FI90080B - Foerfarande foer framstaellning pilokarpinderivat - Google Patents

Description

1 90080

MENETELMÄ PILOKARPIINIJOHDANNAISTEN VALMISTAMISEKSI -FÖRFARANDE FÖR FRAMSTÄLLNING AV PILOKARPINDERIVAT

Esillä oleva keksintö koskee menetelmää uusi-5 en, fasmaseuttisesti käyttökelpoisten pilokarpiinijohdannaisten valmistamiseksi.

Pilokarpiini on {3S-cis)-3-etyylidisytro-4-[(1-metyyli -1H-imidatsol-5-yyli)metyyli]-2(3H)-fura-nonin geneerinen nimi. Pilokarpiini tunnetaan kirjal-10 lisuudessa kolinergisenä aineena.

Julkaisussa, Journal Of The Chemical Society, voi 101 (1912) ss. 530-544, on kuvattu erilaisten pilokarpiini johdannaisten valmistusta.

Nyt on yllättäen todettu, että yhdiste, joka 15 saadaan korvaamalla furaanirengas tiofeniinirenkaalla, samaten kuin yhdisteen johdannaiset, omaa erityisen mielenkiintoisen farmaseuttisen profiilin.

Siten keksintö liittyy uusiin pilokarpiinijohdannaisiin, joita jatkossa kutsutaan uusiksi yhdisteik-20 si, joilla on kaava I, Υ^ΤΓ'Ι'1 1 : 25 R4 2 R„ 1 3 jossa

Rx on alempi alkyyli, R2 ja Rj ovat toisistaan riippumatta vety tai alempi 30 alkyyli, R4 ja R5 ovat yhdessä = O, = S tai = NR, jolloin R on di(alempi alkyyliJkarbamoyylioksi, tai R4 on vety ja R, on hydroksi tai OR , jossa R' on alempi alkyy- 35 li tai di(alempi alkyyli)karbamoyyli, vapaan emäksen tai happoaditiosuolan muodossa.

2 9 O G 8 O

Riippuen substituenteista uusissa yhdisteissä voi olla asymetrisiä hiiliatomeja 2-, 3- ja 4-asemissa. Keksintö koskee kaikkia saatavia cis/ trans-isomeereja, yleisesti kaikkia stereoisomeereja samaten kuin niiden 5 seoksia, esim. enantiomeerien raseemisia seoksia.

Kaikissa alkyyleissä on edullisesti yksi tai kaksi hiiliatomia.

R3 on edullisesti metyyli.

Edullisesti yksi substuenteista R2 ja R3 on 10 vety ja toinen etyyli.

Edullisesti R4 ja Rs ovat yhdessä = O.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden eräässä ryhmässä R1 on, kuten on määritelty yllä R2 on vety, R3 on etyyli ja R4 sekä R5 ovat yhdessä = O tai = S.

15 Seuraavat merkitykset ovat ensisijaisia:

Rx on metyyli; yksi substituenteista R2 ja R3 on vety ja toinen on alempi alkyyli, erityisesti etyyli; R4 ja R5 ovat yhdessä = O tai = S, erityisesti 20 = O.

Esillä oleva keksintö tuo esiin menetelmän kaavan I mukaisen yhdisteen tai sen happoadditiosuolan valmistamiseksi, johon menetelmään kuuluu reaktiovaihe jossa kaavan II mukainen yhdiste, 25 jossa R1# R2 ja R3 tarkoittavat saama kuin kyllä, saatetaan reagoimaan fosforisulfidin kanssa, mahdollisesti 35 muutetaan täten saatu kaavan I mukainen yhdiste, jossa R4 ja R5 ovat yhdessä = O tai = S, edelleen toiseksi kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi ja otetaan talteen saa- 3 90080 tu kaavan I mukainen yhdiste talteen vapaan emäksen tai happoadditiosuolan muodossa.

Kaavan II mukaisen yhdisteen reaktio fosfori-sulfidin kanssa voi tapahtua tunnettuun tapaan käyttäen 5 esim. P4S10:ta fosforisulfidina, tai edullisesti Lawes-son'n reagenssia, jolla on kaava 30

5 S

15 Reaktioseoksen työstäminen voidaan toteuttaa tunnetuilla menetelmillä. Saadaan seos, jossa on kaavan I mukaista yhdistettä, jossa R4 ja R5 ovat yhdessä = O, kaavan I mukaisen yhdisteen kanssa, jossa R4 ja R5 ovat yhdessä = S. Erotus voidaan toteuttaa tunnetuilla mene-20 telmillä, esim. kromatografisesti.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä, joissa R4 ja R5 ovat yhdessä = O, voidaan edelleen valmistaa saattamalla kaavan II mukainen yhdiste reagoimaan natriumtio-asetaatin kanssa tunnettuun tapaan, esim. kuten on 25 kuvattu esimerkissä 2 alla.

Kaava I mukaisten yhdisteiden, joissa R4 ja R5 ovat yhdessä = O tai = S, muuttaminen kaavan I mukaisiksi muiksi yhdisteiksi voidaan toteuttaa tunnetuin menetelmin, esim. seuraavasti: 30 Kaavan I mukaisia yhdisteitä, jossa R4 on vety ja R5 on hydroksi, voidaan valmistaa pelkistämällä kaavan I mukaisia yhdisteitä, jossa R4 ja R5 ovat yhdessä = O, esim. käyttäen di-isobutyylialumiinihydri-dia, kuten on kuvattu esimerkissä 4. Saadut yhdisteet 35 voidaan muuttaa kaavan I mukaisiksi yhdisteiksi, jossa R4 on vety ja R5 on -OR' saattamalla ne reagoimaan kaavan R’OH (kun R’ on yllä määritelty alkyyli) tai kaavan * 90080 R'CL (kun R' on yllä määritelty alkyylikarbamoyyli) kanssa, kuten on kuvattu esimerkeissä 5 ja 6.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä, jossa R4 ja Rs ovat yhdessä =NR, voidaan valmistaa saattamalla yhdis-5 te, jossa R4 ja R5 ovat yhdessä = S, reagoimaan hydrok-syyliamiinihydrokloridin kanssa, kuten on kuvattu esimerkissä 7, ja saattamalla saatava yhdiste reagoimaan dialkyyliaminokarboksyylihappokloridin kanssa analogisesti esimerkin 6 kanssa.

10 Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan erottaa vapaassa muodossa tai niiden happojen kanssa muodostettujen happoadditiosuolojen muodossa. Happoadditiosuolat voidaan valmistaa vapaista emäsmuodoista tunnettuun tapaan ja päinvastoin.

15 Kaavan 11 mukaiset lähtöaineet ovat tunnettuja ja niitä voidaan valmistaa tunnetuin menetelmin tai analogisesti tunnettujen menetelmien kanssa. Esim. (3S-cis)-3-etyylidihydro-4-[(l-metyyli-lH-imidatsol-5-yy-li)metyyli]-2(3H)-furanoni [(+)-pilokarpiini] on kuvat-20 tu kirjallisuudessa farmaseuttisena aineena, ja se on kaupallisesti saatavilla.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät happoadditiosuolat, joista alla käytetään nimitystä keksinnön mukaiset yhdisteet, 25 omaavat farmakologista aktiivisuutta ja ovat sen vuoksi käyttökelpoisia farmaseuttisina aineina.

Erityisesti keksinnön mukaiset yhdisteet lisäävät kolinergistä aktiivisuutta standardikokeessa, jossa ne toimivat vallitsevasti presynaptisina mus-30 kariinisina antagonisteina ja eräät niistä postsynap-tisina muskariinisina agonisteina. Niiden kyky parantaa muistitoimintaa, joka on huononnettu skopolamiinilla, osoittaa, että keksinnön mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia vanhuusiän henkisessä rappeutumisessa, 35 vanhuusiän dementiassa ja Alzheimerin taudissa, erityisesti varhaisvaiheessa, kun osa kolinergisistä hermo-päätteistä on vahingoittumattomia. Lisäksi keksinnön 5 90080 mukaiset yhdisteet ovat näin ollen käyttökelpoisia hoidettaessa vanhusten konfusionaalisia sekavuustiloja, myasthenia gravista, skitsofreniaa, maniaa ja glaukoomaa.

5 Keksinnön mukaisten yhdisteiden farmakologinen aktiivisuus voidaan osoittaa seuraavilla kokeilla: Sähköisesti aikaansaatu asetyylikoliinin vapautuminen hippokampaalileikkeistä (rotta) 10 Keksinnön mukaiset yhdisteet antagonisoivat pitoisuuksina n. 10 6 - 10'4 M muskariiniagonistien, kuten oksotremoriinin, inhiboivia vaikutuksia presynap-tisissa muskariinireseptoreissa, mikä osoittaa, että kaavan I mukaiset yhdisteet ovat presynaptisia muska-15 riiniantagonisteja. Kaavan I mukaiset yhdisteet antagonisoivat lisäksi sellaisen endogeenisen asetyylikoliinin inhiboivia vaikutuksia, joka akkumuloituu hermo-päistä vapautumisen jälkeen asetyylikoliiniesteraasi-inhibiittorin, fysostigmiinin, läsnäollessa.

20

Vaikutus viljeltyjen hippokampaali-pyramidisolujen sähköiseen aktiivisuuteen

Keksinnön mukaiset yhdisteet eivät pysty vaikuttamaan pitoisuuksina n. 10’6 - 10~4 M pyramidisolujen 25 aktiivisuuteen koetilanteessa, jossa ei ole lainkaan mukana kolinergisiä soluja, mutta ne indusoivat ärsytysvaikutuksia yhteisviljelmissä, jotka sisältävät funktionaalisia kolinergisiä sidekudoksia (connectivities) (yhteisviljelmä, joka on valmistettu septumista 30 ja hippokampuksesta). Tulokset osoittavat, että keksinnön mukaiset yhdisteet vaativat kolinergisten solujen läsnäolon ärsytysvaikutuksien aikaansaamiseksi. Tulokset ovat yhteensopivia käsityksen kanssa, jonka mukaan keksinnön mukaiset yhdisteet indusoivat asetyylikolii-35 nin vapautumista kolinergisistä päistä ilman, että ne salpaavat postsynaptisia muskariinireseptoreja.

6 90080

Passiivinen muistamattomuus (skopolamiiniamnesia) hiirellä

Kun hiirille annetaan skopolamiini-injektio ennen kertakokeena suoritettavaa passiivista muistamat-5 tomuus(passive avoidance)opetusta, hiiret eivät muista opetusta, mikä ilmenee niiden käytöksestä kokeen jälkeen suoritetussa muistiretentiokokeessa. Keksinnön mukaiset yhdisteet kumoavat osaksi tätä muistamatto-muustilaa, kun myös niitä annetaan ennen opetusta. 10 Oraalisesti annettaessa alhaisin annos, joka aikaansaa merkittävää parannusta kokeessa, on 153 pmol/kg (40 mg/kg). Tulokset osoittavat, että keksinnön mukaiset yhdisteet voivat parantaa tajunnan sisällön (kognitiivista) heikentymistä, joka aiheutuu mitä suurimmalla 15 todennäköisyydellä kolinergisestä vajaatoiminnasta, toimimalla presynaptisina antagonisteina reseptoreissa, joissa asetyylikoliini inhiboi omaa vapautumistaan.

Vaikutus rotan aivojen asetyylikoliinipitoisuuteen 20 Annettaessa oraalisesti n. 1-10 mg/kg suu ruisina annoksina keksinnön mukaiset yhdisteet indusoivat annoksesta riippuvan striatiumin, hippokampuksen ja korteksin asetyylikoliinisisällön pitkäkestoisen pienentymisen. Tällä on samanlainen, mutta 10 kertaa hei-25 kömpi vaikutus, kuin skopolamiinilla, joka on pre- ja postsynaptinen muskariiniantagonisti, tuotettu vaikutus. Keksinnön mukaisten yhdisteiden samanaikainen anto asetyylikoliiniesteraasi-inhibiittorin kanssa tuottaa selvästi erilaisia vaikutuksia asetyylikoliinitasoihin 30 kuin keksinnön mukaisesti klassinen skopolamiini-anta-gonistin yhdistelmä. Tämä osoittaa, että keksinnön mukaiset yhdisteet ovat selektiivisesti presynaptisia antagonisteja ilman postsynaptisia antagonistiominai-suuksia.

35 Mainitun presynaptisen antagonismin lisäksi keksinnön mukaisilla yhdisteillä, jotka ovat cis-konfi-guraatiossa asemissa C 3/C 4, on myös agonistista vuo- 7 90080 rovaikutusta muskariinireseptorien kanssa, jotka sijaitsevat postsynaptisesti. Tämä osoitetaan klassisissa farmakologisissa kokeissa saaduilla tuloksilla: a) eristetty marsun ileumivalmiste (sykkyräsuoli-): 5 jossa kaavan I mukaisten yhdisteiden vaikutuksia lihaksen supistumiseen mitataan isotonisesti vertaamalla muskariinilla saatuihin vaikutuksiin.

b) rotan eristetty servikaaligangliovalmiste (kaulaher-mosolmu-): muskariiniagonistit indusoivat depolarisaa- 10 tion tässä eristetyssä gangliossa; vaikutuksia verrataan muskariiniannon jälkeen saatuihin vaikutuksiin.

Käytetyt menetelmät on kuvattu julkaisussa, J.M. Palacios et ai., Europ. J. Pharmacol. 125, 45-62, (1986).

15 Mainittujen aineiden pD2-arvot näissä kokeissa ovat välillä 5 - 6.5 ja nämä aineet voivat toimia täysin tai osittain agonisteina.

Edellä esitetyt tulokset osittavat, että keksinnön mukaiset yhdisteet toimivat pääasiallisesti 20 presynaptisina muskariiniantagonisteina ja eräät yhdisteet postsynaptisina muskariiniagonisteina.

Esimerkin 2 mukainen yhdiste on edullinen yhdiste edellä esittettyihin indikaatioihin. On esim. määritetty, että tämä yhdiste indusoi rotalla suorite-25 tussa kokeessa merkittävän asetyylikoliinipitoisuuden pienentymisen korteksissa 3 mg/kg p.o. annon jälkeen sekä hippokampuksessa ja striatumissa lmg/kg p.o. annon jälkeen. Siten esimerkin 2 mukaista yhdistettä ehdotetaan annettavaksi näihin indikaatioihin 1 - 50 mg p.o. 30 päiväannoksina suuremmille nisäkkäille esim. ihmisille. Edullisena indikaationa esitetään vanhuusiän dementia.

Yleisesti sopiva päivittäinen annos on välillä noin 1 - 250 mg, esim. noin 1 - 50 mg keksinnön mukaista yhdistettä yhdessä kiinteän tai nestemäisen kantaja-35 aineen tai laimennusaineen kanssa.

Seuraavissa esimerkeissä kaikki lämpötilat ovat korjaamattomia ja on ilmoitettu Celsius-asteina.

8 90080 ESIMERKKI 1; (+) - (3R-trans)-3-etyylidihydro-4-Γ(1-me- tyyli-lH-imidatsol-5-vyli)metyyli]-2(3H)-tiofenoni la ( -)-(3R-trans)-3-etyylidihydro-4-f(1-metyyli-lH-imi-datsol-5-yyli)metyyli]-2(3H)-tiofeeni-tioni 5 10 g (+)-pilokarpiinihydrokloridia suspendoi- daan 600 ml ksyleeniin yhdessä 24.8 g Lawesson'n rea-genssin kanssa ja sekoitetaan 7 h ajan lämpötilassa 135° typpi-ilmakehässä 1.5 ml sulfonointipullossa, jossa on kaasunsyöttöputki ja palautusjäähdytin. Jäähdytyksen 10 jälkeen huoneen lämpötilaan ksyleeni dekantoidaan pois ja hartsimainen, ruskehtava jäännös liotetaan 400 ml metyleenikloridi/metanoliin (95: 5) ja uutetaan kahdesti 150 ml 2N soodaliuoksella. Orgaanisen faasin nat-riumsulfaatilla kuivauksen jälkeen seos suodatetaan ja 15 konsentroidaan haihduttamalla.

Jäännös kromatografoidaan käyttäen 100-ker-taista silikageelimäärää ja metyleenikloridi/metano-li/ammoniakkia (93: 7: 0.7) eluenttina.

(+)-(3R-trans)-3-etyylidihydro-4-[(1-metyyli-20 lH-imidatsol-5-yyli)-metyyli]-2(3H)-tiofenoni-divety-fosfaatti (etanolista) sulaa lämpötilassa 189 - 192°.

[e]*° = + 20.2° (c = 1.0 vedessä).

(-)-(3R-trans)-3-etyylidihydro-4-[(1-metyyli-lH-imidatsol-5-yyli)metyyli-2(3H)-tiofeeni-tioni (me-25 tanoli/eetteristä) sulaa lämpötilassa 158 - 161°. [ot]*° = - 23.6° (c = 0.5 etanolissa).

ESIMERKKI 2: (+ )-(3s-cis)-3-etyylidihydro-4-Γ(1-metyyli- lH-imidat soi- 3 -yyli )metyyli1-2(3H)-tiofenoni 39.7 g kaliumtioasetaattia sekoitetaan 6 h 30 ajan lämpötilassa 150° yhdessä 42.5 g (+)-pilokarpiinin kanssa 500 ml dimetyyliformamidissa. Jäähdytyksen ja liuottimen haihdutuksen jälkeen ruskea jäännös liuotetaan 1.5 1 95 % metyleenikloridi/metanoliin ja saatua seosta pestään kahdesti 200 ml tyydytetyllä natriumbi-35 karbonaatilla ja kerran 200 ml vedellä. Orgaanisen faasin natriumsulfaatilla kuivauksen jälkeen seos suodatetaan ja konsentroidaan haihduttamalla.

9 90080 Jäännös kromatografoidaan käyttäen 100-ker-taista silikageelimäärää ja metyleenikloridi/metano-li/ammoniakkia (97.5: 2.5: 0.3) eluenttina.

Öljy koostuu 80: 20 trans: cis-seoksesta.

‘ 5 26.3 ml butyylilitiumia (1.6 N heksaanissa) lisätään tipoittain lämpötilassa 0° argonsuojakaasun alla liuokseen, jossa on 6.5 ml di-isopropyyliamiinia 250 ml absoluuttisessa tetrahydrofuraanissa. 7.0 g trans/cis-seosta, liuotettuna 60 ml absoluuttiseen 10 tetrahydrofuraaniin, lisätään tämän jälkeen tipoittain litiumdi-isopropyyliamidiin, joka on jäähdytetty lämpötilaan 70 °. Sekoittamista jatketaan 1/2 h ajan lämpötilassa -70°, ja sen jälkeen lisätään 15.6 g di-t-butyyli-hydroksitolueenia, liuotettuna 70 ml tetrahydrofuraa-15 niin tipoittain. Kylmä liuos kaadetaan 300 ml 2N HCl:oon, ja vesifaasi uutetaan kahdesti 500 ml mety-leenikloridilla. Vesifaasin pH säädetään arvoon 8 2N natriumkarbonaattiliuoksella, ja sitä uutetaan kolmesti 250 ml metyleenikloridilla. Orgaaninen faasi kuivataan 20 natriumsulfaatilla, suodatetaan ja konsentroidaan haihduttamalla.

Stereoisomeerisesti puhdas cis-muoto saadaan kiteyttämällä uudelleen D(+)-toluyylitartraatti etanolista.

25 (+)-(3S-cis)-3-etyylidihydro-4-[(1-metyyli-lH- imidatsol-3-yyli)-metyyli]-2(3H)-tiofenoni divetyfos-faatti (etanolista) sulaa lämpötilassa 193 -196° (haj.); [ct]*° = + 37.4 ° (c = 0.65 vedessä).

30 ESIMERKKI 3

Seuraavat kaavan I mukaiset yhdisteet valmistetaan analogisesti esimerkkien 1 ja 2 kanssa: 3a. (-)-dihydro-4-[(l-metyyli-lH-imidatsol-5-yyli)metyyli]-2(3H)-tiofenoni 35 S.p. = 142 - 145° (haj.). [or]*° = - 20.8 ° (c = 0.73 vedessä).

3b. (±)-3-etyylidihydro-3-metyyli-4-[(1-metyy- 10 9 0 080 li-lH-imidatsol-5-yyli)metyyli]-2(3H)-tiofenoni S.p. = 195 - 196° (haj.).

ESIMERKKI 4: (+ ) - (3r-trans) - 3-etwli-2-hvdroksi-4- Γ (1-5 metyyli-1H-imidatsol-5-yyli)metyyl11-tetrahydrotlo feeni 17 ml (17 mmol) di-isobutyylialumiinihydridiä (1.0 M heksaanissa) lisätään liuokseen, jossa on 2.7 g (12 mmol) trans-tiopilokarpiinia 30 ml metyleeniklori-dissa, lämpötilassa - 70° argonsuojakaasun alla. Liuos 10 jätetään lämpenemään lämpötilaan 0 °C ja 2 ml kyllästettyä natriumsulfaattiliuosta lisätään, jonka jälkeen muodostuu valkea sakka. Liuos erotetaan imun avulla ja konsentroidaan oranssiksi öljyksi. Öljy kromatografoi-daan käyttäen 50-kertaista silikageelimäärää ja mety-15 leenikloridi/metanoli/anunoniakkia (89: 10: 1) eluentti-na. Tuote saatetaan reagoimaan yhden ekvalentin kanssa fumaarihappoa, ja saatava fumaraatti kiteytetään uudelleen etanoli-eetteristä. 360 Mhz XH NMR-spektri osoittaa, että tuote on läsnä C2 suhteen 2: 1 diastereoiso-20 meerisena seoksena.

Otsakkeen mukaisen yhdisteen fumaraatti sulaa lämpötilassa 125 - 127°. [cr]*° = + 85.2° (c 0.43 vedessä).

25 ESIMERKKI 4a: (+) -(3S-cis)-3-etwll-2-hydroksl-4-f (1- metwli-lH-imidatsol-5-wli)metyyli1-tetrahydrotiofeeni Toimitaan analogisesti esimerkin 4 kanssa käyttäen cis-tiopilokarpiinia. Otsakkeen mukaisen yhdisteen vetyfumaraatti sulaa lämpötilassa 110 - 112° 30 (haj.). [cr]^° = + 38.3° (c = 0.35 vedessä).

ESIMERKKI 5: (+)-(3S~cls)-3-etyyli-4-Γ(1-metvvli-lH- imidatso1-5-yyli)metyyli1-2-metoks i-tetrahydrotlofeeni 1.1 ml etanolia lisätään lämpötilassa 60° liuokseen, jossa on 3.0 g (13.3 mmol) cis-tiopilokar-35 piinilaktolia 40 ml metyleenikloridissa. 3.4 ml (27 mmol) booritrifluorieetteriä lisätään sitten ja reak-tioseos jätetään lämpenemään huoneenlämpötilaan ja sitä 11 ;0080 sekoitetaan yli yön. 2N soodaliuosta lisätään ja seos uutetaan metyleenikloridilla. Orgaaninen faasi kuivataan natriumsulfaatin päällä ja konsentroidaan keltai-. seksi hartsimaiseksi tuotteeksi. Tämä tuote kromato- 5 graafoidaan silikageelillä käyttäen metyleenikloridi/-metanoli/ammoniakkia (90: 9: 1) eluenttina. Saatava tuote (2.8 g, 11.6 mmol) saatetaan reagoimaan 1-ekva-lentin kanssa oksaalihappoa, ja saatu suola kiteytetään uudelleen etanoli-eetteristä. NMR-analyysi osoittaa, 10 että tuote on läsnä C2 suhteen 90 : 10 diastereoisomee-risena seoksena.

Otsakkeen mukaisen yhdisteen vetyoksalaatti sulaa lämpötilassa 144 - 148° (etanoli-eetteristä).

[et]^° = + 112° (c = 0.47 etanolissa).

15 ESIMERKKI 5a: (+)-(3R-trans)-3-etyyli-4-f(1-metyyli-lH-imidatsol-5-yyli)metyyli1-2-metoksi-tetrahydrotiofeeni Edetään analogisesti esimerkin 5 kanssa käyttäen trans-tiopilokarpiinilaktolia. Otsakkeen mukaisen 20 yhdisteen vetyoksalaatti sulaa lämpötilassa 87 - 89°.

[a]” = + 19.7° (c = 0.33 etanolissa).

ESIMERKKI 6: (+ ) - (3R-trans)-3-etyyli-4-Γ (l-metwli-1H- imidatsol-5-yvli)metyyli]-2-(N,N-dimetyylikarbamovy-25 lioksi)-tetrahydrotiofeeni 2.7 ml Ν,Ν-dimetyylikarbamoyylikloridia lisätään tipoittain huoneenlämpötilassa liuokseen, jossa on 2.7 g (12 mmol) esimerkin 4 mukaista yhdistettä, 0,4 ml (20 mmol) trietyyliamiinia ja 270 mg dimetyy-30 liaminopyridiiniä 25 ml metyleenikloridissa. Liuosta sekoitetaan yli yön, ja sitä uutetaan natriumbikarbonaatilla. Orgaaninen faasi erotetaan, kuivataan natriumsulf aatilla ja konsentroidaan öljyksi. Öljy kro-matografoidaan silikageelillä käyttäen metyleeniklori-35 di/metanolia (97: 3) eluenttina. Saatava tuote (1.4 g; 4.7 mmol) on läsnä C2 suhteen 70: 30 diastereoiso- meerisena seoksena NMR-analyysin mukaan.

12 ) Ί 0 8 3

Otsakkeen mukaisen yhdisteen vetyfumaraatti (etanoli-etyyliasetaatista) sulaa 134 - 137° [a]*° = + 43.0° (c = 0.5 vedessä).

5 ESIMERKKI 7; (-) - (3R-trans)-3-etwlldlhydro-4-Γ (1-me- tyvli-lH-imidatsol-5-yyli)metyyli)-2-(N,N-dimetyylikar-bamoyylioksimlno)-3H-tlofeenl (a) 5 ml 2N soodaliuosta lisätään liuokseen, jossa on 1.0 g (4.2 mmol) (+)-(3R-trans)-3-etyylidihyd- 10 ro-4-[(1-metyyli-1H-imidatsol-5-yyli)metyyli]-2(3H- tiofeenitionia ja 420 mg (6.0 mmol) hydroksyyliamiini-hydrokloridia 13 ml metanolissa. Sekoitusta jatketaan yli yön ja seokseen lisätään metyleenikloridi ja natriumbikarbonaatti. Orgaaninen faasi kuivataan natrium-15 sulfaatin päällä ja konsentroidaan. Saatava öljy kroma-tografoidaan silikageelillä käyttäen metyleeniklori-di/metanoli/ammoniakkia (90 : 9 : 1) eluenttina.

(b) (+)-(3R-trans)-3-etyylidihydro-4-[(1-me-20 tyyli-lH-imidatsol-5-yyli)metyyli]-2-oksi-imino-3H-tio- feeni, saatu kohdan a) mukaisesti, muutetaan otsikon mukaiseksi yhdisteeksi analogisesti esimerkin 6 kanssa. Vetyfumaraatti sulaa lämpötilassa 123 - 127° (haj.). [a]*° - - 3,0 ° (c « 1.0 vedessä).

25

Claims (2)

1. Menetelmä kaavan I mukaisen, farmaseuttisesti käyttökelpoisen yhdisteen valmistamiseksi vapaan 5 emäksen tai happoadditiosuolan muodossa, h "f2-if^ji- 10 .R, 1 jossa Rx on alempi alkyyli, R2 ja R3 ovat toisistaan riippumatta vety tai alempi 15 alkyyli, R4 ja R5 ovat yhdessä = O, = S tai = NR, jolloin R on di(alempi alkyyli)karbamoyylioksi, tai R4 on vety ja R5 on hydroksi tai -OR , jossa R' on alempi alkyy- 20 li tai di(alempi alkyyli)karbamoyyli, tunnettu siitä, että menetelmässä: a) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa R4 ja R5 ovat yhdessä = 0 tai = S, kaavan II mukainen 25 yhdiste -:· R, s '!±rV’ 30 jossa R , R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin yllä, saatetaan reagoimaan fosforisulfidin kanssa; tai b) kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa R4 35 ja R5 ovat yhdessä = O, kaavan II mukainen yhdiste, kuten on määritelty edellä, saatetaan reagoimaan ka-liumtioasetaatin kanssa; i4 )0080 ja, valinnaisesti, muutetaan saatu kaavan I mukainen yhdiste, jossa R4 ja R5 ovat yhdessä = 0 tai = S, edelleen toiseksi kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi ja otetaan saatu kaavan I mukainen yhdiste talteen vapaan 5 emäksen tai happoadditiosuolan muodossa.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan (+)-(3S-cis)- 3-etyylidihydro-4-[(1-metyyli-lH-imidatsol-5-yyli)metyyli ]-2(3H)-tiofenoni. is JO 080