FR2556970A1 - Procede d'obtention de produits sexuels prets a la fecondation a partir de poissons sexuellement matures - Google Patents
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Abstract
LA PRESENTE INVENTION EST RELATIVE A UN PROCEDE D'OBTENTION DE PRODUITS SEXUELS PRETS A LA FECONDATION A PARTIR DE POISSONS SEXUELLEMENT MATURES. CE PROCEDE SE CARACTERISE EN CE QUE L'ON UTILISE, A TITRE DE COMPOSES A DES EFFETS HORMONAUX, DES NONAPEPTIDE-ALCOYL (EN C)-AMIDES ET DES DECAPEPTIDE-AMIDES REPRESENTES PAR LA FORMULE GENERALE (I) CI-APRES: (CF DESSIN DANS BOPI) DANS LAQUELLE :X EST UN GROUPE GLYCYLE OU UN D-ISOMERE D'UN QUELCONQUE GROUPE AMINOACIDE NATUREL OU SYNTHETIQUE;X EST UN GROUPE L-AMINOACIDE DONT LA CHAINE LATERALE CONTIENT 1 A 4 ATOMES DE CARBONE, L-PHENYLALANYL OU L-TRYPTOPHYLE;X EST UN GROUPE L-AMINOACIDE AYANT UNE CHAINE LATERALE ALCOYLE EN C OU ALCANOYL (EN C)-AMIDE;X EST UN GROUPE GLYCINE-AMIDE OU ALCOYL (EN C)-AMIDE. APPLICATION A L'ELEVAGE DES POISSONS.
Description
La présente invention est relative à un procédé d'cbtention des produits
sexuels prêts pour la fécondation, à
partir de poissons sexuellement matures, à une période indé-
pendante de leur époque naturelle de frai.
On sait que l'activité sexuelle chez les poissons des deux sexes est régulée par des hormones gonadotropes libérées par l'adénohypophyse. Ces hormones contrôlent le développement morphologique et fonctionnel et la maturation des gonades, leur activité gamétogénétique (production des ovules et des spermatozoïdes ou gonades) et l'excrétion des
hormones gonadiques.
L'adénohypophyse libère les mêmes deux hormones gonadotropes chez les deux sexes. L'une d'entre elle est appelée FSH (hormone folliculo stimulante), l'autre est connue en tant que LH (hormone lutéinisante) ou ICSH (hormone stimulante les cellules intersticielles) en fonction de l'effet qu'elle exerce
chez les mâles.
On sait également que ces deux hormones ne présen-
tent aucune spécificité sexuelle, puisque la même FSH est responsable de l'activité gamétogénétique chez les mâles et les
femelles et que la même LH ou ICSH induit l'excrétion d'andro-
gènes chez les mâles et d'oestrogènes ou de progestérone chez
les femelles.
La FSH et la FH sont toutes les deux des glyco-
protéides, qui présentent une forte spécificité d'espèce chez
les poissons.
L'hypophyse du poisson intègre les fonctions du système endocrinien et elle a aussi quelques fonctions de coordination entre le système endocrinien et le système nerveux, principalement par l'intermédiaire des noyaux du système nerveux autonome dans la région hypothalamique du diencéphale. Par ailleurs, l'hypophyse règle le cycle de reproduction, à l'aide
des hormones à tropismes spécifiques à l'espèce.
Dans des conditions normales, l'ovulation du poisson apparait dans un milieu de frai caractéristique de l'espèce de poisson donnée. L'ovulation des oeufs m rs n'a pas lieu spontanément, mais les oeufs restent en repos pendant une période plus ou moins longue, jusqu'à l'apparition des conditions appropriéess Cette adaptation de la reproduction caractéristique du poisson, est contrôle conjointement par l'hypophyse et le système nerveux central. Dans l'état du repos,
l'organisme du poisson est équilibré à un faible taux d'acti-
vité gonadotrope et ainsi, une très faible quantité seulement
de gonadotrophine est libérée dans le système sanguin.
( Berbilsky N.: Sowremennoe nostoianie woprosa o nevroformo-
nalny reguliacii polowo cyclu ryb i bioteknika gormonalnyh wozdiestwii w rybowodstwe, Leningrad, 1966, Publisher: Gos,
Univ., page 8).
Il est impossible de déterminer le moment exact de l'apparition des conditions favorables pour le poisson, puisque ceux-ci se développent à une certaine période, plus ou moins fortuitement (par exemple, à la fin du printemps ou au début de l'été). Cela signifie que le mécanisme de régulation de la reproduction chez le poisson permet l'adaptation du cycle de reproduction à l'environnement extérieur. Cette régulation
est co-ordonnée chez le poisson par le système hypothalamus-
-hypophyse. A la suite des études menées ces dernières années, on a constaté que la libération de certaines hormones tropiques de l'adénohypophyse, est régulée par des neurohormones. Les neurohormones quittent les nerfs terminaux allant à certains noyaux de l'hypothalamus et sont absorbées aussitôt par les vaisseaux capillaires dits portes; de cette façon, elles vont
directement, par l'intermédiaire du sang aux sinus de l'adéno-
hypophyse.
Toutes les neurohormones connues jusqu'à maintenant sont des oligopeptides ou des polypeptides. Les neurohormones induisant la sécrétion d'hormne à tropismes spécifiques, sont dénmmées "facteur de libération" (RF), tandis que celles qui inhibent la sécrétion hormonale sont appelées "facteur d'inhibition" (IF),
Selon la nomenclature actuelle, on utilise les termes d' "Irm'ne de li-
bération" (RH) ou "boxne inhibant la libération" (RIH), dans le cas
des neurohornunes ayant une structure et une fonction connues.
Une caractéristique propre à toutes les neuro-
hormones réside en ce que leur effet dans des animaux hypo-
physectomisés est analogue à l'effet observé après administra-
tion des hormones à tropismes spécifiques.
Des cellules basophiles d'hypophyse de poisson montrent des changements saisonniers, leur quantité diminue pendant la période du frai. Au cours du processus d'adaptation à l'environnement, il se produit des hormones de libération (RH)
qui, par l'intermédiaire du flux sanguin, vont dans l'hypo-
physe et y régulent la libération des hormones à tropismes spé-
cifiques dans le sang. Les poissons sont ainsi informés de l'apparition prochaine des conditions de frai extérieurs convenables. Il en résulte que l'hypophyse et l'excrétion de gonadotropes dans le sang sont activées par l'hormone de régulation de l'hormone lutéinisante (LH/RH) et le processus d'ovulation commence.fBreton B. et Weill Cl.n C.R. Acad. Sc.,
Paris, 277, 2061-2064 (1973)].
Des impulsions nerveuses sensorielles générées par le terrain du frai sont transmises de cette façon au système
endocrinien et ce mécanisme active le système de reproduction -
se trouvant dans un état de repos forcé - au moment o est détecté l'environnement extérieur optimal du point de vue de la survie de la progéniture (Gerbilsky, loc. cit.) Des neurohormones sont interspécifiques à un degré élevé. La séquence de LH/RH chez les poissons diffère de celle des mammifères, si bien qu'elles ne sont pas efficaces en cas
d'interchangement.
On a pu obtenir une reproduction artificielle induite des poissons, en trouvant et en développant mondialement la technique d'hypophysation. (Gerbilsky, loc. cit.) On utilise principalement, après conservation convenable, des hypophyses collectées chez des carpes communes
matures ou presque matures, pour réaliser l'induction hormo-
nale de l'ovulation. D'autres hormones naturelles ou synthé-
tiques essayées jusqu'à maintenant, n'ont pas donné de
résultats vraiment positifs.
Comme la carpe commune est largement reproduite en élevage, on dispose de stocks importants de par le monde, à partir desquels on peut facilement prélever des hypophyses
en des quantités suffisantes pour des buts de production.
L'hypophyse de la carpe commune peut être utilisée avec succès
dans la reproduction de plusieurs espèces de poisson d'élevage.
Les espèces de poissons éloignées du point de vue taxonomique (par exemple, les esturgeons) constituent des exceptions, car dans leur cas, on met en oeuvre une suspension hormonale
préparée à partir d'hypophyse de la même espèce.
Le prélèvement et la conservation des hypophyses sont effectués de la même manière, quelle que soit l'espèce du donneur. Les hypophyses doivent être prélevées chez les poissons plus agés, si possible matures sexuellement. Ce n'est
que très rarement possible.
L'hypophyse est plus petite chez un petit poisson -
si bien qu'il faudrait beaucoup plus de donneurs dans le cas
de petits poissons, puisqu'on la dose en poids.
Les hypophyses sont deshydratées avec de l'acétone selon la méthode connue. Les hypophyses sont débarrassées d'eau et de graisses après 3 fois 8 à 12 heures de trempage dans l'acétone. Après ducrissement, les hypophyses sont séchées pendant 24 heures à la température ambiante, tandis que s'évapore l'acétone. L'acétone n'est pas nuisible aux composés gonadotropes actifs de l'hypophyse et des glandes ainsi séchées peuvent être conservées pendant une plus grande période de
temps, sans perte.
Pour activer les hormones gonadotropes, on pulvé-
rise les glandes dans un mortier en porcelaine, puis on dissout les hormones dans une solution saline physiologique pour
poissons (0,65 % de NaCl).
On injecte la solution d'hormones dans les mus-
cles du poisson pour éviter tout reflux ou un quelconque autre gaspillage. Les injections sont administrées dans la cavité corporelle dans le cas de petits poissons ou de poissons à muscles flasques. Les hormones pituitaires injectées jouent le même rôle que les propres hormones du poisson libérées lors de la détection du milieu du frai; elles génèrent le processus d'ovulation. La technique d'hypophysation n'est pas efficace dans tous les cas, bien qu'elle soit largement utilisée en pisciculture. Les principales raisons en sont les suivantes
a) Comme on ne connait pas le moment de la matura-
tion du poisson donneur (dont on prélève l'hypophyse), on ne connait pas non plus la teneur en hormones gonadotropes des glandes. L'effet est donc incertain, même si les doses sont
calculées à l'intérieur de larges limites.
b) Les hormones d'hypophyse de la carpe commune ne sont efficaces que chez la carpe commune et chez des espèces
qui ne lui sont pas éloignées du point de vue taxonomique.
Il en résulte que plusieurs espèces de poissons ne peuvent être reproduits qu'avec une faible efficacité ou ne pas être reproduites du tout, ce qui est important du point de vue économique. c) Avec l'hypophyse de la carpe commune ('ou d'une quelconque autre) on ne peut obtenir que l'effet de la LH dans des conditions industrielles, on ne peut pas produire l'effet de la FSH de cette façon, sans doute pour les raisons
indiquées en a).
d) Etant donné le manque d'effet de la FSH, l'hypo-
physation ne peut être utilisée que pour réaliser l'induction
des poissons avec des oeufs mûrs pour l'ovulation.
e) Dans les cas de l'hypophysation, on ne peut effectuer une reproduction artificielle induite que pendant la saison naturelle du frai; cela signifie que la possibilité est limitée à quelques jours par an. Ainsi l'exploitation des
unités de production est également limitée.
f) On ne peut procéder au prélèvement d'hypophyses en grandes quantités qu'à partir de poissons immature dont
l'hypophyse est caractérisée par une faible activité gona-
dotrope. Le prélèvement à partir de poissons matures n'est
possible qu'en triant les poissons donneurs intéressants.
La présente invention a pour but de mettre au point un procédé qui permet l'obtention de produits sexuels prêts pour la réalisation de fécondation naturelle ou artificielle,
à partir d'unequelconque espèce de poisson mature.
La présente invention repose sur la constatation selon laquelle le but cidessus peut être pleinement atteint par l'administration de nouveaux dérivés de gonadolibérine dans l'organisme de poissons matures. La demanderesse a trouvé que les FSH-LH/RH excrétées dans l'hypothalamus du poisson peuvent être avantageusement remplacées par ces composés, c'est-àdire que le développement des spermatozoides et des oeufs et l'ovulation peuvent être induits avec succès par
l'injection de ces nouveaux composés.
La présente invention se rapporte donc à un procédé d'obtention de produits sexuels prêts pour une fécondation à partir de poissons sexuellement matures, pendant une période indépendante de leur saison naturelle de frai, selon lequel on détermine par examen l'état réel de maturité des produits sexuels (sperme et oeufs) des poissons sexuellement matures, on sépare des poissons matures des poissons qui ne sont pas encore mûrs pour l'ovulation, on administre aux poissons des composés exerçant un effet hormonal et après l'ovulation,on recueille les produits sexuels d'ovulation à partir des poissons
ou de leur environnement.
Conformément à la présente invention, des nonapep-
tides-alcoyl(en Clà4)-amides et des décapeptide-amides repré-
sentés par la formule générale (I) ci-après, Glp-His-Trp-Ser-Tyr-Xl-X2-X3Pro-X4 dans laquelle X1 est un groupe glycyle ou un D-isomère d'un quelconque aminoacide naturel ou synthétique
X2 est un groupe L-aminoacide dont la chaîne latérale con-
tien 1 à 4 atomes de carbone, un groupe L-phênyl-alanyle ou L-tryptophyle, X3 est un groupe L-aminoacide ayant une chaîne latérale alcoyle en Clà4 ou alcanoyl (en C2à4)amide, X4 est un groupe glycine-amide ou alcoyl(en Clà4)-amide,
ainsi que des sels ou complexes métalliques de ces composés -
en tant que composants exerçant un effet hormonal -, sont administrés aux poissons à une dose de 0,1 pg à 5 mg, avantageusement de 2 à 500 pg, de préférence de 5 à 100 pg et dans le cas des poissons qui ne sont pas encore mUrs pour l'ovulation, les doses ci-dessus sont administrées en au moins 2 et en plus 12 portions, la dernière dose utilisée étant au moins égale ou de préférence au moins 1,5 fois supérieure A
la dose précédente.
Les abréviations utilisées dans la formule sont identiques à celles de la nomenclature acceptée dans la chimie des peptides, publiée par exemple dans J. Biol. Chem. (241,
527 (1966); 247, 977 ( 1972).
Le composé n'est pas toxique, si bien qu'une dose
trop élevée ne provoque pas d'effet nuisible.
Lorsqu'on traite des poissons qui ne sont pas encore mûrs pour l'ovulation, le nombre d'injections dépend du degré d'éloignement du poisson donné par rapport à l'état de maturité pour l'ovulation. Si cet état est plus proche, le
nombre d'injections est plus faible.
Des poissons sont mers pour l'ovulation, lorsque, dans le cas des mâles, les spermatozoïdes deviennent mobiles au contact de l'eau et dans le cas des femelles, le noyau est
situé à la périphérie du follicule.
On peut mettre en oeuvre de façon particulièrement avantageuse des décapeptides de formule (II) Glp-His-Trp-Ser-Tyr-D-Phe-Leu-Gln-Pro-GlyNH2 (II) et de formule (III) Glp-His-Trp-Ser-Tyr-D-Phe-Trp-Leu-Pro-GlyNH2 (III) parmi des composés de formule générale (I) dans le procédé conforme à la présente invention. Il est judicieux de produire les composés de formule générale (I) utilisés dans le procédé de la présente invention, selon la technique en phase solide de la synthèse
des peptides (Merrifield R.B., J. Am. Chem. Soc., 85, 2149-
2151 Z19637). En fonction de la structure des composés dési-
rés, il est avantageux d'utiliser une résine polystyrène-
divinylbenzène chlorométhylée dans le cas d'un peptide alcoyl-
amide et une résine benzhydrylamine dans le cas d'un peptide amide. Les aminoacides sont couples à la résine sous forme de
leur dérivé N-a-ter-butyloxycarbonyle (Boc), avec du dicyclo-
hexylcarbodiimide (DCC), du N,N'-diisopropylcarbodiimide (DCC) ou selon la méthode de l'ester actif. Le produit final peut être séparé du support solide par une technique de clivage
acide ou alcaline.
Les produits finaux requis de formule générale (I) peuvent être construit à partir d'aminoacides protégés convenables, par utilisation d'une combinaison convenable de
synthèse par étapes et de condensation de fragment, en fonc-
tion du caractère chimique des composants aminoacides varia-
bles.
Les principaux avantages du procédé conforme à la présente invention sont les suivants: a) Il permet la reproduction d'espèces de poisson éloignées du point de vue taxonomique de la carpe commune, qui n'étaient pas reproduits jusqu'à maintenant en raison du
manque d'hypophyse spécifique de l'espèce.
b) Il peut être mis en oeuvre dans de vastes limi-
tes écologiques, parce que les composés de formule générale
(I) exercent leurs effets physiologiques, même dans des con-
ditions biologiques très différentes.
c) la reproduction des poissons hors de leur
saison naturelle de frai et en même temps la pleine exploita-
tion des unités de production, deviennent possibles.
d) On peut éliminer l'absence d'ovulation due à un dosage imprécis d'hypophyse.
e) Le composé actif utilisé conformément au pro-
cédé de la présente invention peut être produit par synthèse
dans des laboratoires, si bien qu'on peut supprimer l'incer-
titude des effets caractérisant la méthode connue d'hypophy-
sation.
f) L'effet de l'hormone synthétique utilisée dans le procédé est identique à celui de la libération des
propres hormones gonadotropes du poisson.
g) L'hormone synthétique utilisée dans le procédé est interspécifique, si bien qu'elle est efficace même dans
le cas de poissons très différents du point de vue taxonomi-
que. Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions qui ressortiront de la
description qui va suivre.
L'invention sera mieux comprise à l'aide du
complément de description qui va suivre, qui se réfère à des
exemples de mise en oeuvre du procédé objet de la présente invention. Il doit être bien entendu, toutefois, que ces exemples de mise en oeuvre sont donnés uniquement à titre
d'illustration de l'objet de l'invention, dont ils ne cons-
tituent en aucune manière une limitation.
EXEMPLE 1
Reproduction artificielle induite du sterlet (Acipenser ruthenus L.)
On choisit des poissons matures dans une popula-
tion d'une aire d'habitation donnée et on les transporte vers le lieu de reproduction. Les sexes sont séparés et l'état de maturation des oeufs des femelles est déterminé. On considère qu'un poisson est mûr pour l'ovulation si le noyau est situé sur la périphérie du follicule. Les spermatozoïdes des mâles ne sont pas examines, parce que dans une population d'une aire d'habitation donnée, les produits sexuels des mâles et des femelles se trouvent pratiquement tous dans le même état de maturation. Si les poissons sont mûrs pour l'ovulation, le décapeptide de formule générale (I) est injecté en une
unique dose de 70 gg à chaque poisson, y compris aux mâles.
Si les poissons ne sont pas mûrs pour l'ovulation, ils doivent être maintenus à la température du frai naturel et le composé ci-dessus doit être administré à des doses de gg chacune, au moins deux mais douze fois au maximum, tant
que le noyau se déplace du centre vers la périphérie. Le nom-
bre de traitements dépend de l'état réel de maturation des
produits sexuels par rapport à l'état "mûr pour l'ovulation".
Ce procédé de maturation dure au moins 100, mais au plus 630 jour-degrés dans l'intervalle de température de 12 à 18 C (les jour-degrés indiquent le nombre de jours multiplié par la température moyenne de l'eau utilisée pendant la période
de maturation).
L'ovulation a lieu 24 à 32 heures après l'admi-
nistration de la dernière dose. On obtient ensuite des pro-
duits sexuels en 40 à 60 minutes.
EXEMPLE 2
Reproduction artificielle induite de la carpe commune (Cyprinus carpio L.)
A une quelconque saison de l'année et à une quel-
conque température, des reproducteurs matures sont choisis
dans l'effectif et transportés dans le lieu de reproduction.
Les sexes sont séparés et l'état de maturité des produits sexuels est déterminé selon la procédure de l'Exemple 1. Si les poissons sont mûrs pour l'ovulation, on administre une seule dose de 70 gg de décapeptide de formule (I) y compris
aux mâles.
Les poissons qui ne sont pas prêts pour l'ovula-
tion doivent être maintenus à la température du frai naturel et le composé indiqué ci-dessus doit être administré à des doses de 5 gg chacune, au moins deux, mais quinze fois au maximum, tant que le noyau du follicule se déplace du centre vers la périphérie. Le nombre de traitements dépend de l'état réel de maturité des produits sexuels par rapport à l'état "mûr pour l'ovulation". Le procédé de maturation dure au
moins 100, mais au plus 750 jour-degrés dans la gamme de tem-
pératures de 20 à 24 C.
L'ovulation a lieu 240 à 260 heure-degrés après administration de la dernière dose. Les produits sexuels sont
ensuite séparés en 40 à 60 minutes.
EXEMPLE 3
Reproduction artificielle induite de la perche (Perca fluviatilis L)
Des poissons matures sont choisis dans la popula-
tion et transportés dans le lieu de reproduction. La maturité des produits sexuels est déterminée selon la procédure de l'Exemple 1, mais les sexes ne sont pas séparés. Les poissons prêts à l'ovulation - y compris les mâles - sont traités avec une dose unique de 20 gg du décapeptide de formule (II) Les poissons qui ne sont pas mûrs pour l'ovulation doivent être maintenus à la température du frai naturel et le composé indiqué ci-dessus doit être administré à des doses de 2 gg chacune, au moins deux et au plus dix fois, tant que le
noyau du follicule se déplace du centre vers la périphérie.
Le nombre de traitements dépend de l'état réel de maturité
des produits sexuels par rapport à l'état "mûr pour l'ovula-
tion". Le procédé de maturation dure au moins 100 jour-degrés, et 400 jour-degrés dans des cas extrêmes, dans un intervalle
de températures de l'eau de 12 à 16eC.
Le frai a lieu 24 à 36 heures après administration de la dernière dose. La perche peut facilement frayer dans des bassins; dans ce cas, la séparation des produits sexuels
n'est pas nécessaire.
EXEMPLE 4
Reproduction artificielle induite du maquereau bâtard (Trachurus trachurus L.) On transporte dans un lieu de reproduction, des spécimens de 240 mm de long au moins, choisis parmi des ma-
quereaux bâtards pris vivants dans l'Adriatique, en Novembre.
(Des poissons de cette dimension sont déjà sexuellement ma-
ture). Le composé de formule (II) est injecté à chaque pois-
son, à la dose unique de 10 gg. L'ovulation a lieu en 24 heures, avec une température de l'eau entre 18 et 24 C. Des
produits sexuels sont obtenus en 2 heures.
Il n'est pas nécessaire de déterminer l'état de maturité et le sexe dans le cas de maquereaux bâtards, car
des poissons matures sont disponibles en une quantité pra-
tiquement illimitée.
EXEMPLE 5
Reproduction artificielle induite du brochet (Esox lucius L.) Des poissons sexuellement matures sont choisis
dans une population et transportés vers le lieu de reproduc-
tion. Les sexes sont séparés et l'état de maturité des pro-
duits sexuels est déterminé selon la procédure de l'Exemple
1. Des poissons prêts à l'ovulation - les mâles compris -
sont traités avec une dose unique de 100 Gg du décapeptide de
formule (II).
Les poissons qui ne sont pas encore mûrs pour l'ovulation doivent être maintenus à la température du frai naturel et le composé indiqué cidessus doit être administré des doses de 5 Fg chacune, au moins deux fois mais au plus dix fois, tant que le noyau du follicule se déplace du centre vers la périphérie. Le nombre de traitements dépend de l'état réel de maturité des produits sexuels par rapport à l'état "mûr pour l'ovulation". Le procédé de maturation dure au moins , et dans des cas extrêmes, 350 jour-degrés à la température
de l'eau de 8 à 14 C.
EXEMPLE 6
Reproduction artificielle induite de la carpe-miroir (Hypophthalmichtys molitrix Val.) Des poissons sexuellement matures sont choisis dans l'effectif et transportés vers le site de reproduction. Les sexes sont séparés. L'état de maturité des produits sexuels est déterminé selon la procédure de l'Exemple 1 et des poissons mûrs pour l'ovulation - les mâles compris - sont
traités avec une dose unique de 100 gg du décapeptide de for-
mule (III).
Les poissons qui ne sont pas encore mûrs pour l'ovulation doivent être maintenus à la température du frai
naturel et le composé mentionné ci-dessus doit être adminis-
tré à des doses de 10 gg chacune, au moins deux et au plus dix fois, tant que le noyau du follicule se déplace du centre
vers la périphérie.
Le nombre de traitements dépend de l'état réel de maturité des produits sexuels par rapport à l'état "mûr pour l'ovulation". Ce procédé de maturation dure au moins 150,
dans des cas extrêmes 850 jour-degrés, dans une gamme de tem-
pérature de l'eau de 20 à 26 C.
L'ovulation a lieu 240 à 260 heure-degrés après administration de la dernière dose. Les produits sexuels sont
ensuite séparés.
Ainsi que cela ressort de ce qui précède, l'in-
vention ne se limite nullement à ceux de ses modes de mise en oeuvre, de réalisation et d'application qui viennent d'être
décrits de façon plus explicite; elle en embrasse au contrai-
re toutes les variantes qui peuvent venir à l'esprit du technicien en la matière, sans s'écarter du cadre, ni de la
portée, de la présente invention.
Claims (1)
- REVENDICATIONProcédé pour obtenir des produits sexuels prêts à la fécondation à partir de poissons sexuellements matures, à une période indépendante de leur saison de frai naturel selon lequel l'état réel de maturité est déterminé par l'examen des produits sexuels (sperme et oeufs), des poissons qui ne sont pas encore mûrs pour l'ovulation sont séparés des poissons matures, des produits exerçant un effet hormonalsont administrés aux poissons et après l'ovulation, des pro-duits sexuels sont obtenus à partir des poissons ou de leur environnement, caractérisé en ce qu'à titre de composés ayant des effets hormonaux, des nonapeptide-alcoyl (en Clà4)-amides et des décapeptideamides représentés par la formule générale (I) ci-après: Glp-his-Trp-Ser-Tyr-X1-X2-X3-Pro-X4 (I) dans laquelle: X est un groupe glycyle ou un D-isomère d'un quelconque groupe aminoacide naturel ou synthétique,X2 est un groupe L-aminoacide dont la chaine latérale con-tient 1 à 4 atomes de carbone, L-phénylalanyl ou L-tryptophyle, X3 est un groupe L-aminoacide ayant une chaîne latérale alcoyle en C1à4 ou alcanoyl (en C2à4)-amide, X4 est un groupe glycineamide ou alcoyl (en C1 à4)-amide, ainsi que des sels et complexes métalliques de ces composés, sont administrés aux poissons à une dose de 0,1 Fg à 5 mg, avantageusement 2 à 500 Fg, de préférence 5 à 100 gg et aux poissons qui ne sont pas encore mûrs pour l'ovulation, les quantités ci-dessus sont administrées en au moins deux mais au plus douze portions, la dernière dose utilisée étant au moins égale ou avantageusement au moins 1,5 fois supérieureà la précédente.
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