FI80887C - Azetidinonderivater, ett foerfarande foer deras framstaellning samt deras anvaendning som intermediater i framstaellning av karbapenem-antibioter. - Google Patents

Description

80887 1 Atsetidinonijohdannaiset, menetelmä niiden valmistamiseksi ja niiden käyttö välituotteina karbapeneemiantibioottien valmistuksessa

Azetidinonderivater, ett förfarande för deras framställning 5 samt deras användning som intermediater i framställning av karbapenem-antibloter •jq Keksinnön kohteena on menetelmä kaavan (IV) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi: is “1 R2 R3 ,

v-V-rV

J_l_!l <iv> o ncqor5 20 (jossa: 25 R1 tarkoittaa vetyä tai hydroksia suojaavaa ryhmää, kuten (C^_g-alkyy-li)^ Si, p-NOj-fenyylialkyylioksikarbonyyli tai allyylioksikarbonyyli; 2 3 R ja R tarkoittavat vetyä tai g-alkyyliä; 4 30 R tarkoittaa C^-Cg-alkyyliryhmää, fenyyliryhmää, N-suojaryhmällä suojattua amino-Cj g-alkyyli- tai pyrrolidinyyliryhmää; ja tarkoittaa vetyä tai karboksia suojaavaa ryhmää, kuten p-NC^-fenyyli-alkyylia tai allyylia.

Tämä keksintö koskee joukkoa uusia atsetidinonijohdannaisia, jotka ovat arvokkaita välituotteina tiettyjen karbapeneemijohdannaisten, joista mo- 35 2 80887 1 nilla on arvokkaita antibioottisia ominaisuuksia, valmistuksessa. Keksintö tarjoaa myös menetelmiä tällaisten atsetidinoni- ja karbapeneemijohdan-nalsten valmistamiseksi.

Karbapeneemit ovat ryhmä -laktaamiyhdlsteitä, joille on tunnusomaista 5 perusrakenne (A): - J=D; o ! 3 . _ Tämä rakenne tunnetaan "karbapeneeminä" ja on perustana yleisesti hyväk-15 sytylle karbapeneemijohdannaisten puolisystemaattiselle nimistölle, jota järjestelmää tässä käytetään.

Vaikka viime vuosina on monia karbapeneemijohdannaisia ehdotettu käytet-2q täväksi antibiootteina, monet niistä kärsivät ongelmasta, joka on yleinen lääketeollisuudessa: nimittäin siitä, että näiden yhdisteiden valmistus on vaikeaa tai toteutettavissa vain alhaisin saannoin. Näiden ongelmien syntyyn voi olla useita syitä, esimerkiksi voivat lähtöaineet olla vaikeita, jopa mahdottomia valmistaa taloudellisesti tai ne voivat olla 25 saatavissa vain rajoitetusti tai korkealla hinnalla; tai vaihtoehtoisesti voi kokonaissaanto siinä vaiheessa, kun karbapeneemlyhdistelden tuottamiseksi tavallisesti tarvittavat monet menetelmävaiheet on suoritettu, olla niin pieni, että se tekee menetelmästä epätaloudellisen.

2Q Samanaikaisesti vireillä olevassa patenttihakemuksessa US 407.914, tehty 13. elokuuta 1982, on selitetty joukko erinomaisen antibioottisen tehon omaavia karbapeneemijohdannaisia ja on myös selitetty menetelmä tällaisten yhdisteiden valmistamiseksi.

gg Toinen menetelmä, jota voidaan käyttää edellämainitussa US-patenttihake-muksessa selitetyn tyyppisten yhdisteiden valmistamiseksi, on selitetty 3 80887 1 patenttijulkaisussa EP 58317. Tässä EP-patenttijulkaisussa selitetty menetelmä käsittää kaavan (B) mukaisen yhdisteen: 5 _r^X^C/Z^· Rb JUI s ° ^c=o p/

10 · R

(jossa: R tarkoittaa vetyatomia, alkyyliryhmää, asyyliaminoryhmää tai substituoitua alkyyliryhmää; voi tarkoittaa monia erilaisia orgaanisia ryhmiä mukaanlukien alkyyli- ja aryyliryhmät, jotka voivat olla substitu-oltuja tai substltuolmattomia; R tarkoittaa mm. karboksyyliryhmää tai esteröityä karboksyyliryhmää; Z tarkoittaa mm. rikki- tai happiatomia; ja X tarkoittaa rikki- tai happiatomia tai metyleeniryhmää) saattamisen reagoimaan trialkyylifosfIitin kanssa lämpötilassa alueella 20-80°C.

2q Afonso £t ai. ovat ilmoittaneet J.Am.Chem.Soc., 104 (1982), p. 6138 , että olosuhteet, joissa tämä reaktio suoritetaan, ovat hyvin kriittiset, koska näiden kahden yhdisteen reaktio voi synnyttää kaavan (C) mukaisen fosforanylideeniyhdisteen: 25 R? ,1^ h s-r' r ^Rb I 11

-H S

30 C = P|Rd],

Rc 35 (jossa Ra, R^, RC, X ja Z ovat edellä määritellyt ja tarkoittaa alkok- 4 80887 1 siryhmää). Tässä fosforanylideenijohdannainen ei syklisoldu peneemi- tai karbapeneemiyhdisteeksi ja edustaa siten hukkaan menevää sivutuotetta.

Lisäksi ovat Ponsford et ai. (J.C.S., Chem.Comm., 1979, p. 847), Oida 5 ££. ai. Chem.Pharm.Bull., 28 (1980), p. 3494 ja Kametani £t ai. (J.C.S.,

Perkin I, 1981, p. 964) ilmoittaneet, että on erittäin vaikeaa toteuttaa molekyylin sisäinen Wittig-reaktio yhdisteillä, joilla on kaava (C), mutta joissa rikkiatomi on korvattu happiatomilla ja X on metyleeniryhmä, Z on rikkiatomi ja on fenyyliryhmä. Edellämainitussa EP-patenttihake- Ί0 muksessa selitetyssä menetelmässä eräs tapa kaavan (B) mukaisen lähtöaineen valmistamiseksi käsittää todellakin vaiheen, jossa karbonyylin happiatomi korvataan rikkiatomilla (katso esimerkiksi valmistukset R, S, T ja U).

-jij Olemme nyt keksineet, että yhdisteet, jotka ovat kaavan (B) kaltaisia, joissa X tarkoittaa metyleeniryhmää ja R tarkoittaa tiettyä, rajoitettua substituenttlen joukkoa, mutta joissa rikkiatomi on korvattu happiatomilla, voidaan saattaa reagoimaan rajoitetun joukon fosfiitteja ja fosfori (III) amideja kanssa uusiksi, kaavan (C) mukaisten yhdisteiden 20 kaltaisiksi yhdisteiksi ja että yllättäen nämä uudet yhdisteet voidaan helposti syklisoida erilaisiksi karbapeneemijohdannaisiksi, joista monet ovat huomattavan kiintoisia antibiootteina. Tietyt näin valmistetuista karbapeneemijohdannaisista on selitetty samanaikaisesti vireillä olevas-·;- sa US-patenttihakemuksessa 407.914, tehty 13. elokuuta 1982.

V 25 Tämän keksinnön mukaiset atsetidinoniyhdisteet, jotka ovat arvokkaita välituotteina monien erilaisten karbapeneemiantibioottien valmistamiseksi, voidaan esittää kaavalla (I): 3° OR1 RJ R3 ΛιΤ J-N ° e U) 35 0 >=P(RS13 COOR5 5 80887 1 jossa: R^ tarkoittaa vetyä tai hydroksia suojaavaa ryhmää, kuten (C -alkvy- 1-0 li)^ Si, p-NOj-fenyylialkyylioksikarbonyyli tai allyylioksikarbonyyli; 5 2 3 R ja R tarkoittavat vetyä tai ^-alkyyliä; 4 R tarkoittaa C^-Cg-alkyyliryhmää, fenyyliryhmää, N-suojaryhmällä suojattua amino-C^ g-alkyyli- tai pyrrolidinyyliryhmää; 10 R^ tarkoittaa vetyä tai karboksia suojaavaa ryhmää, kuten p-NC^-fenyyli-alkyylia tai allyylia ja R^ tarkoittaa Cj_g-alkoksia.

15

Julkaisussa EP-A-0045198 on kuvattu samantapaisia yhdisteitä kuin kaavan (1) mukaiset, mutta ne eroavat ryhmän R^ olennaisesta asemasta. Esillä olevassa keksinnössä kaavan R mukaiset ryhmät on sidottu happi- ja typpiatomilla keskeiseen fosforiin, kun taas julkaisussa EP-A-0045198 20 esitetään ainoastaan suora hiili-fostori-sidonta.

Keksinnön mukainen menetelmä kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi on pääasiassa tunnettu siitä, että saatetaan kaavan (II) mukainen yhdiste: 25 08' j2 r3 v dV”1 30 ® ^>=0 COOR5 fII) j 2 3 4 3 (jossa R , R , R , R ja R ovat edellä määritellyt) reagoimaan kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa: 35 P(R6)3 (III) 6 80887 j (ja tarkoittaa g-alkoksia) kaavan (I) mukaisen yhdisteen saamiseksi: 5 ORI r3 J-N 5 (I) 0 4'>=P(R6h 10 C00R5 1 2 3 A 5 6 jossa R , R , R , R , RJ ja R ovat edellä määritellyt) ja syklisoidaan kaavan (I) mukainen yhdiste kaavan IV mukaisen yhdisteen saamiseksi.

Kaavojen (I), (II) ja (IV) mukaisissa yhdisteissä on R* vetyatomi tai hyd-roksia suojaava ryhmä. Koska hydroksla suojaavan ryhmän tarkoitus on pelkästään suojata hydroksiryhmää hyökkäykseltä kaavojen (I) ja (IV) mukais-2q ten yhdisteiden valmistukseen johtavien reaktioiden aikana, ja koska tämä hydroksia suojaava ryhmä tavallisesti ja edullisesti poistetaan kaavan (IV) mukaisen yhdisteen valmistamisen jälkeen, jolloin jää vapaa hydroksi-ryhmä, ei käytettävän hydroksia suojaavan ryhmän luonne ole kriittinen ·;· tälle keksinnölle ja voidaan käyttää mitä tahansa alalla tunnettua, hydrok- ·*; 25 siä suojaavaa ryhmää. Esimerkkejä suojaryhmistä, joita voidaan käyttää tällaisten alkoholisten hydroksiryhmien suojaamiseksi, ovat: silyyliryh-mät, kuten trimetyylisllyyli-, t-butyylidimetyylisilyyli- tai trifenyyli-1 silyyliryhmät; aralkyyliryhmät, kuten bentsyyli-, p-nitrobentsyyli-, o- * nitrobentsyyli- tai m-metoksibetnsyyliryhmät; substituoidut oksikarbonyy- 0Q liryhmät, kuten bentsyylioksikarbonyyli-, p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-, o-nitrobentsyylioksikarbonyyli-, allyylioksikarbonyyli-, 2-klooriallyyli-oksikarbonyyli-, 2-metyyliallyylioksikarbonyyli-, 2,2,2-trikloorietoksi-karbonyyli-, 2,2,2-tribromietoksikarbonyyli-, t-butoksikarbonyyli-, di-: : fenyylimetoksikarbonyyli- tai 2-(trimetyylisilyyli)etoksikarbonyyliryh- gg mät; eetteriryhmät, kuten tetrahydropyranyyli-, metoksimetyyli-, 1-etoksi-" etyyli- tai 2-(trimetyylisllyyli)etoksimetyyliryhmät: ja klooriasetyyli- ryhmä. Korostettakoon kuitenkin sitä, että nämä ryhmät on annettu vain 7 80887 1 esimerkkinä ja voidaan rajoituksetta käyttää suurta joukkoa tavanomaisia hydroksla suojaavia ryhmiä.

4

Kun R tarkoittaa Cj-Cg-alkyyliryhmää, se on edullisemmin C^-C^, ryhmä ja g voi olla suora- tai haaraketjuinen ryhmä. Esimerkkejä ovat metyyli-, etyyli-, propyyli- isopropyyli- ja t-butyyliryhmät.

Esimerkkejä substituentelsta, jotka voivat olla liittyneinä rengashiili-atomeihin ovat alkyyli-, alkoksialkyyli-, syanoalkyyli-, haloalkyyli-, jQ alkoksi-, hydroksi-, amino-, aryylioksi-, asyyliamlno-, syano-, atsido-, karboksi-, alkoksikarbonyyli-, karbamoyyli-, alkyylitio-, alkyylisulfi-nyyli-, alkyylisulfonyyli- ja nitroryhmät ja halogeeniatomit. Esimerkkejä substituentelsta, jotka voivat olla liittyneinä rengastyppiatomeihin, ovat alkyyli-, alkenyyli-, alkynyyli-, sykloalkyyli-, sykloalkyylialkyyli-, 15 aryyli-, aralkyyli-, asyyli-, fenasyyli-, sulfo-, alkoksisulfonyyli-, alkyylisulfonyyli-, alkenyyllsulfonyyli-, alkynyylisulfonyyli-, syklo-alkyylisulfonyyli-, sykloalkyylialkyylisulfonyyli-, aryylisulfonyyli-, aralkyylisulfonyyli-, heteroaryylisulfonyyli-, heteroaralkyylisulfonyyli-, alkoksikarbonyyli- ja aralkyylioksikarbonyyliryhmät, samoin kuin ryhmät, 20 joilla on kaava: R10 —C = H - R11 25 (jossa tarkoittaa vetyatomia tai Cj-Cg alkyyliryhmää ja R^ tarkoittaa vetyatomia tai iminoa suojaavaa ryhmää); ryhmät, joilla on kaava 30

-C-HC

35 1 ‘ 12 13 (jossa R ja R ovat samoja tai erilaisia ja kumpikin tarkoittaa vety- 8 80887 1 atomia tai Cj-Cg alkyyliryhmää ja Y tarkoittaa happiatomia, rikkiatomia tai iminoryhmää, jossa valinnaisesti on C^-Cg alkyylisubstituentti).

Edellä mainitut, rengastyppiatomeihin liittyneet substituentit voivat 5 itse olla substituoituja yhdellä tai useammalla seuraavista substituent-tiryhmistä tai -atomeista: Cj-Cg alkyyliryhmät, Cj-Cg alkoksiryhmät, hydroksiryhmät, aminoryhmät, halogeeniatomit, C^-Cg alifaattiset asyyli-ryhmät, syanoryhmät, atsldoryhmät, karboksiryhmät, ^2-^7 alkoksikarbonyy-liryhmät, karbamoyyliryhmät, C^-Cg alkyylitioryhmät, Cj-Cg alkyylisulfi-10 nyyliryhmät, Cj-Cg alkyylisulfonyyliryhmät, nitroryhmät ja ryhmät, joilla on kaava —M=c —«HR15

15 «K

14 15 (jossa R ja R ovat samoja tai erilaisia ja kumpikin tarkoittaa vety-20 atomia tai Cj-Cg alkyyliryhmää).

Erityisen edullisia substituentteja liitettäviksi heterosyklisten ryhmien rengashiiliatomeihin ovat seuraavat: suora- tai haaraketjuiset '·' C^-Cg alkyyliryhmät, kuten metyyli-, etyyli-, propyyli-, isopropyyli-, 25 butyyli-, isobutyyli-, sek.-butyyli-, t-butyyli-, pentyyli- tai isopen-tyyliryhmät; sykloalkyyliryhmät, kuten syklopropyyli-, syklobutyyli-, syklopentyyli- tai sykloheksyyliryhmät; ^-Cg alkoksialkyyliryhmät, kuten metoksimetyyli-, etoksimetyyli-, propoksimetyyli-, isopropoksimetyyli-, butoksimetyyli-, 1-metoksietyyli-, 2-metoksietyyli-, 3-metoksipropyyli-, 30 2-metoksipropyyli- tai 4-etoksibutyyliryhmät: (ar)alkoksikarbonyylialkyy-liryhmät, kuten metoksikarbonyylimetyyli-, etoksikarbonyylimetyyli-, t-butoksikarbonyylimetyyli-, betnsyylioksikarbonyylietyyli- tai metoksi-karbonyylipropyyliryhmät; -C^ syanoalkyyliryhmät, kuten syanometyyli-, - 1-syanoetyyli-, 2-syanoetyyli-, 3-syanopropyyli-, 2-syanopropyyli- tai : 35 4-syanobutyyliryhmät: C^-Cg haloalkyyliryhmät, kuten trifluorimetyyli-, 2-fluorietyyli-, 2,2,2-trifluorietyyli-, 2-kloorietyyli-, 2-bromietyyli-, ' 3-fluoripropyyli-, 2-fluoripropyyli-, 4-klooributyyli- tai 3-fluoributyy- 9 80887 1 liryhmät; suora- tai haaraketjuiset C^-Cg alkoksiryhmät, kuten metoksi-, etoksi-, propoksi-, isopropoksi-, butoksi-, isobutoksi-, sek.-butoksi-tai t-butoksiryhmät; halogeeniatomit, kuten fluori-, kloori-, bromi- tai jodiatomit; C^-Cg alifaattiset asyylioksiryhmät, kuten asetoksi-, propio-5 nyylioksi-, butyylioksi- tai isobutyylioksiryhmät; C^-Cg alifaattiset asyyliaminoryhmät, kuten asetyyliamino-, propionyyliamino-, butyryyli-amino- tai isobutyryyliaminoryhmät; syanoryhmä; atsidoryhmä; karboksiryh-mä; alkoksikarbonyyliryhmät, kuten metoksikarbonyyli-, etoksikarbo- nyyli-, propoksikarbonyyli-, isopropoksikarbonyyli-, butoksikarbonyyli-, 1Q isobutoksikarbonyyli-, sek.-butoksikarbonyyli- tai t-butoksikarbonyyli-ryhmät; karbamoyyliryhmä; suora- tai haaraketjuiset Cj-Cg alkyylitioryh-mät, kuten metyylitio-, etyylitio-, propyylitio-, isopropyylitio-, butyy-litio- tai isobutyylitioryhmät; suora- tai haaraketjuiset C^-Cg alkyyli-sulfinyyliryhmät, kuten metyylisulfinyyli-, etyylisulfinyyli-, propyyli--J5 sulfinyyli-, isopropyylisulfinyyli-, butyylisulfinyyli- tai isobutyyli-sulfinyyliryhmät; suora- tai haaraketjuiset Cj-Cg alkyylisulfonyyliryh-mät, kuten metyylisulfonyyli-, etyylisulfonyyli-, propyylisulfonyyli-, isopropyylisulfonyyli-, butyylisulfonyyli- tai isobutyylisulfonyyliryh-mät; ja nitroryhmä.

20

Erityisen edullisia substituentteja edellä mainittujen alisyklisten hete-rosyklisten ryhmien rengastyppiatomeihin liitettäviksi ovat: suora- tai haaraketjuiset C^-Cg alkyyliryhmät, kuten metyyli-, etyyli-, propyyli-, isopropyyli-, butyyli-, isobutyyli-, sek.-butyyli-, t-butyyli-, pentyyli-25 tai isopentyyliryhmät; ^2~^β ®lkenyyliryhmät, kuten vinyyli-, allyyli-, 1-propenyyli-, isopropenyyli-, 2-butenyyli- tai 2-pentenyyliryhmät; C2~Cg alkynyyliryhmät, kuten etynyyli-, 2-propynyyli-, 2-butynyyli- tai 4-pentynyyliryhmät; C^-Cg sykloalkyyliryhmät, kuten syklopropyyli-, syklobutyyli-, syklopentyyli-, sykloheksyyli- tai sykloheptyyliryhmät; 30 sykloalkyylialkyyliryhmät, kuten syklopropyylimetyyli-, syklobutyylime-tyyli-, syklopentyylimetyyli-, sykloheksyylimetyyli-, sykloheptyylime-tyyli-, 2-syklopentyylihetyyli-, 2-sykloheksyylietyyli-, 3-syklopentyyli-propyyli-, 2-syklopentyylipropyyli-, 3-sykloheksyylipropyyli-,2-syklohek-syylipropyyli-, 4-syklopentyylibutyyli- tai 3-sykloheksyylibutyyliryhmät; 35 aryyliryhmät, kuten fenyyli- tai naftyyliryhmät; aralkyyliryhmät, kuten bentsyyli-, fenetyyli- tai 3-fenyylipropyyliryhmät; Cj-Cg alifaattiset asyyliryhmät, kuten formyyli-, asetyyli-, propionyyli-, butyryyli-, iso- 10 80887 1 butyryyli-, akryloyyli-, metakryloyyli-, krotonoyyli-, isokrotonoyyli-, propioloyyli- tai metyylipropioloyyliryhnät; sykloalkaanikarbonyyliryh-mät, kuten syklopropaanlkarbonyyli-, syklobutaanikarbonyyli-, syklopen-taanikarbonyyli- tai sykloheksaanikarbonyyliryhmat; sykloalkyylialkano-g yyliryhmät, kuten syklopropyyliasetyyli-, syklobutyyliasetyyli-, syklo-pentyyliasetyyli-, sykloheksyyliasetyyli-, 3-syklopentyylipropionyyli-, 3-sykloheksyylipropionyyli-, 4-syklopentyylibutyryyli- tai 4-sykloheksyy-libutyryyliryhmät; aromaattiset asyyliryhmät, kuten bentsoyyli-, I-nafto-yyli- tai 2-naftoyyliryhmät; aralifaattiset asyyliryhmät, kuten fenyyli-Ίq asetyyli-, 1-naftyyliasetyyli-, 3-fenyylipropionyyli-, hydratropoyyli-, kinnamoyyli- tai fenyylipropioloyyliryhmät; heterosykliset asyyliryhmät, kuten furoyyli-, tenoyyli-, nikotinoyyli-, isonikotinoyyli-, 4-tiatsoli-karbonyyli-, 5-pyrimidiinikarbonyyli- tai 2-pyratsiinikarbonyyliryhmät, heterosyklisesti substituoidut alifaattiset asyyliryhmät, kuten 2-tienyy-15 liasetyyli-, 3-(2-tienyyli)propionyyli-, 4-tiatsolyyliasetyyli-, 2-pyri-dyyliasetyyli-, 4-pyridyyliasetyyli-, 5-pyrimidinyyliasetyyli-, l-atsi-ridinyyliasetyyli-, 1-atsetidinyyliasetyyli-, 3-atsetidinyyliasetyyli-, 1- pyrrolidinyyliasetyyli-, 2-pyrrolidinyyliasetyyli-, 3-pyrrolidinyyliasetyyli-, 3-(2-pyrrolidinyyli)propionyyli-, piperidinoasetyyli-, 2-piperi- ·- 20 dinyyliasetyyli-, 4-piperidinyyliasetyyli- tai morfolinoasetyyliryhmät; .·. heterosyklyylikarbonyyliryhmät, kuten 1-atsiridiinikarbonyyli-, 1-atse- tidiinikarbonyyli-, 3-atsetidiinikarbonyyli-, 1-pyrrolidiinikarbonyyli-, 2- pyrrolidiinikarbonyyli-, 3-pyrrolidiinikarbonyyli-, 1-piperidiinikar-bonyyli-, 2-piperidiinikarbonyyli-, 4-piperidiinikarbonyyli- tai 4-mor- 25 foliinikarbonyyliryhmät; fenasyyliryhmä; sulforyhmä; C^-C^ alkoksisulfo-nyyliryhmät, kuten metoksisulfonyyli-, etoksisulfonyyli-, propoksisulfo-nyyli- tai isopropoksisulfonyyliryhmät; suora- tai haaraketjuiset C^-C^ alkyylisulfonyyliryhmät, kuten metyylisulfonyyli-, etyylisulfonyyli-, propyylisulfonyyli-, isopropyylisulfonyyli-, butyylisulfonyyli- tai : 30 isobutyylisulfonyyliryhmät; alkenyylisulfonyyliryhmät, kuten allyy- lisulfonyyli-, isopropenyylisulfonyyli- tai 2-butenyylisulfonyyliryhmät; * ; ^2~S> aHtynyylisulf°nyyliry^ln^t» kuten etynyylisulfonyyli-, 2-propymyyli sulfonyyli- tai 2-butyryylisulfonyyliryhmät; sykloalkyylisulfonyyliryh-mät, kuten syklopropyylisulfonyyli-, syklobutyylisulfonyyli-, syklopen-35 tyylisulfonyyli- tai sykloheksyylisulfonyyliryhmät; sykloalkyylialkyyli- j sulfonyyliryhmät, kuten syklopropyylimetyylisulfonyyli-, syklobutyyli- metyylisulfonyyli-, syklopentyylimetyylisulfonyyli-, sykloheksyylimetyy- 11 80887 1 lisulfonyyli-, 2-syklopentyylietyylisulfonyyli-, 2-sykloheksyylietyyli-sulfonyyli-, 3-syklopentyylipropyylisulfonyyli- tai 2-syklopentyylipro-pyylisulfonyyliryhmät; aryylisulfonyyliryhmät, kuten fenyylisulfonyyli-, 1- naftyylisulfonyyli- tai 2-naftyylisulfonyyliryhmät; aralkyylisulfonyyli-5 ryhmät, kuten bentsyylisulfonyyli-, fenetyylisulfonyyli-, 3-fenyylipro- pyylieulfonyyli- tai 2-fenyylipropyylisulfonyyliryhmät; heteroaryylisul-fonyyliryhmät, kuten 2-tienyylisulfonyyli-, 4-tiatsolyylisulfonyyli-, 2- pyridyylisulfonyyli- tai 4-pyridyylisulfonyyliryhmät; heterosykliset aralkyylisulfonyyliryhmät, kuten 2-tienyylimetyylisulfonyyli-, 3—(2— 10 tienyyli)propyylisulfonyyli-, 4-tiatsolyylimetyylisulfonyyli-, 2-pyri-dyylimetyylisulfonyyli- tai 4-pyridyylimetyylisulfonyyliryhraä; ryhmät, joilla on kaava: R10 15 _C = H-fl11 (jossa tarkoittaa vetyatomia tai C.-C, alkyyliryhmää (kuten metyyli-, 1 * il 20 etyyli-, propyyli- tai isopropyyliryhmää) ja R tarkoittaa vetyatomia, allfaattista oksikarbonyyliryhmää (kuten allyylioksikarbonyyli, 2-mety-liallyylioksikarbonyyli-, 2-klooriallyylioksikarbonyyli-, 2,2,2-trikloo-rietoksikarbonyyli- tai 2,2,2-tribromietoksikarbonyyliryhmää) tai aral-·. . kyylioksikarbonyyliryhmää (kuten p-nitrobentsyylioksikarbonyyli- tai 25 o-nitrobentsyylioksikarbonyyliryhmää)]; ryhmät, joilla on kaava: /Rl2

-C-HC

" R13

30 Y

**** 12 13

Jjossa R ja R ovat samoja tai erilaisia ja kumpikin tarkoittaa vety-atomia tai alkyyliryhmää (kuten metyyli-, etyyli-, propyyli- tai 35 isopropyyliryhmää) ja Y tarkoittaa happiatomia, rikkiätornia tai iminoryh-: mää, joka voi valinnaisesti olla substltuoitu C^-C^ alkyyliryhmällä (kuten metyyli-, etyyli-, propyyli- tai isopropyyliryhmällä)] ; alkok- 12 80887 1 sikarbonyyliryhmät, kuten metoksikarbonyyli-, etoksikarbonyyll-, butoksi-karbonyyli-, 2,2,2-trikloorietoksikarbonyj'li- tai 2,2,2-tribromietoksi-karbonyyliryhmät; ja aralkyylioksikarbonyyliryhmät, kuten bentsyylioksi-karbonyyli-, fenetyylioksikarbonyyli-, p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-5 tai o-nitrobentsyylioksikarbonyyliryhmä.

Edellä mainitut typpiatomeihin liittyneet substituentit voivat valinnaisesti olla vielä itse substituoituja yhdellä tai useammalla ryhmällä, jotka on valittu seuraavista: C^-C^ alkyyliryhmät, kuten metyyli-, 10 etyyli-, propyyli- tai isopropyyliryhmä; C^-C^ alkoksiryhmät, kuten metoksi-, etoksi-, propoksi- tai isopropoksiryhmät; hydroksiryhmä; amino-ryhmä; halogeeniatomit, kuten fluori-, kloori- tai bromiatomit; C^-C,. alifaattiset asyylioksiryhmät, kuten asetoksi-, propionyylioksi-, butyy-lioksi- tai isobutyryylioksiryhmät; C^-C,. alifaattiset asyyliaminoryhmät, 15 kuten asetyyliamino-, propionyyliamino-, butyyliamino- tai isobutyryyli-aminoryhmät; syanoryhmä; atsidoryhmä; karboksiryhmä; alkoksikarbo- nyyliryhmät, kuten metoksikarbonyyli-, etoksikarbonyyli-, propoksikarbo-nyyli- tai isopropoksikarbonyyliryhmät; karbamoyyliryhmä; Cj-C^ alkyyli-tioryhmä, kuten metyylitio-, etyylitio-, propyylitio- tai isopropyylitio-·' 20 ryhmä; C^-C^ alkyylisulfinyyliryhmät, kuten metyylisulfinyyli-, etyyli- : sulfinyyli-, propyylisulfinyyli- tai isopropyylisulfinyyliryhmät; C^-C^ alkyylisulfonyyliryhmät, kuten metyylisulfonyyli-, etyylisulfonyyli-, propyylisulfonyyli- tai isopropyylisulfonyyliryhmät; nitroryhmä; ja ryhmät, joilla on kaava 25 -N=C-NHR15

Ru 30 14 15 (jossa R ja R ovat samoja tai erilaisia ja kumpikin tarkoittaa vety-atomia tai C -C^ alkyyllryhmää, kuten metyyli-, etyyli-, propyyli- tai isopropyyliryhmät).

35 4

Kun R tarkoittaa aminoalkyyliryhmää, on aminoryhmä edullisesti suojattu ja esimerkkejä sellaisista ryhmistä ovat 2-(suojattu amino)etyyli-, 2- 13 80887 1 (suojattu amino)-l-metyylietyyli-, 2-(suojattu amino)-l-etyylietyyli-, 3-(suojattu amino)propyyli-, 3-(suojattu amino)-l-metyylipropyyli-, 2-(suojattu amino)-2-metyylietyyli-, 2-(suojattu N-metyyliamino)etyyli-tai 2-(suojattu N-metyyliamino)-1-metyylietyyliryhmät. Samoin kuin hydrok-g siä suojaavien ryhmien, ei käytettävän aminoa suojaavan ryhmän luonne ole kriittinen keksinnön kannalta, koska se tavallisesti ja edullisesti poistetaan reaktiosarjan lopussa ja ennen kaavan (IV) mukaisen karbapeneemi-johdannaisen käyttöä terapiaan. Voidaan siis käyttää suurta joukkoa aminoa suojaavia ryhmiä, ilman erityisiä rajoituksia. Esimerkkejä sopivista 1Q aminoa suojaavista ryhmistä ovat: asyyliryhmät, kuten formyyli-, asetyyli-, kloorietyyli-, propionyyli- tai bentsoyyliryhmät; oksikarbonyyliryhmät, kuten t-butoksikarbonyyli-, 2,2,2-tribromietoksikarbonyyli-, 2-(trimetyy-lisilyy]i)etoksikarbonyyli-, bentsyy1ioksikarbonyyli-, p-nitrobentsyyli-oksikarbonyyli- tai o-nitrobentsyylioksikarbonyyliryhmät.

15 5 R voi tarkoittaa vetyatomia tai karboksia suojaavaa ryhmää. Käytettävän karboksia suojaavan ryhmän luonteelle ei ole mitään erityistä rajoitusta, koska se tavallisesti ja edullisesti poistetaan sen jälkeen, kun tämän keksinnön mukainen reaktiosarja on viety päätökseen. Voidaan siis käyttää 20 mitä tahansa suojaavaa ryhmää, jota yleisesti käytetään -laktaamianti-bioottien yhteydessä. Esimerkkejä sopivista suojaryhmistä ovat: Cj-C^. al-kyyliryhmät, kuten metyyli-, etyyli- tai t-butyyliryhmät; aralkyyliryh-mät, kuten bentsyyli-, difenyylimetyyli-, p-nitrobentsyyli- tai o-nitro-bentsyyliryhmät; alkenyyli- tai substituoidut alkenyyliryhmät, kuten 25 allyyli-, 2-klooriallyyli- tai. 2-metyyliallyyliryhmät; halogeenialkyyli-ryhmät, kuten 2,2,2-kloorietyyli- tai 2,2,2-tribromietyyliryhmät; 2-trimetyylisilyylietyyliryhmä; tai t-butyylikarbonyylioksimetyyliryhmä.

Kun tarkoittaa Cj-C^-alkoksiryhmää, se voi olla suora- tai haaraket-30 juinen ryhmä, esimerkiksi metoksi-, etoksi-, propoksi-, isopropoksi-, butoksi- tai sek.-butoksiryhmät. Kun tarkoittaa aryylioksiryhmää, tämä on edullisesti fenoksiryhmä, joka voi olla substituoitu tai substituoimaton ja esimerkkejä ovat fenoksi-, p-metyylifenoksi- tai p-metoksifenoksiryhmät. Kun R tarkoittaa dialkyyliaminoryhmää, kummas-35 sakin alkyyliryhmässä, jotka voivat olla suora- tai haaraketjuinen ryhmä, on edullisesti 1-6 hiiliatomia ja esimerkkejä ovat dimetyyli-amino-, dietyyliamino-, dipropyyliamino-, di-isopropyyliamino-, dibutyyli- 14 80 887 1 amino-, di-sek.-butyyliamino-, di-t-butyyliamino- tai dipentyyliaraino-ryhmät.

Erityisen edullisia tämän keksinnön kaavan (I) mukaisia yhdisteitä ovat 5 ne yhdisteet, joissa: R* tarkoittaa vetyatomia, trimetyylisilyy]i-, t-butyylidimetyylisilyyli-, p-nitrobentsyyli-, p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-, ailyylioksikarbonyy-li-, 2,2,2-tribromietoksikarbonyyli-, 1-etoksietyyli- tai klooriasetyyli-•jq ryhmää; 2 3 R ja R molemmat tarkoittavat vetyatomeja; 4 R tarkoittaa: Cj-C^-alkyyliryhmää (kuten metyyli-, etyyli- tai t-butyyli-j5 ryhmää); suojattua aminoalkyyliryhmää, kuten suojattua 2-aminoetyyli-, suojattua 2-amino-l-metyylietyyli-, suojattua 2-(2-aminoetoksi)etyyli-tai suojattua 2-(2-aminoetoksi)-l- metyylietyyliryhmää; fenyyliryhmää; alisyklistä heterosyklistä ryhmää, kuten l-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyyli)pyrrolidin- 3-yyli-, l-asetyylipyrrolidin-3-yyli-, 1- N-(p-nitro-20 bentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyli pyrrolidin-3-yyli-, l-(N-metyyli-asetimidoyyli)pyrrolidin-3-yyli-, 1-jN-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-formimidoyyli^ pyrrolidin-3-yyli-, l-(N-metyyliformimidoyyli)pyrrolidin- 3-yyli-, alkyyliryhmää, jossa on alifaattinen heterosyklinen substituent-ti, kuten 1- l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3- yyli 25 etyyli-, l-(l-asetyylipyrrolidin-3-yyli)etyyli-, I—(I— N-(p-nitro- bentsyylioksikarbonyyli)formimidoyyli pyrrolidin-3-yyli)etyyli-, 1—(1 — J^N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyliJpyrrolidin-3-yyli)etyyli-, 30 tarkoittaa vetyatomia tai karboksia suojaavaa ryhmää, kuten metyyli-, t-butyyli-, bentsyyli-, difenyylimetyvli-, p-nitrobentsyyli-, o-nitro-bentsyyli-, allyyli-, 2-klooriallyyli-, 2,2,2-trikloorietyyli-, 2,2,2-tribromietyyli- tai 2-trimetyylisilyylietyyliryhmiä; 35 3a tarkoittaa: Cj-C^-alkoksiryhmää, kuten metoksi-, etoksi-, propoksi-, isopropoksi-, butoksi- tai sek.-butoksiryhmiä.

15 80887 1 Esimerkkejä tämän keksinnön kaavan (I) mukaisista yhdisteistä on annettu seuraavassa luettelossa: 1. 3-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-4-(metyylitio)-karbonyyli-5 metyyli-1-|l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-l-tripropoksifosforanyli- deenimetyyli} -2-atsetidinoni 2. 4-£l-(t-butyylitio)karbonyylietyyli] -3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbo-nyylioksietyyli)-l - £l-(o-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-l-trietoksifos- Ί0 foranylideenimetyylij-2-atsetidinoni 3. 3-(l-klooriasetoksietyyli)-l-[l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-1-tri-isopropoksifosforanylideenimetyyliJ-4-(fenyylitio)karbonyylimetyy-li-2-atsetidinoni 15 4. 3-(l-p-nitrobentsyylioksietyyli)-l-£l-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyyli)-l-trifenoksifosforanylideenimetyyl^-4-(2-p-nitrobentsyylioksi-karbonyylioksletyylitio)karbonyylimetyyli-2-atsetidinoni 20 5. 4-(2-t-butyylidimetyylisilyylioksi-l-metyylietyylitio)karbonyyli- metyyli-3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-l-£l-(p-nitro-bentsyylioksikarbonyyli)-l-tripropoksifosforanylideenimetyyli|-2-atsetidinoni 25 6. l-(l-metallyylioksikarbonyyli-l-trifenoksifosforanylideenimetyyli)- 3-(l-o-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-4-(2-p-nitrobentsyylioksi-karbonyyliaminoetyylitio)karbonyylimetyyli-2-atsetidinoni 7. 3-£l-(2-klooriallyylioksikarbonyylioksi)etyyliJ“4- [l-metyyli-2- 30 (2,2,2-tribromietoksikarbonyyliamino)etyylitio|karbonyylimetyyli-l-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-l-tributoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetidlnoni 8. l-(l-bentshydryylioksikarbonyyli-l-trietoksifosforanylideenimetyyli)-35 3-(l-p-nitrobentsyylioksietyyli)-4-^2-(2-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli- aminoetoksi)etyylitioJkarbonyylimetyyli-2-atsetidinoni is 80887 1 9. 3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-l-(l-p-nitrobentsyyli- 112 oksikarbonyyli-l-trietoksifosforanylideenimetyyli)-4-[(N ,Ν ,N -trimetyyli-amidinometyylitio)karbonyylimetyyliJ-2-atsetidinoni m 10 1 g 10. 3-fl-(t-butyylidimetyylisilyylioksi)etyyli) -4-(N ,N -dimetyyli-N - p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamidinometyylitio)karbonyylimetyyli-l-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-1-trietoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetldlnonl ry 1 i 10 11 · 3~fr -(t-butyylidimetyyli8llyylioksi)etyyl^| -4-(N -etyyli-N ,N -di- metyyliamidinometyylitio)karbonyylimetyyli-1(l-p-nitrobentsyylioksikar-bonyyli-l-trietoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetidinoni 12. 3-£l-(t-butyylidimetyylisilyylioksi)etyyl^-4- 2-metyyli-imino-2- •J5 (1-pyrrolidinyyli)etyylitio karbonyylimetyyli-l-(l-p-nitrobentsyylioksi- karbonyyli-1-trietoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetidinoni 13. 3- [l-(t-butyylidimetyylisilyylioksi)etyyli]-4-[[(l-metyyli-2-imidat-solin-2-yylimetyylitio)karbonyylimetyyli] -l-(1-p-nitrobentsyylioksikarbo- 20 nyyli-l-trietoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetidinoni 1 2 14. 4-£n ,N -bis(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)amidinotiokarbonyylime-tyylij -3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-l-(l-p-nitrobent-syylioksikarbonyyli-l-trietoksifosforanylideenimetyyli)2-atsetidinoni 25 15. 3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-l-(l-p-nitrobentsyy- 1 1 2 lioksikarbonyyli-l-trietoksifosforanylideenimetyyli)-4- 2-(N ,N ,N -tri-metyyliamidino)etyylitio karbonyylimetyyli-2-atsetidinoni 3Q 16. 4-^3-(N^.N^-dimetyyli-N^-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamidinoipro- pyylitioJkarbonyylimetyyli-S-Cl-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi etyyli)- 1- (l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l-trietoksifosforanylideenimetyyli)- 2- atsetidinoni 35 17. 3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-4-[(l-p-nitrobentsyy- lioksikarbonyyli-3-pyrrolidinyylitio)karbonyylimetyyl^-l-(p-nitrobent-syylioksikarbonyyli-1-trietoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetidinoni 17 80887 | 18. 4-£(l-asetoksi-3-pyrrolidinyylitio)karbonyylimetyyliJ -3-(l-p-nitro- bentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-l-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli- 1-trietoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetldinonl g 19. 4- [l-(N-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliasetimidoyyli)-3-pyrrolidinyy- litiojkarbonyylimetyyli-l-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l-tripropok-sifosforanylideenimetyyli)-3-£l-(trinietyylisilyylioksi) etyylij -2-atse-tidinoni IQ 20. 4-£l-(N-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliformimidoyyli)-3-pyrrolidinyy-litio) karbonyylimetyyli-l-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l-tri-iso-propoksifosforanylideenimetyyli)-3-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi-etyyli)-2-atsetidinoni 15 21. 4- [l — (N— p-nitrobentsyylioksikarbonyyliasetimidoyyli)-3-pyrrolidinyy- litioj karbonyylimetyyli-3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-l-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l-tri-isopropoksifosforanylideeni-metyyli)-2-atsetidinoni 20 22. 4-£l-(N-metyyliformimidoyyli)-3-pyrrolidinyylitio| karbonyylimetyyli- 3-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-1-(1-p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli-l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetidinoni 23. l-(l-t-butoksikarbonyyli-l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyyli)-25 4-(4-metoksi-l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-3-pyrrolidinyylitio)karbo- nyylimetyyli-3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-2-atsetidi- noni 24. l-(l-karboksi-l-tritnetok8ifosforanylideenimetyyli)-4-(4-metyylisul-3Q fonyyli-l-p-nitrobent8yyliokeikarbonyyli-3-pyrrolidinyylitio)karbonyyli- . . metyyli-3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-2-atsetidinoni 25. l-(l-bentsyylioksikarbonyyli-l-trietoksifosforanylideenimetyyli)-4-(5-etoksi-l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-3-pyrrolidinyylitio)karbonyy- 35 1imetyyli-3-(1-p-nitrobetnsyylioksikarbonyylioksietyyli)-2-atsetidinoni 26. 3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-l-(l-p-nitrobentsyy- ‘8 80887 1 lioksikarbonyyli-l-trietoksifosforanylideenimetyyli)-4-(1-pnitrobentsyy-lioksikarbonyyli-3-piperidyylitio)karbonyylimetyyli-2-atsetidinoni 27. 4-(5-metoksikarbonyyli-l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-4-piperidyy-g litio)karbonyylimetyyli-3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)- 1- (l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l-trietoksifosforanylideenimetyyli)- 2- atsetidinoni 28. 4-(2-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino-4,5-dihydro-1,3-triatsol-10 5-yylitio)karbonyylimetyyli-3-Q-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli )-1-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l-tris(dimetyyliami.no)fosforan-ylideenimetyyli}-2.-atsetidinoni 29. 4-(2-metyyli-3,4,5,6-tetrahydro-5-pyrimidinyylitio)karbonyylimetyyliin 3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-l-(l-p-nitrobentsyylioksi- karbonyyli-l-trietoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetidinoni 30. 4-(2-metoksimetyyli-l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l,4,5,6-tetra-hydro-5-pyrimidinyylitio)karbonyylimetyyli-3-(l-p-nitrobentsyylioksikar- 20 bonyylioksietyyli)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l-trietoksifosforan-ylideenimetyyli)-2-atsetidinoni 31. 4-(2-metoksikarbonyylimetyyli-l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli- 1,4,5,6-tetrahydro-5-pyrimidinyylitio)karbonyylime tyyli-1-(p-nitrobent-25 syylioksikarbonyyli-l-trietoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetidinoni 32. 4- £l-(4-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-2-morfolinyyli)etyylitio]kar-bonyylimetyyli-3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-l-(1-p-nit-robentsyylioksikarbonyyli-l-tripropoksifosforanylideenimetyyli)-2-atse- 30 tidinoni 33. 4-[l-(4-asetyyli-2-morfolinyyli)etyylitioJ karbonyylimetyyli-3- (1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-1-(1-p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli-l-tripropoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetidinoni 35 34. 4-(l-£4-(N-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliasetimidoyyli)-2-morfoli-nyyli^Jetyylitio)karbonyylimetyyli-3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliok- » 80887 1 sietyyli)-l-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l-tripropoksifosforanyli-deenimetyyli)-2-atsetidinoni 35. 3-(l-t-butyylidiraetyylisilyylioksietyyli)-4-(l- 4-(N-p-nitrobentsyy-5 lioksikarbonyyliformimidoyyli)-3-piperidyyli etyylitio)karbonyylimetyyli- 1- (l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l-tripropoksifosforanylideenimetyyli)- 2- atsetidinoni 36. 3-(1-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-4- £l-(1-p-nitrobentsyyli-10 oksikarbonyyli-3-pyrrolidinyyli)etyylitio karbonyylimetyyli-l-£Jl-p-nitro- bentsyylioksikarbonyyli-l-tris(dipropyyliamino)fosforanylideenimetyyli -2-atsetidinoni 37. 4-£l-(l-asetyyli-3-pyrrolidinyyli)etyylitioJ karbonyylimetyyli-3-15 (l-t-butyylidlmetyylisilyylioksietyyli)-l-(l-p-nitrobentsyylioksikarbo- nyyli-1-trietoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetidinoni 38. 3-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-4-(l-£l-(N-p-nitrobentsyy-lioksikarbonyyliformimidoyyli)-3-pyrrolidinyyli)etyylItio)karbonyyliinetyy- 20 li-l-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l-trietoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetidinoni 39. 3-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-4-(l-Q-(N-p-nitrobentsyy-lioksikarbonyyliasetimidoyyli)-3-pyrrolidinyyli]etyylitio)karbonyyliraetyy- 25 li-1- £l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l-tris(dibutyyliamino)fosforanyli- deenimetyylij-2-atsetidinoni 40. 3-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-l-(l-p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli-l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyyli)-4-(2-pyridyylitio) 30 karbonyylimetyyli-2-atsetidinoni 41. 3-(l-t-butyylimetyylisilyylioksietyyli)-l-(l-karboksi-l-tri-isopro-poksifosforanylideenimetyyli)-4-(3-pyridyylitio)karbonyylimetyyli-2-atsetidinoni 35 42. 3-(1-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-1-(1-p-nitrobentsyylioksi- 20 8 0 8 8 7 1 karbonyyli-l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyyli)-4-(4-pyridyylitio) karbonyylimetyyli-2-atsetidinoni 43. 3-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-l-(l-p-nitrobentsyylioksi-g karbonyyli-l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyyli)-4-(2-tienyylitio) karbonyylimetyyli-2-atsetidinoni 44. 3-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-l-(l-p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli-l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyy11)-4-(4-nitro-2-furyyli- j q t io) karbonyyliroetyyli-2-atsetidinoni 45. 3-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyl1)-1-(1-p-nitrobentsyy-lloksikarbonyyll-l-trletoksifosforanylideenimetyyli)-4- [l-(2-(l,3,5-tri-atsinyyll)tlo)karbonyylimetyyli] -2-atsetidinoni 15 46. 4-(2-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino-4-imidatsolyylitio)karbo-nyylimetyyli-3-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-l-(l-p-nitro-benstyyliokslkarbonyyll-1-trletokslfosforanylideenimetyyli)-2-atsetidinoni 20 47. 4-(2-metoksi-5-pyrimidinyylitio)karbonyylimetyyli-3-(1-p-nitrobent-syylioksikarbonyylioksietyyli)-1-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-1-trietoksifosforanylideenimetyyli)-2-atsetidinoni 25 48 · (N-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliasetimidoyyli)-3-pyrrolidi- nyylitio]karbonyylimetyyli-l-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l-trietok-sifosforanylideenimetyyli)-3-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)- 2-atsetidinoni 30 49 · 3-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-1-(1-p-nitrobentsyy- lioksikarbonyyli-l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyyli)-4-(2-okso-5-heksahydropyrimidinyylitio)karbonyylimetyyli-2-atsetidinoni 50. 4-(2- £(N-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliformimidoyyli)amino]etyyli- 35 tio)karbonyylimetyyli-1-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-l-trietoksifos-foranylideenimetyyli)-3-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-2-atsetidinoni 2i 80887 1 Edullisia kaavan (IV) mukaisia yhdisteitä ovat ne, joissa: OR1 r2 r3 s , c^v3vs,‘ 5 H3C [ I (Ivj θ' N ^“COOR5 1 / R tarkoittaa vetyatomia tai trimetyylisilyyli-, t-butyylidimetyyli- 1Q silyyli-, p-nitrobentsyyli-, p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-, allyylioksi-karbonyyliryhmää; 2 3 R ja R molemmat tarkoittavat vetyatomia; 4 •jg R tarkoittaa: C^-C^-alkyyliryhmää (kuten metyyli-, etyyli- tai t-butyyliryh-mää); suojattua aminoalkyyliryhmää, kuten suojattua 2-aminoetyyli-, suojattua 2-amino-l-metyyliatyyli-, suojattua 2-(2-aminoetoksi)etyyli- tai suojattua 2-(2-aminoetoksi)-l- metyylietyyliryhmää; fenyyliryhmää; ali-syklistä heterosyklistä ryhmää, kuten l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)- 20 pyrrolidin- 3-yyli-, l-asetyylipyrrolidin-3-yyli-, 1-jN-(p-nitrobentsyyli-oksikarbonyyli)asetimidoyyliJpyrrolidin-3-yyli-, l-(N-metyyliasetimidoyyli)-pyrrolidin-3-yyli-, 1- N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)formimidoyyli pyrrolidin-3-yyli-, l-(N-metyyliformimidoyyli)pyrrolidin-3-yyli-, alkyyli-ryhmää, jossa on alifaattinen heterosyklinen substituentti, kuten l-£l- 25 (p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-^J3-yyli etyyli-, I-(asetyyli-pyrrolidin-3-yyli)etyyli-, 1-(1- N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-formimidoyyliJpyrrolidin-3-yyli)etyyli-, I-(l-jN-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli)asetimidoyyli pyrrolidin-3-yyli) etyyli-*, 3Q R^ tarkoittaa vetyatomia tai karboksla suojaavaa ryhmää, kuten metyyli-, t-butyyli-, bentsyyli-, difenyylimetyyli-, p-nitrobentsyyli- o-nitrobent-syyli-, allyyli-, 2-klooriallyyli-, 2,2,2-trikloorietyyli-, 2,2,2-tribro-mimetyyli- tai 2-trimetyylisilyylietyyliryhmiä.

35 Esimerkkejä kaavan (IV) mukaisista yhdisteistä ovat ne yhdisteet, jotka ovat nimenomaan johdettavissa keksinnön mukaisella menetelmällä edellä 22 80887 1 luetelluista kaavan (I) mukaisista yhdisteistä. Erityisesti seuraavat kaavan (IV) mukaiset yhdisteet ovat erikoisen mielenkiintoisia.

51. t-butyyli-6-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-2-metyylitiokar-g bapen-2-eemi-3-karboksylaatti 52. p-nitrobentsyyli-6-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-2-metyyli-tiokarbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 1Q 53. Bentshydryyli-2-t-butyylitio-6-(l-p-nitrobentsyylioksietyyli)-kar-bapen-2-eemi-3-karboksylaatti 54. o-nitrobentsyyli-2-t-butyylitio-l-metyyli-6-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 15 55. 2,2,2-trikloorietyyli-6-(l-allyylioksikarbonyylioksietyyli)-2-t-butyylitio-1,l-dimetyylikarbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 56. p-nitrobentsyyli-2-bentsyylitio-6- 1-(2,2,2-trikloorietoksikarbonyy-20 lioksi)etyyli karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 57. 2-metyyli-2-propenyyli-2-bentsyylitio-6-£l~(l-etoksietoksi)etyyli]·· karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 25 58. 2-trimetyylisilyylietyyli-6-(l-o-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi- etyyli)-2-fenyylitiokarbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 112 59. p-nitrobentsyyli-6-(l-klooriasetoksietyyli)-2-(N ,N ,N -trimetyyli-amidinometyylitio)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 30 60. p-nitrobentsyyli-2-(2-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyylitio)- 6-(l-p-nitrobentsvylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 61. p-nitrobentsyyli-2-(2-t-butyylidimetyylisilyyIloksi-1-metyylietyyli-jjg tio)-6-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3- karboksylaatti 1 62. 2-metyyli-2-propenyyli-2-(2-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliaminoetyy- litio)-6-(l-o-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3- karboksylaatti 23 80887 g 63. p-nitrobentsyyli-6-[l-(2-klooriallyylioksikarbonyylioksietyyli)3~2-2-(2,2,2-tribromimetoksikarbonyyliamino)-l-metyylietyylitio karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 64. bentshydryyli-2-JT2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyliaminoetoksi)etyy-•|q litioj-6-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3- karboksylaatti 65. p-nitrobentsyyli-6-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-2-(l-p-nitrobetnsyylioksikarbonyyli-3-pyrrolidinyylitio)karbapen-2-eemi- -jg 3-karboksylaatti 66. p-nitrobentsyyli-2-(l-asetyyli-3-pyrrolidinyylitio)-6-(l-p-nitro-bentsyylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 20 P-nitr°bentsyyli-2-£l-(N-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliasetimidoyy- li)-3-pyrrolidinyylitio]-6-(l-trimetyylisilyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 68. 6-(l-hydroksietyyli)-2-(l-asetimidoyyli-3-pyrrolidinyylitio)karbapen-25 2-eemi-3-karboksylaatti 69. p-nitrobentsyyli-2- j(N-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliformimidoyyli)- 3-pyrrolidinyyliti<J-6-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)karba-pen-2-eemi-3-karbok8ylaatti 30 70. t-butyyli-2-Q-(N-metyyliasetiinidoyyli)-3-pyrrolidinyyliti0J-6-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 71. 6-(l-hydroksietyyli)-2- |l-(N-metyyliasetimidoyyli)-3-pyrrolidinyyli-35 tioj karbapen-2-eemi-3-karboksyylihappo 1 72. 2-(4-metyylisulfonyyli-l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-3-pyrrolidi- nyylitio)-6-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi- 3-karboksyylihappo 24 80887 g 73. bentsyyli-2-(2-etoksi-l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-4-pyrrolidi-nyylitio)-6-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi- 3-karboksylaatti 74. p-nitrobentsyyli-6-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)-2-10 (l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-3-piperidyylitio)karbapen-2-eemi-3- karboksylaatti 75. p-nitrobentsyyli-2-(3-metoksikarbonyyli-l-p-nitrobentsyylioksikarbo-nyyli-4-piperidyylitio)-6-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli) 15 karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 76. p-nitrobentsyyli-2-(2-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino-4,5-dihydro-1,3-tiatsol-5-yylitio)-6-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)kar-bapen-2-eemi-3-karboksylaatti 20 77. p-nitrobentsyyli-2-(2-metyyli-3,4,5,6-tetrahydro-5-pyrimidinyylitio)- 6-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3-karboksy-laatti 25 78. p-nitrobentsyyli-2-(2-metoksimetyyli-l-p-nitrobentsyylioksikarbonyy- li-1,4,5,6-tetrahydro-5-pyrimidinyylitio)-6-(1-p-nitrobentsyylioksikarbo-nyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 79. p-nitrobentsyyli-2-(2-metoksikarbonyylimetyyli-l-p-nitrobentsyyli-30 oksikarbonyyli-1,4,5,6-tetrahydro-5-pyrimidinyylitio)-6-(1-p-nitrobent- syylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 80. p-nitrobentsyyli-2-[l-(4-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-2-morfolin-yyii) etyylitiq]-6-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen- 35 2-eemi-3-karboksylaatti 81. p-nitrobentsyyli-2-£l-(4-asetyyli-2-morfolinyyli)etyyliti<T|-6-( 1-p- 1 nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 25 8 0 8 8 7 82. p-nitrobentsyyli-2-(l-j4-(N-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliasetimido-yyli)-2-morfolinyylij etyylitio-6-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi- g etyyli)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 83. p-nitrobentsyyli-6-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-2-(l-£l-£N-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliformimidoyyli)-3-piperidyyliJetyylitio)J-karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 10 84. p-nitrobent8yyli-6-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-2 [j-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-3-pyrrolidinyyli)etyylitioJ karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti •|g 85. p-nitrobentsyyli-6-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-2-£l-(l- asetyyli-3-pyrrolidinyyli)etyylitio]karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 86. p-nitrobentsyyli-6-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-2-(l-J^l-(N-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliformimidoyyli)-3-pyrrolidinyyli3“ 20 etyylitio)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 87. p-nitrobentsyyli-6-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-2-(l- [l-(N- p-nitrobentsyylioksikarbonyyliasetimidoyyli)-3-pyrrolidinyyli3etyyli-tio) karbapen-2-eemi-3-karbok8ylaatti 25 88. p-nitrobentsyyli-6-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-2-(2-p-pyridyylitio)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 89. p-nitrobentsyyli-6-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-2-(3-30 pyridyylitio)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 90. p-nitrobentsyyli-6-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-2-(4-pyridyylitio)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 35 91. p-nitrobentsyyli-6-(l-t-butyylidiemtyylisilyylioksietyyli)-2-(2- tienyylitio)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 26 80887 1 92. p-nitrobentsyyli-6-(l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli)-2-(4- nitro-2-furyylitio)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 93. p-nitrobentsyyli-l-metyyli-6-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi-5 etyyli)-2-(2-1,3,5-triatsinyyli)tio)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 94. p-nitrobentsyyli-2-(2-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino-4-imidat-solyylitio)-6-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 10 95. p-nitrobentsyyli-2-(2-metoksi-5-pyrimidinyylitio)-6-(l-p-nitrobent-syylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 96. p-nitrobentsyyli-2-(2- |j(N-p-nitrobentsyylioksikarbonyyliformimido-15 yyli)amin<0etyylitio)-6-(1-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)kar- bapen-2-eemi-3-karboksylaatti 97. p-nitrobentsyyli-2-(2-okso-5-heksahydropyrimidinyylitio)-6-(l-p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 20 98. p-nitrobentsyyli-2-(2-asetamidovinyylitio)-6-£l-(p-nitrobentsyyli-oksikarbonyylioksi)etyyli^karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti

Kaavojen (I), (II) ja (IV) mukaisten yhdisteiden stereokemiaa ei ole eri- 25 tyisesti rajoitettu, vaikkakin pidämme edullisena, että niillä olisi sama 4 eteerinen konfiguraatio kuin tienamyslinillä. Mikäli R :n tarkoittamissa ryhmissä on asymmetrisiä hiiliatomeja, niin voidaan käyttää yksittäisiä isomeerejä tai niiden seoksia.

30 Kaavan (I) mukaiset yhdisteet: OR1 R2 R3 35 h3c/S hr 35 J-H U (li 0 \=P(r6]3 C00R5 27 8 0 8 8 7 1 voidaan valmistaa saattamalla kaavan (II) mukainen yhdiste: OR1 R2 R3 , 1 mi

J-N

0 ^>=0 C00R5 10 reagoimaan kaavan (III) mukaisen fosforiyhdisteen kanssa: p(R6)3 (III) 15 (yllä olevissa kaavoissa R^-R^ ovat edellä määritellyt).

Sopivia kaavan (II) mukaisia kolmenarvoisia orgaanisia fosforiyhdisteitä tämän keksinnön mukaisessa menetelmässä käytettäviksi ovat sykliset ja/tai asykliset trialkyylifosfIitit, triaryylifosfiitit, seka-alkyyli-20 aryylifosfiitit tai fosfori (III) amidit. Erityisen edullisia ovat trialkyylifosf iitit, joista trietyylifosfiitti, tripropyylifosfiitti ja tri-isopropyylifosfiitti ovat edullisimmat.

Esimerkkejä sopivista aryyli- ja seka-alkyyliaryylifosfIiteistä ovat: 25 trifenyylifosfiitti; katekolifosfiitit, esim. kaavan (V) mukaiset yhdisteet:

Cto>-°-Rl (Y> 30 jossa R* tarkoittaa alkyyliryhmää (esim. metyyli- tai etyyliryhmä) tai 35 aryyliryhmää (esim. fenyyliryhmä); ja dimeeriset katekolifosfiitit, esim.

kaavan (VI) mukaiset yhdisteet: 28 8088 7 QHo>-°-(cH2)n'o“<o^O ™ 5 jossa n on kokonaisluku, edullisesti 2.

Ί0 Sopiva syklinen fosfIitti on kaavan (VII) mukainen yhdiste: ^CHj-O.

15 ch3-c — ch2-0 — p (SE) xCH2-cr

Sopivia fosfori (III) amideja ovat ne kaavan (VIII) mukaiset yhdisteet: 20 r"o /Rm >-< ™'

Il X \Dm

RO R

30 joissa R" ja R,M ovat samoja tai erilaisia ja kukin tarkoittaa alkyyli-ryhmää (esim. metyyli- tai etyyliryhmä) tai aryyliryhmää (esim. fenyyli-ryhmä); R":n tarkoittamat kaksi ryhmää voivat olla samoja tai erilaisia, vaikkakin ne edullisesti ovat samoja ja samalla tavoin voivat R'":n tarkoittamat kaksi ryhmää olla samoja tai erilaisia, vaikka edullisesti ne 35 ovat samoja.

Reaktio aikaansaatetaan edullisesti aproottlsessa liuottimessa, edulli- 29 80887 1 sestl: alifaattisessa tai aromaattisessa hiilivedyssä, kuten heksaani, bentseeni, tolueeni tai ksyleenl; halogenoidussa hiilivedyssä, kuten kloroformi, metyleenikloridi tai 1,2-dikloorietaani; esterissä, kuten etyyliasetaatti; eetterissä, kuten tetrahydrofuraani tai dloksaani; asetonit-g rillissä; tai dimetyyliformamidissa.

Yhdisteiden (II) ja (III) reaktio aikaansaatetaan edullisesti kuumentaen, esimerkiksi lämpötilassa alueella 50-150°C, esimerkiksi 1-10 tunnin ajan. Tämän ajan lopussa liuotin ja muut haihtuvat ainekset poistetaan tislaa--jg maila alennetussa paineessa, jolloin saadaan haluttu kaavan (I) mukainen yhdiste. Riippuen reaktiolämpötilasta ja reaktioon käytetystä ajasta on kaavan (I) mukainen yhdiste voinut jo syklisoitua muuttaen osan tai kaiken tästä yhdisteestä kaavan (IV) mukaiseksi yhdisteeksi. Niinpä pidettäessä kaavojen (II) ja (III) mukaisten yhdisteiden seos lämpötilassa <15 alueella 80-150°C, 10 tunnin - 5 päivän ajan, eristämättä kaavan (I) mukaista yhdistettä, saadaan suoraan yhdiste (IV). Tämä on keksinnön mukaisen menetelmän etu, koska se mahdollistaa halutun lopputuotteen, kaavan (IV) mukaisen yhdisteen, saamisen harvemmilla reaktiovaiheilla ja puhdistus- ja/t.ai erotusvaiheilla, mahdollistaen siten suurempien saantojen 20 saavuttamisen.

Kuitenkin, milloin kaavan (I) mukainen yhdiste on valmistettu ja eristetty, kuumennettaessa yhdisteen liuosta esimerkiksi jossakin edellä selostetuista aproottisista liuottimista, lämpötilassa 80-150°C, 10 tunnin -25 5 päivän ajan, saadaan kaavan (IV) mukainen yhdiste.

Kaavojen (I) ja/tai (IV) mukaisten yhdisteiden valmistuksen jälkeen voidaan haluttu yhdiste erottaa, edullisesti yksinkertaisesti tislaamalla pois liuotin ja kaikki muu haihtuva aines alennetussa paineessa, minkä 3Q jälkeen se voidaan tarvittaessa edelleen puhdistaa monilla erilaisilla tavanomaisilla menetelmillä, kuten uudelleekiteytyksellä, pylväskromato-grafialla tai preparatiivisella ohutkerroskromatograflalla.

Helppous, jolla tämän keksinnön kaksi valmistusmenetelmää tapahtuvat, on 35 aivan odottamatonta. Niinpä yhdiste, joka on samankaltainen kuin kaavan (I) mukaiset, mutta jossa on fenyyliryhmä, voidaan valmistaa Woodward et al:n J.Chem.Soc., 101 (1979), p. 6301 menetelmällä, esimerkiksi siten 30 80887 1 kuin Kametani et ai. ovat selostaneet J.C.S., Perkin I (1981) p. 964 , 4 mutta syklisoituminen etenee vain mikäli R on elektroneja puoleensa ve- 4 tävä ryhmä ja etenee tuskin lainkaan, kun R tarkoittaa alkyyliryhmää. Kaavan (1) mukaiset yhdisteet sitävastoin voidaan helposti valmistaa ja g ne syklisoituvat helposti kaavan (IV) mukaisiksi karbapeneemijohdannaisiksi.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden valmistuksessa käytettävät, kaavan (II) mukaiset lähtöaineet voidaan valmistaa monilla eri tavoilla, esimerkiksi jq seuraavassa kuvatusti.

Menetelmä A

Kaavan (IX) mukainen yhdiste: 15 OR1 I. 1(30 -( (Π) J-N.

20 0 ^ (j31 * 1 30 31

(jossa R on edellä määritelty, R tarkoittaa poistuvaa ryhmää ja R

tarkoittaa vetyatomia tai amidia suojaavaa ryhmää) saatetaan reagoimaan 25 kaavan (X) mukaisen yhdisteen: R2 0 30 >CH3)3 Si-C-C-SR1, (Il R3 2 3 4 35 (jossa R , R ja R ovat edellä määritellyt) kanssa, trimetyylisilyyli- trifluorimetaanisulfonaatin läsnäollessa. Jatkossa reaktion kulku riippuu 31 R :n tarkoittaman ryhmän luonteesta.

31 31 80887 1 (i) milloin R tarkoittaa trimetyylisilyyliryhmää, desilyloituminen tapah tuu helposti reaktioseoksen jatkokäsittelyn aikana, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (XI): mi * J~« 1 10 1234 (jossa R , R , R ja R ovat edellä määritellyt). Tämä asyloidaan sitten kaavan C1COCOOR3 (jossa R on edellä määritelty) mukaisella alkoksioksa-lyylikloridilla, jolloin saadaan haluttu kaavan (II) mukainen tuote.

31 •jtj (ii) milloin R tarkoittaa ryhmää, jolla on kaava ,cHa ""p r-' 20 R5oor ^ch3 (jossa R3 on edellä määritelty), saadaan yhdiste, jolla on kaava (XII): 25 ”><3 [ΣΠΙ

H3C iHT

ir :oor5 35 32 8 0 8 8 7 j 2 3 4 3 1 (jossa R , R , R , R ja RJ ovat edellä määritellyt). Tämä lohkaistaan sitten hapettamalla otsonilla, jolloin saadaan haluttu kaavan (II) mukainen yhdiste.

31 5 (lii) milloin R tarkoittaa ryhmää, jolla on kaava x ^CH2 R50 0C^'ch— c^ch3 10 5 (jossa R on edellä määritelty), saadaan kaavan (XIII) mukainen yhdiste: 15 OR1 R*R3 , v j j X«2 ,rnl1 20 » ^-c ^CH3

coorS

X 2 3 4 5 25 (jossa R , R , R , R ja R3 ovat edellä määritellyt). Tätä käsitellään emäksellä, edellä määritellyn kaavan (XII) mukaisen yhdisteen saamiseksi, joka yhdiste sitten lohkaistaan hapettamalla halutuksi kaavan (II) mukaiseksi yhdisteeksi.

31 30 (iv) milloin R tarkoittaa alkoksioksalyyliryhmää, saadaan kaavan (II) mukainen yhdiste suoraan.

Menetelmä B

35 Kaavan (II) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa myös reaktiosarjalla, jota kuvaa seuraava reaktiokaavio: 33 80887 OR32 OR32 ''S_/AC (al ^[__^^OCH2Ph

5 CH3 T -lal . CK3 I I

Si (CH3)3 ^Si(CH3)3 (xm ini 10 OR32 M32 —r^°°H (ci °*>\—r^SRt 15 J-NH J-NH 0 0 0 (ΣΗΙ (ΙΣΟΙ 20 OR32 -!il- c, I-Γγ ” -"γο COOfi33 (ΣΣΠΙΙ 30 • 4 32

Edellä esitetyssä reaktiokaaviossa R on edellä määritelty; R tarkoittaa hydroksia suojaavaa ryhmää, joista esimerkkejä on annettu edellä; 33 35 R tarkoittaa karboksia suojaavaa ryhmää, joista esimerkkejä on annettu edellä; Ac tarkoittaa asetyyliryhmää ja Ph tarkoittaa fenyyliryhmää.

34 8 0 8 8 7 1 Reaktiokaavan vaiheessa (a) saatetaan kaavan (XIV) mukainen yhdiste reagoimaan bentsyyli(trimetyylisilyyli)asetaatin kanssa kaavan (XV) mukaiseksi yhdisteeksi, joka sitten saatetaan reagoimaan ensin veden ja sitten vedyn, palladium-hiilen läsnäollessa, kanssa, jolloin saadaan kaavan (XVI) g mukainen yhdiste.

4

Kaavan (XVI) mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan kaavan R SH mukaisen 4 merkaptaanin (jossa R on edellä määritelty) kanssa kondensoivan aineen, kuten N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidin tai difenyylifosforyyliatsidi/ JO trietyyliamiinin läsnäollessa, kaavan (XVII) mukaisen yhdisteen saamiseksi. Tämä saatetaan sitten reagoimaan alkoksioksalyylikloridin kanssa, jolloin saadaan haluttu kaavan (XVIII) mukainen yhdiste, so. kaavan (II) mukainen yhdiste, jossa on hydroksia suojaava ryhmä ja R^ on karboksia suojaava ryhmä.

15

Menetelmä C

Kaavan (XVIII) mukaiset yhdisteet voidaan myös valmistaa seuraavilla reaktioilla: 20 25 30 35 35 8 0 8 8 7 OR32 OR32 A,_A |, I Al__f^/0CH2Ph ». j^Cji — " AT5!·· 1 A 1 V>

COO RJ J

(ΠΧΙ (XI) OR32 ib) —τΆ”08 lcl ~ CK3 .. 0 CH3 0 'VvY^ch3 C00R33 (ΣΧ31 r32 SRi jr sr1, ,Α—rΎ„ μ- ciS—ry

0^ \λ V

COOR33 e0CR’J

inn) lumi 36 80887

32 33 A

1 Edellä olevissa kaavoissa ovat R , R , R , Ac ja Ph edellä määritellyt.

Kaavan (XIX) mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan bentsyylKtrimetyyli- sllyyll)asetaatin kanssa kaavan (XX) mukaisen yhdisteen saamiseksi. Tämän 5 yhdisteen bentsyyliryhmä poistetaan sitten tavanomaisin keinoin, esim.

hydraamalla käyttäen vetykaasua palladiumhiilen läsnäollessa, kaavan (XXI) mukaisen yhdisteen saamiseksi. Tämä kaavan (XXI) mukainen yhdiste 4 4 saatetaan reagoimaan kaavan R SH (jossa R on edellä määritelty) mukaisen merkaptaanijohdannaisen kanssa, kondensoivan aineen, kuten N,N'-10 disykloheksyylikarbodi-imidin tai difenyylifosforyyliatsidi/trietyyli- amiinin, kanssa kaavan (XXII) mukaisen yhdisteen saamiseksi, joka yhdiste sitten hapetetaan otsonilla kaavan (XVIII) mukaiseksi yhdisteeksi.

Menetelmä D

15

Kaavan (II) mukaiset yhdisteet voidaan myös valmistaa kuten seuraavassa reaktiokaaviossa on kuvattu: OR1 OR1 OAc Γ SR1 <1—f fi -!ϋ- <1—YYm

Y-A. J-U A

0 . T™3 0 COOR5 C00R5 (ΣΕΠ) f’ SRt OR1 R2 r3 0 · 'Xf^CH3 r N\_0 COOR5 COOR5 (rmri im v 80887 14 5 1 Edellä olevissa kaavoissa R , R , R ja Ac ovat edellä määritellyt.

Tämän reaktiokaavlon valheessa (a) saatetaan kaavan (XXIX) mukainen yhdiste reagoimaan kaavan (XXX) mukaisen yhdisteen kanssa: 5 SR4 CH2=C(^ (ΣΠΙ OSi (CH-i}-j io J J' kaavan (XXXI) mukaisen yhdisteen saamiseksi. Tämä aikaansaadaan edullises-.jg ti liuottimen (kuten heksaani, bentseeni, tolueeni, metyleenikloridi, kloroformi, dietyylieetteri, tetrahydrofuraani, dioksaani, asetonitriili tai dimetyyliformamidi) ja katalyyttisen määrän trimetyylisilyyli-trifluorlmetaanlsulfonaattia läsnäollessa, käyttäen kaavan (XXX) mukaista yhdistettä määränä 1-3 ekvivalenttia yhtä kaavan (XXIX) mukaisen yhdis-20 teen ekvivalenttia kohti. Reaktiolämpötila voi vaihdella laajalla alueella, esimerkiksi -15°C - +100°C ja reaktioon tarvittava aika on yleisesti 5 tuntia - 7 päivää.

Reaktion vaiheessa (b) käsitellään saatua kaavan (XXXI) mukaista yhdistet-25 tä emäksellä, esimerkiksi trietyyliamiinilla, 1,5-diatsabisyklo 4.3.0 non-5-eenilla, 1,4-dlatsabisyklo 2.2.2 oktaanilla tai 4-(N,N-dimetyyli-amino)pyrimidiinillä, kaavan (XXXII) mukaisen yhdisteen saamiseksi. Tähän voidaan sitten kohdistaa otsonolyysi vaiheessa (c) halutun, kaavan (II) mukaisen yhdisteen saamiseksi.

30 4

On myös mahdollista muuntaa jokin kaavan SR mukainen ryhmä toiseksi ryh-4 mäksi, jossa R :llä on eri merkitys, saattamalla yhdiste, jolla on kaava (XXIII): 35 38 80887 I. RXR' SR3^ 5 Λ-{ΏΙΏ] J-NR35 0 0 ίο 3 -|g (jossa R , R^ ja R ovat edellä määritellyt, R tarkoittaa aryyliryhmää tai aromaattista heterosyklistä ryhmää, kuten ne, joita tähän mennessä 4 35 on esitetty esimerkkeinä ryhmästä R ; ja R tarkoittaa vetyatomia tai mitä tahansa orgaanista ryhmää, joka on tunteeton tioesteri-vaihtoreak- 4 4 tiolle) reagoimaan kaavan R SH (jossa R on edellä määritelty) mukaisen jg yhdisteen kanssa.

35

Edellyttäen, ettei R :n tarkoittama ryhmä ota osaa tai vaikuta tioesteri- vaihtoreaktioon, sen luonne ei ole kriittinen. Näin ollen voidaan tämä reaktio aikaansaattaa missä tahansa vaiheessa keksinnön mukaisten mene- 35 2Q telmien ja edellä selostettujen menetelmien aikana ja R voi siten tarkoittaa mitä tahansa seuraavien kaavojen mukaisista ryhmistä; 25 30 35 39 80887 /CH3 5 R500CxC*Cv"ch3 10 \ ^CH2 R500C/C^“”C^CH3 15 20 \=P(R6)3 COOR5 25 \=0 30 CO OR 5 35

Ao 80 887 1 Tämä reaktio suoritetaan edullisesti liuottimen läsnäollessa; liuottimen luonne ei ole kriittinen edellyttäen, ettei se haitallisesti vaikuta reaktioon. Esimerkkejä sopivista liuottimista ovat: eetterit, kuten dietyyli-eetteri, tetrahydrofuraani tai dloksaani; aromaattiset hiilivedyt, kuten 5 bentseeni tai tolueeni; dialkyyliamidit, kuten dimetyyliformamidi tai di-metyyliasetamidi: halogenoidut hiilivedyt, kuten metyleenikloridi, kloroformi tai 1,2-dikloorietaani; esterit, kuten etyyliasetaatti: alkoholit, kuten metanoli, etanoli tai propanoli; asetonitriili; dimetyylisulfoksidi; ja näistä kahden tai useamman seokset. Emäksen läsnäolo edistää reaktiota ‘jQ ja se suoritetaan siis edullisesti emäksen läsnäollessa, joskaan tämä ei ole välttämätöntä. Sopivia emäksiä ovat sellaiset orgaaniset emäkset kuin trietyyliamiini, di-isopropyylietyyliamiini, pyridiini, 1,4-diatsabisyklo £2.2.2^ oktaani ja 1,5-diatsabisyklo|4.3.oJnon-5-eeni ja sellaiset epäorgaaniset emäkset kuin alkalimetallihydroksidlt (erityisesti litium-15 hydroksidi, natriumhydroksidi tai kaliumhydroksidi) tai alkalimetallikar-bonaatit ja -bikarbonaatit (erityisesti natriumkarbonaatti, kaliumkarbonaatti tai natriumbikarbonaatti). Reaktiolämpötila ei ole erityisen kriittinen ja pidämme tavallisesti edullisena reaktion suorittamista lämpötilassa alueella -20°C - 100°C. Vaikkakin on edullista suorittaa reaktio 20 inertin kaasun (kuten typen) suojaamana, reaktio etenee myös ilmassa.

Reaktiolle tulisi suoda aikaa 10 minuuttia - 3 päivää, riippuen lähtöaineiden luonteesta ja reaktiolämpötilasta.

Tämän tioesteri-vaihtoreaktion lähtöaineena käytettävä kaavan (XXIII) 25 mukainen yhdiste voi olla valmistettu jollain edellä kuvatuista menetelmistä A-D. Se voidaan lisäksi valmistaa seuraavalla menetelmällä E.

Menetelmä E

30 Kuten seuraavassa reaktiokaaviossa on esitetty: 35 u 80887 OR1 OR1 , X_ui_ X_rcst-s»” ✓-nr35 qJ—NR35 (ΣΧΠΙ (ΠΉ1 10 OR1 X / SR3t (bi —X r 15 J-NR35 0 0 (nmj 20 ^ 1 4 34 35

Reaktiokaaviossa edellä R , R , R , R ja Ph ovat edellä määritellyt.

Kaavan (XXIV) mukainen yhdiste saatetaan vaiheessa a) reagoimaan kaavan (XXV) mukaisen Grignard-reagenssin kanssa: 30

MgBr-C = C-SR34 (XXV) kaavan (XXVI) mukaisen yhdisteen saamiseksi. Tämä reaktio voidaan suorittaa tavalla, joka on selitetty patenttihakemuksessa JP Kokai (so. julki-35 sesti nähtäväksi pantuna) n:o 7251/80. Kaavan (XXVI) mukainen yhdiste voidaan muuntaa kaavan (XXVII) mukaiseksi yhdisteeksi liittämällä vettä hapanta katalyyttia kuten trifluorietikkahappoa käyttäen. Tietysti anne- 42 80887 1 taan arvo sille seikalle, että tätä menetelmää voidaan soveltaa myös muihin lähtöaineisiin, joita käytetään tämän keksinnön menetelmissä.

Tämän keksinnön mukaisia menetelmiä valaistaan edelleen seuraavissa esi-5 merkeissä, jotka sisältävät myös eri vaiheita lähtöaineiden valmistamiseksi keksinnön menetelmiin. Muita lähtöaineita keksinnön menetelmiin voidaan valmistaa kuten seuraavissa valmistuksissa on kuvattu. Kaikki ominaiskiertokyvyn arvot mitattiin käyttäen natriumin D-viivaa, so. kaikki arvot ovat H- 10

Esimerkki 1(a) (3S,4R)-3-C(R)-l-t-Butyylidimetyylisilyylioksietyyli -4- (butyylltio) karbonyylimetyyljl -2-atsetidinonl 15 542 mg (1,89 mmoolia) (3S,4R-3-^(R)-l-t-butyylidimetyvlisilyylioksietyyliJ- 4-(karboksyylimetyyli)-2-atsetidinonia, 212 mg (2,36 mmoolia) butyylimer-kaptaania, 381 mg (3,77 mmoolia) trietyyliamiinia ja 1,04 g (3,78 mmoolia) trifenyylifosforyyliatsidia liuotettiin 10 mlraan N,N-dimetyyliformamidia 20 ja liuoksen annettiin seistä yön yli huoneen lämpötilassa. Etyyliasetaatilla laimentamisen jälkeen seos pestiin vedellä useita kertoja ja sitten kuivattiin. Liuotin poistettiin tislaamalla ja jäännös (1,25 g) puhdistettiin pylväskromatografiällä 23 g:n piigeeliä läpi, eluoiden heksaanin ja etyyliasetaatin seoksilla tilavuussuhteissa 4:1 - 2:1, jolloin saatiin 25 649 mg (saanto 96 %) otsikkotuotetta. Uudelleenkiteytys heksaanista antoi värittömiä neulasia, jotka sulivat 56,5-57°C:ssa.

Aluaineanalyysi laskettu C^H^IK^SSille 30 C 56,78 %; H 9,25 %; N 3,90 %; S 8,92 % löydetty: C 56,88 Z; H 9,15 Z; N 3,89 Z; S 9,08 % IR-absorptiospektri (Nujol) V* max cm ^ 3160, 3090, 1762, 1722, 1683.

NMR-spektri (CDCl^) &ppm: 35 43 8 0 8 8 7 1 0,06 (6H, singletti); 0,89 (9H, singletti); 0,06-1,8 (7H, multipletti); 1,16 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 5 2,7-3,2 (5H, multipletti); 3,9 (1H, multipletti); 4,15 (IH, kvintetti, J = 6 Hz); 6,4 (IH, leveä singletti).

10 Esimerkki 1(b) (3S,4R)-3- L(R)-l-t-Butyylidimetyylisilyylioksietyyli3 -4-£(butyylitio) karbonyylimetyyli]-l-(p-nitrobentsyylioksioksalyyli)-2-atsetidinoni Ί5 Liuokseen, jossa oli 150 mg (0,418 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidi-metyylisilyylioksietyyliJ-4- [(butyylitio)karbonyylimetyylij -2-atsetidino-nla 6 ralrssa 1,2-dikloorietaania, lisättiin peräkkäin 140 mg (1,25 mmoolia) 1,4-diatsablsyklo £2.2.23- oktaania ja 305 mg (1,25 mmoolia) p-nitrobent-syylioksioksalyylikloridia, jäällä jäähdyttäen ja hämmentäen, typpeä suo-20 jakaasuna käyttäen.

Kun seosta oli hämmennetty 2 tunnin ajan lisättiin reaktioseokseen 0,1M fosfaattlpuskuriliuosta (pH 7,2) reaktion viemiseksi loppuun. Reaktioseokseen lisättiin sitten metyleenikloridla ja orgaaninen kerros erotettiin, 25 pestiin vedellä ja sitten kuivattiin. Liuotin poistettiin tislaamalla ja tulokseksi saatu jäännös (232 mg) puhdistettiin pylväskromatografiällä 6 g:n pllgeeliä lävitse, eluoiden heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 5:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 132 mg (saanto 56 %) otsikkotuotetta öljynä.

30 IR-absorptiospektri (CHCl^) y> ^ay cm S 1802, 1756, 1687, 1520, 1346.

NMR-spektri (CDCl^) £ ppm: - (miinus) 0,01 (3H, singeltti); 0,08 (3H, singletti); 35 44 80887 1 0,80 (9H, singletti); 0,90 (3H, tripletti, J = 6 Hz); 1,19 (3H, dupletti, J = 6 Hz); noin 1,5 (4H, multipletti); g 2,90 (2H, tripletti, J = 6 Hz); 3,00 (1H, kaksinkertainen dupletti, J = 15 & 3 Hz); 3,33 (1H, tripletti, J = 3 Hz); 3.40 (1H, kaksinkertainen dupletti, J = 15 & 4 Hz)M; 4,31 (1H, nelinkertainen dupletti, J = 6 & 3 Hz); IQ 4,61 (1H, kaksinkertainen kaksinkertainen dupletti, J = 8 & 4 & 3 Hz); 5.40 (2H, singletti); 7,58 (2H, dupletti, J *= 9 Hz); 8,23 (2H, dupletti, J = 9 Hz).

15

Esimerkki 1(c) (3S,4R)-3-[(R)-l-t-Butyylidimetyylisilyylioksietyyli3-4- £(butyylitio) karbonyylimetyyHj-l-Cl-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-l-trimetok-2q sifosforanylideenimetyylj] -2-atsetidinoni

Seosta, jossa oli 61 mg (0,11 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyyli-silyylioksietyylij -4-[(butyylitio)karbonyylimetyylij-l-(p-nitrobentsyy-lioksioksalyyli)-2-atsetidinonia, 107 mg (0,86 mmoolia) trimetyylifosfiit-25 tia ja 7 ml etyyliasetaattia, hämmennettiin 70-80°C:ssa 65 tunnin ajan, typpeä suojakaasuna käyttäen. Liuotin ja ylimäärä trimetyylifosfiittia poistettiin tislaamalla alennetussa paineessa, jolloin saatiin 69 mg (saanto 95 %) otsikkoyhdistettä öljynä.

3Q IR-absorptiospektri (CHCl^) V fflax cm *: 1740, 1675, 1631, 1520, 1343.

NMR-spektri (CDCl^) $ ppm: 35 0,05 (6H, singletti); 0,85 (9H, singletti); 0,90 (3H, tripletti, J = 6 Hz); 45 80887 1 1,23 (3H, dupletti, J * 6 Hz); noin 1,5 (4H, multipletti); 2,5-3,1 (5H, multipletti); 3,87 (9H, dupletti, J - 12 Hz); g noin 4,0 (2H, multipletti); 5.0- 5,4 (2H, multipletti); 7,48 ja 7,54 (2H, dupletti); 8,15 ja 8,19 (2H, dupletti).

10 Esimerkki 1(d) p-Nitrobentsyyli-(5R,6S)-6- f(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli3~2-(butyylitio)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti jjj Seosta, jossa oli 69 mg (0,10 mmoolia) raakaa (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyyli-dimetyylisilyylioksietyyliJ-4-£(butyylitio)karbonyylimetyyliJ- l-[l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-l-trimetoksifosforanylideenimetyyliJ-2-atsetidinonia, valmistettu kuten esimerkissä 1(c) on kuvattu, 5 mg (0,05 mmoolia) hydrokinonia ja 9 ml ksyleeniä, kuumennettiin 120°C:ssa 20 21 tunnin ajan, typpeä suojakaasuna käyttäen. Liuotin poistettiin tislaa malla alennetussa paineessa ja tulokseksi saatu jäännös puhdistettiin preparatiivisella ohutkerroskromatografiällä piigeelillä, kehitettynä heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 1,5:1 (tilavuusosla), jolloin saatiin 10 mg (saanto 18 %) otsikkoyhdistettä öljynä.

25 IR-absorptiospektri (CHCl^) ^max cm : 1768, 1695, 1605, 1520, 1345.

NMR-spektri (CDCl^) $ ppm: 30 0,00 (6H, singletti); ____ 0,80 (9H, singletti); 0,86 (3H, triplettl, J = 6 Hz); 1,18 (3H, dupletti, J * 6 Hz); 35 noin 1,5 (4H, multipletti); 2,77 (2H, tripletin kaltainen, J = 6 HZ); 3.0- 3,2 (3H, multipletti); 46 8 0 8 8 7 1 4,0-4,3 (2H, multipletti); 5,17 (1H, dupletti, J = 14 Hz); 5,42 (1H, dupletti, J = 14 Hz); 7,59 (2H, dupletti, J = 9 Hz); 5 8,16 (2H, dupletti, J = 9 Hz).

Esimerkki 2(a) (3S,4R)-3-I(R)-l-t-Butyylidimetyylisilyylioksietyyli -4- (isopropyylltio) IQ karbonyylimetyyli}-2-atsetldinoni 1,15 g (4,00 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyy-li] -4-karboksimetyyli-2-atsetidinonia, 380 mg (5,00 mmoolia) isopropyyli-merkaptaania, 808 mg (8,00 mmoolia) trietyyliamilnia ja 2,20 g (8,00 •|g mmoolia) difenyylifosforyyliatsidia liuotettiin peräjälkeen 20 ml:aan Ν,Ν-dimetyyliformamidia ja liuoksen annettiin seistä 15 tunnin ajan huoneen lämpötilassa.

Reaktion mentyä loppuun kaadettiin reaktioseos jääveteen ja uutettiin 20 kahdesti etyyliasetaatilla; uute pestiin vedellä ja kuivattiin. Liuotin poistettiin tislaamalla ja tulokseksi saatu jäännös puhdistettiin pylväs-kromatografiällä 30 g:n piigeeliä lävitse, eluoituna heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 3:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 1,06 g (saanto 77 Z) otsikkotuotetta kiinteänä aineena.

25

Uudelleenkiteytys heksaanista antoi puhtaan tuotteen, joka suli 89-90°C:ssa.

Alkuaineanalyysi 30 laskettu C^H^^NO^SSiille

C 55,61 Z; H 9,04 Z; N 4,05 Z; S 9,28 Z löydetty C 55,71 Z; H 8,92 Z; N 4,25 Z; S 9,24 Z

IR-absorptiospektri (CHCl^) ^ max cm 35 3420, 1756, 1670.

NMR-spektri (CDCl^) δ ppm: 47 80887 1 0,08 (6H, singletti); 0,88 (9H, singletti); 1,18 (3H, dupletti, J * 6 Hz); 1,30 (6H, dupletti, J = 7 Hz); g noin 2,8 (3H, multipletti); 3,64 (1H, multipletti); 3,8-4,4 (2H, multipletti); 6,3 (1H, leveä singletti).

10 Esimerkki 2(b) (3S,4R)-3-[(R)-l-t-Butyylidimetyylisilyylioksietyyli3 -4-t(isopropyylitio) karbonyylimetyyli]-l-(p-nitrobentsyylioksioksalyyll)-2-atsetidinoni •jg Liuokseen, jossa oli 708 mg (2,05 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidime-tyylisilyylioksietyyli] -4-^(isopropyylitio)karbonyylimetyyli] -2-atsetidi-nonia 30 ml:ssa metyleenikloridia, lisättiin peräjälkeen 689 mg (6,15 mmoolia) 1,4-diatsabisyklo [2.2.2]-oktaania ja 1,50 g (6,15 mmoolia) p-nitrobentsyylioksioksalyylikloridia, jäällä jäähdyttäen ja hämmentäen.

20 Kun seo8ta hämmennetty 1,5 tunnin ajan, lisättiin 20 ml 0,1M fosfaat-tipuskuriliuosta.

Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin vedellä ja sitten kuivattiin. Liuotin poistettiin tislaamalla ja tulokseksi saatu jäännös puhdistettiin 25 pylväskromatografiällä 20 g:n piigeeliä lävitse, eluoiden heksaanin ja etyyliasetaatin seoksilla tilavuussuhteissa 5:1 - 4:1, jolloin saatiin 1,12 g (saanto 99 Z) otsikkotuotetta öljynä.

IR-absorptiosepktri (CHC1_) v* cm *: j max 30 1804, 1755, 1695.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: - (miinus) 0,03 (3H, singletti); 35 0,05 (3H, singletti); 0,80 (9H, singletti); 1,18 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 48 80887 1 1,30 (6H, leveä duplettl, J = 7 Hz); 2,96 (1H, kaksinkertainen duplettl, J = 15 & 8 Hz); 3.32 (1H, kaksinkertainen duplettl, J = 15 & 4 Hz); 3.33 (1H, tripletti, J * 3 Hz); 5 3,65 (1H, multipletti); noin A,3 (1H, multipletti); noin 4,6 (1H, multipletti); 5,40 (2H, singletti); 7,56 (2H, duplettl); 10 8,17 (2H, duplettl).

Esimerkki 2(c) p-Nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-[(R)-l-t-butyylidlmetyylisilyylioksietyyliJ-15 2-(isopropyylitio)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti

Seosta, jossa oli 55 mg (0,10 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidime-tyylisilyylioksietyyliJ-4- £(isopropyylitio)karbonyylimetyylij-l-(p-nitro-bentsyylioksioksalyyli)-2-at8etidinonia, 100 mg (0,60 mmoolia) trietyyli-20 fosfiittia, 3 mg hydrokinonia ja 5,5 ml ksyleeniä, kuumennettiin 120°C.ssa 70 tunnin ajan, typpeä suojakaasuna käyttäen. Reaktion mentyä loppuun poistettiin liuotin ja haihtuvat aineet tislaamalla alennetussa paineessa. Tulokseksi saatu Öljy liuotettiin uudelleen 5,5 ml:aan ksyleeniä ja liuosta kuumennettiin 120°C:ssa 70 tunnin ajan, typpeä suojakaasuna käyt-25 täen. Reaktion mentyä loppuun poistettiin liuotin tislaamalla alennetussa paineessa ja jäännös puhdistettiin preparatiivisella ohutkerroskroma-tografialla, kehittäen heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 3:1 (tila-vuusosia), jolloin saatiin 26,6 mg (saanto 51 %) otsikkotuotetta öljynä.

3Q IR-absorptiospektri (CHCl^) ^ max cm 1768, 1690.

NMR-spektri (CDCl^) 6 ppm: 35 0,08 (6H, singletti); 0,87 (9H, singletti); 1,25 (3H, duplettl, J - 6 Hz); 49 8 0 8 8 7 1 1,35 (6H, leveä dupletti, J - 7 Hz); 2.9- 3,6 (3H, multipletti); 3.9- 4,4 (2H, multipletti); 5,20 (1H, dupletti, J = 14 Hz); g 5,45 (1H, dupletti, J * 14 Hz); 7,62 (2H, dupletti); 8,19 (2H, dupletti).

Esimerkki 3(a) 10 (3S,4R)-3- [(R)-l-t-Butyylidimetyylisilyylioksietyyli3-4-£(fenyylitio) karbonyylimetyyli]-2-atsetidinoni 1,10 g (3,06 mmoolia) (3R,4R)-4-asetoksi-3-[(R)-l-t-butyylidimetyyli-jg silyylioksietyyli]-l-trimetyylisilyyli-2-atsetidinonia ja 961 mg (4,29 mmoolia) S-fenyylitrimetyylisilyylietaanitioaattia liuotettiin 20 ml:aan metyleenikloridia. Liuokseen lisättiin 0,07 ml (0,32 mmoolia) trimetyyli-silyylitrifluorimetaanlsulfonaattia, -20°C:ssa typpeä suojakaasuna käyttäen, ja reaktioseosta hämmennettiin 4,5 tunnin ajan lämpötilassa 20 “10 - +5°C. Sitten seokseen lisättiin vettä reaktion viemiseksi lop puun. Metyleenikloridikerros erotettiin ja pestiin peräjälkeen laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyllä natrlumklorldin vesiliuoksella.

25 Liuotin poistettiin sitten tislaamalla ja jäännös liuotettiin 2,5 ml:aan etanolia. Liuokseen lisättiin 58 mg (1,00 mmooll) kaliumfluoridia ja reaktioseosta hämmennettiin 1,5 tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja laimennettiin sitten etyyliasetaatilla. Se pestiin sitten peräjälkeen vedellä ja kyllästetyllä natrlumklorldin vesiliuoksella. Liuotin poistettiin tislaa-3Q maila ja tulokseksi saatu jäännös puhdistettiin Lobar-pylväskromatografi-alla (E. Merck Co., Ltd.), jolloin saatiin 961 mg (saanto 83 %) otsikko-tuotetta kiteinä jakeesta, joka eluoitiin heksaanln ja etyyliasetaatin seoksella 2:1 (tilavuusosia). Uudelleenkiteytys heksaanista antoi neulasia, jotka sulivat 94-95°C:ssa.

35 so 80 8 87 1 Alkuaineanalyysi laskettu C19H29N°3SSi:lle C 60,12 %; H 7,70 %; N 3,69 %; S 8,45 % löydetty C 60,11 %; H 7,72 %; N 3,67 %; S 8,54 %.

5 IR-absorptiospektri (Nujol) V max cm : 3160, 3000, 1767, 1726, 1703.

NMR-spektri (CDCl^) & ppm: 10 0,08 (6H, singletti); 0,88 (9H, singletti); 1,21 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 2,7-3,2 (3H, multipletti); 15 4,0 (1H, multipletti); 4,18 (1H, kvintetti, J = 6 Hz); 6,10 (1H, leveä singletti); 7,4 (5H, singletti).

20 esimerkki 3 (b) (3S,4R)-3- [(R)-l-t-ButyylidimetyylisilyylioksietyyliJ-l-(p-nltrobentsyy-lioksioksalyyli)-4- t(fenyylitio)karbonyylimetyyli3-2-atsetldinoni 25 747 mg (1,97 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksiety- li3-4-£(fenyylitio)karbonyylimetyyliJ-2-atsetidinonla ja 398 mg (3,94 mmoolia) trietyyliamiinia liuotettiin 20 ml:aan metyleenikloridia. Liuokseen lisättiin 960 mg (3,94 mmoolia) p-nitrobentsyylioksioksalyyliklori-dia, jäällä jäähdyttäen ja typpivirtauksen alla. Seosta hämmennettiin 2 30 tunnin ajan ja sitten reaktioseokseen lisättiin 0,1M fosfaattipuskuri-liuosta (pH 7,2) reaktion viemiseksi loppuun. Orgaaninen kerros erotettiin ja pestiin vedellä, minkä jälkeen se kuivattiin. Liuotin poistettiin tislaamalla ja tulokseksi saatu jäännös puhdistettiin pylväskromatogra-fialla 15 g:n piigeeliä lävitse, jolloin saatiin 1032 mg (saanto 89 %) 35 haluttua tuotetta öljynä jakeista, jotka eluoitiin heksaanin ja etyyliasetaatin seoksilla tilavuussuhteissa 6:1 - 3:1.

51 80887 1 IR-absorptiospektri (CHCl^) ^ max cm 1805, 1757, 1699, 1609, 1522, 1344.

NMR-spektri (CDCl^) $ ppm: 5 - (miinus) 0,02 (3H, singletti); 0,04 (3H, singletti); 0,08 (9H, singletti); 1,14 (3H, dupletti, J *= 6 HZ) ; IQ 3,11 (1H, kaksinkertainen dupletti, J * 15 & 8 Hz); 3,35 (1H, tripletti, J = 3 Hz); 3,43 (1H, kaksinkertainen dupletti, J = 15 & 4 Hz); 4,29 (1H, nelinkertainen dupletti, J = 6 & 3 Hz); 4,64 (1H, kaksinkertainen kaksinkertainen dupletti, 15 J = 8 & 4 & 3 Hz); 5,37 (2H, singletti); 7,52 (2H, dupletti, J = 8 Hz); 8,16 (2H, dupletti, J - 8 Hz).

20 Esimerkki 3(c) p-Nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-[(R)-l-t-butyylimetyylisilyylioksietyylQ-2- (fenyylitio)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 25 Seosta, jossa oli 511 mg (0,872 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidime-tyylisilyylioksietyyli3-l-(p-nitrobentsyylioksioksalyyli)-4- £(fenyylitio) karbonyylimetyylij-2-atsetidinonia, 1,03 g (8,46 mmoolia) trimetyylifos-fiittia ja 50 ml etyyliasetaattia, hämmennettiin 70°C:ssa 4 päivän ajan, typpeä suojakaasuna käyttäen. Liuotin poistettiin sitten tislaamalla ja 3Q jäännös puhdistettiin korkeapalnenestekromatografialla käyttäen Lobar-pylvästä (E. Merck Co., Ltd.), eluoiden bentseenin ja etyyliasetaatin seoksella 1:3 (tilavuusosia), jolloin saatiin 158 mg otsikkotuotetta, sisältäen jonkin verran epäpuhtauksia, ja 176 mg (saanto 29 %) (3S,4R)- 3-[(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyliJ -1- [-l-(p-nitrobentsyylioksi-35 karbonyyli)-l-trimetoksifosforanylideenimetyyl^-4-£(fenyylitio)karbonyy-limetyyli3 -2-atsetidinonia.

52 80887 1 Otsikkotuotetta sisältävä seos puhdistettiin edelleen kromatografiällä käyttäen Lobar-pylvästä, eluoiden heksaanln ja asetonin seoksella 3,5:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 103 mg (saanto 21 %) otsikkotuotetta kiinteänä aineena, joka uudelleenkiteytettäessä asetoni-heksaanis-5 ta muodosti puhtaita värittömiä neulasia, jotka sulivat 144-145,5°C:ssa.

Trimetoksifosforanylideenlyhdiste IR-absorptiospektri (CHCl^) **max cm 10 1740, 1695, 1636, 1520, 1345.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 0,00 (6H, singletti); -|5 0,87 (9H, singletti); 1,26 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 2,7-3,5 (3H, multipletti); 3,84 (9H, dupletti, J 12 Hz); noin 4,2 (2H, multipletti); 20 4,9-5,5 (2H, multipletti); 7,36 (5H, singletti); 7,53 (2H, dupletti, J = 9 Hz); 8,17 (2H, dupletti, J = 9 Hz).

25 Karbapeneemi

Alkuaineanalyysi laskettu CooHo/N„0,SSi:lle

Zo 2. O

C 60,62 Z; H 6,18 Z; N 5,05 Z; S 5,78 Z 30 löydetty C 60,50 Z; H 6,11 Z; N 4,77 Z; S 5,91 Z.

IR-absorptiospektri (Nujol-tavaramerkki) v*max cm 1777, 1697, 1524.

35 NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 0,06 (6H, singletti); 53 80887 1 0,83 (9H, singletti); 1,15 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 2,63 (2H, dupletti, J - 10 Hz); 3,05 (1H, kaksinkertainen dupletti, J = 4 & 2 Hz); g 4,04 (1H, kaksinkertainen dupletti, J = 10 & 2 Hz); 4.19 (1H, kaksinkertainen kvartetti, J = 4 & 6 Hz); 5,22 (1H, dupletti, J = 14 Hz); 5,50 (1H, dupletti, J = 14 Hz); 7,2-7,7 (5H, multipletti); |q 7,64 (2H, dupletti, J = 9 Hz); 8.19 (2H, dupletti, J = 9 Hz),

Esimerkki 4 15 p-Nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyliJ -2-(fenyylltlo)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti

Seosta, jossa oli 19 mg (0,027 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidime-tyylisilyylioksietyyli3-l-£l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-l-trime-20 toksifosforanylideenimetyyliJ-4-£(fenyylitio)karbonyylimetyyli^-2-atse-tidinonia valmistettu kuten esimerkissä 3(c) on kuvattu , katalyyttinen määrä hydrokinonia ja 2 ml ksyleeniä, hämmennettiin 120°C:ssa 4 tunnin ajan, typpeä suojakaasuna käyttäen. Reaktion mentyä loppuun poistettiin liuotin tislaamalla ja jäännös puhdistettiin käyttäen Lobar-pylväskroma-25 tografiaa, käyttäen eluenttina heksaanin ja asetonin seosta 3,5:1 (tila-vuusosla), jolloin saatiin 75 mg (saanto 45 %) otsikkotuotetta kiinteänä aineena.

Esimerkki 5 30 p-Nitrobentsyyll-(5R,6S)-6-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli3-2-(fenyylitio)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti

Seosta, jossa oli 114 mg (0,194 mmoolia) (3S,4R)-3- £(R)-l-t-butyylidime-35 tyylisilyylioksietyyli3“l-(p-nitrobentsyylioksioksalyyli)-4-£(fenyylitio) karbonyylimetyylij-2-atsetidinonia, 258 mg (1,55 mmoolia) trietyylifos-fiittia ja 10 ml tolueenia, hämmennettiin 100°C:ssa 18 tunnin ajan, typ- 54 80887 1 peä suojakaasuna käyttäen. Liuotin poistettiin tislaamalla ja jäännös puhdistettiin esimerkissä 5 selostetulla menettelyllä, jolloin saatiin 95 mg (saanto 88 %) otsikkotuotetta kiteinä.

g Esimerkki 6 p-Nitrobentsyyll-(5R,6S)-6- f(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyliJ-2-(fenyylitio)karbapen-2-eeml-3-karboksylaatti 1Q Esimerkin 5 menettelyä noudattaen saatiin 83 mg (saanto 77 %) otsikkotuotetta kiteinä, käyttäen trietyylifosfiitin asemasta 324 mg (1,56 mmoolia) tri-isopropyylifosfiittia.

Esimerkki 7 15 p-Nitrobentsyyli-(5R,6S)-6- [(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli]-2-(fenyylltio)karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti

Esimerkin 5 menettelyä noudattaen saatiin 37 mg (saanto 34 %) haluttua 20 tuotetta kiteinä, käyttäen trietyylifosfiitin asemasta 195 mg (1,56 mmoolia) trimetyylifosfiittia.

Esimerkki 8(a) 25 (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidlmetyyllsilyylloksletyyl:i3-4-(£2-(p-nitrobent-syyliokslkarbonyyliamino)etyylitiö)karbonyylimetyyli)-2-atsetidinoni 1,00 g (3,48 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyy-li]-4-karboksimetyyli-2-atsetidinonia ja 1,07 g (4,8 mmoolia) 2-(p-nitro-30 bentsyylioksikarbonyyliamino)etaanitiolia liuotettiin 20 ml:aan bentsee-niä. Tähän liuokseen lisättiin 861 mg (4,18 mmoolia) disykloheksyylidi-karbodi-imidiä ja 10 mg (0,082 mmoolia) 4-dimetyyliaminopyridiiniä huoneen lämpötilassa hämmentäen. Seosta hämmenttiin 2 tunnin ajan, minkä jälkeen muodostunut liukenematon aines poistettiin suodattamalla ja tu-35 lokseksi saatu suodos väkevöltiln kuiviin haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännös puhdistettiin pylväskromatografiällä 40 g:n piigeeliä lävitse, jolloin saatiin 1,59 g (saanto 87 %) haluttua tuotetta öljynä 55 8 0 8 8 7 1 jakeista, jotka eluoitiin bentseenin ja etyyliasetaatin seoksella 1:1 (tilavuusosia).

IR-absorptiospektri (CHCl^) k'max cm 5 3390, 1746, 1715, 1673.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 0,07 (6H, singletti); 1Q 0,87 (9H, singletti); 1,17 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 2.7- 3,6 (7H, multipletti); 3.8- 4,4 (2H, multipletti); 5,12 (2H, singletti); 15 5,88 (1H, leveä tripletti, J = 6 Hz); 6,91 (1H, singletti; 7,41 (2H, dupletti); 8,10 (2H, dupletti).

20 Esimerkki 8(b) (3S,4R)-3-[/R)-l-t-Butyylidimetyylisllyylioksletyyli3-4-(/2-(p-nitro- bentsyylioksikarbonyyliamlno)etyylitiQ^karbonyylimetyyll)-l-(p-nitro- bentsyyliokslosaklyyll)-2-atsetidinoni 25

Liuokseen, jossa oli 500 mg (0,95 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyyli-dimetyylisilyylioksietyyli3-4-(£2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino) etyylitiql karbonyylimetyyli)-2-atsetidinonia 6 ml:ssa metyleenikloridia, lisättiin peräjälkeen 288 mg (2,85 mmoolia) trietyyliamlinia ja 694 mg 30 (2 ,85 mmoolia) p-nitrobentsyylioksioksalyylikloridia, 0°C:ssa hämmentäen.

1 tunnin kuluttua lisättiin reaktioseokseen 10 ml 0,1M fosfaattipuskuri-liuosta (pH 7,0). Orgaaninen kerros erotettiin ja sitten kuivattiin. Liuotin poistettiin tislaamalla ja tulokseksi saatu jäännös puhdistettiin 35 pylväskromatografiällä 8 g:n piigeeliä lävitse, eluoiden heksaanln ja etyyliasetaatin seoksella 1:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 642 mg (saanto 92 %) otsikkotuotetta öljynä.

56 80887 1 IR-absorptiotspektri (CHCl^) **max cm 3450, 1802, 1745 (olka), 1715, 1700 (olka).

5 NMR-spektri (CDCl^) S ppm: - (miinus) 0,02 (3H, slngletti); 0,05 (3H, slngletti); 0,80 (9H, slngletti); Ί0 1,18 (3H, dupletti, J * 6 Hz); 2,8-3,6 (7H, multlplettl); noin 4,25 (1H, multlplettl); noin 4,6 (1H, multlplettl); 5,15 (2H, slngletti); •J5 5,36 (2H, slngletti); 7,46 (2H, dupletti); 7,54 (2H, dupletti); 8,17 (2H, dupletti); 8,19 (2H, dupletti).

20

Esimerkki 8(c) p-Nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-^(R)-l-t-butyylidlmetyylisllyylioksletyyllJ-2-£2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)etyylitio3 karbapen-2-eemi-3-25 karboksylaatti

Seosta, jossa oli 165 mg (0,23 mmoolla) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidime-tyylisilyylioksietyyli}-4-([2-p-nitrobentsyylloksikarbonyyliamino)etyyli-tiojkarbonyylimetyyli)-l-(p-nitrobentsyylioksioksalyyli)-2-atsetidlnonla, 30 229 mg (1,38 mmoolla) trietyylifosfUttia, 4 mg hydrokinonia ja 16,5 ml tolueenia, kuumennettiin 90°C.ssa 30 tunnin ajan, typpeä suojakaasuna käyttäen, ja sitten tolueeni tislattiin pois alennetussa paineessa ja jäännös puhdistettiin nestekromatograflalla käyttäen Lobar-pylvästä (E Merck Co., Ltd.) eluoituna bentseenin ja etyyliasetaatin seoksella 35 2:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 107 mg (saanto 68 %) otsikkotuotet- ta kiinteänä aineena.

57 80887 1 Uudelleenklteytys bentseeni-heksaanista antoi puhdasta tuotetta, joka suli 65-67°C:ssa.

IR-absorptiospektri (CHCl^) V* cm 5 3450, 1770, 1715, 1696 (olka).

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 0,09 (6H, slngletti); 1Q 0,88 (9H, singletti); 1,23 (3H, dupletti, J =* 6 Hz); 2,7-3,7 (6H, multipletti); 3,9-4,5 (2H, multipletti); 5.13 (2H, singletti); 15 5,15 (1H, dupletti, J = 14 Hz); 5,39 (1H, dupletti, J = 14 Hz); 7,41 (2H, dupletti); 7,56 (2H, dupletti); 8.13 (2H, dupletti).

20

Esimerkki 9(a) (3S,4R)-3-[(R)-l-t-Butyylidimetyylisilyylioksietyylil-4-(/(S)-l-(p-nitro-bentsyyliokslkarbonyyli)pyrrolidin-3-yylltiolkarbonyyllmetyyli)-2-atse-25 tidlnoni 180 mg (0,50 mmoolia) (3R,4R)-4-asetoksi-3-[(R)-l-t-butyylidimetyylisi-lyylioksietyyl^-l-(trimetyylisilyyli)-2-atsetidinonia ja 414 mg (1,00 mmoolia) (S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-3-(trimetyylisilyyli-30 asetyylitio)pyrrolidiiniä liuotettiin 3 ml:aan metyleenikloridia. Liuokseen lisättiin 15 mg (0,07 mmoolia) trimetyylisilyylitrifluorimetaanisul-fonaattia ja seoksen annettiin seistä huoneen lämpötilassa 15 tunnin ajan. Reaktion mentyä loppuun kaadettiin reaktloseos hämmentäen natriumbikarbonaatin vesiliuokseen. Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin vedellä 35 ja sitten kuivattiin. Liuotin poistettiin tislaamalla ja tulokseksi saatu jäännös puhdistettiin preparatiivisella ohutkerroskromatografiällä, kehitettynä kloroformin ja etyyliasetaatin seoksella 6:1 (tilavuusosia), 58 80887 1 jolloin saatiin 185 mg (saanto 67 %) haluttua tuotetta kiinteänä aineena. Uudelleenkiteytys heksaani-etyyliasetaatista antoi puhtaan tuotteen, joka suli 104-106°C:ssa.

5 IR-absorptiospektri (CHCl^) k* χ cm 3410, 1775, 1685.

NMR-spektri (CDCl^) 5 ppm: 1Q 0,08 (6H, singletti); 0,88 (9H, singletti); 1.19 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 1.7- 2,5 (2H, multipletti); 2.7- 3,0 (2H, multipletti); 15 3,53 (2H, tripletti, J = 7 Hz); 3,2-4,4 (6H, multipletti); 5.19 (2H, singletti); 6,15 (1H, leveä singletti); 7,42 (2H, dupletti); 20 8,20 (2H, dupletti).

Esimerkki 9(b) (3S,4R)-3-f(R)-l-t-Butyylidimetyylisilyylioksietyylil-l-(p-nitrobentsyy-25 lioksloksalyyli)-4-(E(S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin- 3-yyliticlkarbonyylimetyyli)-2-atsetidinoni 57,7 mg (0,105 mmoolia) (3S,4R)-3-f(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksi-etyyli3-l-(p-nitrobentsyylioksioksalyyli)-4-( £(S)-l-(p-nitrobentsyylioksi-30 karbonyyli)pyrrolidin-3-yylitioJkarbonyylimetyyli)-2-atsetidinonia ja 33 mg (0,33 mmoolia) trietyyliamiinia liuotettiin 3 ml:aan metyleeniklo-ridia. Liuokseen lisättiin 73 mg (0,30 mmoolia) p-nitrobentsyylioksi-oksalyylikloridia, jäällä jäähdyttäen ja typpeä suojakaasuna käyttäen. Seosta hämmennettiin 1 tunnin ajan ja sitten se kaadettiin 0,1M fosfaat-35 tipuskuriliuokseen (pH 7,2). Orgaaninen kerros erotettiin ja pestiin kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella. Liuotin poistettiin tislaamalla ja jäännös puhdistettiin pylväskromatografiällä 1,3 g:n piigeeliä lä- 59 80887 1 vitse, jolloin saatiin 67,8 mg (saanto 83 %) haluttua tuotetta öljynä jakeesta, joka eluoitiin bentseenin ja etyyliasetaatin seoksilla tilavuussuhteissa 12:1 - 4:1.

g IR-absorptiospektri (CHCl^) ^max cm 1800, 1754, 1685, 1682.

NMR-spektri (CDCl^) £ ppm: 10 0,03 (3H, singletti); 0,13 (3H,singletti); 0,85 (9H, singletti); 1.23 (3H, dupletti, J - 6 Hz); 1,5-2,5 (2H, multipletti); 15 3,0-5,0 (10H, multipletti); 5.23 (2H, singletti); 5,43 (2H, singletti); 7,50 (2H, dupletti, J = 8 Hz); 7,56 (2H, dupletti, J - 8 Hz); 20 8,22 (4H, dupletti, J “ 8 Hz).

Esimerkki 9(c) p-Nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-C(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyynJ -25 2-[(S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yylitio3 karbapen- 2-eemi-karboksylaatti

Seosta, jossa oli 190 mg (0,25 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyy-lisilyylioksietyyli3-l-(p-nitrobentsyylioksioksalyyli)-4-(£(S)-l-(p-nitro-30 bentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yylitioj karbonyylimetyyli)-2-atse-tidinonia, 250 mg (1,5 mmoolia) trietyylifosfUttia, 10 mg (0,09 mmoolia) hydrokinonla ja 20 ml tolueenla, kuumennettiin 95°C:ssa 15 tunnin ajan typpeä suojakaasuna käyttäen. Reaktioseokselle suoritettiin ohutkerros-kromatografia ja reaktion edetessä lähtöaineen täplä katosi ja havaittiin 35 haluttu karbapeneemi ja (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksi-etyyli3“l-(l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-l-trietoksifosforanylidee-nimetyyli3~4-( £(S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yylitioJ

«° 80887 1 karbonyylimetyyli)-2-atsetidinoni.

Liuotin ja ylimääräinen trietyylifosfiitti tislattiin pois alennetussa paineessa ja öljymäinen jäännös liuotettiin uudelleen 20 ml:aan toluee-5 nia. Liuosta kuumennettiin 95°C:ssa 57 tunnin ajan fosforaanln syklisoi-tumisreaktion viemiseksi loppuun. Liuotin poistettiin tislaamalla ja jäännös puhdistettiin käyttäen Lobar-pylvästä (eluentti: bentseenin ja etyyliasetaatin seos tilavuussuhteessa 2:1), jolloin saatiin 151,5 mg (saanto 83 %) otsikkotuotetta öljynä.

10 -1 IR-absorptiospektri (CHCl^) V χ cm : 1770, 1695.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 15 0,07 (6H, singletti); 0,87 (9H, singletti); 1,24 (3H, dupletti, J 6 Hz); 1,6-2,8 (2H, multipletti); 20 2,8-4,5 (10H, multipletti); 5,14 (1H, dupletti, J 14 Hz); 5,18 (2H, singletti); 5,41 (1H, dupletti, J * 14 Hz); 7,46 (2H, dupletti, J - 9 Hz); 25 7,61 (2H, dupletti, J * 9 Hz); 8,17 (4H, dupletti, J = 9 Hz).

Esimerkki 10(a) 30 (3S,4R)-3-[(R)-l-t-Butyylidimetyylisilyylioksletyyli]-4-(C(S)-l- N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimldoyyll3 pyrrolidin-3-yylitio karbo-nyylimetyyli)-2-atsetidlnoni 2,67 mg (0,93 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksi-35 etyyli3-4-karboksimetyyli-2-atsetidinonia ja 330 mg (1,02 mmoolia) (S)-3-merkapto-l-[N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyylij pyrro-lidiiniä liuotettiin 5 ml:aan bentseeniä. 210 mg (9,02 mmoolia) disyklo- «1 80887 1 heksyylikarbodi-imidiä ja 5 mg (0,04 mmoolia) 4-dimetyyliaminopyridiiniä lisättiin ja seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa 1 tunnin ajan, minkä jälkeen liukenematon aines suodatettiin pois. Suodos väkevöitiin kuiviin haihduttamalla alennetussa paineessa ja tulokseksi saatu öljymäi-5 nen jäännös puhdistettiin pylväskromatografiällä 15 g:n piigeellä lävitse, eluolden bentseenin ja etyyliasetaatin seoksilla tilavuussuhteissa 1:2 - 1:5, jolloin saatiin 495 mg (saanto 90 %) otsikkotuotetta öljynä.

IR-absorptiospektri (CHCl^) cm 10 3410, 1760, 1677.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 0,09 (6H, singletti); 15 0,88 (9H, singletti); 1,20 (3H, dupletti, J = 6,5 Hz); 2,29 (3H, singletti); 1,5-2,5 (2H, multipletti); 2,7-3,0 (2H, multipletti); 20 3,3-4,4 (8H, multipletti); 5,18 (2H, singletti); 6,27 (1H, leveä singletti); 7,52 (2H, dupletti); 8,17 (2H, dupletti).

25

Esimerkki 10(b) (3S,4R)-3-f(R)-l-t-Butyylidlmetyylisilyylioksietyylil-l-(p-nitro-bentsyylioksloksalyyli)-4-([(S)-l- N-(p-nitrobentsyylloksikarbonyyli) 30 asetimidoyyU3pyrrolidin-3-yylitio karbonyylimetyyli)-2-atsetldinoni 185 mg (0,31 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksi-etyyli3~4-(Qs)-l-[N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyli pyrrolidin-3-yylitio]karbonyylimetyyli)-2-atsetidinonia liuotettiin 35 5 ml:aan tetrahydrofuraania. Liuokseen lisättiin tipoittain 0,20 ml (0,32 mmoolia) butyylilitiumin 15 p-% heksaanilluosta typpeä suojakaa-suna käyttäen, -78°C:ssa hämmentäen. Seosta hämmennettiin 2 minuutin 62 80887 1 ajan samassa lämpötilassa ja sitten lisättiin 120 mg (0,49 mmoolia) p-nitrobentsyylioksioksalyylikloridia ja reaktioliuosta hämmennettiin 4 minuutin ajan. 10 ml 0,1M fosfaattipuskuriliuosta (pH 7,1) lisättiin sitten reaktioseokseen, minkä jälkeen sitä uutettiin etyyliasetaatilla. Or-5 gaaniset uutteet kuivattiin ja väkevöinnin jälkeen saatu raaka tuote puhdistettiin pylväskromatografiällä 6 g:n piigeeliä lävitse.

Pylvään eluointi bentseenin ja etyyliasetaatin seoksella 8:1 (tilavuus-osia) antoi epäpuhdasta ainetta ja sitten eluointi bentseenin ja etyyli-|q asetaatln seoksilla tilavuussuhteissa 4:1 - 3:1 antoi 99 mg (saanto 45 %) otsikkotuotetta öljynä.

Eluointi edelleen bentseenin ja etyyliasetaatin seokseilla tilvavuussuh-telssa 1:2 - 1:5 antoi 51 mg (28 %) lähtöainetta.

15 -1 IR-absorptiospektri (CHC1„) y cm : Γ r J max 1808, 1756, 1689.

NMR-spektri (CDCl^) & ppm: 20 -(miinus) 0,03 (3H, singletti); 0,08 (3H, singletti); 0,82 (9H, singletti); 1,20 (3H, dupletti, J - 6,5 Hz); 25 2,29 (3H, singletti); 1,5-2,5 (2H, multipletti); 3,0-4,7 (10H, multipletti); 5.17 (2H, singletti); 5,36 (2H, singletti); 30 7,51 (2H, dupletti); 7,53 (2H, dupletti); 8.18 (2H, dupletti); 8,22 (4H, dupletti).

35 1 Esimerkki 10(c) 63 80887 p-Nltrobentsyyli-(5R,6S)-6-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyHj-2-f(S)-l- N-(p -nitrobentsyylloksikarbonyyli)asetimidoyyli3pyrrolidin-3-5 yylltio karbapen-2-eeml-3-karboksylaatti 99 mg (0,14 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksi-etyyli}-1-(p-nitrobentsyylioksioksalyyli)-4-(£(S)-1- N-(p-nitrobentsyy-lioksikarbonyyli)asetimidoyyli}pyrrolidin-3-yylitio karbonyylimetyyli)-10 2-atsetidinonia, 139 mg (0,84 mmoolia) trietyylifosfiittia ja 4 mg (0,04 mmoolia) hydrokinonia liuotettiin 10 ml:aan tolueenia ja liuosta kuumennettiin 95°C:ssa 24 tunnin ajan, typpeä suojakaasuna käyttäen. Liuotin poistettiin sitten tislaamalla ja jäännös puhdistettiin preparatiivisella piigeeli-ohutkerroskromatografialla (kehitysliuotin: bentseenin ja etyy-15 llasetaatin seos tilavuussuhteessa 3:1), jolloin saatiin 71 mg (saanto 75 %) oteikkotuotetta öljynä.

IR-absorptiospektri (CHC10) v cm 1: 3 max 1773, 1690 (olka).

20 NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 0,09 (6H, singletti); 0,88 (9H, singletti); 25 1,23 (3H, duplettl, J = 6 Hz); 2,28 (3H, singletti); 1,5-2,5 (2H, multipletti); 2,9-4,5 (10H, multipletti); 5,16 (2H, singletti); 30 5,17 (1H, duplettl, J * 14 Hz); 5,40 (1H, duplettl, J - 14 Hz); 7,49 (2H, duplettl); 7,56 (2H, duplettl); 8,15 (4H, duplettl); 35 1 Esimerkki 11 64 80887 p-Nitrobentsyyli-(5R,6S)-2-[2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino) etyylit io3-6-C,(R)-l-tr imetyylisilyylioksietyyli3-karbapen-2-eemi-3-5 karboksylaatti 114 mg (0,16 mmoolia) (3S,4R)-4-([2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-amino)etyylitio} karbonyylimetyyli)-l-(p-nitrobentsyylioksioksalyyli)- 3-£(R)-l-trimetyylisilyylioksietyyli)-2-atsetidinonia, 164 mg (0,99 jq mmoolia) trietyylifosfiittia ja 3 mg (0,03 mmoolia) hydrokinonia liuotettiin 15 ml:aan tolueenia ja liuosta kuumennettiin 100°C:ssa 24 tunnin ajan, typpeä suojakaasuna käyttäen. Reaktion mentyä loppuun liuotin poistettiin tislaamalla alennetussa paineessa ja jäännös puhdistettiin käyttäen Lobar-pylväskromatografiaa (eluentti: bentseenin ja etyyliase-jg taatin seos tilavuussuhteessa 2:1), jolloin saatiin 43 mg (saanto 40 %) otsikkotuotetta kiinteänä aineena. Tämä uudelleenkitetytettiin bentseeni-heksaanista kiteinä, jotka sulivat 105-106°C:ssa.

IR-absorptiospektri (CHC1_) V* cm r 3 max 20 1773, 1718> 1700 (°lka)· NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 0,14 (9H, singletti); 25 1,26 (3H, duplettl, J = 6 Hz); 2.8- 3,7 (7H, multipletti); 3.9- 4,5 (2H, multipletti); 5,15 (2H, singletti); 5,18 (1H, dupletti, J - 14 Hz); 30 5,44 (1H, dupletti, J = 14 Hz); noin 5,3 (1H, leveä singletti); 7,43 (2H, dupletti); 7,59 (2H, dupletti); 8,17 (4H, dupletti).

35 1 Esimerkki 12(a) 65 80887 (3S,4R)-3-[(R)-1-(p-NitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyliJ-4-(f(S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yylitioJkarbonyylimetyyli)-5 l-(p-nitrobentsyylioksioksalyyli)-2-atsetldinonl 182 mg (0,295 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-oksi)etyyliJ-4-([\s)-l-(p-nitrobetnsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yylitio]karbonyylimetyyli)-2-atsetidinonia liuotettiin 10 ml:aan metylee-|Q nikloridia. Tähän liuokseen lisättiin peräjälkeen 110 mg (0,98 mmoolia) 1,4-diatsobisyklo 2,2,2 oktaania ja 450 mg (1,85 mmoolia) p-nitrobentsyy-lioksioksalyyliklorldla, 0°C:ssa hämmentäen. 1 tunnin kuluttua reaktio-seos kaadettiin 40 ml:aan 0,1M fosfaattipuskuriliuosta (pH 7) ja uutettiin metyleenikloridilla. Orgaaniset uutteet pestiin kyllästetyllä nat-15 riumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin. Liuotin poistettiin tislaamalla. Tulokseksi saatu jäännös puhdistettiin pylväskromatograflalla 5 g:n piigeeliä lävitse, eluolden etyyliasetaatin 10-17,5 til-% liuoksilla bentseenissä, jolloin saatiin 169 mg (saanto 69,5 %) otsikkotuotet-ta öljyn muodossa.

20 IR-absorptiospektri (CHCl^) V max cm 1805, 1745, 1695, 1690 (olka).

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 25 1,42 (3H, dupletti, J = 6,5 Hz); 1,5-2,5 (2H, multipletti); 2,7-4,2 (9H, multipletti); noin 4,5 (1H, multipletti); 30 5,17 (2H, singeltti); 5,20 (2H, singletti); 5,36 (2H, singletti); 7,47 (4H, dupletti); 7,52 (2H, dupletti); 35 8,18 (6H, dupletti).

1 Esimerkki 12(b) 66 80887 p-Nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-f(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi) etyyll3-2-£(S)-l-(p-nitrobent8yyliokslkarbonyyll)pyrrolldln-3-yylitioJ g karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 128 mg (0,155 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-oksi)etyyli}-4-([(S)-1-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yylitioi] karbonyylimetyyli)-l-(p-nitrobentsyylioksioksalyyli)-2-atse-|q tidinonla, 155 mg (0,934 mmoolia) trietyylifosfIittiä ja 7 mg (0,06 mmoolia) hydrokinonia liuotettiin 13 ml:aan tolueenia ja liuosta kuumennettiin 90°C:ssa 1,5 tunnin ajan, typpeä suojakaasuna käyttäen. Reaktion mentyä loppuun poistettiin liuotin ja ylimääräinen trietyylifosfiitti poistettiin tislaamalla alennetussa paineessa ja tulokseksi saatu jään-jg nös liuotettiin 13 ml:aan tolueenia ja kuumennettiin 100°C:ssa 80 tunnin ajan, typpeä suojakaasuna käyttäen. Liuotin tislattiin pois ja jäännös puhdistettiin käyttäen Lobar-pylväskromatografiaa (eluentti: etyyliasetaatin ja bentseenin seos tilavuussuhteessa 1:1), jolloin saatiin 69,6 mg (saanto 56,6 %) haluttua tuotetta öljyn muodossa.

20 IR-absorptiospektri (CHCl^) V mgy cm : 1778, 1745, 1695, 1690 (olka).

NMR-spektri (CDCl^) $ ppm: 25 1.47 (3H, dupletti, J 6 Hz); 1,7-2,7 (2H, multipletti); 2,9-4,5 (10H, multipletti); 5.18 (2H, singletti); 30 5,21 (2H, singeltti); 5.19 (1H, dupletti, J = 14 Hz); 5,45 (1H, dupletti, J 14 Hz); 7.47 (4H, dupletti); 7,58 (2H, dupletti); 35 8,17 (6H, dupletti).

1 Esimerkki 13(a) « 80887 (3R, 4R)-4-Asetoksl-3-f(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyH3-l-trimetyyllsilyyli-2-atsetidlnoni 5 Jäällä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli 50 g (0,174 moolia) (3R,4R)- 4-asetoksi-3-[(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli3 -2-atsetidinonia ja 24,6 g (0,244 moolia) trietyyliamiinla 500 ml:ssa tetrahydrofuraania, lisättiin 26,5 g (0,244 moolia) trimetyylikloorisilaania typpivirran 1Q alla. Reaktiolämpötilan annettiin kohota huoneen lämpötilaan ja reaktio-seosta hämmennettiin 2 tunnin ajan. Saostuma suodatettiin pois käyttäen Celite- (tavaramerkki) suodatusapuainetta. Sen jälkeen, kun saostuma oli pesty kahdesti eetterillä, suodos ja pesunesteet yhdistettiin ja liuotin haihdutettiin. Jäännös pestiin eetterillä liukenemattoman aineksen pols-Ί5 tamiseksi suodattamalla. Liuottimen haihduttaminen suodoksesta tuotti 6,23 g (saanto 100 %) otsikkoyhdlstettä jähmeänä aineena.

IR-absorptiospektri (Nujol) ^max cm 1770, 1745.

20 NMR-spektri (CDCl^) £ ppm: 0,06 (6H, singletti); 0,26 (9H, singletti); 25 0,85 (9H, singletti); 1,19 (3H, dupletti, J * 6 Hz); 2,03 (3H, singletti); 3,07 (1H, kaksinkertainen dupletti, J *> 3 & 1 Hz); 4,13 (1H, kaksinkertainen kvartetti, J * 3 & 6 Hz); 30 6,04 (1H, dupletti, J 1 Hz).

Esimerkki 13(b) (3 S,4R)-3-f(R)-l-t-Butyylidlmetyyli8ilyylloksietyylj-4-( Γ( S)-1-35 (p-nitrobentsyyliokslkarbonyyli)pyrrolldln-3-yylitiojkarbonyyllmetyyli)- 2-atsetldlnonl 68 80887 1 180 mg (0,50 mmoolia) (3R,4R)-4-asetoksi-3-[(R)-l-t-butyylidimetyyli- silyylioksietyyliJ-l-(trimetyylisilyyli)-2-atsetidinonia ja 414 mg (1,00 mmoolia) (S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-3-(trimetyyli-silyyliasetyylitio)pyrrolidiiniä liuotettiin 3 ml:aan metyleenikloridia g ja sitten liuokseen lisättiin 15 mg (0,07 mmoolia) trimetyylisilyyli-trifluorimetaanlsulfonaattia ja saadun seoksen annettiin seistä huoneen lämpötilassa 15 tunnin ajan. Reaktion mentyä loppuun reaktioseos kaadettiin hämmentäen natriumbikarbonaatin vesiliuokseen. Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin vedellä ja kuivattiin ja orgaaninen liuotin haihdu-Ί0 tettiin. Jäännös puhdistettiin preparatiivisella ohutkerroskromatogra-flalla, kehitettynä kloroformin ja etyyliasetaatin seoksella 6:1 (tila-vuusosia). Saatiin 185 mg (saanto 67 %) kiinteätä ainetta, joka uudel-leenkiteytettäessä heksaanln ja etyyliasetaatin seoksesta antoi puhdistetun tuotteen, joka suli 104-106°C:ssa.

15 IR-absorptiospektri (CHCl^) ^max cm 3410, 1775, 1685.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 20 0,08 (6H, singletti); 0,88 (9H, singletti); 1.19 (3H, dupletti, J 6 Hz); 1.7- 2,5 (2H, multipletti); 2.7- 3,0 (2H, multipletti); 25 3,53 (2H, tripletti, J » 7 Hz); 3,2-4,4 (6H, multipletti); 5.19 (2H, singletti); 6,15 (1H, leveä singletti); 7,42 (2H, dupletti); 30 8,20 (2H, dupletti).

Esimerkki 13(c) (3S,4R)-3- [(R)-l-t-Butyylidimetyylisllyylioksietyyli3 -l-(p-nitrobentsyy-35 lioksioksalyyli)-4-(C(S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin- 3-yylitiq]karbonyyllmetyyli)-2-atsetidinonl 69 80887 1 Liuos, jossa oli 57,7 mg (0,105 mmoolia) (3S,4R)-3-[(R)-l-t-butyylidi-metyylisilyylioksietyyliJ-4-( £(S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli) pyrrolidin-3-yylitio)karbonyylimetyyli)-2-atsetidinonia ja 33 mg (0,33 mmoolia) trietyyliamiinia 3 ml:ssa metyleenlkloridla, jäähdytettiin jääl-5 lä, minkä jälkeen lisättiin 73 mg (0,30 mmoolia) p-nitrobentsyylioksi-okealyylikloridia typpivirtauksen alla ja seosta hämmennettiin 1 tunnin ajan. Reaktioliuos kaadettiin 0,1M fosfaattipuskuriliuokseen (pH 7,2) ja orgaaninen kerros pestiin kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella.

10

Liuottimen haihduttamisen jälkeen jäännös puhdistettiin pylväskromato-grafiällä käyttäen 1,3 g piigeeliä. Eluoidut jakeet, jotka saatiin bentseenin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteissa 12:1 - 4:1 sekoitetulla liuottimena, kerättiin ja saatiin 67,8 mg (saanto 83 %) otsikkoyhdis-15 tettä öljynä.

IR-absorptiospektri (CHCl^) V* cm 1800, 1754, 1695, 1682.

20 NMR-spektri (CDCl^) δ ppm: 0,03 (3H, singletti); • 0,13 (3H, singletti); 0,85 (9H, singletti); 1.23 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 25 1,5-2,5 (2H, multipletti); 3,0-5,0 (10H, multipletti); 5.23 (2H, singletti); 5,43 (2H, singletti); 7,50 (2H, dupletti, J = 8 Hz); 30 7,56 (2H, dupletti, J = 8 Hz); 8,22 (4H, dupletti, J = 8 Hz).

Esimerkki 13(d) 35 p-Nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-C(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyli3- 2-t(S)-l-(p-nltrobentsyylioksikarbonyyll)pyrrolldin-3-yyliti(3 karbapen- 2-eemi-3-karboksylaatti 70 80887 1 Liuosta, jossa oli 190 mg (0,25 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylimetyy-lisilyylioksietyyl^-1-(p-nitrobentsyylioksioksalyyli)-4-(£(S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yylitiqJ karbonyylimetyyli)-2-atsetidinonia, 250 mg (1,5 mmoolia) trietyylifosfIittiä ja 10 mg (0,90 g mmoolia) hydrokinonia 20 ml:ssa tolueenia, kuumennettiin 95°C:ssa 15 tunnin ajan. Ohutkerroskromatografiällä havaittiin lähtöaineiden katoaminen ja (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksietyyliJ-l-£l-(p-nitro-bentyylioksikarbonyyli)-l-trietoksifosforanylideenimetyylij -4-(£(S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yylitio]karbonyylimetyyli)-|q 2-atsetidinonin ja halutun karbapeneemiyhdlsteen ilmestyminen. Liuotin ja ylimääräinen trietyylifosfiitti haihdutettiin pois alennetussa paineessa. Öljyiseen jäännökseen lisättiin 20 ml tolueenia ja seosta kuumennettiin 95°C:ssa 57 tunnin ajan fosforanylideeniyhdisteen syklisoitumis-reaktion viemiseksi loppuun. Liuottimen haihduttamisen jälkeen jäännös 15 puhdistettiin Lobar-pylväällä. Bentseenin ja etyyliasetaatin seoksella 2:1 (tilavuusosia) eluoitu jae kerättiin ja 151,5 mg (saanto 83 %) ot-sikkoyhdistettä saatiin öljynä.

IR-absorptiospektri (CHC1-) V cm *: J max 20 1770, 1695· NMR-spektri (CDCl^) δ ppm: 0,07 (6H, singletti); 0,87 (9H, singletti); 25 1,24 (3H, dupletti, J * 6 Hz); 1,6-2,8 (2H, multipletti); 2,8-4,5 (10H, multipletti); 5,14 (1H, dupletti, J * 14 Hz); 5,18 (2H, singletti); 30 5,41 (1H, dupletti, J 14 Hz); 7,46 (2H, dupletti, J 9 Hz); 7,61 (2H, dupletti, J - 9 Hz); 8,17 (4H, dupletti, J * 9 Hz).

35 1 Esimerkki 14(a)(1) 7i 80887 (3S>4R)-3-[(R)-l-(p-Nitrobentsyyllokslkarbonyylloksi)etyyli3-A-f(fenyyli-tio)karbonyylimetyyli} -2-atsetidinoni 5

Liuokseen, jossa oli 448 mg (3S,4R)-3-£(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyylioksi)etyyliJ-4-[(fenyylitio)etynyyliJ-2-atsetidinonia 5 mlrssa vedetöntä metyleenikloridia, lisättiin typpeä suojakaasuna käyttäen 0,4 ml trifluorietikkahappoa, hämmentäen ja jäällä jäähdyttäen. Hämmentämistä jq jatkettiin 30 minuutin ajan jäällä jäähdyttäen ja vielä 1,5 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Reaktloseos kaadettiin sitten seokseen, jossa oli 1,0 g natriumbikarbonaattia, 10 ml vettä ja 20 ml etyyliasetaattia. Seos kyllästettiin natriumkloridilla ja orgaaninen kerros erotettiin. Vesiker-rosta uutettiin kahdesti etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros ja etyyli-j5 asetaattiuutteet yhdistettiin ja yhdistetty liuos pestiin peräjälkeen natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridln vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin poistettiin tislaamalla alennetussa paineessa ja jäännökselle suoritettiin pylväskromatografla piigeelin lävitse, eluoiden sykloheksaanin ja 20 etyyliasetaatin seoksella 1:1 (tllavuusosia), jolloin saatiin 95,0 mg (saanto 63,0 %) otsikon tioesteriyhdistettä viskoosina öljynä.

IR-absorptiospektri (CHCl^) ^max cm 1770.

25 NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 1,43(3H, dupletti, J = 6 Hz); 2,9-3,3 (3H, multipletti); 3,8-4,2 (1H, multipletti); 30 4,7-5,4 (1H, multipletti); 5,13 (2H, singletti); 6,40 (1H, leveä singletti); 7,33 (5H, singletti); 7,75 (4H, ^I^kvartetti, Δδ 44 Hz, J = 9 Hz).

35 * massaspektri m/e: 444 (M ).

1 Esimerkki 14(a)(il) 72 80887 (3S,4R)-3-f(R)-l-(p-Nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyli3-l-(p-nitro-bentsyylioksioksalyyli)-4-E(fenyylitio)karbonyyllmetyyli3-2-atsetidinoni 5 1,00 g (2,25 mmoolia) (3S,4R)-3-[(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-oksi)etyyli] -4~£(fenyylitio)karbonyylimetyyliJ -2-atsetidinonia liuotettiin 20 ml:aan metyleenikloridia. Liuokseen lisättiin 350 mg (2,71 mmoolia) di-isopropyylietyyliamiinia ja sitten 660 mg (2,71 mmoolia) p-nitro-1q bentsyylioksioksalyylikloridia, hämmentäen 0°C:ssa. 15 minuutin kuluttua lisättiin vielä 230 mg (1,78 mmoolia) di-isopropyylietyyliamiinia ja 433 mg (1,78 mmoolia) p-nitrobentsyylioksioksalyylikloridia ja seosta hämmennettiin siinä lämpötilassa 15 minuutin ajan. Reaktion mentyä loppuun, lisättiin reaktioseokseen 30 ml 0,1M fosfaattlpuskurlliuosta 15 (pH 7,1) ja orgaaninen kerros erotettiin. Vesikerrosta uutettiin kloroformilla. Orgaaninen kerros yhdistettiin kloroformiuutteeseen ja sitten liuotin tislattiin seoksesta. Jäännös liuotettiin 50 ml:aan bentseenin ja etyyliasetaatin seosta 1:1 (tilavuusosla), pestiin peräjälkeen 0,02 N kloorivetyhapolla, vedellä, natriumbikarbonaatin 5 p-% vesiliuoksella ja 20 kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois, jolloin saatiin 1,47 g (saanto 100 %) otsikkotuotetta kiteinä, jotka uudelleenkiteytettiin bentseenin ja etyyliasetaatin seoksesta, jolloin saatiin puhdasta tuotetta, joka suli 129-130°C:ssa.

25

Esimerkki 14(b)(1) (3S,4R)-3-[(R)-l-t-butyylidimetyyli8ilyyliok8ietyylij-l-i(R)-2-metyyli-1(p-nitrobentsyylioksikarbonyyll)-prop-2-enyyli3-4-£(fenyylitio)karbo-30 nyylimetyyli3-2-atsetidinoni 83 mg (0,160 mmoolia) (3R,4RS)-4-asetoksi-3- [(R)-l-t-butyylidimetyyli-silyylioksietyylij -l-£(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-2-metyyli-prop-2-enyyliJ-2-atsetidinonia ja 54 mg (0,24 mmoolia) 1-fenyylitio-l-35 (trimetyylisilyylioksi)eteeniä liuotettiin 3 ml:aan kuivaa metyleeniklo ridia. Liuokseen lisättiin 6 mg (0,025 mmoolia) trimetyylisilyylitrifluo-rimetaanisulfonaattia ja seoksen annettiin seistä typpikaasulla suojat- 73 80887 1 tuna 72 tunnin ajan. Reaktion mentyä loppuun kaadettiin reaktioseos laimeanaan natriumbikarbonaatin vesiliuokseen ja uutettiin kloroformilla. Kloroformi tislattiin uutteesta ja jäännös käsiteltiin ohutkerroskroma-tografiällä, käyttäen pligeeliä kehitettynä heksaanin ja etikkahapon g seoksella 4:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 86 mg (saanto 88 %) otsik-kotuotetta.

IR-absorptiospektri (CHC1-) V cm r J max 1750 (olka), 1740, 1695.

10

Ominaiskiertokyky ^: -50° (C = 1,04, kloroformi).

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 15 0,03 (3H, singletti); 0,06 (3H, singletti); 0,85 (9H, singletti); 1,18 (3H, dupletti, J - 6 Hz); 1,85 (3H, leveä singletti); 20 2,86 (1H, kaksinkertainen dupletti, J * 15 & 7 Hz); 3,00 (1H, kaksinkertainen dupletti, J * 5 & 2,5 Hz); 3.20 (1H, kaksinkertainen dupletti, J 15 & 5,5 Hz); 3,9-4,6 (2H, multipletti); 4,78 (1H, singletti); 25 4,87 (1H, leveä singletti); 5,02 (1H, leveä); 5.20 (2H, singletti); 7,36 (5H, singletti); 7,45 (2H, dupletti); 30 8,16 (2H, dupletti).

Esimerkki 14(b)(li) (3S,4R)-3-I(R)-l-HydroksietyylO-l-f2-metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksi-35 karbonyyli)prop-l-enyyll3 -4-C(fenyylitio)karbonyylimetyyll3-2-atsetldi-nonl n 80887 1 64 mg (0,104 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksi- etyyliJ-l-[(R)- 2-metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)prop-2-enyyliJ-4-£(fenyylitio)karbonyylimetyyliJ-2-atsetidinonia liuotettiin 1,5 mlraan asetonitriiliä. Liuokseen lisättiin, hämmentäen -15°C:ssa, 5 15 mg (0,106 mmoolia) booritrifluoridi-eteraattia. 30 minuutin kuluttua reaktioseos laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella. Liuotin poistettiin tislaamalla alennetussa paineessa ja tulokseksi saatu jäännös käsiteltiin ohutkerroskromatogra-fialla, käyttäen piigeeliä kehitettynä bentseenin ja etyyliasetaatin 10 seoksella 2:3 (tilavuusosisa), jolloin saatiin 48 mg (saanto 92 %) otsik-kotuotetta.

IR-absorptiospektri (CHCl^) ^max cm 3480, 1748, 1720 (olka), 1700 (olka), 1625.

15 NMR-spektri (CDCl^) £ ppm: 1,26 (3H, dupletti, J = 6,5 Hz); 1,99 (3H, singletti); 20 2,23 (3H> singletti); noin 2,95 (1H, multipletti); 2,97 (2H, dupletti, J - 6,5 Hz); 3,9-4,5 (2H, multipletti); 5,24 (2H, singletti); 25 7,35 (5H, leveä singletti); 7,49 (2H, dupletti); 8,17 (2H, dupletti).

Esimerkki 14 (b)(iii) 30 (3S,4R)-l-[2-metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)prop-l-enyyliJ-3 [(R)-1-(p-nltrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyljj-4-£(fenyylitio) karbonyyllmetyyli]-2-atsetldinoni 35 44 mg (0,088 mmoolia) (3S,4R)-3-f(R)-l-hydroksietyyli^-l-[2-metyyli-l- (p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)prop-l-enyyli^-4-£(fenyylitio)karbo-nyylimetyyli^-2-atsetidinonia liuotettiin 2 mlraan metyleenikloridia.

75 80887 1 Liuokseen lisättiin 32 mg (0,26 mmoolia) 4-(N,N-dimetyyliamino)pyridiiniä ja 57 mg (0,26 mmoolia) p-nitrobentsyylioksikarbonyylikloridia, hämmentäen 0°C:ssa. Seosta hämmennettiin siinä lämpötilassa 3 tunnin ajan, minkä jälkeen se kaadettiin laimeaan natriumbikarbonaatin vesiliuokseen ja 5 uutettiin kloroformilla. Kloroformiuute pestiin peräjälkeen laimealla kloorivetyhapolla ja laimealla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin tislattiin sitten pois. Jäännöstä käsiteltiin ohutkerroskromatografiällä, käyttäen piigee-liä kehitettynä bentseenln ja etyyliasetaatin seoksella 3:1 (tilavuus-1Q osia), jolloin saatiin 21 mg (saanto 35 %) otsikkotuotetta öljynä.

IR-absorptiospektri (CHCl^) ^ max Cm 1756, 1720 (olka), 1700 (olka), 1625.

15 NMR-spektri (CDCl^) 5 ppm: 1,41 (3H, dupletti, J - 6,5 Hz); 1,96 (3H, singletti); 2.23 (3H, singletti); 20 2,91 (2H, dupletti, J 6,4 Hz); 3,11 (1H, kaksinkertainen dupletti, J = 8,5 & 2,5 Hz); 4.31 (1H, kolminkertainen dupletti, J * 6,5 & 2,5 Hz); 5,08 (2H, singletti); 5.23 (2H, singletti); 25 5,1 (1H, multipletti); 7.32 (5H, singletti); 7,39 (2H, dupletti); 7,49 (2H, dupletti); 8,15 (4H, dupletti).

30

Esimerkki 14(b)(iv) (3S,4R)-3-C(R)-l-(p-Nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyli!-l-(p-nitrobentsyylloksioksalyyll)-4- f(fenyylitio)karbonyylimetyyl:0-2-35 atsetidinoni

Otsonia kuplitettiin liuoksen, jossa oli 97 mg (3S,4R)-l-[2-metyyli-l- 76 80887 1 (p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)prop-l-enyyli3-3-£(R)-l-(p-nitrobentsyyli-oksikarbonyylioksi)etyyli)-4- £( fenyylitio)karbonyylimetyylij-2-atsetidi-nonia 10 ml:ssa metyleenikloridia, lävitse -78°C:ssa. Kun reaktioseos oli muuttunut siniseksi, kuplltettiin seoksen lävitse typpikaasu ylimää-5 rälsen otsonin poistamiseksi. 0,1 ml dimetyylisulfidia lisättiin sitten reaktioseokseen ja sen lämpötila kohotettiin huoneen lämpötilaan noin 5 minuutissa. Seos väkevöitiin sitten haihduttamalla alennetussa paineessa. Jäännös liuotettiin bentseenlin, pestiin kahdesti vedellä ja kuivattiin. Liuotin tislattiin pois, jolloin saatiin 93 mg (saanto 100 %) otsikko--jQ tuotetta kiinteänä aineena, joka uudelleenkiteytettiin bentseenin ja etyyliasetaatin seoksesta ja saatiin puhdasta tuotetta, joka suli 129-130°C:ssa.

Alkuaineanalyysi J5 laskettu C30H25°12N3S:

C 55,30 7.; H 3,87 (; N 6,45 %; S 4,92 % löydetty C 55,49 %; H 3,92 %; N 6,30 %; S 4,87 X

20 IR-absorptiospektri (Nujol) ^ max cm 1810, 1748, 1728, 1700, 1690 (olka).

Ominaiskiertokyky (o*.}^ ’· -48° (C = 1,02 kloroformi).

25 NMR-spektri (CDC13) δ ppm: 1,43 (3H, dupletti, J = 6,5 Hz); 3,12 (1H, kaksinkertainen dupletti, J * 16 & 8 Hz); 3,53 (1H, kaksinkertainen dupletti, J = 16 & 4 Hz); 30 3,66 (1H, kaksinkertainen dupletti, J = 7 & 3,5 Hz); 4,55 (1H, multipletti); 5.11 (2H, singletti); 5,35 (2H, singletti); noin 5,2 (1H, multipletti); 35 7,52 (4H, dupletti); 8.12 (2H, dupletti); 8,16 (2H, dupletti).

1 Esimerkki 14(c) 77 80887 (3S,4R)-3-f(R)-l-(p-Nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyliJ-l-fi-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyylij-5 4-£(fenyylitio)karbonyylimetyyli3-2-atsetidinoni 147 mg (0,225 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-oksi)etyyli]-l-(p-nitrobentsyylioksioksalyyli)-4-£(fenyylitio)karbonyyli-metyyli]-2-atsetidlnonia ja 234 mg (1,13 mmoolia) tri-isopropyylifosfiit-Ί0 tia liuotettiin 3 ml:aan bentseeniä ja sitten seosta hämmennettiin typpi-kaasuvirtauksessa 70°C:ssa 1,5 tunnin ajan. Liuotin poistettiin sitten tislaamalla ja tulokseksi saatua jäännöstä käsiteltiin kromatografiällä käyttäen Lobar-pylvästä A (E. Merck Co:n tuote), eluoiden bentseenin ja etyyliasetaatin seoksella 3:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 161 mg •J5 (saanto 85 %) otsikkoyhdistettä öljymäisenä aineena.

IR-absorptiospektri (CHCl^) ^ max cm 1748, 1700, 1630.

20 Esimerkki 15(a) (3S,4R)-3-f(R)-l-Hydroksietyyli3-4-(f2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-amlno)etyylitio karbonyyllmetyyli)-l-Cl-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-2-me tyyli-l-propenyylil-2-atsetldinoni 25

Liuokseen, jossa oli 150 mg (0,198 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)~l-t-butyyli-dimetyylisilyylioksie tyyli] -4-( £2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino) etyylitio] karbonyylimetyyli)-l-£2 -metyyli-1-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyyli)prop-l-enyyli]-2-atsetldinonia 5 ml:ssa asetonitriiliä, lisättiin 30 28 mg (0,197 mmoolia) booritrlfluoridl-eteraattla, hämmentäen ja jäällä jäähdyttäen. 20 minuutin kuluttua reaktioseos laimennettiin 10 ml:11a etyyliasetaattia, pestiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kuivattiin. Liuotin poistettiin tislaamalla, jolloin saatiin 125 mg (saanto 98 %) otsikkotuotetta öljymäisenä aineena.

35 IR-absorptiospektri (CHCl^) ^ cm 3450, 3400, 1747, 1720, 1700 (olka), 1680.

78 80887 1 NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 1,25 (3H, dupletti, J - 6 Hz); 1,94 (3H, singletti); g 2,18 (3H, singletti); 2,5-3,6 (7H, multipletti); 3,8-4,5 (2H, multipletti); 5.13 (2H, singletti); 5,22 (2H, singletti); JO 5,4 (1H, leveä singletti); 7,42 (2H, dupletti); 7,50 (2H, dupletti); 8.14 (4H, dupletti).

15 Esimerkki 15(b) (3S,4R)-4-(£2-(p-Nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)etyylltiolkarbonyyli-metyyli)-1-£2 -metyyli-l-(p-nitrobentsyylloksikarbonyyli)prop-l-enyyli3- 3- £(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyli3-2-atsetidlnoni 20 125 mg (0,194 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-hydroksietyyli3-4-(£2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)etyylitio]karbonyylimetyyli)-l-|2-metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)prop-1-enyyli)-2-atsetidinonia liuotettiin 4 mlraan metyleenikloridia. Liuokseen lisättiin vuorollaan 25 71 mg (0,58 mmoolia) 4-(N,N-dimetyyliamino)pyridiiniä ja 126 mg (0,58 mmoolia) p-nitrobentsyylioksikarbonyylikloridia, hämmentäen 0°C:ssa. Reaktioseosta hämmennettiin sitten huoneen lämpötilassa 1 tunnin ajan, minkä jälkeen se laimennettiin metyleenikloridilla ja pestiin kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella. Liuotin poistettiin tislaamalla ja 30 jäännös kromatografoltiin käyttäen Lobar-pylvästä B eluoltuna heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 2:3 (tilavuusosia), jolloin saatiin 82 mg (saanto 51 %) otsikkotuotetta Öljymäisenä aineena. Tuotteen IR- ja NMR-spektrit olivat yhtäpitävät valmistuksen 5 tuotteen kanssa.

35 1 Esimerkki 15(c) 79 80887 (3S ,4R)-4-([2-(p-Nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)etyylitiolkarbonyyli-metyyli)-3-f(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyliJ-l-(p-nitro-5 bentsyylioksioksalyyli)-2-atsetidinoni 31 mg (3S,4R)-4-(f2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)etyylitio]karbo-nyylimetyyli)-l-£2-metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)prop-l-enyylij -3-£(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksietyyli} -2-atsetidi-1Q nonia liuotettiin 15 mlraan metyleenikloridia ja otsonia kuplitettiin liuoksen lävitse -78°C:ssa 5 minuutin ajan. Seoksen annettiin sitten seistä tässä lämpötilassa 15 minuutin ajan, minkä jälkeen seoksen lävitse kuplitettiin typpikaasua ylimääräisen otsonin poistamiseksi. 50 mg dimetyylisulfidia lisättiin reaktloseokseen, joka lämmitettiin sitten 15 huoneen lämpötilaan 10 minuutin kuluessa. Liuotin poistettiin tislaamalla ja jäännös liuotettiin bentseeniin, pestiin kahdesti vedellä ja kuivattiin. Liuotin tislattiin pois alennetussa paineessa, jolloin saatiin 27 mg (saanto 90 %) otsikkotuotetta öljymäisenä aineena.

20 IR-absorptiospektri (CHCl^) cni 1808, 1749, 1718 (leveä), 1700 (olka), 1682 (olka).

NMR-spektri (CDCl^) 4 ppm: 25 1,40 (3H, dupletti, J = 6,5 Hz); 2,7-3,7 (7H, multipletti); 4,5 (1H, multipletti); 5,13 (2H, singletti); 5,19 (2H, singletti); 30 5,35 (2H, singletti); 4,9-5,4 (2H, multipletti); 7,43 (2H, dupletti); 7,46 (2H, dupletti); 7,50 (2H, dupletti); 35 8,15 (2H, dupletti); 8,17 (4H, dupletti).

1 Esimerkki 15(d) so 80 887 (3S,411)-4-(f2-(p-Kitrobentsyylioksikarbonyyliamino)etyylitio]karbonyyli-metyyli)-3-f(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyliJ-l-fl-(p-5 nitrobentsyylioksikarbonyylil-l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyyli -2-atsetidinoni

Seosta, jossa oli 165 mg (0,207 mmoolia) (3S,4R)-4-(^2-(p-nitrobentsyy-1ioksikarbonyyliamino)etyylitiojkarbonyylimetyyli)-3-£(R)-l-(p-nitro-Ί0 bentsyylioksikarbonyylioksDetyyli] -l-(p-nitrobentsyylioksioksalyyli)-2-atsetidinonia ja 215 mg (1,04 mmoolia) tri-isopropyylifosfIittiä 3 mlrssa tolueenin, hämmennettiin 80°C:ssa typpikaasuvirrassa 1,5 tunnin ajan. Liuotin poistettiin sitten tislaamalla ja jäännös kromatogra-foitiin käyttäen Lobar-pyIvasta A (E. Merck Co:n tuote), eluoitu bent-j5 seenin ja etyyliasetaatin seoksella 1:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 182 mg (saanto 89 X) otsikkotuotetta öljymäisenä aineena.

IR-absorptiospektri (CHC1«) v cm j max 3450, 1745 (leveä), 1682, 1632.

20

Esmerkki 15(e) p-Nitrobentsyyli-(5R,6S)-2-[2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyliamino) etyylitio3-6- [(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyylij karbapen-25 2-eemi-3-karboksylaatti

Seosta, jossa oli 48 mg (3S,4R)-4-(^2-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-amino)etyylitioJ karbonyylimetyyli)-3- [(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyylioksi)etyyli} -1- £l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-l-tri-isopropoksi-30 fosforanylideenimetyyli}-2-atsetidinonia ja 30 mg hydrokinonia 5 missä ksyleeniä, kuumennettiin 120°C:ssa typpikaasuvirtauksen alla 13 tunnin ajan. Ksyleeni poistettiin sitten tislaamalla ja jäännös kromatografoltiin käyttäen Lobar-pyIvasta A eluoituna kloroformin ja etyyliasetaatin seoksella 2:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin raakakiteitä, jotka uudel-35 1eenkiteytettiin bentseenin ja etyyliasetaatin seoksesta, jolloin saatiin 19 mg (saanto 51 X) värittömiä prismoja, jotka sulivat 158-150°C:ssa.

ei 80887 1 Alkuaineanalyysi laskettu C34H31°16N5S:ile C 53,33 %; H 4,08 %; N 9,15 %; S 4,19 % löydetty C 53,19%; H 4,07 %; N 9,13 %; S 4,43 %.

5 _! IR-absorptiospektri (CHCl^) ^max cm : 3450, 1780, 1740 (olka), 1718, 1700 (olka).

Ominaiskiertokyky M ^ : +66° (C = 0,81, kloroformi).

10 NMR-spektri (CDCl^) $ ppm: 1,47 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 2,7-3,7 (7H, multipletti); 15 4,20 (1HZ, multipletti); noin 5,1 (1H, multipletti); 5,16 (2H, singletti); 5,22 (2H, singletti); 5,18 (1H, dupletti, J - 14 Hz); 20 5,47 (1H, dupletti, J - 14 Hz); 7,45 (2H, dupletti); 7,49 (2H, dupletti); 7,60 (2H, dupletti); 8,20 (6H, dupletti).

25

Esimerkki 16(a)(1) (3S,4R)-3-L(R)-l-Hydroksietyyli}-4-(f(S)-l-[N-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli)asetimldoyyHlpyrrolidln-3-yylltiq3karbonyylimetyyli)-l- 30 f2-metyyli-l-(p-nltrobentsyyliokslkarbonyyli)prop-l-enyyliJ-2-atse- tidinoni 511 mg (0,62 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyylisllyylioksi-etyyliJ-4-( £(S)-1-[N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyliJ 35 pyrrolidin-3-yylitio3karbonyylimetyyli)-l-£2-metyyli-l-(p-nitrobent-syylioksikarbonyyli)prop-l-enyyli]-2-atsetidinonia liuotettiin 20 ml:aan asetonitriiliä. Tähän liuokseen lisättiin 176 mg (1,24 mmoo- 82 80 887 1 lia) booritrifluoridi-eteraattia, hämmentäen ja jäällä jäähdyttäen. Reak-tloseos jätettiin sitten seisomaan huoneen lämpötilaan 2,5 tunnin ajaksi, minkä jälkeen se laimennettiin etyyliasetaatilla, pestiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kuivattiin. Liuotin poistettiin tislaamalla, g jolloin saatiin 462 mg otsikkotuotetta.

IR-absorptiospektri (CHCl^) v*max cm 3500, 1749, 1718, 1674.

10 NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 1,24 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 1,94 (3H, singletti); 2,19 (3H, singletti); 15 2,28 (3H, singletti); 1,7-2,5 (2H, multipletti); 2,87 (2H, dupletti, J = 6,5 Hz); 3,1-4,5 (8H, multipletti); 5,15 (2H, singletti); 20 5,22 (2H, singletti); 7,49 (2H, dupletti); 7,51 (2H, dupletti); 8,13 (2H, dupletti); 8,17 (2H, dupletti).

25

Esimerkki 16(a)(ii) (3S,4R)-4-( C(S)-l-[N-(p-Nitrobentsyylioksikarbonyyli)a8etimidoyyll3pyrro-lidin-3-yylitic3 karbonyylimetyyli)-l-(2-metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksi-30 karbonyyli)prop-l-enyyll·] -3-f(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyIloksi) etyyli]-2-atsetidinoni 56 mg (0,079 mmoolia) (3S,4R)-3-{(R)-l-hydroksietyyli]-4-(£(S)-l-[N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)3 asetimidoyyli pyrrolidin-3-yylitiqJ karbo-35 nyylimetyyli)-1-^2 -metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)prop-1- enyyli3-2-atsetidinonia liuotettiin 1,5 ml:aan metyleenikloridia. Liuokseen lisättiin vuorollaan 29 mg (0,24 mmoolia) 4-(N,N-dimetyyliamino) m 80887 1 pyridiiniä ja 51 mg (0,24 moolia) p-nitrobentsyylioksikarbonyylikloridia, hämmentäen 0°C:ssa. Reaktloseosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa 3 tunnin ajan, laimennettiin metyleenlkloridilla, pestiin natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin 5 poistettiin tislaamalla ja jäännöstä käsiteltiin ohutkerroskromatogra- fialla, käyttäen piigeeliä kehitettynä heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 1:5 (tilavuusosia), jolloin saatiin 30 mg (saanto 42 %) otsikkotuo-tetta öljymäisenä aineena. Myös 8 mg (14 Z) lähtöainetta otettiin talteen.

Ί0 IR-absorptiospektri (CHCl^) V cm 1756, 1720 (olka), 1677.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: Ί5 1,41 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 1,94 (3H, singletti); 2,21 (3H, singletti); 2,27 (3H, singletti); 1,7-2,5 (2H, multipletti); 20 2,81 (2H, dupletti, J = 6,5 Hz); 3,06 (1H, kaksinkertainen dupletti, J = 7,5 & 2 Hz); 3,2-4,1 (5H, multipletti); 4,26 (1H, kolminkertainen dupletti, J = 6,5 & 2 Hz); noin 5,1 (1H, multipletti); 25 5,18 (4H, singletti); 5,23 (2H, singletti); 7,46 (2H, dupletti); 7,50 (4H, dupletti); 8,13 (2H, dupletti); 30 8.16 (4H, dupletti).

Esimerkki 16(a)(lii) (3S,4R)-4-( I(S)-l-(N-(p-Nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyylij pyrro 35 lldin-3-yylitio karbonyylimetyyli)-3- C(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbo- nyylioksi)etyyli3-l-fp-nitrobentsyylioksioksalyyHj 2-atsetidinoni 84 80 887 1 34 mg (0,038 mmoolia) (3S,4R)-4-(£(S)-l- N-(p-nitrobentsyylioksikarbo- nyyli)asetimidoyyli3pyrrolidin-3-yylitio karbonyylimetyyli)-l-£2-metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)prop-l-enyyli]-3-£(R)-l-(p-nitrobent-syylioksikarbonyylioksi)etyyli^-2-atsetidinonia liuotettiin 10 ml:aan g metyleenikloridia. Otsonia kuplitettiin liuoksen lävitse -78°C:ssa 3 minuutin ajan. Seos jätettiin sitten seisomaan siinä lämpötilassa 10 minuutiksi, minkä jälkeen lävitse kuplitettiin typpikaasua ylimääräisen otsonin poistamiseksi. 30 mg dimetyyllsulfidia lisättiin sitten seokseen, joka sitten lämmitettiin huoneen lämpötilaan noin 10 minuutin ajan kulues-•fQ sa ja kaadettiin jään ja veden seokseen. Kloroformikerros erotettiin, pestiin vedellä ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin poistettiin tislaamalla, jolloin saatiin 33 mg (saanto 100 %) otsikkotuotet-ta öljymäisenä aineena.

•jtj IR-absorptiospektri (CHCl^) v max cm 1810, 1753, 1682 (leveä).

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 20 1,42 (3H, dupletti, J = 6,5 Hz); 1.8- 2,5 (2H, multipletti); 2,26 (3H, singletti); 2.8- 4,2 (8H, multipletti); noin 4,5 (1H, multipletti); 25 5,17 (2H, singletti); 5,21 (2H, singletti); 5,37 (2H, singletti); noin 5,2 (1H, multipletti); 7,52 (6H, leveä dupletti); 30 8,15 (2H, dupletti); 8,19 (4H, dupletti).

Esimerkki 16(b)(1) (3S,4R)-3-l(R)-l-(p-Nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyylil-4- f(fenyyli-tio)karbonyylimetyylil -2-atsetidinoni 35 85 80887 1 203 mg (0,36 mmoolia) atsetidinonia, saatu kuten on selostettu kohdassa

Valmistus 7(a), liuotettiin 10 ml:aan asetonia. Tulokseksi saatuun liuokseen lisättiin 3,0 g (15,2 ekvivalenttia) cerium (IV) ammoniumnitraattia 5 mlrssa vettä, hämmentäen huoneen lämpötilassa. Seosta hämmennettiin 5 edelleen huoneen lämpötilassa, samalla kun siihen lisättiin 200 ml etyyliasetaattia ja 50 ml vettä. Sitten seosta hämmennettiin ja sen pH säädettiin arvoon noin 7,0 lisäämällä natriumkbikarbonaatin 5 p-% vesiliuosta. Etyyliasetaattikerros erotettiin, pestiin 50 ml:11a kyllästettä natrium-kloridin vesiliuosta ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla.

JO Magnesiumsulfaatti poistettiin suodattamalla ja etyyliasetaatti tislattiin suodoksesta alennetussa paineessa. Jäännös kromatografoltiin Lobar-pylvässä, eluolden sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 2:1 (tila-vuusosia), jolloin saatiin 119 mg (69,5 %) haluttua atsetidinoniyhdistet-tä.

15 IR-absorptiospektri (CHCl^) V max cm 1770.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 20 1,43 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 2,9-3,3 (3H, multipletti) 3,8-4,2 (1H, multipletti); 4,7-5,4 (1H, multipletti); 25 5,13 (2H, singletti); 6,40 (1H, leveä singletti); 7,33 (5H, singletti); 7,75 (4H, A2B2~kvartettI, “ 44 Hz, J - 9 Hz).

* 30 massaspektri m/e: 444 (M ).

Esimerkki 16(b)(ii) (3S,4R)-4-(C(S)-l- N-(p-Nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyli 35 pyrrolidin-3-yylitiq3karbonyylimetyyli)-3- f(R)-l-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyylioksl)etyyli]-2-atsetidinoni 86 80887 1 Liuokseen, jossa oli 115 mg (0,26 mmoolia) esimerkissä 16(b)(i) selostetulla tavalla saatua atsetidlnonia 5 mlrssa kuivaa metyleenikloridia, lisättiin 125 mg (0,386 mmoolia) (S)-3-merkapto-l-[N-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli)asetimidoyyliJpyrrolidiiniä. Tulokseksi saatuun seokseen lisät-5 tiin katalyyttinen määrä trietyyliamiinia, hämmentäen huoneen lämpötilassa ja jatkaen hämmentämistä yli yön.

Reaktion mentyä loppuun poistettiin liuotin tislaamalla ja jäännös kro-matografoitiin käyttäen Lobar-pylvästä eluoituna etyyliasetaatilla, jol-Ίq loin saatiin 168 mg (saanto 98,0 %) otsikon atsetidinoniyhdistettä.

NMR-spektri (CDCl^) gppm: 1,42 (3H, dupletti, J = 6 Hz); j5 2,28 (3H, singletti); 1,5-2,6 (2H, multipletti); 2,90 (2H, ddupletti, J - 6,5 Hz); 3,05 (1H, leveä dupletti, J = 7 Hz); 3,2-4,2 (6H, multipletti); 20 4,9-5,3 (1H, multipletti); 5,18 (2H, singletti); 5,22 (2H, singletti); 6,7 (1H, singletti); 7,4-8,3 (8H, multipletti).

25

Esimerkki 16(b)(lii) (3R,4R)-1- fl-Hydroksi-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)metyyliJ-4-( (S)-l-[N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyylj3 pyrrolidin-3-30 yylitiql karbonyylimetyyli)-3-f(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-oksi)etyyli -2-atsetidinoni

Seosta, jossa oli 950 mg (1,45 mmoolia) (3S,4R)-4-(£(S)-l-[N-(p-nitro-bentsyy11 oksikarbonyyli)asetimidoyyl^pyrrolidin-3-yylit ioj karbonyyli-35 metyyli) — 3— ^(K)-l-(p-nitrobentsyylioksi)etyyliJ-2-atsetidinonia, 492 g (2,17 mmoolia) p-nitrobentsyyliglyoksylaatin hydraattia, 9 g molekyyli-seulaa 4A ja 18 mg (0,17 mmoolia) trietyyliamiinia 20 ml:ssa tetrahydro- 87 80887 1 furaania, hämmennettiin huoneen lämpötilassa 3 tunnin ajan. Tämän ajan lopussa reaktioseos suodatettiin ja liuotin tislattiin suodoksesta. Jäännös kromatografoitiin käyttäen Lobar-pylvästä B eluoituna bentseenin ja etyyliasetaatin seoksella 1:5 (tilavuusosia), jolloin saatiin 970 mg 5 (saanto 77 £) otsikkotuotetta öljymäisenä aineena.

IR-absorptiospektri (CHCl^) γ* cm 3400, 1748, 1675.

Ί0 NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 1,37 (3H, dupletti, J = 6,5 Hz); 1.7- 2,5 (2H, multipletti); 2,27 (3H, singletti); 15 2,7-3,2 (3H, multipletti); 3,3-4,3 (6H, multipletti); 5,15 ja 5,27 (2H, singletti); 5.19 (4H, singletti); 4.8- 5,6 (2H, multipletti); 20 7,51 (4H, dupletti); 7,53 (2H, dupletti); 8,17 (2H, dupletti); 8.20 (4H, dupletti).

25 Esimerkki 16 (b)(iv) (3S,4R)-4-( l(S)-l-CN-(p-Nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetlmidoyylll pyrrolidin-3-yylltio3karbonyylimetyyli)-3- f(R)-l-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyylioksi)etyyli)-l-fp-nitrobentsyylioksioksalyylil -2-atsetidi- 30 noni 110 mg (0,87 mmoolia) oksalyylikloridia liuotettiin 5 ml:aan metyleeni-kloridia. Liuokseen lisättiin 137 mg (1,75 mmoolia) dimetyylisulfoksidia typpikaasuvirran alla -78°C:ssa. Seosta hämmennettiin sitten 10 minuutin 35 ajan, minkä jälkeen seokseen lisättiin 2 minuutin aikana liuos, jossa oli 500 mg (0,577 mmoolia) (3R,4R)-l-£l-hydroksi-l-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyyli)metyylij-4-( £(S)-1- N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyli 88 80 887 1 pyrrolidin-3-yylitioJkarbonyylimetyyli)-3- [(R)-l-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyylioksi)etyyliJ-2-atsetidinonia. Seosta hämmennettiin 5 minuutin ajan ja sitten siihen lisättiin 250 mg (2,48 mmoolia) trietyyliamiinia ja seosta hämmennettiin 15 minuutin ajan. Noin 30 ml 0,1 M fosfaattipus-5 kuriliuosta (pH 7,1) lisättiin seokseen, jota sitten hämmennettiin ja uutettiin metyleenikloridilla. Uute kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja liuotin poistettiin tislaamalla. Jäännös kromatografoitiin nopeasti pylväässä 10 g:n piigeeliä lävitse, eluoiden bentseenin ja etyyliasetaatin seoksilla 2:1 - 1:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 350 mg 10 (saanto 70 %) otsikkotuotetta öljymäisenä aineena. Tuotteen IR- ja NMR-spektrit olivat yhtäpitävät esimerkissä 16(a)(lii) selostetulla tavalla saadun tuotteen kanssa.

Esimerkki 16(c) 15 (3S,4R)-4-( [(S)-l-[N-(p-Nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyli] pyrrolidin-3-yylitio3karbonyylimetyyli)-3-f(R)-l-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyylioksi)etyyli!-l-|l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyyli!-2-atsetidinoni 20 430 mg (0,497 mmoolia) (3S,4R)-4-(£(S)-l-[N-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyyli)asetimidoyyliJ pyrrolidin-3-yylitioJkarbonyylimetyyli)-3-f(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyylij-l-(p-nitrobentsyylioksioksa-lyyli)-2-atsetidinonia ja 517 mg (2,49 mmoolia) tri-isopropyylifosfiit-25 tia liuotettiin 10 ml:aan tolueenia. Liuosta kuumennettiin typpikaasuvir-tauksessa 90°C:ssa 2 tunnin ajan. Liuotin poistettiin sitten tislaamalla alennetussa paineessa. Jäännös kromatografoitiin käyttäen Lobar-pylvästä eluoituna etyyliasetaatin, kloroformin ja metanolin seoksella 30:10:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 447 mg (saanto 85 %) otsikkotuotetta 81-30 jymäisenä aineena. Tuotteen IR- ja NMR-spektrit olivat yhtäpitävät esimerkin 18 tuotteen kanssa.

Esimerkki 16(d) 35 p-Nitrobentsyyli-^R^S^-t^-l-EN-^-nitrobentsyylioksikarbonyyll) asetimidoyyli^ pyrrolidin-3-yylitio)-6-£(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyylioksi)etyyll3 karbapen-2-eemi-3-karboksylaatti 89 80 887 j Seosta, jossa oli 100 mg (3S,4R)-4-([(S)-l-jN-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyyli)asetimidoyyliJpyrrolidin-3-yyliti<0 karbonyylimetyyli)-3- £(R)-1-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyli] -1- £l-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli)-l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyyli]-2-atsetidinonia ja g 6 mg hydrokinonia 10 ml:ssa tolueenia, kuumennettiin 110°C:ssa typpikaa-suvirran alla 24 tunnin ajan. Tolueeni tislattiin sitten pois alennetussa paineessa ja jäännös käsiteltiin nestekromatografiällä, käyttäen Lobar-pylvästä A eluoituna kloroformin, etyyliasetaatin ja metanolin seoksella 10:30:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 41 mg (saanto 52 %) otsikkotuo-1Q tetta öljymäisenä aineena.

IR-absorptiospektri (CHCl^) ^max cm 1780, 1744, 1690 (olka), 1676.

•jg Ominaiskiertokyky |c<.l 25 +68° (C = 0,17; kloroformi).

NMR-spektri (CDCl^) £ ppm: 1,48 (3H, dupletti, J = 6,5 Hz); 20 2,31 (3H· singletti); 1,8-2,6 (2H, multipletti); 3,0-4,5 (9H, multipletti); 5,16 (2H, singletti); 5,20 (2H, singletti); 25 5,14 (1H, dupletti, J = 14 Hz); 5,43 (1H, dupletti, J = 14 Hz); noin 5,2 (1H, multipletti); 7,50 (4H, dupletti); 7,57 (2H, dupletti); 3Q 8,17 (6H, dupletti).

Esimerkki 16(e) (5R,6S)-2-C(S)-l-Asetlmidoyyllpyrrolldln-3-yylitio]-6- f(R)-l-hydroksi-35 etyyli3karbapen-2-eemi-3-karboksyylihappo 485 mg p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-2-((S)-l-[fi-(p-nitrobentsyylioksikarbo- 90 8 0 8 8 7 1 nyyli)asetimidoyyll3 pyrrolidin-3-yylitio)-6-£(R)-l-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyylioksi)etyyli]-karbapen-2-eemi-3-karboksylaattia liuotettiin seokseen, joka koostui 25 tnl:sta tetrahydrofuraania ja 25 ml:sta 0,1 M fos-faattipuskuriliuosta (pH 7,1). Tähän liuokseen lisättiin 1,4 g 10 paino-% 5 palladium/aktiivihiili-katalyyttia ja seosta hämmennettiin vetykaasuvir-tauksen alla, ilmakehän paineessa, 70 minuutin ajan. Reaktion mentyä loppuun suodatettiin katalyytti pois ja 15 ml em. puskuriliuosta lisättiin suodokseen. Seos pestiin etyyliasetaatilla. Vesikerros erotettiin ja vä-kevöitiin puoleen alkuperäisestä tilavuudestaan haihduttamalla huoneen 10 lämpötilassa, alennetussa paineessa. Väkevöity kromatografoitiin pylväässä 15 ml:a HP20 AG-hartsia (Mitsubishi Chemical Industries Co:n tuote) lävitse. Asetonin 3 til-% vesiliuoksella eluoidut jakeet kerättiin ja pakastekuivattiin, jolloin saatiin 115 mg (saanto 58 %) otsikkotuotetta valkoisena jauheena.

15 IR-absorptiospektri (KBr) ^max cm 3400, 1760, 1675.

NMR-spektri (θ£θ) Ä ppm: 20 1.29 (3H, dupletti, J * 6,5 Hz); 1,8-2,7 (2H, multipletti); 2.29 (3H, singlentti); 3,22 (2H, dupletti, J - 9,5 Hz); 25 3,3-4,4 (8H, multipletti).

Esimerkki 17 (3S,4R)-4-([2-Nitrobentsyylioksikarbonyyliamlno)etyylitio]karbonyyli-30 metyyli)-3-C(R)-l-(p-nltrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyli3-l-Q.-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-l-tri-isopropoksifosforanylideenime-tyylij -2-atsetidinoni 52 mg (0,062 mmoolia) (3S,4R)-3- [(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-35 oksi)etyyli3~l-jl-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-1-tri-isopropoksifos-foranylideenimetyyli^-4- |j(fenyylitio)karbonyylimetyyli]-2-atsetidinonia, saatu kuten esimerkissä 14(c) on kuvattu, 32 mg (0,125 mmoolia) 2-(p- 91 80887 1 nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)etaanitiolia ja 13 mg (0,13 mmoolia) trietyyliamiinia liuoteCtiin 1 ml:aan metyleenikloridia. Liuos jätettiin seisomaan typpikaasulla suojattuna huoneenlämpötilassa 24 tunnin ajaksi. Liuotin poistettiin sitten tislaamalla alennetussa paineessa ja jäännös g nestekromatografoitiin, käyttäen Lobar-pylvästä A eluoituna bentseenin jaetyyliasetaatin seoksella 1:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 48 mg (saanto 79 %) otsikkotuotetta öljymäisenä aineena.

IR-absorptiospektri (KBr) y* cm *: 10 3450, 1745 (leveä), 1682, 1632.

NMR-spektri (CDCl^) 5 ppm: 1,33 (18H, dupletti, J = 6 Hz); 1,42 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 15 2,7-3,5 (7H, multipletti); 3,5-4,2 (1H, multipletti); 4,3-5,4 (5H, multipletti); 5,12 (4H, singletti); 5,18 (2H, singletti); 20 7,43 (6H, multipletti); 8,16 (6H, dupletti).

Esimerkki 18 25 (3S,4R)-4-( [(S)-l-[.N-(p-Nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetlmidoyylil pyrrolidin-3-yylitiol karbonyylimetyyli)-3- [(R)-l-(p-nitrobentsyyli-oksikarbonyylioksi)etyyll3-l-&-(p-nitrobentsyylloksikarbonyyli)-l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyyll3-2-atsetidinoni 30 756 mg (0,896 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)- l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyyliJ-4-£(fenyylitio)karbonyylimetyy-“3 -2-atsetidinonia, saatu kuten esimerkissä 14(c) on selostettu, 580 mg (0,180 mmoolia) (S)-3-merkapto-l-[N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli) asetimidoyylijpyrrolidiiniä ja 181 mg (0,179 mmoolia) trietyyliamiinia 35 liuotettiin 14 ml:aan metyleenikloridia. Liuos jätettiin seisomaan typpikaasulla suojattuna huoneen lämpötilassa yön yli. Liuotin poistettiin sitten tislaamalla alennetussa paineessa ja jäännös pylväskromatografoitiin 92 80 887 1 20 g:n piigeeliä lävitse, eluolden bentseenin ja etyyliasetaatin seoksil la 1:1 - 1:10 (tilavuusosia), jolloin saatiin raakatuote, joka kromato-grafoitiin käyttäen Lobar-pylvästä B eluoituna kloroformin, etyyliasetaatin ja metanolin seoksella 10:30:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 489 mg g (saanto 51 %) otsikkotuotetta öljymäisenä aineena.

IR-absorptiospektri (KBr) V max cm 1750, 1675, 1630.

1Q NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 1,35 (18H, dupletti, J = 6,5 Hz); 1,43 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 2,24 (3H, singletti); 15 1,7-2,5 (2H, multipletti); 2,6-3,1 (2H, multipletti); 3,1-4,2 (7H, multipletti); 4,4-5,3 (4H, multipletti); 5.13 (4H, singletti); 20 5,18 (2H> singletti); 7,45 (2H, dupletti); 7,48 (4H, dupletti); 8.13 (6H, dupletti).

25 Esimerkki 19(a) (3S,4R)-4-([(R)-l- N-(p-Nitrobentsyyliokslkarbonyyli)asetimldoyyli3pyrro-lidln-3-yylitio karbonyylimetyyli)-3-f(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyylioksi)etyyli^-l-£l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-l-tri-isopropoksi-30 fosforanylideenimetyyli3-2-atsetidinoni 325 mg (0,385 mmoolia) (3S,4R)-3-[(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli-oksl)etyyllj-l-£l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-l-tri-isopropoksi-fosf oranylideenimetyyli3-4-^fenyylitio)karbonyylimetyyliJ-2-atsetidi-35 nonia, saatu kuten esimerkissä 14(c) on selostettu, 248 mg (0,77 mmoolia) (R)-3-merkapto-l- N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyli pyrro-lidiiniä ja 78 mg (0,77 mmoolia) trietyyliamiinia liuotettiin 6 ml:aan 93 8 0 8 8 7 1 metyleenikloridi. Liuos jätettiin seisomaan typpikaasulla suojattuna huoneen lämpötilassa yli yön. Liuotin tislattiin sitten pois ja jäännös kro-matografoitiin 10 g:n piigeeliä lävitse, eluoiden bentseenin ja etyyliasetaatin seoksella 1:10 (tilavuusosia), jolloin saatiin raakatuote, joka g kromatografoltiin käyttäen Lobar-pylvästä B eluoituna kloroformin, etyyliasetaatin ja metanolin seoksella 10:30:1 (tilavuusosia) ja saatiin 231 mg (saanto 56 X) otsikkotuotetta öljymäisenä aineena.

IR-absorptiospektri (KBr) Ϋ max cm ^: 10 1750, 1675, 1635.

NMR-spektri (CDCl^) £ ppm: 1,35 (18H, dupletti, J * 6,5 Hz); 15 1,43 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 2,24 (3H, singletti); 1,7-2,5 (2H, multipletti); 2,6-3,1 (2H, multipletti); 3,1-4,2 (7H, multipletti); 20 4*4-5,3 (4H, multipletti); 5,13 (4H, singletti); 5,18 (2H, singletti); 7,45 (2H, dupletti); 7,48 (4H, dupletti); 25 8,13 (6H, dupletti).

Esimerkki 19(b) (5R,6S)-2- [(R)-l-(asetimidoyyli)pyrrolidin-3-yylitio3-6- f(R)-l-hydroksi-30 etyyli]karbapen-2-eemi-3-karboksyylihappo

Esimerkissä 16(d) selostettua menettelyä noudattaen suoritettiin sykli-sointireaktio (3S,4R)-4-([(R)-l-(N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)aset-imidoyyli3pyrrolidin-3-yylitio)karbonyylimetyyli -3-{(R)-l-(p-nitro-35 bentsyylioksikarbonyylioksi)etyyliJ -l-£l-(p-nitrobentsyylioksikarbo- nyyli)-l-tri-isopropoksifosforanylideenimetyyliJ-2-atsetidinonille, valmistettu kuten esimerkissä 19(a) on selostettu, ja sitten suojaavat ryh- 94 80887 1 mät poistettiin tulokseksi saadusta p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-2-((R)-l-£n-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyliJpyrrolidin-3-yylitio)- 6- [(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyyliJkarbapen-2-eenii- 3-karboksylaatista, esimerkissä 16(e) selostetulla menetelmällä, jolloin 5 saatiin otsikkotuote valkoisina kiteinä, jotka sulivat 208-209°C:ssa (hajoten).

IR-absorptiospektri (KBr) ^max cm *·' 3400, 1760, 1675.

10 NMR-spektri (D2O) $ ppm: 1,29 (3H, dupletti, J = 6,5 Hz); 1.8- 2,7 (2H, multipletti); j5 2,29 (3H, singletti); 2.9- 4,4 (10H, multipletti).

Valmistus 1(a) 20 (3S,4R)-3-[(R)-l-t-Butyylidimetyylisilyylioksietyyli]-l-(l-metoksikarbo-nyyli-2-metyyliprop-l-enyyli)-4-(bentsyylioksikarbonyylimetyyli)-2-atsetidinoni 1,04 g (2,61 mmoolia) (3R,4R)-4-asetoksi-3-£(R)-l-t-butyylidimetyyli-25 silyylioksietyylij -l-(l-metoksikarbonyyli-2-metyyliprop-l-enyyli)-2-atsetidinonia ja 1,74 g (7,84 mmoolia) bentsyylitrimetyylisilyyliase-taattia liuotettiin 12 ml:aan metyleenikloridia. Liuokseen lisättiin 50 mg (0,23 mmoolia) trimetyylisilyylitrifluorimetaanisulfonaattia, ja seoksen annettiin seistä huoneen lämpötilassa 7 päivän ajan. Reaktio-30 seos kaadettiin sitten natriumbikarbonaatin vesiliuokseen. Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin vedellä ja kuivattiin. Liuotin poistettiin sitten tislaamalla. Tulokseksi saatu jäännös puhdistettiin nestekromato-grafiällä käyttäen Lobar-pylvästä B (E. Merck & Co., Ltd.), eluoituna heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 4:1 (tilavuusosia), jolloin saa-35 tiin 109 mg (8,6 1) lähtöainetta ja sen perästä 693 mg (saanto 55 %) ot-sikkotuotetta öljynä.

95 80887 1 IR-absorptiospektri (CHC1_) y cm 3 max 1740 (leveä).

NMR-spektri (CDCl^) $ ppm: 5 0,09 (6H, slnglettl); 0,89 (9H, slnglettl); 1,23 (3H, dupletti, J = 6 & 5 Hz); 1.85 (3H, slnglettl); 10 2,10 (3H, slnglettl); 2,67 (2H, dupletti, J = 7 Hz); 2.85 (1H, kaksinkertainen dupletti, J * 6,5 & 2,5 Hz); 3,64 (3H, slnglettl); 3,9-4,5 (2H, multlpletti); 15 4,90 (1H, dupletti, J = 12 Hz); 5,06 (1H, dupletti, J = 12Hz); 7,28 (5H, slnglettl).

Valmistus 1(b) 20 (3S,4R)-3- £(R)-l-t-Butyylldimetyylisilyylioksietyyli3-4-(karboksi-metyyli)-1-(1-metoksikarbonyyli-2-metyyliprop-1-enyy11)-2-atse-tldinoni 25 1.18 g (3S,4R)-4-(bentsyylioksikarbonyylimetyy11)-3- [(R)-l-t-butyylidi- metyylisilyylioksietyyli}-l-(l-metoksikarbonyyli-2-metyyliprop-l-enyyli)-2-atsetidinonia liuotettiin 26 mlraan etyyliasetaattia. Liuokseen lisättiin 500 mg 10 paino-% palladium/hiiltä ja katalyyttinen pelkistys suoritettiin vedyllä. Seosta hämmennettiin 1,5 tunnin ajan, minkä 30 jälkeen katalyytti suodatettiin pois ja saatu suodos väkevöitiin kuiviin haihduttamalla alennetussa paineessa, jolloin saatiin 960 mg (saanto 99 %) otsikkotuotetta värittömänä öljynä.

IR-absorptiospektri (CHCl^) ',max cm 35 noin 3300, 1734, 1715.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 96 8 0 8 8 7 1 0,10 (6H, singlettl); 0,90 (9H, singletti); 1.26 (3H, dupletti, J * 6 Hz); 1.94 (3H, singletti); 5 2,18 (3H, singletti); 2,71 (2H, dupletti, J * 7 Hz); 2.94 (1H, kaksinkertainen dupletti, J = 6,5 & 2,5 Hz); 3,76 (3H, singletti); 4,0-4,5 (2H, multipletti).

10

Valmistus 1(c) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-ButyylidimetyylisilyylioksietyyliJ-l-(l-metoksi-karbonyyli-2-metyyliprop-l-enyyli)-4-( f(S)-l-(p-nitrobentsyylioksi-J5 karbonyyli)pyrrolidin-3-yylitioJ karbonyylimetyyli)-2-atsetidinoni 962 mg (2,41 mmoolia) (3S,4R)-3-[(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksi-etyyli]-4-karboksimetyyli-1-(l-metoksikarbonyyli-2-metyyliprop-1-enyyli)-2-atsetidinonia ja 748 mg (2,65 mmoolia) (S)-3-merkapto-l-(p-20 nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidiiniä liuotettiin 15 ml:aan bentsee-niä. Liuokseen lisättiin 596 mg (2,89 mmoolia) disykloheksyylikarbodi-imidiä ja 10 mg (0,082 mmoolia) 4-dimetyyliaminopyrimidiiniä, jäällä jäähdyttäen ja hämmentäen. Tunnin kuluttua suodatettiin liukenematon aines pois ja tulokseksi saatu suodos väkevöitiin kuiviin haihduttamalla alen-25 netussa paineessa. Jäännös puhdistettiin pylväskromatografialla 30 g:n piigeeliä lävitse, eluoiden bentseenin ja etyyliasetaatin seoksella 5:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 1,41 g (saanto 88 %) otsikkotuotetta öljynä.

30 NMR-spektri (CDCl^) $ppm: 0,09 (6H, singletti); 0,88 (9H, singletti); 1.26 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 35 1,94 (3H, singletti); 2,17 (3H, singletti); 1,5-2,4 (2H, multipletti); 97 80887 1 2,89 (2H, leveä dupletti, J = 7 Hz); 3.52 (2H, tripletti, J = 7 Hz); 3,76 (3H, singletti); 3,0-4,6 (8H, multipletti); g 5,19 (2H, singletti); 7,49 (2H, dupletti); 8,21 (2H, dupletti).

Valmistus 1(d) 10 (3S,4R)-3-[(R)-l~Hydroksletyylll-l-(l-metoksikarbonyyli-2-metyyliprop-l-enyyli-4-(f(S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yyli-tloj karbonyylimetyyli)-2-atsetidinoni 15 Liuokseen, jossa oli 1,33 g (2,01 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidi-metyylisilyylioksietyyli3“l“(l~metoksikarbonyyli-2-metyyliprop-l-enyyli)- 4-(£(S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yylitio|karbonyyli-metyyli)-2-atsetidinonia 24 ml:ssa asetonitriiliä, lisättiin 0,66 g (4,65 mmoolia) booritrifluoridieteraattia, jäällä jäähdyttäen ja hämmen-20 täen. 5 minuutin kuluttua reaktioseos kaadettiin natriumbikarbonaatin vesiliuoksen ja etyyliasetaatin seokseen hämmentäen voimakkaasti. Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin vedellä ja kuivattiin. Liuotin tislattiin pois, jolloin saatiin 1,04 g (saanto 96 %) otsikkotuotetta värittömänä öljynä.

25 IR-absorptiospektri (CHCl^) max cin : 3430, 1750, 1700 (leveä).

NMR-spektri (CDCl^) j ppm: 30 1,32 (3H, dupletti, J * 6,5 Hz); 1,95 (3H, singletti); 2,19 (3H, singletti); 1,5-2,5 (2H, multipletti); 35 2,94 (2H, dupletin kaltainen); 3.53 (2H, tripletti, J 7 Hz); 3,78 (3H, singletti); 98 8 0 8 8 7 1 3,0-4,4 (8H, multipletti); 5,21 (2H, slngletti); 7,52 (2H, dupletti); 8,26 (2H, dupletti) 5

Valmistus 1(e) (3S,4R)-l-(l-Metoksikarbonyyll-2-metyyliprop-l-enyyli)-3-[(R)-l-(p-nitrobentsyyllokslkarbonyylioksl)etyyliJ-4-(C(S)-1-Cp-nitrobentsyyll-10 oksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yylitio] karbonyylimetyyli)-2-atsetidinoni 110 mg (0,20 mmoolia) (3S,4R)-3-[(R)-l-hydroksietyyliJ-l-(l -metoksi-karbonyyli-2-metyyliprop-l-enyyli)-4-(£(S)-1-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyyli)pyrrolidin-3-yylitioJkarbonyylimetyyli)-2-atsetidinonia ja 97,6 mg 15 (0 ,80 mmoolia) 4-dimetyyliaminopyridiiniä liuotettiin 4 ml:aan metyleeni- kloridia. Liuokseen lisättiin tipoittain 1 ml metyleenikloridiliuosta, jossa oli 170 mg (0,80 mmoolia) p-nitrobentsyylioksikarbonyylikloridia, jäällä jäähdyttäen ja hämmentäen. Kun lisäys oli päättynyt, annettiin reaktioseoksen seistä 3 tunnin ajan huoneen lämpötilassa.

20 Tämän ajan lopussa reaktioseos kaadettiin jääveteen. Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin peräjälkeen 0,2 N kloorivetyhapolla, vedellä ja kyllästetyllä natriumkloridin liuoksella ja kuivattiin. Liuotin poistettiin tislaamalla ja tulokseksi saatu jäännös puhdistettiin pylväskromatogra-25 fialla 4 g:n piigeeliä lävitse, eluoiden etyyliasetaatin 12,5-60 til-% liuoksilla bentseenissä, jolloin saatiin 120 mg (saanto 82 %) otsikko-tuotetta öljynä.

IR-absorptiospektri (CHCl^) v*max cm *· 30 1745, 1690 (leveä).

NMR-spektri (CDCl^) & ppm: 1,45 (3H, dupletti, J - 6,5 Hz); 35 1.94 (3H, singletti); 2,18 (3H, singletti); 1,5-2,6 (2H, multipletti); 99 80887 1 2,88 (2H, dupletti, J = 7 Hz); 3,12 (1H, kaksinkertainen dupletti, J = 7,5 & 2,5 Hz); 3,47 (2H, tripletin kaltainen); 3,75 (3H, singletti); 5 3,0-4,5 (7H, multipletti); 5,18 (2H, singletti); 5,22 (2H, singletti); 7,46 (2H, dupletti); 7,49 (2H, dupletti); 10 8,18 (4H, dupletti).

Valmistus 2(a) (3S,4R)-3-I(R)-l-t-Butyylidimetyylisilyylloksietyylil-4-f(fenyylitio)kar-15 bonyylimetyyli3-2-atsetidinonl

Liuokseen, jossa oli 3,28 g (3S,4R)-3-[(R)-l-t-butyylidimetyylisilyyli-oksietyyliJ-4-[(fenyylitio)etynyyli3-2-atsetidinonia 75,0 mlrssa vedetöntä metyleenikloridia, lisättiin typpeä suojakaasuna käyttäen 3,5 ml tri-20 fluorietikkahappoa, hämmentäen ja jäällä jäähdyttäen. Seosta hämmennettiin sitten 30 minuutin ajan jäällä jäähdyttäen ja edelleen 1,5 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Reaktioseos kaadettiin sitten seokseen, jossa oli 1,14 g natriumbikarbonaattia, 75 ml vettä ja 300 ml etyyliasetaattia. Seos kyllästettiin natriumkloridilla ja orgaaninen kerros erotettiin. 25 Vesikerrosta uutettiin kahdesti etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros ja etyyliasetaattiuutteet yhdistettiin ja yhdistetty liuos pestiin peräjälkeen natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyllä natriumklori-din vesiliuoksella ja sitten kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois alennetussa paineessa ja jäännös pylväskromato-30 grafoitiin piigeelin lävitse, eluoiden sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 3:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 3,09 g (saanto 89,9 7„) otsikon tioesteriyhdistettä, joka suli 94-95°C:ssa.

Sen IR- ja NMR-spektrit olivat identtiset esimerkissä 3(a) saatujen kans- 35 sa.

loo 80 887 1 Valmistus 2(b) (3S,4R)-3-f(R)-l-t-Butyylidimetyylisilyylioksietyyli3-4-(f(S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yylitio3karbonyyllme tyyli) -5 2-atsetldinoni 191 mg (0,50 mmoolia) kohdassa Valmistus 2(a) selostetulla tavalla saatua atsetidinoniyhdistettä liuotettiin 5 ml:aan kuivaa metyleeniklori-dla. Liuokseen lisättiin vuorollaan 159 mg (0,56 mmoolia) (S)-3-merkapto-10 l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrrolidiiniä ja katalyyttinen määrä trietyyliamiinia. Seosta refluksoitiin 3 tunnin ajan ja jätettiin sitten seisomaan yli yön. Reaktion mentyä loppuun tislattiin liuotin pois ja jäännös liuotettiin 40 mlraan etyyliasetaattia, pestiin peräjälkeen vedellä (kahdesti 10 ml) ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella 15 ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Magnesiumsulfaatti suodatettiin pois ja etyyliasetaatti poistettiin tislaamalla alennetussa paineessa. Tulokseksi saatu öljymäinen aines kromatografoitiin Lobar-pylväässä, eluoiden etyyliasetaatilla, jolloin saatiin 253 mg (saanto 91,2 Z) otsikon atsetidinoniyhdistettä, joka suli 104-106°C:ssa. Sen IR-20 ja NMR-spektrit olivat identtiset esimerkissä 13(b) saatujen kanssa.

Valmistus 2(c) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-Butyylidimetyylisllyylioksletyyll3-4-( C(S)-1-Cn-(p~ 25 nitrobentsyylloksikarbonyyli)asetimidoyyUjpyrrolidin-3-yylitic3karbo-nyylimetyyli)-2-atsetidinoni 382 mg (1,01 mmoolia) kohdassa Valmistus 2(a) selostetulla tavalla saatua atsetidinoniyhdistettä liuotettiin 10 mlraan kuivaa metyleeniklori-30 dia. Liuokseen lisättiin vuorollaan 357 mg (1,10 mmoolia) (S)-3-merkapto-l-[N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyllJpyrrolidiiniä ja katalyyttinen määrä trietyyliamiinia, hämmentäen huoneen lämpötilassa. Seos jätettiin seisomaan tähän lämpötilaan 2 tunnin ajaksi ja sitä refluksoitiin sitten 3 tunnin ajan. Reaktion mentyä loppuun tislattiin liuotin 35 pois ja jäännös liuotettiin 40 ml:aan etyyliasetaattia, pestiin peräjälkeen vedellä (kahdesti 10 ml:11a) ja kyllästetyllä natriumkloridin vesi-liuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Magnesiumsul- '01 80887 1 faattl suodatettiin pois ja etyyliasetaatti tislattiin suodoksesta alennetussa paineessa. Saatu öljymäinen aines kromatografoitiin Lobar-pyl-väässä, eluoiden etyyliasetaatilla, jolloin saatiin 514 mg (saanto 86,1 %) otsikon atsetidinoniyhdistettä.

5 IR-absorptiospektri (KBr) cm : 1600, 1640, 1690, 1760, 3050-3500.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 10 0,09 (6H, singletti); 0,88 (9H, singletti); 1,20 (3H, dupletti, J - 6,5 Hz); 2,29 (3H, singletti); jej 1,5-2,5 (2H, multipletti); 2,7-3,03 (2H, multipletti); 3,3-4,4 (8H, multipletti); 5,18 (2H, singletti); 6,27 (1H, leveä singletti); 20 7,52 (2H, dupletti); 8,17 (2H, dupletti).

Valmistus 3 25 (3S,4R)-3-f(R)-l-hydroksietyyH3-4-r(fenyylitio)karbonyylimetyylil-2-atsetidinoni

Liuokseen, jossa oli 718 mg (3S,4S)-3-£(R)-l-hydroksietyyli3-4-£(fenyy-litio)etynyyli3~2-atsetidinonia 8 ml:ssa vedetöntä metyleenikloridia, 30 lisättiin typpeä suojakaasuna käyttäen 1,1 ml trifluorletikkahappoa, hämmentäen ja jäällä jäähdyttäen. Seosta hämmennettiin sitten 30 minuutin ajan jäällä jäähdyttäen ja edelleen 1,5 tunnin ajan huoneen lämpötilassa. Reaktioseos kaadettiin sitten seokseen, jossa oli 2,44 g natriumbikarbonaattia, 15 ml vettä ja 30 ml etyyliasetaattia. Seos kyllästettiin 35 natriumkloridilla ja orgaaninen kerros erotettiin. Vesikerrosta uutettiin kahdesti etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros ja etyyliasetaattiuutteet yhdistettiin ja yhdistetty liuos pestiin peräjälkeen natriumbikarbonaa- 102 80887 1 tin vesiliuoksella ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Liuotin tislattiin pois alennetussa paineessa ja jäännös kromatografoltiin pylväässä piigeelin lävitse, eluoiden sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 1:3 (tilavuus-5 osia), jolloin saatiin 281 mg (saanto 36,5 Z) otsikon tioesteriyhdistettä, joka uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatin ja heksaanin seoksesta ja saatiin kiteitä, jotka sulivat 121,5-123,5°C:ssa.

IR-absorptiospektri (KBr) cm 10 1730· NMR-spektri (deuteroasetoni) S ppn>: 1,23 (3H, dupletti, J = 6 Hz); •J5 2,77 (1H, singletti); 2.8- 3,3 (3H, multipletti); 3.8- 4,2 (2H, multipletti); 7,25 (1H, singletti); 7,50 (5H, singletti).

20

Valmistus 4(a) (3S,4R)-3- f(R)-l-t-Butyylidimetyylisilyylloksletyyli3-l-£t-(p-nitro-bentsyylioksikarbonyyll)-2-metyyliprop-l-enyyllJ-4-C(fenyylitio)karbo-25 nyylimetyyli!-2-atsetidinoni

Liuokseen, jossa oli 86 mg (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyyli-oksietyyl^-l-[(R)-2-metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)prop-2-enyyl^-4-[](fenyylitio)karbonyylimetyyli]-2-atsetidinonia 1,5 ml:ssa 30 metyleenikloridia, lisättiin 15 mg trietyyliamiinia. Seos jätettiin seisomaan huoneen lämpötilassa 1 tunnin ajaksi, minkä jälkeen liuotin tislattiin pois ja jäännös liuotettiin bentseenin ja etyyliasetaatin seokseen 20:1 (tilavuusosla) ja kromatografoltiin pylväässä 1 g:n piigeeliä lävitse, jolloin saatiin 84 mg (saanto 98 Z) otsikkotuotetta öljynä.

35 IR-absorptiospektri (CHCl^) V* max cm 1750, 1715 (olka), 1625.

103 80887 1 Ominaiskiertokyky [cfj ^ +46° (C = 1,32; kloroformi).

NMR-spektri (CDCl^) $ ppm: 5 0,00 (3H, singletti); 0,05 (3H, singletti); 0,86 (9H, singletti); 1,25 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 2,00 (3H, singletti); 10 2*20 (3H, singletti); 2,90 (1H, kaksinkertainen dupletti, J = 6 & 2,5 Hz); 2,95 (2H, dupletti, J = 6,5 Hz); 4,15 (1H, multipletti); 4,40 (1H, kolminkertainen dupletti, J = 6,5 & 2,5 Hz); 15 5,26 (2H, singletti); 7,33 (5H, leveä singletti); 7,52 (2H, dupletti); 8,17 (2H, dupletti).

20 Valmistus 4(b) (3S,4R)-3-[(R)-l-t-Butyylidimetyyllsilyylioksietyyli3~4-(f2-(p-nitro- bentsyylloksikarbonyyliamino)etyylitic3karbonyylimetyyli)-l-f2-metyyli- l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)prop-l-enyylij-2-atsetidinoni 25 166 mg (0,249 mmoolia) (3S,4R)-3-£(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksi-etyyli3“l-[2-metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)prop-l-enyyliJ- 4-((fenyylitio)karbonyylimetyyli3-2-atsetidinonia, saatu kuten on selostettu kohdassa Valmistus 4(a), 139 mg (0,54 mmoolia) 2-(p-nitrobentsyy-30 lioksikarbonyyliamino)etaanitiolia ja 55 mg (0,54 mmoolia) trietyyli-amiinia liuotettiin 38 ml:aan metyleenikloridia. Liuos jätettiin seisomaan typpikaasulla suojattuna huoneen lämpötilassa yli yön. Liuotin tislattiin pois alennetussa paineessa ja jäännös kromatografoitlin käyttäen Lobar-pylvästä B eluoituna heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 1:2 35 (tilavuusosla), jolloin saatiin 156 mg (saanto 76 %) otsikkotuotetta öl-jymaisenä aineena.

104 80 887 1 IR-absorptlospektri (CHCl^) V max cm 3460, 1748, 1720, 1685.

NMR-spektri (CDCl^) S ppm: 5 0,00 (3H, slnglettl); 0,04 (3H, singletti); 0,84 (9H, singletti); 1,21 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 10 1>95 (3H» singletti); 2,15 (3H, singletti); 2,87 (2H, dupletti, J = 6,5 Hz); 2,8-3,5 (5H, multipletti); 4.13 (1H, multipletti); 15 4,35 (1H, kolminkertainen dupletti, J = 6,5 & 2,5 Hz); 5.14 (2H, singletti); 5,24 (2H, singletti); 5,37 (1H, leveä singletti); 7,43 (2H, dupletti); 20 7,51 (2H, dupletti); 8,13 (2H, dupletti); 8,17 (2H, dupletti).

Valmistus 4(c) 25 (3S,4R)-3- [(R)-l-t-Butyylidimetyyllsllyylioksietyyli3-4-( f(S)-l-lN-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyli3pyrrolidin-3-yyliticjkarbonyylimetyyli)-!- [2-metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli)prop-l-enyyli} -2-atsetidinoni 30 491 mg (0,802 mmoolia) (3S,4R)-3-[(R)-l-t-butyylidimetyylisilyylioksi-etyyli3-l-f2-metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)prop-l-enyyli^- 4-£( fenyylitio)karbonyylimetyyliJ-2-atsetidinonia, saatu kuten kohdassa 4(a) on selostettu, 518 mg (1,60 mmoolia) (S)-3-merkapto-l- N-(p-nitro-35 bentsyylioksikarbonyyli asetimidoyyli pyrrolidiiniä ja 162 mg (1,60 mmoolia) trietyyliamiinia liuotettiin 10 ml:aan metyleenikloridia. Liuos jätettiin seisomaan typpikaasulla suojattuna huoneen lämpötilaan 1,5 tun- 105 80887 1 nin ajaksi, minkä jälkeen liuotin tislattiin pois alennetussa paineessa ja jäännös kromatografoitiin käyttäen Lobar-pylvästä B eluoituna bentsee-nin ja etyyliasetaatin seoksella 2:3 (tilavuusosia), jolloin saatiin 511 mg (saanto 77 %) otsikkotuotetta öljymäisenä aineena.

5 IR-absorptiospektri (CHCl^) Vmax cin : 1747, 1720, 1676.

NMR-spektri (CHC13) S ppm: 10 0,00 (3H, singletti); 0,04 (3H, singletti); 0,85 (9H, singletti); 1,20 (3H, dupletti, J * 6 Hz); Ί5 1,94 (3H, singletti); 2,16 (3H, singletti); 2,26 (3H, singletti); 1,7-2,5 (2H, multipletti); 2,82 (2H, leveä dupletti, J = 7 Hz); 20 3,1-4,5 (8H, multipletti); 5.14 (2H, singletti); 5.22 (2H, singletti); 5.22 (2H, singletti); 7,46 (2H, dupletti); 25 7,49 (2H, dupletti); 8,10 (2H, dupletti); 8.14 (2H, dupletti).

Valmistus 5 30 (3S,4R)-4-(r2-(p-Nitrobentsyylioksikarbonyyliamino)etyyliticJkarbo-nyylimetyyli)-l-[2-metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli(prop-1-enyyli]-3-£(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyy11^-2-atsetidinonl 35 21 mg (0,032 mmoolia) (3S,4R)-l-(2-metyyli-l-(p-nitrobentsyylioksikar-bonyyli)prop-l-enyyliJ-3- {(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi) 106 80887 1 etyyli])”·^- [(fenyylitio)karbonyylimetyyli]~2-atsetidinonia, saatu kuten esimerkissä 14(b)(iii) on kuvattu, 16 mg (0,063 mmoolia) 2-(p-nitrobent-syylioksikarbonyyliamino)etaanitiolia ja 6 mg (0,06 mmoolia) trietyyli-amiinia liuotettiin 0,4 ml:aan metyleenikloridia. Liuos jätettiin seiso-5 maan typpikaasulla suojattuna huoneen lämpötilassa 3 tunnin ajaksi. Reak-tloseos laimennettiin sitten kloroformilla, pestiin vedellä ja kuivattiin. Liuotin tislattiin pois ja jäännös käsiteltiin ohutkerroskromatografial-la, käyttäen piigeeliä kehitettynä heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 2:3 (tilavuusosia), jolloin saatiin 17 mg (saanto 60 %) otsikkotuotet-j0 ta öljymäisenä aineena.

IR-absorptiospektri (CHCl^) ^ max cm 3460, 1753, 1721, 1700 (olka), 1682.

j5 Ominaiskiertokyky +8.5° (C = 0,86; kloroformi).

NMR-spektri (CHCl3) £ ppm: 1,42 (3H, dupletti, J 6,5 Hz); 20 1*97 (3H, singletti); 2.23 (3H, singletti); 2,84 (2H, dupletti, J = 6,5 Hz); 2,7-3,7 (5H, multipletti); 4,27 (1H, kolminkertainen dupletti, J = 6,5 & 2 Hz); 25 4,8-5,5 (2H, multipletti); 5,16 (2H, singletti); 5,19 (2H, singletti); 5.23 (2H, singletti); 7,46 (4H, leveä dupletti); 30 7,51 (2H, dupletti); 8,18 (6H, dupletti).

Valmistus 6(a) 35 (3S,4R)-3-C(R)-l-(allyylioksikarbonyylioksi)etyyll3-l-(p-metoksl-bentsyyli)-4- C(fenyylitio)karbonyylimetyyli3-2-atsetidlnoni 107 80887 1 Liuokseen, jossa oli 377 mg (3S,4R)-4-asetoksi-3-£(R)-l-(allyyli- oksikarbonyylioksi)etyyliJ-l-(p-metoksibentsyyli)-2-atsetidinonia 2 ml:ssa kuivaa metyleenikloridia, lisättiin 448 mg (2 mmoolia) 1-fenyylitio-l-(trimetyylisilyylioksi)-etyleeniä ja sitten seosta hämmennettiin huoneen 5 lämpötilassa. Katalyyttinen määrä trimetyylisilyylitrifluorimetaanisul-fonaattia lisättiin seokseen, joka jätettiin sitten seisomaan huoneen lämpötilassa yli yön. Muodostunut saostuma liuotettiin 200 ml:aan etyyliasetaattia ja saatu liuos pestiin peräjälkeen 100 ml:lla vettä ja 100 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta. Se kuivattiin sitten jQ vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja käsiteltiin Lobar-pylväskromatogra-fiällä, eluoiden sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 1:1 (tila-vuusosia), jolloin saatiin 430 mg (saanto 91 %) otsikon atsetidinonia.

NMR-spektri (CDCl^) 6 ppm: 15 1,39 (3H, dupletti, J - 6,5 Hz); 2,8 (2H, kaksinkertainen dupletti, J * 3,0 & 9 Hz); 3,1 (1H, kaksinkertainen dupletti, J 2,5 & 6,5 Hz); 3,75 (3H, singletti); 20 3,8-4,62 (6H, multipletti); 4,8-5,4 (2H, multipletti); 5.6- 7,1 (1H, multipletti); 6.7- 7,5 (9H, multipletti).

25 massaspektri m/e: 469 (M+) .

Valmistus 6(b) (3S,4R)-3-C(R)-(allyyliok8ikarbonyylioksi)etyyli3-4-£(fenyylitio)karbo-30 nyylimetyylij -2-atsetidinonl 140 mg (0,3 mmoolia) kohdassa Valmistus 6(a) selostetulla tavalla saatua atsetidlnoniyhdistettä liuotettiin seokseen, jossa oli 2 ml asetonia ja 1 ml vettä. Liuokseen lisättiin 822 mg (1,5 mmoolia) cerium (IV) ammonium-35 nitraattia hämmentäen huoneen lämpötilassa ja hämmennettiin edelleen 2 tunnin ajan. 100 ml etyyliasetaattia lisättiin reaktioseokseen. Seos pestiin sitten peräjälkeen vedellä (kahdesti 20 ml), 20 ml:lla natriumbikar- 108 80887 1 bonaatin 5 paino-% vesiliuosta ja 20 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Etyyliasetaatti tislattiin pois ja jäännös käsiteltiin Lobar-pylväskromatografiällä, eluoiden sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 1:1 (tilavuus-5 osia), jolloin saatiin 25 mg (saanto 24,0 %) otsikon atsetidinoniyhdis-tettä.

NMR-spektri (CDCl^) & ppm: -JO 1,4 (3H, dupletti, J = 6,5 Hz); 2.8- 3,3 (3H, multipletti); 3.8- 4,2 (2H, multipletti); 4,4-4,7 (2H, multipletti); 4.8- 5,5 (2H, multipletti); Ί5 5,6-6,1 (1H, multipletti); 6,1-6,3 (1H, leveä singletti); 7,36 (5H, singletti).

massaspektri m/e: 349 (M+).

20

Alkuaineanalyysi laskettu: C 58,4 X; H 5,48 X; N 4,01 X; S 9,15 % löydetty: C 58,1 %; H 5,49 X; N 3,89 X; S 9,34 X.

25 Valmistus 7(a) (3S,4R)-l-(p-Metoksibentsyyli)-3- [(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyylioksi)etyyli3-4-r(fenyylitio)karbonyylimetyyll3-2-atsetidinoni 30 1,18 g (2,5 mmoolia) (3S,4R)-l-(p-metoksibentsyyli)-3-£(R)-l-(p-nitro- bentsyylioksikarbonyyli) etyyli] -4-asetoksi-2-atsetidinonia liuotettiin 10 ml:aan kuivaa metyleenikloridia, minkä jälkeen seosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa. Tulokseksi saatuun liuokseen lisättiin 2,24 g (10 mmoolia) l-fenyylitio-l-(trimetyylisilyylioksi)etyleeniä ja 0,11 g 35 (0,50 mmoolia) trimetyylisilyylitrifluorimetaanisulfonaattia (katalyyt tinä). Seos jätettiin seisomaan huoneen lämpötilassa yli yön. Metyleeni-kloridi tislattiin sitten pois ja jäännös liuotettiin 100 ml:aan etyyli- 109 80887 1 asetaattia. Näin saatu liuos pestiin peräjälkeen 50 ml:11a vettä, 50 ml:11a natriumbikarbonaatin 5 paino-% vesiliuosta ja 50 ml:11a kyllästettyä natriumkloridin vesiliuosta, minkä jälkeen se kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Magnesiumsulfaatti suodatettiin pois ja etyy-5 liasetaatti tislattiin suodoksesta alennetussa paineessa. Jäännös kromato-grafoitiin pylväässä 125 g:n piigeeliä lävitse, eluoiden sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seoksella 1:1 (tilavuusosia), jolloin saatiin 1,34 g (saanto 94,9 X) haluttua (R)-4-[(fenyylitio)karbonyylimetyyli3~2-atse-tidinonijohdannaista öljymäisenä aineena.

10

Alkuaineanalyysi laskettu: C 61,60 X; H 5,00 %; N 4,96 %; S 5,67 % löydetty: C 61,33 X; H 5,12 X; N 4,81 X; S 5,63 %.

15 Valmistus 7(b) (3S,4R)-1-(p-Metoksibentsyyli)-4-(f(S)-1- N-(p-nitrobentsyylioksikarbo-nyyli)asetimidoyyli3pyrrolidin-3-yylitio karbonyylimetyyli)-3-f(R)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyylioksi)etyylil-2-atsetidinoni 20 5 ml:aan kuivaa metyleenikloridia liuotettiin 219 mg (0,39 mmoolia) kohdassa Valmistus 7(a) selostetulla tavalla saatua atsetidinoniyhdistettä.

Liuokseen lisättiin vuorollaan 250 mg (0,77 mmoolia) (S)-3-merkapto-l-25 [N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyliJpyrrolidiiniä ja katalyyttinen määrä trietyyliamiinia, hämmentäen huoneen lämpötilassa. Seos jätettiin seisomaan siinä lämpötilassa yli yön. Reaktion mentyä loppuun, liuotin tislattiin pois ja jäännös kromatografoitiin käyttäen Lobar-pylvästä eluoituna etyyliasetaatilla, jolloin saatiin 276 mg (saanto 30 91,5 %) otsikon atsetidinonia.

NMR-spektri (CDCl^) § ppm: 1,39 (3H, dupletti, J = 6,5 HZ); 35 1,7-2,5 (2H, multipletti); 2,25 (3H, singletti); 2,6-2,8 (2H, multipletti); no 80887 1 3,1 (1H, leveä dupletti, J = 8 Hz); 3.2- 4,0 (6H, multipletti); 3,73 (3H, singletti); 4.10 (1H, dupletti, J * 15 Hz); 5 4,50 (1H, dupletti, J = 15 Hz); 4,9-5,3 (1H, multipletti); 5.19 (2H, singletti); 6,75 (2H, dupletti); 7.10 (2H, dupletti); -JO 7,50 (4H, dupletti); 8,15 (2H, dupletti); 8.20 (2H, dupletti).

Valmistus 8 15 (3S,4R)-3- £(R)-l-(allyylioksikarbonyylioksi)etyylll-l-(p-Metoksi-bentsyyll)-4-( f(S)-l-fN-(p-nltrobentsyyliokslkarbonyyli)asetimido-yyli]pyrrolidln-3-yylitiQ3karbonyylimetyyli)-2-atsetidlnoni 20 Liuokseen, jossa oli 461 mg (0,98 mmoolia) kohdassa Valmistus 6(a) selostetulla tavalla saatua atsetidinonlyhdistettä 5 ml:ssa kuivaa metyleeni-kloridia, lisättiin 969 mg (3 mmoolia) (S)-3-merkapto-l-£N-(p-nitro-bentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyliJpyrrolidiiniä. Katalyyttinen määrä trietyyliamiinia lisättiin ja seos jätettiin seisomaan huoneen lämpöti-25 lassa yli yön. Reaktion mentyä loppuun liuotin tislattiin pois ja jäännös kromatografoitiin käyttäen Lobar-pylvästä eluoituna etyyliasetaatilla, jolloin saatiin 546 mg (saanto 76,7 %) otsikon atsetidinoniyhdistet-tä.

30 NMR-spektri (CDCl^) $ ppm: 1,38 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 2,27 (3H, singletti); 1,7-2,6 (2H, multipletti); 35 2,6-2,9 (2H, multipletti); 3,1 (leveä dupletti, J 7 Hz); 3.2- 4,5 (9H, multipletti); ill 80887 1 4,5-4,7 (2H, multlpletti); 4,85-5,20 (2H, multlpletti); 4,80-5,50 (2H, multlpletti); 5.6- 6,2 (1H, multlpletti); g 6,82 (2H, dupletti); 7,52 (2H, dupletti); 8.15 (2H, dupletti).

Valmistus 9 10 (3S,4R)-3-f(R)-l-(Allyylioksikarbonyylioksi)etyyli]-4-( [(S)-l~ [N-(p-nitrobentsyyliokslkarbonyyli)asetlmidoyyli] pyrrolldin-3-yylitlcQkarbonyylimetyyli)-2-atsetidinoni |5 Liuokseen, jossa oli 115 mg (0,26 imnoolia) kohdassa Valmistus 6(b) selostetulla tavalla saatua atsetidinoniyhdistettä ja 125 mg (0,386 mmoolia) (S)-3-merkapto-l-|N-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)asetimidoyyli[pyrro-lidiiniä 5 ml:ssa kuivaa metyleenikloridia, lisättiin katalyyttinen määrä trietyyliamiinia. Seos jätettiin seisomaan huoneen lämpötilassa yli yön. 20 Liuotin tislattiin pois ja jäännös kromatografoitiin käyttäen Lobar-pylvästä eluoituna etyyliasetaatilla, jolloin saatiin 168 mg (saanto 98 %) otsikon atsetidinoniyhdistettä.

NMR-spektri (CDCl^) & ppm: 25 1,38 (3H, dupletti, J = 6 Hz); 2,26 (3H, singletti); 1.8- 2,6 (2H, multipletti); 2.7- 3,0 (2H, multipletti); 30 3,0 (leveä dupletti, J = 6,5 Hz); 3,2-4,2 (5H, multlpletti); 4,5-4,7 (2H, multlpletti); 4.9- 5,1 (1H, multipletti); 5,1-5,4 (2H, multipletti); 35 5,6-6,1 (1H, multipletti); 6,17 (1H, leveä singletti); 7,48 (2H, dupletti); 8.15 (2H, dupletti).

Π2 80887 1 Lisäesimerkki 1 p-Nitrobentsyyll (lR,5R,6S)-l-metyyli-2-^(S)-l- (p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)-pyrrolidin-3-yylitioli]-6-C(R)-l-5 (trimetyylisilyylioksi)etyyli] karbapen-2-eemi-3-karboksilaatti 1(a) (3S,4R)-3-£~(R)-l-Hydroksietyyli}-4-f(R)-l-(fenyylitio-karbonyyli)etyylit-2-atsetidinoni jq 1.40 g (3S,4R)-3-[(R)-l-(t-butyyli-dimetyylisilyylioksi)- etyyli]-4-£(R)-l-(fenyylitiokarbonyyli)etyyliJ-2-atsetidinonia, (joka on kuvattu esimerkissä 3a), käsiteltiin samalla tavalla kuin esimerkissä 15a, jolloin saatiin 0,977 g otsikkoyhdistettä.

15 IR spektri (KBr) cm * : 3360, 1745, 1695 1(b) (3S,4R)-4~[(R)-l- tC(S)-l-(p-nitrobentsyyliokslkarbonyyli)-pyrrolidin-3-yylitit] karbonyyli] etyyli]-3-f(R)-l-(trimetyylisilyylioksi) e tyyli] -2-atsetidinoni 20 1,02 ml klooritrimetyylisilaania ja 1,15 ml trietyyliaminia lisättiin liuokseen, joka sisälsi 0,75 g (3S,4R)-3-f(R)-l~hydroksietyyli]-4-£(R)-l-(fenyylitiokarbonyyli)etyylij-2-atsetidinonia metyyleenikloridissa ja liuosta sekoistettiin huoneen lämmössä kaksi tuntia. Kun liuotin oli 25 haihdutettu pois ja 10 ml etyyliasetaattia ja 2 ml metanolia oli lisätty jäännökseen, ja 1,28 g (S)-3-merkapto-l-(p-nitrobentsyylioksi-karbonyyli) pyrrolidinia ja 750 1 trietyyliaminia lisättiin liuokseen ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa yhden päivän ajan. Reaktioseos pestiin vedellä, liuotin haihdutettiin pois ja jäännös puhdistettiin silikageelikolonni-30 kromatografiällä käyttämällä sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seosta suhteessa 1:1, jolloin saatiin 1,04 g otsikkoyhdistettä.

IR spektri (CHC13) cm-1 : 3430, 1760, 1695 35 1(c) p-Nitrobentsyyli(lR,5R,6S)-l-metyyli-2-[(S)-l-(p-nitrobentsyyli- oksikarbonyyli)-pyrrolldin-3-yylitio]-6-L(R)-l-(trimetyylisilyylioksi)-etyyli] karbapen-2-eemi-3-kabok8ylaatti 113 80887 1 0,984 g (3S,4R)-4-£(R)-l-^£(S)-l-(p-nitrobentsyylioksikarbonyyli)pyrroli- din-3-yylitio] karbonyyli3etyyliJ-3-^(R)-l-(trimetyylisilyylioksi)etyyliJ-2-atsetidinoni käsiteltiin samalla tavalla kuin esimerkeissä 9(b) ja 9(c), jolloin saatiin 0,415 g otsikkoyhdistettä.

5 _1 IR spektri (CHCl^) cm : 1765, 1700 NMR spektri (CDCl^)^ppm: 0,10 (9H,s), 1,25 (6H,d,J=6Hz), 1,7-2,4 (2H,m), 3,1-4,4 (9H,m), 5,11 (lH,d,J=14 Hz), 5,15 (2H,s), 5,24 (lH,d,J=14Hz), 1Q 7,43 (2H,d,J=9Hz), 7,57 (2H,d,J=9Hz), 8,14 (sH,d,J=9Hz)

Lisäesimerkki 2

Allyyli (5R,6S)-6-£(R)-l-(allyylioksikarbonyylioksi)etyyli-2-[*(S)-l-15 (allyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yyliti<^karbapen-2-eemi-3-kaboksy-laatti 2(a) (3S,4R)-3-[(R)-l-(allyylikarbonyylioksi)etyyll3-4- ff(S)-l-(allyyli~ oksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yylitio3karbonyylimetyyli3-2-atsetidinoni 20

Liuos, joka sisälsi 540 mg (3S,4R)-3-[(R)-l -(allyylioksikarbonyylioksi) etyyli3~4-^(fenyylitio)karbonyylimetyyliJ-2-atsetidinonia (kuten on kuvattu esimerkissä 6(b)), 430 mg (S)-3-merkapto-l-(allyylioksikarbonyyli-oksDpyrrolidinia ja 150 mg trietyyliamiinia 5 ml:ssa etyyliasetaattia 25 annettiin seistä huoneen lämpötilassa yön yli. Seos pestiin vedellä ja haihdutettiin vakuumissa, jolloin saatiin öljymäinen jäännös, joka puhdistettiin sillkageellkolonnikromatograflalla. Eluointi etyyliasetaatin ja bentseenin seoksella suhteessa 1:1 antoi 430 mg otsikkoyhdistettä öljyn muodossa.

30 IR spektri (neste) cm 3260, 1765, 1690 NMR spektri (CDCl^) £ppm: 1,42 (3H,d,J=7Hz9, 1,7-2,5 (2H,m), 2,8-4,2 (9H,m), 4,5-4,7 (4H,m), 4,8,-5,6 (5H,m), 5,6-6,3 (2H,m), 6,40 (lH,br,s) 35 2(b) (3s,4R)-3- [(R)-l-(allyylioksikarbonyylioksi)etyylQ-4-[[(S)-l-(allyylioksikarbonyyli)pyrrolidlni-3-yylitic3 karbonyylimetyyli]-!-(allyylioksioksalyyli)-2-atsetidinonl 114 80887 1 458 mg allyylioksioksalyylikloridia lisättiin liuokseen, joka sisälsi 653 mg (3S, 4R)-3- [(R) -1-(allyylioksikarbonyyli)etyyliJ-4-^"£(S) -I- (allyylioksikarbonyyli)-pyrrol idin-3-yyliticQkarbonyylimetyyli3-2-atsetidinoni ja 412 mg di-isopropyylietyyliamiini 23 ml:ssa metyleenikloridia, samalla g jäähdyttäen jäällä ja sekoittaen. Seosta sekoitettiin samassa lämpötilassa 20 minuuttia ja kaadettiin sitten 0,05 M fosfaattipuskuri-liuokseen (pH 7,1). Orgaaninen kerros erotettiin, pestiin kyllästetyllä natrium-kloridilla ja haihdutettiin vakumissa, jolloin saatiin 935 mg otsikko-yhdistettä raakana öljynä.

10 IR spektri (neste)$cm 1805, 1755, 1710,1690 NMR Spektri (CDC1,) ppm: 1,42 (3H,d,J=6,5Hz), 1,7-2,3 (2H,m), 2,8-4,1 (6H,m), 4,3-4,8 (7H,m), 5,0-5,5 (7H,m), 5,6-6,2 (3H,m) 15 2(c) Allyyli (5R,6S)-6-l[(R)-l-(allyylioksikarbonyylioksi)etyyliJ-2-f(S)-1-(ailyylioksikarbonyyli)pyrrolidin-3-yylitiqjkarbapen-2-eemi-3-karboksi-laatti 20 Liuos, joka sisälsi 935 mg (3S,4R)-3-j"(R)-l-(allyylioksikarbonyylioksi)-etyyli3~4- f[(S) -1-(allyylioks ikarbonyyli)-pyrrolid in-3-yylit io] karbonyy1i-metyy! -l-(allyylioksioksalyyli)-2-atsetidinonia ja 1,56 g trietyyli-fosfiittia 75 ml:ssa tolueenia sekoitettiin lämpötilassa 80°C kolmen tunnin ajan. Kun liuotin ja ylimäärä trietyylifosfaattia oli haihdutettu 25 vakuumissa, jäännös liuotettiin 80 ml:aan tolueenia ja kuumenettiin lämpötilassa 115°C (hauteen lämpötila) 30 mg:n hydrokinonin läsnäollessa typpiatmosfäärissä 72 tunnin ajan. Liuotin haihdutettiin pois alennetussa paineessa, jolloin saatiin raakatuote, joka puhdistettiin osittain silika-geelikolonnikromatografialla. Eluointi etyyliasetaatin ja bentseenin 30 seoksella suhteessa 1:3 antoi öljymäisen aineen, öljy edelleen puhdistettiin kromatografialla käyttämällä Lobar kolonnia-B (E.Merck, Darmstadt), jolloin eluoitiin etyyliasetaatin ja bentseenin 1:2 seoksella, jolloin saatiin 378 mg otsikkoyhdistettä öljynä.

35 IR spektri (neste) cm 1790, 1750, 1700 (br.) NMR spektri (CDC^JJppm: 1,47 (3H,d,J=6,5Hz), 1,8-2,6 (2H,m) , 3,0-4,3 (9H,m), 4,5-4,8 (6H,m), 5,0-6,3 (10H,m).

Claims (4)

115 80887

1. Menetelmä kaavan (IV) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi: 5 OR1 rZ r3 , ./Oc·»1 » / Ncoos- 15 (jossa: tarkoittaa vetyä tai hydroksia suojaavaa ryhmää, kuten (C^ ^-alkyy-li)^ Si, p-NC^-fenyylialkyylioksikarbonyyli tai allyylioksikarbonyyli; 2 3 20. ja R tarkoittavat vetyä tai Cj g-alkyyliä; 4 R tarkoittaa Cj-C^-alkyyliryhmää, fenyyliryhmää, N-suojaryhmällä suojattua amino-Cj ^-alkyyli- tai pyrrolidinyyliryhmää; ja

25 R^ tarkoittaa vetyä tai karboksla suojaavaa ryhmää, kuten p-NC^-fenyyli-alkyylia tai allyylia, tunnettu siitä, että saatetaan kaavan (II) mukainen yhdiste: OR’ R* «3 , & !II> 116 80887 2 2 3 4 5 1 (jossa R , R , R , R ja R ovat edellä määritellyt) reagoimaan kaavan (111) mukaisen yhdisteen kanssa: p(R6)3 (III) 5 (ja R tarkoittaa Cj_g-alkoksla) kaavan (I) mukaisen yhdisteen saamiseksi: ORl r2 , r3 J-N ® (I) 0 4/=P(R8l3

15 COGR5 1 2 3 4 5 6 jossa R,R,R,R,R ja R ovat edellä määritellyt) ja syklisoidaan 20 kaavan (I) mukainen yhdiste kaavan IV mukaisen yhdisteen saamiseksi.

1 Patenttivaatimukset

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että syklisointi suoritetaan eristämättä välillä kaavojen (II) ja (III) mukaisten yhdisteiden välisen reaktion tuotetta. 25

3. Kaavan (I) mukaiset yhdisteet

30 OR1 R2 R3

3 J-N 0 (I> 0 \=p(rB), 35 C00R5 1Π 80887 1 jossa: R* tarkoittaa vetyä tai hydroksia suojaavaa ryhmää, kuten (Cj ^-alkyy-li)^ Si, p-NC^-fenyylialkyylioksikarbonyyli tai allyylioksikarbonyyli; 5 2 3 R ja R tarkoittavat vetyä tai ^-alkyyliä;

4 R tarkoittaa Cj-C^-alkyyliryhmää, fenyyliryhmää, N-suojaryhmällä suojattua amino-Cj ^.-alkyyli- tai pyrrolidinyyliryhmää; 10 R^ tarkoittaa vetyä tai karboksia suojaavaa ryhmää, kuten p-NO^-fenyyli-alkyylia tai allyylia ja tarkoittaa C^g-alkoksia. 15 20 25 30 35 118 80887