HRP20050763A2 - Ganglioside based vaccine compositions for subcutaneous administration - Google Patents
Ganglioside based vaccine compositions for subcutaneous administration Download PDFInfo
- Publication number
- HRP20050763A2 HRP20050763A2 HR20050763A HRP20050763A HRP20050763A2 HR P20050763 A2 HRP20050763 A2 HR P20050763A2 HR 20050763 A HR20050763 A HR 20050763A HR P20050763 A HRP20050763 A HR P20050763A HR P20050763 A2 HRP20050763 A2 HR P20050763A2
- Authority
- HR
- Croatia
- Prior art keywords
- vssp
- acgm3
- vaccine
- ganglioside
- gangliosides
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 42
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 title claims abstract description 24
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 title claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 31
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims abstract description 28
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 7
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 5
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 claims description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 5
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 claims description 2
- 241000588650 Neisseria meningitidis Species 0.000 abstract description 4
- 108010030416 proteoliposomes Proteins 0.000 abstract description 3
- 101710116435 Outer membrane protein Proteins 0.000 abstract 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 14
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 5
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 4
- 239000000568 immunological adjuvant Substances 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000001325 log-rank test Methods 0.000 description 3
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010000269 abscess Diseases 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 1
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- GIVLTTJNORAZON-HDBOBKCLSA-N ganglioside GM2 (18:0) Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC[C@H](NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)[C@H](O)\C=C\CCCCCCCCCCCCC)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@]2(O[C@H]([C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C2)[C@H](O)[C@H](O)CO)C(O)=O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](CO)O1 GIVLTTJNORAZON-HDBOBKCLSA-N 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 231100000344 non-irritating Toxicity 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 238000009520 phase I clinical trial Methods 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000012109 statistical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001169—Tumor associated carbohydrates
- A61K39/001171—Gangliosides, e.g. GM2, GD2 or GD3
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/385—Haptens or antigens, bound to carriers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/095—Neisseria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
Opisani su pripravci cjepiva u kojima su gangliozidi i OMP (proteini vanjske membrane) N. meningitidis kombinirani tako da oblikuju proteoliposome vrlo male veličine (very small siže proteoliposomes = VSSP) s namjerom da se primijene supkutano. Ovi pripravci ne zahtijevaju korištenje nikakvog dodatnog adjuvansa.
Description
Tehničko polje izuma
Predmetni izum odnosi se na pripravke cjepiva za supkutanu primjenu koji sadržavaju gangliozide korisne za imunološko liječenje autoimunih bolesti i tumora, bez dodatnih adjuvansa.
Prethodno stanje u struci
Već je duže vrijeme poznata namjera korištenja imunološkog liječenja autoimunih bolesti i raka, na primjer, patentna prijeva USA-A-4965198 opisuje korištenje gangliozida GM2 u prevenciji i liječenju takvih bolesti. U patentnoj prijavi EP-A-661061 i u patentnoj prijavi US-A- 6149921, opisani su pripravci cjepiva kojima je svrha stimulirati ili pojačati odgovor protutijela na gangliozid koji sadržavaju imunogen i imunološki adjuvans.
Opisani imunogeni su: VSSP (Very Small Siže Proteoliposomes = Proteoliposomi vrlo male veličine) koji nastaju povezivanjem N-acetilGM3 i N-glikolilGM3 glikozida, od sad nadalje: (N-AcGM3) i (N-GcGM3), s proteinskim kompleksom vanjske membrane (OMP) iz Neisserije meningitidis.
Takvi imunogeni bit će od sada nadalje označeni kao N-AcGM3/VSSP i N-GcGM3/VSSP; oni su vrlo male veličine i praktički nevidljivi elektronskim mikroskopom, vodotopivi i povećanog kapaciteta plutanja.
Za pripravke cjepiva opisane u EP-A-661061 i US-A-6149921, neophodno je bilo korištenje adjuvansa, kao što je dobro poznati inkompletni Freundov adjuvans.
U patentnoj prijavi VVO-A-02145746 opisani su pripravci cjepiva koji sadržavaju (A) jedan ili više antigena niske imunogeničnosti; (B) VSSP s inkorporiranim gangliozidima, uglavnom N-AcGM3/VSSP i N-GcGM3/VSSP, i (C) eventualno jedan ili više adjuvansa.
U članku Carr A. et al., objavljenom u Melanoma Research, 2001, Vol. 11, str. 219-227, opisano je antitumorsko djelovanje cjepiva koje sadržava N-AcGM3 gangliozid u miševa koji nose melanom.
U navedenom članku također je proučavan utjecaj prisustva imunološkog adjuvansa, naročito kompletnog Freundovog adjuvansa ili inkompletnog adjuvansa poput Freundovog, Montanide ISA 51. Cjepiva su dana intramuskularno, a zaključak koji iz toga proizlazi jest da su miševi imunizirani s N-AcGM3/VSSP, s bilo kojim od adjuvansa, Freundovim ili Montanide ISA 51, pokazali IgM i IgG anti-N-AcGM3 odgovore u 8. tjednu (tablica 1). Nasuprot tome, cjepivo s N-AcGM3/VSSP bez ikakvog adjuvansa nije polučilo imunološki odgovor (stranica 223, desni stupac).
Prema tome, stanje u struci podučava da cjepiva koja sadržavaju VSSP konjugiran s gangliozidima moraju biti formulirana s adjuvansima, uglavnom s Freundovim (kompletnim ili inkompletnim) ili Montanide ISA 51.
Vrlo je dobro poznato, međutim, da kada se primjenjuju parenteralno, takvi adjuvansi, naročito Freundov kompletni adjuvans, uzrokuju neke nepovoljne nuspojave, kao što je kronična upala na mjestu injekcije, eventualno formiranje granuloma i sterilnog apscesa ili ulcerirajuće nekroze u tkivima. Montanide ISA 51 je manje agresivan, ali isto tako može uzrokovati neke upalne poremećaje.
Bilo bi izuzetno poželjno, sa stanovišta njihove primjene u liječenju autoimunih, infektivnih i tumorskih, da postoje novi pripravci gangliozidnih cjepiva koji su manje agresivni na mjestu injekcije i koji bi se mogli lakše koristiti, s manje nelagode za pacijenta.
Autori predmetnog izuma otkrili su da se cjepiva bazirana na gangliozidima obliovana s VSSP, kad se primijene supkutano, mogu koristiti bez ikakvih adjuvansa, a da njihova relevantna imunološka svojstva budu očuvana.
Ciljevi predmetnog izuma su novi pripravci cjepiva uključeni u VSSP, povoljno N-AcGM3/VSSP i N-GcGM3/VSSP, koji ne sadržavaju nikakav imunološki adjuvans i primjenjuju se supkutano.
Također je cilj predmetnog izuma postupak liječenja bolesnika koji zahtijevaju pojačavanje imunološkog odgovora koje se sastoji u supkutanoj primjeni pripravaka gangliozidnog cjepiva, povoljno N-AcGM3/VSSP i N-GcGM3/VSSP, koji ne sadržavaju nikakav imunološki adjuvans.
Također su cilj predmetnog izuma pripravci cjepiva s N-AcGM3/VSSP i/ili N-GcGM3/VSSP, koji ne sadržavaju druge antigenične komponente različite od gangliozida ili bilo kakve druge imunološke adjuvanse i daju se supkutano.
Detaljan opis izuma
Ciljevi pripravka cjepiva iz predmetnog izuma sastoje se od otopine ili vodene disperzije jednog ili više gangliozida i njihovog uključenja u OMP N. meningitidis (VSSP), koja je u mogućnosti stimulirati imunološki odgovor supkutanom primjenom bez ikakvog dodatnog imunološkog adjuvansa.
VSSP su visoko stabilni gangliozidni hidrofobni spojevi s proteinskim kompleksom vanjske membrane Neisserije meningitidis, bez potrebe za kovalentnim vezivanjem. Takvi sustavi gangliozid-protein detaljno su opisani u patentnim prijavama EP-A-661061 i US-A-6149921, kao i u različitim publikacijama, na primjer, Estévez et al. Vaccine, 1999; Vol. 18(1-2): str. 190-197. U takvim dokumentima također je opisan postupak njihovog dobivanja.
Među gangliozidima uključenima u VSSP u predmetnom izumu prednost je stavljena na N-AcGM3 i N-GcGM3, s tim daje naročito povoljan N-AcGM3.
Detaljan opis imunogenosti oba konjugirana gangliozida, kao i njihove primjene kao protutumorskih tvari i stimulansa stečene imunosti može se pronaći u gore navedenim dokumentima i u preglednom članku: Bitton R. Et al., Oncology Reports (2002), Vol 9, str. 267-276, i u recentnim komunikacijama i znanstvenim skupovima, na primjer 6. Latinoamerički kongres Imunologije, koji se održao u Havani, 9. prosinca 2002., Gaurez G. et al. «Phase I clinical trial of the ganglioside cancer vaccine N-Acetil-GM3/VSSP/Montanide ISA 51 in advanced breast cancer patients».
Pripravci cjepiva koji ne sadržavaju druge antigene komponente osim gangliozida su povoljan cilj izuma, s tim da su naročito povoljni oni koji sadržavaju N-AcGM3 (N-AcGM3/VSSP) ili N-GcGM3 (N-GcGM3/VSSP) kao jedinstvenu imunogenu komponentu, a naročito su povoljni oni koji sadržavaju samo N-AcGM3/VSSP.
Pripravci cjepiva iz predmetnog izuma su otopine ili vodene disperzije VSSP koji mogu eventualno sadržavati druge ne-toksična, ne-iritirajuća otapala kompatibilna s vodom koja se normalno koriste u farmaceutici za parenteralnu primjenu, kao što bi mogao biti polietilenglikol.
Koncentracija konjugiranog gangliozida u otopini ili vodenoj disperziji nije kritična i može biti u rasponu od 0,03% do 3% (w/v), povoljno između 0,04% i 2,5% (w/v). Raspon supkutano primijenjenih doza, koje se daju kao navedena cjepiva u predmetnom izumu, je između 50 μg i 2,4 mg, povoljno između 200 μg i 2 mg.
Ključna osobina pripravka cjepiva, cilj ovog izuma, jest u tome da je on oblikovan tako da se upotrijebi supkutano, bez ikakvog imunološkog adjuvansa.
Imunološki adjuvansi se često koriste u oblikovanju cjepiva. Takvi adjuvansi poticali su imunogeno djelovanje na više načina:
- stvaranjem depozita antigena na mjestu injekcije oslobađanjem ili otpuštanjem antigena u sistematskom obliku
- pomažući antigenu da dođe do slezene i limfnih čvorova oblikovanjem uljnih mikro-kapljica, koje lako zarobljuju makrofazi
- direktnim ili indirektnim aktiviranjem stanica uključenih u imunološki odgovor
- Najpoznatiji imunološki adjuvansi su: Freundov, puni i nepotpuni, Montanide ISA, Ribi adjuvansi, Hunterov TiterMax, aluminijeve soli Gerbuov adjuvans, QS-21 itd.
Iznenađujuće i neočekivano, autori predmetnog izuma otkrili su da se adjuvansi mogu u potpunosti izbaciti kada se gangliozid/VSSP cjepiva daju supkutano. Usprkos prethodnom stanju u struci, to je bilo gotovo u potpunosti isključeno za intramuskularnu primjenu.
Prema tome, predmetni izum predstavlja neosporne prednosti što se tiče spomenutih upalnih problema nastalih lokalno korištenjem adjuvansa. Ovaj postupak cijepljenja s gangliozidima je jednostavan, učinkovit i manje agresivan za pacijente.
U sljedećim primjerima uključeni su komparativni eksperimentalni detalji koji omogućuju da se pokaže imunološka učinkovitost pripravka cjepiva koji ne sadržava imunološke adjuvanse.
Primjer 1:
Koristeći postupak opisan u primjeru 3 u patentnoj prijavi US-A-6149921, vodeni pripravak cjepiva pripremljen je (pufer tris-HCI) sadržavajući 2,4 mg/mL N-AcGM3/VSSP. Do alikvota takvog imunogenog pripravka dodan je isti volumen Montanide ISA 51 (Seppic Pariš, Francuska). U isto vrijeme do drugog alikvota dodan je identični volumen pufera Tris-HCI.
Dobivena su dva cjepiva:
A: Vodena otopina koja sadržava 1,2 mg/mL N-AcGM3/VSSP
B: Emulzija W/O koja sadržava 1,2 mg/mL N-AcGM3/VSSP.
Odabrani su ženski miševi 50 C57BL/6 tjelesne težine između 18-20 g i organizirani u o eksperimentalnih skupina, svaka od po 10 životinja.
Životinjama iz skupine 1 (kontrolnoj) intramuskularno je u dane 0, 14, 28 i 42 inokulirano 0,1 mL slane otopine puferirane fosfatnim puferom (PBS).
Životinjama iz skupine 2 je intramuskularno u dane 0, 14, 28 i 42 inokulirano 0,1 mL pripravka cjepiva B (120 μg N-AcGM3/VSSP).
Životinjama iz skupine 3 (kontrolna) je supkutano u dane 0, 14, 28 i 42 inokulirano 0,1 mL slane otopine puferirane fosfatnim puferom (PBS).
Životinjama iz skupine 4 je supkutano u dane 0, 14, 28 i 42 inokulirano 0,1 mL pripravka cjepiva B (120 μg N-AcGM3/VSSP).
Životinjama iz skupine 5 je supkutano u dane 0, 14, 28 i 42 inokulirano 0,1 mL pripravka cjepiva A (120 μg N-AcGM3/VSSP).
Miševima iz svih skupina 63. dana pokusa supkutano je dano 5×103 stanica melanoma MB16F10(0,2mL).
Životinje su individualizirane od 0. dana i dvaput tjedno određivali su se sljedeći parametri: volumen tumora, preživljenje i vrijeme do progresije.
Dobiveni su sljedeći rezultati:
Volumen tumora:
Ma slici 1 prikazana je kinetika rasta tumora svake eksperimentalne skupine.
Mann-Whitneyev U test korišten je za procjenu statističke značajnosti u vrijednostima volumena tumora odgovarajućih skupina individualiziranih životinja 33. dana nakon inokulacije tumora. Ovaj statistički postupak naročito je prikladan za evaluaciju ove vrste eksperimenata u kojima postoji prirodna raspršenost podataka ovisno o biološkom događaju.
P vrijednost predstavlja vjerojatnost povezanu s praktičnom vrijednošću izračunatom iz uzorka i dozvoljava da se približno definira Alfa vrijednost (značajnost) izračunata stadigrafom i samim podacima koji ocjenjuju nultu hipotezu (p>0,05).
Rezultati su prikazani na slici 1 i tablici 1 Tablica 1. - Učinak cijepljenja na volumen tumora
[image]
a: p-vrijednost je rezultat usporedbe skupine 2 sa skupinom 1
b: p-vrijednost je rezultat usporedbe skupine 4 sa skupinom 3
c: p-vrijednost je rezultat usporedbe skupine 5 sa skupinom 3
Iz slike 1 i tablice 1 vidljivo je da su miševi iz skupine 5, cijepljeni supkutano pripravkom koji je predmet ovog izuma, pokazali značajno smanjenje volumena tumora u odnosu na druge skupine u eksperimentu i odgovarajuće kontrole.
Preživljenje
Ovaj parametar ocjenjuje mogućnost cjepiva da produži očekivano trajanje života imuniziranih životinja s obzirom na letalni tumor MB16. parametar je mjeren u danima u usporedbi s preživljenjem netretiranih životinja. Za statističku značajnost korišten je Log-Rank test.
Dobiveni podaci pokazani su na slici 2 i u tablici 2. U tablici 2 fraza referentna skupina X označava skupinu koja se uspoređuje sa svakim stupcem.
Tablica 2. Statistika vremena preživljenja prema Log-Rank testu
[image]
Ovi rezultati pokazali su da su miševi iz skupine 5, supkutano cijepljeni predmetom formulacije iz ovog izuma, pokazali najdulje preživljenje nakon inokulacije tumora.
Vrijeme do progresije
Vrijeme do progresije je parametar koji ocjenjuje vrijeme potrebno da bi tumor bio vidljiv u svake pojedine životinje, mjereno od trenutka inokulacije. Rezultati su prikazani u tablici 3:
Tablica 3. Statistika vremena do progresije prema Log-Rank testu.
[image]
U miševa koji nisu razvili tumor do kraja eksperimenta, kao vrijeme progresije uzeto je 60 dana.
Utjecaj na produljenje vremena do progresije je parametar kojem je očito vrlo poželjno postići značajne razlike cjepivom protiv tumora, a u skladu s rezultatima viđenima u tablici 3, životinje iz skupine 5, supkutano cijepljene ciljanim VSSP pripravkom iz predmetnog izuma, pokazale su relevantnije pozitivne rezultate.
Regresija tumora
U skupinama 4 i 5, odgovarajući supkutanom cijepljenju sa i bez adjuvansa, viđena je životinja sa regresijom tumora. U životinje iz skupine 4 tumor je bio mjerljiv 19. dan od inokulacije te nije pokazivao rast do 35. dana kad je nalaz bio negativan. Mišu iz skupine 5 tuor se mogao napipati 26. dana od inokulacije, a kao negativan nalaz prijavljen je 29. dana.
Ukupna procjena
Rezultati eksperimenata pokazali su da je pripravak cjepiva, koji je cilj predmetnog izuma, produljio vrijeme preživljenja i vrijeme do progresije, a u isto vrijeme značajno smanjujući brzinu rasta tumora u odnosu na kontrolnu skupinu tretiranu slanom otopinom.
S druge strane, primjena pripravka cjepiva koji je sadržavao adjuvans Montanide ISA 51 mogla je pružiti zaštitu samo kod intramuskularne primjene, pokazujući potpunu neučinkovitost pri supkutanoj primjeni.
Sve u svemu, supkutano cijepljenje s pripravama cjepiva koji su cilj predmetnog izuma pokazalo je superiorne rezultate u odnosu na rezultate dobivene intramuskularnom primjenom pripravka cjepiva koji sadržava adjuvans tipa Montanide.
Kratak opis crteža
Slika 1 predstavlja grafički prikaz napredovanja tumorskog volumena u 5 skupina životinja podvrgnutim različitim tretmanima cijepljenja kojima je inokuliran maligni tumor.
Slika 2 predstavlja grafikon koji omogućava pregled parametra preživljenja u 5 skupina eksperimentalnih životinja.
Claims (7)
1. Pripravci cjepiva, naznačeni time, što sadržavaju otopinu ili vodenu disperziju jednog ili više gangliozida uključenih u VSSP, koji su u stanju stimulirati imunološki odgovor nakon supkutane primjene bez ikakvog dodatnog imunološkog adjuvansa.
2. Pripravak cjepiva u skladu s patentnim zahtjevom 1, naznačen time, što gangliozidi uključeni u VSSP jesu N-AcGM3 i N-GcGM3.
3. Pripravak cjepiva u skladu s patentnim zahtjevom 2, naznačen time, što gangliozid uključen u VSSP jest N-AcGM3.
4. Pripravak cjepiva u skladu s patentnim zahtjevom 1, naznačen time, što navedeni pripravak ne sadržava druge antigene različite od gangliozida.
5. Pripravci cjepiva u skladu s patentnim zahtjevima 2 i 4, naznačeni time, što kao jedinstvenu imunološku komponentu sadržavaju N-AcGM3/VSSP i/ili N-GcGM3/VSSP.
6. Pripravak cjepiva u skladu s patentnim zahtjevom 5, naznačen time, što kao jedinstvenu imunološku komponentu sadržava N-AcGM3/VSSP.
7. Postupak za liječenje bolesnika koji zahtijeva jačanje imunološkog odgovora, naznačen time, što uključuje supkutanu primjenu pripravka cjepiva opisanog u patentnim zahtjevima 1 do 6.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CU20030047A CU23257A1 (es) | 2003-02-27 | 2003-02-27 | COMPOSICIONES VACUNALES A BASE DE GANGLIOSIDOS PARA LA ADMINISTRACION SUBCUTáNEA |
| PCT/CU2004/000003 WO2004075811A2 (es) | 2003-02-27 | 2004-02-27 | Composiciones vacunales a base de gangliósidos para administración subcutánea |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HRP20050763A2 true HRP20050763A2 (en) | 2006-06-30 |
Family
ID=40091613
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HR20050763A HRP20050763A2 (en) | 2003-02-27 | 2005-09-02 | Ganglioside based vaccine compositions for subcutaneous administration |
Country Status (37)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US8591917B2 (hr) |
| EP (1) | EP1604683B1 (hr) |
| JP (1) | JP4729475B2 (hr) |
| KR (1) | KR100703570B1 (hr) |
| CN (1) | CN100418576C (hr) |
| AR (1) | AR043377A1 (hr) |
| AT (1) | ATE353668T1 (hr) |
| AU (1) | AU2004216554B2 (hr) |
| BR (1) | BRPI0407854B1 (hr) |
| CA (1) | CA2535214C (hr) |
| CL (1) | CL2004000374A1 (hr) |
| CR (1) | CR7965A (hr) |
| CU (1) | CU23257A1 (hr) |
| CY (1) | CY1106668T1 (hr) |
| DE (1) | DE602004004768T2 (hr) |
| DK (1) | DK1604683T3 (hr) |
| EA (1) | EA008905B1 (hr) |
| EC (1) | ECSP055978A (hr) |
| EG (1) | EG26446A (hr) |
| ES (1) | ES2280948T3 (hr) |
| GE (1) | GEP20074120B (hr) |
| HK (1) | HK1087630A1 (hr) |
| HR (1) | HRP20050763A2 (hr) |
| IL (1) | IL170355A (hr) |
| LT (1) | LT5351B (hr) |
| LV (1) | LV13400B (hr) |
| MY (1) | MY139811A (hr) |
| NZ (1) | NZ541952A (hr) |
| PE (1) | PE20040955A1 (hr) |
| PT (1) | PT1604683E (hr) |
| RS (1) | RS20050664A (hr) |
| SI (1) | SI1604683T1 (hr) |
| TN (1) | TNSN05209A1 (hr) |
| TW (1) | TWI344372B (hr) |
| UA (1) | UA80859C2 (hr) |
| UY (1) | UY28207A1 (hr) |
| WO (1) | WO2004075811A2 (hr) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CU24534B1 (es) * | 2017-11-06 | 2021-07-02 | Ct Inmunologia Molecular | Adyuvantes nano-particulados que contienen variantes sintéticas del gangliósido gm3 |
| CU20170173A7 (es) | 2017-12-27 | 2019-11-04 | Ct Inmunologia Molecular | Nano-partículas que contienen el gangliósido gm3 como inmunomoduladoras |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4965198A (en) | 1985-12-24 | 1990-10-23 | Konica Corporation | Monoclonal antibody and method of manufacturing hybridoma producing the same |
| CU22420A1 (es) * | 1993-12-29 | 1996-01-31 | Centro Inmunologia Molecular | Composicion vacunal para el desarrollo de una respuesta contra gangliosidos n glicolilados y su uso para el tratamiento del cancer |
| US6149921A (en) * | 1993-12-29 | 2000-11-21 | Centro De Inmunologia Molecular | Vaccine compositions for eliciting an immune response against N-acetylated gangliosides and their use for cancer treatment |
| PE20020572A1 (es) * | 2000-12-06 | 2002-07-31 | Centro Inmunologia Molecular | Preparaciones para potenciar la inmunogenicidad de antigenos poco inmunogenicos |
| CA2399325A1 (en) * | 2001-08-21 | 2003-02-21 | National Research Council Of Canada | Carbohydrate-based whole cell cancer vaccines |
-
2003
- 2003-02-27 CU CU20030047A patent/CU23257A1/es unknown
-
2004
- 2004-02-24 AR ARP040100571A patent/AR043377A1/es not_active Application Discontinuation
- 2004-02-24 PE PE2004000186A patent/PE20040955A1/es not_active Application Discontinuation
- 2004-02-25 TW TW093104808A patent/TWI344372B/zh not_active IP Right Cessation
- 2004-02-26 CL CL200400374A patent/CL2004000374A1/es unknown
- 2004-02-26 MY MYPI20040641A patent/MY139811A/en unknown
- 2004-02-27 AT AT04715239T patent/ATE353668T1/de active
- 2004-02-27 CN CNB2004800052015A patent/CN100418576C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-27 SI SI200430262T patent/SI1604683T1/sl unknown
- 2004-02-27 EA EA200501367A patent/EA008905B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2004-02-27 US US10/547,164 patent/US8591917B2/en active Active
- 2004-02-27 NZ NZ541952A patent/NZ541952A/en not_active IP Right Cessation
- 2004-02-27 EP EP04715239A patent/EP1604683B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-27 BR BRPI0407854-3A patent/BRPI0407854B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2004-02-27 AU AU2004216554A patent/AU2004216554B2/en not_active Expired
- 2004-02-27 WO PCT/CU2004/000003 patent/WO2004075811A2/es active IP Right Grant
- 2004-02-27 CA CA2535214A patent/CA2535214C/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-27 JP JP2006501455A patent/JP4729475B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-27 ES ES04715239T patent/ES2280948T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-27 DE DE602004004768T patent/DE602004004768T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2004-02-27 UY UY28207A patent/UY28207A1/es unknown
- 2004-02-27 GE GEAP20048952A patent/GEP20074120B/en unknown
- 2004-02-27 KR KR1020057015531A patent/KR100703570B1/ko active IP Right Grant
- 2004-02-27 RS YUP-2005/0664A patent/RS20050664A/sr unknown
- 2004-02-27 PT PT04715239T patent/PT1604683E/pt unknown
- 2004-02-27 DK DK04715239T patent/DK1604683T3/da active
- 2004-02-27 UA UAA200508381A patent/UA80859C2/xx unknown
-
2005
- 2005-08-18 IL IL170355A patent/IL170355A/en not_active IP Right Cessation
- 2005-08-20 EG EGPCTNA2005000479A patent/EG26446A/en active
- 2005-08-24 EC EC2005005978A patent/ECSP055978A/es unknown
- 2005-08-26 CR CR7965A patent/CR7965A/es unknown
- 2005-08-26 TN TNP2005000209A patent/TNSN05209A1/en unknown
- 2005-08-29 LV LVP-05-110A patent/LV13400B/en unknown
- 2005-09-02 HR HR20050763A patent/HRP20050763A2/hr not_active Application Discontinuation
- 2005-09-21 LT LT2005087A patent/LT5351B/lt not_active IP Right Cessation
-
2006
- 2006-07-14 HK HK06107889.3A patent/HK1087630A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-04-26 CY CY20071100556T patent/CY1106668T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5980912A (en) | Chitosan induced immunopotentiation | |
| Silva et al. | Inulin‐derived adjuvants efficiently promote both Th1 and Th2 immune responses | |
| JP3814290B2 (ja) | 抗原用のアジュバントおよびその製法ならびに用途 | |
| JPH07504683A (ja) | Ｇｍ−ｃｓｆのワクチンアジュバントとしての利用 | |
| EP0789590B1 (en) | Chitosan induced immunopotentiation | |
| HRP20050763A2 (en) | Ganglioside based vaccine compositions for subcutaneous administration | |
| EP3392291B1 (en) | Vaccine adjuvant composition based on amphiphilic polyamino acid polymer, containing squalene | |
| JP2016532712A (ja) | 薬物中毒に対するワクチン組成物 | |
| JPS6236501B2 (hr) | ||
| US20210008186A1 (en) | Immunotherapy of leishmaniasis | |
| CA2255867C (en) | Chitosan induced immunopotentiation | |
| WO2018097750A1 (ru) | Средство для профилактики лейкоза крупного рогатого скота и способ его применения | |
| CA2525615C (en) | Vaccine composition comprising iron phosphate as a pharmaceutical aid to said vaccine | |
| Stone et al. | Tick‐paralysis toxoid: an effective immunizing agent against the toxin of Ixodes holocyclus | |
| US6927235B2 (en) | Vaccine composition comprising iron phosphate as vaccine adjuvant | |
| JP2006525373A (ja) | プロテオソームを用いた感染性疾患に対する予防接種 | |
| JPS6236500B2 (hr) | ||
| Fastier et al. | An adjuvant vaccine against infectious canine hepatitis | |
| AU771525B2 (en) | Chitosan induced immunopotentiation | |
| JP2000154148A (ja) | インターフェロンβをアジュバントとするワクチン |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A1OB | Publication of a patent application | ||
| ARAI | Request for the grant of a patent on the basis of the submitted results of a substantive examination of a patent application | ||
| ODRP | Renewal fee for the maintenance of a patent |
Payment date: 20120220 Year of fee payment: 9 |
|
| OBST | Application withdrawn |