát képezik a nagy mennyiségű sejt és szövet tenyésztésére használt ilyen berendezésekből álló telepek is. 45
A sejttenyésztő és szövettenyésztő módszerek sok éve jól ismertek szakterületükön. Az ilyen tenyésztő eljárások gazdaságosan felhasználhatók arra, hogy tenyésztett sejtekből vagy szövetekből másodlagos metabolitokat nyerjünk ki, például gyógyászatilag aktív ve- 50 gyületeket, a kozmetikában használt anyagokat, hormonokat, enzimeket, proteineket, antigéneket, élelmiszer-adalékokat és természetes rovarirtó anyagokat. Amellett, hogy potenciálisan magában rejti a jövedelmezőséget, ez a megoldás mégsem kristályosodott ki 55 hatékonyan az ipari méretű bioreaktorokban, amelyek a nagy beruházási költségek miatt lassan növekvő tenyészeteket és állati kultúrákat alkalmaznak.
Az említett anyagok előállítására használt, ipari méretű sejt és/vagy szövettenyésztésnél alkalmazott is- 60 mert technológia olyan üvegből vagy rozsdamentes acélból készült bioreaktorokon nyugszik, amelyek jelentős beruházási költséget jelentenek. Ezen túlmenően ezeknek az ipari bioreaktoroknak igen bonyolult és költséges keverötechnológiájuk van, így például drága és bonyolult steril tömítéseken keresztül hajtott keverőlapátja, sőt, néhány drága fermentor légpárnás többrészes felépítésű. Az ilyen típusú bioreaktorok eredményes működtetése igen gyakran megkívánja a folyamatosan javításra szoruló aeráló módszerek alkalmazását, továbbá a bioreaktorok általában az egyszerre igényelt csúcskapacitásra vannak méretezve. Ennek köszönhetően általában gondok adódnak már akkor, amikor félüzemi laboratóriumi fermentorokról nagy fermentorokra térnek át, vagy ha szükségesnek látszik a termelés felfuttatása a meglévő bioreaktorok kapacitásán túl. Az egyetlen nagy kapacitású bioreaktor létező alternatívája, nevezetesen sok kisebb méretű üveg vagy rozsdamentes acél bioreaktor használata, amelyek teljes kapacitása elégségesnek bizonyul, miközben nagyfokú rugalmasságot biztosít a teljes kapacitás növelése vagy csökkentése vonatkozásában, mindazonáltal sokkal költségesebb, mint az egy nagyobb bioreaktor előállítása. Ezen túlmenően a legtöbb üveg és rozsdamentes acél bioreaktor üzemeltetési költsége is nagy a bioreaktorok minden egyes tenyésztési ciklust követő kötelező sterilizálásával kapcsolatos alacsony termelékenység miatt. Ennek következtében az ilyen bioreaktorokban növesztett sejtekből vagy szövetekből kinyert termékek drágák, és jelenleg kereskedelmi téren nem tekinthetők versenyképesnek az alternatív módszerekkel létrehozott hasonló termékekkel összehasonlítva. Ténylegesen számunkra egyetlen olyan japán vállalat ismert, amely a fent vázolt sejt és/vagy szövettenyésztö eljárást kereskedelmi méretekben alkalmazza, rozsdamentes acél bioreaktorokkal, mely cég a leginkább kizárólag Japánban használt „Shikonin’’ nevű vegyületet állít elő.
Az ipari vagy annál nagyobb méretű bioreaktorok hagyományosan állandó vagy félállandó résznek minősülnek, és a nagy volumenű sejt és/vagy szövette2
HU 226 908 Β1 nyésztéssel kapcsolatos, fent vázolt problémák megoldására ismereteink szerint nem született egyszer használatos bioreaktorra vonatkozó javaslat vagy megoldás. Másrészt egyszer használatos fermentorok és bioreaktorberendezések jól ismertek, és kizárólagosan a nagyon kis mennyiségű előállításra alkalmasak, például házi sörfőzéshez vagy laboratóriumi munkákhoz. Ezek a bioreaktorok általában eldobható zacskót tartalmaznak, amelyet jellemző módon fel kell vágnunk ahhoz, hogy a sejt- vagy szövettartalmat megkapjuk, lehetetlenné téve ezzel a zacskó minden további felhasználását. Kis volumenű előállításhoz, például házi vagy laboratóriumi kutatáshoz ilyen ismert egyszer használatos bioreaktort gyárt az izraeli Osmotec cég (lásd az Agritech Israel folyóirat 11. számát, 1997 ősz, 19. oldal). Ez a bioreaktor kúpos zacskót tartalmaz, amelynek bemenetén keresztül a tenyésztő tápközeget, levegőt, oltóanyagot és egyéb opcionális adalékokat lehet bevezetni, és térfogata mindössze körülbelül 1,5 liter. Az aeráció úgy történik, hogy nagyon kis légbuborékokat vezetnek be, amelyek számos esetben a sejtek sérüléséhez vezetnek, különösen növényi sejtkultúrák esetében. Ezek a zacskók kifejezetten egyetlen tenyésztési és kinyerési ciklusra lettek kitalálva, és a zacskó tartalmát a zacskó aljának a levágásával lehet kinyerni. Ezek a zacskók így nem igazán adnak gazdaságos megoldást a kultúrából kinyerendő, ipari mennyiségű anyagok fent vázolt megszerzéséhez.
Ezeknek a bioreaktorkészülékeknek az eldobhatósága nem jelent általában gazdasági hátrányt a felhasználó számára, mivel ezeknek a készülékeknek az alacsony beszerzési költségével szemben áll a használat, tárolás egyszerűségének és más gyakorlati megfontolásoknak a kérdése. A gyakorlatban azon kis termelési szinteken, amelyeket ezek a készülékek megcéloztak, a berendezések gazdaságossága nem igazi motiváció ezen berendezések bonyolultságának a növelésére, bonyolultabb kezelésére annak érdekében, hogy lehetővé tegyük ezeknek a készülékeknek folyamatosan egynél több tenyésztő/kinyerő cikluson keresztül történő felhasználását.
Ezen túlmenően az eldobható bioreaktorokon kívül sem szükség nincs steril körülmények biztosítására, sem lehetőség nincs arra számos esetben, és így miután azokat kinyitottuk a tenyészet kivételéhez, nincs sem hatékony, gyakorlati megoldás, sem lehetőség gyakran arra, hogy fenntartsuk a nyitáshoz meglévő steril körülményeket és megakadályozzuk a zacskó és az esetlegesen abban maradt tenyészet szennyeződését. így ezeket az eldobható készülékeket egy tenyésztési ciklus után nem lehet még egyszer felhasználni.
A GB 2 202 549, valamint EP 0343885 számú szabadalmi leírások egyaránt ilyen rugalmas anyagú, összehajtogatható zacskó típusú fermentorokat ismertetnek, amelyeknek ugyan van bemenete és kimenete a levegő részére, de az anyagot nem lehet kivenni belőlük anélkül, hogy a tartály tönkre ne menne. így nemigen különböznek a többi ismert, egyszer használatos, felvágásuk után eldobandó bioreaktortól.
Az EP 0350723 számú szabadalmi leírás egy egyszerű szelepszerkezetet ismertet, amelynek felhasználásával a fenti problémák, hiányosságok nem oldhatók meg.
Az eldobható bioreaktorkészülékek így a nem ipari méretű felhasználók által általában igényelt mennyiségek vonatkozásában viszonylag olcsó készülékeknek bizonyulnak, amelyeknek kezelése is viszonylag egyszerű és nem kíván külön szakavatott személyzetet. Tulajdonképpen az egyszerű használhatóság és az alacsony költség az, ami az eldobható bioreaktorkészülékek egyik fő vonzereje. Az ismert műszaki szinthez tartozó eldobható bioreaktorkészülékeknek tehát nagyon kevés közük van az ipari méretű bioreaktorokhoz - mind felépítésüket, mind működésüket, mind pedig gazdaságosságukat tekintve - és tulajdonképpen elterelik a figyelmet az ipari méretű bioreaktorokhoz kapcsolódó problémák megoldásáról, nem pedig elősegítik azt.
Találmányunk mindezek figyelembe vételével forradalmian új megoldást jelent az eddig vázolt problémák megoldása tekintetében, azáltal, hogy akár ipari méretekben is lehetővé teszi sejt- és/vagy szövettenyészetek gazdaságos előállítását egyszer használatos, eldobható bioreaktorkészülékekkel. A javasolt bioreaktor amellett, hogy eldobható, újszerű módon többször felhasználható kimenettel rendelkezik, ami lehetővé teszi, hogy igény esetén a benne lévő sejtekből és/vagy szövetekből álló tápközeget részben vagy egészben kinyerhessük, így a készüléket folyamatosan tudjuk használni egy vagy több egymást követő tenyésztési és kinyerési cikluson keresztül. Üzemi környezetben pedig biztosítani tudjuk a készülék kimenetének a sterilitását mind a kinyerés alatt, mind pedig azt követően, mindezt lényegesen olcsóbban, mint az ismert megoldások, például úgy, hogy olyan steril harangot rendelünk hozzá, amelyben elhelyezzük az összes szükséges csatlakozást. Ha a készülék mégis szennyeződik, akkor a csatlakozások oldása után egyszerűen eldobható. Az ilyen készülékek olcsón gyárthatók, akár 50 l-t meghaladó tenyésztési mennyiségekre is. Ezenkívül a több tenyésztési és kinyerési cikluson keresztül való használhatóság gazdaságilag vonzó, és a készülékre eső relatív költséget tovább csökkenti. Lehetőség van ilyen készülékekből igen gazdaságosan megfelelő teljesítményre képes telepet összeállítani és a telepet létrehozó készülékek számát a mindenkori termelési igényekhez igazodóan lehet variálni. így viszonylag egyszerű és gazdaságos módon át tudunk térni a félüzemi laboratóriumi bioreaktorokról a nagy teljesítményű bioreaktorokra, mindössze azáltal, hogy a telephez még több készüléket kapcsolunk. Ezenkívül a keverőeszközöket is nélkülöző, viszonylag kis előállítási teljesítményű készülékek együttesen viszonylag nagyobb termékmennyiséget eredményeznek, mint a hagyományos és jellemző rozsdamentes acélból készült bioreaktorok.
A találmánnyal célunk egyrészt sejtek és/vagy szövetek steril tenyésztésére és kinyerésére szolgáló, a felsorolt hiányosságoktól és hátrányoktól mentes ké3
HU 226 908 Β1 szülék, valamint azzal megvalósítható eljárás létrehozása. Célunk továbbá olyan készülék kialakítása, amely gazdaságosan gyártható és egyszerűen kezelhető. További célunk a találmánnyal olyan készülék létrehozása, amely eldobható, mindamellett folyamatosan használható kiválasztott sejtek és/vagy szövetek több egymást követő tenyésztési és kinyerési ciklusán keresztül.
Találmányunk további célja olyan készülék létrehozása, amelynél csupán az első tenyésztési ciklushoz szükséges oltóanyagot bejuttatunk, míg a rákövetkező ciklusokhoz az oltóanyagot az a tenyésztett kultúra táptalaj biztosítja, amely a készülékben marad az előző ciklusban tenyésztett anyag kinyerését követően. Célunk ezenkívül a találmánnyal olyan telep létrehozása, amellyel ipari méretekben tudunk sejteket és/vagy szöveteket előállítani.
A kitűzött feladat megoldása során olyan egyszer használatos készüléket vettünk alapul sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére, amelynek felső véggel és alsó véggel rendelkező, sterilizálható átlátszó és/vagy áttetsző egyszer használatos, legalább részben tenyésztéshez alkalmas steril biológiai sejt- és/vagy szövettenyésztő tápközeggel és/vagy biológiailag steril oltóanyaggal és/vagy steril levegővel és/vagy egyéb szükséges steril adalék anyaggal feltölthető tartálya van, mely tartálynak felesleges levegőt és/vagy hulladék gázokat a tartályból eltávolító gázkivezető szerve, valamint oltóanyagot és/vagy tenyésztő tápközeget és/vagy adalék anyagot a tartályba bevezető adalékanyag-bevezető szerve van. Ezt a találmány értelmében úgy fejlesztettük tovább, hogy kívánság szerint a sejteket és/vagy szövetet tartalmazó tápközeg legalább egy részének ürítését lehetővé tevő, és ezzel a készülék folyamatos használatát legalább egy rákövetkező tenyésztési és ürítési ciklus erejéig lehetővé tevő, áramlásszabályozó eszközt tartalmazó újra felhasználható ürítőszervvel van ellátva, továbbá az egy következő tenyésztési és ürítési ciklusban oltószerként alkalmazható, sejteket és/vagy szöveteket tartalmazó tápközeg maradék részét továbbra is magában foglaló tartálya van.
A találmány szerinti készülék egy előnyös kiviteli alakja értelmében steril levegőt buborékok formájában a tenyésztő tápközegbe első bevezető és levegőforráshoz kapcsolódó nyíláson át bejuttató légbevezető szerve van.
A találmány szerinti készülék egy további előnyös kiviteli alakja értelmében az ürítőszerv szennyeződésnek az ürítőszerven keresztül a tartályba való bejutását lényegében meggátló szennyeződést meggátló eszköze van.
Ugyancsak előnyös a találmány értelmében, ha a tartály nem merev anyagú.
Előnyös továbbá, ha a tartály nem merev műanyagból készült.
Fentieken túlmenően előnyös, ha a műanyag polietilént, polikarbonátot, polietilén-nejlon kopolimert, poli(vinil-klorid)-ot és etil-étert tartalmazó csoportból van kiválasztva.
Ugyancsak előnyös a találmány értelmében, ha a tartály több anyagrétegből van összeállítva.
A találmány szerinti készülék egy további előnyös kiviteli alakja értelmében a tartály két anyagréteg előre meghatározott varratok mentén történő megömlesztésével van kialakítva.
Előnyös továbbá, ha a légbevezető szerv a levegőt bevezető nyílástól a tartály belsejébe nyúló, vagy annak alja tartományában végződő légbevezető csövet tartalmaz.
Fentieken túlmenően előnyös, ha a levegőbuborékok némelyike 1-10 mm tartományba eső átlagos átmérőjű buborék.
Ugyancsak előnyös a találmány értelmében, ha legalább némely levegőbuborék 4 mm körüli átlagos átmérőjű buborék.
A találmány szerinti készülék egy további előnyös kiviteli alakja értelmében a tartály szennyeződéseknek gázkivezető szervén keresztül a tartályba jutását lényegében megakadályozó szűrőt tartalmaz a gázkivezető szervén felszerelve.
Előnyös továbbá, ha a tartály szennyeződéseknek adalékanyag-bevezető szervén keresztül a tartályba jutását lényegében megakadályozó szűrőt tartalmaz a adalékanyag-bevezető szervén felszerelve.
Ugyancsak előnyös, ha a szennyeződést meggátló eszköz U alakú folyadékcsapda, amelynek egyik szára aszeptikus csatlakozóelemekkel az ürítőszerv külső kimenetéhez van aszeptikusán csatlakoztatva.
Fentieken túlmenően előnyös, ha az ürítőszerv a tartály alsó végének alján van elrendezve.
Előnyös továbbá, ha az ürítőszerv a tartály alsó vége végének a szomszédságában van elrendezve úgy, hogy minden egyes ürítőciklus végén a sejteket és/vagy szöveteket tartalmazó tápközegmaradvány automatikusan a tartály alsó végében marad az ürítőszervvel azonos magasságban húzódó szintig.
A találmány szerinti készülék egy további előnyös kiviteli alakja értelmében a sejteket és/vagy szöveteket tartalmazó tápközegmaradvány a tenyésztő tápközegből és az oltóanyagból álló eredeti térfogat 2,5-45%-a közötti tartományba, előnyösen 10-20% közötti tartományba eső részét képezi.
Ugyancsak előnyös a találmány értelmében, ha a tartály alsó vége (lényegében) domború kiképzésű.
Előnyös továbbá, ha a tartály alsó vége lényegében csonka kúp alakú.
Fentieken túlmenően előnyös, ha a tartály 5-50 I tartományba eső belső feltölthető térfogattal rendelkezik.
Ugyancsak előnyös, ha tartószerkezeten felerősítő rögzítőelemekkel van ellátva.
Előnyös továbbá a találmány értelmében, ha a rögzítőelemeket a tartály felső végével előnyösen egybeépítetten kiképzett szem alkotja.
A kitűzött feladat megoldása során olyan telepet vettünk alapul sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére, amely a találmány szerinti készülékből van összeállítva.
HU 226 908 Β1
A találmány szerinti telep egy előnyös kiviteli alakja értelmében a készülékeket azok rögzítőeszköze segítségével tartószerkezet tartja.
A találmány szerinti telep egy további előnyös kiviteli alakja értelmében mindegyik készülék gázkivezető szerve abban az esetben szennyeződéseknek a készülékekbe jutását meggátló eszközzel ellátott közös gázkivezető gyűjtőcsőhöz van csatlakoztatva.
Ugyancsak előnyös a találmány értelmében, ha a szennyeződések bejutását meggátló szerv szűrőt tartalmaz.
Előnyös továbbá, ha a készülékek adalékanyag-bevezető szerve adott esetben aszeptikus csatlakozóval ellátott szabad végű közös gyűjtőcsővel áll kapcsolatban.
Előnyös fentieken túlmenően, ha a gyűjtőcső szabad vége tápközeg és/vagy adalékanyag-forráshoz van csatlakoztatva.
Ugyancsak előnyös, ha a készülékek ürítőszerve adott esetben aszeptikus csatlakozóval ellátott szabad végű közös gyűjtőcsőhöz van csatlakoztatva.
Fentieken túlmenően előnyös, ha a tartályba a közös ürítő gyűjtőcsövön át szennyeződések bejutását megakadályozó szennyeződést meggátló eszközt tartalmaz.
Ugyancsak előnyös a találmány értelmében, ha a szennyeződést meggátló szerv U alakú folyadékcsapda, amelynek egyik szára nyílást tartalmaz, másik szára aszeptikusán aszeptikus csatlakozókon keresztül közösítve van a közös ürítővezeték szabad végével.
A találmány szerinti telep egy további előnyös kiviteli alakja értelmében az U alakú folyadékcsapda szabad vége fogadótartályhoz csatlakozik.
Előnyös továbbá, ha a készülékek légbevezető szerve adott esetben aszeptikus csatlakozóval ellátott szabad végű közös légbevezető gyűjtőcsőhöz van csatlakoztatva.
Ugyancsak előnyös a találmány értelmében, ha a gyűjtőcső szabad vége levegőforráshoz van csatlakoztatva.
A kitűzött feladat megoldása során továbbá sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére vonatkozó eljárás során létrehozunk egy találmány szerinti készüléket, annak ürítőszervén keresztül biológiailag semleges oltóanyagot juttatunk be, a készülék adalékanyag-bevezető szervén keresztül steril tenyésztő tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatunk be, adott esetben a készülék tartályát kívülről megvilágítjuk, a sejteket és/vagy szöveteket a táptalajban kívánt hozam eléréséig tenyésztjük, a tartályból a felesleges levegőt és/vagy hulladék gázokat folyamatosan eltávolítjuk a készülék gázkivezető szervén keresztül, a tartályban előállított sejtek és/vagy szövetek szennyeződését és/vagy minőségét megvizsgáljuk, és ha szennyeződést találunk, vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek gyenge minőségűek, a készüléket tartalmával együtt hulladéknak minősítve eldobjuk, ha nem találunk szennyeződést, vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek jó minőségűek, akkor a sejteket és/vagy szövetet tartalmazó tápközeg meghatározott részét ürítjük, maradék részét a tartályban hagyjuk, amelyet egy következő tenyésztési és ürítési ciklus számára oltóanyagként hasznosítunk, a következő tenyésztési és ürítési ciklushoz az adalékanyag-bevezető szervén keresztül steril tenyésztési tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatunk be, a fenti lépéseket mindaddig ismételjük, amíg a megvizsgált sejtekben és/vagy szövetekben szennyeződést találunk vagy azokat gyenge minőségűnek minősítjük, és a készüléket tartalmával együtt eldobjuk.
A találmány szerinti eljárás egy előnyös foganatosítási módja értelmében steril levegőt buborékok formájában egy első nyílásán keresztül a táptalajba bejuttató készülékkel steril levegőt juttatunk be a tartályba az első és a rákövetkező ciklusok során.
A találmány szerinti eljárás egy további előnyös foganatosítási módja értelmében a steril levegőt legalább egy tenyésztési cikluson keresztül folyamatosan juttatjuk be.
Ugyancsak előnyös a találmány értelmében, ha a steril levegőt legalább egy tenyésztési cikluson keresztül adagokban juttatjuk be.
A kitűzött feladat megoldása során ezen túlmenően sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére vonatkozó eljárás során
a) találmány szerinti telepet, és abban legalább egy találmány szerinti készüléket állítunk elő,
b) annak közös ürítő gyűjtőcsövén keresztül biológiailag semleges oltóanyagot juttatunk be,
c) a készülék közös adalékanyag-bevezető gyűjtőcsövén keresztül steril tenyésztő tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatunk be,
d) adott esetben a készülék tartályát kívülről megvilágítjuk,
e) a sejteket és/vagy szöveteket a táptalajban kívánt hozam eléréséig tenyésztjük,
f) a tartályból a felesleges levegőt és/vagy hulladék gázokat folyamatosan eltávolítjuk a készülék közös gázkivezető gyűjtőcsövén keresztül,
g) a tartályokban előállított sejtek és/vagy szövetek szennyeződését és/vagy minőségét megvizsgáljuk, és ha valamelyik tartályban szennyeződést találunk, vagy az abban előállított sejtek és/vagy szövetek gyenge minőségűek, a tartályt tartalmazó készülék ürítőszervét lezárjuk és ezzel meggátoljuk a szennyeződés bejutását a többi készülékébe, és ha a telep összes készülékében szennyeződést találunk, vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek gyenge minőségűek, az összes ilyen készüléket tartalmával együtt hulladéknak minősítve eldobjuk, és ha nem találunk szennyeződést, vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek jó minőségűek, akkor a készüléket üríthetőnek minősítjük és a soron következő h) lépést végrehajtjuk,
h) a g) lépés minden egyes üríthető készülékénél a sejteket és/vagy szövetet tartalmazó tápközeg meghatározott részét közös ürítő gyűjtőcsövön és a szennyeződést meggátló szerven át fogadótartályba ürítjük, maradék részét a tartályban hagyjuk,
HU 226 908 Β1 amelyet egy következő tenyésztési és ürítési ciklus számára oltóanyagként hasznosítunk,
i) a következő tenyésztési és ürítési ciklushoz az adalék anyag közös bevezető gyűjtőcsövön keresztül steril tenyésztési tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatunk be,
j) a fenti d), e), f), g), h) és i) lépéseket mindaddig ismételjük, amíg a megvizsgált sejtekben és/vagy szövetekben szennyeződést találunk vagy azokat gyenge minőségűnek minősítjük a telep összes készülékében, minek következtében a szennyeződést meggátló szervet a közös ürítő gyűjtővezetékről leválasztjuk és a készülékeket tartalmukkal együtt eldobjuk.
A kitűzött feladat megoldása során ezen túlmenően sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére vonatkozó eljárás során
a) egy találmány szerinti telepet, és abban legalább egy találmány szerinti készüléket állítunk elő,
b) annak közös ürítő gyűjtőcsövén keresztül biológiailag semleges oltóanyagot juttatunk be,
c) a készülék közös adalékanyag-bevezető gyűjtőcsövén keresztül steril tenyésztő tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatunk be,
d) a készülék közös légbevezető gyűjtőcsövén keresztül steril levegőt juttatunk be,
e) adott esetben a készülék tartályát kívülről megvilágítjuk,
f) a sejteket és/vagy szöveteket a táptalajban kívánt hozam eléréséig tenyésztjük,
g) a tartályból a felesleges levegőt és/vagy hulladék gázokat folyamatosan eltávolítjuk a készülék közös gázkivezető gyűjtőcsövén keresztül,
h) a tartályokban előállított sejtek és/vagy szövetek szennyeződését és/vagy minőségét megvizsgáljuk, és ha valamelyik tartályban szennyeződést találunk, vagy az abban előállított sejtek és/vagy szövetek gyenge minőségűek, a tartályt tartalmazó készülék ürítőszervét lezárjuk és ezzel meggátoljuk a szennyeződés bejutását a többi készülékébe, és ha a telep összes készülékében szennyeződést találunk vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek gyenge minőségűek, az összes ilyen készüléket tartalmával együtt hulladéknak minősítve eldobjuk, és ha nem találunk szennyeződést, vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek jó minőségűek, akkor a készüléket üríthetönek minősítjük és a soron következő i) lépést végrehajtjuk,
i) a h) lépés minden egyes üríthető készülékénél a sejteket és/vagy szövetet tartalmazó tápközeg meghatározott részét közös ürítő gyűjtőcsövön és a szennyeződést meggátló szerven át fogadótartályba ürítjük, maradék részét a tartályban hagyjuk, amelyet egy következő tenyésztési és ürítési ciklus számára oltóanyagként hasznosítunk,
j) a következő tenyésztési és ürítési ciklushoz az adalék anyag közös bevezető gyűjtőcsövön keresztül steril tenyésztési tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatunk be,
k) a fenti d), e), f), g), h), i) és j) lépéseket mindaddig ismételjük, amíg a megvizsgált sejtekben és/vagy szövetekben szennyeződést találunk vagy azokat gyenge minőségűnek minősítjük a telep összes készülékében, minek következtében a szennyeződést meggátló szervet a közös ürítő gyűjtővezetékről leválasztjuk és a készülékeket tartalmukkal együtt eldobjuk.
Találmányunk tehát lehetővé teszi az egyszer használatos készülék többszöri, egészen a szennyeződéséig tartó használatát, és mind aerob, mind anaerob formában kivitelezhető.
A találmányt a továbbiakban a csatolt rajz segítségével ismertetjük részletesebben, amelyen a javasolt készülék néhány példaként! kiviteli alakját tüntettük fel. A rajzon az
1a. és 1b. ábra a találmány szerinti készülék egy lehetséges kiviteli alakjának főbb alkotórészeit mutatja elölnézetben és/vagy hosszmetszetben, a
2a. és 2b. ábra a találmány szerinti készülék egy másik lehetséges kiviteli alakjának főbb részeit mutatja, ugyancsak elölnézetben és/vagy hosszmetszetben, a
3. ábrán a találmány szerinti készülék egy harmadik lehetséges kiviteli alakját vázoltuk fel metszetben, a
4. ábrán a javasolt készülék egy lehetséges kiviteli alakjának főbb illesztési vonalait tüntettük fel metszetben, és az
5. ábra a találmány szerinti készülékkel megvalósított telep egy lehetséges kialakítását mutatja tömbvázlatszinten.
Az 1., 2. és 3. ábrák tehát három különböző, előnyös találmány szerinti 10 készüléket mutatnak be. A 10 készüléknek átlátszó és/vagy áttetsző 20 tartálya van, amely egy fölső 26 véggel és egy alsó 28 véggel rendelkezik. A 20 tartály 22 oldalfallal is rendelkezik, amely előnyösen lényegében hengeres alakú, azonban más alakok, például négyszögletes vagy sokszögű is lehet. A 20 tartály alsó 28 vége az ott bekövetkező szedimentációt a lehető legkisebbre csökkentő módon van kialakítva. így például a bemutatott kiviteli alaknál a 20 tartály alsó 28 vége lényegében csonka kúp alakú, vagy legalább egy felfelé ferdülő fala van. A második kiviteli alaknál látható, hogy az alsó 28 végnek ilyen felfelé ferdén húzódó 29 fala van. A bemutatott harmadik kiviteli alak esetében a 20 tartály alsó 28 vége lényegében hengeres, de alternatív megoldásként domború alakúra is kiképezhető. A 20 tartály alsó 28 végének az itt vázolt kialakításai, egy később részletesebben is bemutatásra kerülő 76 kiömlésnek az alsó 28 véghez közeli elhelyezésével közösen lehetővé teszi, hogy a 76 kiömlésen keresztül szállított levegővel keverőmozgást indukáljunk a 20 tartály tartalmában az alsó 28 vég tartományában, ami hatékonyan csökkenti az ottani leülepedést. Mindazonáltal a 20 tartály alsó 28 vége lényegében sík kiképzésű is lehet a találmány szerinti 10 készülék egyéb kiviteli alakjainál. A 20 tartály belső betölthető 30 térfogatot tartalmaz, amely jel6
HU 226 908 Β1 lemzően 5-50 I tartományba eső értékű, de a találmány szerinti 10 készülék alternatív módon ennél nagyobb, de ennél kisebb belső 30 térfogattal is rendelkezhet. Ezt a belső 30 térfogatot megfelelő steril biológiai sejt- és/vagy szövetkultúra 65 töltettel és/vagy steril 60 oltóanyaggal és/vagy steril levegővel és/vagy egyéb steril adalék anyaggal, például antibiotikummal vagy gombaölő szerrel is megtölthetjük, erre még visszatérünk. Az előbb említett kiviteli alakoknál a 20 tartály lényegében nem merev tulajdonságú és célszerűen valamilyen nem merev műanyagból készíthető, amelyet polietilént, polikarbonátot, polietilén-nejlon kopolimerjét, poli(vinil-klorid)-ot és etil-étert tartalmazó csoportból választhatunk ki. Opcionálisan a 20 tartályt az említett anyagok több rétegéből készített laminátumként is létrehozhatjuk.
Mint a 3. ábrán bemutatott harmadik kiviteli alaknál látható, a 20 tartály ugyancsak opcionálisan két koncentrikus külső 24 falat tartalmaz, amelyek megnövelik a 10 készülék 20 tartályának a mechanikai szilárdságát, és minimálisra csökkentik a 20 tartály 65 töltetének a 29 falon keresztüli esetleges szennyeződését.
Az előnyös második és harmadik kiviteli alaknál a 10 készülék aerob, oxigént igénylő felhasználásra készült. Ennek megfelelően a 20 tartálynak 70 buborékok formájában steril levegőt bevezető légbevezető szervei vannak. A 70 buborékok légbevezető 72 nyíláson keresztül kerülnek be a kultúra 65 töltetbe. Az előbb említett kiviteli alakoknál a légbevezető szervek közé tartozik az a 74 cső, amely az ábrán nem látható, a célnak megfelelően használható levegőforráshoz csatlakozik és a légbeömlő 72 nyílástól a 20 tartály belsejébe nyúlik, annak alsó 28 végétől d1 távolságnyira, ahol d1 távolság értéke jellemzően 10 mm, de ennél nagyobb vagy ennél kisebb is lehet. A 74 cső szilikonból vagy más alkalmas műanyagból készülhet és előnyösen rugalmas kiképzésű. A 74 cső megfelelő átmérőjű levegő 76 kiömléssel van ellátva ahhoz, hogy a kívánt átlagos átmérőjű 70 buborékokat tudja szolgáltatni. Ezek a 70 buborékok a 65 tölteteknek nemcsak az aerálására szolgálnak, hanem a 20 tartály 65 töltetét át is keverik, minimálisra csökkentve ezáltal a 20 tartály alsó 28 végénél a leülepedést. A légbevezető szervek által szállított 70 buborékok mérete a 10 készülék mindenkori alkalmazásától függően változik, és jóval 1 mm-nél kisebb értéktől 10 mm fölötti értékig terjedhet.
Egyes esetekben, különösen a növényi sejtek esetében a kisméretű 70 buborékok megsérthetik a sejtfalat, ennek a veszélynek az elkerülésére 4 mm-nél nem kisebb közepes buborékátmérőt célszerű használni. Más esetekben lényegesen kisebb 70 buborékok használata tűnik előnyösnek, és a levegő 76 kiömlésnél a 70 buborékok méretének a csökkentésére permeteztetőelemet is elhelyezhetünk. Ugyancsak más esetben 10 mm-es vagy azt meghaladó átmérőjű levegő 70 buborékok használata tűnik optimálisnak. Az említett 76 kiömlés opcionálisan a 20 tartály alsó 28 végénél megfelelő elemekkel, például az ábrán nem látható pányvával vagy más elemmel helyzetében rögzíthető.
A találmány szerinti 10 készülék más kiviteli alakja anaerob felhasználásra készül, ennek megfelelően nem tartalmaz légbevezető szerveket.
A 10 készülék 20 tartálya ezenkívül gázkivezető elemeket tartalmaz, amelyek a felesleges levegő és/vagy hulladék gázok 20 tartályból való kijuttatására szolgálnak. Ezek a gázok általában a 20 tartály felső 26 végében gyűlnek össze. A gázkivezető elemek 90 csövet foglalhatnak magukban, amelynek a 20 tartály felső 26 végénél vagy annak közelében D4 távolságban a 20 tartály alsó 28 végétől 96 bemenete van. A d4 távolság a bemutatott előnyös kiviteli alakok esetében általában 900 mm értékű. Az említett 90 csövet szilikonból vagy más megfelelő műanyagból készíthetjük, célszerűen rugalmasra. A 90 cső az ábrán nem látható, de szakember számára ismert elemekkel és ismert módon alkalmas kivezetőelemekhez csatlakoztatható. Ezek az elemek ezenkívül alkalmasan megválasztott egyszer használatos szelepet vagy szűrőt is tartalmazhatnak, amellyel például lényegében megakadályozható, hogy a gázkivezető elemeken keresztül szennyeződés jusson a 20 tartály belsejébe. A felső 26 vég legalább egy részét úgy is kiképezhetjük, hogy elősegítse a hulladék gázok összegyűlését, azoknak még a 96 bemeneten történő eltávolítását megelőzően. Ennek megfelelően az előnyös és bemutatott második és harmadik kiviteli alaknál a 20 tartály felső 26 végének a felső része erőteljesen keskenyedik egészen egy legkisebb keresztmetszeti értékig, amely a 96 bemenet közelében található. Alternatív módon a 20 tartály felső 26 végének legalább a felső része kellően csonka kúp vagy domború alakúra is kialakítható.
A 10 készülék 20 tartálya ezen túlmenően további beömlési elemeket tartalmazhat oltóanyagok és/vagy a kultúra 65 töltet és/vagy járulékos adalék anyagok 20 tartályba való bejuttatására. Az említett kiviteli alakok esetében ezek a járulékos beömlési elemek megfelelő 80 csőként alakíthatók ki, amelynek 86 kiömlése célszerűen a 20 tartály felső 26 végénél vagy annak körzetében húzódik, a 20 tartály alsó 28 végétől d3 távolságban, ami az előnyös kiviteli alakok esetében körülbelül 680 mm. A 80 cső is szilikonból vagy más alkalmas műanyagból készülhet, és előnyösen rugalmas 80 cső, amely ismert módon és elemekkel megfelelő sterilizált oltóanyag és/vagy kultúra 65 töltet és/vagy adalékanyag-forrással áll összeköttetésben. A járulékos beömlési elemek ezen túlmenően olyan részeket tartalmaznak, amelyek lényegében a szennyeződésnek a 20 tartályba történő meggátlására szolgálnak ezeken a járulékos beömlési elemeken keresztül, és a bemutatott kiviteli alakok esetében megfelelő egyszer használatos szelepként vagy 84 szűrőként lehetnek kialakítva. A 20 tartály 65 töltetének a szintje általában a 86 kiömlés alatt húzódik.
Ezen túlmenően a 10 készülék 20 tartálya újra felhasználható ürítőszerve van, amelyen keresztül szükség esetén a sejteket és/vagy szövetet tartalmazó 65 töltet legalább egy első részét el tudjuk távolítani, és ezzel lehetővé tesszük, hogy a 10 készüléket folyamatosan legalább még egy rákövetkező tenyésztési ciklu7
HU 226 908 Β1 són keresztül használni lehessen. A sejteket és/vagy szövetet tartalmazó 65 töltet maradék második része oltóanyagként szolgál egy következő tenyésztési ciklus számára, amelynek során létrehozzuk a szóban forgó tenyészetet és/vagy járulékait. Ezt az ürítőszervet felhasználhatjuk arra, hogy az oltóanyag eredeti térfogatát bejuttassuk a 20 tartályba, valamint hogy lehetővé tegyük a létrehozott 65 töltetnek az azon keresztül a 20 tartályból való kijutását. A korábban említett kiviteli alakoknál az ürítőszerv 50 cső, amelynek 52 bemenete összeköttetésben áll a belső 30 térfogattal, valamint 56 kimenete van, amely természetszerűleg a 20 tartályon kívül található. Az 50 csövet szilikonból vagy más megfelelő műanyagból készíthetjük, és ez az 50 cső is előnyösen rugalmas kialakítású. Az 50 cső viszonylag nagy, jellemzően 20 mm körüli átmérőjű, mivel a tenyésztett és kiürítésre kerülő sejt- és/vagy szövetáram olyan csomókat tartalmazhat, amelyek a keskenyebb 50 csövet esetleg eltömíthetnék. Előnyös módon az 52 bemenet a 20 tartály alsó 28 vége közelében helyezkedik el úgy, hogy csupán a 20 tartály efölött lévő tartalma kerül kiürítésre. így minden egyes ürítési ciklus végén a sejteket és/vagy szöveteket tartalmazó 65 töltetmaradék második része automatikusan bennmarad a 20 tartály alsó 28 vége tartományában, egészen az 52 bemenet 51 szintjéig, ami a 20 tartály alsó 28 végétől d2 távolságban helyezkedik el. A bemutatott előnyös kiviteli alakoknál a d2 távolság körülbelül 250 mm. Egy alternatív megoldás szerint az 52 bemenet a 20 tartály lehető legalacsonyabb pontján is kiképezhető, ilyen esetben a 10 készüléket kezelő személynek kell kézi úton biztosítani, hogy a sejteket és/vagy szöveteket tartalmazó tápközegnek egy megfelelő mennyiségű része benne maradjon a 20 tartályban, a sejteket és/vagy szöveteket tartalmazó tápközeg kívánt részének a kiürítését követően. Az ürítőszerv ezen túlmenően áramlásvezérlő elemeket is tartalmaz, például 54 szelepet és/vagy aszeptikus 55 csatlakozót, amelyekkel lehetőség van az anyagáramlás lezárására és/vagy megnyitására a 20 tartályba és/vagy a 20 tartályból. Ez az aszeptikus csatlakozó jellemzően rozsdamentes acélból készül, és a gyakorlatban számos kialakítása ismert. Az ürítőszerv ezen túlmenően előnyösen megfelelő szennyeződést megakadályozó elemeket is tartalmaz, amelyek lényegében arra szolgálnak, hogy megakadályozzák a szennyeződések bejutását a 20 tartályba az ürítést követően az ürítőszerven keresztül. Az előnyös második és harmadik kiviteli alak esetében ez a szennyeződést meggátló szerv lényegében 300 folyadékcsapda. A 300 folyadékcsapda előnyösen lényegében U alakú üreges csőként van kiképezve, amelynek egyik szára az ürítőszerv 56 kimenetéhez van szerelve, másik szára pedig külső 58 nyílást tartalmaz. Az ürítésre kerülő sejtek és/vagy szövetek a 10 készülékből az ürítőszerven keresztül távoznak, méghozzá a 300 folyadékcsapdán és az említett 58 nyíláson át, ahonnan később ismertetésre kerülő megfelelő fogadótartályban gyűjthetjük össze. Az ürítés befejezését követően levegő hatolhatna be az ürítőszervbe az 58 nyíláson át, az ürítettanyag-maradék visszáramával, ami potenciálisan szennyeződés bejutásának a veszélyét jelentheti. Az említett U alakú csövei megvalósított 300 folyadékcsapda lényegében ezt a problémát kerüli meg azzal, hogy bizonyos mennyiségű ürített anyagot, azaz sejtet vagy szövetet az 58 nyílástól visszafelé benntart, és ezzel megakadályozza, hogy levegő és azzal lehetségesen szennyeződések jussanak be a 20 tartályba. Miután az ürítőszervet az 54 szelep segítségével lezártuk, az U alakú 300 folyadékcsapdát eltávolítjuk, és vagy sterilizáljuk a következő felhasználáshoz, vagy eldobjuk. Az U alakú 300 folyadékcsapdát rozsdamentes acélból vagy más megfelelő merev műanyagból készíthetjük.
Az eddig említett kiviteli alakok esetében a sejteket és/vagy szövetet tartalmazó 65 töltetmaradék második része általában a teljes 65 töltet és az oltóanyag együttes eredeti térfogatának a 10-20%-a közé esik, de ez a rész 20%-ot meg is haladhat, akár 45% vagy afölötti értéket is elérhet és/vagy másik irányban 10%-nál kevesebb is lehet, például 2,5% vagy az alá csökkenhet.
A 10 készülék opcionálisan csatlakozószervet is tartalmazhat, amellyel egy függesztő tartószerelvényhez csatlakoztathatjuk. A bemutatott kiviteli alakoknál ez a tartószerkezet egy 100 rúd lehet, lásd az 1. és
2. ábrát, vagy az ábrákon nem látható függesztőgyűrűként is kiképezhető. A harmadik kiviteli alaknál a csatlakozószerv 25 kampó, amely előnyösen a 20 tartály felső 26 végével egybe van építve. Alternatív kialakításként és az 1b. és 2b. ábrán megfigyelhető módon a csatlakozószerv rugalmas és lényegében hengeres 27 szemet tartalmazhat, amely általában ugyanabból az anyagból készülhet, mint maga a 20 tartály és vagy azzal eleve egybeépítve, vagy megfelelő módon (például ömlesztőhegesztéssel) a 10 készülék felső 26 végéhez van rögzítve.
A 20 tartály megfelelő anyagú két réteg megömlesztéses kötésével alakítható ki, például előre meghatározott illesztések mentén. A 4. ábrán megfigyelhető, hogy két 200 anyagréteg megközelítőleg hosszúkás négyszögletes alakúra vágható, és egymásra helyezhető. A 200 anyagrétegeket ezt követően a szakterületen jól ismert módszerrel megömlesztéses kötéssel összeerősítjük, hogy a két hosszabb oldal kerülete mentén 205 és 206 varratokat, valamint a rövidebb vég kerülete mentén 210 varratokat alakítsunk ki, majd ismét párhuzamosan és attól befelé elhelyezkedve a 20 tartály felső 26 végénél még egy 220 varratot hozzunk létre. A hosszú oldalak menti megömlesztéses hegesztéssel készült 207 és 208 varratok, amelyek a hosszú oldalak mentén, és az egymással párhuzamos rövid végeknél kialakított 210, 220 varratok között húzódnak, levághatok vagy más módon eltávolíthatók, miáltal 27 anyaghurok marad. A 20 tartály alsó 28 végét ugyancsak megömlesztéses kötéssel alakítjuk ki úgy, hogy a 200 anyagrétegek fennmaradó rövid végét két ferde 230 és 240 varrat mentén összeerősítjük, amelyek kölcsönösen egymás felé tartanak a hosszú oldalak 205, 206 varratai felől. Opcionálisan ez a két egymás felé húzódó 230, 240 varrat egy további fúziós
HU 226 908 Β1 hegesztéssel előállított 260 varrattal is levágható, még a találkozási csúcsot megelőzően, mely 260 varrat lényegében a hosszanti oldalak 205, 206 varrataira merőlegesen húzódnak. Mielőtt még a két 200 anyagréteget megömlesztéses hegesztéssel egymáshoz erősítenénk, az említett légbevezető szerveknek, gázkivezető elemeknek, adalékanyag-bevezető elemeknek és ürítőelemeknek megfelelő helyeken merev műanyag 270, 260, 280 és 250 vastagításokat hozhatunk létre, amelyek megfelelő mechanizmus csatlakozási pontokat képeznek a hozzájuk tartozó bemeneti és kimeneti elemek számára.
Az összes bemutatott kiviteli alak esetében a 10 készüléket olyan anyagból vagy anyagokból készítjük, amelyek biológiailag egymással összeférnek, és amelyek lehetővé teszik, hogy a 20 tartályt első használatát megelőzően sterilizálni tudjuk.
Az ugyancsak a találmányunk részét képező telep, amely sejtek és/vagy szövetek ciklusokban történő steril tenyésztésére és kinyerésére szolgáló eldobható készülékekből van összeállítva, az alábbiakban kerül bemutatásra. Előrebocsátjuk, hogy a telepben lévő összes készülék mind felépítésében, mind használatában hasonló a leírásunk előző részében bemutatott 10 készülékhez.
Az 5. ábrára áttérve megfigyelhető, hogy 500 telep több olyan 10 készülékből van összeállítva, amelyeket az ábrán nem látható keretben vagy keretekben a már említett csatlakozóelemek tartanak meg. Az 500 telep jellemzően több csoportra osztható fel, ahol minden egyes csoporthoz egy adott számú 10 készülék tartozik.
Egy előnyös kiviteli alak értelmében a 10 készülékeknek az említett légbevezető szerve az egyes csoportokban össze van kötve egymással. Ez azt jelenti, hogy a csoporthoz tartozó minden egyes 10 készülék légbevezető 74 csöve szabad 170 végződésű
174 gyűjtőcsőhöz csatlakozik, amely aszeptikus
175 csatlakozóval van ellátva. Sterilizált levegőt megfelelő 100 kompresszorral állítjuk elő, amelynek például egy vagy több szűrő formájában kialakított megfelelő 110 sterilizálóberendezése van. A 100 kompresszor 101 szállítóvezetékének végén olyan aszeptikus 176 csatlakozó található, amely általában a
174 gyűjtöcsö szabad végénél felszerelt aszeptikus
175 csatlakozóhoz csatlakoztatható. Ezt a kapcsolatot minden egyes tenyésztési és/vagy ürítési ciklus kezdetén létrehozzuk egy hordozható és steril 380 burkolaton belül, hogy biztosítsuk a steril feltételek fennállását a kapcsolat létrejöttének teljes folyamata alatt. A steril 380 burkolat így egyszerű és viszonylag olcsó csatlakoztatási rendszert biztosít a különböző tápközegek számára, így a levegő, oltóanyag és a sejtek számára a 10 készülékekből összeállított csoporthoz és/vagy csoporttól lényegében steril körülmények között. Hasonlóképpen, minden egyes tenyésztési és/vagy kiürítési ciklus befejezésekor a 175 és 176 csatlakozókat szétválasztjuk a steril 380 burkolatban, a felhasznált eszközöket eltávolítjuk, lehetővé téve a kompresszorvégi 175 csatlakozó összekötését egy új eszközcsoporthoz tartozó 176 csatlakozóhoz. A sterilizált levegőt általában folyamatosan szolgáltatjuk, de ez előre meghatározott adagokban is történhet, az egyes tenyésztési ciklusok alatt.
A bemutatott előnyös kiviteli alak esetében az egyes 10 készülékektől származó felesleges levegőt és/vagy hulladék gázokat 290 gyűjtőcsövön keresztül távolítjuk el a környezetbe, mely 290 gyűjtőcső megfelelő módon az egyes gázkivezető 90 csövekhez van csatlakoztatva. A 290 gyűjtőcső is megfelelő 310 egységet tartalmaz, például egy vagy több szűrőt, amelyek meggátolják, hogy szennyező anyagok jussanak a 10 készülékekbe. Alternatív megoldásként az egyes 10 készülékek gázkivezető 90 csöve külön-külön kivezethető és kapcsolatban állhat a környezettel, előnyösen megfelelő szűrőkön keresztül, amelyek lényegében ugyancsak meggátolják, hogy szennyező anyagok kerüljenek a 10 készülékek belsejébe.
A tápközegeket és az adalék anyagokat egy vagy több 340 tárolótartályban raktározzuk. Például a mikroelemeket, makroelemeket és a vitaminokat külön-külön 340 tárolótartályokban tárolhatjuk, míg az adalék anyagokat, például az antibiotikumokat és gombaölő szereket ugyancsak külön 340 tárolótartályokban helyezhetjük el. 345 szivattyúk vannak minden egyes 340 tárolótartályhoz rendelve, és a 345 szivattyúk teszik lehetővé, hogy a tápközeg minden egyes összetevőjének és/vagy az adalék anyagoknak a kívánt arányú mennyiségeit előre meghatározott és ellenőrzött mennyiségben juttathassuk el 350 statikus keverőbe, amelyen keresztül vizet áramoltatunk - vagy desztillált vizet, vagy megfelelő szűrt és tisztított vizet - egy megfelelő 360 forrásból, célszerűen megfelelő 365 szivattyúk segítségével (lásd az 5. ábrát). A 345 és 365 szivattyúk szállítási teljesítményének a beállítása révén például szabályozni tudjuk a tápközeg-koncentrációt, valamint az egyes 10 készülékekbe bejuttatandó adalék anyagokat. A vízzel összekevert tápközeget és/vagy adalék anyagokat ezután a 350 statikus keverőbői steril körülmények között 310 szűrőn, valamint szabad 390 végén aszeptikus 375 csatlakozót tartalmazó 370 szállítócsövön keresztül továbbítjuk.
A bemutatott előnyös kiviteli alak esetében a 10 készülékek csoportjában minden egyes 10 készülék adalékanyag-bevezető 80 csöve 180 gyűjtőcsőhöz kapcsolódik, mely utóbbi szabad végén egyszerű aszeptikus 376 csatlakozó van felszerelve. Ez az aszeptikus 376 csatlakozó az említett steril 380 burkolaton belül a 370 szállítóvezeték szabad 390 végén található aszeptikus 375 csatlakozóhoz, miáltal lehetővé válik, hogy a telep vagy a csoport minden egyes 10 készüléke el legyen látva megfelelő tápközeggel és adalék anyagokkal. A 10 készülék élettartamának a végén, még annak kidobása előtt az aszeptikus 375 és 376 csatlakozókat szétkapcsoljuk a steril 380 burkolaton belül. Az aszeptikus 375 csatlakozó ezzel készen áll az új 10 készülékekből álló következő sterilizált telep vagy csoport aszeptikus 376 csatlakozójának a csatlakoztatására, azaz készen áll a következő tenyésztési és/vagy kiürítési ciklus megindítására.
HU 226 908 Β1
A steril 380 burkolatot felhasználhatjuk arra is, hogy a 340 tárolótartályokat a telepben lévő 10 készülékek egy adott csoportjának mindegyikéhez csatlakoztassuk, a csoportban lévő 10 készülékek teljes használati élettartama alatt. így, ha a 10 készülékek egy csoportját elláttuk tápközeggel és/vagy adalék anyaggal, a csoport aszeptikus 376 csatlakozóját ideiglenesen aszeptikusán lezárjuk a steril 380 burkolaton belül, amelyet azután a következő 10 készülékcsoporthoz mozgatunk, ahol a közös aszeptikus 376 csatlakozót a 370 szállítóvezeték steril 375 csatlakozójával összeköthetjük, lehetővé téve ezzel, hogy ezen 10 készülékcsoport is ellátható legyen tápközeggel és/vagy adalék anyaggal.
Egy másik lehetséges kiviteli alak esetében az említett hordozható steril 380 burkolatot használhatjuk fel arra, hogy egy előnyösen rugalmas és az említett 350 statikus keverővei összekötött szállítóvezeték szabad 390 végét összekössük a minden egyes 10 készülék adalékanyag-bevezető szervével. A steril 380 burkolatot ezt követően az egyik 10 készüléktől a következő 10 készülékre mozgatjuk, és minden egyes alkalommal a szabad 390 véget összekötjük a következő megfelelő 80 cső bemeneti végével, lehetővé téve ezzel, hogy mindegyik 10 készülékbe bejusson a várt tápközeg. A steril 380 burkolat az aszeptikus csatlakozóelemekkel együtt előnyösen rozsdamentes acélból készül, és a 390 végnél, valamint a 10 készülékek hozzá tartozó 80 csöveinek bemeneténél lehetővé teszi minden egyes 10 készülék könnyű felcsatlakoztatását, valamint azt követő lecsatlakoztatását a 390 végről és ezzel a tápközegforrásról, méghozzá steril körülmények között. A szakterületen számos más módszer és példa ismert, amellyel két csövet kellő módon össze lehet kötni. A 390 végnél, valamint a 80 csőnél megfelelő szűrők vannak elrendezve, annak érdekében, hogy meggátoljuk vagy legalábbis a lehető legkisebbre csökkentsük a 340 tárolótartályok tartalmának a szennyeződési lehetőségét. A steril 380 burkolat automatikusan vagy kézi úton továbbítható 10 készülékről 10 készülékre, és ilyenkor minden egyes 10 készüléket egy megfelelő kezelőszemély csatlakoztat a tápközegforráshoz a steril 380 burkolat használatával, azaz tölti fel a 10 készüléket a megfelelő mennyiségű tápközeggel és/vagy adalék anyaggal, majd választja le ezt követően a steril 380 burkolatot a 10 készülékről, hogy a 380 burkolatot ezt követően a következő 10 készülékhez mozgassa. A 390 vég természetesen nem csupán egyetlen sterilizált 375 csatlakozóhoz, hanem több 375 csatlakozóhoz illeszthető, és ilyen esetben több 10 készüléknek megfelelő 376 csatlakozóval kell rendelkeznie, amelyekkel azok egyidejűleg ráköthetők a tápközegforrásra targonca segítségével.
Minden alkalommal, a 390 vég egy-egy 10 készülékhez vagy készülékcsoporthoz történő csatlakoztatását megelőzően a megfelelő 375, 376 csatlakozókat autoklávban sterilizáljuk.
A találmány szerinti 10 készülékekből összeállított, ugyancsak találmány szerinti telep egy további lehetséges kiviteli alakjánál egyetlen cső vagy több cső (az ábrán nem láthatóak) van a 350 statikus keverőhöz egy vagy megfelelően csoportosított több 10 készülékhez egyidejűleg csatlakoztatva, és az egy vagy több 10 készüléket szállítószalag-rendszer mozgatja az egy vagy több csőhöz és/vagy vissza. A 10 készülék vagy készülékek feltöltését követően a szállítószalag tovább mozog, és lehetővé teszi, hogy egy újabb 10 készülék vagy készülékcsoport kapcsolódhasson a 350 statikus keverőhöz az egy vagy több cső segítségével.
Az előnyös kiviteli alak esetében a csoporthoz tartozó minden egyes 10 készülék ürítőszervei összeköttetésben állnak egymással. Ennek révén az egyes 10 készülékek ürítő 50 csövei szabad 150 véggel ellátott közös 154 ürítő vezetékhez kapcsolódnak, amelynek 150 végén aszeptikus 155 csatlakozó van kiképezve. Az ürítő 50 csövek egy-egy 54 szelepet tartalmazhatnak a korábban leírtak szerint, amellyel lezárják vagy engedélyezik az ürített sejtek áramlását az egyes 10 készülékekből. így például ha azt állapítjuk meg, hogy egy adott csoportból meghatározott számú 10 készülék szennyeződött, míg a többi 10 készülék még szennyezésmentes, akkor az utóbbiakból a sejteket a szennyeződés veszélye nélkül kigyűjthetjük mindaddig, amíg a már szennyezett tartalmú 10 eszközökhöz tartozó 54 szelepek zárva maradnak. A közös vezetékezés ezen túlmenően közös 259 leválasztószelepet tartalmaz az aszeptikus 155 csatlakozó felett, valamint a szennyeződést meggátló eszközök úgy vannak kiképezve, hogy lényegében megakadályozzák a szennyeződések bejutását az ürítőszerveken át az ürítést követően. Az előnyös kiviteli alak esetében a szennyeződést meggátló elemekhez tartozik egy lényegében U alakú 400 folyadékcsapda, amelynek egyik szárán aszeptikus 156 csatlakozó található, másik szára pedig 158 nyílást tartalmaz, amelyen keresztül folyadékkapcsolatban áll egy 590 fogadótartállyal. A mozgatható steril 380 burkolaton belül az aszeptikus 155 és 156 csatlakozók steril körülmények között kapcsolhatók össze, majd az ürítést úgy végezzük, hogy a csoporthoz tartozó, szennyeződéstől mentes összes 10 készülék 54 szelepét megnyitjuk, és megnyitjuk a 259 leválasztószelepet is. A csoportból az ürített sejtek ennek hatására befolynak az 590 fogadótartályba, célszerűen gravitációs úton, de természetesen a szállításhoz megfelelő szivattyút is használhatunk. Miután az ürítés befejeződött, az aszeptikus 155 és 156 csatlakozókat szétválaszthatjuk a steril 380 burkolaton belül, amelyet azután a következő 10 készülékekből álló csoporthoz mozgathatunk, és ennek a csoportnak a megfelelő aszeptikus 155 csatlakozóját összeköthetjük az U alakú 400 folyadékcsapda aszeptikus 156 csatlakozójával, lehetővé téve ezzel a sejtek kiürítését ebből a 10 készülékcsoportból is.
Egy másik lehetséges kiviteli alak esetében a közös 590 fogadótartályt az ábrán nem látható egyetlen cső vagy több cső egyidejűleg összekötheti vagy egy 10 készülékkel vagy egy 10 készülékekből álló csoporttal, és a 10 készüléket vagy készülékeket ilyen esetben szállítószalag-rendszer továbbítja az egy vagy több csőhöz, és onnan vissza. A 10 készülék vagy készülé10
HU 226 908 Β1 kék kiürítését követően a szállítószalag lehetővé teszi, hogy a közös 590 fogadótartályhoz további egy vagy több 10 készüléket csatlakoztassunk az egy vagy több cső révén.
Egy további, ugyancsak előnyös kiviteli alaknál minden egyes 10 készüléket külön-külön tudunk üríteni úgy, hogy az egyes 10 készülékek ürítőszerve tartalmazza a már korábban említett, szennyeződést meggátló elemeket, amelyek annak megakadályozására szolgálnak, hogy szennyeződés jusson a 10 készülék 20 tartályába az ürítőszerven keresztül az ürítést követően. Ennél a kiviteli alaknál a szennyeződést meggátló elemek szintén U alakú 400 folyadékcsapdaként vannak kialakítva, amelynek egyik szára aszeptikus 156 csatlakozót tartalmaz, másik szárán pedig 158 nyílás található, amely folyadékkapcsolatban áll az 590 fogadótartállyal. Az ürítőszerv ehhez igazodóan aszeptikus 55 csatlakozóval rendelkezik, amely a 400 folyadékcsapda aszeptikus 156 csatlakozójához kapcsolódik a mobil 380 burkolaton belül steril körülmények között. Az ürítéshez a 10 készülék 54 szelepét kell megnyitnunk, miután a tenyésztett sejtek célszerűen gravitáció révén átfolynak az 590 fogadótartályba, bár erre a célra egyes esetben megfelelő szivattyút is használhatunk. Miután az ürítést befejeztük, az aszeptikus 55 és 156 csatlakozókat szétválaszthatjuk a steril 380 burkolaton belül, és az utóbbit a következő 10 készülékhez mozgathatjuk; ennek hatására az újabb 10 készülék ürítőszervének aszeptikus 55 csatlakozója válik összeköthetővé az U alakú 400 folyadékcsapda aszeptikus 156 csatlakozójával, és az újabb 10 készülékből tudjuk a tenyésztett sejteket kiüríteni.
Egy másik előnyös kiviteli alaknál az ürítőszervet arra is felhasználhatjuk, hogy egy új tenyésztési és/vagy ürítési ciklus elején oltóanyagot juttassunk be a 10 készülékbe. Ekkor az oltóanyagot a sterilizált tápközeggel olyan alkalmas 20 tartályban keverhetjük össze, amelynek szabad végén aszeptikus csatlakozóval ellátott szállítóvezetéke van, és az említett csatlakozó kapcsolódik a steril 380 burkolaton belül a közös 154 ürítő vezeték aszeptikus 155 csatlakozójához. Az oltóanyagot gravitáció révén, vagy megfelelő szivattyúval juttathatjuk be a csoport minden egyes 10 készülékébe a közös 154 ürítővezetéken keresztül, miután az aszeptikus csatlakozókat leválasztottuk a steril 380 burkolaton belül.
Egy alternatív megoldás értelmében az oltóanyagot az említett adalékanyag-bevezető elemeken keresztül is bejuttathatjuk a 10 készülékekbe, különösen a közös adalék anyag 180 gyűjtőcsövön keresztül, hasonlóképpen ahhoz, ahogy azt ismertettük az ürítőszervek és a közös 154 ürítővezeték kapcsolatában, természetesen a szükséges módosításokkal.
Egy víztisztító rendszer általában deionizált és pirogénmentes vizet szállít koncentrált tápközeget tartalmazó tartályhoz, majd a felhígított tápközeget az adalékanyag-bevezető elemeken keresztül bejuttatjuk a 10 készülékbe. Jellemzően 0,2 pm-es szűrőket telepítünk a szállítóvezetékekbe, valamint az adalékanyagbevezető elemek elé is annak érdekében, hogy minimálisra csökkentsük az egyes 10 készülékek 20 tartályának és a 20 tartályok tartalmának a szennyeződési veszélyét. Alternatív megoldásként vagy ezen túlmenően a veszély csökkentésére visszacsapó szelepeket is használhatunk.
Minden egyes 10 készülékben az első tenyésztési ciklushoz oltóanyagot, jellemzően az adott 10 készülékben tenyésztendő sejttípus mintáját előre összekeverjük egy gőzzel sterilizált tartályban lévő tápközeggel vagy vízzel, majd az ürítőszerveken keresztül bejuttatjuk a 10 készülékbe. A tápközeget ezután az adalékanyag-bevezető szerven átjuttatjuk be a 10 készülékbe, és a rákövetkező ciklusok során csupán a tápközeget és/vagy az adalék anyagokat kell az ismertetett módon a 10 készülékbe bejuttatnunk.
Elegendő mennyiségű sterilizált levegőt levegőkompresszorral szállítunk az egyes 10 készülékekhez több szűrőn keresztül: durva szűrőt használunk a mechanikai részecskék eltávolítására, szárító és páraszűrőt a pára eltávolítására, valamint egy általában 0,2 pm-es finomszűrőt a maradék szennyeződések visszatartására. A légbevezető szervek előtt célszerűen további szűrő elhelyezésével tovább csökkenthetjük a 20 tartály tartalma szennyeződésének a kockázatát.
Mindegyik 10 készüléknél a 20 tartállyal valamilyen kapcsolatban álló összes csatlakozást, azaz a légbevezető szervekhez, az adalékanyag-bevezető szervekhez és előnyösen a gázkivezető szervekhez és az ürítőszervekhez kapcsolódó csatlakozást használat előtt autoklávban sterilizálunk, és a sterilitást végig fenntartjuk a perifériával való összekapcsolás során, például a levegőforrással való kapcsolat során azzal, hogy az összeköttetést a korábban leírtak szerint a steril 380 burkolaton belül valósítjuk meg. Az egyes 10 készülékek hőmérséklet-szabályozását előnyösen a célnak megfelelő légkondicionáló berendezéssel biztosítjuk. Amennyiben szükséges, a 10 készülékek megvilágítását a 10 készülékek között megfelelő módon elrendezett és a sejtnövekedést serkentő fénycső világítással oldjuk meg.
Az egyes 10 készülékek minden egyes tenyésztési ciklusa során a 20 tartályok tartalmát általában aeráljuk és keverjük 7-14 napig, vagy azt meghaladó ideig, szabályozott és ellenőrzött hőmérsékleti és fényviszonyok között.
Az egyes 10 készülékek tenyésztési ciklusának a végén a hozzá tartozó ürítőszervet általában egy előre sterilizált környezetben csatlakoztatjuk megfelelő csatlakozók segítségével, amelyeket az összeköttetést megelőzően és alatt is sterilen tartunk a leírtak szerint. Ezt követően végrehajtjuk az ürítést, amelynek során megközelítőleg 2,5-45%-nyi mennyiséget hagyunk a 20 tartályban, ez a mennyiség jellemzően 10-20% közötti értékű, és az ezt alkotó sejtek és/vagy szövetek oltóanyagként szolgálnak a következő ciklus számára.
Az ürített sejteket és/vagy szöveteket ezt követően szükség szerint száríthatjuk vagy kivonhatjuk.
Találmányunkat a leírás végén egy példa segítségével igyekszünk részletesebben is bemutatni, amely
HU 226 908 Β1 az igénypontokban meghatározott oltalmi körbe esik, de azt nem határozza meg.
Példa: VinCa sejtek tenyésztésével
Tíz bioreaktorból álló csoport mindegyik bioreaktora a találmány szerinti, ismertetett 10 készülékből áll, és mindegyiknek 0,1 mm falvastagságú, 200 mm átmérőjű, 1,2 m magasságú polietilén-nejlon kopolimerből készített 20 tartálya van, és d 1 =5 cm távolságban (magasságban) a légbevezető szervek számára, d2=25 cm magasságban az ürítőszervek számára, d3=68 cm magasságban az adalékanyag-bevezető szervek számára, és d4=90 cm magasságban a gázkivezető szervek számára 30 mm-es csatlakozási lehetőségekkel rendelkezik, és körülbelül 10 literes effektív feltölthető térfogatú. A bioreaktorokat a szerelvényekkel együtt 2,5 mRad-os gamma-besugárzással sterilizáltuk.
Kilenc liter Schenk & Hildebrandt-féle ásványi-vitaminos tápközeget, klór-fenoxi-ecetsav és 2,4-diklórfenoxi-ecetsav mindegyikéből 2 mg/l-nyit, 0,2 mg/l-nyi kinetint, 3% szacharózt és a V24 Catharantus roseus (VinCa) sejtből kezdeti oltóanyagként 900 ml kiszerelt mennyiséget juttattunk be minden egyes bioreaktorba. A tápközeg felülete fölötti levegő térfogata 3 I volt. Ezután 1,5 l/min áramlási térfogatú steril levegős aerálást hajtottunk végre, ahol a steril levegőt a 20 tartály fenekétől 1 cm-re elhelyezett 4 mm-es nyíláson keresztül juttattuk be.
A bioreaktorokat szabályozott hőmérsékletű (25 °C) helyiségben helyeztük el, és a tenyésztést 10 napon át folytattuk, amíg a térfogat megközelítőleg 7,5 l-re nőtt (ez a teljes térfogat 75%-a, a logaritmikus fázisban ez 2 napos megkettőződési arányt jelent). Ebben az állapotban a sejteket kiürítettük, melynek során az ürítőszerven keresztül 9 I tápközeget és sejtet távolítottunk el, és az adalékanyag-bevezető szerven keresztül 9 I friss steril tápközeget juttattunk be, az eredetivel egyező adalék anyagokkal együtt. Ezt követően 10 napos időközönként hat további cikluson át ürítettük a sejteket, majd ezt követően befejeztük a tenyésztést.
Az eljárás eredménye a hét tíznapos periódus után minden egyes 10 I kapacitású bioreaktorból 6,5 kp friss sejt (0,5 kp száraz súly) volt kinyerhető. Ezek a sejtek teljes alkaloidtartalma 0,6% volt, ugyanannyi, mint a kiinduláskor.
Jóllehet leírásunkban a találmánynak csupán néhány, általunk előnyösnek tartott részletére tudtunk kitérni, a találmány, valamint az igénypontokban megfogalmazott oltalmi kör nem korlátozódik a leírás és a rajz alapján megismerhető kiviteli alakokra.
Claims (40)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Egyszer használatos készülék sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére, amelynek felső véggel és alsó véggel rendelkező, sterilizálható átlátszó és/vagy áttetsző egyszer használatos, legalább részben tenyésztéshez alkalmas steril biológiai sejtés/vagy szövettenyésztő tápközeggel és/vagy biológiailag steril oltóanyaggal és/vagy steril levegővel és/vagy egyéb szükséges steril adalék anyaggal feltölthető tartálya van, mely tartálynak felesleges levegőt és/vagy hulladék gázokat a tartályból eltávolító gázkivezető szerve, valamint oltóanyagot és/vagy tenyésztő tápközeget és/vagy adalék anyagot a tartályba bevezető adalékanyag-bevezető szerve van, azzal jellemezve, hogy a sejteket és/vagy szövetet tartalmazó tápközeg egy részének ürítését lehetővé tevő, és ezzel a készülék (10) folyamatos használatát legalább egy rákövetkező tenyésztési és ürítési ciklus erejéig lehetővé tevő, áramlásszabályozó eszközt tartalmazó, újra felhasználható ürítőszervvel van ellátva, továbbá az egy következő tenyésztési és ürítési ciklusban oltószerként alkalmazható, sejteket és/vagy szöveteket tartalmazó tápközeg maradék részét továbbra is magában foglaló tartálya (20) van.
- 2. Az 1. igénypont szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy steril levegőt buborékok (70) formájában a tenyésztő tápközegbe első bevezető és levegőforráshoz kapcsolódó nyíláson (72) át bejuttató légbevezető szerve van.
- 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy az ürítőszerv szennyeződésnek az ürítőszerven keresztül a tartályba (20) való bejutását lényegében meggátló eszköze van.
- 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a tartály (20) nem merev anyagú.
- 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a tartály (20) nem merev műanyagból készült.
- 6. Az 5. igénypont szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a műanyag polietilént, polikarbonátot, polietilén-poliamid kopolimert, poli(vinil-klorid)-ot és etilén-vinil-acetát-polimert tartalmazó csoportból van kiválasztva.
- 7. Az 5. vagy 6. igénypont szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a tartály (20) több anyagrétegből (200) van összeállítva.
- 8. Az 5-7. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a tartály (20) két anyagréteg (200) előre meghatározott varratok (205, 206) mentén történő megömlesztésével van kialakítva.
- 9. Az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a légbevezetö szerv a levegőt bevezető nyílástól (72) a tartály (20) belsejébe nyúló, vagy annak alja tartományában végződő légbevezetö csövet (74) tartalmaz.
- 10. Az 1-9. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a levegőbuborék (70) 1-10 mm tartományba eső átlagos átmérőjű.
- 11. Az 1-10. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a levegőbuborék (70) 4 mm körüli átlagos átmérőjű.
- 12. Az 1-11. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a tartály (20) szennyeződéseknek gázkivezetö szervén keresztül a tartálybaHU 226 908 Β1 (20) jutását lényegében megakadályozó szűrőt tartalmaz a gázkivezetö szervén felszerelve.
- 13. Az 1-12. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a tartály (20) szennyeződéseknek adalékanyag-bevezető szervén keresztül a tartályba (20) jutását lényegében megakadályozó szűrőt (84) tartalmaz a adalékanyag-bevezető szervén felszerelve.
- 14. Az 1-13. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a szennyeződést meggátló eszköz U alakú folyadékcsapda (300), amelynek egyik szára aszeptikus csatlakozóelemekkel az ürítőszerv külső kimenetéhez van aszeptikusán csatlakoztatva.
- 15. Az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy az ürítőszerv a tartály (20) alsó végének (28) alján van elrendezve.
- 16. Az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy az ürítőszerv a tartály (20) alsó végének (28) a szomszédságában van elrendezve úgy, hogy minden egyes ürítőciklus végén a sejteket és/vagy szöveteket tartalmazó tápközegmaradvány automatikusan a tartály (20) alsó végében (28) marad az ürítőszervvel azonos magasságban húzódó szintig.
- 17. Az 1-16. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a sejteket és/vagy szöveteket tartalmazó tápközegmaradvány a tenyésztő tápközegből és az oltóanyagból álló eredeti térfogat 2,5-45%-a közötti tartományba, előnyösen 10-20% közötti tartományba eső részét képezi.
- 18. Az 1-7. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a tartály (20) alsó vége (28) lényegében domború kiképzésű.
- 19. Az 1-17. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a tartály (20) alsó vége (28) lényegében csonka kúp alakú.
- 20. Az 1-19. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a tartály (20) 5-50 I tartományba eső belső feltölthető térfogattal (30) rendelkezik.
- 21. Az 1-20. igénypontok bármelyike szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy tartószerkezeten felerősítő rögzítőelemekkel van ellátva.
- 22. A 21. igénypont szerinti készülék, azzal jellemezve, hogy a rögzítőelemeket a tartály (20) felső végével (26) előnyösen egybeépítetten kiképzett szem (27) alkotja.
- 23. Telep sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére, azzal jellemezve, hogy legalább két, az 1-22. igénypontok bármelyike szerinti készülékből van összeállítva.
- 24. A 23. igénypont szerinti telep, azzal jellemezve, hogy a készülékeket (10) azok rögzítőeszköze segítségével tartószerkezet tartja.
- 25. A 23. vagy 24. igénypont szerinti telep, azzal jellemezve, hogy mindegyik készülék (10) gázkivezető szerve abban az esetben szennyeződéseknek a készülékekbe (10) jutását meggátló eszközzel ellátott közös gázkivezető gyűjtőcsőhöz (290) van csatlakoztatva.
- 26. A 25. igénypont szerinti telep, azzal jellemezve, hogy a szennyeződések bejutását meggátló szerv szűrőt tartalmaz.
- 27. A 23-26. igénypontok bármelyike szerinti telep, azzal jellemezve, hogy a készülékek (10) adalékanyagbevezető szerve adott esetben aszeptikus csatlakozóval ellátott szabad végű közös gyűjtőcsővel áll kapcsolatban.
- 28. A 27. igénypont szerinti telep, azzal jellemezve, hogy a gyűjtőcső szabad vége tápközeg- és/vagy adalékanyag-forráshoz van csatlakoztatva.
- 29. A 23-28. igénypontok bármelyike szerinti telep, azzal jellemezve, hogy a készülékek (10) ürítőszerve adott esetben aszeptikus csatlakozóval ellátott szabad végű közös gyűjtőcsőhöz van csatlakoztatva.
- 30. A 29. igénypont szerinti telep, azzal jellemezve, hogy a tartályba (20) a közös ürítő gyűjtőcsövön át szennyeződések bejutását megakadályozó szennyeződést meggátló eszközt tartalmaz.
- 31. A 30. igénypont szerinti telep, azzal jellemezve, hogy a szennyeződést meggátló szerv U alakú folyadékcsapda (400), amelynek egyik szára nyílást (158) tartalmaz, másik szára aszeptikus csatlakozókon keresztül közösítve van a közös ürítő vezeték (154) szabad végével.
- 32. A 31. igénypont szerinti telep, azzal jellemezve, hogy az U alakú folyadékcsapda (400) szabad vége fogadótartályhoz (590) csatlakozik.
- 33. A 23-32. igénypontok bármelyike szerinti telep, azzal jellemezve, hogy a készülékek (10) légbevezető szerve adott esetben aszeptikus csatlakozóval ellátott szabad végű közös légbevezető gyűjtőcsőhöz (174) van csatlakoztatva.
- 34. A 33. igénypont szerinti telep, azzal jellemezve, hogy a gyűjtőcső (174) szabad vége levegőforráshoz van csatlakoztatva.
- 35. Eljárás sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére, azzal jellemezve, hogya) az 1-22. igénypontok bármelyike szerinti készülék ürítőszervén keresztül biológiailag semleges oltóanyagot juttatunk be,b) a készülék (10) adalékanyag-bevezető szervén keresztül steril tenyésztő tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatunk be,c) adott esetben a készülék (10) tartályát (20) kívülről megvilágítjuk,d) a sejteket és/vagy szöveteket a táptalajban kívánt hozam eléréséig tenyésztjük,e) a tartályból (20) a felesleges levegőt és/vagy hulladék gázokat folyamatosan eltávolítjuk a készülék (10) gázkivezető szervén keresztül,f) a tartályban (20) előállított sejtek és/vagy szövetek szennyeződését és/vagy minőségét megvizsgáljuk, és ha szennyeződést találunk, vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek gyenge minőségűek, a készüléket (10) tartalmával együtt hulladéknak minősítve eldobjuk, ha nem találunk szennyeződést,HU 226 908 Β1 vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek jó minőségűek, akkor a soron következő g) lépést végrehajtjuk,g) a sejteket és/vagy szövetet tartalmazó tápközeg meghatározott részét ürítjük, maradék részét a tartályban (20) hagyjuk, amelyet egy következő tenyésztési és ürítési ciklus szamára oltóanyagként hasznosítunk,h) a következő tenyésztési és ürítési ciklushoz az adalék anyag bevezetőszervén keresztül steril tenyésztési tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatunk be,i) a fenti c), d), e), f), g) és h) lépéseket mindaddig ismételjük, amíg a megvizsgált sejtekben és/vagy szövetekben szennyeződést találunk vagy azokat gyenge minőségűnek minősítjük, és a készüléket (10) tartalmával együtt eldobjuk.
- 36. A 35. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a készülék (10) légbevezető nyílásán (72) keresztül steril levegőt juttatunk be a tartályba (20) buborékok (70) formájában az első és a rákövetkező ciklusok során.
- 37. A 36. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a steril levegőt legalább egy tenyésztési cikluson keresztül folyamatosan juttatjuk be.
- 38. A 36. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a steril levegőt legalább egy tenyésztési cikluson keresztül adagokban juttatjuk be.
- 39. Eljárás, sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére, azzal jellemezve, hogya) a 31. igénypont szerinti telepet (500) alkotó készülék (10) közös ürítővezetékén (154) keresztül biológiailag semleges oltóanyagot juttatunk be,b) a készülék (10) közös adalékanyag-bevezető gyűjtőcsövén (180) keresztül steril tenyésztő tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatunk be,c) adott esetben a készülék (10) tartályát (20) kívülről megvilágítjuk,d) a sejteket és/vagy szöveteket a táptalajban kívánt hozam eléréséig tenyésztjük,e) a tartályból (20) a felesleges levegőt és/vagy hulladék gázokat folyamatosan eltávolítjuk a készülék (10) közös gázkivezető gyűjtőcsövén (290) keresztül,f) a tartályokban (20) előállított sejtek és/vagy szövetek szennyeződését és/vagy minőségét megvizsgáljuk, és ha valamelyik tartályban (10) szennyeződést találunk, vagy az abban előállított sejtek és/vagy szövetek gyenge minőségűek, a tartályt (20) tartalmazó készülék (10) ürítőszervét lezárjuk és ezzel meggátoljuk a szennyeződés bejutását a többi készülékébe, és ha a telep (500) összes készülékében (10) szennyeződést találunk, vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek gyenge minőségűek, az összes ilyen készüléket (10) tartalmával együtt hulladéknak minősítve eldobjuk, és ha nem találunk szennyeződést, vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek jó minőségűek, akkor a készüléket üríthetőnek minősítjük és a soron következő g) lépést végrehajtjuk,g) az f) lépés minden egyes üríthető készülékénél (10) a sejteket és/vagy szövetet tartalmazó tápközeg meghatározott részét közös ürítő vezetéken (154) és a szennyeződést meggátló szerven át fogadótartályba (590) ürítjük, maradék részét a tartályban (20) hagyjuk, amelyet egy következő tenyésztési és ürítési ciklus számára oltóanyagként hasznosítunk,h) a következő tenyésztési és ürítési ciklushoz az adalék anyag közös bevezető gyűjtőcsövön keresztül steril tenyésztési tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatunk be,i) a fenti c), d), e), f), g) és h) lépéseket mindaddig ismételjük, amíg a megvizsgált sejtekben és/vagy szövetekben szennyeződést találunk vagy azokat gyenge minőségűnek minősítjük a telep (500) összes készülékében (10), minek következtében a szennyeződést meggátló szervet a közös ürítővezetékről (154) leválasztjuk és a készülékeket (10) tartalmukkal együtt eldobjuk.
- 40. Eljárás sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történő, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére, azzal jellemezve, hogya) a 34. igénypont szerinti telepet alkotó készülékek (10) közös ürítő vezetékén (154) keresztül biológiailag semleges oltóanyagot juttatunk be,b) a készülék (10) közös adalékanyag-bevezető gyűjtőcsövén (180) keresztül steril tenyésztő tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatunk be,c) a készülék (10) közös légbevezető gyűjtőcsövén (174) keresztül steril levegőt juttatunk be,d) adott esetben a készülék (10) tartályát (20) kívülről megvilágítjuk,e) a sejteket és/vagy szöveteket a táptalajban kívánt hozam eléréséig tenyésztjük,f) a tartályból (20) a felesleges levegőt és/vagy hulladék gázokat folyamatosan eltávolítjuk a készülék (10) közös gázkivezető gyűjtőcsövén (290) keresztül,g) a tartályokban (20) előállított sejtek és/vagy szövetek szennyeződését és/vagy minőségét megvizsgáljuk, és ha valamelyik tartályban (10) szennyeződést találunk, vagy az abban előállított sejtek és/vagy szövetek gyenge minőségűek, a tartályt (20) tartalmazó készülék (10) ürítőszervét lezárjuk és ezzel meggátoljuk a szennyeződés bejutását a többi készülékébe, és ha a telep (500) összes készülékében (10) szennyeződést találunk, vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek gyenge minőségűek, az összes ilyen készüléket (10) tartalmával együtt hulladéknak minősítve eldobjuk, és ha nem találunk szennyeződést, vagy az előállított sejtek és/vagy szövetek jó minőségűek, akkor a készüléket üríthetőnek minősítjük és a soron következő h) lépést végrehajtjuk,h) a g) lépés minden egyes üríthető készülékénél (10) a sejteket és/vagy szövetet tartalmazó tápközeg meghatározott részét közös ürítővezetéken (154) és a szennyeződést meggátló szerven át fogadótartályba (590) ürítjük, maradék részét a tartályban (20) hagyjuk, amelyet egy következő tenyésztési és ürítési ciklus számára oltóanyagként hasznosítunk,HU 226 908 Β1i) a következő tenyésztési és ürítési ciklushoz az adalék anyag közös bevezető gyűjtőcsövön (180) keresztül steril tenyésztési tápközeget és/vagy steril adalék anyagot juttatunk be,j) a fenti c), d), e), f), g), h) és i) lépéseket mindaddig 5 ismételjük, amíg a megvizsgált sejtekben és/vagy szövetekben szennyeződést találunk vagy azokat gyenge minőségűnek minősítjük a telep (500) összes készülékében (10), minek következtében a szennyeződést meggátló szervet a közös ürítővezetékről (154) leválasztjuk és a készülékeket (10) tartalmukkal együtt eldobjuk.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
IL11931096A IL119310A (en) | 1996-09-26 | 1996-09-26 | Cell/tissue culturing device and method |
PCT/IL1997/000316 WO1998013469A1 (en) | 1996-09-26 | 1997-09-26 | Cell/tissue culturing device and method |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HUP9904529A2 HUP9904529A2 (hu) | 2000-04-28 |
HUP9904529A3 HUP9904529A3 (en) | 2001-07-30 |
HU226908B1 true HU226908B1 (hu) | 2010-03-01 |
Family
ID=11069322
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU9904529A HU226908B1 (hu) | 1996-09-26 | 1997-09-26 | Egyszer használatos készülék, telep és eljárás sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történõ, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US6391638B1 (hu) |
EP (1) | EP0938544B1 (hu) |
JP (1) | JP3987121B2 (hu) |
AT (1) | ATE231912T1 (hu) |
AU (1) | AU4318097A (hu) |
CA (1) | CA2266851C (hu) |
CZ (1) | CZ298148B6 (hu) |
DE (1) | DE69718812T2 (hu) |
DK (1) | DK0938544T3 (hu) |
ES (1) | ES2191851T3 (hu) |
HK (1) | HK1023361A1 (hu) |
HU (1) | HU226908B1 (hu) |
IL (1) | IL119310A (hu) |
PL (1) | PL190829B1 (hu) |
WO (1) | WO1998013469A1 (hu) |
Families Citing this family (102)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20050032211A1 (en) * | 1996-09-26 | 2005-02-10 | Metabogal Ltd. | Cell/tissue culturing device, system and method |
IL155588A0 (en) * | 2003-04-27 | 2003-11-23 | Metabogal Ltd | Methods for expression of enzymatically active recombinant lysosomal enzymes in transgenic plant root cells and vectors used thereby |
FR2781202B1 (fr) * | 1998-07-16 | 2001-01-12 | Stedim Sa | Poches pour produits fluides bio-pharmaceutiques |
GB9915874D0 (en) * | 1999-07-08 | 1999-09-08 | Biofence Ltd | Microorganism culture |
EP2284253B2 (de) * | 1999-09-08 | 2020-05-27 | Levitronix Technologies, LLC | Bioreaktor |
US7086778B2 (en) * | 2000-10-09 | 2006-08-08 | Levtech, Inc. | System using a levitating, rotating pumping or mixing element and related methods |
US6635441B2 (en) * | 2001-02-08 | 2003-10-21 | Irm, Llc | Multi-sample fermentor and method of using same |
US20030100945A1 (en) | 2001-11-23 | 2003-05-29 | Mindguard Ltd. | Implantable intraluminal device and method of using same in treating aneurysms |
JP4398125B2 (ja) * | 2001-12-05 | 2010-01-13 | 高木産業株式会社 | 細胞・組織培養装置 |
US7168459B2 (en) * | 2002-04-12 | 2007-01-30 | Hynetics Llc | Feed bags and methods of use |
IL166340A0 (en) * | 2002-07-18 | 2006-01-16 | Kemire Phosphates Pty Ltd | Proliferation and delivery apparatus |
MXPA05000816A (es) | 2002-07-19 | 2005-04-28 | Baxter Int | Sistemas y metodos para realizar dialisis peritoneal. |
US7951557B2 (en) | 2003-04-27 | 2011-05-31 | Protalix Ltd. | Human lysosomal proteins from plant cell culture |
US20100196345A1 (en) * | 2003-04-27 | 2010-08-05 | Protalix | Production of high mannose proteins in plant culture |
FR2854901B1 (fr) * | 2003-05-13 | 2006-05-26 | Rhodia Chimie Sa | Procede de preparation d'une suspension de micro-organismes |
US20070113474A1 (en) * | 2003-05-30 | 2007-05-24 | Biolex, Inc. | Bioreactor for growing biological materials supported on a liquid surface |
US7176024B2 (en) * | 2003-05-30 | 2007-02-13 | Biolex, Inc. | Bioreactor for growing biological materials supported on a liquid surface |
WO2005006838A2 (en) * | 2003-07-21 | 2005-01-27 | Ben-Gurion University Of The Negev | Flat panel photobioreactor |
US8206973B2 (en) * | 2003-09-04 | 2012-06-26 | Gotohti.Com Inc | Automated biological growth and dispensing system |
WO2005044851A1 (en) | 2003-11-06 | 2005-05-19 | Compugen Ltd. | Variants of human glycoprotein hormone alpha chain: compositions and uses thereof |
EP1701780B8 (en) | 2004-01-07 | 2014-09-24 | Pall Technology UK limited | Bioprocessing vessel with integral sparger, and method of its manufacture |
US7875448B2 (en) * | 2004-01-12 | 2011-01-25 | Single Use Brx, Llc | Bioreactor systems and disposable bioreactor |
GB0410118D0 (en) * | 2004-05-06 | 2004-06-09 | Glaxo Group Ltd | Novel bioreactor |
CN101001945B (zh) | 2004-06-04 | 2012-02-08 | 艾克塞勒雷克斯公司 | 一次性生物反应器系统及方法 |
JP4570032B2 (ja) * | 2004-07-12 | 2010-10-27 | 応用地質株式会社 | フレキシブル培養バッグを用いる嫌気培養試験装置 |
US8603805B2 (en) | 2005-04-22 | 2013-12-10 | Hyclone Laboratories, Inc. | Gas spargers and related container systems |
WO2006138143A1 (en) * | 2005-06-15 | 2006-12-28 | Amprotein Corporation | Suspension culture vessels |
JP2008543307A (ja) * | 2005-06-15 | 2008-12-04 | アンプロテイン コーポレイション | 懸濁培養用容器 |
US7628528B2 (en) * | 2005-10-26 | 2009-12-08 | PRS Biotech, Inc. | Pneumatic bioreactor |
US8790913B2 (en) * | 2005-10-26 | 2014-07-29 | Pbs Biotech, Inc. | Methods of using pneumatic bioreactors |
US20090047722A1 (en) * | 2005-12-09 | 2009-02-19 | Bionavitas, Inc. | Systems, devices, and methods for biomass production |
GB2433266A (en) | 2005-12-16 | 2007-06-20 | Kevin Andrew Auton | Cell culture vessel |
US8198076B2 (en) * | 2006-02-21 | 2012-06-12 | The Arizona Board Of Regents, A Body Corporate Acting On Behalf Of Arizona State University | Photobioreactor and uses therefor |
JP4986659B2 (ja) * | 2006-03-23 | 2012-07-25 | 藤森工業株式会社 | 培養袋及び培養器 |
DE102006018824A1 (de) | 2006-04-22 | 2007-10-25 | Bayer Technology Services Gmbh | Einweg-Bioreaktor |
DE102006022307A1 (de) * | 2006-05-11 | 2007-11-15 | Respironics Novametrix, LLC, Wallingford | Einwegbioreaktor mit Sensoranordnung |
CN101460605B (zh) * | 2006-05-13 | 2017-09-08 | Atmi有限责任公司 | 一次性生物反应器 |
WO2007142664A1 (en) * | 2006-06-08 | 2007-12-13 | Amprotein Corporation | A method to increase dissolved oxygen in a culture vessel |
US9512392B2 (en) * | 2006-06-08 | 2016-12-06 | Zhejiang Jinyishengshi Bioengineering Co., Ltd | Method to increase dissolved oxygen in a culture vessel |
JP5254226B2 (ja) * | 2006-07-14 | 2013-08-07 | エクセレレックス インク. | 環境保護用収容システム |
WO2008021990A2 (en) * | 2006-08-10 | 2008-02-21 | Barnes Allen C | Portable biological testing device and method |
US10753927B2 (en) | 2006-09-22 | 2020-08-25 | ALERE TECHNOLOGIES GmbH | Methods for detecting an analyte |
US20080131960A1 (en) * | 2006-11-15 | 2008-06-05 | Millipore Corporation | Self standing bioreactor construction |
DE102006062634A1 (de) * | 2006-12-23 | 2008-06-26 | Stiftung Alfred-Wegener-Institut für Polar- und Meeresforschung Stiftung des öffentlichen Rechts | Kulturvorrichtung für aquatische Organismen |
US20100028990A1 (en) * | 2007-02-15 | 2010-02-04 | Broadley-James Corporation | Sterile bioreactor bag with integrated drive unit |
WO2008101127A2 (en) * | 2007-02-15 | 2008-08-21 | Broadley-James Corporation | Bioreactor jacket |
WO2008131019A1 (en) * | 2007-04-20 | 2008-10-30 | Bionavitas, Inc. | Systems, devices, and, methods for releasing biomass cell components |
US7713730B2 (en) | 2007-04-24 | 2010-05-11 | Pbs Biotech, Inc. | Pneumatic bioreactor |
KR101489014B1 (ko) * | 2007-04-27 | 2015-02-02 | 도요세이칸 그룹 홀딩스 가부시키가이샤 | 세포배양장치, 세포배양시스템 및 세포배양방법 |
EP2150608B1 (en) * | 2007-05-07 | 2017-11-29 | Protalix Ltd. | Large scale disposable bioreactor |
GB2450337B (en) * | 2007-06-19 | 2009-06-17 | Cellexus Biosystems Plc | Cell culture and mixing vessel |
DK2169054T3 (en) * | 2007-07-03 | 2016-03-07 | Idemitsu Kosan Co | A vaccine against edema disease in swine |
WO2009018498A2 (en) * | 2007-08-01 | 2009-02-05 | Bionavitas, Inc. | Illumination systems, devices, and methods for biomass production |
WO2009024977A2 (en) | 2007-08-20 | 2009-02-26 | Protalix Ltd. | Saccharide-containing protein conjugates and uses thereof |
BE1017763A5 (nl) * | 2007-09-24 | 2009-06-02 | Proviron Holding | Bioreactor. |
US8444587B2 (en) | 2007-10-01 | 2013-05-21 | Baxter International Inc. | Fluid and air handling in blood and dialysis circuits |
US7892331B2 (en) * | 2007-10-01 | 2011-02-22 | Baxter International Inc. | Dialysis systems having air separation chambers with internal structures to enhance air removal |
US7871462B2 (en) * | 2007-10-01 | 2011-01-18 | Baxter International Inc. | Dialysis systems having air separation chambers with internal structures to enhance air removal |
US7892332B2 (en) * | 2007-10-01 | 2011-02-22 | Baxter International Inc. | Dialysis systems having air traps with internal structures to enhance air removal |
US20090090022A1 (en) * | 2007-10-09 | 2009-04-09 | Hememics Biotechnologies, Inc. | Desiccation Chamber and Methods for Drying Biological Materials |
US8123947B2 (en) * | 2007-10-22 | 2012-02-28 | Baxter International Inc. | Priming and air removal systems and methods for dialysis |
US8114276B2 (en) | 2007-10-24 | 2012-02-14 | Baxter International Inc. | Personal hemodialysis system |
US20090269849A1 (en) * | 2008-04-25 | 2009-10-29 | Pbs Biotech, Inc. | Bioreactor Apparatus |
US8535936B2 (en) * | 2008-06-30 | 2013-09-17 | Twistaferm | Vessels for mixing bioprocessing materials |
US8057679B2 (en) | 2008-07-09 | 2011-11-15 | Baxter International Inc. | Dialysis system having trending and alert generation |
EP2364152A4 (en) * | 2008-11-03 | 2013-02-13 | Univ Johns Hopkins | METHOD FOR PRODUCING AND USING MARKINFILTRATING LYMPHOCYTES (MILS) |
DE102009005962A1 (de) | 2009-01-23 | 2010-07-29 | Bayer Technology Services Gmbh | Begasungssystem |
WO2010108091A2 (en) * | 2009-03-20 | 2010-09-23 | Pbs Biotech, Inc. | Automatable aseptic sample withdrawal system |
DE102009028059A1 (de) | 2009-07-28 | 2011-02-10 | Wacker Chemie Ag | Verfahren zur Kultivierung von phototrophen Organismen |
WO2011061736A1 (en) | 2009-11-17 | 2011-05-26 | Protalix Ltd. | Alkaline alpha galactosidase for the treatment of fabry disease |
US9194011B2 (en) | 2009-11-17 | 2015-11-24 | Protalix Ltd. | Stabilized alpha-galactosidase and uses thereof |
US8382711B2 (en) | 2010-12-29 | 2013-02-26 | Baxter International Inc. | Intravenous pumping air management systems and methods |
JP5913372B2 (ja) | 2011-01-20 | 2016-04-27 | プロタリクス リミテッド | 植物および植物細胞におけるα−ガラクトシダーゼの発現のための核酸発現構築物 |
US20140322804A1 (en) * | 2011-03-31 | 2014-10-30 | Sabin Boily | Photobioreactors and culture bags for use therewith |
US9376655B2 (en) | 2011-09-29 | 2016-06-28 | Life Technologies Corporation | Filter systems for separating microcarriers from cell culture solutions |
US9643133B2 (en) | 2011-09-30 | 2017-05-09 | Life Technologies Corporation | Container with film sparger |
US9603906B2 (en) | 2012-02-01 | 2017-03-28 | Protalix Ltd. | Inhalable liquid formulations of DNase I |
WO2013121405A1 (en) | 2012-02-19 | 2013-08-22 | Protalix Ltd. | Oral unit dosage forms and uses of same for the treatment of gaucher disease |
AU2013262485B2 (en) | 2012-05-18 | 2017-12-14 | Wilson Wolf Manufacturing, LLC | Improved methods of cell culture for adoptive cell therapy |
DE102012010155B4 (de) * | 2012-05-24 | 2015-06-11 | Pan-Biotech Gmbh | Zellkulturbehälter für den Einmalgebrauch |
US20140099700A1 (en) * | 2012-10-04 | 2014-04-10 | Energaia, Inc. | Apparatus and system for bioreactor cultivating microorganisms and reducing carbon dioxide |
WO2014074770A2 (en) | 2012-11-09 | 2014-05-15 | Heliae Development, Llc | Balanced mixotrophy methods |
WO2014074772A1 (en) | 2012-11-09 | 2014-05-15 | Heliae Development, Llc | Mixotrophic, phototrophic, and heterotrophic combination methods and systems |
BR112015021708A2 (pt) | 2013-03-06 | 2017-08-29 | Protalix Ltd | Inibidor de polipetídeo do tnfa, polinucleotídeo isolado, estrutura de expressão de ácido nucleico, célula de planta, composição farmacêutica e método de produção de um inibidor de polipeptídeo do tnfa |
WO2015091455A1 (en) * | 2013-12-17 | 2015-06-25 | Dpx Holdings B.V. | Bioreactor |
JP6311306B2 (ja) * | 2013-12-26 | 2018-04-18 | 株式会社Ihi | 細胞回収装置及び細胞培養システム |
WO2015118547A1 (en) | 2014-02-10 | 2015-08-13 | Protalix Ltd. | Method of maintaining disease stability in a subject having gaucher's disease |
US9079690B1 (en) | 2014-06-26 | 2015-07-14 | Advanced Scientifics, Inc. | Freezer bag, storage system, and method of freezing |
DE102014111913A1 (de) | 2014-08-20 | 2016-02-25 | Best Vitality International Ltd. | Verfahren zum Gewinnen von Phytoplankton |
US10000551B2 (en) | 2014-09-11 | 2018-06-19 | Protalix Ltd. | Chimeric polypeptides, polynucleotides encoding same, cells expressing same and methods of producing same |
US9486590B2 (en) | 2014-09-29 | 2016-11-08 | Fenwal, Inc. | Automatic purging of air from a fluid processing system |
KR102549261B1 (ko) | 2015-06-25 | 2023-06-28 | 감브로 룬디아 아베 | 분산형 데이터베이스를 갖는 의료 디바이스 시스템 및 방법 |
US10625009B2 (en) | 2016-02-17 | 2020-04-21 | Baxter International Inc. | Airtrap, system and method for removing microbubbles from a fluid stream |
US10589197B2 (en) | 2016-12-01 | 2020-03-17 | Life Technologies Corporation | Microcarrier filter bag assemblies and methods of use |
BR112019012719A2 (pt) | 2016-12-21 | 2019-11-26 | Gambro Lundia Ab | sistema de dispositivo médico incluindo infraestrutura de tecnologia de informação tendo domínio de agrupamento seguro suportando domínio externo |
DE102017107423A1 (de) | 2017-04-06 | 2018-10-11 | Agriculture New Energy Gmbh | Kultiviereinrichtung sowie Verfahren zum Gewinnen von Phytoplankton |
DK3502229T3 (da) * | 2017-12-22 | 2022-08-08 | Evologic Tech Gmbh | Inokuleringsbeholder og bioreaktor til hårrodskulturer |
KR102041088B1 (ko) * | 2018-02-19 | 2019-11-06 | (주)마이크로디지탈 | 일회용 세포 배양백 |
US20220002653A1 (en) * | 2018-11-07 | 2022-01-06 | Bluebird Bio, Inc. | Cell therapy vessels |
DE102018128010B4 (de) * | 2018-11-08 | 2021-02-11 | Bastian Steudel | Bioreaktor zum Kultivieren von photoautotrophen Mikroorganismen und dessen Verwendung |
WO2020141328A1 (en) * | 2019-01-04 | 2020-07-09 | Oribiotech Ltd | Cell processing platform cell processing system and methods of use thereof |
CA3231087A1 (en) | 2021-09-13 | 2023-03-16 | Plantibodies | Genetically modified organism for recombinant protein production |
Family Cites Families (48)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1053848A (hu) * | ||||
US467993A (en) | 1892-02-02 | Alfred jorgensen | ||
US2147271A (en) | 1937-07-16 | 1939-02-14 | Schwarz Lab Inc | Pure yeast culture apparatus |
US2341259A (en) | 1941-01-22 | 1944-02-08 | Lummus Co | Inoculating method and apparatus |
US2836434A (en) * | 1952-08-21 | 1958-05-27 | Separator Ab | Arrangement for sterile interconnection and sealing of apparatuses in a plant for instance for cultivation of bacteria |
US3201327A (en) | 1962-08-21 | 1965-08-17 | Sun Oil Co | Fermentation apparatus and process |
SE371208B (hu) | 1966-10-06 | 1974-11-11 | Sanraku Ocean Co | |
US3468520A (en) | 1967-05-12 | 1969-09-23 | American Cyanamid Co | Combination agitation and transfer unit for suspended cells |
US3504185A (en) | 1968-05-09 | 1970-03-31 | Univ Syracuse Res Corp | Apparatus for measuring and controlling cell population density in a liquid medium |
GB1284077A (en) | 1968-10-18 | 1972-08-02 | British Petroleum Co | Process and apparatus for the cultivation of micro-organisms |
US3540700A (en) | 1969-01-24 | 1970-11-17 | New Brunswick Scientific Co | Rotary processing apparatus |
DE2059931C3 (de) | 1970-12-05 | 1973-10-18 | Knapsack Ag, 5033 Huerth-Knapsack | Verfahren zum Verhindern von Schaumausbrüchen aus geschlossenen Reaktionsräumen |
US3793154A (en) | 1970-12-21 | 1974-02-19 | Univ St Johns | Apparatus for gaseous environmental control of batch cultures of micro-organisms |
US3950227A (en) | 1970-12-21 | 1976-04-13 | St. John's University | Batch method of establishing and maintaining a controlled aerobic environment for a microbial culture |
CS192067B1 (en) * | 1975-12-02 | 1979-08-31 | Drahoslav Pravda | Separation blood bag for the sterile preparation of the blood serum for single use |
US4179339A (en) | 1977-03-02 | 1979-12-18 | Olympus Optical Company, Ltd. | Liquid feeder for automatic culture apparatus |
US4228243A (en) | 1978-07-13 | 1980-10-14 | Toray Industries, Inc. | Cell culture propagation apparatus |
CS202395B1 (cs) * | 1978-12-01 | 1981-01-30 | Zdenek Aunicky | Zařízeni na odtahování zralého média při kontinuálních aerobních kultivacích mikroorganismů |
US4328317A (en) | 1980-03-31 | 1982-05-04 | Solargizer International, Inc. | Continuous chemical conversion or fermentation apparatus |
DE3133314A1 (de) | 1981-08-22 | 1983-03-10 | Hoechst Ag, 6000 Frankfurt | "vorrichtung zum dispergieren einer zweiten phase in einer ersten phase" |
CH663422A5 (de) | 1982-05-27 | 1987-12-15 | Chemap Ag | Verfahren und fermenter zur zuechtung von gewebezellen. |
CS229179B1 (cs) * | 1982-12-22 | 1984-06-18 | Miroslav Ing Cerovsky | Zařízení pro kultivací mikroorganismů |
US4708938A (en) | 1984-04-30 | 1987-11-24 | Hickinbotham Winemakers Pty. Ltd. | Alcoholic fermentation |
EP0200792B1 (de) * | 1985-02-01 | 1990-05-09 | Herbert Prof. Dr.-Ing. Märkl | Folienfermenter |
US4668632A (en) * | 1985-02-06 | 1987-05-26 | Vxr, Inc. | Sparger and apparatus for and method of growing cells |
US5372945A (en) | 1985-06-06 | 1994-12-13 | Alchas; Paul G. | Device and method for collecting and processing fat tissue and procuring microvessel endothelial cells to produce endothelial cell product |
US4713345A (en) | 1985-07-29 | 1987-12-15 | Grain Processing Corporation | Fermentation methods and apparatus |
EP0224962A1 (en) | 1985-11-25 | 1987-06-10 | De Staat Der Nederlanden Vertegenwoordigd Door De Minister Van Welzijn, Volksgezondheid En Cultuur | Apparatus for the continuous cultivation of microorganisms in a culture liquid |
US5166072A (en) | 1986-06-26 | 1992-11-24 | Bayer Aktiengesellschaft | Apparatus for the cultivation of immobilized micro-organisms |
SE453752B (sv) * | 1986-07-04 | 1988-02-29 | Alfa Laval Food & Dairy Eng | Forfarande och anordning for aseptisk overforing av en vetskemengd, serskilt vid provtagning |
US4717668A (en) | 1986-12-12 | 1988-01-05 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Plastic roller bottle for suspension cultures |
US5081036A (en) | 1987-01-23 | 1992-01-14 | Hoffmann-La Roche Inc. | Method and apparatus for cell culture |
US4908315A (en) * | 1987-03-04 | 1990-03-13 | Agristar, Inc. | Integument and method for micropropagation and tissue culturing |
GB2202549A (en) * | 1987-03-20 | 1988-09-28 | Philip John Whitney | Foldable fermenter |
IL86442A (en) * | 1988-05-19 | 1992-02-16 | Plant Biotec Ltd | Air lift fermenter formed from flexible plastic sheets |
DE3823711C1 (hu) * | 1988-07-13 | 1990-04-12 | Chemap Ag, Volketswil, Ch | |
US4931401A (en) | 1988-09-01 | 1990-06-05 | La Societe De Recherche Snc Inc. | Bioreactor |
US5073491A (en) | 1988-12-23 | 1991-12-17 | Hoffman-La Roche Inc. | Immobilization of cells in alginate beads containing cavities for growth of cells in airlift bioreactors |
SU1687604A1 (ru) | 1989-01-05 | 1991-10-30 | Всесоюзный научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности | Аппарат дл культивировани клеток |
US5188946A (en) | 1989-01-26 | 1993-02-23 | Biocontrol Systems Incorporated | Process and device for sequential microbial enrichment in a single apparatus |
US5100801A (en) | 1989-01-26 | 1992-03-31 | Biocontrol Systems, Inc. | Device for sequential microbial enrichment in a single apparatus |
EP0471947A1 (en) | 1990-06-29 | 1992-02-26 | Sekisui Chemical Co., Ltd. | Culture bag |
US5240598A (en) | 1990-09-18 | 1993-08-31 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Microbubble generator for the transfer of oxygen to microbial inocula and microbubble generator immobilized cell reactor |
AT394576B (de) | 1991-01-16 | 1992-05-11 | Vogelbusch Gmbh | Reaktor zur durchfuehrung biologischer reaktionen mittels biokatalysatoren |
US5612188A (en) | 1991-11-25 | 1997-03-18 | Cornell Research Foundation, Inc. | Automated, multicompartmental cell culture system |
US5267791A (en) | 1991-12-13 | 1993-12-07 | Corning Incorporated | Suspended cell culture stirring vessel closure and apparatus |
US5409833A (en) | 1993-07-01 | 1995-04-25 | Baxter International Inc. | Microvessel cell isolation apparatus |
US5342781A (en) | 1993-07-15 | 1994-08-30 | Su Wei Wen W | External-loop perfusion air-lift bioreactor |
-
1996
- 1996-09-26 IL IL11931096A patent/IL119310A/xx not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-09-26 DK DK97941180T patent/DK0938544T3/da active
- 1997-09-26 CZ CZ0104799A patent/CZ298148B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1997-09-26 PL PL332483A patent/PL190829B1/pl unknown
- 1997-09-26 AT AT97941180T patent/ATE231912T1/de not_active IP Right Cessation
- 1997-09-26 HU HU9904529A patent/HU226908B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1997-09-26 ES ES97941180T patent/ES2191851T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-26 WO PCT/IL1997/000316 patent/WO1998013469A1/en active IP Right Grant
- 1997-09-26 CA CA002266851A patent/CA2266851C/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-09-26 JP JP51546598A patent/JP3987121B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1997-09-26 AU AU43180/97A patent/AU4318097A/en not_active Abandoned
- 1997-09-26 EP EP97941180A patent/EP0938544B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-26 DE DE69718812T patent/DE69718812T2/de not_active Expired - Lifetime
-
1999
- 1999-02-08 US US09/246,600 patent/US6391638B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-02-29 HK HK00101274A patent/HK1023361A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-04-12 US US10/121,534 patent/US20020110915A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
HK1023361A1 (en) | 2000-09-08 |
US20020110915A1 (en) | 2002-08-15 |
JP3987121B2 (ja) | 2007-10-03 |
DE69718812T2 (de) | 2004-01-22 |
EP0938544A1 (en) | 1999-09-01 |
DK0938544T3 (da) | 2003-05-26 |
DE69718812D1 (de) | 2003-03-06 |
WO1998013469A1 (en) | 1998-04-02 |
CZ104799A3 (cs) | 1999-08-11 |
AU4318097A (en) | 1998-04-17 |
EP0938544B1 (en) | 2003-01-29 |
IL119310A0 (en) | 1996-12-05 |
PL332483A1 (en) | 1999-09-13 |
HUP9904529A2 (hu) | 2000-04-28 |
HUP9904529A3 (en) | 2001-07-30 |
JP2001502526A (ja) | 2001-02-27 |
ES2191851T3 (es) | 2003-09-16 |
CZ298148B6 (cs) | 2007-07-04 |
US6391638B1 (en) | 2002-05-21 |
CA2266851C (en) | 2009-07-07 |
CA2266851A1 (en) | 1998-04-02 |
ATE231912T1 (de) | 2003-02-15 |
PL190829B1 (pl) | 2006-02-28 |
IL119310A (en) | 1999-07-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
HU226908B1 (hu) | Egyszer használatos készülék, telep és eljárás sejtek és/vagy szövetek legalább egy ciklusban történõ, biológiailag steril tenyésztésére és ürítésére | |
Bedding | Large scale production, storage and transport of the insect‐parasitic nematodes Neoaplectana spp. and Heterorhabditis spp. | |
US6544788B2 (en) | Disposable perfusion bioreactor for cell culture | |
TWI259203B (en) | Cell-cultivating device | |
US6432698B1 (en) | Disposable bioreactor for culturing microorganisms and cells | |
EP2225359B1 (en) | The cell culture apparatus and mass automatic cell culture device having it | |
EP2217692B1 (en) | A cell culture flask and the cell culture device having it | |
ES2207616T3 (es) | Dispositivo para realizar cultivos de tejidos vegetales o animales. | |
US20020034817A1 (en) | Process and apparatus for isolating and continuosly cultivating, harvesting, and processing of a substantially pure form of a desired species of algae | |
JPH03505164A (ja) | 生体外増殖のための方法及び装置並びに培養培地中での細胞の成長 | |
ZA200500120B (en) | Proliferation and delivery apparatus | |
CN109762723A (zh) | 一种用于光合细菌培养的装置 | |
KR101135052B1 (ko) | 멸균이 간편한 생물배양기 및 이를 이용한 액상배양방법 | |
CN209957772U (zh) | 一种用于光合细菌培养的装置 | |
MXPA99002775A (en) | Cell/tissue culturing device and method | |
CN1087032C (zh) | 一种生产重组腺病毒的方法 | |
EP0597837B1 (en) | Apparatus and method for rearing nematodes, fungi, tissue cultures and the like, and for harvesting nematodes | |
CN1277456C (zh) | 增氧式液体菌种的生产及接种方法和装置 | |
CN221094125U (zh) | 一种医学检验微生物培养装置 | |
CN218851484U (zh) | 一种猴头菇液体菌种自动接种机 | |
CN218146657U (zh) | 一种食用菌液体菌种培养装置 | |
CN207659362U (zh) | 一种生物肽过滤装置 | |
CN116162532A (zh) | 一种可提高含氧量的微生物发酵罐 | |
KR20020097079A (ko) | 액체종균 배양장치 | |
KR20070030891A (ko) | 세포 배양용 액기상 노출 반응기 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees |