HU205770B

HU205770B - Process for producing renin inhibiting dipeptide derivatives and pharmaceutical compositions comprising same

Info

Publication number: HU205770B
Application number: HU902505A
Authority: HU
Inventors: Wolf-Ulrich Nickel; Wolfgang Linz; Dieter Ruppert; Hansjoerg Urbach; Adalbert Wagner
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1989-04-22
Filing date: 1990-04-20
Publication date: 1992-06-29
Also published as: EP0394853A1; AU622015B2; CN1047084A; KR900016255A; RU1836382C; CS197990A2; ZA902995B; HU902505D0; NO901759D0; IL94144A0; FI901957A0; AU5371690A; NO901759L; HUT54384A; MA21812A1; CA2015070A1; MX20405A; PT93797A; JPH02295998A; DE3913272A1

Description

Atalálmányreningátló hatású új peptid-származékok és az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására vonatkozik.

A255082sz. publikált európai szabadalmi bejelentés N-termínálisan cildoalkilkarbonil-vagy cikloalkilalkil-karhonil-szubsztituenst tartalmazó dipeptidszármazékokat ismertet. A WO 88/05050 sz. alatt publikált nemzetközi bejelentés reningátló aminodiolszármazékokra vonatkozik.

Azt találtuk, hogy az (I) általános képletű vegyületek és fiziológiailag elviselhető sóik (I) általános képletben

R^a jelentése adott esetben terc-butoxikarbonilcsoporttal védett amino-(C₅_7)-cildoalldlcsoport,

AjelentéseL-PhevagyL-Tyr(O-metü)-csoport,

B ielentéseL-Nva vagy L-His,

R² jelentése ciklohexümetilcsoport,

R³ jelentésehidrogénatom vagy hidroxilcsoport és

R⁴ jelentése (Π) általános képletű csoport, amelyben D jelentése aromás, egy vagy két nitrogénatomot tartalmazó, 5-7 tagú heterociklusos csoport és m értéke 1,2 vaw 3, és az R² szubsztituenst hordozó szénatom S-konfigurációjú, az OH-csoportot hordozó szénatom S-vagy R-konfigurációjú, és az R³ szubsztituenst hordozó szénatom, amennyiben királis, S-konfiguráció jú reningátló hatásúak.

A találmány szerint az (I) általános képletű vegyületeket úgy állítjuk elő, hogy valamely, a terminálisán karboxilcsoportot tartalmazó fragmenst vagy ennek reakcióképes származékát megfelelő, szabad aminocsoportot hordozó másik fragmenssel kondenzáljuk, kívánt esetben a reakcióképes csoportok védelmére bevezetett védőcsoportokat lehasítjuk és a kapott vegyületet kívánt esetben fiziológiailag elviselhető sóvá alakítjuk

Az (I) általános képletű vegyületek terminális karhoxilcsoportot hordozó fragmensei a (EHa), (Ettb) és (Ette) általános képletnek felelnek meg, a terminális aminocsoportot hordozó fragmensek a (JVa), (IVb) és (ÍVc) képlettel írhatók le.

Az amidkötés kialakítására alkalmas módszereket például az alábbi irodalom tárgyalja: Houben-Weyl, Methoden dér organischen Chemie, 15/2, kötet: Bodanszky et aI.,Peptidesynthsis, 2nd ed. (Wiley &Sons, NewYork 1976), vagy Gross, Meienhofer, ThePeptides. Analysis, synthesis, biology (Academic Press, • NewYork 1979). Előnyösen az alábbi módszereket alkalmazzuktazaktívészteres módszer, N-hidroxi-szukcinimidet vagy 1-hidroxi-benztrizolt alkalmazva észterkomponensként; karbodiimiddel, így dícildohexilkarbodiimiddel vagy propánfoszfonsavanhidriddel végzettkapcsolás; avegyes anhidrid módszere, pivaloil-ldoriddal.

A kiindulási anyagként szükséges optikailag aktív (TVc) általános képletű amidokat, ahol R², R³ és R⁴jelentése afenti, optikailag aktív α-aminosavakból kiindulva állítjuk elő, amineksorán a savak aszimmetriacentruma megmarad. Ismert módon a nitrogénatomon védett aminosav-aldehidet készítünk, majd ezt- aldol-analógreakciókeretéhen-megfelelő heteroarilalkil-elemmel kapcsoljuk össze, és a védőcsoport lehasítása után (TVc) általánosképletű aminoalkoholt kapunk.

AzN-védett aminosav-aldehideket B. Castro et al. módszerével állítjuk elő [Synthesis (1983), 676].

Az aldol-analóg addícionáltatást, aminek során az aminosav-aldehid N-atomján a védőcsoport előnyösen N-tercbutoxikarbonil- vagy benziloxikarbonilcsoport, bázissal szemben közömbös oldószerben végezzük; alkalmas például éter, THF, toluol, DMF, DMSO vagy dimetoxietán.

A heteroarilalkil-komponens deprotonálásához az alábbi bázisokat alkalmazhatjuk: alkálifém-alkoholátok, így kálium-O-terc-butilát, nátrium-metilát, alkáiifémhidridek, pl. nátrium- és kálium-hidrid, szerve fémbázisok, így n-butil-lítium, szek-butil-lítium, raetil-lííium vagy fenil-lítium, nátrium-amid, valamint alkálifémből szerves nitrogénbázissal képzett sók, így lítiumdiizopropilamid.

Az 0) általános képletű vegyületek előállítása során szükséges előkészítési és utólagos műveletek, így védőcsoportok bevezetése és lehasítása az irodalomból ismert (pl. T. W. Greene .Protective Groups in Organic Synthesis”) módszerek szerint történnek. Az (I) általános képletű vegyületek sóit szintén ismert módon állítjuk elő, pl. oly módon, hogy egy, bázikus csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyület egy egyenértékétközömböspoláros oldószerben,így például tetrahidrofuránban, etanolban vagy dimetil-szulfoxidban feloldjuk, a megfelelő sav egy egyenér tekét adjukhozzá és a kapott oldatot keverjük. A savaddíciós sót az oldat betöményítésévei izoláljuk.

Ha AésB aminosavként racém aminosavakat alkalmazunk, sztereoizomer-elegyek, főleg diasztereomerelegyek keletkeznek. Az elegyeket ismert módon, például frakcionált kristályosítással vagy kromatográfiásan szétválaszthatjuk.

A találmány szerint előállított (I) általános képletű vegyületek enzimgátló tulajdonságokkal rendelkeznek, főleg a renin enzim működését gátolják. A renin: az aszpartil-proteáz enzimek osztályába tartozó proteolitikus enzim, amelyet különböző ingerek következtében (pl. térfogatcsökkenés, nátriumhiány, β-receptor ingerlés) a vese juxtaglomeruláris sejtjei választanak ki a vérkeringésbe. Ott a máj által kiválasztott angiotenzinogénről lehasítja azangiotenzin Inevű dekapeptidet, amelyet majd az „angiotensín converting enzyme” (ACE) angiotenzinné H-vé alakít. Az angiotenzin Π-nek lényeges szerepe van a vérnyomás szabályozásában, mert képes a vérnyomást közvetlenül, érösszehúzódás kiváltásával növelni. Emellett az angiotenzin H a mellékvesék aldoszteron-termelését serkenti, így a nátrium-kiválasztás gátlásán keresztül növeli a sejtközti állományban levő folyadéktérfógatot, ami hozzájárul a vérnyomás emelkedéséhez. Ha a renin enzimes aktivitását gátoljuk, kevesebb angiotenzin I keletkezik, így angiotenzin H is kevesebb képződik. Ezen aktív peptihormon koncentrációjának csökkenése a közvetlen oka annak, hogy a renin-gátlók a

HU 205770 Β vérnyomást csökkentik.

A renin-gátlók hatékonysága in vitro teszttel ellenőrizhető, aminek során az anziotenzin I képződésének csökkentését mérjük különböző rendszerekben (humán plazma, tisztított humán renin).

A mérés elve

Például mind renint, mind angiotenzinogént tartalmazó humán plazmát 37 °C-on a vizsgálandó vegyülettel együtt inkubálunk, majd az inkubálás során keletkezett angiotenzin I koncentrációját radio-immunoassay módszerrel mérjük. Arénin-inhibitor az angiotenzin felszabadítását gátolja.

A plazma előkészítése

Vért veszünk önkéntesektől, mintegy 0,5 litert személyenként (ASID Bonz und Sohn interschleissheimi cég készülékével), és jeges hűtés mellett olyan palackokban felfogjuk, amelyekből a levegőt részben eltávólítottuk. A vér alvadását 10 mM végkoncentrációjú EDTA-val gátoljuk. Sorvall típusú (HS 4 rotor) centrifugában a plazmát 3500 perc'¹ fordulatszám mellett 0-4 ’C-on 15 percen keresztül centrifugáljuk; a centrifugálástszükség esetén megismételjük. Utána a plazmát óvatosan lepipettázzuk és alkalmas adagokban 30 ’C-on lefagyasztjuk. A teszthez csak elegendően nagy renin-aktivitású plazmát alkalmazunk. Alacsony renin-aktivitásü plazmát hidegkezeléssel (3 napon át -4 ’C-on) aktiválunk (aprorenin reninná alakul).

A teszt végrehajtása

Az angiotenzin I-et a Renin-Maia-kit reagens-készlettel (gyártja:Serono Diagnistics SA., Coisins, Svájc) határozzuk meg, A plazma inkubálását a készlethez mellékelt használati utasítás szerint végezzük. Az alábbi összetételű elegyet inkubáljuk:

1000 ji plazma (0-4 °C-on felengedve)

100 jil 7,4 pH-jú foszfátpuffer

10⁴Mramipriláttal lOjilPMSF-oldat ji 10,1 %-os GenapolPFIC ji 1 DMSO ill. tesztpreparátum

A vizsgálni kívánt vegyületekből általában dimetilszulfoxiddal 10'² mól kondentrációjú oldatot készítünk és dimetilszulfoxiddal hígítjuk. Az inkubálásra kerülő elegy legfeljebb 1% dimetil-szulfoxidot tartalmaz.

Az elegyet jeges hűtés mellett Összekeverjük, majd 37 ’C-os vízfürdőn 1 órán át inkubáljuk. Egy elegyet inhibitor nélkül készítünk, ebből inkubálás nélkül 6 mintát veszünk (100-100 ni), az alkalmazott plazma kiindulási angiotenzin I tartalmának meghatározására.

A vizsgálni kívánt vegyületek koncentrációját úgy választjuk meg, hogy 10% és 90% enzimgátlás közötti tartományban legyenek mérési pontjaink (legalább 5 koncentráció). Az inkubálási idő elteltével mindegyik elegyből 3-3 100 nl-es mintát veszünk, előre hűtött Eppendorf-edényekben száraz jégen befagyasztjuk és kb. -25 ’C-on az angiotenzin I meghatározásig (három minta középértéke) tároljuk.

Angiotenzin I radio-immuno-assay (RIA)

A Serono Diagnistics S A.(Coinsins, Svájc) cég által gyártott RIA-kit használati utasítását pontosan követjük.

A kalibrációs görbe 0,2 ng/ml-tól 25 ng/ml-ig mutatja az angiotenzin I koncentrációját, A plazma bázis-angiotenzin-tartalmát minden mérési értékből levonjuk A plazma renin-aktivitását (PRA) ng Ang I/ml.óra egységben adjuk meg. A vizsgálni kívánt vegyület jelenlétében kapott PRA-értéket az inhibitor nélkül mért értékre (100%) vonatkoztatjuk és %-os maradék aktivitásként adjuk meg. A %-os maradék aktivitást az ordinátára, a vegyület koncentrációját a logaritmikus léptékű abszcisszára felvive olyan diagramot kapunk, amelyből a vegyület IC₅₀-értéke leolvasható. Az itt leírt vegyületek az in vitro tesztben mintegy ΙΟ'⁵ - 10'¹⁰ mól/1 koncentrációban mutatnak gátlóaktivitást.

Tisztított emberi veserenin gátlása

Az alábbi összetételű assay eiegyben angioteinzin ϊ-et szabadítunkfel (konc.mól/1-ben)

3,75 nmól renm-szubsztrátum (Asp-Arg-Val-IyrIle-His-Pro-Phe-His-Leu-Val-Ile-His-Asn; gyártja: BachemAG, BUbendorf, Svájc),

0,24 mg szarvasmarha szérumahibin (Sigma No. A7638),

1,6 mmól EDTA, ,

0,09 mól foszfátpuffer pH 7,5

I mmól fenilmetilszulfoniifliiorid (Genapol^RPF 10 detergens, gyártja: Calbiochem. GmBH Frankfurt, NSZK) és kb. 3-5 ng angiotenzin 1/ml.óra mennyiségű termeléséhez elegendő emberi veserenin (Calbiochem. GmbH, Frankfurt, NSZK). Az elegy össztérfogata

1,2 ml volt. A vizsgálni kívánt vegyületeket dimetüszulfoxidos oldat alakjában adagoltuk, 1 tf% végső koncentrációig. Az elegyet 0 ’C-on homogenizáltuk, és azonnal a renin adagolása után mintát vettünk az angiotenzin kiindulási immunreaktivitásának meghatározására. Utána az elegyet 2 órán át 37 ’C-on inkubáltuk, A 40., 80. és 120. perc után 250 jil térfogatú mintát vettünk, amelyekben a reakciót 96 ’C-ra törtér nő 2 perces melegítéssel félbeszakítottuk.

Előállítási példa IC₅₀(hM) emberi veserenin emberi plazmarenin

1.	4,4	65
2.	4,4	20
3.	2,2	28
4.	10	44
6.	15	270
7.	19	45
9.	4,6	30
10.	2,9	28
12.	50	400
13.	380	550
15.	57	450
16	30	70
19.	1,8	1,2

HU 205770 Β

Előállítási példa IC₅₀ (nM)

	emberi veserenin	emberi plazmarenin
20.	2,9	0,85
23.	7,8	13
24.	4,5	4,8

Renin-gátlőksóban szegény állatokban vérnyomáscsökkentést váltanak ki. Tekintettel arra, hogy a humán renin egyéb fajok renin jétől különbözik, az in vivő kísérletekhez főemlősöket vontunk be (marmozetek, rézusz-majmok). Ezeknek a reninje és a humán renin szekvenciában messzemenően egyezik. Furoszemid intravénás beadásával endogén renin-kibocsátást inkubáltunk, utána a vizsgálni kívánt vegyületeket folyamatos infúzióval adagoltuk, közben a vérnyomást ésa szívfrekvenciáját mérve. A találmány szerint előállítottvegyületekmintegy 0,1...5mg/kg (i.v.) dózistartományban hatásosak. Az ® általános képletű vegyületek vérnyomáscsökkentő gyógyszerkészítmények hatóanyagaként, valamint szívelégtelenség kezelésébenhasználhatókfel.

AHEV-proteáz önmagát vágja ki autokatalitikusan aGAG-POL-polipeptidből,utána a p55 előpeptidet a pl7, p24 és pl4 core-antigénekké hasítja. Ezért a HIV-proteáz esszenciális enzim, amelynek gátlása a vírus életciklusátmegszakítja,szaporodását megszünteti.

Biológiai kísérletek azt mutatták, hogy a találmány szerint előállított vegyüíetek enzimgátló hatással rendelkeznek és vírus eredetű enzimeket, így a HlV-proíeázt is gátolják. Ez főleg a HÍV okozta megbetegedések megelőzése és kezelése szempontjából fontos. Az alkalmazott in vitro tesztekben az (I) általános képletű vegyületekmintegy ΙΟ⁴-10*⁸ mól/l koncentrációban mutattakgátló hatást.

A találmány az (I) általános képletű vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására is kiterjed. Akészítmények az (E) általános képletű vegyület hatásos dózisát, valamint a gyógyszergyártásban általánosan alkalmazott hordozó és egyéb segédanyagot tartalmazzák. Az alkalmazás intranazálisan, intravénásán, szubkután, perorálisan történhet. A dózis a melegvérű fajától, a testtömegtől, életkortól és az alkalmazott módtól függ. A találmány szerint a gyógyszerkészítményeket önmagukban ismert oldásí, keverési, granulálási vagy egyéb eljárásokkal állítjuk elő.

Orális alkalmazásra szánt készítmények előállítására a hatóanyagot összekeverjük a szokásos hordozóanyagokkal, stabilizátorokkal vagy közömbös hígítószerekkel, majd alkalmas adagolási formában (tabletta, drazsé, kapszulák, vizes, alkoholos vagy olajos szuszpenziók vagy vizes, alkoholos vagy olajos oldatok) kiszereljük. Közömbös hordozóként például gumi arabikum, magnézia, magnézium-karbonát, káliumfoszfát, tejcukor, glükóz, magnézium-sztearil-fumarát vagy keményítő, különösen kukoricakeményítő kerülhet alkalmazásra. Száraz vagy nedves granulálási végezhetünk. Olajos hordozóanyagként például növényi és állati eredetű olajok, így napraforgóolaj vagy csukamájolaj jöhet számításba.

Szubkután vagy intravénás alkalmazás céljára az aktív anyagot vagy fiziológiailag elviselhető sóját feloldjuk, szuszpendáljuk, emulgeáljuk, kívánt esetben a szokásos segédanyagokkal (oldódást elősegítő anyagokkal, emulgeátorokkal, egyéb segédanyagokkal) együtt. Oldószerként péládul az alábbiakat alkalmazhatjuk: víz, fiziológiás konyhasóoldat vagy alkoholok, például etanol, propanol vagy glicerin, továbbá cukoroldat, így glükóz- vagy mannitoldat, vagy a felsoroltak elegyei.

ACC 4-amino-ciklohexil-karbonil-csoport

Boc terc-butoxikarbonil-csoport

BuLi n-butil-lítium

DCC diciklohexil-karbodiimid

DCIDesorption Chemical Ionisation

DNP 2,4-dinitro-fenii-csoport

DME dimetoxi-etán

DMF dimetil-formamid

EE etil-acetát

EIElectronlmpact

FAB Fást atom bombardment

HOBt 1-hidroxi-benzotirazol

M molekuka csúcs

MS tömegspektrum

MTBE metil-terc-butil-éter

NEMN-etil-morfolin

N-PropA n-propil-foszfonsavanhidrid

THF tetrahidrofurán.

Az aminosavak jelölésére alkalmazott egyéb rövidítések megfelelnek a peptidkémiában szokásos háromkötésű kódnak (Europ. J. Biochem. 138,9-37 /1984/). Ha másként nem adtuk meg, mindig az L-konfigurációjú savról van szó.

Az alkalmazott futtató elegyek rövidítései az alábbiak:

LM1 CH₂-C1₂/CH₃OH20:1

LM2CH₂-C1₂/CH₃OH9:1

LM3 CH₂C1₂/CH₃OH 12:1

LM4 CH₂Cl₂/CH₃OH/tömény ammónia 10:1:0,1

LM5 ciklohexán/etil-acetát9:l

LM6 n-hexán/etil-acetát 2:1

Az alábbi példákkal a találmányt közelebbről ismertetjük, a találmányt azonban nem korlátozzuk a példákra.

1. példa

N-(N-terc-butoxikarbonil-cisz-4-amino-ciklohexí l-karbonil)-L-feniIalanin-L-norvalin-[lS-ciklohexil metil-2S-hidroxi-5-(2-piridil(]-pentilamid

235 mg N-(N-terc-butoxikarbonil-cisz-4-aminociklohexil-karbonil)-L-fenilalanin 3 ml dimetil-formamiddal készített oldatához az alábbiakat adagoljuk: 98 mg HOBt, 130 mg DCC és 0,08 ml NEM. Az oldathoz 230 mg L-norvalin-[(lS-cikIohexilmetil-2Shidroxi-5-(2-piridil)]-pentilamid 3 ml dimetilformamiddal készített oldatát adjuk, és az elegyet szobahőmérsékletne egy éjszakán át keverjük. A dimetil-for4

HU 205770 Β mamidot nagyvákuumban ledesztilláljuk, a megmaradt oldatot etil-acetáttal hígítjuk, a kivált karbamidot kiszűrjük és az oldatot telített nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal, majd telített konyhasó-oldattal kétszer-kétszer mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk és vákuumban betöményítjük.

A nyers terméket oszlopkormatográfiásan (kovagél, LM1) tisztítjuk. 315 mg cím szerinti terméket kapunk, amely 100-103 °C-on olvad.

MS (FAB) 748 (M+l)

a) N-(N-terc-butoxikarbonil-cisz-4-amino-ciklohexil-karbonil)-L-fenilalanin

5,5 g N-(N-terc-butoxikarbonil-cisz-4-amino-cÍklohexilkarbonil)-L-fenilalanin-benzilészter 230 ml etanoUal készített oldatát 1 g szénhordozós palládium katalizátor jelenlétében légköri nyomáson hidrogénezzük. A reakció befejeztével a katalizátort kiszűrjük és az oldószert ledesztilláljuk. n-Heptán/etil-acetát elegyéből végzett átkristályosítás után 4,1 g színtelen terméket kapunk, amely bomlás közben 160— 161 °C-on olvad.

MS (DÓ) 391 (M+l)

b) N-(N-terc-butocikarbonil-cisz-4-amino-ciklohexilkarbonil)-L-fenilalanin-benzilészter

6,0 g N-terc-butoxikarbonil-cisz-l,4-amino-ciklohexánkarbonsav és 6,3 g L-fenilalanin-benzilészter 75 ml dimetilformamiddal készített oldatához 0 ’C-on 24 ml n-propil-PA-t és 15,7 ml NME-t adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át reagáltatjuk, Az oldatot diklór-metánnal hígítjuk, félig telített NaHCO₃-oldattal, 10%-os citromsa voldattal, majd vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk és vákuumban bepároljuk. Flash kromatográfiás tisztítás után 5,7 g tiszta terméket kapunk.

[ajjj: -14,6° (c=1,1, metanol)

2, példa

N-(cisz-4-amino-ciklohexilkarbonÍl)-L-fenilalanl n-L-norvalin-[lS-ciklohexil-metil-2S-hidroxi-5-(2píridil)]-pentilamid

Az 1. példa szerinti vegyület 77,7 mg-jának 2 ml diklórmetánnal készített oldatához 0 ’C-on nitrogéngáz légkör alatt 2 ml trifluor-ecetsavat adunk. 30 perc elteltével az oldatot betöményítjük, a maradékot etil-acetátban oldjuk és az oldatot telített NaHC0₃oldaítal, majd konyhasó-oldattal kétszer-kétszer mossuk. Oszlopkromatográfiás tisztítás (kovagél, LM1) után 24,7 mg cím szerinti terméket kapunk.

MS (FAB) 648 (M+l)

3. példa

N-(N-terc-butoxikarbonil-transz-amino-ciklohexil-karbonil)-L-fenÍlalanín-L-norvalin-[ 1 S-cildohexilmetil-2S-hidroxi-5-(2-piridil)]-pentilamíd

Az 1. példa szerint járunk el N-(N-terc-butoxikarbonil-transz-4-amino-ciklohexilkarbonil)-L-fenilala nint és L-norvalin-[lS-ciklohexilmetil-2S-hidroxi-5(2-piridil)]>pentílamidot reagáltatva. 270 mg cím szerinti terméket kapunk, amely 219-220 ’C-on olvad.

MS (FAB) 748 (M+l)

a) N-(N-terc-butoxikarbonil-transz-4-amino-ciklohexilkarbonil)-L-fenilalanin

4,45 g N-(N-terc-butoxikarbonil-transz-aminociklohexilkarbonil)-L-fenilalanin-benzilészter 200 ml etanollal készített oldatát 900 mg szénhordozós palládium katalizátor jelenlétében légköri nyomáson hidrogénezzük. A reakció befejeztével a katalizátort kiszűrjük és az oldószert ledesztilláljuk Átkristályosítás után 2,67 g tiszta terméket kapunk, amely 160 ’C felett bomlás közben olvad.

MS(DCI)391 (M+l)

b) N-(N-terc-butoxikarbonil-transz-4-amino-cÍldohexilkarbonil)-L-fenilalanin-benzilészter g N-terc-butoxikarbonil-transz-4-amino-ciklohexilkarbonsav és 3,2 g L-fenilalanin-benzilészter 40 ml dimetilformamiddal készített oldatához 0 ’C-on

7,85 mlN-etil-morfolint, eztkövetően 12mln-propilfoszfonsavanhidridet adunk. Az elegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük, utána 200 ml etilacetáttal hígítjuk és vízzel, 10%-os citromsav-oldattal, telített NaHCO₃-oldattal és telített konyhasóoldattal kétszer-kétszer mossuk A szerves fázist Vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk és vákuumban oldószermentesítjük. A nyers terméket dietil-éterrel eldörzsöljük, a kivált kristályokat leszívatjuk és szárítjuk Op.: 176-177’C

MS(DCI)481 (M+l)

4. példa

N-(transz-amino-ciklohexilkarbonil)-L-fenilala-n in-L-norvalin-[lS-ciklohexil-metil-2H-hidroxi-5-(2

-piridil)j-pentilamid

A 2. példában leírtak szerint állítjuk elő a cím szerinti vegyületet a 3. példa szerinti termékből.

Hozam kromatográfiás tisztítás (kovasavgél,LM2) után 27 mg MS(FAB) 648 (M+l), Rf 0,17 (CH₂C1₂/Metanol 8:2)

5. példa

N-(N-terc-butoxikarbonil-transz-4-amino-ciklohexil-karbonil)-L-fenilalanin-N(im)-tritil-L-hiszti-d in-[lS-dklohexil-metÍl-2S-hidroxi-5-(2-piridil)p pentilamid

A 3a) példa szerinti fenilalanin-származékból és FMOC-His(Trt)-(lS-ciklohexilmetíl-2S-hidroxi-5(2-piridil)j-pentilamidból állítjuk elő a cím szerinti vegyületet az 1. példában leírt eljárással.

Hozam kromatográfiás tisztítás (kovasavgél, LM1) után 0,4 g.

MS (FAB) 1028 (M+l), 1934 (M+7) Rf 0,5 (toluol/metanol 8:1)

6. példa

N-(N-terc-butoxikarbonil-transz-4-amino-ciklohexil-karbonil)-L-fenilalanin-L-hisztidin-[lS-ciklo hexil-metil-2S-hidroxi-5-(2~piridÍl))-pentilamid mg 5. példa szerinti terméket feloldunk 5 ml 90%-os ecetsavban, és az oldatot 2 órán át 60 ’C-on tartjuk. Utána a pH-t nátrium-karbonáttal 8-ra állít5

HU 205770 Β juk, és az oldatot etilacetáttal háromszor extraháljuk. Aszerves fázist telített NaHCO₃-oldattal, majd telített konyhasó-oldattal kétszer-kétszer mossuk, vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk és vákuumban betömnyítjük. Kromatográfiás tisztítás (kovasavgél, LMl)után 16 mg tiszta terméket kapunk.

MS (FAB)786 (M+l), bomlás 155 Cfelett

7. példa

N-(transz-4-amino-ciklobexil-karbonil)-L-feniIa-Ianil-L-hisztidin-[lS-ciklohexil-metil-2S-hidroxi-5

-(2-piridil)]-pentilamid

300 mg 5. példa szerinti vegyület, 5 ml ecetsav és 0,25 ml víz elegyét 15 percen át 0 °C-on, majd 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldatot vákuumban betöményítjük, NaHCO₃-oldattal meglúgosítjuk és etil-acetáttal extrabáljuk. A szerves fázist vákuumban betöményítjük, a maradékot kromatografáljuk (kovasavgél, LM2).

MS (FAB) 686 (M+l), op. 114-116 ’C.

8. példa

N-(N-terc-butoxikarbonil-cisz-4-amino-cikIohexiI-karboníl)-L-fenilalanin-N(im)-tritü-L-bísztidin[lS-cikíohexiImetil-2S-hidroxi-5-(2-plridil)]-pentila mid

Az la) példa szerinti vegyületből és FMOCHfe(Trt)-[lS-cíkIohexilmetil-2S-hídroxi-5-(2-piridil) l-pentilamidból állítjuk elő a cím. szerinti vegyületet az

I. példában leírt eljárással. Kromatográfiás tisztítás (kovasavgél, LM1) után 0,5 g cím szerinti terméket kapunk.

MS (FAB) 1028 (M+l), 1034 (M+7), Rf 0,26 (LM1)

9. példa

N-(N-terc-butoxíkarboníl-císz-4-amino-cikIohexil-karbonil)-L-fenilalanin-L-hlsztidin-[lS-ciklohexiI-metiI-2S-hídroxí-5-(2-píridil)]-pentilamid

A 8. példa szerinti termékből állítjuk elő a cím szerinti vegyületet a 6. példában leírt eljárással. Hozam: 61 mg, op.: 127-130 ’C, R_f 0,21 (LM2)

MS (FAB)786 (M+l)

10. példa

N-(cisz-4-ammo-ciklobexíl-karbonil)-L-fenilalanin-L-hisztídin-[lS-cikIohexil-metll-2S-hidroxi-5(2-pírídil)]-pentilamid

A 8. példa szerinti termékből állítjuk elő a cím szerinti vegyületet a 7. példában leírt eljárással. Hozam: 180 mg, op.: 177 ’C, bomlás közben

MS (FAB) 686 (M+l)

11. példa

N-(N-terc-butoxxkarbonll-transz-4-ammo-ciklohexil-karbonil)-L-tirozin(O-metil)-N(im)-tritíl-L-hi sztidih-[lS-ciklohexü-metil-2S-hidroxi-5-(2-piridil) j-pentilamid

N-(N-terc-butoxikarbonil-transz-4-amino-ciklohexiI-karbonll)-L-tirozin(metil)-bőI és L-Hjs(tritil)[lS-cÍkIohexilmetll-2S-hidroxi-5-(2-piridil)]-pentiIa midből az 1. példában leírt eljárással állítjuk élő a cím szerinti vegyületet.

Rf 0,54 (toluol/etanol 8:2)

MS (FAB) 1058 (M+l)

12. példa

N-(N-terc-butoxikarbonil-transz-4~amino-ciklohexil-karbonil)-L-tirozin(0-metil)-hisztidin-[lS-cik lohexil-metil-2S-bidroxi-5-(2-piridil)]-pentilamid

All. példa szerinti termékből állítjuk élő a címszerinti vegyületet a 6. példában leírt eljárással.

180 ’C-tól felfelé bomlás, Rf 0,2 (toluol/etanol 8:2)

MS (FAB) 816 (M+l)

13. példa

N-(transz-4-amino-ciklohexil-karboníl)-L-tirozan (O-metÍl)-L-hisztidín-[lS-ciklobexil-metil-2-S-hidroxi-5-(2-piridiI)]-pentilamid

All. példa szerinti termékből állítjuk eló'acím szerinti vegyületet a 7. példában leírt eljárással.

MS (FAB) 716 (M+l)

14. példa

N-(N-terc-butoxikarbonil-cisz-4-amino-ciklohexil-karbonil)-L-tirozin(0-metiI)-N(im)-tritií-L-hisztidÍn-[lS-ciklohexil-metil-2S-bidroxí-5-(2-piridil)]pentilamid

N-(N-terc-butoxikarbonií-cisz-4-amino-ciklohexi l-karbonil)-L-tirozin(0-metil)-ből és L-EKs(tritll)[lS-clklohexilmetll-2S-hidroxi-5-(2-piridll)]-pentna midből az 1. példábanleírt eljárással állítjuk elő a cím szerinti vegyületet

RfO,75(LM2)

MS (FAB) 1058 (M+l)

15. példa

N-(N-terc-butoxikarboniI-cisz-4-amíno-ciklohexi l-karbonn)-L-tirozin(0-metiI)-L-hisztidín-[rS-cikIo hexil-metü-2S-bidroxi-5-(2-piridil)3-pentiIamid

A14. példa szerinti vegyületből állítjuk elő a cím szerinti terméket a 6. példában leírtak szerint.

R_f0,80(LM4)

MS (FAB) 816 (M+l)

16. példa

N-(cisz-4-amiao-ciklohexiI-karboniI)-L-tirozin(O

-metil)-L-hisztidin-[lS-ciklohexil-w.etü-2-S-hidroxi

-5-(2-piridü)]-pentilamid

A 14. példa szerinti vegyületből állítjuk élő a cím szerinti terméket a 7.példában leírtak szerint.

Rf0,50(LM4)

MS (FAB) 716 (M+l)

77. példa ^K

N-[N-(N-cisz-4-terc-butoxikarbonil-amino-ciklo hexil-karbonü-fenilalanü)-bisztidiniI]-2-(5S-amino6-ciklohexil-3S,4R-dihídiroxi-n-hexil)-piridin mg 17a) példa szerinti vegyület, 40mgtíofenolés 2 ml aeetonitril elegyét 2 órán át keverjük.Betoményítés után a terméket kovasavgélen (LM4) kromatogra6

HU 205770 Β faljuk. 45 mg amorf port kapunk.

MS (FAB) m802 (M+l)

a) Boc-cisz-4-amúio-ciklohexil-karbonil-Phe-His(

DNP)-2-(5-amino-6-ciklohexil-3S,4R-dihidroxin-hexil)-piridm mg Boc-His(DNP)-(3S,4R-5S)-2-(5-amino-6ciklohexil-3,4-dihidroxi-hexil)-piridin 5 ml sósavas dimetoxi-etánnal készített elegyét 2 órán át keverjük. A betöményítés után kapott nyerstermék, 50 mg N(N-terc-butoxikarbonil-cÍsz-4-amino-ciklohexil-kar bonil)-L-fenilalanin, 120 mg DCC és 80 mg HOBt 3 ml dimetil-formamiddal készített oldatának pH-értékét N-etil-morfolinnal 9-re állítjuk. Az oldatot 16 órán át keverjük, szűrjük, a szűrletet etil-acetáttal hígítjuk és 3%-os NaHCOj-oldattal, vízzel, majd telített konyasóoldattal mossuk, utána vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, betöményítjük, és a nyers terméket kovagélen (LM3) tisztítjuk. 60 mg cím szerinti vegyületetkapunk sárga hab alakjában.

MS (FÁM) 968 (M+l)

b)

Boc-His(DNP)-(3S,4R,5S)-2-(5-amino-6-ciklohexil-3,4-dihidroxi-hexil)-piridin

A 17c) példa szerint kapott (3S,4R,5S)-izomer 0,5 mmól-ját sósavgázzal telített dimetoxi-etán 5 miében 2 órán át keverjük. Vákuumban végzett betöményítés után a maradékot 3 ml vízmentes dimetil-formamidban oldjuk, és Boc-His(DNP)-OH, diciklohexilkarbodiimid és HOBt 0,5-0,5 mólját adjuk az oldathoz. Az oldat pH-értékét N-etil-morfolinnal 9-re állítjuk, és az elegyet 24 órán át keverjük. Az elegyet szűrjük, a szűrletet etil-acetáttal hígítjuk és 3%-os NaHOGj-oldattal mossuk. Magnézium-szulfátos szárítás után az oldatot betöményítjük, és a maradékot kromatográfiásan (kovasavgél, LM1) tisztítjuk. Sárga gyanta alakjában kapjuk a cím szerinti vegyületet.

MS (FAB) 696 (M+l)

c) 2-[3S,4R,5S)-5-terc-butoxikarbonil-ammo-3,4-di hidroxi-6-ciklohexiI-n-hexilj-piridin mg(l mmól) 2-pikolin 10 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához -78 °C-on 1,4 ml (1 mmól) n-butillítiumot adunk. Amikor az elegy szobahőmérsékletre felengedett, 30 percen át keverjük, majd -40 ’C-ra hűtjük. Az elegyhez 1 mmól (2RS,3R,4S)-3-terc-butil-dimetU-szÍliloxi-4-terc-butoxikarbonil-amino-5ciklohexil-l,2-oxopentán (189 203 sz. európai szabadalmi bejelentés 6. példájából ismert) 5 ml tetrahidrofuránnal készített oldatát adjuk. Az elegyet szobahőmérsékleten 10 órán át állni hagyjuk, majd vízzel hígítjuk és metíl-terc-butil-éterrel extraháljuk. A 0,4 g nyersterméket tetrahidrofuránban oldjuk, 5 ml 1 mólos tetrahidrofurános tetrabutil-ammónium-fluoridoldatot adunk hozzá, és az elegyet 0 ’C-on 1 órán át keverjük.

Az elegyet vízzel hígítjuk, etil-acetáttal extraháljuk, így

0,15g(3S,4R,5S)-izomert [MS(FAB) 391 (M+l)]és 0,12 g (3S,4S,5S)-izomert [MS (FAB) 391 (M+l)] kapunk.

18. példa cisz-4-amino-ciklohexil-karbonil-L-Phe-L-His[(lS-cik]o-hexilmetil-2R,3S-dihidroxi-5-(2-piridil)]

-n-pentilamid-trisz-trifluoracetát

A17. példa szerinti vegyület 25 mg-ját 1 ml trifluorecetsav és 1 ml diklór-metán elegyében 2 órán át kever jük. Az elegyet betöményítjük, a maradékot vízben oldjuk és az oldatot liofilizáljuk. 20 mg cím szerinti terméket kapunk színtelen por alakjában.

MS (FAB) 702 (M+l)

19. példa

Boc-transz-4-amino-ciklohexil-karbonil-L-Phe-L -His-[ 1 S-ciklohexil-metil-2R,3S-dihidroxi-5-(2-piri dil)]-n-pentilamid

A17. példa szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti terméket a 19a) példa szerinti vegyületből. Hozam:

79,5 mg.

R_f0,19(LM2)

MS (FAB) 802 (M+l)

a) Boc-transz-4-amÍno-ciklohexil-karbonií-L-Phe-L

-His(DNP)-[lS-ciklohexü-metil-2R,3S-dihidroxi

-5-(2-piridil)]-n-pentilamid

A 17a) példa szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti terméket a 3a) és 19b) példa szerinti vegyületből.

Rf0,40(LM2) .

MS (FAB) 968 (M+l)

b) H-His(DNP)-(3S,4R,5S)-2-(5-amino-6-ciklohexil

-3,4-dihidroxi-n-hexil)-piridin-hídroklorid

A 17b) példa szerinti vegyület 400 mg-ját 10 ml sósavgázzal telített dimetoxi-etánban 2 órán át keverjük.

Betöményítés után a maradékot kétszer toluolban felvesszük, újból betöményítjük. Sárga habként kapjuk a cím szerinti vegyületet.

MS (FÁM) (M+l)

20. példa transz-4-amino-ciklohexil-karbonil-L-Phe-L-His -[ 1 S-ciklohexil-metil-2R,3S-dihidroxi-5-(2-piridil)] -n-pentilamid

A18. példa szerint eljárva kapjuk meg a cím szerinti terméket a 19. példában leírt vegyületből. Hozam: 49 mg

MS (FAB) 702 (M+l)

21. példa

Boe-transz-4-amino-ciklohexü-karböniI-L-Tyr(0

-metil)-L-His-[lS-ciklohexil-metü-2R,3S-dihidroxi

-5-(2-piridiÍ)]-n-pentiIamíd

A17. példa szerint eljárva állítjuk elő a cún szerinti terméket a 21 a) példa szerinti vegyületből.

MS (FAB) 832 (M+l)

a) Boc-transz-4-amino-ciklohexil-karbonil-L-Tyr(0

-metil)-L-His(DNP)-[lS-ciklohexil-metil-2R,3SdihÍdroxÍ-5-(2-piridil)]-n-pentilamid

A 17a) példa szerinti eljárva állítjuk elő a cím szerinti terméket a 21a) és 19b) példa szerinti vegyületből.

MS (FAB) 998 (M+l)

HU 205770 Β

b) Boc-transz-4-amino-ciklohexil-karbonil-Tyr(OCH₃ )-OH

0,05 mól Boc-transz-4-amino-cikIohexil-karbonilTyr(OCH₃)-OCH₃ 250 ml dimetoxi-etánnal készített oldatához ekvimoláris mennyiségű In nátrium-hdiroxid-oldatot adunk és az elegyet 5 órán át keverjük.

Ezt követően az oldatot betöményítjük, a maradékotvízben oldjuk, az oldatot kálium-hidrogén-szulfáttal pH4-resavanyítjuk és etil-acetáttal extraháljuk. A nyers terméket n-heptán és etil-acetáttal extraháljuk. Anyers terméket n-heptán és etil-acetát elegyéből átkristályosítjuk. Fehér por alakjában kapjuk a cím szerinti terméket, amely 181 ’C-on olvad. Rf 0,20 (toluol/etanol8:2)

MS (DCI) 421 (M+l).

c) Boc-transz-4-ammQ-ciklohexiI-karbonil-Tyr(OCH₃ )-OCH₃

0,1 mól Boc-transz-4-amino-cikIohexiI-karbonilOHésO,l mólL-tirozin(OCH₃)-metilészter 500 ml dímetil-formamiddal készített oldatához 0 ’C-on nitrogéngáz légkör alatt 100 ml 50%-os diklór-metános nPropPA-oIdatot és 0,5 mól trietil-amint adunk. Az oldatot egy éjszakán állni hagyjuk. A vékonyréteg-kromatográfiával ellenőrzött reakció befejeztével az oldószert nagyvákuumban ledesztilláljuk, és a maradékot etil-acetátbanfelvesszük. A szerves fázist 10%-os citromsav-oldattal, vízzel, félig telített NaHC0₃-oIdattal, majd telített konyhasóoldattal kétszer-kétszer extraháljuk, majd vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, vákuumban betöményítjük, és a maradékot kromatografáljuk (kovasavgél, LM5).

Op.: 150-155’C

MS (DCI) 435 (M+l)

22. példa transz-4-amino-ciklohexil-karbonil-L-Tyr(O-metÍI)-L-His-QlS-cikIohexii-metÍl-2R,3S-dÍhidroxi-5(2-píridil)-n-pentilamid

A 18. példában leírtak szerint a 21. példa szerinti vegyületből állítjuk elő a cím szerinti terméket.

MS(FÁB)732(M+1)

23. példa

Boc-cisz-4-amíno-ciklohexiI-karbonil-L-Tyr(0metil)-L-His-[lS-cikIohexiI-metil-2R,3S-dihidroxí5-(2-piridil)]-n-pentiIamid

A17. példában leírtak szerint a 23a) példa szerinti vegyületből állítjuk elő a cím szerinti terméket.

MS (FAB) 832 (M+l)

a) Boc-cisz-4-amino-ciklohexiI-karbonil-L-Tyr(0metil)-L-His(DNP)-[ls-CIKLOHEXIL-2r,3S-dihidroci-5-(2-piridil)]-n-pentilamid

A 17a) példában leírtak szerint a 23b) és 19b) példa szerinti vegyületekből állítjuk elő a cím szerinti terméket.

MS (FAB) 998 (M+l)

b) Boc-cisz-4-amino-cikIohexil-karbonil-Tyr(OCH₃)

-OH

A 21b) példa szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti terméket. [a]²⁵D=18,6’ (c = 1, metanol)

c) Boc-cisz-ACC-Tyr(OCH₃)-metilészter

A 21c) példa szerint állítjuk elő a cím szerinti terméket

MS (DCI) 435 (M+l)

24. példa cisz-4-amino-cildohexil-karbonil-L-Tyr(O-metil)

-L-His-[lS-ciklohexil-metil-2R,3S-dihidroxi-5-(2piridil)]-n-pentilamid

A18. példában leírtak szerint a 23) példa szerinti vegyületből állítjuk elő a cím szerinti terméket.

MS (FAB) 732 (M+l),Rf 0,56 (LM4) . 25. példa

Boc-cisz-4-amino-cfldohexil-karbonil-L-Phe-LHis-[lS-ciklohexil-metil-2S-hidroxi-5-(N-propil-2imidazolÍl)j-pentil-amid

A17. példában leírtak szerint a 25a) példa szerinti vegyületből állítjuk elő a cím szerinti terméket.

MS (FAB) 817 (M+l)

a) Boc-cisz-4-amino-ciklohexil-karbonil-Phe-His(

DNP)-[lS-ciklohexil-metil-2S-hidroxi-5-(N-propi l-2-imidazoíiI)]-pentiIamid

Ab) pont szerinti vegyűlet 60 mg-jának 4 ml, sósavgázzal telített dimetoxi-etánnal készített oldatát 2 órán át keverjük, majd vákuumban betöményítjük, A maradékot 3 ml dimetil-formamidban oldjuk, és 44 mg Boc-bisz-4-ammo-ciklohexil-karbonil-pHeOH-t, 0,11 mmól DCC-t és 0,11 mmól HOBt-t adunk hozzá. Az oldat pH-értékét N-etil-morf olinnal 9-reállítjuk. Az elegyet 24 órán át keverjük, etil-acetáttal hígítjuk, és 3%-os nátriumhidroxid-oldattal, vízzel, majd telített konyyhasóoldattal kétszer-kétszer mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfáttal szárítjuk, majd betöményítjük, kovasavgélen kromatografáljuk. Sárga gyanta alakjában kapjuk a cím szerinti vegyületet.

MS (FAB) 983 (M+l)

b) Boc-His(DNP)-[lS-ciklohexil-metil-2S-hidroxí-5(N -propil-2-imidazolil)]-pentilamid

100 mg c) pont szerinti vegyűlet 5 ml telített sósavas dimetoxi-etánnal készített oldatát 2 órán át keverjük, majd vákuumban betöményítjük. A maradékot 3 ml vízmentes dimetilformamdiban oldjuk. 105 mgBocHis(DNP)-OH, 0,3 mmól DCC és O,3 mmól HOBt adagolása után az oldat pH-értékét N-etil-morf olinnal 9re állítjuk, és az elegyet 24 órán át keverjük. Szűrés után a szűrletet etil-acetáttal hígítjuk és 3%-os nátrium-hidroxid-oldattal, vízzel, majd telített konyhasóoldattal kétszer-kétszer mossuk. A vízmentes magnéziumszulfáttal szárított oldatot betöményítjük és kovasavgélen kromatografáljuk. A cím szerinti vegyületet sárga gyanta.

MS (FAB) 711 (M+l)

c) 3-Boc-4S-ciklohexil-metil-2,2-dimetil-5-[3-(2-N

-propil-imidazolil)-propil]-oxazolidin

500 mgd) pont szerinti vegyűlet 5 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatához -60 ’C-on argon légkör alatt 1,9 ml n-hexános, 1,5 mólos n-butil-lítium-oldatot adunk. 15 perc elteltével 500 mg e) pont

HU 205770 Β szerinti vegyület 5 mi vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatát adagoljuk. Az elegyet 1 órán át 60 °C-on tartjuk, majd 10 ml telített NaHCO₃-oldatot adunk hozzá. Az elegyet hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni, utána etil-acetáttal háromszor extraháljuk, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk, majd betöményítjük. A terméket kovagélen kromatografáljuk etilacetáttal.

R_f 0,3 (etil-acetát); MS (FAB) 408 (M+l)

d) 10 g 2-metil-imidazol 40 ml n-propil-bromiddal készített elegyét 2 órán keresztül forraljuk, majd 150 ml 5%-os NaHS0₄-oldatba öntjük és etil-acetáttal háromszor extraháljuk. A szerves fázist vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk, majd betöményítjük, A maradékot éterben oldjuk, az oldatból a fel nem oldott kiindulási anyagot kiszűrjük. Színtelen olaj alakjában kapjuk a cím szerinti terméket.

Rf 0,2(etil-acetát/metanol 10:1)

e) 3-Boc-cíklohexil-mtiI-2,2-dimetiI-5-(2-bróm-etii) -oxazolidin

690 mg 3-Boc-lS-ciklohexil-metil-2,2-dimetil-5(2-hídroxi-etü)-oxazolidin, 2,6 g trifenil-foszfin és

1,6 gpiridinium-bromid 15 ml diklór-metánnal készített elegyéhez argon légkör alatt 20 ’C-on 1,6 ml azodikarbonsav-dietüésztert csepegtetünk. Az elegyet szobahőmérsékleten 16 órán át keverjük, utána vizet adunk hozzá, és az elegyet 100 ml diklór-metánnal hígítjuk. A szerves fázist telített 100 ml diklór-metánnal hígítjuk. A szerves fázist telített NaHCO₃-oldattal kétszer, konyhasó-oldattal egyszer mossuk, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk, majd betőményítjük. A maradékot kevés etil-acetátban oldjuk és az oldatot a trífenilfoszfin eltávolítása céljából szűrjük. A terméket kromatográfiásan tisztítjuk (kovasavgél, LM6)

RfÖ,3(LM6);mS404(M+l)

f) '3-Boc-cikÍohexiI-metil-2,2-dimetil-5-(2-hidroxiet il)-oxazolídin g Boc-ACHPA-OC₂H₅ (előállítás J. Med. CHem.

28,1779/1985/szerint), 500 mg p-toluolszulfonsav és

7,2 ml dimetoxipropán 160 ml toluollal készített elegyét argon légkör alatt 2 órán át 80 °C-on tartjuk. Betöményítés után a maradékot 2 g LíA1H₄ 200 ml tetrahidrofuránnal készített szuszpenziójához csepegtetjük. Az elegyet 2,5 órán át 0 ’C-on tartjuk, utána 100 ml 5%-os NaHSO₄-oldattal hígítjuk és etil-acetáttal háromszor extraháljuk. Az egyesített szerves nátrium-szulfáttal szárítjuk, betőményítjük és a maradékot kovasavgélen kromatografáljuk (LM6).

Rf0,l (LM6);MS (00)342 (M+l)

26. példa cisz-4-amino-ciklohexil-karbonil-L-Phe-L-His[lS-ciklohexil-metil-2S-hidroxi-5-(N-propil-2-imidazolil)]-pentilamid

A18. példa szerint eljárva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet a 25. példa szerinti vegyületből.

MS (FAB) 717 (M+l).

Claims

1. Eljárás (Γ) általános képletű Vegyületek - az (I) általános képletben

R^a jelentése adott esetben terc-butoxikarbonilcsoporttal védett amino 5-7 szénatomos cikloalkilcsoport,

A jelentése L-pHe vagy L-Tyr(O-metil)-Csoport,

B jelentése L-Nva vagy L-His,

R² jelentése ciklohexilmetii-csoport,

R³ jelentése hidrogénatom Vagy hidroxiícsoport és

R⁴ jelentése (Π) általános képletű csoport, amelyben D jelentése aromás, egy vagy két nitrogénatomot tartalmazó, 5-7 tagú heterociklusos csoport és mértéke 1,2 vagy 3, és az R² szubsztítuenst hordozó szénatom S-konfigurációjú, az OH-csoportot hordozó szénatom S- vagy R-konfigurációjú, és az R³ szubsztítuenst hordozó szénatom, amennyiben királis, S-konfigurációjú valamint fiziológiailag elviselhető sóik előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely, a terminálisán karboxiicsoportot tartalmazó fragmenst vagy ennek reakcióképes származékát megfelelő, szabad aminocsoportot hordozó másik fragmenssel kondenzáljuk, kívánt esetben a rewakcióképes csoportok védelmére bevezetett védőcsoportokat lehasíthatjuk és a kapott vegyületet kívánt fiziológiailag elviselhetősóvá alakítjuk,

2. Eljárás gyógyszerkészítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy egy, az 1. igénypont szerint előállított (I) általános képletű vegyületet - ahol R^a, A, B, R², R³, R⁴ jelentése az 1, igénypont szerinti vagy fiziológiailag elviselhető sóját a gyógyszergyártásban szokásos hordozó és egyéb segédanyagokba összekeverjük és gyógyszerkészítménnyé alakítjuk.