FI83224C

FI83224C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva substituerade oxider av inre salter av hydroxiheterocyklylalkoxifosfinyloxitrialkylaminiumhydroxid.

Info

Publication number: FI83224C
Application number: FI863492A
Authority: FI
Inventors: William Joseph Houlihan; Mark Leonard Lee
Original assignee: Sandoz Ag
Priority date: 1985-08-30
Filing date: 1986-08-28
Publication date: 1991-06-10
Also published as: HUT44261A; DK414886D0; DK414886A; IE862300L; ES2001766A6; CY1673A; HK74893A; NZ217389A; JPH0633293B2; AU598744B2; IL79875A; IE59077B1; EP0213082A1; GR862220B; JPS6251692A; HU199851B; FI83224B; AU6203886A; FI863492A0; FI863492A

Description

1 83224

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten substituoitujen hydroksiheterosyklyylialkoksifosfinyylioksitrialkyyli-aminiumhydroksidin sisäisten suolojen oksidien valmistamiseksi 5 Tämä keksintö koskee menetelmää tiettyjen substituoitu jen hydroksiheterosyklyylialkoksifosfinyylioksitri-alkyyliaminiumhydroksidin sisäisten suolojen oksidien valmistamiseksi, joita yhdisteitä voidaan käyttää lääkeaineina, 10 erityisesti kasvainten vastaisina aineina.

Tarkemmin sanoen tämä keksintö koskee menetelmää yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava I

R<XR i ©/R’

15 «5 <CH2>m - o - r - 0 - (CH2)n - N-R, I

0® R, jossa R on vety, g-alkyyli tai CH2OR2 tai CH2CH2OR2# joissa R2 on C^^g-alkyyli, kukin R^ on muista riippumat-20 ta _2~alkyyli, m on 1 tai 2, n on kokonaisluku väliltä 2-8 ja R^ ja R^ yhdessä niiden välisen hiiliatomin kanssa muodostavan ryhmän 25 ^ (a) (c) (d) 0=C—R3 r"x /—< °v^ M (f) tai (9) 2 83224 joissa Rg on alkyyli, alkenyyli, alkynyyli, alkoksi, alke-nyylioksi tai alkynyylioksi, joista jokaisessa on 12-24 hiiliatomia, jolloin ryhmien ja Rj. muodostaessa niiden välisen hiiliatomin kanssa i) renkaan e) R on H ja ii) muun kuin 5 renkaan e) R on muu kuin H.

Esimerkkejä erityisistä keksinnön piiriin kuuluvista yhdisteryhmistä ovat: alaluokka Ia), jolloin R^ ja R,. yhdessä niiden välisen hiiliatomin kanssa tarkoittavat rengasta a) tai b), eri-10 tyisesti rengasta a); alaluokka Ib), jolloin R^ ja R^ yhdessä niiden välisen hiiliatomin kanssa tarkoittavat rengasta c) tai d), erityisesti rengasta c); alaluokka Ie) , jolloin R4 ja R,. yhdessä niiden väli-15 sen hiiliatomin kanssa tarkoittavat rengasta g); alaluokka Id), jolloin R^ ja R^ yhdessä niiden välisen hiiliatomin kanssa tarkoittavat rengasta f).

Näissä alaluokissa ovat edullisia yhdisteet, joissa R on R' ja tarkoittaa n-C1g-alkyyliä, ryhmää CH2OR2' tai 20 ryhmää CH2CHOR2', joissa R2' on n-C^g-alkyyli, ja n on kokonaisluku väliltä 2-6 (alaluokat Ia' jne). Erityisen edullisia ovat yhdisteet, joissa R on R" ja tarkoittaa n-C1g_^g-alkyyliä tai ryhmää CH2OR2' ja n on kokonaisluku väliltä 2-4 (alaluokat Ia" jne). Edullisia ovat varsinkin yhdisteet, 25 joissa R on R" kuten edellä on määritelty, m on 1, n on 2 ja jokainen R^ on CHg (alaluokat Ia"' jne.).

Yhdisteiden yksi alaluokka on edelleen alaluokka Ie, jossa R^ ja R^ yhdessä niiden välisen hiiliatomin kanssa tarkoittavat rengasta e). Tässä alaluokassa ovat edullisia 30 yhdisteet, joissa Rg on Rg * ja tarkoittaa alkyyliä, alkenyy-liä, alkynyyliä, alkoksia, alkenyylioksia tai alkynyyliok-sia, joissa kussakin on 12-20 hiiliatomia, m on 1 ja n on kokonaisluku väliltä 2-6 (alaluokka Ie').

Il 3 83224

Erityisesti edullisia ovat yhdisteet, joissa on R^" ja tarkoittaa alkyyliä, alkenyyliä, alkynyyliä, alkok-sia, alkenyylioksia tai alkynyylioksia, joissa kussakin on 12-18 hiiliatomia, m on 1 ja n on kokonaisluku väliltä 2-4 5 (alaluokka (IeM). Edullisia ovat varsinkin yhdisteet, joissa R^ on R^’" ja tarkoittaa alkoksia, alkenyylioksia tai alkynyylioksia, erityisesti alkoksia, joissa kussakin on 12-18 hiili-atomia, m on 1 ja n on kokonaisluku väliltä 2-4 (alaluokka Ie"'). Kaavan I mukaisissa yhdisteissä ja jokaisessa alaluo-10 kassa on edullista, että kaikki R^:t ovat samoja.

Erityisen edullisia yksittäisiä yhdisteitä ovat 2-/hyd-roksi(tetrahydro)-2-(oktadekyyli-5-okso-2-furanyyli)metoksi-fosfinyylioksi^-N,Ν,Ν-trimetyylietaniaminiumhydroksidin sisäisen suolan 4-oksidi, 15 2-/f( 2-oktadekyylioksimetyylitetrahydro-2-furanyylimetoksi) hyd- roksifosfinyylioksi7-N,N,N-trimetyylietaaniaminiumhydroksidin sisäisen suolan 4-oksidi, 2-hydroksi/1 -oktadekyylioksikarbonyyli-3-piperidinyylimetoksi_7-fosfinyylioksi-N,N,N-trimetyylietaaniaminiumhydroksidin sisäi-20 sen suolan 4-oksidi.

• · Kaavan I mukaisia yhdisteitä valmistetaan keksinnön mu kaisesti siten, että yhdiste, jolla on kaava £ «4R y

25 (CH2)m - 0 - f - 0 - (CH2)n - X C

OH _

saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava CC

/Rl _

N —R. CC

30 \ 1 — R1 joissa R, R.| , R^, R,., m ja n ovat edellä määritellyt ja X on poistuva ryhmä.

4 83224

Reaktio saatetaan sopivasti tapahtumaan siten, että mukana on inertti orgaaninen liuotin kuten alempi alkanoli, esim. metanoli tai etanoli, aromaattinen hiilivety, esim. to-lueeni tai bentseeni, dialkyyliamidi kuten dimetyyliformamidi 5 tai asetonitriili esimerkiksi 50-70°C:n lämpötilassa. Nämä olosuhteet ovat erityisen hyvin sopivat silloin, kun käytetään edullista poistuvaa ryhmää eli bromia, jodia, tosyyliä tai mesyyliä.

Kaavan C mukainen lähtöaine voidaan valmistaa siten,

10 että yhdiste, jolla on kaava CCC

R. R

4>^ CCC

*5 <CH2>8H ~ saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava CCCC 15 0

Cl2P - 0 - (CH2)n - Br CCCcT

Tämä reaktio toteutetaan tavanomaisella tavalla esimerkiksi siten, että läsnä on amiiniemäs kuten pyridiini tai tri-20 etyyliamiini, ja inertissä orgaanisessa liuottimessa, esim. aromaattisessa hiilivedyssä kuten tolueenissa, bentseenissä tai ksyleenissä, halogenoidussa alifaattisessa hiilivedyssä kuten metyleenikloridissa, kloroformissa tai hiilitetraklori-dissa, halogenoidussa aromaattisessa hiilivedyssä, esim. kloo-25 ribentseenissä, tai eetterissä kuten dietyylieetterissä. Reaktio voidaan saattaa tapahtumaan lämpötiloissa 20-70°C.

Näin valmistetulle tuotteelle suoritetaan sitten emäksinen hydrolyysi, esim. suspendoimalla tuote veteen. Hydro-lyysi suoritetaan sopivasti lämpötiloissa 20-100°C.

30 Kaavan I mukaisia yhdisteitä, joissa n on 2, voidaan

keksinnön mukaisesti vaihtoehtoisesti valmistaa siten, että yhdiste, jolla on kaava _L

II

5 83224 R, ^ (CH«) - 0 - P Γ 5 2' m \ 0 -1 _

saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava CC

5 R

/ '

N — R-, EE

Nr1 joissa R, R^, R4, R,. ja m ovat edellä määritellyt.

10 Reaktio toteutetaan oleellisesti samalla tavalla kuin on kuvattu kaavojen C ja CC mukaisten yhdisteiden reaktion yhteydessä.

Kaavan L mukaiset lähtöaineet voidaan valmistaa siten, että yhdiste, jolla on kaava CCC

: 15 R4 R

R5X (CH2>m0H —

20 saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava LL

0 0 " x i-r

C1 - Ρχ EE

0 25 Tämä reaktio toteutetaan inertissä orgaanisessa liuot- . . timessa kuten halogenoidussa hiilivedyssä, esim. metyleeni- kloridissa tai kloroformissa tai aromaattisessa hiilivedyssä, esim. bentseenissä tai tolueenissa ja tertiäärisen amiinin kuten C^_4~trialkyyliamiinin, esim. trietyyliamiinin ja mah- 30 dollisesti katalysaattorin, esim. 4-dimetyyliaminopyridii-nin läsnä ollessa esim. lämpötiloissa 20-40°C.

Kaavan CCC mukainen lähtöaine voidaan valmistaa seu-raavassa esitettyjen reaktiokaavioiden mukaisesti tai niiden kanssa analogisesti.

6 83224

Reaktiokaavioiden selitys Bn = bentsyyli M = alkali- tai maa-alkalimetalli Y = 0 tai S 5 Z = CH2 tai C=0 E = Cl, Br, I tai tolueenisulfonyyli

Esimerkkejä reaktiokaavioiden mukaisten menetelmien reaktio-olosuhteista on annettu menetelmien havainnollistamiseksi seuraavissa taulukoissa tai jäljempänä esitetyissä 10 esimerkeissä.

Lyhenteet 10 = inertti orgaaninen HC = hiilivety

HalHC = halogenoitu hiilivety 15 THF = tetrahydrofuraani DMSO = dimetyylisulfoksidi DMA = dimetyyliasetamidi DMS = dimetyylisulfidi DMF = dimetyyliformamidi 11 7 83224 rY- cf3 < - 5 ^ v-y ©/ \© LH20H CH2OH r' r

XV [CCC R4*R5njsngas^ m „0—1 ho—| MU

I___________ OBn !CH2),09n

io , W

I-< © R (S) |ΝθΟ OBn W ^

j J 2m-- ch2= -- 0= IV

y 1 0 XIII (CH,) OBn {CH_) 03n cm cm .» . /® 01 1® ,. Vy r\· :

y CHj-CHCHjCH,-OH V

• · (CH,) OBn (CH-) OBn XIV / XIVa 2 m CH, OBn

\ ® I S

:/ 20 /“V" / '\/K vt

(CH2)m°H V

[CCC R4*R5= rengas f) tai g)/ H° ° <CH2)m08n !© ... ” 6- - ©v · VII (CH,) 08„ HO (CH,) 03 , I C flj Π c Π) Π r~\/at’·°" Γ“\/

: " « ' (CH_) OH Y (CH,) OH

• cm £ 1 IX [CCC R,,<-R-»iielngas a) tax b)7 30 ____4 5 :'· ^— /λ’

H° (CWBn (CVm0Bn tCH2>m0H

x XI [CCC R*R-. rengas c) (________4 5 tax d)J_ 8 83224 --^—----—I—I------- P I >1 >1

T3 I >ι I >i >i C

H O W 0) M p 0) θ I Ρ Μ Ρ Η ® β

(0 0 P (O H H

-P P · - φ ·γΙ Ό H h H

ΗιΟΕ-ΡΟΌΜΒ <0

N H C · >i E-· ·> P

ö >i »01 (!) C ·Η β n ·. - CP

Ρ, M 0) <D <D CliH · ® u SC -H

P r-ι a oi fi 6 ο-rl 6 U SC C

0 iti q. u p ·η s ο <d <o η h oi h (n c a) g Η K C H E· H 4-101 (OH (OH (DO)

5 -p Ό * (OX «5 - <U K O 3C U C C

•P pM C Λ >1 1 HH (N N PH

C S CD en E C Ρ P ~ G SC C SC POH

ai.a c * v- cudJoiH a) u a) u ppc p ·ρ p »o -p-p-PM p p ro a) c · p c - p a c ρ p 1 ΟαίιΟβΦ-ι-Ο-ΡΗφ o 01 0 w p cn en __HdlSrHHP ΗΗΗ0)__HQ) HQ) (Q (U X____ 10 (0 c u

fö P Q) O C U

P U W CD in HO

p 0 ·· cn u <n m 0

p O O ·· O CO

O O O U O I p 10 H <— 00 TJ< OT in

5 1 OO I OO P 00 CM

•(0 0 t— <0 O t~~ rO (—' I

p H II fM I > I O

15------1----------

J, I * P

P I H C (0 Ρ ·Ή H H (0

“(0(0 >, PE p » I

“ p p >1 a» ο ό h

£ H (D SC P Λ P · H G

Si, O E Ό Q) (0 M E Ρ O H

2* Λ ·ρ 2 Β Λ ·Ρ -ρ Ο W Η $ O H H Ρ CO H S Ε ,¾ .* <0 c in c o α> m a <ο

«HM H X 0)0 OH

on Ti (OHM O C H » ft:® H

p H (0 c H HM H aM >1 $ ρ -ρ h (θ£τ)(θω>ι S] >1 H W >, P 3 H Ä M m p >hPP >1 Μ H M H S5

S oi 0) (d CO G fi Ό H fNrtJ H

5 PQ)> p PH >, (0 Λ H —.

2 Ccn G φόλρηΡιπ

° 01 H - <D CVP C U P K

P PH H XI HP<0<DOI<N

~ ^ ρ ό e >< (nu mu 2 >1 s h >1 h o a. ~ ~ ~ 1 — „ _ Ρ Ρ Ό P PE P (0 O t— 25 fr Ρ01Ό PC M· υ·υ·

2 :,0 >1 :(0 H e HE E

p tn »p tn P h ^ h h r 1 P S Ρ ·Ρ·Ρ rs 01 H H u «1 Λ m W__Ρ X H p H__Π ® Ρ Π — ® Xl Q) __ 1 P H Q) <0 0

> JC

'Ti tn •H 3

«) Λ CU 4J

30 ο. <jj fr a _P_____03_ o

H

P

Λί <C

(0 >— r- CVI

<u

35 X

9 83224

Π s I

h Pm C ^ · H 53 Id -H -H g

44 Eh id nj -HIO

>1 -P 05 CO X3 CN

w· C M CN (M O id EC

g a> c g

•H -H Oj (0 Id (d *· dP

Ο W 44 W ω -H + c; -M d> · w tn I—( m •H geo O OKr-

-P C * -Η -Η -Η -H CO

o o -h w c -p +> ron

CCH 0(044 44 44 EG -H

•H-HCU = Id Id Id iHU-P

Pi -P -P 10 W O O rd 01 -P -P Ο 44 P P ~ 0 fd ο o (1) -h k ω

Ο <U W.CC C Cuo-H

η o o g Lon

•HC Η -Η -P .μ O K H

H HI flj Id 3 3 iH (NO

O C ,-P-P 44 44 <d U T3 u c u m ooo o HU Ο -P o O u

•ho cn en en u O

P in .. ..o I o :0 ΙΟ I U U O in

Qj I 0 0m o I

go oo oo o I m o :0 (N r-~ Mno l cn

Pi I I I CN

. . ---1-1---u------ -H HO si .

CO <0 g I

m > :rfl 44 3 <0 -H O I

. C -PH430 -HU) « -P |J

Ο Λ ffl D I -H *-HO *00 0

Cn x ·· -H r- 4J :nj +J g QiH id fd —.

O X -H G I 44 -P -H ·* ·Η Ο,Ό C wen o Φ'Η o c-H(d μο·η·η >ιΟΧϊ :' '. Cm Og Ο -H i+4 -H m X Vi Vi h w h C · O’ 0 Cl -PWT3 100 id w P ·· g o P cd ocno-H > m 3-p -Pom -·- O S ·η η λ xm to him ή -h-Hi-h-p oom

.: ' o CNMiOl XU) 10 44 -H H CSlPCd 44CI

-p K OÄ^f C td H H S Id OH Id -Hin 43 U CO Vi 01 >t[0 <d Pi P cn UOf- 3 CNld + · 044 P a >i -H -H 4-> >, \ a'-'

ω ffi-pgo Ή 44 H -H + -HrH +J

0 U Mad-Η -P > > >iH >, W P rd (¾ cniQ

H K «|J «I 10 H !4JfO>i H SJ ο -P K Qi O U S CO O id -H cn +J Ή 44 H *H O 0 — 44 in n ·· -P Ό C O :rd V-i H >i co £) 44 EG + -H cnc/1 φ - to X o in -P rd >, m o oo

Ch K 3 S id H >i O m-H-H 44 —- -H Ό (d

-P U-P+JC -p Ο Η · «o H in.+J ft C

•h m-Henow g otag-p -hi

' P —. -H (0 -H O H -H -H CO Ή CNH (d ·. ft CO

W id g -P C -P 43 Ό — ^tnrdS P U in rd d oo id 43 Ο -P Q -P O P fti-pr- JJ - - ——- •HO id o > 43 • ·Η Ö4

- - CU

>1 ί>1 &H _ Ο •Η -Ρ 44 id ro «s- in ιο ο

K

_ I

-t------- --------———— ---· 10 83224 - j - ' · P ·Η I k.

P -P G P P · I I -H I tr!

E I p O P

^2+1^ P P O 3 >* P l p >, ega oiEH to 1 <U P I tO ·

3 0 P -H <u (DXIH 4J (DPP E

O C '· 3 (U P >,H P P

_r GEjOE p >< >i rd to

>1 QJW-H P (d >i -p >i -P (U

>i ) ' H S « P vo G Cu P W P >i(U-P

^ < H >iQ <D <U ·Η K ο Λ fl .¾ P <U P ..

P S P (0 -P o H EH > ¢) -Η P Ό E P P

G <d Q to λ: p * -P p Λί -ΗΛΕ td (UP

•H -PCUfO-H i · -P (d -Η · ·ι~| -p (U

-P TJ ' * P P <U χ to β Λί · p T3 E td P P

2 „ & r Γ '2 2 -H id P G E P -HP(UP

3 G S O C ·* P 10 GG <U βω -rl P G to (U QJ

P 1) Q Ϊ 0) (0 P o i 0)(0 p <D (UP (OP (U <U P P <U

PI P Ι)Ή Jl HI G(U P P (U P P P Ή

3 · G to to iC

a: E tu p ,γ pa: *w a: p p >i <u

-HGGOG-H Αί Ο P P to G to p +J p G

O (0 P (U i P 3 O<U-H-H0 O Q) <U 3 P

Η ϋ)·ΡΛ 10 CP tOO X Η P P P 4-1 Η -P φ Λ P

Ö Ö •rH 1-1 „ P p

-* A! G

P rö fd rd (U

•HO <U (U P Q)

PO PU PtfllO O

:0 O O .. .. O

GO GOO O

El Q) r" (U Ο Ο 1*

:nj in pi Poo I

Pii—I Go 3r-<N o

_____Ai CM fN ^ VC II <N

p o I

P :id \ I · P P

(0C tNP E E TJ W

«to (¾ G -Η -Η P

G t(d O + *H to p ϊ—I

Φ r-l ·Η G 1 S' P CN O >1 >1 5 g a: o p p tu Id to to -H tu ^ ffi Q) Ή Ο f~H £s

> o p(d 4-1 E fd P (U

PS P P <U A! P G

5J G ιΗ ϊ—I P -H

«Η i (d >d I td tl* PE >iG 1)1 :n(

•S X! 3 P O G id C H P

Sr, X 'H -H <V X -Η Λ c

« ω p P G Λί I (U

o cv - λ; p e g e p x

P « o cn td P P 3 Ό P

o (U P ·» 10 H H >, « >1 (d II II p P P p iH g ^ p Ό td td <d ϊ

ti S >H>H G >i-H > λ; -H G

P:idi E P O

p WP CG P P O * P >i

^ PP 33 G (U P W <d >i G

w ιΡΟ a: a: λ; E λ s p p . n —— - ' ' j

. . ·Η <U O

fd 0) g > Λ to Φ "> 3 crv

P p O -H

Of 1 C <2 >i >i H1__f?_____ 0

*H

P *1 «C Q3

CO <C CO C CQ

id 0) 6 __ 11 83224 H I * id -H n

J d x> -P -H

S 01 X> U

·£ d -ΓΗ «S K

2 'H d id U

χ) Q) XI X> 0) -H ·

' ^ IJIDHE

- y Λ Id x> td -H

5 ® O ε d oi 'll - 'H. o o h ai d ε -ι-t te

^ ^ M 0) -H dH

o +> W <D ro fN

oiNd dtutuffi-H

ή ή οι χ ί d Λ! U X» Λ * 4 e oi ™ 3 O U O 0) 35 2* * Htc+Jdo --CLU________________—- -* d id id -t-* O ·· ·· ·« (/5 ;0 o d vo u cj u ·· a vo oi o o o u

E l -PO o o OO

:fd o d -H oo m in o I-I N< χ x> I 1 1 m | j ,. jj ' *- i o i U S' -Hold ι>ι - '7 > <2 d -H H · -H >1 m 9 IdSM-l Gh+i «*01 Id0)-H -H >1 0)

COO HP H 01^-H

0)&iOl Ή χ> ΟΙΛίΡ σι&ι-Ρ 01 + -H Γ-Ι-Ρ ---- J id d -HP ~ Id ,2 -d <u γη te o ;id -h d

« 01X1 N >1·Η O 01P-H

> O p z >,w xi 01 x> λ; m O X n 0) d

-.;. ^ ^ 9< ·* «H —* d 01 -H -H

2 e -h vo K id inn x id oi

Ή -H ffi .* :id -p P

·.. -S-POO <pcNd 0<d

d p o -h ^ x> u -h aiad> I

«ΦΉ.Ρ ITi — 01 -H 01 Id ΟΟιΛίΛί 33 -H p d 01 * 01 Τ’ ·η i id ^ftdid -h -h id oi 0 d E 0) Cl E H > -H d 01 Ή « oi p lai^o E-Hoid

[7 0) d *H t—I d » Id -H -H -H

π en -rH e — id -H O Ό d -H

tj O -* ai 01 a-H MH -H E

•r’ »h a xi u ο,-d « p-h id

ω 19 «R 3 — —» id id -H O = U >1 H -H

- - W__-d 01 a _x__td XI !> -g P__H qiHH_

1 -P

-h ai ,

d a> O

^ -d d ^ § n ö*

o O -H

a p oi ^ Ό >i

·:·· £ >1 >1 ^ x: rH

o

•H

ΰ < 5 o q «t e S ° Q < o

M

__________________ i2 83224 Välituotteita, jotka sisältävät muita kuin reaktio-kaavioissa kuvattuja substituentteja, voidaan valmistaa näiden kanssa analogisesti tai ne ovat tunnettuja tai valmistettavissa analogisesti tunnettujen menetelmien kanssa.

5 Edellä esitetyt lähtöaineet ovat tunnettuja ja/tai valmistettavissa tunnettujen menetelmien kanssa analogisesti tavanomaiseen tapaan.

Lopputuotteet ja välituotteet voidaan eristää ja puhdistaa tavanomaisella tavalla. Sopivissa tapauksissa väli-10 tuotteita voidaan käyttää suoraan seuraavassa vaiheessa puhdistamatta niitä.

Kuten alan ammattimiehelle on ilmeistä kaavan I mukaiset yhdisteet voivat esiintyä raseemisena tai enantiomee-risenä muotona ja keksintö on tarkoitettu käsittämään kaik-15 ki muodot.

Enantiomeerisia muotoja voidaan saada tavanomaisella tavalla, esim. jakamalla loppu- tai välituotteet isomeereik-seen tai käyttämällä optisesti aktiivisia lähtöaineita.

Kuten edellä on mainittu, kaavan I mukaiset yhdisteet 20 esitetään käytettäviksi kasvainten vastaisina aineina ja siten ne esitetään käytettäviksi kasvainten vastaisina aineina ja siten ne esitetään käytettäviksi inhiboimaan erilaisten imukudoskasvainten (lymfoomien), tukikudossyöpien (sar-koomien), myeloomien ja leukemioiden kasvua. Kaavan I mu-25 kaisten yhdisteiden kasvaimenvastäinen aktiivisuus voidaan osoittaa käyttämällä kasvainsolusytotoksisuus-koetta (Tumor Cell Cytotoxicity -koe eli TCC-koe) seuraavasti:

Tasapohjaisille mikrotitrauslevyille (Nunc Roskilde, Tanska) siirrettiin Abelson 8.1-lymfoomasoluja, YAC L1210-, 30 P815-, Meth A-fibrosarkoomasoluja tai tuoreita ihmisen neu- roblastoomakasvainsoluja seoksessa, jonka muodostivat DMEM + 10 % vasikan fetaaliseerumia, ja kasvainsoluja sisältäviä levyjä inkuboitiin, niin että mukana oli 1, 3 ja 5 yug tutkittavaa yhdistettä, 6-72 tunnin pituinen aika.

35 Abelson 8.1-, /AC-, L1210- ja P815-kokeissa olevien kasvain- i3 83224 solujen lukumäärä määritettiin mittaamalla alkalifosfataa-si seuraavasti:

Kasvainsolulevyjä sentrifugoitiin (500 x g) kymmenen minuutin ajan ja emäliuos kaadettiin pois. Ilman lisäpesuja 5 lisättiin 100 ^ul puskuria, joka sisäksi 20 ^ul dietanoli-amiinia, 2 ^uM MgClj* 61^0, 2,5 yuM p-nitrofenyylifosfaattia ja 10 mg Triton X-100:aa. Näytteitä inkuboitiin 60 minuuttia huoneenlämmössä ja entsymaattinen reaktio lopetettiin lisäämällä 100 ^ul 0,5-normaalista NaOH:ta. Sen jälkeen mitattiin 10 absorbanssi 405 nm:ssä käyttäen Titertek Multiskan-laitetta.

Meth A-fibrosarkoomasoluja ja ihmisen neuroblastooma-soluja käyttäen tehdyissä kokeissa olevien kasvainsolujen lu- 3 kumaärä mitattiin H-tymidiinin sitoutumisen perusteella seuraavasti : 15 72 tunnin kuluttua solut pestään perusteellisesti ja jokaista levyn kaivoa käsitellään noin 0,1 yUC:llä ^H-tymi-diiniä. 4-6 tunnin kuluttua solut otetaan talteen käyttäen kaupallista solujen kokoamislaitetta ja suodoksen radioaktiivisuus mitataan tuikelaskimessa.

20 Kaavan I mukaisten yhdisteiden kasvainten vastainen aktiivisuus voidaan osoittaa myös käyttämällä Influence on Cytotoxicity of ET-1e-OCH^-koetta seuraavasti:

Luuytimen solumakrofageja (105/kuoppa), jotka oli saatu (BALB/CX57/BLg)F1-hiiristä, inkuboitiin niin että mukana 25 oli 10 ^ug 1-oktadekyyli-2-metoksi-3-fosforyylikoliinia (ET-18-OCH3) 24 tuntia tasapohjaisilla mikrotitrauslevyil-lä (Nunc Roskilde, Tanska), minkä jälkeen ne sentrifugoitiin ja pestiin kerran. Levyille lisättiin sitten Abelson 8.1-kasvainsoluja seoksessa DMEM + 10 % vasikan fetaalisee-30 rumia sekä 1, 3 ja 5 ^ug tutkittavaa yhdistettä. ET-ie-OCH^n (10 yUg) sytotoksisuus yksin käytettynä merkittiin 100 %:ksi ja inhiboituminen tai sytotoksisen vaikutuksen voimistuminen mitattuna alkalifosfataasikokeella määritettiin ja tutkittavan yhdisteen määrille 1, 3 ja 5 ^ug saadut arvot rekis-35 teröitiin.

14 83224

Kaavan I mukaisten yhdisteiden käyttökelpoisuus kasvainten hoidossa voidaan osoittaa lisäksi seuraavalla menettelyllä :

Meth A-fibrosarkoomasoluja aikaansaatiin BALB/C-hii-5 riin käyttämällä metyylikolantreenia menetelmällä, jonka ovat kuvanneet Old et ai. (Old, L.J., Boyse, E.A., Clarke, D.A. ja Carswell, E., Ann. N.Y. Acad. Sei., 101 (1962) s. 80).

Nämä solut otettiin talteen mahaontelosta (peritoneaa-10 Hontelosta) 10-12 vuorokautta metyylikolantreenin antami sen jälkeen. Kymmenen CBF.-hiirtä, kukin iältään 10-12 viik- ' g koa, ympättiin kukin 7,3 x 10 Meth A-sarkoomasolulla; nämä hiiret toimivat verrokkeina. Toiseen kymmenen CBF.-hii- g ' ren ryhmään ympättiin kuhunkin 7,3 x 10 Meth A-sarkooma-15 solua ja vuorokauden kuluttua ymppäyksestä jokaista hiir tä hoidettiin oraalisesti vuorokausiannoksella 5-50 tutkittavaa yhdistettä kaikkiaan 20 tai 27 vuorokautta. Kasvaimen kasvu ja eloonjääneiden lukumäärä tarkastettiin 7, 14, 21 ja 28 vuorokauden kuluttua kasvaimen ymppäämisestä.

20 Yhdisteet on täten osoitettu käytettäviksi kasvai men vastaisina aineina ja todettu sopiva vuorokausiannos tässä käyttötarkoituksessa on noin 500-2000 mg, edullisesti 1000-1500 mg, joka annetaan sopivasti jaettuna annoksiksi, jotka ovat suuruudeltaan 125-2000 mg, edullisesti 250-25 1500 mg, ja jotka annetaan 1-4 kertaa vuorokaudessa, tai valvotusti vapautuvana muotona tai esim. 20 mg/kg intrave-nöösisti 24 tunnin kuluessa. Tyypillinen oraalisesti käytettävä annos sisältää 300-600 mg (yksikköannos erityisesti 300-500 mg, varsinkin 350-450 mg) yhdistettä.

30 Tämä keksintö koskee siten myös kasvainten hoitome netelmää, jossa tällaisen hoidon tarpeessa olevalle kohteelle annetaan kaavan I mukaista yhdistettä, sekä tällaisten yhdisteiden käyttöä lääkeaineina esim. kasvainten hoitoon.

Yhdisteitä voidaan käyttää yksin tai seoksina farma-35 seuttisesti hyväksyttävän laimentimen tai kantoaineen ja 15 83224 mahdollisesti muiden lisäaineiden kanssa, ja niitä voidaan antaa oraalisesti esimerkiksi tablettien, dispergoi-tuvien jauheiden, rakeiden, eliksiirien, kapselien tai suspensioiden muodossa, tai parenteraalisesti esimerkiksi ste-5 rillien injektoitavien liuosten tai suspensioiden muodossa.

Edullisia farmaseuttisia koostumuksia valmistuksen ja käytön helppouden kannalta ovat kiinteät koostumukset, erityisesti tabletit ja kovatäytteiset tai nestetäytteiset kapselit.

Tällaiset koostumukset muodostavat myös keksinnön osan. 10 Seuraavat esimerkit, joissa kaikki lämpötilat on esi tetty celsiusasteina, havainnollistavat keksintöä.

Esimerkki 1 2~/Jiydroksi (tetrahydro) -2- (oktadekyylioksimetyyli-5-okso-2-furanyyli)metoksifosfinyylioksi7-N,N,N-trimetyylietaa-15 niaminiumhydroksidin sisäisen suolan 4-oksidi (Alaluokka Ib; rengas c) t R = d^OC^ gH^; kukin = CH^; n = 2, m = 1) a) 1-0-oktadekyyli-3-0-bentsyyliglyserolin valmistus 12,0 g:aan 60-prosenttista natriumhydridiä mineraali- 20 öljyssä (30 mmol; pesty öljyttömäksi käyttämällä petrolieet-teriä) lisättiin 32,4 g (300 mmol) bentsyylialkoholia 200 ml;ssa kuivaa dimetyyliformamidia. Suspensio kuumennettiin typpivirrassa 80°C:seen ja pidettiin tässä lämpötilassa 45 minuuttia, minkä jälkeen lisättiin 63,2 g (0,19 mol) epoksi-25 dia (valmistettu allyylioktadekyylieetterin perhappohapetuk-sella) 100 ml:ssa dimetyyliformamidia ja lämpötila pidettiin 80°C:na 15 tuntia. Sen jälkeen liuotin poistettiin tyhjiössä ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluent-tina petrolieetterin ja dietyylieetterin 3:2 -suhteista seos-30 ta; tällöin saatiin alhaalla sulava vahamainen kiinteä aine.

b) 1-0-oktadekyyli-3-0-bentsyylidihydroksiasetonin vamlistus

Kompleksiin, joka oli valmistettu -60°C:ssa lisäämällä 10,4 ml kuivaa dimetyylisulfoksidia 8,9 g:aan (70 mmol) 35 oksalyylikloridia 150 ml:ssa metyleenikloridia, lisättiin ti- 16 83224 poittain 27,0 g (62,2 mmol) edellä kohdassa a) valmistettua yhdistettä. Seosta sekoitettiin typpiatmosfäärissä 1 tunti, minkä jälkeen lisättiin 50 ml trietyyliamiinia 50 ml:ssa metyleenikloridia ja muodostuneen seoksen annettiin lämmetä 5 0°c:seen 30 minuutin kuluessa, minkä jälkeen se huuhdottiin 75 ml :11a vettä. Kun seoksen oli annettu lämmetä huoneen lämpötilaan, orgaaninen kerros erotettiin, pestiin kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin tyhjiössä, jolloin saatiin öljy, joka 2Q kiinteytyi seistessään. Flash-kromatografoimalla silikagee-lillä käyttäen eluenttina petrolieetterin ja dietyylieette-rin 7:3 -suhteista seosta saatiin valkoinen kiinteä aine.

c) 2-bentsyy1ioks imetyy1i-2-hydroks i-1-oktadekyy1i-oksiheks-5-eenin valmistus 15 1,12 g (8 mmol) 4-bromi-1-buteenia 15 ml:ssa kuivaa eetteriä ja 200 mg magnesiumlastuja saatettiin reagoimaan palautustislauslämpötilassa typpiatmosfäärissä tunnin ajan. Muodostunut Grignard-reagenssi jäähdytettiin -60°C:seen ja sitä käsiteltiin sitten 2,16 g:lla (5 mmol) yhdistettä, joka 20 valmistettiin edellä kohdassa b) ja joka oli 30 ml:ssa eetteriä. Kun seosta oli pidetty 1 tunti -60°C:ssa, se lämmitettiin yön kuluessa huoneen lämpötilaan ja siihen lisättiin kyllästettyä ammoniumasetaatin vesiliuosta ja seoksen kerrokset erotettiin. Orgaaninen kerros pestiin kahdesti am-25 moniumasetaatilla, kerran kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla, minkä jälkeen liuotin poistettiin alipaineessa. Raakatuote puhdistettiin sili-kageelillä käyttäen eluenttina petrolieetterin ja dietyyli-eetterin seosta, jolloin saatiin väritön öljy.

20 d) 5-bentsyylioksimetyyli-2-hydroksi-5-oktadekyyliok- simetyylitetrahydrofuraanin valmistus 6,0 g (12,3 mmol) edellä kohdassa c) valmistettua yhdistettä 100 ml:ssa metyleenikloridia käsiteltiin otsonilla -60°C:ssa. Olefiinin loppumisen jälkeen lisättiin 25 ml 35 dimetyylisulfidia ja seoksen annettiin lämmetä huoneen läm- li i7 83224 potilaan. Liuotin poistettiin tyhjiössä ja raakatuote puhdistettiin silikageelillä käyttäen eluenttina petrolieet-terin ja dietyylieetterin 7:3 -suhteista seosta, jolloin saatiin väritön öljy.

5 e) 5-bentsyylioksimetyyli-5-oktadekyylioksimetyyli-4,5- dihydro-2(3H)-furanonin valmistus

Typpiatmosfäärissä pidettyyn liuokseen, joka muodosti 1,6 g (7,4 mmol) pyridiniumkloorikromaattia 25 mlrssa mety-leenikloridia, lisättiin 13,2 g (6,5 mmol) edellä kohdassa 10 d) valmistettua yhdistettä 25 ml:ssa metyleenikloridia. Kun liuosta oli pidetty 18 tuntia 25°C:ssa, se laimennettiin 150 ml:lla eetteriä, suodatettiin silikageelin läpi ja suo-dos haihdutettiin, niin että saatiin öljy. öljy flash-kroma-tografoitiin sitten silikageelillä käyttäen eluenttina pet-15 rolieetterin ja dietyylieetterin 7:3 -suhteista seosta, jolloin saatiin väritön öljy.

f) 5-hydroksimetyyli-5-oktadekyylioksimetyyli-4,5-dihydro-2(3H)-furanonin valmistus

Seos, joka sisäksi 10,7 g (21,83 mmol) edellä kohdas-20 sa e) valmistettua yhdistettä, 300 ml etyylialkoholin ja veden 9:1 -suhteistaseosta ja 1,5 g 5-prosenttista palla-dium-hiilikatalysaattoria (vesipitoisuus 50 %), pantiin pai-nepulloon ja hydrattiin 40°C:ssa vedyn paineessa 345 kPa (50 lbs), kunnes vedyn kulutus päättyi. Sen jälkeen kataly-25 saattori suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin tyhjössä. Jäännös kiteytettiin metanolista, jolloin saatiin kiinteä aine.

g) Otsikon yhdisteen valmistus 860 mg:aan (2,16 mmol) edellä kohdassa f) valmistet-30 tua yhdistettä, 29 mgsaan (0,24 mmol) 4-dimetyyliaminopyri-diiniä ja 0,42 ml:aan (3 mmol) trietyyliamiinia 10 ml:ssa bentseeniä lisättiin 455 mg (3,2 mmol) 2-kloori-2-okso-1,3,2-dioksafosfolaania. Muodostunutta seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 18 tuntia, minkä jälkeen se suodatet-35 tiin ja suodos haihdutettiin kuiviin. Jäännös otettiin ie 83224 10 ml:aan kuivaa asetonitriiliä, jäähdytettiin kondensoituneen trimetyyliamiinin ylimäärän viemiseksi siihen ja kuumennettiin sitten suljetussa putkessa paineen alaisena 20 tuntia 70°C:ssa. Sen jälkeen reaktioseos jäähdytettiin 5 huoneen lämpötilaan, laimennettiin yhtä suurella tilavuudella asetonitriiliä ja suodatettiin, jolloin saatiin valkoinen kiinteä aine, joka uudelleenkiteytettiin metyleenikloridin ja asetonin seoksesta, jolloin saatiin kiinteä aine, sp. 215-220°C (hajoaa).

10 Esimerkki 2 2-hydroksi/tetrahydro-2-(oktadekyyli-5-okso-2-furanyy-li)metoksifosfinyylioksi7-N,N,N-trimetyylietaaniaminiumhyd-roksidin sisäisen suolan 4-oksidi (Alaluokka Ib; rengas c), R = C^gH^y? m = 1, n = 2, kukin 15 = CHg), analogisesti esimerkin 1 kanssa, sp. 235-240°C.

Esimerkki 3 2~Zhydroksi(tetrahydro)-2-(2-oktadekyylioksietyyli)- 5-okso-2-furanyyli7metoksifosfinyylioksi)-Ν,Ν,Ν-trimetyyli-etaaniaminiumhydroksidin sisäisen suolan 4-oksidi 20 (Alaluokka 1b; rengas c), R = CH2CH2OC^gHg7; m = 1, n = 2, kukin R^ = CH^) analogisesti esimerkin 1 kanssa, sp. 107°C (hajoaa).

Esimerkki 4 2-/piydroksi-2-Ztetrahydro-2- (oktadekyylioksimetyyli) -5-25 okso-2-furanyyli7etoksifosfinyylioksi7~N,N,N-trimetyylietaa- niaminiumhydroksidin sisäisen suolan 4-oksidi (Alaluokka 1b; rengas c) , R = CH2OC.jgH^; m = 2, n = 2, kukin R^ = CH^) analogisesti esimerkin 1 kanssa, sp. 145°C (hajoaa). Esimerkki 5 30 2-£*(2-oktadekyylioksimetyylitetrahydro-2-furanyyli- metoksi)hydroksifosfinyylioksi/-N,N,N-trimetyylietaaniaminium-hydroksidin sisäisen suolan 4-oksidi (Alaluokka Ia; rengas a), R = CHgOC gH^, m = 1, n = 2, kukin R1 = CHg).

II

19 83224 a) Tetrahydro-2-oktadekyylioksimetyyli-2-furaani-metanolin valmistus

Seokseen, jonka muodostivat 2,64 g (0,020 mol) 2,2-bis(hydroksimetyyli)tetrahydrofuraania ja 2,2 g (0,0066 mol) 5 bromioktadekaania 8 ml:ssa dimetyylisulfoksidin ja tetrahyd- rofuraanin 1:1 -suhteista seosta, lisättiin 1,84 g (0,0264 mol) hienoksi jauhettua kaliumhydroksidia. Muodostunutta seosta sekoitettiin sitten huoneen lämpötilassa 2 tuntia, minkä jälkeen se kaadettiin 100 ml:aan vettä, 10 laimennettiin kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksel la ja uutettiin eetterillä. Eetterikerros pestiin sitten kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja eetteri poistettiin alipaineessa. Raakatuote puhdistettiin sitten pylväskromatografoimal-15 la silikageelillä käyttäen eluenttina metyyli-t-butyylieet- terin ja heksaanin (suhde 3:1) seosta, jolloin saatiin haluttu yhdiste vahana.

Otsikon yhdiste valmistetaan analogisesti esimerkin 1 viimeisen vaiheen kanssa; valkoinen kiinteä aine, sp.

. 20 23 2-235°C.

Esimerkki 6 2-/hydroksi(tetrahydro)-3-(oktadekyyli-5-okso-3-fu-ranyyli)metoksifosfinyylioksi7-N,N,N-trimetyylietaaniami-niumhydroksidin sisäisen suolan 4-oksidi 25 (Alaluokka Ie; R = C^gH^, m = 1, n = 2, kukin R^ = CHg) a) 2-bentsyylioksimetyyli-1-eikosaanin valmistus

Suspensioon, jonka muodosti 5,0 g metyylitrifenyy-lifosfoniumbromidia 50 ml:ssa vedetöntä tetrahydrofuraania ja 4,0 ml heksametyylifosforitriamidia, lisättiin se-30 koittaen ja vähitellen 27 ml 0,5-molaarista kalium-bis- trimetyylisilyyliamidia. Muodostunutta seosta sekoitettiin sitten huoneen lämpötilassa 30 minuuttia, minkä jälkeen se jäähdytettiin -60°C:seen (kuiva jää/asetoni -haude) ja siihen lisättiin tipoittain 8,0 g (210 mmol) esimerkissä 35 2b) valmistettua yhdistettä liuotettuna 50 ml:aan vedetöntä 20 83224 tetrahydrofuraania ja seosta sekoitettiin 1 tunti -60°C:ssa ja 1 tunti jäähauteen lämpötilassa. Kiinteät aineet suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin tyhjiössä, niin että saatiin öljy. öljy kromatografoitiin sitten silikageelil-5 lä käyttäen eluenttina petrolieetterin ja metyyli-t-butyyli-eetterin 9:1 -suhteista seosta, jolloin saatiin keltainen öljy.

b) 3-bentsyylioksimetyyli-3-oktadekyylisyklobutano-nin valmistus 10 Seosta, jonka muodostivat 7,18 g (18 mmol) edellä kohdassa a) valmistettua yhdistettä, 75 ml vedetöntä dietyy-lieetteriä ja 1,4 g sinkki/kupari-paria, sekoitettiin, se peitettiin typellä ja siihen lisättiin tipoittain huoneen lämpötilassa liuos, joka sisälsi 3,63 g (20 mmol) triklooriasetyy-15 likloridia ja 3,06 g (20 mmol) fosforioksikloridia. Kun seosta oli sekoitettu huoneenlämmössä 48 tuntia, suolat suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin tyhjiössä. Jäännös kromatografoitiin sitten silikageelillä käyttäen eluenttina petrolieetterin ja metyyli-t-butyylieetterin 9:1 -suhteista 20 seosta, jolloin saatiin keltainen öljy.

c) 4-bentsyylioksimetyyli-4-oktadekyyli-4,5-dihydro-2(3H)-furanonin valmistus

Sekoitettua liuosta, joka sisälsi 2,27 g (5,1 mmol) edellä kohdassa b) valmistettua yhdistettä ja 2,2 g (12,75 25 mmol) m-klooriperbentsoehappoa 30 ml:ssa vedetöntä metylee- nikloridia, refluksoitiin 10 tuntia typpiatmosfäärissä.

Sen jälkeen reaktioseos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan, pestiin 10 ml:11a 2-molaarista natriumbisulfiittiliuosta, kahdesti 10 ml :11a 2-molaarista natriumbikarbonaattiliuosta 30 ja kerran 10 ml :11a suolaliuosta, minkä jälkeen se kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin, niin että saatiin väritön neste. Neste kromatografoitiin sitten silikageelillä käyttäen eluenttina petrolieetterin ja metyyli-t-butyylieetterin 7:3 -suhteista seosta, jolloin 35 saatiin väritön neste.

il 2i 83224

Valmistusta jatketaan analogisesti esimerkin 1f) ja 1g) kanssa, jolloin saadaan otsikon yhdiste valkoisena kiinteänä aineena, sp. 251-256°C.

Esimerkki 7 5 2-/l3-oktadekyylitetrahydro-3-furanyylimetoksi)hyd- roksifosfinyylioksi7-N,N,N-trimetyylietaaniaminiumhydroksi-din sisäisen suolan 4-oksidi (Alaluokka 1d; R = C18H37; m = 1; n = 2, kukin R1 = CH^) a) 3-bentsyylioksi-3-oktadekyylitetrahydrofuraanin 10 valmistus

Liuos, jonka muodosti 1,0 g (2,1 mmol) esimerkin 6c) yhdistettä 25 ml:ssa vedetöntä tolueenia typpiatmosfäärissä, jäähdytettiin -70°C:seen (metanoli/kuiva jää -haude) ja siihen lisättiin tipoittain 45 minuutin kuluessa 3,2 ml 1,0-mo-15 laarista di-isobutyylialumiinihydridiä. Muodostunutta seos ta sekoitettiin sitten vielä 2 tuntia, jolloin lämpötila pidettiin -70°:na, minkä jälkeen se kaadettiin varovasti seokseen, jonka muodosti 1 ml etikkahappoa ja 80 g jää/vesi -seosta. Orgaaninen kerros erotettiin sen jälkeen ja vesikerrosta 20 uutettiin kahdesti 20 ml:11a tolueenia. Yhdistetyt toluee- nikerrokset pestiin 20 ml:11a 1-normaalista natriumbikarbo-naattiliuosta ja kahdesti 20 ml:lla suolaliuosta, minkä jälkeen ne kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin öljyksi, öljy liuotettiin sitten liuokseen, 25 joka sisälsi 0,366 g (3,15 mmol) trietyylisilaania ja 10 ml kuivaa metyleenikloridia, jäähdytettiin -20°C:seen (isopro-panoli/kuiva jää -haude) ja siihen lisättiin 0,326 g (2,3 mmol) booritrifluoridieteraattia. Muodostunutta seosta sekoitettiin sitten tunnin ajan samalla kun lämpötila 30 pidettiin -20°C:ssa, minkä jälkeen lisättiin 5 ml 1-normaa-lista natriumbikarbonaattiliuosta ja seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan. Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin 5 mlrlla suolaliuosta, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin tyhjiös-35 sä, niin että saatiin öljy. öljy kromatografoitiin silika- 22 geelillä käyttäen eluenttina petrolieetterin ja metyyli-t-butyylieetterin 9:1 -suhteista seosta, jolloin saatiin öljy.

Valmistusta jatketaan analogisesti esimerkin 1f) ja 1g) kanssa, jolloin saadaan otsikon yhdiste valkoisena kiin-5 teänä aineena, sp. 235-241°C (hajoaa).

Esimerkki 8 2-_/hydroksi (tetrahydro) -3- (oktadekyylioksimetyyli- 5-okso-3-furanyyli)metoksifosfinyylioks\7-N,N,N-trimetyyli- etaaniaminiumhydroksidin sisäisen suolan 4-oksidi 10 (Alaluokka Ie; R = gH.^, m = 1, n = 2, kukin = CHg) analogisesti esimerkkien 6a), b), c), 1f) ja 1g) kanssa; val- o koinen kiinteä aine, sp. 220-225 C (hajoaa).

Esimerkki 9 2-hydroksi-/J-oktadekyylioksikarbonyyli-3-piperidinyy-15 limetoksi7fosfinyylioksi^-N,N,Ν-trimetyylietaaniaminiumhyd- roksidin sisäisen suolan 4-oksidi (Alaluokka Ie; Rg = OC^Hg^; m = 1, n = 2, kukin R^ = CH^) a) 3-hydroksimetyyli-N-oktadekyylioksikarbonyylipi-peridiinin valmistus 20 Liuokseen, jonka muodostivat 10,52 g (91 mmol) 3-pi- peridiinimetanolia 100 ml:ssa dikloorimetaania ja 13,3 ml (96 mmol) trietyyliamiinia, lisättiin huoneen lämpötilassa liuos, jonka muodosti 87 mmol oktadekyyliklooriformaattia tolueenissa. Muodostuneen seoksen annettiin sitten reagoi-25 da 24 tuntia, minkä jälkeen se pestiin vedellä. Vesiker- rosta uutettiin sen jälkeen kahdesti dikloorimetaanilla ja orgaaniset kerrokset yhdistettiin, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja suodatettiin. Liuotin poistettiin tyhjiössä, jolloin saatiin raakatuote kiinteänä aineena. Raakatuote - 30 kromatografoitiin sitten silikageelillä käyttäen eluentti na dikloorimetaania, jolloin saatiin valkoinen kiinteä aine. Otsikon yhdisteen valmistus 0,5 g (1,22 mmol) edellä kohdassa a) valmistettua yhdistettä liuotettiin 20 ml:aan bentseeniä, joka sisälsi 35 15 mg Ν,Ν-dimetyyliaminopyridiiniä ja 0,21 ml (1,52 mmol) li 23 83224 trietyyliamiinia. Seokseen lisättiin 0,23 g (1,62 mmol) 2-kloori-2-okso-1,3,2-dioksafosfolaania ja muodostunutta seosta sekoitettiin huoneen lämmössä 2 tuntia. Suolat poistettiin sen jälkeen suodattamalla ja jäännös otettiin kui-5 vaan asetonitriiliin, joka jäähdytettiin sitten -78°C:seen.

Sen jälkeen seokseen kondensoitiin trimetyyliamiinia, reak-tioastia suljettiin, lämmitettiin 60°C:seen ja pidettiin tässä lämpötilassa 24 tuntia. Sen jälkeen reaktioseos jäähdytettiin jää/metanoli-hauteessa ja kiinteät aineet erotet-10 tiin suodattamalla, pestiin asetonitriilillä ja kuivattiin tyhjiössä, jolloin saatiin raakatuote. Raakatuote kromato-grafoitiin sitten silikageelillä käyttäen eluenttina kloroformin, metanolin ja veden seosta (suhde 2:1:0,2), jolloin saatiin valkoinen kiinteä aine, sp. > 230°C.

15 Esimerkki 10 .· : 2-hydroksi-/i-heksadekyylioksikarbonyyli-3-piperidi- nyy1imetoksi7fosfinyy1ioksi/-N,N,N-trimetyy1ietaaniaminium-hydroksidin sisäisen suolan 4-oksidi — (Alaluokka Ie; R-, = 0C.,Ho-,, m = 1, n = 2, kukin R. = CH.,) 20 analogisesti esimerkin 9 kanssa, valkoinen kiinteä aine, sp. > 230°C.

Esimerkki 11 2-hydroksi-/*1 -heksadekanoyyli-3-piperidinyylimetoksi_7-fosfinyylioksi7-N,N,N-trimetyylietaaniaminiumhydroksidin 25 sisäisen suolan 4-oksidi (Alaluokka 1e; R^ = m = 1, n = 2, kukin R^ = CH^) analogisesti esimerkin 9 kanssa, valkoinen kiinteä aine, sp. 229°C.

Esimerkki 12 30 6-hydroksi-Zj~oktadekyylioksikarbonyyli-3-piperidi- nyylimetoks i7fosf inyylioks i^-N,N,N-trimetyy1iheksaaniaminium-hydroksidin sisäisen suolan 8-oksidi (Alaluokka Ie; R^ = OC^gH^, m = 1, n = 6, kukin R^ = CH^) 10 ml:aan kuivaa bentseeniä, joka sisälsi 0,358 g 35 (1,2 mmol) 6-bromiheksyylioksifosforidikloridaattia, lisät- 24 8 3 2 2 4 tiin 0,411 g (1,0 mmol) esimerkin 1a) yhdistettä ja muodostunut seos jäähdytettiin jää/suolahauteessa, minkä jälkeen siihen lisättiin tipoittain typpiatmosfäärissä liuos, jonka muodosti 103 ^-ul pyridiiniä 1 ml:ssa bentseeniä. Sen 5 jälkeen jää/suola-haude poistettiin ja seoksen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan 6 tunnin kuluessa. Haihtuvat aineosat poistettiin sitten alipaineessa ja jäännös suspen-doitiin 15 ml:aan vettä ja kuumennettiin höyryhauteessa tunnin ajan. Sen jälkeen seos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan, 10 uutettiin kloroformilla ja uutteet kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja liuotin poistettiin tyhjiössä. Jäännöstä käsiteltiin sitten trimetyyliamiinilla analogisesti edellä esimerkin 1 viimeisessä vaiheessa kuvatun tavan kanssa; tällöin saatiin otsikon yhdisteen vetybromidisuola. 15 Vetybromidisuola otettiin 10 ml:aan metanolia, johon oli : suspendoitu 0,310 g hopeakarbonaattia. 90 minuutin kuluttua kiinteät aineet poistettiin suodattamalla ja suodos haihdutettiin tyhjiössä, jolloin saatiin raakatuote. Raakatuote kromatografoitiin silikageelillä käyttäen eluenttina kloro-20 formin, metanolin ja veden seosta (suhde 2:1:0,2), jolloin saatiin valkoinen kiinteä aine, sp. 137-140°C.

Il

Claims

83224 25

1. Menetelmä terapeuttisesti aktiivisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava I 5 R. R 0 R, 4X i ©/ ’ RS <CV* - 0 - P - 0 - (C H 2) n - N·-», 1 0® R, 10 jossa R on vety, g-alkyyli tai tai joissa R2 tarkoittaa C14_lQ-alkyyliä, jokainen R^ on muista riippumatta C^^-alkyyli, m on 1 tai 2, n on kokonaisluku väliltä 2-8 ja R^ ja R^ merkitsevät yhdessä niiden välisen hiiliatomin kanssa ryhmää •N Qi Q< (a) (b) (c) (d) 20 „ „ n 0=C— R Q o b (e) (f) tai (g) . . joissa Rg on alkyyli, alkenyyli, alkynyyli, alkoksi, alkenyy- lioksi tai alkynyylioksi, joissa kussakin on 12-24 hiiliatomia, jolloin siinä tapauksessa, että R4 ja R^ merkitsevät niiden 30 välisen hiiliatomin kanssa (i) rengasta e), R on H, ja (ii) muuta rengasta kuin e), R on muu kuin H, tunnettu siitä, että a) yhdiste, jolla on kaava C 35 26 8 3 2 2 4 R . R 0 *5^ <CH2>m - 0 - '1 * 0 - (CHZ>n - X Ϊ OH _ saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava CC

5 R / 1 N — R-ι CC N 10 joissa R, , R^, R^, m ja n ovat edellä määritellyt ja Y on poistuva ryhmä, tai b) kun n on 2, yhdiste, jolla on kaava L R4 R ° 0

15 Rs <CH2>m - 0 - \ i 0 — saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava CC Λ

2. N — R1 — ;;; joissa R, R1, R4, R5 ja m ovat edellä määritellyt.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että valmistetaan 2- [[(2-oktadekvylioksi-metyylitetrahydro-2-furanyylimetoksi)hydroksifosfinyylioksi)-- - Ν,Ν,Ν-trimetyylietaaniaminiumhydroksidin sisäisen suolan 4- oksidi. ...30

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että valmistetaan 2-{]hydroksi-(1-oktadekyyli-oksikarbonvvli-3-piDeridinvvlimetoksi)fosfinvvlioksi]] -Ν,Ν,Ν-trimetyylietaaniaminiumhydroksidinsisäisen suolan 4-oksidi. 27 83224