FI87203B - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara sulfider. - Google Patents

Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara sulfider. Download PDF

Info

Publication number
FI87203B
FI87203B FI860981A FI860981A FI87203B FI 87203 B FI87203 B FI 87203B FI 860981 A FI860981 A FI 860981A FI 860981 A FI860981 A FI 860981A FI 87203 B FI87203 B FI 87203B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
ppm
het
carboxy
methyl
formula
Prior art date
Application number
FI860981A
Other languages
English (en)
Other versions
FI860981L (fi
FI860981A0 (fi
FI87203C (fi
Inventor
Hans-Harald Sedlacek
Walter Duerckheimer
Michael Limbert
Karl-Heinz Scheunemann
Juergen Blumbach
Hans-Ulrich Schorlemmer
Gerhard Dickneite
Original Assignee
Hoechst Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoechst Ag filed Critical Hoechst Ag
Publication of FI860981A0 publication Critical patent/FI860981A0/fi
Publication of FI860981L publication Critical patent/FI860981L/fi
Publication of FI87203B publication Critical patent/FI87203B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI87203C publication Critical patent/FI87203C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/79—Acids; Esters
    • C07D213/80—Acids; Esters in position 3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/24—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 2
    • C07D235/28—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/08—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles
    • C07D249/10—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D249/12—Oxygen or sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D253/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00
    • C07D253/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00 not condensed with other rings
    • C07D253/06—1,2,4-Triazines
    • C07D253/065—1,2,4-Triazines having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D253/07—1,2,4-Triazines having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms, or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/36—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/38—Nitrogen atoms
    • C07D277/44—Acylated amino or imino radicals
    • C07D277/46—Acylated amino or imino radicals by carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/56—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/60—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D277/62—Benzothiazoles
    • C07D277/68—Benzothiazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 2
    • C07D277/70—Sulfur atoms
    • C07D277/74—Sulfur atoms substituted by carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D285/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D275/00 - C07D283/00
    • C07D285/01—Five-membered rings
    • C07D285/02—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles
    • C07D285/04—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles not condensed with other rings
    • C07D285/12—1,3,4-Thiadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-thiadiazoles
    • C07D285/125—1,3,4-Thiadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-thiadiazoles with oxygen, sulfur or nitrogen atoms, directly attached to ring carbon atoms, the nitrogen atoms not forming part of a nitro radical

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
  • Nitrogen- Or Sulfur-Containing Heterocyclic Ring Compounds With Rings Of Six Or More Members (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Description

1 87203
Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten sulfidien valmistamiseksi
On tunnettua, että elävän organismin torjuntameka-5 nismit, joita lyhyesti sanottuna nimitetään humoraalisek-si ja soluvälitteiseksi immuniteetiksi, vaikuttavat yhdessä vieraiden aineiden, jotka aiheuttavat patogeneetti-siä muutoksia tai voivat olla vahingollisia, etupäässä mikroorganismien tai kasvainsolujen, neutraloimiseksi ja 10 poistamiseksi.
Immunologiset tutkimukset ilmaisivat, että on olemassa yhteys sisäisten ja ulkoisten tekijöiden aikaansaaman immunologisen aktiivisuuden vähenemisen ja infektio-ja kasvainsairauksien lisääntymisen välillä. Sen ohella 15 syntyy muita sairauksia immuunisysteemin toimintojen muutosten kautta. Tähän kuuluvat esimerkiksi autoimmuunisairaudet tai immuunikompleksien aikaan saamat sairaudet. Siitä syystä on pitkään etsitty immuunistimulantteja, se on aineita, jotka kykenevät muuttamaan vastaanottajan im-20 munologista aktiivisuutta, etupäässä nostamaan, ja suuren tehonsa sekä hyvän siedettävyytensä perusteella antavat suuren panoksen kehon vastustuskyvyn edistämiseksi. Esi-merkit, jotka on tutkittu immuniteetin stimuloinnin suhteen, ovat BCG ja C. parvum, sekä edelleen mikro-organis-. ‘ 25 meistä M. tuberculosis ja Brucella saadut uutteet.
Nämä aineet aiheuttavat kuitenkin konsentraatioi---- na, joina niitä käytetään, selviä sivuvaikutuksia, kuten esimerkiksi eri määriä paikallista granuloomaa. Aineiden tarkan luonteen epäselvyys vaikeuttaa systemaattista tut-30 kirnusta kliinisten tulosten hyvin toistettavuuksin. Täten ovat tässä yhteydessä toivottavia uudet immuunistimu-lantit, jotka ovat kemiallisesti määriteltyjä yhdisteitä ja joiden myrkyllisyys on vähäinen, kuten esimerkiksi bestatiini, joka nykyisin on tehokkaasti tutkittu pieni-35 molekyylinen immuunistimulantti ja joka yleisesti on tutkimustyössä käytetty vertailuaine.
2 87203
Yllättäen on havaittu, että alempana esitetyn kaavan I mukaisilla yhdisteillä on voimakas immuniteettiä stimuloiva ja palauttava vaikutus, kuten ilmenee esimerkiksi lampaan erytrosyyteillä suoritetussa DTH-reaktios-5 sa, yksitumaisten fagosyyttien aktivoinnissa sekä selvässä CSF-aktiivisuudessa. Nämä immuniteettia stimuloivat vaikutukset voidaan havaita esimerkiksi vastustuskyvyn nousuna infektioita vastaan. Edelleen, kaavan I mukaisilla yhdisteillä on yllättävää sytostaattista vaikutusta, 10 esimerkiksi hiirellä B16-melanomaa vastaan.
Esillä oleva keksintö kuvaa täten immunofarmako-logisesti ja sytostaattisesti vaikuttavia aineita, jotka ovat kemiallisesti määritellyt, joilla on alhainen toksisuus ja jotka sellaisenaan tai muihin vaikuttaviin ainei-15 siin yhdistettyinä ovat arvokkaita lääkeaineita. Kyseisillä aineilla LD^-arvo on suurempi kuin 1000 mg/kg, hiirillä laskimonsisäisenä injektiona. Vaikuttavat, immuniteettiä muuttavat ja sytostaattiset määrät ovat lämminverisillä imeväisillä noin 0,5 - 100 mg/kg kehonpainoa 20 parenteraalisessa tai suun kautta suoritettavassa annostelussa, jolloin ei ilmene myrkyllisiä sivuvaikutuksia, ja ne soveltuvat täten hyvin immuunijärjestelmän sairauksien hoitoon.
-. Edellä mainittu kaavan I on seuraava: 25
Het-S-R1 (I) jossa Het merkitsee mahdollisesti substituoitua, 5- tai 6-jäsenistä, heterosyklistä ryhmää ja R* merkitsee subs-30 tituoitua alkyyliä, alkenyyliä tai alkynyyliä, joiden ketjut voivat olla myös heteroatomien, kuten esimerkiksi R' 0:n, S:n tai -N-:n katkaisemia, jolloin R’ merkitsee alkyyliä, jossa on 1 - 4 C-atomia, tai mahdollisesti subs-35 tituoitua sykloalkyyliä. Heterosyklinen ryhmä voi sisältää esimerkiksi 1-4 heteroatomia, erityisesti ryhmä voi 3 87203 sisältää esimerkiksi 1-4 heteroatomia, erityisesti N:n, mahdollisesti S:n tai 0:n kanssa yhdistettynä.
Keksintö koskee menetelmää terapeuttisesti käyttökelpoisten, em. kaavan I piiriin sisältyvien uusien sul-5 fidien valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava II
Het'-S-R2 (II) jossa Het' on 1,3-tiatsoli, joka sisältää yhden tai kaksi 10 substituenttia joukosta metyyli, karboksi-C-j^-elkyyli, karboksi ja C25-asyyliamino, jolloin asyyli on alifaat- tisen dikarboksyylihapon radikaali, ja jolloin Het'-ryhmä kantaa vähintään yhden suoralla sidoksella liittyneen karboksyyliryhmän tai yhden edellä mainituista karboksyy- 15 liryhmän sisältäistän substituenteista ja 2 R on C^^-alkyyli, karboksilla tai ^-alkoksikarbonyy-lillä substituoitu ^-alkyyli, hydroksi-iminolla tai metoksi-iminolla ja karboksilla substituoitu etyyli, karboksilla tai halogeenilla substituoidulla fenyylillä sub-20 stituoitu metyyli tai karboksilla substituoitu ^-syk-loalkyyli, ja jolloin em. karboksyyliryhmät voivat olla fysiologisesti hyväksyttävän suolan muodossa.
2 - Kun R merkitsee alkyyli- tai sykloakyylitähdettä 25 tulevat kysymykseen suoraketjuinen tai haaroittunut ja mahdollisesti substituoitu alkyyli, jossa on etupäässä ; 1-6 C-atomia, sekä sykloalkyyli, jossa on etupäässä 3 - 6 C-atomia, kuten esimerkiksi metyyli, etyyli, n-propyy- li, i-propyyli, n-butyyli, n-pentyyli, n-heksyyli, syklo- 30 propyyli, syklobutyyli, syklopentyyli, sykloheksyyli.
2
Jos R merkitessään alkyyliryhmää on substituioi-tu, niin erityisen edullisina substituentteina mainittakoon karboksi ja fenyyli, joka puolestaan on erityisen edullisesti substituoitu karboksilla.
35 Erityisen edullisia ovat seuraavan yleisen kaavan mukaiset yhdisteet, 4 87203 il-Γ"3 HOOC- ( CH2 )n-S-N. ^Lch2cooh 5 jossa kaavassa n voi olla 1-5, jolloin tässä ryhmässä yhdisteellä, jossa n = 3, on erityisen edullinen asema.
Sikäli kuin kaavan II mukaisissa yhdisteissä on happamia ryhmiä, voivat ne olla fysiologisesti siedettävien suolojensa muodossa, esimerkiksi alkali- ja maa-al-10 kalisuoloina, kuten esimerkiksi Na-, K-, Ca-, Mg-suoloina tai esimerkiksi ammoniumsuoloina tai substituoituina am monium suoloina, kuten esimerkiksi NH^+ -, etanoliammo-nium, dietanoliammonium-, trialkyyliammonium, kuten esim. trietyyliammonium, tetra-alkyyliammoniumsuoloina, suoloi-15 na emäksisten aminohappojen, kuten esimerkiksi lysiinin, arginiinin kanssa.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle kaavan II mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi on tunnusomaista, että 20 (a) seuraavan kaavan III mukainen yhdiste
Het'-SH (III) •·. jossa kaavassa Het':llä on edellä esitetty merkitys, saa- 25 tetaan reagoimaan kaavan IV mukaisen alkylointiaineen kanssa R2-X (IV) ' 2 jossa kaavassa R :11a on yllä annettu merkitys ja X mer-30 kitsee helposti vaihdettavissa olevaa ryhmää, tai (b) seuraavan kaavan V mukainen yhdiste
Het'-X (V) 35 jossa kaavassa Het':llä ja X:llä on edellä esitetty merkitys, saatetaan reagoimaan kaavan VI mukaisen yhdisteen kanssa 5 87203 r2-sh (VI) 2 jossa kaavassa R :llä on edellä esitetty merkitys, ja 5 (a)- tai (b)-kohdan mukaisesti saaduissa, kaavan II mu- 2 kaisissa yhdisteissä jokin Het':n tai R :n substituen- teista muutetaan sinänsä tunnetulla tavalla Het':n tai 2 R :n joksikin toiseksi substituentiksi.
Kaavoissa IV ja V X merkitsee helposti vaihdetta- 10 vaa ryhmää, kuten esimerkiksi halogeenia, edullisesti 3 3 klooria, bromia, jodiaryhmää, 0S02R , jolloin R merkitsee ^-alkyyliä, kuten edullisesti metyyliä, halogeeni-C^_^-alkyyliä, kuten edullisesti trifluorimetyyliä, mahdollisesti substituoitua fenyyliä, kuten edullisesti fe-15 nyyliä tai p-tolyyliä.
Yleisesti ottaen kaavan II mukaisten sulfidien 2 ryhmissä R ja/tai Het' sijaitsevat substituentit muuttaa kirjallisuudessa tunnetuin menetelmin muiksi kyseessä olevan keksinnön mukaisiksi substituenteiksi. Siten voi-20 daan esimerkiksi alkoksikarbonyyliryhmä muuttaa saippuoi malla, vapaaksi karboksyyliryhmäksi.
Vaihtoreaktio voidaan suorittaa vesiliuoksessa, jossain orgaanisessa liuottimessa, kuten esimerkiksi alkoholissa, erityisesti jossain pienimolekyylisessä alko-25 holissa, esimerkiksi metanolissa, etanolissa, propanolis- sa tai isopropanolissa, jossain eetterissä, kuten esimerkiksi dietyylieetterissä, tetrahydrofuraanissa, dioksaa-nissa, dimetyyliformamidissa, dimetyyliasetamidissa, asetonissa, metyylietyyliketonissa, asetonitriilissä, etik- 30 kahappoetyyliesterissä tai mainittujen liuosten seoksessa. Voi olla tarkoituksen mukaista suorittaa reaktio 2-faasi-järjestelmässä, joka koostuu vedestä ja jostain veden kanssa sekoittumattomasta tai vain osittain sekoittuvasta liuottimesta, kuten esimerkiksi etikkaesteristä, 35 dietyylieetteristä, metyleeni kloridista, kloroformista tai tolueenista.
6 87203
Edullisina liuottimina mainittakoon esim. vesi, metanoli, etanoli, asetoni, dimetyyliformamidi, dimetyy-liasetamidi, tetrahydrofuraani ja dioksaani.
Mainittujen valmistusmenetelmien jouduttamiseksi 5 voi olla tarpeellista lisätä jotain emäksistä ainetta ek-vimolaarinen määrä, kuten esimerkiksi natriumhydroksidia, kaliumhydroksidia, natriumkarbonaattia, kaliumkarbonaattia, natriumbikarbonaattia, kaliumbikarbonaattia. Voidaan käyttää myös orgaanisia emäksiä, kuten esimerkiksi 10 amiineja, etupäässä dietyyliamiinia, trietyyliamiinia, di-isopropyyli amiinia, etyyli-di-isopropyyliamiinia, N,N-dimetyylianiliinia, pyridiiniä, piperidiiniä, N,N'-dimetyylipiperidiiniä, morfoliinia tai N-metyylimorfolii-nia.
15 Jos reaktio suoritetaan kaksifaasijärjestelmässä voi olla edullista lisätä faasinsiirtokatalysaattori, kuten esimerkiksi kvartäärisiä ammoniumsuoloja, kuten edullisesti tetrabutyyliammoniumkloridia, tetrabutyyliammo-niumbromidia, tetrabutyyliammoniumjodidia, tetrabutyyli-20 ammoniumvetysulfaattia, bentsyylitrimetyyliammoniumbromi- dia, bentsyyli-dimetyyli-n-dodeksyyliammoniumbromidia tai tertiaarisia fosfoniumyhdisteitä, kuten esimerkiksi etyy-litrioktyylifosfoniumbromidia ja heksadeksyylitributyyli-fosfoniumbromidia.
: : 25 Reaktio voidaan suorittaa lämpötila-alueella noin -20 °C:n ja käytetyn liuottimen tai liuotinseoksen kie-humapisteen välisellä alueella, edullisesti noin +5 °C:n ja kiehumapisteen välillä.
Vaikuttavaa ainetta voidaan antaa yksinään tai yh-- 30 teen tai useampaan, etupäässä johonkin muuhun lääkeaineeseen yhdistettynä, joka edullisesti vaikuttaa bakteerei-den, sienien tai virusten aiheuttamiin infektioihin sekä kasvainsairauksiin. Vaikuttavia aineita voidaan antaa sekä parenteraalisesti että myös suun kautta. Parenteraa-35 lista antamista varten tulevat kysymykseen vaikuttavan aineen liuokset ja suspensiot jossain farmaseuttisesti 87203 siedettävässä väliaineessa, etupäässä kasviöljyssä, kuten esimerkiksi maapähkinäöljystä tai seesamiöljyssä, sekä vaikuttavan aineen alkoholiliuokset, esimerkiksi etanoli, propaanidioli tai glyseroli tai mainittujen liuosten 5 seoksissa. Vesiliuosten valmistamiseen käytetään vaikuttavaa ainetta etupäässä vesiliukoisen, fysiologisesti sopivan suolan muodossa. Valmisteet voivat sisältää muita tavanomaisia apu- ja kantaja-aineita. Sellaisina tulevat kysymykseen esimerkiksi täyteaineet, emulgaattorit, liu-10 ku- ja puskurointiaineet sekä makua parantavat agenssit.
Seuraavassa valaistaan yhdisteiden vaikutusta hiiren immuunivasteeseen sekä niiden immuniteettiä stimuloivaa vaikutusta erilaisissa standardimenetelmissä in vivo. Käytetyt, erilaiset koemenetelmät tunnetusti soveltuvat 15 erityisen hyvin immuunistimulanttien sekä niiden vaikutuksen laadun arviointiin.
Koe 1
Vaikutus soluvälitteiseen, viivästyneeseen immunologiseen reaktiotyyppiin lampaan punasoluja vastaan 20 (delayed type hypersensitivity, DHT)
Ryhmille, joihin kuului 5 naaraspuolista NMRI- hiirtä, joiden paino oli 18 - 20 g, annettiin laskimonsi- 6 6 säisesti joko 10 tai 10 lampaan punasolua eläintä kohti. Lampaan punasolut toimivat immunologiassa standardi-25 koeaineena (antigeeni) solusidonnaisten ja humoraalisten immuniteettireaktioiden laukaisemiseksi. Tämä koe antaa erityisesti tietoa T-soluista riippuvien immuunijärjestelmän komponenttien (T-auttajasolujen) toimintakyvystä. Suoritusesimerkin 7 mukaisesti saatua koeyhdistettä 30 ([2-(3-karboksi-prop-l-yylitio)-4-metyyli-l,3-tiatsol-5- yyli]etikkahappoa) annettiin -3:na, -2:na, -l:nä ja 0:na päivänä, konsentraatioina 10 - 100 mg/kg fysiologisessa keittosuolaliuoksessa vatsaontelonsisäisesti. 5 päivän kuluttua kaikille eläimille ruiskutettiin, kulloinkin 2 x g 35 10 lampaan punasolua jalkapohjaan ja 24 tuntia myöhem min mitattiin jalan turvotus. Jalan turvotus laukaistaan 8 87203 hidastetun ihoreaktiotyypin välityksellä (delayed type hypersensitivity, (DTH), ja se on, kuten asiantuntijoille on selvää, soluvälitteisen immuunivasteen mitta (Collins, F.M. ja Mackaness, G.B., J. Immunol. 101, 830-845, 1968). 5 Taulukkoon 1 kootut tulokset havainnollistavat, että soluvälitteinen immuunivaste nousee antamalla kyseessä olevan keksinnön mukaisesti saatua ainetta, esimerkiksi 10^-g 10 lampaan punasolulla suoritetun immunisoinnin jälkeen. Stimuloinnin optimi voidaan tässä koe-erässä havaita an-10 noksella 20 - 40 mg/kg koeyhdistettä.
Taulukko 1
Hiirten immunisointi lampaan punasoluilla - vaikutus soluvälitteiseen immuunivasteeseen (DHT-reaktio) lx/päivä i.p. antaminen Jalan turpomis-% annet- 15 9 päivänä -3, -2, -1, 0 taessa 10 erytrosyyttiä PBS1 15,1 ± 4,2
Koeyhdiste 10 mg/kg 23,5 ±2,8 20 " 20 mg/kg 27,8 ±3,7 " 40 mg/kg 26,3 ±2,5 " 60 mg/kg 23,8 ± 5,7 80 mg/kg 20,8 ± 3,5 100 mg/kg 18,2 ± 2,7 25 -g- lx/päivä p.o. antaminen annettaessa 10° päivänä -3, -2, -1, 0 erytrosyyttiä PBS 17,9 ± 3,2 30 Koeyhdiste 10 mg/kg 24,4 ± 6,2 20 mg/kg 27,9 ±8,8 40 mg/kg 43,5 ± 10,5 " 60 mg/kg 26,8 ± 4,4 80 mg/kg 25,3 ± 3,5 35 " 100 mg /kg 23,2 ± 6,5 PBS = fosfaatilla puskuroitu keittosuolaliuos (NaCl: 8000 mg/1; KC1: 200 mg/1, Na2HP04 2H20: 1440 mg/1, KH2P04: 200 mg/1)
Koe 2 9 87203
Vaikutus epäspesifisen immuniteetin stimulointiin mononukleaaristen fagosyyttien aktivointi
Kyseessäolevassa kokeessa tutkittiin suoritusesi-5 merkin 7 mukaisesti saadun koeyhdisteen vaikutusta vatsaontelon makrofaagien stimulointiin 6-8 viikon ikäisillä NMRI-hiirillä.
Naaraspuoliset hiiret saivat parenteraalisesti ja suun kautta koeainetta 25 mg/kg:n, 50 mg/kg:n, 100 mg/ 10 kg:n ja 200 mg/kg:n suuruisena annoksena. Kontrolliryhmälle annettiin puskuroitua keittosuolaliuosta. Kolmen päivän kuluttua ruiskutuksesta hiiret tapettiin, ja eläinten vatsaontelon makrofaagit tutkittiin aktivointi-tilan suhteen. Eräänä makrofaagien aktivoinnin mittana 15 määritettiin lysosomientsyymien erittyminen (B-galakto- sidaasi, B-glukuronidaasi, N-asetyyli-8-D-glukoosiamini- daasi). Toisaalta voitiin vertailevissa makrofaagiviljel- 198 missä tutkia pinosytoosia kolloidisen kullan ( Au) vastaanoton perusteella alan ammattimiehen tuntemalla taval-20 la. Oksidatiivisen aineenvaihdunnan korkeus makrofaageil- la toimii niiden aktivointitilan lisämittana. Tämä aktiivisuus mitataan bioluminesenssiä aikaan saavan aineen avulla, määrittämällä kemiluminisointi.
Tätä tarkoitusta varten viljeltiin, joko petrimal-'25 joissa, joiden läpimitta oli 30 mm, 3 x 10^ makrofaagia 1 ml:n kanssa TC 199-elatusainetta tai 10^ makrofaagia 100 μ1:η kanssa elatusainetta pyöreäpohjäisissä polyetyleeni-putkissa (kemiluminisoinnin määritystä varten) 5 %:ssa CX^za sekä 37 °C:ssa.
30 Yhden tunnin mittaisen inkuboinnin jälkeen viljel mät pestiin kelluvien solujen poistamiseksi. Kemiluminisointi (koeputkiviljelmä) määritettiin sitten suoraan, kun taas petrimaljoja inkuboitiin uudelleen 24 tunnin ajan 37 °C:ssa, ja tämän jälkeen viljelmistä määritettiin 35 entsyymi- ja pinosytoosiaktiivisuus. Saatiin seuraavana esitetyt tulokset.
10 87203 in in in in in o o o o o rH I—I rH rH i—(
X X X X X
σ' co vo cs τί O rH CO |> Tf
O O O O rH
c a) · +1+1 +i +i +i a) o μ . io eo v) h is h a to n n ^ in ^ ^ ^ ^ •h m rH o m
H ^ 00 Hi CO rH
p to H
(0 Ή Ό +>
H +J
m o X 3 0 c
-H
C E
.2 ,n in in in in m h S o o o o o
σ ΓΗ H rH H H rH
® HO u V u u u t| j K η ή n ^ R *· (N ό co m σ>
mm H H vO CO H
12 O O O O H
c +1 +1 +1 +1 +1 5 c*· Οι <N l> Hi 2 S g mV vo « n * § “ « 00 s * 5 (0 c " 1-1 (0 (ο -Η λ: +> e >i (0 3 o
^ rH rH
-r| (0 es G E > „ S ® Oi Oi O) 0) o Jj * Äjijscjxro .¾ 2 r. 0)0)0)0) w
3 Λ g E E E E -H
H (0 H
3 iS ® m o o o h (θ3·Ρ Minoo <1> * £ g H CM 2 X Ό Λ •Η Λ O a) 3
(0 -H +j +J W
> (0 +> (0
> >1 -H II
G χθ Ό <u x jc ω a) >h j c x ω a) a: •h mo «o rH a u: * 11 87203 NMRI-hiirten parenteraalinen sekä suun kautta suoritettu käsittely esimerkin 7 mukaan valmistetulla koeyh-disteellä stimuloi makrofaagien aktiivisuutta, ja täten sillä on immuniteettiä stimuloivaa vaikutusta. Täten 5 oksidatiivinen aineenvaihdunta yhdessä happiradikaalien synnyttämisen ja siihen liittyvän, mitattavan valon kanssa lisääntyy makrofaageilla huomattavasti. Annosteltaessa annoksesta 25 mg/kg ylöspäin päästään annoksesta riippuvaan makrofaagien aktiivisuuden nousuun, sekä parenteraa-10 lisen että oraalisen käytön yhteydessä.
Taulukon 3 perusteella on pääteltävissä, että kon-trollihiirten makrofaagit luovuttavat ainoastaan vähäisiä määriä lysosomientsyymejä (β-glukuronidaasia, B-galakto-sidaasia, N-asetyyli-O-D-glukoosiaminidaasia) viljelynes-15 teeseen. Hiirten mononukleaariset fagosyytit, joita käsiteltiin parenteraalisesti tai suun kautta koeaineella 72 tunnin ajan, erittävät mm. happamia hydrolaaseja (6-glu, β-gal, N-Ac-Glu) selvästi enemmän ja antavat täten annos/ vastekäyrän, jonka perusteella voi todeta kaikkien mi-20 tattujen entsyymien suhteen ylivoimaisuutta kontrolleihin nähden. On selvää, että koeyhdisteellä on stimuloivaa vaikutusta makrofaagien aktiivisuuteen, ja se edistää entsyymin vapautumista.
i2 87203 dp c n
0) -H VO xl* O' VO CO
Q) B ^ ^ v v x to 3 cs o vo or» H P H N N vj in E H 3 \\\\\ 3 (0 <0 tn h in o\ vf P ΟΛ 3 I (0 Tf d (0 N in <0 oq> h n n in ίο a <0 > c a)
•H
3 5 «
O -H vf in H N CO
C s s ^ < k -π 3 vo in oo σν >. P T-l r-i <N 00 ^ JC 33 N \ \ N. \
h (0 in o o' co N
C O Dl '*'··' a» I (0 ro o o cm co
p CQ> ι-H (S Π rji ID
CO
H
MS
u a) a rl o » C0 (0 03
§ » -¾ 00 ^ M N
k, . I P B s v v ' j J; h 3 vo in n f' in M S’ o p h n η 'ί -..-: mm13 \ \ \ \ \ Ϊ 5 ϋ m m cs o co in R ,2 < a .....
~ Ti I <0 O'- C'' vO O !—t £ g Z > p cn m -ha: or» <o m >6 o oi o 01
See x x x x -¾ S o o» o» o» 0» 3 CD H epee
H P CD B B B
3 » £ in O O O
<0 'H C (S in O O
H ^ 0 · <-< CS
C <0 O
>i CO
<D p a cd O (0 \ p
hi! > CD
a -π G · Ο Ό CD P P £ P P Sm •h a >, ω Id •H :(0 m o £ pa a a: i3 87203
Pinosytoosiaktiivisuuden kvantitatiivinen määritys mononukleaarisilla fagosyyteillä suoritettiin Daviesin et ai. menetelmien mukaisesti (Davies, P., Allison, A.C. ja
Haswell, A.D.; Biochem. Biophys. Res. Corn. 52, 627, 1973).
5 Tähän käytettiin radioaktiivista, kolloidista kultaa 198 ( Au), jonka partikkelikoko oli 20 nm ja jonka spesifinen aktiivisuus oli 4-12 mCi/mg Au. Taulukossa 4 esitetyt tulokset havainnollistavat esimerkin 7 mukaisesti saadun koeyhdisteen vaikutusta endosytoosiin. Kolloidisen 198 10 kullan ( Au) pinosytoosi hiiren vatsaontelon makrofaa-geilla, jotka on kaavan II mukaisella yhdisteellä käsitellyiltä eläimiltä, on käsittelemättömien eläinten mak-rofaageihin verrattuna kohonnut merkittävästi ja annoksesta riippumatta.
14 87203 e e e e e ο. a α α α υ ο υ υ υ G (O 00 00 00 00 00 -Η Ρ Ο Ο Ο Ο Ο
•Η *Ρ ιΗ f-H rH ιΗ 1—I
CO 3
0 ® X X X X X
O JC
+j o tn οο η σ' G tn vd tj» vd oo to 3 rl 00 ^ VO f* 0 3 V < 1. V «.
G CO O O O O O
•H
a c a) rl 01 (0 £ e g g e e n Oi Oi Oi Oi Q<
g ^ O O O O O
•jrt O 00 00 00 00 00
e H -H OOOOO
B Q) P rlrlrlrlrl
- P CO
S GO) XXXXX
S O 10
(Ö -rl H IO 00 CO N
Ijcoso o ri m ri νσ T2 p co n Ί in h ai (0 "rl »»vk».
M > co OOOOO
3
P
3
X
•rl ^ £ > o O) o o
0 X X X X
X C \ \ \ \ ä ® o o ο o»
3 $ e E E E
3 5 m o o o ίο li cm tn o o
^ 'O rl CM
Λ a) g a) op p « p to
>i -H
*0 Ό
X jC
>1 x co a) cö o
rH CU
15 87203
Koe 3
Balb/c-hiirien vastustuskyvyn lisääntyminen Candida albicans-infektiota kohtaan a) Terapeuttinen käsittely 5 Kroonista Candida albicans infektiota terapeutti sesti käsiteltäessä infektoitiin naaraspuolisia Balb/c-hiiriä (16/ryhmä) laskimonsisäisesti Candida albicansil- 5 la (2,5 x 10 cfu/hiiri) (päivänä 0). Seurauksena olevan infektion jälkeen eläimiä käsiteltiin 13 toisiaan seuraa-10 vana päivänä (päivät 3-15) esimerkin 7 mukaisesti saadulla koeyhdisteellä, vatsaontelonsisäisesti; konsentraa-tiot olivat 0,5, 2,0, 5,0, 10,0, 30,0, 60,0 mg/kg. Kon-trollieläimille annettiin fysiologista keittosuolaliuosta. Päivinä 19 ja 24 eläimiltä otettiin virtsa ja lasket-15 tiin taudinaiheuttajien lukumäärä sekä määritettiin munuaisten nekroosi.
Taulukko 5 ilmaisee, että koeyhdisteen kaikilla konsentraatioilla taudinaiheuttajien lukumäärä sekä virtsassa että munuaisissa samoin kuin nekroosin muodostumi-20 nen munuaisissa oli vähentynyt. Optimivaikutus havaittiin annoksella 0,5 - 5,0 mg/kg. Aineen terapeuttisella annolla voidaan täten saavuttaa kroonisen infektion kulun selvä paraneminen.
16 87203 «5 m -P tji covovot^r-ioo c p Ό m (S p •H >
CO
C (0 io e O P •H O ~ JQ P <#> H X ^ 10 0) p <n • fin cooiooc^co Ορό co p
O
£ <0 o ϋ -13 o
C 'H
O 1-1
•h O <#» inr^C^C^rOP
es s< s< oo « .2 P p c 2 P c m3 ιΟΓ^ΟΟΓ^σΟΟ g Σ m (N P CS (N 00 (0
O
P
A
.... * H
(0 e ^ <0 P <#> Ό a p w m p e <o οι οι οι oi a . ® «SP M X X x x o £ upo) \ \ \ \ \ •Silpoen 0> 0> O» O» 0> λ^λρρ essee 3 P x (0 H e « Φ 3 moooo 3 s PC s . . . s o® C 3 ocsinoo E" P ϋ P E P io lii
C tH
o
O 0) I
U p p x p to oo a »H “H * O Ό *0 ·Η
*0 k .C P
E P >1 > X
•C Cd) P
>1 OO *0 O
o: * se AP
i7 87203 b) Yhdistelmähoito sienten kasvua estävän aineen kanssa Tässä kokeessa käytettiin esimerkin 7 mukaan saatua koeainetta yhdessä sienten kasvua estävän aineen ke-5 tokonatsolin kanssa (Nizoral®, Janssen). Naaraspuolisia Balb/c-hiiriä (15/ryhmä) infektoitiin laskimonsisäisesti Candida albicansilla (10^ cfu/hiiri) (päivänä 0). Muodostettiin kolme ryhmää: ryhmää 1 käsiteltiin fysiologisella keittosuolaliuoksella, ryhmä 2 sai 70 mg/kg ketokonatso-10 lia suun kautta seitsemänä toisiaan seuraavana päivänä (päivinä -1-6). Ryhmä 3 sai ketokonatsolin lisäksi 10 vatsaontelonsisäistä ruisketta koeyhdistettä 2 mg/kg, päivinä 3-30 (joka 3 päivä). Kuolleiden eläinten lukum äärä merkittiin päivittäin pöytäkirjaan, ja ilmoitettiin 15 ajankohta, jolloin 50 % ryhmän eläimistä oli kuollut (T50). Taulukko 6 ilmaisee, että eläimillä, jotka saivat ketokonatsolin ja koeyhdisteen yhdistelmää, oli selvästi pitempi henkiinjäämisaika (T^q) kuin eläimillä, jotka saivat ainoastaan ketonatsolia.
20
Taulukko 6
Koeyhdisteen yhdistelmä sienten kasvua estävän aineen kanssa T5Q-arvot päivinä 25 Ryhmä Tg0 1. Kontrolli 8 2. Ketokonatsoli 70 mg/kg (d-1-6 po) 18 3. Ketokonatsoli 70 mg/kg (d-1-6 po) + koeyhdiste 30 30 2 mg/kg (10 x i.p., d 3 - 30, joka 3. päivä)
Koe 4 DTH-reaktion stimulointi kaavan II mukaisilla yhdisteillä 35 NMRI-hiriä käsiteltiin kaavan II mukaisilla ain eilla kuten kokeessa 1 kuvattiin.
18 87203
Kokeena immuniteetin stimuloinnin ymmärtämiseksi tutkittiin DTH-reaktio uudelleen.
Taulukko 7 osoittaa koeyhdisteiden suhteellisen tehokkuuden esimerkistä 7 peräisin olevan yhdisteen suh-5 teen, jonka maksimaalinen aktiivisuus vastaa 100 % (ero kontrollin ja stimuloinnin välillä). Taulukosta on pääteltävissä, että koeyhdisteellä esikäsitellyillä eläimillä DTH-reaktio ilmenee selvästi voimakkaammin kuin vastaavilla kontrollieläimillä.
10
Taulukko 7
Yhdiste Annos Käyttö DTH-reaktio esim. nro (SRBC) 15 7 200 1 x i.p. päivänä 0 100 % 24 100 " 115 % 25 100 " 115 % 27 20 " 144 % 39 100 " 210 % 20
Koe 5
Makrofaagien aktiivisuuden stimulointi kaavan II mukaisilla yhdisteillä NMRI-hiriä käsiteltiin kaavan II mukaisilla ain-.25 eilla kuten kokeessa 1 kuvattiin.
Kokeena immuniteetin stimuloinnin ymmärtämiseksi tutkittiin vielä makrofaagien toiminta (kemiluminisointi ja entsyymiaktiivisuus).
Taulukko 8 ilmaisee koeyhdisteiden suhteellisen 30 tehokkuuden esimerkin 7 yhdisteiden suhteen, joiden mak-simiaktivointi (kontrollin ja stimuloinnin välinen ero) vastaa 100 %. Taulukon perusteella on pääteltävissä, että vertailtaessa käsittelemättömistä eläimistä saatuihin makrofaageihin, kaikkien koeyhdisteiden avulla näiden so- 35 lujen kemiluminisointireaktio oli voimakkaasti stimuloi-tunut ja lysosomiperäisten entsyymien määrä oli niissä selvästi kohonnut.
i9 87203
Taulukko 8
Yhdiste Käyttö Makrofaagien aktiivisuus esim. nro Kemiluminisointi Eksosytoosi (100 mg/kg i.p.) 5 -—--- 1 1 x i.p. päivänä 0 29 % 124 % 7 " 100 % 100 % 15 " 49 % 172 % 24 " 57 % 218 % 10 25 ” 26 % 186 % 27 " 22 % 258 % 39 " 35 % 148 %
Koe 6 15 Vaikutus B16-melanooman etäispesäkkeiden muodostu miseen B16-melanooman etäispesäkkeiden käsittelemiseksi infektoitiin naaraspuolisia C57B1/6 hiiriä (10 eläintä/ _5 ryhmä) 2 x 10 elävällä B16-melanoomasolulla primaari-20 kasvainta. Tämän kasvaimen poiston jälkeen B16-melanooma muodostaa etäispesäkkeitä keuhkoihin ja eläimet kuolevat. Eläimiä käsiteltiin kasvaimen aiheuttamisen jälkeen päivinä 3, 5, 7, 9, 11 ja 13, joko ennen poistoa tai sen jälkeen 50 mg/kg:llä esimerkin 7 mukaan saatua koeyhdis-25 tettä, vatsaontelonsisäisesti. Makroskooppisesti nähtävissä olevien etäispesäkkeiden lukumäärä keuhkoissa määritettiin päivinä 14, 17, 21, 25 ja 28 primaarikasvainta seuranneen poiston jälkeen.
Kuten taulukosta 9 käy ilmi, B16-melanooman keuh-30 kojen etäispesäkkeiden lukumäärä oli käsiteltyjen eläinten ryhmässä selvästi vähäisempi kuin vastaavissa kon-trollieläimissä.
20 87 203
Taulukko 9
Keuhkojen etäispesäkkeiden lukumäärä B16-melanoo-mamallissa Päiviä Kontrolli Koeyhdiste (50 mg/kg, 6 x i.p.) 5 metastaa- 2 x 10° Päiviä 3, 5, 7, Päiviä 3, 5, sien las- kasvainso- 9, 11, 13 ennen 7, 9, 11, 13 kemiseen lua metas- poistoa metas- poiston jälkeen taasien lu- taasien lukumäärä metastaasien kumäärä lukumäärä 10 (kuolinnopeus) 14 13+5 2 ± 2 6+3 17 16 ±1 5 ± 1 6 ± 4 21 22 ±2 2 ± 2 5 ± 3 15 25 26 ± 2 12 ± 5 6 ± 5 (5/10) 28 50 15 ± 6 12 ± 3 (9/10) 20 Koe 7
Vaikutus luuydinpesäkkelden muodostumiseen Tässä yhteydessä tutkittiin esimerkin 7 mukaan saadun koeyhdisteen vaikutusta luuydinpesäkkelden stimulointiin 6 -8 viikon ikäisillä B6D2F1 hiirillä. Naaras-25 puoliset hiiret saivat koeyhdistettä vatsaontelonsisäi-sesti annoksina 2,5 ja 5 mg/kg. Päivää myöhemmin eläimet tapettiin, luuydinsolut eristettiin ja niitä viljeltiin yleisesti tunnettujen menetelmien mukaisesti (Metcalf, Immunology 21, 427, 1971 ja Stanley et ai. J. Exp. Med.
: 30 143, 631, 1976). Luuydinpesäkkelden kehittämiseen käytet tiin "CSF"-lähteenä (Colony stimulating factor) kuten tavanomaisesti, L-solujen elatusainetta (15 %). Pesäkkeet laskettiin 8 päivän kuluttua ymppäämisestä. Kuten taulukosta 10 on nähtävissä, johtaa kerran suoritettu 2,5 tai 35 5 mg:n suuruinen koeyhdisteen antaminen pesäkemuodostuk- sen selvään nousuun luuydinsoluissa, sekä lisättäessä CSF:a (Colony stimulating factor) että ilman sitä in vitro.
21 87203
Taulukko 10
Vaikutus luuydinpesäkemuodostukseen in vivo
Koeyhdiste Luuydinpesäkkeiden muodostuminen 1 x i.p. (päivänä 8) 5 (mg/kg) CSF (15 %) kanssa ilman CSF (15 %) PBS 77 ± 6 2 ± 1 2,5 134 ±10 56 ± 4 5,0 217 ±7 117 ± 11 10
Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä sitä kuitenkaan rajoittamatta. Esimerkeissä kuvataan sekä keksinnön kaavan II piiriin kuuluvien yhdisteiden että laajemman kaavan I piiriin kuuluvien yhdisteiden valmistusta.
15 Esimerkki 1
Vaihe 1 2-merkapto-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli-etikkahap- pometyy1iesteri 27.0 g (0,14 moolia) 2-merkapto-4-metyyli-l,3- 20 tiatsol-5-yyli-etikkahappoa liuotetaan 230 ml:aan metano-lia ja lisätään pisaroittaan 6 ml konsentroitua HCl:a. Tämän jälkeen sekoitetaan huoneenlämpötilassa 4 tunnin ajan, neste poistetaan imemällä sakasta, pestään vähäisellä määrällä metanolia. Saanto 14,3 g = 49,3 %. Emä- 25 liuoksesta saatiin vielä 12,0 g = 41,4 %. Sulamispiste 134 - 135 °C. NMR (d'g-DMS0) δ = 8,67 miljoonasosaa s leveä, 1H, -SH 3,30 miljoonasosaa s 2H C^-COOCH^, 2,03 miljoonasosaa s 3H 4-CHg.
Vaihe 2 30 2-metyylimerkapto-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli- etikkahappo-metyyliesteri 28.0 g (0,14 moolia) vaiheen 1 mukaista yhdistettä liuotetaan 5000 ml:aan asetonia ja sekoitetaan 38,1 g:n (0,28 moolia) kanssa hienoksi jauhettua kaliumkarbonaat- 35 tia. 10 minuutin kuluttua lisätään 21,6 g = 9,5 ml (0,15 moolia) metyylijodidia. Lämpötila nousee vähän.
22 87203
Sekoitetaan 3 tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Neste erotetaan imemällä kiinteästä kaliumjodidista ja väkevöidään pyöröhaihduttajassa. Jäännös 36,1 g keltaista öljyä = 100 % teoreettisesta arvosta.
5 NMR (dg-DMSO) 6 3,50 miljoonasosaa, s, 2H, -C^-COOCH^, 3,30 miljoonasosaa, s, 3H, C^-COOCH^, 2,63 miljoonasosaa, s, 3H, -S-CHg, 2,23 miljoonasosaa, s, 3H, 4-CH3·
Vaihe 3 2-metyylimerkapto-4-metyy1i-1,3-1 iätsol-5-yy1i-10 etikkahappo 36,1 g (0,166 moolia) yhdistettä vaiheesta 2 liuotetaan 50 ml:aan metanolia ja lisätään 100 ml 2 N nat-riumhydroksidia. Palautusjäähdytetään yhden tunnin, meta-noli poistetaan tislaamalla ja jäähtymisen jälkeen uute-15 taan 2 x etikkahapolla. pH säädetään 3:ksi konsentroidulla suolahapolla, saostuma poistetaan imemällä ja uudel-leenkiteytetään isopropanolista.
Saanto 21,2 g = 62,9 % teoreettisesta arvosta. Sulamispiste 159 - 160 °C.
20 IR. KBr (1870, 1710, 1550 cm'1)
NMR (d6-DMS0) δ = 3,73 ppm, s, 2H, CH2-C00H
2,63 ppm, s, 3H, S-CH^ 2,20 ppm, s, 3H, 4-CH3 12,77 ppm, s, 1H, COOH 25 Esimerkki 2
Vaihe 1 2-etyylimerkapto-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli- etikkahappo-metyyliesteri 2,03 g (0,01 moolia) esimerkin 1, vaiheen 1, mu-30 kaista yhdistettä annetaan reagoida kaliumkarbonaatin ja etyylijodidin kanssa esimerkin 1, vaiheen 2, mukaisesti ja käsittelyä jatketaan. Saanto 2,8 g öljyä.
NMR (d6-M50) δ = 3,83 ppm, s, 2H, CH2~C02CH3 3,63 ppm, s, 3H, COO-CH^ 35 3,10 ppm, q, 2H, SCH2CH3 2,23 ppm, s, 3H, 4CH3 1,33 ppm, t, 3H, S-CH2CH3 23 87203
Vaihe 2 2-etyylimerkapto-4-metyyli-l,3-tiatsoi-5-yyli-etikkaesteri 2,8 g vaiheesta 1 saatua yhdistettä annetaan rea-5 goida yhdenmukaisesti esimerkin 1, vaiheen 3, kanssa ja työ saatetaan päätökseen. Saanto 1,1 g. Sulamispiste 124-5°C.
N MR fd^MSO) S “ 3,75 ppm, s, 2H,· CH2~C00H
3,14 ppm, q, 2H, S-CH2«CH3 10 2,23 ppm, s, 3H, 4CH3 1,33 ppm, tr, 3H, S-CH^-CH^
Esimerkki 3 Vaihe 1 ^5 2-bentsyyli-merkapto-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli- etikkahappo-metyyliesteri 2,03 g (0,01 moolia) 2-merkapto-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli-etikkahappoetyyliesteriä annetaan reagoida esimerkin 1, vaiheen 2 mukaisesti, kaliumkarbonaatin ja 20 bentsyylikloridin kanssa asetonissa ja työ suoritetaan loppuun. Saanto 3,3 g öljyä, 1Q0 % teoreettisesta arvosta.
NMR (d^DMSO) / - 7,27 ppm, d, SH, aromat.
4,40 ppm, s, 2H, Benzyl CH2 3,83 ppm, s, 2H, CH2-COOCH3 25 3,60 ppm, s, 3H, COOCHj 2,26 ppm, s, 3H, 4-CHj . Vaihe 2 2-bentsyyli-merkapto-4-metyyli-l, 3-tiatsol-5-yyli-30 etikkahappo . . 3,03 g (0,01 moolia) sekoitetaan esimerkin 1, vai heen 3, mukaisesti 2 N natriumhydroksidin kanssa, ja työ päätetään mainitun esimerkin mukaisesti. Saanto: 1,3 g, : sulamispiste 129-130°C.
24 87203 NMR (d^-DMSO) £ * 7,36 ppm, d, 5H, fenyyli
4,43 ppm, s, 2H,bentsyyli CH2 5 3,75 ppm, s', 2H, Ctt2-COOH
2,25 ppm, s, 3H, 4-CH3
Esimerkki 4 2-n-propyylimerkapto-4-metyyli-1,3-tiatsol-5-yyli-etikkahappometyyliesteri 10 Vaihe 1 2,03 g (0,01 moolia) esimerkistä 1, vaiheesta 1, saatua yhdistettä annetaan reagoida esimerkin 1, vaiheen 2, mukaisesti kaliumkarbonaatin ja n-propyylijodidin kanssa asetonissa, ja työ päätekään vastaavasti. Saanto 3,9 g 15 öljyä, 100 % teoreettisesta.
NMR (d6-DMS0) <T - 3,83, s, 2H, CH2-COOCH3 3,62, s, 3H, COOCHj 3,10, t, 2H, CH2-CH2 CH2 2,38, s, 3H, 4-CHj 20 1,67, q, 2H, CH2-CH2-CH3 0,97, t, 3H, CH2-CH2-CH3
Vaihe 2 2-n-propyylimerkapto-4-metyyli-l, 3-tiatsol-5-yyli-25 etikkahappo 4,1 g (0,Q168 moolia) vaiheen 1 yhdistettä sekoite-taan esimerkin 1, vaiheen 3, mukaisesti 2 N natriumhydr-oksidin kanssa, ja työ päätetään esimerkin 1, vaiheen 3, mukaisesti. Saanto 2,0 g = 52 % teoreettisesta. Sulamis--V-: 30 piste 79-8Q°C.
NMR (d&-DMS0) £ - 12,60, br s, 1H, COOH
3,73, s, 2H, CH^COOH
3,11*, m, 2H, CH2-CH2-CH3 \ 2,20, s, 3H, 4CH3 35 1,70, q, 2n, ch2-ch2-ch3 0,97, t, 3H, CH2-CH2-CH3 25 87203
Esimerkki 5 (2-karboksimetyylitio-4-metyyli-l,3-tiatsol-5- yyli)-etikkahappo 7,6 g 2-merkapto-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli-5 etikkahappoa liuotetaan 50 ml:aan 2 N natronlipeää ja sekoitetaan 6,9 g:n kanssa bromietikkahappoa. Kuumennetaan 3 tunnin ajan höyrynauteella, ja tänä aikana pH pidetään 8:ssa säätämällä se 2N NaOHrn avulla. Jäähdyttämisen jälkeen liuos suodatetaan ja tehdään happameksi. Saadaan 6,5 g ai-netta, jonka sulamispiste on 180°C.
Alkuaineanalyysi (CgHgNO^S2; 297,3)
Laskettu: C 38,8, H 3,7, N 5,7, S 25,9 % Määritetty:C38,8, H 3,6, N 5,6, S 25,5 % ^H-NMR (dg-DMSO): % (miljoonasosaa): 2,25 (s, CH^-tiatsoli, 15 3H), 3,70 (s, 5-CH~-tiatsoli, 2H) , 3,93 (s, 2-CH~-S-tiatso- li, 2H).
Esimerkki 6 /2-(2-karboksi-etyylitio)-4-metyyli-l,3-tiatsol-5- yyli7-etikkahappo 20 3,14 g 2-merkapto-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli- etikkahappoa liuotetaan 40 ml:n kanssa N natriumhydroksidi-liuosta ja sekoitetaan 2,16 g:n kanssa 3-klooripropionihap-poa. Sen jälkeen kun on edelleen lisätty 10 ml N NaOH-liuos-ta, kuumennetaan 5 tunnin ajan höyryhauteella. Liuos teh-25 dään happameksi ja jäähdytetään kiteytymisen täydentämiseksi. Suosatus ja kaksi kertaa suoritettu toistokiteytys antoi-vat etikkaesteristä 2,5 g ainetta, jonka sulamispiste oli i24°c.
Alkuaineanalyysi (C9HnN04S2' 261,3) 30 Laskettu: C 41,4 %, H 4,2 %, N 5,4 % Löydetty: C 41,3 %, H 4,2 %, N 5,4 % V': Vedestä suoritetun uudelleenkiteyttämisen jälkeen voidaan saada hydraatti. 1,0 g antoi 0,9 g ainetta, jonka - - sulamispiste oli 93°C.
^ Alkuaineanalyysi (CgH^^NO^Sj; 261,3 x H2q; 279,3) 26 87203
Laskettu: C 38,7, H 4,7, N 5,0, S 22,9 % Löydetty: C 39,2, H 4,8, N 4,9, S 23,1 % 1H-NMR (dg-DMSO): ^ (miljoonasosaa) = 2,17 (s, 4-CH.j-tiatsoli, 3H), 2,61 ja 3,21 (2 x t, J = 7Hz, -CH2CH2“, 5 4H), 3,72 (s, 4-CH2-tiatsoli, 2H).
Esimerkki 7 /2-(3-karboksi-prop-l-yylitio)-4-metyyli-l,3-tiatsol- 5-yyli7~etikkahappo
Vaihe 1 10 /2-(3-metoksikarbonyyli-prop-l-yylitio)-4-metyyli- 1,3-tiatsol-5-yyli7~etikkahappo 9,27 g 2-merkapto-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli-etik-kahappo-4-metoksibentsyyliesteriä liuotetaan 100 ml:aan kuivaa DMF:a ja sekoitetaan 7,0 g:n kanssa vedetöntä, jau-15 hettua kaliumkarbonaattia. Tähän suspensioon lisätään pisaroittaan 4,5 g 4-kloorivoihappometyyliesteriä. Annetaan sekoittua 6 tunnin ajan huoneenlämpötilassa, suodatetaan ja liuotin poistetaan. Raaka tuote kromatografoidaan pii-happogeelillä etikkahappoesteri/sykloheksaani-seosta käyt-2Q täen (1:1). Liuottimen poistamisen jälkeen tuotejakeesta liuotetaan noin 20 ml:aan metyleenikooridia ja sekoitetaan 10 ml:n kanssa trifluorietikkahappoa. Annetaan sekoittua 30 minuutin ajan huoneenlämpötilassa, liuotin poistetaan tyh-jössä, jäännös otetaan 1Q0 ml:aan 2 N natriumbikarbonaatti-25 liuosta, uutetaan etikkaesterillä. Vesijae tehdään happa-:- meksi ja uutetaan uudelleen kaikkiaan 300 ml :11a etikka- esteriä. Orgaaniset jakeet kuivataan MgS04:11a, ja liuotin ·. poistetaan. Saadaan 3,5 g vaiheen 1 mukaista yhdistettä, jonka sulamispiste on 80°C etikkahappoesteri/di-isopropyy-30 lieetteri-seoksesta suoritetun uudelleenkiteyttämisen jäl-- . keen.
27 87203 ^H-NMR iCDClj):
\t£ * 3,66; 3H
m, « O 2’°‘2’5* 4H N_Λ I, ---- Jl j[ h3c-oc-ch2-.ch2-ch2s -^s^ch2cooh 10
s, £ - 2,31 ; 3H br. s; £« 3,45; 1H
s, / - 3,71 Γ 2H
t, ^ “ 3,16; J - 7Hz; 2H
15
Vaihe 2 ^2-(3-karboksi-prop-l-yylitio)-4-metyyli-l,3-tiat-sol-5-yyli7~etikkaesteri 3,5 g vaiheesta 1 saatua yhdistettä liuotetaan 2o 20 mitään metanolia ja sekoitetaan 0,8 g:n kanssa NaOHta ja 10 ml tn kanssa vettä 6 tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Väkevöidään kuivaksi, otetaan uudelleen veden kanssa ja teh-. dään happameksi 2 N HCl-liuoksella. Saostunut tuote suoda- tetaan ja uudelleenkiteytetään etikkahaposta. Saadaan 1,8 g ·.' 25 ainetta, jonka sulamispiste on 121°C.
Alkuaineanalyysi (C^ qH^ 3NO^S2; 275,3)
Laskettut c 43,6 I H 4,71 N 5,11 S 23,3 I Löydettyt 43,8 I 4,9 t 5,0 t 23,0 \ ^ H-NMR (dt-DMSO): £· 2,20 (s, 4-CHj-tiatsolx 3H), 30 1,70-2,60 fm,2-CH2CH2S-tiatsoli 4H), 3,15 (s, H00CCH2-, 2H), 3,73 (s, 5-CH2COOH, 2H) . Esimerkkien 8-13 mukaiset yhdisteet syntetisoidaan 35 esimerkissä 7 kuvatulla tavallat 28 87203
Esimerkki 8 2-(2-karboksi-2-metoksi-imino-etyylitio)-4-metyyli- 1,3-tiatsol-5-yyli-etikkahappo Sulamispiste 138°C.
5 Alkuaineanalyysi (c1oH12N2°5S; 304,3)
Laskettu: C 39,5, H 4,0, N 9,2, S 21,0 % Löydetty: C 39,4, H 3,8, N 9,3, S 20,7 % ’h-NMR (d^-DMSO) : S * 2,30 is, 4-CHj- tiatsoli 3H), 3,63 is, CH2S, 2H), 10 3,93 is, N-OCH3, 3H), 4,06 f s, 5-CH2- tiatsoli 2H)
Esimerkki 9 2- (2-karboksi-2-hydroksi-imino-etyylitio) -4-metyy-15 li-1,3-tiatsol-5-yyli-etikkahappo
Sulamispiste 166-7°C.
Alkuaineanalyysi (Cg^o^^Si 290,3)
Laskettu: c 37,2 4 H 3,51 N 9,6 I S 22,Il
Löydetty: 37,5 I 3,6 I 9,9 I 22,4 I
20 1 'H-NMR fd^-DMSO): £m 2,23 fs, 4-CHj-tiatsoli 3H), 3,79 fs, CH2S; 2H), 4,03 (s, 5-CH2-tiatsoli 2H)
Esimerkki 10 35 2-(4-karboksi-butyylitio)-4-metyyli-l,3-tiatsol-5- yyli-etikkahappo ·’...· Sulamispiste 110-1°C.
Alkuaineanalyysi: (C^H^N0^S2; 289,3) 3Q Laskettu: c 45,7 I H 5,2 I N 4,8 4 Löydetty: 45 I 5,4 I 4,7 4 1 H-NMR (dg-DMSO) : S = 1,6 ja 2,2 ja 3,1 (je m, -(CH2)4-8H), ·* ‘ 2,23 (s, 4-tiatsoli-CH3, 3H), 3,72 (s, 5-CH2_tiatsoli , 2H).
: : Esimerkki 11 35 2-(5-karboksi-pentyyli-tio)-4-metyyli-l,3-tiatsol- 5-yylietikkahappo 29 87203
Sulamispiste 128-9°C.
Alkuaineanalyysi (C^2H17N®4®2^3,3)
Laskettu: C 47,5, K 5,6, N 4,6 % Löydetty: C 47,6, H 5,7, N 4,5 % 5 1H-NMR (dg-DMSO) : $ = 1,5 ja 2,2 ja 3,2 (je m, -(CH^-10H), 2,20 (s, 4-CH3-tiatsoli, 3H), 3,76 (s, 5-CH2-tiat-soli, 2H) .
Esimerkki 12 £2-(1-karboksi-l-metyyli-etyylitio)-4-metyyli-l,3-]_0 tiatsol-5-yyli7~etikkahappo
Sulamispiste 154-5°C.
1H-NMR (dg-DMSO): %= 1,48 (s, (CH3)2C, 6H), 2,25 (s, 4-CH2-tiatsoli, 3H), 3,80 (s, 5-CH2COOH-tiatsoli, 2H). Esimerkki 13 15 £1~(1-karboksi-l-syklobutyylitio)-4-metyyli-l,3- tiatsol-5-yyli7-etikkahappo Sulamispiste 114-5°C.
1H-NMR (dg-DMSO): £= 1,8-2,6 (m, 6H, syklobutyyli-H9, 2,20 (s, 4-CHj-tiatsoli, 3H), 3,75 (s, 5-CH2CO).
2Q Esimerkki 14 4-karboksi-5-etyylitio-l,3-tiatsoli 6 g 5-etyylitio-l,3-tiatsoli-4-karboksyylihappo-metyyliesteriä liuotettiin 100 ml:aan metanolia ja palautus jäähdytettiin 1,2 g:n kanssa NaOH:a 10 ml:ssa vettä 25 noin yhden tunnin ajan. Liuottimen haihduttamisen jälkeen pyöröhaihduttajassa suoritettiin suodatus ja tehtiin hap-pameksi 2 N HCl-liuoksella. Kuivaamisen jälkeen saatiin 4,7 g otsikon mukaista yhdistettä, jonka sulamispiste oli 158-9°C.
30 "^H-NMR (dg-DMSO): S (miljoonasosaa): 1,2 (t, etyylitio-CH3) , J = 7Hz, 3H), 2,9 (q, etyylitio-CH2, J = 7Hz, 2H), 8,8 (s, tiatsoli-2H, 1H).
Molekyylirakenne: moolihuippu 189 (CgH7N02S2).
Esimerkki 15 35 5-karboksimetyylitio-l,3-tiatsol-4-yyli-karboksyyli- happo 30 8 7 2 0 3 12,3 g 5-metoksikarbonyylimetyylitio-l,3-tiatsol- 4-yyli-karboksyylihappometyyliesteriä liuotettiin 100 ml: aan metanolia ja palautusjäähdytettiin 2 g:n kanssa NaOH:a 20 ml:ssa vettä, 2 tunnin ajan. Pyöröhaihduttajalla suorien tetun metanolin poistamisen jälkeen liuos kirkastettiin suodattamalla ja tehtiin happameksi 2 N HCl-liuoksella. Kuivauksen jälkeen saatiin 10,3 g ainetta, jonka sulamispiste oli 237°C.
^H-NMR (d.-DMSO): & (miljoonasosaa): 3,9 (s, HOOCCt^S, 2H), 8,8 (s, tiatsoli-2H, 1H), IR (KBr-puriste) : = 1680 cm ^ (tiatsoli-COOH) , 1710 cm ^ (-SCK2COOH).
Esimerkki 16 5-karboksimetyylitio-l,3-tiatsol-4-yyli-karboksyyli-^5 hapon dinatriumsuola 24 g dikarboksyylihappoa, joka on esimerkistä 32 peräisin, liuotetaan 8,8 g:n kanssa NaOII:a sekä noin 50 ml:n kanssa vettä. Sekoitetaan metanolin kanssa, kunnes muodostuu heikko samentuma ja annetaan kiteytyä jäähtymisen aika-20 na. Suodatus antoi 23,5 g dinatriumsuolaa, jonka sulamispiste 300°C.
Alkuaineanalyysi (CgH3N04S2Na2 x H20; 281,4)
Laskettu: H20 6,4, Na 16,3 % Löydetty: H20 7,4, Na 16,0 % : 25 Esimerkki 17 /λ- (4-karboksi-l, 3-tiatsol-5-yyli) -tio7~voihappo 4 g otsikon mukaisen yhdisteen dimetyyliesteriä liuotettiin noin 20 ml:aan etanolia ja palautusjäähdytet-tiin 1,5 g:n kanssa NaOH:a 5 ml:ssa vettä, yhden tunnin 30 ajan. Liuottimen poistamisen jälkeen, mikä suoritettiin . . pyöröhaihduttajassa, sekä vesiliuoksen suodattamisen jäl- ;keen, tehdään happameksi 2 N HCl-liuoksella. Suodatetun ' saostuman kuivauksen jälkeen saatiin 2,7 g otsikon mukaista yhdistettä, jonka sulamispiste oli 177°C.
35 ^H-NMR (d^-DMSO): ^ (miljoonasosaa): 1,9 (m, S-CH2CH2CH2COOH, 3i 87203 2H), 2,4 ja 3,1 (je t, S-CH2CH,CH2COOH, je 2H, J = 7Hz), 8,9 (s, tiatsoli-2H).
IR (KBr-puriste): = 1680 cm ^ (tiatsoli-4-COOH), 1707 cm-1 (S-CH2)3COOH).
5 Esimerkki 18 /3-(4-karboksi-l,3-tiatsol-5-yyli)-tio7-propioni-happo 13 g otsikon mukaisen yhdisteen dimetyyliesteriä liuotettiin 200 mlraan metanolia ja palautusjäähdytettiin 10 höyryhauteella 4 g:n kanssa NaOH:a 25 ml:ssa vettä, 2 tunnin ajan. Tislaamalla suoritetun metanolin poistamisen jälkeen ja vesijakeen suodattamisen jälkeen vesijae tehtiin happameksi 2 N HCl-liuoksella hapon saostamiseksi. Kuivauksen jälkeen saatiin 2,3 g ainetta, jonka sulamis-15 piste oli 172°C.
IR (KBr-puriste): = 3090 cm ^ (C-H-tiatsoli), 1700 cm ^ (COOK).
'"H-NMR (dg-DHSO) : ^ (miljoonasosaa): 2,7 ja 3,2 (je t, -S-CH2CH2COOH, J - 7Hz, je 2H), 8,9 (s, tiatsoli-2-H, 1H). 20 Esimerkki 19 j/5- (4-karboksi-l, 3-tiatsol-5-yyli) -tio7~pentaani-hapon dinatriumsuola 20 g otsikon mukaisen yhdisteen dimetyyliesteriä liuotettiin 100 mitään metanolia ja 100 mitään vettä ja 25 sekoitettiin 5,6 gtn kanssa NaOHta. Palautusjäähdytettiin noin yhden tunnin ajan, metanoli poistettiin tislaamalla. Vesijae suodatettiin ja tehtiin happameksi 2 N HCl-liuoksella. Kuivauksen jälkeen saatiin 15 g ainetta, jonka sulamispiste oli 187-190°C. Tämä määrä liuotettiin pieneen mää-30 rään vettä 4,2 g:n kanssa NaOHra ja sekoitettiin asetonin kanssa. Syntyvä saostuma poistettiin suodattamalla, kuivattiin. Saatiin 17,5 g otsikon mukaista yhdistettä, jonka sulamispiste oli 210°C (hajoaa).
^H-NMR (D20) : i) (miljoonasosaa): 1,7 ja 2,2 ja 3,0 (je m, 35 -SCH2CH2CH2CH2C02, 4 ja 2 ja 2H), 8,6 (s, tiatsoli-2H, 1H).
32 8 7 2 0 3
Alkuaineanalyysi (CgHgNO^S2Na2 x 1,5 t^O; 332,3)
Laskettu: C 32,4, H 3,6, N 4,2, Na 13,8, 1^0 8,1 % Löydetty: C 32,5, H 3,7, N 4,1, Na 14,0, H^O 8,8 %
Esimerkki 20 5 β>-(4-karboksi-l,3-tiatsol-5-yyli)-tio7~heksaani- hapon dinatriumsuola 20 g otsikon mukaisen yhdisteen dimetyyliesteriä palautusjäähdytettiin 200 ml:ssa vesi/metanoli-seosta (1:1), 5,4 g:n kanssa NaOH:a, yhden tunnin ajan höyryhauteella. Melo tanolin poistamisen jälkeen, joka suoritettiin tislaamalla, vesijae kirkastettiin tekemällä se happameksi 2 N HCl-liuok-sella, ja dikarboksyylihappo poistettiin suodattamalla. Saanto oli 16,6 g ainetta, jonka sulamispiste oli 151-2°C. Näin saatu määrä liuotettiin pieneen vesimäärään, joka sisälsi 15 4,4 g NaOH:a, ja dinatriumsuola saostettiin asetonilla.
Saanto: 18,5 g ainetta, jonka sulamispiste oli 164-6°C (hajoaa) ^K-NMR (D2O) : £ (miljoonasosaa): 1,6 ja 2,2 ja 3,0 (je m, -S-(CH2)5~C02r 6 ja 2 ja 2H), 8,6 (s, tiatsoli-2H, 1H).
20 Alkuaineanalyysi (ciQHnii04S2Na2 x ll^0? 337,3)
Laskettu: C 35,6, H 3,9, N 4,1, Na 13,6, i^O 5,4 % Löydetty: C 34,8, H 4,0, N 4,0, Na 13,3, H20 6,9 %
Esimerkki 21 (2-karboksimetyylitio-l,3-tiatsol-5-yyli)-etikka-25 happo ’ 2,97 g (2-merkapto-l,3-tiatsol-5-yyli)etikkahappoa liuotettiin 17 ml:aan 2 N NaOHra. Tähän lisättiin 2,78 g : : : bromietikkahappoa ja palautusjäähdytettiin 3 tunnin ajan höyryhauteella. Jäähdyttämisen jälkeen suoritettiin kirkas-30 taminen ja tehtiin happameksi 2 N HCl:lla. Yli yön jää-: kaapissa suoritettu kiteyttäminen antoi 1,4 g ainetta, jon- . ·; ka sulamispiste oli 120-1°C.
^H-MNR (dg-DMSO): S (miljoonasosaa): 3,65 (s, S-CI^COOH, 2H), 3,8 (s, tiatsoli-CI^COOH, 2H), 7,3 (s, tiatsoli-4H, ../ 35 1H) . MS: M+ = 233 (C^NO^) 33 87203
Esimerkki 22 /2-(3-karboksi-propyylitio)-1,3-tiatsol-5-yyli7- etikkahappo 1,5 g [2-(3-metoksikarbonyylipropyylitio)-1,3-5 tiatsol-S-yyliJ-etikkahappoa palautusjäähdytettiin 5 ml: ssa metanolia, 7 ml:n kanssa 2 N NaOH:n vesiliuosta, 3 tunnin ajan höyryhauteella. Pyöröhaihduttajassa suoritetun metanolin poistamisen jälkeen ja sen jälkeen kun vesiliuos oli kirkastettu, tehtiin happameksi 2 N HC1-10 liuoksella ja saatiin kiteyttämisen jälkeen 0,6 g ainetta, jonka sulamispiste oli 97°C.
1H-NMR (dg-DMSO): £ (miljoonasosaa): 2,0 (m, SCH2CH2CH2COOH, 2H) , 2,4 ja 3,2 (je t, S-CK2CH2CII2COOK, je 2H, J = 7Hz), 3,8 (s, tiatsoli-CH2COOH, 2H), 7,3 (s, tiatsoli-4H, 1H).
15 IR (KBr-puriste): V* = 3100 cm ^ (tiatsoli-4H-valenssi), 1680 cm'1 ja 1710 cm 1 (COOK) .
Esimerkki 23 /2-(2-karboksibentsyyli)-tio-4-metyyli-l,3-tiatsol- 5-yyli7~etikkahappo 20 Vaihe 1 /2-(2-metoksikarbonyylibentsyyli)-tio-4-metyyli- 1,3-tiatsol-5-yyli7-etikkahappometyyliesteri 4,1 g 2-merkapto-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli-etikkahappometyyliesteriä liuotettiin 50 ml:aan Dr4F:a ja 25 sekoitettiin kaliumkarbonaatin läsnäollessa, jota oli 5 g, pisaroittain 5,1 g:n kanssa 2-bromimetyyli-bentsoehappo-metyyliesteriä. Muutoslämmön vaimenemisen jälkeen sekoitettiin yhden tunnin ajan, suodatettiin ja DMF poistettiin pyöröhaihduttajassa. Jäännös otettiin etikkahappoon ja 3Q pestiin 2 x vedellä. Orgaaninen jae kuivattiin ja liuotin poistettiin tyhjössä. Saatiin 5,6 g öljyä.
^H-NMR (CDC13) : S (miljoonasosaa): 2,3 (s, tiatsoli-4-CH-j, 3H), 3,60 (s, tiatsoli-5-CH2, 2H), 3,65 (s, tiatsoli-5-CH2COOCH3, 3H), 3,8 (s, aromaatt. COOCII3, 3H) , 4,7 (s, 35 aromaatt. CH2,2H), 7,1 (m, aromaatt. H, 4H).
34 8 7 2 0 3
Vaihe 2
Otsikon mukainen yhdiste 3,8 g vaiheesta 1 saatua ainetta liuotetaan 35 ml: aan metanolia ja palautusjäähdytetään 0,9 g:n kanssa NaOH:a 5 ml:ssa vettä nöyryhauteella, 2 tunnin ajan. Metanoli pois-5 tetaan pyöröhaihduttajalla, vesiliuos kirkastetaan ja tehdään happameksi 2 N HCl-liuoksella. Saostunut tuote uudelleen kiteytetään isopropanolista. Saanto 1,5 g, sulamispiste 199°C.
'''H-NMR (dg-DMSO) : (miljoonasosaa): 2,2 (s, tiatsoli-4-CH^, 10 3K), 3,6 (s, tiatsoli-5-CH2, 2H), 4,6 (s, CK^S, 2H), 7,2-7,8 (m, aromaatt. H, 4H) .
IR (KBr-puriste) : = 1680 cm 1 ja 1710 cm”^ (COOK) .
Esimerkki 24 l-fenyyli-3-hydroksi-l,2,4-triatsol-5-yyli-5-merkapto-15 etikkahappo 0,96 g (5 mmoolia) l-fenyyli-3-hydroksi-5-merkapto- 1.2.4- triatsolia liuotetaan 15 ml:aan DMF:a. 0,7 g (5 mmoo-lia) hienoksijauhettua kaliumkarbonaattia ja 0,6 g (6 mmoolia) kloorietikkahappoa lisätään. Lyhyen vaahtoamisen jäl- 20 keen sekoitetaan huoneenlämpötilassa 4 tunnin ajan. Erotetaan natriumkloridista imemällä, DMF poistetaan tislaamalla suurvakuumissa ja huoneenlämpötilassa. Jäännös pestään vedellä ja kuivataan. Saanto: 0,52 g = 41 %, sulamispiste 202°C (hajoaa).
25 IR (KBr) ^ = 3440; 1730; 1630 cm"1; NMR (dg-DMSO) £ = 12,33 miljoonasosaa s (1H) , 7,50 miljoo-: nasosaa S (5H) arom. 4,03 miljoonasosaa s (2H) S-CHj- ' l-metyyli-3-hydroksi-l,2,4-triatsol-5-yyli-merkapto- etikkahappo : ; 1,3 g (10 mmoolia) l-metyyli-3-hydroksi-5-merkapto- 1.2.4- triatsolia liuotetaan 20 ml:aan DMF:a ja lisätään : 1,1 g (11,6 mmoolia) kloorietikkahappoa. Sekoitetaan 16 tuntia 5Q°C:ssa, väkevöidään pyöröhaihduttajassa ja sekoitetaan useita kertoja eetterin kanssa. Valkoinen sakka pes-tään eetterillä. Sulamispiste 240°C, saanto 1,4 g = 75 %.
IR (KBr) 0 = 3000-2500 cm 1 OH valenssinheilahdus, 1725 cm 1 tyydyttynyt karboksyylihappo, 35 87203 NMR (TFA) £ = 4,15 miljoonasosaa (s, 2H), 4,03 miljoonasosaa (s, 3H).
Esimerkki 25 2.5- di-karboksimetyylitio-l,3,4-tiadiatsoli 5 3,54 g 2,5-dimerkapto-l,3,4-tiadiatsolia, liuotet tuna 17 ml:aan 1 N NaOHra, sekoitettiin 2,55 g:n kanssa bromietikkahappoa. Kuumennettiin 3 tunnin ajan höyryhau-teella, suodatettiin, jäähdytettiin +5°C:een, pH säädettiin l,8:ksi 2N HCl:lla. Saostuma poistettiin imemällä, 10 pestiin H20:lla ja kuivattiin tyhjössä. Saanto: 3,44 g, sulamispiste: 168°C.
NMR (DMSO-dg) S 4,15 miljoonasosaa, s, 4H, CH2·
Esimerkki 26 2.5- di-karboksietyylitio-l,3,4-tiodiatsoli 15 904 mg di-natrium-1,3,4-tiadiatsoli-2,5-ditiolaat- tia liuotettiin 30 ml:aan DMF:a ja sekoitettiin 1,22 g:n kanssa 3-bromipropionihappoa. Sekoitettiin 18 tunnin ajan huoneenlämmössä, suodatettiin, emäliuos väkevöitiin haihduttamalla ja jäännös otettiin H20:n. pH säädettiin 1,8: 20 ksi 2 N HClrllä. Saostuma poistettiin imemällä, pestiin H20:lla ja kuivattiin tyhjössä. Saanto: 0,7 g sulamispiste: 140°C. NMR (DMSO-dg): 2,7 miljoonasosaa, t, 4H, CH2C02, 3,4 miljoonasosaa, t, 4H, CH2S.
Esimerkki 27 25 2,5-di-(3-karboksi-l-propyyli-tio)-1,3,4-tiadiatsoli Käytetään 1,56 g 4-bromivoihappoa yhdenmukaisesti esimerkin 26 kanssa, jotta saadaan 990 mg otsikon mukaista -· yhdistettä. Sulamispiste: 111°C.
NMR (DMSO-dg): 1,7-2,6 miljoonasosaa, m, 8H, CH2CH2C02, 30 3,3 miljoonasosaa, t, 4H, CH2~S.
Seuraavat esimerkit suoritettiin yhdenmukaisesti esimerkin 23 kanssa.
Esimerkki 28 /2-(3-karboksibentsyyli)-tio-4-metyyli-l,3-tiatsol-35 5-yyli7-etikkahappoa
Vaihe 1 {2-(3-metoksikarbonyylibentsyyli)-tio-4-metyyli- 1,3-tiatsol-5-yyli7_etikkahappometyyliesteri 36 8 7 2 0 3 4.1 g:sta 2-merkapto-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli-etikkahappometyyliesteriä ja 5,1 g:sta 3-bromimetyyli-bentsoehappometyyliesteriä saatiin 5,0 g öljyä.
^H-NMR (CDCl^) : S (miljoonasosaa): 2,3 (s, tiatsoli-4-5 CH3, 3H), 3,60 ja 3,62 (2 x s, tiatsoli-5-CH2), 2H; tiat^oli-5-CH2), 2H; tiatsoli-5-CH2COOCH3, 3H), 3,8 (s, aromaatt. COOCH^, 3H), 4,4 (s, aromaatti. CH2, 2K), 6,8- 7,8 (m, aromaatt. H, 4K).
Vaihe 2 1Q Otsikon mukainen yhdiste 2,4 g:sta vaiheen 1 mukaista tuotetta saatiin 1,2 g otsikon mukaista yhdistettä, jonka sulamispiste oli 221°C. 1H-NMR (dg-DMSO): (miljoonasosaa): 2,25 (s, tiatsoli-4- CH3, 3H), 3,72 (s, tiatsoli-5-CH2, 2H), 4,5 (s, aromaatt.
15 CH2' 2H), 7,3-8,0 (m, aromaatt. H, 4H).
IR (KBr-puriste): ^ = 1710 cm 1 (COOH), 2500 cm 1 (OH). Esimerkki 29 £2-(4-karboksibentsyyli)-tio-4-metyyli-l,3-tiatsol- 5-yyli7~etikkahappo 20 Vaihe 1 £2-(4-metoksikarbonyylibentsyyli)-tio-4-metyyli- 1,3-tiatsol-5-yyli7-etikkahappometyyliesteri 6.1 g:sta 2-merkapto-4-metyyli-1,3-tiatsol-5-yyli- : etikkahappometyyliesteriä ja 8,6 g:sta 4-bromimetyyli- : r 25 bentsoehappometyyliesteriä saatiin 6,7 g öljyä.
^-NMR (CDCl^) = (miljoonasosaa): 2,3 (s, tiatsoli-4-CH3, 3H), 3,55 (s, tiatsoli-5-CH2, 2H), 3,6 (s, tiatsoli-5-CH2COOCH3, 3H), 3,78 (s, aromaatt. COOCH3, 3H), 4,3 (s, aromaatt. CH2, 2H), 7,25 ja 7,80 (je d, J = 8Hz, aromaatt.
30 H' 4H)· IR (kalvo): 0 = 1710"1 ja 1725 cm"1 (COOCH3).
; Vaihe 2
Otsikon mukainen yhdiste 6,7 g:sta vaiheesta 1 saatua tuotetta saatiin 4,2 g 35 otsikon mukaista yhdistettä, jonka sulamispiste oli 196°C (i-propanoli).
37 87203 '"H-NMR (d,-DMSO) : % (miljoonasosaa) = 2,17 (s, 4-tiatsoli-b CH^, 3H) , 3,7Q (s, S-tiatsoli-CH^, 2H), 4,48 (s, arom. CHy, 2H), 7,35 ja 7,85 (je d, J = -Hz, aromaatt. H, 4H).
IR (KBr-puriste): V = 1700 cm ^ (COOH), 2500 cm ^ (OH) 5 Alkuaineanalyysi: C^^H^^NO^S (323,3)
Laskettu: C 52,0, H 4,1, N 4,3 % Löydetty: C 52,1, H 4,2, N 4,0 %
Esimerkkien 30-33 mukaiset yhdisteet syntetisoitiin esimerkissä 5 kuvatulla tavalla.
10 Esimerkki 30 2-karboksimetyylitio-5-hydroksi-l-metyyli-6-okso-dihydro-1,3,4-triatsiini NMR (DMS0 - dg) δ = 3,98 ppm (s, CH2) 6 = 3,32 ppm (s, CH.) 15 3
Esimerkki 31 2-karboksietyylitio-5-hydroksi-l-metyyli-6-okso-dihydro-1,3,4-triatsiini 2o NMR (DMS0 - dg) δ * 3,28 ppm (s, CH3) e * 3,18 ppm (t, CHg) δ « 2,73 ppm (t, CH g)
Esimerkki 32 ' 4-karboksietyyli-2-karboksimetyylitio-l,3-tiatsoli 25 NMR (DMS0 - dfi) δ « 7,28 ppm (s, Thiazol-H) δ * 4,1 ppm (s, C H g) δ * 3,3 ppm (m, 2 xCH2)
Esimerkki 33 30 4-karboksietyyli-2-karboksietyylitio-l,3-tiatsoli NMR (DMS0 - dg) δ * 7,18 ppm (s, Thiazol-H) e f 3,5 ppm (t, CH2) δ * 3,3 ppm (m, 2 x CHg) δ * 2,7 ppm (t, CH?) 35 - 38 8 7 2 0 3
Esimerkki 34 4- karboksi-2-karboksietyylitio-l,3-tiatsoli 6,0 g bromipropionihappoa liuotettiin 100 ml:aan vettä ja pH säädettiin 7:ksi 1 N NaOH:lla. Tämä liuos tipu-5 tettiin pisaroittain suspensioon, jossa oli 7,5 g 4-etoksi-karbonyyli-2-merkapto-l,3-tiatsolia 75 mlrssa H20:a. pH säädettiin 8-lQ:ksi 2 N NaOH:lla, sekoitettiin 4 tunnin ajan huoneenlämpötilassa ja 2 tunnin ajan 60°C:ssa. pH säilytettiin 8-10:ssä. Jäillä suoritetun jäähdyttämisen jälkeen pH säädettiin l:ksi 2 N HC1:11a ja suodatettiin.
NMR (DMSO-dg)<S = 8,35 miljoonasosaa (s, tiatsoli-H) S = 3,52 miljoonasosaa (t, CH2), ^ = 2,75 miljoonasosaa (t,CH2)
Esimerkki 35 5- karboksi-2-karboksimetyylitio-4-metyyli-l,3-tiat- ]_5 soli
Vaihe 1 6 g bromietikkahappoa liuotettiin 50 mlraan vettä ja pH säädettiin 7-8:ksi 1 N NaOH:lla. 60°C:een kuumennettuun liuokseen lisättiin 8 g 5-etoksi-karbonyyli-2-merkap-2Q to-4-metyyli-l,3-tiatsolia ja sekoitettiin 2 tunnin ajan tässä lämpötilassa ja pH 8-10:ssä. Jäiden avulla jäähdyttäen säädettiin pH l:ksi 2 N HClrlla ja imettiin 10,9 g.
Vaihe 2 2,61 g vaiheesta 1 saatua tuotetta liuotettiin 20 ml: : : : 25 aan etanolia ja sekoitettiin 1,96 g:n kanssa KOH:a, joka oli 7Q ml:ssa etanolia. Sekoitettiin 1/2 tunnin ajan 50-60°C: . ssa, laimennettiin 60 ml :11a H20:a ja jäähdyttäen jäiden • avulla tehtiin happameksi pH 0,5:ksi käyttäen 1/2 konsent roitua HCl:a. Etanoli poistettiin pyöröhaihduttajassa, jol-3Q loin tuote saostui. Suodatettiin ja pestiin H20:lla. Saanto: - 2,Q5 g otsikon mukaista yhdistettä.
NMR (DMSO-dg) S = 4,08 miljoonasosaa (s, CH2), % = 2,52 mil-: joonasosaa (s, CH^) ·
Esimerkkien 36-37 mukaiset yhdisteet valmistettiin 35 esimerkissä 35 kuvatulla tavalla.
39 87203
Esimerkki 36 4- karboksi-2-karboksimetyylitio-l,3-tiatsoli NMR (DMSO-dg) % = 8,23 miljoonasosaa (s, tiatsoli-H) f) 4,12 miljoonasosaa.
5 Esimerkki 37 5- karboksi-2-karboksietyylitio-4-metyyli-l,3-tiatsoli NMR (DMSO-dg) £ = 3,5 miljoonasosaa (t, CK2) = 2,75 miljoonasosaa (t, CH2) , <) = 2,57 miljoonasosaa (s, CH^) .
10 Esimerkki 38 4- karboksi-2-karboksipropyylitio-l,3-tiatsoli
Vaihe 1 8,3 g 4-etoksikarbonyyli-2-merkapto-l,3-tiatsolia sekoitettiin 100 ml:ssa asetonia yhdessä 6,1 g:n kanssa ^5 I^CO^ia ja 1Q,3 g bromivoihappoetyyliesteriä, 3/4 tunnin ajan huoneenlämmössä. Suodatettiin ja suodos haihdutettiin kuivaksi. Jäännös otettiin etikkaesteriin ja uutettiin 2 x joilla. Liuottimen haihduttamisen jälkeen jäi jäljelle 14 g öljyä.
20 Vaihe 2 13,8 g tuotetta, joka oli saatu vaiheesta 1 liuotettiin 80 ml:aan etanolia ja sekoitettiin 11,6 g:n kanssa KOH:a, joka oli 250 ml:ssa etanolia. Sekoitettiin 3 tunnin ajan huoneenlämpötilassa, ja saostunut kaliumsuola pois-25 tettiin suodattamalla. Suola liuotettiin 150 ml:aan vettä ja Q°C:ssa pH säädettiin 0,5:ksi 1/2 konsentroidulla HC1: : llä, jolloin tuote saostui: 8,7 g otsikon mukaista yhdis tettä.
NMR (DMSO-dg) S = 8,22 (s, tiatsoli-H), ä = 3,25 (t, CH2), 3Q & = 2,38 (t, CH2), λ = 1,92 (q, CH2) .
Esimerkkien 39-41 mukaiset yhdisteet valmistettiin esimerkissä 38 kuvatulla tavalla.
Esimerkki 39 5- karboksi-2-karboksipropyylitio-4-metyyli-l,3- 35 tiatsoli 40 872°3 NMR (DMSO - dg) δ = 3,27 ppm (t, CH2) δ = 2,58 ppm (s, CH3) δ = 2,38 ppm (t, CH2) δ = 1,93 ppm (q, CH2)
Esimerkki 40 2-karboksyylitio-5-hydroksi-l-metyyli-6-okso-di-hydro-1,3,4-triatsiini 10 NMR (OMSO - dg)’ δ = 3,28 ppm (s, CHg) δ * 3,07 ppm (t, CH2) δ * 2,37 ppm (t, CH2) δ * 1,93 ppm (q, CH2) 15 Esimerkki 41 5-karboksi-2-karboksibutyylitio-4-metyyli-l,3-tiatsoli NMR (DMSO - dg) δ = 3,23 ppm (t, CH2) δ = 2,57 ppm (s, CHj) 2Q «= 2,27 ppm (t, CH2) δ' * 1,73 ppm (m, 2 x CH2)
Esimerkki 42 5-asetamido-2’-karboksimetyylitio-l, 3-tiatsoli 25 00 ml:aan kuivaa DMF:a liuotettiin 3,48 g (20 mmoolia) 5-asetamido-2-merkapto-l,3-tiatsolia, lisättiin 2,78 g (20 mmoolia) bromietikkahappoa ja sekoitettiin 2 tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Sitten liuotin poistet-tiin tyhjössä, ja jäännös pestiin dietyylieetterillä.
30 Isopropanoli/dietyylieetteri-seoksesta suoritetun uudel-leenkiteyttämisen jälkeen saatiin 3,1 g (67 %) otsikon - ' mukaista yhdistettä.
*H - NMR (dg - DMSO): δ * 2,10 ppm (s, 3H, -CHj), 3,93 ppm (s, 2H, -CHg-), 7,40 ppm 35 (s, 1H, tiatsoli -H), 7,90 ppm (br s, -CH20 ja H20), 11,43-ppm (br, s, 1H, -NH).
41 87203
Yhdenmukaisesti esimerkin 42 kanssa syntetisoitiin esimerkeissä 43-48 kuvatut aineet.
Esimerkki 43 N-(2-karboksimetyylitio-l,3-tiatsol-5-yyli)-glu-5 taarihappomonoamidi 1H - NMR (dg - DMSO): d = 1,56 - 2,65 ppm (m, 6H, -CH2-CH2-CH2-), 3,90 ppm (s, 2H, -CH2S), 7,36 ppm (s*, 1H, tiatscli-H), 8,26 ppm (br s, -CH20 ja H20), 1 1,40 ppm (br s, 1H, - N H-) 10
Esimerkki 44 N-(karboksimetyylitio-1,3-tiatsol-5-yyli)-meri-pihkahappomonoamidi ^ - NMR (dg - DMSO): 15 6 = 2,40 - 2,45 ppm (m, 4H, -CH2*CH2-), 3,90 ppm (s, 2H, -CH2S-), 7,33 ppm (s, lH.tiatsoli -H), 9,26 ppm (br s, -C02H ja H20), 11,46 ppmMbr s, 1H, -NH-)
Esimerkki 45 2Q (R,S)-2-(karboksimetyylitio)-6-karboksi-4,5,6,7- tetrahydro-1,3-bentsotiatsoli ’h - NMR (dg - DMSO): t = 1,75 - 1,91 ja 2,05 - 2,15 ppm (zwei m, 2H, -CHg- tiatsoli C-5), 2,51 ppm (br s, 1H, -CH-C02"), 2,61 - 3.01 ppm (m, 4H, 25 -CH2-CH2-) 4,03 ppm (s, 2H, -CH2S-) • - Esimerkki 46 - 2-(karboksimetyylitio)-bentsotiatsoli
Sp 144-6°C. IR 171Q cm"1. H-NMR (dg-DMSO): h =4,23 mil-. . 30 joonasosaa (s, 2H-CH2), 7,2-8,0 miljoonasosaa (m, 4H, aryyli-H).
Esimerkki 47 2-(karboksimetyylitio)-bentsimidatsoli SP-172-4°C. IR 1640, 1720 cm'1.
35 1 H - NMR (dg - DMSO): δ = 4,27 ppm (s, 2H, -CH2), 7,2 - 7,4 ppm (m, 4H,aryyli-N).
42 87203
Esimerkki 48 2-(karboksimetyylitio)-5-karboksi-bentsimid-atsoli
Sp. 228 - 230°C. IR 1610, 1700 cm-1.
5 ’h - NMR (dg - DMSO): e = 3,97 ppm (s, 2H, — CH^) · 7,4 * 8,03 (m, 3H,aryyii*H).
Esimerkki 49 /2-(karboksimetyylitio)-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-10 yyli7~3-propionihappo 40 ml:aan kuivaa DMF:a pantiin 2 g (8,6 mmoolia) (2-merkapto-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli)-3-propionihappo-etyyliesteriä ja lisättiin 1,49 g (8,6 mmoolia) bromietik-kahappoa. 2 tunnin kuluttua liuotin poistettiin tyhjössä 15 ja saa-iin 3,8 g /2-(karboksimetyylitio)-4-metyyli-l,3- tiatsol-3-yyli7-3-propionihappoetyyliesteriä öljynä. Raaka tuote otettiin 25 ml:aan etanolia, lisättiin 33 ml 1 N natronlipeää ja reaktioseos lämmitettiin 50°C:een. Päättyneen reaktion jälkeen etanoli poistettiin tyhjössä, vettä 2Q sisältävän jäännöksen pH säädettiin konsentroidulla suolahapolla 3,0:ksi ja uutettiin etikkaesterillä. Orgaanisesta jakeesta saatiin MgSO^:llä suoritetun kuivauksen, väke-voinnin ja dietyylieetterin kanssa suoritetun kiteyttämi-: sen jälkeen 1,6 g (71 %) otsikon mukaista yhdistettä.
: : 25 ^H-NMR (dg-DMSO): S = 2,23 miljoonasosaa (s, 3H, -CH^), 2,25-3,15 miljoonasosaa (m, 4H, -CK2-CH2-). 3,96 miljoonas-- osaa (s, 2H, -CH2S-).
.-.. Esimerkki 50 (R,S)-2-(karboksiet-2-yylitio)-6-karboksi-4,5,6,7-. . 3o tetrahydro-1,3-bentsotiatsoli ; 50 ml:aan asetonia liuotettiin 1,15 g (5 mmoolia) (R,S)-6-metoksikarbonyyli-4,5,6,7-tetrahydro-2-merkapto-bentsotiatsolia, lisättiin 888 mg (6,5 mmoolia) jauhettua K2C02:a ja 0,77 ml (5 mmoolia) 3-bromipropionihappoetyyli-35 esteriä ja reaktioseosta sekoitettiin 3 tunnin ajan huoneen- 43 87203 lämpötilassa. Sitten kiinteä jäännös poistettiin suodattamalla ja suodos väkevöitiin. Raaka tuote (1,6 g) saippuoitiin 2 N natronlipeällä sekä etanolilla. Sitten etanoli poistettiin tislaamalla, ja vettä sisältävän jäännöksen 5 pH säädettiin 3:ksi 2 N suolahapolla, jolloin saostui 480 mg (33 %) otsikon mukaista yhdistettä.
^Ιί-NMR (dg-DMSO) : S = 1,4-3,0 miljoonasosaa (m, 11H, 5 CH2” ryhmät ja 1 CU).
Esimerkki 51 10 /2-(3-karboksiprop-l-yylitio)-4-metyyli-l,3-tiatsol- 5,-yyli/-3-propionihappo 4Q ml:aan DMF:a pantiin 2 g (8,6 mmoolia) /2-merkap-to-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli^-3-propionihappoetyyliesteriä, lisättiin 1,48 g (11 mmoolia) jauhettua I^CO^a ja 15 1,23 ml (8,6 mmoolia) 4-bromivoihappoetyyliesteriä ja reak- tioseosta sekoitettiin 2 tunnin ajan 50°C:ssa. Kiinteä jäännös poistettiin imemällä, DMF poistettiin tyhjössä ja saatiin 3,6 g raakaa tuotetta, joka otettiin 25 ml:aan etanolia. Sen jälkeen kun oli lisätty 1 N natronlpieää, 20 sekoitettiin vielä 2 tunnin ajan huoneenlämpötilassa, etanoli valutettiin pois, ja nestemäisen jäännöksen pH säädettiin 3:ksi suolahapolla. Uutettiin etikkaesterillä, orgaaninen jae kuivattiin MgSO^rllä ja väkevöitiin. Saatiin : 2,2 g (88 %) otsikon mukaista yhdistettä öljynä.
25 ^H-NMR (CDCl-j) : & = 1,66-2,5 ja 2,6-3,15 miljoonasosaa (2 m, 1QH, 5 CH2~ryhmät), 2,16 miljoonasosaa (s, 3H, -CH^), 6,4 miljoonasosaa (br s, 2H, -CC^H).
Esimerkkien 52-56 mukaiset yhdisteet valmistettiin esimerkissä 51 kuvatulla tavalla.
· 30 Esimerkki 52 2-(karboksiprop-l-yylitio)-6-karboksi-4,5,6,7-tetra-hydro-1,3-bentsotiatsoli ^H-NMR (dg-DMSO): = 1,5-3,2 miljoonasosaa (m, 13H, 6 CH2-ryhmää ja 1 CH).
44 87203
Esimerkki 53 2-(karboksiprop-l-yylitio)-5-karboksi-bentsimid-atsoli
Sp 198-200°C IR 1700 cm-1.
5 ^H-NMR (dg-DMSO): ^ = 1,83-2,40 miljoonasosaa (m, 4H, -Cfi^-Ci^) / 3,37 miljoonasosaa (t, 2H, -CI^S) , 7,4-8,0 miljoonasosaa (m, 311, aryyli-H) .
Esimerkki 54 2-(karboksiprop-l-yylitio)-bentsimidatsoli 10 Sp 158-9°C. IR 1710 cm"1.
1H-I4MR (dg-DMSO) : ^ = 1,83-2,56 miljoonasosaa (m, 4H, -C^-C^), 3,57 miljoonasosaa (t, 2H, -CH2S), 7,3-7,8 miljoonasosaa (m, 411, aryyli-H) .
Esimerkki 55 ]_5 3-hydroksi-5- (3-karboksiprop-l-yylitio) -1-fenyyli- 1,2,4-triatsoli Sp 182°C. IR 1730 cm-1.
1H - NMR (dg - DMS0): 6 * 1,76 - 2,23 ppm (n, 4H, -CH2-CH2), 3,13 ppn (t, 2H, -CH2S), 2q 7,33 ppm (m, 5H, aryyli-H), 8,85 ppm (br s, ΊΗ, OH).
Esimerkki 56 2- (karboksiprop-l-yylitiö)bentsotiatsoli Sp. 1C0°C. IR 1710 cm'1 λΗ - NMR (d, - DMS0): 25 6 δ = 2,03 - 2,08 ppm (m, 4H, -CH2-CH2), 3,45 ppm (t, 2H, -CH2S), 7,18 - 7,9 ppm (m, 4H, aryyli-H).
; Esimerkki 57 2-(4-karboksibentsyylitio)-bentsimidatsoli 3Q 60 mlraan kuivaa DMF:a pantiin 4,6 g (30 mmoolia) : 2-merkaptobentsimidatsolia, lisättiin 8,3 g (60 mmoolia)
K2C<^2' lisättiin pisaroittain liuos, jossa oli 6,7 g (31 m-moolia) oC -bromi-4-tolyylihappoa 15 ml:ssa kuivaa DMF:a, huoneenlämpötilassa- 4 tunnin kuluttua imettiin kiinteä 35 jäännös pois, poistettiin DMF tyhjössä, ja jäännöksen pH
87203 45 säädettiin 2:ksi suolahapon vesiliuoksella. Otsikon mukaisen yhdisteen kiteitä erottui, ne pestiin vedellä, metano-lilla ja eetterillä sekä kuivattiin. Saanto: 7,1 g (34 %) . Sp. 263-5°C. IR 1710 cm"1.
5 1H-NMR (dg-DMSO): S = 4,90 miljoonasosaa (s, 2H, -CH^), 7,27-7,93 miljoonasosaa (m, 4H, aryyli-H).
Esimerkkien 58-60 mukaiset yhdisteet valmistettiin esimerkissä 57 kuvatulla tavalla.
Esimerkki^ 58 10 3-hydroksi-5-(4-karboksibentsyylitio)-1-metyyli- 1.2.4- triatsoli
Sp 298°C. TR 1710 cm"1.
1H-NMR (dg-DMSO) : £> = 3,43 miljoonasosaa (s, 3H, -CH-j) , 4,37 miljoonasosaa (s, 2H, bentsyyli-H), 7,33-7,93 miljoo-15 nasosaa (m, 4H, aryyli-H).
Esimerkki 59 2- (4-karboksibentsyylitio)-bentsotiatsoli Sp 190-2°C. XR 1680-1710 cm"1.
1H-NMR (dg-DMSO): % - 4,70 miljoonasosaa (s, 2H, -C^) , 20 7,23-7,86 miljoonasosaa/m, 4H, aryyli-H).
Es imerkki 60 3- hydroksi-5-(4-karboksibentsyylitio)-1-fenyyli- 1.2.4- triatsoli
Sp 138-140°C. IR 1700 cm"1 . . 25 1H-NMR (dg-DMSO): £ = 4,45 miljoonasosaa (s, 2H, -C^S) , 7,4-7,93 miljoonasosaa (m, 5H, aryyli-H).
Esimerkki 61 4- (3-karboksi-l-metyyli-l,2,4-triatsol-5-yyli)-tio-voihappo 3Q Vaihe 1 4-(3-metoksikarbonyyli-l-metyyli-l,2,4-triatsol-5-yyli-tiovoihappometyyliesteri 1,9 g l-metyyli-5-merkapto-l,2,4-triatsol-3-yyli-karboksyylihappoetyyliesteriä liuotetaan 30 ml:aan aseto-35 nia, sekoitetaan 1,8 g:n kanssa 4-kloorivoihappometyyli- 46 87203 esteriä ja palautusjäähdytetään 2,8 g:n läsnäollessa jauhettua K2C03:a (potaska) 2 tunnin ajan. Suodattamisen, liuottimen poistamisen jälkeen kromatografoidaan etikka-happoesterillä piihappogeelin kautta (R^: noin 0,6),tuo-5 tejae väkevöidään. Saanto: 1,5 g öljymäistä tuotetta.
1H-NMR (CDC13): £ = (miljoonasosaa 1,3 (t, OCH2CH3, 3H), = 2,2, 2,4 ja 3,4 (je m, S-CH2CH2CH2-COO, 6H), = 3,5 ja 3,8 (je s, N-CH3 ja COOCH3, 6H), = 4,3 (q, 0-CH2CH3, 2H). Vaihe 2 1Q Otsikon mukainen yhdiste 1,5 g ainetta vaiheesta 1 liuotetaan 5 mlrssa meta-nolia, sekoitetaan 2,8 ml:n kanssa 2 N NaOH:a ja kuumennetaan 1 tunnin ajan höyryhauteella. Liuos kirkastettiin aktiivihiilen avulla, jäähdytetään ja pH säädetään noin 4: 15 ksi 2 N HCl:lla. Tuotteen suodatus ja kuivaus antavat 0,8g ainetta, jonka sp on 118-20°C.
^HpNMR (dg-DMSO): ^ (miljoonasosaa) = 1,9 (q, -CK2CH2CH2-, 2H), = 2,4 ja 3,2 (je t, -CH2CH2CH2-, 4H), = 3,8 (s, N-CH3, 3H) .
2Q Seuraavien esimerkkien 62-63 mukaiset yhdisteet val mistettiin yhdenmukaisesti esimerkin 61 kanssa.
Esimerkki 62 2-(3-karboksipropyylitio)-nikotiinihappo 3,4 g:sta 2-merkapto-nikotiinihappometyyliesteriä ja 25 3,6 g:sta 4-kloorivoihappometyyliesteriä saadaan alkalisen saippuoinnin jälkeen 3,3 g otsikon mukaista yhdistettä, jonka sulamispiste on 188°C.
Alkuaineanalyysi: (C^qH^NO^S; 241,3)
Laskettu: C 49,8, H 4,6, N 5,8, S 13,3 % ·. 30 Löydetty: C 49,6, H 4,5, N 5,8, S 13,4 % 1H-NMR (dg-DMSO): % (miljoonasosaa) = 1,9 (q, -CH2CH2CH2-, 2H) , = 2,3 ja 3,2 (je t, -CH2CH2CH2“, 4H) , = 7,1; 8,1 ja 8,5 (m, pyridiini-H, 3H).
Esimerkki 63 ;; 35 6-(3-karboksipropyylitio)-nikotiinihappo 0,76 g 6-merkapto-nikotiinihappometyyliesteriä ja 47 87203 0,98 g 4-bromivoihappoetyyliesterxä antoivat alkalisen saippuoinnin jälkeen 1,0 g otsikon mukaista yhdistettä, jonka sp oli 185°C.
1H - NMR (dg - DMSO): 5 « (ppm) = 2,0 (q, -CH2CH2CH2-, 2H) - 2,3 ja 3,2 (je t, -CH2CH2CH2-, 4H) = 7,3; 8,0 ja *8*7 (m.pyridiini-· H, 3H)
Esimerkki 64 5-(4-klooribentsyylitio)-1,3-tiatsol-4-yyli-karboksyylihappo 13 g otsikon mukaista metyyliesteriä liuotetaan 30Q ml:aan metanolia. Tähän lisätään 2 g NaOK:a, joka on liuotettu 1Q ml:aan vettä ja kuumennetaan 30 minuutin ajan ^5 höyryhauteella. Jäähdytettäessä kiteytyy hapon Na-suola. Liuotin poistetaan tyhjössä, otetaan veteen ja tehdään happameksi 2 N HCl:lla. Suodattamisen ja kuivauksen jälkeen saadaan 11 a tuotetta, jonka sp on 176-78°C. Alkuaineanalyysi (C11HgN02S2C 1 xO, 7 H20; 298,3) 2Q Laskettu: c 44,3% H 3,1% N 4,7% H20 4,2% Löydetty: 44,6% 3,0% 4,7% 4,4% 1H - NMR (dg - DMSO): « (ppm) = 4,3 (s, CH2, 2H) = 7,3 (s, aromat. H, 4H) 25 = 8,9 (s.tiatsoli -2-H, 1H) : Esimerkki ¢5 5-(2-karbometoksi-etyylitio)-1,3-tiatsol-4-yyli-karboksyylihappo 30 7,8 g 5-(2-karbometoksi-etyylitio)-1,3-tiatsol-4- yyli-karboksyylihappo-tert-butyyliesteriä sekoitetaan 30 minuutin ajan huoneenlämpötilassa, sekoitettuna 100 ml:aan trifluorietikkahappoa, 100 ml:n kanssa metyleenikloridia. Liuotin poistetaan tyhjössä, ja jäännös sekoitetaan 100 ml:n 35 kanssa eetteri/ligroiini-seosta (50-70°C) 1/1. Suodatuksen 4β 87203 ja kuivauksen jälkeen saadaan 6,2 g ainetta, jonka sulamispiste on 112-6°C, etikkaesteristä suoritetun uudelleen-kiteyttämisen jälkeen sp on 21Q-1°C.
.Alkuaineanal. : (CgHgNO^S,,; 247,3)
Lask.:C 38,9 % H 3,7 % N 5,7 % S 25,9 % Löyd.: C 38,9·% H 3,8 % N 5,4 % s 25,8 % 1H - NMR (d6 - DMSO): 6 (ppm) = 2,7 ja 3,2 (je 6, -S-CH2CH2-C00, 4H) 10 = 3,6 (s, C00CH3, 3H) = 8,8 ( S , tiatsoli * 2 - H, 1 H )
Esimerkki 66 2-(3-karboksi-propyylitio)-4-metyyli-l,3-tiatsol-15 5-yyli-etikkahappometyyliesteri vaihe 1 2-(3-(4-metoksibentsyylioksikarbonyyli)-propyyli-tio)-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli-etikkahappometyy-liesteri 2Q 10,2 g 2-merkapto-4-metyyli-l,3-tiatsol-5-yyli- etikkahappometyyliesteriä liuotetaan 200 mltssa asetonia ja sekoitetaan tehokkaasti 4 tunnin ajan ottaen tarkasti huomioon ympäristön lämpötilan, 12,1 g:n kanssa 4-kloori-voihappo-4-metoksibentsyyliesteriä, jauhetun, kuivan ka-25 liumkarbonaatin (potaska) (13,0 g) läsnäollessa. Suodatuksen jälkeen asetoni poistetaan tyhjössä ja jäännös puhdistetaan pylväskromatografiän avulla (Si02, etikkaesteri-sykloheksaani 1:1). Saanto: 21 g öljymäistä yhdistettä.
ΊΗ - NMR (CDC13): 30 6 (ppm) = 2,0 (m, -S CH2CH2CH2 C00-, 2H) = 2,2 (s, 4-CH3- tiatsoli- 3H) = 2,3 ja 3,2 (je t, -S CH2CH2CH2 C00-, 4H) = 3,6 (s, £H2C00CH3, 2H) = 3,65 ja 3,7 (je s, aromat. OCH3 ja COOCH3, je 3H) 35 = 4,9 (s, CH2-Arom., 2H) = 6,8 ia 7,2 (je d, aromat. H, 4H) 49 87203
Vaihe 2
Otsikon mukainen yhdiste 5,3 g vaiheen 1 mukaista yhdistettä liuotetaan 20 ml:n kanssa trifluorietikkahappoa ja 30 minuutin mittaisen 5 sekoittamisen jälkeen väkevöidään tyhjössä. Jäännös 2 x uudelleenkiteytetään etikkahappo/sykloheksaanista (2:1). Saadaan 1,6 g tuotetta, jonka sp on 104-5°C.
Alkuaineanalyysi: ^11^15^^4^2 ’ 289,3) 10 Lask.: C 45,6 % H’5,2 % N 4,8 % S 22,2 % Löyd.: C 45,3 % H 5,5 % N 4,7 % S 22,0 % 'h - NMR {CDC13) « (ppm) = 2,0 (m, -SCH2CH2CH2COO-, 2H) 15 = 2,3 (s, 4-CH3-tiatsoli, 3 h ) * 2,4 ja 3,2 (je t, -SCH2CH2£H2C00-, 4H) = 3,6 (s, C00CH3, 3H) = 10,8 (s, C 0 0JH, 1H, vaihdettavissa Ö20:n kanssa).

Claims (2)

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten sul-fidien valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava II 5 Het'-S-R2 (II) jossa Het' on 1,3-tiatsoli, joka sisältää yhden tai kaksi substituenttia joukosta metyyli, karboksi-C1_2~alJcYYlif 10 karboksi ja C2_g-asyyliamino, jolloin asyyli on alifaat- tisen dikarboksyylihapon radikaali, ja jolloin Het*-ryhmä kantaa vähintään yhden suoralla sidoksella liittyneen kar- boksyyliryhmän tai yhden edellä mainituista karboksyyli- ryhmän sisältävistä substituenteista ja 2 15. on C^g-alkyyli, karboksi11a tai C1_^-alkoksikarbonyy- lillä substituoitu g-alkyyli, hydroksi-iminolla tai me-toksi-iminolla ja karboksilla substituoitu etyyli, kar-boksilla tai halogeenilla substituoidulla fenyylillä substituoitu metyyli tai karboksilla substituoitu g-syk-20 loalkyyli, ja jolloin em. karboksyyliryhmät voivat olla fysiologisesti hyväksyttävän suolan muodossa, tunnettu siitä, että (a) seuraavan kaavan III mukainen yhdiste . 25 Het'-SH (III) jossa kaavassa Het':llä on edellä esitetty merkitys, saatetaan reagoimaan kaavan IV mukaisen alkylointiaineen ' 30 kanssa R2-X (IV) 2 jossa kaavassa R:lla on yllä annettu merkitys ja X mer-35 kitsee helposti vaihdettavissa olevaa ryhmää, tai si 87203 (b) seuraavan kaavan V mukainen yhdiste Het'-X (V) 5 jossa kaavassa Het':llä ja X:llä on edellä esitetty merkitys, saatetaan reagoimaan kaavan VI mukaisen yhdisteen kanssa R1-SH (VI) 10 2 jossa kaavassa R :llä on edellä esitetty merkitys, ja (a)- tai (b)-kohdan mukaisesti saaduissa, kaavan II mu- 2 kaisissa yhdisteissä jokin Het':n tai R :n substituen- teista muutetaan sinänsä tunnetulla tavalla Het':n tai 2 15 R :n joksikin toiseksi substituentiksi. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä kaavan II mukaisen sulfidin tai sen fysiologisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että Het' on N-iTCH3 20 _JJ^ ^JLcH2COOH ja R on HOOC-(CH0) -, jossa n on kokonaisluku 1-5. M II 52 87203
1. Förfarande för framställning av terapeutiskt användbara sulfiderr med den allmänna formeln il 5 Het'-S-R1 (il) i vilken Het' Mr en 1,3-tiazol som innehäller en eller tvä substituenter ur gruppen metyl, karboxi-C^ 2-alkYl» 10 karboxl ooh C2_g-acylamlno, varvid acylgruppen är en ra-dlkal av en alifatisk dikarboxylsyra, och varvid Het'-gruppen bär ätmistone en via direkt bindning bunden kar-boxylgrupp eller en av de ovan nämnda substituenterna som innehäller en karboxylgrupp, och 15 R2 är en C^^-alkyl, en C^_g-alkyl som substituerats med karboxi eller C^^-alkoxikarbonyl, etyl som substituerats med hydroxiimino eller metoxiimino och karboxi, metyl som substituerats med en med karboxi eller halogen substitue-rad fenyl eller en C^g-cykloalkyl som substituerats med 20 karboxi, och varvid de ovannämnda karboxylgrupperna kan föreligga i form av ett fysiologiskt godtagbart sait, känne-t e c k n a t därav, att (a) en förening med följande formel III 25 Het'-SH (III) 1 vilken Het' har ovan angivna betydelse, bringas att reagera med ett alkyleringsmedel med formel IV 30 R1-X (IV) i vilken R har ovan angivna betydelse och X anger en lätt utbytbar grupp, eller 53 87203 (b) en förening med följande formel V Het'-X (V) 5. vilken Het' och X har ovan angivna betydelse, bringas att reagera med en förening med formeln VI r2-SH (VI) 2 10. vilken R har ovan angivna betydelse, och nägon av 2 substituenterna i Het' och R i de enligt punkt (a) eller punkt (b) erhällna föreningarna med formeln II överförs pä i och för sig känt sätt tili en annan av substituen- 2 terna i Het' eller R . 15
2. Förfarande enligt patentkravet 1 för framställ- ning av en sulfid med formeln II eller ett fysiologiskt godtagbart sait av denna, kännetecknat dä-rav, att Het' är N-iTCH3 20 11 'Lch^COOH och R2 är HOOC-(CH^) i vilken n är ett helt tai 1-5. Λλ Π
FI860981A 1985-03-12 1986-03-10 Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara sulfider FI87203C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3508665 1985-03-12
DE19853508665 DE3508665A1 (de) 1985-03-12 1985-03-12 Heterocyclische sulfide und ihre anwendung als immunmodulatoren

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI860981A0 FI860981A0 (fi) 1986-03-10
FI860981L FI860981L (fi) 1986-09-13
FI87203B true FI87203B (fi) 1992-08-31
FI87203C FI87203C (fi) 1992-12-10

Family

ID=6264870

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI860981A FI87203C (fi) 1985-03-12 1986-03-10 Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara sulfider

Country Status (21)

Country Link
US (1) US4762848A (fi)
EP (1) EP0194572B1 (fi)
JP (2) JPS61212590A (fi)
KR (1) KR940002255B1 (fi)
AR (1) AR247738A1 (fi)
AT (1) ATE70973T1 (fi)
AU (1) AU584993B2 (fi)
CA (1) CA1268769A (fi)
DE (2) DE3508665A1 (fi)
DK (1) DK165110C (fi)
ES (1) ES8801505A1 (fi)
FI (1) FI87203C (fi)
GR (1) GR860648B (fi)
HU (1) HU199441B (fi)
IE (1) IE58875B1 (fi)
IL (1) IL78090A (fi)
NO (1) NO167386C (fi)
NZ (1) NZ215425A (fi)
PH (1) PH24659A (fi)
PT (1) PT82167B (fi)
ZA (1) ZA861779B (fi)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5047540A (en) * 1987-12-17 1991-09-10 Shionogi & Co., Ltd. Lipid derivatives
DE3816603A1 (de) * 1988-05-16 1989-11-30 Behringwerke Ag Verwendung des thiazol-derivates tiprotimod zur herstellung eines mittels zur therapie von virusinfektionen
DE3915094A1 (de) 1989-05-09 1991-01-10 Hoechst Ag Verfahren zur herstellung von 2-mercapto-4-methyl-1,3-thiazol-5-yl-essigsaeure und deren ester
TW252112B (fi) * 1993-08-19 1995-07-21 Pfizer
JP2001517666A (ja) * 1997-09-23 2001-10-09 藤沢薬品工業株式会社 チアゾール誘導体
EP1392639B1 (en) * 2001-05-03 2008-09-17 Galileo Laboratories, Inc. Pyruvate derivatives
TWI359810B (en) * 2004-11-04 2012-03-11 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Carboxylic acid derivative containing thiazole rin
MX2011004505A (es) 2008-10-29 2011-05-31 Merck Sharp & Dohme Derivados novedosos de bencimidazol ciclico, utiles como agentes antidiabeticos.
CA2741672A1 (en) 2008-10-31 2010-05-06 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel cyclic benzimidazole derivatives useful anti-diabetic agents
US20230312496A1 (en) * 2020-08-26 2023-10-05 The Lubrizol Corporation 2,5-Dimercapto-1,3,4-Thiadiazole (DMTD) Metal Salt Derivatives

Family Cites Families (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR837278A (fr) * 1937-10-02 1939-02-07 Materiel Telephonique Dispositifs de sondage utilisant des ondes électro-magnétiques
US2776976A (en) * 1952-10-21 1957-01-08 Monsanto Chemicals Halogen substituted unsaturated thiazolylthioethers
US2886487A (en) * 1955-08-22 1959-05-12 Ortho Pharma Corp Quaternary ammonium salt and n-thiotrichloromethyl hydantoin vaginal composition
BE591151A (fr) * 1959-05-28 1960-11-23 Hoffmann La Roche Procédé pour la préparation de mono- et dihydrazino-triazines.
AT238200B (de) * 1962-03-27 1965-01-25 Degussa Verfahren zur Herstellung von neuen Pyridinderivaten
SE345453B (fi) * 1965-10-21 1972-05-29 Ciba Geigy Ag
US4139635A (en) * 1967-02-21 1979-02-13 L'oreal Cysteamine derivatives for oral treatment of seborrhea
US3950542A (en) * 1967-02-21 1976-04-13 L'oreal Cysteamine derivatives for oral treatment of seborrhea
LU53029A1 (fi) * 1967-02-21 1968-08-27
US4035492A (en) * 1967-02-21 1977-07-12 L'oreal Oral treatment of seborrhea with cysteamine derivatives
FR6283M (fi) * 1967-03-07 1968-09-02
US3671643A (en) * 1969-09-15 1972-06-20 Oreal Treatment of excessive sebaceous glands secretion with substituted cysteamine compounds
DE2129012A1 (de) * 1971-06-11 1973-01-04 Merck Patent Gmbh Azol-derivate
DE2165554A1 (de) * 1971-12-30 1973-07-05 Bayer Ag Verfahren zur herstellung von 1,2,4triazin-5-on-derivaten
US3907822A (en) * 1973-06-11 1975-09-23 Squibb & Sons Inc Anti-inflammatory (2-benzimidazoylthio)alkylamidoximes
DE2359922A1 (de) * 1973-12-01 1975-06-05 Hoechst Ag (1-alkyl-5-nitro-imidazolyl-2-alkyl)- heteroaryl-verbindungen und verfahren zu ihrer herstellung
GB1462521A (en) * 1974-02-11 1977-01-26 Wyeth John & Brother Ltd Triazole derivatives
US4107438A (en) * 1974-09-30 1978-08-15 Victor Lafon Cyclic phenylsulphinyl-amidine derivatives
FR2285867A1 (fr) * 1974-09-30 1976-04-23 Lafon Labor Derives du diphenylsulfoxyde
US4022607A (en) * 1975-06-09 1977-05-10 Sandoz, Inc. Substituted oxazoles and thiazoles as herbicides
DE2533605A1 (de) * 1975-07-26 1977-02-03 Bayer Ag Antiparasitenmittel
JPS5218831A (en) * 1975-07-31 1977-02-12 Wellcome Found Pharmaceutical composition containing antiiimflammation substance and imidazole or benzimidazole
US4002624A (en) * 1976-01-26 1977-01-11 The Dow Chemical Company Substituted-3-thio-1,2,4-triazines
US4202901A (en) * 1976-03-04 1980-05-13 Ciba-Geigy Corporation 2-Pyridinecarbonitrile compounds
US4018923A (en) * 1976-03-10 1977-04-19 Eli Lilly And Company 5,6-Diaryl-1,2,4-triazines as topically-active anti-inflammatory agents
FR2368278A1 (fr) * 1976-10-25 1978-05-19 Fabre Sa Pierre Nouveaux medicaments antalgiques contenant des triazines 1-2-4
US4182769A (en) * 1977-02-09 1980-01-08 E. I. Du Pont De Nemours And Company Anti-inflammatory 1-substituted-4,5-diaryl-2-(substituted-thio) imidazoles and their corresponding sulfoxides and sulfones
US4197307A (en) * 1977-04-12 1980-04-08 Ciba-Geigy Corporation 2-Alkylthio-, 2-alkylsulphinyl- and 2-alkylsulfonyl-6-phenylbenzimidazoles as anthelmintic agents
AT367296B (de) * 1977-04-12 1982-06-25 Ciba Geigy Ag Verfahren zur kurativen und prophylaktischen bekaempfung von parasitaeren helminthen
US4157392A (en) * 1977-05-17 1979-06-05 Diamond Shamrock Corporation Pharmacologically active substituted 1,2,4-triazines
GB1604085A (en) * 1977-05-17 1981-12-02 Diamond Shamrock Corp Pharmaceutical preparations containing 1,2,4-triazine derivatives
US4251527A (en) * 1977-05-17 1981-02-17 Diamond Shamrock Corporation Pharmacologically active substituted 1,2,4-triazines
US4396625A (en) * 1980-05-13 1983-08-02 Sumitomo Chemical Company, Limited Treatment of glaucoma or ocular hypertension and ophthalmic composition
US4379159A (en) * 1980-10-16 1983-04-05 E. I. Du Pont De Nemours & Company Antiinflammatory 2-substituted-thio-4,5-dihydro-4,5-diaryl-1H-imidazoles
US4451471A (en) * 1981-03-18 1984-05-29 Ciba-Geigy Corporation Certain 2,4,5-tri-substituted thiazoles, pharmaceutical compositions containing same and methods of using same
DE3118126A1 (de) * 1981-05-07 1982-12-02 Bayer Ag, 5090 Leverkusen Sulfenamide zur verwendung in arzneimitteln
DE3216416A1 (de) * 1982-05-03 1983-11-03 Bayer Ag, 5090 Leverkusen Heteroarylthiovinyl-verbindungen, ein verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als schaedlingsbekaempfungsmittel
DE3336846A1 (de) * 1983-10-11 1985-04-25 Bayer Ag, 5090 Leverkusen Neue 2-mercaptothiazolderivate, verfahren zu deren herstellung sowie die verwendung von 2-mercaptothiazolderivaten in arzneimitteln
ZA854550B (en) * 1984-06-18 1986-04-30 Smithkline Beckman Corp Leukotriene antagonists

Also Published As

Publication number Publication date
PH24659A (en) 1990-09-07
GR860648B (en) 1986-07-11
AU584993B2 (en) 1989-06-08
DK108686D0 (da) 1986-03-10
NO860907L (no) 1986-09-15
NO167386B (no) 1991-07-22
ZA861779B (en) 1986-10-29
FI860981L (fi) 1986-09-13
FI860981A0 (fi) 1986-03-10
IE58875B1 (en) 1993-12-01
ES8801505A1 (es) 1988-01-16
US4762848A (en) 1988-08-09
PT82167B (pt) 1988-07-29
IL78090A (en) 1991-08-16
HUT44524A (en) 1988-03-28
AR247738A1 (es) 1995-03-31
KR860007235A (ko) 1986-10-10
NZ215425A (en) 1990-01-29
HU199441B (en) 1990-02-28
IL78090A0 (en) 1986-07-31
EP0194572A1 (de) 1986-09-17
DK165110B (da) 1992-10-12
IE860631L (en) 1986-09-12
EP0194572B1 (de) 1992-01-02
NO167386C (no) 1991-10-30
DK108686A (da) 1986-09-13
DK165110C (da) 1993-03-01
FI87203C (fi) 1992-12-10
CA1268769A (en) 1990-05-08
ATE70973T1 (de) 1992-01-15
DE3508665A1 (de) 1986-09-18
JPS6452719A (en) 1989-02-28
JPS61212590A (ja) 1986-09-20
KR940002255B1 (ko) 1994-03-19
DE3683172D1 (de) 1992-02-13
AU5460686A (en) 1986-10-16
JPH0380792B2 (fi) 1991-12-26
PT82167A (de) 1986-04-01
ES552841A0 (es) 1988-01-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI87203B (fi) Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara sulfider.
JP4343690B2 (ja) プロテアーゼ阻害薬としてのシアノアルキルアミノ誘導体
US6803380B1 (en) 5-aryl-1h-1,2,4-triazole compounds as inhibitors of cyclooxygenase-2 and pharmaceutical compositions containing them
US20090170835A1 (en) Isoindoline derivatives
RU98117628A (ru) Замещенные производные тиазолидиндиона, способ их получения, фармкомпозиция
JPH0219828B2 (fi)
JP3539926B2 (ja) 抗ウイルス性ピリミジンジオン誘導体及びそれらの製造方法
CA2427750A1 (en) Substituted alkanoic acids
US6765003B1 (en) 3-Arylsulfonyl-2 (substituted methyl) propanoic acid derivatives as matrix metalloproteinase inhibitors
JP5378499B2 (ja) 微小管形成阻害剤として有用なベンゾフェノンチアゾール誘導体及びその製造方法
RU2007132179A (ru) Ингибирующие вич производные 2-(4-цианофениламино)пиримидина
NL7909334A (nl) Werkwijze voor het bereiden van een bloeddruk ver- lagend middel op basis van disulfideverbindingen, het aldus bereide geneesmiddel en een werkwijze voor de bereiding van de actieve component.
AU594943B2 (en) Heterocyclic disulfides and their use as immunodulators
JP2001509790A (ja) 金属タンパク質分解酵素阻害剤
US4324892A (en) 7-(N-Substituted-2-phenylglycinamido)-3-substituted-3-cephem-4-carboxylic acid compounds
AU776803B2 (en) Benzimidazole compounds and medicaments comprising the same
HUP0001417A2 (hu) Gyógyászatilag alkalmazható új sók, eljárás előállításukra és azokat tartalmazó gyógyászati készítmények
JP2021508332A (ja) がんの処置における使用のためのビグアニド誘導体及びそれらの転位生成物
AU2003291839B2 (en) Nicotinamide-based kinase inhibitors
CA1292990C (en) Heterocyclic disulfides and their use as immunomodulators
JPH10338680A (ja) チアゾール誘導体、その製造法および用途
KR810000600B1 (ko) 헤테로 사이클 유도체의 제법

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed
MM Patent lapsed

Owner name: HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT