CZ104799A3 - Způsob pěstování buněk a tkání a zařízení k provádění tohoto způsobu - Google Patents
Způsob pěstování buněk a tkání a zařízení k provádění tohoto způsobu Download PDFInfo
- Publication number
- CZ104799A3 CZ104799A3 CZ991047A CZ104799A CZ104799A3 CZ 104799 A3 CZ104799 A3 CZ 104799A3 CZ 991047 A CZ991047 A CZ 991047A CZ 104799 A CZ104799 A CZ 104799A CZ 104799 A3 CZ104799 A3 CZ 104799A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- harvesting
- container
- tissues
- cells
- sterile
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims abstract description 144
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims abstract description 58
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 54
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 43
- 239000002912 waste gas Substances 0.000 claims abstract description 14
- 230000003816 axenic effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 claims abstract 2
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 claims abstract 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 95
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 51
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 42
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 34
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 26
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 claims description 24
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 24
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 claims description 24
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 23
- 238000011109 contamination Methods 0.000 claims description 17
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 claims description 15
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 claims description 15
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 11
- 239000004033 plastic Substances 0.000 claims description 9
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 claims description 9
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 9
- GNFTZDOKVXKIBK-UHFFFAOYSA-N 3-(2-methoxyethoxy)benzohydrazide Chemical compound COCCOC1=CC=CC(C(=O)NN)=C1 GNFTZDOKVXKIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 4
- 238000007599 discharging Methods 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 claims description 3
- -1 polyethylene Polymers 0.000 claims description 3
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004687 Nylon copolymer Substances 0.000 claims description 2
- 238000005304 joining Methods 0.000 claims description 2
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 claims description 2
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 claims description 2
- 241000192700 Cyanobacteria Species 0.000 claims 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 10
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 abstract description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 10
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 5
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 5
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 4
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 3
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 3
- 241000863480 Vinca Species 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 238000003466 welding Methods 0.000 description 2
- OVSKIKFHRZPJSS-UHFFFAOYSA-N 2,4-D Chemical compound OC(=O)COC1=CC=C(Cl)C=C1Cl OVSKIKFHRZPJSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HABAPWZXRLIZDL-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-2-phenoxyacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)OC1=CC=CC=C1 HABAPWZXRLIZDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NEZONWMXZKDMKF-JTQLQIEISA-N Alkannin Chemical compound C1=CC(O)=C2C(=O)C([C@@H](O)CC=C(C)C)=CC(=O)C2=C1O NEZONWMXZKDMKF-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- 241000208328 Catharanthus Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N Kinetin Natural products N=1C=NC=2N=CNC=2C=1N(C)C1=CC=CO1 FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001071917 Lithospermum Species 0.000 description 1
- 241001503485 Mammuthus Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 238000004378 air conditioning Methods 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- UNNKKUDWEASWDN-UHFFFAOYSA-N alkannin Natural products CC(=CCC(O)c1cc(O)c2C(=O)C=CC(=O)c2c1O)C UNNKKUDWEASWDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 230000003373 anti-fouling effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 230000002542 deteriorative effect Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 239000012526 feed medium Substances 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N kinetin Chemical compound N=1C=NC=2N=CNC=2C=1NCC1=CC=CO1 QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001669 kinetin Drugs 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 239000006272 natural pesticide Substances 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 235000014366 other mixer Nutrition 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000013022 venting Methods 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/02—Form or structure of the vessel
- C12M23/14—Bags
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/22—Transparent or translucent parts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/28—Constructional details, e.g. recesses, hinges disposable or single use
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M33/00—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/44—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of volume or liquid level
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Clinical Laboratory Science (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Description
Způsob pěstování buněk a tkání a zařízení k provádění tohoto způsobu
Oblast techniky
--Vynález-se—tý-k-á-zařízení—p ro—axenické - - - p ě s t o v á η í___a sklízení buněk a/nebo tkání, zahrnujících bioreaktory a fěrmentory. Zejména se tento vynález týká takových zařízení, která jsou určena k jednomu použití, která však nicméně mohou být používána nepřetržitě pro celou řadu po sobě následujících pěstovacích a sklízečích cyklů až do té doby, kdy budou tato zařízení určena k likvidaci.
Tento vynález se rovněž týká celých baterií takovýchto zařízení, které mohou být použity pro pěstování buněk a tkání ve velkém měřítku.
Dosavadní stav techniky
Způsoby pěstování buněk a tkání jsou dostupné již po celou řadu let a jsou z dosavadního stavu techniky velmi dobře a všeobecně známy.
Vyhlídky na využití takovýchto pěstovacích technik jsou výhodné pro získávání druhotných metabolitů, jako například farmaceuticky aktivních sloučenin, různých látek využitelných v kosmetice, hormonů, enzymů, proteinů, antigenů, potravinářských přísad a přírodních pesticidů na základě sklízení pěstovaných buněk nebo tkání. Přestože jsou tyto způsoby potenciálně lukrativní, nejsou nicméně shora uvedené vyhlídky efektivní s použitím průmyslových vícenásobných
| bioreaktorů, které | využíváj i | pomalu | rostoucí | rostlinné a |
| živočišné kultury, | a . to | zejména | z důvodu vysokých | |
| kapitálových nákladů | • | |||
| Z dosavadního | stavu | techniky | známá | techniky a |
technologie výroby a pěstování buněčných a/nebo tkáňových kultur v průmyslovém měřítku, určených pro využití ve výrobě shora uvedených materiálů, : —je — založena na skleněnýc h bioreaktorech a na bioreaktorech z nerezové oceli, které představují velmi nákladné kapitálové položky.
Kromě toho tyto typy průmyslových bioreaktorů využívají komplikovaných a nákladných směšovacích technologií, jako jsou například oběžná kola, poháněná prostřednictvím nákladných a složitých sterilních utěsnění; některé nákladné fermentory obsahují mamutí čerpadla velmi složitých konstrukcí.
Úspěšný provoz takovýchto bioreaktorů často vyžaduje zavádění provzdušňovacích technologií, které je nezbytné neustále zlepšovat a zdokonalovat. Kromě toho mají takovéto bioreaktory rozměry, odpovídající jejich špičkové objemové kapacitě, která je požadována pouze občas. Problémy tak vznikají při zvyšování měřítka od poloprovozních kvasných kádí nebo fermentorů až na rozměrné fermentory, nebo tehdy, kdy vzniká potřeba zvýšit výrobu nad kapacitu existujících bioreaktorů.
Alternativou k velkokapacitním reaktorům může být celá řada menších skleněných bioreaktorů nebo bioreaktorů z • · · · nerezové oceli, jejichž celková objemová kapacita splňuje příslušné požadavky, přičemž nabízí určitý stupeň pružnosti pro zvýšení nebo snížení celkové kapacity, jde však nicméně o záležitost mnohem nákladnější a dražší, než je opatření jediného velkého bioreaktoru. Kromě toho provozní náklady, týkající se většího počtu skleněných bioreaktorů nebo bioreaktoru z nerezové oceli, jsou rovněž mnohem vyšší, a to v důsledku malé výtěžnosti, která je spjata s nezbytností sterilizace bioreaktorů po každém pěstovacím cyklu.
V důsledku shora uvedeného jsou produkty, získávané z buněk nebo tkání, pěstovaných v takovýchto bioreaktorech, velmi nákladné a nemohou komerčně soutěžit se srovnatelnými produkty, vyráběnými s pomocí alternativních technik. Ve skutečnosti je známa pouze jedna japonská společnost, která využívá shora uvedených technik pro komerční pěstování buněk a/nebo tkání s využitím bioreaktorů z nerezové oceli. Tato společnost vyrábí Shikonin, což je sloučenina, která je využívána téměř výlučně v Japonsku.
Průmyslové bioreaktory, a zejména velká průmyslová bioreaktorová zařízení, jsou již tradičně stálými nebo téměř stálými součástmi, přičemž není známa žádná koncepce vyřaditelného bioreaktorového zařízení pro řešení shora uvedených problémů, týkajících se produkce buněčných a/nebo tkáňových kultur ve velkém měřítku.
Naopak jsou vyřaditelná fermentorová a bioreaktorová zařízení velmi dobře známa, přičemž jsou zaměřena zejména na velmi malé produkční objemy, jako jsou například malé domácí pivovary nebo laboratorní práce. Takováto bioreaktorová zařízení obvykle obsahují vyřaditelný sáček, který je obvykle • · • · • · · · ·
rozříznut za účelem pěstování buněk a/nebo tkání, čímž je znehodnocena jakákoliv další využitelnost takovéhoto sáčku.
Jed.en takovýto známý, vyřaditelný bioreaktor je vyráběn firmou Osmotec, Izrael (Agritech Izrael, vydání č. 11, 1997, str. 19) pro využití v malém měřítku, jako jsou například laboratorní výzkumy. Tento bioreaktor obsahuje kuželovitý sáček, mající vstupní otvor, kterým je přiváděno živné prostředí, vzduch, očkovací látka nebo jiné případné přísady, přičemž—má ob j em—pouze o—velí kosti—zhruba—1-,-5—litru----Je zde prováděno provzdušňování přiváděním velmi malých vzduchových bublinek, které v mnoha případech způsobují poškození buněk, zejména v případě pěstování rostlinných buněčných kultur. Takovéto sáčky jsou určeny zejména pro jediný pěstovací a/nebo sklízeči cyklus, přičemž obsah sáčku je vyjímán odříznutím dna tohoto sáčku. Takovéto sáčky tedy nejsou zaměřeny na ekonomické řešení otázky poskytování průmyslového množství materiálů, které mají být získávány z pěstovaných kultur, jak již bylo shora řečeno.
Vyřaditelnost těchto bioreaktorových zařízení nepředstavuje obecně ekonomickou nevýhodu pro uživatele, neboť nízké kapitálové náklady na tyto položky stojí proti jednoduchosti využití skladování a jiných praktických uplatnění. Ve skutečnosti při nízkých výrobních hladinách, na které jsou takováto zařízení zaměřena je ekonomika těchto zařízení taková, že není vyvolávána žádná motivace na zvýšení komplexnosti těchto zařízení nebo jejich provozu z hlediska jejich nepřetržitého využívání pro více než jeden cyklus pěstování a sklízení.
···· ·· ι·
Kromě toho sterilní podmínky na vnější straně vyřaditelných bioreaktorových zařízení nejsou bud’ vyžadovány, nebo je jejich dosažení dokonce v mnoha případech nemožné, takže.pokud dojde jednou k otevření za účelem sklizně, není z hlediska nákladů efektivní a prakticky ani často možné udržet v otevřeném stavu sterilní prostředí, takže dochází ke znečištění sáčku, uvnitř kterého se může ocitnout jakákoliv znečišťující látka. Takže takováto vyřaditelná zařízení nemají po ukončení jednoho pěstovacího cyklu žádné další
-------------v-y-u-ž-i-t-í-.------------:----------------------------------Vyřaditelná bioreaktorová zařízení jsou tak poměrně nenákladná pro taková množství a takové produkční objemy, které jsou obvykle vyžadovány od uživatelů v neprůmyslovém měřítku, přičemž jsou poměrně velmi snadno využitelná pro neprofesionální obsluhu. Ve skutečnosti je to tento aspekt jednoduchosti použití a nízkých ekonomických nákladů, který se vztahuje k nízkoobjemové produkci těchto vyřaditelných zařízení, který představuje hlavní výhodu vyřaditelných bioreaktorových zařízení.
Takže vyřaditelná bioreaktorová zařízení, známá z dosavadního stavu techniky, mají velmi málo společného s průmyslovými bioreaktory, a to jak z konstrukčního hlediska, tak i z hlediska provozního nebo z hlediska ekonomického, přičemž ve skutečnosti nepodněcují k řešení problémů, spjatých s průmyslovými bioreaktory, tím spíše, že v žádném případě takováto řešení nenavrhují.
Podstata vynálezu
Předmět tohoto vynálezu tak představuje revoluční řešení shora uvedených problémů tím, že poskytuje vyřaditelné bioreaktorové zařízení pro výrobu buněčných a/nebo tkáňových kultur ve velkém měřítku. Zařízení podle tohoto vynálezu, které je vyřaditelné, je charakterizováno tím, že obsahuje opětovně využitelný sklízeči výstup pro umožnění sklízení alespoň části živného prostředí, obsahujícího buňky, a/nebo tkáně,—-j-e^L-i_to_požadováno,___čimž__je___umožněno, aby bylo zařízení využíváno nepřetržitě pro jeden nebo více následujících po sobě jdoucích pěstovacích a/nebo sklízečích cyklů.
V průmyslovém prostředí může být sterilita sklízecího výstupu během sklízení a po ukončení sklízení zajištěna do poměrně vysoké míry a relativně nízkými náklady opatřením například sterilního krytu, v němž jsou prováděny veškeré nezbytné spojovací a rozpojovací služby, týkající se daného zařízení. Pokud je případně dané zařízení znečištěno, může být vyřazeno. Takováto zařízení mohou být velmi levně vyráběna, a to dokonce pro produkci objemu kultur až o velikosti 50 litrů nebo více.
Kromě toho je schopnost provádění většího počtu pěstovacích a/nebo sklízečích cyklů ekonomicky velmi lukrativní, neboť snižuje dokonce další efektivní náklady na jedno zařízení. Může být rovněž ekonomicky uspořádána celá baterie takovýchto zařízení, přičemž počet zařízení v baterii může být regulován tak, aby velice blízce odpovídal požadované produkci.
·· ····
Takže přechod od poloprovozních bioreaktorů k produkci ve velkém měřítku může být rovněž dosažen poměrně jednoduchým a ekonomickým způsobem, a to přidáním více zařízení do předmětné baterie. Kromě toho pak poměrně malý objem produkce v každém zařízení, která jsou spojena bez pevných mísičů, vede k poměrně vyšší výtěžnosti v porovnání s obvyklými bioreaktory z nerezové oceli.
Úkolem tohoto vynálezu je vyvinout zařízení a příslušný způsob pro axenické pěstování a sklí zení buněk a/nebo_tkání_,_ které nebudou trpět shora uvedenými nedostatky.
Dalším úkolem předmětu tohoto vynálezu je vyvinout takové zařízení, které bude možno ekonomicky průmyslově vyrábět, a které bude možno jednoduše využívat.
Ještě dalším úkolem předmětu tohoto vynálezu je vyvinout takové zařízení, které bude vyřaditelné, avšak které může být nicméně využíváno nepřetržitě v průběhu většího množství po sobě jdoucích následujících cyklů pěstování a sklízení požadovaných buněk a/nebo tkání.
Ještě jiným úkolem tohoto vynálezu je vyvinout takové zařízení, kde je nutno přivádět očkovací látku pouze pro první pěstovací cyklus, přičemž očkovací látku pro následující po sobě jdoucí cykly tvoří část vypěstované kultury, která zůstává v zařízení po ukončení sklizně této kultury v předcházejícím cyklu..
Ještě jiným úkolem předmětu tohoto vynálezu je vyvinout baterii takových zařízení pro pěstování buněk a/nebo tkání v průmyslovém měřítku.
Předmět vynálezu se proto týká vyřaditelného zařízení a příslušného odpovídajícího způsobu pro axenické pěstování a sklízení buněk a/nebo tkání v alespoň jednom cyklu, přičemž uvedené zařízení obsahuje sterilizovatelnou průhlednou a/nebo průsvitnou využitelnou nádobku, mající horní konec a spodní konec, kterážto nádobka může být alespoň částečně naplněna vhodným sterilním biologických živným prostředím pro pěstování buněk a/nebo tkání, a/nebo axenickou očkovací látkou, a/nebo sterilním vzduchem, a/nebo požadovanými jinými steří 1 nimi pří sadami,-přúňemž_uv-edená_nádab±a_uob_sahujej_________ (i) plynové výstupní prostředky pro odvádění přebytečného vzduchu a/nebo odpadních plynů z uvedené nádobky, (ii) aditivní přídavné přiváděči prostředky pro přivádění uvedené očkovací látky a/nebo uvedeného živného prostředí a/nebo uvedených přísad do uvedené nádobky, přičemž podstata tohoto vynálezu spočívá v tom, že tato nádobka dále obsahuje (iii) opětovně využitelné sklízeči prostředky pro umožnění sklízení alespoň požadované části uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, pokud je to požadováno, přičemž je umožněno, aby uvedené zařízení bylo používáno nepřetržitě pro alespoň jeden další následující pěstovací a/nebo sklízeči cyklus, přičemž zbytek uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, zbývající z předcházejícího sklízecího • 0 00 • · cyklu, může sloužit jako očkovací látka pro další pěstovací a sklízeči cyklus, přičemž je přiváděno uvedené živné prostředí a/nebo uvedené požadované přísady.
Uvedené zařízení může dále obsahovat vzduchové přívodní prostředky pro přivádění sterilního vzduchu ve formě vzduchových bublinek do uvedeného živného prostředí prostřednictvím vstupního otvoru. Živné prostředí a vzduch a jakékoliv další požadované přísady jsou přiváděny ve vhodných množstvích-v--průběhu--každého—cyklu-za---účelem—umožnění pěstování uvedených buněk a/nebo tkání z uvedené očkovací látky. Předmětné zařízení může být v případě jeho znečištění vyřazeno.
U druhé aspektu předmětu tohoto vynálezu může být v případu požadavku sestavena baterie takovýchto zařízení, která jsou vhodně vzájemně propojena, a která umožňují pěstovat buňky a/nebo tkáně v průmyslovém měřítku.
Přehled obrázků na výkresech
| Vynález bude v dalším podrobněji vysvětlen na jednotlivých příkladech jeho praktického provedení, jejichž | |||||
| popis bude | podán s přihlédnutím | k přiloženým výkresům, | kde: | ||
| obr. | la | znázorňuje čelní | nárysný pohled na | hlavní | |
| součásti | a | složky výhodného | provedení | předmětu | tohoto |
| vynálezu; | |||||
| obr. | lb | znázorňuje boční | pohled v | řezu na | hlavní |
| součásti | a | složky výhodného | provedení | předmětu | tohoto |
| vynálezu; |
obr. 2a znázorňuje čelní nárysný pohled na hlavní součásti a složky druhého výhodného provedení předmětu tohoto vynálezu;
obr. 2b znázorňuje boční pohled v řezu na hlavní součásti a složky druhého výhodného provedení předmětu tohoto vynálezu;
obr. 3 znázorňuje boční pohled v řezu na hlavní součásti a-složky-třetího výhodného--provedení__předmětu____tohoto vynálezu;
obr. 4 znázorňuje švové linie u výhodného provedení předmětu tohoto vynálezu v čelním nárysném pohledu;
obr. 5 znázorňuje hlavní součásti a složky výhodného provedení baterie podle tohoto vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Vynález se týká využitelného zařízení pro axenické pěstování a sklízení buněk a/nebo tkání v alespoň jednom cyklu, přičemž uvedené zařízení obsahuje sterilizovatelnou průhlednou a/nebo průsvitnou využitelnou nádobku, mající horní konec a spodní konec, kterážto nádobka může být alespoň částečně naplněna vhodným sterilním biologických živným prostředím pro pěstování buněk a/nebo tkání, a/nebo axenickou očkovací látkou, a/nebo sterilním vzduchem, a/nebo požadovanými jinými sterilními přísadami, přičemž uvedená nádobka obsahuje:
4· ·<
· ·· ··· ·· ·· » · · ·
I · · · ··· · · · (i) plynové výstupní prostředky pro odvádění přebytečného vzduchu a/nebo odpadních plynů z uvedené nádobky, (ii) aditivní přídavné přiváděči prostředky pro přivádění uvedené očkovací látky a/nebo uvedeného živného prostředí a/nebo uvedených přísad do uvedené nádobky, přičemž podstata tohoto vynálezu spočívá v tom,—že předmětné zařízení dále obsahuje (iii) opětovně využitelné sklízeči prostředky pro umožnění sklízení alespoň požadované části uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, pokud je to požadováno, přičemž je umožněno, aby uvedené zařízení bylo používáno nepřetržitě pro alespoň jeden další následující pěstovací a/nebo sklízeči cyklus, přičemž zbytek uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, zbývající z předcházejícího sklízecího cyklu, může sloužit jako očkovací látka pro další pěstovací a sklízeči cyklus, přičemž je přiváděno uvedené živné prostředí a/nebo uvedené požadované přísady.
Tento vynález se dále týká takového zařízení, které dále obsahuje vzduchové přiváděči prostředky pro přivádění sterilního vzduchu ve formě vzduchových bublinek do uvedeného živného prostředí prostřednictvím prvního vstupního otvoru, přičemž jsou uvedené vzduchové přívodní prostředky připojitelné ke vhodnému přívodu vzduchu.
999 9 9 9 • · • 9 9 9 • Φ ·< 99 9999
9 9 9 9 9 • 9 999 · · ··· • 9 9 9 9 9 « · • · 9 · 9 9 · «« ·« « 9 999
Takže s přihlédnutím k vyobrazením na obr. 1, obr. 2 a obr. 3, která příslušně znázorňují první, druhé a třetí provedení zařízení podle tohoto vynálezu, pak toto zařízení, které .je obecně, označeno vztahovou značkou 10, obsahuje průhlednou a/nebo průsvitnou nádobku 20, která má horní konec 26 a spodní konec 28. Tato nádobka 20 má boční stěnu 22, která je s výhodou v podstatě válcovitá, přičemž však může mít i jiné vhodné tvary, takže může být například obdélníkovitá nebo mnohostranná. Uvedený spodní konec 28 je s výhodou vhodně— tvarován—za— účelem—minimalizace—mo ž n os ti usazování. Například u výhodného provedení má tento spodní konec 28 v podstatě tvar komolého kužele, nebo je alespoň opatřen směrem vzhůru skloněnými stěnami.
U druhé provedení je spodní konec 28 opatřen jednou směrem vzhůru skloněnou stěnou 2 9. U třetího provedení je spodní konec 28 v podstatě válcovitý nebo alternativně konvexní. Shora uvedená uspořádání spodního konce 28 ve spojitosti s umístěním vzduchového výstupního otvoru 7 6 (který bude podrobněji popsán v dalším) v blízkosti spodního konce 28 umožňuje, aby vzduch, přiváděný uvedeným vzduchovým výstupním otvorem 7 6, uváděl obsah nádobky 20 do mísícího pohybu v blízkosti spodního konce 28, čímž je efektivně zamezováno možnosti usazování v těchto místech. Nicméně může být spodní konec 28 v podstatě zcela plochý u jiných provedení předmětu tohoto vynálezu.
Průhledná a/nebo průsvitná nádobka 20 obsahuje vnitřní plnitelný prostor 30, jehož objem leží obvykle mezi hodnotami 5 až 50 litrů, přičemž však uvedené zařízení 10 může mít alternativně vnitřní plnitelný prostor 30 větší, než 50 litrů, nebo menší, než 5 litrů. Tento vnitřní plnitelný
«009 ·
000 0 0
999
0 0
prostor 30 může být naplněn vhodným sterilním živným prostředím 65 pro pěstování biologických buněk a/nebo tkání, a/nebo axenickou očkovací látkou, a/nebo sterilním vzduchem, a/nebo požadovanými jinými sterilními přísadami, jako jsou antibiotika nebo fungicidy, například takové, jaké jsou v dalším popsány.
U shora popsaných provedení je nádobka 20 v podstatě nepevná, neboť je vyrobena s výhodou z nepevného plastického materiálu,_vybraného____ze__skupiny,__obsahující například polyetylén, polykarbonát, kopolymer polyetylénu a nylon, PVC a EVA. Popřípadě může být nádobka 20 vyrobena z laminátového vrstveného materiálu, obsahujícího více než jednu vrstvu shora uvedených materiálů.
Jak je znázorněno u třetího provedení předmětu tohoto vynálezu, vyobrazeného na obr. 3, může uvedená nádobka 20 případně obsahovat dvě soustředné vnější stěny 24 za účelem zvýšení mechanické pevnosti a za účelem minimalizace rizika kontaminace obsahu nádobky 20 prostřednictvím stěn této nádobky 20.
U výhodného druhého a třetího provedení je uvedené zařízení 10 určeno pro aerobní použití. Proto nádobka 20 dále obsahuje vzduchové vstupní prostředky pro přivádění sterilního vzduchu ve formě vzduchových bublinek 70 do uvedeného živného prostředí 65 prostřednictvím vzduchového vstupního otvoru 72.
U shora uvedených provedení pak tyto vzduchové vstupní prostředky obsahují vstupní potrubí 7 4, které je připojitelné ke vhodnému zdroji vzduchu (na vyobrazeních neznázorněno), a
které se rozprostírá od uvedeného vzduchového vstupního otvoru 72 k místu uvnitř uvedené nádobky 20 ve vzdálenosti dd ode dna spodního konce 28, přičemž tato vzdálenost dl má obvykle velikost, kolem 1 cm, přestože může být větší nebo menší, než 1 cm.
Uvedené vstupní potrubí 74 může být vyrobeno ze silikonu nebo z jiného vhodného plastického materiálu, přičemž je s výhodou pružné či ohebné. Vstupní potrubí 7 4 pak obsahuje vzduchový—výstupná__ot-vor__7Jo__o._vhodném průměru,___určený___k_ vytváření vzduchových bublinek 7 0 o požadovaném hlavním průměru. Tyto vzduchové bublinky 70 nejenom provzdušňují živné prostředí 65, avšak rovněž slouží k promíchávání obsahu nádobky 20, čímž přispívají k minimalizaci možnosti usazování u spodního konce 28, jak již bylo shora popsáno. Velikost bublinek, dodávaných vzduchovými vstupními prostředky, se bude měnit v závislosti na využití daného zařízení 10, přičemž bude ležet v rozmezí od méně, než 1 mm do více, než 10 mm v průměru.
V některých případech, týkajících se zejména pěstování buněk, mohou malé bublinky skutečně poškozovat buněčné stěny, přičemž hlavní průměr bublinek, který není menší, než 4 mm, v podstatě řeší tento potenciální problém. V jiných případech jsou mnohem menší bublinky výhodné, takže je možno na vzduchovém výstupním otvoru využívat rozstřikovače nebo kropítka za účelem snižování velikosti vzduchových bublinek 70. A ještě v jiných případech mohou být optimální vzduchové bublinky 70 o průměru 10 mm nebo dokonce větším. Uvedený vzduchový výstupní otvor 7 6 může být fixován v příslušné poloze u uvedeného spodního konce 28 prostřednictvím provazu či řetězu (na vyobrazeních neznázorněno) nebo jinými prostředky, známými z dosavadního stavu techniky.
U jiných provedení předmětu tohoto vynálezu je uvedené zařízení 10 určeno pro anaerobní použití, takže neobsahuje uvedené vzduchové přívodní prostředky.
Uvedená nádobka 20 je dále opatřena plynovými výstupními prostředky pro odvádění přebytečného vzduchu a/nebo odpadních plynů__z__uvedené___nádobky .._2_0__. Tyto plyny__se shromažďuj í__u_ uvedeného horního konce 26 uvedené nádobky 20. Tyto plynové výstupní prostředky mohou obsahovat potrubí 90, opatřené vstupním otvorem 96 na uvedeném horním konci 26 nebo v jeho blízkosti, a to ve vzdálenosti d_4 ode dna uvedeného spodního konce 28, přičemž tato vzdálenost d4 má pro výhodné provedení předmětu tohoto vynálezu velikost obvykle 90 cm.
Uvedené potrubí 90 může být vyrobeno ze silikonu nebo z jiného vhodného plastického materiálu, přičemž je s výhodou pružné či ohebné. Toto uvedené potrubí 90 je možno připojit k vhodným výstupním prostředkům (na vyobrazeních neznázorněno), a to pomocí známých prostředků. Uvedené výstupní prostředky dále obsahují takové prostředky, jako je například vhodný jednocestný ventil nebo filtr, určený pro podstatné zamezení vstupu znečišťujících látek do uvedené nádobky 20 uvedenými plynovými výstupními prostředky.
Alespoň část horního konce 26 může být vhodně uspořádána tak, aby bylo usnadněno shromažďování odpadních plynů ještě předtím, než budou odvedeny uvedeným vstupním otvorem 96. Takže u výhodného prvního a druhého provedení je horní část horního konce 26 postupně zúžena až na minimální průřezovou plochu v blízkosti umístění vstupního otvoru 96. Alternativně může být alespoň horní část horního konce 26 vytvořena příslušně ve tvaru komolého kužele nebo může být konvexní.
Uvedená nádobka 20 je dále opatřena aditivními přídavnými vstupními prostředky pro přivádění uvedené očkovací látky a/nebo uvedeného živného prostředí a/nebo uvedených přísad či přídavných látek do uvedené nádobky 20. U shora uvedených provedení předmětu tohoto vynálezu pak
-----uvedené—adiiivjíí—p±ídavjmé_vs±up_ní_prostředky obsahují vhodné potrubí 8 0, opatřené výstupním otvorem 8 6, umístěným s výhodou na uvedeném horním konci 26 nebo v jeho blízkosti, a to ve vzdálenosti d3 ode dna uvedeného spodního konce 28, přičemž vzdálenost d3 má pro výhodné provedení obvykle velikost přibližně 68 cm.
Uvedené potrubí 80 může být vyrobeno ze silikonu nebo z jiného plastického materiálu, přičemž je s výhodou pružné či ohebné. Uvedené potrubí 80 je možno známými prostředky připojit ke vhodnému sterilnímu přívodu uvedené očkovací látky a/nebo uvedeného živného prostředí a/nebo uvedených přísad či přídavných látek.
Uvedené aditivní přídavné vstupní prostředky dále obsahují prostředky pro podstatné zamezení vstupu znečišťujících látek do uvedené nádobky 20 prostřednictvím těchto aditivních přídavných vstupních prostředků, přičemž v tomto provedení obsahují vhodný jednocestný ventil nebo filtr 84 . Obvykle pak hladina obsahu nádobky 20 zůstává pod hladinou uvedeného výstupního otvoru 8 6.
·· ····
Uvedená nádobka 20 dále obsahuje opětovně využitelné sklízeči prostředky pro sklízení alespoň požadované první části uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, což umožňuje v případě potřeby využívat uvedené zařízení 10 nepřetržitě pro alespoň jeden následující pěstební cyklus. Zbývající druhá část uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, slouží jako očkovací látka pro další pěstební a sklízeči cyklus, který je opatřen uvedeným živným prostředím a/nebo uvedenými požadovanými pří sadami____________________________________________
Uvedené sklízeči prostředky mohou být rovněž využívány pro přivádění originálního objemu očkovací látky do nádobky 20, stejně jako pro umožnění toho, aby sklízený materiál zde mohl protékat a vytékat ven z nádobky 20. U shora uvedeného provedení předmětu tohoto vynálezu pak sklízeči prostředky obsahují potrubí 50, opatřené vstupním otvorem 52, který je propojen s vnitřním prostorem 30, a výstupním otvorem 56, který leží na vnější straně uvedené nádobky 20.
Uvedené potrubí 50 může být vyrobeno ze silikonu nebo z jiného vhodného plastického materiálu, přičemž je s výhodou pružné či ohebné. Uvedené potrubí 50 má poměrně velký průměr, obvykle kolem 2 cm, neboť sklízené buňky a/nebo tkáně, které tímto potrubím 50 protékají, mohou obsahovat hrudky buněčných částic, které by mohly užší potrubí ucpat.
Vstupní otvor 52 je s výhodou umístěn v blízkosti spodního konce 28 uvedené nádobky 20, takže je sklízen pouze obsah nádobky 20 nad tímto vstupním otvorem 52. Takže na konci každého sklízecího cyklu pak uvedená druhá část živného ·· ··
9 9 9
9099 9 9 9 9 9 9 0 9 9 9 9 9
0 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, zůstává automaticky u uvedeného spodního konce 28 uvedené nádobky 2 0 až k úrovni pod úrovní 51 uvedeného vstupního otvoru 52, který je umístěn ve vzdálenosti d2 ode dna uvedeného spodního konce 28 . Velikost této vzdálenosti d2 je u příkladného výhodného provedení zhruba 25 cm.
Alternativně může být uvedený vstupní otvor 52 umístěn v nej spodněj ším bodě uvedené nádobky 20, přičemž pracovník z obsluhy—může—manuálně—zajistit,_____že___vhodná__část__živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, zůstane v nádobce 20 po ukončení sklizně požadované části živného prostředí s buňkami a/nebo tkáněmi.
Uvedené sklízeči prostředky dále obsahují prostředky pro řízení průtoku, jako například vhodný ventil 54, a/nebo aseptickou přípojku 55 pro uzavírání nebo pro umožnění průtoku materiálu dovnitř nebo ven z uvedené nádobky 20 prostřednictvím uvedených sklízečích prostředků. Uvedená aseptická přípojka 55 bývá obvykle vyrobena z nerezové oceli, přičemž z dosavadního stavu techniky je známa celá řada vhodných příkladů.
Uvedené sklízeči prostředky dále s výhodou ještě obsahují prostředky pro zabránění znečištění či kontaminaci za účelem podstatného zamezení přivádění znečišťujících látek do uvedené nádobky 20 přes uvedené sklízeči prostředky po ukončení sklizně.
U výhodného druhého a třetího provedení předmětu tohoto vynálezu pak uvedené prostředky pro zamezení znečištění obsahují tekutinový sifon 300. Tento tekutinový sifon 300 má ·· ···· • · s výhodou v podstatě tvar duté trubice ve tvaru písmene U, jejíž jedno rameno je připevněno k výstupnímu otvoru 56 uvedených sklízečích prostředků, zatímco druhé rameno je opatřeno vnějším otvorem 58 . Sklízené buňky nebo tkáně mohou proudit ven ze zařízení 10 přes uvedené sklízeči prostředky, přes tekutinový sifon 300 a přes uvedený vnější otvor 58, za kterým jsou shromažďovány do vhodné přijímací nádrže, jak bude v dalším podrobněji popsáno.
_______Po__ukončení_s_klizně může být do sklízečích prostředků přiváděn vzduch, a to výstupním otvorem 56, což je doprovázeno určitým zpětným prouděním sklízeného materiálu, čímž může potenciálně dojít ke vstupu znečišťujících látek do zařízení 10. . Tekutinový sifon 300 ve tvaru duté trubice ve tvaru písmene U řeší tento potenciální problém, neboť zachycuje určitý sklízený materiál, to jest buňky a tkáně, směrem dolů ve směru proudění od výstupního otvoru 56, čímž zabraňuje tomu, aby se do sklízečích prostředků mohl dostat vzduch a případné znečišťující látky.
Čas od času jsou sklízeči prostředky uzavřeny uvedeným ventilem 54, tekutinový sifon 300 ve formě trubice ve tvaru písmene U je odejmut a je obvykle sterilizován pro další využití nebo je vyřazen. Tento tekutinový sifon 300 ve formě trubice ve tvaru písmene U může být vyroben z nerezové oceli nebo z jiného vhodného pevného plastického materiálu.
U shora uvedených provedení uvedená zbývající druhá část uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, obvykle obsahuje mezi 10 % a 20 % původního objemu uvedeného živného prostředí a uvedené očkovací látky, přičemž tato uvedená druhá část může být v případě potřeby větší, ···· • 444 · · · · • ·· · · 4 4 4 4 4 4 · 4 • 4 44 44 444 44 44 než 20 %, a to až do výše 45 % nebo více, nebo může být menší, než 10 %, a to až do výše 2,5 % nebo méně z uvedeného původního objemu.
Uvedené zařízení 10 může případně dále obsahovat připevňovací prostředky pro připevnění tohoto zařízení 10 k přečnívající nosné konstrukci. U shora uvedených provedení může takováto nosná konstrukce obsahovat tyč 100 (viz obr. 1 a obr. 2) nebo prstence (na vyobrazeních neznázorněno).
U—třetího—provedení___pxe drnět u__-t_o.h.o.ti3_tvyná lezu __ mohou uvedené připevňovací prostředky obsahovat hák 25, který je s výhodou integrálně připevněn k uvedenému hornímu konci 2 6 uvedené nádobky 2 0.
Alternativně pak, jak je příslušně znázorněno u výhodného prvního a druhého provedení na obr. 1 a na obr. 2, mohou uvedené připevňovací prostředky obsahovat s výhodou pružné a v podstatě válcové závěsné oko 27 z vhodného materiálu, obvykle ze stejného materiálu, jaký byl použit pro nádobku 20, přičemž může být toto závěsné oko 27 provedeno buď integrálně se zařízením 10, nebo může být vhodně připevněno (například tavným svařováním) k hornímu konci 26 zařízení 10. Uvedená nádobka 20 může být vytvořena tavným spojováním dvou vhodných listů nebo pásů vhodného materiálu, jak bylo již shora řečeno, a to podél předem stanovených švů či svarů.
Jak je vidět na vyobrazení podle obr. 4, mohou být dva pásy 200 materiálu vyříznuty do přibližně podlouhlého obdélníkového tvaru a umístěny vzájemně- jeden na druhý. Tyto ·· ··«· • · · «
• ·· pásy 200 jsou poté tavným způsobem vzájemně k sobě spojeny, a to způsobem, který je z dosavadního stavu techniky velmi dobře a všeobecně znám, takže vytvářejí švy podél obvodu 205 delší strany a podél obvodu 206 delší strany a rovněž podél obvodu jednoho z kratších konců 210, a opět rovnoběžně a směrem dovnitř umístěny vytvářejí šev 220 na horním konci nádobky 20.
Tavné švové svary 207 a 208 podél delších stran, umístěné mezi těmito___rovnoběžnými krátkýmj koncovými švy 210 a 220, mohou být odříznuty nebo jinak odstraněny, přičemž zde může být efektivně ponechána smyčka materiálu, vytvářející závěsné oko 27.
Spodní konec 28 nádobky 20 je vytvořen tavným spojením zbývajícího krátkého konce pásů podél dvou skloněných švových linií 230 a 240, které se vzájemně sbíhají od švových svarů 205 a 206 delších stran. Popřípadě mohou být dvě skloněné švové linie 230 a 240 spojeny nad vrcholem jiné linie tavného švového svaru 260, přibližně kolmé na švové svary 205 a 206 delší strany.
Ještě před započetím tavného svařování dvou pásů materiálu k sobě mohou být tavně navařeny pevné plastické výstupky 270, 290, 280 a 250 v místech, která odpovídají příslušně uvedeným vzduchovým vstupním prostředkům, vzduchovým výstupním prostředkům, aditivním přídavným vstupním prostředkům a sklízecím prostředkům. Tyto pevné plastické výstupky 270, 290, 280 a 250 vytvářejí vhodné mechanické připevňovací body pro každý z odpovídajících vstupních a výstupních prostředků.
·· « v · · « · * 9
999
99
9 9 9
9 9 9
999 9 9 9 • · ·· ·«
U všech provedení je zařízení 10 vyrobené z materiálu nebo z materiálů, které jsou biologicky kompatibilní neboli slučitelné, a které umožňují, aby mohla být nádobka 20 před prvním použitím řádně sterilizována..
Tento vynález se rovněž týká baterie zařízení na jedno použití pro axenické pěstování a sklízení buněk a/nebo tkání v cyklech, přičemž každé z většího počtu těchto zařízení je konstrukce a provozně podobné uvedenému zařízení 10, tak jak byle shora definováno a popsáno .—-----------Jak je znázorněno na vyobrazení podle obr. 5, tak baterie 500 obsahuje větší počet uvedených zařízení 10, která jsou nesena na rámu nebo na rámech (na vyobrazení neznázorněno) prostřednictvím uvedených připevňovacích prostředků. Obvykle může být baterie 500 rozdělena do většího počtu skupin, přičemž každá z těchto skupin obsahuje určitý počet zařízení 10.
U výhodného provedení předmětu tohoto vynálezu jsou uvedené vzduchové vstupní prostředky zařízení 10 v každé skupině spolu vzájemně propojeny. Takže uvedená vzduchová vstupní potrubí 74 každého zařízení 10 příslušné skupiny jsou připojena ke společnému potrubí 174, které má volný konec, který je opatřen aseptickou přípojkou 175. Sterilizovaný vzduch je dodáván vhodným vzduchovým kompresorem 100, opatřeným vhodnými sterilizačními prostředky 110, jako je například jeden nebo několik filtrů. Tento kompresor 100 je opatřen výtlačným potrubím 101, které má na svém volném konci aseptickou přípojku 176, která bývá obvykle připojitelná k uvedené aseptické přípojce 175, umístěné na volném konce společného potrubí 174.
• 0 99 « 0 · · • 99 0 « 0 0 0
0
0« 00 • 0 00 99 0«0· Λ _ ♦·« 9 9 9
9 9 0 0 00 9 9 999
9 9 9 9 9 9 ··
9 9 9 9 9 9
99 99 999
Toto spojení je prováděno na počátku každého běhu pěstovacího a/nebo sklízecího cyklu v mobilním sterilním krytu 380, jehož účelem je zabezpečit sterilní podmínky a udržovat tyto .sterilní . podmínky během, spojováníTento mobilní sterilní kryt 380 poskytuje jednoduchý a poměrně nenákladný systém pro připojování různých obslužných příslušenství, jako je vzduch, tekutiny, očkovací látky a sklízené buňky, ke skupinám zařízení 10 za v podstatě sterilních podmínek.
Obdobně pak na konci každého běhu pěstovacího a/nebo sklízecícho cyklu jsou aseptické přípojky 175 a 176 pod mobilním sterilním krytem 380 rozpojeny a použitá zařízení jsou vyřazena, čímž je umožněno, aby aseptická přípojka 175 na kompresorovém konci byla připojena k aseptické přípojce 176 nové skupiny zařízení 10. Sterilizovaný vzduch je obvykle dodáván nepřetržitě, nebo může být alternativně dodáván v předem stanovených impulzech během každého pěstebního cyklu.
U výhodného provedení předmětu tohoto vynálezu je přebytečný vzduch a/nebo odpadní plyny z každého z uvedených zařízení odváděn do atmosféry prostřednictvím společného potrubí 290, které je vhodně připojeno ke každým odpovídajícím prostředkům 90 pro odvádění plynu. Uvedené společné potrubí 2 90 je opatřeno vhodnými prostředky 210, jako je například jeden nebo více filtrů, a to za účelem zabránění možnosti proudění znečišťujících látek do uvedených zařízení 10. Alternativně může být umožňěno, aby každé prostředky 90 pro odvádění plynu každého zařízení 10 mohly být individuálně odvětrány do atmosféry, a to s výhodou přes • · • · • · · · i · ·« i · · vhodné filtry, které by měly v podstatě zabránit proudění znečišťujících látek do zařízení 10.
Živná prostředí a příslušné přísady jsou obsaženy v jedné nebo v několika zásobních nádržích 340. Například mikroskopické prvky, makroskopické prvky a vitamíny mohou být uloženy v různých nádržích, zatímco přísady, jako například antibiotika a fungicidy, mohou být rovněž uloženy v ještě dalších oddělených nádržích.
Čerpací prostředky 345, obsluhující každou nádrž, umožňují, aby byly požadované relativní poměry každé složky živného prostředí a/nebo přísad dodávány v předem stanoveném a řízeném průtokovém množství a předem stanovenou a řízenou průtokovou rychlostí do statického mísiče 350, kterým protéká z vhodného přívodu 360 voda, která je buď destilovaná nebo je vhodně filtrována a vyčištěna, přičemž tomuto průtoku vody s výhodou napomáhají vhodné čerpací prostředky 365 (viz obr. 5).
Nastavením průtokových rychlostí čerpacích prostředků 345 a 365 může být například řízena koncentrace živného prostředí stejně jako koncentrace dostupných přísad, dodávaných do uvedených zařízení 10. Živné prostředí a/nebo přísady, smíšené s vodou, mohou být poté dodávány z uvedeného statického mísiče 350 za sterilních podmínek přes filtr 310 a přes přívodní napájecí potrubí 370, které je na svém volném konci 390 opatřeno aseptickou přípojkou 375.
U příkladného provedení předmětu tohoto vynálezu je vstup aditivního přídavného potrubí 80 každého odpovídajícího zařízení 10 ve skupině uvedených zařízení připojen ke • · • · • · · ·
společnému potrubí 180, které je na svém volném konci opatřeno společnou aseptickou přípojkou 376. Tato společná aseptická přípojka 376 může být poté připojena v uvedeném mobilním sterilním krytu 380 .k aseptické přípojce _37 5 na volném konci 390 přívodního napájecího potrubí 370 pro přívod živného prostředí a přísad, čímž je umožněno, že do každého zařízení 10 baterie 500 nebo příslušné skupiny bude dodáváno živné prostředí a příslušné přísady.
--Na—konci—životnosti—zařízení—10—a—ještě—před—vyřazením těchto zařízení 10 jsou aseptické přípojky 375 a 37 6 pod sterilním krytem 380 rozpojeny. Aseptická přípojka 375 je poté připravena k připojení k nové aseptické přípojce 376 další sterilizované skupiny nových zařízení 10 baterie 500, která jsou připravena pro absolvování dalšího běhu pěstovacích a/nebo sklízečích cyklů.
Sterilní kryt 380 může být rovněž využit pro připojování nádrže 350 na živné prostředí a/nebo přísady ke každému jednotlivému zařízení 10 z celého počtu skupin těchto zařízení 10 v baterii 500, a to postupně v průběhu užitné životnosti těchto zařízení 10 v uvedených skupinách. Byla-li tedy například jedna skupina zařízení 10 obsloužena živným prostředím a/nebo přísadami, je aseptická přípojka 376 této skupiny dočasně asepticky utěsněna ve sterilním krytu 380, který se poté přesune k další skupině zařízení 10, kde je jejich společná aseptická přípojka 376 připojena ke sterilní přípojce 375 přívodního napájecího potrubí 370, čímž je umožněno, aby mohla být tato skupina zařízení 10 obsloužena živným prostředím a/nebo přísadami.
• · • · • · i ·» ··
U jiného provedení předmětu tohoto vynálezu může být mobilní sterilní kryt 380 využit ke vzájemnému připojení volného konce 390 s výhodou pružného a ohebného přívodního potrubí, připojeného..k uvedené statické, směšovací nádrži 350, k aditivním přídavným vstupním prostředkům každého zařízení 10 za sebou. Uvedený mobilní sterilní kryt 380 se poté může posunout od jednoho uvedeného zařízení 10 k dalšímu, přičemž je pokaždé uvedený volný konec 390 připojen ke vstupnímu konci odpovídajícího potrubí 80 za účelem umožnění—přívodu—živného prostředí do—každého září zení l_0 za sebou.
Mobilní sterilní kryt 380 společně s aseptickými připojovacími prostředky, vyrobenými s výhodou z nerezové oceli, na uvedeném konci 390 a na vstupu potrubí 80 příslušného odpovídajícího zařízení 10 umožňuje, aby každé zařízení 10 mohlo být snadno připojeno ke konci 390 a následně od tohoto konce 390 snadno odpojeno, čímž je umožněno provádění přívodu živného prostředí za sterilních podmínek. Celá řada dalších případů vhodných spojovacích prostředků pro vzájemné spojování trubek je z dosavadního stavu techniky velmi dobře a všeobecně známa.
Na konci 390 a na potrubí 80 jsou uspořádány vhodné filtry, které jsou určeny k zabránění nebo alespoň k minimalizaci potenciálního možného znečištění obsahu nádobky. Sterilní kryt 380 tak může být automaticky nebo manuálně přemísťován od zařízení 10 k zařízení 10, přičemž u každého dalšího zařízení 10 může pracovník obsluhy připojit toto zařízení 10 k přívodu živného prostředí s využitím mobilního sterilního krytu 380, může naplnit zařízení 10 příslušným vhodným množstvím živného prostředí a/nebo příslušných • ·
přísad, a může následně odpojit sterilní kryt 380 od zařízení 10, takže se tento sterilní kryt 380 může přesunout k následujícímu zařízení 10.
Konec 390 může být pochopitelně přizpůsoben tak, aby obsahoval větší množství připojovacích prostředků 375, než pouze jedinou sterilizovanou aseptickou přípojku 375, takže může být připojeno více než jedno zařízení 10, a zejména stejné množství těchto zařízení 10, opatřené příslušnými odpoví da j í c; mi—spog-O-vacími—pros Lředky_3_7_6_můž.e__b_ýt__s_ouča_sně_ připojeno k přívodu živného prostředí prostřednictvím vozíku 380.
Pokaždé před připojením uvedeného konce 390 ke každému zařízení 10 nebo k soupravě či skupině těchto zařízení 10 jsou příslušné odpovídající spojovací prostředky 375 a 376 obvykle autoklávově sterilizovány.
U ještě jiného provedení baterie 500 pak jediné potrubí nebo sada takovýchto potrubí (na vyobrazení neznázorněno) připojuje uvedený statický mísič 350 k uvedenému zařízení 10 nebo k příslušné odpovídající skupině těchto zařízení 10 současně, přičemž dopravníkový systém přepravuje zařízení 10 nebo skupinu těchto zařízení 10 k uvedenému jedinému potrubí nebo sadě takovýchto potrubí nebo naopak. Po naplnění uvedeného zařízení 10 nebo celé skupiny těchto zařízení 10 pak dopravník umožňuje, aby ke statickému mísiči 350 byla připojena další zařízení 10 nebo skupina těchto zařízení 10, a to prostřednictvím uvedeného jediného potrubí nebo prostřednictvím sady takovýchto potrubí.
U výhodného provedení předmětu tohoto vynálezu jsou sklízeči prostředky každého ze zařízení 10 ve skupině spolu vzájemně propojeny. Takže sklízeči potrubí 50 každého uvedeného zařízení 10 je připojeno ke společnému sklízecímu potrubí 154, majícímu volný konec 150, který je opatřen aseptickou přípojkou 155.
Každé z uvedených sklízečích potrubí 50 může být s výhodou opatřeno ventilem 54, jak již bylo shora popsáno,
-který_je určen_k uzavření nebo k umožnění průtoku sklízených buněk z každého příslušného odpovídajícího zařízení 10. Takže například bylo-li zjištěno, že je určitý počet zařízení 10 v určité skupině těchto zařízení 10 znečištěn, zatímco ostatní zařízení znečištěna nejsou, mohou být buňky z těchto neznečištěných zařízení 10 sklizeny bez obav, že by byly znečištěny z jiných zařízení, a to tak dlouho, pokud zůstanou ventily 54 u znečištěných zařízení 10 uzavřeny.
Uvedené společné potrubí je dále s výhodou opatřeno společným uzavíracím ventilem 259, umístěným vzhůru proti proudu od uvedené aseptické přípojky 155. Uvedené prostředky pro zabránění znečištění jsou s výhodou uspořádány pro podstatné zamezování přístupu znečišťujících látek do uvedené nádobky přes uvedené sklízeči prostředky po ukončení sklizně.
U výhodného provedení předmětu tohoto vynálezu jsou uvedené prostředky pro zabránění znečištění tvořeny v podstatě tekutinovým sifonem 400 ve tvaru písmene U, který je na jednom svém rameni opatřen aseptickou přípojkou 156, přičemž je na jeho druhém rameni uspořádán otvor 158, který je propojen s přijímací nádrží 590. Aseptické přípojky 155 ββ» a 156 jsou poté vzájemně spojeny v uvedeném mobilním sterilním krytu 380 za sterilních podmínek.
Sklízení je poté zahájeno otevřením ventilů 54 u všech zařízení 10 ve skupině, která není znečištěna, stejně jako otevřením společného uzavíracího ventilu 259. Buňky ze skupiny budou poté proudit do přijímací nádrže 590, s výhodou působením zemské přitažlivosti, přičemž může být v určitých případech použito i vhodného čerpadla. Po ukončení sklizně
--------mohou—bý-t___as-ept-ieiké_p.řj_p_o_j_ky__155 a 156 rozpojeny v uvedeném mobilním sterilním krytu 380, který se pak může přesunout k následující skupině zařízení 10. Odpovídající aseptická přípojka 155 této následující skupiny může být poté vzájemně spojena s aseptickou přípojkou 156 tekutinového sifonu 400 ve tvaru písmene U, čímž je umožněno, aby byly sklízeny buňky z této skupiny zařízení 10.
U jiného provedení předmětu tohoto vynálezu může jediné potrubí nebo sada takovýchto potrubí (na vyobrazeních neznázorněno) spojovat uvedenou společnou přijímací nádrž s uvedeným zařízením 10 nebo s odpovídající skupinou těchto zařízení 10 současně, přičemž dopravníkový systém přepravuje zařízení 10 nebo skupinu zařízení 10 k jedinému potrubí nebo k sadě takovýchto potrubí nebo naopak. Po ukončení sklizně uvedeného zařízení 10 nebo skupiny těchto zařízení 10 pak dopravník umožní, aby bylo další zařízení 10 nebo skupina takových zařízení 10 připojeno k uvedené společné přijímací nádrži prostřednictvím uvedeného jediného potrubí nebo prostřednictvím sady takovýchto potrubí.
U jiného provedení předmětu tohoto vynálezu může být každé zařízení 10 sklízeno individuálně, přičemž uvedené « · ·· ··· 4· ·· sklízeči prostředky každého zařízení 10 obsahují uvedené prostředky pro zabránění znečištění, určené k podstatnému zabránění vniknutí znečišťujících látek do uvedené nádobky přes uvedené sklízeči prostředky po ukončení sklizně. U tohoto provedení pak uvedené prostředky pro zabránění znečištění obsahují tekutinový sifon 400 ve tvaru písmene U, který byl již dříve popsán a který je opatřen aseptickou přípojkou 156 na svém jednom rameni, zatímco jeho druhé rameno je opatřeno otvorem 158, který je propojen s přijímací nádrž i 590 ______________;____________
Uvedené sklízeči prostředky jsou opatřeny aseptickou přípojkou 55, která může být spojena s aseptickou přípojkou 156 tekutinového sifonu 400 ve tvaru písmene U v uvedeném mobilním sterilním krytu 380 za sterilních podmínek. Sklízení je poté zahájeno otevřením ventilu 54 zařízení 10, přičemž buňky začnou proudit do přijímací nádrže 590 s výhodou působením zemské přitažlivosti, přestože je možno v určitých případech použít vhodného čerpadla.
Po ukončení sklizně mohou být tyto aseptické přípojky 55 a 156 rozpojeny v uvedeném mobilním sterilním krytu 380, který se poté může přesunout k dalšímu zařízení 10. Odpovídající příslušná aseptická přípojka 55 sklízečích prostředků tohoto zařízení může být poté připojena k aseptické přípojce 156 tekutinového sifonu 400 ve tvaru písmene U, čímž je umožněno, aby mohla být prováděna sklizeň tohoto dalšího zařízení 10.
U výhodného provedení předmětu tohoto vynálezu může být uvedených sklízečích prostředků rovněž využito pro počáteční přivádění očkovací látky při započetí nového běhu pěstovacího
4 4 4 4 «
4444 4 4 4 4 4 ·· 4 · 4 4 44
4 4 · 4 4 4 • 4 4 4 4 4 · · ·
a/nebo sklízecího cyklu. Takže očkovací látka může být smíchána se sterilizovaným živným prostředím ve vhodné nádrži, opatřené přívodním potrubím, které má na svém volném konci, aseptickou ^přípojku, která je připojena k uvedené aseptické přípojce 155 společného sklízecího potrubí 154 v mobilním sterilním krytu 380. Poté je umožněno, aby očkovací látka proudila působením zemské přitažlivosti nebo s pomocí vhodného čerpadla do každého ze zařízení 10 ve skupině uvedeným společným sklízecím potrubím 154, načež jsou poté -a-s©phd.-c-kč—př-ípo-j-kv-CK—mob-ilním sterilním krytu 380 rozpojeny.__
Alternativně může být uvedená očkovací látka přiváděna do zařízení přes uvedené aditivní přídavné vstupní prostředky, zejména prostřednictvím uvedeného aditivního přídavného společného potrubí 180, a to obdobným způsobem, jako tomu bylo u výše popsaného způsobu, týkajícího se sklízečích prostředků a společného sklízecího potrubí 155.
Vynález se rovněž týká způsobu pěstování a sklízení buněk a/nebo tkání v zařízení na vícenásobné použití, přičemž tento způsob zahrnuje následující kroky:
a) opatření uvedeného zařízení 10, které bylo shora definováno;
b) přivádění sterilního vzduchu do uvedené nádobky prostřednictvím uvedených vzduchových přívodních prostředků během každého cyklu, a to buď nepřetržitě nebo v jednotlivých impulzech;
c) přivádění sterilního živného prostředí a/nebo sterilních přísad prostřednictvím aditivních přídavných vstupních prostředků;
d) přivádění axenické očkovací látky prostřednictvím uvedených sklízečích prostředků;
e) případné osvětlování uvedené nádobky pomocí vnějších světelných prostředků;
f) umožnění růstu uvedených buněk a/nebo tkání v uvedeném živném prostředí až do požadované výtěžnosti;
g) nepřetržité umožňování odvádění přebytečného vzduchu a/nebo odpadních plynů z uvedené nádobky prostřednictvím uvedených plynových odváděčích prostředků;
h) kontrola znečištění a/nebo kvality buněk a/nebo tkání, které jsou pěstovány v uvedené nádobce: pokud byla zjištěna přítomnost znečišťujících látek nebo pokud bylo zjištěno, že buňky a/nebo tkáně, které jsou pěstovány, mají nízkou kvalitu, je zařízení 10 a jeho obsah vyřazeno; pokud nebyly zjištěny znečišťující látky, je prováděn krok i);
i) pěstování alespoň uvedené požadované první části uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, při ponechání zbývající uvedené druhé části živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, v uvedené nádobce, přičemž uvedená první část živného prostředí může sloužit jako očkovací látka pro další pěstova-cí a/nebo sklízeči cyklus;
«9 9· ····
j) přivádění uvedeného sterilního živného prostředí a/nebo sterilních přísad pro další pěstovací a/nebo sklízeči cyklus prostřednictvím uvedených aditivních přídavných přiváděčích prostředků;
k) opakování kroků b), e) , f), g) , h), i) a j) mnohokrát až do té doby, kdy je v kroku h) zjištěna přítomnost znečišťujících látek nebo kdy je zjištěno, že pěstované buňky a/nebo tkáně mají nízkou kvalitu, na základě čehož —-j-e—z-a-ří-z-e ná- -1-0—a—j-eho—obsah—v-y-ča-ze-n©-.—-—------Vynález se rovněž týká způsobu axenického pěstování a sklízení buněk a/nebo tkání anaerobně v baterii použitelných zařízení, přičemž tento způsobu zahrnuje následující kroky:
a) opatření baterie 500 alespoň jedné skupiny uvedených
| zařízení 10, | přičemž | tato zařízení | 10 | neobsahuj í |
| vzduchové přiváděči prostředky alespoň | pro | jedno z | ||
| uvedených zařízení 10; | ||||
| b) přivádění | axenické | očkovací látky | do | uvedeného |
| zařízení 10 | prostřednictvím společného | sklízecího |
potrubí;
c) přivádění sterilního živného prostředí a/nebo sterilních přísad do uvedeného zařízení 10 prostřednictvím uvedeného společného aditivního přídavného vstupního potrubí;
d) případné osvětlování uvedeného zařízení 10 pomocí vnějších světelných prostředků;
··· ·· ··
e) umožnění růstu uvedených buněk a/nebo tkání v uvedeném zařízení 10 v uvedeném živném prostředí až do požadované výtěžnosti;
f) umožnění odvádění přebytečného vzduchu a/nebo odpadních plynů z uvedeného zařízení 10 nepřetržitě prostřednictvím uvedeného společného plynového odváděcího potrubí;
q)—kontrola-znečištění_a/nebe__kvality_buněk__a/nebo tkání, které jsou pěstovány v uvedeném zařízení 10: pokud byla v uvedeném zařízení 10 zjištěna přítomnost znečišťujících látek nebo pokud bylo zjištěno, že buňky a/nebo tkáně, které jsou pěstovány, mají nízkou kvalitu, jsou uvedené sklízeči prostředky uvedeného zařízení 10 uzavřeny za účelem zabránění znečištění dalších uvedených zařízení 10 v uvedené baterii 500; pokud byly ve všech z uvedených zařízení 10 uvedené baterie 500 zjištěny znečišťující látky nebo byla zjištěna nízká kvalita pěstovaných buněk a/nebo tkání, jsou veškerá zařízení 10 a jejich obsahy vyřazeny; pokud nebyly znečišťující látky zjištěny a kvalita pěstovaných buněk a/nebo tkání je přijatelná, je zařízení 10 považováno za schopné ke sklízení a je prováděn krok h) ;
h) pro každé uvedené zařízení 10, schopné ke sklízení z kroku g) , je prováděna sklizeň alespoň požadované první části uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně prostřednictvím uvedeného společného sklízecího potrubí a uvedených prostředků pro zabránění znečištění do vhodné přijímací nádrže při ponechání uvedené druhé části živného prostředí, obsahujícího l ··«· • · • ··· buňky a/nebo tkáně, v uvedené nádobce, přičemž uvedená druhá část živného prostředí slouží jako očkovací látka pro další pěstovací a/nebo sklízeči cyklus;
i) přivádění uvedeného sterilního živného prostředí a/nebo sterilních přísad pro další pěstovací a/nebo sklízeči cyklus prostřednictvím uvedených aditivních přídavných přiváděčích prostředků;
___j )_opakování kroků d) ,_e} , £} ,___g) , h)—a—i-)--mnohokrát až do té doby, kdy je v kroku g) zjištěna přítomnost znečišťujících látek nebo kdy je zjištěno, že pěstované buňky a/nebo tkáně mají nízkou kvalitu pro všechna uvedená zařízení 10 z. uvedené baterie 500, na základě čehož jsou uvedené prostředky pro zabránění znečištění odpojeny od uvedených společných sklízečích prostředků a uvedená zařízení 10 a jejich obsahy jsou vyřazeny.
Vynález se rovněž týká způsobu axenického pěstování a sklízení buněk a/nebo tkání aerobně v baterii použitelných zařízení 10, přičemž tento způsob zahrnuje následující kroky:
a) opatření baterie 500 alespoň jedné skupiny uvedených zařízení 10, přičemž tato zařízení 10 obsahují vzduchové přiváděči prostředky, které byly shora popsány, pro alespoň jedno z uvedených zařízení 10;
b) přivádění axenické očkovací látky do uvedeného zařízení 10 prostřednictvím uvedeného společného sklízecího potrubí;
·· *· • to ·· ·· ···· • · · 9 9 9 n r · ··♦· to1 «to · to
JP · ·« 9 9 9 9 9 9 999 999
9 9 9 9 9 9 · · «· ·· ·· toto· ·· ··
c) přivádění sterilního živného prostředí a/nebo sterilních přísad do uvedeného zařízení 10 prostřednictvím uvedeného společného aditivního přídavného vstupního potrubí;
d) přivádění sterilního vzduchu do uvedeného zařízení 10 prostřednictvím společného vzduchového přívodního potrubí;
e) _případné__osvětlování_uvedeného září zen í i_0— pomocí vnějších světelných prostředků;
f) umožnění růstu uvedených buněk a/nebo tkání v uvedeném zařízení 10 v uvedeném živném prostředí až do požadované výtěžnosti;
g) umožnění odvádění přebytečného vzduchu a/nebo odpadních plynů z uvedeného zařízení 10 nepřetržitě prostřednictvím uvedeného společného plynového odváděcího potrubí;
h) kontrola znečištění a/nebo kvality buněk a/nebo tkání, které jsou pěstovány v uvedeném zařízení 10: pokud byla v uvedeném zařízení 10 zjištěna přítomnost znečišťujících látek nebo pokud bylo zjištěno, že buňky a/nebo tkáně, které jsou pěstovány, mají nízkou kvalitu, jsou uvedené sklízeči prostředky uvedeného zařízení 10 uzavřeny za účelem zabránění znečištění dalších uvedených zařízení 10 v uvedené baterii 500; pokud byly ve všech z uvedených zařízení 10 uvedené baterie 500 zjištěny znečišťující látky nebo byla zjištěna nízká kvalita pěstovaných buněk a/nebo tkání, jsou veškerá • · · ♦ 4 9 4 4 9 4 ·· * ·
-- 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
-S / · 4 999 9' · 444 · · 9 9 ' 4 99 999 « 94 444444
9 9 9 9 9 9 9 ·
99 99 99· 99 99 zařízení 10 a jejich obsahy vyřazeny; pokud nebyly znečišťující látky zjištěny a kvalita pěstovaných buněk a/nebo tkání je přijatelná, je zařízení 10 považováno za schopné ke sklízení a je prováděn krok i);
i) pro každé uvedené zařízení 10, schopné ke sklízení z kroku h) , je prováděna sklizeň alespoň požadované první části uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně prostřednictvím uvedeného společného _______ sklízecího potrubí_a_uvedených prostředků pro zabránění_______ znečištění do vhodné přijímací nádrže při ponechání uvedené druhé části živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, v uvedené nádobce, přičemž uvedená druhá část živného prostředí slouží jako očkovací látka pro další pěstovací a/nebo sklízeči cyklus;
j) přivádění uvedeného sterilního živného prostředí a/nebo sterilních přísad pro další pěstovací a/nebo sklízeči cyklus prostřednictvím uvedených aditivních přídavných přiváděčích prostředků;
k) opakování kroků d), e), f) , g) , h) , i) a j) mnohokrát až do té doby, kdy je v kroku h) zjištěna přítomnost znečišťujících látek nebo kdy je zjištěno, že pěstované buňky a/nebo tkáně mají nízkou kvalitu pro všechna uvedená zařízení 10 z uvedené baterie 500, na základě čehož jsou uvedené prostředky pro zabránění znečištění odpojeny od uvedených společných sklízečích prostředků a uvedená zařízení 10 a jejich obsahy jsou vyřazeny.
·» ·· ·· ···· ·· ·· ·*· · · · · · · ·
Q · 9 · · · · ···· ·..·· · · ’·· ·♦· · ·· ··· ···
Systém pro čištění vody obvykle dodává deíonizovanou vodu, zbavenou pyrogenů, do nádrže, obsahující koncentrované živné prostředí, přičemž zředěné živné prostředí je poté čerpáno do uvedeného zařízení 10 prostřednictvím uvedených aditivních přídavných přívodních prostředků. Do přívodního potrubí a rovněž proti proudu nad uvedenými aditivními přídavnými přívodními prostředky bývají obvykle instalovány filtry o velikosti ok 0,2 μιη, a to za účelem minimalizace rizika znečištění obsahu nádobky v každém zařízení 10. Za účelem minima1A-zace-1 ohoř o—-rizA-k-a-—mů-ž-e-být-aAťe-ma-tA-v-ně—-nebo přídavně rovněž využito jednocestného ventilu.
Pro první pěstovací cyklus u každého zařízení 10 je očkovací látka, obvykle vzorek typu buňky, kterou je zamýšleno pěstovat v uvedeném zařízení 10, předběžně směšována s živným prostředím nebo s vodou v parou sterilizované nádobce, a je přiváděna do zařízení 10 prostřednictvím sklízečích prostředků. Živné prostředí je poté přiváděno do zařízení 10 prostřednictvím uvedených aditivních přídavných přiváděčích prostředků. Pro následující cykly je přiváděno pouze živné prostředí a/nebo přísady, jak již bylo shora popsáno.
Vzduchový kompresor obvykle dodává v podstatě sterilizovaný vzduch do každého uvedeného zařízení 10 prostřednictvím celé řady filtrů: přes hrubý filtr pro odstraňování hrubších částic, přes vysoušeč a vlhkostní filtr pro odstraňování vlhkosti, a přes jemný filtr obvykle s oky o velikosti 0,2 μιη pro odstraňování znečišťujících látek. S výhodou je možno použít i dalšího filtru, umístěného zejména ve směru proti proudu od uvedených vzduchových přívodních ·· • 4 4
4 4 44 « · «
4 4 1
44
4 4 4 4 4 • · » 4 4 44
44 prostředků, čímž se dále snižuje riziko znečištění obsahu nádobky.
Pro každé uvedené zařízení 10 jsou všechny přípojky k nádobce 20, prostředkům, prostředkům, prostředkům vzduchovým přídavným plynovým přívodním přívodním výstupním to jest k uvedeným k uvedeným aditivním a zejména rovněž k a ke sklízečům prostředkům sterilizovány v autoklávu před jejich použitím, přičemž jejich sterilita je udržována_b_ěhe.m_přip_oj_ojváni_pomo_cnému^vyb_avLení_,__-_a.__t_o_uvčetně_ například uvedených vzduchových přívodních prostředků . a uvedených výstupních prostředků prováděním spojení ve sterilním krytu, jak již bylo shora popsáno.
Řízení a ovládání teploty je pro každé zařízení 10 s výhodou prováděno vhodnými klimatizačními prostředky. Případné osvětlování zařízení 10 může být prováděno vhodnými fluorescenčními světelnými prostředky, vhodně uspořádanými kolem uvedeného zařízení 10, pokud je to požadováno pro růst buněk.
V průběhu každého pěstovacího cyklu je u každého zařízení 10 obsah každé příslušné nádobky 20 obvykle provzdušňován a promícháván po dobu zhruba 7 až 14 dnů nebo déle, a to při regulované teplotě a řízených světelných podmínkách.
Na konci pěstovacího cyklu jsou pro každé zařízení 10 odpovídající sklízeči prostředky obvykle připojeny k předem sterilizovanému prostředí prostřednictvím vhodných přípojek, které jsou sterilizovány před a v průběhu spojování, jak již bylo shora popsáno. Poté je prováděna sklizeň, přičemž je ·» *· «· *··· ·· 99 • φ Ο ·β· · · · · · · ··· · · ··· · ·· · “ ν « ··· · · · · · · φ·φ • · · φ · φ · · · ·· ·· ·· ··· ·· ·· ponecháváno mezi zhruba 2,5 % do zhruba 45 %, obvykle pak mezi zhruba 10 % až zhruba 20 % buněk a/nebo tkání, které slouží jako očkovací látka pro další cyklus.
Sklizené buňky a/nebo tkáně mohou poté být podle požadavku sušeny nebo extrahovány.
Předmět tohoto vynálezu bude nyní podrobněji popsán s odkazy na následující příklady jeho provedení, které však nejsou určeny k omezování rozsahu ochrany tohoto vyn.á 1ezu____
Příklad: Pěstování buněk Vinca
Byla použita skupina deseti bioreaktorů (z nichž každý je zařízením 10 podle tohoto vynálezu), každý je opatřen nádobkou, vyrobenou z polyetylén-nylon kopolymerů (tloušťka stěny 0,1 mm, průměr 20 cm, výška 1,2 m) , opatřenou vstupními otvory 30 mm ve výšce 5 cm (pro vzduchové vstupní prostředky), 25 cm (pro sklízeči prostředky), 68 cm (pro aditivní přídavné přiváděči prostředky) a 90 cm (pro plynové výstupní prostředky) ode dna, a mající efektivní účinný plnitelný objem zhruba 10 litrů. Tyto bioreaktory byly společně s jejich přípojkami sterilizovány pomocí gama záření (2,5 mRad).
Do každého bioreaktorů bylo přivedeno 9 litrů minerálního a vitamínového živného prostředí Schenk & Hildebrandt, 2 mg/1 kyseliny chlorofenoxyacetické, mg/1 kyseliny dichlorofenoxyacetické, 0,2 mg/1 kinetinu, % sacharózy a 900 ml náplňového objemu iniciační očkovací látky linie V24 Catharanthus roseus (Vinca) buněk. Objem vzduchu nad hladinou živného prostředí byl 3 1. Bylo ·· «4 4444 44 ·· e W β 4 « · 4 β β · · 444 9 9 999 4 4 4 · • 9 9 9 9 9 · 4 4 ··· ··· ······ 4 · 4
44 44 444 44 44 prováděno provzdušňování s využitím průtočného objemu 1,5 1/min. sterilního vzduchu, přiváděného přes otvor o průměru 4 mm (vzduchové přívodní prostředky), umístěný ve výšce 1 cm nade dnem nádobky.
Bioreaktory byly uspořádány v místnosti s řízenou teplotou (25° C), přičemž pěstování probíhalo nepřetržitě po dobu 10 dnů, až se náplňový objem zvýšil zhruba na 7,5 litru (75 % celkového objemu; zdvojené množství dvou dnů během __ logaritmické__fáze)______V___tomto_bodě__časového_ú seku by 1 y__buňky _ _ sklizeny odebráním devíti litrů živného prostředí a buněk prostřednictvím sklízečích prostředků, přičemž bylo prostřednictvím aditivních přídavných přívodních prostředků přidáno devět litrů čerstvého sterilního živného prostředí společně s čerstvými sterilními přísadami. Buňky byly opětovně sklízeny po desetidenních intervalech v šesti přídavných cyklech, přičemž po uplynutí této doby byl tento běh ukončen.
Takto byla nashromážděna celková hmotnost 6,5 kilogramů čerstvých buněk (0,5 kilogramu hmotnosti sušiny) za dobu sedmi desetidenních časových úseků, a to z každého bioreaktoru o kapacitě deset litrů. Tyto buňky měly celkový obsah 0,6 % alkaloidů, to jest stejný, jako výchozí linie.
Přestože bylo ve shora uvedeném popisu popsáno pouze několik provedení, není předmět tohoto vynálezu omezen pouze na tato provedení a je definován toliko rozsahem patentových nároků.
Claims (4)
1. Využitelné zařízení pro axenické pěstování a sklízení buněk a/nebo tkání v alespoň jednom cyklu, přičemž uvedené zařízení obsahuje sterilizovatelnou průhlednou a/nebo průsvitnou využitelnou nádobku, mající horní konec a spodní konec, kterážto nádobka může být alespoň částečně naplněna vhodným sterilním biologických živným prostředím pro pěstování buněk a/nebo tkání, a/nebo axenickou očkovací látkou,_a/nebo sterilním vzduchem, a/nebo požadovanými jinými___________ sterilními přísadami, přičemž uvedená nádobka obsahuje:
(i) plynové výstupní prostředky pro odvádění přebytečného vzduchu a/nebo odpadních plynů z uvedené nádobky, (ii) aditivní přídavné přiváděči prostředky pro přivádění uvedené očkovací látky a/nebo uvedeného živného prostředí a/nebo uvedených přísad do uvedené nádobky, vyznačující se tím, že dále obsahuje:
(iii) opětovně využitelné sklízeči prostředky pro umožnění sklízení alespoň požadované části uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, pokud je to požadováno, přičemž je umožněno, aby uvedené zařízení bylo používáno nepřetržitě pro alespoň jeden další následující pěstovací a/nebo sklízeči cyklus, přičemž zbytek uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, zbývající z předcházejícího sklízecího • Β ·· BB BBBB ·« ·· v c β ··· © · e β • BBBB · · Β·· · · · · • · · β * · · * · ·Β· ··· ······ Β Β · • · ·· ·· ··· ·· ΒΒ cyklu, může sloužit jako očkovací látka pro další pěstovací a sklízeči cyklus, přičemž je přiváděno uvedené živné prostředí a/nebo uvedené požadované přísady.
2. Zařízení podle nároku 1 vyznačující se tím, že dále obsahuje vzduchové přiváděči prostředky pro přivádění sterilního vzduchu ve formě bublinek do uvedeného živného prostředí prostřednictvím prvního vstupního otvoru, přičemž jsou uvedené vzduchové___přiváděči prostředky připojitelné ke vhodnému přívodu vzduchu.
3. Zařízení podle nároku 1 nebo 2 vyznačující se tím, že uvedené sklízeči prostředky obsahují prostředky pro zabránění znečištění, určené pro podstatné zabránění přívodu znečišťujících látek do uvedené nádobky prostřednictvím sklízečích prostředků.
Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačuj íci nepevná.
se tím, že uvedená nádobka je
5. Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že uvedená nádobka je vyrobena z nepevného plastického materiálu.
6. Zařízení podle nároku 5 vyznačující se tím, že uvedený materiál je vybrán ze skupiny, obsahující polyetylén, polykarbonát, kopolymer polyetylénu a nylon, PVC a EVA.
·· «· ·· ···· « e β · β « • · ··· · · ···
9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9
99 99 99 999
99 99
9 9 9 9
9 9 9 9
999 999
9 9
99 99
Ί. Zařízení podle nároků 5 nebo 6 vyznačující se tím, že nádobka je vyrobena z vrstveného laminátu z více než jedné vrstvy uvedených materiálů.
8. Zařízení podle kteréhokoliv z nároků 5 až 7 vyznačující se tím, že uvedená nádobka je vytvořena tavným spojením dvou vhodných pásů uvedeného materiálu podél předem stanovených švových svarů.
9. Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že uvedené vzduchové přiváděči prostředky obsahují vzduchové vstupní potrubí, rozprostírající se od uvedeného vstupního otvoru k místu uvnitř uvedené nádobky na uvedeném spodním konci nebo v jeho blízkosti.
10. Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že alespoň některé z uvedených vzduchových bublinek mají hlavní průměr o velikosti mezi zhruba 1 mm a zhruba 10 mm.
11. Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že alespoň některé z uvedených vzduchových bublinek mají hlavní průměr o velikosti zhruba 4 mm.
12. Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že uvedená nádobka obsahuje vhodný filtr, uspořádaný na uvedených plynových výstupních prostředcích pro podstatné zabránění přístupu • ·
45 :
znečišťujících látek do uvedené nádobky prostřednictvím uvedených plynových výstupních prostředků.
13. Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že uvedená nádobka dále obsahuje vhodný filtr, uspořádaný na uvedených aditivních přídavných přiváděčích prostředcích pro podstatné zabránění přístupu znečišťujících látek do uvedené nádobky prostřednictvím těchto aditivních přídavných přiváděčích prcszředků________________________. ----------------14. Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že uvedené prostředky pro zabránění znečištění obsahují tekutinový sifon ve tvaru písmene U, přičemž jeho jedno rameno je asepticky namontováno na vnější výstup uvedených sklízečích prostředků pomocí vhodných aseptických spojovacích prostředků.
15. Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že uvedené sklízeči prostředky jsou umístěny u dna uvedeného spodního konce uvedené nádobky.
16. Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 14 vyznačující se tím, že uvedené sklízeči prostředky jsou umístěny v blízkosti dna uvedeného spodního konce uvedené nádobky, takže na konci každého sklízecího cyklu uvedený zbytek uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, automaticky zůstává u uvedeného spodního konce uvedené nádobky až do úrovně pod hladinou uvedených sklízečích prostředků.
46 :
• «
17. Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že uvedený zbytek uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, obsahuje mezi zhruba 2,5 % a zhruba 45 %, s výhodou pak mezi zhruba 10 % a zhruba 20 % původního objemu uvedeného živného prostředí a uvedené očkovací látky.
18. Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že uvedený spodní konec je v podstatě konvexní____:__:______
19. Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 17 vyznačující se tím, že uvedený spodní konec má v podstatě tvar komolého kužele.
20. Zařízení podle kteréhokoliv z předcházejících nároků vyznačující se tím, že uvedená nádobka obsahuje vnitřní plnitelný objem o velikosti mezi zhruba pěti litry a zhruba padesáti litry.
21. Zařízení podle kteréhokoliv z vyznačující se tím, dále obsahuje vhodné připevňovací připevnění k vhodné nosné konstrukci.
předcházejících nároků že uvedené zařízení prostředky pro jeho
22. Zařízení . podle nároku 21 vyznačující se tím, že uvedené připevňovací prostředky obsahují závěsné oko z materiálu, který je s výhodou integrálně připevněn k uvedenému hornímu konci uvedené nádobky.
• · ···· « ·
4 7 · · ···
4 / · · e · · « · ···
23. Baterie vyznačuj ící dvě uvedená využitelná předcházejících nároků.
uvedených zařízení se tím, že obsahuje alespoň zařízení podle kteréhokoliv z podle se tím, nároku že uvedená
24. Baterie vyznačuj ící jsou nesena vhodnou nosnou konstrukcí prostřednictvím zařízení uvedených _zaří zení.
připevňovacích prostředků každého uvedeného
25. Baterie podle nároků 23 nebo 24 vyznačující se tím, že uvedené plynové výstupní prostředky každého uvedeného zařízení jsou vhodně připojeny ke společnému plynovému výstupnímu potrubí, které případně obsahuje vhodné prostředky pro zabránění tomu, aby znečišťující látky proudily do uvedených zařízení.
26. Baterie vyznačuj ící pro zabránění tomu, podle se tím, ze nároku 25 uvedené prostředky aby znečišťující látky proudily do uvedených zařízení, obsahují vhodný filtr,
27. Baterie podle kteréhokoliv z vyznačující se tím, že nároků 23 až 26 uvedené aditivní přídavné přiváděči prostředky každého uvedeného zařízení jsou vhodně připojeny ke společnému aditivnímu přídavnému přiváděcímu potrubí, jehož volný konec je případně opatřen vhodnými aseptickými připojovacími prostředky.
28. Baterie vyznačuj ící podle nároku 27 tím, že uvedený volný konec β β · β je připojitelný ke vhodnému přívodu živného prostředí a/nebo přísad.
29. Baterie podle kteréhokoliv z nároků 23 až 28 vyznačující se tím, že uvedené sklízeči prostředky každého uvedeného zařízení jsou vhodně připojeny ke společnému sklízecímu potrubí, jehož volný konec je případně opatřen vhodnými aseptickými připojovacími prostředky.
30. Baterie vyznačující s prostředky pro zabránění vstupu znečišťujících prostřednictvím uvedeného podle e tím, znečištění látek společného nároku 29 že dále obsahuje pro podstatné zamezení do uvedené nádobky sklízecího potrubí.
31. Baterie podle nároku 30 vyznačující se tím, že uvedené prostředky pro zabránění znečištění obsahují tekutinový sifon ve tvaru písmene U, jehož jedno rameno je volné a je opatřeno otvorem, přičemž jeho druhý konec je asepticky připojitelný k uvedenému volnému konci uvedeného společného sklízecího potrubí prostřednictvím vhodných aseptických připojovacích prostředků.
32. Baterie podle nároku 3Ϊ vyznačující se tím, že uvedené volný konec uvedeného tekutinového sifonu ve tvaru písmene U je připojitelný k vhodné přijímací nádrži.
33. Baterie podle kteréhokoliv z nároků 23 až 32 vyznačující se tím, že uvedené vzduchové
49 :
• · ·
9 999 β
9 9 9 9 9 přiváděči prostředky každého uvedeného zařízení jsou vhodně připojeny ke společnému vzduchovému přívodnímu potrubí, jehož volný konec je případně opatřen vhodnými aseptickými připojovacími prostředky.
34. Baterie vyznačuj ící podle se tím, nároku 33 že uvedený volný konec je připojitelný ke vhodnému přívodu vzduchu.
__35. Způsob axenického pěstováni a sklízení buněk a/nebo tkání ve využitelném zařízení vyznačující se tím, že obsahuje následující kroky:
a) opatření uvedeného zařízení, které obsahuje sterilizovatelnou průhlednou a/nebo průsvitnou využitelnou nádobku, mající horní konec a spodní konec, kterážto nádobka může být alespoň částečně naplněna vhodným sterilním biologických živným prostředím pro pěstování buněk a/nebo tkání, a/nebo axenickou očkovací látkou, a/nebo sterilním vzduchem, a/nebo požadovanými jinými sterilními přísadami, přičemž uvedená nádobka obsahuje:
(i) plynové výstupní prostředky pro odvádění přebytečného vzduchu a/nebo odpadních plynů z uvedené nádobky, (ii) aditivní přídavné přiváděči prostředky pro přivádění uvedené očkovací látky a/nebo uvedeného živného prostředí a/nebo uvedených přísad do uvedené nádobky, ·· ···· ·'· ·· · ·(iii) opětovně využitelné sklízeči prostředky pro umožnění sklízení alespoň požadované části uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, pokud je to požadováno, přičemž je umožněno, aby uvedené zařízení bylo používáno nepřetržitě pro alespoň jeden další následující pěstovací a/nebo sklízeči cyklus, přičemž zbytek uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, zbývající z předcházejícího
--s-k-l-í-ze-cího_cyklu, může_sloužit jako očkovací látka pro další pěstovací a sklízeči cyklus, přičemž je přiváděno uvedené živné prostředí a/nebo uvedené požadované přísady,
b) přivádění axenické očkovací látky prostřednictvím uvedených sklízečích prostředků,
c) přivádění sterilního živného prostředí a/nebo sterilních přísad prostřednictvím uvedených aditivních přídavných přiváděčích prostředků,
d) případné osvětlování uvedené nádobky pomocí vnějších světelných prostředků,
e) umožnění růstu uvedených buněk a/nebo tkání v uvedeném živném prostředí až do požadované výtěžnosti,
f) umožnění odvádění přebytečného vzduchu a/nebo odpadních plynů z uvedené nádobky nepřetržitě prostřednictvím uvedených plynových odváděčích prostředků, • ·
g) kontrola znečištění a/nebo kvality buněk a/nebo tkání, které jsou pěstovány v uvedené nádobce: pokud byla zjištěna přítomnost znečišťujících látek nebo pokud bylo zjištěno, že buňky a/nebo tkáně, které jsou pěstovány, mají nízkou kvalitu, je zařízení i se svým obsahem vyřazeno; nebyla-li zjištěna přítomnost znečišťujících látek, je prováděn krok h),
h) sklízení uvedené požadované části uvedeného živného p roso ředí,_ob_s_ahuj-ícího buňky a/nebo tkáně,___při__ ponechání uvedeného zbytku živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, v uvedené nádobce, přičemž tento zbytek živného prostředí slouží jako očkovací látka pro další pěstovací a sklízeči cyklus,
i) přivádění uvedeného sterilního živného prostředí a/nebo sterilních přísad pro další pěstovací a/nebo sklízeči cyklus prostřednictvím uvedených aditivních přídavných přiváděčích prostředků;
j) opakování kroků d), e), f), g), h) a i) mnohokrát až do té doby, kdy je v kroku g) zjištěna přítomnost znečišťujících látek nebo kdy je zjištěno, že pěstované buňky a/nebo tkáně mají nízkou kvalitu, na základě čehož je zařízení i se svým obsahem vyřazeno.
36. Způsob podle nároku 35 vyznačující se tím, že uvedené zařízení dále obsahuje vzduchové přívodní prostředky pro přivádění sterilního vzduchu ve formě vzduchových bublinek do uvedeného živného prostředí prostřednictvím prvního vstupního otvoru, připojitelného ke vhodnému sterilnímu přívodu vzduchu, » ·· á β • · ·· ···· přičemž uvedený způsob dále obsahuje krok přivádění sterilního vzduchu do uvedených vzduchových přiváděčích prostředků během prvního cyklu a během každého následujícího cyklu.
37. Způsob podle nároku 36 vyznačující se tím, že uvedený sterilní vzduch je přiváděn nepřetržitě v průběhu alespoň jednoho pěstovacího cyklu.
38. Způsob podle nároku 36 vyznačující se tím, že uvedený sterilní vzduch je přiváděn v impulzech v průběhu alespoň jednoho pěstovacího cyklu,.
39. Způsob axenického pěstování a sklízení buněk a/nebo tkání v baterii využitelných zařízení vyznačující se tím, že obsahuje následující kroky:
a) opatření baterie zařízení podle nároku 31 a pro alespoň jedno uvedené zařízení,
b) přivádění axenické očkovací látky do uvedeného zařízení prostřednictvím společného sklízecího potrubí,
c) přivádění sterilního živného prostředí a/nebo sterilních přísad do uvedeného zařízení prostřednictvím uvedeného společného aditivního přídavného vstupního potrubí, • 4
d) případné osvětlování uvedeného vnějších světelných prostředků, zařízení pomocí
e) umožnění , růstu uvedených buněk a/nebo tkání . v uvedeném zařízení v uvedeném živném prostředí až do požadované výtěžnosti,
f) umožnění odvádění přebytečného vzduchu a/nebo odpadních plynů z uvedeného zařízení nepřetržitě prostřednict-v-í-m-uvedeného--společného plynového odváděcího potrubí,
g) kontrola znečištění a/nebo kvality buněk a/nebo tkání, které jsou pěstovány v uvedeném zařízení: pokud byla v uvedeném zařízení zjištěna přítomnost znečišťujících látek nebo pokud bylo zjištěno, že buňky a/nebo tkáně, které jsou pěstovány, mají nízkou kvalitu, jsou uvedené sklízeči prostředky uvedeného zařízení uzavřeny za účelem zabránění znečištění dalších uvedených zařízení v uvedené baterii; pokud byly ve všech z uvedených zařízení uvedené baterie zjištěny znečišťující látky nebo byla zjištěna nízká kvalita pěstovaných buněk a/nebo tkání, jsou veškerá zařízení a jejich obsahy vyřazeny; pokud nebyly znečišťující látky zjištěny, a. kvalita pěstovaných buněk a/nebo tkání je přijatelná, je zařízení považováno za schopné ke sklízení a je prováděn krok h),
h) pro každé uvedené zařízení, schopné ke sklízení z kroku g) , je prováděna sklizeň alespoň požadované první části uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně prostřednictvím uvedeného společného sklízecího potrubí a uvedených prostředků pro zabránění znečištění do vhodné přijímací nádrže při ponechání uvedeného zbytku živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, v uvedené nádobce,, přičemž uvedená druhá část živného prostředí slouží jako očkovací látka pro další pěstovací a/nebo sklízeči cyklus,
i) přivádění uvedeného sterilního živného prostředí a/nebo sterilních přísad pro další pěstovací a/nebo
--skl ízeoí—cy-kl-us—prostřednictvím_uvedených_aditivních přídavných přiváděčích prostředků,
j) opakování kroků d), e), f), g), h) a i) mnohokrát až do té doby, kdy je v kroku g) zjištěna přítomnost znečišťujících látek nebo kdy je zjištěno, že pěstované buňky a/nebo tkáně mají nízkou kvalitu pro všechna uvedená zařízení z uvedené baterie, na základě čehož jsou uvedené prostředky pro zabránění znečištění odpojeny od uvedených společných sklízečích prostředků a uvedená zařízení a jejich obsahy jsou vyřazeny.
40. Způsob axenického pěstování a sklízení buněk a/nebo tkání v baterii využitelných zařízení vyznačující se tím, že obsahuje následující kroky:
a) opatření baterie zařízení podle nároku 34 a pro alespoň jedno uvedené zařízení,
b) přivádění axenické očkovací látky do uvedeného zařízení prostřednictvím uvedeného společného sklízecího potrubí, • ·
c) přivádění sterilního živného prostředí a/nebo sterilních přísad do uvedeného zařízení prostřednictvím uvedeného společného aditivního přídavného vstupního potrubí,
d) přivádění sterilního vzduchu do uvedeného zařízení prostřednictvím uvedeného společného vzduchového přívodního potrubí,
e) —případné--osvětlování—uvedeného-zařízení-pomocí vnějších světelných prostředků,
f) umožnění růstu uvedených buněk a/nebo tkání v uvedeném zařízení v uvedeném živném prostředí až do požadované výtěžnosti,
g) umožnění odvádění přebytečného vzduchu a/nebo odpadních plynů z uvedeného zařízení nepřetržitě prostřednictvím uvedeného společného plynového odváděcího potrubí,
h) kontrola znečištění a/nebo kvality buněk a/nebo tkání, které' jsou pěstovány v uvedeném zařízení: pokud byla v uvedeném zařízení zjištěna přítomnost znečišťujících látek nebo pokud bylo zjištěno, že buňky a/nebo tkáně, které jsou pěstovány, mají nízkou kvalitu, jsou uvedené sklízeči prostředky uvedeného zařízení uzavřeny za účelem zabránění znečištění dalších uvedených zařízení v uvedené baterii; pokud byly ve všech z uvedených zařízení uvedené baterie zjištěny znečišťující látky nebo byla zjištěna nízká kvalita pěstovaných buněk a/nebo tkání, jsou veškerá zařízení a
4444 •••4 · 4 444 • 4 4 4 4 4
4 · · 4 4 «4 44 44 44» jejich obsahy vyřazeny; pokud nebyly znečišťující látky zjištěny a kvalita pěstovaných buněk a/nebo tkání je přijatelná, je zařízení považováno za schopné ke sklízení a je prováděn krok i),
i) pro každé uvedené zařízení, schopné ke sklízení z kroku h) , je prováděna sklizeň alespoň požadované první části uvedeného živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně prostřednictvím uvedeného společného sklízecího potrubí a uvedených _pro_st_ředků_ pro zabránění znečištění do vhodné přijímací nádrže při ponechání uvedeného zbytku živného prostředí, obsahujícího buňky a/nebo tkáně, v uvedené nádobce, přičemž uvedený zbytek živného prostředí slouží jako očkovací látka pro další pěstovací a/nebo sklízeči cyklus,
j) přivádění uvedeného sterilního živného prostředí a/nebo sterilních přísad pro další pěstovací a/nebo sklízeči cyklus prostřednictvím uvedených aditivních přídavných přiváděčích prostředků,
k) opakování kroků d), e), f), g) , h), i) a j) mnohokrát až do té doby, kdy je v kroku h) zjištěna přítomnost znečišťujících látek nebo kdy je zjištěno, že pěstované buňky a/nebo tkáně mají nízkou kvalitu pro všechna uvedená zařízení z uvedené baterie, na základě čehož jsou uvedené prostředky pro zabránění znečištění odpojeny od uvedených společných sklízečích prostředků a uvedená zařízení a jejich obsahy jsou vyřazeny.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IL11931096A IL119310A (en) | 1996-09-26 | 1996-09-26 | Cell/tissue culturing device and method |
| PCT/IL1997/000316 WO1998013469A1 (en) | 1996-09-26 | 1997-09-26 | Cell/tissue culturing device and method |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ104799A3 true CZ104799A3 (cs) | 1999-08-11 |
| CZ298148B6 CZ298148B6 (cs) | 2007-07-04 |
Family
ID=11069322
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ0104799A CZ298148B6 (cs) | 1996-09-26 | 1997-09-26 | Zarízení na jedno pouzití pro axenické pestování a sklízení bunek a/nebo tkání, baterie takových zarízení a príslusný zpusob |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6391638B1 (cs) |
| EP (1) | EP0938544B1 (cs) |
| JP (1) | JP3987121B2 (cs) |
| AT (1) | ATE231912T1 (cs) |
| AU (1) | AU4318097A (cs) |
| CA (1) | CA2266851C (cs) |
| CZ (1) | CZ298148B6 (cs) |
| DE (1) | DE69718812T2 (cs) |
| DK (1) | DK0938544T3 (cs) |
| ES (1) | ES2191851T3 (cs) |
| HK (1) | HK1023361A1 (cs) |
| HU (1) | HU226908B1 (cs) |
| IL (1) | IL119310A (cs) |
| PL (1) | PL190829B1 (cs) |
| WO (1) | WO1998013469A1 (cs) |
Families Citing this family (102)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050032211A1 (en) * | 1996-09-26 | 2005-02-10 | Metabogal Ltd. | Cell/tissue culturing device, system and method |
| IL155588A0 (en) * | 2003-04-27 | 2003-11-23 | Metabogal Ltd | Methods for expression of enzymatically active recombinant lysosomal enzymes in transgenic plant root cells and vectors used thereby |
| FR2781202B1 (fr) * | 1998-07-16 | 2001-01-12 | Stedim Sa | Poches pour produits fluides bio-pharmaceutiques |
| GB9915874D0 (en) * | 1999-07-08 | 1999-09-08 | Biofence Ltd | Microorganism culture |
| EP2284253B2 (de) * | 1999-09-08 | 2020-05-27 | Levitronix Technologies, LLC | Bioreaktor |
| US7086778B2 (en) * | 2000-10-09 | 2006-08-08 | Levtech, Inc. | System using a levitating, rotating pumping or mixing element and related methods |
| US6635441B2 (en) * | 2001-02-08 | 2003-10-21 | Irm, Llc | Multi-sample fermentor and method of using same |
| US20030100945A1 (en) | 2001-11-23 | 2003-05-29 | Mindguard Ltd. | Implantable intraluminal device and method of using same in treating aneurysms |
| JP4398125B2 (ja) * | 2001-12-05 | 2010-01-13 | 高木産業株式会社 | 細胞・組織培養装置 |
| US7168459B2 (en) * | 2002-04-12 | 2007-01-30 | Hynetics Llc | Feed bags and methods of use |
| IL166340A0 (en) * | 2002-07-18 | 2006-01-16 | Kemire Phosphates Pty Ltd | Proliferation and delivery apparatus |
| MXPA05000816A (es) | 2002-07-19 | 2005-04-28 | Baxter Int | Sistemas y metodos para realizar dialisis peritoneal. |
| US7951557B2 (en) | 2003-04-27 | 2011-05-31 | Protalix Ltd. | Human lysosomal proteins from plant cell culture |
| US20100196345A1 (en) * | 2003-04-27 | 2010-08-05 | Protalix | Production of high mannose proteins in plant culture |
| FR2854901B1 (fr) * | 2003-05-13 | 2006-05-26 | Rhodia Chimie Sa | Procede de preparation d'une suspension de micro-organismes |
| US20070113474A1 (en) * | 2003-05-30 | 2007-05-24 | Biolex, Inc. | Bioreactor for growing biological materials supported on a liquid surface |
| US7176024B2 (en) * | 2003-05-30 | 2007-02-13 | Biolex, Inc. | Bioreactor for growing biological materials supported on a liquid surface |
| WO2005006838A2 (en) * | 2003-07-21 | 2005-01-27 | Ben-Gurion University Of The Negev | Flat panel photobioreactor |
| US8206973B2 (en) * | 2003-09-04 | 2012-06-26 | Gotohti.Com Inc | Automated biological growth and dispensing system |
| WO2005044851A1 (en) | 2003-11-06 | 2005-05-19 | Compugen Ltd. | Variants of human glycoprotein hormone alpha chain: compositions and uses thereof |
| EP1701780B8 (en) | 2004-01-07 | 2014-09-24 | Pall Technology UK limited | Bioprocessing vessel with integral sparger, and method of its manufacture |
| US7875448B2 (en) * | 2004-01-12 | 2011-01-25 | Single Use Brx, Llc | Bioreactor systems and disposable bioreactor |
| GB0410118D0 (en) * | 2004-05-06 | 2004-06-09 | Glaxo Group Ltd | Novel bioreactor |
| CN101001945B (zh) | 2004-06-04 | 2012-02-08 | 艾克塞勒雷克斯公司 | 一次性生物反应器系统及方法 |
| JP4570032B2 (ja) * | 2004-07-12 | 2010-10-27 | 応用地質株式会社 | フレキシブル培養バッグを用いる嫌気培養試験装置 |
| US8603805B2 (en) | 2005-04-22 | 2013-12-10 | Hyclone Laboratories, Inc. | Gas spargers and related container systems |
| WO2006138143A1 (en) * | 2005-06-15 | 2006-12-28 | Amprotein Corporation | Suspension culture vessels |
| JP2008543307A (ja) * | 2005-06-15 | 2008-12-04 | アンプロテイン コーポレイション | 懸濁培養用容器 |
| US7628528B2 (en) * | 2005-10-26 | 2009-12-08 | PRS Biotech, Inc. | Pneumatic bioreactor |
| US8790913B2 (en) * | 2005-10-26 | 2014-07-29 | Pbs Biotech, Inc. | Methods of using pneumatic bioreactors |
| US20090047722A1 (en) * | 2005-12-09 | 2009-02-19 | Bionavitas, Inc. | Systems, devices, and methods for biomass production |
| GB2433266A (en) | 2005-12-16 | 2007-06-20 | Kevin Andrew Auton | Cell culture vessel |
| US8198076B2 (en) * | 2006-02-21 | 2012-06-12 | The Arizona Board Of Regents, A Body Corporate Acting On Behalf Of Arizona State University | Photobioreactor and uses therefor |
| JP4986659B2 (ja) * | 2006-03-23 | 2012-07-25 | 藤森工業株式会社 | 培養袋及び培養器 |
| DE102006018824A1 (de) | 2006-04-22 | 2007-10-25 | Bayer Technology Services Gmbh | Einweg-Bioreaktor |
| DE102006022307A1 (de) * | 2006-05-11 | 2007-11-15 | Respironics Novametrix, LLC, Wallingford | Einwegbioreaktor mit Sensoranordnung |
| CN101460605B (zh) * | 2006-05-13 | 2017-09-08 | Atmi有限责任公司 | 一次性生物反应器 |
| WO2007142664A1 (en) * | 2006-06-08 | 2007-12-13 | Amprotein Corporation | A method to increase dissolved oxygen in a culture vessel |
| US9512392B2 (en) * | 2006-06-08 | 2016-12-06 | Zhejiang Jinyishengshi Bioengineering Co., Ltd | Method to increase dissolved oxygen in a culture vessel |
| JP5254226B2 (ja) * | 2006-07-14 | 2013-08-07 | エクセレレックス インク． | 環境保護用収容システム |
| WO2008021990A2 (en) * | 2006-08-10 | 2008-02-21 | Barnes Allen C | Portable biological testing device and method |
| US10753927B2 (en) | 2006-09-22 | 2020-08-25 | ALERE TECHNOLOGIES GmbH | Methods for detecting an analyte |
| US20080131960A1 (en) * | 2006-11-15 | 2008-06-05 | Millipore Corporation | Self standing bioreactor construction |
| DE102006062634A1 (de) * | 2006-12-23 | 2008-06-26 | Stiftung Alfred-Wegener-Institut für Polar- und Meeresforschung Stiftung des öffentlichen Rechts | Kulturvorrichtung für aquatische Organismen |
| US20100028990A1 (en) * | 2007-02-15 | 2010-02-04 | Broadley-James Corporation | Sterile bioreactor bag with integrated drive unit |
| WO2008101127A2 (en) * | 2007-02-15 | 2008-08-21 | Broadley-James Corporation | Bioreactor jacket |
| WO2008131019A1 (en) * | 2007-04-20 | 2008-10-30 | Bionavitas, Inc. | Systems, devices, and, methods for releasing biomass cell components |
| US7713730B2 (en) | 2007-04-24 | 2010-05-11 | Pbs Biotech, Inc. | Pneumatic bioreactor |
| KR101489014B1 (ko) * | 2007-04-27 | 2015-02-02 | 도요세이칸 그룹 홀딩스 가부시키가이샤 | 세포배양장치, 세포배양시스템 및 세포배양방법 |
| EP2150608B1 (en) * | 2007-05-07 | 2017-11-29 | Protalix Ltd. | Large scale disposable bioreactor |
| GB2450337B (en) * | 2007-06-19 | 2009-06-17 | Cellexus Biosystems Plc | Cell culture and mixing vessel |
| DK2169054T3 (en) * | 2007-07-03 | 2016-03-07 | Idemitsu Kosan Co | A vaccine against edema disease in swine |
| WO2009018498A2 (en) * | 2007-08-01 | 2009-02-05 | Bionavitas, Inc. | Illumination systems, devices, and methods for biomass production |
| WO2009024977A2 (en) | 2007-08-20 | 2009-02-26 | Protalix Ltd. | Saccharide-containing protein conjugates and uses thereof |
| BE1017763A5 (nl) * | 2007-09-24 | 2009-06-02 | Proviron Holding | Bioreactor. |
| US8444587B2 (en) | 2007-10-01 | 2013-05-21 | Baxter International Inc. | Fluid and air handling in blood and dialysis circuits |
| US7892331B2 (en) * | 2007-10-01 | 2011-02-22 | Baxter International Inc. | Dialysis systems having air separation chambers with internal structures to enhance air removal |
| US7871462B2 (en) * | 2007-10-01 | 2011-01-18 | Baxter International Inc. | Dialysis systems having air separation chambers with internal structures to enhance air removal |
| US7892332B2 (en) * | 2007-10-01 | 2011-02-22 | Baxter International Inc. | Dialysis systems having air traps with internal structures to enhance air removal |
| US20090090022A1 (en) * | 2007-10-09 | 2009-04-09 | Hememics Biotechnologies, Inc. | Desiccation Chamber and Methods for Drying Biological Materials |
| US8123947B2 (en) * | 2007-10-22 | 2012-02-28 | Baxter International Inc. | Priming and air removal systems and methods for dialysis |
| US8114276B2 (en) | 2007-10-24 | 2012-02-14 | Baxter International Inc. | Personal hemodialysis system |
| US20090269849A1 (en) * | 2008-04-25 | 2009-10-29 | Pbs Biotech, Inc. | Bioreactor Apparatus |
| US8535936B2 (en) * | 2008-06-30 | 2013-09-17 | Twistaferm | Vessels for mixing bioprocessing materials |
| US8057679B2 (en) | 2008-07-09 | 2011-11-15 | Baxter International Inc. | Dialysis system having trending and alert generation |
| EP2364152A4 (en) * | 2008-11-03 | 2013-02-13 | Univ Johns Hopkins | METHOD FOR PRODUCING AND USING MARKINFILTRATING LYMPHOCYTES (MILS) |
| DE102009005962A1 (de) | 2009-01-23 | 2010-07-29 | Bayer Technology Services Gmbh | Begasungssystem |
| WO2010108091A2 (en) * | 2009-03-20 | 2010-09-23 | Pbs Biotech, Inc. | Automatable aseptic sample withdrawal system |
| DE102009028059A1 (de) | 2009-07-28 | 2011-02-10 | Wacker Chemie Ag | Verfahren zur Kultivierung von phototrophen Organismen |
| WO2011061736A1 (en) | 2009-11-17 | 2011-05-26 | Protalix Ltd. | Alkaline alpha galactosidase for the treatment of fabry disease |
| US9194011B2 (en) | 2009-11-17 | 2015-11-24 | Protalix Ltd. | Stabilized alpha-galactosidase and uses thereof |
| US8382711B2 (en) | 2010-12-29 | 2013-02-26 | Baxter International Inc. | Intravenous pumping air management systems and methods |
| JP5913372B2 (ja) | 2011-01-20 | 2016-04-27 | プロタリクス リミテッド | 植物および植物細胞におけるα−ガラクトシダーゼの発現のための核酸発現構築物 |
| US20140322804A1 (en) * | 2011-03-31 | 2014-10-30 | Sabin Boily | Photobioreactors and culture bags for use therewith |
| US9376655B2 (en) | 2011-09-29 | 2016-06-28 | Life Technologies Corporation | Filter systems for separating microcarriers from cell culture solutions |
| US9643133B2 (en) | 2011-09-30 | 2017-05-09 | Life Technologies Corporation | Container with film sparger |
| US9603906B2 (en) | 2012-02-01 | 2017-03-28 | Protalix Ltd. | Inhalable liquid formulations of DNase I |
| WO2013121405A1 (en) | 2012-02-19 | 2013-08-22 | Protalix Ltd. | Oral unit dosage forms and uses of same for the treatment of gaucher disease |
| AU2013262485B2 (en) | 2012-05-18 | 2017-12-14 | Wilson Wolf Manufacturing, LLC | Improved methods of cell culture for adoptive cell therapy |
| DE102012010155B4 (de) * | 2012-05-24 | 2015-06-11 | Pan-Biotech Gmbh | Zellkulturbehälter für den Einmalgebrauch |
| US20140099700A1 (en) * | 2012-10-04 | 2014-04-10 | Energaia, Inc. | Apparatus and system for bioreactor cultivating microorganisms and reducing carbon dioxide |
| WO2014074770A2 (en) | 2012-11-09 | 2014-05-15 | Heliae Development, Llc | Balanced mixotrophy methods |
| WO2014074772A1 (en) | 2012-11-09 | 2014-05-15 | Heliae Development, Llc | Mixotrophic, phototrophic, and heterotrophic combination methods and systems |
| BR112015021708A2 (pt) | 2013-03-06 | 2017-08-29 | Protalix Ltd | Inibidor de polipetídeo do tnfa, polinucleotídeo isolado, estrutura de expressão de ácido nucleico, célula de planta, composição farmacêutica e método de produção de um inibidor de polipeptídeo do tnfa |
| WO2015091455A1 (en) * | 2013-12-17 | 2015-06-25 | Dpx Holdings B.V. | Bioreactor |
| JP6311306B2 (ja) * | 2013-12-26 | 2018-04-18 | 株式会社Ihi | 細胞回収装置及び細胞培養システム |
| WO2015118547A1 (en) | 2014-02-10 | 2015-08-13 | Protalix Ltd. | Method of maintaining disease stability in a subject having gaucher's disease |
| US9079690B1 (en) | 2014-06-26 | 2015-07-14 | Advanced Scientifics, Inc. | Freezer bag, storage system, and method of freezing |
| DE102014111913A1 (de) | 2014-08-20 | 2016-02-25 | Best Vitality International Ltd. | Verfahren zum Gewinnen von Phytoplankton |
| US10000551B2 (en) | 2014-09-11 | 2018-06-19 | Protalix Ltd. | Chimeric polypeptides, polynucleotides encoding same, cells expressing same and methods of producing same |
| US9486590B2 (en) | 2014-09-29 | 2016-11-08 | Fenwal, Inc. | Automatic purging of air from a fluid processing system |
| KR102549261B1 (ko) | 2015-06-25 | 2023-06-28 | 감브로 룬디아 아베 | 분산형 데이터베이스를 갖는 의료 디바이스 시스템 및 방법 |
| US10625009B2 (en) | 2016-02-17 | 2020-04-21 | Baxter International Inc. | Airtrap, system and method for removing microbubbles from a fluid stream |
| US10589197B2 (en) | 2016-12-01 | 2020-03-17 | Life Technologies Corporation | Microcarrier filter bag assemblies and methods of use |
| BR112019012719A2 (pt) | 2016-12-21 | 2019-11-26 | Gambro Lundia Ab | sistema de dispositivo médico incluindo infraestrutura de tecnologia de informação tendo domínio de agrupamento seguro suportando domínio externo |
| DE102017107423A1 (de) | 2017-04-06 | 2018-10-11 | Agriculture New Energy Gmbh | Kultiviereinrichtung sowie Verfahren zum Gewinnen von Phytoplankton |
| DK3502229T3 (da) * | 2017-12-22 | 2022-08-08 | Evologic Tech Gmbh | Inokuleringsbeholder og bioreaktor til hårrodskulturer |
| KR102041088B1 (ko) * | 2018-02-19 | 2019-11-06 | (주)마이크로디지탈 | 일회용 세포 배양백 |
| US20220002653A1 (en) * | 2018-11-07 | 2022-01-06 | Bluebird Bio, Inc. | Cell therapy vessels |
| DE102018128010B4 (de) * | 2018-11-08 | 2021-02-11 | Bastian Steudel | Bioreaktor zum Kultivieren von photoautotrophen Mikroorganismen und dessen Verwendung |
| WO2020141328A1 (en) * | 2019-01-04 | 2020-07-09 | Oribiotech Ltd | Cell processing platform cell processing system and methods of use thereof |
| CA3231087A1 (en) | 2021-09-13 | 2023-03-16 | Plantibodies | Genetically modified organism for recombinant protein production |
Family Cites Families (48)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1053848A (cs) * | ||||
| US467993A (en) | 1892-02-02 | Alfred jorgensen | ||
| US2147271A (en) | 1937-07-16 | 1939-02-14 | Schwarz Lab Inc | Pure yeast culture apparatus |
| US2341259A (en) | 1941-01-22 | 1944-02-08 | Lummus Co | Inoculating method and apparatus |
| US2836434A (en) * | 1952-08-21 | 1958-05-27 | Separator Ab | Arrangement for sterile interconnection and sealing of apparatuses in a plant for instance for cultivation of bacteria |
| US3201327A (en) | 1962-08-21 | 1965-08-17 | Sun Oil Co | Fermentation apparatus and process |
| SE371208B (cs) | 1966-10-06 | 1974-11-11 | Sanraku Ocean Co | |
| US3468520A (en) | 1967-05-12 | 1969-09-23 | American Cyanamid Co | Combination agitation and transfer unit for suspended cells |
| US3504185A (en) | 1968-05-09 | 1970-03-31 | Univ Syracuse Res Corp | Apparatus for measuring and controlling cell population density in a liquid medium |
| GB1284077A (en) | 1968-10-18 | 1972-08-02 | British Petroleum Co | Process and apparatus for the cultivation of micro-organisms |
| US3540700A (en) | 1969-01-24 | 1970-11-17 | New Brunswick Scientific Co | Rotary processing apparatus |
| DE2059931C3 (de) | 1970-12-05 | 1973-10-18 | Knapsack Ag, 5033 Huerth-Knapsack | Verfahren zum Verhindern von Schaumausbrüchen aus geschlossenen Reaktionsräumen |
| US3793154A (en) | 1970-12-21 | 1974-02-19 | Univ St Johns | Apparatus for gaseous environmental control of batch cultures of micro-organisms |
| US3950227A (en) | 1970-12-21 | 1976-04-13 | St. John's University | Batch method of establishing and maintaining a controlled aerobic environment for a microbial culture |
| CS192067B1 (en) * | 1975-12-02 | 1979-08-31 | Drahoslav Pravda | Separation blood bag for the sterile preparation of the blood serum for single use |
| US4179339A (en) | 1977-03-02 | 1979-12-18 | Olympus Optical Company, Ltd. | Liquid feeder for automatic culture apparatus |
| US4228243A (en) | 1978-07-13 | 1980-10-14 | Toray Industries, Inc. | Cell culture propagation apparatus |
| CS202395B1 (cs) * | 1978-12-01 | 1981-01-30 | Zdenek Aunicky | Zařízeni na odtahování zralého média při kontinuálních aerobních kultivacích mikroorganismů |
| US4328317A (en) | 1980-03-31 | 1982-05-04 | Solargizer International, Inc. | Continuous chemical conversion or fermentation apparatus |
| DE3133314A1 (de) | 1981-08-22 | 1983-03-10 | Hoechst Ag, 6000 Frankfurt | "vorrichtung zum dispergieren einer zweiten phase in einer ersten phase" |
| CH663422A5 (de) | 1982-05-27 | 1987-12-15 | Chemap Ag | Verfahren und fermenter zur zuechtung von gewebezellen. |
| CS229179B1 (cs) * | 1982-12-22 | 1984-06-18 | Miroslav Ing Cerovsky | Zařízení pro kultivací mikroorganismů |
| US4708938A (en) | 1984-04-30 | 1987-11-24 | Hickinbotham Winemakers Pty. Ltd. | Alcoholic fermentation |
| EP0200792B1 (de) * | 1985-02-01 | 1990-05-09 | Herbert Prof. Dr.-Ing. Märkl | Folienfermenter |
| US4668632A (en) * | 1985-02-06 | 1987-05-26 | Vxr, Inc. | Sparger and apparatus for and method of growing cells |
| US5372945A (en) | 1985-06-06 | 1994-12-13 | Alchas; Paul G. | Device and method for collecting and processing fat tissue and procuring microvessel endothelial cells to produce endothelial cell product |
| US4713345A (en) | 1985-07-29 | 1987-12-15 | Grain Processing Corporation | Fermentation methods and apparatus |
| EP0224962A1 (en) | 1985-11-25 | 1987-06-10 | De Staat Der Nederlanden Vertegenwoordigd Door De Minister Van Welzijn, Volksgezondheid En Cultuur | Apparatus for the continuous cultivation of microorganisms in a culture liquid |
| US5166072A (en) | 1986-06-26 | 1992-11-24 | Bayer Aktiengesellschaft | Apparatus for the cultivation of immobilized micro-organisms |
| SE453752B (sv) * | 1986-07-04 | 1988-02-29 | Alfa Laval Food & Dairy Eng | Forfarande och anordning for aseptisk overforing av en vetskemengd, serskilt vid provtagning |
| US4717668A (en) | 1986-12-12 | 1988-01-05 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Plastic roller bottle for suspension cultures |
| US5081036A (en) | 1987-01-23 | 1992-01-14 | Hoffmann-La Roche Inc. | Method and apparatus for cell culture |
| US4908315A (en) * | 1987-03-04 | 1990-03-13 | Agristar, Inc. | Integument and method for micropropagation and tissue culturing |
| GB2202549A (en) * | 1987-03-20 | 1988-09-28 | Philip John Whitney | Foldable fermenter |
| IL86442A (en) * | 1988-05-19 | 1992-02-16 | Plant Biotec Ltd | Air lift fermenter formed from flexible plastic sheets |
| DE3823711C1 (cs) * | 1988-07-13 | 1990-04-12 | Chemap Ag, Volketswil, Ch | |
| US4931401A (en) | 1988-09-01 | 1990-06-05 | La Societe De Recherche Snc Inc. | Bioreactor |
| US5073491A (en) | 1988-12-23 | 1991-12-17 | Hoffman-La Roche Inc. | Immobilization of cells in alginate beads containing cavities for growth of cells in airlift bioreactors |
| SU1687604A1 (ru) | 1989-01-05 | 1991-10-30 | Всесоюзный научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности | Аппарат дл культивировани клеток |
| US5188946A (en) | 1989-01-26 | 1993-02-23 | Biocontrol Systems Incorporated | Process and device for sequential microbial enrichment in a single apparatus |
| US5100801A (en) | 1989-01-26 | 1992-03-31 | Biocontrol Systems, Inc. | Device for sequential microbial enrichment in a single apparatus |
| EP0471947A1 (en) | 1990-06-29 | 1992-02-26 | Sekisui Chemical Co., Ltd. | Culture bag |
| US5240598A (en) | 1990-09-18 | 1993-08-31 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Microbubble generator for the transfer of oxygen to microbial inocula and microbubble generator immobilized cell reactor |
| AT394576B (de) | 1991-01-16 | 1992-05-11 | Vogelbusch Gmbh | Reaktor zur durchfuehrung biologischer reaktionen mittels biokatalysatoren |
| US5612188A (en) | 1991-11-25 | 1997-03-18 | Cornell Research Foundation, Inc. | Automated, multicompartmental cell culture system |
| US5267791A (en) | 1991-12-13 | 1993-12-07 | Corning Incorporated | Suspended cell culture stirring vessel closure and apparatus |
| US5409833A (en) | 1993-07-01 | 1995-04-25 | Baxter International Inc. | Microvessel cell isolation apparatus |
| US5342781A (en) | 1993-07-15 | 1994-08-30 | Su Wei Wen W | External-loop perfusion air-lift bioreactor |
-
1996
- 1996-09-26 IL IL11931096A patent/IL119310A/xx not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-09-26 DK DK97941180T patent/DK0938544T3/da active
- 1997-09-26 CZ CZ0104799A patent/CZ298148B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1997-09-26 PL PL332483A patent/PL190829B1/pl unknown
- 1997-09-26 AT AT97941180T patent/ATE231912T1/de not_active IP Right Cessation
- 1997-09-26 HU HU9904529A patent/HU226908B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1997-09-26 ES ES97941180T patent/ES2191851T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-26 WO PCT/IL1997/000316 patent/WO1998013469A1/en active IP Right Grant
- 1997-09-26 CA CA002266851A patent/CA2266851C/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-09-26 JP JP51546598A patent/JP3987121B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1997-09-26 AU AU43180/97A patent/AU4318097A/en not_active Abandoned
- 1997-09-26 EP EP97941180A patent/EP0938544B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-26 DE DE69718812T patent/DE69718812T2/de not_active Expired - Lifetime
-
1999
- 1999-02-08 US US09/246,600 patent/US6391638B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-02-29 HK HK00101274A patent/HK1023361A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-04-12 US US10/121,534 patent/US20020110915A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HK1023361A1 (en) | 2000-09-08 |
| US20020110915A1 (en) | 2002-08-15 |
| JP3987121B2 (ja) | 2007-10-03 |
| DE69718812T2 (de) | 2004-01-22 |
| EP0938544A1 (en) | 1999-09-01 |
| DK0938544T3 (da) | 2003-05-26 |
| DE69718812D1 (de) | 2003-03-06 |
| WO1998013469A1 (en) | 1998-04-02 |
| AU4318097A (en) | 1998-04-17 |
| EP0938544B1 (en) | 2003-01-29 |
| IL119310A0 (en) | 1996-12-05 |
| PL332483A1 (en) | 1999-09-13 |
| HUP9904529A2 (hu) | 2000-04-28 |
| HUP9904529A3 (en) | 2001-07-30 |
| JP2001502526A (ja) | 2001-02-27 |
| ES2191851T3 (es) | 2003-09-16 |
| CZ298148B6 (cs) | 2007-07-04 |
| HU226908B1 (hu) | 2010-03-01 |
| US6391638B1 (en) | 2002-05-21 |
| CA2266851C (en) | 2009-07-07 |
| CA2266851A1 (en) | 1998-04-02 |
| ATE231912T1 (de) | 2003-02-15 |
| PL190829B1 (pl) | 2006-02-28 |
| IL119310A (en) | 1999-07-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ104799A3 (cs) | Způsob pěstování buněk a tkání a zařízení k provádění tohoto způsobu | |
| US6571735B1 (en) | Non-metallic bioreactor and uses | |
| US20090053762A1 (en) | Cell/tissue culturing device, system and method | |
| CN101965394B (zh) | 开放连续模式的细胞培养的方法和装置 | |
| US8658421B2 (en) | Circulatory photobioreactor | |
| CN1902304A (zh) | 细胞培养系统 | |
| AU2003258339B2 (en) | Proliferation and delivery apparatus | |
| KR20100113179A (ko) | 관형 스피루리나 배양장치 | |
| CN108641909A (zh) | 一种适于兼养培养的微藻无菌培养装置及培养方法 | |
| CN108060081A (zh) | 一种多层平板灌注式生物反应器 | |
| CN211734205U (zh) | 一种可折叠的发酵装置 | |
| CN102344888B (zh) | 循环式光生物反应器 | |
| JP2015525570A (ja) | 無菌条件下の植物の大規模成長のためのバイオリアクタ容器 | |
| CN102268375B (zh) | 单胞藻培养的藻液连续收集方法和系统 | |
| CN106337024A (zh) | 一种用于人工肝系统的细胞生物反应器 | |
| MXPA99002775A (en) | Cell/tissue culturing device and method | |
| CN205188306U (zh) | 细胞培养瓶 | |
| CN220099050U (zh) | 一种用于细胞培养的无菌传输系统 | |
| CN214694174U (zh) | 一种用于微藻异养和混养培养的薄膜式无菌生物反应器 | |
| CN211847921U (zh) | 一种复合光动力菌剂生产系统装置 | |
| CN217418691U (zh) | 一种藻类连续流动培养的实验装置 | |
| EP4310168A1 (en) | Photobioreactor system for the cultivation of photosynthetic micro-organisms in animal houses | |
| CN210560476U (zh) | 动态三维细胞灌流培养系统 | |
| CN209836025U (zh) | 一种将畜禽废水转化为光合细菌菌肥的装置 | |
| EP2412793A1 (en) | Circulatory photobioreactor |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20150926 |