HRP20010526A2 - Use of antibodies for anticancer vaccination - Google Patents
Use of antibodies for anticancer vaccination Download PDFInfo
- Publication number
- HRP20010526A2 HRP20010526A2 HR20010526A HRP20010526A HRP20010526A2 HR P20010526 A2 HRP20010526 A2 HR P20010526A2 HR 20010526 A HR20010526 A HR 20010526A HR P20010526 A HRP20010526 A HR P20010526A HR P20010526 A2 HRP20010526 A2 HR P20010526A2
- Authority
- HR
- Croatia
- Prior art keywords
- antibody
- antibodies
- vaccination
- cells
- cancer
- Prior art date
Links
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 title claims description 80
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 title 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 54
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 36
- 101710181478 Envelope glycoprotein GP350 Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims abstract 2
- 102000018651 Epithelial Cell Adhesion Molecule Human genes 0.000 claims description 36
- 108010066687 Epithelial Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 claims description 36
- 238000009739 binding Methods 0.000 claims description 23
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 claims description 14
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 14
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 7
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 4
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 4
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 claims description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 1
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 claims 1
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 claims 1
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 abstract description 23
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 83
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 45
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 45
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 45
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 36
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 31
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 23
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 21
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 18
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 18
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 18
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 16
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 description 16
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 14
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 9
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 9
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 9
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 9
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 8
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 8
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 8
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 8
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 7
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 7
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 7
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000013024 dilution buffer Substances 0.000 description 6
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 6
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 6
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 6
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 6
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 6
- 102000012406 Carcinoembryonic Antigen Human genes 0.000 description 5
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 description 5
- 102100021852 Neuronal cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 5
- 101710130688 Neuronal cell adhesion molecule Proteins 0.000 description 5
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 5
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 5
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 5
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 5
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 5
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 5
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 5
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- MXRIRQGCELJRSN-UHFFFAOYSA-N O.O.O.[Al] Chemical compound O.O.O.[Al] MXRIRQGCELJRSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 4
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 4
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 4
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 3
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 3
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 3
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 3
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 3
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- BYYNJRSNDARRBX-YFKPBYRVSA-N Gly-Gln-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O BYYNJRSNDARRBX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- 241001467552 Mycobacterium bovis BCG Species 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 102000007066 Prostate-Specific Antigen Human genes 0.000 description 2
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 description 2
- 101000762949 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) Exotoxin A Proteins 0.000 description 2
- -1 Sialyl Tn carbohydrate Chemical class 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 2
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 2
- 229960000190 bacillus calmette–guérin vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000001217 buttock Anatomy 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 230000008611 intercellular interaction Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 2
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 2
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 2
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethoxybenzenecarbothioamide Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(N)=S WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KUDREHRZRIVKHS-UWJYBYFXSA-N Ala-Asp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KUDREHRZRIVKHS-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- YNOCMHZSWJMGBB-GCJQMDKQSA-N Ala-Thr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O YNOCMHZSWJMGBB-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- IOFVWPYSRSCWHI-JXUBOQSCSA-N Ala-Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](C)N IOFVWPYSRSCWHI-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- DEAGTWNKODHUIY-MRFFXTKBSA-N Ala-Tyr-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O DEAGTWNKODHUIY-MRFFXTKBSA-N 0.000 description 1
- 206010002199 Anaphylactic shock Diseases 0.000 description 1
- KMSHNDWHPWXPEC-BQBZGAKWSA-N Arg-Asp-Gly Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O KMSHNDWHPWXPEC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- PRLPSDIHSRITSF-UNQGMJICSA-N Arg-Phe-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PRLPSDIHSRITSF-UNQGMJICSA-N 0.000 description 1
- HGKHPCFTRQDHCU-IUCAKERBSA-N Arg-Pro-Gly Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O HGKHPCFTRQDHCU-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- OLGCWMNDJTWQAG-GUBZILKMSA-N Asn-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O OLGCWMNDJTWQAG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SPCONPVIDFMDJI-QSFUFRPTSA-N Asn-Ile-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O SPCONPVIDFMDJI-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 1
- GKKUBLFXKRDMFC-BQBZGAKWSA-N Asn-Pro-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O GKKUBLFXKRDMFC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- WMLFFCRUSPNENW-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WMLFFCRUSPNENW-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 1
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 1
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 1
- 101100283604 Caenorhabditis elegans pigk-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100032768 Complement receptor type 2 Human genes 0.000 description 1
- OZHXXYOHPLLLMI-CIUDSAMLSA-N Cys-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OZHXXYOHPLLLMI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 1
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 1
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101710190709 Eukaryotic translation initiation factor 4 gamma 2 Proteins 0.000 description 1
- XOKGKOQWADCLFQ-GARJFASQSA-N Gln-Arg-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)C(=O)O XOKGKOQWADCLFQ-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- YXQCLIVLWCKCRS-RYUDHWBXSA-N Gln-Gly-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O YXQCLIVLWCKCRS-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 1
- SYZZMPFLOLSMHL-XHNCKOQMSA-N Gln-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)C(=O)O SYZZMPFLOLSMHL-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 1
- ZFBBMCKQSNJZSN-AUTRQRHGSA-N Gln-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O ZFBBMCKQSNJZSN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 1
- DYFJZDDQPNIPAB-NHCYSSNCSA-N Glu-Arg-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DYFJZDDQPNIPAB-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- JVSBYEDSSRZQGV-GUBZILKMSA-N Glu-Asp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JVSBYEDSSRZQGV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- GJBUAAAIZSRCDC-GVXVVHGQSA-N Glu-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O GJBUAAAIZSRCDC-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N Gly-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N 0.000 description 1
- UIQGJYUEQDOODF-KWQFWETISA-N Gly-Tyr-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=C(O)C=C1 UIQGJYUEQDOODF-KWQFWETISA-N 0.000 description 1
- ZVXMEWXHFBYJPI-LSJOCFKGSA-N Gly-Val-Ile Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O ZVXMEWXHFBYJPI-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- OHOXVDFVRDGFND-YUMQZZPRSA-N His-Cys-Gly Chemical compound N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O OHOXVDFVRDGFND-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 1
- 101000941929 Homo sapiens Complement receptor type 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001133056 Homo sapiens Mucin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 208000005016 Intestinal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N L-tryptophan-L-tyrosine Natural products C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KAFOIVJDVSZUMD-DCAQKATOSA-N Leu-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O KAFOIVJDVSZUMD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- KAFOIVJDVSZUMD-UHFFFAOYSA-N Leu-Gln-Gln Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O KAFOIVJDVSZUMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N Leu-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- HGFGEMSVBMCFKK-MNXVOIDGSA-N Leu-Ile-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HGFGEMSVBMCFKK-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- UWKNTTJNVSYXPC-CIUDSAMLSA-N Lys-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN UWKNTTJNVSYXPC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- SKRGVGLIRUGANF-AVGNSLFASA-N Lys-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SKRGVGLIRUGANF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- CNGOEHJCLVCJHN-SRVKXCTJSA-N Lys-Pro-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CNGOEHJCLVCJHN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- DIBZLYZXTSVGLN-CIUDSAMLSA-N Lys-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DIBZLYZXTSVGLN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- VOOINLQYUZOREH-SRVKXCTJSA-N Met-Gln-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCSC)N VOOINLQYUZOREH-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- GGXZOTSDJJTDGB-GUBZILKMSA-N Met-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O GGXZOTSDJJTDGB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SPSSJSICDYYTQN-HJGDQZAQSA-N Met-Thr-Gln Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O SPSSJSICDYYTQN-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- JHSRGEODDALISP-XVSYOHENSA-N Phe-Thr-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O JHSRGEODDALISP-XVSYOHENSA-N 0.000 description 1
- KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N Phe-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- LEBTWGWVUVJNTA-FKBYEOEOSA-N Pro-Trp-Phe Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)N[C@@H](CC4=CC=CC=C4)C(=O)O LEBTWGWVUVJNTA-FKBYEOEOSA-N 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 1
- 101710100968 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- OBXVZEAMXFSGPU-FXQIFTODSA-N Ser-Asn-Arg Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)N)CN=C(N)N OBXVZEAMXFSGPU-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- SQBLRDDJTUJDMV-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O SQBLRDDJTUJDMV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- UQFYNFTYDHUIMI-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO UQFYNFTYDHUIMI-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- VIIJCAQMJBHSJH-FXQIFTODSA-N Ser-Met-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VIIJCAQMJBHSJH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- NMZXJDSKEGFDLJ-DCAQKATOSA-N Ser-Pro-Lys Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O NMZXJDSKEGFDLJ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- XJDMUQCLVSCRSJ-VZFHVOOUSA-N Ser-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XJDMUQCLVSCRSJ-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- KIEIJCFVGZCUAS-MELADBBJSA-N Ser-Tyr-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O KIEIJCFVGZCUAS-MELADBBJSA-N 0.000 description 1
- LLSLRQOEAFCZLW-NRPADANISA-N Ser-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O LLSLRQOEAFCZLW-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- LGIMRDKGABDMBN-DCAQKATOSA-N Ser-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N LGIMRDKGABDMBN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NJEMRSFGDNECGF-GCJQMDKQSA-N Thr-Ala-Asp Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O NJEMRSFGDNECGF-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- JVTHIXKSVYEWNI-JRQIVUDYSA-N Thr-Asn-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O JVTHIXKSVYEWNI-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 1
- FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N Thr-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 1
- VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N Thr-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N Thr-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O KZSYAEWQMJEGRZ-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N Thr-Phe-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=CC=C1 BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N 0.000 description 1
- IVDFVBVIVLJJHR-LKXGYXEUSA-N Thr-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IVDFVBVIVLJJHR-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N Thr-Val-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MNYNCKZAEIAONY-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- 108010033576 Transferrin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100026144 Transferrin receptor protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100026145 Transitional endoplasmic reticulum ATPase Human genes 0.000 description 1
- 101710132062 Transitional endoplasmic reticulum ATPase Proteins 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- UOXPLPBMEPLZBW-WDSOQIARSA-N Trp-Val-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 UOXPLPBMEPLZBW-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N Tyr-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- CNLKDWSAORJEMW-KWQFWETISA-N Tyr-Gly-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CNLKDWSAORJEMW-KWQFWETISA-N 0.000 description 1
- ZZDYJFVIKVSUFA-WLTAIBSBSA-N Tyr-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O ZZDYJFVIKVSUFA-WLTAIBSBSA-N 0.000 description 1
- CVUDMNSZAIZFAE-UHFFFAOYSA-N Val-Arg-Pro Natural products NC(N)=NCCCC(NC(=O)C(N)C(C)C)C(=O)N1CCCC1C(O)=O CVUDMNSZAIZFAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZXYPHBKIZLAQTL-QXEWZRGKSA-N Val-Pro-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N ZXYPHBKIZLAQTL-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- JQTYTBPCSOAZHI-FXQIFTODSA-N Val-Ser-Cys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N JQTYTBPCSOAZHI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- SDHZOOIGIUEPDY-JYJNAYRXSA-N Val-Ser-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 SDHZOOIGIUEPDY-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- PGBMPFKFKXYROZ-UFYCRDLUSA-N Val-Tyr-Phe Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=CC=C2)C(=O)O)N PGBMPFKFKXYROZ-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- JVGDAEKKZKKZFO-RCWTZXSCSA-N Val-Val-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O JVGDAEKKZKKZFO-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010050025 alpha-glutamyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 108010040443 aspartyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- RIIWUGSYXOBDMC-UHFFFAOYSA-N benzene-1,2-diamine;hydron;dichloride Chemical compound Cl.Cl.NC1=CC=CC=C1N RIIWUGSYXOBDMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001815 biotherapy Methods 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 1
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 1
- 231100000050 cytotoxic potential Toxicity 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Chemical class 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 229940031098 ethanolamine Drugs 0.000 description 1
- 230000008175 fetal development Effects 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010057083 glutamyl-aspartyl-leucine Proteins 0.000 description 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Natural products NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010082286 glycyl-seryl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 201000002313 intestinal cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical class O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Chemical class 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010038320 lysylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000005497 microtitration Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 108010070409 phenylalanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010024607 phenylalanylalanine Proteins 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 108010071207 serylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 229960002385 streptomycin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 101150047061 tag-72 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010044292 tryptophyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Sadašnji izum se odnosi na upotrebu antitijela koja su usmjerena protiv ljudskih staničnih membranskih antigena, za dobivanje farmaceutskog pripravka za cijepljenje protiv raka.
S otkrićem tehnologije hibridoma, postalo je moguće razviti monoklonalna antitijela (MAB) protiv najraznovrsnijih antigena. Ova tehnologija, koja se može općenito primijeniti na sve biološke probleme, također ima važnu ulogu u istraživanju raka. Tijekom posljednjih dvadeset godina, proizvedena su MAB usmjerena protiv mnogo tumor-povezanih antigena (TAA). TAA su strukture koje se predominantno eksprimiraju na staničnoj membrani tumorskih stanica i koje, prema tome, omogućuju razlikovanje od ne-malignih tkiva. Zbog toga, oni se smatraju ciljevima za dijagnostičke ili terapijske primjene na temelju specifičnih MAB ili derivata izvedenih iz tih MAB.
Direktne terapijske primjene MAB koje su usmjerene protiv TAA se temelje na pasivnim imunoterapijama, tj. MAB ili njegov derivat se primjenjuje sistemski pacijentima s rakom u odgovarajućoj količini i ima terapijski učinak samo tako dugo, dok je koncentracija u organizmu dovoljno visoka. Biološki polu-život takvih sredstava ovisi o njihovoj strukturi i kreće se od samo nekoliko sati do nekoliko dana. Prema tome, potrebno je ponavljati aplikacije. Međutim, ako se upotrebljavaju ksenogena antitijela (npr. glodavaca), može doći do neželjenih imunih reakcija, koje mogu dovesti do neutralizacije mogućeg terapijskog učinka i do opasnih nuspojava (anafilaktički šok). Zbog toga, takve imunoterapije se mogu primjenjivati samo u ograničenom vremenskom periodu.
Drugi pristup za imunoterapiju raka se temelji na selektivnoj aktivaciji imunog sustava pacijenata s rakom, za borbu protiv malignih stanica, za što se upotrebljavaju najrazličitiji tipovi cjepiva protiv raka. Oni uključuju cijepljenja s autolognim ili alogenim tumorskim stanicama, cijepljenja s autolognim ili alogenim tumorskim stanicama koje su kemijski modificirane ili su modificirane tehnikama genetske tehnologije, cijepljenja s izoliranim TAA ili TAA koji su proizvedeni upotrebom kemijskih ili genetskih tehnološkim postupaka, s peptidima izvedenim iz njih, i, u posljednje vrijeme, također cijepljenja sa DNA koje kodiraju za TAA ili strukture izvedene iz njih, itd. Alternativna metoda se temelji na upotrebi antiidiotipskih antitijela za cijepljenje protiv raka. Prikladna antiidiotipska antitijela mogu imunološki oponašati TAA. Kao ksenogeni proteini (npr. antitijela glodavaca, antitijela koze itd.), oni induciraju snažan imuni odgovor u čovjeku nakon cijepljenja – za razliku od pravih ljudskih tumorskih antigena koji su, kao vlastite strukture, često imunogeni samo u niskom stupnju. Prema tome, antiidiotipska antitijela se mogu upotrijebiti za cijepljenje kao imunogeni nadomjestak za tumorski antigen.
Za razliku od pasivne imunoterapije s antitumorskim antitijelima, u aktivnoj specifičnoj imunoterapiji raka su, u principu, čak i male količine prikladnog cjepiva dovoljne da induciraju imunitet koji traje mjesecima ili godinama i koji se može pojačati ponovnim cjepljenjima ako oslabi. Dalje, aktivna imunizacija omogućuje induciranje humoralnog, kao i staničnog imuniteta, čija suradnja može dovesti do djelotvorne zaštite.
U sažetku, upotreba antitijela ili njihovih derivata za imunoterapiju protiv raka, koja je do sada opisana, se uglavnom temelji na dva principa:
– pasivna terapija s antitijelima ili njihovim derivatima, koja su usmjerena protiv TAA.
– aktivna imunizacija (cijepljenje) s antitijelima ili njihovim derivatima koja su usmjerena protiv idiotipa antitijela koja imaju specifičnost za TAA.
U slijedu otkrića i posljedične karakterizacije najraznovrsnijih TAA, ispostavilo se da oni imaju važne funkcije što se tiče stanica raka. Oni omogućuju degeneriranim stanicama da izraze svojstva karakteristična za maligni fenotip, kao što je povećana sposobnost adhezije, koja ima važnu ulogu u razvijanju metastaza. Međutim, takvi antigeni se mogu, u određenim stadijima, također eksprimirati na normalnim stanicama gdje su odgovorni za normalne funkcije tih stanica. Bez pretenzija na potpunost, u nastavku su nabrojeni neki primjeri takvih antigena:
- N-CAM (neuronska stanična adhezijska molekula), koja se često eksprimira na tumorima neuronskog porijekla i koja djeluje na homofilnu adheziju (J. Cell Biol. 118 (1992), 937).
- Lewis-ov Y ugljikohidratni antigen, koji se pojavljuje na većini tumora epitelnog porijekla, ali koji također ima važnu ulogu za vrijeme fetalnog razvoja epitelnih tkiva. Pokazalo se da je ekspresija ovog antigena kod raka pluća snažno povezana s nepovoljnom prognozom, budući da Lewis Y-pozitivne stanice raka očito imaju jači potencijal stvaranja metastaza (N. Engl. J. Med. 327 (1992), 14).
- CEA (karcino-embrionski antigen), koji se često pojavljuje na epitelnim tumorima gastrointestinalnog trakta i koji je identificiran kao samo-adhezijska molekula (Cell 57 (1989), 327).
- Ep-CAM (epitelna stanična adhezijska molekula), koja se eksprimira skoro na svim tumorima epitelnog porijekla, ali koja se također pojavljuje kod velikog broja normalnih epitela. Karakterizirana je kao samo-adhezijska molekula i može se prema tome klasificirati kao pan-epitelni adhezijski antigen (J. Cell. Biol. 125 (1994), 437).
Tehnički problem, koji predstavlja pozadinu ovog izuma, je pružanje daljnjih sredstava i postupaka koji omogućuju djelotvornu profilaksu ili terapiju bolesti raka.
Ovaj problem je riješen zahvaljujući ostvarenjima koja su karakterizirana u zahtjevima.
Prema tome, izum se odnosi na upotrebu antitijela koja su usmjerena protiv ljudskih staničnih membranskih antigena, za dobivanje farmaceutskog pripravka za profilaktičko i/ili terapijsko cijepljenje protiv raka. U ovom kontekstu, termin "stanični membranski antigeni" se odnosi na strukture koje su izložene na staničnoj membrani stanica. One uključuju naročito receptore, kao što je receptor transferina, ili druge molekule, kao što je E kadherin* ili Ep-CAM.
U poželjnom ostvarenju, takav stanični membranski antigen je tumor-povezani antigen. U ovom kontekstu, "tumor-povezani antigen" znači strukturu koja je predominantno izložena na tumorskim stanicama i tako omogućuje razlikovanje od ne-malignih tkiva. Poželjno, takav tumor-povezani antigen je smješten na ili u staničnoj membrani tumorske stanice. To, međutim, ne isključuje mogućnost da se takvi antigeni također pojave na ne-degeneriranim stanicama. Tumor-povezani antigeni mogu, na primjer, biti polipeptidi, naročito glikozilirani proteini, ili glikozilacijski modeli polipeptida. Druge strukture koje mogu predstavljati tumor-povezani antigen se, npr., glikolipidi. Oni uključuju, na primjer, gangliozide, kao što je GM2. Dalje, tumor-povezani antigeni mogu biti predstavljeni promjenama u sastavu lipida stanične membrane, koje mogu biti karakteristične za stanice raka.
Primjeri tumor-povezanih antigena su N-CAM, Lewis-ov Y ugljikohidratni antigen, CEA i EpCAM, koji su već bili ranije spomenuti. Daljnji primjeri su Sialyl Tn ugljikohidrat, Globo H ugljikohidrat, gangliozidi kao npr. GD2/GD3/GM2, prostata-specifični antigen (PSA), CA 125, CA 19-9, CA 15-3, TAG-72, EGF receptor, Her2/Neu receptor, p97, CD20 i CD21. Dostupna su monoklonalna antitijela usmjerena protiv svih tih antigena. Daljnji tumor-povezani antigeni su opisani, npr., u DeVita i sur. (Eds., "Biological Therapy of Cancer", 2. izdanje, poglavlje 3: biologija tumorskih antigena, Lippincott Company, ISBN 0-397-51416-6 (1995)).
Termin "antitijelo" se odnosi na antitijela svih mogućih tipova, naročito na poliklonalna ili monoklonalna antitijela ili također na antitijela proizvedena kemijskim, biokemijskim ili genetskim tehnološkim postupcima. Postupci za proizvodnju takvih molekula su stručnjaku poznati. Način proizvodnje antitijela nije važan. Poželjno, upotrebljavaju se monoklonalna antitijela, najpoželjnije monoklonalna antitijela životinjskog porijekla, naročito porijekla od glodavaca. Naročito je poželjno da se upotrebljava monoklonalno antitijelo HE-2 glodavca, koje se može proizvesti kako je opisano, ili antitijelo koje ima jednako finu specifičnost vezanja kao HE2. Unutar značenja sadašnjeg izuma, termin "antitijelo" također uključuje fragmente i derivate antitijela, pritom ti fragmenti ili derivati prepoznaju TAA. Terapijski djelotvorni imuni odgovor, koji se inducira cijepljenjem s odgovarajućim antitijelima usmjerenim protiv TAA se određuje prema veznoj regiji tih antitijela, tj. prema njihovom idiotipu. Zbog toga je, u principu, također moguće upotrijebiti, umjesto intaktnih antitijela, fragmente ili derivate tih antitijela za uspješno ciejpljenje, sve dok ti derivati sadržavaju idiotip odnosnog početnog antitijela. Kao primjeri, bez ograničavanja, mogu se nabrojiti: F(ab)'2 fragmenti, F(ab)' fragmenti, Fv fragmenti, koji se mogu proizvesti ili poznatim biokemijskim postupcima (enzimsko cijepanje), ili poznatim postupcima molekulske biologije. Daljnji primjeri su derivati antitijela, koji se mogu proizvesti poznatim kemijskim, biokemijskim ili genetskim tehnološkim postupcima. U ovom kontekstu, termin "derivat", naročito, također uključuje produkte koji mogu nastati kemijskim vezanjem antitijela (fragmenata antitijela) s molekulama koje mogu pojačati imuni odgovor, kao što je tetanus toksoid, Pseudomonas egzotoksin, derivati lipida A, GM-CSF, IL-2, ili kemijskim vezanjem antitijela (fragmenata antitijela) s lipidima, za bolje uklapanje u pripravak liposoma. Termin "derivat" također uključuje fuzijske proteine antitijela (fragmenata antitijela), koji su proizvedeni genskom tehnologijom, s polipeptidima koji pojačavaju imuni odgovor, kao što su GM-CSF, IL-2, IL-12, C3d itd. Prema izumu, antitijela mogu, naravno, biti primijenjena u kombinaciji jedno s drugim. To znači da se mogu primijeniti dva ili više antitijela koja prepoznaju različite membranske antigene ili različite epitope istog membranskog antigena. Različita antitijela se mogu primijeniti istovremeno (zajedno ili odvojeno) ili jedno za drugim. Stanice raka često eksprimiraju nekoliko TAA u isto vrijeme, protiv kojih su dostupna ili se mogu razviti odgovarajuća antitijela za cijepljenje. Da bi se postigao pojačani ili moguće sinergistički učinak na inducirani imuni odgovor i smanjila moguća opasnost selekcije antigen-negativnih varijanti i da bi se suprotstavilo mogućoj heterogenosti tumorskih stanica, može biti korisno upotrijebiti kombinaciju dva ili više prikladnih antitijela ili njihovih fragmenata ili derivata istovremeno za cijepljenje.
U kontekstu sadašnjeg izuma, termin "cijepljenje" znači aktivnu imunizaciju, tj. indukciju specifičnog imunog odgovora zbog primjene (npr. potkožne, intradermalne, intramuskularne, moguće također oralne, nazalne) male količine antigena (tvari koju cijepljeni pojedinac prepoznaje kao stranu i prema tome imunogenu) u prikladnom imunogenom pripravku. Antigen se dakle upotrebljava kao "okidač" za imuni sustav, da potakne specifični imuni odgovor protiv antigena. U principu, potrebne količine antigena mogu biti vrlo male (neka cjepiva sadržavaju samo oko 5-10 µg antigena po dozi cjepiva).
Karakteristika aktivne imunizacije jest da krivulja doza-učinak, u širokom opsegu, samo malo ovisi o količini primijenjenog antigena. To znači da je imuni odgovor manje ili više identičan za široki opseg doza. Kao posljedica, u slučaju cijepljenja, željeni učinak, tj. indukcija imunog odgovora, se može postići već sa vrlo malim količinama antigena. Međutim, može se također, na komparabilan način, postići upotrebom bitno većih količina antigena. Naravno, općenito je poželjno upotrijebiti što je moguće manju dozu, naročito s obzirom na nuspojave, trošak materijala itd., što je važno kod cijepljenja.
U smislu sadašnjeg izuma, cijepljenje se može izvesti u terapijskom smislu, kao i u profilaktičkom smislu (kao što je slučaj kod svih antimikrobnih cjepiva). To znači da se cijepljenje protiv raka prema sadašnjem izumu može podrazumijevati i kao terapijska i profilaktička primjena. Prema tome, po potrebi je moguće postići profilaktičku zaštitu protiv nastajanja raka, cijepljenjem pojedinaca koji nemaju rak. Pojedinci na kojima se takvo profilaktičko cijepljenje može primijeniti su pojedinci koji imaju povećani rizik razvijanja bolesti raka, iako ova primjena nije ograničena na takve pojedince.
Upotreba prema sadašnjem izumu se razlikuje bitno od osnovnih mogućnosti terapijskih primjena antitijela za liječenje raka, koje su do sada bile poznate i koje su opisane ranije u tekstu, i omogućuje neočekivano djelotvoran tretman.
Vezna regija antitijela protiv TAA može predstavljati strukturnu komplementarnu sliku veznog epitopa odnosnog TAA prema principu "ključ i brava". To znači da takvo antitijelo ima, u svom idiotipu, strukturnu informaciju o epitopu TAA protiv kojeg je usmjereno. Dakle, ako se pacijent s rakom cijepi s odgovarajućim imunogenim antitijelom protiv TAA (tj. na primjer s MAB glodavca protiv TAA), u pacijentu se proizvode antitijela koja su, djelomično, usmjerena protiv idiotipa antitijela upotrijebljenog kao cjepivo i koje može strukturno oponašati epitop TAA prema principu "ključ i brava". To znači da se zahvaljujući takvom cijepljenju, tako reći, razvijaju topljive varijante epitopa TAA u pacijentu s rakom, koje mogu biti djelotvorne kao aktivno inducirana autologna antitijela u dugom vremenskom periodu i čiji titar se može pojačati u odgovarajućim intervalima ponavljanjem cijepljenja.
U poželjnom ostvarenju, ljudski stanični membranski antigen je struktura koja ima ulogu u procesima adhezije. U ovom kontekstu, procesi adhezije su poželjno interakcije stanica-stanica, u kojima su uključeni ligandi ili receptori na staničnoj površini. Dakle, adhezijske molekule su ligandi ili receptori na staničnoj površini koji služe za interakciju stanica-stanica. Podskupina takvih adhezijskih molekula su samo-adhezijske molekule. One imaju sposobnost da se vežu same za sebe.
Fiziološki učinak imunog odgovora induciranog cijepljenjem s antitijelom usmjerenim protiv TAA naravno ovisi o funkciji odnosnog TAA. Ako TAA ima, na primjer, funkciju receptora za adheziju tumorskih stanica, naročito za ligand na endotelnim stanicama vaskularnog sustava (takvo svojstvo je bitno za sposobnost diseminiranih tumorskih stanica da izađu iz vaskularnog sustava i smjeste se u tkiva da bi stvorile metastazu), ta sposobnost adhezije se smanjuje cijepljenjem s odgovarajućim antitijelom usmjerenim protiv tog TAA, budući da će inducirana antitijela, koja će se natjecati za interakciju TAA s njegovim ligandom jer oponašaju TAA u topljivom obliku, biti trajno prisutna u cirkulaciji i tkivu.
Općenito govoreći, moguće je, prema objašnjenjima danima iznad, cijepljenjem s odgovarajućim antitijelima protiv TAA koji imaju funkciju s obzirom na malignost tumorskih stanica, postići da inducirani imuni odgovor interferira s funkcijom TAA u njegovoj interakciji s njegovim ligandom i ometa ili sprečava tu interakciju. To znači da stanice raka ne mogu ili ne mogu dovoljno izraziti svojstva koja su važna za maligni fenotip, što omogućava usporavanje ili zaustavljanje razvoja bolesti i suprimiranje razvoja metastaza, naročito u ranom stadiju.
U daljnjem poželjnom ostvarenju, stanični membranski antigen je sposoban za samo-adheziju, tj. određeni epitopi antigena su odgovorni za homofilno vezanje za isti antigen na drugoj stanici. Primjeri takvih antigena su, među ostalim, N-CAM (neuronska stanična adhezijska molekula), CEA (karcino-embrionski antigen) i Ep-CAM (epitelna stanična adhezijska molekula). Antitijela usmjerena protiv epitopa samo-adhezijskih antigena koji su uključeni u tu funkciju mogu, kako je opisano iznad, sadržavati strukturnu informaciju koja je komplementarna takvom epitopu. Cijepljenjem s takvim antitijelima je, prema tome, moguće, kako je opisano iznad, inducirati stvaranje antitijela koja imaju svojstvo autoadhezije u reakciji vezanja. Obratno, to znači da se takva inducirana antitijela mogu vezati za samo-adhezijski antigen, budući da su u tom slučaju antigen i receptor identični. Dakle, moguće je inducirati imuni odgovor cijepljenjem pacijenata s rakom s odgovarajućim antitijelima usmjerenim protiv samo-adhezijskih antigena, gdje se spomenuti imuni odgovor u obratu direktno veže za tumorske stanice i tako pokreće razne terapijske učinke. S jedne strane, sposobnost autoadhezije, koja je važna za maligne stanice, se blokira, i, s druge strane, ljudske efektorske funkcije, kao što je komplement-ovisna liza i/ili liza zbog aktivacije citotoksičnih efektorskih stanica, se može pokrenuti vezanjem induciranih antitijela za tumorske stanice, što dovodi do uništavanja tumorskih stanica.
Svim gore spomenutim mehanizmima i djelovanjima, stvaranje novih metastaza se može suprimirati i širenje bolesti se može, najmanje, usporiti zahvaljujući cijepljenju pacijenata s rakom s odgovarajućim antitijelima protiv TAA. U ranim stadijima bolesti, na primjer nakon uspješne operacije primarnog tumora (adjuvantni* stadij), preostale diseminirane tumorske stanice se sprečavaju od toga da od sebe stvore nove metastaze zbog takvih cijepljenja. To omogućuje produljenje perioda preživljavanja bez relapsa i prema tome ukupni život tih pacijenata. Po potrebi bi bilo moguće postići doživotnu zaštitu od stvaranja metastaza pomoću takvih cijepljenja i ponovnih cijepljenja koja se izvode u odgovarajućim intervalima. Od naročitog su interesa cijepljenja pacijenata s rakom s odgovarajućim antitijelima usmjerenim protiv samo-adhezijskih TAA budući da je u tim slučajevima, kako je gore opisano, moguće postići pojačano terapijsko djelovanje zbog dodatnog direktnog napada induciranog imunog odgovora na tumorske stanice.
U daljnjem poželjnom ostvarenju, farmaceutski pripravak koji se izrađuje za upotrebu prema sadašnjem izumu, sadrži najmanje jedno pomoćno sredstvo koje se uobičajeno upotrebljava u pripravcima cjepiva osim antitijela. Moguće je pojačati imuni odgovor takvim pomoćnim sredstvima. Kao primjeri pomoćnih sredstava, ali bez ograničavanja na njih, sljedeća se mogu nabrojiti: aluminij hidroksid (Alu gel), derivati lipopolisaharida, Bacillus Calmette Guerin (BCG), pripravci liposoma, pripravci s dodatnim antigenima protiv kojih je imunološki sustav već proizveo jaki imuni odgovor, kao na primjer tetanus toksoid, Pseudomonas egzotoksin, ili konstituenti virusa gripe, po potrebi u pripravku liposoma, biološka pomoćna sredstva kao npr. granulocit makrofag stimulirajući faktor (GM-CSF), interleukin 2 (IL-2) ili gama interferon (IFNγ).
U drugom poželjnom ostvarenju, farmaceutski pripravak dobiven za upotrebu prema izumu je prikladan za primjenu za cijepljenje u dozi od 0,01 do 4 mg antitijela, poželjno 0,5 mg.
Cijepljenje se može izvesti jednom primjenom gore spomenute doze. Međutim, poželjno se cijepljenje izvodi ponavljanjem aplikacija. Broj ponavljanja je u opsegu od 1 do 12 godišnje, poželjnije u opsegu od 4 do 8 godišnje. Doza može ostati ista ili se može smanjiti.
(Booster)* cijepljenja se mogu provoditi u pravilnim intervalima, u principu, doživotno. Prikladni intervali su u opsegu od 6 do 24 mjeseca i mogu se odrediti praćenjem titra induciranih antitijela (*booster cijepljenje bi trebalo provesti čim titar induciranih antitijela značajno padne).
Primjena antitijela se može izvesti postupcima koji su poznati stručnjaku. Poželjno, farmaceutski pripravak koji sadrži antitijelo je prikladan za subkutanu, intradermalnu ili intramuskularnu primjenu.
Sadašnji izum se dalje odnosi na upotrebu antitijela koja prepoznaju tumor-povezani antigen, za cijepljenje protiv bolesti raka, kao i za postupak za tretiranje bolesti raka cijepljenjem, pritom jedno ili više antitijela koja prepoznaju TAA se daju pacijentu u količini koja je dovoljna za cijepljenje. Za definicije i poželjna ostvarenja vrijedi isto kao što je već opisano ranije, u vezi s upotrebom prema izumu.
Upotreb antitijela usmjerenih protiv TAA, ili njihovih derivata ili fragmenata kao cjepiva se bitno razlikuje od poznatih primjena takvih anti-TAA antitijela za pasivnu imunoterapiju. Neke osnovne prednosti upotrebe prema izumu, u usporedbi s imuno terapijom pasivnim antitijelima, su kratko opisane u nastavku:
Antitijela usmjerena protiv TAA za pasivnu imunoterapiju raka:
- visoka doza (≥ 100 mg / intravenska infuzija)
- kratki učinak zbog eliminacije efektivnog sredstva
- ksenogeno antitijelo nepoželjno zbog imunogenosti
- trajanje terapije je ograničeno, naročito u slučaju ksenogenih antitijela, zbog indukcije imunog odgovora i opasnosti anafilaktičkih reakcija time uzrokovanih, u slučaju ponovljenih primjena
Antitijela usmjerena protiv TAA za profilaktičko i/ili terapijsko cijepljenje protiv raka:
- niska doza (< 1 mg / cijepljenje; subkutana, intradermalna ili intramusklarna injekcija)
- dugotrajni učinak direktno induciranog imunog odgovora
- ksenogena antitijela poželjna budući da se učinka temelji na imunogeničnosti
- trajanje tretmana neograničeno (*booster cijepljenja su uvijek moguća)
Dalje, bit će opisani pokusi koji pokazuju da cijepljenje s određenim MAB (HE2) glodavca, koje je usmjereno protiv samo-adhezijskog TAA Ep-CAM, ili cijepljenje s njegovim F(ab)'2 fragmentom direktno dovodi do indukcije antitijela koja se selektivno vežu za ljudske tumorske stanice koje eksprimiraju taj antigen. To pokazuje, kao primjer ali bez ograničenja, da se imuni odgovor, koji može imati terapijski učinak kod bolesti raka, inducira cijepljenjem s odgovarajućim antitijelima usmjerenim protiv samo-adhezijskih TAA ili njihovim derivatima koji sadrže barem idiotip početnog antitijela.
Za tu svrhu, monoklonalno antitijelo glodavca HE2 je dobiveno prema opisanim standardnim postupcima tehnologije hibridoma (vidi, npr., H. Zola. Monoclonal Antibodies: A Manual of Techniques. CRC Press, Inc. ISBN 0-8493-6476-0; 1988). Balb/c miševi su imunizirani s ljudskim stanicama kolorektalnog raka prema standardnim protokolima. Stanice slezene su spojene s mišjom linijom melanoma P3X63Ag8 i odabrani su hibridomi koji proizvode antitijela koja se selektivno vežu za ljudske stanice kolorektalnog raka, ali ne za stanice melanoma. Konačno, odabran je hibridom koji je izlučivao IgG2a/kapa antitijelo. Ovo antitijelo (HE2) se veže za Ep-CAM što se može pokazati, npr., Western Blot analizom s membranskim pripravcima iz KATO III stanica raka želuca upotrebom poznatog Ep-CAM antitijela (KS1-4) za usporedbu.
Aminokiselinski sljedovi varijabilnih regija MAB HE2 su kako slijedi:
Teški lanac:
QVQLQQSGAELVRPGTSVKVSCKASGYAFTNYLIEWVKQRPGQGLEWIGVINPGSGGTNYNEKFKGKATLTADKSSSTAYMQLSSLTSDDSAVYFCARDGPWFAYWGQGTLVTVSA (SEQ ID NO. 1)
Laki lanac:
NIVMTQSPKSMSMSVGERVTLTCKASENVVTYVSWYQQKPEQSPKLLIYGASNRYTGVPDRFTGSGSATDFTLTISSVQAEDLADYHCGQGYSYPYTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO. 2)
Slike prikazuju:
Slika 1 pokazuje inhibiciju autoadhezije linije SW2 raka pluća malih stanica pomoću MAB HE2 in vitro.
Slika 2 pokazuje samo-adheziju linije SW2 ljudskog raka pluća malih stanica bez utjecaja MAB HE2 in vitro, kao kontrola za pokus prikazan na slici 1.
Slika 3 pokazuje indukciju imunog odgovora antitijela protiv he2 nakon cijepljenja koza sa f(ab)'2 fragmentom he2, određeno pomoću elisa.
Slika 4 pokazuje indukciju imunog odgovora antitijela protiv Ep-CAM pozitivnih stanica ljudskog raka želuca (Kato III) nakon cijepljenja koza sa F(ab)'2 fragmentom HE2, određeno ELISA ispitivanjem stanica.
Slika 5 pokazuje odsutnost imunog odgovora antitijela protiv Ep-CAM negativnih stanica ljudskog melanoma (WM9) nakon cijepljenja koza sa F(ab)'2 fragmentom HE2, određeno ELISA ispitivanjem stanica, koje je izvedeno kao kontrola za pokus prikazan na slici 4.
Slika 6 pokazuje vezanje afinitetno pročišćene frakcije seruma koza, koje su cijepljene sa F(ab)'2 fragmentom HE2, za Ep-CAM pozitivne stanice ljudskog raka želuca (Kato III), određeno ELISA ispitivanjem stanica.
Slika 7 pokazuje odsutnost vezanja afinitetno pročišćene frakcije seruma koza, koje su cijepljene sa F(ab)'2 fragmentom HE2, za Ep-CAM negativne stanice ljudskog melanoma (WM9), određeno ELISA ispitivanjem stanica, koje je izvedeno kao kontrola za pokus prikazan na slici 6.
Slika 8 pokazuje indukciju imunog odgovora antitijela protiv HE2 nakon cijepljenja rezus majmuna sa 0,5 mg HE2 adsorbiranog na aluminij hidroksid, određeno pomoću ELISA.
Slika 9 pokazuje indukciju imunog odgovora antitijela protiv Ep-CAM pozitivnih stanica ljudskog raka želuca (Kato III) nakon cijepljenja rezus majmuna sa 0,5 mg HE2 adsorbiranog na aluminij hidroksid, određeno pomoću ELISA ispitivanja stanica.
Slika 10 pokazuje indukciju imunog odgovora antitijela protiv HE2 detektiranog u povezanosti sa studijom o toksičnosti sa rezus majmunima nakon cijepljenja jedne skupine rezus majmuan sa 0,5 mg HE2 adsorbiranog na aluminij hidroksid, kao i odsutnost imunog odgovora protiv HE2 nakon tretiranja druge skupine rezus majmuna pripravkom aluminij hidroksida bez antigena (placebo), određeno ELISA ispitivanjem.
Slika 11 pokazuje primjer indukcije imunog odgovora antitijela protiv Ep-CAM pozitivnih stanica ljudskog raka želuca (Kato III) nakon ponovljenih cijepljenja pacijenta koji pati od raka crijeva sa 0,5 mg HE2 adsorbiranog na aluminij hidroksid, određeno pomoću ELISA ispitivanja stanica.
Slika 12 pokazuje indukciju imunog odgovora antitijela protiv Ep-CAM pozitivnih ljudskih stanica raka želuca (Kato III) nakon ponovljenih cijepljenja pacijenta koji pati od raka crijeva sa 0,5 mg HE2 adsorbiranog na aluminij hidroksid, određeno pomoću ELISA ispitivanja stanica.
Slika 13 pokazuje indukciju serumske citotoksičnosti protiv Ep-CAM pozitivnih ljudskih stanica raka želuca (Kato III) nakon ponovljenih cijepljenja pacijenta koji pati od raka crijeva sa 0,5 mg HE2 adsorbiranog na aluminij hidroksid, određeno u pokusu lize stanica.
Sljedeći primjeri služe da dalje ilustriraju izum, ali ga ne ograničavaju:
Da bi se pokazalo da se MAB HE2 glodavca veže za epitop samo-adhezijskog antigena Ep-CAM, koji je uključen u homofilno vezanje, ispitan je utjecaj HE2 na sposobnost autoadhezije ljudske stanične linije SW2. Ova linija karcinoma pluća malih stanica teži formiranju staničnih grozdova u in vitro kulturi nekoliko sati nakon prethodnog jednog zasijavanja. Opis pokusa se može pronaći u primjeru 1. Kako je očito iz slika 1 i 2, formiranje staničnih grozdova se u velikom opsegu sprečava dodavanjem HE2. To dokazuje da se HE2 veže za epitop Ep-CAM, koji je uključen u homofilno vezanje tog membranskog proteina.
Da bi se mogao ispitati direktni humoralni imuni odgovor na cijepljenje sa F(ab)'2 fragmentom MAB HE2 glodavca, koze su imunizirane s tim fragmentom. Fragment je dobiven postupcima koji su poznati i opisani kao cijepanje HE2 sa pepsinom i pročišćen. Imunizacija koza je opisana u primjeru 2.
Prvo, kozji imunoserum koji je regeneriran i skupljen u jednu cjelinu se ispituje, u usporedbi sa predserumom, na imunoglobuline koji su usmjereni protiv MAB HE2, da bi se odredio ukupni imuni odgovor cijepljenih koza. Ovo ispitivanje je izvedeno pomoću ELISA testa, čiji eksperimentalni opis je dan u primjeru 3. Rezultat ovog pokusa je prikazan na slici 3: koze su, zbog cijepljenja s F(ab)'2 fragmentom MAB HE2, razvile snažan imuni odgovor na njega, dok u predserumu nisu bila pronađena antitijela protiv HE2.
Dalje, ispitano je da li je moguće detektirati imunoglobuline u kozjem imunoserumu, koji se vežu za ljudske stanice raka koje eksprimiraju TAA protiv kojega je usmjereno MAB HE2 (Ep-CAM). Za tu svrhu, upotrijebljena je stanična linija raka želuca KATO III. Također je ispitano vezanje za ljudsku staničnu liniju, koja ne eksprimira Ep-CAM (WM9 stanice melanoma), kao kontrola. Ta ispitivanja su izvedena pomoću ELISA ispitivanja stanica, čiji eksperimentalni opis je dan u primjeru 4. Rezultati tih pokusa su prikazani na slikama 4 i 5: kozji imunoserum sadrži imunoglobuline koji se snažno vežu za Ep-CAM pozitivne KATO stanice, dok se vezanje ne može detektirati na Ep-CAM negativnim WM9 stanicama. Predserum ne sadrži antitijela koja se vežu za te stanice. Ovaj vrlo iznenađujući rezultat pokazuje da su antitijela razvijena cijepljenjem sa HE2-F(ab)'2 fragmentom zaista sposobna da se vežu za stanice koje eksprimiraju TAA, koje prepoznaje HE2. Posljedično, funkcija TAA za samo-adheziju bi se mogla prenijeti na antitijela koja se razvijaju cijepljenjem s HE2, što je prethodno detaljno opisano.
Da bi se dokazalo, da antitijela proizvedena u kozama zbog cijepljenja sa F(ab)'2 fragmentom HE2 i koja su usmjerena protiv idiotipa tog MAB, su zaista ona koja se vežu za KATO stanice, antiidiotipski dio tih induciranih antitijela je specifično pročišćen iz kozjeg imunoseruma uz pomoć slijeda imunoafinitetnih kromatografija kako je uglavnom opisano ("Proc. Natl. Acad. Sci. USA", 81, 216, (1984)). Sekvenca koraka pročišćavanja je ponovno kratko opisana u primjeru 5.
Ta afinitetno pročišćena kozja antitijela su ponovno testirana na njihovo vezanje za Ep-CAM pozitivne KATO stanice, kao i za Ep-CAM negativne WM9 stanice. Opis pokusa je dan u primjeru 6. Rezultat tih pokusa je prikazan na slikama 6 i 7: kozji IgG, koji je usmjeren protiv idiotipa HE2, se snažno veže za Ep-CAM pozitivne KATO stanice, dok se nespecifični kozji IgG jedva veže. Vezanje afinitetno pročišćenog specifičnog kozjeg IgG za Ep-CAM negativne WM9 stanice, međutim, se ne razlikuje od onog nespecifičnog kozjeg IgG. Tako je dokazano da dio antitijela koja su direktno razvijena zbog cijepljenja sa F(ab)'2 fragmentom HE2 i koja su usmjerena protiv idiotipa tog antitijela, sadrži antitijela koja se vežu za stanice raka koje eksprimiraju TAA, što prepoznaje HE2. Ovim pokusom je također zaključno pokazano da antitijela protiv Ep-CAM pozitivnih stanica induciranih cijepljenjem sa HE2 nisu rezultat dvostruko autologne idiotipske mrežne kaskade, što je postulirano u nekoliko publikacija (vidi, npr.: Cancer Immunol. Immunother. 42 (1996), 81-87), jer takva antiidiotipska antitijela (Ab3) nisu sva mogla biti pročišćena afinitetnom kromatografijom na Ab1 (= HE2) stupcu budući da, prema idiotipskoj mreži, ona se ne mogu vezati za Ab1, nego samo za Ab2.
S obzirom na gore opisane rezultate imunizacije koza sa F(ab)'2 fragmentom HE2, također su provedene studije cijepljenja s rezus majmunima da bi se potvrdili imunološki rezultati kod vrste koja je bliska čovjeku. Za te pokuse, cjelovito MAB HE2 glodavca je upotrijebljeno kao imunogen. Pretpostavljeno je da bi Fc dio glodavca kao veliki ksenogeni protein također pojačao imuni odgovor protiv idiotipa (efekt nosača). Da bi se izbjegle moguće nuspojave, upotrijebljen je aluminij hidroksid kao blagi adjuvans. Dobivanje pripravka za te pokuse cijepljenja je opisano u primjeru 7.
Pripravak opisan u primjeru 7 je injiciran subkutano u stražnjicu četiri rezus majmuna (0,5 mg HE2 = 0,5 ml po cijepljenju, primijenjeno dva puta u intervalu od četiri tjedna). Za dobivanje seruma, krv je izvađena u nekoliko vremenskih točaka.
Prvo, imuni odgovor protiv HE2 je određen u ELISA. Eksperimentalni opis je dan u primjeru 8. Kako je prikazano na slici 8, signifikantni titar antitijela protiv HE2 se može izmjeriti već na dan 29.
Dalje je ispitano, da li su cijepljenjem inducirana antitijela koja se vežu za KATO III stanice. Za te testove, upotrijebljeno je ELISA ispitivanje stanica. Eksperimentalni opis je dan u primjeru 9. Kako je prikazano na slici 9, antitijela koja se vežu za Ep-CAM pozitivne KATO III tumorske stanice su već inducirana u danu 29 kod svih životinja.
Dalje, četiri životinje su cijepljene sa HE2 adsorbiranim na aluminij hidroksid, povezano sa studijom toksičnosti kod rezus majmuna. Četiri druga rezus majmuna su primila aluminij hidroksid kao placebo. Dobivanje pripravaka je opisano u primjerima 10 i 11. Ukupno, rezus majmuni su injicirani subkutano u stražnjicu četiri puta sa 0,5 ml pojedinačnog pripravka (aktivno sredstvo ili placebo) (dani 1, 15, 29 i 57). Za dobivanje seruma, krv je izvađena prije početka studije i nekoliko puta za vrijeme tretmana.
Ponovno, imuni odgovor protiv HE2 je najprije određen u ELISA. Eksperimentalni opis je dan u primjeru 8. Kako je prikazano na slici 10, sva četiri rezus majmuna su razvila značajan humoralni imuni odgovor protiv HE2 već nakon jednog cijepljenja. koji je dalje pojačan drugim cijepljenjem, dok majmuni iz placebo skupine ne pokazuju nikakvo povećanje u titru antitijela protvi HE2.
Ti pronalasci su dalje potvrđeni imunoafinitetnim pročišćavanjem seruma od dana 43 rezus majmuna iz HE2 skupine. Eksperimentalni opis je dna u primjeru 12. Kako je pirkazano u sljedećoj tablici, sva četiri majmuna su razvila jaki imuni odgovor proti vHE2 (sekundarni imuni odgovor) u svom serumu na dan 43, dok je IgM dio komparabilan s onim iz predseruma.
[image]
Također je ispitana indukcija antitijela protiv Ep-CAM pozitivnih Kato III stanica. Ponovno, za te testove je upotrijebljeno ELISA ispitivanje stanica. Eksperimentalni opis je dan u primjeru 9. Kako je pokazano na slici 11, rezus majmuni iz HE2 skupine su razvili antitijela protiv Kato III stanica već na dan 29.
S obzirom na gore opisane rezultate cijepljenja koza i rezus majmuna, pacijent koji pati od raka crijeva s metastazama (Dukes D) je dalje cijepljen s MAB HE2, adsorbiranim na aluminij hidroksid, u neobjavljenom slučaju. Dobivanje pripravka je opisano u primjeru 7. Ukupno, pacijent je injiciran četiri puta (dan 1, 50, 78, 114) subkutano u gornje ekstremitete sa 0,5 ml ovog pripravka (odgovara 0,5 mg HE2). Krv je izvađena za dobivanje seruma prije svakog cijepljenja i na dan 128. Prvo, ispitano je da li su cijepljenjem inducirana antitijela koja se vežu za KATO III stanice. Ponovno je za te testove upotrijebljeno ELISA ispitivanje stanica. Eksperimentalni opis je dan u primjeru 9. Rezultati tih pokusa su prikazani na slici 12. Visoki titri antitijela koja se vežu za KATO III stanice su očito inducirani kod ovog pacijenta s rakom zbog cijepljenja.
Dalje je ispitano, da je antitijela inducirana cijepljenjem s HE2 posreduju citotoksični efekt protiv KATO III stanica ex vivo. Za tu svrhu, KATO III stanice su inkubirane sa pre- i imunoserumima tog pacijenta s rakom, da bi se pokazala komplement-ovisna liza posredovana induciranim antitijelima. Eksperimentalni opis je dan u primjeru 13.
Rezultati su prikazani na slici 13. Antitijela inducirana cijepljenjem s HE2 su očito sposobna za uništavanje Ep-CAM pozitivnih KATO III stanica preko komplement-ovisne lize u autolognom serumu pacijenta.
Gore opisani pokusi primjerno pokazuju da cijepljenje s odgovarajućim antitijelima protiv samo-adhezijskih TAA, kao što je Ep-CAM, ili njihovim derivatima s istim idiotipom kao pojedinačna početna antitijela, okida humoralni imuni odgovor koji se selektivno veže za tumorske stanice koje eksprimiraju taj samo-adhezijski TAA. Inducirana antitijela mogu pokazati citotoksični potencijal protiv takvih tumorskih stanica. Cijepljenje s takvim antitijelima može prema tome dovesti do terapijskog učinka kod bolesti raka.
Primjeri
Upotrijebljeni materijali:
mikrotitracijske ploče: Immuno Plate F96 MaxiSorp (Nunc) za ELISA
Cell Culture Cluster (Costar; Cat. Nr. 3598) za ELISA stanica
stanične linije: SW2: ljudska linija karcinoma pluća malih stanica, Ep-CAM pozitivna
KATO III: ljudska stanična linija raka želuca, Ep-CAM pozitivna (ATCC HTB 103)
WM9: ljudska stanična linija melanoma, Ep-CAM negativna
pufer za spajanje: 0,1 M NaHCO3
0,5 M NaCl
pH vrijednost 8,0
pufer za pročišćavanje A: PBS def
0,2 M NaCl
pH vrijednost 7,2
pufer za pročišćavanje B: 0,1 M glicin / HCl
0,2 M NaCl
pH vrijednost 2,9
medij A: RPMI 1640 + 2 g/l NaHCO3
100 jed/ml penicilin G
100 µg/ml streptomicin sulfat
4 mM glutamin
10% serum goveđeg fetusa (inaktiviran toplinom)
pufer za povezivanje: 15 mM Na2CO3
35 mM NaHCO3
3 mM NaN3
pH vrijednost: 9,6
PBS deficijent: 138 mM NaCl
1,5 mM KH2PO4
2,7 mM KCl
6,5 mM NaH2PO4
pH vrijednost: 7,2
otopina za fiksiranje: 0,1% glutaraldehid u fiziološkoj otopini NaCl
pufer za ispiranje A: 2% NaCl
0,2% Triton X-100
u PBS deficijentu
pufer za ispiranje B: 0,05% Tween 20 u PBS deficijentu
pufer za blokiranje A: 5% serum goveđeg fetusa (inaktiviran toplinom)
u PBS deficijentu
pufer za blokiranje B: 1% goveđi serumski albumin
0,1% NaN3
u PBS deficijentu
pufer za razrjeđenje A: 2% serum goveđeg fetusa (inaktiviran toplinom)
u PBS deficijentu
pufer za razrjeđenje B: PBS deficijent
pufer za pravljenje mrlja: 24,3 mM limunska kiselina
51,4 mM Na2HPO4
pH vrijednost: 5,0
supstrat: 40 mg o-fenilen diamin dihidroklorida
100 ml pufera za pravljenje mrlja
20 µl H2O2 (30%)
otopina za prekidanje: 4 N H2SO4
Primjer 1:
In vitro kultivirane SW2 stanice se centrifugiraju i talog se suspendira u mediju A i podesi na 7×104 stanica/ml. U komorama LabTek se ili 0,1 ml PBS def pomiješa sa 0,3 ml suspenzije stanica ili se 0,1 ml PBS def pomiješa sa 40 µg HE2 i zatim sa 0,3 ml suspenzije stanica (konačna koncentracija HE2 100 µg/ml). Neposredno prije nego što se suspenzija stanica doda kao posljednji konstituent, stanice se odvoje pipetom. Odmah nakon miješanja, pojedinačne suspenzije stanica se fotografiraju pod inverznim mikroskopom (povećanje 100 puta). Zatim, suspenzije stanica se kultiviraju 4 sata pri 37 °C / 5% CO2 i zatim ponovno fotografiraju.
Primjer 2:
Dvije koze se svaka cijepe intradermalno na više mjesta sa 1,5 mg F(ab)'2 fragmenta u 3 ml PBS deficijenta zajedno sa 3 ml Freund's Complete Adjuvant (Difco). Na dan 8, daje se prvo cijepljenje za pojačanje kao na dan 1, sa Freund's Complete Adjuvant (Difco). Na dan 29, na isti način se daje drugo cijepljenje za pojačanje. Međutim, ne dodaje se adjuvans. Krv se uzima prije početka cijepljenja i na dan 54, za dobivanje seruma za analizu razvijenog imunog odgovora.
Primjer 3:
100 µl alikvoti MAB HE2 (otopina sa 10 μg/ml u puferu za povezivanje) se inkubiraju u otvorima mikrotitracijske ploče 1 sat pri 37 °C. Nakon ispiranja ploče s puferom za ispiranje A šest puta, doda se 200 μl pufera za blokiranje A u svaki otvor i ploča se inkubira 30 minuta pri 37 °C. Nakon ispiranja ploče kako je opisano iznad, 100 μl alikvoti kozjih seruma koje treba testirati se inkubiraju u razrjeđenjima od 1:100 do 1:1.000.000 u puferu za razrjeđivanje A 1 sat pri 37 °C. Nakon ispiranja ploče kako je opisano iznad, 100 μl peroksidaza-konjugiranog zečjeg protukozjeg Ig antitijela (Zymed) se doda u svaki otvor u razrjeđenju do 1:1000 u puferu za razrjeđivanje A i inkubira 30 minuta pri 37 °C. Ploča se ispere sa puferom za ispiranje A četiri puta i dvaput s puferom za pravljenje mrlja. Vezanje antitijela se detektira dodatkom 100 μl specifičnog supstrata u svaki otvor i reakcija pravljenja mrlja se prekine nakon 10 minuta dodatkom 50 μl otopine za prekidanje. Procjena se izvede mjerenjem optičke gustoće (OD) pri 490 nm (valna duljina referentnog mjerenja je 620 nm).
Primjer 4:
Otvori mikrotitracijske ploče se inkubiraju pri +4 °C preko noći sa 100 μl suspenzije stanica stanične linije koja se testira u koncentraciji od 2×106 stanica/ml u mediju A. Nakon odsisavanja supernatanta, ploča se inkubira sa 50 μl otopine za fiksiranje po otvoru 5 minuta na sobnoj temperaturi. Nakon odsisavanja supernatanta, u svaki otvor se doda 200 μl pufera za blokiranje B i ploča se inkubira 1 sat pri 37 °C. Nakon ispiranja dvaput sa 200 μl pufera za ispiranje B, 100 μl alikvoti kozjih seruma koje treba testirati se inkubiraju 1 sat pri 37 °C u razrjeđenjima od 1:10 do 1:100.000 u puferu za razrjeđivanje B. Nakon ispiranja ploče dvaput sa 100 μl ledenog pufera za ispiranje B, doda se 100 μl peroksidaza-konjugiranog zečjeg protukozjeg-Ig antitijela (Zymed) u razrjeđenju od 1:1000 u puferu za razrjeđivanje A i inkubira 45 minuta pri 37 °C. Ploča se ispere tri puta sa 100 μl ledenog pufera za ispiranje B. Vezanje antitijela se detektira dodavanjem 100 μl specifičnog supstrata po otvoru i reakcija stvaranja mrlja se zaustavi nakon oko 10 minuta dodavanjem 50 μl otopine za prekidanje. Procjena je izvedena mjerenjem optičke gustoće (OD) pri 490 nm (valna duljina referentnog mjerenja je 620 nm).
Primjer 5:
Pročišćavanje je principalno opisano u "Proc. Natl. Acad. Sci. USA", 81:216, (1984.) i kratko opisano kako slijedi: u prvom koraku, pročišćavanje ukupnog IgG sadržanog u kozjem serumu se izvede prema poznatim postupcima na DEAE anionskom izmjenjivačkom stupcu. Zatim, kozja antitijela koja su usmjerena protiv konstantnih regija F(ab)'2 fragmenta HE2 se vežu u imunoafinitetnom stupcu (CH-Sepharose 4B, Pharmacia), za koji su spojeni irelevantni IgG2a glodavca, dok se frakcije antiidiotipskih kozjih antitijela ne vežu u ovom stupcu. Prema tome, u zadnjem koraku, protok ove imunoafinitetne kromatografije se veže u imnuoafinitetnom stupcu (CH-Sepharose 4B, Pharmacia), za koji je spojeno HE2. Frakcija specifično vezana u ovom stupcu se eluira s puferom pH 2,8 (0,1 M glicin/HCl) i neutralizira. Kozja IgG frakcija dobivena na ovaj način je usmjerena protiv idiotipa HE2.
Primjer 6:
Ovo ELISA ispitivanje stanica se u biti izvodi na jednak način kako je opisano u primjeru 4. Umjesto razrjeđenja seruma, upotrebljavaju se koncentracije od 100 μg/ml do 0,031 μg/ml imunoafinitetno-pročišćenog kozjeg IgG i nespecifičnog pročišćenog kozjeg IgG, pojedinačno.
Primjer 7:
0,83 ml suspenzije Alu-Gel (Alu-Gel S od Serva, 2%-tna suspenzija, stupanj kvalitete: adjuvans za pripravu cjepiva) se pažljivo potresa 1 sat na sobnoj temperaturi u sterilnim uvjetima sa 0,5 ml otopine 10 mg/ml HE2 uPBS pH 5,5 zajedno sa 3,67 ml PBS def (konačna koncentracija HE2: 1 mg/ml; Alu-Gel S: 0,33%). Zatim, suspenzija se sterilno napuni u injekcijske bočice u alikvotima od 0,5 ml.
Primjer 8:
Ovo ELISA se uglavnom izvodi na jednak način kako je opisano u primjeru 3 s razlikom, što se za detekciju antitijela rezus majmuna (ili ljudskih antitijela), koja su vezana za stanice, upotrebljava peroksidaza-konjugirano kozje-anti-ljudsko-Ig antitijelo (Zymed). Peroksidaza-konjugirano kozje-anti-mišje-Ig antitijelo (Zymed) se upotrebljava za detekciju HE2 glodavca, kao kontrola.
Primjer 10:
3,5 ml otopine HE2 (10 mg/ml u PBS def pH = 5,5) se pomiješa u sterilnim uvjetima sa 0,35 vodene otopine tiomersala (10 mg/ml; Sigma), kao i sa 27,25 ml fiziološke otopine, i doda u 3,9 ml suspenzije aluminij hidroksida (3% u vodi; Alhydrogel, Superfos Biosector, Danska) uz pažljivo potresanje. 0,6 ml suspenzije dobivene na taj način se zatim napuni u staklene epruvete bez pirogena u sterilnim uvjetima, koje se zapečate gumenim zatvaračem s aluminijskom kapicom.
Primjer 11:
Pripravak placeba se načini na jednak način kako je opisano u primjeru 10, osim što se umjesto otopine antitijela upotrijebi 3,5 ml PBS def pH = 5,5 i umjesto otopine tiomersala 0,35 ml fiziološke otopine NaCl.
Primjer 12:
1 g CH-Sepharose 4B (Pharmacia) se suspendira u 30 ml 1 mM HCl 15 minuta. Gel se zatim ispere na filtru od sinter stakla AG3 s 1 litrom 1 mM HCl i nakon toga sa 200 ml pufera za spajanje. 10 mg HE2 (matična otopina 10 mg/ml) se dijalizira protiv oko 0,5 litara pufera za spajanje. Ova otopina se pomiješa sa suspenzijom gela u hermetički zatvorenom spremniku. Omjer gel:pufer od 1:2 daje suspenziju prikladnu za spajanje. Ova suspenzija se potresa 5,5 sati na sobnoj temperaturi. Nakon toga, suvišak liganda se ukloni ispiranjem sa 3 × 30 ml pufera za spajanje. Preostale reaktivne skupine se blokiraju inkubacijom 1 sat na sobnoj temperaturi sa 1 M etanol aminom. Gel se zatim potresa 1 sat na sobnoj temperaturi s 0,1 M Tris-HCl puferom pH = 8. Konačno, gel se ispere sa 3 ciklusa pufera s različitim pH. Svaki ciklus se sastoji od 0,1 M natrij acetatnog pufera pH 4 s 0,5 M NaCl, i nakon toga 0,1 M Tris-HCl pufera pH ( s 0,5 M NaCl. Gel se održava pri 4 °C.
Imunoafinitetno pročišćavanje frakcije antitijela usmjerene protiv HE2 iz seruma rezus majmuna se izvodi prema sljedećim uputama: imunoafinitetno pročišćavanje se izvodi na FPLC sustavu (Pharmacia). 1 ml gela dobivenog prema gornjim uputama se napuni u Pharmacia HR5/5 stupac. 0,5 ml seruma se razrijedi 1:10 s puferom za pročišćavanje A. Ova otopina se pumpa preko stupca brzinom od 1 ml/minuta i ispire s puferom za pročišćavanje A dok se ponovno ne dostigne UV temeljna linija detektora (280 nm). Vezani imunoglobulini se zatim eluiraju s puferom za pročišćavanje B i frakcija se odmah neutralizira nakon desorpcije sa 0,5 M Na2HPO4 i doda se 0,02% NaN3. 50 μl frakcije antitijela pročišćene na tja način se analiziraju na stupcu za frakcioniranje po veličini (SEC, Zorbax 250 GF) i dijelovi IgG i IgM se kvantitativno odrede. Za SEC se upotrebljava 220 mM fosfatni pufer pH 7 + 10%-tni acetonitril kao eluens. Ljudski IgG i ljudski IgM služe kao standard za SEC, gdje se svaki kromatografira u nekoliko koncentracija, za izradu standardne kalibracijske krivulje (površina signala prema koncentraciji). Računanje koncentracija IgG i IgM u afinitetno pročišćenim frakcijama antitijela rezus majmuna se izvede linearnom regresijom upotrebom standardnih krivulja. Koncentracije su označene kao μg/ml upotrijebljenog seruma majmuna.
Primjer 13:
Jedan dan prije izvođenja testa, KATO III stanice se prenesu u svježi medij A i održavaju na 37 °C / 5% CO2 u tikvici sa staničnom kulturom. Sljedeći dan, stanice se prvo označe sa 51Cr. 5×106 stanica se inkubira u 800 μl medija A pri 37 °C / 5% CO2 sa 100 μCi Na251CrO4. Zatim, stanice se isperu s medijem A i podese na gustoću od 2,5×105 stanica/ml. 100 μl alikvoti te suspenzije stanica se pipetiraju u otvore mikrotitracijske ploče. 100 μl alikvoti seruma pacijenta koje treba testirati se dodaju i inkubiraju 3 sata pri 37 °C / 5% CO2 (serumi se pohrane na –80 °C i otope samo jednom za ovo ispitivanje, da bi se izbjeglo oštećenje aktivnosti komplementa). Supernatanti se dobiju upotrebom Skatron-Harvesting-Press i izmjere u gama-brojaču. Kao rezultat, dobiju se vrijednosti "eksperimentalnog otpuštanja". Za određivanje "ukupnog otpuštanja", stanice se obrađuju kako je opisano iznad, gdje se serum zamijeni otopinom 2% SDS, 50 mM Na2CO3 i 10 mM EDTA. Vrijednosti "spontanog otpuštanja" se dobiju zamjenom seruma s medijem A. Rezultat se izračuna kako slijedi:
eksperimentalno otpuštanje – spontano otpuštanje
% lize = --------------------------------------------------------------------------- × 100
ukupno otpuštanje – spontano otpuštanje
Test se izvede 3 puta i izračunaju se srednja vrijednost i standardna devijacija pojedinačnih rezultata.
SEQUENCE LISTING
<110> IGENEON GmbH
<120> Use of antibodies for the vaccination against cancer
<130> D 2923 PCT
<140>
<141>
<160> 2
<170> PatentIn Ver. 2.1
<210> 1
<211> 116
<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 1
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Leu Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Gly Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Asp Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Pro Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ala
115
<210> 2
<211> 107
<212> PRT
<213> Mus musculus
<400> 2
Asn Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser Met Ser Met Ser Val Gly
1 5 10 15
Glu Arg Val Thr Leu Thr Cys Lys Ala Ser Glu Asn Val Val Thr Tyr
20 25 30
Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Ala Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Asp Tyr His Cys Gly Gln Gly Tyr Ser Tyr Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
1
2
2
Claims (9)
1. Upotreba antitijela koje je usmjereno protiv staničnog membranskog antigena Ep-CAM, naznačena time, što se upotrebljava za dobivanje farmaceutskog pripravka za profilaktičko i/ili terapijsko cijepljenje protiv raka.
2. Upotreba prema zahtjevu 1, naznačena time, što antitijelo je životinjskog porijekla.
3. Upotreba prema zahtjevu 1 ili 2, naznačena time, što antitijelo je monoklonalno antitijelo.
4. Upotreba prema zahtjevu 3, naznačena time, što antitijelo je monoklonalno antitijelo glodavca, u kojem varijabilna regija teškog lanca je aminokiselinski slijed kako je prikazana u SEQ ID NO:1 i u kojem varijabilna regija lakog lanca je aminokiselinski slijed kako je prikazana u SEQ ID NO:2.
5. Upotreba prema bilo kojem od zahtjeva 1 do 3, naznačena time, što antitijelo ima jednako finu specifičnost vezanja kao antitijelo definirano u zahtjevu 4.
6. Upotreba prema bilo kojem od zahtjeva 1 do 5, naznačena time, što se jedno ili više antitijela koja su usmjerena protiv različitih epitopa membranskog antigena upotrebljavaju u kombinaciji jedno s drugim.
7. Upotreba prema bilo kojem od zahtjeva 1 do 6, naznačena time, što farmaceutski pripravak također sadrži najmanje jedan adjuvans za cjepivo.
8. Upotreba prema bilo kojem od zahtjeva 1 do 7, naznačena time, što farmaceutski pripravak je prikladan za primjenu antitijela u dozi u opsegu od 0,01 do 4 mg antitijela.
9. Upotreba prema bilo kojem od zahtjeva 1 do 9, naznačena time, što farmaceutski pripravak je prikladan za primjenu potkožnonom, intradermalnom ili intramuskularnom injekcijom.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CH5199 | 1999-01-13 | ||
| PCT/EP2000/000174 WO2000041722A1 (de) | 1999-01-13 | 2000-01-12 | Verwendung von antikörpern zur vakzinierung gegen krebs |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HRP20010526A2 true HRP20010526A2 (en) | 2002-08-31 |
Family
ID=4178206
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HR20010526A HRP20010526A2 (en) | 1999-01-13 | 2001-07-12 | Use of antibodies for anticancer vaccination |
Country Status (28)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US7691372B2 (hr) |
| EP (2) | EP1140168B1 (hr) |
| JP (1) | JP4774551B2 (hr) |
| KR (1) | KR100771752B1 (hr) |
| CN (1) | CN1188169C (hr) |
| AT (2) | ATE219687T1 (hr) |
| AU (1) | AU768515B2 (hr) |
| CA (1) | CA2360382C (hr) |
| CZ (1) | CZ302801B6 (hr) |
| DE (2) | DE50009240D1 (hr) |
| DK (2) | DK1140168T3 (hr) |
| EE (1) | EE05474B1 (hr) |
| ES (2) | ES2177509T3 (hr) |
| HK (1) | HK1044487B (hr) |
| HR (1) | HRP20010526A2 (hr) |
| HU (1) | HU226150B1 (hr) |
| ID (1) | ID30223A (hr) |
| IL (2) | IL144265A0 (hr) |
| IS (1) | IS5998A (hr) |
| MX (1) | MXPA01007148A (hr) |
| NO (1) | NO329917B1 (hr) |
| NZ (1) | NZ512722A (hr) |
| PL (1) | PL201533B1 (hr) |
| PT (2) | PT1140168E (hr) |
| SI (2) | SI1230932T1 (hr) |
| SK (1) | SK286627B6 (hr) |
| TR (1) | TR200102034T2 (hr) |
| WO (1) | WO2000041722A1 (hr) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ302801B6 (cs) * | 1999-01-13 | 2011-11-16 | Igeneon Krebs-Immuntherapie Forschungs Und Entwicklungs-Ag | Použití protilátky namírené proti antigenu bunecné membrány Ep-CAM pro výrobu farmaceutického prostredku |
| AT410172B (de) | 2000-03-21 | 2003-02-25 | Igeneon Gmbh | Verfahren zur herstellung einer vakzineformulierung |
| AT502293B1 (de) * | 2002-05-15 | 2008-03-15 | Igeneon Krebs Immuntherapie | Immunogener, monoklonaler antikörper |
| AT500647A1 (de) * | 2002-05-21 | 2006-02-15 | Igeneon Krebs Immuntherapie | Verwendung eines impfstoffes |
| AT500650B1 (de) * | 2003-04-17 | 2009-11-15 | Altropus Gmbh | Immunogener rekombinanter antikörper |
| AT500651B9 (de) * | 2003-05-27 | 2010-04-15 | Altropus Gmbh | Aktiv immunisierender antikörper |
| AU2004321433B2 (en) | 2004-07-14 | 2011-07-21 | Greenovation Biotech Gmbh | N-glycosylated antibody |
| EP1618890B1 (en) * | 2004-07-20 | 2010-10-06 | Altropus Gmbh | Use of antibodies in a very low dose for the vaccination against cancer |
| KR101205064B1 (ko) * | 2005-04-26 | 2012-11-27 | 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 | 암 면역요법을 위한 조성물과 방법 |
| EP1762575A1 (en) * | 2005-09-12 | 2007-03-14 | Ganymed Pharmaceuticals AG | Identification of tumor-associated antigens for diagnosis and therapy |
| AT504231A1 (de) | 2006-10-03 | 2008-04-15 | Hans Dr Loibner | Prädiktive parameter |
| BRPI0821165B8 (pt) | 2007-12-07 | 2021-05-25 | Nutricia Nv | uso de uma composição |
| JP5764071B2 (ja) | 2009-02-24 | 2015-08-12 | エスバテック − ア ノバルティスカンパニー エルエルシー | 細胞表面抗原のイムノバインダーを同定するための方法 |
| US8887373B2 (en) | 2012-02-24 | 2014-11-18 | Covidien Lp | Vessel sealing instrument with reduced thermal spread and method of manufacture therefor |
| US20140276968A1 (en) * | 2013-03-14 | 2014-09-18 | Ethicon, Inc. | Applicator systems for surgical fasteners |
| US10196458B2 (en) * | 2013-07-26 | 2019-02-05 | The Regents Of The University Of California | Anti-immunoglobulin E antibodies and methods of using thereof |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1341281C (en) * | 1986-07-09 | 2001-08-07 | Hubert J.P. Schoemaker | Immunotherapy of tumor with monoclonal antibody against the 17-1a antigen |
| US5270202A (en) * | 1989-11-03 | 1993-12-14 | Syamal Raychaudhuri | Anti-idiotypic antibodies to human melanoma-associated proteoglycan antigen |
| US5965132A (en) * | 1992-03-05 | 1999-10-12 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for targeting the vasculature of solid tumors |
| US5798100A (en) * | 1994-07-06 | 1998-08-25 | Immunomedics, Inc. | Multi-stage cascade boosting vaccine |
| WO1997005597A1 (en) * | 1995-07-31 | 1997-02-13 | Litton Systems Canada Limited | Flat panel pixel array incorporating photoconductive switches |
| EP0857176A1 (en) * | 1995-10-25 | 1998-08-12 | Centocor B.V. | HUMAN EPITHELIAL ANTIGEN Ep-CAM DERIVED PEPTIDES AND THEIR USE |
| US6235280B1 (en) * | 1996-04-12 | 2001-05-22 | Malaya Chatterjee | Methods of delaying development of CEA-associated tumors using anti-idiotype antibody 3H1 |
| IL121041A0 (en) * | 1997-06-09 | 1997-11-20 | Yeda Res & Dev | Immunogenic compositions for induction of anti-tumor immunity |
| US6274143B1 (en) * | 1997-06-13 | 2001-08-14 | Malaya Chatterjee | Methods of delaying development of HMFG-associated tumors using anti-idiotype antibody 11D10 |
| DE69942742D1 (de) * | 1998-06-15 | 2010-10-21 | Quest Pharmatech Inc | Immuntherapeutische zusammensetzung und verfahren zur behandlung von prostatakrebs |
| CZ302801B6 (cs) * | 1999-01-13 | 2011-11-16 | Igeneon Krebs-Immuntherapie Forschungs Und Entwicklungs-Ag | Použití protilátky namírené proti antigenu bunecné membrány Ep-CAM pro výrobu farmaceutického prostredku |
| US6632431B2 (en) * | 2000-05-16 | 2003-10-14 | New York University | Anti-idiotypic antibody against FimH adhesion of uropathogenic type I-fimbriated Escherichia coli, compositions containing same and method for using same |
-
2000
- 2000-01-12 CZ CZ20012581A patent/CZ302801B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2000-01-12 DK DK00906191T patent/DK1140168T3/da active
- 2000-01-12 ID IDW00200101396A patent/ID30223A/id unknown
- 2000-01-12 CN CNB008027641A patent/CN1188169C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2000-01-12 ES ES00906191T patent/ES2177509T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-01-12 ES ES02005394T patent/ES2236375T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-01-12 EP EP00906191A patent/EP1140168B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-01-12 DK DK02005394T patent/DK1230932T3/da active
- 2000-01-12 AU AU27964/00A patent/AU768515B2/en not_active Ceased
- 2000-01-12 EE EEP200100366A patent/EE05474B1/xx not_active IP Right Cessation
- 2000-01-12 TR TR2001/02034T patent/TR200102034T2/xx unknown
- 2000-01-12 WO PCT/EP2000/000174 patent/WO2000041722A1/de active IP Right Grant
- 2000-01-12 PT PT00906191T patent/PT1140168E/pt unknown
- 2000-01-12 KR KR1020017008697A patent/KR100771752B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2000-01-12 HU HU0200527A patent/HU226150B1/hu not_active IP Right Cessation
- 2000-01-12 SI SI200030594T patent/SI1230932T1/xx unknown
- 2000-01-12 SI SI200030015T patent/SI1140168T1/xx unknown
- 2000-01-12 MX MXPA01007148A patent/MXPA01007148A/es not_active IP Right Cessation
- 2000-01-12 CA CA2360382A patent/CA2360382C/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-01-12 NZ NZ512722A patent/NZ512722A/en not_active IP Right Cessation
- 2000-01-12 SK SK964-2001A patent/SK286627B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2000-01-12 IL IL14426500A patent/IL144265A0/xx active IP Right Grant
- 2000-01-12 EP EP02005394A patent/EP1230932B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-01-12 DE DE50009240T patent/DE50009240D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-01-12 PT PT02005394T patent/PT1230932E/pt unknown
- 2000-01-12 JP JP2000593332A patent/JP4774551B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2000-01-12 AT AT00906191T patent/ATE219687T1/de active
- 2000-01-12 AT AT02005394T patent/ATE286745T1/de active
- 2000-01-12 PL PL364747A patent/PL201533B1/pl not_active IP Right Cessation
- 2000-01-12 DE DE50000243T patent/DE50000243D1/de not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-06-21 NO NO20013093A patent/NO329917B1/no not_active IP Right Cessation
- 2001-07-10 IS IS5998A patent/IS5998A/is unknown
- 2001-07-11 IL IL144265A patent/IL144265A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-07-12 HR HR20010526A patent/HRP20010526A2/hr not_active Application Discontinuation
-
2002
- 2002-08-23 HK HK02106215.4A patent/HK1044487B/zh not_active IP Right Cessation
-
2006
- 2006-10-10 US US11/548,269 patent/US7691372B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2009
- 2009-09-18 US US12/562,886 patent/US20100233178A1/en not_active Abandoned
-
2011
- 2011-08-12 US US13/209,285 patent/US8444974B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7691372B2 (en) | Use of antibodies for the vaccination against cancer | |
| JP3565351B2 (ja) | 免疫応答を惹起するための、多数エピトープ含有抗原の再構成法および組成物 | |
| AU780853B2 (en) | Use of anti-idiotypical antibodies as vaccines against cancer | |
| Umeda et al. | The occurrence of anti-3-fucosyllactosamine antibodies and their cross-reactive idiotopes in preimmune and immune mouse sera. | |
| AU2005306186B2 (en) | Immunotherapeutic formulations with Interleukin-2-neutralising capacity | |
| US20060018901A1 (en) | Use of antibodies in a very low dose for the vaccination against cancer | |
| US20040265318A1 (en) | Use of antibodies for the vaccination against cancer | |
| JP2004532261A (ja) | ポリクローナル免疫グロブリンの使用 | |
| KR100372958B1 (ko) | 면역반응을개시시키기위해다중에피토프항원의입체형태를변화시키기위한방법및조성물 | |
| JP2004002481A (ja) | 免疫応答を惹起するための、多数エピトープ含有抗原の再構成法および組成物 | |
| JP2001055341A (ja) | 免疫応答を惹起するための、多数エピトープ含有抗原の再構成法および組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A1OB | Publication of a patent application | ||
| ARAI | Request for the grant of a patent on the basis of the submitted results of a substantive examination of a patent application | ||
| ODRP | Renewal fee for the maintenance of a patent |
Payment date: 20041124 Year of fee payment: 6 |
|
| ODBI | Application refused |