FI66184B - Foerening foer icke-terapeutiskt anvaendning vilken foerbaettrar tillvaexthastigheten och utnyttjandet av foedan hos idisslare - Google Patents
Foerening foer icke-terapeutiskt anvaendning vilken foerbaettrar tillvaexthastigheten och utnyttjandet av foedan hos idisslare Download PDFInfo
- Publication number
- FI66184B FI66184B FI792420A FI792420A FI66184B FI 66184 B FI66184 B FI 66184B FI 792420 A FI792420 A FI 792420A FI 792420 A FI792420 A FI 792420A FI 66184 B FI66184 B FI 66184B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- och
- utnyttjandet
- tillvaexthastigheten
- idisslare
- foerbaettrar
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/06—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using actinomycetales
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/195—Antibiotics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P60/00—Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
- Y02P60/20—Reduction of greenhouse gas [GHG] emissions in agriculture, e.g. CO2
- Y02P60/22—Methane [CH4], e.g. from rice paddies
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Feed For Specific Animals (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
---L'-Ί .. KUULUTUSjULKAISU CCAOA
jjgTs ® ^ utlAggningsskiiipt 66184 c FatenUi ayt'nnotty 10 09 1934 f Patent ccddelat ^ ^ ' (51) C 07 D 407/02, A 23 K 1/17, C 12 P 1/06 SUOH I—FINLAND C») 792420 (22) AwBIwl^ifcK 03.08.79 (F) (23) 03.08.79 (41) T** HUmU-MMt «MU 04.02.80 huuti» )» ItklltlfllaMtW (4A ΝΜνΜΜρμμν H hMUailaiM· pnt_ ratanti och ri|latant)mlM *—*»«k*i«e»«UMNtStarit 31.05.84 (32)(33)(31) P)rr<a«qr wotki 03.08.78
Englanti-England(GB) 32172/78 (71) Imperial Chemical Industries Limited, Imperial Chemical House,
Millbank, London SW1P 3JF, Englanti-England(GB) (72) David Huw Davies, Macclesfield, Cheshire, Geoffrey Lightfoot Floyd Norris, Sandbach, Cheshire, Englanti-England(GB) (74) Oy Kolster Ab (54) Märehtijöiden kasvunopeutta ja ravinnon hyväksikäyttöä parantava ei-terapeuttisesti käytettävä yhdiste - Förening för icke-tera-peutiskt användning vilken förbättrar tilIväxthastigheten och utnyttjandet av födan hos idisslare
Keksintö koskee märehtijöiden kasvunopeutta ja ravinnon hyväksikäyttöä parantavaa, ei-terapeuttisesti käytettävää uutta yhdistettä, jonka kaava on
Me
Me, M\_^ \ MV»H
I Hy—/ ?N· o ^ \ H I JX \ H u H OMe
\ /fi H
ΓΥΛ /ho/
> \" H
Me U H
1 X
/X / Me e x0 O A© 2 66184 jossa A on vety tai alkalimetalli. Keksintö koskee myös märehtijöiden kasvunopeutta ja ravinnon hyväksikäyttöä parantavaa, ei-tera-peuttisesti käytettävää koostumusta, joka sisältää 5 ppm-50 paino-% kaavan I mukaista yhdistettä sekoitettuna kiinteään tai nestemäiseen, syötäväksi kelpaavaan, myrkyttömään laimentimeen tai kantaja-aineeseen .
Keksinnön mukaiset yhdisteet ovat aerobisesta Streptomyces longisporoflavus-viljelmästä saatavia metaboliitteja. Ne vähentävät pötsikäymisessä syntyvän metaanin suhteellista määrää ja lisäävät pötsinesteen sisältämän propionihapon suhteellista määrää nautaeläimillä ja niillä on siten märehtijöiden kasvua edistäviä ominaisuuksia. On tunnettua että pötsinesteen sisältämän propionihapon suhteellista määrää lisäävät kemialliset yhdisteet parantavat kasvunopeutta syötettäessä niitä nautakarjalle tai lampaille.
Kaavan I mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa viljelemällä Streptomyces longisporoflavus-kantaa vesipitoisessa viljelyväli-aineessa, jossa on assimiloituvan hiilen lähde, ja ravistelemalla aerobisissa olosuhteissa lämpötilassa 22-32°C. Saatu käymisseos uutetaan veteen sekoittumattomalla orgaanisella liuottimena sinänsä tunnetulla tavalla ja liuotin haihdutetaan, jolloin saadaan kaavan I mukainen natriumsuola (M.139,603), joka voidaan muuttaa "vapaaksi hapoksi" ja "vapaa happo" voidaan muuttaa muiksi alkalimetallisuo-loiksi sinänsä tunnetulla tavalla.
Sopiva M.139,603:a tuottava S. longisporoflavus-kanta on NCIB 11462, jota on saatavissa rajoituksetta laitoksesta National Collection of Industrial Bacteria, Ministry of Agriculture, Fisheries and Food, Torry Reseach Station, 135 Abbey Road, Aberdeen AB9 8DG, Scotland, ja johon pätee seuraavanlainen kuvaus: /Käytetty väliaine on valmistettu 'International Streptomyces Project'in (ISP) ohjeiden mukaisesti ja on sen mukainen kuin Shirling, E.G. & Gottlieb, D ovat kuvanneet (International Journal of Systematic Bacteriology, 16 , (3), 313-340, 1966)/7.
Inkubointiolosuhteet - noin 25UC
- päivänvalo ISPI Tryptonihiiva (mutta agarilla lisättynä).
5 vuorokautta - Ohut, hieman kostea, samettimainen, vaalean kellanruskea - Kääntöpuoli värittymätön 3 661 84 13 vuorokautta - Ohut samettimainen - hieman rakeinen, vaalean kellanruskea - Kääntöpuoli värittymätön ISP2 Hiivauute/mallasuute-agar.
5 vuorokautta - Ohut, samettimainen, vaaleanharmaa - Kääntöpuoli - hyvin heikosti kellertävän ruskea 13 vuorokautta - Kohtalainen, kohonnut ja poimuttunut, samettimainen, vaaleankeltainen/ruskea/ harmaa - Kääntöpuoli - kellanruskea ISPR3 Kaurajauhoagar.
5 vuorokautta - Hajanainen tai ohut, samettimainen, vaaleankeltainen/harmaa - Kääntöpuoli ei näkyvissä 13 vuorokautta - Ohut, hieman kohonnut, samettimainen, vaaleanharmaa - Kääntöpuoli ei näkyvissä.
ISP4 Epäorgaanisia suoloja - lähtöagar 5 vuorokautta - Ohut, vaalean kellanruskea, hieman rakeinen - Kääntöpuoli värittymätön 13 vuorokautta - Ohut, hieman kostea, kellanruskea - Kääntöpuoli lähes värittymätön ISP5 Glyseroli - asparagiiniagar 5 vuorokautta - Ohut, hieman rakeinen, vaalean kellanruskea - Kääntöpuoli - värittymätön 13 vuorokautta - Ohut, samettimainen, vaaleanharmaa - Kääntöpuoli - värittymätön ISP7 Tyrosiiniagar.
5 vuorokautta - Hajanainen tai ohut, hieman rakeinen, samettimainen, vaalean kellanruskea/harmaa.
- Kääntöpuoli värittymätön 13 vuorokautta - Ohut, samettimainen, hieman kohonnut, kellanruskea - Kääntöpuoli - kellaruskea/harmaa ISP7:llä viljelmä yleensä vanhetessaan muuttuu vaalean punertavaksi kellaruskeaksi, mutta voimakkaamman itiönmuodos-tuksen yhteydessä näkyy tummempia alueita.
4 66184 ISI9 - Hiilen hyödyntämisagar Arvio 15 vuorokautta - Ei hiiltä - Hyvin hajanainen, upoksissa - Glukoosi - Ohut/kohtalainen samettimainen, kellanruskea + - Arabinoosi - Hajanainen - Fruktoosi - Ohut, samettimainen kellanruskea + - Inositoli - Hyvin hajanainen - Mannitoli - Ohut, samettimainen - Ramnoosi - Hyvin hajanainen - - Ksyloosi - Hajanainen -
Yleistä
Melaniineja ei synny.
Kääntöpuolelle ei muodostu pigmenttejä.
Liukenevia pigmenttejä ei synny.
Itiöt ovat avoimissa ja tiukoissa kierukoissa usein suorempien kannattavien "hyyfien" tai mahdollisesti itiöketjujen pääakselista erottamina. Itiöitä itseään on vaikea nähdä tavallisella mikroskoopilla, sillä ne ovat tiiviisti toisiinsa kiinnittyneitä. Itiön seinämät ovat sileitä (elektronimikroskooppi, 4 %:n uranyyliasetaatti-valmisteella).
Tätä S. longisporoflavus-kantaa on myös rajoituksetta saatavissa laitoksesta Centraalbureau voor Schimmelcultures, PO Box 273, Oosterstraat 1,3740 AG Baarn, Netherlands, viitenumerolla CBS 312,79.
Natriumsuolaa M.139,603 vastaava "vapaa happo” voidaan saada tekemällä M.139,603:n liuos happamaksi ja uuttamalla tämä hapan liuos veteen sekoittumattomalla orgaanisella liuottimena; ja muut alkali-metallisuolat voidaan saada käsittelemällä "vapaan hapon" liuosta sopivalla alkalimetallihydroksidilla, esim. lititumhydroksidilla, kaliumhydroksidilla, cesiumhydroksidilla tai rubidiumhydroksidilla. Jos käytetään natriumhydroksidia, M.139,603 muodostuu uudestaan, mikä osoittaa, ettei näihin reaktioihin liity mitään rakenteellista muutosta.
Kuten edellä todettiin, yhdistellä on pötsinesteessä olevan propionihapon suhteellista määrää lisäävä vaikutus ja ne lisäävät 5 66184 propionihapon suhteellista määrää nimenomaan metaanin ja/tai etik-kahapon kustannuksella. Tällä tiedetään olevan hyödyllinen vaikutus märehtijöiden ravinnossa, koska propionihappo on etikkahappoa huomattavasti tehokkaampi glukoosin prekursori, josta eläin saa energiaa ja jota se käyttää kasvamiseen; kun taas se osa eläimen saamasta ravinnosta, joka muuttuu metaaniksi, menee eläimeltä hukkaan poistumalla metaanina röyhtäisyissä.
Täten sillä aineenvaihdunnan muutoksella, jonka keksinnön mukaiset yhdisteet aiheuttavat pötsissä, on mitä hyödyllisin vaikutus ja se parantaa märehtijöiden kasvunopeutta ja ravinnon hyväksikäyttöä .
On suositeltavaa antaa keksinnön mukaista yhdistettä eläimille normaalin ravinnon lisänä, toisin sanoen sekoitettuna tavalliseen kiinteään rehuaineeseen, rehuharkoissa tai nuolukivissä, liuotettuna juomaveteen tai nuorille eläimille, kuten karitsoille ja vasikoille annettaessa täysmaitoon tai kuorittuun maitoon liuotettuna. Keksinnön mukaista yhdistettä lisätään rehuun, rehuhark-koihin, nuolukiviin, juomaveteen, täysmaitoon tai kuorittuun maitoon sellainen määrä, että eläin saa keksinnön mukaista yhdistettä 0,01-30 mg/kg,edullisesti 0,01-10 mg/kg päivässä.
Keksinnön mukaista yhdistettä voidaan vaihtoehtoisesti an- y / taa eläimille hitaasti sulavina rakeina tai pillereinä, joista y' eläin saa saman määrän keksinnön mukaisia yhdisteitä päivässä. y'
Eläimille voidaan antaa keksinnön mukaista yhdistettä käytännöllisesti katsoen koko niiden kasvukauden ajan tai vain osalla kasvukautta, esim. varhaisessa vaiheessa ja/tai teurastusta juuri edeltävänä aikana. Saavutettu kasvuvauhdin lisäys mahdollistaa lihaksi kasvatettavien eläinten saattamisen myynti- tai teurastus-painoisiksi normaalia lyhyemmässä ajassa tai mahdollistaa painavampien eläinten tuottamisen normaalin kasvuajän puitteissa. Saavutettu parempi ravinnon hyväksikäyttö saa aikaan sen, että käsitellyt eläimet saavuttavat minkä tahansa toivotun painon vähemmällä ravinnon kulutuksella kuin saman painoisiksi kasvatetut käsittelemättömät eläimet. Parhaan mahdollisen kasvun edistävän vaikutuksen aikaan saavilla pitoisuustasoilla ei voitu havaita mitään keksinnön mukaisista yhdisteistä johtuvaa toksista vaikutusta.
Sopiva keksinnön mukaisessa koostumuksessa käytettävä nestemäinen laimennus- tai kantaja-aine on esim. juomavesi, täysmaito tai kuorittu maito.
6 66184
Sopiva kiinteä syötäväksi kelpaava, myrkytön laimennus- tai kantaja-aine voi esimerkiksi olla tavanomainen ravintoaineiden suhteen tasapinoitettu märehtijöiden rehuaine, esim. tyypillinen nautakarjan tai lampaiden rehu, joka koostuu viljatuotteista kuten ohrajauhosta, maissijauhosta tai rehuvehnästä, pähkinä- ja siemen-tuotteista kuten kuoritusta ja jauhetusta pähkinästä tai puuvil-lansiemenistä tai karistetuista puuvillansiemenistä valmistetusta kakusta sekä näiden ohella pienistä määristä sulka-, merilevä-, ja karkeaa ja hienoa luujauhoa, liitua, suolaa, ureaa, melassia, vitamiineja ja hivenaineita; tai se voi olla inertti kiinteä laimennus-tai kantaja-aine, jolla ei ole energia-arvoa, esim. kaoliini, talkki, kalsiumkarbonaatti, kuohusavi, attapulgussavi, jauhetut osterin-kuoret tai jauhettu kalkkikivi; tai sitten se voi olla tärkkelys tai laktoosi.
Keksinnön mukainen koostumus voi olla suoraan eläimelle syötettävän täydennetyn rehuaineen muodossa, jolloin se sisältää 5-3000 ppm keksinnön mukaista yhdistettä sekoitettuna tavanomaiseen rehuaineeseen; tai se voi olla ennalta sekoitettuna tiivisteenä, joka laimennetaan tavallisella märehtijöiden rehulla sellaisenaan syötettäväksi kelpaavan täydennetyn rehuaineen saamiseksi, ja mainitun kaltainen ennalta sekoitettu tiiviste sisältää 0,3-50 % pai-no/paino keksinnön mukaista yhdistettä sekoitettuna joko tavanomaiseen ravintoaineiden suhteen tasapainoitettuun rehuaineeseen, inerttiin kiinteään laimennusaineeseen, jolla ei ole energia-arvoa, esim. jauhettuun kalkkikiveen, tai sitten tärkkelykseen tai laktoosiin.
Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä.
Esimerkki 1 500 ml:n erlenmeyrerpullossa kasvatettiin Streptomyces longisporoflavus-kantaa NCIB 11426 kasvatettiin tryptoni-hiiva-agarissa, joka sisälsi:
Tryptonia - "Oxoid" L42 (tavaramerkki) 0,5 % paino/tilav.
hiivauutetta - "Oxoid" L21 (tavaramerkki) 0,3 % paino/tilav.
ja jota oli ennalta steriloitu autoklaavissa 20 minuutin ajan normaalipaineessa. Väliaineen pH oli noin 7,0. Pulloa ravisteltiin 25°C:ssa 120 tunnin ajan pyörivällä ravistimella.
.7 66184
Pullon sisällöllä ympättiin sitten vielä 10 samanlaista pulloa, joista kukin sisälsi 200 ml seuraavan sisältöistä väliainetta : glukoosisiirappia 3,0 % paino/tilav.
kalsiumkarbonaattia 0,25 % paino/tilav.
natriumkloridia 0,5 % paino/tilav.
magnesiumsulfaatin heptahydraattia 0,05 % paino/tilav.
hivenainekonsentraattia 0,1 % tilav./tilav.
bakteriologista peptonia ("Oxoid" L37 - tavaramerkki) 0,1 % paino/tilav.
Lihauutejauhetta ("Oxoid" L29,
Lab Lemco" -tavaramerkki) 0,5 % paino/tilav.
deionisoitua vettä täytetään 100 ml:ksi pH säädettiin arvoon 7,2 ja väliainetta steriloitiin ennalta autoklaavissa 120°C:ssa 20 minuutin ajan. Ympättyjä pulloja ravisteltiin 25°C:ssa 120 tunnin ajan pyörivällä ravistimella, minkä jälkeen pullojen sisällöt yhdistettiin ja saadun seoksen pH säädettiin arvoon 3 lisäämällä varovaisesti 0,1N kloorivetyhappoa. Väliaine uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 600 ml), uutteet yhdistettiin ja kuivattiin natriumsulfaatilla ja liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin öljymäinen jäännös (290 mg).
Etyyliasetaattiuute puhdistettiin preparatiivisella levy-kromatografiällä käyttäen kahta piidioksidilevyä (Merck'in "Kieselgel" 60f-254 - tavaramerkki, 20 x 20 cm, paksuus 2 mm) ja etyyliasetaattia eluenttina. Kohdassa Rp = 0,39 (noin) oleva vyö kaavittiin levyiltä ja uutettiin etyyliasetaatilla ja haihdutettiin liuotin, jolloin saatiin tahmea kumimainen aine (21 mg), joka osoitti in vitro antibakteerista vaikutusta S. aureus-lajia vastaan. Tämä aktiivinen fraktio puhdistettiin edelleen preparatiivisella kromato-grafiällä käyttäen yhtä silikageelilevyä (MerckVin "Kieselgel" 60F-254 20 x 20 cm, paksuus 0,25 mm) ja eluenttina dietyylieetterin, metanolin ja muurahaishapon seosta, joka sisälsi dietyylieetteriä, metanolia ja muurahaishappoa tilavuussuhteessa 95:4:1 vastaavasti. Kohdassa Rp =0,55 (noin) oleva vyö kaavittiin levyltä ja uutettiin etyyliasetaatilla, jolloin liuottimen haihduttamisen jälkeen saatiin tahmea kumimainen aine (9 mg). Kumimainen aine muutettiin natriumsuolaksi M.139,603 ravistelemalla sitä kloroformiin liuotet- 8 66184 tuna natriumhydroksidiliuoksen kanssa (0,1M). Kloroformikerros erotettiin ja kuivattiin natriumsulfaatilla ja liuotin haihdutettiin, jolloin saatiin M.139,603 valkeana kiinteänä aineena (8 rag), sp. 129-132°C, IR-sepktri (kuvio 1) osoitti seuraavat huiput: 3300, 1725, 1645, 1565 ja 915 cm Alkuaineanalyysi:
Saatu, C = 67,5% H = 8,8 %; laskettuna kaavassa C = 67,3%, H= 8,5 %. Massaspektri: M+ = 624,361, laskettuna C35H5308Na = 624,364. Rp = 0,39 (ohutlevykromatografia Merck'in 60F-254-, 0,25 mm:n levyillä etyyliasetaatilla kehitettynä, tulee näkyviin ruskeana pisteenä 3N rikkihapolla ruiskuttamisen ja 100°C:seen kuumentamisen jälkeen). Protonin magneettisen resonanssin spektri käy ilmi kuviosta 2.
Esimerkki 2
Streptomyces longisporoflavus NCIB 11426:tta kasvatettiin kaltevina viljelminä ISP-7-agarilla (45 ml) 7 vuorokauden ajan 30°C:ssa. Kolme mainittua kaltevaa viljelmää kaavittiin kukin erikseen kolmeen 100 ml steriiliä vettä sisältävään pulloon ja näin saadulla suspensiolla ympättiin kolme 2 litran pulloa, jotka kukin sisälsivät seuraavan sisältöistä väliainetta: glyserolia 3,0 % paino/tilav.
bakteriologista peptonia ("Oxoid" L-37-tavaramerkki) 2,0 % paino/tilav.
KHnPO, 0,024 % paino/tilav.
MgS04.7H20 0,02 % paino/tilav.
hivenainekonsentraattia 0,1 % paino/tilav.
liitua 0,1 % paino/tilav.
deionisoitua vettä täytettiin 1 litraksi, jota oli ennalta steriloitu autoklaavissa normaalipaineella 1/2 tunnin ajan pH:n ollessa noin 6,7.
Näin valmistettuja kolmea kahden litran pulloa ravistettiin 30°C:ssa 3 vuorokautta pyörivällä ravistimella. Sen jälkeen näiden kolmen pullon sisällöt yhdistettiin ja niillä ympättiin ruostumattomasta teräksestä valmistettu käymisastia, joka sisälsi 30 1 seuraavan sisältöistä väliainetta.
glyserolia 3,0 % paino/tilav.
soijajauhoa BSP 70 1,0 % paino/tilav.
liitua 0,25 % paino/tilav.
9 66184 sereloosia 3,0 % paino/tilav.
NaCl 0,5 % paino/tilav.
Mg SO 4.711^0 0,05 % tilav./tilav.
hivenainekonsentraattia 0,1 % paino/tilav.
tislattua vettä täytetään 30 litraksi.
Käymisastian sisältö sekoitettiin 30°C:ssa 70 tuntia käyttäen 350 kierrosta minuutissa pyörivää neljällä litteällä terällä varustettua turpiinia ja tuoden ilmaa astiaan 15 1 minuutissa. Seokseen oli ennen autoklaavikäsittelyä lisätty 30 ml "Silcolapsea" (tavaramerkki) , erästä silikonipitoista vaahdonestoainetta. Saalista korjattaessa pH oli 7,9 ja tulokseksi saatu käymisseos (22 litraa) lisättiin koko ajan sekottaen yhtä suureen tilavuuteen etyyliasetaattia. 30 minuutin kuluttua seos erotettiin keskipakoiserottimella ja etyyliasetaattiuute (noin 18 1) kuivattiin vedettömällä natriumsul-faatilla ja suodatettiin. Suodos konsentroitiin alennetussa paineessa, jolloin saatiin öljymäinen jäännös (10,7 g).
M.139,603 saatiin yllä saadusta konsentraatista seuraavalla menetelmällä: öljymäinen jäännös (10,7 g) liuotettiin mahdollisimman pieneen tilavuuteen etyyliasetaattia ja saatu liuos siirrettiin etyyliasetaattiin lietettyä neutraalia alumiinioksidia (Woelm N, 200 g
S
18 cm x 4 cm) sisältävän patsaan yläpäähän. Patsas eluoitiin ensin χ etyyliasetaatilla ja sen jälkeen yhtä suuret tilavuusmäärät etyy- / liasetaattia ja metanolia sisältävällä seoksella ja lopuksi metanp^ lilla. Liuotinrintaman tultua patsaasta koottiin seuraavat fraktiot:
Fraktio Tilavuus Eluentti
No.
1 150 ml etyyliasetaatti 2 150 ml etyyliasetaatti 3 150 ml etyyliasetaatti 4 150 ml etyyliasetaatti 5 150 ml etyyliasetaatti-metanoli 50 % tilav./tilav.
6 150 ml etyyliasetaatti-metanoli 50 % tilav./tilav.
7 150 ml etyyliasetaatti-metanoli 50 % tilav.tilav.
8 150 ml etyyliasetaatti-metanoli 50 % tilav./tilav.
ίο 6 6184
Fraktio Tilavuus Eluentti
No.
9 200 ml metanoli 10 200 ml metanoli 11 200 ml metanoli
Ohutlevykromatografisesti silikageelillä, kehittäen 20 % tilav./tilav. asetonia sisältävällä petrolieetterillä (k.p. 60-80°C) osoitettiin fraktioiden 7-11 sisältävän M.139,603:a (Rp'^'0,22) ja kun ne yhdistettiin ja haihdutettiin, saatiin tahmea kumimai-nen aine (840 mg), jota edelleen puhdistettiin preparatiivisella kromatografiällä silikageelillä (Merck1in "Kieselgel 60F250"-tavaramerkki, 40 cm x 20 cm, paksuus 2 mm) käyttäen eluenttina seosta, joka sisälsi 20 % tilav./tilav. asetonia petrolieetterissä (k.p. 60-80°C) . Ultraviolettivalossa näkyvä vyö kohdassa REr-"'0,22 (noin) kaavittiin kahdelta levyltä ja uutettiin etyyliasetaatilla ja uute haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin tahmea kumimainen aine (240 mg), joka kiteytyi lisättäessä petroolieetteriä (k.p. 60-80°C). Tämä aine kiteytettiin uudestaan petroolieetteristä (k.p. 60-80°C), jolloin saatiin M.139,603 värittöminä kiteinä, jotka suodatettiin ja kuivattiin (210 mg), sp. 176-178°C. UV-spekt-ri etanolissa osoitti absorptiot 243 nm:llä (£ = 12900) ja 272 nm:llä (£ = 10800). IR- ja NMR-spektrit olivat identtiset esimerkin 1 tuotteella saatujen kanssa.
Esimerkki 3 M.139,603:a (40 mg) liuotettiin asetonin (10 ml), ja veden (2 ml) seokseen, lisätiiin 1 ml 2N kloorivetyhappoa ja seosta sekoitettiin voimakkaasti 5 minuuttia. Lisättiin tislattua vettä (20 ml) ja seos uutettiin dikloorimetaanilla (2 x 10 ml). Orgaaninen kerros erotettiin ja pestiin 2N kloorivetyhapolla ja sen jälkeen tislatulla vedellä. Dikloorimetaanikerros konsentroitiin sitten, jolloin saatiin M.139,603:a vastaava "vapaa happo" tahmeana kumimaisena aineena (33 mg). Alkuaineanalyysi: Saatu: C = 69,5 %, H = 9,1%. Laskettu kaavasta C^H^Og: C = 69,8%, H = 9,0%; IR-spek-tri nujolilla, esitetty kuviossa 3, sisälsi luonteenomaiset absorptiot aaltoluvuilla 3500, 1765, 1685, 1650, 1575 cm protonin magneettisen resonanssin spektri deuteriokloroformilla on esitetty kuviossa 4.
11 66184
Esimerkki 4 M. 139,603:a vastaava "vapaa happo" (30 mg) liuotettiin tet-rahydrofuraanin (7 ml) ja veden (1 ml) seokseen. Lisättiin alkali-metallihydroksidia ΧΟΗ (2N, 2 ml) vettä sisältävään tetrahydrofu-raaniseokseen, jota sitten sekoitettiin voimakkaasti 10 minuuttia. Lisättiin vettä (10 ml) ja liuos uutettiin eetterillä (2 x 15 ml). Eetteriuutteet yhdistettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin nat-riumsuolaa M.139,603 vastaavat alkalimetallisuolat.
Kun X = kalium, muodostui kaliumsuola, sp. 146-150°C, mo-lekyylikaava C35H,-.j0g ·κ· joka on saatu massaspektrometrisesti molekyyli-ionina M+, jonka massa on 640,335 (laskettuna kaavalle eoc.H 0Q.K = 640,338), ja alkuaineanalyysillä: Saatu, C = 65, 7 %, 3z> 53 ö H = 8,5 % (laskettuna kaavasta C35H53°g*K: C = 65,6 %, H = 8,3 %).
Kun X = rubidium, nuodostui rubidiumsuola, sp. 95-120°C, molekyylikaava C^H^Og · Rb, joka on saatu massa-spektrometrisesti molekyyli-ionina M+, jonka massa on 686,279 (laskettuna kaavalle C,_Hc_0o.Rb = 686,286).
3 D b j o M.139,603:n kyky estää metaanin syntymistä märehtijöiden pötsissä ja sen kyky lisätä propionaatin suhteellista määrää asetaa-tin kustannuksella (Ac/Pr) tuotetuissa haihtuvissa rasvahapoissa (VFA) osoitettiin seuraavalla tavalla:
Koottiin pötsinestettä säännöllisesti rutiininomaisesti kahdelta nuorelta härältä, joille syötettiin samaa heinä+konsentraat-ti-ravintoa. Näytteenottoaika stadardisoitiin niin hyvin kuin mahdollista ja kummastakin eläimestä saatu neste yhdistettiin suhteessa 50/50. Suurehkot hiukkaset poistettiin suodattamalla yhdistetyt nesteet nelinkertaisen musliinikankaan läpi. Suodos laimennettiin sitten suhteessa yksi tilavuusosa suodosta kolmeen tila-vuusosaan keinotekoista pötsinestettä (valmistettu G. L. Bales'in et ai. julkaisussa Journal of Dairy Science, 1976, volume 59, sivu 1850 kuvaamalla tavalla, mutta jättäen etikkahappo pois) ja seoksen pH säädettiin välille 6,9-7,0 natriumkarbonaatin kyllästetyllä vesiliuoksella. Tämä seos jaettiin eriin (50 ml), jotka siirrettiin kuivattua jauhettua heinää (0,5 g) sisältäviin 100 ml:n kartiomaisiin pulloihin ja kutakin pulloa käytettiin testiyhdisteen testaamiseen tietyllä konsentraatiolla.
Testattava yhdiste lisättiin kartiomaiseen pulloon etanoliin liuotettuna, pullo täytettiin hiilidoksidikaasulla, suljettiin suba- 12 661 84 tulpalla ja inkuboitiin 39°C:ssa 15-16 tuntia. Tunnin kuluttua su-ba-tulpan läpi pistettiin ohut ontto neula kaasun paineen päästämiseksi ja neula vedettiin pois 30 minuuttia ennen inkuboinnin päättymistä. Käyminen keskeytettiin sitten panemalla pullo jäihin ja 15 minuutin jäähdytyksen jälkeen nesteen yläpuolella olevasta kaasusta tutkittiin metaani kaasukromatografisesta Pullojen sisältö suodatettiin sitten ennalta kuivatun lasisen sintterisuppi-lon läpi. Kolmesta suodosnäytteestä tutkittiin sitten kaasukromatograf isesti haihtuvat rasvahapot ja aiemmin määritettyyn inku-bointia edeltävään haihtuvien rasvahappojen määrään verraten määritettiin inkuboinnin aikana tuotettujen rasvahappojen (asetaatti ja propionaatti) nettomäärä.
Saatiin seuraavat tulokset, jotka on ilmaistu prosentteina kontrolliarvoista, jotka on saatu, kun testattavaa yhdistettä ei käytetty. Positiivisena kontrollina käytettiin Momensinia, tunnettua kasvua edistävää ainetta, jonka toiminta perustuu sen vaikutukseen pötsiin.
Yhdiste Konsentraatio Metaani- Asetaatti/ % suhteessa propionaatti- kontrolliin suhde - * suh- _teessä kontrolliin M.139,603 1,0 58 62 0,3 72 64 0,1 87 70
Monensin 1,0 67 79 0,3 90 87 0,1 100 95 M. 139,603:n kyky lisätä propionaatin suhteellista määrää asetaatin kustannuksella lampaiden pötsinesteessä osoitettiin seuraavalla tavalla:
Kahtakymmentäkolmea lammasta pidettiin karsiointuna kutakin erikseen ja kullekin syötettiin samaa 1 kg:n kuivattuja ruo-hokuutioita yhtä eläintä päivää kohti käsittävää ravintoa antaen päivittäinen annos kahdessa osassa. Eläimistä valittiin umpimähkään 13 negatiivisiksi kontrollieläimiksi, 5 positiivisiksi monen-sinia, tunnettua pötsiin vaikuttavaa ainetta käyttäviksi kontrollieläimiksi ja 5 M.139,603:11a käsiteltäviksi. Käsiteltäville 13 661 84 eläimille annettiin monensinia tai M.139.603:a suun kautta 0,5 mg/kg kullekin neljänä peräkkäisenä päivänä, pötsinestenäytteitä kerättiin vatsaputkella 6 tuntia käsittelyn jälkeen neljäntenä päivänä. PötsinestenäytteistS tutkittiin sitten asetatti ja pro-pionaatti esimerkissä 2 kuvatulla tavalla.
Saatiin seuraavat tulokset: Käsittelyryhmät Mooliosuus prosentteina haihtuvien rasvahappojen kokonaismäärästä __asetaatti_propionaatti
Negatiivinen kontrolliryhmä 69,9 19,8
Positiivinen kontrolliryhmä monensin 0,5 mg/kg 57,1 32,3 M.139,603 - 0,5 mg/kg 54,2 39,9 M. 139,603:11a saatu asetaattivastine on merkitsevä tasolla p<0,02 verrattuna postiiviseen kontrolliin, monensiniin; ja M.139,603:11a saatu propionaattivastine on merkitsevä tasolla p<0,001 verrattuna positiiviseen kontrolliin, monensiniin.
Claims (2)
1. Märehtijöiden kasvunopeutta ja ravinnon hyväksikäyttöä parantava ei-terapeuttisesti käytettävä yhdiste, tunnettu siitä, että sen kaava on Me^ Me , M\ /“ VV" i S—/ Γ'= Λ~Κ H I \ H OMe /"V=\· · </ o Me \ A—A O Λ0 jossa A on vety tai alkalimetalli.
2. Märehtijöiden kasvunopeutta ja ravinnon hyväksikäyttöä parantava ei-terapeuttisesti käytettävä koostumus, tunnet-t u siitä, että se sisältää 5 ppm - 50 paino-% kaavan I raukaista yhdistettä sekoitettuna kiinteään tai nestemäiseen, syötäväksi kelpaavaan myrkyttömään laimentimeen tai kantaja-aineeseen.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB7832172 | 1978-08-03 | ||
| GB7832172 | 1978-08-03 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI792420A FI792420A (fi) | 1980-02-04 |
| FI66184B true FI66184B (fi) | 1984-05-31 |
| FI66184C FI66184C (fi) | 1984-09-10 |
Family
ID=10498845
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI792420A FI66184C (fi) | 1978-08-03 | 1979-08-03 | Foerening foer icke-terapeutiskt anvaendning vilken foerbaettrar tillvaexthastigheten och utnyttjandet av foedan hos idisslare |
Country Status (32)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4279894A (fi) |
| JP (1) | JPS5551097A (fi) |
| AT (2) | AT367450B (fi) |
| AU (1) | AU530316B2 (fi) |
| BE (1) | BE878042A (fi) |
| BG (1) | BG40659A3 (fi) |
| CA (1) | CA1142107A (fi) |
| CH (1) | CH649780A5 (fi) |
| CS (1) | CS221514B2 (fi) |
| DE (2) | DE2954593C2 (fi) |
| DK (1) | DK151257C (fi) |
| FI (1) | FI66184C (fi) |
| FR (1) | FR2433578A1 (fi) |
| HK (1) | HK26185A (fi) |
| HU (1) | HU179207B (fi) |
| IE (1) | IE48204B1 (fi) |
| IL (1) | IL57919A (fi) |
| IT (1) | IT1162363B (fi) |
| KE (1) | KE3433A (fi) |
| MY (1) | MY8500754A (fi) |
| NL (1) | NL7905979A (fi) |
| NO (1) | NO156201C (fi) |
| NZ (1) | NZ191105A (fi) |
| PL (1) | PL130950B1 (fi) |
| PT (1) | PT70023A (fi) |
| RO (1) | RO79259A (fi) |
| SE (1) | SE447910C (fi) |
| SG (1) | SG54784G (fi) |
| SU (2) | SU1212328A3 (fi) |
| YU (1) | YU42489B (fi) |
| ZA (1) | ZA793772B (fi) |
| ZW (1) | ZW13679A1 (fi) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0070622B1 (en) * | 1981-07-16 | 1987-01-14 | Imperial Chemical Industries Plc | Derivatives of m.139,603 useful as growth promotors |
| JPS60141293A (ja) * | 1983-12-28 | 1985-07-26 | Kitasato Inst:The | 新規制癌性抗生物質８１−４８４およびその製造法 |
| AU581691B2 (en) * | 1985-10-14 | 1989-03-02 | Balfour Manufacturing Company Limited | Process for the production of feedstuffs |
| US4675270A (en) * | 1986-02-10 | 1987-06-23 | Loctite (Ireland) Limited | Imaging method for vapor deposited photoresists of anionically polymerizable monomer |
| US5023086A (en) * | 1987-03-13 | 1991-06-11 | Micro-Pak, Inc. | Encapsulated ionophore growth factors |
| US4876273A (en) * | 1987-08-13 | 1989-10-24 | Eli Lilly And Company | Antibotic A80577 and process for its production |
| US5985907A (en) * | 1998-08-12 | 1999-11-16 | Health Research, Inc. | Method for inhibiting growth of methanogens |
| CN113150995A (zh) * | 2021-04-22 | 2021-07-23 | 贵州安康医学检验中心有限公司 | 一种用于转运过程中的细菌转运保藏培养基及其配制方法 |
-
1979
- 1979-07-23 ZW ZW136/79A patent/ZW13679A1/xx unknown
- 1979-07-24 ZA ZA00793772A patent/ZA793772B/xx unknown
- 1979-07-24 AU AU49194/79A patent/AU530316B2/en not_active Ceased
- 1979-07-24 NZ NZ191105A patent/NZ191105A/xx unknown
- 1979-07-25 US US06/060,682 patent/US4279894A/en not_active Expired - Lifetime
- 1979-07-29 IL IL57919A patent/IL57919A/xx unknown
- 1979-07-31 DE DE2954593A patent/DE2954593C2/de not_active Expired
- 1979-07-31 DE DE19792931082 patent/DE2931082A1/de active Granted
- 1979-08-01 DK DK325179A patent/DK151257C/da not_active IP Right Cessation
- 1979-08-01 PL PL1979217506A patent/PL130950B1/pl unknown
- 1979-08-02 FR FR7919883A patent/FR2433578A1/fr active Granted
- 1979-08-02 IT IT49943/79A patent/IT1162363B/it active
- 1979-08-02 SE SE7906553A patent/SE447910C/sv unknown
- 1979-08-02 BE BE0/196575A patent/BE878042A/fr not_active IP Right Cessation
- 1979-08-02 NO NO792537A patent/NO156201C/no unknown
- 1979-08-02 CS CS795335A patent/CS221514B2/cs unknown
- 1979-08-02 AT AT0531779A patent/AT367450B/de not_active IP Right Cessation
- 1979-08-02 SU SU792798603A patent/SU1212328A3/ru active
- 1979-08-02 YU YU1880/79A patent/YU42489B/xx unknown
- 1979-08-02 CH CH7107/79A patent/CH649780A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-08-03 FI FI792420A patent/FI66184C/fi not_active IP Right Cessation
- 1979-08-03 BG BG7944552A patent/BG40659A3/xx unknown
- 1979-08-03 HU HU79IE880A patent/HU179207B/hu not_active IP Right Cessation
- 1979-08-03 NL NL7905979A patent/NL7905979A/nl not_active Application Discontinuation
- 1979-08-03 PT PT70023A patent/PT70023A/pt unknown
- 1979-08-03 JP JP9877079A patent/JPS5551097A/ja active Granted
- 1979-08-03 CA CA000333117A patent/CA1142107A/en not_active Expired
- 1979-08-03 RO RO7998350A patent/RO79259A/ro unknown
- 1979-08-08 IE IE1403/79A patent/IE48204B1/en not_active IP Right Cessation
-
1980
- 1980-07-15 SU SU802949055A patent/SU1324575A3/ru active
-
1981
- 1981-04-06 AT AT0160081A patent/AT366892B/de not_active IP Right Cessation
-
1984
- 1984-08-01 KE KE3433A patent/KE3433A/xx unknown
- 1984-08-06 SG SG547/84A patent/SG54784G/en unknown
-
1985
- 1985-04-04 HK HK261/85A patent/HK26185A/xx not_active IP Right Cessation
- 1985-12-30 MY MY754/85A patent/MY8500754A/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPS58180487A (ja) | 抗生物質ｄｃ−８１およびその製造法 | |
| FI66184B (fi) | Foerening foer icke-terapeutiskt anvaendning vilken foerbaettrar tillvaexthastigheten och utnyttjandet av foedan hos idisslare | |
| SU818492A3 (ru) | Способ получени деоксинаразино-ВОгО АНТибиОТичЕСКОгО КОМплЕКСА | |
| US4229535A (en) | Method for preparing multhiomycin | |
| US4225593A (en) | Growth promotion | |
| PL131791B1 (en) | Process for preparing novel antibiotic | |
| EP0158179B1 (en) | Antibiotic 6270, process for its production, and its use as an anticoccidiosis agent and a feed additive | |
| GB2027013A (en) | Compound M.139603 from Streptomyces longisporoflavus, and its use in ruminants | |
| JPS62234091A (ja) | エホマイシン、その製造法、及びその動物における産出量促進剤としての使用 | |
| JPS61149096A (ja) | 有機化合物、その微生物学的製造方法およびその使用 | |
| EP0259751A2 (de) | Annomycin, ein Antibiotikum; mikrobiologisches Verfahren zu dessen Herstellung und seine Verwendung | |
| JPS61233695A (ja) | エフオマイシン類及びその製造方法 | |
| SE437917B (sv) | Djurfoder innehallande en ny kemisk forening som befremjar tillvexten och forbettrar fodertillgodogorandet hos djur | |
| SU751309A3 (ru) | Способ усилени роста нежвачных животных | |
| SU561521A3 (ru) | Способ получени антибиотика | |
| EP0293787B1 (en) | Antibiotic 6270B, processes for its production, and its use as an anticoccidiosis agent and a feed additive | |
| SU576966A3 (ru) | Способ получени антибиотического комплекса а-28086 | |
| KR800000966B1 (ko) | 항생물질 31559 rp의 제조방법 | |
| JP2780828B2 (ja) | ポリエーテル抗生物質ｍｉ２１５―ｎｆ３物質及びその製造法、並びに鶏のコクシジウム症の防除剤 | |
| SU730274A3 (ru) | Способ усилени роста животных и птиц | |
| PL143999B1 (en) | Process for preparing novel antibiotic | |
| PL97341B1 (pl) | Sposob wytwarzania nowego zwiazku 38295 o charakterze antybiotyku | |
| JPS61170396A (ja) | 新規な制癌性抗生物質８３−１６−ａおよびその製造法 | |
| PL99573B1 (pl) | Sposob wytwarzania mieszaniny antybiotykow 35763,36926,37277 i 37932 | |
| PL88752B1 (fi) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC | Transfer of assignment of patent |
Owner name: PITMAN-MOORE, INC. |
|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: PITMAN-MOORE, INC. |