HU182102B - Diagnostic device for indicating leucocytes in liquids of body and method for making this - Google Patents

Diagnostic device for indicating leucocytes in liquids of body and method for making this Download PDF

Info

Publication number
HU182102B
HU182102B HU80326A HU32680A HU182102B HU 182102 B HU182102 B HU 182102B HU 80326 A HU80326 A HU 80326A HU 32680 A HU32680 A HU 32680A HU 182102 B HU182102 B HU 182102B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
sec
seo
group
activators
alkyl
Prior art date
Application number
HU80326A
Other languages
English (en)
Inventor
Dieter Berger
Guenter Frey
Manfred Kuhr
Wolfgang Werner
Original Assignee
Boehringer Mannheim Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=6062854&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=HU182102(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Boehringer Mannheim Gmbh filed Critical Boehringer Mannheim Gmbh
Publication of HU182102B publication Critical patent/HU182102B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C12Q1/37—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving peptidase or proteinase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
    • C09B11/00—Diaryl- or thriarylmethane dyes
    • C09B11/04—Diaryl- or thriarylmethane dyes derived from triarylmethanes, i.e. central C-atom is substituted by amino, cyano, alkyl
    • C09B11/06—Hydroxy derivatives of triarylmethanes in which at least one OH group is bound to an aryl nucleus and their ethers or esters
    • C09B11/08—Phthaleins; Phenolphthaleins; Fluorescein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
    • C09B43/00—Preparation of azo dyes from other azo compounds
    • C09B43/18—Preparation of azo dyes from other azo compounds by acylation of hydroxyl group or of mercapto group
    • C09B43/20—Preparation of azo dyes from other azo compounds by acylation of hydroxyl group or of mercapto group with monocarboxylic acids, carbamic acid esters or halides, mono- isocyanates or haloformic acid esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C12Q1/44—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving esterase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2334/00—O-linked chromogens for determinations of hydrolase enzymes, e.g. glycosidases, phosphatases, esterases
    • C12Q2334/40—Triphenylmethane dye chromogens, e.g. fluorescein derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2334/00—O-linked chromogens for determinations of hydrolase enzymes, e.g. glycosidases, phosphatases, esterases
    • C12Q2334/50—Indoles

Description

R3 jelenthet továbbá egy vinü-kinuklidü-karbonilcsoportot Is - és/vagy (II) általános képletű - ahol Rjjelentése hidrogénatom, rövidszénláncú alkilcsoport vagy adott esetben hidroxil- vagy rövidszénláncú alifás acilcsoporttal szubsztituált fenil- vagy naftilcsoport;
R? jelentése hidrogénatom, amino-(rövidszénláncú) -alkil, N-(t<>vidszénláncú)-alifás acil-amino-(rövidszénláncú)-alkil- vagy rövidszénláncú alifás, adott esetben telítetlen karbonsavgyök, vagy adott esetben nitrogénen rövidszénláncú alifás karbonsavval acilezett rövidszénláncú alifás a-aminosav-gyök - és/vagy (III) általános képletű - ahol
X jelentése hidrogénatom vagy hidroxilcsoport; és A jelentése egyenes vagy elágazó láncú, telített vagy 1-5-ször telítetlen, 3—25 szénatomos alkil- vagy telített vagy 1— 3-szor telítetlen, 3—20 szénatomos cikloalldlgyök - és/vagy (IV) általános képletű - ahol D jelentése alkálifémion;
B jelentése nehézfémion;
m jelentése 2-től 5-ig terjedő egész szám;
n jelentése 4-től 8-ig terjedő egész szám;
és p jelentése 0 vagy 1;
ahol m értéke a nehézfémion vegyértékétől és az n számától függ - aktivátort tartalmaz.
(i )
(«) vkcnmnoV
X-k-OH (Ul) (ív)
182.102
A leukociták testfolyadékokban, különösen vizeletben való kimutatása kiemelkedő fontosságú helyet foglal el a vese ás az uxogenitálls traktus betegségeinek diagnosztikájában.
Bzideig ezt a kimutatást a leukociták centxifugálatlan vizeletben vagy vizeletüledékben való mlkxőszkópiás számlálását val végezték. >·.
Természtesen mindkét·módszexben közös az, hogy csak ép leukocitákat vesz figyelembe. Másrészt ismeretes, hogy a leukoA olta-lizis sebessége a vizelet kémhatásától függően jelentős csökkenéseket okozhat; igy például erősen lúgos vizeletben csali 60 perces leukooita-felezési idővel k:ll számolni. Túl alacsony leukocitaszám, illetve a vizelet hosszabb ideig való állása lgj hamis negatív leleteket eredményezhet.
A llzla-hibától eltekintve a leukociták centrifugálatlan, homogenizált vizeletben, számlálókamxában való kvantitatív mikroazkópiáa meghatározása jól elfogadható értékeket szolgáltát. A gyakorlatban ezt a módszert mégis csak ritkán alkalmazzák, mivel munkaigényes, fárasztó és ldőtrabló, és alkalmazása iskolá·* zott személyzetet igényel.
A leukociták vizeletben való meghatározásainak túlnyomó többségét az orvosi gyakorlatban az ugynevezett'.látótér módszerrel végzik vlzeletüledékből. Ehhez először vizsgálati anyagot /üledéket/ kell nyerni oentrifugálássál. Ekkor a vizelet más alkotórészei is feldúsulnak, amelyek - igy például sók és hámsejt tek - a leukociták mikroszkópiáé megszámlálását jelentősen megnehezíthetik. Kis üledéktaxtalom. az üledék inhomogenitásai, valamint esetleges eltérő mikroszkopiáé nagyítások vagy a mikroszkóp eltérő optikai kiképzése oda vezethet, hogy a szokás szerint a mikroszkóp látóterére megadott leukocitaszám többszáz százalékos eltérési hibákkal adható csak meg.
A legújabb időkban ezért nem hiányoztak az arr§ irányuló kísérletek, hogy olyan diagnosztikai eszközt készítsenek, amellyel a leukociták testfolyadékokban egyszerű és könnyen kezelhető módon, valamint lehetőleg gyorsan és tökéletesen kimutathatók. Ilyen leukocitateszt kimutatási alapjául enzimreakciók adódnak, mivel a leukociták széles enzimspektrummal rendel-f kfi piti fi k * * A 28 26 965.0, a 28 J6 644.1 és a 28 54 987.3 azámu Német Szövetségi Köztársaság-beli szabadalmi bejelentésekben például olyan diagnosztikai eszközöket Írnak le, amelyek egy olyan szlvóképes hordozóból állnak, amely alkalmas pufféranyaggal; szokásos segédanyagokkal és egy kromogénnel van imprágnálva. Kromogénként a 28 26 9θ5·Ο számú Német Szövetségi Köztársaságbeli szabadalmi bejelentés szerint az ÍAJ általános képletü szulfonftáléin—észtereket - ahol jelentése valamely, adott esetben halogénatommal vagy rövidszénláncú alkoxicsoporttal szubsztituált 1-5 szénatomos alifás karbonsav-, benzoesav- vagy naftoesavgyök, benzoil-oxi-kaxbonil- vagy rövidszénláncú alkoxi-karbonil-nitrogén-védőcsoporttal rendelkező aminosavvagy 2—4 aminosavból álló peptidgyök, emellett az aminosav- vagy peptidgyök adott esetben nitro- vagy 0-acetil-csoporttal szubsztituált,
jelentése halogénatom vagy rövidszénláncú alkilcsoport,
182.102 *· || éa jelentése azonos vagy eltérő, éspedig hidrogén- vágj1 halogénatom -, a 28 36644.1 számú Német. Szövetségi Köztársaság-beli szabadalmi bejelentés szerint aÍR]általános képletü azo-szlnezék-észtereket - ahol Γ
Α» jelentése 1 vagy 2 nitrogénatomot, kénatomot, oxigénatomot tartalmazó, 5- vagy 6-tagu heterociklusos gyűrű;
------------------ amely adott esetben halogénatommal vagy rövidszénláncu alkilcsoporttal egyszeresen szubsztituált és amely . egy, adott esetben rövidszénláncú alkil- vagy alkoxics'óporttal szubsztituált anellált benzolgyürüt tartalmaz-, hat, vagy rövidszénláncú al ki leskor ttal, rövidszénláncp. alkoxi-csoporttal, nitrocsoporttal, szufonsav-, illet-J ve alkállfem-szulfonsav-gyökkel és/vagy benzoll-amino-. -csoporttal egyszeresen, kétszeresen vagy háromszorosáé szubsztituált fenilcsoport,
Β» jelentése adott esetben s^ulfonsav-, illetve alkállfém-szalfonsav-gyökkel, rövidszénláncú alkoxicsoporttal és/vagy rövidszénláncú alkoxi-2-4 tagszámú /rövidazén-J láncú alkilénoxi/-csoporttal egyszeresen vagy kétszeresen szubsztituált benzol-, naftalln- vagy kinolinmaradék, jelentése benzollcsoport vagy valamely 2-5 szénatomos alifás acilcsöport, vagy valamely, terc-butoxl-karbonilvagy benziloxi-karbonil- vagy p-toluol-szulfonil-védő-? csoporttal védett, nem heterociklusos, élővilágban előforduló monoamino-monokarbonsav-gyök vagy valamely 2-6 tagszámú nem heterociklusos, élővilágban előforduló ’ monoamlno-monokarbonsavakból álló peptidgyök és n jelentése 1 vagy 2 és a 28 54 9θ7·3 számú Német, Szövetségi Köztársaság-beli szabadalmi bejelentés szerint a f'QJ általános képletü indoxilészte— reket ahol . ' ’ BÍ**»B2**» és R^’» jelentése azonos vagy eltérő, éspedig hidrogén- vagy halogénétom, 1-4 szénatomos alkil- vagy1 1-4 szénatomos alkoxicsoport,
X jelentése kénátom vagy adott esetben 1-4 szénatomos al- kllcsoporttal, fenil- vagy naftil csoporttal vagy fenilvagy naftil -/1-4 szénatomos álkil/-csoporttal vagy benzoilcsoporttal szubsztituált iminocsoport,
A” jelentése alifás, aromás, nem heterociklusos, természetes L-monoamlno-karbonsav, valamint ezek D- és DLalakjá vagy 2-5 aminosavat tartalmazó peptidosoport,
B” jelentése a peptidkémiában szokásos vagy abból levezethető nitrogén-védőcsoport alkalmaznak.
Ilyen diagnosztikai eszköz segítségével az észterolitikus, illetve proteolitikus enzimek, különösen a leukocitákban1 előforduló észterázok, illetve proteázok testfolyadékokban, különösen vizeletben való kimutatása egyszerűen és gyorsan egy ’
182.102 szlnátcsapással végezhető.
A jelen találmány feladata az volt, hogy olyan lehetőségeket keressen, amelyek ezt az enzlmetlkus vizsgálaton alapuló kimutatási reakciót hasznosítják.
Meglepődve tapasztaltuk, hogy ennek az enzlmatikusan végzett leukooita-vizsgálatnak a reakcióidői jelentősen megrövidülnek, ha az eddig szokásos segédanyagokon és kromogéneken kívül még egy vagy több aktivátort is alkalmazunk adalékként.
A jelen találmány tárgya ezért észterolitikus és/vagy proteolitikus enzimek kimutatására szolgáló olyan diagnosztikai eszköz, amely a szokásos segédanyagok mellett egy szokásos észteráz- és/vagy proteáz-szubsztrátot tartalmaz, és az eszközt ' az jellemzi, hogy adalékként még egy vagy több aktivátort is tartalmaz.
A jelen találmány tárgya továbbá az ilyen diagnosztikai eszköz előállítására szolgáló eljárás.
A találmány szerinti diagnosztikai eszköz előnyösen egy szlvóképes hordozó vagy egy fllmréteg, vagy egy porkeverék, vagy e^y llofillzátum, vagy egy oldat vagy egy reagenstabletta formájában készíthető el, amely egy szokásos észteráz- és/vagy pfoteaz-szubsztrátot, valamint szokásos adalékanyagokat és egy vagy több aktivátort tartalmaz.
A találmány szerint alkalmas aktivátorok például» a/ és /1/ általános képletü piridin-származékok, ahol R^jRg, Rj,R^ és R^ azonosak vagy különbözők, és jelentésük hidrogénatom vagy halogénatom, rövidszénláncú alkil- vagy rövidszénláncú alkoxicsoport, vagy olyan vinllcsoport, amely egy adott esetben egy vagy több rövidszénláncú alkoxi-, rövidszénláncú dlalkll-amino-csoporttal szubsztituált fenil- vagy naftilcsojsorttal vagy egy 5-7 tagú, egy nitrogén, oxigén vagy ken heteroatomot tartalmazó heterociklusos csoporttal van szubsztltuálva;
két szomszédos szubsztituens jelenthet egy adott esetben halogénatommal, hidroxil-, rövidszénláncú alkllvagy rövidszénláncú alkoxi-csoportokkal 1-3 szorosan szubsztituált indeno- vagy benzoanellált csoportot, amely még adott esetben egy rövidszénláncú alkllcsoporttal szubsztituált benzo- vagy piridoanellált csoporttal lehet szubsztltuálva;
jelenthet továbbá egy vinil-kinuklldil-karbinol-csoportot is;
b/ /11/ általános képletü imidazol-származékok, ahol
R,’ jelentése hidrogénatom, rövidszénláncú alkilcsoport 1 vagy adott esetben hidroxil- vagy rövidszénláncú alifás acllcsoporttal szubsztituált fenil- vagy naftilcsoport;
és Rl jelentése hidrogénatom, amino-/rövidszénláncu/-alkll-, N-/rövidszénláncu/-allfás-acil-amlno-/rövidszénláncu/-alkil- vagy rövidszénláncú alifás, adott esetben telítetlen karbonsav-csoport, vagy adott esetben nitrogénen rövidszénláncú alifás karbonsavval acilezett rövldszénláncu alifás (/-amlnosav-gyök;
182.102 c/ /111/ általános képletű alkoholok, ahol X jelentése hidrogénatom vagy hidroxilcsoport;
és A jelentése egyenes vagy elágazó lánca, telített vagy
1-5-ször telítetlen, 3-25 szénatomos alkil- vagy telített vagy 1-3-szor telítetlen, 3-20 szénatomos cikloalkilgyök, d/ /IV/ általános képletű fémkomplex, ahol D jelentése alkálifémion;
B jelentése nehézfémion;
m jelentése 2-től 5-ig terjedő egész szám;
n jelentése 4-től 8-ig terjedő egész szám;
és p jelentése 0 vagy 1 ;
ahol m értéke a nehézfémion vegyértékétől és az n számtól függ.
Az Rj., Bg, Rj, és Rj szubsztituensek jelentésénél említett halogénatomon fluor-, klór-, bróm-r és jódatom, előnyösen klóratom es brómatom értendő.
Az Rj-, Rg, Rj, R^ és Rj szubsztituensek jelentésénél említett rövidszénláncú alkil- és alkoxlcsoportok, valamint az R’, és R£ szubsztituensek jelentésénél említett rövidszénláncú alkilcsoportok egyenes vagy elágazó láncuak és 1-4, előnyösén 1-3 szénatomosak. Különösen előnyösek a metil-, etil-, n-propilés izopropil-, illetve a metoxl- és etoxiesoportok.
Az A jelentése egyenes vagy elágazó láncú, .telitett vagy 1-5-ször telítetlen alkil- vagy telített vagy 1-3-szor telítetlen clkloalkilgyök lehet, és alkilveg^ületek esetében 3-25, előnyösen 5-22 szénatomot, cikloalkil-vegyületek esetében 3-20, előnyösen 6-17 szénatomot tartalmaz.
Az R£ és R£ jelentésénél említett acilcsoportok 2-5, e*lőnyösen 2-3 szénatomos alifás karbonsavak gyökei, különösen e*lőnyös az acetilcsoport.
Az R,, R2, R,, R. és R,- szubsztituensek jelentésénél megadott heterociklusos Csoporton öt- vagy hattagú._1 heteroatomos csoportok értendők, amelyekben nitrogén-, ken- és oxigénatomok a heteroatomok. Különösen előnyös a piridil-, furlles tlenil-csoport.
Az RÓ szubsztituens jelentésénél említett rövidszénláncu, alifás, adott esetben telítetlen karbonsav-csoport és adott esetben nitrogénen rövidszénláncú alifás karbonsavval acilezett rövidszénláncú alifás -x-amlnosav-gyök 2-5, előnyösen 2-3 szénatomos karbonsavgyök, illetve ennek fx-amino-származéka. Különösen előnyös, az acetil-, propionil- és akriloil-/ illetve L-alanil- és N-acetil-L-alanil-csoport.
A /IV/ általános képletű aktlvátorokban D-vel jelölt alkálifémionokként előnyösen nátrium- és kálium-ionok, és B-vel jelölt nehézfémionokként előnyösen a vas, nikkel, króm, mangán, kobalt, molibdén és vanádium ionjai jönnek számításba.
A találmány szerint alkalmazható aktivátorok például a következők!
182.102
1. Piridin,
2. 2-Metll-piridin,
3· 3-®til-piridin,
4. 2-bróm-pirldln,
5. 3,5-diklór-piridin,
6. 4—metoxi-plridln,
7. 2,6-ά1ΜθΙϋ-4-θϋοχ1τ·ρ1ι1ά1η,
8. klnolin,
9« 2-metil-kinolln,
10. 8-metil-kinolin,
11. 7-izopropil-tinolln,
12. 2-klóx-kinolin,
13. 4-bróm-klnolin,
14. 3-metoxl-klnolin,
15· 6-etoxi-kinolln,
16. 2-metll-6-br6m-klnolln,
17. 2-metil~4-metoxi-kinolln,
18· 5,7-dlbróm-8-metoxi-kinoíin,
19· izokinolin,
20. l-metil~izoklnolin,
21. 3-piopil-izokinolln,
22. 7~met il-izokinolln,
23. l-kl6r-izokinolln,
24. 4-bróm-izokinolln,
25. 7-ra®toxi-izokinolin,
26. l-metoxi-3-klór-lzokinolln,
27· l-klór-4-metil-5-metoxi~izoklnolin,
28. benzo/b kinolin /=akrldin/,
29. benzo ó'o.7 kinolin /=fenantridin/,
30. 2-metll-fenantridin,
31. 2-etil-fenantxidin,
32. 2-propil-fenantxidln,
33· 2-metoxi-fenantridin,
34. benzo [íj kinolin,
35· 2-lzopíopll-benzo /fj kinolin,
36. 3-metil-benzo )f_7 klnolin,
37· 2,4-dimetil-benzo fff kinolin, benzo Tg/ klnolin,
39· 4-metillbenzo ígj kinolin,
40. 2,4-dimetll-benzo 7g7 kinolin,
41. benzo íhj kinolin
42. 1,7-fenántrolin,
43· 2-metll-l,7-fenantrolln,
44. 2,B-dimetll-l,7-fenantrolln,
45· 4,7-fanantrolin,
46; 3-met11-4,7-fenantrolin,
47· 3>8-dimetil-4,7-fönantrolin,
48; 1,10-fenantrolin,
49; 2,9-dimetil-l,10-fenantrolin,
50. 4-aza-flu.oren,
51. kinin,
52. kinidin,
53· kinkonln, '
54. kinkonidin,.
55. kuprein,
56. 2-/2-fenil-vinil/-piridln,
182.102
57·
58.
59·
60.
61.
62.
63.
64.
65·
66.
67. . . .
68. ' 4-/2-/2-tlenll/-vlnllj-piridin,
69. -
70.
71.
72.
73.
74.
75.
i
77.
78.
í
80.
81.
82.
83.
84.
85.
86.
87·
88.
89.
90.
91.
92.
93.
94.
95.
96.
9799· 100. 101. 102. 10?.
104.
105.
106. 107 ί 108.
109.
110. 111. 112.
2-/2-/4-met oxi-fenil/-vlnil7-pirldln,
2-£2-4-/N ,Ν-dinxet il-amino/-f enil] -vinll\-plridin,
2,4-bisζ/2-fenil-vinil/-pir idin, 2-f2-/l-naftil-vinil/7-píridin, 2-/2-/2-piridil/-vinll?-piridin, 2-/2-/3-piridil/-vinil7-piridin, 2-72-/4-piridll/-vinilJ-piridin,
2- 72-/2-furil/-vinil7-piridin,
3- 72-/3-plr ldil/-virillj -piridin,
4- i2~/3-piridil/-vinil7 -piridin,
4-(2-/4—pirldil/-vlnil7-piridin, imidazol,
1-et11-imidazol, 1,fenil-imidazol, l-/4-hidroxi-fenil/-imidazol,
1- /4-aoetll-fenil/-imidazol, Hisztamin, N-!/-acetil-h.i azt amin, : /4-imidazolll/-eoetaav,
2- /4-imldazolil/-proplonaav, 2-/4-Imidaz ¢11l/-akr ila av, L-hiaztidin, N-/-acet ll-L-hiaz idin, 1-hexanol, 1-heptanol, 1-oktanol, 1-nonanol, 1-dekanol, 1-dodekanol, 1-tetradekanol, 1-pentadekanol, 1-hexadekanol, l-heptadekanol, 1-oktadekanol, 1-nonadekanol, 1-elkozanol, 1-dokozanol,. ciklohexanol, 1-hidroxl-l-ciklohexén, oikloheptanol,
98. · oiklooktanol, ciklononanol, ciklodekanol, olklododekanol, cikloheptadekanol, l-hldroxi-9-cikloheptadeoén, oltronellol, geraniol, ner ol, linalool, farnezol, nerölidől, 1-hidr oxi-ciaz-9-oktadeoén, fitol, l,5~pentándlol,
182.102
113.
114.
115.
116. 11?· 118.
119.
120.
121.
122.
123.
124. 125-
126.
127.
1.6- hexándiol,
1.7- heptándlol,
1.8- oktándiol,
1.9- nonándiol.
1.10- dekándiol, 1,12-dodekándlol, \ trikállum-höxaoiaűo-ferrát /111/, tetrakálium-hexaoiano-ferrát /11/, dikálium-tetraolano-nikkelát /11/, trinátrium-oktaolano-molibdát /V/, dlnátrium-pentaolano-nitrozil-ferrát /11/, tr1kál1um-pent ac1an o-n 11 r ο z i1-mangan át /1/, trikálium-pentaolano-nitrozil-kromát /1/, ' trikálium-pentaolano-nltrozil-kobaltát /1/, pentakállum-pentaclano-nitrozil-vanadát /1/
Az összes aktivátor ismert vegyület vagy lsmsrt vegyülő-* tek analógiájára állítható elő.
A találmány szerint aktlvátoxként alkalmazott /1/,/11/ és /IV/ általános képletü vegyületeket 10-4_ χ mól/liter, előnyösen 10“5- 10-1 mól/llter koncentrációban használjuk az Impregnálóoldatban. míg a /111/ általános képletü aktlvátorokból 0,5 - 10 /suly/terf./ %-nyl, előnyösen 1-5 /suly/téxf./%-nyí mennyiségeket adunk az impxegnálóoldathoz.
A találmány Szerinti diagnosztikai eszközök az aktívátok rok mellett további szokásos alkotórészeket, például szokásod’ észteráz- vagy proteáz-szubsztrátokat, puffotokat, nedvesítőszereket, adott esetben komplexképzőket és oxidáloszereket tartalmaznak. Ezeket olymódon és olyan koncentrációban alkalmaz- . zuk, amint a 28 26 965.0 és 28 36 644.1 számú német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi bejelentésben leírják.
Az észteráz-vagy proteáz-szubsztrátként alkalmazott krdmogéneket rendszerint 10“4 - 1 mól/liter, előnyösen 10~3 - íc/jl mól/liter koncentrációban adjuk az impregnálóoldathoz, kenőmasszához vagy a vizsgálandó folyadékhoz.
Az észterolltlkus és/vagy proteolitikus enzimek, különös sen a leukoolta-proteázok kimutatására szolgáló diagnosztikai eszköz további alkotórésze egy megfelelő pufférrendszer. Ilyeá célra például foszfát-, borát-, barblturát-, trlsz/hidroxi-me4 tíl/-amino-metán/=TBIS/, 2-aminc-2-metil-1.3-propándiol-/=Ame-* diói/ vagy aminosav-puffexok jönnek számításba, ahol a pH-ért^ket és kapaoitást úgy kell megválasztani, hogy a fiérőoldatbán illetve a tesztpapíron 6-10, előnyösen 7-9 közötti pH-érték álljon be.
Az észterolltlkus és/vagy proteolitikus enzimek, különö·* sen a leukoolta-észterázok vagy -proteázok kimutatására szolgáló diagnosztikai eszköz egy további alkotórésze valamilyen neívesitőszer. Előnyösen nem-ionögén, de amfoter, kation- vagy a·?' nlon-aktlv nedvesitőszeröket is alkalmaznak 0,05 — 2 %, előnyösen 0,1 - 1 % koncentrációban.
A találmány szerinti diagnosztikai eszköz egy további alkotórésze lehet valamilyen alkalmad komplexképző. Előnyösen fémsókat, például a vas, réz, króm, kobalt, nikkel, mangán éa a óink sóit adják az lmpregfialóoldathoz 104 - icr1 mól/liter. előnyösen 10* - ΙΟ42 mól/llter koncentrációban.
A találmány szerinti diagnosztikai eszköz előállításánál
182.102 továbbá oxidálószereket Is alkalmazhatunk, például kállum-hexa··· oiano-ferrát/III/-t, kállum-bxomátot, kállum-kromátot, fenazln-metoszulfátot vagy tetxazólium-sókat. Ezeket 10-4 _ 1 mól/liter, előnyösen 10? - 10-1 mól/liter koncentrációban adjuk az impregnálóoldathoz, kenőmasszához vagy vizsgálandó oldathoz.
A találmány szerinti diagnosztikai eszköz készítéséhez például szivóképes hordozókat, előnyösen szűrőpapírt, cellulózt vagy műszál-filcet impregnálnak tesztcsíkok készítéséhez szükséges szokásos reagensek /szubsztrát. puffét, aktlvátorok, adott esetben nedveaitoazerek, komplex képzők, oxidálószerek, stb./ könnyen illó oldószerekkel, például vizzel, metanollal, etanollal vagy acetonnal készült oldataival. Ez célszerűen két lépésben történik.
Először egy olyan vizes oldattal impregnálunk, amely puffért és adott esetben vlzoldható aktlvátorokat tartalmaz.
Utána olyan oldattal impregnálunk, amely az észteráz- vagy proteáz-azubaztrátokat, adott esetben vízben oldhatatlan aktívatorokat valamint egyéb vízben nem oldható adalékanyagokat tartalmazza. Különleges esetekben fordított lmpregnálásl sorrend is alkalmazható.
A kész tesztpapirok igy is használhatók, vagy önmagában' ismert módon fogókra ragaszthatók vagy előnyösen a 2118455-az. német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírás szerint műanyaglap és finom háló közé hegeszthetők.
A fllmrétegként felkent tesztcsíkok készítése céljából az összes reagenst valamilyen filmképző anyag, például polivinilészter vagy poliamid oldatához vagy diszperziójához adjuk, és homogénre elkeverjük. Az elegyet vékony rétegben felkenjük egy műanyag hordozóra, és megszáritjuk. A találmány szerinti filmszerű rétegként felkent tesztcsíkokat a szárítás után felvágjuk, és vagy igy használjuk, vagy önmagában ismert módon fogókra ragasztjuk, vagy például a 21 18 455 számú német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírásban közöltek szerint müanyagfólia és finomlyukú háló közé hegesztjük.
Az észterolitikus és/vagy proteolitikus enzimet kimutatására szolgáló találmány szerinti diagnosztikai eszköz porkeverékek vagy reagenstabletták formájában is elkészíthető, amenynyiben a testit előbbiekben felsorolt alkotórészeit szokásos galenusi adalékanyagokkal keverjük, és granuláljuk. Ilyenféle adalékanyagok például szénhidrátok, mono-, oligo- vagy poliszaoharldok, vagy cukoralkoholok, mannlt, szorbit, vagy xilit, vagy más oldható inért vegyületek, például polietilén-glikolok va^y pollvinilpirrolidon. A porkeverékek vagy reagens-tabletták végső súlya általában körülbelül 50 - 200 mg, előnyösen 50-80 mg.
Körülbelül 5 - 20 mg, előnyösen körülbelül 10 mg összsúlyú llofilizátumok előállítása céljából fagyasztva szárítunk egy olyan oldatot, amely a teszthez szükséges összes reagens mellett szokásos vázképzőket, például polivinilpirrolidont, és esetleges további töltőanyagokat, például mannitot, szorbitot vagy xilitet tartalmaz.
A találmány szerinti diagnosztikai eszköz oldat formájában előnyösen a teszthez szükséges összes reagens oldatából all. Oldószerként viz vagy viz valamilyen vlzoldható szerves oldószerrel, például metanollal, etanollal. acetonnal vagy dimetil-formamiddal készült elegye használható. Eltarthatóság szempontjából előnyös, ha a teszthez szükséges reagenseket két vagy
182.102 több oldatba osztjuk szét, amelyeket csak a tulajdonképpeni vizsgálat előtt elegyítünk.
Az igy előállított diagnosztikai eszköz lehetővé teszi, hogy a vizsgálandó testfolyadékokban a leukocitákat gyorsan es egyszerűen szinképződéssel illetve színváltozással mutassuk ki, A 28 26 965.0, 28 J6 644.1 és 28 54 987,5 számú német szövetség gl köztársaságbeli szabadalmi leírásokban közölt diagnosztikai eszközökkel összehasonlítva a találmány Szerinti aktivátorok alkalmazásakor lényegesen rövidebb reakcióidők észlelhetők.
A találmányt a következő példákkal szemléltetjük részletesebben.
1. példa.
Szűrőpapírt /például Schlelcher und Sohüll 2? SL·/ egymásután impregnálunk a következő oldatokkal, és utána 60°C-on illetve szobahőmérsékleten megszárltjuk.
1. oldat:
trisz/hidroxi-metil/-amino-metán. HCl puffer 0,2 mól/liter koncentrációjú, 9,0 pH-ju vizes oldata.
2. oldat:
10~5 mól/llter koncentrációjú szubsztrátoldatok acetonban.
A találmány szerinti aktlvátorokat - oldhatóságtól függően - az 1. oldathoz vagy a 2. oldathoz adjuk hozzá, úgy hogy az I, II és IV általános képletü aktlvátoroknál 10“2 mól/llter,a III általános képletü aktlvátoroknál 2 /suly/térf./% legyen a végső koncentráció az impregnáló oldatban.
Az 1. táblázatban a következő észteráz - vagy proteáz-szubsztrátokkal végzett vizsgálatok eredményeit összegezzük: A : Diacetil-3’3-dlbróm-5’5',-diklór-fenolszulfonftalein, B : Diacetil-4j5,6,7,3*,5’,3,5-oktabróm-fenolazulfonftaleln, C : Di/N-benziloxiUkarbonil-L-alanil/-3J5}3’,'5','-'tetrabróm-fenolszulfonftaleln,
D : Di/N-benziloxl-karbonil-L-fenilalanil/-3’5’35-tetrabx6m-fenolszulfonftaleln.
Az 1. táblázatban azokat a reakcióidőket tüntetjük fel, amelyek a tesztcsík 5000 leukocita//ul izotóniás konyhasóoldat koncentrációjú standardoldatban való bemérésétől az első jelentős szinreakclólg telnek el. Vonatkozási értékként az aktivátoradalékok nélküli receptekkel kapott reakciók szolgálnak. A vizsgált négy vegyületnél a szinátcsapás színtelenből mélykékbe történik.
1. táblázat.
Aktivátorok Reakcióidők az alábbi szuDSztratokra __________________________A B_________C________D összehasonlítás aktivátor nélkül 210 sec. 90 sec. 600 sec. 550 sec.
1. Piridin 110 seo. 70 sec. 410 sec. 450 sec;
2. 3-Btll-piridin 95 sec. 65 sec. 440 sec. 470 dec.
182.102
1. táblázat /folytatás/
Aktivátorok Reakcióidők; az alábbi szubsztrátokra
A B- . 0 D
3· 4-Metoxi-pirldin 110 sec·. 65 sec. 470 seo. 450 seo.
4. Kinolin 75 seo. 50 seo. 320 seo. 340 seo.
5« 2-Metil-klnolin 45 sec. 55 seo. 300 seo. 350 seo.
6, 4-Bióm-klnolin 60 sec. 60 sec. 370 sec; 330 seo.
7. 3-Metoxi-kinolln 50 sec; 50 sec. 310 sec, 380 seo;
8. Izokinolin 85 s®o. 55 seo. 350 seo. 380 sec.
9. Benzo fbj kinolin 90 sec. 65 sec. 280 seo. 330 seo.
... . = Akridin 1 Γ
10. Benzo ioJ kinolin 75 sec.- 60 seo. 260 seo. 360 sec.
= Fenantridin *
11. 2-Metil-fenantridin 100 sec; 65 sec. 250 seo. 370 sec.
12. 2-Etll-fenantridín 80 sec. 70 sec. 300 seo. 360 seo.
13; 2-Propll-fenantridin 80 sec. 60 seo. 280 sec. 330 seo.
14; 2-Metoxi-fenantridin 85 seo. 60 sec. 260 seo. 350 seo.
15· Benzo ííj kinolin 90 sec. 40 seo. 310 seo. 310 seo.
16; Bénzo ;hj kinolin 90 seo. 55 sec. 290 seo. 340 seó.
17. 1,7-Feriantrolin 75 seo· 65 sec; 340 sec. 410 seo.
18. 4,7-Fenantrolin 80 sec; 70 seo; 270 seo. 380 seó.
19. 4-Aza-fluoren 120 seo. 50 sec. 240 seo. 29O seo.
.20. Kinin 110 sec. 70 sec. 350 seo. 330 seo.
21. Klnidin 70 seo. 65 seo. 375 sec. 280 seo.
22. Klnkonln 60 sec. 50 sec. 340 sec; 300 seo.
23. Kinkonidln 65 seo; 55 seo. 390 sec. 320 seo.
24. Kupiéin 70 sec. 60 seo. 400 seo. 305 seo.
25. 2-/2-Fenil-vinll/-
-piiidin 115 sec. 70 sec. 370 seo. 270 seo.
26. 2-'2-/3-Pilldil/-
-viniy -piridin 145 sec. 65 sec. 430 sec. 250 seo.
27. 4—£2-/4-Plridil/-
-vlniŰ -piridin 140 sec. 55 sec. 350 seo. 280 seo.
‘28. 2-Í2-/2-Furil/-
• -vinilj-piridin I50 sec. 70 sec. 410 sec. 25O seó.
29« Imidazol 90 sec. 55 sec. 380 sec. 210 seó;
;30. Hisztamin 110 sec. 60 seo. , 440 sec. ;290. sec.
ijl. /4-Imidazolil/-eoet-
sav 150 sec. 75 seo. 450 seo. 350 sea.(
32. 2-/4—Imidazol11/- 170 70 490 380
-propionsav seo. sec. seo. sec·
33· L-Hisztidin1' 130 sec. 80 sec;. 465 seo. 320 sec;
34. 1-Oktanol 150 seo. - 75 sec; 500 sec; 460 seó.
35· 1-Dekanol 130 sec. 70 seo. 480 seo. 420 seó.
56. 1-Tetradekanol 105 sec. 60 sec; 420 sec. 400 seó.
37· Ciklooktanol 125 sec. 80 sec. 530 see. 480 sec;
38. Giklpdodekanol 90 sec. 55 sec. 49O sec. 470 seó·
39· Citronellol 100 sec. 40 seo. 430 sec. 440 seó.
40. Párnázol 130 sec. 50 seo. 440 seo. 410 sec.
.41· Fitol ..... 135 sec. 55 sec.. 430 sec. 450 seo·
'42. Tr i káli un-hexaciám Ó-“ 480
-ferrát/II/. 160 sec.· 70 seo.. 550 sec. sec.
182.102
1. táblázat /folytatás/
Aktivátorok Reakcióidők az alábbi szubsztrátokra ___________________A____________B - C_____________D '43. Dlkálium-tetraciano-nikkelát-/II/. 160 sec. 80 sec. 550 sec. 450 sec.
44. Dinátrlum-pentaclano-nitrozil-ferrát/11/ I50 sec. 65 sec. 470 sec. 460 sec.
Hasonló kísérleti eredményeket kapunk, ha az A, B, C és D szubsztrátok helyett a 28 26 965.0 számú nemet szövetségi köztársaságból! szabadalmi bejelentésben szereplő más szulfonftalein-észtereket és/vagy az izotóniás nátrlum-klorid oldattal készített 5000 leukocita/ /ul koncentrációjú oldat helyett leukoBlta-tartalmu vizeletet'használunk.
2. példa
Szűrőpapírt /például Schlelcher und Schüll 23 SL/ egymásután a következő oldatokkal impregnálunk, és utána 60 °0-on illetve szobahőmérsékleten megszárítjuk.
1. oldat:
0,2 mólos, 7,0 pH-ju vizes trisz/hidroxi-metil/-áminometán-hidroklorid puffer /az E, F és G szubsztrátok részére/ ' illetve 0,2 mólos, 8,0 pH-ju vizes trlsz/hidroxl-metll/-amino-metán-hldroklorid puffer /a H szubsztráthoz/.
2. oldat:
10“^ mól/liter koncentrációjú szubsztrátoldatok acetonban.
Az aktivátorok hozzáadását és a kísérleteket az 1. példában leírtak szerint végezzük.
A 2. táblázatban az alábbi proteáz-szubsztrátokkal kapott kísérleti eredményeket összesítjük: ........ . . .. ’
Ε : Tlazol-2-azo-4’-íl’-/I:r-benziloxi-karbonil-L-alaniloxi/-5 *-met oxi-naf tal'lnj .
/A tesztpapirok átcsapása rózsaszínből vörösbe/.
F t 6-Metoxi-benzotiazol-2-azo-2’-ll’-/N-benziloxi-karbonil-L~alaniloxi/-naftalinJ . · ' /A tesztpapirok szinátcsapása rózsaszínből vörösbe./ G : 2,4-dlnitro-benzol-azo-4’/l’7N-benziloxl-karbonil-L-alaniloxi/-benzolj .
/A tesztpapirok szinátcsapása sárgából vöröseslilába/. H : 2,5-dimetoxi-benzol-azo-4’-/'l,-/N-benziloxi-karbonll-L-alaniloxl/-naftalinj.
/A tesztpapirok szinátcsapása világos narancssárgából vörösbe./
182.102
Ártáblázatban a teaztpapir izotónlás nátrium-klorid oldattal készült 5000 leukoclta/yul koncentrációjú standard-oldatba való bemártásától az első jelentős színváltozásig eltelt reakcióidőket tüntetjük fel. összehasonlítási értékként az akti-: vátor hozzáadása nélkül hasonló körülmények között kapott reakfcióidőket tüntetjük fel.
2. táblázat.
Aktivátorok Reakcióidők az alábbi szubsztrátokra
E F G H
összehasonlítás aktlvátor nélkül 60 sec. 180 sec. 160 sec. -<] 0 aeo.
1. Piridin 50 sec. 150 sec. 130 sec. 55 sec.
2. 2-Metil-piridln 45 sec. 140 sec. 135 sec. 50 sec.
3· 2-Bróm-piridin 50 sec. 150 sec. 125 sec. 45 sec.
4. 3,5-diklór-plridln 45 sec. 160 sec. 130 sec. 50 sec.
5. Kinolin 50 sec. 110 sec. 95 sec; 45 sec.;
6. 8-Metil-kinolin, 45 sec. 130 sec; 110 sec; 40 seo.:
7· 2-Klór-kinolln 40 sec. 130 sec. 110 sec. 35 sec/
8. 6-Etoxi-klnolln 35 sec. 150 sec. 120 sec. 40 sec.·
9· 2-Metil-4-metoxl-
-kinolin 40 sec. 120 sec. 105 sec. 40 sec.:
10. Izokinolin 40 sec. 130 sec. 110 sec; 40 sec.’
11. l-Metll-izokinolin 45 sec. .100 sec; 120 sec. 35 seo /
12; 4-Bróm-izokinolin 45 sec. 140 sec. 115 sec. 40 sec/
IJ. 7-Metoxi-izokinolln 14. Benzo íb] kinolin 50 sec. 130 sec. 130 sec) 45 sec.;
= ákridin 30 sec. 150 sec. 60 sec. 45 sea.
15· Benzo fo] kinolin
= fenántridin 35 sec. 120 sec. 80 sec. 40 Sec.
16. 2-Metil-fenantridin 40 sec. 140 sec. 90 sec. 40 sec;
17. Benzo ÍÍJ kinolin 18. 2-Izopropll-benzo- 50 sec. 130 sec. 70 sec. 30 sec.
ff? kinolin , 45 sec. 130 sec. 95 sec. 35 sec.
19. 3-Metil-benzoIfi ki-
nolin 40 sec. 125 sec. 80 sec. 40 s ec.
20. 2,4-Dímetil-benzo-
ff/' kinolin 40 sec. 110 sec. 90 sec; 40 sec.
21. Benzo /gj kinolin 22. 4-Metií-benzo fg?-kinolln 40 sec. 90 sec. 70 sec. 35 sec.
40 sec. 100 sec. 80 sec. 40 sec)
2J. Benzo fhj kinolin 35 sec. 70 sec. 50 sec. 30 sec,
24. 1,7-Fenantrolin 45 sec. 120 sec. 120 sec; 40 sec.
25. 4,7-Penantrolin 40 sec. 105 sec. 105 sec; 45 sec.
26. 1,10-Fenantrolin 45 sec. 130 sec; 110 sec; 45 sec;
27; Kinin 40 sec; 120 sec; 60 sec; 35 sec;
28. Kinkonln 45 sec. 100 sec. 90 sec; 30 sec;
29« Kuprein 30. 2-/2~Penil-vlnll/- 40 sec. 140 sec. 105 sec. 30 sec.
-piridin 35 sec. 125 sec. 120 sec. 50 sec.
Jl. 2,4-bisz/2-Fenil-vi- 60
nil/-piridin 30 sec. 150 sec. 140 sec. sec·
182.102
2. táblázat /folytatás/
Aktívától ok Reakcióidők az alábbi szubsztrátokra
B F G H
32. 2-(2-/2-Fuxil/-viniy 1 -piridin 3Ö· sec. 120 sec. 90 seo. 55 séd.
33. Imldazol 45 sec; 140 sec. 120 sec. 40 séd.
34. l-Etll-imldazol 40 sec. 130 sec. 130 sec. 45 séd·
35« l-Fenil-lmidazol 35 sec. 120 seo. 120 sec.' 40 séd.
36. l-/4-Hidroxi-fenll/- 1
-lmldazol 45 sec; 140 sec. 135 seo. 50 séd·
37· Hisztamin 50 sec. I30 sec. 140 seo. 55 séd·
38. 2-/4~Imidazolil/— i ·
-propionsav 50 sec. 150 seo. 140 seo. 50 se$.
39· 2-/4~Imldazolil/-ak- -í .
rilsav 50 sec. 160 sec. 135 seo. 55 seá.
40. L-Hisztidln 45 sec. I50 sec. 125 sec. 5° seó.
41. H^-Aoetll-L-hiazti- . .. .15,
din 45 sec. 140 sec. 130 seo. 40 sec.
42. 1-Heptanol 30 sec. 130 sec. 100 sec. 40 sec;
43· 1-Oktanol 30 sec. 120 sec. 95 seo. 35 séd.
44. 1-Dekanol 20 sec. 90 sec. 80 sec; 30 séd.
45· l-Dodekanol 20 sec. 80 sec. 70 sec; 30 sec.
46; l-Hexadekanol 25 sec; 105 3ΘΟ. 80 sec; 40 séd.
4-7. 1-Eikozanol 30 sec. 120 sec. 110 sec. 45 séd.
48. Clklohexanol 35 sec. 110 sec. 105 sec. 40 sec.
49· Clklodekanol 25 sec. 95 seo. 85 seo. 30 seó.
50. Clklododekanol 25 sec. 120 sec. 90· sec; 25 Séd.
51. Cikloheptadekanol 30 sec. 130 seo. 120 sec. 30 sec.
52. l-Hidroxi-9-ciklohep-
tadecén 30 sec. 110 sec. 100 sec. 35 sec;
53· Citronellol 25 sec. 100 sec. 70 sec. 25 seb.
54. Linaiool 20 sec. 105 sec. 60 seo. 30 seb.
55· Farnezol 30 seo. 110 sec. 75 sec. 25 seb.
56. l-Hidroxl-cis z-9- ϊ
-oktadecén 25 sec. 90 sec; 85 sec. 40 seb.
57; Fitol 30 seo. 80 sec. 65 seo. -30 seb.
58; 1,5-Fentándiol 35 seo; 130 seo; 120 sec; 45 seó.
59i 1,7-Heptándiol 40 sec. I50 sec; 125 sec. 40 seó.
60; 1,10-Dekándiol 30 sec. 135 sec· 140 sec. 50 sec;
61. 1,12-Dodekándiol 40 sec. 160 sec. 130 sec. 50 seó.
62. Trlkálium-hexaoiano-
-ferxát /111/ 45 sec. 160 seo. 135 sec. 55 seb.
63. Tetrakállum-hexacia- f
no-ferrát /11/ 40 sec. 160 sec. 140 sec. 50 sec.
64, Dinátrlüm-pentaoiano-
-nitrozll-ferrát/II/ 40 sec. 140 sec. 130 sec. 40 sec.
65· Trikálium-penüaclano-
-nltrozil-kromát /1/ 50 sec. 145 sec. 130 sec. 50 sec.
66, Trlkállum-pentaciano-
-nitrozil-kobaltát /1/50 sec. 160 sec. 145 sec. 45 sec.
182.102
Hasonló eredményeket kapunk, ha az E, F, G és H szubsztrátok helyett a 28 36 644.1 számú német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi bejelentésben leirt más azoszinezék-észtere·* két és/vagy az izotóniás nátrium-klorid oldattal készített 5000 leukooita/ pl koncentrációjú standardoldat helyett leukooita- j tartalmú vizeletet használunk. v
3« példa.
Szűrőpapírt /például Schleicher und Schüll 23 SL·/ egymásután a következő oldatokkal impregnálunk, és utána 60 °C-on illetve szobahőmérsékleten megszáritjuk. i
1. oldat:
0,2 mólos vizes nátrium-tetraborát/sósav pufferjpH = 8,0,
2. oldat:
103 mólos szubsztrátoldat aoetonban.
Az aktivátorok hozzáadását és a vizsgálatok kivitelezését az 1. példában leírtakhoz hasonlóan végezzük. ;
A 3· táblázatban az alábbi proteaz-szubsztrátokkal kapott kísérleti eredményeket összegezzük: ’
I : 3-ÍN-/Difenil-karbamoil/-Ij-alaniloxiT-lndol;
J : 3-fN-/5’5’-Dlmetll-3*-oxo-l’-ciklohéxenil/-l-alanlloxj7-indol;
K : 3-!.N-/Benzlloxi~karbonil/-L-alaniloxi} -indol.
A táblázatban a tesztcsíknak izotóniás nátrium-klorid oldattal készült 5000 leukocita//ul koncentrációjú standard-oldatba való bemártásától az első jelentős színváltozásig eltelt reakcióidőket tüntetjük fel. összehasonlító értékként az aktivátor hozzáadása nélkül kapott reakcióidők szerepelnek; ' i
Mindhárom szubsztrattal készített tesztpaplrok leukocitákat tartalmazó oldatokba való bemártás után színtelenből sötétkékbe való szinátcsapást mutatnak..
3. táblázat.
Aktivátorok Beakcióidők az alábbi szubsztrátokra
I J K
összehasonlító érték aktivátor nélkül 300 sec. 180 sec. 60 sec.
1. Piridin 220 sec. 140 sec. 45 sec.
2. 2-Bróm-piMdln 205 sec. 130 sec. 40 sec.
3« 2,6-Dimetil-4-etoxi-
-piridin 160 sec. 110 sec. 40 sec.
4. Kinolin 185 sec. 90 sec. 35 sec.
5· 2-Metil-kinolin 190 sec. 105 sec. 40 sec.
6. 7-Izopropil-kinolin 165 sec. 80 sec. 35 sec.
7· 3-Metoxi-kinolin 150 sec. 75 sec. 30 sec.
8. 2-Metil-6-bróm-kinolin 170 sec. 80 sec. 40 sec.
9. 5,7-dlbróm-8-metoxl-
-kinolin 195 sec; 90 sec. 40 sec.
10. Izokinolin 150 sec. 80 sec. 40 sec.
182.102
3· táblázat, /folytatás/
Aktlvátorok Reakcióidők az alábbi azubaztrátokra
I J K
11. 3-Propil-izokinolin I70 sec. 75 sec. 35 sec.
12. 7-Metil-izokinolin 145 sec. 105 sec. 30 sec.
13. 1-Klór-lzoklnolln 180 sec. 90 sec. 35 sec.
14. l-Metoxi-3-klór-izo-
kinolin 155 sec. 95 sec. 40 seo.
15. l-Klór-4-metil-5-metoxi-
-izokinolin 190 sec. 80 sec. 35 sec.
16. Benzo ÍW kinolln
= akridln I70 sec. 90 sec. 40 sec.
17· Benzo fd kinolln
= fenantridin 130 sec. 110 sec. 35 sec.
18. 2-Etil-fenantridin 160 sec. 100 seo. 30 sec.
19· 2-Metoxi-fenantridin 145 sec. 120 sec. 35 sec.
20. Benzo f.' kinolln 130 sec. 105 sec. 35 aec.~
21. Benzo’jgj kinolln 140 sec. 130 sec. 45 sec.
22· 2,4-Dimetil-benzo-
ígj kinolln 135 sec. 110 sec. 40 sec.
23» Benzó ítí1 kinolln 110 seo. 70 sec. 40 sec.
24. 1,7-Fenantrolin 165 sec. 130 sec. 45 sec.
25. 2-Metll-l,7-fenantrolin 130 sec. 110 sec. 45 sec.
26. 2,8-Dimetll-l,7-fenan-
trolin 145 sec. 105 sec. 40 aec.
27· 4,7-Fenantrolln 120 sec. 120 sec. 35 sec.
28. 3-Metil-4,7-fenantrolin 145 sec. 95 sec. ’ 40 aec.
29. 3,8-Dimetil~4,7-fenan-
trolin 160 sec. 80 sec. 35 sec.
30. 1,10-Fenantrolin 170 sec. 90 sec. 35 sec.
31. 2,9-Dimetil-l,10-fenan-
trolin 145 sec. 120 sec. 45 aec.
32. 4-Aza-fluoren 90 sec. 60 sec. 35 aec.
33· Kinin 150 sec. 90 sec. 30 aec.
34. Kinkönidin 125 sec. 85 sec. 30 aec.
35· Kuprein 160 sec. 95 sec. 35 sec.
36. 2-f2-/4-Metoxi-fenil/-
-vínll7-piridin 95 sec. 90 sec. 45 aec.
37· 2- /2-/4~Dimetil-amino-
-fenil/-viniX/ -piridin 110 sec. 110 sec. 45 aec.
38. 2,4-bisz/2-Penil-vinil/-
-piridin 120 sec. 95 sec. 40 aec.
39· 2-r2-/l-Naftil/-vinilJ-
-píridin 105 sec. 90 sec. 40 aec.
40. 2-(2-/2-P1Iidil/-vlniB -
-piridin 80 sec. 80 sec. 30 aec.
41. 2-í2-/4-Plrldil/-vinil7-
-píridin 60 sec. 50 sec. 25 aec.
42. 2-f2-/3-Pixidil/-vlniV-
-píridin 75 sec. 70 sec. 30 aec.
43. 4-Í2-/3-Piridil/-vinil7-
-píridin 95 sec. 90 sec. 25 sec.
44. 4-r2-/2-Tienil/-viniV-
-pírldin 80 sec. 75 sec. 35 sec.
182.102
3· táblázat /folytatás/
Aktlvátorok Reakcióidők az alábbi azubsztrátokra
I J K
45« Imidazol 175 sec. 120 sec. 35 sec.
46. 1-Fenil-lmldazol 180 sec. 140 sec. 40 sec.
47· Hisztamin 230 sec. 150 sec. 45 sec.
48. 1H/-Acet11-hisztamin 205 sec. 130 sec. 40 sec.
49. 4-Imidazolil-ecetsav 220 sec. 150 sec. 50 sec.
50. L-Hisztldin 195 sec. 120 sec. 45 sec.
51. N-rÁ-Acetll-L-hlsztidin 165 sec. 110 sec. 40 seo.
52. l-Hexanol 95 sec. 95 990. 30 sec.
53. l-0ktanol 90 sec. 100 seo. 30 sec.
54. 1-Nonanol 90 sec. 80 sec; 30 sec.
55· 1-Dekanol 80 sec. 60 sec. 25 sec.
56. 1-Dodekanol 75 8θο· 90 sec. 25 sec.
57· l-Pentadekanol 100 sec. 80 sec. 30 sec.
58; 1-Heptadekanol 80 sec. 105 sec. 35 sec.
59· l-Oktadekanol 90 sec. 95 sec. 40 sec.
60. 1-Nonadekanol 85 sec. 120 sec. 40 sec;
61; 1-Dokozanol 85 sec; 110 sec; 40 sec.
62. 1-Hidxoxi-l-ciklohexén 95 sec; 130 sec. 35 seo.
63. Ciklononanol 80 sec. 120 sec. 35 sec.
64. Clklódékanol 80 sec. 115 sec. 40 sec;
65· Clkloheptadekanol 90 sec. 130 sec. 40 sec.
66. Geraniol 75 sec. 85 sec. 30 sec.
67. Nerol 90 sec. 70 sec. 35 sec.
68. Linalool 80 sec. 80 sec. •30 sec.
69· Nerolidol 105 sec. 90 sec. 25 sec.
70. l-Hidroxl-ciaz-9-
-oktadecén 110 sec. 115 sec. 25 sec;
71; 1,6-Hexándiol 130 sec; 130 sec. 45 sec.
72. 1,8-Oktándiol 115 sec. 125 sec. 40 sec.
73· 1,9-Nonándiol 140 sec. 130 sec. 45 seo.
74. 1,10-Dekándlol I30 sec. 115 sec. 50 seo.
75· Tetrakállum-hexaciano-
'-ferrát /11/ 230 sec. 160 sec. 50 sec.
76. Trinátrium-oktaclano-
-molibdát /V/ 205 sec. 150 sec. 50 sec.
77· Trlkállum-pentaclano-
-nitrozil-ferrát /11/ 180 Sec. 150 sec. 45 sec.
78. Trlkállum-pentaclano-
-nitrozil-manganát /1/ 210 sec. 145 sec. 40 sec.
79· Pentakállum-pentaciano-
nitrozil-vanadát /1/ 220 sec. 155 seo· 45 sec.
Hasonló eredményeket kapunk a 28 54 987.3 számú német szövetségi köztársaságban szabadalmi bejelentésben leírt más indoxil-észterek és/vagy az izotóniás nátrium-klorid oldattal készült 5000 leukocita/yul koncentrációjú'standaxdoldat helyett leukocita-tartalmu vizelet alkalmazásával.
182.102
4. példa
Szűrőpapírt /például Schleicher und Schüll 2? Sl·/ egymásután Impregnálunk a következő oldatokkal, és utána 60 °C-on illetve szobahőmérsékleten megszáritjuk.
1. oldat:
0,2 mólos, 9,0 pH-ju vizes trisz/hidroxi-metil/-amino~metán/sósav puffer.
2. oldat:
10“5 mólos diacetil-3*5’35-tetrabróm-fenil-szulfonftalein oldat acetonban. ’ ’
A találmány szerinti aktivátorokat egyenként vagy keverékként adjuk oldhatóságuktól függően az 1. és/vagy 2. oldathoz, úgy hogy az,egyes I, II és IV általános képletü aktlvátorok végső koncentrációja 10~2 mól/liter legyen az impregnálóoldatban,' a III általános képletü vegyületek esetében pedig 2 /suly/tf/% legyen a végső koncentráció az impregnáló-oldatban.
A 4. táblázatban azokat a reakcióidőket tüntetjük fel, amelyeket a tesztcsíknak az izotóniás nátrium-klorid oldattal készült 5000 leukocita//ul koncentrációjú standard-oldatba való bemártásátóí az első jelentős szinreakcióig mérünk. Összehasonlító értékként az aktivátor hozzáadása nélkül készült elegyben mért reakcióidő szolgál.
A tesztpapirok leukocita-tartalmu'oldatba való bemártáskor színtelenről sötétkékre szlneződnek.
4. táblázat.
Aktivátorok Reakcióidők összehasonlítási alap aktivátorok nélkül 160 sec.
1. 2. 1. 2-Metil-kinolin 1-Tetrádekanol és 2. aktivátor 110 sec. 90 sec. 60 sec.
3·. 1,7-Eenantrolin 80 sec.
4. Teürakálium-hexaciano-
-ferrát /11/ 140 sec.
3. és 4. aktivátor 70 seo.
5. Kinkonin 9θ sec.
6. 2-/2-Ι’θη11-ν1η11/-ρ1Πά1η 105 sec.
5· és 6. aktivátor 65 sec.
Hasonló eredményekét kapunk izotóniás nátrium-klorid oldattal készitett 5000 leukocita//ul koncentrációjú-standardoldat helyett leukocita-tartalmu vizeletet használva.
5· példa.
A 4. példában leirt módon teaztpapirokát készítünk a következő oldatokkal:
182.102
1. oldat:
0,2 mólos trisz/hidroxi-metil/-amino-metán/sósav pufíer; pH = 8,0.
2. oldat:
10-3 mól/liter koncentrációjú 2-metoxi-4-nitro-benzol-azo-4 ’-íl’-/N ~benziloxi-karbonil-li-alaniloxi/-naftalinj-oldat acetonbaá.
A tesztpapirok leukocita-taxtalmu oldatba való bemartágkor világos narancssárgáról vörösre szineződnek.
Az 5· táblázatban foglaljuk össze a kísérleti eredményeket. Azokat a reakcióidőket tüntetjük fel, amelyeket a tesztpapirok izotónlás nátrium-klorid oldattal készített 5000 leukocita//ul koncentrációjú standardoldatba való bemártásától az első jeientős szinreakció észleléséig mérünk. Összehasonlító értékként az akt ivator hozzáadása nélkül mért reakcióidőket tüntetjük fel.
5. táblázat
Aktivátorok Reakcióidők
összehasonlítási alap aktivátorok nélkül 80 sec.
1. Benzo lb] kinolin = akridín 60 sec.
2. 1-Hi dr oxi-cisz-9-oktadecén 40 sec.
1. és 2. aktivátor 30 sec.
3. Benzo Íh7 kinolin 50 sec.
4. Kinin ' 55 sec.
3- és 4. aktivátor 35 sec.
5· 1,7-Eenantrolin 45 sec.
6. Farnezol 30 sec.
5· és 6. aktivátor 25 sec.
Hasonló eredményeket kapunk az izotónlás nátrium-klorid oldattal készült 5000 leukocita/ yul koncentrációjú'standard oldat helyett leukocita-tartalmu vizeletet használva.
6. példa.
A 4. példában leirt módon teaztpapirokat készítünk a következő oldatokkal:
1. oldat:
0,2 mólos 8,0 pH-ju vizes nátrium-tetraborát/sósav puffer.
2. oldat:
10“3 mólos acetonos 3-fN-/2’-nitro-benzol-szulfonil/-L-alaniloxij-indol oldat.
A tesztpapirok leukocita-tartalmu oldatokba való bemártáskor sárgáról zöldre szineződnek.
182.102
A kísérleti eredményeket a 6. táblázatban összesítjük. Azokat a reakcióidőket tüntetjük fel, amelyeket a tesztcsíkoknak lzotónlás nátrium-klórid oldattal készült 5000 leukocita//ul koncentrációjú standard-oldatokba való bemártásától az eláő jelentős szinreakció megjelenéséig mérünk. Összehasonlító értékként az aktivátorok nélkül készült oldattal mért reakcióidő szolgál.
6. táblázat ktivátorok Reakcióidők
ö akt jehasonlitó adat iivátorok nélkül 100 sec.
1. Kinolin 80 sec.
2. Ciklododekanol 70 sec.
1. és 2. aktivátor 55 sec.
3. 2- f2-/2-Furil/-v inilj -
-piridin 75 sec.
4. Fitol 50 sec.
3- és 4. aktivátor 40 sec.
5- 4,7-Fenantrolin 85 sec.
6. Tetrakálium-hexaciano- -ferrát /11/ 90 sec.
5. és 6. aktív tor 70 sec.
Hasonló eredményeket kapunk, ha lzotónlás nátrium-klorid. oldattal készült 5000 leukocita/yúl koncentr ióju standard-oldat helyett leukocita-tartalmu vizeletet has. álunk.
7· példa.
A 4. példában leirt módon tesztpapirokát készítünk a következő oldatokkal:
1. oldat:
0,2 mólos, 8,0 pH-ju nátr lum-te tr ab órát/·, ósav puffer vízben.
2. oldat:
10“^ mólos 3-/Ν-όβηζο11-ΠΓι-α1Ηη11οχ1/-1ηόο1 oldat acetonban.
A tesztpaplrok leukocita-tartalmu oldatokba való bemártáskor színtelenről kékre szineződnek.
A kísérleti eredményeket a 7. táblázatban foglalj k össze. Azokat a reakcióidőket tüntetjük fel, amelyeket a tesztcsík izotónlás nátrium-klorid oldattal készült 5000 leukocita//ul koncentrációjú standard-oldatba való bemártásától az első jelentős szinreakció megjelenéséig mérünk. Összehasonlító értékként az aktivátor hozzáadása nélkül mért reakcióidő szolgál.
132.102
7- táblázat.
Aktlvátorok Reakcióidők
összehasonlító adat
aktlvátorok nélkül 90 sec.
1. 2-/2-Fenil-vinll/- -piridin 70 seo.
2. l-Hexadekánol 55 sec;
1. és 2. aktívátok ' 40 sec.
3. 4-/2-/4-Pir idil/-vinií] -piridin 40 seo.
4. Linalool 50 ΒΘΟ.
5. és 4. aktlvátor 30 seo.
5- Kinkonin 75 sec.
6· Dinátrium-pentaoiano-nltrozll-ferrát /11/ 60 seo.
5. és 6. aktlvátor 40 seo.
Hasonló eredményeket kapunk, ha lzotóniás nátrium-klorid oldattal készült 5000 leukooita/ úl koncentrációjú standard-oldat helyett leukocita-tartalmu vizeletét használunk.
7·a/ példa.
A 4. példában leírt módon tesztpapirokat készítünk a kö-. vetkező oldatokkal:
1. oldat:
0,2 mólos, vizes, 8,0 pH-ju nátrium-tetraboxát/sósav puffer.
2. oldat:
103 mólos 3-/N-p-toluolszulfonll-L-alaniloxl/-indpl ol-( dat acetonban.
A tesztpapirok leukocita-tartalmu oldatokba való bemártáskor színtelenről kékre szlneződnek. ·
A kísérleti eredményeket a 7.a/ táblázatban összesítjük. Azokat a reakcióidőket tüntetjük fel, amelyeket a tesztcsíkok lzotóniás nátrium-klorid oldattal készült 5000 leukoclta//ul koncentrációjú standard-oldatba való bemártásától az elsőjelentős azinreakció jelentkezéséig mérünk, összehasonlító értéiként az aktivátor nélkül mért reakcióidőt tüntetjük fel.
7·a/ táblázat
Aktlvátorok Reakcióidők
Összehasonlító adat aktívátólok nélkül 24sec.
1. Kinin 22sec.
2. Dinátrium-pentaciano-
-nitrozil-ferrát /11/ 15seo.
182.102
7.a/ táblázat /folytatás/
Aktivátorok Reakcióidők
3· 1-Dekanol 18 sec.
1., 2. és 3. aktívától \ 6 sec.
Hasonló eredményeket kapunk, ha izotóniás nátrium-klorid oldattal készült 5000 leukocita//ul koncentrációjú standard-oldat helyett leukoclta-tartalmu vizeletet használunk.
8. példa
Szűrőpapírt /például Schlelcher und Schüll 23 SL/ egymásután a következő oldatokkal impregnálunk, és 60 °C-on illetve szobahőmérsékleten szárítjuk.
1. oldat:
0,2 % laur11-plridinlum-klorId 0,2 mólos, vizes, 7,0 pHju vizes triaz/hidroxi-metil/-amino-metán/sóaav pufferban.
2. oldat:
10-3 mólos tlazol-2-azo-4’-fl’-/N-benziloxl-karbonil-L-alanlloxi/-naftalinj- oldat acetonban.
Az aktivátorok hozzáadása és a kísérletek elvégzése az 1· példában leírtakhoz hasonlóan történik.
A tesztpapirok leukoclta-tartalmu oldatokba való bemártáskor rózsaszínről ibolyaszlnüre szineződnek.
A 8. táblázatban összesítjük a kísérleti eredményeket. Azokat a reakcióidőket tüntetjük fel, amelyeket a'tesztcsíkok 1zotonlás nátrium-klorid oldattal készült 500 leukoclta//ul koncentrációjú standard-oldatba való bemártásától az első jelentős szinreakció megjelenéséig mérünk. Összehasonlító értékként az aktívától hozzáadása nélkül végzett mérés reakcióideje szolgál,
8. táblázatτ
Aktivátorok Reakcióidők
összehasonlító adat akt Ívátor nélkül 70 sec.
1. Piridin 45 sec.
2. Kinolin. 40 sec.
3. Benzo ib] kinolin = akridln 35 sec.
4. 1,10-Fenantrolin 40 sec.
5. 4-Aza-fluoren 30 sec.
6. Kinin 35 sec.
7. 4-r2-/4-Plrldil/-vinil·]- ........ ...............----- -
-piridin 30 sec.
8. Imldazol 50 sec.
9· Dodekanol 30 sec.
10. Fitol 25 sec.
11. Dinátrium-pentaciano- -n1trozll-ferrát /11/ 60 sec.
182.102
Hasonló eredményeket kapunk az 1-?. példákban említett más szubsztrátokkal és aktivátorokkal és/vagy más szokásos nedvesltöszerekkel.
9· példa.
Saürőpaplrt /például Sohleiober und Sohüll 23 SL/ egymásután a következő oldatokkal impregnálunk, és utána 60 °C-on illetve szobahőmérsékleten szárítjuk.
1. oldat:
0,2 mólos, 7,0 pH-ju vizes tr lsz/hl<iroxi-metll/-amino-metán/sósav puffer.
2. oldat:
10-^ mól/liter tiazol-2-azo-l’-L2*-/N-benziloxi-karbonil-L-alanlloxi/-naftalin] és 10“ 3 mól/llter cink/I/-acetát-dihidrát aoetonban.
Az aktivátorok hozzáadása és a kísérletek elvégzése az 1. példában leírtak szerint történik.
A tesztpapirok leukocita-tartalmu oldatokba való bemártáskor rózsaszínről kékesibolyára szineződnek.
A kísérleti eredményeket a 9· táblázatban soroljuk fel. Azokat a reakcióidőket tüntetjük fel, amelyeket a tesztcsíkok izotónlás nátrium-klorid oldattal készített 5000 leukoclta//ul koncentrációjú standardoldatba való· betartásától az első jelentős szinreakcló megjelenéséig mérünk. Összehasonlítási értékül az aktivátor hozzáadása nélkül mért reakcióidő szolgál.
9. táblázat.
Aktivátorok Reakcióidők
összehasonlító adat aktivátorok nélkül 65 sec.
1. Piridin 50 sec.
2. Kinolln 45 sec.
3. Benzo fb' kinolln
= akrldln 40 sec.
4. 1,10-Fenantrolln 30 sec.
5. 4-Aza-fluoren 35 sec.
6. Kinin 30 sec.
7. 4-í2-/4-Pir idil/-vinil/-
-piridin 35
8. Imidazol 45 sec.
9. Dodekanol 25 sec.
10. Fitol 30 sec.
11. Dinátrlum-pentaciano-
nitrozll-ferrát /11/ 50 sec.
Hasonló eredményeket kapunk a 28 36 644.1 számú német szövetségi köztársaságból! szabadalmi bejelentésben leirt más azoszinezék-észterekkel, az 1-7· példákban említett más aktivátorokkal és/vagy más szokásos komplexképzőkkel.
182.102
10. példa
Szűrőpapírt /például Schleicher und Sohüll 2? SL/ egymásután a következő oldatokkal Impregnálunk, és utána 60 °C-on illetve szobahőmérsékleten megszar ltjuk.
1. oldat:
10-2 mól/llter kálium-bronát 0,2 mólos 8,0 pH-ju nátrium-tetraborát/sósav pufferben. '
2. oldat: .............
10“3 mól/llter 3-/N-formjl-L-alaniloxi/-indol acetonban.
Az aktivátorok hozzáadása és a kísérletek kivitelezése az
1. példában leírtakhoz hasonlóan történik.
A tesztpapirok leukoclta-taxtalmu oldatokba való bemártáekor színtelenről kékre szineződnek.
A kísérleti eredményeket a 10. táblázatban soroljuk fel. Azokat a reakcióidőket tüntetjük fel, amelyeket a tesztpapirok izotóniás nátrium-klorid oldattal készült 5000 leukooita//ul > koncentrációjú standard-oldatba való bemártásától az első jelentős szinreakció megjelenéséig mérünk, összehasonlítási értekként az aktivátor hozzáadása nélkül mért reakcióidő szolgál.
10. táblázat.
Aktivátorok Reakcióidők
összehasonlító adat aktivátorok nélkül 120 .sec.
1. Piridin 85 sec.
2. Kinolin.. 70 sec.
3. Benzo ib] kinolin
= akridín 100 sec.
4. 1,10-Penantrolin 65 seo.
5· 4-Aza-fluoren 50 seo.
6. Kinin 75 aec.
7. 4-l2-/4-Plridil/-vinil)- - - - ...........
-piridin 70 sec.
8. Imidazol 85 sec.
9. Dodekanol 35 sec.
10. Kitol 40 sec.
11. Dinátrium-pentaclano-
-nitrozil-ferrát /11/ 90 sec.
Hasonló eredményeket kapunk a 28 54 987.? számú német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi bejelentésben felsorolt más indoxil-észterekkel, az 1-7. példákban leirt más aktivátorokkal és más szokásos oxidálószerekkel is.
182.102
Szabadalmi igénypontok

Claims (4)

  1. Szabadalmi igénypontok
    1. .'Aj általános képletü - ahol
    RJl jelentése valamely, adott esetben halogénét ómmal vagy rövldszénláncu alkoxicsoporttal szubsztituált 1-5 szénatomos alifás karbonsav-, benzoesav- vagy naftoesaVgyök, benzoil-oxi-karbonil- vagy rövidszénláncú alkoxl-karbonll-nltrogén-védöosoporttal rendelkező amlnosav- vagy 2-4 aminosavbol álló peptidgyök, emellett az aminosav- vagy peptidgyök adott esetben nitro- vagy O-acetil-csoporttal szubsztituált, jelentése halogénatom vagy rövidszénláncú alkilcsoport, Rj és R]£ jelentése azonos vagy eltérő, éspedig hidrogén- vagy _ halogénatom, vagy (jQ általános képletü, - ahol
    A* jelentése 1 vagy 2 nitrogénatomot, kénatomot, oxigénatomot tartalmazó, 5- 6-tagu heterociklusos gyűrű, a- 4 mely adott esetben halogénatommal vagy rövidszénláncú alkilosoporttal egyszeresen szubsztituált és amely egy, adott esetben rövidszénláncú alkil- vagy alkoxicsoporttal szubsztituált anellált benzolgyürüt tartalmazhat, vagy rövidszénláncú alkilcsoporttal, rövidszénláncú alkoxicsoporttal, nitrocsoporttal, szulfonsav-, illetve alkálifém-szulfonsav-gyökkel és/vagy benzoll-amino-csoporttal egyszeresen, kétszeresen vagy háromszorosan szubsztituált ‘ fenilcsoport, ·
    B’ jelentése adott esetben szulfonsav-, illetve alkálifémszulfonsav-gyökkel, rövidszénláncú alkoxicsoporttal és/ vagy rövidszénláncú alkoxi-2-4—tagszámu-/rövldszénléncu,' alkllénoxi/-csoporttal egyszeresen vagy kétszeresen szubsztituált benzol-, naftalln- vagy konollnmaradék,
    R jelentése benzoilcsoport vagy valamely 2-5 szénatomos filifás acilcsoport, vagy valamely, tero-butoxl-karbonll-, vagy benziloxi-karbonil- vagy p-toluol-szulfonll-védőcsöporttal védett, nem heterociklusos, élővilágban előforduló monoamino-monokarbonsav-gyök vagy valamely 2-6 tag·* számú, nem heterociklusos, élővilágban előforduló monoamino-monokarbonsavakból allé peptidgyök és n jelentése 1 vagy 2, vagy ICJ általános kepletü - ahol vagy 1-4 szénatomos alkoxicsoport,
    X jelentése kénatom vagy adott esetben 1-4 szénatomos alkilcsoporttal, fenii- vagy naftll-csoporttal vagy fenilvagy naftil-/l-4 szénatomos alkil/-csoporttal vagy benzoilcsoporttal szubsztituált iminocsoport,
    A jelentése alifás, aromás, nem heterociklusos, természetes L-monoamino-karbonsav, valamint ezek D- es DL-alakja
    182.102 vagy 2-5 aminosavat tartalmazó peptidesöpört,
    B jelentése a peptldkémiában szokásos vagy abból levezethető nitrogén-védőcsoportészteráz- és/vagy proteáz szubsztrátot, valamint segédanyagokat' tartalmazó diagnosztikai eszköz észterolitlkus és/vagy proteolitikus enzimek, különösen leukoolta-észterázok éa/vagy -proteázök teatfolyadékokban való kimutatására, azzal jellemezve, hogy adalékként egy vagy több /1/ általános képletű - ahol
    Rlt R2, Rj, R4 éa Rj azonoaak vagy különbözők, éa jelentésük hidrogénatom vagy halogénatom, rövidazénláncu alkil- vagy rövidszénláncú alkoxi-caoport vagy olyan vlnilcsoport, amely egy adott esetben egy vagy több rövidazénláncu alkoxi-, rövidazénláncu dialkil-amino-csoportot hordozó fénil- vagy naftilcsoporttal vagy egy 5-7 tagú, egy nitrogén, oxigén vagy kén heteroatomot tartalmazó heterociklusos csoporttal van szubsztituálva;
    két szomszédos azubsztituens jelenthet egy, adott esetben egy-három halogénatommal, hldroxilcsoporttal, rövidszénláncú alkil- vagy rövidszénláncú alkoxlcsoporttal szubsztituált indeno- vagy benzoanellált csoportot, amely még ádott esetben egy rövidszénláncú alkil-csoporttal szubsztituált benzo- vagy piridoanellált csoporttal lehet azubsztituálva;
    és R, jelenthet továbbá egy vinil-kinuklidil-karbinol csoportot 2 is - és/vagy /11/ általános képletű - ahol
    Rí jelentése hidrogénatom, rövidszénláncú alkil-csoport vagy adott esetben hidrofil- vagy rövidszénláncú- alifás acilcsoporttal szubsztituált fenil- vagy naftilosoport;
    Rl jelentése hidrogénatom, amino-/rövidszénláncu/-alkll-, JTd -/rövldszénláncu/-allfas acil-amino-/rövidszénlánou/-al’kil- vagy rövidszénláncú alifás, adott esetben telítetlen karbonsavgyök, vagy adott esetben nitrogénen rövidszénláncu alifás karbonsavval acilezett rövidszénláncú alifás w-aminosav-gyök - és/vagy /111/ általános képletű - ahol
    X jelentése hidrogénatom vagy hidroxilcsoport; -------és A jelentése egyenes vagy elágazó láncú, telitett vagy 1-5-. szőr telítetlen, 3—25 szénatomos alkil- vagy telitett vagy 1-3-szor telítetlen, 3-20 szénatomos cikloalkilgyök - és/ vagy /IV/ általános képletű - ahol
    0 jelentése alkálifémion;
    B jelentése nehézfémion;
    m jelentése 2-től 5-ig terjedő egész szám;
    n jelentése 4-től 8-ig terjedő egész szám; és
    P jelentése 0 vagy 1;
    ahol m értéke a nehézfémion vegyértékétől éa n értékétől függ aktivátort tartalmaz és ahol a szubsztrát-aktlvátor arány az
    I., II. és IV. általános képletű aktivátorok esetében 1 mól szubsztrát : 10 ml aktivátor és 1000 mól szubsztrát : 1 mól aktlvátor arányok között van és ahol a szubsztrát-aktlvátor arány a III. éiltalánoa képletű aktivátorok esetében 10~4_i gmol
    182.102 pzubsztrát : 5-100 g aktívától tartományban van.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti diagnosztikai eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, .hogy további segédanyagokként pufferökat, komplexképzőket, nedvesitőszereket, oxidálószereket, fll^·- ‘ képzőket, galenual adalékanyagokat és/vagy vázképzőket tartalmaz,
    I í
  3. 3. Eljárás az 1. vagy 2. igénypont szerinti diagnosztikai eszköz előállítására, azzal jellemezve, hogy, egy szivoképes ,hordozót valamilyen 1. igénypont szerlntilAJ, |Bj vagy. ÍC] általános képletű észteráz- és/vagy proteáz-szubsztráttal,a szokásos segédanyagokkal és valamilyen 1. igénypont szerinti /1/, /11/,^ /111/ vagy /IV/ általános képletű aktivátorral vagy aktivátorokkal impregnálunk. j
  4. 4. A 3· igénypont szerinti eljárás foganatositási módjaj azzal jellemezve, hogy a’szivóképes hordozó impregnálását két müvelétben végezzük, egyik lépésben olyan vizes oldatban impregnálva, amely puffért és adott esetben vizoldható aktivátorokat tartalmaz, másik lépésben olyan oldattal impregnálva, amely az’ észteráz- vagy proteáz-szubsztrátokat,'adott esetben vizben oldhatatlan aktivátorokat; valamint egyéb, vizben nem oldható adalékanyagokat tartalmaz.
    1 db rajz
    F.k.: Hlmar Zoltán Onzágo, Találmányi Hivatal
    70-OTH-84510
    Nemzetközi osztályjelzet: G 01 N 33/50, C 12 Q 1/38, C 12 Q 1/44
HU80326A 1979-02-14 1980-02-13 Diagnostic device for indicating leucocytes in liquids of body and method for making this HU182102B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19792905531 DE2905531A1 (de) 1979-02-14 1979-02-14 Diagnostisches mittel zum nachweis von leukozyten in koerperfluessigkeiten

Publications (1)

Publication Number Publication Date
HU182102B true HU182102B (en) 1983-12-28

Family

ID=6062854

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU80326A HU182102B (en) 1979-02-14 1980-02-13 Diagnostic device for indicating leucocytes in liquids of body and method for making this

Country Status (22)

Country Link
US (1) US4299917A (hu)
EP (1) EP0014929B1 (hu)
JP (1) JPS581920B2 (hu)
AR (1) AR223025A1 (hu)
AT (1) ATE543T1 (hu)
AU (1) AU519912B2 (hu)
BR (1) BR8000886A (hu)
CA (1) CA1148073A (hu)
CS (1) CS216523B2 (hu)
DD (1) DD149121A5 (hu)
DE (2) DE2905531A1 (hu)
DK (1) DK161340C (hu)
ES (1) ES488402A0 (hu)
FI (1) FI69869C (hu)
HK (1) HK15285A (hu)
HU (1) HU182102B (hu)
PL (1) PL125796B1 (hu)
PT (1) PT70813A (hu)
RU (1) RU1784097C (hu)
SG (1) SG79484G (hu)
YU (2) YU45527B (hu)
ZA (1) ZA80765B (hu)

Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3005845A1 (de) * 1980-02-16 1981-09-03 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Aminosaeure- und peptidester von leuko-indoanilinen, verfahren zu deren herstellung sowie diese verbindungen enthaltende mittel zum nachweis proteolytischer enzyme
DE3017721A1 (de) * 1980-05-09 1981-11-26 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme und dafuer geeignete substrate
DE3118381A1 (de) * 1981-05-09 1982-11-25 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Mehrschichtiges testmittel zum nachweis einer komponente einer fluessigen probe
DE3211254A1 (de) * 1982-03-26 1983-09-29 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren zum nachweis des vorliegens einer allergie und zum spezifischen nachweis des fuer die allergie verantwortlichen allergens
US4499185A (en) * 1982-05-17 1985-02-12 Miles Laboratories, Inc. Test for esterase activity in a liquid sample
DE3309544A1 (de) * 1983-03-17 1984-09-20 Macherey-Nagel & Co Chemikalienhandel, 5160 Düren Teststreifen zum nachweis von leukozyten im harn
DE3413120A1 (de) * 1984-04-06 1985-10-24 Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind. Analysenverfahren und mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme
DE3413118A1 (de) * 1984-04-06 1985-10-24 Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind. Analysenverfahren und mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme
US4657855A (en) * 1984-04-06 1987-04-14 Miles Laboratories, Inc. Composition and test device for determining the presence of leukocytes, esterase and protease in a test sample
DE3413119A1 (de) * 1984-04-06 1985-10-24 Miles Laboratories, Inc., Elkhart, Ind. Analysenverfahren und mittel zum nachweis esterolytischer und/oder proteolytischer enzyme
US4637979A (en) * 1984-04-06 1987-01-20 Miles Laboratories, Inc. Composition and test device for determining the presence of leukocytes containing a zwitterion coupling agent
US4645842A (en) * 1984-04-06 1987-02-24 Miles Laboratories, Inc. Pyrrole compounds for detecting the presence of hydrolytic analytes
DD247808C2 (de) * 1984-04-09 1989-01-11 Dresden Arzneimittel Teststreifen zur aufnahme von blutzuckertagesprofilen und verfahren zu seiner herstellung
JPS61502280A (ja) * 1984-05-31 1986-10-09 ク−ルタ−・エレクトロニクス・インコ−ポレ−テッド 白血球のクラスおよびサブクラスの同定、計数並びに試験方法およびそれに用いる試薬系
US4672029A (en) * 1984-12-06 1987-06-09 Eastman Kodak Company Color-forming couplers and their use in the analytical determination of hydrogen peroxide or other analytes
US5051358A (en) * 1987-05-07 1991-09-24 The Procter & Gamble Company Diagnostic methods for detecting periodontal diseases
GB8713951D0 (en) * 1987-06-15 1987-07-22 Dewar M H Enhanced chemiluminescent reaction
DE3732871A1 (de) * 1987-09-30 1989-04-20 Behringwerke Ag Chromogene substrate
US5192688A (en) * 1988-08-15 1993-03-09 Switzer Iii Robert C Histological analysis method
FR2657895A1 (fr) * 1990-02-05 1991-08-09 Inst Textile De France Materiau antiseptique a greffons complexes par des ions metalliques et procede de preparation.
US6046019A (en) * 1991-07-09 2000-04-04 Goumeniouk; Alexander P. Diagnostic kits and methods for making granulocyte cell counts
DE19500768C2 (de) * 1994-01-17 2003-11-20 Aventis Res & Tech Gmbh & Co Phenanthren-Derivate und ihre Verwendung in flüssigkristallinen Mischungen
US5464739A (en) * 1994-08-22 1995-11-07 Bayer Corporation Composition method for determining the presence of leukocyte cells, esterase or protease in a test sample
CA2161574A1 (en) 1994-11-15 1996-05-16 James Noffsinger Methodology for colorimetrically determining the concentration of white blood cells in a biological fluid
DE19651886A1 (de) * 1996-12-13 1998-06-18 Merck Patent Gmbh Mittel und Verfahren zur Bestimmung von hydrolytischen Enzymen
US6348324B1 (en) 1999-01-21 2002-02-19 Hypoguard America Limited Composition and device for detecting leukocytes in urine
US6528652B1 (en) * 1999-01-21 2003-03-04 Chronimed Composition and device for detecting leukocytes in urine
US7781396B2 (en) * 2002-01-31 2010-08-24 Tel Aviv University Future Technology Development L.P. Peptides directed for diagnosis and treatment of amyloid-associated disease
US20040052928A1 (en) * 2002-09-06 2004-03-18 Ehud Gazit Peptides and methods using same for diagnosing and treating amyloid-associated diseases
US6709868B2 (en) * 2002-05-20 2004-03-23 Portascience Inc. Method and apparatus for measuring white blood cell count
US20050260126A1 (en) * 2002-08-30 2005-11-24 Yukitsuka Kudo Diagnostic probes and remedies for diseases with accumulation of prion protein, and stains for prion protein
US7491699B2 (en) 2002-12-09 2009-02-17 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Peptide nanostructures and methods of generating and using the same
US6963007B2 (en) * 2002-12-19 2005-11-08 3M Innovative Properties Company Diacetylenic materials for sensing applications
US20040126897A1 (en) 2002-12-19 2004-07-01 3M Innovative Properties Company Colorimetric sensors constructed of diacetylene materials
EP2058275A1 (en) 2003-01-07 2009-05-13 Ramot at Tel-Aviv University Ltd. Peptide nanostructures encapsulating a foreign material and method of manufacturing same
EP1638517A4 (en) * 2003-06-30 2010-01-06 Univ Tel Aviv Future Tech Dev PEPTIDES, ANTIBODIES AGAINST DISEASES ASSOCIATED WITH AMYLOID AND METHODS OF USE FOR THE DIAGNOSIS AND TREATMENT OF THESE DISEASES
CA2540407A1 (en) * 2003-09-25 2005-03-31 Tel Aviv University Future Technology Development L.P. Compositions and methods using same for treating amyloid-associated diseases
US7625707B2 (en) * 2003-10-02 2009-12-01 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Antibacterial agents and methods of identifying and utilizing same
WO2006006172A2 (en) * 2004-07-15 2006-01-19 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Use of anti-amyloid agents for treating and typing pathogen infections
US8568637B2 (en) * 2004-08-02 2013-10-29 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Method of forming a fiber made of peptide nanostructures
EP1793816B1 (en) * 2004-08-19 2012-01-04 Tel Aviv University Future Technology Development L.P. Compositions for treating amyloid associated diseases
US7786086B2 (en) * 2004-09-08 2010-08-31 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Peptide nanostructures containing end-capping modified peptides and methods of generating and using the same
WO2006073782A2 (en) * 2004-12-17 2006-07-13 3M Innovative Properties Company Colorimetric sensors constructed of diacetylene materials
GB2426334A (en) * 2005-05-20 2006-11-22 Orion Diagnostica Oy Application of a reagent to a matrix material
US8003399B2 (en) * 2005-08-31 2011-08-23 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Nitrite detection technique
US7504235B2 (en) * 2005-08-31 2009-03-17 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Enzyme detection technique
US10004828B2 (en) * 2005-10-11 2018-06-26 Romat at Tel-Aviv University Ltd. Self-assembled Fmoc-ff hydrogels
US7879212B2 (en) * 2005-11-03 2011-02-01 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Peptide nanostructure-coated electrodes
EP2220500A4 (en) * 2007-11-20 2010-12-15 3M Innovative Properties Co METHOD FOR ANALYZING A BACTERIUM SAMPLE USING A POLYMER DETECTOR CONTAINING DIACETYLENE
US9103796B2 (en) 2007-12-14 2015-08-11 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Multi-layered devices for analyte detection
US11104933B1 (en) * 2016-03-22 2021-08-31 Cleu Diagnostics, Llc Compositions and methods for determining the presence of active leukocyte cells using an electrochemical assay
KR20190008199A (ko) * 2016-03-30 2019-01-23 시노보 게엠베하 상처에서 미생물 감염의 검출 방법
JP6902416B2 (ja) * 2016-07-05 2021-07-14 ライオン株式会社 睡眠評価用マーカー及びその用途

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3087794A (en) * 1960-05-23 1963-04-30 Miles Lab Chemical test for differentiating leucocytes from erythrocytes
NL126365C (hu) * 1963-06-24
US3378463A (en) * 1965-06-22 1968-04-16 Army Usa Method of measuring enzyme activity
GB1128371A (en) * 1965-10-04 1968-09-25 Miles Lab Diagnostic composition
CH506792A (de) * 1968-09-20 1971-04-30 Merck Ag E Neues Mittel und Verfahren zur Lipasebestimmung
US3715325A (en) * 1970-10-02 1973-02-06 Miles Lab Insoluble polymeric diazonium salt chromogen
CA1007555A (en) * 1971-08-16 1977-03-29 Robert E. Smith Carbobenzoxydiglycyl-1-arginyl-4-methoxy-2-naphthylamide and process for determining enzyme concentrations
DE2235152C2 (de) * 1972-07-18 1975-07-10 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Diagnostisches Mittel zum Nachweis von Blut und anderen peroxidatisch wirksamen Substanzen in Körperflüssigkeiten
AR204182A1 (es) * 1973-12-20 1975-11-28 Boehringer Mannheim Gmbh Tira de ensayo para la comprobacion de substancias de actividad peroxidica en los liquidos del cuerpo
JPS5342438B2 (hu) * 1974-05-20 1978-11-11
US3874852A (en) * 1974-07-05 1975-04-01 Coulter Diagnostics Inc Reagent and method for determining leukocytes and hemoglobin in the blood
CS176664B1 (hu) * 1975-02-14 1977-06-30
US4045290A (en) * 1975-02-28 1977-08-30 Princeton Biomedix Incorporated Diagnostic method and compounds for use therewith
JPS6010261B2 (ja) * 1975-07-31 1985-03-15 和光純薬工業株式会社 潜血検出用組成物
JPS5263794A (en) * 1975-11-21 1977-05-26 Shionogi Seiyaku Kk Test piece for latent blood
US4206280A (en) * 1975-12-24 1980-06-03 Hoffmann-La Roche Inc. Determination of acid phosphatase
GB1530238A (en) * 1976-05-04 1978-10-25 Du Pont Method of determining lipase activity using a triglyceride reagent and method for preparing that reagent
JPS584560B2 (ja) * 1976-06-01 1983-01-26 三共株式会社 鉄錯塩を用いた酵素活性測定法
JPS5389492A (en) * 1977-01-13 1978-08-07 Uni Arabama Method and reagent for determination of carxylic esterhydrolase
JPS6058746B2 (ja) * 1977-09-22 1985-12-21 中外製薬株式会社 高級脂肪酸エステル
US4184923A (en) * 1977-11-03 1980-01-22 Eastman Kodak Company Reduction of gentisic acid interference in analytical elements
US4212939A (en) * 1977-11-22 1980-07-15 The University Of Alabama Substrate solution for carboxylic ester hydrolase determination
DE2826965A1 (de) * 1978-06-20 1980-01-17 Boehringer Mannheim Gmbh Diagnostisches mittel zum nachweis von leukozyten in koerperfluessigkeiten und dafuer geeignete chromogene
US4251223A (en) * 1979-12-17 1981-02-17 Miles Laboratories, Inc. Sensitizers for peroxidative activity tests
US4251222A (en) * 1979-12-17 1981-02-17 Miles Laboratories, Inc. Sensitizers for peroxidative activity tests

Also Published As

Publication number Publication date
US4299917A (en) 1981-11-10
YU45527B (en) 1992-05-28
DE3060134D1 (en) 1982-02-25
RU1784097C (ru) 1992-12-23
PT70813A (de) 1980-03-01
DD149121A5 (de) 1981-06-24
ES8102726A1 (es) 1981-02-16
SG79484G (en) 1985-08-16
PL125796B1 (en) 1983-06-30
BR8000886A (pt) 1980-10-21
FI69869C (fi) 1986-05-26
DK161340B (da) 1991-06-24
AU519912B2 (en) 1982-01-07
EP0014929A1 (de) 1980-09-03
AU5535980A (en) 1981-01-15
PL221884A1 (hu) 1980-11-03
DK63480A (da) 1980-08-15
EP0014929B1 (de) 1982-01-06
ATE543T1 (de) 1982-01-15
ES488402A0 (es) 1981-02-16
YU38680A (en) 1989-02-28
JPS581920B2 (ja) 1983-01-13
HK15285A (en) 1985-03-15
FI69869B (fi) 1985-12-31
FI800444A (fi) 1980-08-15
ZA80765B (en) 1981-03-25
CS216523B2 (en) 1982-11-26
CA1148073A (en) 1983-06-14
JPS55108300A (en) 1980-08-20
DK161340C (da) 1991-12-02
YU212888A (en) 1990-04-30
AR223025A1 (es) 1981-07-15
DE2905531A1 (de) 1981-01-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU182102B (en) Diagnostic device for indicating leucocytes in liquids of body and method for making this
US5545535A (en) Fluorescent assay for bacterial gram reaction
AU676317B2 (en) Cyclic-substituted unsymmetrical cyanine dyes
US9458499B2 (en) Nucleic acid binding dyes and uses therefor
HU187334B (en) Composition for the detection of esterase and/or protease enzymes and process for the preparation of corresponding substrates
US20090233322A1 (en) Colorimetric method and reagent used for the same
US6057120A (en) Redox-active compounds and their use
EP1885718B1 (en) Fluorescent chemical compounds having high selectivity for double stranded dna, and methods for their use
US6995264B2 (en) Process for preparing aripiprazole
US4442033A (en) Azo dyestuff for use as a chromogen in detecting leukocytes
EP0375723B1 (en) Substrates for the assay of enzymes
JPH06321908A (ja) カチオンを測定するための光学センサー
MX2007008565A (es) Sales de tetrazolio solubles en agua.
US5077200A (en) Azo dye chromogenic substrates
CA2423328C (en) Cephem compound and esbl-detecting reagent containing the same
US20050014213A1 (en) Method of colorimetry and reagent for use therein
WO2018085449A2 (en) Fluorogenic dyes for high sensitivity dna detection
US4670402A (en) Use of benzimidazole derivatives for the detection of blood and other peroxidatically active substances in body fluids and excretion products
US5290536A (en) Phenyl substituted 2-thiazolyl tetrazolium salt indicators
Khalil et al. Synthesis, spectral behaviour and biological activity of benzoxazonyl (quinoxalonyl)‐benzfurano‐(indolo)‐quinoline apocyanine dyes
JPH1031018A (ja) 還元型ニコチンアミド補酵素の測定用試薬およびそれを用いた測定方法並びに測定用試験片
Koraiem Z. zyxwvutsrqponmlkjihgfe

Legal Events

Date Code Title Description
HU90 Patent valid on 900628