FI94763C - Menetelmä uusien 2'-halogeenimetylideeni-, 2'-etenylideeni- ja 2'-etynyyliadenosiinijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

1 - 94763

Menetelmä uusien 2'-halogeenimetylideeni-, 2’-etenylidee-ni- ja 2'-etynyyliadenosiinijohdannaisten valmistamiseksi S-adenosyyli-L-metioniinista (AdoMet) riippuvaiset 5 transmetylaatioreaktiot on katsottu osallisiksi moninaisiin biologisiin tapahtumiin, jotka ovat yhteydessä virusten kasvuun ja replikaatioon, virussyntyiseen solujen transformaatioon, pahanlaatuisten solujen kasvuun sekä sellaisiin tapahtumiin kuin esimerkiksi kemotaksis ja eri-10 tys [ks. P.M. Ueland, Pharm. Reviews, 34, 223 (1982)].

Näitä transmetylaatioreaktioita katalysoivat yleensä monet eri transmetylaasit, jotka käyttävät AdoMet:iä metyylido-norisubstraattina lukuisten metyyliakseptorisubstraattien, kuten esimerkiksi katekolien, norepinefriinin, histamii-15 nin, serotoniinin, tryptamiinin, membraanin fosfolipidien, tiettyjen proteiinien lysyyli-, arginyyli-, histidyyli-, aspartyyli-, glutamyyli- ja karboksyyliryhmien, tRNA:n ja mRNA:n sekä DNA:n, metylaatiossa. Nämä eri transmetylaasit tuottavat sivutuotteena S-adenosiini-L-homokysteiiniä 20 (AdoHcy) siirtäessään metyyliryhmän AdoMet:Itä sopivalle metyyliakseptorisubstraatille.

AdoHcy:n on osoitettu olevan tehokas AdoMet:stä riippuvaisten transmetylaatioreaktioiden palauteinhibiit-tori. Tätä transmetylaasien palauteinhibitiota säännöste-25 lee AdoHcy:n biologinen hajotus S-adenosyyli-L-homokys-teiinihydrolaasilla, joka pitää huolen kudosten AdoHcy-tasojen homeostaattisesta kontrollista. Ammattimiehet katsovat yleisesti S-adenosyyli-L-homokysteiinihydrolaasin aktiivisuudella olevan tärkeä osa kudosten AdoHcy-tasojen 30 säätelyssä ja siten AdoMet:stä riippuvaisten transmetylaatioreaktioiden aktiivisuuden kontrolloinnissa.

* Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet ovat S-adenosyy- li-a-homokysteiinihydrolaasin inhibiittoreita. Tämän vuoksi nämä yhdisteet inhiboivat luonnossa esiintyvää AdoHcy:n 35 biologista hajotusta ja johtavat kohonneisiin kudosten 2 . 54763

AdoHcy-tasoihin. Kohonneet AdoHcy-tasot puolestaan tuottavat sisäsyntyisen palauteinhibition moniin AdoMet:stä riippuvaisiin transmetylaatioreaktioihin, jotka liittyvät virusten kasvuun ja replikaatioon, virussyntyiseen solujen 5 transformaatioon, pahanlaatuisten solujen kasvuun sekä sellaisiin tapahtumiin kuin esimerkiksi kemotaksikseen ja eritykseen yhteydessä oleviin biologisiin tapahtumiin.

Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet ovat sen vuoksi käyttökelpoisia näiden biologisten tapahtumien inhibiittoreina 10 sekä loppukäyttösovellutuksessa hyödyllisiä terapeuttisina aineina hoidettaessa potilaita, jotka kärsivät erilaisista patologisista tiloista, joihin nämä tapahtumat katsotaan osallisiksi, kuten esimerkiksi virusinfektioista ja syöpä-sairaustiloista .

15 Tämä keksintö koskee uusia 21-halogeenimetylidee- ni-, 2'-etenylideeni- ja 2'-etynyyliadenosiinijohdannaisia, jotka ovat käyttökelpoisia S-adenosyyli-L-homokys-teiinihydrolaasin inhibiittoreina ja jotka ovat hyödyllisiä virusvastaisina ja syövänvastaisina aineina.

20 Tämä keksintö tuottaa käyttöön uusia 2'-halogeeni- metylideenijohdannaisia, joilla on kaava (1)

Q

25 // ηρ ^*2 Υι hoch2 . V.

Ϊ3 Z

30 |\H /

H \| /H

1 \ OH (1) / Xl 35 X2 94763 3 jossa V on oksi, metyleeni tai tio, X1 ja X2 ovat kumpikin toisistaan riippumattomasti vety tai halogeeni sillä varauksella, että X^:stä ja X2:sta 5 ainakin toinen on halogeeni, on typpi, CH-ryhmä, CC1-ryhmä, CBr-ryhmä tai CNH2~ryh- mä, Y2 ja Yg ovat kumpikin toisistaan riippumattomasti typpi tai CH-ryhmä, 10 Q on NH2, NHOH, NHCH3 tai vety, ja Z on vety, halogeeni tai NH2; tai tämän kaavan mukaisen yhdisteen farmaseuttisesti soveliaan suolan.

Lisäksi tämä keksintö tuottaa myös käyttöön uusia 15 2'-etenylideenijohdannaisia, joilla on kaava (la)

Q

N

20 ^ // ' ^*2 H0CH2

Y3 Z

\H /

25 H \__/ H

I V

OH C

^ (la)

CHR

30 jossa V on oksi, metyleeni tai tio, R on vety tai C14-alkyyli, Y^ on typpi, CH-ryhmä, CCl-ryhmä, CBr-ryhmä tai CNH2~ryhmä.

94763 4 Y2 Ja kumpikin toisistaan riippumattomasti typpi tai CH-ryhmä, Q on NH2, NHOH, NHCH3 tai vety, ja Z on vety, halogeeni tai NH2; 5 tai tämän kaavan mukaisen yhdisteen farmaseuttisesti soveliaan suolan.

Edelleen tämä keksintö tuottaa käyttöön uusia 2'-etynyylijohdannaisia, joilla on kaava (Ib)

10 Q

\ Λ A

15 HOCH2 .V.

^X] Y3 Z

\H

H \ / H

20 OH A2 db) jossa V on oksi, metyleeni tai tio, A1 A2 ovat kumpikin toisistaan riippumattomasti vety 25 tai -C=CR-ryhmä, jossa R on vety tai C^_^-alkyyli, sillä varauksella, että A^:n ollessa vety, A2 on -CsCR-ryhmä ja että A^n ollessa -CsCR-ryhmä, A2 on vety,

Yj on typpi, CH-ryhmä, CCl-ryhmä, CBr-ryhmä tai CNH2~ryh- mä, 30 Y2 ja Y3 ovat kumpikin toisistaan riippumattomasti typpi tai CH-ryhmä, Q on NH2, NHOH, NHCH3 tai vety, ja Z on vety, halogeeni tai NH2; tai tämän kaavan mukaisen yhdisteen farmaseuttisesti sove-35 liaan suolan.

• 5 94763 Tämä keksintö tuottaa myös käyttöön menetelmän, jolla inhiboidaan AdoMet:stä riippuvaista transmetylaatio-aktiivisuutta sen tarpeessa olevalla potilaalla ja joka pitää sisällään sen, että annetaan terapeuttisesti tehokas 5 inhiboiva määrä kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaista yhdistettä.

Tämän keksinnön toinen toteutusmuoto on menetelmä, jolla hoidetaan syöpäsairaustilasta kärsivää potilasta tai kontrolloidaan kasvaimen kasvua syöpäsairaustilasta kärsi-10 väliä potilaalla ja joka pitää sisällään sen, että annetaan terapeuttisesti tehokas syövänvastainen annos kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaista yhdistettä.

Tämän keksinnön lisätoteutusmuoto on menetelmä, jolla hoidetaan virusinfektion vaivaamaa potilasta tai 15 kontrolloidaan virusinfektiota siitä kärsivällä potilaalla ja joka pitää sisällään sen, että annetaan terapeuttisesti tehokas virusvastainen määrä kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaista yhdistettä.

Tässä käytettynä termi "halogeeni" tarkoittaa fluo-20 ri-, kloori-, bromi- tai jodiatomia ja termi "typpi" tarkoittaa trivalenttia typpiatomia, joka on liittyneenä kahteen radikaaliin. Termi "C14-alkyyli" tarkoittaa tyydyttynyttä suora- tai haaraketjuista hiilivetyradikaalia, jossa on yhdestä neljään hiiliatomia.

25 Kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaiset 2'-halogeenime- tylideeni-, 2'-etenylideeni- ja 2'-etynyyliadenosiinijohdannaiset voidaan valmistaa käyttämällä tavallisen ammattimiehen hyvin tuntemia ja arvostamia menetelmiä ja tekniikoita.

30 Yleinen synteesimenetelmä sellaisten kaavan (1) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa sekä että X2 on halogeeni, esitetään kaaviossa A. Seuraavissa kaavioissa kaikki substituentit ovat, mikäli toisin ei ole osoitettu, edellä määritellyn mukaisia. Lisäksi termi "0" 35 tarkoittaa fenyyliryhmää, termi "XHAL" tarkoittaa halogee- • , - 94763 niatornia, termi "LP-" ilmaisee ylidiryhmää [esimerkiksi difluorimetylideenifosfonaattiylidillä voi olla kaava (0)2P(O)-C(F)2].

Kaavio A

5 « ci , ._,aU . „ .λΑα a' ^ 1

Ύ \ ‘1—i' lp-c(Xhal)(>hal ΓΥ V -W

10 ° ° -O o c si valhe a -SI" / ^ «HAI.

-"\ ) ) 1HAL

(2) (3) . οή: °-i ^ \ x » K- >1 13 2

- Ί—HiH

valhe b I“

HO

/ xral

20 1HAL

«) t //Y-

v \ X A

K» Ί ,3 1 25 -► - Ί /» . vaihe c HO C ^

/ 1HAL *HAL

(5) 30 Vaiheessa a ketonijohdannaisen (2), esimerkiksi 6- kloori-9-[ (3,5-0-tetraisopropyylidisiloksaani-1,3-diyyli) -• 2-keto-β-D-erytro-pentofuranosyyli]puriinin, voidaan antaa reagoida Hittig-tyyppisessä reaktiossa dihalogeenimetyli-deenifosforiylidin kanssa, jolloin saadaan vastaava 2-di-35 halogeenimetylideenisubstituoitu johdannainen (3).

- 94763 7

Fosforiylidejä voidaan valmistaa kemian alalla hyvin tunnettujen ja arvostettujen menetelmien mukaisesti, sellaisten kuin ne, jotka J. March on kuvannut kirjassa "Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and 5 Structure", McGraw-Hill Book Company, 702 - 10 (1968). Fosforiylidi voidaan esimerkiksi valmistaa käsittelemällä soveliasta fosforaani- tai fosfonaattijohdannaista soveliaalla emäksellä. Monia erilaisia emäksiä voidaan käyttää, mukaan lukien alkoksideja ja metallo-orgaanisia yh-10 disteitä, kuten esimerkiksi alkyylilitiumia tai litiumdi-alkyyliamidia. Silloin kun halutaan sellainen kaavan (1) mukainen yhdiste, jossa sekä X^ että ^ on halogeeni, tulee vaiheessa a käyttää dihalogeenimetylideenifosforiyli-diä.

15 Soveliaita fosforaaneja tai fosfonaatteja voidaan valmistaa lisäämällä soveliaan di- tai trihalogeenimetaa-nijohdannaisen joukkoon fosfiineja tai fos£iinioksideja, kuten esimerkiksi trialkyylifosfiinia, triaryylifosfiinia (mukaan lukien trifenyylifosfiinia) tai diaryylifosfiini-20 oksidia (mukaan lukien difenyylifosfiinioksidia). Sovelias fosforaani tai fosfonaatti muunnetaan vastaavaksi fosfori-ylidiksi käsittelemällä fosforaania tai fosfonaattia emäksellä. Tämä voidaan toteuttaa tekemällä fosforaanin tai fosfonaatin valmistus soveliaan emäksen läsnä ollessa.

25 Silloin kun halutaan sellainen kaavan (1) mukainen yhdiste, jossa sekä että X£ on halogeeni, voidaan soveliaan ketonin (2) antaa reagoida dihalogeenimetylideenifosfori-ylidin kanssa, joka on valmistettu antamalla fosflinin tai fosfiinioksidin reagoida trihalogeenimetaanin kanssa emäk-30 sen läsnä ollessa.

Silloin kun nimenoma!semmin halutaan sellainen kaa-van (1) mukainen yhdiste, jossa sekä X^ että X2 on fluori, annetaan soveliaan ketonin (2) reagoida difluorimetylidee-nifosforiylidin kanssa, joka on valmistettu antamalla fos-'35 fiinin tai fosfiinioksidin (kuten esimerkiksi difenyyli- 1 > • i 8 94763 fosfiinioksidin) reagoida difluorihalogeenimetaanin (kuten esimerkiksi difluorikloorimetaanin) kanssa emäksen (kuten esimerkiksi butyylilitiumin) läsnä ollessa.

Vaiheessa b yhdisteen (3) tetraisopropyylidisilok-5 saanisuojaryhmä poistetaan alalla hyvin tunnettujen ja arvostettujen tavanomaisten menetelmien ja tekniikoiden mukaisesti, jolloin saadaan suojaamaton dihalogeenimetyli-deenijohdannainen (4). Tetraisopropyylidisiloksaanisuoja-ryhmä voidaan poistaa antamalla (3):n reagoida fluoridi-10 anionin tai hapon kanssa, jotta suojaryhmä saadaan tehokkaasti poistettua ilman halutun tuotteen pilkkoutumista. Käyttää voidaan esimerkiksi tetrabutyyliammoniumfluoridia tai laimeaa suolahappoa.

Vaiheessa c yhdisteen (4) puriiniemäksen 6-kloori-15 ryhmä korvataan termin "Q" edustamalla halutulla ryhmällä, jolloin saadaan tämän keksinnön mukainen 2'-dihalogeenime-tylideeniadenosiinijohdannainen (5). Tämä substituutio voidaan saada aikaan kemian alalla hyvin tunnettujen ja arvostettujen menetelmien mukaisesti. Esimerkiksi kun 20 Q:ksi halutaan Nl^-ryhmä, voidaan (4):n antaa reagoida ammoniakin metanoliliuoksen kanssa, jotta saadaan aikaan 6-klooriryhmän korvautuminen Nl^-ryhmällä.

Seuraava esimerkki esittää tyypillisen kaaviossa A kuvatun mukaisen synteesin. Tämän esimerkin on ymmärret-25 tävä olevan ainoastaan havainnollistava eikä sen tarkoiteta rajoittavan tämän keksinnön piiriä millään tavoin.

Esimerkki 1 2'-deoksi-2'-difluorimetylideeni-adenosiini

Vaihe a: 6-kloori-9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisi- 30 loksaani-1,3-diyyli)-β-D-erytro-pentofuraani-2-(difluori- metylideeni)osyyli]puriini

Valmista difenyylidifluorimetyylifosfiinioksidi seuraavasti: Lisää liuokseen, jossa on difenyylifosfiini-oksidia (25 g, 124 mmol) tetrahydrofuraanissa (THF) 35 (600 ml) ja joka on jäähdytetty -50 eC:seen, 70 ml liuos- • 94763 9 ta, jossa on 1,8 molaarinen (M) n-butyylilitium heksaanis-sa ja anna seistä -50 eC:ssa 20 minuuttia. Lisää hitaasti ylimäärä difluorikloorimetaania ja sekoita -50 eC:ssa kolme tuntia. Anna seoksen tulla huoneenlämpöiseksi klorofor-5 mi/veteen (1/1, v/v; 200 ml). Erota orgaaninen kerros, kuivaa vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihduta kuivaksi. Puhdista flash-kromatografialla piihappogeelissä eluoimalla tolueeni/etyyliasetaatilla (1/1, v/v). Kiteytä uudelleen heksaani/dikloorimetaanista, jolloin saadaan 10 puhdistettu difenyylidifluorimetyylifosfiinioksidi (sp.

93 - 94 °C).

Jäähdytä liuos, jossa on di-isopropyyliamiinia (1,7 ml, 12 mmol) THSrssa (24 ml) -20 °C:seen kloroformi/-hiilihappojää-hauteessa. Lisää tipoittain n-butyylilitiu-15 mia (8,88 ml, 1,35 molaarista liuosta heksaanissa) ja sekoita seosta 20 minuuttia. Jäähdytä seos -70 °C:seen asetoni /hi il ihappojää-hauteessa. Lisää tipoittain difenyyli-difluorimetyylifosfiinioksidia (3,02 g, 12 mmol) THF:ssa (12 ml) sellaisella nopeudella, että seoksen lämpötila ei 20 nouse -65 °C:n yläpuolelle. Sekoita seosta 30 minuuttia ja lisää sitten tipoittain 6-kloori-9-[3,5-0-tetraisopro-pyylidisiloksaani-1,3-diyyli )-2-keto-p-D-erytro-pentofura-nosyyli]puriinia (5,26 g, 10 mmol) THF:ssa (20 ml). Sekoita seosta yksi tunti -70 eC:ssa, lämmitä seos asteittain 25 huoneenlämpöiseksi ja palautusjäähdytä sitten puoli tuntia. Jäähdytä seos huoneenlämpöiseksi, lisää etyyliasetaattia (500 ml) ja pese orgaaninen seos kyllästetyllä natriumbikarbonaatin vesiliuoksella (100 ml). Erota orgaaninen kerros, kuivaa vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja 30 haihduta kuivaksi vakuumissa. Tee jäännökselle kromatogra-fia piihappogeelissä flas-pylväässä eluoimalla etyyliase-taatti/heksaanilla (1/1, v/v), jolloin saadaan otsikon yhdiste.

- 94763 10

Valhe b: 6-kloori-9-[p-D-erytro-pentofuraani-2-(di-fluorimetylideeni)osyyli]puriinl

Lisää 6-kloori-9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisilok-saanl -1,3-diyyl i) - β-D-erytro-pentof uraani - 2 - (di f luorimety-5 lideeni)osyyli]puriinia (560 mg, 1 mmol) liuokseen, jossa on 1,0 M tetrabutyyliammoniumfluoridi THF:ssa (2,2 ml, 2,2 mmol) ja sekoita seosta huoneenlämpötilassa kaksi tuntia. Neutraloi seos etikkahapolla, lisää flash-piihappo-geeliä seokseen ja haihduta kuivaksi vakuumissa. Siirrä 10 jäännös flash-piihappogeelipylvääseen ja eluoi klorofor-mi/etanolilla (9/1, v/v), jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Vaihe c: 2' -deoksi-2' -dif luorimetylideeni-adenosii-ni

Kuumenna liuosta, jossa on 6-kloori-9-[p-D-erytro-15 pentofuraani-2-(difluorimetylideeni)osyyli]puriinia (954 mg, 3 mmol) ammoniakin metanoliliuoksessa (10 ml, kylläinen 0 °C:ssa), suljetussa putkessa 100 °C:ssa kaksi päivää. Haihduta liuos kuivaksi, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

20 Seuraavat yhdisteet voidaan valmistaa edellä esi merkissä 1 kuvatuille menetelmille analogisilla menetelmillä: 2'-deoksi-2'-difluorimetylideeni-N^-metyyliadenosiini 2'-deoksi-2'-dikloorimetylideeni-adenosiini 25 2'-deoksi-2'-difluorimetylideeni-aristeromysiini 2'-deoksi-2'-difluorimetylideeni-4'-tio-adenosiini 2'-deoksi-2'-difluorimetylideeni-8-amino-adenosiini 2'-deoksi-2'-difluorimetylideeni-3-deatsa-adenosiini 2'-deoksi-2'-difluorimetylideeni-l-deatsa-adenosiini 30 Kaaviossa B esitetään yleinen synteesimenetelmä sellaisten kaavan (1) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa X^rstä ja X2:sta toinen on vety.

II

u . 94763

Kaavio B

,·θ6. , .^Cfr.

X'°~ki X * 1 X' ΊΑ A 11 YS,‘ ·Ί—.u-c(«»M.1(a>!*>Y \ '1—^' 1 ' _ o -► o o c(xhal)«soj*>

— %{'*’ vaihe a SI

X)- A>- 10 (a <«>

Cl

, \ X A

I \l « * BSnBuj ^''ve« B / is --ΎΪ -Ί—-<* -- vaihe b 0 0 C(XbM<)(SnBuj) vaihe c

Sl xy- (7) 20 Γ

"t^AA

X/*v’S '· ,UA

9v -w· "va 11 ’

25 o ___o cbubal) -► . b ^ -¾H

, vaihe d H0 cbixbm.) ^ (9) (8) m

Valheessa a ketonijohdannaisen (2), esimerkiksi 6-30 kloori-9-[ (3,5-O-tetraisopropyylidisiloksaani-l, 3-diyyll )- 2-keto-p-D-erytro-pentofuranosyyli]purilnin, annetaan reagoida Wittig-reaktiossa fosforiylldin kanssa, kuten kaa- * viota A varten on yleisesti kuvattu. Kun halutaan sellainen kaavan (1) mukainen yhdiste, jossa toinen X^tstä ja 35 X^zsta on vety, voidaan (2):n antaa reagoida fenyylisul- 94763 12 fonyyli-halogeenimetylideenifosforiylidin kanssa, jolloin saadaan vastaava 2-fenyylisulfonyyli-halogeenimetylideeni-j ohdannainen.

Sovelias fenyylisulfonyyli-halogeenimetylideenifos-5 foriylidi voidaan valmistaa menetelmillä, jotka ovat hyvin tunnettuja ja arvostettuja kemian alalla. Esimerkiksi silloin kun halutaan kaavan (1) mukainen yhdiste, jossa toinen X1:stä ja X2:sta on vety, voidaan soveliaan ketonin antaa reagoida fenyylisulfonyyli-halogeenimetylideenifos-10 foriylidin kanssa, joka on valmistettu antamalla halogee-nifosfaatin (sellaisen kuin dietyylikloorifosfaatin) reagoida halogeenimetyylifenyylisulfonin kanssa emäksen (sellaisen kuin litiumdi-isopropyyliamidin) läsnä ollessa.

Silloin kun nimenomaisemmin halutaan sellainen kaa-15 van (1) mukainen yhdiste, jossa Xjistä ja X2ista toinen on fluori, voidaan soveliaan ketonin (2) antaa reagoida fenyylisulfonyyli-fluorimetylideenifosforiylidin kanssa, joka on valmistettu antamalla halogeenifosfaatin (sellaisen kuin dietyylikloorifosfaatin) reagoida fluorimetyyli-20 fenyylisulfonin kanssa emäksen (sellaisen kuin litiumdi-isopropyyliamidin) läsnä ollessa.

Vaiheessa b 2-fenyylisulfonyyli-halogeenimetylidee-nijohdannainen (6) muunnetaan vastaavaksi 2-tributyyli-tina-halogeenimetylideenijohdannaiseksi (7). Tämä reaktio . 25 voidaan toteuttaa esimerkiksi antamalla 6:n reagoida tri- butyyli-tina-hydridin (HSnBUg) kanssa 2,2’-atsobis-isobu-tyylinitriilin (AIBN) läsnä ollessa sellaisessa sopivassa liuottimessa kuin esimerkiksi bentseenissä. 2-ttibutyyli-tina-halogeenimetylideenijohdannaisen (7) geometriset iso-30 meerit voidaan haluttaessa eristää käyttämällä menetelmiä ja tekniikoita, jotka ovat alalla hyvin tunnettuja ja arvostettuja. Esimerkiksi (7):n geometriset isomeerit voidaan erottaa kätevästi flash-kromatografiällä (piihappo-geeli) eluoimalla 7-%:isella etyyliasetaatilla heksaa-35 nissa.

94763 13

Valheessa c yhdisteen (7) tributyyli-tina-rakenne-yksikkö poistetaan ja korvataan vetyatomilla, jolloin saadaan vastaava 2-halogeenimetylideenijohdannainen (8). Tämä voidaan toteuttaa antamalla (7):n reagoida heksametyylidi-5 silatsaanin kanssa siten, että läsnä on katalyyttinen määrä ammoniakkia formamidissa. Ammattimiehet havaitsevat lisäksi, että sinä aikana kun yhdisteen (7) tributyyli-tina-rakenneyksikköä poistetaan, tulee myös yhdisteen (7) puriiniemäksen 6-klooriryhmä korvautumaan aminoryhmällä.

10 Vaiheessa d yhdisteen (8) tetraisopropyylidisilok- saanisuojaryhmä poistetaan kaaviota A varten kuvatulla tavalla (vaihe b), jolloin saadaan vastaava 2'-halogeeni-metylideeniadenosiinijohdannainen (9), josta suojaus on poistettu. Esimerkiksi voidaan käyttää fluoridisuolaa, 15 sellaista kuin kesiumfluoridia. Lisäksi silloin kun halutaan tämän keksinnön mukainen yhdiste, jossa Q on jokin muu kuin amino, voidaan yhdisteen (9) puriiniemäksen 6-aminoryhmä korvata halutulla rakenneyksiköllä menetelmillä, jotka hyvin tunnetaan ja osataan arvioida kemian 20 alalla.

Kuten ammattimiehelle on välittömästi ilmeistä, esiintyvät 2'-halogeenimetylideeniadenosiinijohdannaiset, joita kaaviossa B edustaa yhdiste (9), kahtena geometrisenä isomeerinä, jotka voidaan nimetä (Z)- ja (E)-isomee-25 reiksi. Nämä isomeerit voidaan erottaa käyttämällä alalla hyvin tunnettuja ja arvostettuja tavanomaisia erotustek-niikoita. Geometriset isomeerit voidaan esimerkiksi erottaa toisistaan pylväskromatografialla käyttämällä Dowex 1-X2 (OH-muoto) -resiiniä. 2-tributyyli-tina-halogeenime-30 tylideenijohdannainen (7) tai vastaava 2-halogeenimetyli- deenijohdannainen (8) voidaan haluttaessa kätevästi jaotella geometrisiksi isomeereikseen käyttämällä tunnettuja tekniikoita. Vastaavat 2'-halogeeninnetylideeniadenosiini-johdannaisten (9) geometriset isomeerit muodostuvat jät- - 94763 14 kamalla synteesiä kaaviossa B kuvatulla tavalla käyttämällä yhdisteiden (7) ja (8) eri isomeerejä.

Seuraava esimerkki esittää tyypillisesti kaaviossa B kuvatun mukaisen synteesin. Tämä esimerkki on ymmärret-5 tävä vain havainnollistavaksi eikä sen tarkoiteta rajoittavan tämän keksinnön piiriä millään tavoin.

Esimerkki 2 (Z)- ja (E)-2'-deoksi-2'-fluorimetylideeni-adeno-siini 10 Vaihe a: 6-kloori-9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisi- loksaani-1,3-diyyli)-p-D-erytro-pentofuraani-2-(2-fluori-2-fenyylisulfonyylimetylideeni)osyyli]puriini

Valmista dietyylifluorimetyylifenyylisulfonyylifos-fonaatti seuraavasti: Lisää dietyylikloorifosfaattia 15 (4,02 g, 3,37 ml, 11,6 mmol) ruiskun avulla liuokseen, jossa on fluorimetyylifenyylisulfonia (2,02 g, 11,6 mmol) kuivassa THF:ssa (23 ml) ja joka on jäähdytetty noin -78 eC:seen kuivassa 3-kaulaisessa 100 ml:n pullossa, jossa on sekoitussauva, argonsyöttöventtiili, lämpömittari ja 20 kumitulppa. Lisää tähän seokseen ruiskulla liuos, jossa on 1,3 M litiumdi-isopropyyliamidi sykloheksaanissa (17,7 ml, 23 mmol) ja seuraa dietyylifluorimetyylifenyyli-sulfonyylifosfonaatin muodostumista kaasukromatografialla <GC).

25 Lisää edellä olevaan dietyylifluorimetyylifenyyli- sulfonyylifosfonaattiliuokseen, jonka on annettu lämmetä 0 °C:seen, liuos, jossa on 6-kloori-9-[(3,5-0-tetraisopro-pyylidisiloksaani-1,3-diyyli)-2-keto-8-D-erytro-pentofura-nosyyli]puriinia (6,11 g, 11,6 mmol) kuivassa THF:ssa 30 (noin 10 ml). Anna reaktioseoksen lämmetä huoneenlämpötilaan ja sekoita argonilmakehän alaisena neljä tuntia. Kaada seos kyllästettyyn, jääkylmään ammoniumkloridin liuokseen ja uuta seos etyyliasetaatilla (3 kertaa, 75 ml kukin kerta). Yhdistä orgaaniset kerrokset, kuivaa vedettömällä 35 magnesiumsulfaatilla ja haihduta kuivaksi. Tee jäännöksel- • - 94763 15 le kromatografia pilhappogeeli-flas-pylväässä eluoimalla etyyliasetaatti/heksaanilla (1/3, v/v). Haihduta liuotin kuiviin alennetussa paineessa, jolloin saadaan otsikon yhdiste valkoisena vaahtona. Trituroi heksaanilla, jäähdy-5 tä yön yli, suodata ja kuivaa sakka, jolloin saadaan 4,9 g otsikon yhdistettä.

Vaihe b: 6-kloori-9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisi- loksaani-1,3-diyyli)-β-D-erytro-pentofuraani-2-(2-fluori-2-tributyyli-tina-metylideeni)osyyli]puriini 10 Lisää tributyyli-tinahydridiä (769 mg, 0,71 ml, 2,6 mmol) ja 6-kloori-9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisilok-saani-1,3-diyyli ) -β-D-erytro-pentofuraani-2-(2-fluori-2-fenyylisulfonyylimetylideeni)osyyli]puriinia (0,6 g, 0,88 mmol) bentseeniin (0,8 ml) ja kuumenna palautusjääh-15 dytykseen. Lisää 2,2'-atsobis-isobutyylinitriiliä (35 mg, 0,26 mmol) bentseenissä (0,5 ml) noin yhden tunnin aikana.

Erota isomeerit flash-kromatografialla (piihappogeeli) eluoimalla 7-%:isella etyyliasetaatilla heksaanissa, jolloin saadaan 0,31 g otsikon yhdisteen ensimmäisenä eluoi-20 tuvaa isomeeriä (nopea isomeeri) ja 0,38 g otsikon yhdisteen toisena eluoituvaa isomeeriä (hidas isomeeri).

Vaihe c: (Z)- ja (E)-6-amino-9-[(3,5-0-tetraisopro-pyylidisiloksaani-1,3-diyyli)-β-D-erytro-pentofuraani-2-(2-fluorimetylideeni)osyyli]puriini 25 Nopea isomeeri: Yhdistä 6-kloori-9-[(3,5-0-tetra- isopropyylidisiloksaani-1,3-diyyli)-β-D-erytro-pentof uraani-2- (2-f luori-2-tributyyli-tina-metylideeni )osyyli]purii-nin nopea isomeeri (0,7 g, 0,8 mmol) ja heksametyylidisi-latsaani (3,5 ml) formamidissa (1,75 ml), joka on kylläs-30 tetty ammoniakilla. Kuumenna seos 100 °C:seen kolmeksi tunniksi. Haihduta liuotin alennetussa paineessa ja puh-·· dista jäännös flash-kromatografialla (piihappogeeli) eluoimalla etyyliasetaatti/heksaanilla (1/1, v/v). Haihduta liuotin, jolloin saadaan otsikon yhdiste (0,165 g, 35 0,31 mmol).

- 94763 16

Hidas Isomeeri: Yhdistä 6-kloori-9-[(3,5-0-tetra-isopropyylidisiloksaani-1,3-diyyli) -β-D-erytro-pentofuraa-ni-2-(2-fluori-2 -1 r ibu tyy 11 - tina-metyl ideeni) osyy 11 ] puri 1 -nin hidas isomeeri (0,3 g, 0,36 mmol) ja heksametyylidisi-5 latsaani (1,5 ml) formamidissa (0,75 ml), joka on kyllästetty ammoniakilla. Kuumenna seos 100 °C:seen kolmeksi tunniksi. Haihduta liuotin alennetussa paineessa ja puhdista jäännös flash-kromatografialla (piihappogeeli) eluoimalla etyyliasetaatti/heksaanilla (1/1, v/v). Haih-10 duta liuotin, jolloin saadaan otsikon yhdiste (0,065 g, 0,12 mmol).

Vaihe d: (Z)- ja (E)-2,-deoksi-2'-fluorimetylidee-niadenosiini

Nopea isomeeri: Yhdistä 6-amino-9-[(3,5-0-tetraiso-15 propyylidisiloksaani-1,3-diyyli)-p-D-erytro-pentofuraani-2-(2-fluorimetylideeni)osyyli]puriini (nopea isomeeri) (0,114 g, 0,22 mmol) ja kesiumfluoridi (1,32 g, 8,7 mmol) etanolissa (30 ml) ja sekoita ympäristön lämpötilassa noin 24 tuntia. Haihduta liuotin piihappogeelin läsnä ollessa, 20 laita piihappogeelijäännös flash-kromatografiapylvääseen ja eluoi etyyliasetaatilla ja tämän jälkeen 10-%:isella etanolilla etyyliasetaatissa. Haihduta liuotin, jolloin saadaan otsikon yhdiste (47 mg, 0,16 mmol) kokonaissaannolla 7,0 %.

25 Hidas isomeeri: Yhdistä 6-amino-9-[(3,5-0-tetraiso- propyylidisiloksaani-1,3-diyyli)-p-D-erytro-pentofuraani-2-(2-fluorimetylideeni)osyyli]puriini (hidas isomeeri) (0,206 g, 0,4 mmol) ja kesiumfluoridi (2,28 g, 15 mmol) etanolissa (60 ml) ja sekoita ympäristön lämpötilassa noin 30 24 tuntia. Haihduta liuotin piihappogeelin läsnä ollessa, laita piihappogeelijäännös flash-kromatografiapylvääseen ja eluoi etyyliasetaatilla ja tämän jälkeen 10-%:isella etanolilla etyyliasetaatissa. Haihduta liuotin, jolloin saadaan otsikon yhdiste (81 mg, 0,28 mmol) kokonaissaan-35 nolla 5,9 %.

17 - 94763

Seuraavat yhdisteet voidaan valmistaa edellä esimerkissä 2 kuvatuille menetelmille analogisilla menetelmillä: (E)- ja (Z)-2'-deoksl-2'-f luorimetylideeni-N**-rmetyyliade-5 nosllnl (E)- ja (Z)-2,-deoksl-2,-kloorlmetylldeenl-adenoslinl (E)- ja (Z)-2'-deoksl-2'-fluorimetylldeeni-aristeromysilni (E)- ja (Z)-2,-deoksi-2'-fluorimetylideeni-4'-tioadenosii-ni 10 (E)- ja (Z)-2'-deoksl-2'-fluorlmetylldeenl-8-aminoadeno- slini (E)- ja (Z)-2'-deoksl-2'-fluorlmetylideeni-3-deatsa-adeno-sllni

Kaaviossa C esitetään yleinen menetelmä sellaisten 15 kaavan (la) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa 1*2 on vety.

Kaavio C

20 x«'

25 I ' I ^ \ C(OH)-C=CR

o __o o — ~~.S1 vaihe a "Si -Λ >- >- (2) N ' 11 (10) -('ti : I ,ο—I ^7\ ^ _^ K- 7 t3 2 vaihe b Y\ " -►

O n C-CHR Valhe C

35 ~~~S1 A>- di) 1β - 94763 .,,.λ'Λ .

. ^ · · ί&: · · “ V*lh' d RO OCR.

<12> (13)

Vaiheessa a ketonijohdannaisen (2), esimerkiksi 6-10 kloori-9 - [ (3,5-O-tetraisopropyylidisiloksaani-l, 3-diyyli )-2-keto-p-D-erytro-pentofuranosyyli]puriinin, voidaan antaa reagoida asetyleenlrunkoisen Grignardin reagenssin kanssa, kuten esimerkiksi sen, jota esittää yleinen kaava R^CsC-MgBr, jolloin saadaan vastaava 2-etynyylialkoholi (10).

15 Vaihtoehtoisesti alkoholi (10) voidaan valmistaa reaktiivisista metalleista tehdyistä muista metallo-orgaanisista yhdisteistä, kuten esimerkiksi siitä, jota esittää yleinen kaava RC=CLi.

Sovelias Grignardin reagenssi tai muu metallo-or-20 gaaninen reagenssi, voidaan valmistaa kemian alalla hyvin tunnettujen ja arvostettujen menetelmien ja menettelytapojen mukaisesti, kuten esimerkiksi niiden, jotka J. March kuvaa kirjassa "Advanced Organic Chemistry: Reactions,

Mechanisms and Structure", McGraw-Hill Book Company, 684-25 88 ja 697 - 98 (1968). Esimerkiksi asetyleenistä tai al- kyylisubstituoidusta asetyleenistä voidaan valmistaa Grignardin reagenssi käsittelemällä asetyleeniä tai alkyy-lisubstituoitua asetyleeniä metyylimagnesiumbromidilla vedettömissä olosuhteissa.

30 Ammattimies ymmärtää tietenkin hyvin, että 2-ety- nyylialkoholi (10) voi esiintyä jompanakumpana kahdesta geometrisestä isomeeristä, 1. toisena, jossa etynyyllryhmä on samalla puolella furanosyylirengasta kuin 3-hydroksi-ryhmä ja toisena, jossa etynyyllryhmä on samalla puolella 35 furanosyylirengasta kuin puriiniryhmä. Näille geometrisil-

II

94763 19 le Isomeereille voidaan vastaavasti antaa nimet 6-kloori- 9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisiloksaani-l,3-diyyli)-β-ϋ-ribo-pentofuraani-2-(etynyyli)osyyli]puriini ja 6-kloori- 9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisiloksaani-l,3-diyyli)-β-ϋ-5 arabino-pentofuraani-2-(etynyyli)osyyli]puriini.

Vaiheessa b 2-etynyylialkoholi (10) pelkistetään, jolloin saadaan 2-etenylideenijohdannainen (11). Tämä pelkistys voidaan tehdä sellaisten menetelmien ja menettelytapojen mukaisesti, jotka ovat kemian alalla hyvin tunnet-10 tuja ja arvostettuja, kuten esimerkiksi käsittelemällä 2-etynyylialkoholia (10) litiumalumiinihydridillä ja alumii-nikloridilla.

Vaiheessa c poistetaan yhdisteen (11) tetraisopro-pyylidiloksaanisuojaryhmä, kuten kaaviota A varten on ku-15 vattu (vaihe b), jolloin saadaan vastaava 2-etenylideeni-johdannainen (12), josta suojaus on poistettu.

Vaiheessa d yhdisteen (12) puriiniemäksen 6-kloori-ryhmä korvataan halutulla ryhmällä, jota edustaa termi Q, jolloin saadaan tämän keksinnön mukainen 2'-etenylideeni-20 adenosiinijohdannainen (13). Tämä substituutio voidaan toteuttaa kemian alalla hyvin tunnettujen ja arvostettujen menettelytapojen mukaisesti, kuten kaaviota A varten on kuvattu (vaihe d).

Seuraava esimerkki esittää kaavion C kuvaaman tyy-25 pillisen synteesin. Tämän esimerkin on ymmärrettävä olevan vain havainnollistava eikä sen tarkoiteta rajoittavan tämän keksinnön piiriä millään tavoin.

Esimerkki 3 2'-deoksi-2'-etenylideeni-adenosiini 30 Vaihe a: 6-kloori-9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisi- loksaani-1,3-diyyli)-β-ϋ-(ribo- tai arabino) - pentofuraani-2-(etynyy1i)osyy1i]puriini

Kyllästtä THF (750 ml) 0 eC:ssa asetyleenillä ja lisää tipoittain 1,95 N metyylimagnesiumbromidia (51 ml, 35 0,1 mol) sillä aikaa kun asetyleeni vielä kuplii liuoksen 20 94763 läpi. Pysäytä asetyleenivirta 20 minuuttia sen jälkeen kun metyylimagnesiumbromidin lisäys on lopussa ja puhdista 20 minuutin ajan argonilla. Lisää tähän liuokseen 6-kloori- 9-[ (3,5-0-tetraisopropyylidisiloksaani-l,3-diyyli )-2-keto-5 β-Ο-βΓγΐΓΟ-ρβηΐοίυΓβηοβγγΙ^ρυΓϋηΙβ (2,61 g, 5 mmol) THFrssa (20 ml), lämmitä reaktioseos huoneenlämpöiseksi ja sekoita 16 tuntia. Lisää 1 600 ml etyyliasetaattia ja pese seos kyllästetyllä NH^Cl:n vesiliuoksella (200 ml).

Kuivaa orgaaninen kerros vedettömällä magnesiumsulfaatilla 10 ja haihduta kuivaksi vakuumissa. Tee jäännökselle kromato-grafia piihappogeeli-flash-pylväässä eluoimalla etyyliasetaatti/heksaanilla (1/1, v/v), jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Vaihe b: 6-kloori-9-[(3,5-O-tetraisopropyylidisi- 15 loksaani-1,3-diyyli) - β-D-erytro-pentof uraani-2-(etenyli- deeni)osyyli]puriini

Lisää sekoituksessa olevaan liuokseen, jossa on litiumalumiinihydridiä (76 mg, 2 mmol) ja alumiinikloridia (132 mg, 1 mmol) vedettömässä dietyylieetterissä (4 ml) 20 ja joka on jäähdytetty 0 °C:seen, tipoittain liuos, jossa on 6-kloori-9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisiloksaani-l,3-diyyli)^-D-(ribo tai arabino)-pentofuraani-2-(etynyyli)-osyyli]puriinia (0,52 g, 1 mmol) vedettömässä dietyylieetterissä (2 ml). Sekoita reaktioseosta yksi tunti ja sam-, 25 muta sitten reaktio lisäämällä 10-%:ista kaiiumvetysul faattia (10 ml). Pese vesipitoinen liuos etyyliasetaatilla (3 kertaa, 20 ml kukin kerta). Yhdistä orgaaniset kerrokset, kuivaa vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja konsentroi liuos vakuumissa. Tee jäännökselle kromatografia pii-30 happogeeli-flash-pylväässä eluoimalla etyyliasetaatti/hek-saanilla (1/1, v/v), jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Vaihe c: 6-kloori-9-[β-D-erytro-pentofuraani-2- (etenylideeni)osyyli]puriini

Lisää liuokseen, jossa on 1,0 M tetrabutyyliammo-35 niumfluoridi THF:ssa (2,2 ml, 2,2 mmol), 6-kloori-9-[(3,5- - 94763 21 0-tetraisopropyylidisiloksaani-l,3-diyyli)-p-D-erytro-pen-tofuraani-2-(etenylideeni)osyyli]puriinia (542 mg, 1 mmol) ja sekolta seosta huoneenlämpötilassa kaksi tuntia. Neutraloi seos etlkkahapolla, lisää flash-piihappogeeliä seok-5 seen ja haihduta kuivaksi vakuumlssa. Siirrä jäännös flash-pllhappogeellpylvääseen ja eluoi kloroformi/etanolilla (20/1, v/v), jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Vaihe d: 2'-deoksi-2'-etenylideeni-adenoslinl Kuumenna 6-kloori-9-[β-D-erytro-pentofuraani-2- 10 (etenylideeni)osyyli]puriinin (882 mg, 3 nunol) ammoniakin metanoliliuoksessa (10 ml kyllästetty 0 °C:ssa) suljetussa putkessa 100 °C:ssa kaksi päivää. Haihduta liuos kuivaksi, jolloin saadaan otsikon yhdiste.

Seuraavat yhdisteet voidaan valmistaa edellä esi-15 merkissä 3 kuvatuille menetelmille analogisilla menetelmillä: 21-deoksi-2'-etenylideeni-N®-metyyliadenosiini 2'-deoksi-2'-etenylideeni-aristeromysiini 2'-deoksi-2'-etenylideeni-4’-tioadenosiini 20 2'-deoksi-2'-etenylideeni-8-aminoadenosiini 2'-deoksi-2'-etenylideeni-8-klooriadenosiini 2'-deoksi-2'-etenylideeni-N®-hydroksiadenosiini 2'-deoksi-2'-etenylideeni-3-deatsa-adenosiini

Kaaviossa D esitetään yleinen synteesimenetelmä 25 kaavan (ib) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi.

22 - 94763

Kaavio D

= , . .ofr X' *» « Α' Ί:Γ "γ *» «

Vi >—^· v_si _ s~‘

I ' I '' j \ H f^·™ C(OH)-CSCR

0 n 0 — > _ "V* vaihe a —Si''0 xy- xy io (J) Uo»

Cl /V^

0-1 ^'T\« 'x X

15 -► K* H T3 2

vaihe b * CH-CSCR

BO

(14) 20 /yA'· ^»Λ A χ - k- >b 13 *

vaihe c H CH-CECR

BO

25 ' US)

Vaiheessa a ketonijohdannaisen (2), esimerkiksi 6-kloori-9-[ (3,5-0-tetraisopropyylidisiloksaani-l, 3-diyyli) -2-keto-p-D-erytro-pentofuranosyyli]puriinin, voidaan antaa 30 reagoida kuten kaaviossa C on kuvattu (vaihe a), jolloin saadaan vastaava 2-etynyylialkoholi (10). Kuten kaaviota i C varten on kuvattu, 2-etynyylialkoholi (10) voi esiintyä kahtena geometrisenä isomeerinä, ί. 6-kloori-9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisiloksaani-1,3-diyyli)-β-D-ribo-pentof u-35 raani-2-(etynyyli)osyyli]puriinina ja 6-kloori-9-[(3,5-0- 23 · 94763 tetraisopropyylidisiloksaani-l,3-diyyli)-p-D-arabino-pen-tofuraani-2-(etynyyli)osyyli]puriinina.

Vaiheessa b 2-etynyylialkoholi (10) pelkistetään ja tetraisopropyylidisiloksaanisuojaryhmä poistetaan, jol-5 loin saadaan 2-etynyylijohdannainen (14). Tämä pelkistys voidaan tehdä menetelmillä ja menettelytavoilla, jotka ovat hyvin tunnettuja ja arvostettuja kemian alalla, käsittelemällä 2-etynyylialkoholia (10) sellaisella pelkistävällä aineella kuin esimerkiksi trietyylisilaanilla sel-10 laisen hapon kuin esimerkiksi trifluorietikkahapon läsnä ollessa.

Ammattimies osaa tietenkin hyvin arvioida, että 2-etynyylijohdannainen (14) voi esiintyä jompanakumpana kahdesta geometrisestä isomeeristä, 1. toisena, jossa etynyy-15 liryhmä on samalla puolella furanosyylirengasta kuin 3-hydroksiryhmä ja toisena, jossa etynyyliryhmä on samalla puolella furanosyylirengasta kuin puriiniryhmä. Näille geometrisille isomeereille voidaan vastaavasti antaa nimet 6-kloori-9- [ β-D-erytro-pentof uraani-2(R) - (etynyyli )osyy-20 li]puriini ja 6-kloori-9-[p-D-erytro-pentofuraani-2(S)-(etynyyli)osyyli]puriini.

Vaiheessa c yhdisteen (14) puriiniemäksen 6-kloori-ryhmä korvataan halutulla ryhmällä, jota edustaa termi Q, jolloin saadaan tämän keksinnön mukainen 2'-etynyyliadeno-25 siinijohdannainen (15). Tämä substituutio voidaan toteut taa kemian alalla hyvin tunnettujen ja arvostettujen menetelmien mukaisesti kuten kaaviota A varten on kuvattu (vaihe d). Ammattimies voi jälleen hyvin arvioida, että 2'-etynyyliadenosiinijohdannainen (14) voi esiintyä jom-30 panakumpana kahdesta geometrisestä isomeeristä, 1. toisena, jossa etynyyliryhmä on samalla puolella furanosyylirengasta kuin 3-hydroksiryhmä ja toisena, jossa etynyyliryhmä on samalla puolella furanosyylirengasta kuin puriiniryhmä. Näille geometrisille isomeereille voidaan vastaa-35 vasti antaa nimet 2'-deoksi-2'(R)-etynyyli-adenosiini (tai L..

- 94763 24 6-amino-9 - [p-D-erytro-pentofuraani-2(R)-(etynyyli )osyyli]-puriini) ja 2'-deoksi-2'(S)-etynyyliadenosiini (tai 6-ami-no-9- [ p-D-erytro-pentofuraani-2(S )-(etynyyli )osyyli] puriini ).

5 Kuten ammattimiehelle on välittömästi ilmeistä, voidaan 2'-etynyyliadenosiinijohdannaisen (15) geometriset (R)- ja (S)-isomeerit erottaa käyttämällä tavanomaisia erotusmenetelmiä. Geometriset isomeerit voidaan esimerkiksi erottaa toisistaan pylväskromatografialla käyttämällä 10 alalla hyvin tunnettuja ja arvostettuja menetelmiä ja tekniikoita.

Seuraava esimerkki edustaa tyypillistä kaavion D kuvaamaa synteesiä. Tämän esimerkin on ymmärrettävä olevan ainoastaan havainnollistava eikä sen tarkoiteta rajoitta-15 van tämän keksinnön piiriä millään tavoin.

Esimerkki 4 2'-deoksi-2’(R tai S)-etynyyli-adenosiini

Vaihe a: 6-kloori-9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisi- loksaani-1,3-diyyli)-p-D-(ribo tai arabino)-pentofuraani-20 2-(etynyyli)osyyli]puriini

Valmista otsikon yhdiste kuten edellä esimerkissä 3 (vaihe a) on kuvattu.

Vaihe b: 6-kloori-9-[ρ-D-erytro-pentofuraani-2(R

tai S)-(etynyyli)osyyli]puriini 25 Liuota 6-kloori-9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisilok- saani-1,3-diyyli)-p-D-(ribo tai arabino)-pentofuraani-2-(etynyyli)osyyli]puriinia (489 mg, 0,94 mmol) dikloorime-taaniin (3 ml) typpi-ilmekhän alaisena ja jäähdytä liuos jäähauteessa (0 °C). Lisää trifluorietikkahappoa (0,54 ml, 30 7,08 mmol) ja tämän jälkeen trietyylisilaania (0,27 ml, 1,71 mmol) ja sekoita liuosta yön yli huoneenlämpötilassa. Laimenna reaktioseos etyyliasetaatilla (10 ml) ja pese jääkylmällä IN natriumhydroksidiliuoksella (2 kertaa, 5 ml kumpikin kerta). Kuivaa orgaaninen kerros vedettömällä 35 magnesiumsulfaatilla ja haihduta kuivaksi.

« 25

- 9476Z

Valhe d: 2'-deoksi-2'-etynyyli-adenosiini ja 9- (etynyyll-p-D-arabino-furanosyyli)adeniini

Kuumenna liuosta, jossa on 6-kloori-9-[p-D-erytro-pentofuraani-2(R tai S)-(etynyyli)osyyli]puriinia (880 mg, 5 3 mmol) ammoniakin metanoliliuoksella (10 ml, kyllästetty 0 °C:ssa), suljetussa putkessa 100 °C:ssa kaksi päivää. Haihduta liuos kuivaksi ja erota arabino- ja riboyhdisteet Dowex 1-X2 (OH-muoto) -kromatografiapylväällä, jolloin saadaan otsikon yhdisteet.

10 Seuraavat yhdisteet voidaan valmistaa edellä esi merkissä 4 kuvatuille menetelmille analogisilla menetelmillä: 2'-deoksi-2’(R tai S)-etynyyli-N^-metyyliadenosiini 2'-deoksi-2*(R tai S)-etynyyli-aristeromysiini 15 2 *-deoksi-2'(R tai S)-etynyyli-4'-tioadenosiini 2'-deoksi-2'(R tai S)-etynyyli-8-aminoadenosiini 2'-deoksi-2*(R tai S)-etynyyli-8-klooriadenosiini 2'-deoksi-2'(R tai S)-etynyyli-N^-hydroksiadenosiini 2'-deoksi-2'(R tai S)-etynyyli-3-deatsa-adenosiini 20 Vaikka kussakin kaavan (1), (la) ja (b) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi esitetyssä reaktiokaaviossa lähtömateriaalina on esimerkkinä käytetty 6-kloori-9-[(3,5-O-tetraisopropyylidisiloksaani-1,3-diyyli)-2-keto-p-D-erytro-pentofuranosyyli]puriinijohdannaisia, on ammatti-25 miehelle välittömästi ilmeistä, että kaavan (1), (la) ja (Ib) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa käyttämällä lähtömateriaalina muita 9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisiloksaa-ni-1,3-diyyli )-2-keto-β-D-erytro-pentofuranosyyli] puriini-johdannaisia esitetyille analogisissa reaktiokaavioissa.

30 Lähtömateriaalit kaavioissa A - D kuvatussa ylei sessä synteesimenetelmässä käytettäväksi ovat helposti saatavissa käyttämällä synteesimenetelmiä ja -menettelytapoja, jotka tavanomainen ammattimies hyvin tuntee ja osaa arvioida. Esimerkiksi 6-amino-9-[(3,5-0-tetraisopropyyli-35 disiloksaani-1,3-diyyli) - 2-keto-β-D-erytro-pentof uranosyy- - 94763 26 li]puri±nia voidaan käyttää lähtömateriaalina monille kaavojen (1), (la) ja (Ib) mukaisille yhdisteille ja voidaan valmistaa adenosiinista sen menetelmän mukaisesti, jonka ovat kuvanneet Usui ja Ueda [Chem. Pharm. Bull. 34, 15 5 (1986)]. 6-kloori-9-[(3,5-0-tetraisopropyylidisiloksaani- 1,3-diyyli)-2-keto-p-D-erytro-pentofuranosyyli]puriini voidaan valmistaa 6-kloori-9-(β-D-ribofuranosyyli)purii-nista menetelmällä, joka on analoginen Usuin ja Uedan kuvaamalle menetelmälle. Muut 2-ketolähtömateriaalit voidaan 10 valmistaa käyttämällä Usuin ja Uedan kuvaamille menetelmille analogisia menetelmiä, kuten myös muilla tavanomaisilla menetelmillä siten kuin ne alalla hyvin tunnetaan ja arvostetaan.

Toisessa toteutusmuodossa tämä keksintö tuottaa 15 käyttöön menetelmän AdoMetistä riippuvaisen transmetylaa-tioaktiivisuuden inhiboimiseksi sen tarpeessa olevalla potilaalla, mikä käsittää sen, että annetaan terapeuttisesti tehokas inhiboiva määrä kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaista yhdistettä. Termi "terapeuttisesti tehokas inhi-20 boiva määrä” tarkoittaa määrää, joka on riittävä inhiboimaan AdoMet:stä riippuvaisen transmetylaatioaktiivisuuden yhden tai usean annoksen annon jälkeen.

Termi "potilas" tarkoittaa tässä käytettynä lämminveristä eläintä, kuten esimerkiksi nisäkästä, joka kärsii 25 tietystä sairaustilasta. On ymmärrettävä, että koirat, kissat, rotat, hiiret, hevoset, nautakarja, lampaat ja ihmiset ovat esimerkkejä eläimistä, jotka kuuluvat termin merkityksen piiriin.

Kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaisten yhdisteiden 30 uskotaan saavan aikaan niiden inhiboivan vaikutuksen AdoMet:stä riippuvaiseen transmetylaatioon inhiboimalla AdoHcy-hydrolaasia, johtaen siten kudosten AdoHcy-tasojen kasvuun, mikä puolestaan tuottaa palauteinhibition AdoMet:stä riippuvaiseen transmetylaatioon. On kuitenkin 35 ymmärrettävä, ettätätä keksintöä ei rajoita mikään nimen- » - 94763 27 omainen teoria tai esitetty mekanismi, joka selittäisi sen tehokkuuden loppukäyttösovellutuksessa.

Kuten ammattimiehet hyvin tietävät ja arvostavat, monille eri sairaustiloille, kuten esimerkiksi tietyille 5 syöpäsairauksille ja virusinfektioille, on tunnusmerkillistä liiallinen AdoMettstä riippuvainen transmetylaatio-aktiivisuus. Termi "liiallinen" tarkoittaa tässä käytettynä aktiivisuuden tasoa, joka sallii sairaustilan etenevän.

10 Nimenomaisemmin tämä keksintö tuottaa käyttöön me netelmän, jolla hoidetaan potilasta, joka kärsii syöpä-sairaustilasta, jolle on tunnusmerkillistä liiallinen AdoMetrstä riippuvainen transmetylaatioaktiivisuus, joka menetelmä käsittää sen, että potilaalle annetaan terapeut-15 tisesti tehokas syövänvastainen määrä kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaista yhdistettä. Termi "syöpäsairaustila" tarkoittaa tässä käytettynä epänormaalia tilaa tai olosuhdetta, jolle on tunnusmerkillistä nopeasti lisääntyvä solujen kasvu tai kasvain. Sellaisiin syöpäsairaustiloihin, joille 20 on tunnusmerkillistä liiallinen AdoMet:stä riippuvainen transmetylaatioaktiivisuus ja joissa hoito kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaisella yhdisteellä voi olla erityisen hyödyllinen, kuuluvat: leukemiat, kuten esimerkiksi - mutta näihin rajoittumatta - akuutti lymfoblastinen, krooni-25 nen lymfosyyttinen, akuutti myeloblastinen ja krooninen myelosyyttinen leukemia; karsinoomat, kuten esimerkiksi-mutta näihin rajoittumatta - kohdunkaulan, ruokatorven, mahan, ohutsuolen, paksusuolen ja keuhkojen karsinoomat; sarkoomat, kuten esimerkiksi - mutta näihin rajoittumat-30 ta - osteooma, osteosarkooma, lipooma, liposarkooma, he-mangiooma ja hemangiosarkooma; melanoomat, mukaan lukien amelanoottiset ja melanoottiset; sekä sekatyyppiset syövät, kuten esimerkiksi - mutta näihin rajoittumatta - kar-sinosarkooma, lymfaattisen kudostyypin follikulaarinen 35 retikkelisolusarkooma ja Hodgkinin tauti.

• - 94763 28

Terapeuttisesti tehokas syövänvastainen määrä kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaista yhdistettä tarkoittaa määrää, joka on tehokas, annettaessa potilaalle yksi tai usea annos, kontrolloimaan kasvaimen kasvua tai pidentämään 5 potilaan elinaikaa yli sen, mikä on odotettavissa ilman tätä hoitoa.

"Kontrolloimaan syövän kasvua" tarkoittaa tässä käytettynä sen kasvun ja metastosoinnin hidastamista, keskeyttämistä, paikallaan pidättämistä tai pysäyttämistä 10 eikä se välttämättä merkitse syövän täydellistä eliminointia.

Lisäksi tämä keksintö tuottaa käyttöön menetelmän, jolla hoidetaan potilasta, jota vaivaa virusinfektio, jolle on tunnusmerkillistä liiallinen AdoMet:stä riippuvainen 15 transmetylaatioaktiivisuus, joka menetelmä käsittää sen, että potilaalle annetaan terapeuttisesti tehokas virusvas-tainen määrä kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaista yhdistettä. Termi "virusinfektio" tarkoittaa tässä käytettynä epänormaalia tilaa tai olosuhdetta, jolle on tunnusmerkillis-20 tä virussyntyinen solujen transformaatio, viruksen repli-kaatio ja lisääntyminen. Sellaisiin virusinfektioihin, joille on tunnusmerkillistä liiallinen AdoMet:stä riippuvainen transmetylaatioaktiivisuus ja johon hoito kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaisella yhdistellä voi olla erityi-25 sen hyödyllinen, kuuluvat: retrovirukset, kuten esimerkiksi - mutta näihin rajoittumatta - HTLV-I, HTLV-II, ihmisen immuunikatovirukset, HTLV-III (AIDS-virus) ja muut näiden kaltaiset; RNA-virukset, kuten esimerkiksi - mutta näihin rajoittumatta - tyypin A, B ja C influenssa, sikotauti, 30 tuhkarokko, rhinovirus, dengue-kuume, vihurirokko, rabies, hepatiittivirus A, aivotulehdusvirus ja muut näiden kaltaiset; DNA-virukset, kuten esimerkiksi - mutta näihin rajoittumatta - herpes, lehmänrokko, papilloomavirus (syylä), hepatiittivirus V ja muut näiden kaltaiset.

- 94763 29

Terapeuttisesti tehokas virusvastainen määrä kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaista yhdistettä tarkoittaa määrää, joka on tehokas viruksen kontrolloinnissa. Tämä viruskont-rolli tarkoittaa solujen virussyntyisen transformaation 5 tai viruksen replikaation ja lisääntymisen hidastumista, keskeyttämistä, paikallaan pidättämistä tai pysäyttämistä eikä se välttämättä tarkoita viruksen täydellistä eliminointia.

Hoitava diagnostikko voi ammattimiehenä helposti 10 määrittää terapeuttisesti tehokkaan annoksen käyttämällä tavanomaisia tekniikoita ja havainnoimalla analogisissa tilanteissa saatuja tuloksia. Määrittäessään terapeuttisesti tehokasta annosta, hoitava diagnostikko ottaa huomioon useita tekijöitä, mukaan lukien - näihin kuitenkaan 15 rajoittumatta - nisäkäslajin, sen koon, iän ja yleisen terveyden, käsillä olevan nimenomaisen sairauden, sairauden asteen tai mukanaolon tai vakavuuden, potilasyksilön vasteen, nimenomaisen annettavan yhdisteen, antotavan, annettavan valmisteen biologisen hyötyosuuden ominaispiir-20 teet, valitun annosteluohjelman, samanaikaisen lääkityksen käytön ja muut asiaan kuuluvat olosuhteet.

Kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaisen yhdisteen terapeuttisesti tehokkaan määrän odotetaan vaihtelevan noin 0,1 mg:sta ruumiinkiloa kohti päivässä (mg/kg/päivä) noin 25 100 mg/kg/päivä. Edullisten määrien odotetaan vaihtelevan välillä noin 0,5 - 10 mg/kg/päivä.

Lisätoteutusmuodossaan tämä keksintö koskee menetelmää, jolla hoidetaan syöpäsairaustilasta tai virusinfektiosta kärsivää potilasta ja joka pitää sisällään sen, 30 että potilaalle annetaan terapeuttisesti tehokas syövän-vastainen tai virusvastainen määrä sellaista kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaista yhdistettä, jossa Q on N^, yhdistelmähoidossa terapeuttisesti tehokkaan inhiboivan määrän kanssa adenosiinideaminaasin (ADA) inhibiittoria. Termi 35 "yhdistelmähoito" ottaa mahdollisena lukuun (l):n, (la):n • - 94763 30 tai (lb):n yhteisannon ADA-inhibiittorin kanssa käytännöllisesti katsoen samanaikaisesti tai potilaan hoidon ADA-inhibiittorilla ennen tai jälkeen hoidon kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaisella yhdisteellä. ADA-inhibiittorin tera-5 peuttisesti tehokas inhiboiva määrä on määrä, joka on tehokas merkittävästi inhiboimaan ADA:a potilaassa.

ADA deaminoi kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaisia yhdisteitä, joissa Q on NI^ ja hajottaa siten aktiiviset yhdisteet suhteellisen inaktiivisiksi metaboliiteiksi.

10 Silloin kun kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaista yhdistettä, jossa Q on NHj ja ADA-inhibiittoria annetaan yhdistelmähoitona, annos on määrältään tai antofrekvenssiltään pienempi kuin se, joka tarvitaan silloin, kun kaavan (1), (la) tai (Ib) mukainen yhdise annetaan yksin.

15 Moninaisia farmaseuttisesti soveliaita myrkyttömiä ADA-inhibiittoreita voidaan käyttää, mukaan lukien - tähän kuitenkaan rajoittumatta - deoksikoformysiiniä. ADA-inhi-biittorin terapeuttisesti tehokas inhiboiva määrä vaihte-lee välillä noin 0,05 - 0,5 mg/kg/päivä ja on edullisesti 20 noin 0,1 - 0,3 mg/kg/päivä. Deoksikoformysiini on edullinen ADa-inhibiittori käytettäväksi yhdistelmähoidossa yhdessä sellaisten kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaisten yhdisteiden kanssa, joissa Q on NH^.

Edellä kuvatusta sairaustilasta kärsivän potilaan 25 hoidon toteuttamiseksi kaavan (1), (la) tai (Ib) mukainen yhdiste voidaan antaa missä tahansa muodossa tai millä tahansa tavalla, joka tekee yhdisteen tehokkaina määrinä biologisesti saatavilla olevaksi, mukaan lukien oraalisia ja parenteraalisia teitä. Kaavan (1), (la) tai (Ib) mukai-30 set yhdisteet voidaan antaa esimerkiksi suun kautta, ihon alle, lihaksen sisään, suonen sisään, transdermaalisesti, intranasaalisesti, rektaalisesti ja muilla näiden kaltaisilla tavoilla. Oraalinen anto on yleensä edullinen. For-mulaatioiden valmistuksen ammattimies osaa helposti valita 35 annon asianmukaisen muodon ja tavan, joka riippuu valitun « 31 94763 yhdisteen nimenomaisista ominaispiirteistä, hoidettavasta sairaustilasta, sairauden vaiheesta ja muita asiaan kuuluvista olosuhteista.

Yhdisteet voidaan antaa yksin tai farmaseuttisen 5 koostumuksen muodossa yhdistelmässä farmaseuttisesti soveliaiden kantajien tai täyteaineiden kanssa, joiden osuuden ja luonteen määräävät valitun yhdisteen liukoisuus ja kemialliset ominaisuudet, valittu antoreitti ja tavanomainen farmaseuttinen käytäntö. Lisäksi kaavan (1), (la) tai (Ib) 10 mukaisia yhdisteitä, joissa Q on Nl^, voidaan antaa edellä kuvatulla tavalla yhdistettynä edelleen ADA-inhibiittorin kanssa. Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan, vaikka ne ovatkin tehokkaita sellaisenaan, formuloida ja antaa niiden farmaseuttisesti soveliaina happoadditiosuoloina, kun 15 päämääränä on stabiilisuus, kiteytyksen käytännöllisyys, lisääntynyt liukoisuus ja muut näiden kaltaiset seikat.

Toisessa toteutusmuodossa tämä keksintö tuottaa käyttöön farmaseuttisia koostumuksia, jotka käsittävät terapeuttisesti tehokkaan määrän kaavan (1), (la) tai (Ib) 20 mukaista yhdistettä seoksessa tai muuten yhteydessä yhden tai useamman farmaseuttisesti soveliaan kantajan tai täyteaineen kanssa. Lisäksi tämä keksintö tuottaa käyttöön farmaseuttisen koostumuksen, joka käsittää terapeuttisesti tehokkaan määrän sellaista kaavan (1), (la) tai (Ib) mu-25 kaista yhdistettä, jossa Q on ja terapeuttisesti te hokkaan ADA:a inhiboivan määrän ADA-inhibiittoria seoksessa tai muuten yhteydessä yhden tai useamman farmaseuttisesti soveliaan kantajan tai täyteaineen kanssa. Termi "terapeuttisesti tehokkaat määrät" tarkoittavat kaavan 30 (1), (la) tai (Ib) mukaisiin yhdisteisiin sovellettuna tehokkaista inhiboivia, syövänvastaisia tai virusvastaisia määriä, kuten kulloinkin on asianmukaista.

Farmaseuttiset koostumukset valmistetaan farmaseuttisella alalla hyvin tunnetulla tavalla. Kantaja tai täy-35 teaine voi olla kiinteä, puolikilnteä tai nestemäinen ma- « • - 94763 32 teriaali, joka voi toimia vehikkelinä tai väliaineena aktiiviselle aineosalle. Sopivia kantajia tai täyteaineita tunnetaan alalla hyvin. Farmaseuttinen koostumus voidaan sovittaa oraaliseen tai parenteraaliseen käyttöön ja voi-5 daan antaa potilaalle tablettien, kapseleiden, peräpuikkojen, liuoksen, suspensioiden tai muiden näiden kaltaisten muodossa.

Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet voidaan antaa oraalisesti esimerkiksi yhdessä inertin laimennusaineen 10 tai syömäkelpoisen kantajan kanssa. Ne voidaan sulkea ge-latiinikapseleihin tai puristaa tabletteihin. Oraalista terapeuttista antoa varten yhdisteet voidaan saattaa yhteen täyteaineiden kanssa ja käyttää tabletteina, lääke-nappeina, kapseleina, eliksiireinä, suspensioina, lääke-15 siirappeina, vohveleina, purukumeina ja muina näiden kaltaisina. Näiden valmisteiden tulisi sisältää vähintään 4 % keksinnön mukaista yhdistettä, aktiivista aineosaa, mutta tässä voi olla vaihtelua riippuen nimenomaisesta muodosta ja voi kätevästi olla välillä noin 4 - 70 % yksikön 20 painosta. Koostumuksissa mukana olevan yhdisteen määrä on sellainen, että sopiva annostus saavutetaan. Tämän keksinnön mukaiset edulliset koostumukset ja valmisteet valmistetaan siten, että oraalisen annostuksen yksikkö sisältää keksinnön mukaista yhdistettä määrän, joka on 5,0-25 300 mg.

Tabletit, pillerit, kapselit, lääkenapit ja muut näiden kaltaiset voivat myös sisältää yhtä tai useampaa seuraavista adjuvanteista: sitojia, kuten esimerkiksi mik-rokiteistä selluloosaa, traganttikumia tai gelatiinia, 30 täyteaineita, kuten esimerkiksi tärkkelystä tai laktoosia, hajoamista edistäviä aineita, kuten esimerkiksi algiini-happoa, Primogeliä, maissitärkkelystä ja muita näiden kaltaisia, liukastusaineita, kuten esimerkiksi magnesiumstea-raattia tai Sterotexiä, liukumista edistäviä aineita, ku-35 ten esimerkiksi kolloidista piidioksidia ja makeutusainei- « ♦ 94763 33 ta, kuten esimerkiksi sakkaroosia tai sakariinia, voidaan lisätä tai makua antavaa aineta, kuten esimerkiksi piparminttua, metyylisalisylaattia tai appelsiinimakuaineitta.

Kun annosteluyksikön muoto on kapseli, se voi sisältää, 5 edellä olevien materiaalityyppien lisäksi, nestemäisen kantajan, sellaisen kuin polyetyleeniglykoli tai rasvaöl-jy. Muut annosteluyksikön muodot voivat sisältää useita eri materiaaleja, jotka muuntavat annosteluyksikön fysikaalista muotoa, esimerkiksi päällysteinä. Niinpä tabletit 10 tai pillerit voivat olla päällystettyjä sokerilla, sella-kalla tai muilla suolistoon sopivilla päällystysaineilla. Lääkesiirappi voi sisältää, puheena olevien yhdisteiden lisäksi, makeutusaineena sakkaroosia sekä tiettyjä säily-tysaineita, väreaineita ja värejä ja makuaineita. Näiden 15 erilaisten koostumusten valmistukseen käytettävien materiaalien tulee olla farmaseuttisesti puhtaita ja käytettyinä määrinä myrkyttömiä.

Parenteraalista terapeuttista antoa varten tämän keksinnön mukaiset yhdisteet voidaan sisällyttää liuokseen 20 tai suspensioon. Näiden valmisteiden tulisi sisältää vähintään 0,1 % keksinnön mukaista yhdistettä, mutta määtä voi vaihdella välillä 0,1 - 50 % valmisteen painosta. Tällaisissa koostumuksissa mukana olevan keksinnön yhdisteen määrä on sellainen, että sopiva annostus saavutetaan. Tä-25 män keksinnön mukaiset edulliset koostumukset ja valmisteet valmistetaan siten, että parenteraalisen annostuksen yksikkö sisältää keksinnön mukaista yhdistettä määrän, joka on välillä 5,0 - 100 mg.

Liuokset ja suspensiot saattavat lisäksi siältää 30 yhtä tai useampaa seuraavista adejuvanteista: steriilejä : laimennusaineita, kuten esimerkiksi injektiovettä, suola- liuosta, kiinnitettyjä öljyjä, polyetyleeniglykoleja, gly-seriiniä, propyleeniglykolia tai muita synteettisiä liuottimia, bakteerivastaisia aineita, kuten esimerkiksi bent-35 syylialkoholia tai metyyliparabeeniä, antioksidantteja, • • · - 94763 34 kuten esimerkiksi askorbiinihappoa tai natriumbisulfiit-tia, kelatoivia aineita, kuten esimerkiksi etyleenidiamii-nitetraetikkahappoa, puskurieta, kuten esimerkiksi ase-taatteja, sitraatteja tai fosfaatteja sekä aineita tooni-5 suuden säätämiseen, kuten esimerkiksi natriumkloridia tai dekstroosia. Parenteraalinen valmiste voidaan sulkea ampulleihin, kertakäyttöruiskuihin tai lasista tai muovista tehtyihin usean annoksen pieniin lääkepulloihin.

Mikä tahansa edellä kuvatuista farmaseuttisista 10 koostumuksista, joka sisältää sellaisia kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaisia yhdisteitä, joissa Q on Nl^, saattaa sisältää myös terapeuttisesti tehokkaan inhiboivan määrän ADA-inhibiittoria edellä kuvattujen aineosien kanssa seoksessa tai muulla tavoin niiden kanssa yhteydessä.

.15 Kuten on laita minkä tahansa rakenteellisesti toi silleen sukua olevien yhdisteiden ryhmän kanssa, jolla on erityistä yleistä käyttöä, kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaisten yhdisteiden tietyt ryhmät ja konfiguraatiot ovat edullisia niiden loppukäyttösovellutuksissa.

20 Mitä tulee substituentteihin ja edullisia ovat yleensä sellaiset kaavan (1) mukaiset yhdisteet, joissa on fluori ja on vety sekä ne, joissa X^ on vety ja X2 on fluori.

Mitä tulee substituenttiin R, edullisia ovat yleen-25 sä sellaiset kaavojen (la) ja (Ib) mukaiset yhdisteet, joissa R on vety.

Seuraavat ovat edullisia lisätoteutusmuotoja kaavan (1), (la) ja (Ib) mukaisille yhdisteille: yhdisteet, joissa V on oksi, yhdisteet, joissa Y^ on CH-ryhmä, yhdisteet, 30 joissa Y2 on typpi, yhdisteet, joissa Y^ on typpi ja yh-: disteet, joissa Z on vety, ovat yleensä edullisia. Lopuksi mitä tulee Q:hun, edullisia ovat yleensä ne kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaiset yhdisteet, joissa Q on NH2 tai NHCHg, erityisen edullisia ollessa niiden, joissa Q on 35 NH2.

• · 35 - 94763

Seuraava lista identifioi kaavan (1), (la) tai (Ib) mukaisia yhdisteitä, jotka ovat tämän keksinnön erityisen edullisia toteutusmuotoja: 2'-deoksi-2'-difluorimetylideeni-adenosiini 5 2'-deoksi-2'-difluorimetylideeni-aristeromysiini 2’-deoksi-2'-difluorimetylideeni-3-deatsa-adenosiini (Z)- ja (E)-2’-deoksi-2’-fluorimetylideeni-adenosiini (Z)- ja (E)-2'-deoksi-2'-fluorimetylideeni-aristeromysiini (Z)- ja (E)-2'-deoksi-2'-fluorimetylideeni-3-deatsa-adeno-10 siini 2'-deoksi-2'-etenylideeni-adenosiini 2'-deoksi-2’-etenylideeni-3-deatsa-adenosiini 2'-deoksi-2'-etenylideeni-aristeromysiini 2'-deoksi-2'(R) ja (S)-etynyyli-adenosiini 15 2’-deoksi-2'(R) ja (S)-etynyyli-3-deatsa-adenosiini 2'-deoksi-2'(R) ja (S)-etynyyli-aristeromysiini

Edellä olevan listan tarkoitetaan olevan pelkästään tämän keksinnön erityisen edullisia toteutusmuotoja havainnollistava ja on ymmärrettävä, että lista ei rajoita 20 keksinnön piiriä millään tavoin.

« • ·

Claims (5)

36 94763

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava 5 // ητ ^*2 hoch2 v . .•o * i. X. OH < \ X2 15 jossa V on oksi, metyleeni tai tio, Xx ja X2 ovat kumpikin halogeeneja, Yl on typpi, CH-ryhmä, CCl-ryhmä CBr-ryhmä tai CNH2-ryhmä, Y2 ja Y3 ovat kumpikin toisistaan riippumattomasti typpi 20 tai CH-ryhmä, Q on NH2, NHOH, NHCHj tai vety, ja Z on vety, halogeeni tai NH2, tunnettu siitä, että se koostuu vaiheista, joissa (a) annetaan 6-kloori-2'-ketoadenosiinijohdannai-25 sen, jossa on soveliaat suojaryhmät, reagoida dihalogeeni- metylideenifosforiylidin kanssa, jolloin saadaan 6-kloori-2'-dihalogeenimetylideeniadenosiinijohdannainen, jossa on soveliaat suojaryhmät, (b) poistetaan suojaryhmät 6-kloori-2'-dihalogee- 30 nimetylideeniadenosiinijohdannaisesta antamalla sen rea- : goida hapon kanssa, ja (c) korvataan 6-kloori-2'-dihalogeenimetylideeni-adenosiinijohdannaisen, josta suojaryhmät on poistettu, 6-klooriryhmä halutulla ryhmällä, jota edustaa termi "Q". • · 37 94763

2. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava o 5 * Vl H0CH2 . v. Yj 2 i\I_/. 10 1 % X. OH ς \ X2 jossa V on oksi, metyleeni tai tio,

15 Xi ja X2 ovat kumpikin toisistaan riippumattomasti vety tai halogeeni, sillä edellytyksellä, että X1:stä ja X2:sta toinen on halogeeni ja X::stä ja X2:sta toinen on vety, Y3 on typpi, CH-ryhmä, CCl-ryhmä, CBr-ryhmä tai CNH2-ryhmä, Y2 ja Y3 ovat kumpikin toisistaan riippumattomasti typpi 20 tai CH-ryhmä, Q on NH2, NHOH, NHCH3 tai vety, ja Z on vety, halogeeni tai NH2, tunnettu siitä, että se koostuu vaiheista, joissa (a) annetaan 2'-fenyylisulfonyylihalogeenimetyli- 25 deeniadenosiinijohdannaisen, jossa on soveliaat suojaryh- mät, reagoida tributyylitinahydridin kanssa 2,2'-atsobis-isobutyylinitriilin läsnä ollessa vastaavan 2'-tributyyli-tinahalogeenimetylideenijohdannaisen muodostamiseksi, (b) annetaan näin muodostuneen 2’-tributyylitina- 30 halogeenimetylideenijohdannaisen reagoida heksametyylidi- : silatsaanin kanssa siten, että läsnä on katalyyttinen mää rä ammoniakkia formamidissa, ja (c) poistetaan suojaryhmät.

3. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen yh- 35 disteen valmistamiseksi, jolla on kaava • • · 38 94763 Q * Υι

5 HOCHj ^ V .. N *3 Z T-?· 0H \\

10 CHR jossa V on oksi, metyleeni tai tio, R on vety tai C1.4-alkyyli, Y3 on typpi, CH-ryhmä, CCl-ryhmä, CBr-ryhmä tai CNH2-ryh-15 mä, Y2 Ja Y3 ovat kumpikin toisistaan riippumattomasti typpi tai CH-ryhmä, Q on NH2, NHOH, NHCH3 tai vety, ja Z on vety, halogeeni tai NH2; 20 tunnettu siitä, että se koostuu vaiheista, joissa (a) pelkistetään 6-kloori-2'-etynyyli-2’-hydroksi-adenosiinijohdannainen, jossa on soveliaat suojaryhmät, jotta saadaan 6-kloori-2’-etenylideeniadenosiinijohdannainen, jossa on soveliaat suojaryhmät, 25 (b) poistetaan suojaryhmät 6-kloori-2'-etenylidee- niadenosiinijohdannaisesta antamalla sen reagoida hapon kanssa, ja (c) korvataan saadun 6-kloori-2'-etenylideeniadenosiini johdannaisen, josta suojaryhmät on poistettu, ,6-30 klooriryhmä halutulla ryhmällä, jota edustaa termi "Q".

: 4. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen yh- disteen valmistamiseksi, jolla on kaava • · 39 - 94763 Q ϋι\ l 1

5 HOCHj V . N-'^'X. //\ " · H\j_Y H OH A2 (lb) 10 jossa V on oksi, metyleeni tai tio, A2 ja A2 ovat kumpikin toisistaan riippumattomasti vety tai -C=CR-ryhmä, jossa R on vety tai C1.4-alkyyli, sillä edelly-15 tyksellä, että A2:n ollessa vety A2 on -C=CR-ryhmä ja Ax:n ollessa -CsCR-ryhmä A2 on vety, Yx on typpi, CH-ryhmä, CCl-ryhmä, CBr-ryhmä tai CNH2-ryh-mä, Y2 ja Y3 ovat kumpikin toisistaan riippumattomasti typpi 20 tai CH-ryhmä, Q on NH2, NHOH, NHCH3 tai vety, ja Z on vety, halogeeni tai NH2; tunnettu siitä, että se koostuu vaiheista, joissa (a) pelkistetään 6-kloori-2'-etynyyli-2’-hydroksi- 25 adenosiinijohdannainen, jossa on soveliaat suojaryhmät, jotta saadaan 6-kloori-2'-etynyyliadenosiinijohdannainen, ja (b) korvataan saadun 6-kloori-2’-etenylideeniade-nosiinijohdannaisen, josta suojaryhmät on poistettu, 6- 30 klooriryhmä halutulla ryhmällä, jota edustaa termi ”Q". e » • « 40 94763