FR2566665A1 - Composition pour inhiber le developpement des tumeurs, a base d'un derive d'acide peroxydiphosphorique - Google Patents

Abstract

SUIVANT L'INVENTION, LA COMPOSITION COMPREND UN DERIVE NON TOXIQUE SOLUBLE DANS L'EAU ET PHARMACEUTIQUEMENT ACCEPTABLE DE L'ACIDE PEROXYDIPHOSPHORIQUE QUI, LORSQU'ON L'ADMINISTRE PAR VOIE ORALE OU SYSTEMIQUE, PROVOQUE UNE INHIBITION DU DEVELOPPEMENT DES TUMEURS, QU'IL S'AGISSE DE CELLULES TUMORALES IN VITRO OU DU DEVELOPPEMENT D'UNE TUMEUR REELLE IN VIVO CHEZ DES ANIMAUX A SANG CHAUD.

Description

L'invention concerne l'inhibition du dévelop-

pement des tumeurs en ce qui concerne les cellules tu-

morales in vitro et le développement réel des tumeurs

in vivo chez les animaux à sang chaud.

Le cancer résulte du développement de tumeurs malignes. Des recherches médicales considérables ont eté

effectuées, pour réduire et vaincre le fléau du cancer.

A ce jour, un traitement curatif du cancer n'a pas été

trouvé. Cependant, on a beaucoup apprisa sur le mécanis-

me par lequel les animaux a sang chaud évitent l'attein-

te du cancer. L'invention contribue a cette connaissan-

ce en fournissant une matière gui inhibe le développe-

ment des tumeurs et un procédé d'inhibition de ce déve-

loppement. Parmi les cellules contenues dans les liquides de l'organisme des mammifères figurent les lymphocytes,

les monocytes, les macrophages et les cellules polynu-

cléaires. Ces cellules agissent comme un système natu-

rel de surveillance contre le développement des tumeurs

des mammifères inférieurs, tels que les rongeurs, jus-

qu'aux êtres humains. Ces dernières années, on a obser-

vé qu'une sous-population particulière de lymphocytes

ou cellules lymphoides appelées cellules tueuses natu-

relles ("Natural Killer" ou "NK") détruit les cellules

tumorales et évite ainsi le développement du cancer.

Les faits conduisent à penser que les cellules NK pos-

sèdent une activité cytolytique liée à la formation d'une espèce à oxygène actif telle que le peroxyde

d'hydrogène (H202) ou des radicaux contenant de l'oxy-

gène, par exemple l'anion hydroxyle ('OH) et l'anion superoxyde (02) Les cellules NK et des phénomènes liés à l'oxygène actif sont décrits par Herberman et Coll., Science, Vol. 214, 2 octobre 1981, pages 24-30; Roder et Coll., Nature, Vol. 298, 5 août 1982, pages 569-572; Nathan et Coll., Journal of Immunology, Vol. 129, n 5, novembre 1982, pages 2 164- 2 171; et Mavier et Coll., Journal of Immunology, Vol. 132, n 4,

avril 1984, pages 1 980- 1 986.

Bien sûr, il existe de nombreux composés qui libèrent des espèces. à oxygène actif. Cependant, ce facteur seul ne signifie pas qu'un tel composé puisse

être introduit dans l'organisme pour compléter la fonc-

tion des cellules NK ou lorsque la formation d'une tu-

meur n'est pas suffisante pour assurer la fonction des cellules NK et inhiber le développement tumoral. Les composés qui libèrent des espèces à oxygène actif le font généralement rapidement, alors que l'efficacité contre le développement des tumeurs chez les animaux à

sang chaud tels que les êtres humains, semble nécessi-

ter une libération plus lente et plus prolongée. Jus-

qu'a l'invention cela n'a pas été efficacement obtenu.

Lorsque la libération d'oxygène est trop rapide, les cellules tumorales comme les cellules normales peuvent

être attaquées.

Dans le brevet US 4 041 149 délivré le 9 août 1977, on décrit une composition sous différentes formes, y compris un comprimé dentaire, qui inhibe

l'apparition d'une mauvaise haleine et dont l'ingré-

dient actif est un peroxydiphosphate. Le peroxydiphos-

phate diffère de la plupart des composés fournissant de l'oxygène en ce qu'il ne produit pas une bouffée

initiale de peroxyde d'hydrogène. En revanche, il li-

bère du peroxyde d'hydrogène lentement si bien que

lorsqu'on effectue des comparaisons à des concentra-

tions équivalentes avec le peroxyde d'hydrogène, la quantité d'oxygène libérée par le peroxydiphosphate n'est que le dixième de la quantité d'oxygène actif libérée par le peroxyde d'hydrogène. De plus, environ % seulement de l'oxygène actif sont libérés en 20 heures à 25 C en présence de phosphatase alcaline Ou de phosphatase acide, qui sont toutes deux présentes

dans les organismes des animaux a sang chaud, y com-

pris les souris, les rats, les êtres humains, etc. Un des avantages de l'invention est que le développement des tumeurs est inhibé sur les cellules tumorales in vitro et dans le développement réel des tumeurs malignes in vivo chez les animaux a sang chaud

allant des rongeurs aux êtres humains.

Un autre avantage de l'invention est qu'elle

fournit des procédés pour inhiber la formation des tu-

meurs par introduction d'une matière libérant lente-

ment de l'oxygène chez un hôte vivant.

Selon certains de ses aspects, l'invention concerne une composition comprenant une dose d'environ 0,1 à 10 % d'un dérivé non toxique soluble dans l'eau

et pharmaceutiquement acceptable de l'acide peroxydi-

phosphorique dissous ou dispersé dans un véhicule phar-

maceutique.

Selon certains de ses autres aspects, l'in-

vention concerne un procédé pour inhiber la formation des tumeurs contenant des cellules tumorales malignes dans lequel une composition comprenant une dose non toxique d'envrion 0,1 à 6 g par kg de poids corporel

d'un animal à sang chaud d'un dérivé non toxique solu-

ble dans l'eau et pharmaceutiquement acceptable d'aci-

de peroxydiphosphorique dissous ou dispersé dans un véhicule pharmaceutique est administrée à un animal

hôte à sang chaud, par ingestion orale, selon une po-

sologie qui apporte environ 0,1 à 6 g par kg de poids

corporel dudit animal à sang chaud et par jour.

Selon certains de ses autres aspects, l'in-

vention concerne un procédé pour inhiber la formation des tumeurs, dans lequel, une composition, comprenant une dose non toxique d'environ 0,1 à 2 g par kg de

poids corporel d'un animal à sang chaud ayant des cel-

lules tumorales malignes d'un dérivé non toxique solu-

ble dans l'eau et pharmaceutiquement acceptable d'aci-

de peroxydiphosphorique dissous ou dispersé dans un

véhicule pharmaceutique, est administrée par voie sys-

témique (générale) à un animal hôte à sang chaud selon une posologie qui apporte envrion 0,1 à 2 g par kg de

poids corporel dudit animal à sang chaud.

Le composé de type peroxydiphosphate (PDP)

est sous forme d'un composé non toxique pharmaceuti-

quement acceptable qui va plus loin qu'un sel indiqué

dans le brevet US 4 041 149 précité. Les composés com-

prennent les sels de métaux alcalins (par exemple le

lithium, le sodium et le potassium), de métaux alcali-

no-terreux (par exemple, le magnésium, le calcium et

le strontium), de zinc et d'étain, ainsi que les es-

ters organiques de type peroxydiphosphate d'alkyle en C1_12, d'adénylyle, de guanylyle, de cytosylyle et

de thymylyle, ainsi que les sels d'ammonium quaternai-

re et similaires. Parmi les cations minéraux, on pré-

fère les métaux alcalins, en particulier les sels de potassium. Le peroxydiphosphate tétrapotassique est un solide cristallin stable, inodore, finement divisé, s'écoulant librement, blanc et non hygroscopique ayant un poids moléculaire de 346,35 et une teneur en oxygène actif de 4,6 %. Le peroxydiphosphate tétrapotassique est soluble à 47-51 % dans l'eau entre 0 et 61 C, mais insoluble dans les solvants ordinaires, tels que l'acétonitrile, les alcools, les éthers, les cétones,

-le diméthylformamide, le diméthylsulfoxyde et similai-

res. Une solution aqueuse à 2 % a un pH d'envirion 9,6 et une solution saturée a un pH d'environ 10,9. Une solution aqueuse à 10 % dans l'eau à 25 C ne présente pas de perte d'oxygène actif, après quatre mois; et à 509 C une solution à 10 % présente une perte d'oxygène

actif de 3 % en six mois.

Les sels organiques peuvent être particuliè-

rement appropriés à l'administration contre les tumeurs malignes. Parmi les esters organiques, ceux présentant

des propriétés hydrophobes, tels que ceux ayant un ra-

dical alkyle en C _12 et ceux qui facilitent la fixation rapide du fragment peroxydiphosphate par les cellules,

tels que les esters adénylyliques, guanylyliques, cyto-

sylyliques et thymylyliques sont préférés.

Les véhicules ou supports pharmaceutiques ap-

propriés à '1 ingestion orale sont des carrimés enrobés composés d'un matériau qui résiste à la décomposition par les acides gastriques au pH de l'estomac (environ 1-3), car le peroxydiphosphate serait inactivé par ces acides gastriques. Par contre, les véhicules contenant des granules façonnés en comprimés d'un sel d'acide

peroxydiphosphorique solide, sont dissous par les li-

quides intestinaux qui ont un pH supérieur (environ 5,5-10) et qui n'inactivent pas le peroxydiphosphate

et le laissent subir l'action enzymatique des phospha-

tases présentes chez l'homme et les autres animaux à sang chaud. Une solution appropriée pour l'enrobage des comprimés est composée d'un ester d'acide gras

tel que le stearate de n-butyle (de façon typique en-

viron 40-50, de préférence environ 45 parties en poids),

d'une cire telle que la cire de carnauba (de façon ty-

pique d'environ 15-25, de préférence environ 20 parties en poids), d'un acide gras tel que l'acide stéarique (de façon typique environ 20-30 parties, de préférence parties en poids) et d'un ester de la cellulose tel que l'acétate-phtalate de cellulose (de façon typique environ 5-15, de préférence environ 10 parties en poids) et d'un solvant organique (de façon typique environ

400-900 parties). D'autres matières d'enrobage souhai-

tables comprennent la gomme-laque et des copolymères de l'anhydride maléique et de composés éthyléniques

tels que l'éther polyvinyl-méthylique. Ces formes enro-

bées diffèrent des comprimés, qui sont fragmentés dans

-la cavité buccale, dont le matériau du comprimé con-

tient de façon typique environ 80 à 90 parties en poids de mannitol et environ 30 à 40 parties en poids

de stéarate de magnésium.

Les granules façonnés en comprimés du sel de

type peroxydiphosphate sont formés par mélange d'envi-

ron 30 a 50 parties en poids du peroxydiphosphate avec

environ 45 à 65 parties en poids d'un sucre polyhydro-

xylé solide, tel que le mannitol, et humidification avec environ 20 à 35 parties en poids d'une solution

d'un sucre polyhydroxylé, tel que le sorbitol, tami-

sage à la taille désirée, mélange avec environ 20 à 35 parties en poids d'un agent liant, tel que le stéarate de magnésium, et pressage des granules en

comprimés avec une machine à façonner les comprimés.

Les granules façonnés en comprimés sont enrobés par pulvérisation d'une mousse d'une solution du matériau d'enrobage et séchage pour chasser le solvant. Ces comprimés diffèrent des comprimés dentaires qui sont de façon typique des granulés pressés ne portant pas

un revêtement protecteur particulier.

Une posologie efficace d'administration d'un

peroxydiphosphate, lorsque l'administration est effec-

tuée par ingestion orale, est d'environ 0,1-6 g/kg de poids corporel et par jour; lorsque l'administration

est effectuée par voie systémique, par exemple par in-

jection intramusculaire, intrapéritonéale ou intravei-

neuse, la posologie est d'environ 0,1-2 g/kg de poids

corporel et par jour.

Les solvants apyrogênes physiologiquement acceptables constituent des véhicules appropriés pour l'emploi dans l'adiministration classique par voie systémique. Une solution salée tamponnée au phosphate ayant un pH physiologique d'environ 7 à 7,4 constitue

le véhicule préféré pour l'administration par voie sys-

témique. Ces solvants diffèrent des véhicules consti-

tués d'eau et d'un humectant employés typiquement dans

les dentifrices. Une telle solution est préparée de fa-

çon typique par stérilisation d'eau distillée désioni-

sée, contrôle pour assurer le caractère apyrogène selon le test employant un lysat d'amibocytes de Limulus (LAL)

décrit par Tsuji et Coll. dans "Pharmaceutical Manufac-

turing", octobre 1984, pages 35-41, puis addition d'un tampon au phosphate (pH par exemple environ 8,5-10) constitué d'eau stérile apyrogène et d'environ 1 à 100

mg d'un dérivé de peroxydiphosphate et de chlorure de -

sodium à une concentration d'environ 0,5 à 1,5 % en poids. La solution peut être conditionnée dans des

flacons pour être utilisée après une nouvelle stéri-

lisation par passage à travers un filtre microporeux.

Sinon, on peut utiliser d'autres solutions, telles que la solution de Ringer contenant 0,86 % en poids de chlorure de sodium, 0,03 % en poids de chlorure de

potassium et 0,033 % en poids de chlorure de calcium.

Le peroxydiphosphate (PDP) libère-lentement

du peroxyde d'hydrogène en présence des enzymes phos-

phatases selon l'équation suivante:

O O3

O il phosphatases H20 H202+P04 Il

X4-0-P-0-0-P-0 -0-0-P-0

0 -O O-

dans laquelle X est un cation, ou un fragment formant un ester organique, non toxique et pharmaceutiquement

acceptable. La phosphatase qui décompose le peroxydi-

-phosphate est présente dans la salive, ainsi que dans le plasma, les liquides intestinaux et les globules blancs. La libération lente d'oxygène est particuliû=

rement efficace pour compléter l'efficacité des cellu-

les NK contre les cellules tumorales malignes qui sont

sensibles a un traitement par un peroxydiphosphate.

Lorsqu'on traite des animaux à sang chaud avec un PDP selon l'invention, il est souhaitable d'établir un schema posologique qui se poursuive au moins jusqu'à

ce que les tumeurs aient régressé.

Les exemples comparatifs suivants illustrent l'invention. Toutes les quantités sont en poids, sauf

indication contraire.

EXEMPLE 1

Etude in vitro de la cytotoxicité des PDP vis-à-vis des tumeurs

Dans cette étude, l'effet de PDP a été exa-

miné a diverses concentrations sur la croissance des

cellules de myélome murin (lignée SP2) (tableau 1).

Des fibroblastes gingivaux humains ont été utilisés

comme cellules témoins normales (tableau 2). Les cel-

lules ont été cultivées dans du milieu d'Eagle modi-

fié suivant Dulbecco, additionné de 10 % de sérum

bovin foetal, 1 X de vitamines MEM, 1 X de L-glutami.-

ne, 1 X de NEAA3, et 1 X de gentamycine. Elles ont

été incubées à 370 C dans une atmosphère de C02 humi-

difiée. Environ 1 à 3 x 105 cellules ont été placées dans chaque cupule d'une plaque de microtitrage à 24

cupules contenant 2 ml de milieu. Du PDP (sel de po-

tassium) à diverses concentrations a été ajouté.

Apres incubation, on examine la viabilité

des cellules par prélèvement d'échantillons des cupu-

les aux temps indiqués dans leagbleau 1. On évalue

la viabilité, selon le test d'exclusion du bleu Try-

pan. On ajoute du milieu frais dans chaque cupule chaque jour pour maintenir les conditions de culture nécessaires. On calcule l'inhibition par comparaison du pourcentage des cellules vivantes dans le sérum physiologique tamponné au phosphate (PBS) par rapport

au PDP. Les données sont regroupées dans le tableau 1.

Tableau 1

Effet du PDP sur-les cellules de myêlome murin (li-

gnée SP2) Traitement N Nombre de cellules % de cellules x 105 (à 72 heures) viables

______________________________________________________

Témoin (PBS) 4 8,98 0,14 100 % PDP pH 7,0 O100 g/ml 4 1,86 0,14 47 500 pg/ml 4 1,33 0,03 33 1000 pg/ml 4 1,07 o,17 29 2500 >g/ml 4 0,48 + 0,15 12 Les résultats montrent que, par rapport au témoin tampon, le sel de potassium de PDP est très cytotoxique et inhibe les cellulies de myélome murin (cancer). Le tableau 2 indique les effets sur des cellules normales (fibroblastes gingivaux humains}

Tableau 2

Effet du PDP sur des fibroblastes nivaux humains Traitement N Nombre de cellules % de cellules viables (à 72 heures) viables Témoin (PBS) 4 2,67 i 0,17 100 PDP pH 7,0 100 ug/ml 4 2,61 i 0,16 98 500 Pg/ml 4 2,53 0,13 97 1000 ug/ml 4 2,12 i 0,15 79 2500 Pg/ml 4 1,97 i 0,11 74 Les données du tableau 2 n'évoquent aucun effet notable du PDP sur la croissance des cellules à 100-500 ug/ml mais, même pour des cellules normales, la viabilité est réduite à 1000 et à 2500 Pg/mio Il convient de noter que l'effet sur les cellules tumora les de myélome (tableau 1), mêmme à des concentrations

élevées, est plus prononcé que l'effet sur les cellu-

les normales (tableau 2).

On obtient des résultats semblables avec les sels de lithium, de sodium; de magnésium de cal! cium, de strontium, de zinc et d'étain stanneux du PDP, avec des peroxydiphosphates organiques tels que

des esters d'alkyle en C_112, d'adénylyle, de guany-

lyle, de cytosylyle et de thymylyle ainsi que le sel

de tétraméthylanmmonium du PDP.

EXEMPLE 2

Les effets, du PDP, du pyrophosphate de po-

tassium (KPP) et du PBS (sérum physiologique tamponné

au phosphate) sur le développement in vivo des tumeurs.

On utilise 75 souris Balb/C génétiquement identiques ayant un poids moyen de 20 i 3 g réparties en les groupes de 25 animaux suivants: (a) un groupe témoin traité avec une solution saline tamponnée au phosphate (PBS) ,

(b) un groupe traité avec du peroxydiphosphate de po-

tassium (PDP) et du PBS à pH 7,0, et (c) un groupe servant de témoin au phosphate traité

avec du pyrophosphate de potassium (KPP) et du PBS.

Chaque animal reçoit une injection inteapé-

ritonéale (i. p.) de 0,2 ml de Pristane pour le sen-

sibiliser à l'implantation des cellules malignes SP2 (cellules d'une tumeur cancéreuse de type myélome murin). Apres trois semaines, on soumet les animaux aux traitements par ingestion orale suivants: le groupe (a) reçoit par voie i. p. 0,2 ml de PBS; le groupe (b) reçoit 2,0 mg de PDP en suspension dans 0,2 ml de PBS et le groupe (c) reçoit 2,0 mg de KPP dans

0,2 ml de PBS, pendant trois jours consécutifs. Qua-

rante-huit heures après la troisième injection, on

inocule chaque animal (i. p.) avec 2 à 3 x 106 cellu-

les SP2 (cellules tumorales de souris, myélome murin).

Ensuite, on soumet les animaux au traitement corres-

pondant une fois par jour, cinq jours par semaine, soit: (a) PBS, (b) PDP et (c) KPP. Chaque semaine, on note le développement des tumeurs de chaque animal

et les morts. On analyse les données, selon la métho-

de de Mantel-Haenszel (Statistical Aspects of the

Analysis of Data from Retrospective Studies of Disea-

se, J. National Cancer Institute, Vol. 3, 719-748, 1959). Les valeurs des tableaux 3, 4 et 5 indiquent que le PDP est significativement efficace pour lutter contre le développement des tumeurs chez lea souris par rapport au PBS ou au KPP, ce qui établit que les effets d'inhibition du développement des tumeura sont dus à l'apport de l'espèce à oxygène actif et

non au phosphate.

Tableau 3

PBS: par rapport au KPP?_ Etude du dévelopement des tumeurs à 10 semaines Semaine Traltement Tumeura et Pas de A risque morts tumeurs

1-4 PBS 11 14 25

KPP 10 15 25

PBS 4 10 14

KPP 4 11 15

6 PBS 5 5 10

KPP 2 9 11

7 PBS 2 3 5

KPP 4 5 9

8 PBS O 3 3

KPP 1 4 5

9 PBS 2 1 - 3

KPP 3 1 4

PBS 1 O 1

KPP O 1 1

Test khi-carré selon Mantel-Haens.zel 0,36 avec 1 degré de liberté,

P = 0,55

Rapport de probabilité = 1-,34.

Ces résultats ne sont pas significatifa

et n'établissent pas de différence significative en-

tre le PBS et le KPP en ce qui concerne la diminution

du développement des tumeurs chez les animaux.

x PBS = solution saline tamponnée au phosphate Xs KPP = pyrophosphate de potassium

Tableau 4

Etude des tumeurs à 10 semaines PBS* par rapport au PDPI Semaine Traitement Tumeurs et Pas de A risque morts tumeurs

10...........

1-4 PBS 11 14 25

PDP 2 23 25

PBS 4 10 14

PDP 4 19 23

*6 PBS 5 5 10

PDP 5 14 19

7 PBS 2 2 5

PDP 2 13 14

8 PBS O 3 3

PDP 2 10 12

9 PBS 2 1 3

PDP 3 7 10

PBS 1 O 1

PDP 1 6 7

Test khi-carré selon Mantel-Haenszel = 10,40 avec 1 degré de liberté,

P = 0,001

Rapport de probabilité 3,66.

Ces valeurs indiquent que le groupe témoin PBS présente des tumeurs nettement plus tôt que les animaux traités par le PDP (P = 0,001) PBS = solution saline tamponnée au phosphate

i PDP = peroxydiphosphate de potassium.

Tableau 5 Etude des tumeurs à 10 semaines KPP* par rapport au PDP*** Semaine Traitement Tumeurs et Pas de A rIsque morts tumeur

1-4 KPP 10 15 25

PDP 2 23 25

5 KPP 4 11 15

PDP 4 19 23

6 KPP 2 9 1i

PDP 5 14 19

7 KPP 4 5 9

PDP 2 14 14

8 KPP 1 4 5

PDP 2 10 12

9 KPP 3 1 4

PDP 3 7 10

10 KPP 0 1 1

PDP 1 6 7

Test khi-carré selon Mantel-Haenszel = 5,86 avec 1 degré de liberté,

P = 0,02

Rapport de probabilité = 2,60.

Les données indiquent que le groupe KPP pré-

sente des tumeurs significatives plus tôt que les ani-

maux traités par le PDP (P = 0,001) KPP pyrophosphate de potassium

*d PDP = peroxydiphosphate de potassium.

On peut observer des résultats semblables lorsqu'on administre chacun du PBS, du KPP et du PDP par voie intramusculaire et intraveineuse aux mêmes concentrations dans du PBS ou par voie orale à une concentration de 1 mg/ml (0,1 %) dans un véhicule

stable constitué de 45 parties de stéarate de n-buty-

le, 20 parties de cire de carnauba, 25 parties d'acide

stéarique et 10 parties d'acétate-phtalate de cellulo-

se. On obtient des résultats semblables avec d'autres sels minéraux de PDP, en particulier les sels de lithium, de sodium, de magnésium, de calcium, de strontium, de zinc et d'étain stanneux. Des composés organiques duPDP, en particulier les esters d'alkyle en Cl_12, d'adénylyle, de guanylyle, de cytosylyle, de

thymylyle et les sels de tétraméthylammonium sont éga-

lement efficaces pour inhiber le développement des

cellules tumorales malignes de myélome murin.

EXEMPLE 3

On mélange 500 parties de peroxydiphosphate

de potassium et 641 parties de mannitol en les humidi-

fiant avec 32,5 parties d'une solution à 10 % de sor-

bitol pour former des granules humides que l'on sèche à 49Q C et qu'on tamise à travers un tamis US de 12 mesh (ayant des ouvertures de mailles de 1,68 mmn). On ajoute ensuite comme liant 35 parties de stéarate de

magnésium et on forme des granules façonnés en compri-

més par pressage de la composition avec une machine à

façonner les comprimés.

On enrobe les comprimés d'une solution de revêtement à délitage entérique ayant la composition suivante: Acétate-phtalate de cellulose 120 parties Cire de carnauba 30 parties Acide stéarique 10 parties Ethanol à 95 % 450 parties

Acétone qsp 1000 parties.

On effectue le revêtement selon une tech-

nique de coulée dans un dispositif d'enrobage claasi-

que.

Lorsque les comprimés ainsi formes sont in-

gérés, ils traversent l'estomac sans dégradation et le revêtement est ensuite dissous par les liquides intestinaux.

EXEMPLE 4

On stabilise de l'eau distillée désionisée la pression atmosphérique pendant 20 minutes dans un autoclave. Apres refroidissement on contrôle son

caractère apyrogène selon le test du lysat d'amibocy-

tes de Limulus (LAL) décrit par Tsuji et Coll. dans "Pharmaceutical Manufacturing' octobre 1984, pages

-41. On ajoute à l'eau stérile apyrogène, 50 par-

ties de peroxydiphosphate de potassium, du chlorure de sodium en une quantité correspondant à 0O9 % de la solution et du tampon au phosphate 0, 1 M contenant

du KH2PO4 et du Na2HPO4, de pH 9,4. On stérilise en-

suite la solution par passage a travers un filtre ayant des micropores de 0,5 pm, puis on conditionne

dans des récipients stériles.

Claims (12)

REVENDICATIONS

1. Composition comprenant une dose d'environ 0,1 à 10 % d'un dérivé non toxique soluble dans l'eau

et pharmaceutiquement acceptable d'acide peroxydiphos-

phorique dissous ou dispersé dans un véhicule pharma-

ceutique, le véhicule pharmaceutique étant une solution saline tamponnée au phosphate ayant un pH d'environ 7,0 à 7,4 ou un matériau pour comprimés enrobés qui résiste à la décomposition par les acides gastriques tout en étant décomposé par les liquide intestinaux à un pH

d'environ 5,5 à 10.

2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit véhicule pharmaceutique

est ladite solution saline tamponnée au phosphate.

3. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit véhicule pharmaceutique est ledit matériau pour comprimés enrobés qui résiste à la décomposition par les acides gastriques tout en étant décomposé par les liquides intestinaux à un pH

d'environ 5,5 à 10.

4. Composition selon la revendication 3, caractérisée en ce que le revêtement dudit comprimé du véhicule pharmaceutique comprend environ 40 à 50 parties en poids d'un ester d'acide gras, environ 15 à 25 parties en poids d'une cire, environ 20 à 30 parties en poids d'un acide gras et environ 5 à 15

parties en poids d'un ester de la cellulose.

5. Composition selon la revendication 4, caractérisée en ce que l'ester d'acide gras est le stéarate de n-butyle, la cire est la cire de carnauba, l'acide gras est l'acide stéarique et l'ester de la

cellulose est l'acétate-phtalate de cellulose.

6. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le dérivé non toxique soluble dans l'eau et pharmaceutiquement acceptable de l'acide peroxydiphosphorique est un sel choisi parmi les sels de métaux alcalins, de métaux alcalino-terreux, de

zinc et d'étain.

7. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le dérivé non toxique soluble dans l'eau et pharmaceutiquement acceptable d'acide peroxydiphosphorique est choisi dans le groupe cons- titué par les esters d'alkyle en C1_12, d'adénylyle, de guanylyle, de cytosylyle, de thymylyle et un sel

d'ammonium quaternaire.

8. Composition selon la revendication 6,

o10 caractérisée en ce que ledit sel est le peroxydiphos-

phate de potassium.

9. Composition selon la revendication 7, caractérisée en ce que ledit dérivé est un ester

d'alkyle en C1_12 d'acide peroxydiphosphorique.

10. Composition selon la revendication 7, caractérisée en ce que ledit dérivé est un ester

d'adénosyle, de guanylyle, de cytosyle ou de thymy-

lyle de l'acide peroxydiphosphorique.

11. Procédé de préparation de granules fa-

çonnés en comprimés ayant un revêtement qui n'est pas décomposé lors du passage dans l'estomac et qui est dissous par les liquides intestinaux ayant un pH de 5,5 à 10, caractérisé en ce qu'il comprend le mélange d'un

dérivé non toxique soluble dans l'eau et pharmaceuti-

quement acceptable d'acide peroxydiphosphorique avec un sucre polyhydroxylé solide et l'humidification du mélange avec une solution d'un sucre polyhydroxylé, le tamisage à la taille désirée, le mélange avec un agent liant, le pressage pour former des granules façonnés en comprimés et l'enrobage desdits granulés façonnés en comprimés par pulvérisation d'une pellicule d'une solution de revêtement qui n'est pas inactivée par les acides gastriques et qui est dissoute par les liquides intestinaux ayant un pH d'environ 5,5 à 10;

12. Procédé de préparation d'une solution

d'un dérivé non toxique soluble dans l'eau et pharma-

ceutiquement acceptable d'acide peroxydiphosphorique approprié à l'administration gastrique, caractérisé en ce qu'il comprend la stérilisation d'eau distillée désionisée pour la rendre apyrogène puis l'addition à

celle-ci d'un tampon au phosphate et dudit dérivé d'a-

cide peroxydiphosphorique et de chlorure de sodium.