FI80043C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara substituerade 3-aminometylcefalossporiner och nya mellanprodukter. - Google Patents

Description

1 80043

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten substituoitujen 3-aminometyylikefalospöriinien valmistamiseksi ja uudet välituotteet 5 Tämä keksintö koskee menetelmää kefalosporiini- johdannaisten valmistamiseksi, joilla on antibakteerista aktiviteettia, sekä eräitä uusia välituotteita.

Vuosikausia on suuri määrä työtä kohdistettu kefa-losporiinikemiassa muunteluille 3-asemassa. Lukemattomien 10 kemiallisten tyyppien joukossa, joita on tuotu renkaan tähän asemaan, eräs, josta ensimmäiseksi ilmoitettiin yli 10 vuotta sitten, on pyridiinitiometyyliradikaali (Nomura et ai., J. Med. Chem. 17 (1974), ss. 1312 - 1315^. Tämä ryhmä on myöhemmin tuotu kefalosporiineihin, jotka sisältä-15 vät muita asyyliaminoryhmiä 7-asemassa (GB-patenttijulkaisu 1 604 724, GB-hakemusjulki.J sut 2 036 738A ja 2 046 261A sekä EP-patenttijulkaisu 0088853), ja ajatus on äskettäin ulotettu rikkisidoksellisiin yhdisteisiin, joissa kvater-näärinen ryhmä sijaitsee avoketjuisessa rakenteessa (EP-20 patenttijulkaisu 0099297). Pyridiniotiometyyliryhmä voidaan helposti tuoda kefalosproriineihin saattamalla 3-asetoksi-metyylikefalosporiinin johdannainen reagoimaan pyridiini-• | tionin johdannaisen kanssa.

: Kefalosporiinin johdannaisia, jotka vastaavat niitä 25 edellä kuvattuja, joissa rikki on korvattu typellä, ei tunneta. Tämä saattaa osaksi johtua siitä, että edellä kuvat-tua vastaava korvausreaktio on kenties paljon vaikeampi • · aikaansaada analogisen typpireagenssin huonon nukleofii- lisyyden vuoksi tavallisissa olosuhteissa.

30 Typpi-analogeja valmistetaan kuitenkin helposti vaihtoehtoisen reaktion avulla, jossa 3-aminometyylikefalo- sporiinin johdannainen saatetaan reagoimaan sopivan kloori-pyridiinin kanssa. Analoginen reaktiomenetelmä kefalosporiinin kemiassa 7-(pyridiiniamino)kefalosporiinin johdan-35 naisten valmistamiseksi on tosiaankin jo tunnettu (EP-pa-tenttijulkaisu 0018595). Huolimatta siitä seikasta, että tarvittava lähtöaine, 3-aminometyylikefalosporiinin johdan-nainen, on ollut tunnettu vuodesta 1967 lähtien (GB-patent- 2 80043 tijulkaisu 1 155 493) , ei edellä kuvattujen yhdisteiden typpianalogeja ole kuitenkaan tähän mennessä valmistettu.

Keksinnön kohteena on menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten substituoitujen 3-aminometyylikefalospo-5 riinien valmistamiseksi, joilla on kaava I

I^-NH--V.

Y^-CH2-R4 I

10 r3 jossa R3 on kefalosporiinikemiassa tavanomainen C-4-substi-tuentti; R3 on ryhmä, jolla on kaava II, V tai VI 15

H

Rc - N

J n/)~ R6 20 HO-N \\_CH-CO-

NH V

25 c°-rio

Rii-C-CO- VI

iJ* ··

30 N

\ 0-r12 joissa R^ ja Rg merkitsevät itsenäisesti vetyä tai metyyliä;

35 R10 on ryhmä, jolla on kaava VII tai VIII

tl 3 80043 o o

-N N-C2H5 VII

\_/ 1 b

5 HO

"Ö30

H

10 Rjli on 2-aminotiatsol-4-yyli tai 2-amino-oksatsol-4-yyli, kumpikin valinnaisesti substituoituna 5-asemassa fluorilla, kloorilla tai bromilla, r12 on vetY» C^_g-alkyyli, C3_g-sykloalkyyli, C3_g-syklo-alkyyli-C^_3~alkyyli, C3_g-alkenyyli, C3_g-alkynyyli,

15 halogeeni-C^.g-alkyyli, hydroksi-C2_g-alkyyli, C^.^-al-koksi-C2_4-alkyyli, amino-C2_6-alkyyli, syaani-C^_5-al-kyyli, atsido-C^_4~alkyyli, karbamoyyli-C^_4~alkyyli, fenyyli-C^_^-alkyyli, 5-metyyli-iso-oksatsol-3-yylimetyyli-li, 2-(2-karboksifenyylitio)etyyli tai ryhmä, jolla on 20 kaava XI

-CR29R3o-(CH2>m-COR31 XI

jossa m on 0-3, R2g on vety tai Cj^-alkyyli, R30 on ve-25 ty tai Cj^-alkyyli tai R2g ja R3Q muodostavat karbosyk-lisen C3_7~renkaan yhdessä sen hiiliatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, ja R31 on vety tai C^.^-alkoksi; R4 on ryhmä, jolla on kaava XII tai XIV: 30 R34 :: Rj3 XI1 r32 4 80043

-nh-^y^-r40 XIV

N

R39 5 joissa R32 on vety, C^_g-alkyyli, fenyyli tai karboksi-C-j^g-alkyyli; R33 on vety, C^_g-alkyyli, fenyyli, karbok-si-C^.g-alkyyli tai syaani ja R34 on vety tai C^.g-alkyy-li tai R33 ja R34 muodostavat heksahydroatsepiinirenkaan yhdessä sen typpiatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet; 10 rengas Y on pyridiini, pyrimidiini, imidatsoli, dihydro-imidatsoli, tiätsoli tai iso-oksatsoli, joihin kuhunkin on mahdollisesti fuusioitunut, milloin se on mahdollista, bentseeni-, syklopentaani- tai sykloheksaanirengas; R3JJ on vety, C^g-alkyyli, C^.^-alkoksi-C^.^-alkyyli, 15 fenyyli-C^g-alkyyli, C-^g-alkoksikarbonyyli-C^.g-alkyyli, karboksi-C^_g-alkyyli, C^.g-alkyylitio-C^.g-alkyyli, C-^_g-alkoksi-C^_g-alkoksi-C^_g-alkyyli, C^_g-alkyyli-sulfinyyli-C^_g-alkyyli, C^_g-alkoksi, fenyyli-C^_g-alkoksi, C1_g-alkoksikarbonyyliamino-C^_g-alkyyli, ami-20 no-C^_g-alkyyli, karbamoyyli-C^_g-alkyyli, hydroksi-C^.g-alkyyli, CjL_g-alkanoyyli-CjL_g-alkyyli, di-C^_g-alkyyliamino-C^g-alkyyli, CjL.g-alkanoyyliamino-C^.g-alkyyli, C3_g-sykloalkyyli, C3_g-alkenyyli, amino, fe-: nyyli-C^_g-alkyyli, jonka fenyylirengas on mahdollises- 25 ti substituoitu syaanilla, C1_g-alkoksilla, C],_g-alkok-sikarbonyylillä, halogeenillä, C^_g-alkyylillä, nitrolla tai karboksilla, tai ryhmä, jolla on kaava -(CH2)n-N=CR43NR44R45 30 jossa n on 1-4 ja R43, R44 ja R45 merkitsevät kukin itsenäisesti vetyä tai C^_4-alkyyliä; ja R40 on vety tai yksi tai kaksi substituenttia, jotka on valittu seuraavasta: C-j__g-alkyyli, halogeeni-C^_g-alkyy-35 li, karbamoyyli, halogeeni, C^_g-alkoksi, C-^.g-alkoksi-

II

c p. r\ r* I ->

u u u n J

karbonyyli-C^_g-alkyyli, amino, 2-aminoetyylitiometyyli, Cj_g-alkanoyyliamino-C^_g-metyyli, amino-C^_g-alkyyli, nitro, fenyyli-C^_g-alkyyli ja nitrobentsyylioksi; ja, kun kaavan I mukaisessa yhdisteessä ei ole 5 positiivista varausta, sen farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi, ja siinä tapauksessa, että kaavan I mukaisessa yhdisteessä on kar-boksi, sen farmaseuttisesti hyväksyttävien emäs-addi-tiosuolojen valmistamiseksi.

10 Uudet kaavan I mukaiset yhdisteet ovat laajaspekt- risiä antibakteerisia aineita.

On selvää, että edellä esitetyssä kaavassa I ja koko tässä julkaisussa kef-3-eemi-renkaan kuvattu stereo-kemia on absoluuttinen konfiguraatio. On myös selvää, et-15 tä vaikka kaksoissidokset kaavoissa II, VIII ja XII on sijoitettu erityisiin asemiin, ovat muut tautomeeriset muodot joissakin tapauksissa mahdollisia, ja nämä muut muodot sisältyvät tämän keksinnön piiriin.

Seuraavassa on esitetty kaavan I mukaisen kefalo-20 sporiinin johdannaisen edullisia piirteitä. Kun jokin näistä piirteistä otetaan joko erillisenä tai yhdistelmänä edellä lueteltujen keksinnön mukaisen kefalosporiinin johdannaisen muiden yleisten tai erityisten piirteitten kanssa, saadaan yhdisteiden edulliset alaryhmät.

: 25 a) R:llä on kaava II, jossa ja R^ ovat vetyjä.

b) R:llä on kaava VI.

c) R^ on karboksi.

d) R^:llä on kaava XIV.

e) R^ on 2-aminotiatsol-4-yyli.

30 f) R12 on C^_g-alkyyli, C3_g-alkenyyli, C3_g-alkynyyli , C3_g-sykloalkyyli, C3_g-sykloalkyyli-C1_3~alkyyli, halogeeni-C^_3-alkyyli, syaani-C^_^-alkyyli, hydrok-si-C2_g-alkyyli, C1_^-alkoksi-C2_^-alkyyli, amino-C2_g-alkyyli tai bentsyyli.

35 g) R12 on metyyli, etyyli, isopropyyli, allyyli, prop-argyyli, syklopentyyli, syklopropyylimetyyli, 2-kloorietyyli, 2-bromietyyli, syanometyyli, 2-syano-etyyli, 2-hydroksietyyli, 2-etoksietyyli tai bentsyyli.

6 80043 h) R^zlla on kaava XI.

i) Kaavassa XI m on 0.

j) Kaavassa XI R29 ja ovat molemmat vetyjä tai me tyylejä tai R29 ja R^q muodostavat yhdessä sen hii- 5 Ien kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, syklobutyy- li- tai syklopentyylirenkaan.

k) Rengas Y on pyridiini, johon on mahdollisesti liittynyt bentseeni- tai syklopentaanirengas, pyrimi-diini, johon on mahdollisesti liittynyt bentseeni- 10 rengas, tiatsoli tai isoksatsoli.

l) Rengas Y on 4-sidoksinen pyridiini, johon on mahdollisesti liittynyt bentseeni- tai syklopentaanirengas 2,3-asemaan, tai 2- tai 4-sidoksinen pyrimidiini, johon on mahdollisesti liittynyt bentseenirengas 15 5,6-asemaan.

m) R^g on C^_g-alkyyli, Cg_g-alkenyyli, (CH2) ^-CONI^ , (CH-) -S(O) -R._ tai (CH_) -NHCO-R._ /jossa R.~ on 2 q S 42 2 q 42 42 C^_g-alkyyli7, primäärinen hydroksi-C^_g-alkyyli, primäärinen amino-C^_g-alkyyli, Cg_g-alkanoyylime- 20 tyyli, fenyyli-C^_6~alkyyli Ajossa fenyyli on mahdol lisesti substituoituy tai -(CH_) N=CR. -.NR. .R. c .

^ 2 n 43 44 45 n) Rgg on metyyli, etyyli, n-propyyli, isopropyyli, allyyli, karbamoyylimetyyli, (2-asetyyliamino)etyy li, metyylitiometyyli, 2-hydroksietyyli, 2-aminoetyy- 25 li, 4-nitrobentsyyli tai CH2CH2N=C(CH^)NH2.

o) R40 on vety, halogeeni, amino, C1_g-alkyyli, alkoksi tai karbamoyyli.

p) R40 on vety, fluori, amino, metyyli, metoksi tai karbamoyyli.

30 Keksinnön erityisiä yhdisteitä selostetaan esi merkeissä. Seuraava taulukko sisältää ryhmän edullisia yhdisteitä. Näistä se ryhmä, johon sisältyvät esimerkkien 23, 25, 32, 36, 42, 59, 62, 63, 73 ja 122 yhdisteet, on erityisen suositeltava.

Il 7 80043 H„N—/ Ί H ? 2 V : Vs \ N -k/00— NH -] ” 1-N\^~CH2'R4

N -O-R, 9 I

0 COO®

Esimerkki R^2 R4 23 -C(CH3)2COOH _nh —V _ N-CH3 _/T^& 25 -C(CH3)2COOH -NH—TN“CH3 :-: CH3 /p\Q) 3 2 -C(CH3)2COOH “NH’\_yN-CH3

Jp^ 36 -C(CH3)2COOH -NH—N-CH2CH2NH2 59 -C(CH3)2COOH -NH-H^^-CH(CH3)2 ( jatkuu...) 8 80043

Esimerkki R^2 R4 42 -C(CH3)2COOH -NH -0 -CH3 0 63 -C(CH3)2COOH -nh-( N-v \3 62 -C(CH3)2COOH -NH—^_N-CH2CH=CH2 ΝΊ\Θ -NH N-CH0 122 -C(CH3)2COOH y^/ 3 4J) / ^ © 73 -CH2COOH “NH /N~CH3 41 -C(CH3)2COOH -nh n-ch2conh2 110 -C(CH3)2COOH ~NH~^L^N~CH2 -o- N02 CH3 84 -C(CH3)2COOH ~NH—<C^@CH3 (jatkuu...)

II

9 80043

Esimerkki R-^2 R4

85 -C(CH3)2COOH

3 ® * ch3 * CH3 -NH —ς 86 -C(CH3)2COOH \_ / ^ch3 131 ......<\/ cooh -NH -^-CH2CH2NH2 103 -o-ch2ch2ci -nh-(^n-ch2ch2nh2 /\ \ / -NH —Γ N-CH0CH=CH„ 6 7a -- COOH \ — / 2 2 16 -CH3 -NH-^VcH3 67 -CH2CH3 -NH—T^N-CH3 (jatkuu...) 10 80 043

Esimerkki R,~ R, _ R.

12 12 4 39 -C(CH ) COOH -NH-4^-^ W?\ ch3 72 -ch(ch3)2 -nh —^^N-CH3 /~"^ + 96 -CH2CN -NH—(_N-CH3

CH

N-V

117 -CH3 -NH—<S_y 11 80043

Kaavan I mukaisen kefalosporiinijohdannaisen sopiva happoadditiosuola on esimerkiksi suola, joka on muodostettu kloorivetyhapon, bromivetyhapon, fosforihapon, rikkihapon, sitruunahapon tai maleiinihapon kanssa. Kaa-5 van I mukaisen kefalosproriinijohdannaisen sopiva emäs- additiosuola on esimerkiksi alkalimetallisuola (esim. natrium- tai kaliumsuola), maa-alkalimetallisuola (esim. kalsium- tai magensiumsuola), tai suola, joka on muodostettu primäärisen, sekundäärisen tai tertiäärisen orgaanisen 10 amiinin kanssa (esim. trietyyliamiinin, prokaiinin, di- bentsyyliamiinin ja N,N*-dibentsyylietyleenidiamiinin tai muiden amiinien kanssa, joita on käytetty suolojen muodostamiseen kefalosporiinien kanssa).

Kaavan I mukaisia kefalosporiinin johdannaisia 15 voidaan valmistaa menetelmillä, jotka sinänsä ovat tunnettuja kemiallisesti analogisten yhdisteiden valmistuksessa.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle uusien kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi on tunnusomaista, että 20 a) reagoitetaan yhdistettä, jolla on kaava XVIII:

S

R1~NH —-r > J_CH2NH2 XVI11

CT I

25 R

r3 lisäämällä aminoryhmä aktivoituun C=C- tai C=N-sidokseen, joissa on hiilessä radikaali R^q, jonka jälkeen eliminoidaan HR^q tuotteesta, jossa R^q on korvattavissa oleva 30 radikaali; b) sellaisten yhdisteiden ollessa kysymyksessä, joissa on karboksi- ja/tai aminoradikaali, poistetaan suojaus vastaavalta yhdisteeltä, jossa on suojaava ryhmä relevantin vetyatomin paikalla; 12 80043 c) kysymyksen ollessa yhdisteistä, joissa on kaavaltaan V tai VI, asyloidaan yhdiste, jolla on kaava XIX:

JzCl Y^ch2-r4 r3 10 hapolla, jolla on kaava Rg^-OH, jossa Rj^- on kaavaltaan V tai VI, tai sen aktivoidulla johdannaisella; d) kysymyksen ollessa yhdisteistä, joissa R^ on kaavaltaan VI, jossa R^2 on jokin muu kuin vety, reagoi-tetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa R^ on kaavaltaan 15 VI, jossa Rjl on vety, yhdisteen kanssa, jolla on kaava R50~R52' jossa R50 on korvattavissa oleva radikaali ja ja R^2 on jokin R^2:n merkityksistä lukuunottamatta vetyä; e) kysymyksen ollessa yhdisteistä, joissa R·^ on kaavaltaan VI, reagoitetaan yhdiste, jolla on kaava XXI: 20

Rll-CO-CO-NH ^ SN XXI

J?——ch2-r4 ·: r3 25 ; yhdisteen kanssa, jolla on kaava H2N-0-Rj_2; jonka jälkeen, kun kaavan I mukainen yhdiste saadaan vapaan emäksen tai amfoteerin muodossa, ja halutaan saada suola, reagoitetaan vapaan emäksen tai amfoteerin 30 muodossa oleva kaavan I mukainen yhdiste hapon kanssa, joka antaa farmaseuttisesti hyväksyttävissä olevan anio-nin, tai kun kaavan I mukaisessa yhdisteessä on karboksi, kaavan I mukainen yhdiste reagoitetaan emäksen kanssa, joka antaa farmaseuttisesti hyväksyttävissä olevan kationin.

Il 13 δ O G 4 3

Menetelmässä a) reagoitetaan yhdistettä, jolla on kaava XVIII, lisäämällä aminoryhmä aktivoituun C=C-tai C=N-sidokseen, jossa on hiilessä radikaali R^ ja poistamalla sen jälkeen HR5q tuotteesta, jossa R^q on 5 korvattavissa oleva radikaali. Erityinen merkitys symbo lille r5Q on esimerkiksi halogeeni (esim. fluori, kloori tai bromi), C^_g-alkoksi (esim. metoksi tai etoksi), fenoksi, C^galkyylitio (esim. metyylitio) , tri-C^_^-alkyyliammonium (esim. dimetyylisulfonium), C. ,-aikaani-10 sulfinyyli (esim. metaanisulfinyyli), C^_g-alkaanisulfon-yyli (esim. metaanisulfonyyli), C1_g-alkaanisulfonyyli-oksi (esim. metaanisulfonyylioksi), bentseenisulfonyyli, bentseenisulfonyylioksi, tolueeni-p-sulfonyyli tai toluee-ni-p-sulfonyylioksi. Reaktio voidaan suorittaa laimennus-15 aineessa tai liuottimessa, kuten vedessä tai veden kanssa sekoittuvassa nesteessä, kuten dimetyyliformamidissa, ase-tonitriilissä, dimetyylisulfoksidissa, nitrometaanissa, 1,3-dimetyyli-2-okso-tetrahydropyrimidiinissä tai 1,3-di-metyyli-2-okso-dihydroimidatsolissa tai kahden tai kolmen 20 näistä seoksessa. Yleensä on edullista suorittaa reaktio emäksen, kuten trietyyliamiinin tai natriumbikarbonaatin läsnäollessa. Emästä voi olla läsnä ylimäärin, esimerkiksi 20 moolin ylimäärään asti. Reaktio voidaan suorittaa lämpötilassa, joka on välillä 0 - 90°C ja edullisesti ym-25 päristön lämpötilan ja 40°C:n välillä olevassa lämpötilassa.

Menetelmässä b), kun kysymys on niistä yhdisteistä, joissa on karboksi- ja/tai aminoradikaali, poistetaan suojaus vastaavalta yhdisteeltä, jossa on suojaava ryhmä 30 relevantin vetyatomin paikalla.

Niille yhdisteille, joissa on alifaattinen aminoryhmä, voidaan käyttää jotain peptidikemiassatunnetuista aminoa suojaavista ryhmistä. Esimerkkejä tällaisista ryhmistä ovat bentsyylikarbonyyli (poistettavissa hydrogeno-35 lyysin avulla tai käsittelemällä hapolla), tert.-butoksi-karbonyyli tai allyylioksikarbonyyli (poistettavissa hapolla) ja 2-trimetyylisilyylietoksikarbonyyli (poistettavissa hapolla) ja 2-trimetyylisilyylietoksikarbonyyli (poistettavissa fluoridilla).

14 80043

Niille yhdisteille, joissa on aromaattinen amino-ryhmä, ja erityisesti niille yhdisteille, joissa R^:llä on kaava VI, voidaan käyttää jotakin edellä alifaattisel-le aminolle suositeltavista suojaavista ryhmistä. Käyttö-5 kelpoisia suojaavia ryhmiä ovat lisäksi formyyli ja tri- fenyylimetyyli (poistettavissa hapolla) ja klooriasetyy-li (poistettavissa tiourealla).

Menetelmässä c), kun kysymys on yhdisteistä, joissa Ritilä on kaava V tai VI, asyloidaan yhdiste, jol-10 la on kaava XIX, hapolla, jolla on kaava R^^-OH, jossa R^rllä on kaava V tai VI, tai sen aktivoidulla johdannaisella. Erityinen aktivoitu johdannainen on esimerkiksi happokloridi, happobromidi, anhydridi tai esteri, joka on muodostettu 1-hydroksibentsotriatsolin, 4-hydroksibentso-15 1,2,3-triatsiinin tai 2-merkaptobentsotriatsolin kanssa.

Analysointi voidaan vaihtoehtoisesti suorittaa käyttämällä vapaata happoa karbodi-imidin, kuten disykloheksyyli-karbodi-imidin läsnäollessa.

Lisäksi keksinnön kohteena on uusi kefalosporiini-20 johdannainen, jolla on kaava XIX, ja sen happoadditiosuo-lat, jotka ovat arvokkaita välituotteita monien kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi. Kaavan XIX mukainen yhdiste voidaan valmistaa reagoittamalla 3-aminometyy-li-7-aminokefalosporiinin johdannaista (jossa 7-aminoryh-25 mä voi mahdollisesti olla suojattu ) menetelmässä, joka on samanlainen kuin edellä kohdassa a) esitetty (jonka jälkeen poistetaan tarvittaessa suojaava ryhmä). Tätä menetelmää valaistaan esimerkeissä 12, 13, 56 ja esimerkkien 68 - 80 kahdessa viimeisessä osassa.

30 Menetelmässä a) käytettäväksi tarkoitettua kaavan XVIII mukaista lähtöainetta voidaan valmistaa reagoittamalla 7-amino-3-atsidometyylikefalosporiinin johdannaista (jossa, mikäli R^ on karboksi, se on mahdollisesti suojattu) hapon kanssa (tai sen suojatun tai aktivoidun johdan-35 naisen kanssa) tai 2-fluori-imidtasolin kanssa, vastaavasti menetelmänc) mukaan. 3-atsidometyyliryhmä pelkistetään sen jälkeen 3-aminometyyliryhmäksi, jolloin mahdollinen suojaava ryhmä tai ryhmät poistetaan joko ennen tätä

II

is 80043 pelkistysvaihetta tai sen jälkeen. Tämä menetelmä esitetään lähemmin esimerkeissä 1, 23 - 52, 66 - 67a, 81 - 82, 100 - 103 ja 136.

Menetelmässä b) käytettäväksi tarkoitettua lähtö-5 ainetta voidaan valmistaa suorittamalla menetelmä a) tai c) käyttäen sopivasti suojattua välituottetta vastaavan lähtöaineen muodostamiseksi. Menetelmän a) käyttöä valaistaan esimerkeissä 17, 19, 22, 36, 45 ja 131. Menetelmän c) käyttöä valaistaan esimerkeissä 12, 13, 56, 68 - 80 ja 10 91 - 99.

Kuten edellä mainittiin, kaavan I mukaisilla ke-falosporiinin johdannaisilla on antibakteriaalisia ominaisuuksia. Niinpä ne ovat käyttökelpoisia antibakteriaalisi-na aineina, jolloin monilla niistä on laaja aktiviteetti-15 spektri in vitro vakioisia mikro-organismeja, sekä gram- negatiivisia että gram-positiivisia, vastaan, joita käytetään patogeenisiä bakteereja vastaan vaikuttavan aktiviteetin seulontaan. Tietyn yhdisteen antibakteriaalinen spektri ja potenssi voidaan määrittää standardikoejärjes-20 telmässä.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden antibakteriaalisia ominaisuuksia voidaan myös selvittää tavanomaisilla hiirillä suoritetuilla suojauskokeilla.

Kefalosporiinin johdannaisten on yleensä todet-25 tu olevan suhteellisen myrkyttömiä lämminverisille eläimille, ja tämä yleistys pitää paikkansa myös kaavan I mukaisten yhdisteiden suhteen.

Joukko yhdisteitä annettiin hiirille annoksina, jotka olivat suuremmat kuin ne määrät, jotka vaaditaan 30 suojan antamiseksi bakteeri-infektioita vastaan. Niinpä esimerkiksi esimerkkien 23, 70 ja 74 yhdisteitä annettiin : subkutaanisesti hiirille kahtena erillisenä annoksena päi vän aikana, jolloin kumpikin annos oli vähintään 5 kertaa niin suuri kuin tehokkaan annoksen minimi, joka suojasi 35 50 % hiiristä Salmonella dublin'in aiheuttamaa infektiota vastaan (PD^q). Mitään ilmeisiä myrkyllisiä oireita tai sivuvaikutuksia, jotka voitaisiin laskea annettujen yhdisteiden syyksi, ei todettu.

ie 80043

Seuraavassa taulukossa esitetyt tulokset kuvaavat uusien kaavan I mukaisten yhdisteiden biologista aktiviteettia. Luetelluissa yhdisteissä on kaikissa 1-me-tyyli-4-pyridiinoaminometyyliradikaali kefalosporiini-5 renkaan 3-asemassa ja erilaisia tunnettuja substituentte-ja 7-asemassa. Seuraavat tulokset ovat sellaisia, jotka on saatu in vitro suoritetulla standardikoejärjestelmällä käyttämällä Isosensitest-agarväliainetta. Antibakteri-aalinen aktiviteetti ilmaistaan minimiehkäisykonsentraa-10 tion (MIC) muodossa määritettynä agar-laimennusmenetel- 4 mällä ymppikoon ollessa 10 CFU/täplä.

tl 17 80043 00 00

in CO ^ fN fN M fNJ

CN «*CNCNVOVOiHf-HrOrH

00 O rH A Λ Λ ΓΟ iH 00

ι-Η **«—fCNCOCN^OOCNCN

00 O ro H

A

m LO ro ro

^ CN CN rH in rH

n- **oo * ·» ι-H i—I v o o o o o ro ro m ro m ^

ro 1-1 iHCNrHinCNVOCN

CN *00 cH*H O O O O O O * EM <=> \ λ; -------------—- tJ> Vh s_ o) E in <n vo cn-'S'cn *.·Η I »miOrHinroiom

U U) VO OOOOOJOO

H W (Xi ^ ^ ^ ^ ^ 2 o o o o o o vo rH IT) Γ0

o otHCNinrHrHLnincN

r*- ^ ^ ^ ^ ^ ro o o o o o o

V

VO CN CN ^ »—I ro m ro vo ro vo <J\ OiHOCNOOi-HOV£>

* ^ ^ ^ v H

o o o o o o o

cocNooi-Hr-^or-oo •h i-Hin<T\o<NincNincN

Ό ooooooooo

' ‘ 0 rH rH rH 0V rH rH rH CN rH

O ooo^vocnonjroo ί»ί νονοηηΓθτ}<·«ί··^ι-ι

CDOOOOOOOOOOOOOOOO

<<C<C<C<C<C<C<C<C

•h m E m mc m m a) o) m -h •h cm c υ rH m C tue o) d) m -h m

(0 end) C tT> 3 0) Λ O

en O >H -HOOUdJC

M >1 3 i—I )H 3 )H M *rH

O Dj3 X) 0) O 3 -H tJ> h 3 ra rH E E 3

• · H fl U C

O» Ä O · · · 0) 0) a υ · X) · >h h-» 3

C3rH0)4-))HO +J +J . 03 rH e 0) M

: _ cotoMcn^w cQCutii is 80043

MIC

Λ . Esimerkki

Organismi ______ li 2 13 4 14 : 15 / ----<- ---- i E. cloacae j (1841P, P99+) 4 16 8 4 8 4 E. cloacae ! (184IM, P99N) 0,5 2 - 1 E. coli TEM+) 1 8 I 2 2 21 E. coli (R-1570-E) 0,5 8,2 2 11 ------- 1---I———-- K. aerogenes (Kl, 1082E) 4 32 8 8 8 4 K. aerogines ! (Kl, 1522E) 2 16 ; 8 4 22

Ps. aeruginosa ! (PS19, 1592E) >128 j >128 >128 8 128 j 8

Ps. aeruginosa j , i I

(PS19/8, 1593E) 128 : >128 j >128 16 j 16 ------ ------i-1---1-

Ps. aeruginosa I : (185H) >128 | >128 ! >128 64 >128 >128 ; E. coli ~ ' / (DCO, UB1005) 1 16 2 2 11 : E. coli ! (DC2) 0,25 j 4 1 1 1 0,25

Ps. aeruginosa ; (799WT) >128 >128 >128 32 >128 32

Ps. aeruginosa (799/61) 16 32 >128 8 16 8

__. - - --_ L I

II

" '-1-- MIC (mg/1) 19 80043 ^ . . Esimerkki

Organismi -;-i-!-i- __16 23_25 : 32 36 I ; '

Staph, aureus j j | (601052) 0,25 8 4 4 4 1 i

Staph, aureus j ί (601076) 0,25 8 4 i 2 I 64

; I

| i 1

Strep, pneumoniae : j (671001) 0,03125; 0,5 0,25 j 0,5 0,25

jStrep, pyrogenes I

j (681016) 0,015625 °'25 0,25 0,25 I 0,25 |e. coli 1(341100) <0,03125 °'25 0,25 0,125 0,0625 I : ! 1 (e. coli j . i (341135) <0,031251 0,25 0,0625 0,0625 0,03125 I :

Kleb. pneumoniae j j (391010) <0,03125| 0,5 j 0,25 0,25 0,0625

Prot. mirabilis ! · (432057) 0,03125 0,125 0,0625 0,0625 0,03125|

Prot. vulgaris | I

-. : (431009) 0,03125 0,25 0,125 0,0625 0,03125

Ent. cloacae (401053) 2 8 64 32 4

Ent. cloacae (401054) 0,0625 0,25 0,125 0,5 0,5

Ps. aueruginosa (101024) >128 8 241

Ps. aeruginosa (101020) >128 - --32 -1-—-- I MIC (mg/1) 20 8 0 0 4 3 Λ . Esimerkki 0r9anlSml -39-;-41 ' 42 -1-59- 62

Staph, aureus ! (601052) 8 : 8 8 42

Staph, aureus (601076) 8 8 4 42 i

I I

Strep, pneumoniae j (671001) 0,5 j 0/5 0,03125 0,125 0,25

Strep, pyrogenes (681016) 0,25 0,25 0,015625 0,0625 0,125 E. coli !

j I

(341100) 0,25 0,125 | 0,0625 0,0625 0,015625

E. coli I

(341135) 0,125 0,0625 |o,03125 0,03125 0,015625

Kleb. pneumoniae (391010) 0,25 0,125 0,0625 0,125 0, 015625

Prot. mirabilis (432057) 0,125 0,015625 0,0156250,015625<0 fl 15625 -.: Prot. vulgaris .: (431009) 0,125 0,015625 0,015625 0,015625 <0/315625 v Ent. cloacae ·': (401053) 32 32 26 4 2

Ent. cloacae (401054) 1 1 0,25 0,25 0,25

Ps. aueruginosa (101024) 442 42

Ps. aeruginosa (101020) 64 >128 >128 64 64

II

" '-1-- —--- MIC (mg/1) 2i 80043 ~_______i _... .· Esimerkki

Organismi -:-i-—-r—- __63 67 67a_72 73

Staph, aureus (601052) 4 0,125 , 4 0,25 8 i

Staph, aureus i (601076) 4 0,0625| 2 0,125 16

Strep, pneumoniae j (671001) - 0,0156251 0,125 0,03125 0,25

Strep, pyrogenes I

(681016) 0,25 <0,015625) 0,03125 0,015625 0,125 ! E. coli j (341100) 0,125 0,3125 0,125 0,25 0,0625 E. coli (341135) 0,0625 <0,015625 0,03125 0,125 0,03125

Kleb. pneumoniae (391010) 0,125 0,015623 0,25 0,125 0,0625

Prot. mirabilis (432057) 0,0625 0,03125 0,03125 1 0,0625

Prot. vulgaris (431009) 0,01625 0,015625 0,0625 0,25 0,03125

Ent. cloacae (401053) 16 4 8 8 16

Ent. cloacae (401054) 0,5 0,125 0,5 1 0,25

Ps. aueruginosa .- (101024) 4 32 8 64 32

Ps. aeruginosa (101020) 32 >128 64 >128 >128 • --1---- MIC (mg/1) 22 80043 „ . Esimerkki

Organismi -;-i-—--r-- __84 ' 85 86 96 103

Staph, aureus | (601052) 16 I 8 8 0,5 0,5

Staph, aureus j (601076) 8 48 0,25 0,5

Strep, pneumoniae (671001) 0,125 0,25 1 - ),03125 t

Strep, pyrogenes j (681016) 0,125 0,125 | 0,25 - ,01562()

E. coli j I

(341100) 0,25 0,5 0,25 0,03125 0,125 JE. coli (341135) 0,125 0,125 0,125 0,015625 0,125

Kleb. pneumoniae (391010) 0,25 0,25 0,5 0,03125 0,25

Prot. mirabilis ^ (432057) 0,0625 0,125 0,125 0,0625 1 : Prot. vulgaris (431009) 0,0625 0,125 0,125 0,5 1

Ent. cloacae (401053) 64 128 64 4 2

Ent. cloacae (401054) 0,5 0,25 2 0,25 1

Ps. aueruginosa (101024) 42 8 32 32

Ps. aeruginosa (101020) - >128 >128 >64 >128 _I_1___1__

II

23 80043 " '-!---—-- MIC (mg/1) r,».,---· _Esimerkki________

Orcjcin i srni j--:— __110 : 117 122_ 131__

Staph, aureus j (601052) 2 0,5 4 j 4

Staph, aureus j (601076) 2 0,5 4 4

Strep, pneumoniae (671001) 0,0625 |<0,015625 0,125 0,125

Strep, pyrogenes | (681016) 0,015625 |<0,015625 0,0625 0,0625 E. coli (341100) 0,125 0,125 0,25 0,125 E. coli (341135) 0,0625 0,0625 0,125 0,125

Kleb. pneumoniae (391010) 0,125 0,25 0,25 0,25

Prot. mirabilis (432057) 0,125 0,5 0,0625 0,0625

Prot. vulgaris : : (431009) 0,125 0,125 0,0625 0,0625

Ent. cloacae (401053) 1 1 128 8 Ent. cloacae (401054) 1 0,5 1 0,5

Ps. aueruginosa (101024) 8 128 16 2

Ps. aeruginosa (101020) 16 >128 128 16 24 80043

Kaavan I mukaisista yhdisteistä voidaan valmistaa farmaseuttinen koostumus, joka sisältää kaavan I mukaista kefalosporiinin johdannaista yhdessä myrkyttömän farmaseuttisesti hyväksyttävän laimennus- tai kantaja-ai-5 neen kanssa.

Tällainen farmaseuttinen koostumus voi olla esimerkiksi sellaisessa muodossa, joka soveltuu lääkkeen oraaliseen, rektaaliseen tai parenteraaliseen antamiseen, joita tarkoituksia varten se voidaan muotoilla alalla tunnetuilla 10 menetelmillä esimerkiksi tableteiksi, kapseleiksi, vesi- tai öljyliuoksiksi tai suspensioiksi, emulsioiksi, disper-goitaviksi jauheiksi, suppositorioiksi ja steriileiksi in-jetoitaviksi vesi- tai öljyliuoksiksi tai -suspensioiksi.

Kaavan I mukaisen kefalosproriinin johdannaisen 15 lisäksi keksinnön mukainen farmaseuttinen koostumus voi myös sisältää (tai sen kanssa voidaan antaa) yhtä tai useampaa tunnettua lääkettä, joka on valittu muista kliinisesti käyttökelpoisista antibakteriaalisista aineista (esimerkiksi muut beeta-laktaamit tai aminoglykosidit), beeta-20 laktamaasin ehkäisyaineista ("esimerkiksi klavulaanihappo) , munuaisjohtimen salpausaineista (esim. probenisidi) ja meta-bolisoivien entsyymien ehkäisyaineista (esimerkiksi pepti-daasien ehkäisyaineet, kuten Z-2-asyyliamino-3-substituoi-dut propenoaatit).

25 Edellä kuvattu farmaseuttinen koostumus soveltuu annettavaksi suonensisäisenä, ihonalaisena tai lihaksensisäisenä ruiskeena; se on esimerkiksi steriili injektoitava lääke, joka sisältää 1 - 10 % paino/paino kefalosporiinin johdannaista, tai se soveltuu suun kautta annettavaksi yk-30 sikköannosmuodossa, esimerkiksi tablettina tai kapselina, joka sisältää 100 mg - 1 g kefalosporiinin johdannaista.

Tällaista farmaseuttista koostumusta annetaan tavallisesti ihmiselle bakteerien aiheuttamia infektioita vastaan samalla tavalla kuin kefalotiiniä, kefoksitiiniä, 35 kefradiiniä ja muita tunnettuja kliinisesti käytettyjä kefalosporiinin johdannaisia, jolloin kulloinkin kysymykseen tulevat määräannokset valitaan uuden kaavan I mukaisen ke-

II

25 80043 falosporiinin johdannaisen potenssin mukaan suhteessa tunnettuihin kliinisesti käytettyihin kefalosporiineihin. Tällöin jokainen potilas saa päivittäisenä, suonensisäisenä, ihonalaisena tai lihaksensisäisenä annoksena 0,5 - 50 g, 5 edullisesti 0,5 - 10 g, kefalosporiinin johdannaista 1-4 kertaa päivässä. Suonensisäisesti, ihonalaisesti tai lihaksensisäisesti annettu annos annetaan lääkepulloinjektion avulla, vaihtoehtoisesti voidaan suonensisäinen annos antaa jatkuvana infuusiona. Vaihtoehtoisesti voi potilas saada 10 päivittäisen oraalisen annoksen, joka suunnilleen vastaa parenteraalista annosta. Niinpä edullinen päivittäinen oraalinen annos on 0,5 - 10 g kefalosporiinin johdannaista, jolloin koostumusta annetaan 1-4 kertaa päivässä.

Keksintöä valaistaan seuraavien esimerkkien avulla, 15 keksintöä kuitenkaan rajoittamatta niihin. NMR-spektrit on ilmoitettu £>:ssa suhteessa sisäisenä standardina käytetyyn tetrametyylisilaaniin (B = O), (s = yksinkertainen viiva? d = kaksoisviiva? t = kolmoisviiva? m = moninkertaistunut viiva; br = leveä viiva). NMR-arvot on mitattu kentän voi-20 makkuuden ollessa 90 tai 400 MHz. NMR-liuottimet olivat seu-raavat:

liuotin A: dgDMS0 + CD^COOD

liuotin B: dgDMSO + CD-jCOOD + CF-jCOOD

liuotin C: CDCl^ + CD^COOD

25 liuotin D: dgDMS0 + D2O

liuotin E: dgDMSO + TFA

liuotin F: dgDMSO + CF^COOD

Lämpötilat on ilmoitettu Celsius-asteina. Esimerkeissä käytetään seuraavia lyhennyksiä: 30 TFA = trifluorietikkahappo THF = tetrahydrofuraani - HOAc = etikkahappo

EtOAc = etyyliasetaatti

MeOH = metanoli 35 DMF = dimetyyliformamidi DMSO = dimetyylisulfoksidi

Eetteri = dietyylieetteri HPLC = korkeapainenestekromatografia 26 8 0 0 4 3

Esimerkeissä keksinnön mukainen kefalosporiinin johdannainen erotetaan suolan muodossa joko sisäisenä suolana (amfoteerinen ioni) tai suolan hapon, kuten HBr:n tai CF^COOHjn kanssa. Kulloinenkin erotettava suola on riippu-5 vainen useista tekijöistä, joita ovat tuotteen emäksisyys, jatkokäsittely reaktion jälkeen ja käytetyt puhdistusolo-suhteet, sekä lähtöaineen luonne (suola tai vapaa emäs).

Esimerkki 1

Liuokseen, joka sisälsi 3-aminometyyli-7-(imidat-10 sol-2-yyli)aminokef-3-eemi-4-karboksyylihappoa sen TFA/to-lueeni-p-sulfonaattisuolana (1,046 g) DMF:ssa (15 ml), lisättiin samalla sekoittaen 0°C:ssa trietyyliamiinia (560 ml) ja sen jälkeen (etoksime tyleeni)ammoniumkloridia (330 mg). Sen jälkeen, kun seosta oli pidettu 0°C:ssa tunnin ajan, 15 siihen lisättiin muutamia tippoja TFA:a ja seos haihdutettiin kuiviin. Jäännökseen lisättiin MeOH:a ja saatu sakka pestiin MeOH:lla, sen jälkeen eetetrillä ja kuivattiin typ-piatmosfäärin alaisena. Kiinteä aine puhdistettiin HPLCrllä käyttäen eluenttina seosta, jossa oli MeOH/ammoniumkarbo-20 naatin vesiliuosta 20:80 til./til. (nopeus 2,5 ml/minuutti). Relevantit fraktiot yhdistettiin ja haihdutettiin ja jäännös pestiin MeOHrlla ja eetterillä typpiatmosfäärin alaisena. Tällöin saatiin 3-amidinometyyli-7-(imidatsoli-2-yyli)-aminokef-3-eemi-4-karboksyylihappo-trifluoriasetaatti/tolu-25 eeni-p-sulfonaattia (6 %), jolla oli seuraavat NMR-arvot liuottimessa A: 3,45 (m, 2H), 4,5 (m, 2H), 5,05 (br, s, 1H), 5,55 (br, s, 1H), 6,9 (s, 2H) ja 8,0 (m, 1H) .

Lähtöaine voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: Sekoitettuun suspensioon, joka sisälsi 3-asetoksi-30 metyyli-7-aminokef-3-eemi-4-karboksyylihappoa (45,3 g) fos-faattipuskuriliuoksessa (pH 6,4; 700 ml), lisättiin natrium-atsidia (10,8 g) ja sen jälkeen pieninä annoksina natriumbikarbonaattia (14 g). Sekoitettu seos upotettiin sen jälkeen astiassaan 60°C:iseen kylpyyn 6 tunniksi, jolloin pH 35 pysytettiin arvossa 6,4 lisäämällä 2-n HCl:n vesiliuosta tai 5-%:ista (paino/tilavuus) natriumbikarbonaatin vesi-liuosta. Jäähdytyksen jälkeen seoksen pH säädettiin välille 3 - 3,5 2-n HCl:n vesiliuoksella. Muodostunut sakka erotet-

II

27 80043 tiin, pestiin vedellä ja asetonilla ja sen jälkeen kuivattiin P20,.:n avulla, jolloin saatiin 7-amino-3-atsodometyyli-kef-eemi-4-karboksyylihappoa (40 %).

Suspensioon, joka sisälsi 7-amino-3-atsidometyy-5 likef-3-emi-4-karboksyylihappoa (17 g) asetonitriilin ja MeOH:n seoksessa (150 ml, 150 ml), lisättiin difenyy-lidiatsometaania (15,5 g) asetonitriilissä (50 ml). Seosta hämmennettiin 2 tuntia 40°:ssa, sen jälkeen 18 tuntia ympäristön lämpötilassa. Seos suodatettiin, suodos haih-10 dutettiin kuiviin ja jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä hienojakoista piihappoa ja eluenttina metyleenikloridi/eetteri-seosta 90:10 (til./til.). Tällöin saatiin difenyylimetyyli-7-amino-3-atsidometyylikef-3-emi-4-karboksylaattia (78 %), jolla oli seuraavat NMR-ar-15 vot CDC13:ssa : 1,75 (s, 2H); 3,5 (s, 2H); 3,95 (d, 1H); 4.3 (d, 1H); 4,8 (d, 1H); 5,0 (d, 1H); 7,0 (s, 1H); 7,4 (S, 10H).

Seosta, jossa oli difenyylimetyyli-7-amino-3-atsi-do-metyylikef-3-emi-4-karboksylaattia (1,2 g), 2-fluori-20 imidatsoli-hydrokloridia (367 mg) ja asetonitriiliä (4 ml), hämmennettiin 85°:ssa. Sen jälkeen kun täydellinen liukeneminen oli aikaansaatu, lisättiin DMF (1 ml). Kahden tunnin kuluttua liuotin haihdutettiin pois ja jäännös '·; puhdistettiin yön yli tapahtuneen kuivatuksen jälkeen ·.: 25 kromatograf iän avulla käyttäen hienojakoista piihappoa (suhde 40:1 paino/paino) 0°:ssa ja eluenttina metyleeni-kloridi/iMeOH/HOAc-seoksia 0-00 : 0 : 0 — 92 : 4 : 4, til. /til. /til.) . Saatu öljy liuotettiin mahdollisimman pieneen määrään metyleenikloridia ja saostettiin eetterillä. Kuivauksen 30 jälkeen saatiin difenyylimetyyli-3-atsidometyyli-7-(imi- datsol-2-yyli)aminokef-3-emi-4-karboksylaattihydrokloridia (38 %) valkoisena jauheena, jolla oli seuraavat NMR-ar-vot liuottimessa A: 3,65 (d, 1H); 3,8 (d, 1H); 3,95 (d, 1H); 4.3 (d, 1H); 5,3 (d, 1H); 5,85 (d, 1H); 6,9 (s, 2H); 35 7,0 (s, 1H); 7,5 -7,7 (m, 10H).

o o n / 7

2 8 w u v> *t J

Seosta, jossa oli difenyylimetyyli-3-atsidometyy-li-7-(imidatsol-2-yyli)aminokef-3-emi-4-karboksylaattia (260 mg), anisolia (1 ml) ja TFA (1 ml), hämmennettiin ympäristön lämpötilassa 30 minuuttia ja sen jälkeen haih-5 dutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin mahdollisimman pieneen määrään metyleenikloridi/MeOH-seosta ja saostettiin eetterillä, jolloin saatiin kuivauksen jälkeen 3-atsido-metyyli-7-(imidatsol-2-yyli)aminokef-3-emi-4-karboksyyli-happotrifluoriasetaattia (76 %), jolla oli seuraavat 10 NMR-arvot liuottimessa A: 3,55 (d, 1H) ; 3,75 (d, 1H) ; 4.0 (d, 1H); 4,5 (d, 1H); 5,25 (d, 1H); 5,75 (d, 1H); 7.0 (s, 2H). n.m.r.-tulokset osoittavat, että läsnä on 20 % delta-2-isomeeriä.

Hämmennettyä liuosta, jossa oli 3-atsidometyyli-15 7-(imidatsol-2-yyli)aminokef-3-emi-4-karboksyylihappo- trifluoriasetaattia (160 mg) EtOH/TFA-seoksessa (10 ml, 1 ml), hydrattiin käyttämällä 10 %:tista (paino/paino) palladium-hiilellärkatalysaattoria ympäristön lämpöti-tilassa ja paineessa. Kahden tunnin kuluttua seos suoda-20 tettiin piimaalevyn läpi ja levy pestiin metyleeniklo- ridi/MeOH/HOAc-seoksella (90:5:5 til./til./til., 250 ml).

Yhdistetyt suodokset haihdutettiin kuiviin ja jäännös liuotettiin mahdollisimman pieneen määrään metyleeniklo-ridi/MeOH-seosta ja saostettiin uudelleen eetterillä.

25 Sakka suodatettiin ja kuivattiin typpiatmosfäärin alaisena, jolloin saatiin 3-aminometyyli-7-(imidatsol-2-yy-li)aminokef-3-emi-4-karboksyylihappoditrifluoriasetaattia hydroskooppisena kiinteänä aineena (54 %), jolla oli seuraavat NMR-arvot liuottimessa A: 3,2 - 3,8 (m, 4H); 30 5,5 (d, 1H); 5,55 (d, 1H); 6,9 (s, 2H). NMR-tulokset osoittivat, että läsnä oli 30 % delta-2-isomeeriä.

Esimerkit 2-4

Esimerkissä 1 esitetty yleinen menetelmä toistettiin käyttämällä sopivia lähtöaineita (etoksimetyleeni)am-35 moniumkloridin sijasta, ja tällöin saatiin seuraavia yhdisteitä:

II

29 80 043

H

—— N H H

| NH -11-Γ5 x

^ N - N CH2"R

COOH

Esimerkki R

N —

2 -NH

X N—

H

CH-,

H

+ e 4 -NH—N-CH2OCH3 . Br 30 80043

Esimerkki 2

Menetelmä suoritettiin DMF:ssä, ensiksi 0°:ssa, sen jälkeen ympäristön lämpötilassa 3 tuntia käyttäen 2-kloori-imidatsoliinia lähtöaineena. Tuote puhdistettiin 5 HPLC:n avulla käyttämällä eluenttina seoksia, joissa oli

MeOH/ammoniumkarbonaatin vesiliuosta (l5:85 - 25:75 til./til.). Tuotteen saanto TFA/tolueeni-p-sulfonaattisuolana 7 %.

NMR liuottimessa A: 3,5 (m, 2H); 3,7 (m, 4H); 3,95 (s, 2H); 5,1 (d, 1H); 5,6 (d, 1H); 6,9 (s, 2H).

10 Esimerkki 3

Menetelmä suoritettiin MeOH:ssa, joka sisälsi yhden ekvivalentin trietyyliamiinia, 0°:ssa tunnin ajan käyttämällä l-metoksi-3-metyylibentsimidatsoliumjodidia lähtöaineena. Reaktioseoksen jatkokäsittely suoritettiin li-15 säämällä TFA, haihduttamalla ja puhdistamalla jäännös HPLC:n avulla käyttäen eluenttina seosta, jossa oli MeOH/ ammoniumkarbonaatin vesiliuosta ζϊΟ: 70 til./til.). Tuotteen saanto oli 8 %. NMR liuottimessa A: 3,53 (s, 2H); 3,6 (s, 3H); 3,81 (d, 1H); 4,5 (d, 1H); 5,06 (d, 1H); 5,5 20 (d, 1H); 6,7 (s, 2H); 7,1 - 7,6 (m, 4H).

Esimerkki 4

Menetelmä suoritettiin DMF:ssa ympäristön lämpötilassa 4 tunnin ajan käyttämällä lähtöaineena 4-kloori-l-metoksimetyyli-pyrimidiniumbromidia. Tuote puhdistettiin 25 kahdesti HPLC:n avulla käyttämällä eluenttina MeOH/HOAc- seoksia (lO: 90 - 20:80 til./til.). Tuotteen saanto mety-leenikloridi/MeOH-seoksesta eetterillä suoritetun saostuksen jälkeen oli 4 %. NflR liuottimessa A: 3,25 (s, 3H); 3,7 (m, 2H); 4,0 (s, 2H); 5,15 (s, 2H); 5,15 30 (d, 1H); 5,65 (d, 1H); 6,3 (d, 2H); 7,85 (d, 2H); 7,1 (s, 2H).

Esimerkit 5-11

Esimerkissä 1 esitetty yleinen menetelmä toistettiin käyttämällä 2-aminometyyli-7-/'2-(2-aminotiatsol-35 4-yyli)-2-((Z)-metoksi-imino) asetamido.7kef-3-emi-4-kar- boksyylihappotrifluoriasetaattia 3-aminometyyli-7-(imi- I! 3i 8 G G 4 3 diatsol-2-yyli)aminokef-3-eemi-4-karboksyylin sijasta ja sopivia lähtöaineita (etoksimetyleeni)ammoniumkloridin sijasta, ja tällöin saatiin seuraavat yhdisteet:

/S~~H n H H

h2n^ I n i

N JL N ^-CH2“R

OCH3 CT Y

COOH

Esimerkki R

NH

5 -N=C^ ch3 ^n(ch3)2

6 -N=C

"'"'Ή NH„ /· 2 7 -N=C^ NH-© 8 -N=C ^ /r^ ® e 9 -NH—T_ n_CH3 ·1 CH-.

e1

/N

10 -NH —0 ) 1 -NH —. Br^’ 32 80 04 3

Esimerkki 5

Menetelmä suoritettiin vedessä pH-arvossa 7 yhden tunnin ajan ympäristön lämpötilassa käyttämällä (1-etok-sietylideeni)ammoniumkloridia lähtöaineena. Tuote puh-5 distettiin HPLC:n avulla käyttämällä eluenttina MeOH/vesi/ HOAc-seosta (Ϊ0 : 90 :1 til./til./til.). Tuotteen saanto TFA-suolana 5 %. NMR liuottimessa E: 2,2 (s, 3H); 3,5 (d, 1H); 3,7 (d, 1H); 4,0 (s, 3H); 4,0 - 4,4 (m, 2H); 5.2 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 7,1 (s, 1H).

10 Esimerkki 6

Menetelmä suoritettiin DMFrssa ympäristön lämpötilassa 1,5 tunnin ajan käyttämällä N,N-dimetyyli-N-(dime-toksimetyyli)amiinia lähtöaineena. Tuote puhdistettiin HPLC:n avulla käyttäen eluenttina MeOH/vesi/HOAc-seosta 15 (10:90:1 til./t il. /til.). Tuotteen saanto TFA-suolana 6 %. NMR liuottimessa A: 2,95 (s, 3H); 3,15 (s, 3H); 3.2 - 3,6 (m, 2H); 3,8 (s, 3H); 4,0 (d, 1H); 4,3 (d, 1H); 5,0 (d, 1H); 5,6 (d, 1H); 6,7 (s, 1H); 8,3 (s, 1H).

Esimerkki 7 20 Menetelmä suoritettiin DMF:ssä yhden trietyyliamii- niekvivalentin läsnäollessa ympäristön lämpötilassa 2,5 tunnin ajan käyttäen etyylibentsimidaattia lähtöaineena. Reak-tioseoksen jatkokäsittely suoritettiin lisäämällä TFA, haihduttamalla ja puhdistamalla jäännös HPLC:n avulla käyttäen 25 eluenttina MeOH/vesi/HOAc-seosta (2 5 : 75 :1 til./til./til.). Tuotteen saanto TFA-suolana 17 %. NMR liuottimessa A: 3.2 (d, 1H); 3,6 (d, 1H); 3,8 (d, 1H); 3,8 (s, 3H); 3,9 (d, 1H); 4,8 (d, 1H); 5,1 (d, 1H); 5,7 (d, 1H); 6,8 (d, 1H); 7,4 - 7,9 (m, 5H).

30 Esimerkki 8

Menetelmä suoritettiin DMF:ssä yhden trietyyliamii-niekvivalentin läsnäollessa ympäristön lämpötilassa 1,5 tunnin ajan käyttäen etyyli-N-fenyyliformidaattia lähtöaineena. Tuote puhdistettiin HPLC:n avulla käyttäen eluenttina MeOH/ 35 vesi/HOAc-seosta (20 :80 :1 til./til./til.). Tuotteen saanto TFA-suolana 13 %. NMR liuottimessa A: 3,2 (d, 1H); 3,6 (d, 1H); 3,8 (s, 3H); 3,8 (d, 1H); 4,7 (d, 1H); 5,1 (d, 1H); 5,7 (d, 1H); 6,7 (s, 1H); 7,2 - 7,5 (m, 5H); 8,6 (s, 1H).

Il ο ο π Γ\ r' * -*

U U U *+ O

Esimerkki 9

Menetelmä suoritettiin vesipitoisessa DMF:ssä ympäristön lämpötilassa, samalla kun läsnä oli 3 ekvivalenttia natriumbikarbonaattia, 3 tunnin ajan käyttäen 4-kloori-l-5 metyylipyridiniumjodidia lähtöaineena. Tuote puhdistettiin HPLC:n avulla käyttäen eluenttina vesi/HOAc/MeOH-seoksia (84:1:15 - 79:1:20 til./til./til.). Tuotteen saanto mahdollisimman pienestä metyleenikloridi/MeOH-liuoksesta eetterillä suoritetun saostuksen jälkeen 20 %. NMR liuotti-10 messa A: 3,4 (d, 1H); 3,7 (d, 1H); 3,9 (s, 3H); 4,0 (s, 3H); 4,4 (br s, 2H); 5,2 (d, 1H); 5,85 (d, 1H); 7,05 (s, 1H); 6,9 - 7,2 (br, 2H); 8,0 - 8,5 (br, 2H).

Esimerkki 10

Menetelmä suoritettiin esimerkissä 9 kuvatulla 15 tavalla, mutta käyttämällä 2-kloori-l-metyylipyridiniumjo-didia lähtöaineena. HPLC eluenttina vesi/HOAc/MeOH-seos (89:1:10 til./til./til.). Saanto 10 %. NMR liuottimessa F: 3,6 (s, 2H) ; 3,9 (s, 3H) ; 4,0 (s, 3H) ; 4,4 (d, 1H) ; 4,7 (d, 1H) ; 5,2 (d, 1H) ; 5,8 (d, 1H) ; 7,0 (s, 1H) ; 20 7,05 (t, 1H); 7,3 (d, 1H); 8,1 (t, 1H); 8,3 (d, 1H).

Esimerkki 11

Menetelmä suoritettiin esimerkissä 9 kuvatulla tavalla, mutta käyttämällä l-bentsyyli-4-klooripyridinum-kloridia lähtöaineena. Lisäksi reaktion jäännöstä käsi-25 teltiin MeOH/TFA-seoksella, jonka jälkeen haihdutettiin ennen HPLC-käsittelyä. HPLC eluenttina vesi/HOAc/MeOH (69:1:30 - 64:1:35 til./til./til.). Saanto 20 %. NMR liuottimessa F: 3,4 (d, 1H); 3,7 (d, 1H); 4,0 (s, 3H); 4,4 (br s 2H); 5,2 (d, 1H); 5,85 (d, 1H); 5,4 (s, 2H); 7,0 30 (s, 1H); 7,5 (s, 5H); 7,1, 8,3, 8,5 (d,d,d, 4H).

Lähtöaineena käytettyä 3-aminometyyli-7-/’2-(2-amino-tiatsol-4-yyli) -2- ( ( Z) -metoksi-imino) asetamido./kef-3-emi-4-karboksyylihappotrifluoriasetaattia voitiin valmistaa seu-raavalla tavalla: 35 Liuokseen, jossa on kefotaksiimia (5,24 g) fosfaat- tipuskuriliuoksessa (pH 6,4, 440 ml), lisättiin natrium-atsidia (2,86 g) ja natriumjodidia (1,65 g) ja seos upotettiin astiassaan 70°:iseen kylpyyn ja hämmennettiin 4,5 34 80U43 tunnin ajan. Liuotin haihdutettiin saostuspisteeseen asti ja sen jälkeen pH säädettiin arvoon 2,5 2-n HCl:n vesi- liuoksella. Saatu sakka koottiin, pestiin vedellä, asetonilla ja eetterillä ja kuivattiin P20^:n avulla, jolloin 5 saatiin 3-atsidometyyli-7-/2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-( ( Z) -metoksi-imino) asetamido.7kef-3-eini-4-karboksyylihap-poa kvantitatiivinen saanto, jolla aineella oli seuraa-va nMR liuottiraessa A: 3,4 (d, 1H); 3,7 (d, 1H); 3,86 (s, 3H); 3,95 (d, 1H); 4,4 (d, 1H); 5,15 (d, 1H); 5,78 10 (d, 1H); 6,75 (s, 1H).

Hämmennettyyn suspensioon, jossa oli Raney-nik- keliä (16 g) MeOH:ssa (13 ml) ja jonka lämpötila oli 0°, lisättiin liuos, joka sisälsi 3-atsidometyyli-7/2-(2-ami-notriatsol-4-yyli)-2-((Z)-metoksi-imino)asetamidq7kef-3-15 emi-4-karboksyylihappoa (2,96 g) MeOH/TFA-seoksessa (14 ml, 1,13 ml). Sen jälkeen kun kuohuminen oli lakannut, laimennettiin seosta MeOHslla ja suodatettiin paperin läpi. Suodos haihdutettiin, jäännös puhdistettiin HPLC:n avulla käyttäen eluenttina vesi/HOAc/MeOH-seosta (79:1:20 20 til./til./til.) ja tuote kuivattiin P20^:n avulla, jolloin saatiin 3-aminometyyli-7-/'2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2-((Z)-metoksi-imino)asetamido/kef-3-emi-4-karboksyylihap-potrifluoriasetaattia (saanto 45 %), jolla oli seuraava NMR liuottimessa A: 3,5 - 4,2 (m, 4H) ; 3,9 (s, 3H) ; 25 5,15 (d, 1H) ; 5,85 (d, 1H) ; 6,75 (s, 1H) .

Esimerkki 12 Hämmennettyyn suspensioon, joka sisälsi 7-/2-(2-trietyyliaminotiatsol-4-yyli)-2-((Z)-1-t-butoksikarbo-nyyli-l-metyylietoksi-imino)asetamido7-3-(1-bentsyyli-30 4-pyridinio)aminometyylikef-3-emi-4-karboksyylihappo-bromidia (3,09 g) anisolissa (25 ml), lisättiin, reaktion ollessa upotettuna jääkylpyyn, TFA (30 ml). Hämmentämistä jatkettiin ympäristön lämpötilassa 1,5 tuntia ja liuotin haihdutettiin pois. Jäännös saostettiin mini-35 maalisesta määrästä metyleenikloridi/MeOH-liuosta eetterillä ja sakka koottiin typpiatmosfäärin alaisena ja kuivattiin. Sen jälkeen sille suoritettiin puhdistus HPLC:n avulla käyttäen oktadesyylisilaanipylvästä seuraavalla tavalla .

I! 35 0ϋυ4ό 1. Eluenttina MeOH/ammoniumkarbonaatin vesiliuos-puskuri pH 6 (70:70 til./til.).

2. Eluentti sama kuin edellä kohdassa 1, nopeus 4.5 ml/minuutti.

5 3. Eluentti MeOH/ammoniumkarbonaatin vesiliuos- puskuri pH-arvossa 7,2 (65:35 til./tilNopeus 4,5 ml/minuutti .

Tällöin saatiin 7-/2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-((Z)-1-karboksi-l-metyylietoksi-imino)asetamido/-3-(Ι-ΙΟ bentsyyli-4-pyridinio)aminometyylikef-3-emi-4-karboksyy-lihappobromidia (saanto 1%), jolla oli seuraava NMR . liuottimessa A: 1,4 (s, 6H); 3,45 (d, 2H); 4,3 (d, 2H); 5.05 (d, 1H); 5,7 (d, 1H); 5,4 (s, 2H); 6,75 (s, 1H); 7,4 (s, 5HI; 6,8 - 7,0 (m, 2H); 8,2 - 8,4 (m, 2H).

15 Lähtöainetta voidaan saada seuraavalla tavalla: Hämmennettyyn liuokseen, joka sisälsi 7-amino-3-atsidometyylikef-3-emi-4-karboksyylihappoa (48 g) ja NaHC02 (15,8 g) dioksaanissa (180 ml) ja vedessä (180 ml), lisättiin bis(0-t-butyylihiilihappo)anhydridiä (31 ml) 20 dioksaanissa (90 ml), ja hämmentämistä jatkettiin 90 tuntia. Liuotin haihdutettiin pois, vettä ja EtOAc lisättiin ja pH säädettiin arvoon 2. Seos suodatettiin ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 3-atsidometyyli-7-t-bu-toksikarbonyyliamino-kef-3-emi-4-karboksyylihappoa.

25 NMR liuottimessa A: 1,4 (s, 9H); 3,55 (d, 2H); 3,9 (d, 1H); 4,45 (d, 1H); 5,0 (d, 1H); 5,45 (d, 1H).

Liuos, joka sisälsi tätä 3-atsidometyyli-johdannaista (12 g) EtOAc:ssa (400 ml) ja TFA:ssa (5,2 ml), hydrattiin 10 %:tista (paino/paino) palladium-hiilellä-30 katalysaattoria (9 g) käyttäen 30 tuntia ympäristön lämpötilassa ja paineessa. Suspensio suodatettiin piimään läpi ja suodos haihdutettiin. Tuote saostettiin CH2C12/ MeOH-liuoksesta eetterillä, jolloin saatiin 3-amino-me-tyyli-7-t-butoksikarbonyyliaminokef-3-emi-4-karboksyyli-35 happoa; NMR d,DMSO:ssa 1,4 (s, 9H); 3,4 - 3,8 (m, 4H);

O

4,95 (d, 1H); 5,45 (d, 1H).

36 80U43 Hämmennettyyn liuokseen, joka sisälsi 3-aminometyy-li-7-t-butoksikarbonyyliaminokef-3-emi-4-karboksyylihappoa (2,785 g) vesi/DMF-seoksessa (40 ml, 140 ml), lisättiin 0°:ssa natriumbikarbonaattia (1,26 g) ja sen jälkeen 5 liuos, joka sisälsi l-bentsyyli-4-klooripyridiniumbromi-dia (1,423 g) minimaalisessa määrässä DMF. Hämmentämistä jatkettiin 18 tuntia ympäristön lämpötilassa ja sen jälkeen liuotin haihdutettiin pois. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla 0°:ssa käyttäen piihappoa ja eluent-10 tina metyleenikloridi/MeOH/HCOOH-seoksia 100:0:0 - (88:6:6 til./til./til.), jolloin saatiin 7-t-butoksikarbo-nyyliamino-3-(l-bentsyyli-4-pyridinio)aminometyylikef-3-emi-4-karboksyylihappobromidia (saanto 70 %), jolla oli seuraava NMR dgDMSO + CD^COOD-seoksessa: 1,4 (s, 9H); 15 3,5 (s, 2H); 4,2 - 4,4 (m, 2H); 4,95 (d, 1H); 5,4 (d, 1H); 5,4 (s, 2H); 7,45 (s, 5H); 7,0 - 7,3 (m, 2H); 8,2 - 8,5 (m, 2H).

Hämmennettyyn liuokseen, joka sisälsi 7-amino-3-(1-bentsyylipyridinio)aminometyylikef-3-emi-4-karboksyy-20 lihappobromidia (1,84 g) metyleenikloridissa (2,5 ml), lisättiin TFA (2,5 ml) ja liuosta hämmennettiin ympäristön lämpötilassa 1 tunti. Liuotin haihdutettiin pois ja jäännös saostettiin metyleenikloridi/MeOH-liuoksesta eetterillä, jolloin saatiin typpiatmosfäärin alaisena suori-25 tetun sakan kokoamisen ja kuivauksen jälkeen kvantitatiivinen saanto 7-amino-3-(l-bentsyyli-4-pyridinio)aminome-tyylikef-3-emi-4-karboksyylihappobromidia, jolla oli seuraava NMR liuottimessa A: 3,6 (s, 2H); 4,4 (brs, 2H); 5,1 (s, 2H); 5,4 (s, 2H); 7,1 (d, 2H); 7,45 (s, 5H); 30 8,2-8,6 (m, 2H).

Hämmennettyyn liuokseen, joka sisälsi 7-amino-3-(l-bentsyyli-4-pyridinio)aminometyylikef-3-emi-4-karbok-syylihappobromidia (296 mg) metyleenikloridissa (1,5 ml), lisättiin N,0-bis(trimetyylisilyyli)asetamidia (310 ml).

35 Hämmentämistä jatkettiin 1 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, jolloin saatiin trimetyylisilyyli-7-trimetyyli-silyyliamino-3-(1-bentsyyli-4-pyridinio)aminometyylikef- 3-emi-4-karboksylaattibromidia, jota käytettiin sellaisenaan .

Il 37 /-V ·

ÖUU<tO

Hämmennettyyn liuokseen, joka sisälsi 2-((Z)-1-t-butoksikarbonyyli-l-metyylietoksi-imino)-2-(2-tri-tyyliaminotiatsol-4-yyli)etikkahappoa (GB-patentti 1 603 989, 285 mg) metyleenikloridissa (1,5 ml), lisät-5 tiin N-metyylimorfoliinia (55 ml). Hämmennettyyn reaktio- seokseen, joka oli jäähdytetty -45°:seen, lisättiin (kloo-rimetyleeni)dimetyyliammoniumkloridia (71 mg). Siihen lisättiin sen jälkeen, edelleen -45°:ssa ruiskun avulla liuos, joka sisälsi trimetyylisilyyli-7-trimetyylisilyyliamino-3-10 (l-bentsyyli-4-pyridinio)aminometyylikef-3-emi-4-karboksy-laattibromidia (403 mg) metyleenikloridissa. Hämmennetyn reaktioseoksen annettiin sen jälkeen lämmetä ympäristön lämpötilaan ja liuotin haihdutettiin pois, jolloin saatiin 7-/2-(2-trityyliaminotriatsol-4-yyli)-2-((Z)-1-t-butoksi-15 karbonyyli-l-metyylietoksi-imino)asetamido.7-3-(1-bentsyyli- 4-pyridinio)aminometyylikef-3-emi-4-karboksyylihappobromi-dia, jota käytettiin ilman enempää puhdistusta.

Esimerkki 13

Esimerkissä 12 esitetty menetelmä toistettiin käyt-20 täen lähtöaineena 7-/2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-2- ((Z)-1-t-butoksikarbonyyli-l-metyylietoksi-imino)asetamidaj- 3-(3-dimetyyliamidino)metyylikef-3-emi-4-karboksyylihappoa. Tuote puhdistettiin HPLC:n avulla käyttäen oktadekyylisilaa-nipylvästä ja MeOH/vesi/HOAc-seosta (20 : 79 :1 til./til./til.), 25 nopeus 4,5 ml/minuutti, ja tällöin saatiin 7-/2-(2-amino- tiatsol-4-yyli)-2-((Z)-1-karboksi-l-metyylietoksi-imino)asetamido.7-3- (3-dimetyyliamido) metyylikef-3-emi-4-karboksyyli-happotrifluoriasetaattia (saanto 10 %), jolla oli seuraava NMR liuottimessa A: 1,4 (s, 6H); 3,05 (d, 6H); 3,4 (s, 30 2H); 4,0 (d, 1H); 4,3 (d, 1H); 5,0 (d, 1H); 5,7 (d, 1H); 6,7 (s, 1H); 8,3 (s, 1H).

Lähtöainetta voitiin saada toistamalla esimerkin 12 neljäs, viides, kuudes ja seitsemäs osa käyttäen N,N-di-metyyli-N-(dimetoksimetyyli)amiinia lähtöaineena 1-bentsyy-35 li-4-klooripyridiniumbromidin sijasta. Tällöin saatiin sarja välituotteita, jotka vastasivat niitä, jotka saatiin esimerkin 12 toisessa, kolmannessa, neljännessä ja viidennessä osassa, (3-dimetyyliamidino)metyyliradikaalin korva- 38 80043 tessa 3-(l-bentsyyli-4-pyridinio)aminometyyliradikaalin. Kaikki nämä välituotteet tunnistettiin NMR:n avulla. Esimerkit 14 - 15

Esimerkissä 1 esitetty yleinen menetelmä toistet-5 tiin käyttämällä sopivia lähtöaineita (etoksimetyleeni)- amooniumkloridin asemesta, ja tällöin saatiin seuraavat yhdisteet:

ίο I nh—1—Y

QJ-N^j-CH2-R

COOH

15 Esimerkki R Saanto %

yQ

14 -N=C 32

^ H

20 n(ch3)2 15 -N=C 10 25

Esimerkki 14

Menetelmä suoritettiin DMF:ssä 0°C:ssa käyttämällä 2,3,4,5,6,7-tetrahydro-1-(metoksiemtyleeni)- 1H-30 atsepinium-metaanisulfonaattia lähtöaineena. Tuote puhdis tettiin HPLC:n avulla käyttämällä eluanttina seosta, jossa oli MeOH/ammoniumkarbonaatin vesiliuosta (20:80 til./ til.). NMR liuottimessa A: 1,4 - 1,8 (m, 8H); 3,3 - 3,7 (m, 4H); 3,55 (s, 2H); 4,1 (d, 1H); 4,3 (d, 1H), 5,0 (d, 35 1H); 5,5 (d, 1H); 6,75 (s, 2H) ja 8,3 (s, 1H).

ti 39 80043

Esimerkki 15

Menetelmä suoritettiin DMFissä 0°:ssa käyttämällä N,N-dimetyyli-N-(dimetoksimetyyli)amiinia lähtöaineena. Tuote puhdistettiin HPLCrn avulla käyttämällä eluenttina 5 seosta, jossa oli MeOH/ammoniumkarbonaatin vesiliuosta (10:90 til./tilA NMR liuottimessa A: 3,1 (d, 6H) ; 3.5 (s, 2H); 4,35 (d, 1H); 4,1 (d, 1H); 5,05 (d, 1H); 5.5 (d, 1H) ; 6,8 (s, 2H) ; 8,1 (s, 1H) ;

Esimerkit 16-22 10 Esimerkeissä 5-11 esitetty yleinen menetelmä tois tettiin käyttämällä samaa 3-aminometyylikefalosporiinin johdannaista ja, ellei toisin ole mainittu, sopivaa kloo-riheterosykliä lähtöaineina, jolloin reaktiot suoritettiin DMF/vesi-seoksessa (2:1 til./til.) samalla kun läsnä oli 15 3 ekvivalenttia NaHCO^, lämpötilassa, joka oli ympäris tön lämpötilan ja 40°:n välillä, ja 1-4 tunnin ajan. Tuotteet puhdistettiin HPLC:n avulla käyttäen oktadesyylisilaa-nipylvästä, ja näin valmistettiin seuraavat yhdisteet: 20

/S 1 H H

25 T

N S Nn^X-CH2NH-R

'Ndch., 1

J COOH

40 80043

Esimerkki R Saanto % Alaviitteet /T^N® 16 N-CH3 31 1, 2, 3 Θ 17 -CH=NH-CH2COOH 10 4 /—r\© 18 —N-CH2COOC2H5 30 1, 5, 6 CH., 19 -\ \ 20 1, 7, 8, © H 9

CH2COOH

20 ^N-CH2COOH 18 1, 10, 11 Θ 21 -CH=NH-CN 17 12, 5, 13 @ ^NH2 22 -C 1 14,5,15 \ch2cooh

II

4i 80043

Alaviitteet 1. Lähtöaineena oli vastaava klooriheterosykli.

2. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc(25:74:1 til. /til. /til.).

5 3. NMR liuottimessa A: 2-3 (m, 6H); 3,5 (m, 2H); 3,8 (s, 3H); 3,9 (s, 3H); 4,4 (m, 2H); 5,15 (d, 1H); 5,8 (d, 1H); 6,9 (s, 1H); 6,9 (d, 1H); 8,1 (d, 1H).

4. Lähtöaineena oli t-butyyli-2-(etoksimetylee-10 niamino)-asetaatti. Reaktio suoritettiin DMFrssä 20 moo- li-%:n kanssa trietyyliamiinia. Tuote puhdistettiin alaviitteessä 2 kuvatulla tavalla ja käsiteltiin TFA:n kanssa 30 minuuttia t-butyyliesterin lohkaisemiseksi. NMR liuottimessa A: 3,6 (m, 2H); 3,85 (s, 3H); 4,05 - 4,45 15 (m, 4H); 5,15 (d, 1H); 5,8 (d, 1H); 6,8 (s, 1H); 8,1 (s, 1H) ; 5. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc (20:79:1 til. /til. /til.).

6. NMR liuottimessa F: 1,24 (t, 3H); 3,4 20 (d, 1H); 3,7 (d, 1H); 4,0 (s, 3H); 4,22 (q, 4H); 4,4 (s, 2H); 5,2 (s, 2H); 5,25 (d, 1H); 5.85 (d, 1H); 7,0 (s, 1H); 7,1 - 8,3 (m, 4H).

7. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla 25 2-kloori-imidatsolia t-butyylibromiasetaatin kanssa CH2Cl2/natriumhydroksidin vesiliuos seoksessa tetra-n-butyyliammoniumvetysulfaatin läsnäollessa, jolloin saatiin 1-t-butoksikarbonyylimetyyli-2-kloori-imidatsolia. Tämän yhdisteen reaktio trimetyylioksoniumtetrafluori-30 boraatin kanssa CH2Cl2:ssa antoi 1-t-butoksikarbonyyli-metyyli-2-kloori-3-metyyli-imidatsolium-tetrafluoribo-raattia; NMR dgDMSOjssa 1,5 (s, 9H) ; 3,9 (s, 3H) ; 5,17 (s, 2H); 7,81 (d, 1H); 7.85 (d, 1H).

35 8. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc (l3 :86 :1 til./til./til.).

42 80043 9. NMR liuottimessa B: 3,68 (s, 3H); 3,96 (s, 3H); 4,24 (m, 2H); 4,86 (s, 2H); 5,2 (d, 1H); 5,8 (d, 1H); 6,94 (s, 1H); 7,3 (s, 2H).

10. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc (l0 :39 :1 5 til./til./til.).

11. NMR liuottimessa F: 3,4 (d, 1H); 3,7 (d, 1H); 4,0 (s, 3H); 4,4 (s, 2H); 5,1 (s, 2H); 5,22 (d, 1H); 5,81 (d, 1H); 7,0 (s, 1H); 7,1 - 8,3 (m, 4H).

12. Reaktio suoritettiin käyttämällä 2 ekvivalent- 10 tia N-etoksimetyleenisyanamidia, 1 ekvivalentti 3-amino- metyylikefalosporiinia ja 1 ekvivalentti trietyyliamii-nia DMF:ssä.

13. NMR liuottimessa A: 3,5 (d, 1H); 3,6 (d, 1H); 3,92 (s, 3H); 4,0 (d, 1H); 4,4 (d, 1H); 5,05 15 (d, 1H); 5,8 (d, 1H); 6,8 (s, 1H); 8,3 {s, 1H).

14. Reaktio suoritettiin käyttämällä 3 ekvivalenttia t-butyylisyanoasetaattia ja 1 ekvivalentti 3-amino-metyylikefalosporiinia sekä katalyyttinen määrä TFA DMF:ssä 7 tunnin ajan 60°:ssa.

20 15. NMR liuottimessa A: 3,6 (d, 1H); 3,8 (d, 1H); 3,9 (s, 3H); 4,0 (m, 2H); 5,1 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 6,8 (s, 1H).

Esimerkit 23-52

Esimerkeissä 5-11 esitetty yleinen menetelmä tois-25 tettiin käyttämällä 3-aminometyyli-7-/2-(2-aminotiatsol- 4-yyli)-2-((Z)-1-karboksi-l-metyylietoksi-imino)-asetami-do.7-kef-3 -emi-4-karboksyylihappoa 3-aminometyylikefalospo-riinin johdannaisena ja sopivia kvaternisoituja heterosyk-lisiä lähtöaineita, jolloin reaktio suoritettiin DMF/vesi-30 seoksessa (5:1 til./til.) samalla kun läsnä oli 2-4 ekvivalenttia NaHCO^/ lämpötilassa, joka oli ympäristön lämpötilan ja 45°:n välillä, 1-4 tuntia. Tuote puhdistettiin käyttämällä oktadesyylisilaani-HPLC-pylvästä ja näin valmistettiin seuraavat yhdisteet:

II

43 80043

S— H H

H2N—4 I CO— NH--f^SXSl

N li CH, J- N·^- CH2NH-R

N I υ T

'""'"o —C— COOH COO" i ch3

Esimerkki R Saanto % Alaviitteet 23 _// n-CH3 8 1, 2, 3 24 —C_ N-CH2SCH3 30 1, 4, 5, 6 ch3 /r\\ Θ 25 —< N-CH3 50 1, 7, 8 CH., jp< 26 —(' N-CH- 58 1, 7, 9 W0 3 27 —^^J-CH2SOCH3 22 10 /Γ^Θ 28 —( N-OCH3 20 1, 2, 11

Esimerkki R Saanto % Alaviitteet 44 80043 ch2ci 29 —(f ri-CH., 8 12, 13, 14 ΧζυΦ 3 conh2 30 —^~jr-CH3 26 15, 13, 16 .conh2 31 ^U-CH, 15 17, 13, 18 32 —1' N-CH, 24 19, 20, 21

O

33 —(^\-OCH 20 22, 23 34 28 7, 24 ch3 35 —(^N-CH2CH2CHOOC4Hg 33 25, 26, 27 36 _// N-CH2CH2NH2 100 28, 29 il

Esimerkki R Saanto % Alaviitteet 45 80043 37 -T N-CH2CH2NH2 100 28, 29

Br 38 —(__N-CH3 30 30, 31, 32 © /—N-CH, 39 \) 15 35, 7, 36 ch2ococh3 40 37 37, 7' 38 41 -(^~~\-CH2CONH2 30 39, 40, 41

F

42 _^N-CH3 38 42, 7, 43 νπ2 43 —ft ^ N-CH., 11 44, 31, 45, 46 NH2\ 44 —V \j-CH., 11 47, 45, 7, 48 46 80043

Esimerkki R Saanto % Alaviitteet ch2sch2ch2nh2 /ρέ 45 —\ N-CH-j 15 49, 50, 22, 3 51 ch9nhcoch^ rt 46 —\ N-CH-. 30 52, 13, 53 ^6 3

CH NH

47 -V XN-CH^ 22 54, 55, 56, \^/(£ 57 48 —V N-CH2CH2OH 50 58, 59, 60 /T^v ® 49 —U N-CH2COCH3 16 61, 59, 62 /T^(£ 50 -v N-CH2COCH3 100 63 51 -<^rCH2CH2N (CH3) 2 33 64, 56, 65 /7^0 52 —( N-CH2CH2NHCOCH3 53 66, 59, 67 11 47 8G 043

Alaviitteet 1. Lähtöaineena oli vastaava klooriheterosykli.

2. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc (20-25:79-74:1 til. /til. /til.).

5 3. NMR liuottimessa F: 1,5 (s, 6H); 3,4 (d, 1H); 3.2 (d, 1H); 3,9 (s, 3H); 4,4 (s, 2H); 5,2 (d, 1H); 5,85 (d, 1H), 7,1 (s, 1H); 6,9 - 8,3 (m, 4H).

4. Klooripyridiniumsuolaa saatiin reagoittamalla 4-trimetyylisilyylioksipyridiiniä kloorimetyylimetyylisulfi- 10 din kanssa (ei liuotinta). Eetterillä suoritetun uuttamisen ja pesun jälkeen tuotetta käsiteltiin kloroformissa ok-salyylikloridilla 60°:ssa 8 tuntia. Saadulla 4-kloori-l-me-tyylitiometyylipyridiniumkloridilla oli seuraava NMR liuottimessa A: 2,2 (s, 3H); 5,85 (s, 2H); 8,4 (d, 2H); 15 9,26 (d, 2H).

5. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc (28 : 71:1 til. /til. /til 6. NMR liuottimessa A: 1,56 (s, 6H); 2,12 (s, 3H); 3,42 (d, 1H); 3,7 (d, 1H); 4,4 (s, 2H); 5,22 20 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 5,34 (s, 2H); 7,04 (s, 1H); 6,9 - 7.2 (m, 2H); 8,2 - 8,6 (m, 2H).

7. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc(25:74:1 til./til./til.).

8. NMR liuottimessa A: 1,5 (s, 6H) ; 2,2 (s, 3H) ; :/·: 25 3,3 (d, 1H) ; 3,5 (d, 1H) ; 3,9 (s, 3H) ; 4,3 (d, 1H) ; 4,5 (d, 1H); 5,1 (d, 1H) ; 5,7 (d, 1H) ; 6,8 (s, 1H) ; 7,4 (d, 1H) ; y; 8,1 - 8,3 (m, 2H) .

9. NMR liuottimessa B: 1,6 (s, 6H); 2,5 (s, 3H); 3,4 (d, 1H); 3,7 (d, 1H); 3,8 (s, 3H); 4,35 (m, 2H); 5,2 30 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 7,1 (s, 1H); 6,8 - 7,1 (m, 2H); 8,1 - 8,3 (m, 1H).

10. Esimerkin 24 tuote hapetettiin metaklooriperbent-soehapolla CH2Cl2:ssa 0°:ssa 3 tuntia. Tuote erotettiin saos-tamalla eetterillä. NMR liuottimessa A: 1,48 (s, 6H); 35 2,56 (s, 3H); 3,32 (d, 1H); 3,62 (d, 1H); 4,24 (d, 1H); 4,52 (d, 1H); 5,08 (d, 1H); 5,76 (d, 1H); 5,24 (d, 1H); 5,56 (d, 1H); 6,78 (s, 1H); 6,9 - 8,3 (m, 4H).

48 80043 11. NMR liuottimessa A: 1,52 (s, 6H); 3,2 - 3,8 (m, 2H); 4,2 (s, 3H); 4,24 (d, 1H); 4,52 (d, 1H); 5.1 (d, 1H); 5,78 (d, 1H); 6,8 (s, 1H).

12. 4-klooripyridiniumsuolaa saatiin reagoittamal-5 la 4-kloori-2-kloorimetyylipyridiiniä kahden ekvivalentin kanssa metyylisulfaattia 6 tuntia. Raaka reaktiotuote pestiin eetterillä ja kuivattiin. NMR liuottimessa B: 3.5 (s, 3H); 4,44 (s, 3H); 5,28 (s, 2H); 8,32 (dd, 1H); 8,54 (d, 1H); 9,16 (d, 1H).

10 13. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc^20:79:1 til. /til. /til 1).

14. NMR liuottimessa B: 1,54 (s, 6H); 3,4 - 3,7 (m, 2H); 3,95 (s, 3H); 4,38 (s, 2H); 5,0 (s, 2H); 5,27 (d, 1H) ; 5,9 (d, 1H); 7,0 (s, 1H) ; 6,8 - 7,4 15 (m, 2H); 8,0 - 8,6 (m, 2H).

15. Lähtöainetta, 3-karbamoyyli-l-metyyli-4-metok-sipyridiniumsulfaattia, saatiin reagoittamalla 3-karbamo-yyli-4-metoksipyridiiniä 50 %:n suuruisin ylimäärin käytetyn dimetyylisulfaatin kanssa MeOH:ssa ympäristön lämpöti- 20 lassa 18 tuntia. Liuotin haihdutettiin pois ja jäännöstä trituroitiin eetterin kanssa. NMR D20:ssa: 3,8 (s, 3H); 4.1 (s, 3H); 7,7 (d, 1H); 8,8 (d, 1H); 9,1 (s, 1H).

16. NMR liuottimessa A: 1,45 (s, 6H); 3,3 (d, 1H); 3.5 (d, 1H) ; 3,9 (s, 3H) ; 4,3 (d, 1H) ; 4,5 (d, 1H) ; · 25 5,1 (d, 1H); 5,7 (d, 1H); 6,8 (s, 1H); 7,6 (d, 1H); 8,2 (d, 1H); 8,75 (s, 1H).

17. Lähtöainetta, 2-karbamoyyli-l-metyyli-4-metok-sipyridiniumsulfaattia, saatiin seuraavalla tavalla. 2-karbamoyyli-4-metoksipyridiini-N-oksidia pelkistettiin 30 Raney-nikkelin avulla MeOH:ssa ympäristön lämpötilassa vedyn läsnäollessa, ja tuote, 2-karbamoyyli-4-metoksi-pyridiini, kiteytettiin uudelleen asetonista. Tämä tuote - . reagoitettiin dimetyylisulfaatin kanssa (ei liuotinta)

60°:ssa 1 tunnin ajan. Kiteinen suola erotettiin jäähdy-35 tetystä reaktioseoksesta ja pestiin eetterillä. NMR

D20:ssa: 3,8 (s, 3H); 4,16 (s, 3H); 4,2 (s, 3H); 7,4 - 7.6 (m, 1H); 7,7 (d, 1H); 8,7 (d, 1H).

49 80043 18. NMR liuottimessa B: 1,55 (s, 6H); 3,4 (d, 1H); 3,6 (d, 1H); 3,9 (s, 3H); 4,3 (d, 1H); 4,5 (d, 1H); 5,2 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 7,1 (s, 1H); 6,9 - 7,3 (m, 2H); 8,1 - 8,4 (m, 2H).

5 19. Lähtöainetta, 2,3-syklopentano-4-kloori-l-me- tyylipyridiniumjodidia, valmistettiin seuraavalla tavalla. Kloori- ja SC^-kaasuvirtoja kuplitettiin 4 tuntia liuoksen läpi, joka sisälsi 2,3-syklopentanopyridiini-N-oksi-dia kloroformissa. Liuotin haihdutettiin pois, vettä li-10 sättiin ja pH säädettiin arvoon 8. Seokselle suoritettiin vesihöyrytystislaus ja orgaaninen tuote tislattiin, jolloin saatiin 2,3-syklopentano-4-klooripyridiiniä. Tätä yhdistettä käsiteltiin ylimäärin käytetyn metyylijodidin kanssa (ei liuotinta) 0°:ssa. Kiteinen tuote pestiin eetterillä lä. NMR D20:ssa: 2,2 - 2,6 (m, 2H); 3,2 - 3,5 (m, 4H); 4.2 (s, 3H); 7,85 (d, 1H); 8,46 (d, 1H).

20. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc $0 :69:1 til. /til. /til.).

21. NMR liuottimessa B: 1,5 (s, 6H); 2,0 -20 3,2 (m, 6H); 3,5 (m, 2H); 4,5 (m, 2H); 5,2 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 7,0 (s, 1H); 7,0 (d, 1H); 8,1 (d, 1H).

22. HPLC eluenttina MeOH/ammoniumkarbonaatin vesiliuos (2g/l) (35:65 til./til.).

23. NMR liuottimessa B: 1,51 (s, 6H); 3,2 - 25 3,8 (m, 2H); 4,36 (s, 2H); 5,22 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 5,42 (s, 2H); 6,93 (s, 1H); 7,47 (s, 5H); 7,0 - 7,2, 7.3 - 7,5, 8,3 - 8,8 (m,m,m, 4H).

24. NMR liuottimessa B: 1,6 (s, 6H); 3,5 (n, 2H); 3,9 (s, 3H); 4,5 (d, 1H); 4,7 (d, 1H); 5,2 30 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 7,05 (s, 1H); 6,9 - 7,5 (m, 2H); 8,08,0 -8,4 Im, 2H).

25. Lähtöainetta, 4-kloori-l-/2-(t-butoksikarbo-nyyli-amino)etyyli/pyridiniumtolueeni-p-sulfonaattia, saatiin seuraavalla tavalla: 4-pyridonia, N-t-butoksi- 35 karbonyyli-2-metaanisulfonyylioksietyyliamiinia ja kaliumkarbonaattia kuumennettiin asetonissa palautusjääh-dyttäjää käyttäen 15 tuntia. Suodatettu seos puhdistettiin piihappogeelikromatografiän avulla, jolloin saatiin 1-/2-(t-butoksikarbonyyliamino)etyylO-4-pyridonia so 80 043 kiteisenä aineena. Tämä reagoitettiin tolueeni-p-sulfo-nyylikloridin kanssa tolueenissa palautusjäähdyttäkää käyttäen. Erottunut öljy pestiin eetterillä ja kuivattiin. NMR liuottimessa B: 1,27 (s, 9H); 2,3 (s, 3H) ; 5 3,3 - 3,7 (m, 2H); 4,6 (t, 2H); 7,12 (d, 2H); 7,51 (d, 2H); 8,4 (d, 2H); 9,05 (d, 2H).

26. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc (35 - 40) : (64-59) :1 til. /til. /til 27. NMR liuottimessa A: 1,3 (s, 9H); 1,52 10 (s, 6H); 3,2 - 3,6 (m, 4H); 4,0 - 4,4 (m, 4H); 5,2 (d, 1H); 5,88 (d, 1H); 6,95 (s, 1H); 6,8 - 7,2 (m, 2H); 8,0-8,4 (m, 2H).

28. Tuotetta saatiin reagoittamalla esimerkin 35 tuotetta metyleenikloridi/TFA-seoksen 50:50 til./til.

15 kanssa 30 minuuttia. Liuotin haihdutettiin pois, jäännös liuotettiin MeOHrhon ja tuote saostettiin eetterillä.

29. NMR liuottimessa B: 1,54 (s, 6H); 3,2 - 3,7 (m, 4H); 4,1 - 4,6 (m, 4H); 5,2 (d, 1H); 5,88 (d, 1H); 7,0 (s, 1H); 6,8 - 7,3 (m, 2H)? 8,0 - 8,4 20 (m, 2H).

30. Lähtöainetta, 3-bromi-4-kloori-l-metyylipyri-diniumjodidia saatiin reagoittamalla 3-bromi-4-klooripy-ridiiniä minimaalisessa MeOH-määrässä suurin ylimäärin käytetyn metyylijodidin kanssa ympäristön lämpötilassa 25 18 tuntia. Saatu öljy trituroitiin eetterin kanssa, jol loin saatiin kiinteätä ainetta. NMR dgDMSOissa: 4,35 (s, 3H); 8,55 (d, 1H); 9,1 (d, 1H); 9,6 (s, 1H).

31. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc (3 0 :69 :1 til./til./til .y 30 32. NMR liuottimessa B: 1,6 (s, 6H); 3,5 (m, 2H); 4,6 (m, 2H); 4,2 (d, 1H); 4,9 (d, 1H); 7,1 (s, 1H); 7,3 (d, 1H); 8,4 (d, 1H); 8,8 (d, 1H).

33. Lähtöainetta saatiin seuraavalla tavalla:

Vetyä kuplitettiin seoksen läpi, jossa oli 4-kloori-3-35 metoksipyridiini-N-oksidia ja Raney-nikkeliä MeOH:ssa, 3 tuntia. Liuotin haihdutettiin pois, jolloin saatiin 4-kloori-3-metoksipyridiiniä. Seoksen, jossa oli tämä tuote, MeOH ja suurin ylimäärin metyylijodidia, annettiin seistä ympäristön lämpötilassa 18 tuntia. Liuotin 51 S G Q 4 3 haihdutettiin pois ja jäännöstä trituroitiin eetterin kanssa, jolloin saatiin 4-kloori-3-metoksi-l-metyyli-pyridiniumjodidia. NMR liuottimessa F: 4,05 (s, 3H); 4,3 (s, 3H); 8,3 (d, 1H); 8,6 (d, 1H); 9,0 (s, 1H).

5 34. NMR liuottimessa B: 1,6 (s, 6H); 3,5 (m, 2H); 4,0 (s, 3H); 4,5 (m, 2H); 5,2 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 7,1 (s, 1H); 7,1 (m, 1H); 8,1 (m, 2H).

35. Lähtöaineena oli 3-fluori-l-metyylipyridinium- jodidi ja reaktioseosta kuumennettiin 7 tuntia 40°:ssa 10 36. NMR liuottimessa B: 1,6 (s, 6H); 3,5 - 3,7 (m, 2H); 4,25 (s, 3H); 4,2 (m, 2H); 5,2 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 7,1 (s, 1H); 7,6 - 7,8 (m, 2H); 8,1 - 8,3 (m, 2H).

37. Lähtöainetta saatiin seuraavalla tavalla: Seos-15 ta, jossa oli 4-kloori-2-kloorimetyylipyridiiniä ja nat- riumasetaattia DMF/vesi-seoksessa, kuumennettiin 50°:ssa 18 tuntia. Liuotin haihdutettiin pois ja jäännös uutettiin vedestä EtOAc:llä. Uutettu aine puhdistettiin piihap-pogeelikromatografiän avulla. Tätä tuotetta käsiteltiin 20 10 % ylimäärin käytetyn dimetyylisulfaatin kanssa metylee- nikloridissa. Amidituote pestiin eetterillä, jolloin saatiin 2-asetoksimetyyli-4-kloori-l-metyylipyridiniummetyy-lisulf aattia. NMR liuottimessa A: 2,13 (s, 3H) ; 3,4 (s, 3H); 4,28 (s, 3H); 5,5 (s, 2H); 8,3 (dd, 1H); 9,1 25 (d, 1H) .

38. NMR liuottimessa A: 1,47 (s, 6H); 2,17 (s, 3H); 3,2 - 3,6 (m, 2H); 3,88 (s, 3H); 4,2 - 4,7 (m, "H); 5,1 (d, 1H); 5,78 (d, 1H); 6,76 (s, 1H); 6,9 - 7,1, 7,2 - 7,5, 8,0 - 8,4 (m,m,m, 4H).

30 39. Lähtöainetta saatiin seuraavalla tavalla: Seok sen, jossa oli 4-metyylitiopyridiiniä ja bromiasetamidia CJ^C^sssa, annettiin seistä ympäristön lämpötilassa 18 tuntia. Saatu sakka pestiin eetterillä, kuivattiin ja hapetettiin metaklooriperbentsoehapolla metyleenikloridi/ 39 TFA-seoksessa ympäristön lämpötilassa. Liuotin haihdutettiin pois ja jäännös pestiin eetterillä, jolloin saatiin l-karbamoyylimetyyli-4-metaanisulfinyylipyridiniumbromi-din ja l-karbamoyylimetyyli-4-metaanisulfonyylipyridi- c- τ O n n .* 7

52 UUU*tJ

niumbromidin seos. NMR liuottimessa B: 3,56 (s, 3H); 5,58 (s, 2H); 8,74 (d, 2H); 9,38 (d, 2H).

40. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc (l5 :84 :1 til. /til. /til.).

5 41. NMR liuottimessa A: 1,47 (s, 6H); 3,32 (d, 1H); 3,6 (d, 1H); 4,2 (d, 1H); 4,52 (d, 1H); 4,86 (s, 2H); 5,06 (d, 1H); 5,76 (d, 1H); 6,75 (s, 1H); 6,8 - 7,1, 7,2 - 7,5, 7,9 - 8,3 (m, m, m, 4H).

42. Lähtöainetta saatiin reagoittamalla 4-kloori-10 3-fluoripyridiiniä ylimäärin käytetyn metyylijodidin kans sa (ei liuotinta) 0°:ssa 5 päivää. Kiteinen tuote pestiin eetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin 4-kloori- 3-fluori-l-metyylipyridiniumjodidia, n.m.r. liuottimessa A: 4,4 (s, 3H); 8,6 (d, 1H); 9,0 (d, 1H); 9,6 (d, 1H).

15 43. NMR liuottimessa B: 1,6 (s, 6H); 3,6 (m, 2H); 4,0 (s, 3H); 4,5 (m, 2H); 5,2 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 7,05 (s, 1H); 7,2 - 7,4 (m, 1H); 8,2 - 8,4 (m, 1H); 8,6 - 8,8 (m, 1H).

44. Lähtöainetta saatiin antamalla seoksen, jossa 20 oli 2-amino-4-klooripyridiiniä ja ylimäärin metyylijodi-dia (ei liuotinta), seistä ympäristön lämpötilassa 2 päivää, jolloin saatiin 2-amino-4-kloori-l-metyylipyridinium-jodidia kiinteänä aineena. NMR d^DMSO:ssa: 3,6 (s, 3H); 6,6 - 6,7 (m, 1H); 7,0 (d, 1H); 7,9 (d, 1H).

25 45. Reaktioseosta kuumennettiin 40°:ssa 20 tuntia.

46. NMR liuottimessa B: 1,6 (s, 6H); 3,6 (m, 2H); 4,2 - 4,3 (m, 2H); 5,2 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 5,9 - 6,0 (m, 1H); 6,3 - 7,5 (m, 1H); 7,6 - 7,8 (m, 1H).

47. Lähtöainetta valmistettiin antamalla seoksen, 30 jossa oli 3-amino-4-klooripyridiiniä ja ylimäärin metyy- lijodidia (ei liuotinta), seistä ympäristön lämpötilassa 1 tunti, jolloin saatiin 3-amino-4-kloori-l-metyylipyridi-niumjodidia kiinteänä aineena. NMR liuottimessa F: 4,2 (s, 3H); 7,9 - 8,3 (m, 3H).

35 48. NMR liuottimessa B: 1,6 (s, 6H); 3,6 (m, 2H); 4,4 (m, 2H); 3,9 (s, 3H); 5,2 (d, 1H); 5,9 (d, 1H) ; 6,8 - 7,0 (d, 1H) ; 7,6 (s, 1H) ; 7,8 - 8,0 (d, 1H) .

il 53 8 0 0 4 3 49. Lähtöainetta valmistettiin seuraavalla tavalla: Seoksen, jossa oli 4-kloori-2-kloorimetyylipyridiiniä, 2-(t-butoksikarbonyyliamino)etaanitiolia ja natriumbikarbonaattia DMF/dioksaani/vesi-seoksessa (l: 1:1 til./til./til 5 annettiin seistä ympäristön lämpötilassa 24 tuntia. Tuote puhdistettiin piihappogeelikromatografiän avulla ja käsiteltiin yhden ekvivalentin kanssa dimetyylisulfaattia ympäristön lämpötilassa 2 tuntia. Tällöin saatiin 4-kloori- 1- metyyl1-2-/2-(t-butoksikarbonyyliamino)etyylitiometyy-10 li^pyridiniummetyylisulfaattia. NMR CDCl3:ssa: 1,48 (s, 9H); 2,72 (t, 2H); 3,3 (m, 2H); 3,68 (s, 3H); 4,28 (s, 2H); 4,5 (s, 3H); 7,9 (dd, 1H); 8,26 (d, 1H); 9,14 (d, 1H): 50. Reaktion lopussa liuotin haihdutettiin pois 15 ja jäännöstä käsiteltiin TFA:n kanssa 30 minuuttia.

51. NMR liuottimessa B: 1,48 (s, 6H); 2,72 (m, 2H); 3,04 (m, 2H); 3,52 (m, 2H); 3,88 (s, 3H); 4,0 (m, 2H); 4,3 (m, 2H); 5,14 (d, 1H); 5,84 (d, 1H); 6,94 (s, 1H); 7,0 (m, 2H}; 8,0 (m, 1H).

20 52. Lähtöainetta voitiin saada seuraavalla tavalla.

2- kloorimetyyli-4-klooripyridiinin reaktio ylimäärin käytetyn tetrametyylikinoliiniatsidin kanssa Cl^Cl^ssa ympäristön lämpötilassa 24 tunnin ajan antoi 2-atsidometyyli- 4-klooripyridiiniä. NMR CDCl^rssa : 4,5 (s, 2H) ; 25 7,3 (m, 2H); 8,5 (d, 1H). Tämän yhdisteen pelkistys

MeOH:ssa, samalla kun läsnä oli 2 ekvivalenttia etikka-anhydridiä, Raney-nikkelin kanssa ympäristön lämpötilassa 30 minuutin ajan antoi piihappogeelikromatografiän avulla suoritetun puhdistuksen jälkeen 2-asetyyliamino-30 metyyli-4-klooripyridiiniä. NMR CDCl^rssa : 2,1 (s, 3H); 4,56 (d, 2H); 7,3 (m, 2H); 8,48 (d, 2H).

Yhdisteen reagoittaminen ylimäärin käytetyn dime-tyylisulfaatin kanssa 30 minuutin ajan 40°:ssa antoi 2-asetyyliaminometyy1i-4-kloori-1-metyylipyridiniumme-35 tyylisulfaattia. NMR liuottimessa F: 2,0 (s, 3H); 3,44 (s, 3H); 4,3 (s, 3H); 4,7 (s, 2H)? 8,2 (m, 2H); 9,04 (d, 1H).

54 80043 53. NMR liuottimessa B: 1,56 (s, 6H) ; 1,98 (s, 3H); 3,5 (m, 2H); 3,9 (s, 3H); 4,4 (m, 4H); 5,22 (d, 1H); 5,9 (d, 2H); 6,9 (m, 2H); 7,08 (s, 1H); 8,2 (m, 1H).

5 54. Lähtöainetta voitiin saada seuraavalla tavalla: 2-atsidometyyli-4-klooripyridiiniä pelkistettiin Raney-nikkelin kanssa EmOH:ssa, samalla kun läsnä oli 2 ekvivalenttia bis(O-t-butyylihiilihappo)anhydridiä, ympäristön lämpötilassa 1 tunnin ajan. Tuote puhdistettiin kromato-10 grafian avulla piihappogeeliä käyttäen, jolloin saatiin 2-t-butoksikarbonyyliaminometyyli-4-klooripyridiiniä.

NMR CDCl3:ssa : 1,46 (s, 9H); 4,44 (d, 2H); 5,4 (m, 1H); 7,3 (m, 2H); 8,46 (d, 2H). Tämän yhdisteen rea-goittaminen ylimäärin käytetyn dimetyylisulfaatin kanssa 15 40°:ssa 1,5 tuntia antoi 2-t-butoksikarbonyyliaminometyy- li-4-kloori-l-metyylipyridiniummetyylisulfaattia. NMR CDCl^JSsa : 1,46 (s, 9H); 3,6 (s, 3H); 4,36 (s, 3H); 4,72 (d, 2H); 6,6 (m, 1H); 7,9 (m, 2H); 9,92 (d, 1H).

55. Reaktion päätyttyä käsiteltiin raakaa tuotet-20 ta TFA:n kanssa ympäristön lämpötilassa 30 minuuttia.

56. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc ((5-10):(94-89):1 til. /til. /til.).

57. NMR liuottimessa B: 1,52 (s, 6H); 3,5 (m, 2H); 3,92 (s, 3H); 4,36 (s, 4H); 5,2 (d, 1H); 5,9 25 (d, 1H); 7,04 (m, 2H); 7,06 (s, 1H); 8,3 (m, 1H).

58. Lähtöainetta voitiin saada seuraavalla tavalla: 4-metyylitiopyridiinin reagoittaminen viiden ekvivalentin kanssa 2-bromietanolia 18 tunnin ajan 40°:ssa antoi eetteristä suoritetun saostuksen jälkeen 1-(2-hydroksietyy- 30 li)-4-metyylitiopyridiniumbromidia. NMR liuottimessa B: 2,68 (s, 3H); 3,8 (t, 2H); 4,5 (t, 2H); 7,9 (d, 2H); 8,68 (d, 2H). Tämän yhdisteen hapetus metakloorkperbentsoeha-polla CH2Cl2/TFA-seoksessa ympäristön lämpötilassa kolmen tunnin ajan antoi l:l-seoksen 1-(2-hydroksietyyli)-4-me-35 taanisulfinyylipyridiniumbromidia ja vastaavaa sulfonia.

NMR liuottimessa F: 3,0 (s, 3H); 3,56 (s, 3H); 3,8 -

II

55 80043 4.1 (m, 2H); 4,7 - 5,0 (m, 2H); 8,5 (d, 2H); 8,72 (d, 2H); 9,24 (d, 2H); 9,44 (d, 2H).

59. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc f(l5-20}-(84-79): 1 ti 1. /til. /til.).

5 60. NMR liuottimessa B: 1,54 (s, 6H); 3,42 (d, 1H); 3,68 (d, 1H); 3,72 (t, 2H); 4,2 (t, 2H); 4,2 (d, 1H); 4,48 (d, 1H); 5,2 (d, 1H); 5,76 (d, 1H); 7,04 (s, 1H); 6,9 - 7,2 (m, 2H); 8,0 - 8,4 (m, 2H).

61. Lähtöainetta voitiin valmistaa seuraavalla 10 tavalla: 4-metyylitiopyridiinin reagoittaminen viiden ekvivalentin kanssa klooriasetonia välillä 40-50° 18 tunnin ajan antoi l-asetyylimetyyli-4-metyylitiopyridiumkloridia.

NMR liuottimessa B: 2,27 (s, 3H); 2,71 (s, 3H); 6,0 (s, 2H); 7,93 (d, 2H); 8,5 (d, 2H). Tämän yhdisteen ha- 15 petus käyttämällä pienin ylimäärin metaklooriperbentsoe-happoa CI^C^/TFA-seoksessa 0°:n ja ympäristön lämpötilan välillä antoi l-asetyylimetyyli-4-metaanisulfinyylipyri-diniumkloridia. NMR liuottimessa B: 2,32 (s, 3H); 3.01 (s, 3H); 5,84 (s, 8,5(d, 2H); 9,0 (d, 2H).

20 62. NMR liuottimessa B: 1,52 (s, 6H); 2,22 (S, 3H); 3,46 (d, 1H); 3,74 (d, 1H); 4,4 (s, 2H); 5,25 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 5,23 (s, 2H); 6,97 (s, 1H); 6,9 - 7.2 (m, 2H); 7,9 - 8,3 (m, 2H).

63. Tuote on 1-beeta-oksidia, joka vastaa esimerkin 25 49 tuotetta. Sitä saatiin tästä edeltäjäaineesta reagoitta- malla metaklooriperbentsoehapon kanssa CI^C^/TFA-seokses-sa 0°:n ja ympäristön lämpötilan välillä 30 minuutin ajan.

NMR liuottimessa B: 1,6 (s, 6H); 2,22 (s, 3H); 3,64 (d, 1H); 3,88 (d, 1H); 4,44 (s, 2H); 5,06 (d, 1H); 6,1 30 (d, 1H); 5,23 (s, 2H); 7,16 (s, 1H); 6,9 - 7,2 (m, 1H); 7,9 - 8,3 (m, 1H).

64. Lähtöainetta voitiin saada seuraavalla tavalla: 4-metyylitiopyridiinin reagoittaminen yhden ekvivalentin kanssa 2-dimetyyliaminoetyylikloridihydrokloridia EtOH:ssa 35 palautusjäähdyttäjää käyttäen 18 tunnin ajan antoi l-(2-di-

metyyliaminoetyyli)-4-metyylitiopyridiniumkloridia. NMR

56 80043 liuottimessa B: 2,7 (s, 3H); 2,87 (s, 6H); 3,75 (t, 2H); 4,92 (t, 2H); 7,98 (d, 2H); 8,84 (d, 2H). Tämän yhdis teen hapetus metaklooriperbentsoehapolla CI^C^/TFA-seok-sessa 0°:n ja ympäristön lämpötilan välillä 40 minuutin 5 ajan antoi 1-(2-dimetyyliaminoetyyli)-4-metaanisulfinyy-lipyridiniumkloridia. NMR liuottimessa B: 3,0 (s, 6H); 3,34 (s, 3H); 3,87 (t, 2H); 5,16 (t, 2H); 8,52 (d, 2H) ; 9,36 (d, 2H).

65. NMR liuottimessa B: 1,54 (s, 6H); 2,86 10 (s, 6H); 3,4 - 3,8 (m, 4H); 4,3 - 4,7 (m, 4H); 5,22 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 7,02 (s, 1H); 6,9 - 7,2 (m, 2H) ; 8,1 - 8,5 (m, 2H).

66. Lähtöainetta voitiin saada seuraavalla tavalla: 4-metyylitiopyridiinin reagoittaminen neljän ekvivalentin 15 kanssa N-asetyyli-2-kloorietyyliamiinia 80°:ssa 4 tunnin ajan antoi Ci^C^-liuoksesta EtOAc:lla suoritetun saostuksen jälkeen 1-(2-asetyyliaminoetyyli)-4-metyylitiopyri-diniumkloridia. NMR liuottimessa B: 1,76 (s, 3H); 2,69 (s, 3H); 3,6 (t, 2H); 4,5 (t, 2H); 7,87 (d, 2H); 8,64 20 (d, 2H). Tämä yhdiste reagoitettiin yhden ekvivalentin kanssa metaklooriperbentsoehappoa CI^C^/TFA-seoksessa 0°:n ja ympäristön lämpötilan välillä 30 minuutin ajan. Tuote saostettiin CI^C^/MeOH-liuoksesta eetterillä, jolloin saatiin 1-(2-asetyyliaminoetyyli)-4-metaanisulfinyy-25 lipyridiniumkloridia. NMR liuottimessa B: 1,76 (s, 3H); 3,0 (s, 3H); 3,66 (t, 2H); 4,74 (t, 2H); 8,47 (d, 2H); 9,22 (d, 2H).

Kefalosporiini-lähtöainetta voitiin saada seuraavalla tavalla: 30 Hämmennettyyn seokseen, joka sisälsi DMF (5,8 ml) vedettömässä metyleenikloridissa (415 ml) ja jonka lämpötila oli -10°, lisättiin tipottain oksalyylikloridia (6,15 ml). Hämmentämistä jatkettiin -10°:ssa 30 minuuttia, jolloin saatiin hyytelöinäinen valkoinen sakka (kloorime-35 tyleeni)dimetyyliammoniumkloridia. Tähän hämmennettyyn suspensioon lisättiin jauhettua 2-((Z)-1-t-butoksikarbo-

II

57 80043 nyyli-1-metyylietoksi-imino)-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)etikkahappoa (40,0 g) ja sen jälkeen N-metyylimor-foliinia (8,80 ml). Hämmentämistä jatkettiin 30 minuuttia välillä -5°. . . -15°.

5 Toisessa pullossa hämmennettiin suspensiota, joka sisälsi 7-amino-3-atsidometyylikef-3-emi-4-karboksyylihap-poa (17,85 g) vedettömässä metyleenikloridissa (150 ml), yhden tunnin ajan N,0-bis(trimetyylisilyyli)asetamidin (34,5 ml) kanssa, jolloin saatiin kirkas oranssinvärinen 10 liuos. Tämä siirrettiin ruiskun avulla edellä mainittuun happokloridiliuokseen, jota hämmennettiin -10°:ssa lisäyksen aikana. Reaktioseoksen annettiin sen jälkeen lämmetä huoneen lämpötilaan ja hämmentämistä jatkettiin vielä 90 minuuttia. Sen jälkeen seos kaadettiin veteen (500 ml) ja 15 uutettiin EtOAc:lla (3 x 500 ml). Yhdistetyt EtOAc-uutok-set pestiin vedellä, kuivattiin (Na2SO^) ja liuotin haihdutettiin pois alipaineessa, jolloin saatiin ruskeankeltaista vaahtoa. Raaka tuote liuotettiin metyleenikloridiin ja lisättiin piihappopylvääseen (Kieselgel 60) (125 g).

20 Eluointi metyleenikloridi/MeOH/HOAc-seoksella (96:2:2 til./til./til.) antoi 3-atsidometyyli-7-/*2-(2-trityyliami-notiatsol-4-yyli)-2-((Z)-1-t-butoksikarbonyyli-l-metyyli-etoksi-imino)-asetamidq7kef-3-emi-4-karboksyylihappoa (46,4 g) valkoisena vaahtona. NMR liuottimessa A: 25 1,30 (s, 9H); 1,35 (s, 6H); 3,37 (d. 1H); 3,65 (d, 1H); 3,9 (d, 1H); 4,35 (d, 1H); 5,10 (d, 1H); 5,7 (d, 1H); 6,66 (s, 1H); 7,25 (s, 15H).

Raney-nikkelin (10,2 g) vesilietettä lisättiin yhtenä annoksena hämmennettyyn liuokseen, joka sisälsi at-30 sidia (20,0 g) MeOH:n (60 ml) ja TFA:n (60 ml) seoksessa huoneen lämpötilassa. Tällöin todettiin voimakas kuohuminen. Hämmentämistä jatkettiin yhden tunnin ajan ja Raney-nikkeli poistettiin suodattamalla piimään läpi. Suodatus-levy pestiin hyvin MeOH:lla ja pesuvedet yhdistettiin suo-35 doksen kanssa. Liuottimet haihdutettiin pois alipaineessa, jolloin saatiin vaaleankeltainen kiinteä jäännös, jota sen 58 80043 jälkeen hämmennettiin kahden tunnin ajan TFA:n (60 ml) ja veden (1,5 ml) seoksen kanssa. Tämä seos haihdutettiin kuiviin ja jäännöstä hämmennettiin voimakkaasti veden (400 ml) kanssa 30 minuuttia. Saatu liuos suodatettiin piimään läpi 5 liukenemattoman trifenyylimetanolin poistamiseksi ja suo-dos lisättiin Diaion HP20-hartsin muodostamaan pylvääseen (1 litra). Pylväs eluoitiin vedellä (500 ml) epäorgaanisen aineen poistamiseksi ja sen jälkeen MeOH:n vesiliuoksella (1:1 til./til.). Ne fraktiot, jotka näyttivät HPLCrn nojalla 10 sisältävän tuotetta, haihdutettiin alipaineessa, jolloin saatiin 3-aminometyyli-7-/2-(2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-((Z)-1-karboksi-l-metyylietoksi-imino)asetamido/kef-3-emi-4-karboksyylihappoa (4,20. g) vaaleankeltaisena vaahtona, jolla oli seuraava NKR liuottimessa A: 1,4 (s, 6H) ; 15 3,1 - 3,8 (kompleksi, 4H) ; 4,95 (d, 1H); 5,7 (d, 1H); 6,72 (s, 1H).

Esimerkit 53-55

Esimerkeissä vastaavasti 1, 5 ja 6 esitetyt menetelmät toistettiin, mutta käyttämällä lähtöaineena esimerkin 20 36 tuotetta, jolloin saatiin seuraavat yhdisteet:

„ „ /S7! H H

H ^ N —I - · S

N-L /CO —nh —r—f N

cn3 y-N^J-c h2nh-/n-ch2ch2-r ” O— C— COOH I -' ch3 co°®

Esimerkki ~R Saanto % Alaviitteet

^NH

53 -NH-C^ 37 1/2

H

NH

54 -NH-C^ 50 3 4

H

/(ch3)2 55 -N=C 42 5 6

H

II

59 8 0 0 4 3

Alaviitteet 1. Reaktio suoritettiin DMF:ssä ympäristön lämpötilassa 6 tunnin ajan käyttämällä 4 ekvivalenttia (etoksi-metyleeni)ammoniumkloridia ja 8 ekvivalenttia trietyyli- 5 amiinia. Liuotin haihdutettiin pois ja jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä HP20-hartsia ja eluenttina vettä ja sen jälkeen asetonitriili/vesi-seos-ta((5-15):(?5-85) til./til.).

2. NMR liuottimessa B: 1,55 (s, 6H); 2,29 10 (s, 3H); 3,2 - 4,0 (m, 4H); 4,1 - 4,5 (m, 4H); 5,2 (d, 1H); 5,84 (d, 1H); 7,02 (s, 1H); 7,16 (m, 2H); 7,54 (m, 2H); 6,9 - 7,2 (m, 2H); 7,8 - 8,4 (m, 2H).

3. Reaktio suoritettiin DMF/vesi-seoksessa 1:1 til./til. käyttämällä 15 ekvivalenttia 1-etoksietylidee- 15 niammoniumkloridia ja 15 ekvivalenttia natriumbikarbonaattia 0°:n ja ympäristön lämpötilan välillä yhden tunnin ajan. Liuotin haihdutettiin pois ja jäännös puhdistettiin HPLC:n avulla oktade yylisilaanipylväässä käyttäen MeOH/vesi/HOAc-seosta (ij.5-20): (δ4-79): 1 til./til./til 20 4. NMR liuottimessa B: 1,54 (s, 6H); 2,13 (s, 3H); 2,29 (s, 3H); 3,4 - 3,8 (m, 4H); 4,1 - 4,5 (m, 4H); 5,18 (d, 1H); 5,86 (d, 1H); 7,02 (s, 1H); 7,14 (m, 2H); 7,54 (m, 2H); 6,9 - 7,2 (m, 2H); 8,0 - 8,4 (m, 2H).

25 5. Reaktio suoritettiin DMF:ssä ympäristön läm pötilassa kahden tunnin ajan käyttäen kahta ekvivalenttia N,N-dimetyyli-N-(dimetoksimetyyli)amiinia. Liuotin haihdutettiin pois ja jäännös puhdistettiin kromatogra-fian avulla käyttäen HP20-hartsia ja eluenttina vettä 30 ja sen jälkeen MeOH/vesiseosta (20 :80 til./til.').

6. NMR liuottimessa B: 1,52 (s, 6H); 2,3 (s, 3H); 2,99 (s, 3H); 3,16 (s, 3H); 3,4 - 4,0 (m, 4H); 4,2 - 4,4 (m, 4H); 5,14 (d, 1H); 5,82 (d, 1H); 6,96 (s, 1H); 7,14, 7,53 (d, d, 4H); 6,8 - 7,2 (m, 2H); 8,0 -35 8,4 (m, 2H).

60 80 043

Esimerkki 56

Liuoksen, joka sisälsi 7-/2-(2-trityyliaminotiat-sol-4-yyli)-2-((Z)-1-t-butoksikarbonyyli-l-metyylietok-si-imino) asetamidoT‘-3- (l-etyyli-4-pyridinio) aminometyyli-5 kef-3-emi-4-karboksylaattia (410 mg) TFA:ssa (5 ml), an nettiin seistä 30 minuuttia. Sen jälkeen lisättiin vettä (0,5 ml) ja 30 minuutin kuluttua liuotin haihdutettiin pois alipaineessa. Jäännös trituroitiin veden (25 ml) kanssa ja saatu liuos suodatettiin piimään lävitse liu-10 kenemattoman trifenyylimetanolin poistamiseksi. Suodos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, jolloin saatiin oranssinväristä lasimaista ainetta (310 mg), joka puhdistettiin HPLC:n avulla käyttäen oktadekyylisilaanipylvästä ja eluoi-malla MeOH/vesi/HOAc-seoksella (30 : 70 :1 til./til./til.).

15 Tällöin saatiin 7-/2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(( )-1- karboksi-l-metyylietoksi-imino) asetamidoJr-3- (l-etyyli-4-pyridinio)aminometyylikef-3-emi-4-karboksylaattia (28 mg) valkoisena kiinteänä aineena, jolla oli seuraava NMR liuottimessa A: 1,43 (t, 3H); 1,5 (s, 6H); 3,43 (d, 1H); 20 3,7 (d, 1H); 4,22 (q, 2H); 4,35 (br, 2H); 5,2 (d, 1H); 5,85 (d, 1H); 6,77 (d, 1H); 7,0 (d, 2H); 8,25 (br, 2H).

Lähtöainetta voitiin saada seuraavalla tavalla: hämmennettyyn liuokseen, joka sisälsi l-etyyli-4-pyridonia (3,98 g) palautuksella kuumennetussa vedettömässä toluee-25 nissa (60 ml), lisättiin uudelleenkiteytettyä tolueeni-p- sulfonyylikloridia (6,18 g). 5 minuutin kuluttua reaktio-seos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja tolueeni dekan-toitiin pois hartsimaisesta sakasta.

Sakan triturointi eetterin kanssa antoi 4-kloori-30 1-etyylipyridiniumtolueeni-p-sulfonaattia (9,98 g) harmah tavana kiinteänä aineena, jolla oli seuraava NMR D20:ssa : 1,6 (t, 3H)? 2,36 (s, 3H); 4,58 (q, 2H); 7,32 (d, 2H); 7,66 (d, 2H); 8,06 (d, 2H); 8,74 (d, 2H).

Hämmennettyyn suspensioon, joka sisälsi 3-aminome-35 tyyli-7-t-butoksikarbonyyliaminokef-3-emi-4-karboksyyli- appoa (3,28 g) MeOH:ssa (170 ml) ja trietyyliamiinissa ei 80043 (4,17 ml), lisättiin 4-kloori-l-etyylipyridiniumtoluee-ni-p-sulfonaattia. Kiinteät aineet liukenivat nopeasti ja saatiin oranssinvärinen liuos. 2,5 tunnin kuluttua liuotin poistettiin haihduttamalla alipaineessa. Jäännös 5 liuotettiin veteen (400 ml) ja liuoksen pH säädettiin arvoon 6,0 lisäämällä natriumbikarbonaattia. Liuos lisättiin sen jälkeen Diaion HP20-hartsipylvääseen (200 ml), joka eluoitiin aluksi vedellä jäljellä olevan 3-aminome-tyyli-lähtöaineen poistamiseksi ja sen jälkeen vesipitoi-10 sella asetonilla ^4 :1 til./til'}. Ne fraktiot, jotka sisälsivät 7-t-butoksikarbonyyliamino-3-(l-etyyli-4-pyridinio) aminometyylikef-3-emi-4-karboksylaattia, yhdistettiin, asetoni haihdutettiin pois ja jäännös kuivattiin jäähdyttämällä, jolloin saatiin 2,0 g höytälemäistä harmahta-15 vaa kiinteätä ainetta.

Edellä mainittu aminopyridiniumyhdiste (250 mg) liuotettiin TFArhan (0,66 ml). 30 minuutin kuluttua liuotin haihdutettiin pois alipaineessa. Jäännös liuotettiin veteen (10 ml) ja hämmennettyyn liuokseen lisättiin jau-20 hettua natriumbikarbonaattia (718 mg) ja sen jälkeen liuos, joka sisälsi 2-((Z)-1-t-butoksikarbonyyli-l-metyylietoksi-imino)-2-(2-trityyliaminotriatsol-4-yyli)-asetyylikloridia (280 mg) asetonissa (5 ml). Reaktioseosta hämmennettiin huoneen lämpötilassa yön yli ja sen jälkeen se jaettiin 25 EtOAcrn ja veden kesken. Vesifaasi hapotettiin 1-n HCl:n vesiliuoksella pH-arvoon 3,0 ja uutettiin uudelleen EtOAc:lla. Yhdistetyt EtOAc-uutokset pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin ja liuotin haihdutettiin pois alipaineessa, jolloin saatiin raakaa lähtöainetta, 3 0 7-/"2- (2-trityyliaminotiatsol-4-yyli) -2 - ( (Z) -1-t-butoksi- karbonyyli-l-metyylietoksi-imino)-asetamidoJ-3-(1-etyyli-4-pyridinio)aminometyylikef-3-emi-4-karboksylaattia (410 mg) keltaisena vaahtona.

62 80043

Esimerkit 57-65

Liuokseen, joka sisälsi 3-aminometyyli-7-/2-(2-ami-notiatsol-4-yyli)-2-((Z)-1-karboksi-l-metyylietoksi-imi-no)asetamida/'-kef-3-emi-4-karboksyylihappoa (194 mg, 0,4 5 millimoolia) DMF:ssä (11 ml) ja vedessä (3 ml), ja jonka lämpötila oli 0°, lisättiin natriumbikarbonaattia (403 mg, 4,8 millimoolia) liuotettuna minimaaliseen vesitilavuuteen ja sen jälkeen l-metyyli-4-kloorikinoliniumjodidia (122 mg, 0,4 millimoolia). Tunnin kuluttua seosta käsiteltiin 10 HOAc:llä (288 pl., 4,8 millimoolia) ja haihdutettiin kuiviin alipaineessa. Jäännös liuotettiin veteen (6 ml) ja puhdistettiin HPLC:n avulla oktadekyylisilaanipylväässä käyttäen eluenttina MeOH/vesi/HOAc-seosta ()0:60:1 til./til./tilNe fraktiot, jotka sisälsivät tuotetta, yh-15 distettiin, MeOH poistettiin haihduttamalla ja vesipitoinen jäännös kuivattiin jäähdyttämällä, jolloin saatiin tuote (50 %). Tätä yleistä menetelmää käyttäen ja lähtemällä sopivasta kvaternäärisestä heterosyklistä saatiin seuraavat yhdisteet: 20

/S_ H H H2N ^ I .CO — NH-4-ν' N

N Jv/ 1

T ch3 NNH.R

X 1 ' Θ

O — C COOH COCH

CH3

II

63 80043

Esimerkki R Saanto % Alaviitteet 57 -< N-CH3 50 1 /Γ 58 _ N-CH2CH2CH3 25 2,3 59 _ N-CH (CH3) 58 4, 5 /Γ^ Θ 50 -i' N-C(CH3) 2 34 6, 7 61 -f N—<] 48,7 8, 9 62 H^r~^N-CH2CH=CH2 35 10, 11 /Γ* φ 63 12 12' 13 CH-, B/ N-CH-. 23 14, 15 © 3 CH3 65 28 16, 17 X——/ %> 64 80043

Alaviitteet 1. NMR liuottimessa A: 1,4 (s, 6H); 3,52 (br, 2H); 4,6 (br, 2H); 4,07 (s, 3H); 5,1 (d, 1H); 5,8 (d, 1H); 6,7 (s, 1H); 7,2 - 8,7 (kompleksi, 6H).

5 2. NMR liuottimessa A: 0,72 (t, 3H) ; 1,35 (s, 6H); 1,65 (m, 2H); 3,4 (br, 2H); 3,96 (t, 2H); 4,2 (br, 2H); 5,03 (d, 1H); 5,71 (d, 1H); 6,65 (s, 1H); 6,92 (q, 2H); 8,08 (q, 2H).

3. Lähtöainetta voitiin valmistaa seuraavalla 10 tavalla: Liuosta, joka sisälsi 4-hydroksipyridiiniä (960 mg) ja 1-jodipropaania (2,34 ml) asetonissa (30 ml), hämmennettiin palautusjäähdyttäjää käyttäen 2 tuntia jauhetun kaliumkarbonaatin (2,76 g) kanssa. Reaktioseos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja suodatettiin. Liuo-15 tin haihdutettiin suodoksesta ja jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen piihappogeeliä (Kieselgel 60) (100 g) ja eluoimalla metyleenikloridi/MeOH-seoksel- la (jj.00 : O) - ^80 : 2θ) til. /til .J, jolloin saatiin 1-n-propyy-li-4-pyridonia (1,05 g) öljynä, jolla oli NMR CDCl^ssa : 20 0,9 (t, 3H); 1,75 (m, 2H); 3,7 (t, 2H); 6,23 (d, 2H); 7,28 (d, 2H). Tämä aine kloorattiin esimerkin 56 toisessa osassa kuvatulla tavalla, jolloin saatiin 4-kloori-l-n-propyylipyridiniumtolueeni-p-sulfonaattia.

4. NMR liuottimessa A: 1,4 (br, 12H); 3,32 25 (d, 1H); 3,56 (d, 1H); 4,15 (d, 1H); 4,36 (d, 1H); 4,4 (m, 1H); 5,05 (d, 1H); 5,75 (d, 1H); 6,68 (s, 1H); 6,95 (m, 2H); 8,1 (d, 1H); 8,27 (d, 1H).

5. Lähtöainetta voitiin valmistaa samalla tavalla kuin alaviitteessä 3 on esitetty käyttäen isopropyylibro- 30 midia.

6. NMR liuottimessa A: 1,4 (s, 6H); 1,5 (s, 9H) ; 3.3 (d, lii); 3,55 (d, 1H) ; 4,15 (d, 1H) ; 4,36 (d, 1H) ; 5,05 (d, 1H); 5,75 (d, 1H); 6,67 (s, 1H); 6,9 (m, 2H); 8.3 (m, 2H).

35 7. Lähtöainetta voitiin valmistaa seuraavalla ta valla: Liuoksen, joka sisälsi 4-pyronia (730 mg) t-butyy-liamiinissa (3,0 ml) annettiin seistä 3 päivää. Ylimää- 65 80043 räinen t-butyyliamiini haihdutettiin pois alipaineessa ja jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä piihappogeeliä (Kieselgel 60, 20 g) ja eluoimalla mety-leenikloridi/MeOH-seoksella ((LOO : O) - (90 : lO) til. /til.), jol-5 loin saatiin l-t-butyyli-4-pyridonia (530 mg). NKR liuot-timessa A: 1,55 (s, 9H); 6,4 (d, 2H); 7,6 (d, 2H). Tämä aine kloorattiin esimerkin 56 toisessa osassa esitetyllä tavalla, jolloin saatiin 4-kloori-l-t-butyylipyridiniumtoluee-ni-p-sulfonaattia.

10 8. NMR liuottimessa A: 1,05 (br, 4H); 1,4 (s, 6H); 3,3 (d, 1H); 3,6 (d, 1H); 3,75 (m, 1H); 4,18 (d, 1H); 4,4 (d, 1H); 5,1 (d, 1H); 5,77 (d, 1H); 6,69 (s, 1H); 6,9 (m, 2H); 8,06 (d, 1H); 8,24 (d, 1H).

9. Lähtöainetta voitiin saada seuraavalla tavalla: 15 Liuosta, joka sisälsi 2,6-dikarboksi-4-pyronia (10,0 g) ja syklopropyyliamiinia (3,8 ml) MeOHissa (300 ml), hämmennettiin huoneen lämpötilassa yön yli. Saostunut suola erotettiin suodattamalla, kuivattiin tyhjössä ja sitä kuumennettiin 200°:ssa 30 minuuttia. Saatu musta hartsi 20 uutettiin metyleenikloridillä (3 x 150 ml). Uutokset vä-kevöitiin haihduttamalla ja puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen piihappogeeliä (Kieselgel 60, 100 g) ja eluenttina metyleenikloridi/MeOH-seosta((lOO:l) - (δ0:20 til./til.), jolloin saatiin l-syklopropyyli-4-pyridonia 25 (1,26 g) öljynä, jolla oli NMR CDCl^issa : 1,03 (m, 4H) ; 3,38 (m, 1H); 6,3 (d, 2H); 7,4 (d, 2H). Tämä aine kloorattiin esimerkin 56 toisessa osassa esitetyllä tavalla, jolloin saatiin 4-kloori-l-syklopropyylipyridiniumtoluee-ni-p-sulfonaattia.

30 10. NMR liuottimessa A: 1,4 (s, 6H); 3,32 (d, 1H); 3,57 (d, 1H); 4,15 (d, 1H); 4,36 (d, 1H); 4,7 (d, 2h); 5,05 (d, 1H); 5,25 (m, 2H); 5,75 (d, 1H); 5,95 (m, 1H); 6,68 (s, 1HI; 6,95 (m, 2H); 7,95 (d, 1H); 8,13 (d, 1H).

66 80043 11. Lähtöainetta voitiin valmistaa samalla tavalla kuin alaviitteessä 3 on esitetty käyttämällä allyylibro-midia.

12. NMR liuottimessa A: 1,4 (s, 6H); 3,28 (d, 1H); 5 3,55 (d, 1H); 4,3 (br, 2H); 5,05 (d, 1H); 5,69 (d, 1H); 6.7 (s, 1H); 7,1 - 7,9 (m, 5H); 8,4 - 8,8 (m, 2H).

13. Reaktio suoritettiin 70°:ssa 2-bromikinolitsinium-bromidin kanssa.

14. NMR liuottimessa A: 1,4 (s, 6H); 2,7 (s, 3H); 10 3,53 (br, 2H); 3,95 (s, 3H); 4,55 (br, 2H); 5,1 (d, 1H); 5.8 (d, 1H); 6,7 (s, 1H); 7,4 - 8,6 (kompleksi, 5H).

15. Lähtöainetta voitiin valmistaa seuraavalla tavalla*. Liuoksen, joka sisälsi 4-kloorikinaldiinia (1,0 g) ja metyyli-jodidia (1,12 ml) asetonitriilissä (3 ml), annettiin seistä 15 yön yli pimeässä. Reaktioseos laimennettiin eetterillä ja saadut 1,2-dimetyyli-4-kloorikinoliniumjodidin violetinvä-riset kiteet erotettiin suodattamalla ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin saantona 181 mg. NMR D20:ssa: 3,0 (s, 3H); 4,38 (s, 3H); 7,7 - 8,75 (kompleksi, 5H).

20 16. NMR liuottimessa A: 1,4 (s, 6H); 2,7 (s, 3H); 3,27 (d, 1H); 3,53 (d, 1H); 3,9 (s, 3H); 4,4 (d, 1H); 4,6 (d, 1H); 5,0 (d, 1H); 5,65 (d, 1H); 6,7 (s, 1H); 7,4 - 8,6 (kompleksi, 4H).

17. Lähtöainetta voitiin valmistaa seuraavalla tavalla! 25 Jauhettua 4,6-dikloori-2-metyylikinoliinia (254 mg) lisättiin hämmennettyyn liuokseen, joka sisälsi trimetyylioksoniumtet-rafluoriboraattia (177 mg) asetonitriilissä (1 ml), ja hämmentämistä jatkettiin yön yli. Liuotin haihdutettiin pois ja jäännöstä trituroitiin eetterin kanssa, jolloin saatiin 30 4,6-dikloori-l,2-dimetyylikinoliniumtetrafluoriboraattia (296 mg). NMR liuottimessa A: 3,07 (s, 3H); 4,44 (s, 3H); 7.9 - 8,8 (kompleksi, 4H).

Esimerkit 66-67a

Esimerkeissä 57-65 esitetty yleinen menetelmä tois-35 tettiin, jolloin saatiin seuraavat yhdisteet: il 67 80043

H,N_/ T| ? - S

\ 11/ c°-NH -*—γ ^ Τ J—N J-CH2NH-R2

5 Ν—O R, I

COCp

Esimerkki R2 Saanto % Alaviitteet 10 cn3 66 -CH2C02H _V_5,-CH3 25 lf 2, 3 15 67 -C2H5 -^~^N-CH3 60 4, 5, 6 20 67a -^-COOH ~(^NCH2CH=CH2 43 7, 8, 9 25 Alaviitteet 1. Valmistettiin esimerkkien 54 - 62 standardi- menetelmällä (lukuunottamatta, että DMF korvattiin aseto-nitriilillä) lähtemällä sopivasta 3-aminometyylikefalospo-riinin johdannaisesta ja 4-kloori-l,2-dimetyylikinolinium- 30 tetrafluoriboraatista ja suorittamalla jatkokäsittely kro- matografian avulla käyttäen Diaion HP20 SS-hartsia.

2. NMR liuottimessa A: 2,73 (s, 3H); 3,44 (q, 2H); 3,98 (s, 3H); 4,53 (m, 4H); 5,02 (d, 1H); 5,68 (d, 1H) ; 6,8 (s, 1H) ; 7,3 (s, 1H) , 7,6 - 8,2 (m, 3H) ja 8,48 35 d, 1H).

68 80043 3. 3-aminometyylikefalosporiinia voitiin valmistaa

seuraavalla tavalla: Oksalyylikloridia (337 ui) ja DMF

0 (330 pl) lisättiin C^C^Jeen (20 ml) -10 :ssa ja seosta hämmennettiin 30 minuuttia. 2-((Z)-t-butoksikarbonyyli-5 metoksi-imino)-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)etikkahap-poa ja N-metyylimorfoliinia (510 pl) lisättiin ja hämmentämistä jatkettiin 30 minuuttia. Sillä välin erillisessä pullossa olevaa suspensiota, joka sisälsi 7-amino-3-atsi-dometyyli-kef-3-emi-4-karboksyylihappoa (987 mg) dikloori-10 metaanissa (8 ml), käsiteltiin N,0-bis(trimetyylisilyyli) asetamidin (1,91 ml) kanssa ja seosta hämmennettiin yhden tunnin ajan, jolloin saatiin kirkas liuos, joka siirrettiin ruiskun avulla happokloridiliuokseen. Sen jälkeen kun seosta oli hämmennetty yhden tunnin ajan -10°:ssa, 15 annettiin lämpötilan kohota ympäristön lämpötilaan. Seos kaadettiin veteen (25 ml) ja orgaaniset aineet uutettiin EtOAc:llä (3 x 25 ml). Raaka tuote suodatettiin lyhyen SiC^-pylvään läpi EtOAc/HOAc-seoksessa (99:1 til./til.) ja haihdutettiin, jolloin saatiin 3-atsidometyyli-7-^’2-( (Z)-t-20 butoksikarbonyylimetoksi-imino)-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)asetamido/-kef-3-emi-4-karboksyylihappoa, jolla oli seuraava NI4R liuottimessa A: 1,4 (s, 9H) ; 3,35 (d, 1H) ; 3,63 (d, 1H); 3,86 (d, 1H); 4,38 (d, 1H); 4,49 (s, 2H); 5,09 (d, 1H); 5,7 (d, 1H); 6,73 (s, 1H); 7,29 (m, 15H).

25 Edellä mainittua 3-atsidometyyliyhdistettä (0,5 g) lisättiin 90-%:iseen(til./til.) vesipitoiseen TFAshan (10 ml), joka oli esijäähdytetty 0°:seen, ja seosta hämmennettiin 30 minuuttia. Raney-nikkeliä (kosteata, 0,3 g) lisättiin ja seosta hämmennettiin 20 minuuttia sallien läm-30 pötilan kohota ympäristön lämpötilaan. Seos suodatettiin, suodos haihdutettiin, jäännös liuotettiin pieneen vesimäärään ja pH kohotettiin arvoon 2,5 NaHCO^illa. Tuote puhdistettiin kromatografiän avulla Diaion CHP20P-pylväässä eluoiden vesi/CH^CN-seoksella (95 : 5 til./til.), jolloin saa-35 tiin 3-aminometyyli-7-Z2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-((Z)-kar- il 69 80043 boksimetoksi-imino)asetamido7kef-3-emi-4-karboksyylihap-poa sen amfoteerisena muotona, jolla oli seuraava NMR liuottimessa A: 3,3 (d, 1H); 3,44 (d, 1H); 3,56 (d, 1H); 3,69 (d, 1H); 4,55 (s, 2H); 5,01 (d, 1H); 5,72 (d, 1H); 5 6,82 (s, 1H).

4. Valmistettu esimerkkien 54-62 standardimenetelmän avulla sopivasta 3-aminometyylikefalosporiinin johdannaisesta ja 4-kloori-l-metyylipyridiniumjodidista.

5. NMR liuottimessa A: 1,16 (t, 3H); 3,18 10 (d, 1H); 3,47 (d, 1H); 3,8 (s, 3H); 4,04 (q, 2H); 4,12 (d, 1H); 4,4 (d, 1H); 4,95 (d, 1H); 5,58 (d, 1H); 6,66 (s, 1H); 6,9 (m, 1H); 7,2 (m, 1H); 8,0 (m, 1H).

6. Lähtöainetta valmistettiin 2-(Z)-etoksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)etikkahaposta esimerkkien 15 23-52 toisessa osassa esitetyn menetelmän avulla, jolloin saatiin 3-atsidometyyli-7-^~(Z) -2-etoksi-imino-2-(2-trityy-liaminotiatsol-4-yyli)asetamido7kef-3-emi-4-karboksyyli-happoa, jolla oli seuraava NMR CDCl^issa 1,29 (t, 3H) ; 3,3 (d, 1H) ; 3,54 (d, 1H) ; 3,87 (d, 1H) ; 4,3 (q, 2H) ; 20 4,38 (d, 1H); 4,97 (d, 1H); 5,73 (q, 1H); 6,72 (s, 1H); 7,26 (m, 15H).

3-atsidometyyli-yhdiste pelkistettiin edellä esitetyn alaviitteen 3-menetelmällä lukuunottamatta sitä, että muurahaishappoa käytettiin liuottimena TFA:n sijas-25 ta, jolloin saatiin 3-aminometyyli-7-/2-(2-aminotiatsol- 4-yyli) -2- ((Z) - (etoksi-imino) asetamido«7kef-3-emi-4-kar-boksyylihappoa sen amfoteerisena muotona, jolla oli seuraava NMR liuottimessa A: 1,2 (t, 3H); 3,26 (d, 1H); 3,48 (br s, 2H); 3,68 (d, 1H)? 4,08 (q, 2H); 4,97 (d, 1H); 30 5,66 (d, 1H); 6,69 (s, 1H).

7. Lähtöainetta valmistettiin 2-/"(Ζ)-1-(t-butok-sikarbonyyli) syklobut-l-yylioksi-imino.7-2- (2-trityyliami-notiatsol-4-yyli)etikkahaposta esimerkkien 23-52 toisessa osassa esitetyn yleisen menetelmän mukaan, jolloin 35 saatiin 3-atsidometyyli-7-(2-^“(Z)-1-(t-butoksikarbonyy-li)syklobut-l-yylioksi-iminq7-2-/^-trityyliaminotiatsol- 70 80 043 4-yyli7asetamido)kef-3-emi-4-karboksyylihappoa, jolla oli seuraava NMR liuottimessa A: 1,38 (s, 9H) ; 1,78 (m, 1H); 1,89 (m, 1H); 2,35 (m, 4H); 3,45 (d, 1H); 3,63 (d, 1H); 3,9 (d, 1H); 4,38 (d, 1H); 5,13 (d, 1H) ; 5,76 5 (d, 1H); 6,68 (s, 1H); 7,18 - 7,37 (m, 15H).

Edellä mainittu 3-atsidometyylikefalosporiinin johdannainen pelkistettiin esimerkkien 23-52 toisessa osassa esitetyn yleisen menetelmän avulla, jolloin saatiin 3-aminometyyli-7-/2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-^2-((Z) -10 (1-karboksi)syklobut-l-yylioksi-imino)asetamido^kef-3-emi- 4-karboksyylihappoa, joka puhdistettiin osittain kromato-grafian avulla käyttämällä Diaion CHP20-hartsipylvästä ennen sen käyttämistä ilman enempää tunnistamista.

8. NMR liuottimessa A: 1,8 (m, 2H); 2,39 15 (m, 4H); 3,29 (d, 1H); 3,51 (d, 1H); 4,22 (d, 1H); 4,4 (d, 1H); 4,74 (d, 2H); 5,06 (d, 1H); 5,21 (d, 1H); 5,31 (d, 1H); 5,71 (d, 1H); 6,03 (m, 1H); 6,75 (s, 1H); 6,93 (d, 1H); 7,32 (d, 1H); 8,03 (d, 1H); 8,21 (d, 1H).

9. Valmistettu esimerkkien 54-62 standardimene- 20 telmän avulla lukuunottamatta sitä, että DMF korvattiin asetonitriilillä, sopivasta 3-aminometyylikefalosporii-nin johdannaisesta ja l-allyyli-4-klooripyridinium-toluee-ni-p-sulfonaatista, ja tuote puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä Diaion HP20SS-hartsia.

25 Esimerkit 68-80

Vedetöntä dikloorimetaania (5 ml) jäähdytettiin -10°:seen ja siihen lisättiin oksalyylikloridia (1,15 mil-limoolia) ja sen jälkeen DMF (1,15 millimoolia), ja seosta hämmennettiin välillä -15° . . .-10° yhden tunnin ajan.

30 Siihen lisättiin sen jälkeen 2-((Z)-2-atsidoetoksi-imino)- 2-(t-trityyliaminotiatsol-4-yyli)etikkahappoa (1 millimooli) ja sen jälkeen trietyyliamiinia (1,15 millimoolia) ja seosta hämmennettiin yhden tunnin ajan välillä -15°··· -10°.

Toisessa pullossa käsiteltiin liuosta, joka sisäl-35 si 7-amino-3-(l-metyyli-4-pyridinio)aminometyylikef-3- emi-4-karboksyylihappoa (1,15 millimoolia) sen osittaisena suolana 1,76 moolin kanssa TFA dimetyyliasetamidissa

II

7i 80043 (6 ml), trietyyliamiinin (2,08 millimoolia) kanssa ja ruusunpunainen suspensio ruiskutettiin pulloon, joka sisälsi aktivoidun hapon ja sen jälkeen lisättiin tri-etyyliamiinia (1,15 millimoolia). Sen jälkeen kun seos-5 ta oli hämmennetty yhden tunnin ajan -10°:ssa ja yhden tunnin ajan ympäristön lämpötilassa, seos suodatettiin. Liuos haihdutettiin kuiviin, trituroitiin EtOAc:n (50 ml) kanssa ja suodatettiin. Kiinteä tuote lisättiin TFA:han (15 ml), joka oli etukäteen jäähdytetty 0°:seen, ja seos-10 ta hämmennettiin tässä lämpötilassa 30 minuuttia ennen sen kaatamista veteen (150 ml) ja suodattamista. Suodos haihdutettiin pieneen tilavuuteen ja pH säädettiin välille 3-4 natriumbikarbonaatilla. Tuote erotettiin kromatogra-fian avulla käyttämällä Diaion CHP20P-hartsia (hiukkassuu-15 ruus 75-150 ^u) , ja eluointi suoritettiin käyttäen kasvavia asetonitriilin osuuksia vedessä. Sopivat fraktiot yhdistettiin, haihdutettiin pieneen tilavuuteen ja kuivattiin jäähdyttämällä, jolloin tuote saatiin sen amfoteeri-sessa muodossa.

20 Käyttämällä tätä yleistä menetelmää ja lähtemällä sopivasta suojatusta tiatsolihaposta saatiin seuraavat yhdisteet: H2N“( j = txS \ Z V„ 1 CO NH —jF f > ~ Y 0Χί J-CH2NH -£Vch3 ^ O— R I r

co(P

72 80043

Esimerkki R Saanto % Alaviitteet 68 -CH2CH2N3 49 1 69 -H 20 2 70 -CH2CH=CH2 20 3, 4 71 22 5, 6 72 -CH(CH3)2 34 3, 7 73 -CH2COOH 6 8/ g 74 O COOH 42 10, 11 75 -CH2C02CH3 16 12, 13 76 -CH2CH2OC2H5 7 12, 14, 15 77 -CH2C=CH 40 16 78 -CH2CH2NH2 29 17, 18, 19 ^CH2 79 -CH^-CH I 40 20 -ch2 80 -CH2CONH2 8 21 , 22 n 73 80043

Alaviitteet 1. NMR liuottimessa A: 3,24 (d, 1H) ; 3,48 (d, 1H); 3,56 (t, 2H); 3,86 (s, 3H); 4,18 (m, 3H); 4,43 (d, 1H); 5,0 (d, 1H); 5,61 (d, 1H); 6,79 (s, 1H); 6,89 5 (d, 1H); 7,41 (d, 1H); 8,03 (d, 1H); 8,2 (d, 1H).

2. Lähtöaineena käytettiin 2-(2-trityyliamino-tiatsol-4-yyli)-2-(Z)-trityylioksi-iminoetikkahappoa: NMR liuottimessa A: 3,34 (d, 1H) ; 3,61 (d, 1H) ; 3,87 (s, 1H); 4,31 (s, 2H); 5,12 (d, 1H); 5,77 (d, 1H); 6,85 10 (s, 1H); 6,97 (d, 2H); 8,11 (m, 2H).

3. Käytettiin standardimenetelmää lukuunottamatta sitä, että tiatsolihappo aktivoitiin käyttäen fosforipen-takloridia, suojauksen poisto suoritettiin hämmentämällä muurahaishapon kanssa 2,5 tuntia ja lopputuote erotettiin 15 kromatografiän avulla käyttäen Diaion HP20-hartsia, ja sen jälkeen HPLC:n avulla käyttäen eluenttina vesi:aseto-nitriili-seosta (80:20 til./til.).

4. NMR liuottimesta A: 3,38 (q, 2H); 3,84 (s, 3H); 4,31 (q, 2H); 4,56 (d, 2H); 5,01 (d, 1H); 5,2 20 (m, 2H); 5,62 (d, 1H); 5,9 (m, 1H); 6,72 (s, 1H); 6,9 (d, 1H); 7,31 (d, 1H); 8,05 (m, 2H).

5. Käytettiin alaviitteen 3 muunnettua menetelmää, mutta jätettiin lopullinen HPLC-puhdistus suorittamatta.

6. NMR liuottimessa A: 1,72 (m, 8H); 3,38 25 (q, 2H); 3,84 (s, 3H); 4,23 (d, 2H); 4,64 (m, 1H); 5,02 (d, 1H); 5,63 (d, 1H); 6,69 (s, 1H); 6,9 (d, 1H); 7,35 (d, 1H); 8,1 (m, 2H).

7. NMR liuottimessa A: 1,2 (d, 6H); 3,4 (q, 2H); 3,8 (s, 3H); 4,2 (m, 3H); 5,0 (d, 1H); 5,7 (d, 1H); 6,7 30 (s, 1H); 7,0 (m, 2H); 8,1 (m, 2H).

8. Käytettiin standardimenetelmää lähtemällä 2-((Z)-t-butoksikarbonyylimetoksi-imino)-2-(2-trityyliami-notiatso-4-yyli)etikkahaposta, joka aktivoitiin käyttämällä fosforipentakloridia.

35 9. NMR liuottimessa A: 3,38 (q, 2H); 3,85 (S, 3H); 4,3 (m, 2H); 4,48 (s, 2H); 5,0 (d, 1H); 5,65 (d, 1H); 6,81 (s, 1H); 6,9 - 7,3 (m, 2H); 8,05 (m, 2H).

74 80043 10. Käytettiin standardimenetelmää lähtemällä 2-/.(Z) -1- (t-butoksikarbonyyli) syklobut-l-yylioksi-imi-t\o7~2- (2-trityyliaminotiatsol-4-yyli) etikkahaposta, joka aktivoitiin käyttämällä fosforipentakloridia.

5 11. HilR liuottimessa A: 2,35 (m, 4H) ; 3,35 (q, 2H); 3,8 (s, 3H); 4,2 (m, 2H); 4,98 (d, 1H); 5,66 (d, 1H); 6,72 (s, 1H); 6,83 (m, 1H); 7,2 (m, 1H); 8,0 (m, 2H).

12. Käytettiin standardimenetelmää lukuunottamatta 10 sitä, että N-metyylimorfOliini korvattiin trietyyliamiinil- la emäksenä.

13. NMR liuottimessa A: 3,38 (q, 2H); 3,67 (s, 3H); 3,85 (s, 3H); 4,32 (q, 2H); 4,67 (s, 2H); 5,02 (d, 1H); 5,64 (d, 1H); 6,79 (s, 1H); 6,9 (m, 1H); 7,3 15 (m, 1H); 8,1 (m, 2H).

14. NMR liuottimessa A: 1,06 (t, 3H) ; 3,1 - 3,9 (m, 6H); 3,85 (s, 3H); 4,16 (t, 2H); 4,34 (q, 2H); 5.02 (d, 1H); 5,64 (d, 1H); 6,73 (s, 1H); 6,9 (m, 1H); 7.3 (m, 1H); 8,1 (m, lH).

20 15. Lähtöaineena käytettyä tiatsolihappoa valmis tettiin seuraavalla tavalla: Etyyli-(Z)-2-hydroksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)asetaattihydrokloridia (9,87 g) suspendoitiin DMF:än (50 ml) ja käsiteltiin kaliumkarbonaatilla (5,52 g) ja 2-bromietyylietyylieette-25 rillä (2,25 ml). Sen jälkeen kun seosta oli hämmennetty 10 päivää ympäristön lämpötilassa, se laimennettiin vedellä ja jatkokäsiteltiin tavanomaiseen tapaan uuttamalla EtOAcihen, ja suorittamalla sen jälkeen kromatografia piihappoa käyttäen ja eluoimalla CI^C^:EtOAc-seoksella 30 98:2 (til./til.). Etyyliesteri liuotettiin 1,2-dimetoksi- etaaniin (12 ml), liuokseen lisättiin 2-n NaOH:n vesi-liuosta (8,9 ml) ja seosta kuumennettiin palautusjäähdyt-täjää käyttäen 2 tuntia. Seos jäähdytettiin 0°:seen, sakka suodatettiin, pestiin dimetoksietaani/vesi-seoksella (1:1, 35 til./til 2 x 10 ml) , sen jälkeen dimetoksietaani/eetteri- il 75 8 0 0 4 3 seoksella (1:1, til./til.; 10 ml). Sakka suspendoitiin DMSOrhon (50 ml), hapotettiin 2-n HCl:llä (10 ml) ja laimennettiin vedellä (500 ml). Sakka erotettiin suodattamalla, pestiin hyvin vedellä ja kuivattiin, jol-5 loin saatiin 2-((Z)-2-etoksietoksi-imino)-2-(2-trityy-liaminotiatsol-4-yyli)etikkahappoa, jolla oli seuraava NMR CDCl3:ssa : 1,07 (t, 3H); 3,43 (q, 2H); 3,62 (t, 2H); 4,23 (t, 2H); 6,5 (s, 1H); 7,27 (s, 15H).

16. NMR liuottimessa A: 3,29 (d, 1H); 3,32 10 (t, 1H); 3,58 (d, 1H); 3,9 (s, 3H); 4,23 (d, 1H); 4,5 (d, 1H); 4,72 (d, 2H); 5,07 (d, 1H); 5,68 (d, 1H); 6,82 (s, 1H); 7,0 (m, 1H); 7,3 (m, 1H); 8,1 (m, 2H).

17. Käytettiin standardimenetelmää ja lähtöaineena 2-((Z)-2-t-butoksikarbonyyliaminoetoksi-imino)-2-(2- 15 trityyliaminotiatsol-4-yyli)etikkahappoa; tuote erotettiin mono-TFA-suolana.

18. NMR liuottimessa A: 3,12 (t, 2H); 3,22 (d, 1H); 3,52 (d, 1H); 3,83 (s, 3H); 4,3 (m, 4H); 5,0 (d, 1H); 5,63 (d, 1H); 6,79 (s, 1H); 6,9 (m, 1H); 7,1 20 (m, 1H) ; 8,05 (m, 2H) .

19. Lähtöainetta valmistettiin seuraavalla tavalla. Käyttäen alaviitteen 15 menetelmää etyyli-2-((Z)-bromietoksi-imino)-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)ase-taattia valmistettiin 1,2-dibromietaanista ja reagoitet- 25 tiin natriumatsidin kanssa DMF-liuoksessa.

Puhdistus kromatografiän avulla antoi etyyli-2-((Z)-2-atsidoetoksi-imino)-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)asetaattia, joka liuotettiin 1,2-dimetoksietaaniin ja hydrattiin käyttämällä 5-%:ista (paino/paino) palla- 30 dium-hiilellä-katalysaattoria ympäristön lämpötilassa ja paineessa 16 tuntia. Katalysaattori erotettiin suodattamalla ja liuosta käsiteltiin bis(O-t-butyyli)hiilihappo-anhydridin kanssa ympäristön lämpötilassa. 48 tunnin kuluttua reaktion jatkokäsittely suoritettiin tavanomai- 35 seen tapaan ja tuote erotettiin kromatografiän avulla pii-happogeeliä käyttäen ja eluoimalla heksaani/EtOAc-seok- 76 80043 sella 60:40 (til./til.) Etyyliesteri saippuoitiin (katso alaviitettä 15), jolloin saatiin 2-((Z)-2-t-butoksikarbonyyliaminoetoksi-imino)-2-(2-trityyliamino-tiatsol-4-yyli)etikkahappoa, jolla oli seuraava NMR 5 CDC13:ssa : 1,33 (s, 9H); 3,37 (m, 2H); 4,27 (t, 2H); 5,38 (br s, 1H); 6,59 (s, 1H); (s, 1H); 7,29 (m, 16H).

20. NMR liuottimessa A: 0,2 - 0,6 (m, 4H); 1,15 (m, 1H); 3,18 (d, lH); 3,49 (d, 1H); 3,85 (s+d, 5H); 10 4,15 (d, 1H); 4,45 (d, lH); 4,99 (d, lH); 5,6 (d, 1H); 6,69 (s, 1H); 6,9 (m, 1H); 7,4 (m, 1H); 8,1 (m, 2H).

21. (Z)-2-karbamoyylimetoksi-imino-2-(2-trityyli-aminotiatsol-4-yyli)etikkahappoa (486 mg), 1-hydroksibent-sotriatsolia (156 mg) ja disykloheksyylikarbodi-imidiä 15 (206 mg) pantiin kuivaan pulloon argon-kaasun alaisena ja liuotettiin dimetyyliasetamidiin (4 ml). Seosta hämmennettiin 40 minuuttia, jolloin saatiin aktivoitua esteriä, joka sen jälkeen reagoitettiin standardiolosuh-teissa 7-aminokefalosporiinin kanssa.

20 2. NMR liuottimessa A: 3,19 (d, 1H); 3,49 (d, 1H); 3,82 (s, 3H); 4,37 (m, 4H); 4,99 (d, 1H); 5,65 (d, 1H); 6,8 (s, 1H); 7,2 (m, 2H); 8,0 (m, 2H).

Kefalosporiini-lähtöainetta voitiin saada seuraa-valla tavalla: 25 7-amino-3-atsidometyylikef-3-emi-4-karboksyylihap- poa (170 g) suspendoitiin samalla hämmentäen veteen (750 ml) ja natriumbikarbonaattia (60 g) lisättiin varovaisesti ja sen jälkeen t-butanolia (750 ml). Bis(O-t-butyyli)hiilihap-poanhydridiä (170 ml), joka oli liuotettu t-butanoliin 30 (375 ml), lisättiin ja seosta hämmennettiin ympäristön läm- pötilassaj lisäannokset reagenssia (20 ml) t-butanolissa (40 ml) lisättiin 24 ja 48 tunnin kuluttua. 72 tunnin jälkeen t-butanoli poistettiin haihduttamalla ja vesipitoinen jäännös, joka oli laimennettu vedellä 21°:seen, jääh- 35 dytettiin jäissä. pH säädettiin arvoon 3 väkevällä kloo-rivetyhapolla ja sakka suodatettiin ja pestiin vapaaksi 77 80043 haposta. Tyhjössä suoritetun kuivauksen jälkeen raaka tuote uutettiin perättäin yhdellä 500 ml:n ja kahdella 400 ml:n suuruisella erällä asetonitriiliä. Yhdistetyt uutokset haihdutettiin pieneen tilavuuteen ja suodatet-5 tiin, jolloin saatiin 3-atsidometyyli-7-t-butoksikarbo-nyyliaminokef-3-emi-4-karboksyylihappoa (84 g) , jolla oli seuraava NKR liuottimessa A: 1,4 (s, 9H); 3,5 (d, 2H); 4,2 (d, 2H); 5,0 (d, 1H); 5,4 (d, 1H).

Edellä mainittu kefalosporiini (84 g) liuotet-10 tiin etikkahappoon (750 ml) ja jäähdytettiin 15°:seen; tähän lisättiin aktivoitua sinkkiä (77 g) annoksittain 10 minuutin kuluessa säätäen eksotermista reaktiota niin, että lämpötila pysyi 30°:n alapuolella. Sen jälkeen kun seosta oli hämmennetty 30 minuuttia, se laimennettiin 15 vedellä (700 ml), suodatettiin ja suodatuskakku pestiin kolmella erällä HOAc/vesi-seosta (l: 1 til./til.J 150 ml). Suodosta hämmennettiin ja rikkivetyä johdettiin siihen yhden tunnin ajan ja sen jälkeen huuhdeltiin typpikaasu-virralla ennen suodattamista piimään läpi, jonka jälkeen 20 lopuksi suodatuskakku pestiin hyvin. Suodos haihdutettiin pieneen tilavuuteen ja suodatettiin, jolloin saatiin 3-ami-nometyyli-7-t-butoksikarbonyyliaminokef-3-emi-4-karboksyy-lihappoa (55 g) amfoteerisessä muodossa, jolla oli seuraava NMR dgDMSO:ssa : 1,38 (s, 9H); 3,17 (d, 1H); 3,44 25 (d, 2H); 3,55 (d, 1H); 4,85 (d, 1H); 5,31 (d, 1H); 7,76 (d, 1H).

3-aminometyyli-7-t-butoksikarbonyyliaminokef-3-emi- 4-karboksyylihappoa (16,3 g) hämmennettiin DMFtssä (350 ml) jääkylvyssä samalla kun siihen lisättiin natriumbikar-30 bonaattia (8,4 g) vedessä (170 ml). Liuos, joka sisälsi 4-kloori-l-metyylipyridiniumjodidia (25,4 g) DMF:ssä (200 ml) lisättiin ja seosta hämmennettiin 5 tuntia antaen lämpötilan kohota ympäristön lämpötilaan. Pelkistyksen jälkeen pH säädettiin arvoon 6 HOAc:llä, liuottimet 35 haihdutettiin pois ja jäännös liuotettiin veteen (500 ml).

pH säädettiin arvoon 7 ja liuos lisättiin Diaion HP20-hart- 78 80043 sipylvääseen (1 litra), joka oli kasteltu vedellä, ja joka eluoitiin peräkkäisesti vedellä ja vesi/asetoni-seoksilla 90:10 ja 80 :10 (til./til .J. Ne fraktiot, jotka sisälsivät tuotetta, yhdistettiin, haihdutettiin ja jään-5 nöstä trituroitiin asetonitriilin kanssa, jolloin saatiin 7-t-butoksikarbonyyliamino-3-(1-metyylipyridinio)amino-metyylikef-3-emi-4-karboksyylihappoa (13,7 g) sen amfo-teerisenä muotona, jolla oli seuraava NMR liuottimes-sa A: 1,4 (s, 9H); 3,5 (d, 2H); 3,8 (s, 3H); 4,3 (d, 2H); 10 5,0 (d, 1H); 5,4 (dd, 1H); 6,9 (m, 2H); 7,7 (d, 1H); 8,1 (m, 2H).

Edellä mainittu kefalosporiini (13,7 g) lisättiin samalla hämmentäen TFA:han (50 ml, joka oli jäähdytetty vesikylvyssä. 30 minuutin kuluttua liuotin haihdutettiin 15 pois ja jäännöstä trituroitiin eetterin kanssa (4 liuottimen vaihtoa). Kiinteä aine suodatettiin, pestiin hyvin eetterillä ja kuivattiin kaliumkarbonaatin avulla suur-tyhjössä, jolloin saatiin 7-amino-3-(1-metyylipyridi-nio)aminometyylikef-3-emi-4-karboksyylihappoa (17,2 g) 20 osittaisena suolana 1,76 moolin kanssa TFA, jolla suolalla oli seuraava NMR liuottimessa A: 3,5 (s, 2H); 3,8 (s, 3H); 4,4 (d, 2H); 5,1 (dd, 2H); 6,9 (d, 2h); 8,1 (dd, 2H).

Esimerkit 81-82 25 Sopivaa 3-aminometyylikefalosporiinijohdannaista reagoitettiin 4-kloori-l-metyylipyridiniumjodidin kanssa, jolloin saatiin seuraavat yhdisteet:

(D) H H

HO —V CH CONH ^-Y ^ I I /γ-^θ NH N Y^-CH2NH-^Ji-CH3 COR COO^

II

79 80043

Esimerkki R ,_Saantp_% Alaviitteet

O

81 -N N-C2H5 78 1, 2, 3

OH

,u 82 y=° 6 4-5-6

N —N H

Alaviitteet 1. Menetelmä suoritettiin DMFrssä, samalla kun läsnä oli 3 ekvivalenttia NaHCO^, 3,5 tunnin ajan ympä- 20 ristön lämpötilassa. Reaktioseosta jatkokäsiteltiin lisäämällä HOAc ja tuote puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen HP20-hartsia ja eluenttina MeOH/vesi-seosta ((0:100)-(40:60) til./til.).

2. NMR liuottimessa B: 1,08 (t, 3H); 3,2 -25 3,8 (m, 6H); 3,9 (s, 3H); 4,3 (m, 2H); 5,05 (d, 1H); 5,55 (m, 1H); 5,75 (m, 1H); 6,75 (d, 2H); 7,25 (d, 2H); 6,85 - 7,15 (m, 2H); 8,0 - 8,4 (m, 2H).

3. Lähtöainetta voitiin saada seuraavalla tavalla. Liuokseen, joka sisälsi D-(-)-2-/(4-etyyli-2,3-diok- 30 sopiperatsin-l-yyli) -karbonyyliamino-/-2- (4-hydroksife-nyyli)etikkahappoa (1,8 g) asetonitriilissä (1,6 ml) ja dimetyyliasetamidissa (8,0 ml), lisättiin typpiatmosfää-rin alaisena tipottain seos, joka sisälsi trikloorimetyy-liklooriformiaattia (342 ^,ul) ja asetonitriiliä (1 ml) 35 15 minuutin kuluessa -20°:ssa. Tunnin kuluttua lisättiin tipottain liuos, joka sisälsi 7-amino-3-atsidometyyli-kef- 3-emi-4-karboksyylihappohydrokloridia (1,4 g) dimetyyli- 80 80043 asetamidissa (6 ml) ja trikloorimetyylisilaanissa (305 ^,ul) , 10 minuutin kuluessa -20°:ssa. Saatu seos pidettiin -20°:ssa 90 minuuttia ja sen jälkeen väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa 30°:n alapuolella. Tähän jäännökseen lisättiin 5 liuos, joka sisälsi NaHCO^ (1/2 g) vedessä (14 ml). Yhden tunnin kuluttua lisättiin lisää vettä ja seos jäähdytettiin jäissä. Saostunut kiinteä aine koottiin ja puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen HP20-hartsipylvästä ja eluent-tina MeOH/vesiseoksia {(o : 100) - (15 : 85^ til./til.), jolloin saa-10 tiin 7-asyyliamino-3-atsidometyylikefalosporiinijohdannaista. NMR liuottimessa A: 1,08 (t, 3H); 3,2 - 4,02 (m, 6H); 3,78 (d, 1H); 4,44 (d, 1H); 4,94 (d, 1H); 5,48 (d, 1H); 5,62 (d, 1H); 6,75 (d, 2H); 7,25 (d, 2H); 9,7 (d, 1H).

Edellä mainittu 3-atsidometyylijohdannainen (150 mg) 15 MeOH:ssa (15 ml) ja 2-n HCl:n vesiliuoksessa (175 ^ul) hyd-rattiin käyttämällä 100~%:ista (paino/paino) palladium-hiilellä-katalysaattoria (50 mg) ympäristön lämpötilassa ja 4 ilmakehän paineessa. 5 tunnin kuluttua lisättiin lisää katalysaattoria (50 mg). Hämmentämistä jatkettiin 2 tun-20 tia, seos suodatettiin piimään läpi ja suodos haihdutettiin.

Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttän HP20-hart-sia ja eluenttina MeOH/vesi-seoksia ((0 : lOo) - (20 :80) til./til.), jolloin saatiin 7-asyyliamino-3-aminometyylikefalosporiinin johdannaista hydrokloridina. NMR liuottimessa F: 1,08 25 ( 3H); 3,1 - 4,08 (m, 8H); 5,0 (d, 1H); 5,54 (m, 1H); 5,73 (d, 1H); 6,75 (d, 2H); 7,25 (d, 2H).

4. Menetelmä suoritettiin vesi/DMF seoksessa 1:3 til./til., samalla kun läsnä oli 4,5 ekvivalenttia NaHCO^, 75 minuutin ajan ympäristön lämpötilassa. Vielä yksi ekvi-30 valentti NaHCO^ lisättiin ja reaktioseosta jatkokäsitel-tiin 45 minuutin kuluttua haihduttamalla se kuiviin. Tuote saostettiin MeOH-liuoksesta eetterillä ja puhdistettiin edelleen HPLC:n avulla käyttäen oktadekyylisilaanipylväs-tä ja eluenttina MeOH/vesi/HOAC-seosta (15:84 :1 til./til./til.).

il ei 80043 5. NMR liuottimessa B: 3/45 (m, 2H); 3,91 (s, 3H); 4,32 (m, 2H); 5,05 (d, 1H); 5,73 (br s, 1H); 5,77 (d, 1H); 6,74 (d, 2H); 6,86 - 7.14 (m, 2H); 7,29 (d, 2H); 7,97 - 8,4 (m, 2H).

5 6. Lähtöainetta voitiin saada seuraavalla tavalla.

Hämmennettyyn liuokseen, joka sisälsi 3,5-dihydroksi-6-karboksi-1,2,4-triatsiinia (475 mg) DMF:ssä (30 ml), lisättiin typpiatmosfäärin alaisena -15°:ssa trietyyliamii-nia (0,45 ml) ja isobutyyliklooriformiaattia (0,41 ml).

10 Lämpötila pysytettiin -15°:ssa yhden tunnin ajan ja sen jälkeen ympäristön lämpötilassa yhden tunnin ajan. Liuos jäähdytettiin uudelleen -15°:seen ja siihen lisättiin liuos, joka sisälsi 3-atsidometyyli-7-/b-2-amino-2-(4-hydroksifenyyli)asetamido/kef-3-emi-4-karboksyylihappoa 15 (1,22 g) ja trietyyliamiinia (0,42 ml) vedessä (15 ml).

Sen jälkeen kun seosta oli hämmennetty tunnin ajan -15°:ssa, hämmennettiin sitä ympäristön lämpötilassa 24 tuntia. Liuos haihdutettiin ja jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen HP20-hartsia ja eluenttina MeOH/vesi seoksia 20 ((o : 100^ - (50 : 50) til./tilBis-trietyyliamiinisuolan NMR

liuottimessa B: 1,2 (t, 6H); 3,12 (q, 4H); 3,53 (m, 2H); 3,89 (d, 1H); 4,42 (d, 1H); 5,08 (d, 1H); 5,6 - 5,9 (m, 2H); 6,74 (d, 2H); 7,28 (d, 2H); 9,46 (m, 1H).

Liuosta, joka sisälsi edellämainitun 3-atsidometyy-25 lijohdannaisen (373 mg) MeOH:ssa (10 ml) ja 6-n HCl:n vesiliuoksessa (0,25 ml), hydrattiin käyttäen 10-%:ista (paino/paino) palladium-hiilellä-katalysaattoria (180 mg) ympäristön lämpötilassa ja 4 ilmakehän paineessa. 3 tunnin kuluttua lisättiin toinen erä (90 mg) katalysaatto-30 ria. Kahden tunnin kuluttua seos suodatettiin piimään läpi, suodos haihdutettiin ja jäännös puhdistettiin kroma-tografian avulla käyttäen HP20-hartsia ja eluenttina vettä. NMR liuottimessa B: 3,55 (m, 2H); 3,72 (m, 2H); 5,02 (d, 1H); 5,71 (m, 1H); 5,76 (d, 1H); 6,74 (d, 2H); 35 7,23 (d, 2H).

82 80043

Esimerkit 83-90

Esimerkeissä 23-52 esitetty yleinen menetelmä toistettiin käyttämällä sopivaa heterosyklistä lähtöainetta. Reaktiot suoritettiin DMF:ssä trietyyliamiinin tai DMF/ vesi-seosten läsnäollessa samalla kun läsnä oli NaHCO^, lämpötilassa, joka oli ympäristön lämpötilan ja 90°C:n välillä, 1-20 tuntia. Tuote puhdistettiin käyttäen oktade-kyylisilaanipylvästä ja tällä tavoin valmistettiin seuraa-vat yhdisteet:

/S— H H

H?N—(v 1 VS\.

* V I CO -NH-j-p | ϊ" qJ— N ch^nh-r

n T

O -C (CH^) COO^ 80043 83

Esimerkki R Saanto % Alaviitteet ch3 /N ~| 83 / j 11 1, 2, 3 ch3 ν~Λ ί+Ν 84 “O-CHj 26 4' 5' 6 CH3 chq ^N — 85 -U | 13 7, 2, 8 xs - CH0 (£ 1 3 85 ? 32 9, 10, 11 \=L ch3 87 -—(? N 23 12, 13, 14 CK3 "H2-0

<± L

88 // | 20 15, 16, 17 \ S_

S

v—N-CH- 89 ~\ | 12 18, 19, 20, SJ 21 -N CH, 90 —y 47 22, 5, 23 04 80043

Alaviitteet 1. Lähtöaineena 2-kloori-l,3-dimetyyli-imidatso-liumjodidi.

2. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc-seos (20:79:1 5 til./til./til.).

3. NMR liuottimessa B: 1,49 (br s, 6H); 3,6 (br s, 8H); 4,1 - 4,2 (m, 2H); 5,06 (d, 1H); 5,73 (d, 1H); 6,75 (s, 1H); 7,19 (s, 1H).

4. Lähtöainetta voitiin valmistaa seuraavalla ta- 10 valla. 4-kloori-6-metyylipyrimidiiniä reagoitettiin tri- metyylioksoniumtetrafluoriboraatin kanssa Cl^C^iSsa ympäristön lämpötilassa 18 tuntia, jonka jälkeen kuumennettiin palautusjäähdyttäjää käyttäen MeOH:ssa 24 tuntia, jolloin saatiin 4-kloori-l,6-dimetyylipyridinium- ja 4-kloori- 15 3,6-dimetyylipyridiniumtetrafluoriboraattien seosta.

5. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc-seos (l5 :84:1 til. /til. /til.).

6. Yksi ainoa isomeerinen tuote NMR liuottimessa B: 1,52 (s, 3H) ; 1,55 (s, 3H) ; 2,55 (s, 3H) , 20 3,45 (m, 2H); 3,77 (s, 3H); 4,35 (d, 1H); 4,75 (d, 1H); 5,16 (d, 1H); 5,87 (d, 1H) ; 6,8 (s, 1H) ; 7,0 (s, 1H) ; 8,8 (s, 1H).

7. Lähtöainetta voitiin valmistaa reagoittamalla 2- bromitiatsolia ja trimetyylioksoniumtetrafluoriboraat- 25 tia C^C^Jssa 18 tuntia ympäristön lämpötilassa, jolloin saatiin 2-bromi-3-metyylitiatsoliumtetrafluoriboraattia.

8. NMR liuottimessa B: 1,54 (s, 3H); 1,55 (s, 3H); 3,6 (m, 2H); 3,66 (s, 3H); 4,48 (brs, 2H); 5,18 (d, 1H); 5,87 (d, 1H); 7,0 (s, 1H); 7,13 (d, 1H); 7,53 30 (s, 1H).

9. Lähtöainetta voitiin valmistaa reagoittamalla 3- metoksi-5-metyyli-isoksatsolia trimetyylioksoniumtetra-fluoriboraatin kanssa CH2Cl2:ssa 3,5 tuntia palautusjäähdyttä jää käyttäen, jolloin saatiin 2,5-dimetyyli-3-metok- 35 si-isoksatsoliumtetrafluoriboraattia.

(I

85 80043 10. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc-seos (23 : 76 :1 til. /til. /til.).

11. NMR liuottimessa B: 1,53 (s, 1H); 1,54 (s, 1H); 2,42 (s, 3H); 3,56 (m, 2H); 3,85 (s, 3H); 4,39 5 (brs, 2H), 5,18 (d, 1H); 5,88 (d, 1H); 6,68 (s, 1H); 7,01 (s, 1H).

12. Lähtöainetta voitiin valmistaa seuraavalla tavalla. 4-kloori-6-metyylipyrimidiiniä ja 0-(2,4,6-trime-tyyli)bentseenisulfonyylihydroksyyliamiinia reagoitettiin 10 C^C^s-sa 4 tuntia ympäristön lämpötilassa, jolloin saatiin 3-amino-4-kloori-6-metyylipyrimidinium-2,4,6-trime-tyylibentseenisulfonaattia. Kuumentamalla tätä yhdistettä MeOH:ssa palautusjäähdyttäjää käyttäen 5 tuntia saatiin 3-amino-4-metoksi-6-metyylipyrimidinium-2,4,6-trimetyyli- 15 bentseenisulfonaattia.

13. HPLC eluenttina MeOH/vesi/HOAc-seos (18:81:1 til. /til. /til.).

14. NMR. liuottimessa B: 1,54 (s, 3H) ; 1,55 (s, 3H); 2,18 (s, 3H); 2,52 (s, 6H); 3,56 (m, 2H); 4,3 20 (d, 2H); 4,75 (d, 2H); 5,18 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 6,78 (s, 3H); 7,06 (s, 1H); 8,75 (s, 1H).

15. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla keskenään ekvimolaariset määrät 2-bromitiatsolia ja bentsyy-libromidia ympäristön lämpötilassa 4 tuntia, jolloin saa- 25 tiin 2-bromi-3-bentsyylitiatsoliumbromidia.

16. HPLC eluenttina MeOH/natriumbikarbonaatin vesiliuos (pH 6,0) (30: 70 til./til.).

17. NMR liuottimessa B: 1,54 (s, 6H); 3,4 (m, 2H); 4,5 (m, 2H)? 5,16 (d, 1H); 5,36 (s, 2H); 5,9 (d, 1H); 7,0 - 30 7,6 (m, 8H).

18. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla 5-kloo-ritiatsolia trimetyylioksoniumtetrafluoriboraatin kanssa C^C^JSsa ympäristön lämpötilassa 3 tuntia, jolloin saatiin 5-kloori-3-metyylitiatsoliumtetrafluoriboraattia.

35 19. Reaktiotuote puhdistettiin ensiksi kromatogra- fian avulla käyttäen HP20-hartsia ja eluenttina vesi/CH^CN-seoksia |l00 : o) - (60 : 4θ) til. /til.).

86 80043 20. HPLC eluenttina MeOH/natriumbikarbonaatin vesiliuos (pH 6,0).

21. NMR liuottimessa B: 1,52 (s, 3H); 1,55 (s, 3H); 3,49 (m, 2H); 3,91 (s, 3H); 5,19 (d, 1H); 5,27 5 (d, 1H); 5,96 (d, 1H); 5,59 (d, 1H); 6,94 (s, 1H); 8,06 (s, 1H); 9,49 (s, 1H).

22. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla 2-metoksipyrimidiiniä trimetyylioksoniumtetrafluoriboraa-tin kanssa CH2Cl2:ssa ympäristön lämpötilassa 4 tuntia, 10 jolloin saatiin l-metyyli-2-metoksipyrimidiniumtetrafluo- riboraattia.

23. NMR liuottimessa B: 1,5 (s, 6H) ; 3,45 (d, 1H); 3,7 (d, 1H); 3,82 (s, 3H); 4,44 (d, 1H); 4,95 (d, 1H); 5,15 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 7,05 (s, 1H); 7,0 - 15 7, 25 (m, 1H); 8,6 - 8,95 (m, 2H).

Esimerkit 91-99

Esimerkeissä 68-80 esitetty yleinen menetelmä toistettiin käyttäen lähtöaineena sopivaa suojattua aktivoitua happoa ja tällöin saatiin seuraavat yhdisteet: R1 h2s-> I f Ls.

NK —-11

Il /r_ N -CH ^NH —(f ^N-CH

K 2 ~\^ 3 °-R2 lCOOe 11 87 80043

Esimerkki A R1 R2 Saanto % Alaviitteet S H “CH2CH2Br 4 1, 2 92 0 H -CH3 25 3, 4, 5, 6 __y CH3 93 S H I 27 7. 4, 8 N— 0

/N-N

S H "ch2“^nJ{, 10 9, 4, 10

H

95 S H ~CH2-(2> 15 11, 4, 12 96 S H -CH2CN 2 13, 4, 14 97 S Br _CH3 9 15, 16, 4, 17 " S H -CH2CH2C1 8 18, 4, 19

99 S Cl -CH

1 CH3 7 20, 16, 4, 21 88 80043

Alaviitteet 1. Lähtöaine, 2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-2-((Z)-2-bromietoksi-imino)etikkahappo (GB-patenttiha-kemus 2017702A) aktivoitiin trikloorimetyylikloorifor- 5 miaatilla ja kefalosporiini silyloitiin trimetyylisilyy-likloridilla.

2. NMR liuottimessa A: 3,3 - 3,8 (m, 4H); 3,9 (s, 3H); 4,2 - 4,5 (m, 4H); 5,05 (d, 1H); 5,67 (d, 1H); 6,83 (s, 1H); 6,95 (m, 1H); 7,42 (m, 1H); 8,14 (m, 2H).

10 3. Lähtöaineena oli 2-(2-t-butoksikarbonyyliami- no-oksatsol-4-yyli)-2-((Z)-metoksi-imino)etikkahappo (GB-patenttihakemus 2106519A).

4. Käytettynä emäksenä oli N-metyylimorfoliini.

5. Suojauksen poisto suoritettiin TFA/anisoli- 15 seoksen avulla.

6. NMR liuottimessa A: 3,42 (q, 2H); 3,88 (s, 3H); 4,34 (q, 2H); 5,02 (d, 1H); 5,64 (d, 1H); 6,96 (m, 1H); 7,38 (m, 1H); 7,5 (s, 1H); 8,16 (m, 2H).

7. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla 20 etyyli-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-2-((Z)-hydrok- si-imino)asetaattia 3-kloorimetyyli-5-metyyli-isoksat-solin kanssa, jonka jälkeen hydrolysoitiin saatu esteri, jolloin saatiin 2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-2-/(Z)-2- (5-metyyli-isoksatsol-3-yyli) metoksi-imino.7-etikkahap- 25 poa. NMR CDCl3:ssa : 2,32 (s, 3H) ; 5,21 (s, 2H) ; 6,35 (s, 1H); 6,61 (s, 1H); 7,29 (s, 15H).

8. NMR liuottimessa A: 2,38 (s, 3H); 3,48 (q, 2H); 3,9 (s, 3H); 4,35 (s, 2H); 5,15 (d, 1H); 5,2 (s, 2H); 5,82 (d, 1H); 6,34 (s, 1H); 6,98 (s, 1H)? 7,0 30 (m, 2H); 8,2 (m, 2H).

9. Lähtöaineena oli 2-(2-trityyliaminotiatsol- 4-yyli)-2-f(Z)-2-(tetrasol-5-yyli)metoksi-imino^etikka-happo (GB-patenttihakemus 2017702A).

10. NMR liuottimessa A: 3,37 (q, 2H); 3,9 35 (s, 3H); 4,36 (q, 2H); 5,04 (d, 1H); 5,42 (s, 2H); 5,71 (d, 1H); 6,87 (s, 1H); 6,96 (m, 1H); 7,36 (m, 1H); 8,16 (m, 2H).

Il 89 80043 11. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla etyyli-2-(2-trityyliaminotiatso-4-yyli)-2-((Z)-hydroksi-imino)asetaattia bentsyylibromidin kanssa ja hydrolysoimalla sen jälkeen esteri, jolloin saatiin 2-(2-trityyliami- 5 notiatsol-4-yyli)-2-((Z)-bentsyylioksi-imino)etikkahappoa; NMR liuottimessa C: 5,44 (s, 2H); 6,69 (s, 1H); 7,2 - 7,7 (m, 20H).

12. NMR liuottimessa A: 3,54 (q, 2H); 3,96 (s, 3H); 4,4 (q, 2H); 5,21 (d, 1H); 5,32 (s, 2H); 5,86 10 (d, 1H); 7,06 (s, 1H); 7,44 (m, 5H); 6,9 - 8,5 (m, 4H).

13. Lähtöaineena oli 2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-2-((Z)-syanometoksi-imino)etikkahappo (GB-patentti-hakemus 2017702A).

14. NMR liuottimessa A: 3,37 (q, 2H); 3,9 (s, 3H); 15 4,36 (q, 2H); 4,98 (s, 2H); 5,05 (d, 1H); 5,65 (d, 1H); 6,92 (s, 1H); 6,8 - 8,4 (m, 4H).

15. Lähtöainetta valmistettiin formyloimalla ja bro-maamalla peräkkäisesti etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2- ((Z)-metoksi-imino)asetaattia ja hydrolysoimalla sen jälkeen 20 esteri, jolloin saatiin 2-(5-bromi-2-formyyliaminotiatsol- 4-yyli)-2-((Z)-metoksi-imino)etikkahappoa, NMR dgDMSO:ssa: 3,97 (s, 3H); 8,55 (s, 1H).

16. Suojauksen poistaminen suoritettiin HCl:n väkevän vesiliuoksen ja MEOH:n seoksella.

25 17. NMR liuottimessa A: 3,5 (m, 2H); 3,9 (s, 3H); 4,32 (m, 2H); 5,14 (d, 1H); 5,8 (d, 1H); 6,89 (m, 2H); 7,2 (m, 2H).

18. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla etyy-li-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-2-((Z)-hydroksi-imino)-30 asetaattia l-bromi-2-kloorietaanin kanssa ja hydrolysoimalla sen jälkeen esteri, jolloin saatiin 2-(2-trityyliamino-tiatsol-4-yyli)-2-£{ Z)-(2-kloorietoksi)imino7etikkahappoa.

NMR liuottimessa C: 3,75 (t, 2H); 4,36 (t, 2H); 6,64 (s, 1H) ; 7,35 (s, 15H) .

35 19. NMR liuottimessa A: 3,39 (m, 2H); 3,89 (s, 3H); 4,28 (m, 2H); 5,04 (d, 1H); 5,68 (d, 1H); 6,84 (s, 1H); 6,92 (m, 2H); 7,46 (m, 2H).

90 80043 20. Lähtöainetta valmistettiin formyloimalla ja klooraamalla peräkkäisesti etyyli-2-(2-aminotiatsol- 4-yyli)-2-((Z)-metoksi-imino)asetaattia ja hydrolysoimalla sen jälkeen esteri, jolloin saatiin 2-(5-kloori- 5 2-formyyliaminotiatsol-4-yyli)-2-((Z)metoksi-imino)etik- kahappoa. NMR liuottimessa C: 3,99 (s, 3H); 8,5 (s, 1H).

21. NMR liuottimessa A: 3,5 (q, 2H); 3,87 (s, 6H); 4,32 (s, 2H); 5,12 (d, 1H); 5,79 (d, 1H); 6,99 (m, 2H); 8,16 (m, 2H).

10 Esimerkit 100-103

Liuos, joka sisälsi NaHCO^ (0,54 millimoolia) vedessä (1,5 ml), lisättiin liuokseen, joka sisälsi 7-asyy-li-3-aminometyylikefalosporiinijohdannaista (0,135 millimoolia) DMF:ssä (4 ml), ja jonka lämpötila oli 0°, ja sen 15 jälkeen muutaman minuutin kuluttua 1-(2-t-butoksikarbonyy-li-aminoetyyli)-4-klooripyridiniumtolueeni-p-sulfonaattia (0,16 millimoolia). Lämpötilan annettiin kohota ympäristön lämpötilaan viiden tunnin kuluessa ja liuotin haihdutettiin pois.

20 Jäännös liuotettiin CI^C^/TFA-seokseen (1:1 til./til.). Tunnin kuluttua seos haihdutettiin kuiviin ja jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä Diaion HP20-hartsia.

Yleistä menetelmää käyttäen valmistettiin seuraavat 25 yhdisteet: ,S — / , H IJ g

H2N V I CO— NH—i Y 'N

I 1 (Γ X__N H-NH -(' N-R0 n' 1 \ , 1

N — O R1 0 T

COOc

II

si 80043 R, R,

Esimerkki ^ o . -, .....

- - -- saanto % Alaviitteet 100 -CH2CH2CN -CH2CH2NH2 27 1 5 101 -CH2CH2OH -CH2CH2NH2 39 2, 3

COOH

102 -CH2CH2S-^\ -CH3 64 4, 5 103 -CH2CH2C1 -CH2CH2NH2 47 2, 6 10

Alaviitteet 1. NMR liuottimessa A: 3,2 - 3,9 (m, 6H) ; 4,36 (m, 2H) ; 5,06 (s, 2H) ; 5,18 (d, 1H) ; 5,81 (d, 1H) ; 7,04 15 (s, 1H); 7,1 (m, 2H); 8,2 (m, 2H).

2. Tuote puhdistettiin HPLC:n avulla käyttäen ok-tadekyylisilaanipylvästä.

3. NKR liuottimessa A: 3,3 - 3,8 (m, 6H) ; 4,1 - 4,5 (m, 6H); 5,19 (d, 1H); 5,85 (d, 1H); 7,0 (s, 1H); 7,1 20 (m, 2H); 8,24 (m, 2H).

4. Lähtöaineena oli 4-kloori-l-metyylipyridinium-jodidi. Mitään suojauksen poistokäsittelyä ei tarvittu. Tuote puhdistettiin saostamalla DMF:stä vedellä.

5. NMR liuottimessa A: 3,2 - 3,6 (m, 4H); 25 3,91 (s, 3H); 4,38 (m, 4H); 5,21 (d, 1H); 5,86 (d, 1H); 6,9 - 8,4 (m, 8H); 7,08 (s, 1H).

6. NMR liuottimessa A: 3,2 - 3,7 (m, 4H); 3,92 (t, 2H); 4,4 (m, 6H); 5,2 (d, 2H); 5,86 (d, 2H); 6,9 - 7,3 (m, 2H); 7,05 (s, 1H); 8,0 - 8,4 (m, 2H).

30 Edellä olevassa menetelmässä käytettyjä lähtöai neita voitiin saada seuraavalla tavalla: Trietyyliamiinia (1,0 millimoolia) ja fosforipentakloridia (1,0 millimoo-lia) lisättiin liuokseen, joka sisälsi 2-(2-trityyliamino-tiatsol-4-yyli)-2-((Z)-syanometoksi-imino)etikkahappoa 35 (GB-patenttihakemus 2017702A) (1,0 millimoolia) Ct^C^JSsa (2,5 ml), argonkaasun alaisena 0°:ssa ja seosta hämmennet- 92 80043 tiin 1,5 tuntia. Liuotin haihdutettiin pois ja jäännös liuotettiin Ct^C^jeen. Tähän liuokseen lisättiin liuos, joka sisälsi 7-amino-3-atsodometyylikef-3-emi-4-karboksyy-lihappoa (1,0 millimoolia) dikloorimetaanissa (2,5 ml) 5 argonkaasun alaisena, jolloin tätä liuosta oli aikaisemmin käsitelty 0°:ssa N,0-bistrimetyylisilyyliasetamidin (2,0 millimoolia) kanssa ja annettu lämmetä ympäristön lämpötilaan kahden tunnin kuluessa. 1,5 tunnin kuluttua seos laimennettiin ja orgaaninen kerros pestiin vedellä, 10 kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivattiin (MgSO^).

Liuottimen haihdutus antoi tuotteen. Tätä yleistä menetelmää käyttäen valmistettiin seuraavat yhdisteet: (öVcnh-<\] "

V - /3 'n—-. ^ CO — NH —T---T

B J-N^-CH2N3

N — O — R o" I

20 C00H

— Alaviitteet 25 -CH2CH2CN ! -CH2CH2OH 2, 3 COOC(CH3)3

30 -ch2ch*S-\4> 4. S

-CH2CH2C1 6

II

93 80043

Alaviitteet 1. NMR liuottimessa A: 3,4 (s, 2H); 3,9 (d, 1H); 4.4 (d, 1H); 4,8 (s, 2H); 4,9 (d, 1H); 5,7 (d, 1H); 6,8 (s, 1H); 7,2 (s, 15H).

5 2. Lähtöainetta voitiin valmistaa reagoittamalla etyyli-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-2-((Z)-hydroksi-imino)asetaattia l-bromi-2-(2-tetrahydropyran-2-yylioksi)etaa-nin kanssa ja hydrolysoimalla saatu esteri, jolloin saatiin 2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-2-<T(Z)-2-(2-tetrahydropy-10 ran-2-yylioksi)etoksi-imino7etikkahappoa. NMR liuottimes sa C: 1,6 (m, 2H); 3,4 - 4,1 (m, 6H); 4,4 (t, 2H); 4,68 (s, 1H); 6,68 (s, 1); 7,36 (s, 15H).

3. NMR liuottimessa C: 3,48 (s, 2H); 3,95 (m, 3H); 4,33 (m, 3H); 5,05 (d, 1H); 5,85 (d, 1H); 6,76 (s, 1H); 15 7,35 (s, 15H).

4. Lähtöainetta voitiin valmistaa reagoittamalla etyyli-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-2-({Z)-bromietoksi-imino)asetaattia (GB-patenttihakemus 2017702A) t-butyyli-2-merkaptobentsoaatin kanssa ja hydrolysoimalla muodostunut 20 esteri, jolloin saatiin 2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)- 2-/^(Z) -2- (2-t-butoksikarbonyylifenyylitio) etoksi-imino/etik-kahappoa · NMR liuottimessa C: 1,6 (s, 9H) ; 3,3 (t, 2H) ; 4.4 (t, 2H); 6,67 (s, 1H); 7,0 - 8,0 (m, 4H); 7,34 (s, 15H).

5. NMR liuottimessa A: 1,52 (s, 9H); 3,1 - 3,5 25 (m, 4H); 3,9 - 4,6 (m, 4H) ? 4,99 (d, 1H); 5,84 (d, 1H); 6,76 (s, 1H); 6,9 - 7,9 (m, 4H); 7,27 (s, 15H).

6. NMR liuottimessa A: 3,5 - 4,6 (m, 8H); 5,16 (d, 2H); 5,66 (d, 2H); 6,8 (s, 1H); 7,36 (s, 15H).

Raakaa 3-atsidometyylikefalosporiinijohdannaista 30 liuotettiin muurahaishappoon ja käsiteltiin ylimäärin käytetyn kostean Raney-nikkelin kanssa 50 minuuttia. Seos suodatettiin piimään läpi ja suodatuskakkua huuhdeltiin MeOH/ vesi-seoksella (1:1 til./til.). Suodos haihdutettiin ja jäännös liuotettiin TFA/vesi-seokseen (9:1 til./til.) 35 (5 ml) ympäristön lämpötilassa. 1,5 tunnin kuluttua liuo tin haihdutettiin ja tuote puhdistettiin kromatografiän _ _. τ - 80043 94 avulla käyttämällä Diainon HP20-hartsia ja eluoimalla käyttäen eneneviä osuuksia MeOH vedessä. Tällöin saatiin seuraavat yhdisteet: h2*K\ ] Ls N-l/C° ΝΉ—f-p ^ S J—N CH2NH2

— R ° J

10 1

COOH

-R Alaviitteet -ch2chcn 15 -ch2ch2oh cooh 2 -ch2ch2s -^> 3 20 -CH2CH2C1

Alaviitteet 1. NMR liuottimessa A: 3,66 (s, 2H); 3,78 25 (q 2H); 5,02 (s, 2H); 5,15 (d, 1H); 5,84 (d, 1H); 6,98 (s, 1H).

2. NMR liuottimessa A: 3,73 (m, 6H) ; 4,22 (t, 2H); 5,2 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 7,0 (s, 1H).

3. NMR liuottimessa A: 3,4 (m, 2H) ; 3,5 - 30 4,0 (m, 4H); 4,43 (m, 2H); 5,23 (d, 1H); 5,94 (d, 1H); 7,1 (s, 1H); 7,1 - 8,0 (m, 4H).

4. NMR liuottimessa A: 3,6 - 4,0 (m, 6H); 4,39 (t, 2H) ; 5,17 (d, 1H) ; 5,87 (d, 1H) ; 7,02 (s, 1H) .

95 80043

Esimerkit 104-116

Esimerkeissä 57-65 esitetty yleinen menetelmä toistettiin käyttäen sopivia 3-aminometyylikefalosporiini- ja 4-halogeenipyridiniojohdannaisia lähtöaineena ja tällöin 5 saatiin seuraavat yhdisteet:

/ S H H

H0N—Λ : : c Y j- ^ YH2NH -C/-R2 V O R, I £ 1 COÖ~

R R

Esimerkki 1 2 Saanto % Alaviitteet

’ CN

104 -C(CH3)2COOH -CH2-^3 29 1; 2, 3, 4, 5 _^0CH3 105 -C(CH3)2COOH -CH2~(yy 43 lt 6' 3' 4' 7 _sC02C2H5 106 -C(CH3)2COOH -CH2-^A 31 1, 8, 3, 4, 9 107 -c(ch3)2cooh -ch2—f 32 1< 10» 3' 4' 11, 12 108 -C(CH3)2COOH -CK2-(~\-CK3 37 1, 13, 3, 4, V-/ 14 96 80043

Esimerkki R1 R2 Saanto % Alaviitteet 109 -C(CH3)2COOH -CH2—(^-COOH 36 15,3, 4, 16 110 -C(CH3)2COOH -CH2-Q_N02 23 1, 17, 18 OCH3 111 -CH3 -CH2-^ 32 19. 4, 20 CO„C0Hc 112 -ch3 -CH2"Cy 20 19, 4, 21 113 -CH3 -CH2-^^-P 52 22, 23, 24 114 -C(CH3)2COOH -CH2OCH2OCH3 22 25, 19, 26, 27 115 -CH3 -CH2OCH2OCH3 38 22, 28, 29

Alaviitteet 1. Lähtöainetta voitiin valmistaa seuraavalla yleisellä menetelmällä: Substituoitua bentsyylihalogenidia (0,04 moolia) ja 4-pyridonia (0,04 moolia) kuumennettiin palautusjäähdyttäjää käyttäen vedettömässä asetonissa kide-vedettömän natriumkarbonaatin (0,08 moolia) läsnäollessa 3 tuntia. Seos suodatettiin, suodos haihdutettiin ja jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla. Puhdistettua tuotetta (0,01 moolia) käsiteltiin vedettömässä tolueenissa (15 ml) tolueeni-p-sulfonyylikloridin (0,01 moolia) kanssa välillä 140-150° 10 minuuttia. Jäähdytyksen jälkeen liuotin tl 97 80043 dekantoitiin jäljelle jäävästä öljystä, öljyä trituroi-tiin vedettömän tolueenin ja vedettömän eetterin kanssa, kuivattiin tyhjössä ja käytettiin ilman enempää puhdistusta .

5 2. Lähtöaineena oli 4-kloori-l-(2-syanobentsyyli)py- ridiniumtolueeni-p-sulfonaatti.

3. Reaktio suoritettiin asetonitriili/vesi-seokses-sa(l:l til./til.) 18 tunnin ajan.

4. Puhdistus suoritettiin keskinkertaisen paineen 10 käsittävällä kromatografiällä käyttäen Merck'in Lichoprep RPl8-hartsia ja eluenttina asetonitriili/vesi-seosta (7:3 til. /til.).

5. NMR. liuottimessa A: 1,4 (s, 6H); 3,5 (br d, 2H); 4.3 (d, 2H); 5,1 (d, 1H); 5,4 (s, 2H); 5,8 (d, 1H); 6,7 15 (s, 1H)? 6,8 - 8,2 (m, 8H).

6. Lähtöaineena oli 4-kloori-l-(3-metoksibentsyyli)py- ridiniumtolueeni-p-sulfonaatti. NMR CDCl^rssa : 3,8 (s-, 3H) ; 4,9 (s, 2H) ;-.6,4 (d, 2H) ,· 6,8 (m, 3H) ,· 7,3 (m, 3H) .

7. NMR liuottimessa A: 1,46 (s, 6H); 3,54 20 (q, 2H) 7 3,76 (s, 3H) ,· 4,34 (q, 2H) ,· 5,16 (d, 1H) ,· 5,32 (d, 1H) ,· 5,88 (d, 1H) ,· 6,76 (s, 1H) ,· 6,84 - 8,6 (m, 8H) .

8. Lähtöaineena oli 4-kloori-l-(3-etoksikarbonyy-libentsyyli)pyridiniumtolueeni-p-sulfonaatti. NMR

CDC13: ssa : 1,35 (t, 3H) ; 4,35 (q, 2H) ,· 4,95 (s, 2H) ; 25 6,3 (d, 2H); 7,4 (m, 4H); 7,9 (m, 2H).

9. NMR liuottimessa A: 1,0 - 1,6 (s, t, 9H); 3,5 (q, 2H); 4,32 (q, q, 4H); 5,12 (d, 1H) ? 5,44 (s, 2H); 5,92 (d, 1H)7 6,74 (s, 1H)? 6,88 - 7,4 (brm, 2H); 7,6 (d, 2H)7 7,96 {d, 2H)7 8,16 - 8,6 (brm, 2H).

30 10. Lähtöaineena oli 4-kloori-l-(4-fluoribentsyyli)py- ridiniumtolueeni-p-sulfonaatti; r>p. 140-145°.

11. Jatkopuhdistus suoritettiin kromatografiän avulla käyttäen HP20-hartsia ja eluenttina vesi/asetonitriili-seosta (7:3 til. /til .J.

35 12. NMR liuottimessa A: 1,43 (s, 6H)7 3,41 (d, 1H)7 3,58 (d, 1H)7 4,22 (d, 1H) ? 4,36 (d, 1H)7 5,13 (d, 1H)? 5.3 (s, 2H); 5,83 (d, 1H)7 6,75 (s, 1H) 7 6,8 - 8,4 (m, 8H).

\, 98 80043 13. Lähtöaineena oli 4-kloori-l-(4-metyylibent-syyli)pyridiniumtolueeni-p-sulfonaatti; sp. 124-127°.

14. NMR liuottimessa A: 1,4 (s, 6H); 2,25 (s, 3H); 3,45 (q, 2H); 4,3 (brq, 2H); 5,05 (d, 1H); 5 5,15 (s, 2H); 5,75 (d, 1H); 6,7 (s, 1H); 6,8 - 8,4 (m, 8H).

15. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla 4-kloo-ripyridiiniä 4-karboksibentsyylibromidin kanssa asetonissa, jolloin saatiin 4-kloori-l-(4-karboksibentsyyli)pyridinium-bromidia. NMR dgDMSO:ssa : 5,9 (s, 2H); 7,55 (d, 2H); 10 7,9 (d, 2H); 8,35 (d, 2H); 9,2 (d, 2H).

16. NMR liuottimessa A: 1,4 (s, 6H); 3,25 (q, 2H) ; 4,3 (q, 2H) ; 5,1 (d, 1H) ; 5,4 (s, 2H) ; 5,75 (d, 1H); 6,7 (s, 1H); 6,8 - 7,2 (brm, 2H); 7,4 (d, 2H); 7,9 (d, 2H); 8,1 - 8,4 (brm, 2H).

15 17. Lähtöaineena oli 4-kloori-l-(4-nitrobentsyyli)py- ridiniumkloridi. NMR CDCl-^issa : 5,3 (s, 2H) ; 6,3 (d, 2H); 7,6 (m, 4H)M 8,25 (d, 2H).

18. NMR liuottimessa A: 1,5 (s, 6H); 3,5 (q, 2H); 4,35 (q, 2H); 5,1 (d, 1H); 5,5 (s, 2H); 5,75 (d, 2H); 20 6,7 (s, 1H); 6,8 - 7,2 (m, 2H); 7,55 (d, 2H>; 8,2 (d, 4H).

19. Reaktio suoritettiin vedessä 18 tunnin ajan.

20. NMR liuottimessa A: 3,45 (q, 2H); 3,7 (s, 3H); 3,8 (s, 3H); 4,25 (q, 2H); 5,05 (d, 1H); 5,2 (s, 2H); 5,7 (d, 1H); 6,7 (s, 1H); 6,8 - 8,4 (m, 8H).

25 21. NMR liuottimessa A: 1,3 (t, 3H); 3,4 (q, 2H); 3,8 (s, 3H); 4,3 (q, g4H); 5,05 (d, 1H); 5,4 (s, 2H); 5,7 (d, 1H); 6,7 (s, lH); 6,8 - 8,5 (m, 8H).

22. Reaktioaika 18 tuntia.

23. Puhdistus kromatografiän avulla käyttäen 30 CHP20P-hartsia ja eluenttina vesi/asetonitriili-seosta (7:3 til./til.).

24. NMR liuottimessa A: 3,45 (q, 2H); 3,8 (s, 3H); 4,3 (q, 2H); 5,05 - 5,2 (d, s, 3H); 3,7 (d, 1H); 6,7 (s, 1H); 6,8 - 8,4 (m, 8H).

35 25. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla 4-klooripyridiiniä l-metoksi-2-kloorimetoksietaanin kanssa eetterissä, jolloin saatiin 4-kloori-l-(2-metoksietok- 99 80043 si)metyylipyridiniumbromidia. NMR , D20:ssa: 3,4 (s, 3H); 3,7 (m, 4H); 6,0 (s, 2H); 8,25 (d, 2H); 9,05 (d, 2H).

26. Tuote puhdistettiin HPLC:n avulla käyttäen ok-tadekyylisilaanipylvästä ja eluenttina MeOH/vesi/HOAc-seos- 5 ta (35:64 :1 til./til./til 27. NMR liuottimessa A: 1,44 (brs, 6H); 3,2 (s, 3H); 3,4 - 3,68 (m, 6H); 4,36 (q, 2H); 5,16 (d, 1H); 5,47 (s, 2H); 5,86 (d, 1H); 6,95 (s, 1H); 7,05 (t, 1H); 8,28 (q, 2H).

10 28. Tuote puhdistettiin HPLC:n avulla käyttäen okta- desyylisilaanipylvästä ja eluenttina MeOH/vesi/HOAc-seosta (20:79:1 til./til./til O· 29. NMR liuottimessa C: 3,1 (s, 3H); 3,4 (m, 6H); 3,75 (s, 3H); 4,22 (brs, 2H); 5,0 (d, 1H); 5,17 (d, 2H); 15 5,6 (d, 1H); 6,3 (d, 2H); 6,66 (s, 1H); 6,89 (t, 1H); 7,8 (d, 2H).

Esimerkit 116-121 Hämmennettyyn suspensioon, joka sisälsi 3-aminome-tyyli-7-^-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-((Z)-metoksi-iminoase-20 tamidq7~kef-3-emi-4-karboksyylihappoa (0,5 millimoolia) vedessä (3 ml) ja asetonitriilissä (1 ml), lisättiin natriumbikarbonaattia (1,5 millimoolia). Kun kirkas liuos oli muodostunut, lisättiin siihen l-bromi-2-metyyli-isokinoliniumtet-rafluoriboraattia (0,5 millimoolia). 30 minuutin jälkeen 25 lisättiin HOAc (1,5 millimoolia) ja tuote erotettiin HP20-pylväässä käyttäen asetonitriili/vesi-seoksella suoritettua gradienttieluointia. Käyttäen tätä yleistä menetelmää ja sopivia halogeeni-isokinoliniumlähtöaineita valmistettiin seuraavat yhdisteet: 30 /71 ? H CH, H2NH \\ ' ^ ml 3 35 T L N CH2NH -\l) N- O—Rj f Y / \ ! e v coch' N—' R2 loo 80 043

Esimerkki R1 R2 o -:- - - baanto % Alaviitteet 116 -C(CH3)2COOH H 15 1, 2, 3 117 -CH3 H 58 4 5 118 -C(CH3)2COOH 4-Br 28 5, 6 119 -CH3 4-Br 52 7 10 120 -C(CH3)2COOH 5-N02 24 8, 9 15 Alaviitteet 1. Reaktio suoritettiin vedessä.

2. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla 1-bromi-isokinoliinia trimetyylioksoniumtetrafluoribo-raatin kanssa CH2Cl2:ssa, jolloin saatiin l-bromi-2-metyy- 20 li-isokinoliniumtetrafluoriboraattiaJ sp. 162°.

3. NMR liuottimessa A: 1,45 (s, 6H); 3,7 (s, 2H); 4,0 (s, 3H); 4,8 (d, 2H); 5,15 (d, 1H); 5,8 (d, 1H); 6,7 (s, 1H); 7.3 (d, 1H); 7,4 - 8,0 (m, 4H); 8,35 (d, 1H); 4. NMR liuottimessa A: 3,7 (s, 2H) ; 3,85 25 (s, 3H); 4,0 (s, 3H); 4,85 (d, 2H); 5,1 (d, 2H); 5,8 (d, 1H); 6,7 (s, 1H); 7,4 <d, 1H); 7,6 - 8,0 (m, 4H); 8,4 <d, 1H).

5. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla 1-bromi-isokinoliinia HBr:n kanssa, jolloin saatiin 1,4-dibromi- 30 isokinoliinia (sp. 95-96°) , jonka jälkeen tämä yhdiste rea-goitettiin trimetyylioksoniumtetrafluoriboraatin kanssa CH^Cl^sssa, jolloin saatiin 1,4-dibromi-2-metyyli-isokino-liniumtetrafluoriboraattia. NMR liuottimessa A: 3,5 (s, 3H); 7,2 - 8,4 (m, 5H).

Il ιοί 80043 6. NMR liuottimessa A: 1.45 (s, 6H): 3,7 (s, 2H): 4,0 (s, 3H); 4,8 (d. 2H); 5,15 (d, 1H); 5,8 (d, 1H); 6,75 (s, 1H); 7,7 - 8,5 (m, 5H).

7. NMR liuottimessa A: 3,7 (s, 1H); 3,85 5 (s, 3H) ; 4,0 (s, 3H); 4,85 (d, 2H); 5,15 (d, 1H) ; 5,8 (d, 1H); 6,75 (s, 1H) ? 7,7 - 8,5 (m, 5H).

8. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla 1-bro-mi-isokinoliinia väkevässä ^SO^rssä 0°:ssa KNO^:n kanssa. Jatkokäsittelyssä reaktioseosta käsiteltiin veden, NaHCO^sn 10 ja EtOAcrn kanssa, jolloin saatiin l-bromi-5-nitrokinolii-nia, s.p. 187-188°. Tämän yhdisteen reagoittaminen trime-tyylioksoniumtetrafluoriboraatin kanssa Cl^C^^ssa antoi epäpuhdasta l-bromi-2-metyyli-5-nitroisokinoliniumtetra-fluoriboraattia, jota käytettiin sellaisenaan. NMR liuot-15 timessa A: 3,5 (s, 3H); 7,7 - 8,7 (m, 5H).

9. NMR liuottimessa A: 1,45 (m, 6H); 3,7 (s, 2H); 3,95 (s, 3H); 4,83 (q, 2H); 5,15 (d, 1H); 5,82 (d, 1H) ; 6,73 (s, 1H); 7,7 - 8,7 (m, 5H).

Esimerkit 121-125 20 Hämmennettyyn suspensioon, joka sisälsi 3-aminometyy- 11-1-£2-(3-aminotiatsol-4-yyli)-2-((Z)-1-karboksi-l-metyy-lietoksi-imino) asetamidd7‘kef-3-emi-4-karboksyylihappoa (240 mg, 0,5 millimoolia) ja trietyyliamiinia (200 ^ul, 1,4 millimoolia) EtOH:ssa (10 ml) ja jonka lämpötila oli 25 25°, lisättiin l-metyyli-4-metyyli-tiokinatsoliniumjodidia (160 mg, 0,5 millimoolia). 1,5 tunnin kuluttua liuos haihdutettiin kuiviin alipaineessa, jäännös liuotettiin veteen (10 ml), liuos hapotettiin käyttämällä ylimäärin 5 %:ista (til./til.) HOAc:n vesiliuosta ja liukenematon aine erotet-30 tiin suodattamalla. Suodos lisättiin Diaion HP20-pylvää- seen ja tuote puhdistettiin gradienttieluoinnin avulla käyttämällä MeOH. Käyttämällä tätä yleistä menetelmää ja sopivaa kvaternääristä heterosykliä saatiin seuraavat yhdisteet : 102 80043

v-fi 1 K

N^/C0~NH—ΓΤ ^ N^© N P3 0^-N /)— CH^H-^N-Rj o — C— COOH I U /) | COOG' CH, 3 R2

R R

Esimerkki 1 2 Saanto % Alaviitteet 121 -CH3 H 30 1 122 -CH2CH=CH2 H 35 2, 3, 4 123 -CH3 2-CH2CH2CH3 60 5. 6 124 -CH3 7-Cl 35 7, 8 125 "CH2"^^) H 32 9' 10

Alaviitteet 1. NMR liuottimessa A: 1,42 {s, 3H) ; 1,45 (s, 3H) ; 3,55 (q, 2H) ; 4,0 (s, 3H) ; 4,8 (q, 2H) ; 5,1 (d, 1H); 5,82 (d, 1H); 6,72 (s, 1H); 7,85 (t, 1H); 8,0 (d, 1H); 8,12 (t, 1H); 8,55 (d, 1H); 8,95 (s, 1H).

2. Sakka liuotettiin uudelleen minimaaliseen määrään laimeata HOAc (5-%:inentil./til. vedessä) ja tuote erotettiin kromatografiän avulla käyttämällä Diaion CHP 20-hartsia ja eluoimalla käyttäen suurenevia määriä MeOH vedessä. Sopivat fraktiot yhdistettiin, MeOH poistettiin haihduttamalla ja jäännös kuivattiin jäähdyttämällä .

Il 103 80043 3. Kinatsoliniumsuolaa voitiin valmistaa seuraavalla tavalla. Liuosta, joka sisälsi 4-metyylitiokinatsoliinia (1,76 g, 10 millimoolia) ja allyylibromidia (5,0 ^.ul, 60 mil-limoolia) asetonitriilissä (10 ml), kuumennettiin palautus-5 jäähdyttäjää käyttäen 4 tuntia. Jäähdytettäessä erottui kva-ternäärisen suolan kiteitä, jotka suodatettiin erilleen ja pestiin eetterillä. NMR dgDMSO:ssa : 2,9 (s, 3H); 5,3 - 5,6 (kompleksi, 4H); 5,95 - 6,4 (m, 1H); 7,9 - 8,5 (kompleksi, 4H); 9,9 (s, 1H).

10 4. NMR liuottimessa A: 1,41 (s, 3H); 1,43 (s, 3H); 3.5 (d, 1H); 3,65 (d, 1H); 4,64 (d, 1H); 4,99 (d, 1H); 5.1 (d, 1H); 5,15 (m, 2H); 5,31 (m, 2H); 5,84 (d, 1H); 6.06 (m, 1H); 6,75 (s, 1H); 7,82 (m, 1H); 7,95 (m, 1H); 8.06 (m, 1H); 8,55 (m, 1H); 8,97 (s, 1H).

15 5. Lähtöainetta voitiin valmistaa seuraavalla tavalla.

Seosta, jossa oli 2-propyylikinatsol-4-onia ja 2,4-bis-(4-me- 5 5 toksifenyyli)-2,4-ditiokso-P ,P -1,3,2,4-ditiafosfetaania (Lawesson'in reagenssi) (5,7 g) dimetoksietaanissa (100 ml), hämmennettiin ja kuumennettiin palautusjäähdyttäjää käyttäen 20 4 tuntia. Sakka erotettiin jäähdytetystä seoksesta ja kitey tettiin uudelleen EtOHista, jolloin saatiin 2-propyyli-4-merkaptokinatsoliinia. NMR d,DMSO:ssa : 1,15 (t, 3H);

O

1,9 (m, 2H); 2,8 (t, 3H); 7,4 - 8,75 (kompleksi, 4H).

Seosta, jossa oli 2-propyyli-4-merkaptokinatsoliinia 25 (3,3 g) ja natriumhydroksidia (0,68 g) vedessä (7 ml), häm mennettiin 10 minuuttia 25°:ssa. Metyylijodidia (1,1 ml) lisättiin ja hämmentämistä jatkettiin tunnin ajan. Sakka kiteytettiin uudelleen heksaanista, jolloin saatiin 4-metyy-litio-2-propyylikinatsoliinia. NMR CDCl^ssai 1,1 30 (t, 3H); 1,95 (m, 2H); 2,7 (s, 3H); 3,0 (t, 2H); 7,2 - 8.1 (kompleksi, 4H).

Liuosta, joka sisälsi 2-propyyli-4-metyylitiokinat-soliinia (1,08 g) metyylijodidissa (5 ml), kuumennettiin palautusjäähdyttäjää käyttäen 18 tuntia. Kiinteä aine ero-35 tettiin jäähtyneestä seoksesta ja pestiin eetterillä, jolloin saatiin l-metyyli-4-metyylitio-2-propyylikinatsoli- 104 80043 niumjodidia. NMR dgDMSO:ssa : 1,15 (t, 3H); 2,0 (m, 2H); 2,9 (s, 3H); 3,35 (t, 2H); 4,3 (s, 3H); 7,9 - 8,6 (kompleksi, 4H) .

6. NXR liuottimessa A: 1,0 (t, 3H); 1,4 (s, 3H); 5 1,43 (s, 3H); 1,8 (m, 2H); 3,03 (t, 2H); 3,53 (q, 2H); 3,96 (s, 3H); 4,56 (d, 1H); 5,04 (d, 1H); 5,06 (d, 1H); 5,82 (d, 1H); 6,72 (s, 1H); 7,6 - 8,5 (kompleksi, 4H).

7. Lähtöainetta voitiin valmistaa toistamalla alaviitteen 5 ensimmäinen, toinen ja kolmas osa käyttäen 7- 10 kloorikinatsol-4-onia, jolloin saatiin 7-kloori-4-merkap-tokinatsoliinia, 7-kloori-4-metyylitiokinatsoliinia, 7-kloori-4-metyylitiokinatsoliinia ^NMR , CDCl^rssa : 2,7 (s, 3H); 7,4 - 8,1 (kompleksi, 3H); 8,95 (s, lH)/ ja 7-kloori-l-metyyli-4-metyylitiokinatsoliniumjodidia 15 <NMR dgDMSO:ssa : 2,9 (s, 3H); 4,3 (s, 3H); 8,0 - 8,6 (kompleksi 3H) ; 9,7 (s, 1HJ^ 8. NMR liuottimessa A: 1,4 (s, 3H); 1,43 (s, 3H); 3,53 (q, 2H); 3,97 (s, 3H); 4,62 (d, 1H); 4,96 (d, 1H); 5,09 (d, 1H); 5,84 (d, 1H); 6,72 (s, 1H); 20 7,9 - 8,9 (kompleksi, 4H).

9. Lähtöainetta voitiin valmistaa toistamalla alaviitteen 5 ensimmäinen osa käyttäen 4-metyylitiokinatso-liinia, jolloin saatiin l-bentsyyli-4-metyylitiokinatso-liniumkloridia, NMR dgDMSO:ssa : 2,9 (s, 3H); 6,2 25 (s, 2H); 7,2 - 8,5 (kompleksi, 9H); 10,15 (s, 1H).

10. NMR liuottimessa A: 1,4 (s, 3A); 1,43 (s, 3H); 3,6 (q, 2H); 4,66 (d, 1H); 5,02 (d, 1H); 5,1 (d, 1H); 5,75 (s, 2H); 5,84 (d, 1H); 7,32 (m, 5H); 7,75 - 8,55 (kompleksi, 4H); 9,18 (s, 1H).

30 Esimerkit 126-130

Esimerkeissä 57-65 esitetty menetelmä toistettiin käyttämällä sopivia lähtöaineita, jolloin saatiin seuraa-vat yhdisteet:

II

105 80043

/ 1 ? H

H2N~\\ I f :/ S\ n-^/conh-f ^

Il J— n^^-ch2nh-r2

N —O —CT

COC^

Esi- Ala- merkki R^ R2 Saanto % viitteet 126 -CH3 -^N%H2CH=CH2 38 1 127 -CH3 —<3 40 2 ch3 128 -C(CH^)0COOH "*^_^I_CH2CH3 32 3' 4 3 2

Vj7 ch3 129 -C (CH-.) oC00H -/7 'n-CH_CH=CH0 16 5, 6 \\ // CH3 130 -C(CH3)2COOH \ _ ,Nr2CH3 17 7, 8 \\ // F ^

Alaviitteet 1. NMR liuottimessa A: 8,2 (d, 1H); 8,02 (d, 1H); 7,05 (d, 1H); 6,92 (d, 1H); 6,72 (s, 1H); 5,7 - 6,2 (m, 1H); 5,72 (d, 1H); 5,2 - 5,4 (m, 2H); 5,08 (d, 1H); 106 80043 4,73 (s, 2H); 4,4 (d, 1H); 4,16 (d, 1H); 3,81 (s, 3H); 3,6 (d, 1H) ja 3,34 (d, 1H).

2. NMR liuottimessa A: 8,3 (d, 1H); 8,15 (d, 1H); 7,01 (d, 1H); 6,92 (d, 1H); 6,75 (s, 1H); 5 5,75 (d, 1H); 5,1 (d, 1H); 4,44 (d, 1H); 4,2 (d, 1H); 3,6 - 4,0 (m, 1H); 3,84 (s, 3H); 3,6 (d, 1H); 3,32 (d, 1H); 0,95 - 1,3 (m, 4H).

3. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla 1-etyy-li-2-metyyli-4-kinoliinia tolueeni-p-sulfonyylikloridin 10 kanssa, jolloin saatiin 4-kloori-l-etyyli-2-metyylikilonium-tolueeni-p-sulfonaattia.

4. NMR liuottimessa A: 7,3 - 8,65 (m, 5H); 6,76 (s, 1H); 5,72 (d, 1H); 5,05 (d, 1H); 4,56 (br, 2H); 4,32 (q, 2H); 3,6 (d, 1H); 3,35 (d, 1H); 2,78 (s, 3H); 15 1,42 (s, 6H); 1,38 (t, 3H).

5. Lähtöainetta valmistettiin seuraavalla tavalla. Liuosta, joka sisälsi 4-amino-2-metyylikinoliinia (5,0 g) ja allyylibromidia (3,32 ml) nitrobentseenissä (13,7 ml), hämmennettiin 100°:ssa tunnin ajan. Reaktio- 20 seos jäähdytettiin 5°:n alapuolelle ja saatu sakka erotettiin suodattamalla, pestiin eetterillä ja kuivattiin. Tämän aineen suspensiota 1-n NaOH:n vesiliuoksessa (75 ml) hämmennettiin 100°:ssa 3,5 tuntia. Jäähdytetty seos uutettiin EtOAc:llä (2 x 75 ml) ja yhdistetyt uutokset pestiin, 25 kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin l-allyyli-2-metyyli-4-kinoliinia. Tämän yhdisteen reagoittaminen to-lueeni-p-sulfonyylikloridin kanssa antoi l-allyyli-4-kloo-ri-2-metyylikinoliniumtolueeni-p-sulfonaattia.

6. NMR liuottimessa A: 8,46 (d, 1H); 7,8 - 30 7,95 (m, 2H); 7,65 (t, 1H); 7,22 (s, 1H); 6,73 (s, 1H); 6,05 (m, 1H); 5,72 (d, 1H) ; 5,04 (d, 1H); 5,2 (d, 1H); 5,1 (br, 1H); 4,8 (d, 1H); 4,75 (d, 1H); 4,56 (d, 1H); 4,52 (d, 1H); 3,55 (d, 1H); 3,4 (d, 1H); 2,63 (s, 3H); 1,4 (s, 6H).

35 7. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla 1,2- dimetyyli-6-fluori-4-kinolonia tolueeni-p-sulfonyyliklo-ridin kanssa, jolloin saatiin 4-kloori-l,2-dimetyyli-6-fluorikinoliniumtolueeni-p-sulfonaattia.

107 80043 8. NMR liuottimessa A: 7,7 - 8,6 (m, 3H) ; 7.04 (s, 1H); 6,72 (s, 1H); 5,82 (d, 1H); 5,13 (d, 1H) ; 4,54 (br, 2H); 4,0 (s, 3H); 3,56 (br, 2H); 2,72 (s, 3H); 1.4 (s, 6H).

5 Esimerkki 131

Esimerkissä 67a esitetty menetelmä toistettiin käyttäen lähtöaineena 1-((Z)-2-t-butoksikarbonyyliaminoetyyli)-4-klooripyridiniumtolueeni-p-sulfonaattia. Reaktioseokses-ta saatua jäännöstä käsiteltiin TFA:n kanssa 10 minuuttia, 10 haihdutettiin, jäännös laimennettiin vedellä ja tuote puhdistettiin kromatografiän avulla, jolloin saatiin 38 %:n saanto seuraavaa yhdistettä: 15 hHs1 " Vs n -NH --p ^ ** Λ--N Jj~'

Ns. S\ O CH, νηΛ n-ch9ch„nh9 o-^-cooh cocj3 ^ 20 NKR liuottimessa B: 1,9 (m, 2H); 2,4 (m, 4H); 3,3 (m, 2H); 3,4 (d, 1H); 3,6 (d, 1H); 4,2 (d, 1H); 4,3 25 (d,m, 3H); 5,15 (d, 1H) ? 5,85 (d, lH); 6,95 (d, 1H); 7,05 (d,m, 2H); 8,0 (d, 1H); 8,2 (d, 1H).

Esimerkit 132-135

Esimerkeissä 16-22 tai 23-52 esitetty yleinen menetelmä toistettiin käyttäen lähtöaineena sopivaa kloori-30 heterosykliä ellei toisin ole mainittu ja valmistettiin seuraavat yhdisteet: 108 80043

/ST1 H H

Η2ΝΛ 1 I

XN—-NH--p ^ N i- NxJ-CH2NH-R2 X 0-R1 I .

5 coo'*

Esi- Ala_ merkki R1 R2 Saanto % viitteet 10 - - 132 -C(CH3)2COOH -VJ"11 4 ^ 2 no2

¢/ NH

18 133 -C(CH3)2COOH -\7/'CH2C ^ 36 4j 5 /“ 134 -CH-, -Γ N-CH„CH~NH0 _ „ 20 3 2 2 2 100 6, 7, 8, 9 o-ch2 no2 135 -C(CH3)2COOH (-CH 33 10, u> 12 25

Alaviitteet 1. HPLC eluenttina vesi/MeOH/HOAc (74 : 25 :1 50 til./til./til.).

2. NMR liuottimessa B: 3,4 - 3,7 (m, 2H) ; 4,5 - 4,8 (m, 2H); 5,2 (d, 1H); 5,9 (d, 1H); 7,0 (s, 1H); 7,55 (d, 1H); 8,5 (d, 1H); 9,4 (s, 1H).

109 80043 3. HPLC eluenttina vesi/MeOH/HOAc (89:10:1 til. /til. /til.), 4. NMR liuottimessa B: 1,56 (s, 6H); 3,4 (d, 1H); 3,66 (d, 1H); 4,38 (s, 2H); 5,16 (s, 2H); 5,14 5 (d, 1H); 5,82 (d, 1H); 7,0 (s, 1H); 6,9 - 7,2 (m, 2H); 8,0-8,4 (m, 2H).

5. Lähtöainetta saatiin reagoittamalla 4-metyyli-tiopyridiiniä 2-klooriasetamidiinihydrokloridin kanssa EtOHrssa palautusjäähdyttäjää käyttäen 18 tuntia, jolloin 10 saatiin l-amidinometyyli-4-metyylitiopyridiniumkloridia.

NMR liuottimessa B: 2,71 (s, 3H); 5,6 (s, 2H); 7,98 (d, 2H); 8,84 (d, 2H). Tämän yhdisteen hapetus metakloo-riperbentsoehapolla CI^C^: ssa 0°:n ja ympäristön lämpötilan välillä viiden tunnin ajan antoi l-amidinometyyli-4- 15 metyylisulfinyylipyridiniumkloridia. NMR liuottimessa B: 2,99 (s, 3H); 8,6 (d, 2H); 9,38 (d, 2H).

6. Reaktio suoritettiin käyttämällä 1-/2-(t-butoksi-karbonyyliamino)etyyli/-4-klooripyridiniumtolueeni-p-sulfo-naattia. Saanto 40 %.

20 7. HELC eluenttina vesi/MeOH/HOAc (59:40:1 til. /til. /til.).

8, Puhdistettua tuotetta käsiteltiin CI^C^/TFA-seoksella 1:2 til./til. 30 minuuttia. Reaktioseos kaadettiin eetteriin.

25 9. NMR liuottimessa B: 3,2 - 3,6 (m, 4H); 3,96 (s, 3H); 4,1 - 4,6 (m, 4H); 5,15 (d, 1H); 5,77 (d, 1H); 7,07 (s, 1H); 6,9 - 7,3 (m, 2H); 8,0 - 8,4 (m, 2H).

10. HPLC eluenttina vesi/MeOH/HOAc (54:45:1 30 til. ./til./til 11. NMR liuottimessa B: 1,55 (s, 6H); 3,4 - 3,36 (m, 2H); 3,95 (s, 3H); 4,4 - 4,6 (m, 2H); 5,2 (d, 1H); 5,9 (d, 1H);5,4 (s, 2H); 7,1 (s, 1H); 7,0 - 7,2 , 8,2 - 8,4 (m, m, 3H); 7,8 - 8,3 (m, 4H).

no 80043 12. Lähtöainetta valmistettiin reagoittamalla 4-nitro—3-hydroksipyridiini-N-oksidia asetyylikloridin kanssa palautusjäähdyttäjää käyttäen yhden tunnin ajan.

Raaka tuote puhdistettiin nopealla kromatografiällä 5 käyttäen piihappogeeliä ja eluenttina Ct^C^/MeOH-seosta f .

\7 :3 til./til./, jolloin saatiin 4-kloori-3-hydroksipyridiini-N-oksidia. Tämän yhdisteen pelkistäminen Raney-nik-kelin ja vedyn avulla ympäristön lämpötilassa kahden tunnin ajan MeOH:ssa antoi 4-kloori-3-hydroksipyridiiniä.

10 Tämä yhdiste reagoitettiin NaH:n kanssa DMSO:ssa 50°:ssa, reaktioseos jäähdytettiin ja sitä käsiteltiin 4-nitro-bentsyylibromidin kanssa tunnin ajan. Reaktioseosta käsiteltiin edelleen vedellä ja eetterillä ja tuotetta käsiteltiin HCl/eetteriseoksella, jolloin saatiin 4-kloori-15 3-(4-nitrobentsyylioksi)pyridiinihydrokloridia. Vapaan emäksen reagoittaminen ylimäärin käytetyn metyylijodidin kanssa ympäristön lämpötilassa 24 tuntia antoi 4-kloori-l-metyyli-3-(4-nitrobentsyylioksi)pyridiniumjodidia.

NMR dgDMSO.-ssa : 4,35 (s, 3H) ; 5,6 (s, 2H) ; 7,7 20 (d, 2H); 8,3 (d, 2H); 8,4 (d, 1H); 8,7 (d, 1H); 9,15 (s, 1H).

Esimerkki 136

Esimerkeissä 57-65 esitetty yleinen menetelmä toistettiin ja tällöin saatiin 77 %:n saanto seuraavaa yhdis-25 tettä:

/S li H K

h2n-\ I M,s.

\\l C0_NH ΐγ x 11 <f> N-CH2CH=CH2

N - O —COOH U

f ^

cocH

m 80043 2. NMR liuottimessa A: 1,67 (br, 4H); 2,05 (br, 4H); 3,23 (d, 1H); 3,53 (d, 1H); 4,2 (d, 1H); 4,45 (d, 1H); 4,74 (d, 1H); 5,02 (d, 1H); 5,1 -5,3 (m, 2H)? 5,65 (d, 1H)? 5,8 - 6,1 (m, 1H); 6,73 5 (s, 1H); 6,97 (br, 1H); 7,28 (br, 1H); 8,07 (br, 2H).

Lähtöainetta valmistettiin kondensoimalla 2-/"((Z)-1-t-butoksikarbonyyli) syklopent-l-yyli)^/oksi-imino-2- (2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)etikkahappoa ja 7-amino-3-at-sidometyylikef-3-emi-4-karboksyylihappoa käyttäen esimer-10 kin 66 alaviitteen 3 menetelmää, jolloin saatiin 3-atsi-dometyyli-7- (2-/*( (Z) -1-t-butoksikarbonyyli) syklopent-l-yylioksi-imino/-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)aseta-mido)kef-3-3mi-4-karboksyylihappoa, jolla oli seuraava NMR CDCl3:ssa : 1,38 (s, 9H); 1,72 (br, 4H); 2,06 15 (br, 4H); 3,3 (d, 1H); 3,54 (d, 1H); 3,87 (d, 1H); 4,34 (d, 1H); 5,03 (d, 1H); 5,82 (q, 1H); 6,69 (s, 1H); 7,27 (s, 15H); 8,18 (d, 1H).

Atsidometyyliyhdiste pelkistettiin jatkamalla edellä mainittua menetelmää 3-aminometyyliyhdisteeksi, joka 20 puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä XAD-2-hart-sia ja yhdistettä käytettiin ilman täydellistä tunnistamista.

Claims (15)

112 80043

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten substi-tuoitujen 3-aminometyylikefalosporiinien valmistamiseksi, 5 joilla on kaava I R1-NH--S* N J.-N CH2-R4 1 10 r3 jossa R3 on kefalosporiinikemiassa tavanomainen C-4-substi-tuentti; on ryhmä, jolla on kaava II, V tai VI: 15 H R5 N f \ II /LL n" R6 20 HO-Λ_CH-CO- '! NH V / 25 CO-Rio R-ι -I -C-CO- VI Il

30 N \

0-R12 joissa Rtj ja Rg merkitsevät itsenäisesti vetyä tai metyyliä;

35 R1q on ryhmä, jolla on kaava VII tai VIII: I! 113 80043 o o y^f “N_N-C2H5 VII

5 HO H

10 R-^ on 2-aminotiatsol-4-yyli tai 2-amino-oksatsol-4-yyli, kumpikin valinnaisesti substituoituna 5-asemassa fluorilla, kloorilla tai bromilla, R12 on vety, C1_g-alkyyli, C3_g-sykloalkyyli, C3_g-syklo-alkyyli-CjL_3-alkyyli, C3_g-alkenyyli, C3_g-alkynyyli, 15 halogeeni-C^_3-alkyyli, hydroksi-C2_g-alkyyli, C^.^al-koksi-C2_^-alkyyli, amino-C2_g-alkyyli, syaani-C^.g-al-kyyli, atsido-C^_4~alkyyli, karbamoyyli-C^_4~alkyyli, fenyyli-C^_4~alkyyli, 5-metyyli-iso-oksatsol-3-yylimetyyli-li, 2-(2-karboksifenyylitio)etyyli tai ryhmä, jolla on 20 kaava XI -CR29R30-<CH2>m-COR31 XI jossa m on 0-3, R29 on vety tai Cj^-alkyyli, R30 on ve“ 25 ty tai C3_3~alkyyli tai R29 ja R3Q muodostavat karbosyk-lisen C3_-y-renkaan yhdessä sen hiiliatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, ja R33 on vety tai C^.^-alkoksi? R4 on ryhmä, jolla on kaava XII tai XIV:

30 R34 :: k'- /\R -N=C 33 XI1 R32 114 80 0 43 -NH—R40 XIV N R39 5 joissa R32 on vety, C^g-alkyyli, fenyyli tai karboksi-C^_g-alkyyli; R33 on vety, C-^g-alkyyli, fenyyli, karbok-si-C^_g-alkyyli tai syaani ja Rg4 on vety tai C^_g-alkyy-li tai R33 ja Rg4 muodostavat heksahydroatsepiinirenkaan yhdessä sen typpiatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet; 10 rengas Y on pyridiini, pyrimidiini, imidatsoli, dihydro-imidatsoli, tiatsoli tai iso-oksatsoli, joihin kuhunkin on mahdollisesti fuusioitunut, milloin se on mahdollista, bentseeni-, syklopentaani- tai sykloheksaanirengas; R39 on vety, C-^g-alkyyli, C^_4~alkoksi-C^_4-alkyyli, 15 fenyyli-C^_g-alkyyli, C^_g-alkoksikarbonyyli-C^_g-alkyyli, karboksi-C^_g-alkyyli, C^_g-alkyylitio-C1_g-alkyyli, C-L_g-alkoksi-C-L_g-alkoksi-C^_g-alkyyli, C^.g-alkyyli-sulfinyyli-C^_g-alkyyli, C^.g-alkoksi, fenyyli-C^_g-alkoksi, C^_g-alkoksikarbonyyliamino-C^_g-alkyyli, ami-20 no-C^_g-alkyyli, karbamoyyli-C^_g-alkyyli, hydroksi-C^_g-alkyyli, C^_g-alkanoyyli-C^_g-alkyyli, di-C^_g-··: alkyyliamino-C^_g-alkyyli, C^_g-alkanoyyliamino-C^_g- . - alkyyli, C3_g-sykloalkyyli, Cg.g-alkenyyli, amino, fe- nyyli-C^_g-alkyyli, jonka fenyylirengas on mahdollises-- 25 ti substituoitu syaanilla, C^_g-alkoksilla, C^_g-alkok- sikarbonyylillä, halogeenillä, C-^g-alkyylillä, nitrolla tai karboksilla, tai ryhmä, jolla on kaava -(CH2)n-N=CR43NR44R45 30 :: jossa n on 1-4 ja R43, R44 ja R4g merkitsevät kukin it- : : senäisesti vetyä tai C^_4-alkyyliä; ja ‘ R40 on vety tai yksi tai kaksi substituenttia, jotka on valittu seuraavasta: C^.g-alkyyli, halogeeni-C]__g-alkyy-35 li, karbamoyyli, halogeeni, C^_g-alkoksi, C^_g-alkoksi- ti. 115 80043 karbonyyli-C^.g-alkyyli, amino, 2-aminoetyylitiometyyli, C^_g-alkanoyyliamino-C^_g-metyyli, amino-C-^.g-alkyyli, nitro, fenyyli-C-^g-alkyyli ja nitrobentsyylioksi; ja, kun kaavan I mukaisessa yhdisteessä ei ole 5 positiivista varausta, sen farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi, ja siinä tapauksessa, että kaavan I mukaisessa yhdisteessä on kar-boksi, sen farmaseuttisesti hyväksyttävien emäs-addi-tiosuolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 10 a) reagoitetaan yhdistettä, jolla on kaava XVIII: S r-l-nh —-p > , Λ_CH->NHo XVIII 15 k lisäämällä aminoryhmä aktivoituun C=C- tai C=N-sidokseen, joissa on hiilessä radikaali Rgg, jonka jälkeen eliminoidaan HRgQ tuotteesta, jossa Rgg on korvattavissa oleva 20 radikaali; b) sellaisten yhdisteiden ollessa kysymyksessä, joissa on karboksi- ja/tai aminoradikaali, poistetaan suojaus vastaavalta yhdisteeltä, jossa on suojaava ryhmä relevantin vetyatomin paikalla; 25 c) kysymyksen ollessa yhdisteistä, joissa R^ on kaavaltaan V tai VI, asyloidaan yhdiste, jolla on kaava XIX: 3° XIX J’— n^ch2-r4 “3 hapolla, jolla on kaava R^^-OH, jossa R^- on kaavaltaan 35 V''tai VI, tai sen aktivoidulla johdannaisella; 80043 d) kysymyksen ollessa yhdisteistä, joissa R-^ on kaavaltaan VI, jossa on jokin muu kuin vety, reagoi- tetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa on kaavaltaan VI, jossa R-j_ on vety, yhdisteen kanssa, jolla on kaava 5 r50”r52' j°ssa r50 on korvattavissa oleva radikaali ja ja R52 on jokin R-^in merkityksistä lukuunottamatta vetyä; e) kysymyksen ollessa yhdisteistä, joissa R-|_ on kaavaltaan VI, reagoitetaan yhdiste, jolla on kaava XXI;

10 RU-CO-CO-NH -S S XXI ^-CH2-R4 R3 15 yhdisteen kanssa, jolla on kaava I^N-O-R-^; jonka jälkeen, kun kaavan I mukainen yhdiste saadaan vapaan emäksen tai amfoteerin muodossa, ja halutaan saada suola, reagoitetaan vapaan emäksen tai amfoteerin muodossa oleva kaavan I mukainen yhdiste hapon kanssa, 20 joka antaa farmaseuttisesti hyväksyttävissä olevan anio-nin, tai kun kaavan I mukaisessa yhdisteessä on karboksi, kaavan I mukainen yhdiste reagoitetaan emäksen kanssa, joka antaa farmaseuttisesti hyväksyttävissä olevan kationin.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 25 tunnettu siitä, että valmistetaan kefalosporiini-johdannainen, jossa R·^ on kaavaltaan VI, R3 on karboksi ja R^ on kaavaltaan XIV.

3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kefalosporiini- 30 johdannaisen, jossa R·^ on 2-aminotiatsol-4-yyli.

4. Patenttivaatimuksen 2 tai 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kefalosporiini-johdannainen, jossa R12 on metyyli, etyyli, i-propyyli, allyyli, propargyyli, syklopentyyli, syklopropyylimetyy- 35 li, 2-kloorietyyli, 2-bromietyyli, syanometyyli, 2-sya- ti 117 80043 noetyyli, 2-hydroksietyyli, 2-etoksietyyli, bentsyyli tai on kaavaltaan XI, jossa m on 0, R29 ja R^q ovat molemmat vetyjä tai metyylejä tai R29 ja R3Q muodostavat yhdessä sen hiilen kanssa, johon ne ovat kiinnittyneet, 5 syklobutyyli- tai syklopentyylirenkaan ja R33 on vety tai metoksi.

5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kefalosporii-nijohdannainen, jossa R^ on kaavaltaan XIV, jossa rengas 10. on pyridiini, johon on valinnaisesti liittynyt bentsee-ni- tai syklopentaanirengas, pyrimidiini, johon on valinnaisesti liittynyt bentseenirengas, tiatsoli tai isoksatsoli.

6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, 15 tunnettu siitä, että valmistetaan kefalosporii- nijohdannainen, jossa R39 on metyyli, etyyli, n-propyyli, i-propyyli, allyyli, karbaraoyylimetyyli, (2-asetyyliami-no)etyyli, metyylitiometyyli, 2-hydroksietyyli, 2-amino-etyyli, 4-nitrobentsyyli, CH2CH2N=C(CH3)NH2 tai

20 CH2C(NH)NH2 ja R^q on vety, fluori, amino, metyyli, metoksi tai karbamoyyli.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kefalosporii-nijohdannainen, joka on valittu yhdisteryhmästä, joka 25 on lueteltu seuraavassa taulukossa, ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävä emäsadditiosuola: s . H H g

30 H2N—(x || CO-NH “f-Y ^ Λ V JAA ^0-^2 io<£) 118 80043 -Rl 2 ~R4- -c(ch3)2cooh _nh_^^ch3 -c(ch3)2cooh -nh_<^J^-ch3 ch3 -C(CH3)2COOH -νη_^Λ@.οη3 -C(CH3)2COOH -nh—^~^n^-ch2ch2nh2 -c(ch3)2cooh -nh-^~~^^-CH(CH3) 2 -C(CH3)2COOH -nh—f^-CH3 F ^ -C(CH3)2COOH ° -NH V ”\ -C(CH3)2COOH _nh ^e,CH2cH.CH2 -C(CH3)2COOH -NH ~CH3 O -ch2co°h II 119 80043

8. Kefalosporiinijohdannainen, tunnettu siitä, että sillä on kaava XIX: ? H s

5 H2N-—γ N J-N^XCh2-r4 XIX o jossa ja R^ tarkoittavat samaa kuin patenttivaatimukses-10 sa 1, sekä sen happoadditiosuolat. 120 80043