HU222493B1 - Inzulin hatású rövid peptidek, ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás előállításukra - Google Patents
Inzulin hatású rövid peptidek, ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás előállításukra Download PDFInfo
- Publication number
- HU222493B1 HU222493B1 HU9104009A HU400991A HU222493B1 HU 222493 B1 HU222493 B1 HU 222493B1 HU 9104009 A HU9104009 A HU 9104009A HU 400991 A HU400991 A HU 400991A HU 222493 B1 HU222493 B1 HU 222493B1
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- tyr
- asn
- insulin
- physiologically acceptable
- formula
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Obesity (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
A találmány tárgyát képezik a (II) általános képletű peptidszármazékokX–Q–Cys–Asn–OR1 (II) a képletben Q jelentése Tyr(R1), Phe(R2),Asn-Tyr vagy Asn-Tyr(R1), X jelentése hidrogénatom, 1–4 szénatomosalkil-karbonil-csoport vagy 9-fluorenil-metil-oxi-karbonil-csoport, R1jelentése hidrogénatom, 1–4 szénatomos alkilcsoport vagytritilcsoport, R2 jelentése 1–4 szénatomos alkilcsoport vagy 1–4szénatomos alkoxicsoport. A találmány tárgyát képezik továbbá az olyan(II) általános képletű peptidszármazékokat tartalmazógyógyszerkészítmények, melyek képletében Q jelentése Tyr, Tyr(R1),Phe(R2), Asn-Tyr, Asn-Tyr(R1), Leu-Glu-Asn-Tyr, Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr vagy Tyr(R1)-- Gln-Leu-Glu(R2)-Asn-Tyr(R1), X, R1 és R2 jelentésea fenti. ŕ
Description
A találmány inzulin hatású új, rövid peptidekre, ezek előállítására, és inzulin hatású rövid peptideket tartalmazó gyógyszerkészítményekre vonatkozik. A találmány szerint alkalmazott peptidek a diabetes mellitus kezelésére használhatók.
Ismert, hogy az inzulin két polipeptidláncból áll, ahol az A lánc 21 aminosavcsoportot, és a B lánc 30 aminosavcsoportot tartalmaz. Az A és B lánc két diszulfidhídon keresztül kapcsolódik egymáshoz, ahol az A7 és B7 helyzetű, valamint az A20 és B19 helyzetű ciszteincsoportok vannak összekötve. Egy harmadik diszulfidhíd áll az A6 és All helyzetű csoportok között. Az állati és emberi inzulint preproinzulin formájában a hasnyálmirigy képezi. Az emberi preproinzulin például egy 24 aminosavcsoportot tartalmazó prepeptidből és ehhez kapcsolódóan egy 86 aminosavcsoportot tartalmazó proinzulinból áll, amelynek konfigurációja prepeptid B-Arg-Arg-C-Lys-Arg-A, ahol
C jelentése egy 31 csoportból álló aminosavlánc.
A „Langerhand-sziget” nevű szervből történő kiválasztás során a prepeptid lehasad, és proinzulin keletkezik. Ezután a C lánc proteolitikusan lehasad, és kialakul a hatékony emberi inzulin.
Az inzulin egy sor hatást vált ki az inzulinra érzékeny szövetekben. Az egyik feltűnő hatás emlős állatoknál a glükózszint gyors csökkentése, amikor is az inzulin hatására az izom- és zsírsejtek gyorsan kivonják a glükózt a vérből. Az inzulin aktiválja továbbá a glikogénszintetázt, és gátolja a lipolízist. Az inzulin elősegíti az aminosavakból végzett fehéijeszintézist, és erősíti a glikokináz és a foszfo-fruktokináz indukcióját, és gátolja a glükoneogenezis bizonyos enzimeinek képződését, így a piruvát-karboxiláz és a fruktoz-difoszfatáz képződését.
Az inzulintól független II. típusú diabetes összefüggésben van a perifériás szövetek, így izom- és zsírszövetek inzulinrezisztenciájával. Ennek eredménye a glükózértékesítés csökkenése, amelynek közvetlen kiváltó oka a glükóztranszport és az ezt követő metabolitikus folyamatok inzulinstimulációjának hiánya. A fenti sokoldalú rezisztencia alapján a receptor vagy posztreceptorszint károsodására, vagyis úgynevezett „second messenger” képződésére lehet következtetni [Garvey: Diabetes/Metabolism Reviews, 5, 727-742 (1989)].
Meglepő módon azt találtuk, hogy bizonyos rövid peptidek inzulinhatással rendelkeznek, és ezért a diabetes mellitus kezelésére felhasználhatók.
Egyes rövid peptidek ismertek. így például a Q jelentésében Leu-Glu-Asn-Tyr és TyríR^-Gln-LeuGlu(R2)-Asn-Tyr(R1) csoportokat tartalmazó (II) általános képletű vegyületeket (lásd később) ismertet a DE 2 801 175 számú irat. A Q helyén Tyr-Gln-LeuGlu-Asn-Tyr csoportot tartalmazó vegyületeket ismertet a Chem. Bér. 105(5), 1749-1754 (1972). Tyr-CysAsn dimert ismertet a Helc. Chim. Acta 54(1), 398-422 (1971). A vegyületek farmakológiai hatása, így inzulin hatása a fenti iratokból nem ismert.
A találmány tárgyát képezik tehát a (II) általános képletű peptidszármazékok
X-Q-Cys-Asn-OR1 (II) a képletben
Q jelentése Tyr(R*), Phe(R2), Asn-Tyr vagy AsnTyr(Ri),
X jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkil-karbonil-csoport vagy 9-fluorenil-metil-oxi-karbonil-csoport (a továbbiakban Fmoc),
R1 jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy tritilcsoport,
R2 jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy 1-4 szénatomos alkoxicsoport, és ezek fiziológiailag alkalmazható sói.
A találmány tárgyát képezik továbbá a (II) általános képletű peptídszármazékot vagy ezek fiziológiailag alkalmazható sóit tartalmazó gyógyszerkészítmények
X-Q-Cys-Asn-OR1 (II) a képletben
Q jelentése Tyr, Tyr(R'), Phe(R2), Asn-Tyr, AsnTyr(R]), Leu-Glu-Asn-Tyr, Tyr-Gln-Leu-Glu-AsnTyr vagy TyrfR'j-Gln-Leu-GluíR^-Asn-TyríR1),
X jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkil-karbonil-csoport vagy Fmoc,
R1 jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy tritilcsoport,
R2 jelentése 1 -4 szénatomos alkilcsoport vagy 1 -4 szénatomos alkoxicsoport.
Külön kiemeljük azokat a peptideket, amelyek szekvenciája:
Asn-Tyr-Cys-Asn vagy Tyr-Cys-Asn.
Az aminosavak rövidítését az általánosan ismert módon alkalmazzuk [Schröder és Lübke: The Peptides, I. kötet, New York, XXII-XXIII. oldal (1965); Houben-Weyl: Methoden dér Org. Chemie, XV/1. és 2. kötet, Stuttgart (1974)].
Az alkilcsoport kifejezés egyenes vagy elágazó szénhidrogénláncot jelent, ugyanez érvényes az ebből levezethető alkoxicsoportra.
A (II) általános képletű vegyületek fiziológiailag alkalmazható sója lehet valamely farmakológiailag alkalmazható vagy nemtoxikus só. Ezek a sók a savas csoportot, például karboxilcsoportot tartalmazó (II) általános képletű vegyületekből előállíthatók alkálifémek vagy alkáliföldfémek, így nátrium, kálium, magnézium és kalcium, valamint fiziológiailag alkalmazható szerves aminok, így trietil-amin, és trisz(2-hidroxi-etil)-amin alkalmazásával. A bázikus csoportot, például aminocsoportot vagy guanidinocsoportot tartalmazó (II) általános képletű vegyületekből előállíthatók szervetlen savak, például sósav, kénsav és foszforsav, valamint szerves karbon- és szulfonsavak, így ecetsav, citromsav, benzoesav, maleinsav, fumársav, borkősav, és p-toluolszulfonsav alkalmazásával. Azok a vegyületek, amelyek azonos számban tartalmaznak bázikus és savas csoportokat, belső sókat képeznek, és nem tartalmaznak harmadik sókomponenst.
A (II) általános képletű peptidek előállítása során a találmány értelmében úgy járunk el, hogy
a) valamely C-terminális szabad karboxilcsoporttal rendelkező szegmenst vagy ennek aktivált származékát egy megfelelő, N-terminális szabad aminocsoporttal rendelkező szegmenssel reagáltatunk, vagy
HU 222 493 Β1
b) a peptidet lépésenként felépítjük, és az a) vagy b) eljárással kapott vegyületről a funkciós csoportok átmeneti védelmére adott esetben bevitt egy vagy több védőcsoportot kívánt esetben lehasítjuk, és a kapott (II) általános képletű vegyületet kívánt esetben fiziológiailag alkalmazható sóvá alakítjuk.
A találmány szerinti peptideket a peptidkémia általánosan ismert módszerei szerint lépcsőzetesen építjük fel a C-terminális végről kiindulva, vagy szegmensek összekapcsolásával állítjuk elő (Houben-Weyl: Methoden dér Organischen Chemie, XV/1., 2. kötet). A peptidkapcsolás megvalósítható például a vegyesanhidrid-módszerrel, aktív észteren keresztül, az azid- vagy a karbodiimidmódszerrel, előnyösen reakciógyorsító és a racemizálódást gátló anyag, így 1-hidroxi-benzotriazol, N-hidroxi-szukcinimid,3-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-l,2,3-benzotriazin, N-hidroxi-5-norbomén-2,3-dikarboximid, valamint aktivált 1-hidroxi-benzotriazol-származékok vagy foszforsav-, foszfonsav- és foszfmsavanhidridek jelenlétében -10 °C és az oldószer forráspontja közötti, előnyösen -5 °C és +40 °C közötti hőmérsékleten.
Oldószerként alkalmazható például dimetil-formamid, dimetil-acetamid, N-metil-pirrolidon vagy dimetil-szulfoxid.
Amennyiben a komponensek oldékonysága ezt megengedi, felhasználhatók olyan oldószerek is, mint például a metilén-klorid, kloroform vagy tetrahidrofúrán. A fent említett módszereket ismerteti például Meinehofer-Gross: The Peptides, Academic Press, I. kötet (1979).
Amennyiben a mellékreakciók megakadályozásához, vagy speciális peptidek szintéziséhez szükséges, az aminosavak oldalláncában található funkciós csoportok megfelelő védőcsoportokkal (például T. W. Green: Protective Groups in Organic Synthesis) védhetők, ezekre az esetekre példaként a következőket említjük: Glu(OtBu) vagy Tyr(tBu).
Amino-védőcsoportként előnyösen alkalmazható a gyenge savakkal lehasítható tritilcsoport (Trt-), és a szekunder aminokkal lehasítható 9-fluorenil-metil-oxi-karbonil-csoport (Fmoc-). A cisztein SH-csoportja egy sor védőcsoporttal blokkolható. Előnyösen alkalmazható a tritilcsoport (Trt-). A tritilcsoport jódos oxidálással cisztinvegyület képződése közben, valamint redukáló savas hasítással ciszteinvegyület képződése közben lehasítható [Liebigs Ann. Chem. 227-247 (1979)].
Az oldalláncban található hidroxilcsoportok és karbonsavcsoportok a legjobban a savasan lehasítható tercbutil-csoporttal (tBu-) védhetők (Meienhofer-Gross: The Peptides, 3. kötet).
A (II) általános képletű vegyületek és fiziológiailag alkalmazható sói gyógyszerhatóanyagként alkalmazhatók, elsősorban diabetes mellitus és inzulintól független diabetes kezelésére.
A találmány tárgya kiteljed tehát olyan gyógyszerkészítményekre és ezek előállítására, amelyek hatóanyagként legalább egy (II) általános képletű vegyületet és/vagy legalább egy fiziológiailag alkalmazható sóját tartalmazza oldott, amorf és/vagy kristályos formában, előnyösen amorf és/vagy kristályos formában.
A gyógyszerkészítmények előállításához előnyösen alkalmazhatók az
Asn-Tyr-Cys-Asn,
H-Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH vagy
Tyr-Cys-Asn szekvenciájú peptidek és/vagy fiziológiailag alkalmazható sóik.
A gyógyszerkészítményt előnyösen injekciós célra alkalmas oldat vagy szuszpenzió formájában szereljük ki, amelynek pH-értéke mintegy 3,0-9,0, előnyösen mintegy 5,0-8,5. A készítmény segédanyagként előnyösen megfelelő izotonizálószert, konzerválószert és adott esetben megfelelő puffért, valamint adott esetben nyújtott hatást biztosító szert tartalmaz steril vizes oldat vagy szuszpenzió formájában. A készítményhez szükséges segédanyagokat a hordozóanyag egészíti ki.
Izotonizálószerként alkalmazható például glicerin, glükóz, mannit, nátrium-klorid, valamint kalcium- vagy magnéziumvegyületek, így kalcium-klorid vagy magnézium-klorid.
Konzerválószerként alkalmazható például fenol, m-krezol, benzil-alkohol és/vagy p-hidroxi-benzoesavészter.
Pufferanyagként, előnyösen a mintegy 5,0-8,5 értékű pH beállításához szükséges pufferanyagként alkalmazható például nátrium-acetát, nátrium-citrát, nátrium-foszfát. A pH-érték beállításához alkalmazható továbbá fiziológiailag alkalmazható hígított sav, így sósav, illetve lúg, így nátrium-hidroxid.
A hatásprofil módosítása érdekében a találmány szerinti gyógyszerkészítmények további komponensként tartalmazhatnak módosított (132 769 és 132 770 számú európai szabadalmi leírás) és/vagy módosítatlan inzulint, előnyösen marha-, disznó- vagy humán inzulint, elsősorban humán inzulint.
A gyógyszerkészítmények előállításához legalább egy (II) általános képletű vegyületet és/vagy legalább egy fiziológiailag alkalmazható sóját adott esetben módosított és/vagy módosítatlan inzulin(származék)-kal fiziológiailag alkalmazható hordozóanyaggal, és adott esetben egyéb gyógyszerészeti segédanyaggal keveijük, és a keveréket gyógyszerkészítménnyé alakítjuk.
A találmány tárgyát közelebbről az alábbi példákkal világítjuk meg anélkül, hogy az oltalmi kör a példákra korlátozódna.
1. példa
H- Tyr-Cys-Asn-OH
a) Fmoc-Tyr(tBu)-Cys(Trt)-Asn-OtBu
3,4 g Fmoc-Tyr(tBu)-OH, 3,95 g (7,4 mmol) HCys(Trt)-Asn-OtBu [Liebigs Ann. Chem. 242 (1979)] és 1 g HOBT 50 ml dimetil-formamidban felvett oldatához 0 °C hőmérsékleten kevertetés közben 1,63 g DCC-t adunk, és az elegyet 1 órán keresztül 0 °C hőmérsékleten kevertetjük, majd egy éjszakán keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A következő napon a csapadékot leszűijük, és a szűrletet bepároljuk. A maradékot etil-acetáttal elkeveijük.
Kitermelés: 2,83 g.
Az anyalúgból további 3,63 g termék izolálható.
HU 222 493 Bl
Összkitermelés: 6,46 g (89%).
C58H62N4O8S (975,218)
Olvadáspont: 112-114 °C [a]2t}=-15,30 (c=l, metanol).
lb) H-Tyr(tBu)-Cys(Trt)-Asn-OtBu g (6,15 mol) Fmoc-Tyr(tBu)-Cys(Trt)-Asn-OtBu
100 ml dimetil-formamidban felvett oldatához 6,8 g dietil-amint adunk, és 10 percen keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután magasvákuumban bepároljuk, és a maradékot metilén-kloridban Kiesel-gélen kromatografáljuk. Metilén-kloriddal lipofil szennyeződés eluálható. Metilén-klorid/metanol 9,5:0,5 eleggyel eluálódik a cím szerinti vegyület.
Kitermelés: 4,4 g olaj (95%).
C43H52N4O6S (752,976). le) H-Tyr-Cys-Asn-OH
2,2 g (2,9 mmol) H-Tyr(tBu)-Cys(Trt)-Asn-OtBu 25 ml trifluor-ecetsav és 25 ml etil-merkaptán elegyében felvett oldatát 4 órán keresztül 250 ml vízzel rázzuk. A vizes oldatot háromszor éterrel extraháljuk, és fagyasztva szárítjuk.
Kitermelés: 1,05 g (91%).
C16H22N4O6S (398,44) [a]jj=-l,l° (c=l, víz).
2. példa
H-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH
2a) Fmoc-Asn-Tyr(tBu)-Cys (Trt)-Asn-OiBu
2,2 g (2,9 mmol) H-Tyr(tBu)-Cys(Trt)-Asn-OtBu, 1,04 g Fmoc-Asn-OH és 0,39 g HOBT 30 ml dimetilformamidban felvett oldatához 0 °C hőmérsékleten, kevertetés közben 0,64 g DCC-t adunk. Az elegyet 1 órán keresztül 0 °C hőmérsékleten kevertetjük, majd egy éjszakán keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Másnap a csapadékot leszűijük, és a szűrletet bepároljuk. A maradékot etil-acetátban oldjuk, és egymás után vízzel, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, kálium-hidrogén-szulfát-oldattal és vízzel extraháljuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A maradékot petroléterrel eldörzsöljük.
Kitermelés: 1,98 g(63%).
C62H68N6O10S (1089,323) [a]$=-18,8° (c=l, metanol).
2b) H-Asn-Tyr(tBu)-Cys(Trt)-Asn-OtBu
1,9 g (1,74 mmol) Fmoc-Asn-Tyr(tBu)-Cys(Trt)Asn-OtBu 50 ml dimetil-formamidban felvett oldatához 1,8 ml dietil-amint adunk, és az elegyet 15 percen keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután magasvákuumban bepároljuk, és a maradékot etil-acetáttal eldörzsöljük, és vákuumban szárítjuk.
Kitermelés: 0,98 g (65%)
C47H58N6O8S (867,081) [α]]]=-7,2ο (c=l, metanol).
2c) H-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH
0,9 g (1 mmol) fenti vegyület 10 ml etil-merkaptán és 10 ml trifluor-ecetsav elegyében felvett oldatát 4 órán keresztül állni hagyjuk, majd 100 ml vízre öntjük. A vizes oldatot háromszor éterrel extraháljuk, és fagyasztva szárítjuk.
Kitermelés: 455 mg (89%)
C20H28N6O8S (512,547) [a]g=-26,0°(c=l, víz).
3. példa
Acetil-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH
2,0 g (1,56 mmol) H-Leu-Glu(OtBu)-AsnTyr(tBu)-Cys(Trt)-Asn-OtBu-trifluor-acetát [Liebigs Ann. Chem. 243 (1979)] 30 ml dimetil-formamidban felvett oldatához 0,4 ml N-etil-morfolint és 0,53 g acetil-N-hidroxi-szukcinimidet adunk. Az elegyet 4 órán keresztül szobahőmérsékleten reagáltatjuk, majd magasvákuumban bepároljuk. A maradékot etil-acetátban oldjuk, és egymás után telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, kálium-hidrogén-szulfát-oldattal és vízzel kirázzuk. A keletkezett csapadékot kiszűrjük.
Kitermelés: 1,3 g.
Az etil-acetátos fázist nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A maradékot dietil-éterrel eldörzsöljük, és szűrjük.
Kitermelés: 0,8 g.
Összkitermelés: 2,1 g(>100%).
1,3 g (mintegy 1,07 mmol) fenti tiszta Ac-LeuGlu(OtBu)-Asn-Tyr(tBu)-Cys(Trt)-Asn-OtBu vegyület 30 ml trifluor-ecetsav és 30 ml etil-merkaptán elegyében felvett oldatát 4 órán keresztül állni hagyjuk, majd 300 ml vízben kirázzuk, és a vizes oldatot háromszor dietil-éterrel extraháljuk. A vizes fázist fagyasztva szárítjuk.
Kitermelés: 740 mg (87%).
C33H48N8O13S (796,86) [a]$=-25,l° (c=1, víz).
4. példa
H-Tyr(But)-Gln-Leu-Glu(OBut)-Asn-Tyr(But)Cys(Trt)-Asn-OBut-HBr (7.HBr)
4a) Ddz-Tyr(But)-Gln-ONb (16)
25,24 g (55 mmol) Ddz-Tyr(But)-OH, 15,88 g (50 mmol) H-Gln-ONb-HCl és 6,75 g 1-hidroxi-benzotriazol-hidrát 100 ml Ν,Ν-dimetil-formamidban felvett oldatához -3 °C hőmérsékleten 6,4 ml (50 mmol) N-etil-morfolint és 10,5 g diciklohexil-karbodiimidet adunk. Az elegyet 1 órán keresztül 0 °C hőmérsékleten, majd 6 órán keresztül szobahőmérsékleten kevertetjük, és egy éjszakán keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A csapadékot szűrjük, és a szűrletet bepároljuk. A kapott olajat etil-acetátban oldjuk, az oldatot egymás után nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, citrátpufferrel (pH=3) és vízzel mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. Az olajos terméket petroléterrel eldörzsölve porítjuk, és szűrjük. Ezután háromszor 100 ml diizopropil-éterrel felforraljuk, és dekantáljuk. Végül hideg diizopropil-éterrel eldörzsöljük, szűrjük, és petroléterrel mossuk.
Kitermelés: 32,8 g (91%)
Olvadáspont: 80-90 °C.
[a]j?= + 15,l° (c=l, metanol).
Elemanalízis a C37H46N40n összegképlet alapján (722,81):
számított: C 61,48% H6,41% N 7,75% talált: C61,3% H6,7% N 7,9%.
HU 222 493 Bl
4b) Ddz-Tyr(But)-Gln-OH.diciklohexil-amin 32,5 g (45 mmol) (16) számú vegyület 500 ml metanolban felvett oldatához 5 ml vizet, valamint Pd/BaSO4 katalizátort adunk, és 7 órán keresztül hidrogénezzük. Ezután a katalizátort leszűrjük, és a szűrletet bepároljuk. A visszamaradó olajat 250 ml etil-acetátban oldjuk. Az oldathoz 11,3 ml (55 mmol) diciklohexil-amint adunk, és néhány órán keresztül 3 °C hőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután a csapadékot szűrjük, és mozsárban etil-acetátban eldörzsöljük, szűrjük, és vákuumban szárítjuk.
Kitermelés: 27% (78%)
Olvadáspont: 170-171 °C.
[a]£= + 10,2° (c=1, metanol).
Elemanalízis a C42H64N4O9 összegképlet alapján (769,0):
számított: C 65,6% H 8,39% N 7,28% talált: C 65,4% H 8,5% N7,3%.
4c) Ddz-Tyr(But)-Gln-OH (17)
2,9 g (3,7 mmol) Ddz-Tyr(But)-Gln-OH.diciklohexil-amint etil-acetát és citrátpuffer (pH=3) elegyében felveszünk. Az etil-acetátos fázist vízzel semlegesre mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. így amorf (17) számú vegyület marad vissza.
Kitermelés: 2 g (90%).
Olvadáspont: 110-115 °C.
[a]$= + 19,8° (c=l, metanol).
Elemanalízis a C30H4]N3O9 összegképlet alapján (587,68):
számított: C 61,31% H7,03% N7,15% talált: C 60,6% H 7,2% N7,0%.
4d) Ddz-Tyr(But)-Gln-Leu-Glu(OBut)-AsnTyr(But)-Cys(Trt)-Asn-OBut (18)
9,7 g (16,5 mmol) (17) számú vegyület, 19,2 g (15 mmol) 3. példa szerinti vegyület, 2,025 g (15 mmol) HOBT 30 ml Ν,Ν-dimetil-formamidban szobahőmérsékleten kevertetés közben felvett oldatát 0 °C hőmérsékletre hűtjük, 1,95 ml (15 mmol) N-etil-morfolinnal, valamint 3,3 g (16 mmol) diciklohexil-karbodiimid 9 ml Ν,Ν-dimetil-formamidban felvett oldatával elegyítjük, és 1 órán keresztül 0 °C hőmérsékleten, majd 4 órán keresztül szobahőmérsékleten kevertetjük, és egy éjszakán keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A diciklohexil-karbamidot kiszűijük, és kétszer 4,5 ml Ν,Ν-dimetil-formamiddal mossuk. A szűrletet kevertetés közben 159 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldathoz adagoljuk, és a por alakú csapadék kiválásáig kevertetjük. Ezt szűqük, citrátpufferben (pH=3) eldörzsöljük, szűrjük, vízzel semlegesre mossuk, és mintegy 13,3 Pa nyomáson szárítjuk (kitermelés 23,1 g). A nyersterméket gőzfürdőn közel forrásig melegítjük, a híg szuszpenziót egy éjszakán keresztül 3 °C hőmérsékleten állni hagyjuk, a csapadékot szűqük, és etil-acetáttal, valamint éterrel mossuk.
Kitermelés: 20 g (76,8%).
[a]2D2=-10,2° (c=l, metanol).
Olvadáspont: 205 °C (bomlik) és 250 °C (szenesedik);
Aminosavanalízis: Asp 2,00; Glu 2,01; Cys 0,75; Leu 0,99; Tyr 1,95.
Elemanalízis a Cg^j^NjjO^S összegképlet alapján (1735,15):
számított:C 63,68% H7,15% N 8,88% S 1,85% talált: C62,0% N7,2% N 8,6% S2,l%.
4e) H-Tyr(But)-Gln-Leu-Glu(OBut)-Asn-Tyr(But)Cys(Trt)-Asn-OBut.HBr. (7.HBr)
3,5 g (2 mmol) (18) számú vegyületet 1,75 ml trifluor-ecetsav (20 mmol), 0,35 ml víz és 33 ml metiléndiklorid (mintegy 35 ml 5%-os trifluor-ecetsav-oldat 1% víztartalommal) és 3,5 ml anizol elegyében kevertetés közben oldunk. Az oldatot 3 órán keresztül szobahőmérsékleten kevertetjük, 2 ml (24,8 mmol) piridinnel elegyítjük, és mintegy 13,3 Pa nyomáson bepároljuk. A maradékot éterrel eldörzsöljük, szűqük, éterrel mossuk, szárítjuk, vízzel eldörzsöljük, szűqük, vízzel mossuk, és P2O5 felett szárítjuk (kitermelés 3,35 g). További tisztításhoz a nyersterméket kétszer 20 ml etil-acetáttal röviden felforraljuk, majd forrón szűqük. Ezután éterrel mossuk.
Kitermelés: 3,0g(92%).
Olvadáspont: 255-265 °C (bomlik);
[a]g=-20,2° (c=l, metanol);
Aminosavanalízis: Asp 1,97; Glu2,00; Cys 0,61;
Leu 1,00; Tyr 2,01.
Elemanalízis a Cg0H110BrNnO16S összegképlet alapján (1593,8):
számított: C 60,23% H6,96% N 9,67% S 2,01% talált: C 60,6% H 7,0% N9,5% S2,2%.
5. példa
Az új (II) általános képletű peptidek biológiai aktivitását patkányokból előállított zsírsejtpreparátumon és diafragmadarabkákon határozzuk meg. A vizsgálaton belül a tripeptid kifejezés a H-Tyr-Cys-Asn-OH, és a hexapeptid kifejezés az acetil-Leu-Glu-Asn-Tyr-CysAsn-OH szekvenciát jelöli. Az alapaktivitás alatt a stimulálás nélküli aktivitást értjük, az inzulin humán inzulin, és a dpm a percenkénti radioaktív bomlást jelöli. A peptid kifejezés általánosan egy, inzulinszerű hatással rendelkező találmány szerinti peptidet jelent.
A zsírsejtkészítményt patkányokból a következőképpen állítjuk elő:
Korlátozás nélkül takarmányozott 160-180 g testtömegű Wistar-patkányok mellékheréjéből származó zsírszövetet kollagenázzal emésztünk, és a kapott zsírsejteket flotációval többször mossuk.
Diafragmadarabkák előállítása patkányokból:
Korlátozás nélkül takarmányozott 60-70 g testtömegű Wistar-patkányokból származó többször mosott hemidiafragmákat kisméretű (50 mm átmérő) szövetdarabkákra vágunk.
A vizsgálat során az inzulinnal stimulált glükózfelvételt vizsgáljuk, ami funkcionális inzulin jelátvitelkaszkádot és glükóztranszportot igényel, függetlenül attól, hogy a glükóz oxidatív úton (glikolízis, pentóz-foszfát-út) vagy nem oxidatív úton bomlik le. Követjük a lipiddé, glikogénné vagy a membrán által át nem eresztett köztitermékekké (glükóz-6-foszfát) történő átalakulást, de nem követjük a laktátképződést.
a) Patkányzsírsejteket inzulin/peptid jelenlétében vagy távollétében D-[U-14C]glükózzal (22 pmol/l D-glü5
HU 222 493 Bl kózkoncentráció) inkubálunk. A sejteket egy szilikonolaj rétegen történő átcentrifugálással elválasztjuk a tápközegtől, izoláljuk, és meghatározzuk a sejttel asszociált radioaktivitást.
b) A diafragmadarabkákat inzulin/peptid jelenlété- 5 ben vagy távollétében D-[U-14C]glükózzal (75 pmol/l
D-glükózkoncentráció) inkubáljuk. A közeget leszűrjük, a szövetdarabkákat többször mossuk, és ezután a radioaktivitás meghatározásához lúgos kezeléssel szolubilizáljuk.
A mérési eredményeket az 1. táblázat tartalmazza.
1. táblázat Glükózfelvétel
| b) Diafragma | a) Zsírsejtek | ||||
| inzulin | tripeptid | hexapeptid | inzulin | tripeptid | hexapeptid |
| (dpm) | (dpm) | (dpm) | (dpm) | (dpm) | (dpm) |
| 0,1 mmol/1 | 7 591 | 7 429 | 1 838 | 1488 | |
| | 0,5 mmol/1 | 8 540 | 7 752 | 2 947 | 1 917 | |
| 1 mmol/1 | 11 588 | 8 597 | 6 533 | 4 218 | |
| 0,5 ng 10055 | 4 379 | ||||
| 5 ng 20841 | 26 312 | ||||
| | Alap 7348 | 1235 |
6. példa
Glükóztranszport
Az 5. példában leírt módon zsírsejteket és diafragmadarabkákat állítunk elő. A vizsgálatban kizárólag az inzulinnal stimulálható specifikus glükóztranszportot (könnyített diffúzió) vizsgáljuk, amit egy glükózhordozó a plazmamembránon keresztül közvetít, beleértve az inzulin jelátvitelkaszkádot. A glükózanyagcserének a glükóztranszportra gyakorolt befolyását nem lebontható glükózanalógok alkalmazásával zárjuk ki.
a) Patkányzsírsejteket inzulin vagy peptid jelenlétében és távollétében 2-dezoxi-D-[l-3H]glükózzal (0,2 mmol/1 D-glükózkoncentráció) és L-[l-14C]glükózzal (nem transzportálható) inkubálunk. A radioaktivitás meghatározásához (3H és 14C) a sejteket olajrétegen történő átcentrifugálással elválasztjuk a közegtől. A specifikus sztereoszelektív glükóztranszportot a sejthez kötött összradioaktivitás (3H-glükóz) és a diffúzióhoz és nem specifikus befolyásokhoz kapcsolódó radioaktivitás (14C-glükóz) különbsége alapján számoljuk.
b) Diafragmadarabkákat inzulin vagy peptid jelenlétében, vagy távollétében 2-dezoxi-D-[l-3H]glükózzal (0,1 mmol/1 D-glükózkoncentráció) és L-[l14C]glükózzal inkubálunk. A szövetdarabkákat üvegszűrőn történő gyors szűréssel elválasztjuk a közegtől, és intenzíven mossuk. A radioaktivitást lúgos extraktumban mérjük. A mérési eredményeket a 2. táblázat tartalmazza.
2. táblázat Glükóztranszport
| a) Zsírsejtek | b) Diafragma | ||||
| inzulin | tripeptid | hexapeptid | inzulin | tripeptid | hexapeptid |
| (dpm) | (dpm) | (dpm) | (dpm) | (dpm) | (dpm) |
| ( 0,1 mmol/1 | 2 289 | 2 218 | 8 836 | 8 450 | |
| | 0,5 mmol/1 | 3 055 | 2 842 | 9 822 | 8 928 | |
| | 1 mmol/1 | 5 781 | 3 922 | 11252 | 9 676 | |
| 0,5 ng 4851 | 10 828 | ||||
| 5 ng 20342 | 17 750 | ||||
| Alap 2311 | 8 522 |
7. példa
In vitro észterezés
Ez a vizsgálat a glicerin-3-foszfát inzulin által stimulált észterezését méri lipidtermékekben (trigliceri- 60 dekben és foszfolipidekben). Ebben a lipidszintézis enzimei (például acil-CoA: L-glicerin-3-foszfát-aciltranszferáz) vesznek részt, beleértve a funkcionális inzulin jelátviteli kaszkádot. A glükóztranszport ebben
HU 222 493 BI nem játszik szerepet, amit az igazol, hogy a citokalazin B nem gátolja az észterezést.
Az 5. példa szerint előállított patkányzsírsejteket Dglükózzal (33 pmol/l koncentráció) inkubáljuk inzulin vagy peptid jelenlétében, vagy távollétében, majd a plazmamembránt (a belső membrán elroncsolása nélkül) kis koncentrációjú szaponinkezeléssel permeabilizáljuk. L[U-14C]glicerin-3-foszfát hozzáadása után az inkubálást folytatjuk. Az elegyhez toluolban oldódó szcintillációs koktélt adunk, és a vizes fázisból centrifugálással elválasztjuk a lipidet. A lipidet tartalmazó toluolos fázist eltávolítjuk, és megmérjük radioaktivitását. A mérési eredményeket a 3. táblázat tartalmazza.
3. táblázat
Észterezés zsírsejtekben
| Inzulin (dpm) | Tripeptid (dpm) | |
| 0,1 mmol/1 | 3710 | |
| 0,5 mmol/1 | 4422 | |
| | 1 mmol/1 | 5398 | |
| 0,5 ng | - | |
| 5ng | 3640 | |
| | Alap | 3842 |
8. példa
Lipogenezis
Az 5. példa szerinti patkányzsírsejteket az inzulinreceptorok proteolitikus inaktiválása érdekében kis koncentrációjú tripszinnel kezeljük. Proteázinhibitor hozzáadása után a sejteket kétszer flotációval mossuk, és az inkubálást 15 percen keresztül 37 °C hőmérsékleten folytatjuk. A sejteket ezután a lipogenezisnek a peptidek által történő stimulálásának vizsgálatához használjuk. Az inzulinnal végzett kontrollinkubáció azt mutatja, hogy a tripszinnel kezelt sejtek csak nagyon csekély mértékű inzulinnal stimulálható lipogenezist, és ezáltal a funkcionális inzulinreceptoroknak (az inzulinmegkötés vonatkozásában) csak igen korlátozott számát őrizték meg. A vizsgálat ezáltal a lipogenezis stimulálását mutatja be az inzulin jelátviteli kaszkádnak az inzulinreceptorhoz történő kötődése utáni befolyásolásával. A mérési eredményeket a 4. táblázat tartalmazza.
4. táblázat Lipogenezis
| Inzulin (dpm) | Tripeptid (dpm) | |
| [ 0,1 mmol/1 | 3250 | |
| | 0,5 mmol/1 | 4145 | |
| 1 mmol/1 | 5072 | |
| 0,5 ng | - | |
| 1 5ng | 3087 | |
| Alap | 2355 |
9. példa
Vércukorszint egerekben
17-21 g testtömegű nőstény Charles River Wiga Balb-C-egereket (mintegy 30 napos kor) standard diétával táplálunk. A vizsgálatot megelőző 16 órában az egerek takarmányt nem kapnak. A vizsgálati állatokat 5 egyedből álló kísérleti csoportokra osztjuk, és intravénásán a 4. példa szerinti vegyület (oktapeptid) vizes oldatával (pH=6) kezeljük. A kezelési térfogat 0,3 ml/állat.
Az 5. táblázatban a vércukorszint értékét százalékban adjuk meg a kontrollcsoport (5 állat, pH=6,0 értékű pufferoldat, adagolási térfogat 0,3 ml/állat), és a találmány szerinti oktapeptiddel kezelt állatok közötti különbség alapján adjuk meg. Minden kísérleti csoportban az átlagértéket szerepeltetjük.
5. táblázat Vércukorszint
| Idő (perc) | Oktapeptid (%) | |
| 500 pg/állat | 1000 pg/állat | |
| 20 | -2 | -31 |
| 40 | -5 | -19 |
| 60 | -13 | -23 |
| 75 | -21 | -24 |
| 1 90 | -21 | -19 |
SZABADALMI IGÉNYPONTOK
Claims (8)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. (II) általános képletű peptidszármazékokX-Q-Cys-Asn-ORi (II) a képletbenQ jelentése Tyr(R*), Phe(R2), Asn-Tyr vagy AsnTyr(Ri),X jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkil-karbonil-csoport vagy 9-fluorenil-metil-oxi-karbonil-csoport,R1 jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy tritilcsoport,R2 jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy 1 -4 szénatomos alkoxicsoport, és ezek fiziológiailag alkalmazható sói.
- 2. Gyógyszerkészítmény, amely hatóanyagként legalább egy, (II) általános képletű peptidet és/vagy ennek fiziológiailag alkalmazható sóját tartalmazza oldott, amorf vagy kristályos formában, a képletbenQ jelentése Tyr, Tyr(R>), Phe(R2), Asn-Tyr, AsnTyr(R'), Leu-Glu-Asn-Tyr, Tyr-Gln-Leu-Glu-AsnTyr vagy Tyr(R1)-Gln-Leu-Glu(R2)-Asn-Tyr(R1),X jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkil-karbonil-csoport vagy 9-fluoreníl-metil-oxi-karbonil-csoport,R1 jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy tritilcsoport,HU 222 493 BlR2 jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy1-4 szénatomos alkoxicsoport.
- 3. A 2. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amely további komponensként legalább egy módosított vagy módosítatlan inzulint vagy inzulinszármazékot tartalmaz.
- 4. Eljárás az 1. igénypont szerinti (II) általános képletű peptidek és ezek fiziológiailag alkalmazható sói előállítására, azzal jellemezve, hogya) valamely C-terminális szabad karboxilcsoporttal rendelkező szegmenst vagy ennek aktivált származékát egy megfelelő, N-terminális szabad aminocsoporttal rendelkező szegmenssel reagáltatunk, vagyb) a peptidet lépésenként felépítjük, és az a) vagy b) eljárással kapott vegyületről a funkciós csoportok átmeneti védelmére adott esetben bevitt egy vagy több védőcsoportot kívánt esetben lehasítjuk, és a kapott (II) általános képletű vegyületet kívánt esetben fiziológiailag alkalmazható sóvá alakítjuk.
- 5. Eljárás gyógyszerkészítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy legalább egy, 1. igénypont szerinti (II) általános képletű peptidet és/vagy ennek fiziológiailag alkalmazható sóját fiziológiailag alkalmazható hordozóanyaggal, valamint adott esetben megfelelő adalék anyaggal és/vagy segédanyaggal adagolható készítménnyé alakítjuk.
- 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy további komponensként legalább egy módosított vagy módosítatlan inzulint vagy inzulinszármazékot alkalmazunk.
- 7. Eljárás gyógyszerkészítmény előállítására, amely hatóanyagként legalább egy, (II) általános képletű peptidet és/vagy ennek fiziológiailag alkalmazható sóját tartalmazza oldott, amorf vagy kristályos formában, a képletbenQ jelentése Tyr, Leu-Glu-Asn-Tyr, Tyr-Gln-Leu-GluAsn-Tyr vagy Tyr(R1)-Gln-Leu-Glu(R2)-AsnTyr(Ri),X jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkil-karbonil-csoport vagy 9-fluorenil-metil-oxi-karbonil-csoport,R1 jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy tritilcsoport,R2 jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy 1 -4 szénatomos alkoxicsoport, azzal jellemezve, hogy az ismert módon előállított hatóanyagot fiziológiailag alkalmazható hordozóanyaggal, valamint adott esetben megfelelő adalék anyaggal és/vagy segédanyaggal adagolható készítménnyé alakítjuk.
- 8. A 7. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy további komponensként legalább egy módosított vagy módosítatlan inzulint vagy inzulinszármazékot alkalmazunk.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE4040574 | 1990-12-19 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU914009D0 HU914009D0 (en) | 1992-03-30 |
| HUT59697A HUT59697A (en) | 1992-06-29 |
| HU222493B1 true HU222493B1 (hu) | 2003-07-28 |
Family
ID=6420676
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU9104009A HU222493B1 (hu) | 1990-12-19 | 1991-12-18 | Inzulin hatású rövid peptidek, ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás előállításukra |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5461035A (hu) |
| EP (1) | EP0491361B1 (hu) |
| JP (2) | JP3378588B2 (hu) |
| KR (1) | KR100237948B1 (hu) |
| AT (1) | ATE177753T1 (hu) |
| AU (1) | AU643349B2 (hu) |
| CA (1) | CA2058020C (hu) |
| CZ (1) | CZ284568B6 (hu) |
| DE (1) | DE59109109D1 (hu) |
| DK (1) | DK0491361T3 (hu) |
| ES (1) | ES2130130T3 (hu) |
| FI (1) | FI105816B (hu) |
| GR (1) | GR3030510T3 (hu) |
| HR (1) | HRP940839B1 (hu) |
| HU (1) | HU222493B1 (hu) |
| IE (1) | IE914408A1 (hu) |
| IL (1) | IL100400A (hu) |
| NO (1) | NO308951B1 (hu) |
| NZ (1) | NZ241029A (hu) |
| PT (1) | PT99850B (hu) |
| SK (2) | SK282360B6 (hu) |
| TW (1) | TW227004B (hu) |
| YU (1) | YU189891A (hu) |
| ZA (1) | ZA919938B (hu) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0545198B1 (de) * | 1991-11-29 | 1999-09-15 | Hoechst Aktiengesellschaft | Peptide mit insulinartiger Wirkung |
| SE0002716L (sv) * | 2000-07-18 | 2002-01-19 | Lars Wahlberg | Komposition mot insekter |
| WO2002055290A1 (fr) * | 2001-01-15 | 2002-07-18 | Societe De Technologie Michelin | Tambour de conformation pour la fabrication de pneumatiques |
| US7833513B2 (en) | 2004-12-03 | 2010-11-16 | Rhode Island Hospital | Treatment of Alzheimer's Disease |
| KR101909052B1 (ko) | 2017-02-09 | 2018-10-17 | 강원대학교산학협력단 | 인슐린의 a 사슬로부터 유래된 펩타이드 단편 및 이를 포함하는 당뇨병 또는 당뇨병성 창상의 예방 또는 치료용 약학 조성물 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2740406A1 (de) * | 1977-09-08 | 1979-03-22 | Hoechst Ag | Teilgeschuetzte human-insulin-a-kette und verfahren zu ihrer herstellung |
| DE2801175A1 (de) * | 1978-01-12 | 1979-07-19 | Hoechst Ag | Verfahren zur herstellung cysteinhaltiger peptide |
| DD147942A1 (de) * | 1979-08-20 | 1981-04-29 | Guenter Losse | Verfahren zur herstellung von cystin-peptiden mit insulinaehnlicher wirkung |
| FR2525592B1 (hu) * | 1982-04-26 | 1984-09-14 | Pasteur Institut |
-
1991
- 1991-11-28 TW TW080109358A patent/TW227004B/zh not_active IP Right Cessation
- 1991-12-06 YU YU189891A patent/YU189891A/sh unknown
- 1991-12-17 DK DK91121624T patent/DK0491361T3/da active
- 1991-12-17 NZ NZ241029A patent/NZ241029A/xx not_active IP Right Cessation
- 1991-12-17 EP EP91121624A patent/EP0491361B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-17 ES ES91121624T patent/ES2130130T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-17 AT AT91121624T patent/ATE177753T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-12-17 DE DE59109109T patent/DE59109109D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-17 FI FI915933A patent/FI105816B/fi active
- 1991-12-17 IL IL100400A patent/IL100400A/en not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 HU HU9104009A patent/HU222493B1/hu active IP Right Grant
- 1991-12-18 JP JP33475591A patent/JP3378588B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-18 AU AU89825/91A patent/AU643349B2/en not_active Expired
- 1991-12-18 ZA ZA919938A patent/ZA919938B/xx unknown
- 1991-12-18 PT PT99850A patent/PT99850B/pt not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 SK SK3879-91A patent/SK282360B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 KR KR1019910023282A patent/KR100237948B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 CZ CS913879A patent/CZ284568B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 SK SK232-2001A patent/SK282361B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 IE IE440891A patent/IE914408A1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 NO NO914999A patent/NO308951B1/no not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 CA CA002058020A patent/CA2058020C/en not_active Expired - Lifetime
-
1994
- 1994-08-04 US US08/285,443 patent/US5461035A/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-26 HR HRP-1898/91A patent/HRP940839B1/xx not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-06-15 GR GR990401585T patent/GR3030510T3/el unknown
-
2002
- 2002-10-02 JP JP2002289401A patent/JP3802863B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6908897B2 (en) | Covalently bridged insulin dimers | |
| FI79786C (fi) | Foerfarande foer framstaellning ett farmaceutiskt medel foer behandling av diabetes. | |
| FI79854B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av ett laekemedelspreparat som innehaoller ett insulinderivat. | |
| JP3445269B2 (ja) | インスリン様成長因子およびアナログの適用による網膜ニューロン障害の治療 | |
| EP0155786B1 (en) | New peptide, and production and use thereof | |
| JPH03169895A (ja) | 新規インスリン誘導体 | |
| CA2178218A1 (en) | Analogues of hgh-rh (1-29)nh2 having antagonistic activity | |
| WO1996003437A1 (en) | PTH OR PTHrP ANTAGONISTS | |
| HU205145B (en) | Process for producing new superactive insulin analogs and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient | |
| US3856770A (en) | Psychopharmacologically active tetra-, penta-, hexa-, and heptapeptides | |
| HU222493B1 (hu) | Inzulin hatású rövid peptidek, ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás előállításukra | |
| JP3324804B2 (ja) | インシュリン様作用を有するペプチド | |
| EP0003122B1 (de) | Verfahren zur Herstellung cysteinhaltiger Peptide | |
| EP0001075B1 (de) | Teilgeschützte Human-Insulin-A-Kette und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
| US4460576A (en) | Peptide and hormone agent containing the same as effective ingredient | |
| HU201566B (en) | Process for producing new analoguse of activatin factor of human growth hormon and pharmaceutical and veterinair compositions containing them |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HFG4 | Patent granted, date of granting |
Effective date: 20030508 |