FI83645C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaenbara racemiska eller optiskt aktiva 7-oxo- prostacyklin-derivat. - Google Patents

Description

1 83645

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten raseemisten tai optisesti aktiivisten 7-okso-prostasykliinijohdannaisten valmistamiseksi 5 Jakamalla erotettu patenttihakemuksesta 85 0123

Keksintö koskee menetelmää terapeuttisesti käyttökelpoisten raseemisten tai optisesti aktiivisten 7-okso-prostasykliinijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on 10 kaava I

---Ί1 (I) C'Vn

OH

jossa 20 R1 merkitsee vetyä tai farmakologisesti hyväksyttävää kati onia, A merkitsee trans-vinyleeniä tai -C=C-:a ja n voi merkitä kahta tai kolmea.

Jos R1 merkitsee farmakologisesti hyväksyttävää ka-.25 tionia, se voi edustaa kaikkia orgaanisia ja epäorgaanisia kationeja, joilla ei ole mitään haitallista (toksista) vaikutusta käytetyllä annosalueella; sellaiset epäorgaaniset kationit voivat olla esim. alkalimetalleja, kuten esimerkiksi natrium ja kalium, tai maa-alkalimetalleja, kuten 30 esimerkiksi kalsium- ja magnesiumionit. Substituoimattomat ammoniumionit tai ammoniumionit, jotka ovat orgaanisten, edullisesti alkyyliryhmien substituoimia, soveltuvat myös. Substituoiduissa ammoniumioneissa voi olla lisäsubstitu-entteja, kuten esimerkiksi hydroksyyli- tai aminoryhmiä, 35 jotka vaikuttavat suotuisasti suolojen liukoisuus- ja ki- teytymisominaisuuksiin. Eräs sellainen edullinen kationi 2 83645 on tris-(hydroksimetyyli)-anunoniumioni. Suoraketjuinen ja haaroittunut C^-alkyyli, kuten myöhemmin tässä yhteydessä mainitaan, merkitsee metyyliä, etyyliä, propyyliä tai iso-propyyliä, edullisesti metyyliä. C^-alkanoyyli Rz:n määri-5 telmässä voi merkitä osia, jotka ovat peräisin C1_4-alkaani- karboksyylihaposta, kuten esimerkiksi formyyliä, propion-yyliä tai butyryyliä, edullisesti asetyyliä.

Kaavan I mukainen yhdiste voidaan valmistaa siten, että

10 a) hapetetaan yhdiste, jolla on kaava IV

OR3 0 COOR1' if ^ «zo “yV'"2'" OR2 20 jossa R1' merkitsee vetyä, suoraketjuista tai haarautunutta C1.4-alkyyliä tai farmakologisesti hyväksyttävää kationia, R2 merkitsee vetyä tai C1.4-alkanoyyliä, R3 merkitsee vetyä tai suoraketjuista tai haarautunutta C1.4-alkyyliä ja .25 A ja n merkitsevät samaa kuin kaavan I yhteydessä,

ja kuumennetaan täten saatua yhdistettä, jolla on kaava II

30 0R3 1' V*( A ‘ ..·· 35 2'' >A-f RO >

OR

li 3 83645 jossa R1', R2, R3, A ja n merkitsevät samaa kuin kaavan IV yhteydessä, tai

b) hapetetaan yhdiste, jolla on kaava III

5 ^ /N. 1'

COOR

<Y y~ 10 r-v ,CH2’n r2o* a 'Y --- OR2 15 jossa R1', R2, A ja n merkitsevät samaa kuin kaavan IV yh teydessä, ja poistetaan alkanoyyliryhmä R2 ja/tai alkyyliryhmä R1? ja mahdollisesti muutetaan saatu yhdiste suolakseen.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ovat stabiileja ja se-20 lektiivisiä, biologisesti aktiivisia prostasykliinijohdan naisia.

Prostasykliini (PGI2), arakidonihapon metaboliitti, joka on nisäkäsorganismeissa laajalle levinnyt, löydettiin vuonna 1976. Aineella on erilaisia farmaseuttisesti arvok-.25 kaita biologisia aktiivisuuksia.

Se inhiboi verihiutaleiden aggregaatiota, sillä on fibrinolyyttistä aktiivisuutta, se laajentaa hengitystie-hyettä ja verisuonia, sekä vähentää mahahapon erittymistä. Sillä on myös ns. soluja suojaavaa (cytoprotective) aktii-30 visuutta erilaisissa elimissä, kuten esimerkiksi mahalau kussa, maksassa, sydämessä ja munuaisissa; se poistaa mainituissa elimissä esiintyvien vahingoittavien vaikutusten tuhoisat seuraukset tai se parantaa nämä elimet.

On olemassa kaksi ongelmaa PGI2:n laajan käytön suh-35 teen. Toinen on kemiallinen ja biologinen epästabiilisuus, ts. erittäin lyhyt biologinen puoliintumisaika; täten sen 4 83645 antaminen voidaan suorittaa vain erityismenetelmin, esim. sitä voidaan antaa infuusion avulla. Toinen ongelma on useiden sivuvaikutusten esiintyminen, jotka voidaan mahdollisesti havaita lähinnä toivottua vaikutusta, mikä joh-5 tuu aktiivisuuden moninaisesta biologisesta kirjosta.

7-okso-PGI2-johdannaisten, jotka ovat kestävämpiä kuin luonnossa esiintyvä PGI2, valmistus on ensiksi esitetty US-patenttijulkaisussa 4 330 553. Esitettyjen yhdisteiden kemiallinen stabiliteetti on parempi - ja niiden ak-10 tiivisuuden kirjo on oleellisesti sama kuin PGI2:n aktiivi suuden kirjo [J. Med. Chem. 25, s. 105 (1982)].

Samanlaisten 7-okso-PGI2-johdannaisten valmistusta kuvataan BE-patenttijulkaisussa 890 390. Edellä mainittujen 7-okso-PGI2-analogien yhteinen ominaisuus on se, että 15 PGI2:n biologisen aktiivisuuden tavoin niiden biologinen aktiivisuus ei ole selektiivistä.

Keksinnön mukaisesti valmistetuilla uusilla 7-okso-PGI2-johdannaisilla on sama aktiivisuuskirjo kuin PGI2:lla, mutta yllättäen on löydetty uusi yhdiste, joka toimii bio-20 logisesti selektiivisemmin kuin tutkimuksen alkuajoilta tunnetut 7-okso-PGI2-johdannaiset, vaikka niiden säilyvyys on lähes sama.

Kaavan I mukaiset yhdisteet valmistetaan edellä esitetyllä tavalla. Edellä esitettyjen menetelmien suori-.'25 tusmuotojen yksityiskohdat ovat seuraavat: a) Kaavan IV mukainen yhdiste hapetetaan vettä sisältävässä orgaanisessa liuottimessa, edullisesti dioksaa-nissa tai dimetoksietaanissa käyttämällä 1,1 - 10 ekvivalenttia, edullisesti 1,3 - 1,5 ekvivalenttia seleenidiok-30 sidia lämpötilassa 20 - 200 °C, edullisesti 50 - 100 °C:ssa. Näin saatu kaavan II mukainen yhdiste kuumennetaan sitten happokatalysaattorin läsnäollessa orgaanisissa liuottimissa, edullisesti bentseenissä tai tolueenissa, tai halogenoiduissa liuottimissa, kuten esimerkiksi kloo-35 ratuissa hiilivedyissä, edullisesti kloroformissa, tai di-* · polaarisissa aproottisissa liuottimissa, kuten esimerkiksi 5 83645 dimetyylisulfoksidissa, tai ilman mitään liuotinta, jolloin saadaan kaavan I mukainen yhdiste. Happokatalysaattorina p-tolueenisulfonihappo tai rikkihappo ovat edullisia. Kaavan II mukaisia yhdisteitä voidaan kuumentaa 50 - 200 5 °C:ssa, edullisesti 60 - 90 °C:ssa erottamalla vettä tai ilman veden erottamista. Edullinen tapa on suorittaa kuumennus p-tolueenisulfonihapon läsnäollessa bentseenissä tai tolueenissa 60 °C:ssa käyttämällä samalla vedenerotin-ta.

10 Kaavan IV mukaiset yhdisteet tunnetaan kirjallisuu desta tai niitä voidaan valmistaa analogisin menetelmin (kts. esim. HU-patenttihakemus CI-1901).

b) Keksinnön mukaisen toisen edullisen menetelmän mukaisesti kaavan III mukainen yhdiste voidaan hapettaa kaa-15 van I mukaiseksi yhdisteeksi 20 - 200 °C:n lämpötilassa 1,1 - 10 ekvivalentin kanssa seleenioksidia vedettömässä orgaanisessa liuottimessa, kuten esimerkiksi eetterityyp-pisessä liuottimessa, edullisesti dioksaanissa tai dime-toksietaanissa. Reaktio suoritetaan edullisesti dioksaa-20 nissa 1,3 - 1,5 ekvivalentin kanssa seleenidioksidia 80 - 90 °C:ssa.

Kaavan III mukaiset yhdisteet ovat tunnettuja tekniikan tasosta tai niitä voidaan valmistaa yhdenmukaisin menetelmin (R. F. Newton et ai.; Synthesis 1984, s. 449).

• 25 Kaavojen III ja IV mukaisten lähtömateriaalien ase missa 11 ja 15 sijaitsevat hydroksyyliryhmät voidaan suojata erilaisten suojaavien asyyliryhmien, trialkyylisilyy-liryhmien, alkoksialkyyliryhmien ja tetrahydropyranyylin avulla. Suojaryhmien liittäminen voidaan suorittaa sinänsä 30 tunnetuin menetelmin, ja tämä saattaa olla tärkeää paremman saannon saavuttamiseksi. Edellä mainitut suojaryhmät voidaan poistaa - jos niin halutaan - kaavan I mukaisista yhdisteistä sinänsä tunnetuin menetelmin. Alkoksialkyyli-ryhmät tai tetrahydropyranyyliryhmät voidaan poistaa ka-35 liumfluoridilla tai myös hapon läsnäollessa. Asyyliryhmät hydrolysoidaan emäksisessä väliaineessa.

6 83645

Kaavan I mukaisten yhdisteiden suolanmuodostuksessa hapot voidaan vapauttaa suolojen vesiliuoksista varovaisen happameksi tekemisen avulla, ja mainitut karboksyylihapot voidaan liuottaa orgaanisiin liuottimiin ja muuttaa edel-5 leen suoloiksi, esim. trimetoniumsuolaksi vastaavien hap pojen reagoidessa alifaattisten ja aromaattisten amiinien kanssa.

Eräs kaavan I mukaisten yhdisteiden tyypillinen edustaja on 7-okso-16,17,18,19,20-pentanor-15-syklopentyy-10 li-PGI2.

Näiden yhdisteiden selektiivistä biologista aktiivisuutta voidaan tutkia tutkimalla aggregaation estoa sekä hypotensiivistä aktiivisuutta samanaikaisesti. Aggregaation eston aktiivisuus mitattiin in vitro Born'in mukaan 15 [Nature, 214, (1962), s. 927] ihmisen plasmalla, joka oli rikastettu trombosyyteillä ja jossa aggregaatio oli aikaansaatu 2 pm:llä ADP:a, kun taas hemodynaaminen aktiivisuus saatiin verenpainetta vähentävästä aktiivisuudesta, joka oli yhdisteellä, joka oli annettu i.v. bolusinjektio-20 na kissalle, joka oli nukutettu ja jonka rintakehä oli avattu.

Aggre- Suhteel- Verenpai- Suhteel- hVh2 gaation linen netta linen :.25 esto teho alentava teho IC50 H1 aktiivisuus H2

Ed50 pg/kg 7-okso- 30 PGI2-Na 1 1 0,16 11 15 0,066 6,5 0,024 2,75 16,17,18,19,20-pentanor-15-35 syklopentyyli- 7-okso-PGI2-Na 1,6 0,625 21,2 0,0075 83,3 il 7 83645

Voidaan nähdä, että syklopentyylianalogi on noin 100 kertaa selektiivisempi kuin prostasykliini ja se on merkittävästi selektiivisempi kuin 7-okso-PGI2:n natrium-suola, joka on esitetty US-patenttijulkaisussa 4 330 533.

5 Kaavan I mukaisten yhdisteiden erityisenä etuna on se, että niitä voidaan annostella myös suun kautta.

Keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden biologisen aktiivisuuden vuoksi niitä voidaan käyttää farmaseuttisten koostumusten aktiivisina aineosina. Mainittu-10 ja koostumuksia voidaan käyttää verisuoniston perifeeris ten sairauksien estämiseen tai hoitamiseen (artherosklero-sis obliterans, Burger-sairaus, diabethicus angiopethia), parantamaan raajojen verenkiertoa sekä lieventämään sydäninfarktin ankaruutta sekä vähentämään kuolleisuuden mää-15 rää.

Farmaseuttiset koostumukset soveltuvat monentyyppisten sydänkohtauksien intensiteetin ja lukumäärän lieventämiseen sekä erityyppisten muiden verenkiertosairauksien hoitamiseen, kuten esimerkiksi keuhkojen kohonneen 20 verenpaineen sekä sydämen toiminnanvajavuuden hoitoon.

Niillä voi olla arvokasta vaikutusta estettäessä ja hoidettaessa aivojen verenvähyyttä ja niitä voidaan käyttää astman, maha-suolistojärjestelmän sairauksien, kuten esimerkiksi mahahaavan jne. sekä maksa- ja haimasairauksien 25 hoidossa. Koostumukset soveltuvat edelleen yksinään tai yhdessä hepariinin kanssa verihiutaleiden häviöiden estämiseen kun on kysymys kehon ulkopuolisesta verenkierrosta (munuaisten kemodialyysi, sydän-keuhkokone). Niitä käytetään edelleen metastaasien inhibointiin kasvaimia potevil-30 la potilailla.

. . Farmaseuttiset koostumukset voidaan annostella las kimonsisäisesti, ihon alle, lihakseen tai suun kautta (ma-ha-suolistotietä) yhtä hyvin. Vaadittu määrä on 0,0001 -10 mg/kg kehon painoa. Tarkka annos riipuu sairauden anka-35 ruudesta, lääkkeen kulkunopeudesta, käsiteltävän elimen tai potilaan herkkyydestä sekä potilaan reaktiokyvystä.

8 83645

Kuka tahansa aiheeseen perehtynyt voi ilman vaikeuksia määrätä parhaan annostelutien sekä annostarpeen.

Farmaseuttisia koostumuksia valmistettaessa voidaan käyttää tavanomaisia täyteaineita, laimennusaineita, ma-5 kuun ja aromiin vaikuttavia aineita, pH:ta ja osmoottista painetta sääteleviä aineita, stabilisaattoreita, imeytymistä edistäviä aineita jne. sekä muita täyteaineita. Valmistetut koostumukset voivat olla kiinteitä (tabletit, kapselit, rakeet, jauheet, pillerit), nesteitä (infuusio-10 liuokset, kompressiliuokset, lääkeliuokset, tipat jne.) tai puolikiinteitä nesteitä (voiteet, palsamit, peräpuikot jne.).

Esitettyjä aineosia voidaan käyttää yksinään tai muihin aktiivisiin aineosiin yhdistettynä.

15 Esimerkki 1 6-hydroksi-7-okso-ll,15-diasetyyli-16,17,18,19,20-pentanor-15-syklopentyyli-PGI, :n metyyliesteri 605 mg (1,25 mmol) 6-metoksi-ll,15-diasetyyli- 16,17,18,19,20-pentanor-15-syklopentyyli-PGI1 :n metyylies-20 teriä liuotetaan seokseen, jossa on 6 ml dioksaania sekä 0,5 ml vettä. Lisätään 210 mg (1,89 mmol) seleenidioksidia ja reaktioseosta sekoitetaan 2 tunnin ajan. Kun reaktio on täydellinen, seos suodatetaan ja liuotin poistetaan tyhjössä. Jäännös laimennetaan 50 ml:11a etyyliasetaattia, 2-5 pestään 2 x 10 ml:lla vettä, 5-%:isella natriumvetykarbo- naattiliuoksella kunnes pH on 7,5 - 8, sitten se pestään kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan magnesiumsulfaatilla. Näin saatu raaka tuote kromatografoidaan 200 g:11a Reanal Kieselgel G -absorbenttia sekä eluoidaan pyl-30 väskromatografisesti lyhyessä kolonnissa 50-%:isella seok sella, jossa on heksaania ja etyyliasetaattia. 380 g 6-hydroksi-7-okso-ll, 15-diasetyyli-16,17,18,19,20-penta-nor-15-syklopentyyli-PGI1:n metyyliesteriä eristetään punaisen öljymäisen aineen muodossa. Ohutlevykromatografia: 35 Rf: 0,18 (heksaani/etyyliasetaatti, 1:1).

IR (cm'1, filmi): 3 400, 2 950, 1 740 ja 1 150.

9 83645

Esimerkki 2 7-okso-ll,15-dlasetyyli-16,17,18,19,20-pentanor- 15-syklopentyyli-PGl7:n metyyliesteri 380 mg (0,79 mmol) 6-hydroksi-7-okso-ll,15-diase-5 tyyli-16,17,18,19,20-pentanor-15-syklopentyyli-PGI1:n me- tyyliesteriä liuotetaan 30 ml:aan bentseeniä ja liuokseen lisätään 3 mg p-tolueenisulfonihappoa ja seosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 15 minuutin ajan ja 60 °C:ssa 3 tunnin ajan. Kuumennuksen kuluessa tislataan kaikkiaan 5 10 ml bentseeniä vedenerottimeen. Kun reaktio on täydellinen, reaktioseos jäähdytetään huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitetaan 2 tunnin ajan 0,6 g:n kanssa neutraalia alumi-niumoksidia. Aluminiumoksidi suodatetaan, suodos haihdutetaan osittain ja aine kromatografoidaan 20 g:11a Kieselgel 15 G -adsorbenttia pylväskromatografisesti lyhyessä kolonnis sa, käyttäen eluenttina heksaanin ja etyyliasetaatin seosta (2:1). Saadaan 199 mg 7-okso-ll,15-diasetyyli- 16.17.18.19.20- pentanor-15-syklopentyyli-PGI2:n metyylies-teriä värittömän öljymäisen aineen muodossa.

20 Rf: 0,43 (heksaani/etyyliasetaatti, 1:1).

IR (cm'1, filmi): 2 950, 1 745, 1 715, 1 650 ja 1 160.

UV ^Baks = 287 nm, 1 g £= 3,96.

Esimerkki 3 7-okso-16,17,18,19,20-pentanor-15-syklopentyyli-25 PGl7:n metyyliesteri 198 mg (0,43 mmol) 7-okso-ll,15-diasetyyli- 16.17.18.19.20- pentanor-15-syklopentyyli-PGI2:n metyylies-teriä liuotetaan 30 ml:aan vedetöntä metanolia ja liuokseen lisätään 0,25 ml 1 M natriummetoksidin metanoliliuos- 30 ta. Reaktioseosta sekoitetaan yön yli huoneen lämpötilas sa. Metanoli poistetaan tyhjössä 0 °C:ssa ja aine liuotetaan seokseen, jossa on 50 ml eetteriä ja 7 ml vettä, 0 °C:ssa ja kerrosten erottumisen jälkeen eetteriliuos pestään 10 ml:11a kyllästettyä suolaliuosta ja sitä sekoite-35 taan 0,5 g:n kanssa neutraalia aluminiumoksidia ja 0,2 g:n kanssa aktivoitua hiiltä, suodatetaan ja lopuksi kuivataan 10 83645 natriumsulfaatilla trietyyliainiinin läsnäollessa. Haihduttamisen jälkeen saadaan 135 g puhtaan 7-okso- 16,17,18,19,20-pentanor-15-syklopentyyli-PGI2:n metyylies-teriä värittömän öljymäisen aineen muodossa.

5 Rf: 0,36 (heksaani/asetaatti, 1:1).

UV Amak. = 267 nm, 1 g i = 3,856.

Esimerkki 4 7-okso-16,17,18,19,20-pentanor-15-syklopentyyli- PGI,:n natriumsuola 10 220 mg (0,63 mmol) 7-okso-16,17,18,19,20-pentanor- 15-syklopentyyli-PGI2:n me tyyl ies teriä liuotetaan 10 ml: aan metanolia, lisätään 2 ml 1 M natriumhydroksidin vesiliuosta ja seosta sekoitetaan 40 °C:ssa 3 tunnin ajan. Sitten metanoli poistetaan tyhjössä ja jäännös liuotetaan 20 15 ml:aan tislattua vettä, vesiliuosta ravistellaan 2x5 ml:n kanssa eetteriä ja vesikerros tehdään happameksi pH-arvoon 6 0 °C:ssa lisäämällä 1 N natriumvetysulfaattiliuos-ta, sekä uutetaan 2 x 10 ml:11a etyyliasetaattia. Vesikerros tehdään edelleen happameksi natriumvetysulfaattiliuok-20 sella pH-arvoon 4 0 °C:ssa ja sitä uutetaan jälleen 2 x 20 . . ml:11a etyyliasetaattia. Kaikki orgaaniset etyyliasetaat- tikerrokset yhdistetään ja pestään 2x5 ml:11a kyllästettyä suolaliuosta. Liuosta sekoitetaan 0,6 g:n kanssa neutraalia aluminiumoksidia sekä 0,2 g:n kanssa aktivoitua 25 hiiltä 10 minuutin ajan ja suodatetaan. Liuokseen lisätään 20 ml vettä ja liuoksen pH säädetään arvoon 7,2 - 7,3 0,1 N natriumhydroksidiliuoksella. Nämä kaksi kerrosta erotetaan ja orgaanista kerrosta ravistellaan 10 ml:n kanssa vettä. Yhdistetty vesikerros haihdutetaan sekä kui-30 vataan, jolloin saadaan 190 mg 7-okso-16,17,18,19,20-pen-tanor-15-syklopentyyli-PGI2:n natriumsuolaa.

- · Aiottaessa käyttää otsikon mukaisen yhdisteen vesi- liuosta, vesiliuosta ei haihduteta; liuos voidaan käyttää suoraan.

u 83645

Ohutlevykromatografia: Aine kehitetään hapon muodossa.

Rf: 0,30 (bentseeni/dioksaani/etikkahappo, 20:10:1).

IR (cm'1, KBr): 3 500 - 3 200, 2 940, 2 850, 1 720, 1 650 ja 1 615.

5 Esimerkki 5 7-okso-16,17,18,19,20-pentanor-15-syklopentyyli-PGI,:n natriumsuola 340 mg (0,74 mmol) 7-okso-16,17,18,19,20-pentanor-15-syklopentyyli-PGI2:n metyyliesteriä liuotetaan 50 ml:aan 10 metanolia ja liuokseen lisätään 0,5 ml IM natriummetoksi-din metanoliliuosta. Reaktioseosta sekoitetaan vielä 10 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Metanoliosan (kokonaistilavuus noin 20 ml) poistamisen jälkeen lisätään 5 ml 1 N natriumhydroksidin liuosta, ja liuosta sekoitetaan 3 tun-15 nin ajan 40 °C:ssa. Metanoli poistetaan tislaamalla tyhjös sä. Reaktioseosta käsitellään edelleen aiemmassa esimerkissä kuvatulla tavalla.

Esimerkki 6 7-okso-ll,15-diasetyyli-16,17,18,19,20-pentanor-20 15-sykloheksyyli-PGI?:n metyyliesteri

Liuokseen, jossa on 1 010 mg (2,25 mmol) 11,15-di-asetyyli-16,17,18,19,20-pentanor-15-sykloheksyyli-PGI2:a 20 ml:ssa vedetöntä dioksaania, lisätään 374 mg (3,4 mmol) seleenidioksidia. Reaktioseosta sekoitetaan 2,5 tunnin 25 ajan 85 °C:ssa argonkehässä. Kun reaktio päättyy, reaktio- seokseen lisätään 1 g neutraalia aluminiumoksidia huoneen lämpötilassa ja sitä sekoitetaan 15 minuutin ajan. Suodattamisen jälkeen seos haihdutetaan osittain ja puhdistetaan pylväskromatografisesti lyhyessä kolonnissa. Adsorbenttina 30 käytetään 200 g Kieselgel G:tä ja eluaattina käytetään heksaanin ja etyyliasetaatin seosta (1:1). 200 g otsikon mukaista tuotetta eristetään värittömän öljymäisen aineen muodossa.

Rf: 0,40 (heksaani/etyyliasetaatti, 1:1).

35 IR (cm1, filmi): 2 950, 2 860, 1 740, 1 715 ja 1 650.

i2 83645

Esimerkki 7 7-okso-16,17,18,19,20-pentanor-15-sykloheksyyli-PGI,:n metyyllesteri

Liuokseen, jossa on 220 mg (0,46 mmol) 7-okso-5 11,15-diasetyyli-16,17,18,19,20-pentanor-15-sykloheksyyli- PGI2:n metyyliesteriä 30 ml:ssa vedetöntä metanolia, lisätään 0,25 ml 1 M natriummetoksidin metanoliliuosta. Reak-tioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa argonkehässä yön yli. Sitten metanoli poistetaan tyhjössä, aine liuote-10 taan 0 °C:ssa seoksen kanssa, jossa on 50 ml eetteriä ja 7 ml vettä, eetteriliuos pestään 10 ml:11a kyllästettyä suolaliuosta sen jälkeen kun kerrokset ovat eronneet, ja sekoitetaan 0,5 g:n kanssa neutraalia aluminiumoksidia ja 0,2 g:n kanssa aktiivihiiltä 10 minuutin ajan ja kuivataan 15 lopuksi natriumsulfaatilla. Haihduttamisen jälkeen saadaan 148 mg otsikon mukaista yhdistettä värittömän öljymäisen aineen muodossa.

Rf: 0,34 (heksaani/asetoni, 1:1).

UV A„ak. = 289 nm, 1 g £= 3,903.

20 Esimerkki 8 7-okso-16,17,18,19,20-pentanor-15-syklopentyyll-PGI?: n tris-(hydroksimetyyli)-aminometaanisuola 540 mg (1,35 mmol) 7-okso-16,17,18,19,20-pentanor-15-syklopentyyli-PGI2:n natriumsuolaa liuotetaan 10 ml:aan 25 vettä ja liuos tehdään happameksi pH-arvoon 4 1 N natrium- vetysulfaatilla ja sitä uutetaan 2 x 20 ml:11a etyyliasetaattia. Yhdistettyjä orgaanisia kerroksia ravistellaan kyllästetyllä suolaliuoksella ja ne kuivataan natriumsulfaatilla. Natriumsulfaatti poistetaan suodattamalla ja 30 sitten liuokseen lisätään 175 mg (1,45 mmol) tris-(hydrok simetyyli )-aminometaania ja sitä sekoitetaan 2 tunnin ajan 40 °C:ssa ja annetaan seistä 12 tunnin ajan. Sitten reak-tioseos haihdutetaan kuiviin, jolloin eristetään 510 mg otsikon mukaista yhdistettä.

35 Ohutlevykromatografia: yhtäläinen aiempien, happamessa muodossa olevien yhdisteiden kanssa.

UV; EtOH ληβΚβ = 288 nm, 1 g 8= 3,965.

ii i3 83645

Esimerkki 9 6- hydroksi-7-okso-ll,15-diasetyyli-13,14-didehyd-ro-16,17,18,19,20-pentanor-15-sykloheksyyli PGI, :n metyy Hester! 5 1 850 mg (3,76 mmol) 6-metoksi-ll,15-diasetyyli- 13,14-didehydro-16,17,18,19,20-pentanor-15-sykloheksyyli-PGI^n metyyllesteriä liuotetaan 15 ml:aan dioksaania ja 2 ml:aan vettä ja liuokseen lisätään 650 mg (5,86 mmol) se-leenidioksidia ja reaktioseosta sekoitetaan 2 tunnin ajan 10 60 °C:ssa. Sitten reaktioseos suodatetaan, dioksaani pois tetaan alennetussa paineessa ja jäännös laimennetaan 200 ml:11a etyyliasetaattia. Liuos pestään peräkkäin 2 x 50 ml:11a vettä, 5-%:isella natriumvetykarbonaattiliuoksella kunnes pH on 7,5 - 8, ja kyllästetyllä suolaliuoksella ja 15 se kuivataan magnesiumsulfaatilla. Tuote eristetään pyl- väskromatografisesti lyhyessä kolonnissa käyttämällä 500 g Kieselgel G piihappogeeliä sekä eluenttina heksaanin ja etyyliasetaatin seosta (1:1), 790 mg:n suuruisena määränä punaisen öljymäisen aineen muodossa.

20 Ohutlevykromatografia:

Rf: 0,20 (heksaani/etyyliasetaatti, 1:1).

IR (cm*1, filmi): 3 400, 2 950, 2 230, 1 740 ja 1 160. Esimerkki 10 7- okso-ll,15-diasetyyli-13,14-didehydro- 2 5 16,17,18,19,20-pentanor-15-sykloheksyyli-PGI7: n metyyliesteri 750 mg (1,52 mmol) 6-hydroksi-7-okso-ll,15-diase-tyyli-13,14-didehydro-16,17,18,19,20-pentanor-15-syklohek-syyli-PGI^n metyyllesteriä liuotetaan 30 ml:aan bentseeniä 30 ja liuokseen lisätään 5 mg p-tolueenisulfonihappoa, jonka jälkeen seosta sekoitetaan 15 minuutin ajan, samalla kun liuottimena toimiva vesi tislataan pois. Reaktion aikana tislataan pois noin 10 ml bentseeniä. Sitten reaktioseos jäähdytetään huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitetaan 3 35 tunnin ajan 1 g:n kanssa neutraalia aluminiumoksidia. Alu- miniumoksidi poistetaan suodattamalla ja reaktioseos puh- 14 83645 distetaan pylväskromatografisesti lyhyessä kolonnissa (100 g Kieselgel G piihappogeeliä; eluentti: heksaani/etyyli-asetaatti, 2:1). Näin erotetaan 286 mg otsikon mukaista tuotetta värittömän öljymäisen aineen muodossa.

5 Ohutlevykromatografia:

Rf: 0,56 (heksaani/etyyliasetaatti, 1:1).

UV; EtOH 4Mk8 = 285 nm, 1 g E = 4,01.

Esimerkki 11 7-okso-13,14-didehydro-16,17,18,19,20-pentanor-10 15-sykloheksyyli-PGI7:n metyyliesteri 250 mg (0,53 mmol) 7-okso-13,14-didehydro-ll,15-diasetyyli-16,17,18,19,20-pentanor-15-sykloheksyyli-PGI2:n metyyliesteriä liuotetaan 50 ml:aan vedetöntä metanolia ja liuokseen lisätään 1 ml (1 mmol) 1 M natriummetoksidin me-15 tanoliliuosta. Reaktioseoksen annetaan seistä yön yli ja liuotin poistetaan alennetussa paineessa 0 °C:ssa. Jäännös liuotetaan seokseen, jossa on 50 ml eetteriä ja 5 ml vettä, erottunut orgaaninen kerros pestään 10 ml:11a kyllästettyä suolaliuosta, sitä sekoitetaan 0,5 g:n kanssa neut-20 raalia aluminiumoksidia ja 0,5 g:n kanssa aktiivihiiltä 10 minuutin ajan, se suodatetaan ja kuivataan natriumsulfaa-tilla trietyyliamiinin läsnäollessa. Haihduttamisen jälkeen saadaan 143 mg otsikon mukaista yhdistettä värittömän öljyn muodossa.

.25 Ohutlevykromatografia:

Rf: 0,21 (heksaani/etyyliasetaatti, 1:1).

UV; EtOH Anaks = 287 nm, 1 g £ = 3,98.

Esimerkki 12 7-okso-13,14-didehydro-16,17,18,19,20-pentanor-30 15-sykloheksyyli-PGI7:n natrlumsuola 113 mg (0,31 mmol) 7-okso-13,14-didehydro- 16,17,18,19,20-pentanor-15-sykloheksyyli-PGI2:n metyyliesteriä liuotetaan 7 ml:aan metanolia ja 3 ml:aan vettä ja liuokseen lisätään 2 ml (2 mmol) 1 M natriumhydroksidin 35 vesiliuosta, ja liuosta sekoitetaan 3 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Sitten metanoli poistetaan alennetussa pai- is 83645 neessa ja jäännökseen lisätään 10 ml tislattua vettä. Vesiliuosta pestään 2x5 ml:11a eetteriä ja se jäähdytetään 0 °C:seen sekä tehdään happameksi pH-arvoon 5-6 lisäämällä noin 2 ml kylmää 1 M natriumvetysulfaatin vesiliuosta, 5 ja lopuksi sitä uutetaan 2 x 10 ml :11a etyyliasetaattia.

Vesikerros tehdään edelleen happameksi 0,1 M natriumvety-sulfaattiliuoksella pH-arvoon 3-4, ja pestään 2 x 20 ml:11a etyyliasetaattia. Yhdistetyt etyyliasetaattikerrok-set pestään 2 x 10 ml:11a kyllästettyä suolaliuosta, niitä 10 sekoitetaan 10 minuutin ajan 0,5 g:n kanssa neutraalia aluminiumoksidia sekä 0,2 g:n kanssa aktiivihiiltä sekä suodatetaan. Suodokseen lisätään 20 ml vettä ja sen pH säädetään arvoon 7,4 - 7,6 lisäämällä 0,1 N natriumhydrok-sidiliuosta. Orgaanista kerrosta ravistellaan 10 ml:n 15 kanssa vettä ja yhdistetyt vesikerrokset haihdutetaan, jolloin saadaan 78 mg otsikon mukaista yhdistettä. Ohutleykromatografia: aine kehitetään hapon muodossa.

Rf: 0,30 (bentseeni/dioksaani/etikkahappo, 20:10:1).

IR (KBr, cm'1): 3 300, 2 950, 2 220, 1 720 ja 1 645.

Claims (9)

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten ra-seemisten tai optisesti aktiivisten 7-okso-prostasyklii-5 nijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava I rCOOR1 , HO' OH 15 jossa R1 merkitsee vetyä tai farmakologisesti hyväksyttävää kationia, A merkitsee trans-vinyleeniä tai -CsC-:a ja n voi merkitä kahta tai kolmea, 20 tunnettu siitä, että a) hapetetaan yhdiste, jolla on kaava IV OR3 I^V/^V^COOR1’ 25 U /·

30 OR2 jossa R1' merkitsee vetyä, suoraketjuista tai haarautunutta C^-alkyyliä tai farmakologisesti hyväksyttävää kationia, R2 merkitsee vetyä tai C^-alkanoyyliä, R3 merkitsee 35 vetyä tai suoraketjuista tai haarautunutta C1.4-alkyyliä ja A ja n merkitsevät samaa kuin kaavan I yhteydessä, II i7 83645 ja kuumennetaan täten saatua yhdistettä, jolla on kaava II OR3 χι C00R 0 ^ ,CH2>n 2 c' >A-f W R 0 i 2

10 OR jossa R1', R2, R3, A ja n merkitsevät samaa kuin kaavan IV yhteydessä, tai b) hapetetaan yhdiste, jolla on kaava III 15 COOR1' r\ 111 W /- νΛ (ch„) 2 s ^A 2 n R^O ^ 2 OR .25 jossa R1', R2, A ja n merkitsevät samaa kuin kaavan IV yhteydessä, ja poistetaan alkanoyyliryhmä R2 ja/tai alkyyliryhmä R1' ja mahdollisesti muutetaan saatu yhdiste suolakseen.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan 7-okso-16,17,18,19,20-pentanor-15-syklopentyyli-PGI2:n nat-riumsuola tai 7-okso-16,17,18,19,20-pentanor-15-syklopentyyli-PGI2: n 35 tris-(hydroksimetyyli)-aminometaanisuola. 18 83645

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kaavan IV mukainen yhdiste hapetetaan seleenidioksidin kanssa vettä sisältävässä liuottimessa.

4. Patenttivaatimuksen 1 vaihtoehdon a) mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kaavan II mukaista yhdistettä kuumennetaan liuottimessa happokatalysaatto-rin läsnäollessa tai ilman liuotinta 50 - 200 °C:ssa.

5. Patenttivaatimuksen 1 vaihtoehdon b) mukainen 10 menetelmä, tunnettu siitä, että kaavan III mukai nen yhdiste hapetetaan vedettömässä liuoksessa seleenidioksidin kanssa.

6. Patenttivaatimuksen 1 vaihtoehdon a) tai patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu sii- 15 tä, että kaavan IV mukainen yhdiste hapetetaan 1,1 - 10 ekvivalentilla seleenidioksidia 20 - 200 °C:ssa vettä sisältävässä dioksaanissa tai dimetoksietaanissa.

7. Patenttivaatimuksen 1 vaihtoehdon a) tai patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu sii- 20 tä, että kaavan II mukaista yhdistettä kuumennetaan aro maattisessa liuottimessa tai halogenoidussa ja/tai dipo-laarisessa aproottisessa liuottimessa p-tolueenisulfoniha-pon tai rikkihapon läsnäollessa.

8. Patenttivaatimuksen 1 vaihtoehdon a) tai patent- 25 tivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu sii tä, että kaavan II mukaista yhdistettä kuumennetaan bent-seenissä tai tolueenissa p-tolueenisulfonihappokatalysaat-torin läsnäollessa 60 °C:ssa.

9. Patenttivaatimuksen 1 vaihtoehdon b) tai patent- 30 tivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, tunnettu sii tä, että hapetus suoritetaan eetterityyppisessä liuottimessa, edullisesti dioksaanissa 1,1 - 10 ekvivalentilla, edullisesti 1,3 - 1,5 ekvivalentilla seleenidioksidia 20 -200 °C:n lämpötilassa, edullisesti 80 - 90 °C:ssa. Il i9 83645