HU218906B

HU218906B - Kristályos, nem mikroszkópos L-dopa-etilészter, ezt tartalmazó gyógyászati készítmények és eljárás előállításukra

Info

Publication number: HU218906B
Application number: HU9303748A
Authority: HU
Inventors: Daphne Atlas; Eldad Melamed; Isaac Milman; Alexander Veinberg
Original assignee: Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Science Based Industries Campus; Yissum Research Development Co. Of The Hebrew University Of Jerusalem
Priority date: 1992-12-24
Filing date: 1993-12-23
Publication date: 2000-12-28
Also published as: DK0867179T3; PT867179E; CA2112160A1; HU9303748D0; ES2132170T3; DE69324466T2; ZA939573B; AU684053B2; ATE178793T1; IL108147A0; IL108147A; HUT68498A; NO934768L; LV12766A; EP0610595B1; CN1083262C; NO934768D0; DE69329400T2; FI935847A; NO305932B1

Description

A találmány tárgya eljárás gyógyászatilag elfogadható kristályos, nem higroszkopikus, legalább 97% tisztaságú L-DOPA etil-észter előállítására, amely 1 tömeg%nál kevesebb L-DOPA-t tartalmaz.

A találmány tárgya továbbá Parkinson-kórban és hasonló betegségekben szenvedő betegek kezelésére szolgáló gyógyászati készítmények, melyek igen tiszta, stabil, nem higroszkopikus kristályos L-DOPA-etil-észter szabad bázist és kevesebb mint a hatóanyag 1%-át kitevő L-DOPA-t tartalmaznak.

A találmány tárgya továbbá eljárás kristályos, nem higroszkopikus L-DOPA-etil-észter előállítására szabad bázis formájában.

A tipikusan Parkinson-kórban szenvedő betegeket rendszerint L-DOPA, azaz levodopa és DOPA-dekarboxiláz-inhibitor, például karbidopa vagy benzerazid kombinációjával kezelik. Sajnos egy kezdeti kielégítő sima és stabil klinikai hasznos periódus után az L-DOPA-terápiával, amely 2-5 évig tart átlagosan, sok páciens állapota romlik, és komplex dózisfüggő, valamint előre nem látható reakciófluktuációk fejlődnek ki. A reakciófluktuáció oka gyakran sokszoros és komplex, de a farmakokinetikus problémák, elsősorban a hibás L-DOPA-abszorpció kritikus szerepet játszhat. Összefüggés van a klinikai fluktuációk és az L-DOPAplazmaszint-oszcilláció között. A problémák nagy része az L-DOPA kedvezőtlen farmakokinetikai tulajdonságainak, azaz az igen gyenge oldékonyságnak, a gyenge biohozzáférhetőségnek és a rövid in vivő felezési időnek az eredménye.

Az ilyen betegek közös tipikus problémája az „onoff” oszcillációk, melyek során a napi mozgási hatást a figyelemre méltó ingadozások dominálják az off órák között, amikor komolyan gátoltak a mozgásban, merevek, néha nem tudnak beszélni vagy nyelni, és az olyan periódusok között, amikor az L-DOPA-ra reagálnak, és többé-kevésbé tevékenykedni is képesek. A páciensek kezelésére jelenleg használatos apomorfm- és lizuridkezelések nem kielégítőek az off periódusban.

Az L-DOPA oldékony észterek injekciós úton történő beadását javasolták az ilyen állapotban lévő páciensek kezelésére, vagy pedig mint gyógyászati eszközt is javasolták olyan páciensek stabilizálására, akik a krónikus L-DOPA terápia után komoly mozgási fluktuációkat mutatnak. Az ilyen betegek kezelésére L-DOPAmetil-észtert javasoltak [5,017,607; 4 826 875; 4 873 263; 4 666 349; 4 771 073; Juncos és munkatársai, Neurology 37: 1742 (1987); és Cooper és munkatársai, J. Pharm. Pharmacol. 39: 809 (1987)]. Azonban az L-DOPA-metil-észter anyagcsereterméke a metanol, amely toxikusnak bizonyult. A metil-észterekből történő metanolfelszabadulás kis mennyiségű gyógyszer adagolásánál nem jelent toxikus veszélyt, és/vagy akut körülmények között. Azonban ha a napi dózis potenciálisan 1 g lehet, akkor az elméleti dózis körülbelül 4 mg/dl-re nőhet, és ez megközelíti a felső megengedhető határt. A toxicitásnak ez a veszélye jelentősebb lehet, ha az idősebb és csökkent hepatikus metabolikus képességgel rendelkező betegek csökkent metabolikus kiürülési sebességét is figyelembe vesszük. Minthogy a

Parkinson-kóros betegek nagy része idősebb, így jelentőssé válhat a toxicitás lehetséges kockázata.

A terápiára előnyösebb az L-DOPA-etil-észter. Az irodalomban azt jelzik, hogy megfelelő gyógyászati felhasználásra nem lehetséges L-DOPA-etil-észtert kifejleszteni.

„A potenciális toxicitásra való tekintettel, amely a metanolképződés során léphet fel, ideális lenne az etil-észter alkalmazása a humángyógyászatban. Azonban az etil-észtert nem sikerült hidrokloridsója formájában kikristályosítani higroszkopikus tulajdonsága miatt. Ezért humán használatra a metil-észtert fejlesztették ki.” [Stocci F. és munkatársai, Movement Disorders, 7: 249-256 (1992); 254. oldal].

Az L-DOPA-etil-észtert az irodalomban hidrokloridsója formájában írták le. Nehéz azonban kristályos sóként izolálni, és ezért amorf szilárd anyagként jellemezték [Fix és munkatársai, Pharm. Research 6(6): 501-505 (1989)], amely gyógyászati célra nem alkalmazható. Cooper és munkatársai a Clinical Neuropharmacology 7: 89-98 (1984) irodalmi helyen megjegyzik, hogy az L-DOPA-etil-észter hidrokloridsója higroszkopikus, és szintézis közben nehezen kristályosítható. Mi is megerősítettük higroszkopikus jellegét, és azt, hogy gyógyászati célra nem megfelelő. Tiszta, stabil, nem higroszkopikus L-DOPA-etil-észter szükséges gyógyászati célra.

Az L-DOPA-észtereket és sóit, beleértve az L-DOPA-etil-észtert, megemlítették az 1342286 számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban alopecia kezelésére. Az L-DOPA-etil-észter természetére vonatkozóan csak annyit jegyeztek meg, hogy ismert módon állítható elő L-DOPA-ból. Azonban, mint már említettük, az L-DOPA-etil-észter ismert módszerrel történő előállítása gyógyászati célra nem alkalmas terméket eredményez, mivel nem elég tiszta, higroszkopikus és nem elég stabil.

Az 1 364 505 számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban és a megfelelő 3 803 120 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban leírják az L-DOPA-etil-észter hidrokloridsója és a szabad bázis szintézisét. Ezt a szintetizált vegyületet intermedierként alkalmazzák más vegyületek szintéziséhez, és jellemzése nem található meg a szabadalmi leírásban. A Fix és munkatársai (Pharm. Research 6(6): 501-505 (1989); és Cooper és munkatársai (Clin. Neuropharmacol. 7: 89-98 (1984)] irodalmi megállapításokkal megegyezően azt találtuk, hogy a fenti szabadalmi leírásokban közölt módszerekkel szintetizált L-DOPA-etil-észter hidrokloridsója nem stabil, nehezen kristályosítható és ennek megfelelően nehezen tisztítható. Ezt az anyagot gyógyászati készítményekhez nem lehet felhasználni.

Hasonlóképpen az ily módon előállított L-DOPAetil-észter szabad bázis sem elég tiszta és stabil, így ez sem alkalmas gyógyászati készítmények előállítására. Legjobban szintetikus intermedierként alkalmazható az idézett szabadalmi leírásokban leírt módon további kémiai szintézishez.

Két irodalom a racém etil-észter szintéziséről tesz említést [Ginssberg és munkatársai, Zh. Obshch. Khim. 39 :

HU 218 906 Β

1168-1170 (1969) és Venter és munkatársai, S. Afr. Tydskr. Chem. 31: 135-137 (1978)]. Ezen irodalmak egyike szerint sem állítható elő kristályos L-DOPA-etilészter megfelelő gyógyászati felhasználásra, és a kristályos L-DOPA-etil-észter előállítására sincs utalás gyógyászatilag elfogadható formában. Mindkét irodalom szerint más anyagok szintéziséhez használatos intermedierek előállítását írják le.

A 4 771 073 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban és Cooper és társai J. Pharm. Pharmacol. (1987) 39: 627-635 irodalmi helyen L-DOPAetil-észter gyógyszerkészítményeket írtak le. Egyikben sem említik azonban a legalább 97% tisztaságú L-DOPA-etil-észtert, amely 1 tömeg%-nál kevesebb L-DOPA-t tartalmaz.

A jelen találmány olyan gyógyászati készítményre vonatkozik, amely hatóanyagból és gyógyászatilag elfogadható hordozóból áll. A hatóanyag legalább 97 tömeg% mennyiségű L-DOPA-etil-észter és L-DOPA, amely 1 tömeg%-nál kisebb mennyiségű a hatóanyagra vonatkoztatva.

A találmány szerint gyógyászatilag elfogadható kristályos, nem higroszkopikus L-DOPA-etil-észter szabad bázist tartalmazó keveréket állítunk elő, melyben az L-DOPA-etil-észter mennyisége a keverékre vonatkoztatva legalább 97 tömeg%, és az L-DOPA mennyisége a keverékre vonatkoztatott 1 tömeg%-nál kevesebb.

A találmány szerinti készítmény alkalmas Parkinson-kórban szenvedő páciensek kezelésére oly módon, hogy a páciensnek gyógyhatású dózisban adagoljuk a készítményt, amely gyógyászatilag hatékony mennyiségű L-DOPA-etil-észterből és gyógyászatilag elfogadható hordozóból áll.

A találmány szerinti készítmény tartalmaz gyógyászatilag elfogadható hordozót és hatóanyagot, ahol a hatóanyag legalább 97 tömeg% L-DOPA-etil-észter és kevesebb mint 1 tömeg% L-DOPA. A készítményt továbbá az jellemzi, hogy az L-DOPA-etil-észter-tartalom legalább 97 tömeg%-os marad 6 hónapos, 40 °C hőmérsékleten végzett inkubáció után is. Az L-DOPAetil-észter a készítményben szabad bázis formájában fordulhat elő.

A találmány olyan gyógyszerkészítményre is kiterjed, amely gyógyászatilag elfogadható hordozót és a fenti hatóanyagot tartalmazza, ahol az L-DOPA-etilészter koncentrációja gyógyászatilag hatékony.

A gyógyászatilag elfogadható hordozó kifejezés a szokásos hordozókat fedi, ilyen hordozók lehetnek a jól ismert standard hordozók. A találmány szerint a gyógyászatilag elfogadható hordozó vizes oldatban van. Egy másik megoldás szerint a vizes oldat lehet savval pufferezett oldat, például sósavval, kénsavval, borkősavval, foszforsavval, aszkorbinsavval, citromsavval, fumársavval, maleinsavval vagy ecetsavval. A gyógyászatilag hatékony L-DOPA-etil-észter-koncentráció 10-1000 mg ekvivalens L-DOPA/ml. Egy másik megoldás szerint a gyógyászatilag hatékony L-DOPAetil-észter-koncentráció 50-250 mg ekvivalens L-DOPA/ml.

A gyógyászati készítmény előnyösen 1,5-5,5 pHértékű.

A találmány szerinti gyógyászati készítmény, amely gyógyászatilag hatékony mennyiségű L-DOPA-etilésztert tartalmaz, gyógyászatilag elfogadható hordozóként savas oldatot és gátló mennyiségű dekarboxilázinhibitort, például karbidopát vagy benzerazidot is tartalmazhat, vagy egy MAO B inhibitort, például deprenilt. A savas oldat például savas pufferezett oldat lehet.

A találmány szerinti gyógyszerkészítmény lehet olyan gyógyszerkészítmény is, amely gyógyászatilag elfogadható vízmentes oldat formájú hordozót és gyógyászatilag hatékony koncentrációjú L-DOPA-etilésztert tartalmaz. A vízmentes oldat jelenthet például olajat vagy más, fiziológiailag kompatibilis oldószert.

A találmány szerinti gyógyászati készítmény állhat gyógyászatilag elfogadható hordozóból és legalább 97 tömeg% L-DOPA-etil-észtert és 1 tömeg%-nál kevesebb mennyiségű L-DOPA-t tartalmazó hatóanyagból, ahol a gyógyászatilag elfogadható hordozóanyag szilárd anyag, és az L-DOPA-etil-észter gyógyászatilag hatékony mennyiségben van jelen. A találmány egyik változata szerint a gyógyászatilag hatékony mennyiségű L-DOPA-etil-észter 10-1000 mg ekvivalens L-DOPA, egy másik változat szerint a gyógyászatilag hatékony L-DOPA-etil-észter mennyisége 50-250 mg ekvivalens L-DOPA. A találmány szerinti gyógyászati készítmény szilárd formájú, és tartalmazhat még MAO B inhibitort gátló mennyiségben, például deprenilt vagy dekarboxilázinhibitort, például karbidopát vagy benzerazidot, amelyek szinergetikus hatást nem okoznak.

A találmány szerinti L-DOPA-etil-észter kiszerelhető orális, bukkális, szublinguális, parenterális, rektális, intramuszkuláris, intravénás, szubkután, intranazális, intraduodenális vagy intrajejunális adagolásra alkalmas formában. Ezeket a készítményeket előállíthatjuk oldat, szuszpenzió, oldható por vagy tabletta formájában. A készítményeket ismert módon állíthatjuk elő.

A találmány tárgya továbbá olyan gyógyászati készítmény előállítása, amely gyógyászatilag elfogadható kristályos, nem higroszkopikus L-DOPA-etil-észtert tartalmaz szabad bázis formájában, legalább 97 tömeg% mennyiségben, és tartalmaz még L-DOPA-t 1 tömeg%-nál kisebb mennyiségben. Az eljárás abból áll, hogy az L-DOPA-t etanollal reagáltatjuk tionil-klorid vagy savkatalizátor jelenlétében, és így kapjuk a nyers L-DOPA-etil-észter-hidrokloridot. Az illékony anyagokat ezután a nyers L-DOPA-etil-észter-hidrokloridból vákuumdesztillációval távolítjuk el. A maradékot megfelelő antioxidánst tartalmazó vízzel hígítjuk, a pH-t 6 és 7 közé állítjuk megfelelő bázis alkalmazásával, és így kapjuk az L-DOPA-etil-észter szabad bázist tartalmazó oldatot. Ahhoz, hogy oldószer fázisban kapjuk a szabad bázist, az oldatot megfelelő oldószerrel, megfelelő antioxidáns jelenlétében extraháljuk. Az oldószerfázist 40 °C-nál alacsonyabb hőmérsékleten bepárolva csapadékot kapunk. A csapadékot egy második oldószerjelenlétében átkristályosítjuk, ahol az oldószer egy

HU 218 906 Β második antioxidánst tartalmaz, és így kapjuk a gyógyászatilag elfogadható kristályos, nem higroszkopikus L-DOPA-etil-észter szabad bázist. A második megfelelő oldószer és a második megfelelő antioxidáns az elsővel azonos vagy attól eltérő lehet.

A találmány szerint a savkatalizátor, melyet gyógyászatilag elfogadható kristályos, nem higroszkopikus L-DOPA-etil-észter szabad bázis előállításához használunk, lehet sósav vagy toluolszulfonsav. Előnyös, hogyha az L-DOPA-t etanollal, tionil-klorid jelenlétében reagáltatjuk.

Az L-DOPA-etil-észter szabad bázis előállításához antioxidánsként használhatunk aszkorbinsavat, BHT-t, BHA-t, nátrium-szulfitot, nátrium-metabiszulfitot, propil-gallátot vagy E-vitamint. Oldószerként használhatunk etil-acetátot, metilén-kloridot vagy toluolt. Bázisként használhatunk szerves vagy szervetlen bázist, a megfelelő bázis nátrium-hidroxid vagy nátrium-karbonát, vagy ezek elegye. Az L-DOPA-etil-észter előállításánál kapjuk a hatóanyagot, azaz legalább 97 tömeg% L-DOPA-etil-észtert és 1 tömeg%-nál kevesebb L-DOPA-t, és ez a hatóanyag képezi a találmány szerinti készítmény egy részét. A hatóanyagot a gyógyászatilag elfogadható hordozóval együtt összekeverve kapjuk a találmány szerinti gyógyszerkészítményt.

Példák

Az L-DOPA-etil-észter egységdózis-készítmények 10 000 mg ekvivalens L-DOPA-t, előnyösen 50-250 mg ekvivalens L-DOPA-t tartalmaznak.

A találmány szerinti készítmény tartalmazhat még MAO-B inhibitort vagy dekarboxilázinhibitort. A készítmények tartalmazhatnak egyszersmind szinergetikus hatást nem okozó MAO-B inhibitort és dekarboxilázinhibitort is. A MAO-B inhibitorok közé tartozik a deprenil és a lazabemid. A dekarboxilázinhibitorok közül megemlíthetők a benzerazid és a karbidopa.

A találmány szerinti készítményeket Parkinsonkórban vagy parkinsonosdemencia- vagy dopaminhelyettesítő terápiával gyógyított betegek kezelésére használhatjuk.

Az alábbi példák a találmány egyéb részleteit illusztrálják.

1. példa

L-DOPA-etd-észter-szintézis g levodopát hozzáadunk részletekben 2-8 °C hőmérsékletre hűtött, 30 ml tionil-klorid 250 ml abszolút etanollal készített oldatához. A kapott elegyet 16 óra hosszat melegítjük 40 °C-ra, majd az illékony anyagokat vákuumban eltávolítjuk. A maradékot feloldjuk 50 ml vízben, és 20 g nátrium-hidrogén-karbonát, 26 g nátrium-szulfát és 50 mg aszkorbinsav 400 ml vízzel készített elegyével hígítjuk. A kapott oldat pH-ját óvatosan 7-re állítjuk be 10%-os vizes nátrium-hidroxid hozzáadásával, és oxigénmentes, 0,01% BHT-t tartalmazó etil-acetáttal extraháljuk.

Az egyesített etil-acetát-oldatokat nátrium-szulfát felett szárítjuk és alacsony hőmérsékleten bepároljuk, és 16 óra hosszat állni hagyjuk. A kapott csapadékot leszűrjük, egymás után hideg etil-acetáttal és hexánnal mossuk. Az anyagot levegőmentesített oxigénmentes etil-acetátból átkristályosítjuk, mely 0,01% BHT-t tartalmaz, és 88%-os termeléssel kapjuk a cím szerinti vegyületet, amely 87-89 °C hőmérsékleten olvad. Elemanalízis a CnH^NC^ képletre számítva:

Számított: C%=58,67, H%=6,67, N%=6,22; Talált: C%=58,87, H%=6,77, N%=6,19.

IR (KBr) cm-i: 3430, 3320, 3285, 3200,1720,1600.

2. példa

L-DOPA-etil-észter előállítása az 1 364 505 számú nagy-britanniai szabadalmi leírás szerint

a) A szintézist pontosan az 1 364 505 számú nagybritanniai szabadalmi leírás 11. példája szerint hajtjuk végre. A szabadalmi leírás 10. oldalának 92. sorában leírt vizes nátrium-hidrogén-karbonát hozzáadása után a pH 8,5. Amint az alábbiakból kitűnik, a kapott L-DOPA-etil-észter nem alkalmas gyógyászati alkalmazásra.

Kísérleteket tettünk, hogy az 1 364 505 számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban leírt eljárást optimalizáljuk.

b) Az eljárást a fent leírtakhoz hasonlóan megismételjük, azzal az eltéréssel, hogy a hidrogén-karbonát hozzáadása után a pH 7,4. Ezt úgy érjük el, hogy a hozzáadandó hidrogén-karbonát-mennyiséget változtatjuk.

c) Az eljárást megismételjük, azzal az eltéréssel, hogy a hidrogén-karbonát adagolása után a pH 7,1. Ezt a hozzáadott hidrogén-karbonát mennyiségének változtatásával érjük el.

Ahogy az alábbiakból kitűnik, az összes szintézisből kapott termék gyengébb minőségű, és nem alkalmas gyógyászati alkalmazásra.

A szabadalmi leírásban ismertetett szintetikus módszert tehát nem lehet gyógyászatilag hasznos termék előállítására használni.

3. példa

A találmány szerinti és a 2. példa szerint szintetizált

L-DOPA-etil-észter tisztítása és stabilitása

Az 1. és 2. példában szintetizált anyag tisztaságát az

1. táblázat mutatja.

1. táblázat

Vegyület	Elemzés	Szennyeződések	Olvadáspont (°C)
L-DOPA	Egyéb
1. példa	101,7%	0,1%	nincs	88
2a. példa	87,0%	1,6%	13%	70
2b. példa	87,9%	1,3%	8,4%	70
2c. példa	95,8%	0,5%	3,1%	nincs meghatározva

Az 1. és 2. példa szerinti vegyületek stabilitását és tisztaságát a 2. táblázat mutatja.

HU 218 906 Β

2. táblázat

Az 1. és 2. példában megadott körülmények között előállított L-DOPA-etil-észter stabilitása (%-os adatok)

	40 °C	25 °C
N₂-atmoszfcra
Kísérlet t=0	perc	perc	perc	perc	perc	perc
1. példa	98,9	99,6	99,7	98,0	99,4	99,5
2a. példa 87	82,6	80,0	nd	83,1	84,4	nd
2b. példa	85,1	83,3	79,2	88,0	86,8	88,1
2c. példa 95,8	91,7	93	93	94,0	93,6	94,4

Szín
1. példa	A	B	C	A	B	C
2a. példa	E	E	nd	D	E	nd
2b. példa	D/E	D/E	G	D/E	D/E	D/E
2c. példa	D	D/E	G	D	D/E	G

Szennyeződések
1. példa	2,4	0,7	0,5	1,2	0,7	0,6
2a. példa	20,9	19,3	nd	16,9	17,2	nd
2b. példa	14,0	18,2	nd	13,0	13,9	9,7
2c. példa	5,7	4,8	6,4	5,6	5,1	5,6

Színkód: A=fehcr szürke részecskékkel B=krémszínű C=sárgásfehér D=sárga E=sötétsárga F=szürke nd=nem határoztuk meg

4. példa

A levodopa-etil-észter megkísérelt tisztítása A 2c. példa szerinti módszerrel állítjuk elő a levodopa-etil-észtert, és etil-acetátból átkristályosítjuk. 40 A kapott anyag nem gyógyászati tisztaságú.

3. táblázat Szennyeződések

	Elemzés	Levodopa	Egyéb	Olvadáspont
a)	95,5%	0,3%	>1,3%	nincs meghatározva
b)	94,7%	0,3%	>1,4%	85 °C

5. példa

L-DOPA-etil-észter orális oldata

L-DOPA-etil-észter 50 mg

Heterociklusos pH=4,5-ig

Tisztított víz 100 ml-ig

Adott esetben ízesítő- és édesítőanyagot, például szorbitot adhatunk az oldathoz. Adhatunk hozzá még vízmentes közeget is, például glicerint 0,01-90% mennyiségben az oldat össztérfogatára vonatkoztatva.

6. példa

L-DOPA-etil-észter és karbidopa orális oldata

L-DOPA-etil-észter 50,0 mg

Karbidopa 5,0 mg

Dinátrium-EDTA 0,5 mg

Nátrium-metabiszulfít 5,0 mg

Metil-parabén 1,5 mg

Propil-parabén 0,2 mg

Citromsav 5,0 mg

HC1 pH=2-ig

Tisztított víz 100 ml-ig

Az oldathoz ízesítő- és édesítőszert, például szorbitot adhatunk, továbbá nemvizes közeget is, például gli50 cerint 0,01-90% mennyiségben az oldat össztérfogatára vonatkoztatva.

7. példa

L-DOPA-etil-észter és benzerazid orális oldata 55 L-DOPA-etil-észter 50,0 mg

Benzerazid 5,0 mg

Dinátrium-EDTA 0,5 mg

Nátrium-metabiszulfít 5,0 mg

Metil-parabén 1,5 mg

Propil-parabén 0,2 mg

HU 218 906 Β

Citromsav 5,0 mg

HC1 pH=4-ig

Tisztított víz 100 ml-ig

Adott esetben az oldathoz ízesítő- és édesítőszert, például szorbitot is adhatunk, továbbá nemvizes közeget is, például glicerint 0,01-90% mennyiségben az oldat össztérfogatára vonatkoztatva.

8. példa

L-DOPA-etil-észter orális oldata

L-DOPA-etil-észter 50,0 mg

Dinátrium-EDTA 0,5 mg

Nátrium-metabiszulfit 5,0 mg

Metil-parabén 1,5 mg

Propil-parabén 0,2 mg

Citromsav 5,0 mg

HC1 pH=4-ig

Tisztított víz 100 ml-ig

Adhatunk az oldathoz ízesítő- és édesítőszert, például szorbitot, továbbá vízmentes oldószert, például glicerint 0,01-90% mennyiségben az oldat össztérfogatára vonatkoztatva.

9. példa

L-DOPA-etil-észtert tartalmazó tabletta

L-DOPA-etil-észter 250,0 mg

Keményítő 16,5 mg

Nátrium-keményítő-glikolát 36 mg

Poli(vinil-pirrolidon) 7,3 mg

Mikrokristályos cellulóz 44 mg

Magnézium-sztearát 1,5 mg

10. példa

L-DOPA-etil-észtert és karbidopát tartalmazó tabletta

L-DOPA-etil-észter 250 mg

Karbidopa 25 mg

Keményítő 16,5 mg

Nátrium-keményítő-glikolát 36 mg

Poli(vinil-pirrolidon) 7,3 mg

Mikrokristályos cellulóz 44 mg

Magnézium-sztearát 1,5 mg

11. példa

L-DOPA-etil-észtert és benzerazidot tartalmazó tabletta

L-DOPA-etil-észter 250 mg

Benzerazid 25 mg

Keményítő 16,5 mg

Nátrium-keményítő-glikolát 36 mg

Poli(vinil-pirrolidon) 7,3 mg

Mikrokristályos cellulóz 44 mg magnézium-sztearát 1,5 mg

12. példa

L-DOPA-etil-észter biohozzáférhetősége

Négy hímnemű és négy nőstény patkányból álló három alcsoportot szubkután beoltottunk 100 mg/kg L-DOPA-ekvivalenssel mint L-DOPA-etil-észterrel. Az L-DOPA-etil-észtert az 1. példa szerint állítottuk elő, és a 4. példa szerint szereltük ki. Az injekció után a farokból vérmintákat veszünk az alább feltüntetett időpontokban, és az L-DOPA-ra megvizsgáljuk a mintákat T. Wikberg, J. of Pharmaceutical & Biomedical Analysis 9: 167-176 (1991) módszere szerint. A plazmaminták egyikében sem találtunk L-DOPA-etilésztert. Az injekció után az L-DOPA-plazma profilja az alábbi.

4. táblázat

Idő (perc)	Átlagos plazma L-DOPA-szint (pg/ml)
0	0,3 ±0,06
10	5,0±2,7
20	8,3 ±0,7
30	8,6±1,3
60	4,1 ±0,5
90	2,5±0,4
120	l,8±0,4
180	0,8±0,2
240	0,5 ±0,2

Ez azt mutatja, hogy a szubkután befecskendezett L-DOPA-etil-észter teljesen átalakul L-DOPA-vá, melynek kinetikus profdja az L-DOPA-hoz hasonló, de a könnyű beinjektálhatóság az előnye. Összehasonlításképpen ekvivalens mennyiségű L-DOPA befecskendezése körülbelül 100-szoros injekciós térfogatot igényelne.

13. példa

L-DOPA-etil-észter orális adagolása önkénteseknek

Humán önkénteseknek 100 mg ekvivalens L-DOPA-t adtunk az 1. példa szerint előállított és az 5. példa szerint kikészített L-DOPA-etil-észter formájában. Az adagolás után a páciensek L-DOPA-plazmaszintjét az 5. táblázat tartalmazza. Az adatok azt mutatják, hogy az L-DOPA-etil-észter emberben hamar átalakul L-DOPA-vá.

5. táblázat

Plazma L-DOPA-szintek (pg/ml)

Idő (perc)	1. páciens	2. páciens	3. páciens
0	0,02	0,02	0,03
10	1,75	0,86	1,26
20	1,29	2,39	2,50
30	0,84	1,85	1,91
45	0,58	1,34	1,32
60	0,43	0,92	1,09
75	0,36	0,80	0,88
90	0,32	0,62	0,71
105	0,28	0,50	0,6

HU 218 906 Β

14. példa

Orális klinikai kísérlet összefoglalása

Klinikai kísérletet hajtottunk végre, hogy megállapítsuk 8 fluktuáló parkinsonos páciens esetében az orálisan adagolt L-DOPA-etil-észter biztonságosságát, tolerálhatóságát és előzetes hatékonyságát. Az adagolás szubkrónikusan történt.

Ez volt a második orális klinikai kísérletsorozat, melyet L-DOPA-etil-észterrel végeztünk. Az első klinikai kísérletet 5 fluktuáló Parkinson-kóros páciensen végeztük kórházban, ahol az L-DOPA-etil-észtert kétnapos periódus alatt 4 alkalommal adagoltuk. Káros hatást nem tapasztaltunk az első klinikai kísérlet során egy betegnél sem.

A második klinikai kísérletben legalább 10 napig minden páciens kitöltött naponta egy-egy kártyát annak tanulmányozása céljából, hogy hogyan biztosítható a megbízhatóság. A vizsgálat megindításától kezdve a betegek azt az utasítást kapták, hogy folyamatosan töltsék ki a napi kártyákat a 10 napos periódus alatt, melynek során szedték az L-DOPA-etil-észtert.

A páciensek közül háromnál a normális napi dózist, amely levodopa/karbidopából vagy levodopa/benzerazidból állt, felváltották L-DOPA-etil-észterrel 10 napon keresztül naponta. A 10 napos periódus elején és végén fizikai vizsgálatot végeztek, és vérmintát vettek.

A kísérleti eredmények azt mutatták, hogy a páciensek közül egynek sem volt panasza, vagy nem jelentett káros hatást az L-DOPA-etil-észterrel végrehajtott 10 napos kezelés után. A szérumkémia kiértékelése sem mutatott abnormális elváltozást a kezelt betegeknél.

Az L-DOPA-etil-észtert minden páciens jól tűrte a kísérlet során, és a hatékonysági adatok elemzése azt mutatta, hogy jelentős hatékony hatás tapasztalható az L-DOPA-etil-észtemél a gyógyszerhatás megindításának látenciájában, valamint az anti-Parkinson-hatás tartamában is. Lényegesen csökkent a páciensek reakciójának változékonysága a gyógyszerhatásra L-DOPAetil-észter adagolása esetén.

A kísérleti eredmények azt mutatják, hogy az L-DOPA-etil-észter szubkrónikusan adagolva 10 napos periódus során naponta háromszor nyolc parkinsonos páciensnek biztonságos, jól tolerálható és előnyös fluktuáló, előre nem látható on-off reakcióban szenvedő páciensek esetében, összevetve a szokásos terápiával, csökkent a gyógyszerreakció által kiváltott nem előreláthatóság.

Claims

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás gyógyászatilag elfogadható kristályos, nem higroszkopikus L-DOPA-etil-észter szabad bázis formájában történő előállítására, ahol az észter mennyisége legalább 97 tömeg%, és az L-DOPA mennyisége maximum 1 tömeg%, azzal jellemezve, hogy

i) L-DOPA-t etanollal reagáltatunk tionil-klorid vagy savkatalizátor jelenlétében nyers L-DOPAetil-észter előállítására;

ii) a nyers L-DOPA-etil-észterből az illékony anyagokat eltávolítjuk, és a maradékot a tionil-kloridés az etanolfelesleg eltávolítására feloldjuk;

iii) az oldatot antioxidánstartalmú vízzel hígítjuk, és a pH-t bázissal 6-7-re állítjuk L-DOPA-etil-észter szabad bázist tartalmazó oldat előállítására;

iv) az oldatot megfelelő oldószerrel extraháljuk antioxidáns jelenlétében az oldószerfázisban szabad bázis előállítására;

v) az oldószerfázist 40 °C alatt bepárolva csapadékot képezünk; és vi) a csapadékot antioxidánstartalmú oldószerben átkristályosítva gyógyászatilag elfogadható kristályos, nem higroszkopikus L-DOPA-etil-észter szabad bázist állítunk elő.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az i) lépésben savkatalizátorként sósavat vagy toluolszulfonsavat használunk.
3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az iv) lépésben antioxidánsként aszkorbinsavat, 2,6-bisz(l,l-dimetil-etil)-4-metil-fenolt (BHT), 2,6bisz(l,l-dimetil-etil)-4-metoxi-fenolt (BHA), nátriumszulfítot, nátrium-metabiszulfítot, propil-gallátot vagy E-vitamint használunk.
4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy oldószerként etil-acetátot, metilén-kloridot vagy toluolt használunk.
5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az iii) lépésben bázisként szerves bázist használunk.
6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az iii) lépésben bázisként szervetlen bázist használunk.
7. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az iiii) lépésben bázisként nátrium-hidroxidot használunk.
8. Eljárás gyógyászati készítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy

a) gyógyászatilag elfogadható hordozót és

b) egy 1. igénypont szerint előállított hatóanyagot, és

c) szinergizmust nem okozó más hatóanyagokat összekeverünk, ahol a hatóanyag legalább 97 tömeg% L-DOPA-etil-észterből és legfeljebb 1 tömeg% L-DOPA-ból áll a hatóanyagra vonatkoztatva.
9. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy gyógyászatilag elfogadható hordozóként egy oldatot használunk.
10. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy oldatként vizes oldatot használunk.
11. A 10. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy vizes oldatként savas oldatot használunk,
12. A 11. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy savas oldatként sósavat, kénsavat, borkősavat, foszforsavat, aszkorbinsavat, citromsavat, fumársavat, maleinsavat vagy ecetsavat használunk.
13. All. vagy 12. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy savas oldatként pufferezett oldatot használunk.
14. A 11. vagy 12. igénypont szerinti eljárás, ahol a pH 1,5 és 5,5 között van.

HU 218 906 Β
15. A 11., 12. vagy 13. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az L-DOPA-etilésztert 10 és mintegy 1000 mg ekvivalens L-DOPA/mlnek megfelelő koncentrációban alkalmazzuk.
16. A 15. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az L-DOPA-etil-észtert 50 és 250 mg ekvivalens L-DOPA/ml körülinek megfelelő koncentrációban alkalmazzuk.
17. All. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy még hatékonyan gátló mennyiségű monoamin-oxidáz B inhibitort is alkalmazunk.
18. A 11. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy még egy dekarboxilázinhibitor hatásosan gátló mennyiségét is alkalmazzuk.
19. A 9. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy oldatként vízmentes oldatot alkalmazunk.
20. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a gyógyászatiig elfogadható hordozóként szilárd anyagot alkalmazunk.
21. A 20. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a gyógyászatiig elfogadható mennyiségként 10 és 1000 mg ekvivalens L-DOPA/ml-nek megfelelő L-DOPA-etil-észtert alkalmazunk.
22. A 21. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 50 és 250 mg mennyiségű L-DOPA/ml-nek megfelelő L-DOPA-etil-észtert alkalmazunk.
23. A 20. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hatásos gátló mennyiségű MAO B inhibitort is alkalmazunk.
24. A 20. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hatásos gátló mennyiségű dekarboxilázinhibitort is alkalmazunk.
25. Gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy gyógyászatiig elfogadható hordozót és olyan hatóanyagot tartalmaz, amely kristályos, nem higroszkopikus, legalább 97 tömeg% L-DOPA-etil-észter szabad bázisból és kevesebb mint a hatóanyag 1 tömeg%-át kitevő L-DOPA-ból, továbbá adott esetben egyéb, szinergizmust nem okozó, gyógyászatiig hatásos vegyületből áll.
26. A 25. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy a gyógyászatiig elfogadható hordozóoldat.
27. A 26. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy az oldat vizes oldat.
28. A 27. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy a vizes oldat savas oldat.
29. A 28. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy a vizes savas oldat sósav, kénsav, borkősav, foszforsav, aszkorbinsav, citromsav, fumársav, maleinsav vagy ecetsav lehet.
30. A 28. vagy 29. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy a savas oldat pufferezett.
31. A 28. vagy 29. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy a pH 1,5 és 5,5 között van.
32. A 28., 29. vagy 30. igénypontok bármelyike szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy az L-DOPA-etil-észter 10 és 1000 mg ekvivalens L-DOPA/ml-nek megfelelő mennyiségben van jelen.
33. A 32. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy az L-DOPA-etil-észter 50 és 250 mg ekvivalens L-DOPA/ml-nek megfelelő mennyiségben van jelen.
34. A 28. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy még hatásosan gátló mennyiségű MAO B inhibitort is tartalmaz.
35. A 28. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, amely még hatásosan gátló mennyiségű dekarboxilázinhibitort tartalmaz.
36. A 28. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy az oldat vízmentes.
37. A 25. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy a gyógyászatiig elfogadható hordozó egy szilárd anyag, és az L-DOPA-etil-észter gyógyászatiig hatásos mennyiségben van jelen.
38. A 37. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy az L-DOPA-etil-észter 10 és 1000 mg ekvivalens L-DOPA/ml-nek megfelelő mennyiségben van jelen.
39. A 38. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy az L-DOPA-etil-észter 50 és 250 mg ekvivalens L-DOPA/ml-nek megfelelő mennyiségben van jelen.
40. A 37. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy hatásos gátló mennyiségű MAO B inhibitort is tartalmaz.
41. A 37. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy hatásosan gátló mennyiségű dekarboxilázinhibitort is tartalmaz.