FI121273B - Modulatorer av FAS/APO1 receptorers funktion - Google Patents

Claims (16)

1. En DNA-sekvens, som kodar proteinet MORT-1 (eller HF1), som omfattar den i figur 4 presenterade aminosyresekvensen eller fragment av denna, vilka alla förmär binda sig vid den intracellulära FAS-R-domänen.

2. DNA-sekvens enligt patentkrav 1, vilken är vald ur en grupp som bildas av: (a) en cDNA-sekvens som fas ur det omräde som kodar nativt MORT-l-protein; (b) DNA-sekvenser som förmär hybridiseras tili sekvensen i punkt (a) under mättligt stränga betingelser och som kodar biologiskt aktivt bindningsprotein för den intracellulära FAS-R-domänen; och (c) DNA-sekvenser som är degenererade som följd av den genetiska koden hos de i punkterna (a) och (b) definierade DNA-sekvenserna och som kodar biologiskt aktivt # bindningsprotein för den intracellulära FAS-R-domänen.

3. Ett MORT-l-protein eller fragment av detta, som kodas av en sekvens enligt patentkrav 1 eller 2, varvid nämnda .« protein eller fragment av detsamma kan binda sig vid den s # intracellulära FAS-R-domänen.

4. MORT-l-protein enligt patentkrav 3, vilket protein har den härledda aminosyresekvens som presenteras i figur 4. s I*

5. En vektor, som omfattar en DNA-sekvens enligt patentkrav 1 eller 2.

6. Transformerade värdceller, som omfattar en vektor enligt patentkrav 5.

7. Ett förfarande för att framställa ett MORT-l-protein, enligt patentkrav 3 eller 4, eller fragment av detta, vilket förfarande omfattar, att man odlar transformerade värdceller enligt patentkrav 6 under betingelser som är lämpliga för att uttrycka nämnda protein eller fragment, man genomför de posttranslationella modifikationer pä nämnda protein, som är nödvändiga för att ästadkomma nämnda protein eller fragment, och man isolerar nämnda uttryckta protein eller fragment.

8. Antikroppar eller aktiva fragment eller derivat av dessa, som är specifika för MORT-l-proteinet enligt patentkrav 3 eller 4 eller för fragment av detsamma.

9. Ett förfarande för att isolera och identifiera sädana proteiner, faktorer eller receptorer, som förmär binda sig vid MORT-l-proteinet enligt patentkrav 3 eller 4, varvid man vid förfarandet: ; ** (a) använder ett affinitetskromatografiskt förfarande, där »d Ϊ man fäster nämnda MORT-l-protein vid en ···'· affinitetskromatografisk matris, man försätter det nämnda *· d fästa proteinet i kontakt med ett cellextrakt; därefter • ” eluerar, isolerar och analyserar man de proteiner, faktorer ’ eller receptorer i cellextraktet, vilka har bundit sig vid nämnda fästa protein; eller (b) använder ett tvähybridjästförfarande, där den sekvens ·: som kodar nämnda MORT-l-protein finns i den ena hybridvektorn och den sekvens som härrör ur cDNA- eller genom-DNA-biblioteket finns i den andra hybridvektorn, vilka vektorer man sedan använder för att transformera jästvärdceller och isolerar de positivt transformerade cellerna, varefter man gör ett extrakt av den nämnda andra hybridvektorn för att fä en sekvens som kodar ett sädant protein som binder sig vid nämnda MORT-l-protein.

10. Ett förfarande för att isolera och identifiera ett sädant protein som förmär binda sig vid den intracellulära FAS-R-domänen, vilket förfarande omfattar, att man vid förfarandet använder Southern-hybridisering under toleranta betingelser, varefter följer PCR-kloning, där man använder en sekvens enligt patentkrav 1 eller 2 eller delar av densamma som sond för att binda sädana cDNA-sekvenser eller sekvenser ur genom-DNA-biblioteket, vilka innehar ätminstone partiell homologi med densamma, varefter man kopierar de nämnda bundna sekvenserna och klonar dem med PCR, varvid man erhäller kloner, som kodar proteiner, vilka är ätminstone delvis homologa med nämnda sekvenser enligt patentkrav 1 eller 2.

11. En farmaceutisk sammansättning, som omfattar ett verksamt ämne, som valts ur en grupp, som bildas av: *t: (1) ett MORT-l-protein enligt patentkrav 3 eller 4, dess biologiskt aktiva fragment och blandningar av dessa; * a ,, (2) en kombinationsdjurvirusvektor, som innehäller sekvenser, vilka kodar ett protein, som förmär binda sig vid receptorer pä cellytan och som kodar MORT-l-protein enligt patentkrav 3 eller 4 eller för biologiskt aktiva fragment av - detsamma; •y (3) en oligonukleotidsekvens, som kodar en antisense-sekvens för MORT-l-sekvensen enligt patentkrav 1 eller 2; och (4) dess antikropp eller aktiva fragment eller derivat enligt patentkrav 8.

12. Användning av en förening, liknande den som definierats i patentkrav 11, för framställning av ett farmaceutiskt preparat för att modulera verkan av en FAS-R-ligand i celler.

13. Användning av en förening, liknande den som definierats i patentkrav 11 (2) för framställning av ett farmaceutiskt preparat för att behandla svulstceller, HIV-infekterade celler eller andra sjukdomsceller.

14. Användning av ett eller flera MORT-l-proteiner eller -fragment enligt patentkrav 3 eller 4, som förmär binda sig vid nämnda intracellulära FAS-R-domän och modulera dess aktivitet, och av antikroppar och aktiva fragment eller derivat av detsamma enligt patentkrav 8 för att framställa ett farmaceutiskt preparat för modulering av verkan av en FAS-R-ligand i celler. * s

! '* 15. Användning av en vektor, som kodar en ribozymsekvens, tl » vilken vektor förmär växelverka med en cellulär mRNA-sekvens som kodar ett MORT-1-protein enligt patentkrav 3 eller 4, *· h för att framställa ett farmaceutiskt preparat för modulering av verkan av en FAS-R-ligand i celler. ,„r

16. Användning av en DNA-sekvens enligt patentkrav 1 eller 2, som kodar ett MORT-l-protein eller fragment av detsamma , eller ett MORT-l-protein enligt patentkrav 3 eller 4 eller ’ fragment av detta, för att framställa ett farmaceutiskt preparat för modulering i celler av den av MORT-1 inducerade verkan.