FI76074B - Foerfarande foer framstaellning av antihypertensiva 3-amino-/1/bensazepin-2-on-1-alkansyror. - Google Patents

Description

76074

Menetelmä antihypertensiivisten 3-amino-[l]bentsatsepin-2-oni-l-alkaanihappojen valmistamiseksi - Förfarande för fram-ställning av antihypertensiva 3-amino-[l]bensazepin-2-on-l-alkansyror GB-patenttijulkaisussa 1,305,278 on kuvattu kinoliini-, bentsatsepiini- ja bentsatsokiiniyhdisteitä, joilla on hete-rosyklisen renkaan joko 3- tai 4-asemassa välttämättä sekä mahdollisesti substituoitu fenyylisubstituentti että amino-alkyleeniryhmä. Ne soveltuvat keskushermostojärjestelmän stimulanteiksi ja niitä voidaan käyttää depressioiden hoitoon. US-patentissa 3,748,321 on kuvattu N-(dialempialkyyliamino-alempialkyyli J-N-alempialkyyli-l-bentsalkyleeni-imiini-l-karboksamidei ta, joita voidaan käyttää rauhoittavina lääkkeinä. Ruotsalaisessa kuulutusjulkaisussa 372,012 on kuvattu tiettyjä 3-alkoksikarbonyyli-3-amino-4-hydroksi-tetrahydro-kinolin-l-oneja, joita voidaan käyttää välituotteina farmaseuttisesti arvokkaiden 1,4-bentsodiatsepiinijohdannaisten valmistamiseksi.

Tämä keksintö perustuu siihen, että on todettu tiettyjen, substituoitujen 3-amino-[l]bentsatsepin-2-oni-l-alkaa-nihappojen ja niiden johdannaisten muodostavan uuden, angio-tensiinia muuttavaan entsyymiin (ACE) nähden voimakkaasti vaikuttavien inhibiittorien luokan.

Edellä mainitut ominaisuudet tekevät keksinnön mukaiset 3-amino-[1]bentsatsepin-2-onit erityisen arvokkaiksi annostettaessa niitä sellaisinaan tai yhdistelminä imettäväisille, esimerkiksi hoidettaessa tai ehkäistäessä sairauksia, joihin vaikuttaa angiotensiinia muuttavan entsyymin estyminen, esim. kardiovaskulaariset häiriöt, kuten korkea verenpaine ja kardiaaliset olotilat, kuten kongestiiviset sydämen toimintahäiriöt.

Keksintö koskee uusia 3-amino-[l]bentsatsepin-2-oni-l-alkaanihappoja ja niiden johdannaisia, joka ovat arvokkaita angiotensiinia muuttavan entsyymin inhibiittoreina, menetelmää niiden valmistamiseksi, näitä yhdisteitä sisältäviä farmaseuttisia koostumuksia ja menetelmiä sellaisten sairauksien hoitamiseksi, joihin vaikuttaa angiotensiinia muuttavan 2 76074 entsyymin estyminen, annostamalla näitä yhdisteitä ja koostumuksia imettäväisille.

Keksinnön mukaisilla yhdisteillä on yleinen kaava (I)

R4 X

Λ (le I , y-<„

Re 0 /»1

jossa Ra tarkoittaa tähdettä -CH

ja Ro tarkoittaa tähdettä -CH

\r

kO

joissa R0 RÄ:ssa tarkoittaa ryhmää CORg ja RB:ssä ryhmää COR7, joissa Rg ja R7 tarkoittavat toisistaan riippumatta hydroksia, alempialkoksia tai £enyylialempialkoksia; ja Ri tarkoittaa vetyä tai fenyylialempialkyyliä; R2 on vety tai alempialkyyli; R3 ja R4 tarkoittavat toisistaan riippumatta vetyä, alempialkoksia tai halogeenia; R5 on vety ja X tarkoittaa kahta vetyatomia tai samanaikaisesti vetyatomin kanssa hydroksiryhmää; ja niiden stereoisomeerien ja suolojen valmistamiseksi.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden suolat johdetaan sellaisista yhdisteistä, jotka omaavat suolaa muodostavia ominaisuuksia, ja ovat mieluimmin farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja.

Esteröityä karboksyyliryhmää havainnollistetaan osakaa-valla -CORg (tähteessä RA) tai osakaavalla -COR7 (tähteessä Rg), joissa toinen tähteistä Rg ja R7 tai molemmat tähteet tarkoittavat alempialkoksia tai fenyylisubstituoitua alempi-alkoksia, esim. mahdollisesti substituoitua bentsyylioksia.

Il 3 76074

Keksinnön mukaisten yhdisteiden johdannaiset, jotka muodostavat tehoaineen esiasteita, esim. keksinnön mukaisten mono- tai dikarboksyylihappojen kaikki farmaseuttisesti sopivat esterit, jotka voidaan muuttaa solvolyysillä tai fysiologisissa olosuhteissa tämän keksinnön mukaisiksi karboksyy-lihapoiksi, esim. edellä mainitut esterit ovat erityisesti tämän keksinnön kohteena.

Nämä esterit ovat mieluimmin esim. suoraketjuisia tai haarautuneita, substituoimattomia tai sopivalla tavalla subs-tituoituja alempialkyyliestereitä, kuten bentsyyliesteri ja vastaavat.

Keksintö koskee erityisesti yhdisteitä, joiden kaava (IA) on J I il CO—Rc R3 CH° 6 1*2 XCO-R? jossa Ri tarkoittaa vetyä tai aryyli-(alempi)alkyyliä, jossa aryyli tarkoittaa substituoimatonta fenyyliä, R2 tarkoittaa vetyä tai alempialkyyliä, R3 ja R4 tarkoittavat vetyä, alem-pialkoksia tai halogeenia, R5 tarkoittaa vetyä, X tarkoittaa hydroksiryhmää ja vetyatomia tai kahta vetyatomia, Rg ja R7 tarkoittavat toisistaan riippumatta hydroksia, alempialkok-sia tai fenyyli-(alempi)alkoksia, tai niiden farmaseuttisesti sopivia suoloja.

Erityisen arvokkaita ovat kaavan (IA) mukaiset yhdisteet, joissa Ri tarkoittaa vetyä tai fenyyli-(alempi)alkyy-liä, R2 tarkoittaa vetyä tai alempialkyyliä, R3 ja R5 tarkoittavat vetyä, R4 tarkoittaa vetyä, alempialkoksia tai halogeenia, X tarkoittaa hydroksiryhmää ja vetyatomia tai kahta vetyatomia, Rg ja R7 tarkoittavat toisistaan riippumatta hydroksia, alempialkoksia tai fenyyli-(alempi)alkoksia, tai niiden farmaseuttisesti sopivat suolat.

Ennen muuta arvokkaita ovat kaavan (IA) mukaiset yhdis- 4 76074 teet, joissa R^ tarkoittaa vetyä tai aryyli-(metyyliä, etyyliä, propyyliä), joissa aryyli tarkoittaa substituoimatonta fenyyliä, R2 on vety tai metyyli, R3 ja R4 ovat vety, metok-si tai kloori, R5 on vety, X tarkoittaa hydroksiryhmää ja vetyatomia tai kahta vetyatomia, Rg ja R7 tarkoittavat toisistaan riippumata hydroksia, etoksia, metoksia tai bentsyy-lioksia, tai niiden farmaseuttisesti sopivat suolat.

Ylivoimaisen arvokkaita ovat yhdisteet, joilla on kaava (IB) (PV Vnh-CH^ CnH2n"*R8 (IB} '^'C0~Re I o CH2-CO-R7 jossa n on kokonaisluku 1-4, Rg tarkoittaa substituoimatonta fenyyliä, Rg ja R7 tarkoittavat toisistaan riippumatta hydroksia, alempialkoksia, jossa on enintään 4 hiiliatomia tai bentsyylioksia, tai niiden farmaseuttisesti sopivat suolat.

Erityisen arvokkaita ovat kaavan (IB) mukaiset yhdisteet, joissa CnH2n tarkoittaa etyleeniä, Rg tarkoittaa fenyyliä, Rg ja R7 tarkoittavat toisistaan riippumatta hydroksia tai alempialkoksia, jossa on enintään 4 hiiliatomia, tai niiden farmaseuttisesti sopivat suolat.

Tämä keksintö koskee myös kaavan (I) mukaisten yhdisteiden stereoisomeereja. Joukko rasemaatteja saadaan esim. silloin, kun kaavassa (IA) ainakin toinen tähteistä Ri ja R2 on eri kuin vety ja/tai X tarkoittaa ryhmää H(OH).

Voidaan puolestaan saada näiden rasemaattien yksittäiset enantiomeerit. Näiden isomeerien määrätyt, spesifiset edustajat ovat edullisia angiotensiinia muuttavan entsyymin inhibiittoreina.

Edullisia ovat yhdisteet, joilla on kaava (IC) C H —R_ ^, (S)/ n 2n 8 Π T (S )V~NH-CH (IC) n \x>-R6 I O 6 CH2-CO-R?

II

5 76074 jossa S tarkoittaa kiraalisuutta, n on kokonaisluku 1-4, Rg tarkoittaa substituoimatonta fenyyliä, Rg ja R7 tarkoittavat toisistaan riippumatta hydroksia, alempialkoksia, jossa on enintään 4 hiiliatomia tai bentsyylioksia, tai näiden farmaseuttisesti sopivat suolat.

Tässä käytetyillä yleisillä määritelmillä on keksinnön piirissä seuraavat merkitykset.

Aryyli tarkoittaa mieluimmin fenyyliä.

Aryyli-(alempi)alkyyli tarkoittaa mieluimmin bentsyyliä, 1- tai 2-fenetyyliä, 1-, 2- tai 3-fenyylipropyyliä, 1-, 2-, 3- tai 4-fenyylibutyyliä, joissa fenyylirengas on substituoi-maton.

Sanonta "alempi", jota käytetään edellä olevien ja jäljempänä seuraavien orgaanisten tähteiden tai yhdisteiden yhteydessä, määrittelee nämä sellaisiksi, jotka sisältävät enintään 7, mieluimmin enintään 4 ja kaikkein mieluimmin 1 tai 2 hiiliatomia.

Alempialkyyliryhmä sisältää mieluimmin 1-4 hiiliatomia ja tarkoittaa esim. etyyliä, propyyliä, butyyliä tai mieluimmin metyyliä.

Alempialkoksiryhmä sisältää mieluimmin 1-4 hiiliatomia ja on esimerkiksi metoksi, propoksi, isopropoksi tai mieluimmin etoksi.

Aryyli-alempialkoksi tarkoittaa mieluimmin esim. bentsyylioksia.

Halogeeni tarkoittaa mieluimmin klooria, se voi kuitenkin olla myös bromi, fluori tai jodi.

Keksinnön mukaisesti voi toinen tai molemmat dikarbok-syylihappojen karboksyyliryhmistä, ts. kaavan (IA) tai (B) mukaisten yhdisteiden, joissa Rg ja R7 ovat hydroksi, olla funktionaalisten johdannaisten muodossa estereinä. Tällaisia funktionaalisia johdannaisia ovat mieluimmin mono- tai bis-alempialkyyliesterit, esim. metyyli-, etyyli-, n- tai iso-propyyli-, butyyli- tai bentsyyliesteri.

6 76074

Erityisen edullisia funktionaalisia johdannaisia ovat kaavan (IA) mukaiset monoesterit, esim. sellaiset, joissa toinen tähteistä Rg ja tarkoittaa hydroksia ja toinen alem-5 pialkoksia.

Farmaseuttisesti sopivia suoloja ovat mieluimmin kaavan (I) mukaisten yhdisteiden, joissa Rq tarkoittaa karbok-sia, metalli- tai ammoniumsuolat, tai kaavan (IA) mukaisten yhdisteiden, joissa CORg ja/tai COR^ tarkoittavat karboksia, 10 metalli- tai ammoniumsuolat, erityisesti alkali- tai maa- alkalimetallisuolat, esim. natrium-, kalium-, magnesium- tai kalsiumsuolaj tai mieluimmin helposti kiteytyvät ammoniumsuolat, jotka johdetaan ammoniakista tai orgaanisista amiineista, kuten mono-, di- tai tri-alempi(alkyyli, sykloalkyy-15 li tai hydroksialkyyli)amiineista, alempialkyleenidiamiineis-ta tai alempi-(hydroksialkyyli tai aralkyyli)ammoniumemäksis-tä, esim. metyyliamiinista, dietyyliamiinista, trietyyliamii-nista, disykloheksyyliamiinista, trietanoliamiinista, etylee-nidiamiinista, tris-(hydroksimetyyli)aminometaanista tai 20 bentsyylitrimetyyliammoniumhydroksidista. Nämä kaavan (I) mukaiset yhdisteet muodostavat happoadditiosuoloja, jolloin niitä käsitellään mieluimmin terapeuttisesti sopivilla epäorgaanisilla tai orgaanisilla hapoilla, kuten vahvoilla mine-raalihapoilla, esim. halogeenivetyhapoilla, esim. kloorivety-25 tai bromivetyhapolla; rikkihapolla, fosforihapolla, typpihapolla tai perkloorihapolla; alifaattisilla tai aromaattisilla karboksyyli- tai sulfonihapoilla, esim. muurahaishapolla, etikkahapolla, propionihapolla, meripihkahapolla, glykoliha-polla, maitohapolla, omenahapolla, viinihapolla, glukoniha-30 polla, sitruunahapolla, askorbiinihapolla, maleiinihapolla, fumaarihapolla, hydroksimaleiinihapolla, palorypälehapolla, fenyylietikkahapolla, bentsoehapolla, 4-aminobentsoehapolla, antraniilihapolla, 4-hydroksibentsoehapolla, salisyylihapolla, 4-aminosalisyylihapolla, pamoehapolla, nikotiinihapolla; 35 metaanisulfonihapolla, etaanisulfonihapolla, hydroksietaani-sulfonihapolla, bentseenisulfonihapolla, p-tolueenisulfoni-

II

7 76074 hapolla, naftaliinisulfonihapolla, sulfaniliinihapolla tai sykloheksyylisulfamiinihapolla.

Kaavan (I) mukaisilla yhdisteillä on arvokkaita farmakologisia ominaisuuksia, jotka ilmenevät ennen muuta 5 niiden estovaikutuksena angiotensiini II eritykseen. Tämä vaikutus perustuu imettäväisissä angiotensiinia muuttavan entsyymin selektiiviseen estymiseen. Yhdisteet ovat täten hyödyllisiä hoidettaessa sairauksia, jotka reagoivat imettäväisissä, mukaan lukien ihmisissä, angiotensiinia muuttavan 10 entsyymin estymiseen.

Keksinnön mukaiset yhdisteet omaavat ensi sijassa hypotensiivisen/antihypertensiivisen vaikutuksen ja ne vaikuttavat sydämen sykintätiheyteen. Nämä ominaisuudet voidaan osoittaa in vivo- tai in vitro-eläinkokeissa, mieluim-15 min imettäväisissä, kuten esim. koe-eläiminä käytetyissä rotissa, kissoissa, koirissa tai niiden eristetyissä elimissä. Eläimet voivat olla normotensiivisia tai hyperten-siivisia, esim. geneettisesti spontaanisesti hypertensiivi-sia rottia tai renaalisesti hypertensiivisia rottia tai koi-20 ria ja koiria, joiden natrium-arvo on alentunut. Yhdisteet voidaan antaa koe-eläimille enteraalisesti tai parenteraali-sesti, mieluimmin oraalisesti tai suonensisäisesti, esim. liivatekapseleina tai tärkkelystä sisältävien suspensioiden vast, vesipitoisten liuosten muodossa. Käytetty annos voi 25 olla noin 0,01 - 100 mg/kg/päivä, mieluimmin noin 0,05-50 mg/kg/päivä, erityisesti noin 0,1-15 mg/kg/päivä.

Verenpainetta alentava vaikutus in vivo määritetään joko suoraan katetrilla, joka viedään koe-eläimen reisival-timoon tai epäsuorasti sfygmomanometrilla rotan hännässä 30 siirtolaitteen avulla. Verenpaine määritetään ennen aktii-viaineen annostamista ja sen jälkeen mm:na Hg.

Niinpä ovat antihypertensiiviset vaikutukset osoitettavissa spontaanisti hypertensiivisilla rotilla systolisen verenpaineen epäsuoralla mittauksella. Ei-nukutetut rotat 35 laitetaan yksinään häkkiin, joka rajoittaa niiden liikkumista, lievästi kuumennetussa huoneessa. Jokaisen rotan häntään 8 76074 liitetään pulssisensori puhallettavissa olevan mansetin sisälle. Mansetti puhalletaan häntävaltimon sulkemiseksi. Painetta mansetissa vähennetään jatkuvasti ja systolista painetta vastaa paine mansetissa silloin, kun pulssisyke 5 taas esiintyy. Sen jälkeen kun verenpaineen ja sydämen sykintätiheyden kontrolliarvot on rekisteröity, annostetaan testattavat yhdisteet peroraalisesti kerran päivässä neljänä peräkkäisenä päivänä. Lisäverenpainemittauksia suoritetaan tavalliseen tapaan 2,0, 4,0 ja 23,5 tuntia jokaisen 10 päivittäisen annoksen jälkeen. Arvoja verrataan niiden rottien arvoihin, jotka käsitellään ainoastaan kantaja-aineella.

Keksinnön havainnollistamiseksi mainittakoon esimerkin 1 "korkeammalla sulavan" l-karboksimetyyli-3-(1-etoksikarbo-nyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-15 bentsatsepin-2-onin antihypertensiivinen vaikutus: annoksen ollessa 3 mg/kg p.o. verenpaine alenee keskimäärin 40 mm:llä Hg. Mittaukset on suoritettu 2 ja 4 tunnin kuluttua annostuksesta kahtena viimeisenä päivänä. Vastaava, esimerkin 12 S,S-enantiomeerinen yhdiste laskee verenpaineen, peroraa-20 lisen annoksen ollessa 1 mg/kg, 30 mm:llä Hg.

Keksinnön mukaiset yhdisteet omaavat suonensisäisesti tai oraalisesti annostettuina estovaikutuksen angiotensiinin I aiheuttamaan verenpaineen kohoamiseen myös normotensiivi-silla rotilla. Mainittu muuttava entsyymi hydrolysoi angio-25 tensiinin I ja angiotensiinin II, joka on verenpainetta voimakkaasti kohottava aine. Mainitun entsyymin estyminen vähentää angiotensiinin II muodostumista angiotensiinistä I. Tällä tavalla vähenee angiotensiinin I provosoima verenpaineen kohoaminen.

30 Vastaavat in vivo-testit suoritetaan annostamalla suo nensisäisesti yhdisteitä normotensiivisille urosrotille, jotka on nukutettu 5-etyyli-5-(1-metyylipropyyli)-2-tiobarbi-tuurihapon natriumsuolalla. Reisivaltimoon ja pohjelaski-moon liitetään jokaiselle koe-eläimelle kulloinkin reikäneu-35 la verenpaineen mittaamiseksi suoraan sekä angiotensiinin I ja keksinnön mukaisen yhdisteen suonensisäisen annostuksen

II

9 76074 suorittamista varten. Kun perusverenpaine on stabiloitunut, määritetään paineen muutokset kolmen, 5 minuutin ajanjaksoissa i.v. suoritetun ärsytyksen jälkeen, jolloin ärsytys aiheutetaan annostamalla 333ng/kg angiotensiiniä I. Tällai-5 set paineen muutokset määritetään vielä 5, 10, 15, 30 ja 60 minuutin kuluttua testattavan yhdisteen suonensisäisestä annostuksesta. Viimeksi mainittuja paineen muutosarvoja verrataan lähtöarvoihin. Jokainen todettu verenpainevaiku-tuksen väheneminen on osoitus angiotensiiniä I muuttavan 10 entsyymin estymisestä. Keksinnön kuvaamiseksi viitataan esimerkin 1 "korkeammalla sulavan" l-karboksymetyyli-3-(1-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahyd-ro-lH-(l]bentsatsepin-2-oniin ja esimerkin 12 vastaavaan S,S-enantiomeeriin. Nämä estävät täydellisesti verenpaineen 15 kohoamisen angiotensiini I-ärsytyksen jälkeen 30 minuutin ajan suonensisäisestä annostuksesta, joka on 1 mg/kg ainetta.

Angiotensiiniä muuttavan entsyymin in-vitro-estyminen voidaan todeta keksinnön mukaisilla yhdisteillä analogisesti julkaisussa Biochem. Biophys. Acta 293, 451 (1973) esitetyn 20 menetelmän kanssa. Tämän menetelmän mukaisesti mainitut yhdisteet liuotetaan noin 1 mmoolin konsentraatioina fosfaattipuskuriin. 100 mikrolitraan liuosta, jossa on testattava yhdiste fosfaattipuskurissa, ja joka liuos laimennetaan toivottuun konsentraatioon, lisätään ensin 100 mikrolitraa 5 25 millimolaarista hippuryyli-histidyyli-leusiinia fosfaatti-puskurissa ja sen jälkeen 50 yl angiotensiiniä muuttavaa entsyymiä. Tämä entsyymi valmistetaan täyskasvuisten uros-kaniinien keuhkoista tris-puskuriin, joka sisältää kalium-ja magnesiumkloridia sekä myös ruokosokeria. Mainittuja 30 liuoksia inkuboidaan 30 minuuttia 37°C:ssa ja reaktio pysäytetään lisäämällä 0,75 ml 0,6-normaalista, vesipitoista natriumhydroksidiliuosta. Sen jälkeen lisätään huoneen lämpötilassa 100 mikrolitraa 0,2 % o-ftaalialdehydin liuosta metanolissa ja 10 minuutin kuluttua 100 mikrolitraa 6-nor-35 maalista kloorivetyhappoa. Näitä näytteitä verrataan spektrofotometrissä 360 nm:ssa veteen ja niiden optinen ti- ίο 7 60 7 4 heys määritetään. Nämä arvot muutetaan konversiotekijällä vastaamaan standardi-käyrää, jolloin mainitun 30 minuutin inkuboinnin kuluessa muodostunut histidyyli-leusiini-määrä saadaan nanomooleissa. Tulokset esitetään IC^Q-arvon mää-5 rittämiseksi, graafisesti käyränä aktiiviaine-konsentraati-oihin verrattuna. IC^Q-arvo tarkoittaa sellaista aktiivi-aine-konsentraatiota, joka antaa tulokseksi aktiiviainetta sisältämättömän kontrollinäytteen aktiviteetti-arvosta puolet. Keksinnön havainnollistamiseksi viitataan esimerkin 10 9 "korkeammalla sulavan" l-karboksimetyyli-3-(l-karboksi-3- fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin- 2-oniin ja esimerkin 19 vastaavaan S,S-enantiomeeriin, joi- -9 -9 den IC5Q-arvo on 5,2 x 10 M ja 1,7 x 10 M. Esimerkin 8 vastaavan "alempana sulavan" l-karboksimetyyli-3-(1-karbok-15 si-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bents-

_ O

atsepin-2-onin IC^-arvo on 5,8 x 10 M.

Angiotensiinia muuttava entsyymi ei osallistu ainoastaan angiotensiinin I muuttamiseen angiotensiiniksi II vaan sillä on osansa myös bradykiniinin ja aldosteronin tasojen 20 säädössä. Keksinnön mukaisten yhdisteiden vaikutus näihin tekijöihin voi edesauttaa myös niiden antihypertensiivisiä ja sydämen toimintaan vaikuttavia ominaisuuksia.

Edellä mainittujen edullisten ominaisuuksiensa ansiosta ovat keksinnön mukaiset yhdisteet erittäin arvokkaita 25 spesifisinä terapeuttisina aineina imettäväisille, mukaan lukien ihmisille.

Täten ovat keksinnön mukaiset yhdisteet arvokkaita antihypertensiivisiä aineita, erityisesti korkean verenpaineen alentamiseksi (etiologiaan katsomatta) ja/tai sydänsai-30 rauksissa, kuten sydäninsuffisienssissä ja/tai muissa olotiloissa, joissa esiintyy turvotusta tai vesivatsaisuutta. Niitä voidaan käyttää myös välituotteina valmistettaessa muita arvokkaita tuotteita, erityisesti farmakologisesti tehokkaiden valmisteiden valmistuksessa.

35 Keksinnön mukaiset kaavan (I) mukaiset yhdisteet voi daan valmistaa sinänsä tunnetulla tavalla siten, että esim.

It 11 76074 a) yhdisteeseen, jonka kaava (II) on

R4 X

fr J NH—R,- (II) 3 i.° jossa X, Rfi, R^, R4 ja R5 tarkoittavat samaa kuin edellä, liitetään RÄ alkyloimalla yh-5 disteellä, jonka kaava (IIIA) on R -Z (IIIA) /i jossa Z tarkoittaa reaktiivista, esteröityä hydroksyyliryh-mää ja RÄ tarkoittaa samaa kuin edellä, tai alkyloimalla yhdisteellä, jonka kaava (IV) on

Rx - CO - Rq (IV) jossa R^ ja Rq tarkoittavat samaa kuin edellä, pelkistysai-10 neen läsnäollessa, samalla väliaikaisesti suojaten mahdolliset primääriset ja sekundääriset aminoryhmät ja/tai mahdollisesti hydroksyyli- ja/tai oksoryhmät, jotka voivat olla läsnä missä tahansa tähteessä X, R, , R_, R., R_, R. ja Rr, A B 1 3 4 J 5 tai 15 b) yhdiste, jonka kaava (V) on

'»S H O

jossa X, R^, R4 ja R^ tarkoittavat 12 76074 samaa kuin edellä ja Ra« on vety tai se tarkoittaa samaa kuin RA edellä, alkyloidaan yhdisteellä, jonka kaava (IIIB) on RB“Z (IIIB) jossa Z tarkoitta reaktiivista, esteröityä hydroksyyliryhmää ja RB tarkoittaa samaa kuin edellä, jolloin suojataan väliaikaisesti mahdolliset primääriset ja sekundääriset aminoryh-mät ja/tai mahdollisesti hydroksyyli- ja/tai oksoryhmät, jotka voivat olla missä tahansa tähteessä X, RÄ, rb, R3, R4 ja R5, tai c) yhdiste, jonka kaava (VI) on <vi> R3 k° jossa Y tarkoittaa oksoa tai reaktiivista esteröityä hydroksyyliryhmää Z yhdessä vetyatomin kanssa ja X, RB, R3 ja R4 tarkoittavat samaa kuin edellä, kondensoidaan amiinin kanssa, jonka kaava (VII) on RA-NH-R5 (VII) jossa Ra ja R5 tarkoittavat samaa kuin edellä jolloin, kun Y tarkoittaa oksoa, kodensaatio suoritetaan pelkistysaineen läsnäollessa, tai d) yhdisteessä, jonka kaava (VIII) on

R4 X R

-V R5 / 1

(r Ί V-N-CH

T^N-V \R , R- I O 0

3 CH

/ \ R2 Ro" jossa tähteet Ri - R5 tarkoittavat samaa kuin edellä, toinen symboleista R0' ja R0" on syaani ja toinen on syaani tai tarkoittaa samaa kuin R0 edellä, syaaniryhmä(t) saatetaan alttiiksi solvolyysille, tai e) yhdiste, jonka kaava (IX) on

II

COOH A

3 rb 13 76074 jossa X, R^, RB, R3, R4 ja R5 tarkoittavat samaa kuin edellä, tai sen esteri syklisoidaan, tai f) yhdiste, joka rakenteellisesti on identtinen edellä annetun kaavan I mukaisen yhdisteen kanssa, lukuun ottamatta, että yhdiste sisältää ylimääräisen kaksoissidoksen C-3-asemassa tai typpiatomin ja sen viereisen ryhmässä R& olevan hiiliatomin välillä, käsitellään pelkistysaineella, tämän kaksoissidoksen tyydyttämiseksi, ja saatu, edellä määritellyn kaavan I mukainen yhdiste muutetaan haluttaessa toiseksi, edellä annettujen määritelmien puitteissa olevan kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi ja/tai saatu, edellä määritellyn kaavan I mukainen yhdiste, jolla on suolan muodostavia ominaisuuksia, muutetaan haluttaessa suolakseen tai vapaa yhdiste vapautetaan tällaisesta suolasta ja/tai optinen isomeeri, jolla on spesifinen konfiguraatio ainakin yhdessä kiraalisuuskeskuksessa, vapautetaan haluttaessa saadun, kaavan I mukaisen yhdisteen stereoisomeeristen muotojen seoksesta.

Menetelmien a) ja b) mukainen alkylointi, joka suoritetaan tähteen R& vast. RB liittämiseksi, tapahtuu tavalliseen tapaan, mieluimmin siten, että vastaavaa kaavan (II) tai (V) mukaista lähtöainetta käsitellään alkylointiaineella, jonka kaava on R^-Z (IIIA) tai RB (IIIB), joissa RÄ ja RB tarkoittavat samaa kuin edellä ja Z on reaktiivinen esteröity hyd-roksyylityhmä, kuten vahvalla orgaanisella hapolla esteröity hydroksyyliryhmä, esim. alifaattisella tai aromaattisella sulfonihapolla (kuten alempialkaanisulfonihapolla, erityisesti metaanisulfonihapolla, trifluorimetaanisulfonihapolla, erityisesti bentseenisulfonihapolla, p-tolueenisulfonihapolla, p-bromibentseenisulfonihapolla ja p-nitrobentseenisulfo-nihapolla) ja vahvalla, epäorgaanisella hapolla, kuten erityisesti rikkihapolla tai halogeenivetyhapolla, kuten kloo-rivetyhapolla tai kaikkein mieluimmin jodivetyhapolla tai bromivetyhapolla esteröity hydroksyyliryhmä. Alkylointi suoritetaan tavallisesti olosuhteissa, joissa lämpötila on noin 0°C - reaktioseoksen kiehumislämpötila, mieluimmin huoneen lämpötilan ja noin 100°C:n vä- 14 7 6 0 7 4

Iillä. Reaktio tapahtuu mieluimmin liuottimen läsnäollessa, joka on inertti reagoiviin aineisiin nähden, kuten klooratun alempialkaanin (esim. kloroformin tai metyleenikloridin) asyklisen tai syklisen eetterin (esim. dietyylieetterin, 5 1,2-dimetoksietaanin, dioksaanin tai tetrahydrofuraanin) ja erityisesti tertiäärisen, alhaisen molekyylipainon omaavan amidin (esim. Ν,Ν-dimetyyliformamidin, N,N-dimetyyliasetami-din, N-metyylipyrrolidonin, N-etyylipiperidonin ja heksa-metyylifosforihappo-trisamidin) läsnäollessa. Reaktion kulo luessa vapautuva vahva happo HZ sidotaan parhaiten lisäämällä happoa sitovaa ainetta, esim. mieluimmin jotain epäorgaanista happoa sitovaa ainetta, kuten alkalimetallibikarbonaat-tia, -karbonaattia tai -hydroksidia, orgaanista, kvaternää-ristä ammoniumsuolaa (esim. tetrabutyyliammoniumsuolaa) tai 15 orgaanista, tertiääristä emästä, kuten trietyyliamiinia, N-etyylipeperidiiniä, pyridiiniä tai kinoliinia.

Menetelmässä a) voidaan alkylointi suorittaa myös sinänsä tunnetuissa ja tunnetussa tekniikassa käytetyissä, pelkistävän alkyloinnin olosuhteissa.

20 Alkyloinnin suorittamiseksi yhdiste, jonka yleinen kaava (IV) on R..-CO-R (IV)

1 O

jossa R. ja R tarkoittavat samaa kuin edellä, saatetaan l o reagoimaan kaavan (II) mukaisen bisyklisen lähtöaineen kanssa ja samanaikaisesti tai jälkeenpäin seuraavassa menetelmä-25 vaiheessa pelkistysaineen kanssa. Pelkistysaineista, joita käytetään samanaikaisesti alkylointiaineen kanssa, mainittavia ovat muurahaishappo ja kompleksiset metallihydridit, kuten natriumsyaaniboorihydridi; pelkistysaineista, joita yleensä käytetään erillisessä, jälkeenpäin seuraavassa mene-30 telmävaiheessa, t.s. aikaisemmin muodostuneen imiinin (Schiffin emäksen) pelkistyksessä, mainittavia ovat dibo-raani ja kompleksiset metallihydridit, kuten natriumboori-hydridi ja natriumsyaaniboorihydridi, jotka mieluimmin lisä-

II

is 76074 tään primääriseen reaktioseokseen ilman välituotteen, esim. imiinin, eristämistä. Tässä tapauksessa suoritetaan alky-lointi mieluimmin pelkistysaineeseen nähden inertissä orgaanisessa liuottimessa, kuten alifaattisessa tai syklisessä 5 eetterissä (esim. dietyylieetterissä, di-isopropyylieetteris-sä, 1,2-dimetoksietaanissa, dioksaanissa tai tetrahydrofuraa-nissa) tai alifaattisessa alkoholissa (kuten metanolissa, etanolissa, isopropyylialkoholissa, glykolissa, glykolimono-metyylieetterissä tai dietyleeniglykolissa), mieluimmin noin 10 0-80°C:ssa. Kuitenkin tärkeä pelkistysaine, jota voidaan käyttää sekä samanaikaisesti että myös jälkeenpäin, on vety, erityisesti katalyyttisesti aktivoitu vety. Katalysaattoreita ovat tavallisesti hydrauskatalysaattoreina käytetyt, nimittäin mieluimmin jalometallikatalysaattorit (kuten palla-15 dium, platina ja rodium) kantaja-aineella (kuten kalsium-karbonaatilla, aluminiumoksidilla tai bariumsulfaatilla), hienojakoisena suspensiona ilman kantajaa tai kompleksien muodossa homogeenisissa faaseissa. Myös hienojakoiset siir-tymämetallit, esim. Raney-metallit, erityisesti Raney-nikke-20 li, ovat erityisen sopivia katalysaattoreita pelkistävään alkylointiin. Erityiset reaktio-olosuhteet riippuvat suuressa määrin kulloinkin käytetystä hydrauskatalysaattorista ja sen tarkasta aktiviteetista, eivätkä ne eroa hydraukseen tavallisesti käytetyistä olosuhteista. Tekniikan tason 25 standardimenetelmien mukaisesti käyttökelpoisia ovat lämpötilat välillä huoneen lämpötila - noin 150°C ja vetypaine välillä ilmakehä - noin 300 ilmakehää. Edellä hydridipel-kistyksen yhteydessä mainittujen inerttien liuottimien lisäksi voidaan käyttää myös alempimolekyylisiä amideja, eri-30 tyisesti tertiäärisiä amideja (kuten N,N-dimetyyliformamidia, Ν,Ν-dimetyyliasetamidia, N-metyylipyrrolidonia, N-etyyli-piperidonia, heksametyylifosforihappo-trisamidia) kuitenkin myös formamidi ja asetamidi ovat liuottimina sopivia. Kaavan (II) mukaisten lähtöaineiden, jotka sisältävät helposti 35 pelkistettävissä olevan funktionaalisen ryhmän, kuten 5-okso-ryhmän, yhteydessä on otettava tiettyjä seikkoja huomioon? 16 7 60 7 4 näiden ryhmien säilyttämiseksi täytyy käyttää selektiivisiä pelkistysolosuhteita, kuten tekniikan tasosta on tunnettua, tai kun näiden ryhmien samanaikainen pelkistys on toivottavaa tai se on tarpeen, käytetään vastaavasti energisiä reak-5 tioon osallistuvia aineita ja/tai olosuhteita.

Edellä mainitut ensin muodostetut imiinit valmistetaan mieluimmin kondensoimalla kaavan (II) mukainen amiini kaavan (IV) mukaisen yhdisteen kanssa inertissä liuottimessa, esim. tolueenissa tai metyleenikloridissa, ensi sijassa dehydraus-10 katalysaattorin, esim. booritrifluoridi-eteraatin, p-toluee-nisulfonihapon tai molekyyliseulan läsnäollessa.

Menetelmä b) suoritetaan mieluimmin hyvin vahvojen emästen, kuten alkalimetallihydridien (esim. natrium- tai kaliumhydridin), -alkoholaattien (esim. natriummetylaatin 15 tai -etylaatin, kalium-tert.-butylaatin) tai -amidien (esim. litiumdi-isopropyyliamidin) läsnäollessa, jolloin edellä mainitut eetterit ja amidit ovat liuottimina sopivimpia. Menetelmän b) eräässä erityisessä suoritusmuodossa käytetään lähtöaineita, joissa R^, tarkoittaa vetyä, ja reaktioon 20 osallistuvaa kaavan (IIIB) mukaista yhdistettä käytetään ainakin kahta ekvivalenttia. Saadussa tuotteessa ovat molemmat tähteet ja Rg identtisiä ja ne tarkoittavat samaa kuin Rg.

Jokaisessa alkylointimenetelmässä lähtöaineissa olevi-25 en primääristen ja sekundääristen aminoryhmien, lukuun ottamatta alkyloitavaa sekundääristä aminoryhmää, täytyy olla alkyloinnin ajan, väliaikaisesti suojatussa muodossa. Sopivia suojaryhmiä sekä menetelmiä niiden liittämiseksi ja poislohkaisemiseksi on esitetty tunnetussa tekniikan tasos-30 sa, joka on kehitetty yksityiskohtiin asti, erityisesti yleisinä menetelminä peptidien syntetisoimiseksi, vertaa Houben-Weyl: Methoden der organischen Chemie, 4. Ausgabe, Band 15/1 und II, E. Wiinsch (julkaisija) : Synthese von Peptiden (Georg Thieme-Verlag, Stuttgart, 1974). Suojaryh-35 mien lähempi valinta riippuu erityisesti niiden tehtävästä, jolloin on tarpeen huomioida erityisesti kulloinkin käytet- it 17 76074 tyjen lähtöaineiden erityiset ominaisuudet ja jokaisen menetelmän reaktio-olosuhteet. Kun suojattavat funktionaaliset ryhmät ovat erilaiset voidaan valita edullisia kombinaatioita. Mieluimmin käytetään esim. samanlaisia tai parem-5 minkin identtisiä aminosuojaryhmiä sekä tähteissä Rq että myös tähteessä ja ne lohkaistaan pois samanaikaisesti alkyloinnin lopussa.

Sopivia aminosuojaryhmiä ovat erityisesti aminosuoja-ryhmät, jotka voidaan poistaa pelkistäen, kuten esim. eri-10 tyisesti bentsyylioksikarbonyylityyppiset suojaryhmät, joissa bentsyylioksikarbonyyliryhmä voi olla aromaattisessa osassa substituoitu halogeeniatomeilla, alempialkoksiryhmillä ja/tai alempialkyylitähteillä ja erityisesti nitroryhmillä, kuten p-kloori- ja p-bromibentsyylioksikarbonyyli-, p-metok-15 sibentsyylioksikarbonyyli-, p-metyylibentsyylioksikarbonyy-li- ja erityisesti p-nitrobentsyylioksikarbonyyliryhmä tai vaihtoehtoisesti isonikotinyylioksikarbonyyliryhmä. Edullinen aminosuojaryhmä on etoksikarbonyyliryhmä, joka sisältää β-asemassa kolmella hiilivetytähteellä substituoidun silyyli-20 ryhmän, kuten trifenyylisilyylin, dimetyyli-tert.-butyylisi-lyylin tai erityisesti trimetyylisilyylin. Tämän tyyppinen β-(trihydrokarbyylisilyyli)-etoksikarbonyyliryhmä, kuten β-(trialempialkyylisilyyli)-etoksikarbonyyliryhmä, esim. erityisesti β-(trimetyylisilyyli)-etoksikarbonyyli muodos-25 taa suojattavan aminoryhmän kanssa vastaavan β-trihydro- karbyylisilyylietoksikarbonyyliaminoryhmän (esim. β-trimetyy-lisilyylietoksikarbonyyliaminoryhmä), joka voidaan lohkaista pois ainoastaan hyvin erityisissä, erittäin lievissä olosuhteissa fluoridi-ionien vaikutuksella.

30 On myös mahdollista käyttää ryhmiä, jotka voidaan loh kaista pois asidolyysillä, kuten tert.-butoksikarbonyyliryh-mät ja vastaavat ryhmät, kuten myös aralkyyli-tyyppiset ryhmät, kuten bentshydryyli, di-(4-metoksi)-bentshydryyli ja trifenyylimetyyli (trityyli) tai 2-(p-bifenylyyli)-2-propok-35 sikarbonyyli-tyyppiset, tietyt aralkoksikarbonyyliryhmät, kuten on esitetty CH-patenttijulkaisussa 509 266. On huo- ie 7 60 7 4 mättävä, että hiilihapon estereistä johdetut suojaryhmät useimmissa tapauksissa ovat myös emäksisellä hydrolyysillä poislohkaistavissa.

Hydroksiryhmien fakultatiiviseen väliaikaiseen suojaa-5 miseen voidaan käyttää edullisesti suojaryhmiä, jotka voidaan lohkaista pois pelkistäen, vrt. edellä esitettyä tekstiä (Houben-Weyl) ja myös ryhmiä, jotka voidaan poistaa asidolyysillä, kuten 2-tetrahydropyranyyli, tert.-butoksi-karbonyyli ja tert.-butyyli. Edullisia hydroksisuojaryhmiä, 10 jotka voidaan lohkaista pois pelkistäen, ovat esimerkiksi bentsyyliryhmät, jotka aromaattisessa osassa voivat olla substituoidut halogeenilla, alempialkyylillä, alempialkok-silla ja/tai erityisesti nitrolla, erityisesti 4-nitrobents-yyliryhmä. On myös mahdollista käyttää asyyliryhmiä, jotka 15 voidaan lohkaista pois heikosti emäksisissä olosuhteissa, kuten formyyli tai trifluoriasetyyli.

Oksoryhmien fakultatiivisessa suojauksessa nämä ryhmät suojataan mieluimmin ketaaleina, erityisesti alempial-kanoleista, kuten metanolista tai etanolista johdettuina 20 ketaaleina tai mieluimmin etyleeniglykolista johdettuna ketaalina tai vastaavina tioketaaleina, mieluimmin 1,2-etaa-niditiolista johdettuna ketaalina. Kaikki nämä ryhmät voidaan jäljempänä esitetyissä olosuhteissa saattaa vapaiksi oksoryhmiksi.

25 Jälkeenpäin tapahtuva keksinnön mukainen suojaryhmien poislohkaisu riippuu ryhmien luonteesta ja suoritetaan kulloinkin sinänsä tunnetulla tavanomaisella tavalla, jolloin muodostuvien tuotteiden yleiset ominaisuudet on otettava huomioon. Kun suojaryhmät amino-, hydroksi- ja oksoryhmil-30 le valitaan niin, että ne voidaan lohkaista pois samanlaisissa olosuhteissa (erityisesti tällöin ovat edullisia asido-lyyttisillä tai amino- ja hydroksi-ryhmien ollessa kysymyksessä pelkistäen poislohkaistavissa olevat ryhmät, jotka jo yksityiskohtaisesti on mainittu), lohkaistaan kaikki tällai-35 set suojaryhmät edullisesti yhdessä menetelmävaiheessa; erityisissä tapauksissa on kuitenkin mahdollista käyttää eri-

II

19 7 60 7 4 tyyppisiä ryhmiä ja jokainen lohkaistaan erikseen pois.

Ryhmät, jotka voidaan lohkaista pois pelkistäen, erityisesti sellaiset ryhmät, jotka sisältävät kaikentyyppisiä halogenoituja alempialkyylitähteitä (esim. 2,2,2-trikloori-5 etyylitähteitä), isonikotinyylitähteitä (esim. isonikotinyy-lioksikarbonyylin) ja erityisesti substituoituja bentsyyli-tähteitä, ennen kaikkea 4-nitrobentsyylitähteitä, lohkaistaan pois mieluimmin pelkistämällä sinkillä, tavallisesti hapon, mieluimmin etikkahapon läsnäollessa ja lisäämällä 10 inerttiä orgaanista liuotinta tai ilman tätä, tavallisesti huoneen lämpötilassa. Suojaryhmän poislohkaisu happamella hydrolyysillä (asidolyysillä) suoritetaan tert,-butyyli-tyyppisten ryhmien ollessa kysymyksessä, kloorivedyllä, fluorivedyllä tai trifluorietikkahapolla, ja happoherkkien 15 suojaryhmien ollessa kysymyksessä pääasiassa alempialifaat-tisella karboksyylihapolla, kuten muurahaishapolla ja/tai etikkahapolla veden läsnäollessa ja mahdollisesti polyhalo-genoidun alempialkanolin tai alempialkanolin, kuten 1,1,1, 3,3,3-heksafluoripropan-2-olin tai heksafluoriasetonin läs-20 näollessa. Tällä tavalla on esimerkiksi mahdollista lohkaista pois N-trityyliryhmä orgaanisella hapolla, kuten muurahaishapolla, etikkahapolla, kloorietikkahapolla tai trifluorietikkahapolla vesipitoisessa tai absoluuttisessa trifluorietanolissa, joka toimii liuottimena (vrt. DE-kuu-25 lutusjulkaisu 23 46 147) tai vesipitoisella etikkahapolla, tert,-butoksikarbonyyliryhmä trifluorietikkahapolla tai kloorivetyhapolla ja 2-(p-bifenylyyli)-isopropoksikarbonyy-liryhmä vesipitoisella etikkahapolla tai esimerkiksi jääeti-kan, muurahaishapon (vahvuus 82,8%) ja veden seoksella 30 (7:1;2) tai menetelmällä, joka on esitetty DE-kuulutusjul kaisussa 23 46 147. B-silyylietyyliesteriryhmät lohkaistaan pois mieluimmin fluoridi-ioneja tuottavalla reagens-silla, esimerkiksi kvaternäärisen, orgaanisen emäksen fluo-rideilla, kuten tetraetyyliammoniumfluoridilla.

35 Oksoryhmät, jotka ovat ketaaleina tai tioketaaleina, lohkaistaan vapaiksi oksoryhmiksi asidolyysillä tavallisil- 20 76074 la vahvoilla epäorgaanisilla hapoilla tai oksaalihapolla veden läsnäollessa, viimeksi mainitut suojaryhmät mieluimmin käsittelemällä rikkiä sitovalla aineella, esim. elohopea (II) suolalla ja/tai kadmiumkarbonaatilla. Suojaryhmät, 5 jotka emäksisissä olosuhteissa ovat pysymättömiä, esimerkiksi formyyli, trifluoriasetyyli ja hiilihappoesteriryhmät, voidaan poistaa varovasti vesipitoisen natrium- tai kalium-karbonaatti- tai -karbonaattiliuoksen vaikutuksella tai myös vesipitoisen ammoniakin vaikutuksella orgaanisessa liu-10 ottimessa, tavallisesti huoneen lämpötilassa. Suojaryhmät lohkaistaan pois mieluimmin esimerkkien reaktio-olosuhteissa tai vastaavissa.

Ne keksinnön mukaiset lopputuotteet, jotka sisältävät emäksisiä ryhmiä, saadaan, riippuen eristämistavasta, emäs-15 ten tai happoadditiosuolojen muodossa. Vastaavasti voidaan tuotteet, jotka sisältävät happamia ryhmiä, saada myös suolojen muodossa. Jokainen muoto voidaan tunnetulla tavalla muuttaa toiseksi. Emäkset voidaan saada happoadditiosuoloista sinänsä tunnetulla tavalla. Emäksistä puolestaan on mah-20 dollista saada happoadditiosuoloja, erityisesti terapeuttisesti käyttökelpoisia happoadditiosuoloja, reaktiolla happojen, esimerkiksi edellä mainittujen, suolaa muodostavien happojen kanssa. Hapot ja niiden suolat muuttuvat toinen toisikseen samassa suhteessa. Yhdisteet, jotka sisältävät 25 vapaan karboksiryhmän sekä myös emäksisen ryhmän, voivat olla sisäisten suolojen muodossa, ja nämä saadaan esimerkiksi siten, että liuos säädetään isoelektriseen pisteeseen.

Kaavojen (IIIA), (IIIB) ja (IV) mukaiset lähtöaineet, t.s. alkylointiaineet, ovat tunnettuja tai niiden ollessa 30 tuntemattomia, ne voidaan valmistaa yksinkertaisella tavalla tavallisten synteesimenetelmien mukaisesti.

Kaavojen (II) ja (V) mukaiset lähtöaineet voidaan saada tavallisten synteesimenetelmien mukaan ja edullisesti tavalla, joka esitetään ja havainnollistetaan yksityiskohtai-35 sesti jäljempänä erityisten välituotteiden yhteydessä.

Il 21 76074

Menetelmä c), joka tarkoittaa myös alkylointireaktio-ta, suoritetaan samoja yleisiä näkökohtia vastaten ja samoissa kokeellisissa olosuhteissa kuin edellä menetelmät a) ja b), niin kuin edellä yksityiskohtaisesti on esitetty 5 käsiteltäessä kaavojen (IIIA), (IIIB) tai (IV) mukaisilla alkylointiaineilla (nimittäin substitutiivinen alkylointi tai pelkistävä alkylointi). Kaavan (VI) mukaiset lähtöaineet voidaan valmistaa sinänsä tunnetulla tavallisella menetelmällä, esim. jäljempänä yksityiskohtaisemmin esite-10 tyllä tavalla. Kaavan mukaiset amiinit ovat tunnettuja tai niiden ollessa uusia, voidaan ne saada yksinkertaisesti tavallisilla synteesimenetelmillä.

Menetelmä d) suoritetaan myös tavalliseen tapaan sol-volyysin tavanomaisissa olosuhteissa, joille on tunnusomais-15 ta, että ne muuttavat syanidit (nitriilit) vapaiksi karbok-syylihapoiksi tai niiden suoloiksi tai estereiksi.

Muutettaessa vapaaksi hapoksi on edullisinta suorittaa hydrolyysi vedellä inertissä, orgaanisessa liuottimessa, joka ainakin osittain on veden kanssa sekoittuva, kuten eetterit 20 (esim. dietyyli- tai di-isopropyylieetteri, 1,2-dimetoksi- etaani tai erityisesti dioksaani tai tetrahydrofuraani), tai alempialkanolit (esim. metanoli, etanoli, isopropyylialkoho-li, butyylialkoholi, erityisesti tert.-butyylialkoholi), jolloin viimeiksi mainituissa tapauksissa tarvitaan suurempi 25 määrä vettä alkoholyysin estämiseksi. Hydrolyysiä voivat katalysoida sekä vahvat hapot, erityisesti epäorgaaniset hapot, kuten rikkihappo tai mieluimmin halogeenivetyhapot, (esim. bromivetyhappo tai ennen kaikkea kloorivetyhappo) kuten myös emäkset, erityisesti epäorgaaniset emäkset, kuten 30 alkalimetallien hydroksidit ja karbonaatit, esim. natrium- ja kaliumhydroksidi. Emäksiä käytetään tavallisesti ainakin stökiömetrisissä suhteissa, karboksyylihapposuolan muodostaessa primäärisen tuotteen. Happamia katalysaattoreita käytetään laimean vesipitoisen liuoksen muodossa parhaimman tu-35 loksen saavuttamiseksi. Kaavan (I) mukaiset lopputuotteet, joissa Rq tarkoittaa esteröityä karboksyyliryhmää, voidaan 76074 22 saada siten, että nitriilin solvolyysi suoritetaan vastaavalla alkoholilla (alkoholyysi) käyttämällä mukana katalyyttistä määrää vedetöntä, vahvaa happoa, mieluimmin kaasun muodossa olevaa kloorivetyä. Tavallisesti käytetään alkoho-5 Iin ylimäärää liuottimena, kuitenkin voidaan lisätä inertte-jä, orgaanisia liuottimia, kuten asyklisiä tai syklisiä eet-tereitä (erityisesti edellä mainittuja) ja/tai halogenoituja alempialkaaneja (erityisesti kloroformia ja dikloorimetaa-nia). Kun alkoholyysi suoritetaan ehdottomasti vedettömissä 10 olosuhteissa, täytyy primäärinen tuote (imidoesteri) hydrolysoida, mieluimmin lisäämällä vettä reaktioseokseen. Toisaalta, kun alkoholyysi suoritetaan käyttämällä mukana lähes stökiömetristä ekvivalenttia vettä, saadaan toivottu esteri suoraan.

15 Kaavan (VIII) mukaiset lähtöaineet voidaan saada sinän sä tunnettujen tavanomaisten menetelmien mukaan esim. menetelmän c) mukaisella kondensaatiolla, jolloin edellä määritellyn kaavan (VI) mukainen lähtöaine käsitellään amiinilla, jonka kaava (VII1) on i /R1

Rc - NH - CH (VII') 5 ^CN 1 2 3 4 5 6 11 jossa ja R2 tarkoittavat samaa kuin edellä ja joka vastaa 2 edellä määriteltyä kaavan (VII) mukaista amiinia. Myös me 3 netelmiä a) ja b) voidaan vastaavalla tavalla käyttää kaavan 4 (VIII) mukaisten nitriilien valmistukseen.

5

Menetelmämuunnosta e) vastaava syklisointi voidaan 6 suorittaa myös sinänsä tunnetulla tavalla, esim. dehydraati-olla. Erityisen käyttökelpoisia menetelmiä tähän tarkoitukseen on kehitetty peptidien amidisidoksen muodostumisen yhteydessä, kuten on esitetty kokoomateoksissa, esim. Houben- 23 7 6 0 7 4

Weyl, nide 15/1 ja nide 15/11, kuten edellä jo esitettiin. Erään edullisen muunnoksen mukaisesti syklisoitava aminoryh-mä tehdään protonoimalla inaktiiviseksi (t.s. muutetaan hap-poadditiosuolan muotoon) ja karboksyyliryhmä muutetaan akti-5 voiduksi esteriksi, esim. sellaisilla yhdisteillä kuin 2,4,5-trikloorifenolilla, pentakloorifenolilla, pentafluori-fenolilla, 2-nitrofenolilla tai erityisesti 4-nitrofenolil-la, tai N-hydroksiyhdisteellä, kuten N-hydroksisukkinimidil-la, 1-hydroksibentstriatsolilla tai N-hydroksipiperidiinil-10 lä tai vaihtoehtoisesti N,N'-disubstituoidulla isokarbamidil-la, kuten erityisesti N,N'-disykloheksyyli-isokarbamidilla tai jollain vastaavalla, yleisesti tunnetulla aktivoivalla aineella. Syklisointi suoritetaan siten, että reaktioseos tehdään emäksiseksi mieluimmin lisäämällä orgaanista emästä, kuten 15 kvaternääristä ammoniumsuolaa tai erityisesti tertiääristä amiinia, kuten trietyyliamiinia, N-etyylimorfoliinia tai N-metyylipiperidiiniä, syklisoitavan aminoryhmän reaktivoi-miseksi muuttamalla se ei-protonoituun muotoon. Reaktioläm-pötila on tavallisesti -20 - +50°C, mieluimmin lähellä huo-20 neen lämpötilaa ja käytetään tavallisia liuottimia, esim.

dioksaania, tetrahydrofuraania, asetonitriiliä, pyridiiniä, dimetyyliformamidia, dimetyyliasetamidia, dimetyylisulfoksidia, N-metyylipyrrolidonia, heksametyylifosforihappo-trisamidia sekä kloroformia ja metyleenikloridia ja näiden 25 hyväksi havaittuja seoksia. Menetelmän eräässä erityisessä muunnoksessa voidaan karboksiryhmä aktivoida suoraan in situ vapaan hapon vaikuttaessa yhdessä karbodi-imidin, kuten Ν,Ν'-disykloheksyylikarbodi-imidin kanssa (mahdollisesti samaan aikaan lisätään N-hydroksisukkinimidiä, substitu-30 oimatonta tai esimerkiksi halogeenilla, metyylillä tai nietoksilla substituoitua 1-hydroksibentstriatsolia tai 4-hydroksibentso-1,2,3-triatsiini-3-oksidia tai N-hydroksi-5-norborneeni-2,3-dikarboksi-imidiä) tai yhdessä N,N'-karbonyy-lidi-imidatsolin kanssa.

35 Kaavan (IX) mukaiset lähtöaineet voidaan valmistaa si nänsä tunnetuilla yleisillä menetelmillä, esim. kuten jäi- 24 7 6 0 7 4 jempänä erityisin esimerkein on esitetty.

Myös menetelmää f) vastaava pelkistys voidaan suorittaa tavalla, joka on yleisesti tunnettu tämän tapaisten kaksois-sidosten tyydyttämisen yhteydessä. Erityisesti voi kaavaa (I) vastaavissa tyydyttämättömissä lähtöaineissa kaksoissi-dos olla hiiliatomien C-3 ja C-4 välillä tai hiiliatomin C-3 ja viereisen typpiatomin välillä tai typpiatomin ja sen viereisen ryhmässä olevan hiiliatomin välillä. Kaksoissidok-sen tyydyttäminen suoritetaan mieluimmin katalyyttisellä hyd-rauksella, esimerkiksi kuten edellä yksityiskohtaisesti on esitetty, edullisissa olosuhteissa sekä myös metallipelkis-tyksellä, kuten sinkkipelkistyksellä neutraalissa tai happa-messa väliaineessa tai erityisesti kun on kysymys C-N-kaksois-sidoksesta diboraanilla tai kompleksisilla hydrideillä, kuten natriumboorihydridillä, edellä esitetyllä tavalla. Tyydyttämättömät lähtöaineet näihin menetelmämuunnoksiin saadaan yleisten tunnettujen menetelmien mukaan, esim. menetelmän a) ja c) mukaisesti ja/tai erityisessä muodossa, kuten jäljempänä esitetään.

Suoritettaessa saadun, kaavan (I) mukaisen lopputuotteen fakultatiivista muuttamista toiseksi, edellä esitettyjen määritelmien puitteissa olevan kaavan (I) mukaiseksi yhdisteeksi, tapahtuu tämä muuttaminen seuraavalla tavalla:

Symboli X, joka tarkoittaa hydroksyyliryhmää (plus vetyä) muutetaan pelkistämällä kahdeksi vetyatomiksi, ja/tai vapaa hydroksyyli- tai karboksyyliryhmä vapautetaan niiden esteröidystä muodosta hydrolyysillä tai hydrogenolyysillä, ja/tai vapaa karboksyyli esteröidään.

Kaikki nämä fakultatiiviset muutokset suoritetaan hyvin tunnettujen tavanomaisten menetelmien mukaan.

Esteröinnin suorittamiseksi voidaan karboksyyliryhmä saattaa reagoimaan suoraan diatsoalkaanin, erityisesti diat-sometaanin kanssa, tai vastaavan alkoholin kanssa vahvan, happamen katalysaattorin (esim. rikkihapon tai orgaanisen sulfonihapon) läsnäollessa ja/tai vettä poistavan aineen (esim. disykloheksyylikarbodi-imidin) läsnäollessa. Vaihto-

II

25 76074 ehtoisesti voidaan karboksyyliryhmä muuttaa reaktiiviseksi johdannaisekseen, kuten menetelmän e) yhteydessä mainituksi aktiiviseksi esteriksi tai seka-anhydridiksi, esim. happoha-logenidilla (erityisesti happokloridilla) tai trifluorietik-kahapolla ja tämä aktivoitu välituote saatetaan reagoimaan toivotun alkoholin kanssa.

Vapaa karboksyyliryhmä voidaan vapauttaa esteröidystä karboksyylistä yleisesti tunnetulla tavalla, erityisesti emäs-katalysoidulla hydroksyylillä. Erityisen mielenkiintoisia ovat kuitenkin menetelmät, jotka ovat sopivia erityisen, symboleilla -COR6 ja -COR7 merkityn karboksyyliryhmän selektiiviseen vapauttamiseen. Tällaisessa tapauksessa voidaan käyttää sopivaa kombinaatiota esteriryhmistä, jotka ovat tekniikan tasossa tunnettuja erityisesti karboksyylisuoja-ryhminä ja joita on suuremmassa määrin kehitelty erityisesti peptidien synteeseille, vrt. Houben-Weyl, nide 15/1 ja nide 15/11, kuten edellä on esitetty. Selektiiviseen poislohkai-suun karboksyyliryhmän vapauttamiseksi sopivia tähteitä ovat esterit, jotka johdetaan esim. alkoholeista, jotka tuottavat asidolyysillä poistettavissa olevia tähteitä, kuten tert.-butyylialkoholista, kuitenkin erityisesti pelkistäen pois-lohkaistavissa olevia tähteitä tuottavista alkoholeista, kuten bentsyylialkoholista.

Esteröivien ryhmien poislohkaisu riippuu niiden luonteesta ja suoritetaan joka kerta tavallisella, sinänsä tunnetulla tavalla, jolloin muiden osallistuvien tähteiden ominaisuudet otetaan huomioon. Ryhmät, jotka voidaan lohkaista pois pelkistäen, erityisesti bentsyylitähteitä, lohkaistaan pois mieluimmin pelkistäen sinkillä, tavallisesti hapon, mieluimmin etikkahapon läsnäollessa ja inerttiä orgaanista liuotinta lisäten, tai ilman tätä, tavallisesti huoneen lämpötilassa. Ne poistetaan myös hydrogenolyysi-tekniikalla, jota tavallisesti käytetään bentsyyliryhmille.

Esteriryhmän poistaminen happamella hydrolyysillä (asidolyysillä) voidaan suorittaa tert,-butyyli-tyyppisten ryhmien ollessa kysymyksessä kloorivedyllä, fluorivedyllä tai 26 ► 76074 trifluorietikkahapolla. Esteriryhmät, jotka ovat emäksisissä olosuhteissa pysymättömiä, voidaan poistaa varovasti antamalla vesipitoisen natrium- tai kaliumbikarbonaattiliuoksen tai mieluimmin vesipitoisella ammoniakilla orgaanisessa liuot-timessa vaikuttaa nopeasti, tavallisesti huoneen lämpötilassa. Esteriryhmät lohkaistaan pois mieluimmin esimerkeissä esitetyissä reaktio-olosuhteissa tai vastaavissa.

Esteriryhmien sopiva yhdistelmä voidaan valita aikaisemmissa synteesivaiheissa tai valitsemalla sopivat lähtöaineet ja reaktioon osallistuvat aineet, jolloin esim. menetelmässä a) selektiivisesti poislohkaistavissa oleva esteriryh-mä liitetään karboksyylillä, joka viimeisessä vaiheessa vapautetaan .

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet yleensä ja erityisesti kaavan (IA) mukaiset yhdisteet valmistetaan mieluimmin reak-tiosarjaa 1 vastaten, joka käsittää lähtöaineiden ja sisältyvien välituotteiden tarkoituksen mukaisen valinnan ja seu-raavat vaiheet: a) yhdiste, jonka kaava on (XI)

pl ** O

R3 jossa R31 ja R4' tarkoittavat vetyä, alempialkoksi tai halogeenia, X1 tarkoittaa kahta vetyatomia tai samanaikaisesti vetyatomin kanssa hydroksia, ja Rg tarkoittaa aminoa, atsi-doa tai asyyliaminoa, esim. alempialkanoyyliaminoa tai -alkoksikarbonyyliaminoa, kondensoidaan emäk- 11 27 76074 sisen katalyysin olosuhteissa, yhdisteen kanssa, jonka kaava (III'B) on R '-CH-COR ' (III*B) 2 I 7 z jossa R2' tarkoittaa vetyä tai alempialkyyliä, Z tarkoittaa reaktiivisesti esteröityä hydroksia ja R^' tarkoittaa hydrok-5 siä, di-(alempi)alkyyliaminoa, alempialkoksia, aryyli-(alempi) alkoksia, alempialkanoyylioksimetoksia tai alempialkoksi-karbonyyli-(alempi)alkoksia, b) Saatu välituote mahdollisesti pelkistetään, hydro- genolysoidaan, hydrolysoidaan tai alkyloidaan yhdisteen valio mistamiseksi, jonka kaava (II') on y · V j (Γ jT V NH2 (II·.) R~ ' I °

3 CH

/\ r2‘ co-r7' jossa R^', R4' ja X' tarkoittavat samaa kuin kaavassa (XI), R2' tarkoittaa vetyä tai alempialkyyliä ja R^' tar koittaa hydroksia, aminoa, mono- tai di-(alempi)alkyyliaminoa, alempialkoksia, aryyli-(alempi)alkoksia, alempialkano-15 yylioksimetoksia, di-(alempialkyyliamino)-alempialkoksia tai alempialkoksikarbonyyli-(alempi)alkoksia, c) Edellä esitetyn kaavan (II') mukainen yhdiste kon-densoidaan pelkistävän alkyloinnin olosuhteissa yhdisteen kanssa, jonka kaava (IV) on

O

R, 1 -C-COR, 1 (IV) 16 76074 28 jossa P..| ' tarkoittaa vetyä tai fenyyli- (alempi) -alkyy-liä ja P.g' tarkoittaa hydroksia, di- (alempi)alkyyliaminoa, alempialkoksia, aryyli-(alempi)alkok-5 siä, alempialkanoyylioksimetoksia tai alempialkoksikarbonyy-li-(alempi)alkoksia, tai edellä esitetyn kaavan (II') mukainen yhdiste kondensoidaan alkylointiolosuhteissa yhdisteen kanssa, jonka kaava (ΙΙΙΆ) on R.'-CH-COR,' (III'A) jossa R^' ja Rg' tarkoittavat samaa kuin kaavassa (IV) ja 10 Z tarkoittaa reaktiivisesti esteröityä hydroksia.

d) Saatu tuote mahdollisesti hydrolysoidaan tai saatu tuote muutetaan johdannaiseksi, e) minkä tahansa kaavan (IA) mukainen yhdiste muutetaan toiseksi keksinnön mukaiseksi yhdisteeksi.

15 Kaavan (XI) mukaiset yhdisteet saadaan vastaavista, mahdollisesti substituoiduista ja/tai johdannaisiksi muutetuista 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oneista (j.Chem.Soc. 1937, 456; GB-patenttijulkaisu 1 359 285; Liebig's Annalen der Chemie, 574, 171 (1951)). Uudet sopi-20 viksi johdannaisiksi muutetut lähtö-(l)bentsatsepin-2-onit valmistetaan mieluimmin naftalin-l-onien vastaavien johdannaisten Beckmann-toisiintumisella käyttäen tekniikan tasosta tunnettuja ja edellä havainnollistettuja menetelmiä.

Tetrahydro-(l)bentsatsepin-2-onit muutetaan 3-halogee-25 ni-, esim. 3-kloori-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin- 2-oniksi edellä havainnollisesti esitetyissä olosuhteissa, esim. käsittelemällä fosforipentakloridilla ja hydraamalla lopuksi. Tämän halogeeni-johdannaisen substituutio metalli-atsidilla, esim. natriumatsidilla ja mahdollisesti tapahtuva 30 pelkistys tai substituutio ammoniakilla ja mahdollinen asylointi tuottaa tulokseksi kaavan li 29 7 6 0 7 4 (XI) mukaisia yhdisteitä.

Vaihtoehtoisesti saadaan kaavan (XI) mukaisia yhdisteitä, joissa Rg tarkoittaa aminoa ja asyy-liaminoa, pelkistämällä ja syklisoimalla sopivasti substitu-5 oitu ja/tai johdannaiseksi muutettu 4-(o-nitrofenyyli)-2-aminovoihappo ja mahdollisesti lopuksi suoritetaan N-alky-lointi tai N-asylointi.

Keksinnön mukaisten optisesti aktiivisten yhdisteiden eräs toinen synteesi lähtee luonnollisesta tryptofaanista.

10 Erityisesti L-4-(o-aminofenyyli)-4-okso-2-aminovoihappo (L-kynureniini, J.Am.Chem.Soc. 76, 1708 (1954), joka on johdettu L-tryptofaanista) muutetaan optisesti aktiiviseksi kaavan (XI) mukaiseksi lähtöaineeksi, jossa tarkoittaa asyyliaminoa, esim. 3-(S)-tert.-butyylioksikarbonyyliamino-15 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2,5-dioniksi, kuten on esitetty julkaisussa Australian Journal of Chemistry 33, 633-40 (1980). Kaavan (XI) mukaisen yhdisteen laktami-alkylointi kaavan (III1B) mukaisella reagenssilla, joka on hyvin tunnettu tekniikan tasosta, suoritetaan mieluimmin 20 emäksien, kuten alkalimetallihydridien, esim. natrium- tai kaliumhydridin, alkalimetallialkoholaattien, esim. kalium-tert.-butylaatin tai natriummetylaatin, organometallisten reagenssien, esim. litiumdi-isopropyyliamidin läsnäollessa faasin-siirto-katalyysin olosuhteissa, esim. tetrabutyyli-25 ammoniumsuolan läsnäollessa, mieluimmin liuottimessa, esim. tetrahydrofuraanissa, dimetyyliformamidissa, lämpötilassa, joka on mieluimmin noin 0 - 75°C.

Kaavan (II') mukaisen välituotteen kondensaatio kaavan (IV) mukaisen tunnetun α-ketohappo-johdannaisen kanssa 30 (vrt. Chem.Ber. 31, 551, 3133) pelkistävällä N-alkyloinnilla suoritetaan tekniikan tasosta tunnetuissa olosuhteissa, esim. käyttäen katalyyttista hydrausta vedyllä platina-, palladium- tai nikkelikatalysaattorin läsnäollessa tai kemiallisilla pelkistysaineilla, kuten yksinkertaisilla tai 35 kompleksisilla kevytmetallihydrideillä, mieluimmin alkalime-tallisyaaniboorihydridillä, kuten natriumsyaaniboorihydridil- 76074 30 lä. Pelkistävä aminointi suoritetaan alkalimetallisyaani-boorihydridillä mieluimmin inertissä liuottimessa, esim. metanolissa tai asetonitriilissä, mieluimmin hapon, esim. kloorivetyhapon tai etikkahapon läsnäollessa, lämpötilassa, 5 joka on 0 - 50°C, mieluimmin huoneen lämpötilassa.

Kaavan (II') mukaisen välituotteena saadun amiinin alkylointi kaavan (III'A) mukaisen reagenssin kanssa, joka on hyvin tunnettu tekniikan tasosta, suoritetaan käyttäen emäksisiä katalysaattoreita, kuten trietyyliamiinia tai 10 kaliumkarbonaattia tai ilman näitä, inertissä liuottimessa.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet yleensä ja erityisesti kaavan (IA) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa myös reak-tiosarjojen 2 ja 3 mukaisesti.

Sarja 2 käsittää seuraavat vaiheet: 15 a) yhdiste, jonka kaava (XII) on r4‘ X' r5· (r ^“NH (XII) V H ° jossa R^', R^' ja X' tarkoittavat samaa kuin kaavassa (XI) ja R^' on vety» kondensoidaan pelkistävän alkyloinnin olosuhteissa, yhdisteen kanssa, jonka kaava (IV) on 0 R-^-C-CO-Rg' (IV) 20 jossa R^' ja Rg' tarkoittavat samaa kuin edellä, tai alky-lointiolosuhteissa yhdisteen kanssa, jonka kaava (III'A) on R. '-CH-COR,.' (IIIΆ) z jossa R^', Rg' ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä, yhdis- li 76074 31 teen saamiseksi, jonka kaava (V) on IV X* r .

.4 K5 R · —\ r / Ki p I Y-N-CH (V») ,( ^CO-R’ r'· HO 6 jossa R^' , Rj', R^', Rs' / Rg' ja X* tarkoittavat samaa kuin edellä, b) saatu kaavan (V) mukainen yhdiste kondensoidaan, 5 emäksisen katalyysin olosuhteissa yhdisteen kanssa, jonka kaava (III'B) on R '-CH-COR ' (III'B)

Z

jossa R2'/ R^' ja Z tarkoittavat samaa kuin edellä, c) saatu tuote mahdollisesti hydrolysoidaan tai saatu tuote muutetaan johdannaiseksi, 10 d) mahdollisesti mikä tahansa saatu kaavan (I) mukai nen yhdiste muutetaan toiseksi, keksinnön mukaiseksi yhdisteeksi.

Sarja 3 käsittää seuraavat vaiheet: a) yhdiste, jonka kaava (VII1) on R5" R-l" HN - CH - COR " (VII·) D 1 jossa R^" tarkoittaa vetyä tai fenyyli-(alempi)alkyyliä,

Rg" tarkoittaa vetyä ja Rg" tarkoittaa hydroksia, di-(alempi)-alkyvliarainoa, alempialkoksia, aryyli-(älempi)alkoksia, 76074 32 alempialkanoyylioksimetoksia tai alempialkoksikarbonyyli-(alempi)alkoksia, kondensoidaan pelkistävän alkyloinnin olosuhteissa yhdisteen kanssa, jonka kaava (VI') on v x" ΓΤ%γ <vi,) V CH 0 R^" CO-R7h 5 jossa R2” tarkoittaa vetyä tai alempialkyyliä, F3" ja R^" tarkoittavat vetyä, alempialkoksia tai halogeenia, X" tarkoittaa kahta vetyatomia tai yhtä vetyatomia ja eetteröi-10 tyä tai esteröityä hydroksia, R^" tarkoittaa hydroksia, dialempialkoksia, aryyli-(alempi)alkoksia, alempialkanoyylioksimetoksia tai alempialkoksikarbonyy-li-(alempi)alkoksia ja Y tarkoittaa oksoa tai diklooria, tai kaavan (VII') mukainen yhdiste kondensoidaan edellä esi-15 tetyn kaavan (VI1) mukaisen yhdisteen kanssa, jossa X" tarkoittaa oksoa, Y tarkoittaa vetyä ja reaktiivisesti esteröityä tai eetteröityä hydroksia, tai tämän yhdisteen 3,4-dehydro-eliminointituotteen kanssa tai tämän yhdisteen 3,4-dehydro-johdannaisen kanssa, 20 b) saatu tuote mahdollisesti pelkistetään, hydrolysoi daan tai derivoidaan, c) mikä tahansa saatu yhdiste muutetaan mahdollisesti toiseksi keksinnön mukaiseksi yhdisteeksi.

Edellä esitetyissä sarjoissa 2 ja 3 suoritetaan 25 laktaami-alkylointi, pelkistävä N-alkylointi ja amiinien alkylointi mieluimmin menetelmässä 1 esitetyissä olosuhteissa.

Edellä esitetyissä reaktiosarjoissa 1, 2 ja 3 voidaan esimerkiksi kaavojen (ΙΙΙ'Α), (ΙΙΙ'Β) ja (VII') mukaiset

II

33 76074 reaktioon osallistuvat aineet korvata vastaavilla nitrii-leillä, esim. seuraavilla: R2'CH(Z)CN, R1'CH(Z)CN tai R^NHCH(R^')CN. Näin saadut nitriilit voidaan muuttaa vastaaviksi, kaavan (I) mukaisiksi karboksyylihapoiksi, este-5 reiksi käyttäen tekniikan tasosta tunnettuja menetelmiä.

Kaavan (VII') mukaiset lähtöaineet tarkoittavat aminohappoja ja johdannaisia, jotka ovat tunnettuja tekniikan tasosta. Mainitsemisen arvoista on, että voidaan valmistaa 10 optisesti aktiivisia keksinnön mukaisia yhdisteitä lähtemällä optisesti aktiivisesta kaavan (VII') mukaisesta yhdisteestä, esim. L-a-aminofenyylivoihaposta, L-fenyyliala-niinista ja niiden johdannaisista.

Käytettäessä kaavojen (ΙΙΙΆ), (III'B), (IV) ja 15 (VII1) mukaisia yhdisteitä, joissa R^, Rg tai R£ tarkoittaa hydroksia, voidaan valmistaa sopiva karboksylaattisuola, mieluimmin in situ, ennen edellä mainitun toivotun välituotteen kanssa tapahtuvaa kondensaatiota.

Tietyt edellä olevissa menetelmissä käytetyt sanonnat 20 omaavat seuraavassa määritellyt merkitykset.

Reaktiivisesti esteröity hydroksiryhmä tarkoittaa sellaista, joka on esteröity vahvalla, epäorgaanisella tai orgaanisella hapolla, ennen kaikkea halogeenivetyhapolla, esim. kloorivetyhapolla, bromivetyhapolla tai jodivetyhapol-25 la, alifaattisella tai aromaattisella sulfonihapolla, esim. metaanisulfonihapolla tai p-tolueenisulfonihapolla.

Eetteröity hydroksi tarkoittaa mieluimmin alempialkok-sia, esim. metoksia, etoksia tai tert.-butoksia.

Fakultatiiviset pelkistys-, hydrogenolyysi-, hydrolyy-30 sivaiheet tai vaihe, jossa esitetyn menetelmän lähtötuotteet muutetaan johdannaiseksi ja saadun tuotteen muuttaminen toiseksi keksinnön mukaiseksi yhdisteeksi suoritetaan tekniikan tasosta tunnetuilla ja tässä havainnollisesti esitetyillä kemiallisilla työtavoilla.

6 76074 34

5 Kaavan (I) tai (IA) mukaisten yhdisteiden, joissa R

ja/tai R^ tarkoittaa alempialkoksia tai fenyyli-(alemDi)alkoksia, muuttaminen kaavan (I) tai (IA) mukaisiksi yhdisteiksi, joissa R

O

ja/tai R^ tarkoittaa hydroksia, suoritetaan mieluimmin 10 hydrolysoimalla epäorgaanisilla hapoilla, kuten halogeeni- vetyhapoilla tai rikkihapolla tai vesipitoisilla alkaleilla, mieluimmin alkalimetallihydroksideilla, kuten litium- tai natriumhydroksidilla.

Kaavan (I) tai (IA) mukaisten yhdisteiden, joissa R^ Ό 15 ja/tai R^ tarkoittaa a-fenyyli-(alempi)alkoksia, esinu bents-yylioksia, selektiivinen muuttaminen kaavan (I) tai (IA) mukaisiksi yhdisteiksi, joissa Rg ja/tai R^ tarkoittaa hydroksia, suoritetaan mieluimmin hydrogenolyysillä, käyttäen vetyä katalysaattorin, esim. palladiumin läsnäollessa.

20 Kaavan (I) tai (IA) mukaiset yhdisteet, joissa sekä

Rg että R^ tarkoittavat hydroksia, voidaan muuttaa kaavan (I) tai (IA) mukaisiksi monokarboksyylihapoiksi, joissa toinen tähteistä Rg ja R^ tarkoittaa hydroksia. Tällainen muutos suoritetaan selektiivisillä hydrolyyttisillä tai hydrogeno-25 lyyttisillä menetelmillä, jotka ovat hyvin tunnettuja tekniikan tasosta ja riippuvat R_- ja R_-substituenttien kemi- O / allisesta luonteesta.

Kaavan (I) tai (IA) mukaiset vapaat karboksyylihapot, joissa Rg ja/tai R^ tarkoittavat hydroksia, tai niiden suo-30 lat, voidaan esteröidä sopivilla tekniikan tasosta hyvin tunnetuilla alkoholeilla tai niiden reaktiivisilla johdannaisilla, vastaavien mono- tai di-estereiden, toisin sanoen kaavan (I) tai (IA) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa Rg ja/tai R? tarkoittaa alempialkoksia tai fenyyli-(alem-35 pi)alkoksia.

Il 76074 35

Kaavan (I) tai (IA) mukaiset yhdisteet ja välituotteet 5 näitä varten, esim. kaavojen (X) ja (V) mukaiset yhdisteet, joissa X tai X' tarkoittavat oksoa, voidaan muuttaa vastaaviksi yhdisteiksi, joissa X tai X' tarkoittaa vetyatomia ja hydroksiryhmää, pelkistämällä esim. hydraamalla katalyytti-sesti, esim. vedyllä platinakatalysaattorin läsnäollessa tai 10 metallihydridi-pelkistysaineella, kuten natriumboorihydridillä. Saadut yhdisteet, joissa X tai X' tarkoittavat vetyatomia ja hydroksiryhmää, voidaan muuttaa yhdisteiksi, jossa X tai X' tarkoittaa kahta vetyatomia, esim. hydraamalla ka-talyyttisesti karbodi-imidin additiotuote, esim. additiotuo-15 te, joka muodostuu, kun yhdiste, jossa X tai X' tarkoittaa vetyatomia ja hydroksiryhmää, kondensoidaan disykloheksyyli-karbodi-imidin kanssa kupari-(I)-kloridin läsnäollessa yleisen, julkaisussa Chem.Ber., 107, 1353 (1974) esitetyn menetelmän mukaisesti.

20 Vaihtoehtoisesti voidaan yhdisteet, joissa X tai X' tarkoittaa vetyatomia ja hydroksiryhmää, ensin muuttaa vastaaviksi yhdisteiksi, joissa X tai X' tarkoittaa vetyatomia ja asyylioksiryhmää (esim. asetoksia), ja sen jälkeen esim. hydraamalla katalyyttisesti palladiumkatalysaattorin läsnä-25 ollessa, pelkistää yhdisteiksi, joissa X tai X' tarkoittaa kahta vetyatomia.

Edellä esitetyt reaktiot suoritetaan standardi-menetelmien mukaisesti laimennusaineiden läsnäollessa tai ilman niitä, mieluimmin käytetään sellaisia, jotka ovat inerttejä 30 reagoiviin aineisiin nähden, ja liuottavat niitä, edelleen reaktiot suoritetaan katalysaattoreiden, kondensaatioainei-den tai muiden aineiden läsnäollessa tai ilman näitä, ja/tai inerttiatmosfääreissä, alennetuissa lämpötiloissa, huoneen lämpötiloissa, mieluimmin käytetyn liuottimen kiehumispis-35 teessä, ilmakehän tai sen yli olevassa paineessa.

36 76074

Keksintö käsittää tässä esitetyn menetelmän kaikki ne muunnokset, joissa lähtöaineena käytetään missä tahansa vaiheessa välituotteena saatavaa yhdistettä ja suoritetaan jäljellä olevat vaiheet, tai menetelmä keskeytetään missä 5 tahansa vaiheessa, tai lähtöaineet muodostetaan reaktio- olosuhteissa tai reaktiokomponentteja käytetään niiden suolojen tai optisesti puhtaiden antipodien muodossa. Pääasiassa tulee näissä reaktioissa käyttää kulloinkin lähtöaineita, joista saadaan edellä erityisen arvokkaiksi mainittuja 10 yhdisteitä.

Keksintö koskee myös uusia lähtöaineita ja menetelmiä niiden valmistamiseksi.

Riippuen lähtöaineiden ja menetelmien valinnasta voivat uudet yhdisteet olla jonkin mahdollisen isomeerin tai 15 niiden seoksien muodossa, esimerkiksi riippuen asymmetristen hiiliatomien lukumäärästä, yhdisteet voivat olla puhtaina, optisina isomeereinä, kuten antipodeina tai optisten isomeerien seoksina, kuten rasemaatteina tai diastereoiso-meerien seoksina.

20 Saadut diastereoisomeerien seokset ja rasemaattien seokset voidaan aineosien fyBiokemiallisten eroavaisuuksien perusteella tunnetulla tavalla erottaa puhtaiksi isomeereiksi, diastereoisomeereiksi tai rasemaateiksi, esim. kroma-tografisesti ja/tai fraktioivasti kiteyttämällä.

25 Saadut rasemaatit voidaan edelleen erottaa optisiksi antipodeiksi sinänsä tunnetuilla menetelmillä, esimerkiksi kiteyttämällä uudestaan optisesti aktiivisesta liuottimesta, mikro-organismien avulla tai saattamalla hapan lopputuote reagoimaan optisesti aktiivisen, raseemisen hapon kanssa 30 suoloja muodostavan emäksen kanssa, ja erottamalla tällä tavalla saadut suolat, esimerkiksi niiden erilaisten liukoisuuksien perusteella, diastereoisomeereiksi, joista antipodit sopivien aineiden vaikutuksella voidaan vapauttaa. Emäksiset, raseemiset tuotteet voidaan samalla tavalla erottaa 35 antipodeiksi, esim. erottamalla niiden diastereoisomeeriset suolat, esim. kiteyttämällä fraktioivasti niiden d- tai £-

II

37 76074 tartraatit. Mikä tahansa raseeminen välituote tai lähtöaine voidaan erottaa samalla tavalla.

On tarkoituksenmukaisempaa eristää aktiivisempi kahdesta antipodista.

5 Lopulta keksinnön mukaiset yhdisteet saadaan joko vapaassa muodossa tai niiden suolojen muodossa. Mikä tahansa, saatu emäs voidaan muuttaa vastaavaksi happoadditiosuo-laksi, mieluimmin käytetään farmaseuttisesti hyväksyttävää happoa tai anioninvaihto-preparaattia, tai saadut suolat 10 voidaan muuttaa vastaaviksi, vapaiksi emäksiksi, esimerkiksi käyttäen jotain vahvempaa emästä, kuten metalli- tai ammoniumhydroksidia tai emäksistä suolaa, esim. alkalimetal-lihydroksidia tai -karbonaattia, tai kationinvaihto-prepa-raattia. Kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa Rq tarkoittaa 15 karboksia, tai kaavan (IA) mukainen yhdiste, jossa CORg ja/ tai COR^ tarkoittaa karboksia, voidaan myöskin muuttaa vastaavaksi metalli- tai ammoniumsuolaksi. Näitä tai muita suoloja, esimerkiksi pikraatteja, voidaan käyttää myös saatujen emästen puhdistamiseen. Emäkset muutetaan suoloiksi, 20 suolat erotetaan ja emäkset vapautetaan suoloista. Koska vapaat yhdisteet ja suolojensa muodossa olevat yhdisteet ovat hyvin samankaltaisia, on tässä selityksessä aina esitetyn yhdisteen yhteydessä ymmärrettävä tarkoittavan myös vastaavaa suolaa, sen ollessa annetuissa olosuhteissa mah-25 dollista tai sopivaa.

Yhdisteet, mukaan lukien niiden suolat, voidaan saada myös niiden hydraattien muodossa tai ne voivat sisältää muita kiteytykseen käytettyjä liuottimia.

Keksinnön mukaiset farmaseuttiset valmisteet ovat sel-30 laisia, jotka ovat sopivia enteraaliseen, kuten oraaliseen tai rektaaliseen ja parenteraaliseen annostukseen imettäväisille, mukaan lukien ihmisille, hoidettaessa tai ehkäistäessä sairauksia, jotka riippuvat angiotensiinia muuttavan entsyymin estymisestä, esim. kardiovaskulaariset sairaudet, 35 kuten hypertensio, ja kongestiiviset sydäninsuffienssit, ja jotka sisältävät tehokkaan määrän farmakologisesti aktiivista, kaavan (I) mukaista yhdistettä tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa, pelkästään tai kombinaatiossa yhden tai useamman farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan kanssa.

38 7 6 0 7 4

Seuraavat esimerkit kuvaavat keksintöä, sitä kuitenkaan mitenkään rajoittamatta. Lämpötilat on annettu Celsiusasteina (°C) ja kaikki annetut osat ovat paino-osia. Ellei toisin mainita, suoritetaan kaikki haihdutukset alennetussa 5 paineessa, mieluimmin noin 15 - 100 mm:ssä Hg.

Kaavan (I) tai (IA) mukaisissa yhdisteissä, joissa on useampi kuin yksi asymmetriakeskus, merkitään näitä yhdisteitä sisältävissä esimerkeissä saadut diastereoisomeeriset yhdisteet kirjaimilla A, B, jne. Jokainen diastereoisomee-10 rinen yhdiste karakterisoidaan fysikaalisilla ominaisuuksilla, esim. sulamispisteellä, kromatografiässä saadulla suhteellisella matkalla (R^) sekä infrapuna- tai ydinmagneetti-resonanssi-mittauksissa saaduilla spektriarvoilla.

Kaavan (I) tai (IA) mukaisissa yhdisteissä, joissa X 15 tarkoittaa H2:ta ja asymmetriakeskus sijaitsee sivuketjussa hiiliatomissa, johon on sitoutunut typpiatomi, annetaan symbolit A ja B seuraavalla tavalla kulloiselle isomeerille, niiden kromatografiässä kulkeman suhteellisen matkan perusteella. Ohutkerroskromatografiässä ja normaalifaasi-korkea-20 paine-neste-kromatografiässä saatujen matkojen perusteella, käytettäessä piidioksidigeeliä stationäärifaasina, merkitään nopeasti etenevä isomeeri isomeerinä A ja hitaasti etenevä isomeeri isomeerinä B. Korkeapaine-neste-kromatografi-assa, käytettäessä käänteisfaasia, merkitään saadun matkan 25 perusteella hitaammin etenevä isomeeri isomeerinä A ja nopeasti etenevä isomeeri isomeerinä B.

Esimerkki 1: l-karboksyylimetyyli-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyy-liamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-flibentsatsepin-2-oni (kor-30 keammalla sulava isomeeri)

Liuosta, jossa on 3-amino-karboksimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (10,0 g) ja bentsyyli-palorypälehappo-etyyliesteriä (26,4 g) etikkahapossa (75ml) ja metanolissa (75 ml), hämmennetään typpiatmosfäärissä huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Sen jälkeen reaktioseokseen

II

39 7 6 0 7 4 lisätään tipoittain 4 tunnin kuluessa natriumsyaaniboori-hydridiä (3,4 g) metanolissa (25 ml) ja hämmennetään 24 tuntia huoneen lämpötilassa. Seokseen lisätään tipoittain kons. kloorivetyhappoa (4 ml), hämmennetään 1 tunti huoneen 5 lämpötilassa ja haihdutetaan kuiviin. Jäännös uutetaan 150 ml:aan vettä ja 50 ml:aan eetteriä ja 40% vesipitoisella natriumhydroksidiliuoksella säädetään pH arvoon 9. Kerrokset erotetaan ja eetterikerros hylätään. Vesipitoisen kerroksen pH säädetään kons. kloorivetyhapolla pH-arvoon 10 4,3 ja uutetaan 3 x 75 ml:11a etikkahappoetyyliesteriä.

Orgaaniset uutteet kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin. Raakatuote liuotetaan 310 ml:aan metylee-nikloridia ja tähän liuokseen johdetaan 5 minuutin ajan kloorivetykaasua. Liuos haihdutetaan ja jäännös hämmenne-15 tään 225 ml:aan eetteriä. Tuote suodatetaan. Saadaan diastereomeerinen seos 70:30, mikä todetaan korkeapaine-neste-kromatografisesti. Tuote kiteytetään uudestaan eta-noli/etikkahappoetyyliesteristä (1:3). Saadaan 1-karboksi-metyyli-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4, 20 5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni-hydrokloridia, joka sulaa 246 - 248° (hajaantuen) ja vastaa raseemista isomeeriä B.

Liuosta, jossa on edellä saatua hydrokloridisuolaa (0,9 g) ja propyleenioksidia (10 ml) etanolissa (150 ml), 25 hämmennetään 18 tuntia typpiatmosfäärissä. Liuos haihdutetaan kuiviin ja jäännös liuotetaan 3 ml:aan etanolia. Lisätään eetteriä (75 ml), joka saostaa vähäisen määrän edellä mainittua hydrokloridia. Suodos haihdutetaan kuiviin, hämmennetään eetteri/petrolieetterin kanssa (1:9) ja kiin-30 teä aine suodatetaan. Saadaan l-karboksimetyyli-3-(1-etok-sikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH- (l)bentsatsepin-2-onia, joka sulaa 139 - 141°:ssa. Tämä on kaavan (IB) mukaisen yhdisteen, jossa C H~ on etyleeni, R, n zn o tarkoittaa etoksia, R^ tarkoittaa hydroksia ja Rg tarkoittaa 35 fenyyliä, korkeammalla sulava, raseeminen isomeeri B.

76074 40 ’

Erottamalla optisesti aktiivisella amiinilla tavallisissa olosuhteissa ja hajottamalla diastereomeeriset suolat saadaan puhtaat enantiomeerit, esim. esimerkin 12 1-karbok-simetyyli-3S-(lS-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-5 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onin.

Käytettäessä korkeapaine-nestekromatografiaa (tästä eteenpäin merkitään hplc:nä - t.s. "high pressure liquid chromatography"), käänteis-faasi-kolonnissa (liuotinsystee-mi: metanoli/vesi (3:1), joka sisältää 0,025 % etikkahappoa), 10 kulkee isomeeri B nopeammin kuin esimerkin 5, alempana sulava isomeeri A.

Lähtöaine, 3-amino-l-karboksimetyyli-2,3,4,5-tetra-hydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni valmistetaan seuraavalla tavalla: 15 Seos, jossa on 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin- 2-onia (48,3 g; katso Briggs et ai., J.Chem.Soc. 1937, 456), fosforipentakloridia (188 g) ja ksyleeniä (1300 ml), kuumennetaan typpiatmosfäärissä 90°:een (öljyhaude) 30 minuutin kuluessa, samalla hämmentäen. Lämmittäminen suoritetaan si-20 ten, että 30°:ssa (fosforipentakloridin annetaan liueta) ja 50°:ssa pidetään tauko. Muodostuu runsaasti kloorivetyä. Lämpötila pidetään 90°:ssa 30 minuuttia. Reaktioseos suodatetaan kuumana, jotta vähäinen, suspendoitunut kiinteä aine saadaan poistetuksi, ja suodos haihdutetaan kuiviin alenne-25 tussa paineessa. Jäännös kaadetaan, samalla hämmentäen, kyllästettyyn, vesipitoiseen natriumkarbonaattiliuokseen (100 ml). Kun tuotteen kovettuminen on päättynyt se suodatetaan, jonka jälkeen aine lietetään etanoliin (150 ml), pestään etanolilla (50 ml) ja eetterillä (50 ml) ja kuiva-30 taan. Saadaan 3,3-dikloori-2,3,4,5-tetrahydro-lH- 1 bents-atsepin-2-onia, joka sulaa 185-187°:ssa.

Liuosta, jossa on 3,3-dikloori-2,3,4,5-tetrahydro-lH-1 bentsatsepin-2-onia (20 g, 0,174 moolia) ja vedetöntä natriumasetaattia (15,4 g, 0,188 moolia) jääetikkaa (920ml), 35 hydrataan ilmakehän paineessa käyttäen 5% palladium-hiilellä-katalysaattoria (1,72 g), kunnes vedyn kulutus loppuu. Kata-

II

41 76074 lysaattori suodatetaan pois ja etikkahappoa haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös jaetaan 10% natriumvety-karbonaattiliuokseen (900 ml) ja dikloorimetaaniin (300 ml). Vesipitoinen kerros (pH 8) uutetaan edelleen dikloorimetaa-5 nilla (3 x 300 ml). Yhdistetyt uutteet kuivataan vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Saadaan 3-kloori- 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, joka sulaa 163-167°:ssa.

Liuosta, jossa on 3-kloori-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-10 bentsatsepin-2-onia (15,9 g, 0,08 moolia) ja natriumatsidia (6,36 g, 0,10 moolia) dimetyylisulfoksidissa (320 ml), pidetään 3 tuntia 80°:ssa typpiatmosfäärissä. Tällöin otetussa näytteessä on IR-spektrissä vahva maksimi 2150cm ^:ssä, joka on luonteenomaista atsidiryhmälle. Reaktioseos kaade-15 taan 1000 ml:aan jäävettä ja suspensiota hämmennetään 30 minuuttia. Kiinteä aine suodatetaan, pestään vedellä (250 ml) ja kuivataan. Saadaan 3-atsido-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(s)-bentsatsepin-2-onia, joka sulaa 142-145°:ssa.

Liuos, jossa on 3-atsido-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-20 bentsatsepin-2-onia (8,7 g, 0,043 moolia) kuivassa dimetyy-liformamidissa (75 ml), lisätään 30 minuutin kuluessa hämmennettyyn suspensioon, jossa on natriumhydridiä (valmistetaan 60 % mineraaliöljydispersiosta (1,9 g)}, pestään petroli-eetterillä (3 x 150 ml)) kuivassa dimetyyliformamidissa 25 (250 ml), 0°:ssa typpiatmosfäärissä. Hämmentämistä jatke taan 1,5 tuntia, sen jälkeen lisätään bromietikkahappo-bentsyyliesteriä (10,8 g, 0,047 moolia) kuivassa dimetyyliformamidissa (75 ml) 45 minuutin kuluessa, jolloin lämpötila pidetään 0°:ssa. Sen jälkeen reaktioseosta hämmennetään 30 edelleen 18 tuntia, jonka kuluessa se lämpenee huoneen lämpötilaan. Dimetyyliformamidi haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös jaetaan veteen (500 ml) ja dikloorimetaaniin (500 ml). Vesipitoinen faasi uutetaan dikloorimetaa-nilla (3 x 500 ml). Yhdistetyt uutteet kuivataan natrium-35 sulfaatilla ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa.

Saadaan raakaa esteri-atsidia öljynä. Tämä liuotetaan tolu- 42 76074 eeniin (500 ml) ja lisätään piihappogeeliä (48 g). Suodatetaan ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa, jonka jälkeen saadaan 3-atsido-l-bentsyylioksokarbonyylimetyyli- 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia öljynä, jota 5 käytetään puhdistamattomana seuraavassa synteesivaiheessa.

Suspensio, jossa on aktiivista Raney-nikkeli-kataly-saattoria vedellä (15 ml), pestään etanolilla (5 x 100 ml), ja lisätään mekaanisesti hämmennettyyn liuokseen, jossa on 3-atsido-l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetra-10 hydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia (5,0 g) etanolissa (300 ml). Suspensiota hämmennetään 8 tuntia typpiatmosfäärissä huoneen lämpötilassa. Katalysaattori suodatetaan pois ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan 2-normaaliseen kloorivetyhappoon (200 ml) ja liuos uutetaan 15 eetterillä (2 x 250 ml). Vesipitoinen liuos tehdään emäksiseksi (pH 9) konsentroidulla, vesipitoisella ammoniakilla ja liuos uutetaan eetterillä (3 x 200 ml). Yhdistetyt eet-teriuutteet kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 3-amino-l-bentsyylioksi-20 karbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia öljynä, jota käytetään puhdistamattomana seuraavassa syntee s ivaiheessa.

3-amino-l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetra-hydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-oni valmistetaan myös seuraavalla 25 tavalla:

Liuos, jossa on 3-amino-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bents-atsepin-2-onia (5,0 g; 0,028 moolia) dimetyyliformamidissa (100 ml), lisätään typpiatmosfäärissä hämmennettyyn suspensioon, jossa on natriumhydridiä (valmistetaan 60% mineraali-30 öljydispersiosta (1,2 g) pesemällä petrolieetterillä (3 x 150 ml)) dimetyyliformamidissa (400 ml), johon on lisätty tetrabutyyliammoniumbromidia (10 g; 0,031 moolia). Reaktio-seosta pidetään 15 minuuttia 50°:ssa, jonka jälkeen lisätään liuos, jossa on bromietikkahappo-bentsyyliesteriä (7,2 g; 35 0,031 moolia) dimetyyliformamidissa (25 ml). Reaktioseosta hämmennetään edelleen 18 tuntia 50°:ssa, sen jälkeen jäähdy-

II

43 76074 tetään huoneen lämpötilaan ja dimetyyliformamidi haihdutetaan suurtyhjössä. Jäännöstä hämmennetään tolueeni/dikloo-rimetaanin kanssa (1:1, 500 ml), epäorgaanisten suolojen saostamiseksi. Suodatetaan, jonka jälkeen liuos haihdute-5 taan alennetussa paineessa ja jäännös kromatografoidaan pii-happogeelillä (200 g). Eluoidaan 0 - 15% etikkahappoetyyli-esterillä tolueenissa. Päätuotteena saadaan 3-amino-l-bents-yylioksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatse-pin-2-onia.

10 Liuosta, jossa on 3-amino-l-bentsyylioksikarbonyyli- metyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (1,3g) etanolissa (250 ml) hydrataan huoneen lämpötilassa ja ilmakehän paineessa käyttäen 10% palladium-hiilellä—katalysaattoria (0,20 g) kunnes vedyn kulutus loppuu. Katalysaattori 15 suodatetaan pois ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan valkeata vaahtoa (0,90 g). Tämä hierretään eetterin kanssa, jolloin saadaan 3-amino-l-karboksimetyyli-2,3, 4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia. Sul.p. 147-150°.

Liuosta, jossa on 3-atsido-l-bentsyylioksikarbonyyli-20 metyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (14,Og; 0,04 moolia) etanolissa (300 ml), hydrataan 25 tuntia 3,1 ilmakehän paineessa huoneen lämpötilassa, käyttäen 5% palla-dium-hiilellä-katalysaattoria (2,0 g). Katalysaattori suodatetaan pois ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. 25 Jäännös liuotetaan veteen (500 ml) ja liuos uutetaan dikloo-rimetaanilla (2 x 400 ml). Vesipitoinen liuos suodatetaan ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan etanoliin ja liuos haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan uudestaan etanoliin (50 ml) ja haihduttaminen 30 suoritetaan uudestaan. Jäännös kiteytetään uudestaan etano-li/etikkahappoetyyliesteristä. Saadaan 3-amino-l-karboksi-metyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, joka sulaa 147 - 150°:ssa.

44 76074

Esimerkki 2: l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3-(l-karboksi-3-fenyyli-propyyliamlno)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-fl]bentsatsepin-2-oni Natriumsyaaniboorihydridiä (0,152 g; 0,0014 moolia) 5 lisätään liuokseen, jossa on 1-bentsyylioksikarbonyylimetyy-li-3-amino-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (0,45 g; 0,0014 moolia) ja palorypälehappobentsyyliesteriä (0,48 g; 0,0028 moolia) metanolissa (35 ml). Reaktioseosta hämmennetään huoneen lämpötilassa typpiatmosfäärissä 2 tun-10 tia. Sen jälkeen reaktioseokseen lisätään taas palorypäle-happo-bentsyyliesteriä (0,48 g; 0,0028 moolia) ja hämmentämistä jatketaan 18 tunnin ajan. Lisätään kons. kloorivety-happoa (0,5 ml) ja saatua liuosta hämmennetään 1 tunti. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös käsi-15 tellään dikloorimetaanilla,(100 ml), natriumkloridin saosta-miseksi. Seos suodatetaan, liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös kromatografoidaan piihappogeelillä (30 g). Eluointi suoritetaan etikkahappoetyyliesteri/metano-li/etikkahapolla (90:10:0,2). Saadaan 1-bentsyylioksikarbo-20 nyylimetyyli-3-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-IH-(l)bentsatsepin-2-onia öljynä. NMR (CDC13) δ 7,35 (m, 14H) , 5,10 (s, 2H), 4,60 (m, 2H), 3,00 (m, 12H) .

Esimerkki 3: 1- bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3-(l-etoksikarbonyyli-3- 25 fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-fl)bentsatsepin- 2- oni

Liuosta, jossa on l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH- (l)bentsatsepin-2-onia (0,364 g; 0,00075 moolia), natrium-30 vetykarbonaattia (0,190 g; 0,0022 moolia) ja etyylijodidia (0,315 g; 0,002 moolia) dimetyyliasetamidissa (15 ml), hämmennetään typpiatmosfäärissä huoneen lämpötilassa 72 tuntia. Reaktioseos suodatetaan ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Lisätään vettä (100 ml) ja saatu liuos uutetaan dikloo-35 rimetaanilla (4 x 50 ml). Yhdistetyt uutteet kuivataan nätti 45 7 6 0 7 4 riumsulfaatilla ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan diesteriä öljynä. Tämä aine erotetaan hplc:llä kolmeen fraktioon, jolloin liuottimena käytetään etikkahappo-etyyliesteri/tolueenia (30:70).

5 Ensimmäisestä fraktiosta saadaan otsikossa mainitun yhdisteen isomeeri A öljynä. Toinen fraktio sisältää isomeerien A ja B seoksen ja kolmas fraktio käsittää otsikossa mainitun yhdisteen isomeerin B. Käytettäessä hplc:ssä kään-teis-faasi-kolonnia (liuotinsysteemi: metanoli/vesi (3:1), 10 sisältäen 0,025 % etikkahappoa) kulkee isomeeri A hitaammin kuin isomeeri B.

Esimerkki 4: l-karboksimetyyli-3-(l-etoksi-karbonyyli-3-fenyylipropyyli-amino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-fl]bentsatsepin-2-oni (korkeam-15 maila sulava isomeeri)

Liuosta, jossa on l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetra-hydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia (esimerkin 3 isomeeri B; 0,9 g) etanolissa (150 ml), hydrataan huoneen lämpötilassa 20 ja ilmakehän paineessa käyttäen 10 % palladium-hiilellä- katalysaattoria (0,5 g). Kun vedyn kulutus loppuu, katalysaattori suodatetaan pois ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan kiinteä aine, joka hierretään eetterin kanssa (8 ml). Saadaan otsikossa mainittua yhdistettä, 25 joka sulaa 138-140°:ssa ja joka on identtinen esimerkin 1 yhdisteen kanssa.

Esimerkki 5: l-karboksimetyyli-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli-amino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(li bentsatsepin-2-oni (alempa-30 na sulava isomeeri)

Liuosta, jossa on l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetra-hydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (esimerkin 3 isomeeri A* 1,2 g) etanolissa (125 ml), hydrataan huoneen lämpötilassa 46 76074 ja ilmakehän paineessa käyttäen 10 % palladium-hiilellä-katalysaattoria (0,5 g). Sen jälkeen kun vedyn kulutus loppuu, katalysaattori suodatetaan pois ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan kiinteä aine, joka hierretään 5 eetterin kanssa (8 ml). Saadaan l-karboksimetyyli-3-(1-etok-sikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH- (l)bentsatsepin-2-onia, joka sulaa 126 - 129°:ssa ja on alempana sulava raseeminen isomeeri A.

Käytettäessä hplcrssä käänteis-faasi-kolonnia (liuotin-10 systeemi: roetanoli/vesi (3:1), joka sisältää 0,025% etikka-happoa) , kulkee isomeeri A hitaammin kuin korkeammalla sulava raseeminen isomeeri B, joka on esimerkin 1 yhdiste.

Esimerkki 6: 1- bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3-(l-etoksikarbonyyli-3- 15 fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-[l)bentsatsepin- 2- oni

Liuos, jossa on 3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino) -2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (5,0g) kuivassa dimetyyliformamidissa (20 ml), lisätään typpiatmos-20 fäärissä hämmennettyyn suspensioon, jossa on natriumhydridiä (valmistetaan 60 % mineraaliöljydispersiosta (0,6 g), joka pestään petrolieetterillä (3 x 75 ml)) kuivassa dimetyyliformamidissa (85 ml), joka sisältää tetrabutyyliammonium-bromidia (4,4 g). Reaktioseosta hämmennetään 30 minuuttia 25 huoneen lämpötilassa, jonka jälkeen lisätään liuos, jossa on bromietikkahappo-bentsyyliesteriä (3,2 g) kuivassa dimetyyliformamidissa (10 ml). Seosta hämmennetään edelleen 30 minuuttia huoneen lämpötilassa, kuumennetaan 60°:een ja pidetään tässä lämpötilassa 18 tuntia. Reaktioseos jäähdytetään 30 huoneen lämpötilaan ja liuotin haihdutetaan suurtyhjössä.

Lisätään vettä (150 ml) ja saatu liuos uutetaan etikkahappo-etyyliesterillä (2 x 250 ml). Yhdistetyt etikkahappoetyyli-esteri-uutteet pestään vedellä (100 ml), kuivataan magnesium-sulfaatilla ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 35 ruskea öljy, joka kromatografoidaan piihappogeeIillä (150g)

II

47 7 6 0 7 4 ja eluoidaan tolueeni/etikkahappoetyyliesterillä (3:1). Ensin saadaan l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3-(1-etoksi-karbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH- (l)bentsatsepin-2-onin isomeeri A. Sen jälkeen isomeeri B.

5 Isomeerit A ja B ovat identtiset esimerkin 3 yhdisteiden kanssa, kuten voidaan todeta hplcsllä käänteis-faasi-kolonnilla (liuotinsysteemi: metanoli/vesi (3:1), sisältäen 0,025 % etikkahappoa) .

Lähtöaine valmistetaan seuraavalla tavalla: Liuos, 10 jossa on asetamino-malonihappo-dietyyliesteriä (33,2 g) etanolissa (150 ml), lisätään liuokseen, jossa on natrium-metoksidia etanolissa (valmistetaan natriumista (3,8 g) ja etanolista (200 ml)). Reaktioseosta hämmennetään 30 minuuttia huoneen lämpötilassa ja siihen lisätään tipoittain 20 15 minuutin kuluessa liuos, jossa on 2-nitro-fenyylietyyli-bromidia (J.Med.Chem. 20, 1020 (1977); 40,0 g) etanolissa (100 ml). Lisäyksen loputtua reaktioseosta keitetään 18 tuntia palautusjäähdyttäen, sen jälkeen jäähdytetään huoneen lämpötilaan ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös 20 liuotetaan veteen (350 ml) ja liuos uutetaan etikkahappo- etyyliesterillä (2 x 350 ml). Yhdistetyt etikkahappoetyyli-esteri-uutteet pestään vedellä (200 ml) ja kuivataan magnesiumsulfaatilla. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 2-asetamido-2-(o-nitro-fenyylietyyli)-malonihappo-25 dietyyliesteriä alhaalla sulavana kiinteänä aineena, jota käytetään puhdistamattomana seuraavassa synteesivaiheessa.

Liuosta, jossa on 2-asetamido-2-(o-nitro-fenyylietyyli) -malonihappo-dietyyliesteriä (80 g) 3-normaalisessa kloo-rivetyhapossa (900 ml), keitetään palautusjäähdyttäen 12 30 tuntia. Liuos jäähdytetään ja uutetaan etikkahappoetyyli- esterillä (200 ml). Vesipitoinen liuos suodatetaan ja haihdutetaan alennetussa paineessa kuiviin. Jäännös kiteytetään uudelleen etanoli/eetteristä. Saadaan 2-amino-4-(2-nitro-fenyyli)-voihappo-hydrokloridia, joka sulaa 219 - 221°:ssa 35 (hajaantuen).

48 7 6 0 7 4

Liuosta, jossa on 2-amino-4-(2-nitrofenyyli)-voihap-po-hydrokloridia (38 g) 10 % etanolipitoisessa kloorivety-hapossa (1200 ml), keitetään palautusjäähdyttäen 18 tuntia. Reaktioseos haihdutetaan alennetussa paineessa, lisätään 5 vettä (250 ml) ja vesipitoinen liuos tehdään emäksiseksi 2- normaalisella natriumhydroksidiliuoksella. Liuos uutetaan dikloorimetaanilla (2 x 500 ml). Yhdistetyt dikloori-metaani-liuokset pestään vedellä (2 x 150 ml) ja kuivataan vedettömällä natriumsulfaatilla. Haihduttamisen jälkeen 10 saadaan 2-amino-4-(2-nitrofenyyli)-voihappo-etyyliesteriä, jota käytetään puhdistamattomana seuraavassa synteesivai-heessa.

Liuosta, jossa on 2-amino-4-(2-nitrofenyyli)-voihappo-etyyliesteriä (27 g) etanolissa (600 ml), hydrataan huo-15 neen lämpötilassa ja ilmakehän paineessa, käyttäen 10 % palladium-hiilellä-katalysaattoria (2,5 g), kunnes vedyn kulutus loppuu. Katalysaattori suodatetaan pois ja liuos haihdutetaan kuiviin. Saadaan 2-amino-4-(2-aminofenyyli)-voihappo-etyyliesteriä, jota käytetään puhdistamattomana seuraa-20 vassa synteesivaiheessa.

Liuos, jossa on 2-amino-4-(2-aminofenyyli)-voihappo-etyyliesteriä (35,0 g) metanolissa (100 ml), lisätään typpi-atmosfäärissä, samalla hämmentäen, liuokseen, jossa on nat-riummetoksidia metanolissa (valmistetaan natriumista (1,0 g) 25 ja metanolista (400 ml)). Reaktioseosta keitetään palautus-jäähdyttäen 65 tuntia ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös jaetaan veteen (100 ml) ja dikloorimetaaniin (400ml). Vesipitoinen liuos uutetaan dikloorimetaanilla (400 ml). Yhdistetyt orgaaniset liuokset pestään vedellä (100 ml) ja 30 kuivataan magnesiumsulfaatilla. Liuos haihdutetaan kuiviin ja jäännöstä hierretään eetterin kanssa (250 ml) . Saadaan 3- amino-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, joka sulaa 161 - 162°:ssa.

Toisessa tapauksessa voidaan edetä seuraavalla tavalla: 35 Liuosta, jossa on 2-amino-4-(2-nitrofenyyli)-voihappo-hydro-kloridia (2,5 g) vedessä (200 ml), hydrataan huoneen lämpö- 49 76074 tilassa ja ilmakehän paineessa, käytttäen 10% palladium-hiilellä-katalysaattoria. Sen jälkeen kun vedyn kulutus loppuu, katalysaattori suodatetaan pois ja suodos haihdutetaan kuiviin. Jäännös liuotetaan veteen (50 ml) ja pH sääde-5 tään 10% natriumhydroksidiliuoksella arvoon 7. Sakka suodatetaan, pestään vedellä ja kuivataan. Saadaan 2-amino-4-(2-aminofenyyli)-voihappoa. Liuosta, jossa on 2-amino-4-(2-aminofenyyli)-voihappoa (1,0 g), heksametyylidisilatsaania (5,4 g) ja klooritrimetyylisilaania (0,1 g) ksyleenissä 10 (125 ml), keitetään palautusjäähdyttäen 65 tuntia. Reaktio- seos jäähdytetään, kaadetaan etanoliin (200 ml) ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Lisätään vettä (100 ml) ja liuos uutetaan dikloorimetaanilla (2 x 125 ml). Yhdistetyt di-kloorimetaani-liuokset pestään vedellä (50 ml), kuivataan 15 magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan alennetussa paineessa.

Saadaan 3-amino-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, joka on identtinen edellä saadun tuotteen kanssa.

3-amino-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni valmistetaan myös seuraavalla tavalla: 20 Liuokseen, jossa on 3-atsido-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)- bentsatsepin-2-onia (katso esimerkki 1) (27 g) etanolissa (3500 ml), lisätään typpiatmosfäärissä huoneen lämpötilassa, samalla hämmentäen, suspensio, jossa on Raney-nikkeliä vedessä (50 ml, pesty 10 tilavuusosalla etanolia). Seosta 25 hämmennetään huoneen lämpötilassa 2 tuntia, jonka jälkeen lisätään vielä 30 ml Raney-nikkeli-suspensiota. Seosta hämmennetään edelleen 30 minuuttia, katalysaattori suodatetaan pois ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan öljyf joka muuttuu kiinteäksi eetterilisäyksen jälkeen. Saa-30 daan 3-amino-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, joka sulaa 161 - 162°:ssa.

Liuosta, jossa on 3-amino-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-bentsatsepin-2-onia (8,0 g) ja bentsyylipalorypälehappoa (450 ml), hämmennetään typpiatmosfäärissä huoneen lämpöti-35 lassa 30 minuuttia. Lisätään natriumsyaaniboorihydridiä (4,5 g) ja saatua liuosta hämmennetään 48 tuntia huoneen so 76074 lämpötilassa. Seokseen lisätään tipoittain 10 minuutin kuluessa kons. kloorivetyhappoa (7 ml) ja hämmennetään edelleen 1 tunti. Reaktioseos haihdutetaan kuiviin, lisätään dikloorimetaania (150 ml) ja seosta hämmennetään 30 minuut-5 tia. Kiinteä aine suodatetaan, hämmennetään veden kanssa (100 ml) 15 minuuttia, jonka jälkeen suodatetaan, pestään vedellä (50 ml) ja kuivataan. Saadaan 3-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin- 2-onia, isomeerien seoksena. Sul.p. 173 - 175°.

10 Liuosta, jossa on 3-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliami- no)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (6,0 g), natriumvetykarbonaattia (4,0 g) ja etyylijodidia (11,6 g) dimetyyliasetamidissa (200 ml), hämmennetään 72 tuntia typpi-atmosfäärissä huoneen lämpötilassa, suodatetaan ja haihdute-15 taan suurtyhjössä. Jäännös liuotetaan veteen (250 ml) ja saatu liuos uutetaan dikloorimetaanilla (2 x 400 ml). Yhdistetyt uutteet kuivataan magnesiumsulfaatilla ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 3-(l-etoksi-karbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-20 (l)bentsatsepin-2-onia isomeeriseoksena. NMR (CDCl^) <5 9,22 (s, 1H), 4,10 (2 päällekkäistä kvartettia, 2H), 1,13 (2 päällekkäistä triplettiä, 3H).

Esimerkki 7: l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3-(1-bentsyylioksikarbonyy-25 li-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-flibents- atsepin-2-oni

Liuos, jossa on 3-(1-bentsyylioksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino) -2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (4,0 g) kuivassa dimetyyliformamidissa, lisätään typpi-30 atmosfäärissä huoneen lämpötilassa hämmennettyyn suspensioon, jossa on natriumhydridiä (60 % mineraaliöljysuspensiota (0,42 g), pesty petrolieetterillä (3 x 80 ml)) kuivassa di-metyyliformamidissa (100 ml), johon on sekoitettu tetrabutyy-liammoniumbromidia (3,1 g). Seoksen annetaan reagoida edel-35 leen 30 minuuttia huoneen lämpötilassa, jonka jälkeen siihen

II

si 76074 lisätään liuos, jossa on bromietikkahappo-bentsyyliesteriä (2,2 g) kuivassa dimetyyliformamidissa (10 ml). Liuoksen annetaan olla 30 minuuttia huoneen lämpötilassa, jonka jälkeen se kuumennetaan 50°teen ja pidetään tässä lämpötilassa 5 18 tuntia. Seos jäähdytetään huoneen lämpötilaan ja liuotin haihdutetaan suurtyhjössä. Jäännös liuotetaan veteen (150ml) ja liuos uutetaan etikkahappoetyyliesterillä (2 x 300 ml). Yhdistetyt etikkahappoetyyliesteri-liuokset pestään vedellä (100 ml), kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan 10 alennetussa paineessa. Saadaan ruskeaa öljyä, joka kromato-grafoidaan piihappogeelillä (250 g). Eluointi suoritetaan tolueeni/etikkahappoetyyliesterillä (1:1; 600 ml) ja saadaan öljy, joka on otsikossa mainitun yhdisteen isomeeri A, NMR (CDCl^) δ 5,12 (s, 4H), 4,50 (q, 2H). Eluoimalla edelleen 15 2000 ml:11a liuotinseosta saadaan öljy, joka on otsikossa mainitun yhdisteen isomeeri B. NMR (CDC13) 65,17 (s, 2H), 5,03 (d, 2H), 4,60 (q, 2H).

Lähtöaine valmistetaan seuraavalla tavalla: Liuosta, jossa on 3-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tet-20 rahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (kuten esimerkissä 6 on esitetty; 13,0 g), natriumvetykarbonaattia (10,0 g) ja bentsyylibroraidia (19,0 g) dimetyyliasetamidissa (750 ml), hämmennetään huoneen lämpötilassa typpiatmosfäärissä 7,2 tuntia. Reaktioseos suodatetaan ja haihdutetaan suurtyhjös-25 sä. Jäännös liuotetaan veteen (150 ml) ja saatu liuos uutetaan dikloorimetaanilla (2 x 400 ml). Yhdistetyt uutteet pestään vedellä (100 ml), kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan raakaa bents-yyliesteriä. Kiteyttämällä uudestaan etikkahappoetyylies-30 teristä saadaan 3-(l-bentsyylioksikarbonyyli-3-fenyylipropyy-liamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, joka sulaa 139 - 141°:ssa.

52 76074

Esimerkki 8: l-karboksimetyyli-3-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)- 2.3.4.5- tetrahydro-lH-fl)bentsatsepin-2-oni (alempana sulava isomeeri) 5 Liuosta, jossa on l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3- (l-bentsyylioksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia (esimerkin 7 isomeeri A; 2,7 g) etanolissa (800 ml), hydrataan huoneen lämpötilassa ja ilmakehän paineessa, käyttäen 10 % palladium-hiilellä-10 katalysaattoria (0,5 g). Sen jälkeen kun vedyn kulutus loppuu, katalysaattori suodatetaan pois ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan dihappoa (otsikossa mainittu yhdiste), joka on isomeeri A, sul.p. 256 - 259°.

Identtinen yhdiste saadaan hydrolysoimalla esimerkin 15 5 yhdiste.

Esimerkki 9: l-karboksimetyyli-3-(l-karboksi-3-fenvvlipropvvliamino)- 2.3.4.5- tetrahydro-lH-flibentsatsepin-2-oni (korkeammalla sulava isomeeri) 20 Liuosta, jossa on l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3- (l-bentsyylioksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (esimerkin 7 isomeeri B* 5,0 g) etanolissa (950 ml), hydrataan huoneen lämpötilassa ja ilmakehän paineessa, käyttäen palladium-hiilellä-25 katalysaattoria (0,5 g). Sen jälkeen kun vedyn kulutus loppuu, suodatetaan katalysaattori pois ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan edellä mainittua dihappoa (otsikon yhdiste), joka on isomeeri B, sul.p. 280 - 282°.

Identtinen yhdiste saadaan hydrolysoimalla esimerkin 30 1 yhdiste (isomeeri B) tai esimerkin 10 yhdiste (isomeeri B).

Esimerkki 10: l-etoksikarbonyylimetyyli-3-(l-etoksikarbonvyli-3-fenvyli-propyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-flibentsatsepin-2-oni Liuos, jossa on 3-(-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyy-35 liamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (katso

II

53 7 6 0 7 4 esimerkki 6; 3,0 g) kuivassa dimetyyliformamidissa (10 ml), lisätään huoneen lämpötilassa, typpiatmosfäärissä tipoittain 10 minuutin kuluessa hämmennettyyn suspensioon, jossa on natriumhydridiä (valmistetaan 60% mineraaliöljysuspensiosta 5 (0,26 g), joka on pesty petrolieetterillä (3 x 75 ml)) kui vassa dimetyyliformamidissa (100 ml). Seosta hämmennetään edelleen 30 minuuttia, lisätään liuos, jossa on bromietikka-happo-etyyliesteriä (1,4 g) dimetyyliformamidissa (15 ml) ja seosta pidetään 48 tuntia 60°:ssa. Reaktioseos jäähdytetään 10 huoneen lämpötilaan ja liuotin haihdutetaan suurtyhjössä.

Jäännökseen lisätään vettä (100 ml) ja liuos uutetaan etik-kahappoetyyliesterillä (2 x 200 ml). Yhdistetyt uutteet pestään vedellä (50 ml) , kuivataan magnesiumsulfaatilla ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan keltai-15 nen öljy (3,8 g). Tämä kromatografoidaan piihappogeelillä (120 g) ja eluoidaan tolueeni/etikkahappoetyyliesterillä (1:1; 250 ml). Saadaan toivotun tuotteen isomeeri A. Elu-oimalla edelleen 250 ml:11a liuotinseosta saadaan öljy.

Tämä muodostuu pääasiassa toivotun tuotteen isomeeristä B, 20 sisältäen vähäisen määrän isomeeriä A, kuten voidaan todeta analyyttisella hplcsllä (katso esimerkki 6). Eluoimalla edelleen 250 ml:11a liuotinseosta saadaan öljy, joka muodostuu käytännöllisesti katsoen puhtaasta isomeeristä B (hitaammin etenevä). Tämä aine liuotetaan metanoliin (25 ml) 25 ja muutetaan maleaattisuolaksi lisäämällä ekvivalenttinen määrä maleiinihappoa metanolissa. Haihduttamalla liuotin ja kiteyttämällä jäännös uudestaan metanoli/eetteristä saadaan l-etoksikarbonyylimetyyli-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-30 2-onin puhdasta isomeeriä B, joka sulaa 114 - 116°:ssa.

Esimerkki 11: l-karboksimetyyli-3-karboksimetyyliamino-2,3,4,5-tetrahydro-1H-fl)bentsatsepin-2-oni

Liuosta, jossa on l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3-35 bentsyylioksikarbonyylimetyyliamino-2,3,4,5-tetrahydro-lH- 54 7 6 0 7 4 (l)bentsatsepin-2-onia (4,8 g? 0,01 moolia) etanolissa (550 ml), hydrataan huoneen lämpötilassa ja ilmakehän paineessa käyttäen 5% palladium-hiilellä-katalysaattoria (0,85 g), kunnes vedyn kulutus loppuu. Seokseen lisätään 5 vettä (300 ml), katalysaattori suodatetaan pois ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös hierretään eetterin kanssa. Saadaan otsikossa mainittu yhdiste (dihap-poa), joka sulaa 232 - 236°:ssa.

Lähtöaine valmistetaan seuraavalla tavalla: Liuos, 10 jossa on 3-amino-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (5,0 g; 0,028 moolia) dimetyyliformamidissa (100 ml), lisätään typpiatmosfäärissä hämmennettyyn suspensioon, jossa on natriumhydridiä (valmistetaan 60% mineraaliöljysuspensios-ta (1,2 g), joka pestään petrolieetterillä (3 x 150 ml)) di-15 metyyliformamidissa (400 ml), johon on lisätty tetrabutyyli-ammoniumbromidia (10,9 g; 0,031 moolia). Reaktioseosta pidetään 15 minuuttia 50°:ssa, jonka jälkeen lisätään liuos, jossa on bromietikkahappobentsyyliesteriä (7,2 g; 0,031 moolia) dimetyyliformamidissa (25 ml). Seosta hämmennetään edelleen 20 18 tuntia 50°:ssa, sen jälkeen se jäähdytetään huoneen läm pötilaan ja dimetyyliformamidi haihdutetaan suurtyhjössä. Jäännöstä hämmennetään tolueeni/dikloorimetaanin kanssa (1:1? 500 ml), epäorgaanisten suolojen saostamiseksi. Suodatuksen jälkeen liuos haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös 25 kroroatografoidaan piihappogeelillä (200 g) ja eluoidaan 0 - 15% etikkahappoetyyliesterillä tolueenissa. Saadaan 1- bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3-bentsyylioksikarbonyyli-metyyliamino-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia ensimmäisenä fraktiona. Eluoimalla edelleen saadaan 3-bents- 30 yylioksikarbonyyliamino-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin- 2- onia, sul.p. 124 - 127° ja 3-amino-l-bentsyylioksikarbonyy-limetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (katso esimerkki 1).

Il 55 76074

Esimerkki 12: l-karboksimetyyli-3S-(lS-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli-amino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-flibentsatsepin-2-oni Käsittelemällä 3(S)-amino-l-karboksimetyyli-2,3,4,5-5 tetrahydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia bentsyylipalorypäle- happoetyyliesterillä natriumsyaaniboorihydridin läsnäollessa (kuten esimerkissä 1 on esitetty raseemiselle yhdisteelle) ja puhdistamalla seuraavalla tavalla saadaan 1-karboksymetyy-li-3S-(lS-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-10 tetrahydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia:

Liuos, jossa on natriumhydroksidia (2,1 g) vedessä (5 ml), lisätään huoneen lämpötilassa liuokseen, jossa on 3 (S)-amino-l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH- (l)bentsatsepin-2-onia (14,0 g) metanolissa (150 ml) ja liu-15 osta hämmennetään 2 tuntia. Liuotin haihdutetaan, jäännös kuivataan huolellisesti ja lietetään eetterillä. Saadaan 3 (S)-amino-l-karboksimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bents-atsepin-2-oni-natriumsuolaa, jota käytetään puhdistamattoma-na edelleen.

20 Liuosta, jossa on edellä saatua natriumsuolaa (12,9 g) ja bentsyylipalorypälehappoetyyliesteriä (31 g) etikkahapos-sa (100 ml) ja metanolissa (75 ml) hämmennetään kuivassa typpiatmosfäärissä huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Sen jälkeen lisätään 4 tunnin kuluessa tipoittain liuos, jossa 25 on natriumsyaaniboorihydridiä (3,8 g) metanolissa (30 ml). Yhdistettyjä liuoksia hämmennetään yön yli huoneen lämpötilassa ja lisätään tipoittain kons. kloorivetyhappoa (10 ml).

Seosta hämmennetään huoneen lämpötilassa tunti ja haihdutetaan. Jäännös jaetaan veteen (400 ml) ja eetteriin 30 (100 ml) ja pH säädetään 40% natriumhydroksiliuoksella ar voon 9,3. Kerrokset erotetaan ja eetterikerros hylätään. Vesipitoisen kerroksen pH säädetään kons. kloorivetyhapolla arvoon 4,3 ja uutetaan etikkahappoetyyliesterillä (3 x 100ml). Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan magnesiumsulfaatilla 35 ja haihdutetaan. Raaka tuote liuotetaan metyleenikloridiin (150 ml) ja siihen johdetaan 5 minuutin ajan kloorivetykaa- 56 76074 sua. Liuotin haihdutetaan ja saatu vaahto liuotetaan kuumaan metyylietyyliketoniin (100 ml). Saostunut sakka suodatetaan. Saadaan diastereomeerinen seos 95:5, kuten voidaan todeta hplc:llä. Tuote kiteytetään uudestaan 3-pentanoni/ 5 metanolista (10:1). Saadaan l-karboksimetyyli-3(S)-(1(S)- etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-(l)bentsatsepin-2-oni-hydrokloridia, sul.p. 188 - 190°; (a)D = -141,0° (c = 0,9 etanolissa), joka on kaavan (Ha) mukainen yhdiste, jossa CnH2n tarkoittaa etyleeniä, Rg on 10 etoksi, tarkoittaa hydroksia ja Rg tarkoittaa fenyyliä.

Liuosta, jossa on edellä mainittua hydrokloridia (0,035 g) ja propyleenioksidia (0,5 ml) etanolissa (4 ml), hämmennetään huoneen lämpötilassa typpiatmosfäärissä yön yli. Liuos haihdutetaan kuiviin, lisätään eetteriä (2 ml) 15 ja sakka suodatetaan. Saadaan l-karboksimetyyli-3S-(lS-etok-sikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH- (l)bentsatsepin-2-onia, joka sulaa 148 - 149°:ssa. (a)D = -159° (c = 1,2 etanolissa).

Optisesti aktiivinen lähtöaine valmistetaan seuraaval-20 la tavalla: a) Liuosta, jossa on 0,4 g 3(S)-t-butyylioksikarbonyy-liamino-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepiini-2,5-dionia (valmistetaan L-kynureniinista julkaisussa Australian J. Chemistry, Voi. 33, 633-640 (1980) esitetyn menetelmän mu-25 kaan) ja bromietikkahappoetyyliesteriä (0,23 g) kuivassa tetrahydrofuraanissa (30 ml), hämmennetään 0°:ssa kuivassa typpiatmosfäärissä. Seokseen lisätään kalium-tert.-butoksi-dia (0,254 g) yhdessä annoksessa, seoksen annetaan seistä 1 tunti 0°:ssa, sen jälkeen lisätään vielä bromietikkahappo-30 etyyliesteriä (0,23 g) ja hämmennetään 0°:ssa vielä tunnin ajan. Reaktioseokseen lisätään vettä (100 ml) ja uutetaan etikkahappoetyyliesterillä (2 x 50 ml). Yhdistetyt uutteet pestään vedellä (100 ml), kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan keltaista, ku-35 mimaista ainetta, josta saadaan eetteri-petrolieetterillä (kiehumispiste 30 - 60°) hiertämisen jälkeen 3(S)-t-butyyli-

II

57 76074 oksikarbonyyliamino-l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetra-hydro-lH-(l)bentsatsepiini-2,5-dionia, sul.p. 86 - 88°.

(a)D = -203° (c = 1 dimetyyliformamidissa).

Liuosta, jossa on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-1-5 etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepiini-2 , 5-dionia (0,14 g) ja natriumboorihydridiä (7 mg) etanolissa (10 ml), hämmennetään 18 tuntia huoneen lämpötilassa. Etanoli haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös liuotetaan dikloorimetaaniin (25 ml). Liuos uutetaan 10 2-normaalisella kloorivetyhapolla (2 x 20 ml) ja kyllästetyllä, vesipitoisella natriumkloridiliuoksella (20 ml) ja kuivataan natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös hierretään eetterin kanssa. Saadaan 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-l-etoksikarbonyyli-15 metyyli-5-hydroksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, joka sulaa 167 - 169,5°:ssa. (α)β = -193° (c = 0,52 dimetyyliformamidissa). Tämä yhdiste saadaan myös hydraa-malla bentsatsepiini-2,5-dioni-johdannainen H2/Pt:llä etanolissa .

20 Seosta, jossa on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-1- etoksikarbonyylimetyyli-5-hydroksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH- (l)bentsatsepin-2-onia (0,076 g), disykloheksyylikarbodi-imidiä (0,064 g) ja kupari-(I)-kloridia (7 mg), kuumennetaan typpiatmosfäärissä 60°:ssa, 32 tuntia. Reaktioseoksen anne-25 taan jäähtyä huoneen lämpötilaan. Jäännös liuotetaan mety-leenikloridiin (50 ml) ja pestään ensin laimealla ammonium-hydroksidilla (2 x 15 ml) ja sen jälkeen vedellä (20 ml). Orgaaninen faasi kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Saadaan toivotun additiotuotteen ja ylimääräisen di-30 sykloheksyyli-imidin seos.

Viimeksi mainittu seos (0,100 g) liuotetaan etikkahap-poetyyliesteriin (40 ml) ja laitetaan paineastiaan. Lisätään 10% palladium-hiilellä-katalysaattoria (0,010 g) ja seosta hydrataan 16 tuntia 40°:ssa ja ilmakehän 'paineessa.

35 Katalysaattori suodatetaan pois ja suodos haihdutetaan.

Jäännös hierretään eetterin kanssa ja eetteriliuos haihdute- 58 76074 taan. Saadaan 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-l-etoksi-karbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, sul.p. 115 - 116,5°. (°0D = “182° (c = 2,6 dimetyyli- formamidissa).

5 b) Viinihappoa (12,6 g) ja raseemista 3-amino-l-etoksi- karbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (22 g) liuotetaan kuumaan etanoliin (200 ml). Tämä liuos jäähdytetään ja sen annetaan seistä huoneen lämpötilassa yön yli. Saatu sakka suodatetaan ja kiteytetään uu-10 destaan kaksi kertaa etanolista (200 ml). Saadaan 3(S)-ami-no-l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bents-atsepin-2-oni-tartraattisuolaa. Tämä liuotetaan veteen (100 ml), pH säädetään laimealla ammoniumhydroksidilla arvoon 9 ja uutetaan metyleenikloridilla (2 x 50 ml). Yhdis-15 tetyt uutteet pestään vedellä (75 ml), kuivataan magnesium-sulfaatilla ja haihdutetaan. Saadaan 3(S)-amino-l-etoksi-karbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, sul.p. 104 - 106°. (°0D = ”285,5° (c = 0,99 etano lissa) .

20 c) Liuokseen, jossa on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyli- amino-l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-bentsatsepin-2-onia (edellä kohdassa a) saatu yhdiste; 0,225 g) etikkahappoetyyliesterissä (25 ml), johdetaan ensin 45 minuutin ajan kloorivetykaasua ja sen jälkeen 30 minuutin 25 ajan typpeä. Etikkahappoetyyliesteri pestään vedellä (30ml) ja 1-normaalisella kloorivetyhapolla (30 ml). Etikkahappo-etyyliesterikerros hylätään ja vesipitoiset faasit yhdistetään. Vesipitoisen liuoksen pH säädetään laimealla ammoniumhydroksidilla arvoon 9, uutetaan etikkahappoetyyliesterillä 30 (3 x 50 ml). Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan nat- riumsulfaatilla ja haihdutetaan. Saadaan 3(S)-amino-1-etok-sikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, sul.p. 101 - 102°. (°0D = “298° (c = 0,46 etanolissa).

Suojaryhmät lohkaistaan pois käsittelemällä etaanidi-35 tioli/booritrifluoridi-eteraatilla tai trifluorietikkahappo/ anisolilla. Saadaan 3(S)-amino-l-etoksikarbonyylimetyyli-

II

„ 76074 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia.

3 (S) -amino-l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetra-hydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-oni valmistetaan myös seuraa-valla tavalla: 5 d) Liuosta, jossa on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliami- no-l-etoksikarbonyylimetyyli-5-hydroksi-2,3,4,5-tetrahydro-1H-(l)bentsatsepin-2-onia (edellä esitetty yhdiste; 1,0 g) etikkahappoanhydridissä (20 ml), pidetään 3 tuntia 80°:ssa. Reaktioseos jäähdytetään huoneen lämpötilaan ja haihdute-10 taan alennetussa paineessa. Jäännökseen lisätään eetteriä (100 ml), saatu liuos pestään vedellä (500 ml) ja kuivataan magnesiumsulfaatilla. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 5-etoksi-3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino- l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bents-15 atsepin-2-onia värittömänä öljynä, jota puhdistamattomana käytetään edelleen.

Liuosta, jossa on 5-etoksi-3(S)-t-butyylioksikarbonyy-liamino-l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH- (1J-bentsatsepin-2-onia (0,7 g) etanolissa (50ml), hydrataan 24 20 tuntia 70°:ssa ja 2,9 ilmakehän paineessa, käyttäen 10% palladium-hiilellä-katalysaattoria (0,5 g). Katalysaattori suodatetaan pois ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-l-etoksikarbo-nyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, 25 joka muutetaan, puhdistamattomana edellä esitetyn menetelmän mukaisesti, 3(S)-amino-l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-oniksi, sul.p. 99 - 101°, (a)D = -297 (c = 1 etanolissa).

e) Liuosta, jossa on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-30 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepiini-2,5-dionia (12,5 g), valmistetaan L-kynureniinista julkaisussa Australian J. Chemistry Voi. 33, 633-640 (1980) esitetyn menetelmän mukaisesti, ja bromietikkahappo-tert.-butyyliesteriä (10,1 g) asetonissa (700 ml), hämmennetään huoneen lämpötilassa kui-35 vassa typpiatmosfäärissä. Lisätään yhdellä kertaa kalium-karbonaattia (12,5 g) ja saatua suspensiota hämmennetään 16 76074 60 tuntia huoneen lämpötilassa. Kaliumsuolat suodatetaan pois ja suodos haihdutetaan kuiviin. Jäännös jaetaan etikkahap-poetyyliesteriin (250 ml) ja veteen (250 ml). Kerrokset erotetaan ja orgaaninen faasi kuivataan natriumsulfaatilla.

5 Jäännös hierretään petrolieetterin kanssa (350 ml; kiehumispiste 30 - 60°). Saadaan 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino- l-t-butyylioksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-bentsatsepiini-2,5-dionia, sul.p. 75 - 77°. (a)D = -172° (c = 0,96 dimetyyliformamidissa).

10 Liuosta, jossa on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-1- t-butyylioksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-bentsatsepiini-2,5-dionia (8,0 g) etanolissa (500 ml), hyd-rataan 2 tuntia ilmakehän paineessa ja huoneen lämpötilassa, käyttäen platinaoksidia (800 mg). Katalysaattori suodate-15 taan pois ja suodos haihdutetaan. Saadaan 3(S)-t-butyyliok-sikarbonyyliamino-l-t-butyylioksikarbonyylimetyyli-5-hydrok-si-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, (a)D = -173° (c = 1,8 dimetyyliformamidissa).

Suspensiota, jossa on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliami-20 no-1-t-butyylioksikarbonyylimetyyli-5-hydroksi-2,3,4,5-tet- rahydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia (3,0 g), disykloheksyyli-karbodi-imidiä (5,0 g) ja kupari-(I)-kloridia (500 mg), hämmennetään mekaanisesti ja kuumennetaan kuivassa typpiatmos-fäärissä 16 tunnissa 80°:een. Seos jäähdytetään, laimenne-25 taan metyleenikloridilla (100 ml) ja suodatetaan. Kiinteä aine hylätään. Suodos pestään 7% ammoniumhydroksidilla (4 x 75 ml), sen jälkeen 1 x 100 ml:11a vettä ja kyllästetyllä, vesipitoisella natriumkloridiliuoksella (100 ml). Orgaaninen faasi kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdute-30 taan. Saadaan toivotun adduktiotuotteen ja ylimääräisen disykloheksyylikarbodi-imidin seos.

Tämä seos (5,5 g) liuotetaan etikkahappoetyyliesteriin (200 ml), laitetaan paineastiaan, lisätään 10% palladium-hiili-katalysaattoria (3,0 g) ja hydrataan 16 tuntia 40°:ssa 35 ja 3 ilmakehän paineessa. Katalysaattori suodatetaan pois ja suodos haihdutetaan. Jäännös hierretään eetterin kanssa

II

61 76074 (75 ml). Saadaan valkoista, kiinteätä ainetta, joka on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-l-t-butyylioksikarbonyy-limetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH- (l)bentsatsepin-2-onia, sul.p. 145 - 147°, (°0D = “194° (c = 0,46 dimetyyliform- 5 amidissa).

Liuos, jossa on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-1-t-butyylioksikarbonyylimetyyli-5-hydroksi-2,3,4,5-tetra-hydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia (edellä esitetty yhdiste; 3,0 g) etikkahappoanhydridissä (50 ml), kuumennetaan 2 tun-10 nissa kuivassa typpiatmosfäärissä 80°reen. Etikkahappoan-hydridi haihdutetaan, jäännös liuotetaan etikkahappoetyyli-esteriin (75 ml) ja pestään kyllästetyllä, vesipitoisella natriumvetykarbonaattiliuoksella (50 ml), vedellä (50 ml) ja kyllästetyllä, vesipitoisella natriumkloridiliuoksella 15 (50 ml). Orgaaninen faasi kuivataan natriumsulfaatilla, haihdutetaan ja jäännös hierretään eetterin kanssa (50 ml). Saadaan 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-l-t-butyylioksi-karbonyylimetyyli-5-asetoksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bents-atsepin-2-onia, sul.p. 164 - 166,5°, (a)D = -169° (c = 0,36 20 dimetyyliformamidissa).

Liuos, jossa on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-1-t-butyylioksikarbonyylimetyyli-5-asetoksi-2,3,4,5-tetrahyd-ro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia (2,2 g) etanolissa (300 ml), laitetaan yhdessä 10% palladium-hiilellä-katalysaattorin 25 kanssa paineastiaan. Seosta hydrataan 3 päivää 70°:ssa ja 3 ilmakehän paineessa. Katalysaattori suodatetaan pois ja suodos haihdutetaan. Saadaan 3(S)-t-butyylioksikarbonyyli-amino-l-t-butyylioksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-1H-(l)bentsatsepin-2-onia, sul.p. 164 - 165°, (a)D = -200,6° 30 (c = 0,64 dimetyyliformamidissa).

Liuokseen, jossa on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino- l-t-butyylioksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-bentsatsepin-2-onia (0,85 g) etikkahappoetyyliesterissä (40 ml), johdetaan 2 tunnin ajan kloorivetykaasua ja sen 35 jälkeen 30 minuutin ajan typpeä. Etikkahappoetyyliesteri haihdutetaan ja jäännöksenä saatu, valkoinen aine liuotetaan 62 760 7 4 heti metanoliin (40 ml). Lisätään propyleenioksidia (5 ml) ja seosta hämmennetään 16 tuntia huoneen lämpötilassa. Sakkana saatu valkoinen aine suodatetaan. Saadaan 3(S)-amino- l-karboksimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-5 onia, sul.p. 275 - 276°, (a)D = -287° (c = 0,71 1-normaali-sessa kloorivetyhapossa). Tämä tuote kondensoidaan, edellä esitetyllä tavalla, bentsyylipalorypälehappo-etyyliesterin kanssa natriumsyaaniboorihydridin läsnäollessa.

Esimerkki 13; 10 l-karboksimetyyli-3-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-5-hydroksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni

Liuokseen, jossa on 1-bentsyylioksikarbonyylimetyyli- 3-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-2,5-dihydro-lH-(l)bents-atsepiini-2,5-dionia (1,00 g) etikkahapossa (50 ml), lisätään 15 platinaoksidia (0,10 g). Seosta hydrataan paineastiassa 5 tuntia 2,9 ilmakehän paineessa. Katalysaattori suodatetaan pois, suodos haihdutetaan ja saatu öljy hierretään vedettömän etanolin kanssa. Saatu, kiinteä aine erotetaan, kuivataan ja suspendoidaan veteen (10 ml). Suspensiota hämmenne-20 tään 1,5 tuntia, kiinteä aine erotetaan ja kuivataan. Saadaan epäpuhdasta l-karboksimetyyli-3-(l-karboksi-3-fenyyli-propyyliamino)-5-hydroksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatse-pin-2-onia, joka sulaa 179°:ssa, samalla hajoten.

Lähtöaine valmistetaan seuraavalla tavalla: Bromietik- 25 kahappo-bentsyyliesteriä (9,16 g, 0,04 moolia) lisätään tipoittaan huoneen lämpötilassa, Selmalla hämmentäen, seokseen, jossa on 3-metoksi-2,5-dihydro-lH-(l)bentsatsepiini-2,5-dionia (8,13 g; 0,04 moolia; valmistetaan kuten julkaisussa Canadian J.Chem. , 52^, 610 (1974) on esitetty), jauhettua ka-30 liumhydroksidia (2,24 g; 0,04 moolia) ja tetrabutyyliammoni-umbromidia (1,29 g; 0,004 moolia) 1000 ml:ssa asetonitriiliä. Kun lisäys on loppunut, hämmennetään suspensiota 64 tuntia huoneen lämpötilassa, suodatetaan ja suodos konsentroidaan alennetussa paineessa. Saadaan osittain kiteytynyt Öljy.

35 Tämä hierretään eetterin kanssa, jolloin saadaan kiinteä äiti 76074 63 ne. Tämä suspendoidaan etikkahappoetyyliesteriin (100 ml) ja hämmennetään 1,5 tuntia. Liukenematon aine suodatetaan pois ja suodos konsentroidaan. Saadaan raakaa 1-bentsyyli-oksikarbonyylimetyyli-3-metoksi-2,5-dihydro-lH-(l)bentsatse-5 piini-2,5-dionia, jota käytetään suoraan seuraavassa vaiheessa.

Kalium-tert.-butoksidin (0,64 g; 0,0057 moolia) 1,0-molaariseen liuokseen tert.-butanolissa (5,7 ml) lisätään typpiatmosfäärissä huoneen lämpötilassa, samalla hämmentäen, 10 (+)-homofenyylialaniinia (1,02 g; 0,0057 moolia) yhdessä an noksessa. Saatua suspensiota kuumennetaan tert.-butanolin kanssa (4,3 ml), kunnes suurin osa suspendoitavasta, kiinteästä aineesta liukenee. Jäähdyttämisen jälkeen saadaan suspensio. Tämä suspensio lisätään annoksittain, käyttäen 15 pipettiä, 10 minuutin kuluessa palautusjäähdyttäen kiehuvaan, typpiatmosfäärissä hämmennettyyn liuokseen, jossa on 1-bents-yylioksikarbonyylimetyyli-3-metoksi-2,5-dihydro-lH-(l)bents-atsepiini-2,5-dionia (2,00 g) tert.-butanolissa (40 ml). Lisäyksen aikana muodostuu keltainen sakka. Kun lisäys on lop-20 punut, keitetään saatua suspensiota 3 tuntia palautusjäähdyttäen, jonka jälkeen se suodatetaan. Saatu, kumimainen, kiinteä aine pestään petrolieetterillä ja liuotetaan veteen (20 ml). Liuos suodatetaan ja pH säädetään 3-normaalisella kloorivetyhapolla arvoon 5. Saatu raaka 1-bentsyylioksi-25 karbonyylimetyyli-3-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-2,5-dihydro-lH-(l)bentsatsepiini-2,5-dioni erotetaan ja sitä käytetään suoraan otsikossa mainitun yhdisteen valmistamiseen.

Esimerkki 14:

Analogisesti esitettyjen menetelmien mukaisesti val-30 mistetaan seuraavat, kaavan (IA) mukaiset yhdisteet, joissa X = H2, Ra ja R5 = H, R6 = OC2H5 ja R? = OH: 64 76074

No. ^ %

1 C6H5CH2 H H

2 C6H5CH2CH2 7-OCH3 8-OCH3

3 C6H5CH2CH2 7-C1 H

5 4 C6H5CH2CH2 8_CH3 H

5 C6H5CH2CH2 8-OCH3 H

6 p-ClC6H4CH2CH2 H H

7 CH3 H H

Yhdisteisiin 2-5 käytetyt, substituoidut 2,3,4,5-10 tetrahydro-ΙΗ- 1 bentsatsepin-2-oni-lähtöaineet valmistetaan seuraavalla tavalla: 7-kloori-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni, sul.p. 164 - 165°, valmistetaan brittiläisessä patenttijulkaisussa 1,359,285 esitetyllä tavalla.

15 8-metyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni valmistetaan menetelmällä, jonka on esittänyt Huisgen,

Liebigs Ann. Chem. 574, 171 (1951). Sul.p. 153 - 154°.

7,8-dimetoksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni valmistetaan seuraavalla tavalla: Oksiimin valmistami- 20 seksi liuosta, jossa on 24 g 6,7-dimetoksi-a-tetralonia (Snider, T. et ai., Org. Prep. Proced. Int., 5, 291 (1973)) etanolissa (300 ml) ja vedessä (60 ml), keitetään palautus-jäähdyttäen 2 tuntia hydroksyyliamiinihydrokloridin (16 g) ja natriumhydroksidin (25 g) kanssa. Reaktioseos kaadetaan 25 500 ml:aan jää/vesi-seosta ja uutetaan 3 x 300 ml:11a dikloo- rimetaania. Yhdistetyt uutteet pestään 200 ml:11a vettä, kuivataan vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan. Saadaan 25 g oksiimia, joka sulaa 154 - 156°:ssa.

Oksiimi puolestaan liuotetaan dikloorimetaaniin (170ml) 30 ja lisätään polyfosfaatti-esteriä (170 ml) (Fieser and Fieser: Reagents for Organic Synthesis, Wiley N.Y. 1967, s. 892). Reaktioseosta keitetään palautusjäähdyttäen 18 tuntia. Di- 65 76074 kloorimetaani-kerros erotetaan, käsitellään aktiivihiilellä ja kuivataan magnesiumsulfaatilla. Saadaan 7,8-dimetoksi- 2.3.4.5- tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, sul.p. 153 -156°.

5 8-metoksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni, sul.p. 132 - 134°, valmistetaan vastaavalla tavalla lähtemällä 7-metoksi-a-tetralonista.

3-amino-7-kloori-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatse-pin-2-oni valmistetaan seuraavalla tavalla: Liuosta, jossa 10 on 3-amino-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (4,0 g), 2-tert.-butyylioksikarbonyylioksi-imino-2-fenyyli-asetonitriiliä (6,1 g) ja trietyyliamiinia (5 ml) vedessä (20 ml) ja dioksaanissa (25 ml), hämmennetään huoneen lämpötilassa 18 tuntia. Saatu sakka suodatetaan ja pestään vedel-15 lä. Kiteytetään uudestaan etikkahappoetyyliesteristä, jonka jälkeen saadaan 3-t-butyylioksikarbonyyliamino-2,3,4,5-tetra-hydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia, sul.p. 199 - 201°.

Liuokseen, jossa on 3-t-butyylioksikarbonyyliamino- 2.3.4.5- tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (1,5 g) etikka-20 hapossa (20 ml), johdetaan 10 minuutin ajan kloorivetykaasua.

Reaktioseosta hämmennetään edelleen 10 minuuttia. Sakka erotetaan, suspendoidaan veteen (30 ml) ja tehdään emäksiseksi vesipitoisella ammoniakilla. Suodatuksen jälkeen saadaan 3-amino-7-kloori-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia 25 joka sulaa 170 - 171°:ssa.

Esimerkki 15: 1- karboksimetyyli-3S-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli-amino)-2,3,4,5,5a,6,7,8,9,9a-dekahydro-lH-flibentsatsepin- 2- oni

Liuosta, jossa on 3(S)-amino-l-karboksimetyyli-2,3,4-5,5a,6,7,8,9,9a-dekahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni-natrium-suolaa (0,6 g) ja bentsyylipalorypälehappo-etyyliesteriä (1,5 g) etikkahapossa (5 ml) ja metanolissa (3 ml), hämmennetään kuivassa typpiatmosfäärissä huoneen lämpötilassa 1 tunti. Lisätään 4 tunnin kuluessa liuos, jossa on natrium-syaaniboorihydridiä (0,2 g) metanolissa (2 ml). Reaktio-seosta hämmennetään 18 tuntia huoneen lämpötilassa. Lisätään kons. kloorivetyhappoa ja hämmennetään seosta 1 tunti. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös uute- 66 7 6 0 7 4 taan veteen (20 ml) ja eetteriin (20 ml). pH säädetään 40% natriumhydroksidiliuoksella arvoon 9,3. Kerrokset erotetaan ja eetterikerros hylätään. Vesipitoisen faasin pH säädetään kons. kloorivetyhapolla arvoon 4,3 ja uutetaan etikkahappo-5 etyyliesterillä (3 x 25 ml). Uutteet kuivataan magnesium-sulfaatilla ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan dikloorimetaaniin (70 ml) ja liuokseen johdetaan kloorivetykaasua 5 minuutin ajan. Liuos haihdutetaan ja jäännös kiteytetään uudestaan etanoli/eetteristä.

10 Saadaan l-karboksimetyyli-3S-(lS-etoksikarbonyyli-3-fenyyli-propyyliamino)-2,3,4,5,5a,6,7,8,9,9a-dekahydro-lH-(l)bents-atsepin-2-oni-hydrokloridia isomeeriseoksena.

Lähtöaine valmistetaan seuraavalla tavalla:

Liuosta, jossa on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-1-15 etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatse- piini-2,5-dionia (3,6 g) etikkahapossa (50 ml), hydrataan 120 tuntia 3 ilmakehän paineessa, käyttäen platinaoksidia (1,2 g) katalysaattorina. Katalysaattori suodatetaan pois ja suodos haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös uute-20 taan dikloorimetaaniin (200 ml) ja kyllästettyyn, vesipitoiseen natriumvetykarbonaattiliuokseen (100 ml). Dikloori-metaaniliuos pestään vedellä (50 ml), kuivataan natrium-sulfaatilla ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös kromatografoidaan piihappogeelillä ja eluoidaan 25 0 - 50% etikkahappoetyyliesterillä. 50% etikkahappoetyyli- esterillä tolueenissa eluoidut fraktiot kootaan yhteen. Saadaan 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-l-etoksikarbonyy-limetyyli-2,3,4,5,5a,6,7,8,9,9a-dekahydro-lH-(l)bentsatse-piini-2,5-dionia, jota puhdistamattomana käytetään seuraa-30 vassa synteesivaiheessa.

Liuosta, jossa on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-1-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5,5a,6,7,8,9,9a-dekahydro-lH- (l)bentsatsepiini-2,5-dionia (2,7 g) ja natriumboorihydridiä (0,2 g) etanolissa (100 ml), hämmennetään 18 tuntia huoneen 35 lämpötilassa. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös liuotetaan dikloorimetaaniin (100 ml). Liuos

II

67 76074 uutetaan jääkylmällä, 2-normaalisella kloorivetyhapolla (2 x 50 ml) ja kyllästetyllä, vesipitoisella natriumkloridi-liuoksella (50 ml) ja kuivataan natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös hierretään 5 eetterin kanssa. Saadaan 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-l-etoksikarbonyylimetyyli-5-hydroksi-2,3,4,5,5a,6,7,8,9,9a-dekahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia.

Seosta, jossa on 3(S)-t-butyylioksikarbonyyliamino-1-etoksikarbonyylimetyyli-5-hydroksi-2,3,4,5,5a,6,7,8,9,9a-10 dekahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (2,1 g), disykloheksyy-likarbodi-imidiä (1,8 g) ja kupari-(I)-kloridia (0,2 g), kuumennetaan typpiatmosfäärissä 32 tuntia 80°:ssa. Reaktio-seos jäähdytetään huoneen lämpötilaan, jäännös liuotetaan metyleenikloridiin (200ml), pestään laimealla ammoniumhydrok-15 sidiliuoksella (2 x 50 ml) ja vedellä (50 ml). Orgaaninen faasi kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Saadaan toivotun additiotuotteen ja ylimääräisen disykloheksyyli-karbodi-imidin seos. Tämä seos liuotetaan etikkahappoetyy-liesteriin (100 ml) ja laitetaan paineastiaan. Lisätään 10% 20 Pd/C-katalysaattoria (0,4 g) ja seosta hydrataan 40°:ssa ja 3 ilmakehän paineessa 16 tuntia. Katalysaattori suodatetaan pois ja suodos haihdutetaan. Saadaan 3(S)-t-butyylioksi-karbonyyliamino-l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5,5a,6,7,8-9,9a-dekahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, jota käytetään 25 puhdistamattomana seuraavassa synteesivaiheessa.

Edellä saatu tuote (1,1 g) liuotetaan etikkahappoetyy-liesteriin (50 ml) ja liuokseen johdetaan 45 minuuttia kloo-rivetykaasua. Reaktioseos haihdutetaan alennetussa paineessa, jäännös liuotetaan etikkahappoetyyliesteriin (50 ml) ja 30 pestään vedellä (3 x 30 ml). Etikkahappoetyyliesteriliuos kuivataan natriumsulfaatilla ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 3(S)-amino-etoksikarbonyylimetyy-li-2,3,4,5,52,6,7,8,9,92-dekahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, jota käytetään puhdistamattomana seuraavassa menetelmävai-35 heessa.

68 760 74

Liuos, jossa on natriumhydroksidia (0,1 g) vedessä (0,25 ml), lisätään huoneen lämpötilassa edellä saadun amiinin (0,6 g) liuokseen metanolissa (7,5 ml) ja liuosta hämmennetään 2 tuntia. Liuottimet haihdutetaan pois, jäännös 5 kuivataan huolellisesti ja lietetään eetteriin. Saadaan 3(S)-amino-l-karboksimetyyli-2,3,4,5,5a,6,7,8,9,9a-dekahyd-ro-lH-(l)bentsatsepin-2-onin natriumsuolaa.

Esimerkki N-f 1-(1-karboksimetyyli)-2,3,4,5-tetrahydro-2-okso-lH-[l]-10 bentsatsepin-3S-yyliamino)-3-fenyylipropyyli-l-karbonyyli]-L-fenyylialaniini L-fenyylialaniini-metyyliesteri-hydrokloridi konden-soidaan l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3S-(lS-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-15 2-onin kanssa metyleenikloridissa 1-(3-dimetyyliaminopropyy-li) -3-etyyli-karbodi-imidi-hydrokloridin läsnäollessa, huoneen lämpötilassa. Työskentelemällä edelleen saadaan N-(l-(l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-2-okso-1H-(l)bentsatsepin-3S-yyliamino)-3-fenyylipropyyli-l-karbo-20 nyyli)-L-fenyylialaniini-metyyliesteriä

Hydraamalla etanolissa, käyttäen 10% Pd/C-katalysaat-toria, saadaan N-(l-(l-karboksimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro- 2-okso-lH-(l)bentsatsepin-3S-yyliamino)-3-fenyylipropyyli-l-karbonyyli) -L-fenyylialaniini-metyyliesteriä.

25 Hydrolysoimalla laimealla natriumhydroksidlliuoksella huoneen lämpötilassa, 18 tunnin ajan, saadaan N-(l-(1-karbok-simetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-2-okso-lH-(l)bentsatsepin-3S-yyliamino)-3-fenyylipropyyli-l-karbonyyli)-L-fenyylialanii-nia.

30 Esimerkki 17: 1-etoksikarbonyylimetyyli-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyyli-propyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-[l)bentsatsepin-2-oni Käsittelemällä 3-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-l-syaanimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia

II

76074 69 etanoli/eetteri-seoksella (1:1), joka on kyllästetty kloori-vedyllä, 48 tuntia huoneen lämpötilassa, saadaan jatkoreak-tioiden jälkeen l-etoksikarbonyylimetyyli-3-(1-etoksikarbo-nyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bents-5 atsepin-2-onia, joka on identtinen esimerkin 10 yhdisteen kanssa.

Lähtöaine valmistetaan seuraavalla tavalla: 3-(l-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetra-hydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni alkyloidaan bromiasetonitrii-10 Iillä dimetyyliformamidissa natriumhydridin läsnäollessa. Työskentelemällä edelleen saadaan 3-(l-karboksi-3-fenyyli-propyyliamino)-l-syaanimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-bentsatsepin-2-onia, jota käytetään suoraan seuraavassa vaiheessa .

Esimerkki 18: l-karboksimetyyli-3S-(lR-etoksikarbonyyli-3-fenyyllpropyyli-amino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-[l)bentsatsepin-2-oni 20 Esimerkin 12 l-karboksimetyyli-3S-(lS-etoksikarbonyy- li-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bents-atsepin-2-oni-hydrokloridin kiteytyksen metyyli-etyyli-keto-ni-suodos haihdutetaan ja jäännös hierretään etikkahappoetyy-liesterin kanssa (50 ml). Saatu kiinteä aine jaetaan etikka-25 happoetyyliesteriin (100 ml) ja veteen (100 ml) ja pH säädetään kons. kloorivetyhapolla arvoon 4,3. Kerrokset erotetaan ja vesipitoinen faasi uutetaan etikkahappoetyyliesterillä (2 x 100 ml). Yhdistetyt etikkahappoetyyliesteriliuokset kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan alennetussa 30 paineessa. Jäännös erotetaan komponentteihinsa nestekromato-grafisesti (hplc), käyttäen preparatiivista C^g-käänteis-faa-si-kolonnia. Liuottimena käytetään vesi/metanolia (3:7), joka sisältää 0,05% etikkahappoa. Näin saadaan esimerkin 12 S,S-isomeeria vielä lisää ja myös S,R-isomeeriä, S,R-isomee- 76074 70 ria vastaava aine liuotetaan dikloorimetaaniin (75 ml) ja liuokseen johdetaan kloorivetykaasua. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös kiteytetään uudestaan metyyli-etyyli-ketonista. Saadaan l-karboksimetyyli-3S-(1R-5 etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino-2/3,4,5-tetrahydro- 1H-(l)bentsatsepin-2-oni-hydrokloridia, sul.p. 181 - 183°, (a)D = -188° (c = 0,8, etanolissa) .

Esimerkki 19; l-karboksimetyyli-3S-(lS-karboksi-3-fenyylipropyyllamino)-10 2,3,4,5-tetrahydro-lH-fl)bentsatsepin-2-oni

Liuokseen, jossa on l-karboksimetyyli-3S-(lS-etoksi-karbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-bentsatsepin-2-oni-hydrokloridia (1 g) metanolissa (10 ml), lisätään liuos, jossa on natriumhydroksidia (0,27 g) vedessä 15 (2 ml). Reaktioseosta hämmennetään 18 tuntia huoneen lämpö tilassa, jonka jälkeen se haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan veteen (25 ml) ja pH säädetään 4-normaali-sella kloorivetyhapolla arvoon 3. Muodostunut sakka suodatetaan, pestään vedellä ja kuivataan. Saadaan 1-karboksimetyy-20 li-3S-(lS-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahyd-ro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia, joka sulaa 270 - 272°:ssa.

(&)q = -200,5° (c =1, 3%:isessa vesipitoisessa amoniakissa).

Esimerkki 20; 1- etoksikarbonyylimetyyli-3-(l-bentsyylioksikarbonyyli-3- 2 5 fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-flibentsatsepin- 2- oni

Liuos, jossa on 3-(l-bentsyylioksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino) -2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (5,0 g) kuivassa dimetyyliformamidissa, lisätään typpiatmos-30 fäärissä huoneen lämpötilassa hämmennettyyn suspensioon, jos sa on natriumhydridiä (valmistetaan 60% mineraaliöljydisper-siosta (0,5 g), pestään petrolieetterillä (3 x 80 ml)) kuivassa dimetyyliformamidissa (100 ml). Seosta hämmennetään edelleen huoneen lämpötilassa 30 minuuttia, jonka jälkeen

II

71 76074 lisätään bromietikkahappo-etyyliesteriä (2,0 g) kuivassa dimetyyliformamidissa (10 ml) . Reaktioseosta pidetään edelleen huoneen lämpötilassa 30 minuuttia, jonka jälkeen se kuumennetaan 50°:een ja pidetään tässä lämpötilassa 18 tun-5 tia. Seos jäähdytetään huoneen lämpötilaan ja haihdutetaan suurtyhjössä. Jäännös liuotetaan veteen (150 ml) ja liuos uutetaan etikkahappoetyyliesterillä (2 x 300 ml). Yhdistetyt uutteet pestään vedellä (100 ml), kuivataan magnesium-sulfaatilla ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa.

10 Saadaan ruskea öljy, joka kromatografoidaan piihappogeelil-lä (250 g), eluointi suoritetaan tolueeni/etikkahappoetyyli-esterillä (9:1; 600 ml). Saadaan öljy, joka on otsikossa mainitun yhdisteen isomeeri A. Eluoimalla edelleen 1000 ml:lla liuotinseosta, saadaan öljyä» joka on otsikossa 15 mainitun yhdisteen isomeeri B.

Esimerkki 21: l-etoksikarbonyylimetyyli-3-(l-karboksi-3-fenyylipropvvli-amino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-fl]bentsatsepin-2-oni l-etoksikarbonyylimetyyli-3-(1-bentsyylioksikarbonyy-20 li-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bents-atsepin-2-onia (esimerkin 20 isomeeri B; 1,1 g) hydrataan etanolissa (150 ml) huoneen lämpötilassa ja ilmakehän paineessa, käyttäen palladium-hiilellä-katalysaattoria (0,5 g). Kun vedyn kulutus loppuu, katalysaattori suodatetaan pois 25 ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan puo-likiinteä aine, joka hierretään eetterin (30 ml) kanssa. Saadaan otsikossa mainitun yhdisteen isomeeri B, sul.p. 175-177°.

Esimerkki 22: 30 l-karboksimetyyli-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli-amlno)-8-metoksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-fl)bentsatsepin-2-oni (isomeeri B)

Liuosta, jossa on 3-amino-l-karboksimetyyli-8-metoksi- 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (4,0 g) ja 72 7 6 0 7 4 bentsyylipalorypälehappo-etyyliesteriä (9,4 g) etikkahapon (35 ml) ja metanolin (35 ml) seoksessa, hämmennetään tunti. Sen jälkeen lisätään hitaasti 5 tunnin kuluessa liuos, jossa on natriumsyaaniboorihydridiä (1,1 g) metanolissa (50ml) . 5 Seosta hämmennetään edelleen 16 tuntia, lisätään kons. kloo-rivetyhappoa (4 ml) ja hämmennetään vielä tunti. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös jaetaan veteen (75 ml) ja eetteriin (35 ml). Säädetään pH-arvo 9,4, eette-rikerros erotetaan ja hylätään. Vesipitoisen kerroksen pH 10 säädetään arvoon 4,3 ja uutetaan etikkahappoetyyliesterillä (3 x 50 ml). Yhdistetyt etikkahappoesteriliuokset kuivataan magnesiumsulfaatilla ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Raakatuote liuotetaan metyleenikloridiin (100ml) ja liuokseen johdetaan kloorivetykaasua 5 minuutin ajan.

15 Liuos haihdutetaan ja jäännöstä hämmennetään eetterin (75ml) kanssa. Tuote suodatetaan. Saadaan diastereomeerinen seos noin 70:30, kuten voidaan todeta hplcillä.

Tuote kiteytetään uudestaan 3-pentanonista. Saadaan l-karboksimetyyli-8-metoksi-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyyli-20 propyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-7H-(l)bentsatsepin-2-oni-hydrokloridia (isomeeri B), joka sulaa 240 - 245°:ssa (hajaantuen) .

Lähtöaine valmistetaan seuraavalla tavalla:

Liuos, jossa on 8-metoksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-25 bentsatsepin-2-onia (7,0 g; esitetty esimerkissä 14) ja fosforipentakloridia (30,0 g) ksyleenissä (200 ml), kuumennetaan typpiatmosfäärissä, samalla hämmentäen, 90°:een (öl-jyhauteen lämpötila) 30 minuutin kuluessa. Kuumennus suoritetaan siten, että 30°:ssa ja 50°:ssa pidetään tauko. Kuu-30 mennuksen aikana muodostuu huomattavasti kloorivetykaasua. Lämpötila pidetään 30 minuuttia 90°:ssa. Reaktioseos suodatetaan kuumana, vähäisen suspendoituneen kiinteän aineen poistamiseksi ja suodos haihdustetaan kuiviin alennetussa paineessa. Jäännös lisätään, samalla hämmentäen, vesipitoi-35 seen, kyllästettyyn natriumkarbonaattiliuokseen (20 ml).

Kun tuote on kiinteytynyt, se suodatetaan, jonka jälkeen se

II

73 76074 lietetään etanoliin (30 ml), pestään etanolilla (10 ml) ja eetterillä (10 ml) ja kuivataan. Saadaan 3,3-dikloori-8-metoksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, joka sulaa 148 - 150°:ssa.

5 Liuosta, jossa on 3,3Tdikloori-8-metoksi-2,3,4,5- tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (20 g) ja vedetöntä natriumasetaattia (13,2 g) jääetikassa (250 ml), hydrataan ilmakehän paineessa, käyttäen 10% palladium-hiilellä-kata-lysaattoria (1 g), kunnes vedyn kulutus loppuu. Katalysaat-10 tori suodatetaan pois ja etikkahappo haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännökseen lisätään vettä (100 ml) ja suspensiota hämmennetään 1 tunti. Kiinteä aine suodatetaan, pestään vedellä (50 ml) ja kuivataan. Saadaan 3-kloori-8-metoksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, joka 15 sulaa 162 - 163°:ssa.

Liuosta, jossa on 3-kloori-8-metoksi-2,3,4,5-tetrahyd-ro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia (12,5 g) ja natriumatsidia (4,3 g) dimetyylisulfoksidissa (150 ml), pidetään 3 tuntia typpiatmosfäärissä 80°:ssa. Peöfctioseos kaadetaan jää/vesi-seokseen 20 (300 ml) ja suspensiota hämmennetään 30 minuuttia. Kiinteä aine suodatetaan, pestään vedellä (50 ml) ja kuivataan. Saadaan 3-atsido-8-metoksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(1)bentsatse-pin-2-onia, sul.p. 136 - 138°.

2-atsido-8-metoksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatse-25 pin-2-oni (5 g) lisätään yhdellä kertaa typpiatmosfäärissä hämmennettyyn suspensioon, jossa on kaliumhydroksidia (l,3g) ja tetrabutyylianunoniumbromidia (0,7 g) tetrahydrofuraanis-sa, joka on jäähdytetty 0°:een. Seosta hämmennetään edelleen 5 minuuttia, jonka jälkeen 5 minuutin kuluessa lisätään 30 liuos, jossa on bromietikkahappo-etyyliesteriä (3,6 g) tetra-hydrofuraanissa (15 ml). Reaktioseoksen annetaan lämmetä huoneen lämpötilaan, jossa sitä hämmennetään vielä 2 tuntia. Seos suodatetaan ja tetrahydrofuraani haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös uutetaan veteen (50 ml) ja eette-35 riin (100 ml). Orgaaninen faasi pestään 2-normaalisella kloorivetyhapolla (10 ml), kuivataan magnesiumsulfaatilla 74 76074 ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 3-atsido-l-etoksikarbonyylimetyyli-8-metoksi-2,3,4,5-tetra-hydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia, sul.p. 90 - 91°.

Suspensio, jossa on 3-atsido-l-etoksikarbonyylietyy-5 li-8-metoksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (13,8 g) metanolissa (75 ml), käsitellään liuoksella, jossa on natriumhydroksidia (1,9 g) vedessä (75 ml). Reaktiose-osta hämmennetään 2 tuntia 40 - 45°:ssa, lisätään vettä (100 ml), hapotetaan kons. kloorivetyhapolla (10 ml) ja uu-10 tetaan metyleenikloridilla (3 x 75 ml). Yhdistetyt metylee-nikloridiliuokset kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 3-atsido-l-karboksi-metyyli-8-metoksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, joka sulaa 145 - 147°:ssa.

15 Liuosta, jossa on 3-atsido-l-karboksimetyyli-8-metok- si-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (11 g) etanolin (250 ml) ja veden (50 ml) seoksessa, hydrataan huoneen lämpötilassa 3 tuntia 3 ilmakehän paineessa, käyttäen 10% Pd-C-katalysaattoria. Seokseen lisätään 2-normaalista 20 kloorivetyhappoa (50 ml) ja katalysaattori suodatetaan pois. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös liuotetaan veden (50 ml) ja etanolin (50 ml) seokseen. Lisätään propyleenioksidia (25 ml) ja seosta hämmennetään 1 tunti. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 25 3-amino-l-karboksimetyyli-8-metoksi-2,3,4,5-tetrahydro-lH- (l)bentsatsepin-2-onia, joka sulaa yli 300°:n.

Esimerkki 23; 1-(1-karboksietyyli)-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli-amino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-[l]bentsatsepin-2-oni-hydro-30 kloridi

Liuosta, jossa on 3-amino-l-(1-karboksietyyli)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni-hydrokloridia (3 g) ja bentsyylipalorypälehappo-etyyliesteriä (6,5 g) etikkahapossa (30 ml) ja metanolissa (30 ml), hämmennetään huoneen lämpöti-35 lassa tunti. Lisätään 4 tunnin kuluessa natriumsyaaniboori-

II

75 7 6 0 7 4 hydridiä (0,8 g) metanolissa (10 ml). Reaktioseosta hämmennetään 24 tuntia huoneen lämpötilassa, lisätään kons. kloori-vetyhappoa (2 ml) ja hämmennetään tunti. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös uutetaan veteen (50 ml) 5 ja eetteriin (30 ml). Säädetään pH arvoon 9,4, eetteriker-ros erotetaan ja hylätään. Vesipitoisen liuoksen pH säädetään arvoon 4,3 ja uutetaan etikkahappoetyyliesterillä (3 x 50 ml). Yhdistetyt uutteet kuivataan magnesiumsulfaatilla ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Raakatuot-10 teen metyleenikloridiliuokseen (10 ml) johdetaan kloorivety-kaasua 2 minuutin ajan ja liuos haihdutetaan. Saadaan 1-(1-karboksietyyli)-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliami-no)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni-hydroklori-dia diastereomeerien seoksena, sul.p. 87 - 94°.

15 Lähtöaine valmistetaan seuraavalla tavalla: 3-atsido-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni (valmistetaan esimerkin 1 mukaisesti; 5 g) lisätään yhdellä kertaa hämmennettyyn suspensioon, jossa on kaliumhydroksidia (1,8 g) ja tetrabutyyliammoniumbromidia (1,8 g) tetrahydro-20 furaanissa (50 ml), typpiatmosfäärissä 0°:ssa. Hämmentämistä jatketaan 5 minuutin ajan, jonka jälkeen seokseen lisätään 5 minuutin kuluessa (R)-2-bromipropionihappo-tert.-butyyliesteriä (j.P.Greenstein et ai., J.Am.Chem.Soc. 76, 6054 (1954) , H.Niedrich und G.Roller, J.Prakt.Chem. 316, 25 729 (1974)) (5,2 g) tetrahydrofuraanissa (15 ml). Reaktio- seoksen annetaan lämmetä huoneen lämpötilaan 2 seuraavan tunnin kuluessa, samalla sitä hämmentäen. Reaktioseos suodatetaan ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös uutetaan veteen (50 ml) ja eetteriin (100 ml) .

30 Orgaaninen faasi pestään 2-normaalisella kloorivety- hapolla (10 ml), kuivataan magnesiumsulfaatilla ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 3-atsido-l-(1-t-butyylioksikarbonyylietyyli)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-bentsatsepin-2-onia öljynä, jota käytetään puhdistamattoma-35 na edelleen.

76 7 6 0 7 4

Liuosta^ jossa on 3-atsido-l-(1-t-butyylioksikarbonyy-lietyyli)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (7 g) etanolissa (70 ml), hydrataan 3 ilmakehän paineessa 3 tuntia, käyttäen 10% Pd-C-katalysaattoria (0,5 g). Katalysaat-5 tori suodatetaan pois ja etanoli haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 3-amino-l-(1-t-butyylioksikarbonyyli-etyyli)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia öljynä. Nestekromatografia korkeapaineella (hplc) osoittaa, että tuote on diastereomeerien noin l:l-seos. Tätä ainetta käy-10 tetään puhdistamattomana edelleen.

Liuosta, jossa on edellä saatua 3-amino-l-(1-t-butyy-lioksikarbonyylietyyli)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatse-pin-2-onia (4,7 g) trifluorietikkahapossa (25 ml), hämmennetään tunti huoneen lämpötilassa. Trifluorietikkahappo haih-15 dutetaan alennetussa paineessa ja jäännös liuotetaan eetteriin (100 ml). Liuokseen johdetaan kloorivetykaasua, kunnes sakan muodostuminen loppuu. Kiinteä aine suodatetaan pois. Saadaan 3-amino-l-(1-karboksietyyli)-2,3,4,5-tetrahydro-lH- (l)bentsatsepin-2-oni-hydrokloridia, sul.p. 165 - 176°.

20 Hplc osoittaa, että tuote on diastereomeerien noin l:l-seos.

Esimerkki 24: l-etoksikarbonyylimetyyli-3S-(lS-etoksikarbonyyli-3-fenyyli-propyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-flibentsatsepin-2-oni

Liuosta, jossa on 3S-amino-l-etoksikarbonyylimetyyli-25 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (1,5 g), 2-bro- mi-4-fenyyli-voihappoetyyliesteriä (1,6 g) ja trietyyliamii-nia (0,8 ml) dimetyyliformamidissa (37 ml), hämmennetään 18 tuntia 70°:ssa typpiatmosfäärissä. Sen jälkeen dimetyyli-formamidi haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuo-30 tetaan etikkahappoetyyliesteriin (70 ml), pestään vedellä (5 x 25 ml), kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan. Sitten tuote-seos erotetaan piihappogeeli-kromatografisesti, jolloin liuottimena käytetään etikkahappoetyyliesteri/heksaa-nia (40:60). Saadaan suunnilleen yhtä suuret määrät 1-etok-35 sikarbonyylimetyyli-3S-(lS-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyy-

II

76074 77 liamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (NMR (CDCIj)s 64,52 (q, 2H)), joka on esimerkin 10 mukaisen yhdisteen S,S-enantiomeeri, ja sen diastereomeeria 1-etoksi-karbonyylimetyyli-3S-(lR-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli-5 amino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia; NMR (CDC13): 64,50 (q, 2H).

TLC (ohutkerroskromatografia): (piihappogeeli; etikka-happoetyyliesteri/heksaani 40:60): (S,S)-isomeerin R^-arvo 0,24 ja (S,R)-isomeerin R^-arvo on 0,33.

10 Esimerkki 25: l-karboksimetyyli-3S-(lS-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli-amino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-fl)bentsatsepin-2-oni

Lisätään tipoittain 2-normaalista kaiiumhydroksidiliuosta (0,26 ml) liuokseen, jossa on 1-etoksikarbonyylimetyy-15 li-3S-(lS-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5- tetrahydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia (0,25 g) etanolissa (5 ml), huoneen lämpötilassa typpiatmosfäärissä, samalla hämmentäen. Seosta hämmennetään tunti, jonka jälkeen etanoli haihdutetaan pois, jäännös liuotetaan veteen (5 ml), pH 20 säädetään 2-normaalisella kloorivetyhapolla arvoon 2 ja uutetaan etikkahappoetyyliesterillä (2 x 30 ml). Yhdistetyt etikkahappoetyyliesteri-liuokset pestään kyllästetyllä nat-riumhydroksidiliuoksella (5 ml), kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin. Saadaan 1-karboksimetyyli-25 3S-(lS-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4, 5- tetrahydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia, joka on esimerkin 12 yhdiste.

Esimerkki 26: l-karboksimetyyli-7-kloori-3-(l-etoksikarbonyyli-S-fenyyli-3 0 propyyllamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-fl)bentsatsepin-2-oni (isomeeri B)

Liuokseen, jossa on l-karboksimetyyli-3-(1-etoksi-karbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (isomeeri B; 1,5 g) etikkahapossa 78 7 6074 (25 ml), johdetaan huoneen lämpötilassa, samalla hämmentäen, kloorikaasua. Muodostuu valkoinen sakka. Kloorikaasua johdetaan, kunnes reaktio loppuu. Kiinteä aine suodatetaan pois ja erotetaan komponentteihinsa nestekromatografisesti 5 (hplc), käyttäen preparatiivista C^g-käänteis-faasi-kolonnia. Liuottimena käytetään seosta metanoli/0,1% vesipitoinen am-moniumkarbonaattiliuos (1:1) . Sopivat fraktiot liuotetaan metanoli/etikkahappoetyyliesteriin (1:1; 50 ml) ja liuokseen johdetaan kloorivetykaasua. Liuos haihdutetaan, jäännös 10 suspendoidaan eetteriin (100 ml) ja suspensio suodatetaan. Saadaan l-karboksimetyyli-7-kloori-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin- 2-oni-hydrokloridia, joka sulaa 149 - 151°:ssa (isomeeri B).

Esimerkki 27: 15 l-karboksimetyyli-3S-(lS-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyli-amino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-fl)bentsatsepin-2-oni-hydro-kloridi 3(S)-amino-l-karboksimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)- 2 5 bentsatsepin-2-oni-natriumsuola (619 g) , jolla on (oi)D -arvo 20 -304,4° (c = 1,08 vedessä), bentsyylipalorypälehappo-etyyli- esteri (1960 g), vedetön etanoli (5880 ml) ja jääetikka (5880 ml) sekoitetaan ja seosta hämmennetään 20 - 25°:ssa 1,5 tuntia. Liuos, jossa on natriumsyaaniboorihydridiä (179 g) vedettömässä etyylialkoholissa (2200 ml), lisätään 25 24 tunnin kuluessa hitaasti ja tasaisesti seokseen. Kun lisäys on päättynyt, hämmennetään reaktioseosta vielä 24 tuntia. Reaktioseokseen lisätään 12-normaalista kloorivety-happoa (500 ml) ja liuotin haihdutetaan 35 - 40°:ssa paineen ollessa 3 ininHg. Jäljelle jäävä öljy lisätään seokseen, jos-30 sa on jäitä (3000 g), vettä (3000 ml) ja dietyylieetteriä (3000 ml), ja seoksen pH säädetään 10-normaalisella natrium-hydroksidi liuoksella (1735 ml) arvoon 9 - 9,5. Vesipitoinen faasi erotetaan ja eetterikerrokseen lisätään vielä 6000 ml eetteriä, jotta saadaan vielä lisää tuotetta öljynä. Eette-35 rin kanssa sekoittumaton kerros erotetaan ja yhdistetään veli 79 7 60 7 4 sipitoisen faasin kanssa. Sen jälkeen eetteriuute pestään vedellä (2 x 1000 ml), pesunesteet yhdistetään edellä saadun vesi/öljy-osan kanssa ja seoksen pH säädetään 12-normaa-lisella kloorivetyhapolla (550 - 650 ml) arvoon 4,25 - 4,35. 5 Seos uutetaan etikkahappoetyyliesterillä (3 x 2000 ml). Yhdistetyt etikkahappoetyyliesteri-uutteet pestään vedellä (2000 ml) ja kuivataan vedettömällä magnesiumsulfaatilla (500 g). Kuivausaine suodatetaan pois ja liuotin haihdutetaan huolellisesti 40°:ssa ja 3 mm:n Hg-paineessa. Saatu 10 öljy liuotetaan etikkahappoetyyliesteriin (4500 ml) ja siihen lisätään 28% eetteripitoista kloorivetyä (309 g), samalla voimakkaasti hämmentäen. Seokseen lisätään dietyyli-eetteriä (1500 ml), jonka jälkeen sitä hämmennetään tunti. Kiinteä aine erotetaan ja pestään etikkahappoetyyliesteril-15 lä (2 x 500 ml) ja dietyylieetterillä (3 x 1000 ml). Kuivataan 50°:ssa ja 3 mmHg:n paineessa, jolloin saadaan raaka-tuote, joka muodostuu noin 65%:sesti toivotusta 1-karboksi-metyyli-3S-(lS-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)- 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onista, joka on 20 identtinen esimerkin 12 tuotteen kanssa. Tämä vahvistetaan hplc:llä, käyttäen preparatiivista C^g-käänteis-faasi-kolon-nia. Liuottimena käytetään metanoli/vesi/etikkahappo-seosta (75:25:0,02).

Edellä saatu raakatuote suspendoidaan dikloorimetaa-25 niin (26900 ml) ja liuokseen johdetaan kloorivetykaasua tasaisena virtana. 40 minuutin kuluttua saadaan liuos. Tällöin kaasun johtaminen lopetetaan. Liuoksesta poistetaan jäljellä oleva liukenematon aine suodattamalla ja lisätään dietyylieetteriä (10 750 ml).

30 Suspensiota hämmennetään yön yli huoneen lämpötilassa ja kiinteä aine suodatetaan. Tämä pestään dikloorimetaanil-la (4 x 500 ml) ja dietyylieetterillä (3 x 1000 ml). Kuivataan, jonka jälkeen saadaan puhdasta tuotetta hydrokloridi-suolana, sul.p. 175 - 178°.

35 Edellä saatuun hydrokloridisuolaan (1880 g) lisätään dikloorimetaania (18 000 ml). Suspensio käsitellään kloori- so 76074 vetykaasulla, liuoksen saamiseksi. Tähän lisätään dietyyli-eetteriä (7200 ml) . Saatua suspensiota hämmennetään 3 tuntia ja suodatetaan. Kiinteä aine pestään dikloorimetaanil-la (2 x 1000 ml) ja dietyylieetterillä (2 x 1000 ml) ja kui-5 vataan. Saadaan tuote, joka sulaa 183 - 185°:ssa. (Hplc osoittaa, että tuote on 96%:sta).

Edellä saatuun suolaan (1280 g) lisätään kloroformia (4000 ml) ja seosta keitetään 10 minuuttia palautusjäähdyttäen. Kuumentaminen lopetetaan, seosta hämmennetään 4 tun-10 tia ja suodatetaan. Kiinteä aine pestään kloroformilla (2 x 200 ml) ja dietyylieetterillä (3 x 500 ml), kuivataan ja seulotaan. Saadaan l-karboksimetyyli-3S-(lS-etoksikarbo-nyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bents-atsepin-2-oni-hydrokloridia, joka sulaa 184 - 186°:ssa.

15 (a)^ = “139,26° (c = 0,92 absoluuttisessa etanolissa).

Tuote on identtinen esimerkin 12 hydrokloridisuolan kanssa.

Esimerkki 28: 3-(l-bentsyylioksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-1-karboksimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-fl)bentsatsepin-2-oni-20 hydrokloridi (isomeeri B)

Liuokseen, jossa on 3-(l-bentsyylioksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-1-t-butyylioksikarbonyylimetyyli- 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (4,0 g; katso esimerkki 7) etikkahappoetyyliesterissä (100 ml), johdetaan 25 0°:ssa kloorivetykaasua 20 minuutin ajan. Reaktioseos haihdutetaan alennetussa paineessa ja saatu kiinteä aine hierretään eetterin (50 ml) kanssa. Kiinteä aine suodatetaan, pestään eetterillä (15 ml) ja etikkahappoetyyliesterlllä (15 ml) ja sen jälkeen keitetään etikkahappoetyyliesterin 30 (50 ml) kanssa. Tuote kiteytetään uudelleen metanoll/etik- kahappoetyyliesteristä. Saadaan otsikossa mainittua yhdistettä, joka sulaa 197 - 199°:ssa. (Isomeeri B).

Lähtöaine valmistetaan seuraavalla tavalla:

Liuokseen, jossa on 3-(l-bentsyylioksikarbonyyli-3-35 fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin- 2-onia (3,0 g) ja bromietikkahappo-tert,-butyyliesteriä

II

81 7 607 4 (2,2 g) tetrahydrofuraanissa (100 ml), lisätään kuivassa typpiatm°sfäärissä huoneen lämpötilassa, samalla hämmentäen, kalium-tert,-butoksidia (1,2 g). Reaktioseosta hämmennetään 20 tuntia huoneen lämpötilassa, jonka jälkeen se kaa-5 detaan veteen (250 ml) ja uutetaan dikloorimetaanilla (2 x 150 ml). Yhdistetyt uutteet pestään vedellä (100 ml) ja kuivataan magnesiumsulfaatilla. Liuotin haihdutetaan, jonka jälkeen saadaan 3-(l-bentsyylioksikarbonyyli-3-fenyyli-propyyliamino)-l-t-butyylioksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-10 tetrahydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia.

Esimerkki 29: l-etoksikarbonyylimetyyli-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyyli-propyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-fl)bentsatsepin-2-oni Liuokseen, jossa on natriummetoksidia metanolissa 15 (valmistetaan natriumista (0,25 g) ja metanolista (50 ml)), lisätään typpiatmosfäärissä, samalla hämmentäen, liuos, jossa on 2-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-4-(o-(etoksikarbonyylimetyyliamino)-fenyyli)-voihappo-etyylies-teriä (5,6 g) metanolissa (100 ml). Reaktioseosta keitetään 20 65 tuntia palautusjäähdyttäen ja sen jälkeen haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös jaetaan veteen (50 ml) ja dikloorimetaaniin (200 ml). Vesipitoinen liuos uutetaan dikloorimetaanilla (200 ml). Yhdistetyt, orgaaniset liuokset pestään vedellä (50 ml) ja kuivataan kaliumkarbonaatilla. 25 Liuotin haihdutetaan, jonka jälkeen saadaan 1-etoksikarbonyy-limetyyli-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)- 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onin isomeerien A ja B seos, joka erotetaan kromatografisesti piihappogeelil-lä ja esimerkin 10 mukaisesti muutetaan yksittäisiksi male-30 aateiksi.

Lähtöaine valmistetaan seuraavalla tavalla:

Liuokseen, jossa on 2-amino-4-(o-nitrofenyyli)-voihap-po-etyyliesteriä (17,4 g) 50% vesipitoisessa dioksaanissa (130 ml), lisätään trietyyliamiinia (10,5 g) ja 2-(tert.-35 butyylioksikarbonyylioksi-imino)-2-fenyyliasetoksinitriiliä 82 7 6 0 7 4 (18,7 g). Reaktioseosta hämmennetään 4 tuntia huoneen lämpötilassa ja sen jälkeen se laimennetaan vedellä (300 ml). Seos uutetaan eetterillä (2 x 150 ml), vesipitoinen faasi hapotetaan jääkylmällä, 2-normaalisella kloorivetyhapolla 5 ja uutetaan etikkahappoetyyliesterillä (2 x 250 ml). Etik-kahappoetyyliesteri-kerrokset yhdistetään, pestään vedellä (150 ml) ja kuivataan natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 2-t-butyylioksikarbonyy-liamino-4-(o-nitrofenyyli)-voihappo-etyyliesteriä, jota käy-10 tetään puhdistamattomana edelleen.

Liuosta, jossa on 2-t-butyylioksikarbonyyliamino-4-(o-nitrofenyyli)-voihappo-etyyliesteriä (13,0 g) etanolissa (300 ml), hydrataan huoneen lämpötilassa ja ilmakehän paineessa, käyttäen 10% palladium-hiilellä-katalysaattoria (lg), 15 kunnes vedyn kulutus loppuu. Katalysaattori suodatetaan pois ja liuotin haihdutetaan. Saadaan 2-t-butyylioksikarbo-nyyliamino-4-(o-aminofenyyli)-voihappo-etyyliesteriä, jota käytetään puhdistamattomana seuraavassa vaiheessa.

Liuosta, jossa on 2-t-butyylioksikarbonyyliamino-4-20 (o-aminofenyyli)-voihappo-etyyliesteriä (10,0 g) ja glyoksyy-lihappo-etyyliesteriä (4,2 g) etanolissa (120 ml), hydrataan 80°:ssa ja 3 ilmakehän paineessa 72 tuntia, käyttäen 10% palladium-hiilellä-katalysaattoria. Reaktioseos jäähdytetään huoneen lämpötilaan ja katalysaattori suodatetaan pois. 25 Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös jaetaan etikkahappoetyyliesteriin (150 ml) ja veteen (75 ml). Orgaaninen faasi kuivataan natriumsulfaatilla ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 2-t-butyyli-oksikarbonyyliamino-4-(o-(etoksikarbonyylimetyyliamino)-30 fenyyli)-voihappo-etyyliesteriä, jota käytetään puhdistamat tomana seuraavassa vaiheessa.

Liuokseen, jossa on 2-t-butyylioksikarbonyyliamino-4-(o-(etoksikarbonyylimetyyliamino)-fenyyli)-voihappo-etyyliesteriä (8,5 g) etikkahappoetyyliesterissä (150 ml), johde-35 taan kloorivetykaasua 30 minuutin ajan huoneen lämpötilassa. Liuos haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös liuoteli 83 7 6 0 7 4 taan etikkahappoetyyliesteriin (100 ml). Liuos pestään vedellä (3 x 100 ml) ja kuivataan natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 2-amino-4-(o-(etoksikarbonyylimetyyliamino)-fenyyli)-voihappo-etyylieste-5 riä, jota käytetään puhdistamattomana seuraavassa vaiheessa.

Liuosta, jossa on 2-amino-4-(o-(etoksikarbonyylimetyy-liamino) -fenyyli) -voihappo-etyyliesteriä (4,7 g) ja bentsyy-lipalorypälehappo-etyyliesteriä (12,4 g) etikkahapossa (35 ml) ja metanolissa (35 ml), hämmennetään tunnin ajan 10 typpiatmosfäärissä huoneen lämpötilassa. Lisätään tipoit taan 4 tunnin kuluessa natriumsyaaniboorihydridiä (1,6 g) metanolissa (15 ml). Reaktioseosta hämmennetään 24 tuntia huoneen lämpötilassa, lisätään tipoittain kons. kloorivety-happoa (2 ml) ja hämmennetään 1 tunti huoneen lämpötilassa.

15 Seos haihdutetaan kuiviin, jäännös jaetaan veteen (75 ml) ja eetteriin (75 ml) ja pH säädetään 6-normaalisella kloori-vetyhapolla arvoon 2. Kerrokset erotetaan ja vesipitoinen faasi uutetaan eetterillä (2 x 75 ml). Eetteriuutteet hylätään ja vesipitoisen kerroksen pH säädetään 40% natrium-20 hydroksidiliuoksella arvoon 9 ja uutetaan etikkahappoetyy-liesterillä (3 x 50 ml). Uutteet kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 2—(1— etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-4-(o-(etoksikarbo-nyylimetyyliamino-fenyyli)-voihappo-etyyliesteriä, jota käy-25 tetään suoraan lopputuotteen valmistukseen.

Esimerkki 30: 2-amino-4-fenyylivoihappo-etyyliesteri käsitellään, pelkistävän alkyloinnin olosuhteissa, kuten edellä olevissa esimerkeissä on esitetty, l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-30 tetrahydro-ΙΗ-(l)bentsatsepiini-2,3-dionilla. Saadaan 1- etoksikarbonyylimetyyli-3-(l-etoksikarbonyyli-3-fenyyli-propyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia, joka on esimerkin 10 yhdiste.

Lähtöaine valmistetaan seuraavalla tavalla: 35 Liuos, jossa on 3,3-dikloori-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)- bentsatsepin-2-onia (1,0 g f 4,32 mmoolia), ja bromietikka- O* 76074 happoetyyliesteriä (0,51 ml) tetrahydrofuraanissa (30 ml), lisätään 15 minuutin kuluessa tipoittain, samalla hämmentäen, typpiatmosfäärissä liuokseen, jossa on natriumhydridiä (4,76 mmoolia) tetrahydrofuraanissa (20 ml). Seosta häm-5 mennetään edelleen 2 tuntia. Liuos hajotetaan lisäämällä kyllästettyä, vesipitoista ammoniumkloridiliuosta ja liuottimet haihdutetaan alennetussa paineessa. Jäännös uutetaan eetterillä (3 x 20 ml), yhdistetyt eetteriliuokset pestään kyllästetyllä, vesipitoisella natriumkloridiliuoksella 10 (20 ml) ja kuivataan magnesiumsulfaatilla. Liuotin haihdu tetaan alennetussa paineessa. Saadaan 3,3-dikloori-l-etok-sikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin- 2-onia. NMR (CDC13): 61,27 (t, 3H); 3,22 (m, 4H)j 4,25 (q, 2H); 4,65 (s, 2H) ja 7,3 (m, 4H) .

15 Seosta, jossa on morfoliinia (0,315 g? 3,6 mmoolia) ja 3,3-dikloori-l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetra-hydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia (0,5 g), hämmennetään typpiatmosfäärissä 110°:ssa 18 tuntia. Liuos laimennetaan kloroformilla 10 ml:aan ja jäähdytetään 0°:een. Lisätään 20 20% rikkihappoa (1 ml) ja liuosta hämmennetään 2 tuntia 0°:ssa. Liuos uutetaan kloroformilla (2 x 20 ml) ja uutteet pestään 2-normaalisella kloorivetyhapolla (2 x 10 ml) ja kyllästetyllä, vesipitoisella natriumkloridiliuoksella (5ml). Liuos kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan alenne-25 tussa paineessa. Saadaan l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepiini-2,3-dionia. NMR (CDCl^): 61,25 (t, 3H) ; 2,6 (m, 2H) * 3,6 (m, 2H) ·, 4,2 (q, 2H) ja 7,3 (m, 4H) .

Esimerkki 31; 30 2-amino-4-fenyylivoihappoetyyliesteriä käsitellään kaliumkarbonaatin läsnäollessa metyleenikloridissa 3-bromi-l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bents-atsepin-2-onilla. Saadaan l-etoksikarbonyylimetyyli-3-(1-etoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-35 1H-(l)bentsatsepin-2-onia, joka on esimerkin 10 yhdiste.

85 7 6 0 7 4 Lähtöaine valmistetaan seuraavalla tavalla:

Liuokseen, jossa on 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bents-atsepin-2-onia (2,5 g) kloroformissa (30 ml), lisätään annoksittain fosforipentakloridia (3,2 g), jolloin lämpötila 5 pidetään 0 - 5°:ssa. Kun tämä lisäys on loppunut, lisätään tipoittain 5 minuutin kuluessa ensin jodia (30 mg) ja sen jälkeen bromia (2,5 g). Seosta keitetään palautusjäähdyttä-en 4 tuntia. Kloroformiliuos haihdutetaan ja jäännös jaetaan jääveteen (30 ml) ja dikloorimetaaniin (75 ml). Orgaa-10 ninen faasi kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Raakajäännös puhdistetaan kromatografisesta piihappogeelillä, eluointi suoritetaan eetteri/ heksaanilla (7:3). Sopivien fraktioiden haihduttamisen jälkeen saadaan 3-bromi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-15 2-onia, joka sulaa 146 - 148°:ssa.

Hämmennettyyn suspensioon, jossa on kaliumhydroksidia (90 mg) ja tetrabutyyliammoniumbromidia (40 mg) tetrahydro-furaanissa (10 ml), lisätään yhdellä kertaa 3-bromi-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia (300 mg), typpiatmos-20 fäärissä 0°:ssa. Hämmentämistä jatketaan 5 minuuttia. Seokseen lisätään yhdellä kertaa bromietikkahappo-etyylieste-riä (200 mg) ja seoksen annetaan lämmetä huoneen lämpötilaan seuraavan 3 tunnin kuluessa, samalla sitä hämmentäen. Tetra-hydrofuraani haihdutetaan alennetussa paineessa ja jäännös 25 uutetaan veteen (5 ml) ja eetteriin (25 ml). Orgaaninen faasi pestään 2-normaalisella kloorivetyhapolla (5 ml), kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 3-bromi-l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-onia, sul.p. 114 - 116°.

30 3-kloori-l-etoksikarbonyyli-metyyli-2,3,4,5-tetrahyd- ro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-oni valmistetaan samalla tavoin.

Liuos, jossa on 3-kloori-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-bentsatsepin-2-onia (1,95 g) dimetyyliformamidissa (10 ml), lisätään 5°:ssa tipoittain hämmennettyyn liuokseen, jossa 35 on kalium-tert.-butoksidia (1,11 g) dimetyyliformamidissa (10 ml). Liuosta hämmennetään edelleen 15 minuuttia 5°:ssa, 86 76074 jonka jälkeen siihen lisätään tipoittain bromietikkahappo-etyyliesteriä (1,78 g) dimetyyliformamidissa (5 ml). Hämmentämistä jatketaan edelleen 30 minuuttia 5°:ssa ja sen jälkeen 3 tuntia huoneen lämpötilassa. Reaktioseos jäähdy-5 tetään 10°:een ja siihen lisätään vettä (100 ml). Liuos uutetaan kloroformilla (100 ml), kloroformiliuos pestään vedellä (2 x 10 ml) ja kuivataan natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa. Saadaan 3-kloori-l-etoksikarbonyylimetyyli-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bents-10 atsepin-2-onia; NMR (dimetyylisulfoksidi -dg): 61,2 (t, 3H); 2,65 (m, 4H); 4,15 (q, 2H); 2,6 (d, 2H) ja 7,3 (m).

Esimerkki 32: l-karboksimetyyli-3S-(lS-pivaloyylioksimetoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-fl)bentsatsepin-15 2-oni l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3S-(lS-pivaloyyliok-simetoksi-karbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetra-hydro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-oni (3 g) liuotetaan etanoliin (50 ml) ja lisätään 10% palladium-hiilellä-katalysaattoria 20 (0,3 g). Liuosta hydrataan huoneen lämpötilassa 2 tuntia 1 ilmakehän paineessa.

Reaktioseos suodatetaan ja haihdutetaan. Saadaan 1- karboksi-metyyli-3S-(lS-pivaloyylioksimetoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin- 25 2-onia.

Lähtöaine valmistetaan seuraavalla tavalla: l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3S-(lS-karboksi-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin- 2- oni (5 g; esimerkki 2) liuotetaan 2-normaaliseen kalium-30 hydroksidiliuokseen (5,15 ml) ja liuos haihdutetaan kuiviin.

Lisätään pivaliinihappo-jodimetyyliesteriä (2,3 g) ja dimetyy-liformamidia (50 ml) ja seosta hämmennetään typpiatmosfääris-sä 18 tuntia, huoneen lämpötilassa. Dimetyyliformamidi haihdutetaan pois, jäännös liuotetaan etikkahappoetyyliesteriin 35 (100 ml), pestään kyllästetyllä natriumkarbonaattiliuoksella

II

87 76074 (3 x 25 ml), vedellä (3 x 25 ml) ja kyllästetyllä natrium-kloridiliuoksella (25 ml) ja kuivataan magnesiumsulfaatilla. Haihduttamalla saadaan l-bentsyylioksikarbonyylimetyyli-3S-(lS-pivaloyylioksimetoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-5 2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-onia.

Vastaavalla tavalla valmistetaan: a) l-karboksimetyyli-3S-(lS-£-bornyylioksikarbonyyli-metoksikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahyd-ro-ΙΗ-(l)bentsatsepin-2-oni käyttäen lähtöaineena jodietik- 10 kahappo-ί,-bornyylies teriä.

b) l-karboksimetyyli-3S-(lS-p-metoksietoksimetoksi-karbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatsepin-2-oni käyttäen lähtöaineena 8-metoksietoksi-metyylikloridia.

15 c) l-karboksimetyyli-3S-(lS-(3-ftalidioksikarbonyyli)- 3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)bentsatse-pin-2-oni käyttäen lähtöaineena 3-bromiftalidia.

d) l-karboksimetyyli-3S-(IS-(3-pyridyylimetoksikarbo-nyyli)-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-(l)-20 bentsatsepin-2-oni käyttäen lähtöaineena 3-pyridyylimetyyli-kloridia.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden kardiovaskulaarinen farmakologia :

Yhdisteiden vaikutukset testataan menetelmillä, joissa käytetään hyväksi angiotensiinia muuttavan entsyymin (angiotensin converting enzyme = ACE) estymistä. Biokemiallisessa arvioinnissa, jossa määritetään in vitro ACE-estyminen (äCE inhibition = ACEl), määritetään yhdisteen aktiviteetti kaniinin keuhkokudoksessa.

In vivo testausmenetelmässä aiheutetaan koe-eläimessä ensin verenpaineen kohoaminen, annostamalla angiotensiiniä I (AI). Sen jälkeen määritetään yksittäisten yhdisteiden estovaikutus tähän verenpaineen kohoamiseen.

88 7 60 7 4 I. Biokemiallinen testimenetelmä Käytetään kaniinin keuhkokudos-preparaattia ((Das and Saffer, J. Biol. Chem. 250: 6762 (1975) ACE:n määrittämiseksi menetelmällä, jonka ovat esittäneet Cheung ja Cushman (Cheung and Cushman, Biochim. Biophys. Acta 293, 451 (1973)). Tässä menetelmässä määritetään spektrofotometrisesti histi-dyyli-leusiinin se määrä, joka vapautuu synteettisestä substraatista 30 minuutin inkuboinnin kuluessa 37°:ssa. Sen jälkeen lasketaan graafisesti ACE-estymisen IC5Q-arvot. IC^g-arvo on se testattavan yhdisteen konsentraatio (mooleissa) , joka alentaa testattavan yhdisteen poissaollessa muodostunutta histidyyli-leusiini-määrää 50%:11a.

II. Menetelmä, jossa testattavan yhdisteen suonensisäinen annostus estää angiotensiinin I (AI) aiheuttaman verenpaineen kohoamisen (% AI-estyminen) Tässä kokeessa viedään, kuten edellä on esitetty, katetri sekä rotan reisivaltimoon että pohjelaskimoon. Val-timopaine rekisteröidään valtimokatetrista, kun taas angio-tensiini I (AI) ja kulloinkin testattava yhdiste injektoidaan laskimokatetrin kautta. Angiotensiinin I aiheuttaman verenpaineen kohoamisen estyminen on esitetty prosentuaalisena vähenemisenä ennen käsittelyä saaduista verenpaineen kohoamisen kontrolliarvoista ja taulukossa on esitetty estyminen keskiarvona 30 minuutin sisällä testattavan aineen annostuksesta.

Il 89 7 60 7 4

Tulokset;

Angiotensiinin I (AI) aiheuttaman paineen kohoamisen estyminen_

Esimerkin In vitro i.v. annos % AI

yhdiste ACEI (mg/kg) estyminen IC50 (M) 1 6 x 10~7 10 100 1,0 100 0,1 50 5 2 x 10"7 0,1 37 9 5 x 10"9 0,3 93 0,1 80 0,03 40 10 1 x 10-5 1,0 80 maleaat- tisuola 12 4 x 10~7 1,0 100 HCl-suola 0,3 95 0,1 82 0,06 74 0,03 29 19 2 x 10~9 0,1 93 0,06 84 0,03 70 0,02 69 0,01 28 0,007 14 28 1 x 10"7 0,1 92 isomeeri B, HCl-suola

Claims (5)

90 7 60 7 4

1. Menetelmä antihypertensiivisten 3-amino-llJbentsatse-pin-2-oni-l-alkaanihappojen, joiden yleinen kaava I on r4 X 4\ .R Il I \ ^K5 8 „ 3>~V (I) «3 £1 /Bi jossa Rr tarkoittaa tähdettä -CH X«o ja Rg tarkoittaa tähdettä -CH ^Ro joissa R0 RÄ:ssa tarkoittaa ryhmää CORg ja RB:ssä ryhmää COR7, joissa Rg ja Ry tarkoittavat toisistaan riippumatta hydroksia, alempialkoksia tai fenyylialempialkoksia; ja Ri tarkoittaa vetyä tai fenyylialempialkyyliä; R2 on vety tai alempialkyyli; R3 ja R4 tarkoittavat toisistaan riippumatta vetyä, alempialkoksia tai halogeenia; R5 on vety ja X tarkoittaa kahta vetyatomia tai samanaikaisesti vetyatomin kanssa hydroksiryhmää; ja niiden stereoisomeerien ja suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että a) yhdisteessä, jonka kaava II on II 91 76074 R4 X «, ίΕ» jossa X, Rg, R3, R4 ja Rg tarkoittavat samaa kuin edellä, liitetään RA alkyleimalla yhdisteellä, jonka kaava IIIA on Ra-Z (IIIA) jossa Z tarkoittaa reaktiivista esteröityä hydroksyyliryhmää ja Ra tarkoittaa samaa kuin edellä, tai alkyloimalla yhdisteellä, jonka kaava IV on RX - CO - Rq (IV) jossa Rx ja R0 tarkoittavat samaa kuin edellä, pelkistysaineen läsnäollessa, samalla väliaikaisesti suojaten mahdolliset primääriset ja sekundääriset aminoryhmät ja/tai mahdollisesti hydroksyyli- ja/tai oksoryhmät, jotka voivat olla missä tahansa tähteissä X, RÄ, RB, r3, r4 ja tai b) yhdiste, jonka kaava V on ftx. - R3 0 jossa X, R3, R4 ja Rg tarkoittavat samaa kuin edellä ja RÄ' tarkoittaa vetyä tai samaa kuin edellä RA, alkyloidaan yhdisteellä, jonka kaava IIIB on 92 76074 Rb-Z (IIIB) jossa Z tarkoittaa reaktiivista esteröityä hydroksyyliryhmää ja Rg tarkoittaa samaa kuin edellä, jolloin väliaikaisesti suojataan mahdolliset primääriset ja sekundääriset aminoryh-mät ja/tai mahdollisesti hydroksyyli- ja/tai oksoryhmät, jotka voivat olla missä tahansa tähteissä X, RA, Rg, R3, R4 ja R5, tai c) yhdiste, jonka kaava VI on R3 jossa Y tarkoittaa oksoa tai reaktiivista esteröityä hydrok-syyliryhmää Z yhdessä vetyatomin kanssa ja jossa X, Rg, R3 ja R4 tarkoittavat samaa kuin edellä, kondensoidaan amiinin kanssa, jonka kaava VII on Ra-NH-R5 (VII) jossa Ra ja R5 tarkoittavat samaa kuin edellä, jolloin kun Y tarkoittaa oksoa, kondensaatio suoritetaan pelkistysaineen läsnäollessa, tai d) yhdisteessä jonka kaava VIII on R4 X B V . Il d ^4 -\ |5 / 1 [I I Vn-ch (Vili) J 1 r » R, I O o /c\ K9 R " 2 o jossa X ja R1-R5 tarkoittavat samaa kuin edellä, toinen sym- II 93 7 6074 boleista R0* ja R0" on syaani ja toinen on syaani tai tarkoittaa samaa kuin Rc edellä, syaaniryhmäit) saatetaan alttiiksi solvolyysille, tai e) yhdiste, jonka kaava IX on fccS-O /v^NH I ^ R. r I COOH A 3 *b jossa X, R&, Rb, R3, R4 ja R5 tarkoittavat samaa kuin edellä, tai sen esteri syklisoidaan, tai f) yhdistettä, joka rakenteellisesti on identtinen edellä annetun kaavan I mukaisen yhdisteen kanssa, lukuun ottamatta, että yhdiste sisältää ylimääräisen kaksoissidoksen C-3-asemassa tai typpiatomin ja sen viereisen ryhmässä RA olevan hiiliatomin välillä, käsitellään pelkistysaineella, tämän kaksoissidoksen tyydyttämiseksi, ja saatu, edellä määritellyn kaavan I mukainen yhdiste muutetaan haluttaessa toiseksi, edellä annettujen määritelmien puitteissa olevan kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi ja/tai saatu, edellä määritellyn kaavan I mukainen yhdiste, jolla on suolan muodostavia ominaisuuksia, muutetaan haluttaessa suolakseen tai vapaa yhdiste vapautetaan tällaisesta suolasta ja/tai optinen isomeeri, jolla on spesifinen konfiguraatio ainakin yhdessä kiraalisuuskeskuksessa, vapautetaan haluttaessa saadun, kaavan I mukaisen yhdisteen stereoisomeeristen muotojen seoksesta.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että valmistetaan l-karboksimetyyli-3-(1-etoksi-karbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-[1]-bentsatsepin-2-oni, sen stereoisomeeri tai suola.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet- 76074 94 t u siitä, että valmistetaan patenttivaatimuksessa 2 mainitun yhdisteen korkeammassa lämpötilassa sulava raseeminen yhdiste, sen enantiomeeri tai suola.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että valmistetaan patenttivaatimuksessa 2 mainitun yhdisteen alhaisemmassa lämpötilassa sulava raseeminen yhdiste, sen enantiomeeri tai suola.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että valmistetaan l-karboksimetyyli-3S-(lS-etok-sikarbonyyli-3-fenyylipropyyliamino)-2,3,4,5-tetrahydro-lH-[1Jbentsatsepin-2-oni tai sen suola. tl 76074 95 Patentkrav;